CZ302195B6 - Použití chelatovaných komplexu - Google Patents
Použití chelatovaných komplexu Download PDFInfo
- Publication number
- CZ302195B6 CZ302195B6 CZ20012330A CZ20012330A CZ302195B6 CZ 302195 B6 CZ302195 B6 CZ 302195B6 CZ 20012330 A CZ20012330 A CZ 20012330A CZ 20012330 A CZ20012330 A CZ 20012330A CZ 302195 B6 CZ302195 B6 CZ 302195B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- amino
- bis
- carboxymethyl
- ethyl
- acid
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 35
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 27
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims abstract description 25
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 20
- QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N N,N-bis{2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl}glycine Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(=O)O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 15
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims abstract description 14
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims abstract description 14
- 230000005298 paramagnetic effect Effects 0.000 claims abstract description 14
- HSINOMROUCMIEA-FGVHQWLLSA-N (2s,4r)-4-[(3r,5s,6r,7r,8s,9s,10s,13r,14s,17r)-6-ethyl-3,7-dihydroxy-10,13-dimethyl-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]-2-methylpentanoic acid Chemical compound C([C@@]12C)C[C@@H](O)C[C@H]1[C@@H](CC)[C@@H](O)[C@@H]1[C@@H]2CC[C@]2(C)[C@@H]([C@H](C)C[C@H](C)C(O)=O)CC[C@H]21 HSINOMROUCMIEA-FGVHQWLLSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 claims abstract description 10
- 239000003446 ligand Substances 0.000 claims abstract description 9
- HHLZCENAOIROSL-UHFFFAOYSA-N 2-[4,7-bis(carboxymethyl)-1,4,7,10-tetrazacyclododec-1-yl]acetic acid Chemical compound OC(=O)CN1CCNCCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC1 HHLZCENAOIROSL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 7
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims abstract description 7
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 claims abstract description 7
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 claims abstract description 6
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 claims abstract description 6
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 5
- WDLRUFUQRNWCPK-UHFFFAOYSA-N Tetraxetan Chemical compound OC(=O)CN1CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC1 WDLRUFUQRNWCPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 claims abstract description 5
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims abstract description 4
- 239000011575 calcium Substances 0.000 claims abstract description 4
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 claims abstract description 4
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 claims abstract description 4
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 claims abstract description 4
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 claims abstract description 4
- 239000011591 potassium Substances 0.000 claims abstract description 4
- 150000007529 inorganic bases Chemical class 0.000 claims abstract description 3
- 150000002643 lithocholic acids Chemical class 0.000 claims abstract 3
- 150000003512 tertiary amines Chemical class 0.000 claims abstract 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims description 232
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 122
- 125000000267 glycino group Chemical group [H]N([*])C([H])([H])C(=O)O[H] 0.000 claims description 121
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 98
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 97
- 229910052688 Gadolinium Inorganic materials 0.000 claims description 47
- UIWYJDYFSGRHKR-UHFFFAOYSA-N gadolinium atom Chemical compound [Gd] UIWYJDYFSGRHKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 47
- -1 (carboxymethyl) -1-phenyl-2-oxa-5,8,11-triazatridecan-13-one Chemical compound 0.000 claims description 38
- MBBZMMPHUWSWHV-BDVNFPICSA-N N-methylglucamine Chemical compound CNC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBBZMMPHUWSWHV-BDVNFPICSA-N 0.000 claims description 31
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 23
- 125000000218 acetic acid group Chemical group C(C)(=O)* 0.000 claims description 20
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 claims description 14
- XOAAWQZATWQOTB-UHFFFAOYSA-N taurine Chemical compound NCCS(O)(=O)=O XOAAWQZATWQOTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N cholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N 0.000 claims description 11
- 239000011572 manganese Substances 0.000 claims description 11
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 10
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 125000002057 carboxymethyl group Chemical group [H]OC(=O)C([H])([H])[*] 0.000 claims description 9
- 229960003330 pentetic acid Drugs 0.000 claims description 9
- KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N deoxycholic acid Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 6
- 229960003080 taurine Drugs 0.000 claims description 6
- RUDATBOHQWOJDD-UHFFFAOYSA-N (3beta,5beta,7alpha)-3,7-Dihydroxycholan-24-oic acid Natural products OC1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)CC2 RUDATBOHQWOJDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 125000003630 glycyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 claims description 5
- HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoethan-1-ol Chemical compound NCCO HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N Morpholine Chemical compound C1COCCN1 YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 229960003964 deoxycholic acid Drugs 0.000 claims description 4
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 4
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 claims description 4
- IQUHNCOJRJBMSU-UHFFFAOYSA-N H3HP-DO3A Chemical compound CC(O)CN1CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC1 IQUHNCOJRJBMSU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 claims description 3
- RUDATBOHQWOJDD-BSWAIDMHSA-N chenodeoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)CC1 RUDATBOHQWOJDD-BSWAIDMHSA-N 0.000 claims description 3
- 229960001091 chenodeoxycholic acid Drugs 0.000 claims description 3
- KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N deoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N 0.000 claims description 3
- 125000000031 ethylamino group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])N([H])[*] 0.000 claims description 3
- 125000003219 lithocholic acid group Chemical group 0.000 claims description 3
- 238000013421 nuclear magnetic resonance imaging Methods 0.000 claims description 3
- 125000001147 pentyl group Chemical group C(CCCC)* 0.000 claims description 3
- SMEROWZSTRWXGI-UHFFFAOYSA-N Lithocholsaeure Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)CC2 SMEROWZSTRWXGI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims description 2
- ZBCBWPMODOFKDW-UHFFFAOYSA-N diethanolamine Chemical compound OCCNCCO ZBCBWPMODOFKDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 150000002332 glycine derivatives Chemical class 0.000 claims description 2
- 125000000468 ketone group Chemical group 0.000 claims description 2
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- SMEROWZSTRWXGI-HVATVPOCSA-N lithocholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)CC1 SMEROWZSTRWXGI-HVATVPOCSA-N 0.000 claims description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 claims description 2
- RUDATBOHQWOJDD-UZVSRGJWSA-N ursodeoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)CC1 RUDATBOHQWOJDD-UZVSRGJWSA-N 0.000 claims description 2
- 229960001661 ursodiol Drugs 0.000 claims description 2
- 125000000896 monocarboxylic acid group Chemical group 0.000 claims 5
- BHQCQFFYRZLCQQ-UHFFFAOYSA-N (3alpha,5alpha,7alpha,12alpha)-3,7,12-trihydroxy-cholan-24-oic acid Natural products OC1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 BHQCQFFYRZLCQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 239000004380 Cholic acid Substances 0.000 claims 2
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 claims 2
- 229960002471 cholic acid Drugs 0.000 claims 2
- 235000019416 cholic acid Nutrition 0.000 claims 2
- 229910001437 manganese ion Inorganic materials 0.000 claims 2
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N Lithium Chemical compound [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims 1
- 150000001801 chenodeoxycholic acids Chemical class 0.000 claims 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 claims 1
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 abstract description 14
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 abstract description 11
- 239000003613 bile acid Substances 0.000 abstract description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 5
- 238000009472 formulation Methods 0.000 abstract description 2
- 229920000768 polyamine Polymers 0.000 abstract 1
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 147
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 122
- 239000000047 product Substances 0.000 description 66
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 54
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 49
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 37
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 37
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 37
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 37
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 36
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 35
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 31
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 31
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 31
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 29
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 24
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 23
- 238000000034 method Methods 0.000 description 23
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 23
- 238000003818 flash chromatography Methods 0.000 description 22
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 description 22
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 22
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 22
- 239000002872 contrast media Substances 0.000 description 21
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 21
- WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M Lithium hydroxide Chemical compound [Li+].[OH-] WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 20
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 20
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 18
- 229960003194 meglumine Drugs 0.000 description 17
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 239000013058 crude material Substances 0.000 description 16
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 15
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 14
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 12
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 12
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 12
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 12
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 11
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 11
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 11
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 9
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 9
- 229940126062 Compound A Drugs 0.000 description 8
- NLDMNSXOCDLTTB-UHFFFAOYSA-N Heterophylliin A Natural products O1C2COC(=O)C3=CC(O)=C(O)C(O)=C3C3=C(O)C(O)=C(O)C=C3C(=O)OC2C(OC(=O)C=2C=C(O)C(O)=C(O)C=2)C(O)C1OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 NLDMNSXOCDLTTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 8
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 7
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 7
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 7
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 7
- 229960002920 sorbitol Drugs 0.000 description 7
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 7
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N Manganese Chemical compound [Mn] PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 6
- 239000002812 cholic acid derivative Substances 0.000 description 6
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 6
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 6
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 6
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 6
- 229910052748 manganese Inorganic materials 0.000 description 6
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 6
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 6
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 5
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 5
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 5
- 239000013065 commercial product Substances 0.000 description 5
- ZWWWLCMDTZFSOO-UHFFFAOYSA-N diethoxyphosphorylformonitrile Chemical compound CCOP(=O)(C#N)OCC ZWWWLCMDTZFSOO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 5
- 229960002989 glutamic acid Drugs 0.000 description 5
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 5
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 5
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 5
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 5
- 229910019614 (NH4)6 Mo7 O24.4H2 O Inorganic materials 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 4
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 4
- FIXLYHHVMHXSCP-UHFFFAOYSA-H azane;dihydroxy(dioxo)molybdenum;trioxomolybdenum;tetrahydrate Chemical compound N.N.N.N.N.N.O.O.O.O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O[Mo](O)(=O)=O.O[Mo](O)(=O)=O.O[Mo](O)(=O)=O FIXLYHHVMHXSCP-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 4
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 4
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 4
- 238000005251 capillar electrophoresis Methods 0.000 description 4
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 4
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 4
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 4
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 4
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 4
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 4
- ZRSNZINYAWTAHE-UHFFFAOYSA-N p-methoxybenzaldehyde Chemical compound COC1=CC=C(C=O)C=C1 ZRSNZINYAWTAHE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 4
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 4
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- FAASTKYIPSDJDD-OFYXWCICSA-N (4r)-4-[(3s,5r,8r,9s,10s,12s,13r,14s,17r)-3-amino-12-hydroxy-10,13-dimethyl-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]pentanoic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@@H](N)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 FAASTKYIPSDJDD-OFYXWCICSA-N 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N Borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 3
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 3
- RPKLZQLYODPWTM-KBMWBBLPSA-N cholanoic acid Chemical compound C1CC2CCCC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]1(C)CC2 RPKLZQLYODPWTM-KBMWBBLPSA-N 0.000 description 3
- 230000003750 conditioning effect Effects 0.000 description 3
- HJUFTIJOISQSKQ-UHFFFAOYSA-N fenoxycarb Chemical compound C1=CC(OCCNC(=O)OCC)=CC=C1OC1=CC=CC=C1 HJUFTIJOISQSKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 3
- 239000005350 fused silica glass Substances 0.000 description 3
- 238000010829 isocratic elution Methods 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- RPKLZQLYODPWTM-UHFFFAOYSA-N methyl 15-acetoxy(10),13E-ent-halimadien-18-oate Natural products C1CC2CCCCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)CC2 RPKLZQLYODPWTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000001728 nano-filtration Methods 0.000 description 3
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 description 3
- IOQPZZOEVPZRBK-UHFFFAOYSA-N octan-1-amine Chemical compound CCCCCCCCN IOQPZZOEVPZRBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 3
- 150000003335 secondary amines Chemical group 0.000 description 3
- BNWCETAHAJSBFG-UHFFFAOYSA-N tert-butyl 2-bromoacetate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)CBr BNWCETAHAJSBFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 3
- ZHCAAZIHTDCFJX-FDMPVNCMSA-N (4r)-4-[(8r,9s,10s,13r,14s,17r)-7,12-dihydroxy-10,13-dimethyl-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]pentanoic acid Chemical compound OC1CC2CCCC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]1(C)C(O)C2 ZHCAAZIHTDCFJX-FDMPVNCMSA-N 0.000 description 2
- 125000000022 2-aminoethyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])N([H])[H] 0.000 description 2
- 102100031102 C-C motif chemokine 4 Human genes 0.000 description 2
- 101100054773 Caenorhabditis elegans act-2 gene Proteins 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101150065749 Churc1 gene Proteins 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FKNQFGJONOIPTF-UHFFFAOYSA-N Sodium cation Chemical compound [Na+] FKNQFGJONOIPTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000029936 alkylation Effects 0.000 description 2
- 238000005804 alkylation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 2
- 239000002585 base Substances 0.000 description 2
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 2
- 229940099352 cholate Drugs 0.000 description 2
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 238000012631 diagnostic technique Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 2
- YMAWOPBAYDPSLA-UHFFFAOYSA-N glycylglycine Chemical compound [NH3+]CC(=O)NCC([O-])=O YMAWOPBAYDPSLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 125000004356 hydroxy functional group Chemical group O* 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 230000005291 magnetic effect Effects 0.000 description 2
- 238000002595 magnetic resonance imaging Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 2
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 2
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 2
- QEVHRUUCFGRFIF-MDEJGZGSSA-N reserpine Chemical compound O([C@H]1[C@@H]([C@H]([C@H]2C[C@@H]3C4=C(C5=CC=C(OC)C=C5N4)CCN3C[C@H]2C1)C(=O)OC)OC)C(=O)C1=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C1 QEVHRUUCFGRFIF-MDEJGZGSSA-N 0.000 description 2
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 150000003431 steroids Chemical group 0.000 description 2
- SJMDMGHPMLKLHQ-UHFFFAOYSA-N tert-butyl 2-aminoacetate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)CN SJMDMGHPMLKLHQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000007056 transamidation reaction Methods 0.000 description 2
- RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N triphenylphosphine Chemical compound C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000005166 vasculature Anatomy 0.000 description 2
- BJLLOMORJCWXON-GSVOUGTGSA-N (2r)-5-oxopyrrolidine-1,2-dicarboxylic acid Chemical compound OC(=O)[C@H]1CCC(=O)N1C(O)=O BJLLOMORJCWXON-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- NTGZYEIFZWYKFV-WLDMJGECSA-N (2r,3s,4r,5r)-1-(methylamino)hexane-1,2,3,4,5,6-hexol Chemical compound CNC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO NTGZYEIFZWYKFV-WLDMJGECSA-N 0.000 description 1
- VHSFUGXCSGOKJX-JTQLQIEISA-N (2s)-5-oxo-1-phenylmethoxycarbonylpyrrolidine-2-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCC(=O)N1C(=O)OCC1=CC=CC=C1 VHSFUGXCSGOKJX-JTQLQIEISA-N 0.000 description 1
- BJLLOMORJCWXON-VKHMYHEASA-N (2s)-5-oxopyrrolidine-1,2-dicarboxylic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCC(=O)N1C(O)=O BJLLOMORJCWXON-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- OBUOWZOYJNAMCZ-RPQFKRIZSA-N (4r)-4-[(8r,9s,10s,13r,14s,17r)-12-hydroxy-10,13-dimethyl-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]pentanoic acid Chemical compound C1CC2CCCC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]1(C)C(O)C2 OBUOWZOYJNAMCZ-RPQFKRIZSA-N 0.000 description 1
- DEWLEGDTCGBNGU-UHFFFAOYSA-N 1,3-dichloropropan-2-ol Chemical compound ClCC(O)CCl DEWLEGDTCGBNGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IWLZWTMJODRHAX-UHFFFAOYSA-N 2-[2-bromoethyl-[2-[(2-methylpropan-2-yl)oxy]-2-oxoethyl]amino]acetic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)CN(CCBr)CC(O)=O IWLZWTMJODRHAX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RAZLJUXJEOEYAM-UHFFFAOYSA-N 2-[bis[2-(2,6-dioxomorpholin-4-yl)ethyl]azaniumyl]acetate Chemical compound C1C(=O)OC(=O)CN1CCN(CC(=O)O)CCN1CC(=O)OC(=O)C1 RAZLJUXJEOEYAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YEDUAINPPJYDJZ-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxybenzothiazole Chemical compound C1=CC=C2SC(O)=NC2=C1 YEDUAINPPJYDJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JHUUPUMBZGWODW-UHFFFAOYSA-N 3,6-dihydro-1,2-dioxine Chemical compound C1OOCC=C1 JHUUPUMBZGWODW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KXGVEGMKQFWNSR-OFYXWCICSA-N 3beta,12alpha-dihydroxy-5beta-cholan-24-oic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 KXGVEGMKQFWNSR-OFYXWCICSA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 230000010736 Chelating Activity Effects 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 150000000921 Gadolinium Chemical class 0.000 description 1
- 108010008488 Glycylglycine Proteins 0.000 description 1
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 239000003810 Jones reagent Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012307 MRI technique Methods 0.000 description 1
- 238000006751 Mitsunobu reaction Methods 0.000 description 1
- 229910052779 Neodymium Inorganic materials 0.000 description 1
- YGYAWVDWMABLBF-UHFFFAOYSA-N Phosgene Chemical compound ClC(Cl)=O YGYAWVDWMABLBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- 108010039918 Polylysine Proteins 0.000 description 1
- 125000000738 acetamido group Chemical group [H]C([H])([H])C(=O)N([H])[*] 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001342 alkaline earth metals Chemical class 0.000 description 1
- AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N alumane Chemical group [AlH3] AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003121 arginine Drugs 0.000 description 1
- 239000003637 basic solution Substances 0.000 description 1
- OMCLKKMMLVBMEQ-UHFFFAOYSA-N benzyl 2-hydroxyacetate;trifluoromethanesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C(F)(F)F.OCC(=O)OCC1=CC=CC=C1 OMCLKKMMLVBMEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LDECUSDQMXVUMP-UHFFFAOYSA-N benzyl 3-[6-[[2-(butylamino)-1-[3-methoxycarbonyl-4-(2-methoxy-2-oxoethoxy)phenyl]-2-oxoethyl]-hexylamino]-6-oxohexyl]-4-methyl-2-oxo-6-(4-phenylphenyl)-1,6-dihydropyrimidine-5-carboxylate Chemical compound O=C1NC(C=2C=CC(=CC=2)C=2C=CC=CC=2)C(C(=O)OCC=2C=CC=CC=2)=C(C)N1CCCCCC(=O)N(CCCCCC)C(C(=O)NCCCC)C1=CC=C(OCC(=O)OC)C(C(=O)OC)=C1 LDECUSDQMXVUMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002051 biphasic effect Effects 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical group 0.000 description 1
- 150000001767 cationic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000013522 chelant Substances 0.000 description 1
- 239000007810 chemical reaction solvent Substances 0.000 description 1
- QSHQKIURKJITMZ-BRPMRXRMSA-N cholane Chemical compound C1CC2CCCC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCC)[C@@]1(C)CC2 QSHQKIURKJITMZ-BRPMRXRMSA-N 0.000 description 1
- JOPOVCBBYLSVDA-UHFFFAOYSA-N chromium(6+) Chemical compound [Cr+6] JOPOVCBBYLSVDA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 239000007822 coupling agent Substances 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 150000005690 diesters Chemical class 0.000 description 1
- FAMRKDQNMBBFBR-BQYQJAHWSA-N diethyl azodicarboxylate Substances CCOC(=O)\N=N\C(=O)OCC FAMRKDQNMBBFBR-BQYQJAHWSA-N 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 1
- WBJINCZRORDGAQ-UHFFFAOYSA-N ethyl formate Chemical compound CCOC=O WBJINCZRORDGAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FAMRKDQNMBBFBR-UHFFFAOYSA-N ethyl n-ethoxycarbonyliminocarbamate Chemical compound CCOC(=O)N=NC(=O)OCC FAMRKDQNMBBFBR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003722 extracellular fluid Anatomy 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 239000003517 fume Substances 0.000 description 1
- HZHFFEYYPYZMNU-UHFFFAOYSA-K gadodiamide Chemical compound [Gd+3].CNC(=O)CN(CC([O-])=O)CCN(CC([O-])=O)CCN(CC([O-])=O)CC(=O)NC HZHFFEYYPYZMNU-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- LGMLJQFQKXPRGA-VPVMAENOSA-K gadopentetate dimeglumine Chemical compound [Gd+3].CNC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO.CNC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO.OC(=O)CN(CC([O-])=O)CCN(CC([O-])=O)CCN(CC(O)=O)CC([O-])=O LGMLJQFQKXPRGA-VPVMAENOSA-K 0.000 description 1
- RYHQMKVRYNEBNJ-BMWGJIJESA-K gadoterate meglumine Chemical compound [Gd+3].CNC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO.OC(=O)CN1CCN(CC([O-])=O)CCN(CC([O-])=O)CCN(CC([O-])=O)CC1 RYHQMKVRYNEBNJ-BMWGJIJESA-K 0.000 description 1
- 229940083124 ganglion-blocking antiadrenergic secondary and tertiary amines Drugs 0.000 description 1
- 229960002449 glycine Drugs 0.000 description 1
- 229940043257 glycylglycine Drugs 0.000 description 1
- 229920005555 halobutyl Polymers 0.000 description 1
- 125000004968 halobutyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000008241 heterogeneous mixture Substances 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 230000002706 hydrostatic effect Effects 0.000 description 1
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 239000007972 injectable composition Substances 0.000 description 1
- 229910001411 inorganic cation Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002075 inversion recovery Methods 0.000 description 1
- INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N iodomethane Chemical compound IC INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 229960003646 lysine Drugs 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- WQMNXHOWINIDRC-ARCWCCGYSA-N methyl (4r)-4-[(3s,5r,8r,9s,10s,13r,14s,17r)-3-amino-10,13-dimethyl-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]pentanoate Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@@H](N)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@H](C)CCC(=O)OC)[C@@]2(C)CC1 WQMNXHOWINIDRC-ARCWCCGYSA-N 0.000 description 1
- DPUYXXIKHKPYAZ-WWNGEWRCSA-N methyl (4r)-4-[(8r,9s,10s,13r,14s,17r)-2-hydroxy-10,13-dimethyl-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]pentanoate Chemical compound C1CC2CCC(O)C[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCC(=O)OC)[C@@]1(C)CC2 DPUYXXIKHKPYAZ-WWNGEWRCSA-N 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- MGJXBDMLVWIYOQ-UHFFFAOYSA-N methylazanide Chemical compound [NH-]C MGJXBDMLVWIYOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 1
- 238000003541 multi-stage reaction Methods 0.000 description 1
- RIVIDPPYRINTTH-UHFFFAOYSA-N n-ethylpropan-2-amine Chemical compound CCNC(C)C RIVIDPPYRINTTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 description 1
- 238000001225 nuclear magnetic resonance method Methods 0.000 description 1
- 230000003071 parasitic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- XYFCBTPGUUZFHI-UHFFFAOYSA-O phosphonium Chemical compound [PH4+] XYFCBTPGUUZFHI-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 235000011007 phosphoric acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920001467 poly(styrenesulfonates) Polymers 0.000 description 1
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 1
- 229920000656 polylysine Polymers 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 229940071643 prefilled syringe Drugs 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 150000003141 primary amines Chemical class 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- LVTJOONKWUXEFR-FZRMHRINSA-N protoneodioscin Natural products O(C[C@@H](CC[C@]1(O)[C@H](C)[C@@H]2[C@]3(C)[C@H]([C@H]4[C@@H]([C@]5(C)C(=CC4)C[C@@H](O[C@@H]4[C@H](O[C@H]6[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O6)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]6[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O6)[C@H](CO)O4)CC5)CC3)C[C@@H]2O1)C)[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 LVTJOONKWUXEFR-FZRMHRINSA-N 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002510 pyrogen Substances 0.000 description 1
- HNJBEVLQSNELDL-UHFFFAOYSA-N pyrrolidin-2-one Chemical compound O=C1CCCN1 HNJBEVLQSNELDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003660 reticulum Anatomy 0.000 description 1
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 150000003334 secondary amides Chemical class 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 229910001415 sodium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000008279 sol Substances 0.000 description 1
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 1
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- UCPYLLCMEDAXFR-UHFFFAOYSA-N triphosgene Chemical compound ClC(Cl)(Cl)OC(=O)OC(Cl)(Cl)Cl UCPYLLCMEDAXFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000281 trometamol Drugs 0.000 description 1
- 229910052720 vanadium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011534 wash buffer Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 1
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 1
- ORZHVTYKPFFVMG-UHFFFAOYSA-N xylenol orange Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CC1=C(O)C(C)=CC(C2(C3=CC=CC=C3S(=O)(=O)O2)C=2C=C(CN(CC(O)=O)CC(O)=O)C(O)=C(C)C=2)=C1 ORZHVTYKPFFVMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/06—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/06—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations
- A61K49/08—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by the carrier
- A61K49/10—Organic compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/06—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations
- A61K49/08—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by the carrier
- A61K49/085—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by the carrier conjugated systems
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S977/00—Nanotechnology
- Y10S977/902—Specified use of nanostructure
- Y10S977/904—Specified use of nanostructure for medical, immunological, body treatment, or diagnosis
- Y10S977/927—Diagnostic contrast agent
- Y10S977/928—X-ray agent
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S977/00—Nanotechnology
- Y10S977/902—Specified use of nanostructure
- Y10S977/904—Specified use of nanostructure for medical, immunological, body treatment, or diagnosis
- Y10S977/927—Diagnostic contrast agent
- Y10S977/929—Ultrasound contrast agent
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S977/00—Nanotechnology
- Y10S977/902—Specified use of nanostructure
- Y10S977/904—Specified use of nanostructure for medical, immunological, body treatment, or diagnosis
- Y10S977/927—Diagnostic contrast agent
- Y10S977/93—MRI contrast agent
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Radiology & Medical Imaging (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Magnetic Resonance Imaging Apparatus (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Abstract
Použití komplexu obecného vzorce I s paramagnetickými dvoj- nebo trojmocnými kovovými ionty zvolenými ze skupiny Fe.sup.(2+).n., Fe.sup.(3+).n., Cu.sup.(2+).n., Cr.sup.(3+).n., Gd.sup.(3+).n., Eu.sup.(3+).n., Dy.sup.(3+).n., Yb.sup.(3+).n.nebo Mn.sup.(2+).n., stejne jako jejich solí s fyziologicky kompatibilními organickými bázemi zvolenými z primárních, sekundárních, terciárních aminu nebo bazických aminokyselin, nebo s anorganickými bázemi jejichž kationty jsou sodík, draslík, horcík, vápník nebo jejich smesi, kde ve vzorci I X-L-Y X je zbytek polyaminopolykarboxylového ligandu a jeho derivátu zvolených ze skupiny EDTA, DTPA, DOTA, DO3A, HPDO3A, BOPTA; Y je derivát žlucové kyseliny zvolený ze skupiny zbytku kyseliny cholové, chenodeoxycholové, deoxycholové, ursodeoxycholové, lithocholové, jako takových i funkcionalizovaných v polohách obsahujících hydroxylovou skupinu jako reaktivní skupinu; L je retezec navázaný na jakoukoli polohu skupiny X a na polohy C-3, C-7, C-12 skupiny Y, pro výrobu diagnostických prostredku pro získání zobrazení krevního systému cloveka nebo zvírete metodou NMR.
Description
Použiti chelatovaných komplexů
Oblast techniky
Předkládaný vynález se týká nového použití komplexů kovových iontů konjugátů žlučových kyselin s molekulami s chelatační aktivitou jako kontrastních látek při diagnostickém způsobu známém jako „zobrazování magnetickou rezonancí“ (magnetic rezonance imaging, M.R.I.) zvláště jako látek setrvávajících v krevním oběhu (blood pool agents).
Dosavadní stav techniky
Komplexy vytvořené z chelatačních činidel a vhodných kovů se již používají jako kontrastní látky v následujících diagnostických technikách: rentgenové zobrazování, zobrazování nukleární magnetickou rezonancí (M. R. I.) a při scintigrafii.
Lékařská diagnóza využívající zobrazování nukleární magnetickou rezonancí je uznávaná diagnostická technika v klinické praxi (Stark, D. D„ Bradley, W. G., Jr., Ed. „Magnetic Rezonance
Imaging“ The C. V. Mosby Company, St. Louis, Missouri (USA), 1988), která hlavně využívá paramagnetických farmaceutických prostředků, s výhodou obsahujících chelatované komplexy dvoj až trojmocných iontů paramagnetických kovů s polyaminopolykarboxylovými ligandy a/nebo jejich deriváty nebo analogy.
Zobrazení, která jsou v podstatě odvozena z NMR signálu protonů vody, jsou výsledkem komplexní interakce mezi různými parametry, jako je hustota protonů a relaxační časy Ti a T2. Zesílení kontrastu může být dosaženo podáním exogenních chemických látek, které významným způsobem mění resonanční vlastnosti protonů nacházejících se vjejich blízkosti (viz Lauffer, R. B., Chem. Rev. 1987, 87, 901).
Paramagnetické kontrastní látky používané pro zobrazování NMR modifikují relaxační časy protonů vody přítomných ve tkáních, ve kteiých jsou tyto kontrastní látky zakoncentrované, a mohou proto zvyšovat kontrast mezi různými tkáněmi nebo mezi zdravými a nemocnými tkáněmi.
Paramagnetické komplexy s obsahem gadolinia byly předměty studií, publikací a patentů v důsledku jejich vysoké schopnosti snižovat relaxační časy protonů molekul vody, které jsou v jejich blízkosti, prostřednictvím dipolámí interakce.
Některé z těchto látek se v současnosti klinicky používají jako kontrastní látky při M.R.I.:
Gd-DTPA, N-methylglukaminová sůl komplexu gadolinia s kyselinou diethylentriaminpentaoctovou, MAGNEVIST®; Gd-DOTA, N-methylglukaminová sůl komplexu gadolinia s kyselinou l,4,7,10-tetraazacyklododekan~l,4,7,10-tetraoctovou, DOTAREM®; Gd-HPDO3A, kom45 plex gadolinia s kyselinou [ 10-(2-hydroxypropyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan— 1,4,7-trioctovou, PROHANCE®; Gd-DTPA-BMA, komplex gadolinia s bis(methylamidem) kyseliny diethylentriaminpentaoctové, OMNISCAN®.
Kontrastní látky uvedené výše jsou komerčně dostupné a jsou určeny pro obecné použití. Po podání tyto kontrastní látky difundují v krvi a v extracelulámích oblastech různých částí těla před tím, než jsou vyloučeny. Jsou proto z tohoto hlediska podobné jodovaným sloučeninám používaným při rentgenové lékařské diagnóze.
V současnosti je v lékařství zapotřebí kontrastních látek, které jsou zaměřené na specifické orgá55 ny, nebo které jsou vhodné pro zobrazování krevního systému, které nemohou být dobře defino- 1 CZ 302195 B6 vány pomocí produktů, které jsou již komerčně dostupné. První přístup pro získání látek pro zobrazování krevního oběhu spočíval v kovalentním navázání kontrastní látky na makromolekuly jako jsou proteiny, nebo ve vložení kontrastní látky dovnitř stabilních molekulárních agregátů jako jsou liposomy, nebo ještě v použití tzv. superparamagnetických částic.
Například komplex gadolinia s kyselinou diethylentriaminpentaoctovou (Gd-DTPA) byl navázán na lidský albumin (HSA), polylysin nebo dextran (Oksendal A. N. a další, J. Magn. Reson. Imaging, 157, 1993; Rocklage S. M., „Contrast Agents, Magn. Res. Imaging, Mosby Year Book, 372 - 437, 1992) s cílem minimalizovat a nebo dokonce potlačit difúzi z krve do extracelulámí tekutiny a tím dosáhnout vyšší doby zdržení tohoto prostředku v krevním systému. Takový přístup, i když se s jeho pomocí dosahuje požadovaného účinku, má nežádoucí vedlejší účinky v tom, že samotná kontrastní látka se pouze obtížně vylučuje.
Odlišná strategie je používání superparamagnetických částic potažených polyethy lengly koty nebo uhlovodíky, aby se snížil příjem do jater prostřednictvím endotheliálního retikula nebo jinými systémy (Tilcock C., Biochim. Biophys. Acta, 77, 1993; Bogdanoy A. A. a další, Radiology, 701, 1993), a tím došlo k prodloužení zachování těchto látek v krvi. V tomto případě se také vyskytují výše uvedené vedlejší účinky spolu s problémy způsobenými vysokými náklady při výrobě.
Proto stále trvá požadavek na účinný prostředek setrvávající v krevním oběhu, který by měl nízkou toxicitu a rozumné ekonomické náklady.
Předkládaný vynález se týká nového použití specifických zvolených sloučenin jako látek setrvávajících v krevním oběhu, přičemž tyto sloučeniny již byly přihlašovatelem popsány v mezinárodní patentové přihlášce WO-A 95/32741, pro MR zobrazování hepatobiliálního systému. Uvedené sloučeniny byly získány konjugací žlučové kyseliny scheiatačním činidlem, ajsou schopny chelatovat ionty paramagnetických dvoj- nebo trojmocných kovů.
Překvapivě bylo zjištěno, že specifická třída těchto sloučenin zůstává v cévním systému po dostatečně dlouhou dobu, aby byly vhodné pro použití jako kontrastní látky pro zobrazování cévního systému, zvláště v koronární oblasti.
Tento jev je možno jasně prokázat provedením testu irt vivo na zvířatech (jako králík a opice). Dobu setrvání v cévním systému je možno ihned ukázat při vynesení relaxačních časů protonů (1/T|) vzorků krve zvířete odebíraných ve vhodných časových intervalech po podání kontrastní látky.
Protože komplexy Gd(lII) jsou paramagnetické, vysoké hodnoty 1/Tj jsou důkazem vysokých koncentrací těchto kontrastních látek v krvi.
Rozdíl mezi běžným extracelulámím kontrastním prostředkem a prostředkem setrvávajícím v krevním oběhu je dobře objasněn v článku LaufTer a další, Radiology, 529, 1998, ve kterém jsou ukázány profily T| v krvi jako funkce času, který uplynul po podání kontrastní látky.
Zvláště komplexy podle předkládaného vynálezu, jestliže jsou podány například králíkovi v dávce splňující požadavky na rozumný index bezpečnosti, jsou schopny indukovat změny v rychlostech relaxace (měřeno jako Δ 1/TJ v krvi vyšší než 5 s“1 10 min po podání, takže jsou vhodnými látkami pro použití jako kontrastní látky pro zobrazování cévního systému.
Bylo zjištěno, že tento typ účinku nemůže být spojován výhradně s přítomností žlučových kyselin, ale závisí na chemické struktuře těchto komplexů. Ve skutečnosti se zdá, že chelatační jednotka by měla být s výhodou navázána na steroidní kostru prostřednictvím vazby v polohách 3, 7 nebo 12 žlučové kyseliny.
-2CZ 302195 B6
Bylo prokázáno, že jakékoli vazby mezi chelatační jednotkou a žlučovou kyselinou zahrnující karboxylovou kyselinu v poloze 24 by poskytly komplexy s neuspokojivým setrváním v cévním systému.
Podstata vynálezu io Předmětem předkládaného vynálezu je tedy použití komplexů sloučenin obecného vzorce I s paramagnetickými dvoj- nebo troj mocnými kovovými ionty zvolenými ze skupiny Fet2+), Fe(3+), Cu(2+), Cr(3n, Gd<3+), Eu{3+\ Dy(3+), Yb(3+) nebo Mnu+),
X-L-Y (I ), ve kterých
X je zbytek polyaminopolykarboxylové ligandů nebo jeho derivátu zvoleného ze skupiny:
kyselina ethylendiamintetraoctová (EDTA), diethylentriaminpentaoctová (DTP A), kyselina 20 1,4,7,10—tetraazacyklododekan-1,4,7,10-tetraoctová (DOTA), kyselina 1,4,7,10—tetraazacyklododekan-l,4,7-trioctová (DO3A), kyselina [10-(2-hydroxypropyl)-l,4,7,10-tetraazacyklododekan-l,4,7-trioctová (HPDO3A), kyselina 4—kar boxy-5,8,1 l-tris(karboxymethyl)-1-fenyl-2-oxa~5,8,l l-triazatridekan-13-ová (BOPTA);
Y je derivát žlučové kyseliny zvolený ze skupiny zbytků kyseliny cholové, chenodeoxycholové, deoxycholové, ursodeoxycholové, lithocholové,
kyselina choíová kyselina chenodeoxycholová kyselina deoxycholová
- 3 CZ 302195 B6
kyseiina ursodeoxycholová kyselina litocholová jako takových i funkcionalizovaných v polohách obsahujících hydroxylovou skupinu jako reaktivní skupinu, nezávisle na stereochemickém uspořádání konečných produktů, s kde uvedený derivát také obsahuje konjugát skupiny kyseliny v poloze 24 s taurinem a glyčinem;
L je řetězec navázaný na jakoukoli polohu skupiny X, popřípadě obsahující jednu z karboxylových skupin, která je takto převedena na amidoskupinu, a na polohu C-3, C-7, C-12 io skupiny Y, a který má následující vzorec 11
(11).
kde m je celé číslo od I do 10, přičemž pro hodnoty vyšší než 1 může mít skupina A různé významy,
A má následující vzorec III
n a q mohou být 0 nebo 1, ale nejsou obě současně 0, p může být v rozmezí 0 až 10,
Z znamená atom kyslíku nebo skupinu -NR, ve které
R znamená atom vodíku nebo skupinu (Ct-C5)alkyl, buď nesubstituovanou, nebo substituovanou skupinou -COOH.
Zvláště výhodné sloučeniny jsou látky, ve kterých mají mezerníkové řetězce L následující obecné vzorce lila a Illb.
-4CZ 302195 B6
Výhodné jsou také struktury, ve kterých Z je atom kyslíku, a proto je skupina L vytvořena prostřednictvím hydroxylových skupin přítomných v polohách 3, 7, 12, nezávisle na stereochemic5 kém uspořádání konečných produktů.
Zvláště výhodné jsou sloučeniny vzorce I, ve kterých je zbytek X zvolen ze skupiny: EDTA, DTPA, DOTA, DO3A, BOPTA; L je zvoleno ze skupiny IHa, 111b;
ίο Y je s výhodou zvoleno ze skupiny zbytků kyseliny c ho lové, deoxycholové, chenodeoxycholové, lithocholové, navázaných na skupinu L aminovou skupinou v poloze 3 a kyselinová skupina v poloze 24 je přítomna nedotčená, nebo ve formě taurinového nebo glycinového derivátu.
Na skupinu Y mohou být také navázány odlišné funkční skupiny, například převedením jedné i? nebo více hydroxylových skupin na ketoskupiny.
Zvláště výhodné komplexy s ionty paramagnetických kovů definované výše jsou komplexy s gadoliniem nebo s manganem.
Výhodné jsou sloučeniny obecného vzorce IV, ve kterých v obecném vzorci I je zbytek X DTPA, substituovaná na centrálním řetězci, a ve kterých skupina Rt znamená atom vodíku nebo skupinu -COOH,
HOOC—\
HOOC— /—COOH
Ý— COOH ((V),
A25
Y je zvoleno ze skupiny zbytků kyselin chotové, deoxycholové, chenodeoxycholové, lithocholové, a L má strukturu vzorce III.
Zvláště výhodné jsou sloučeniny obecného vzorce IVa
HOOC
HOOC v
HOOC^t-Y χ—COOH
COOH (IVa), ve kterých Rj je skupina COOH a Y má významy uvedené výše pro sloučeniny obecného vzorce IV a L má strukturu IIIa nebo Ilib.
- 5 CZ 302195 B6
Další předmět předkládaného vynálezu je použití následujících nových sloučenin, které náležejí do třídy sloučenin obecného vzorce lVa;
kyselina [3p(S),5p]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyljamino]-4-karboxy-l-oxobutyl](karboxymethyl)amino]cholan-24-ová
io kyselina [3p(S),5p]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]—4-karboxy-l-oxobutyl]amino]cholan-24~ová
kyselina [3p(S),5p7p]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]-4-karboxy-loxobutyl]amino]-7-hydroxycholan“24-ová
ky se 1 i n a [3 β( S), 5 β]—3—[ [4—[ b i s[ 2—[ b i s( karboxy methy I Jam i no] ethy I ] am i no]-4-karboxy-1 -oxobutyl]amino]cholan-24-ová
kyselina [3β(5),5β]-3-[[4—[bÍs[2-[bis(karboxymcthyl)amino]ethyl]amino]—4-karboxy-l—oxobutyl]amino]-l 2-oxocholan-24-ová
-6CZ 302195 B6
kyselina [3β(5),5β,7a]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]—4-karboxy-1oxobutyl]amino]-7-hydroxycholan-24-ová
N2-bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]--N-[(3p,5p,7a, 12cx)-7J 2-dihvdroxy-24-0X0-24[(2-sulfoethyl)amino]chotan~3-yI]-L-glutamin
N2-bÍs[2-[bis(karboxymethyl)amÍno]ethyl]-N-[(3p,5p)-24-oxo-24—[(2sulfoethyl)aminoJchotan-3-yl]-L-glutamin
___SO,H
NH^ 1 kyselina [3 p(S),5 p,l2a]-3-[[4~[bis[2-[bis( karboxy methy l)amino]ethyl]amino]^4-karboxy-1oxobuty I]am i no]-12-hydroxy cho lan-24-ová
- 7 CZ 302195 B6
kyselina [3β(Κ)„5β, 12a]-3-[[4-[bÍs[2~[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]-4-karboxy-l oxobutyl]aminoJ-l2-hydroxycho1an-24—ová
HO,C
HO,C
V>í z00»*1
COOH kyselina [3p(RS),5p, 12a]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amÍno]-4-karboxyoxobutyl]aminoJ-l2-hydroxycholan-24-ová
kyselina [3a(S),5p,12a]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]-4-karboxy-l oxobutyl]amino]-l 2-hydroxvcholan-24-ová
kyselina [3 P(RS),5p,7a, 12a]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboxy methy l)amino] ethyl Jam ino]-4-karbo xy-1-oxobutyl]amino J-7,12-dihydroxycholan-24—ová
-8CZ 302195 B6
kyselina [3a(S),5p,7a, 12a]-3-[[[[5-[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]-5-karboxypentyl] ami no] karbony l]oxy]-7,12-dihydroxycholan-24-ová
kyselina [3a(S),5p]-3-[2-[[5-[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyI]amino]-5-karboxypentyl]amino]-2-oxoethoxy]cholan-24-ová
Další sloučeniny náležející do této skupiny, jejichž komplexy s gadoliniem byly popsány v paten tové přihlášce WO-A 95/32741, jsou následující:
kyselina [3p(S),5p,7a,12a]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]-4_karboxy1 -oxobutyl]amino]-7,12-dihydroxycholan-24-ová
kyselina [3p(S),5p,7a,l2a]-3-[[4-[[5-[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]-5-karboxypenty l]amino]-l ,4-dioxobutyl]amino]-7,12-dihydroxycholan-24_ová.
-9CZ 302195 Β6
Výhodné jsou také sloučeniny obecného vzorce IVb, které jsou také deriváty DTPA substituované v centrální poloze,
HOOCN
HOOC—
OVb), ve kterých Y má výše uvedené významy pro sloučeniny vzorce IV a L má strukturu lila.
Předkládaný vynález se dále týká použití následujících sloučenin, které náleží ke třídě obecného vzorce IVb:
kyselina(3p,5p,7a,12a)-3-[[[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyI]amino]acetyl]amino]7,12-dihydroxycholan-24-ová
Kyselina (3p,5p)-3-[[[[[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]acety]]amino]acetyl3amino]cholan-24-ová
Další sloučeniny patřící do této třídy, jejichž komplexy s gadoliniem byly popsány v patentové přihlášce WO-A 95/32741, jsou následující:
- 10CZ 302195 B6 kyselina (3p,5p,7a,12a]-3-[[[[[bis[2-[bís(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]acetyl]amino]-
kyselina (3β,5β,7α, 12a]-3-[[6-[[[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]acetyl]amino]1-oxohexylJamino]-7,12-dihydroxycholan-24-ová
Zvláště výhodné jsou také sloučeniny obecného vzorce V, ve kterých v obecném vzorci 1 znamená zbytek X DTPA, Y má významy uvedené výše pro sloučeniny IV a L má strukturu vzorce lila.
^COOH
HOOC'XX‘N^xx'Nx-x^'N‘X_ L”Y (V),
J k ,5 HOOC COOH
Další sloučeniny náležející do této třídy, jejichž komplexy s gadoliniem byly popsány v patentové přihlášce WO-A 95/32741, jsou následující:
kyselina (3 β,5β,7α, 12a)-3-[[N-[N-[2-[[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyI](karboxymethyl)amino]ethyl]-N-(karboxymethyl)glycyl]glycyÍ]amino]-7,12-dihydroxycholan-24-ová
-11CZ 302195 B6 kyselina 18-[[(3β,5β,7α, 12a)-23“karboxy-7,12-hydroxy-24-norcholan-3-yl]amino]-3,6,9tris( karboxy methy 1)-1 1,18-dioxo-3,6,9,12-tetraazaoktadekanová
Výhodné jsou také sloučeniny vzorce VI, ve kterých ve vzorci I je zbytek X DO3A, Y má významy uvedené výše pro sloučeniny vzorce IV a L je zvoleno ze struktur lila a Blb.
hooc^C^X^ooh _I _γ (VI),
Mezi sloučeninami vzorce Vije zvláště výhodná kyselina 10-[3-[[(3α,5β,7α, 12β)-23^ΗΛοχγ7,12-d i hydro xy-24-norcholan-3-yl] oxy ]-2-hyd roxy propy l]-l ,4,7,10-tetraazacyklododekan1,4,7-trioctová, jejíž komplex s gadotiniem byl popsán v patentové přihlášce WO-A-95/32741.
Podobně jsou výhodné sloučeniny obecného vzorce VII, ve kterých ve vzorci I je zbytek X EDTA, Y má významy uvedené výše pro sloučeniny vzorce IV a L má strukturu vzorce III,
Zvláště výhodné jsou komplexy sloučenin vzorce VII s manganem.
HOOC
HOQC^\
COOH (VU).
Mezi sloučeninami vzorce VII jsou zvláště výhodné následující:
- 12CZ 302195 B6 kyselina [3α(δ),5β, 12a]-3-[[[[[5-[[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl](karboxymethy l)amino] 5-karboxy pentyl Jam i no] karbonyl] oxy ]-12-hydroxycholan-24-ová
kyselina [3p(S),5p,7a, 12a]-3-[[4-[[5-[[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl](karboxy methyl)amino]-5-karboxypentyl]amino]-l ,4-dioxobutyl]amino]_7,12-dihydroxycholan-24-ová
O kyselina [3a(S),5p]-3-[2-[[5-[[2-[bis(karboxymethyl)amino]-ethyl](karboxymethyl)amino]-5 karboxypentyl]amino]-2-oxoethoxy]cholan-24-ová
COOH kyselina [3(3(S),5β, 12a]-3-[[4-[[2-[[bis(karboxymethyl)amino]ethyl](karboxymethyl)amino]4-karboxy-1 -oxobuty I ]am ino]-12-hydroxycholan-24-o vá
O
COOH
- 13CZ 302195 B6 kyselina |33(Sk5p]-3-[[4-[|2-[fbis(karboxymethy])amino]ethyl](karboxymethyí)amino]—4karboxy-l-oxobutyl]amino]-l 2-oxocholan-24-ová
Sloučeniny obecného vzorce I mohou být připraveny metodou konvergentní syntézy, která zahrnuje následující kroky:
1) syntetizuje sc funkcionalizovaný ligand, tj. odvozený od ligandů schopného koordinovat jeden iont paramagnetického kovu, a přitom se stabilně vázat na žlučovou kyselinu pomocí vhodné funkční skupiny;
2) syntetizuje se funkcionalizovaná žlučová kyselina;
3) provede se vazebná reakce mezi těmito dvěma odlišnými syntony;
4) provede se odštěpení jakýchkoli přítomných ochranných skupin;
5) vytvoří se komplex s iontem paramagnetického kovu;
jakje podrobně ilustrováno ve výše citované patentové přihlášce WO-A 95/32741.
Některé z výhodných způsobů výroby ligandů podle předkládaného vynálezu zahrnují vytvoření amidové vazby mezi dvěma syntony, z nichž jeden je prekurzor chelatačního systému paramagnetického iontu (synton A), a druhý je prekurzor zbytku žlučové kyseliny obsaženého v hotovém komplexu (synton B).
Způsoby popsané dále by neměly být považovány za omezující syntézu sloučenin podle předkládaného vynálezu.
Amidová vazba může být vytvořena následujícími způsoby:
a) provede se reakce syntonů A obsahujících karboxylovou funkční skupinu se syntony B obsahujícími primární nebo sekundární aminovou funkční skupinu;
b) provede se reakce syntonů A obsahujících primární nebo sekundární aminovou funkční skupinu se syntony B obsahujícími karboxylovou funkční skupinu;
c) provede se reakce dianhydridu DTPA (komerčně dostupný produkt) se syntonem B obsahujícím primární nebo sekundární aminovou funkční skupinu.
Seznam některých ze syntonů A a B použitých v rámci předkládaného vynálezu je uveden v následující tabulce.
- 14CZ 302195 B6
Tabulka
Syntony použité při reakcích jsou samozřejmě vhodně chráněny na těch skupinách, na kterých by mohlo docházet k parazitickým reakcím za podmínek použitých pro vytvoření amidové vazby. Po vytvoření vazby mezi íěiiiiío dvěma syntony se uvažuje provedení jednoho nebo vice kroku odstranění ochranných skupin pro obnovení původních skupin.
-15 CZ 302195 B6
Alternativně k tomuto typů procesů může být chelatační podjednotka zavedena vícestupňovými reakcemi, přičemž se vychází z derivátu žlučové kyseliny, jak je tomu v případě syntézy sloučeniny popsané v příkladu 3 experimentální části ilustrovaném na následujícím schématu 1.
Schéma 1
HCCC ccg ^CCCK
GdCI3 megfumín
'CGG^N N^CCO*
CCC^ .-.3- ^CCC-’
CH io Předkládaný vynález se také týká nového způsobu ukázaného na následujícím schématu 2.
- 16CZ 302195 B6
Schéma 2
Λ
X
K chránění
COOH transamidace
N 'CCOR, r4 NHf
RjOCC
ŇHR4Rj η kde
R4 znamená ochrannou skupinu aminoskupiny;
R5 znamená přímou nebo rozvětvenou^-Cioalkylovou nebo arylovou skupinu;
lí)
R2 a R3 jsou nezávisle atom vodíku, přímá nebo rozvětvená C|-C2o alkylová skupina, která je nesubstituovaná nebo substituovaná arylovými skupinami, nebo uvedené skupiny tvoří C3-C10 cyklus;
přičemž tento způsob využívá transamidační reakce a umožňuje zachovat stereochemické uspořádání na chirálním centru sousedícím s atomem dusíku výchozího pyrrolidinonu za získání sekundárního amidu. Kombinovaná volba skupin R4 a R5 je důležitá v tom, že štěpení by mělo probíhat za různých podmínek. Možné příklady skupin R4 jsou skupina karbobenzyloxy (Cbz) a příklady skupiny R5 jsou skupina methyl nebo t-butyl.
Tento způsob je obecně použitelný pro získání y-amidů kyseliny glutamové aje velmi vhodný pro výrobu sloučenin podle vynálezu, zvláště γ-amidů s 3-aminovými deriváty zbytků Y, jak je definováno výše. Ve skutečnosti tento způsob umožňuje získat finální sloučeninu a vyhnout se použití drahých kondenzačních činidel pro vytvoření γ-amidů amidové vazby mezi glutamovou kyselinou a odpovídajícím aminem.
Příklad použití tohoto zcela nového syntetického postupuje syntéza kyseliny [3β,(5),5β,12α]-3[[4-[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]-4-karboxy-l-oxobutyl]amino]-l 2-hydroxycholan-24—ové jejíž běžná syntéza je ukázána v příkladu 4 experimentální části, zatímco alter30 nativní způsob je ukázán v příkladu 5 a úplné schéma syntézy je ukázáno na následujícím schématu 3.
-17CZ 302195 B6
Schéma 3
LiOH, dioxan
Analogicky byl připraven derivát kyseliny cholové, který již byl popsán v patentové přihlášce WO-A95/3274I, a to kyselina [3p,(S),5p,7ctl2aJ-3-[[4-[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyljamino]—4— karboxy-1-oxobutyJ]amino]-7,l 2-d i hydroxy cholan-24—ová.
Kovové ionty vhodné pro vytvoření komplexních solí s chelatačními činidly obecného vzorce I io jsou dvojmocné nebo trojmocné ionty prvku zvolených ze skupiny: Fet2+), Fe<3+), Cu(2+), Cr(3+>,
Gď3'1, Eu1’. Dý34’, Yb’3*1 nebo Mnl2+).
Co se týče diagnostického použití nových chelatovaných komplexů podle vynálezu, mohou být použity jako kontrastní látky, zvláštč pro použití jako látky setrvávající v krevním oběhu při technikách diagnostického zobrazování pomocí magnetické rezonance.
Příprava komplexů se běžně provádí způsobem, při kterém se oxid nebo vhodná sůl paramagnetického kovu, rozpuštěný ve vodě nebo suspendovaný v roztoku voda-alkohol, přidá k vodnému nebo vodně-alkoholického roztoku chelatačního činidla za míchání, a v případě potřeby se směs mírně zahřívá nebo se zahřívá až k teplotě varu, dokud není reakce u konce. Jestliže je komplex v reakčním rozpouštědle nerozpustný, může být odfiltrován. Pokud je rozpustný, může být oddělen odpařením rozpouštědla za získání zbytku, například rozprašovacím sušením.
V případě, že získaný komplex stále obsahuje skupiny volné kyseliny, převede se na neutrální sůl reakcí s organickou nebo anorganickou bází, které tvoří fyziologicky kompatibilní kationty v roztocích.
Pro přípravu těchto neutrálních solí může být do komplexů s obsahem volných kyselinových skupin ve vodném roztoku nebo suspenzi přidáváno dostatečné množství báze až do neutrality.
- 18CZ 302195 B6
Získaný roztok může potom být běžným způsobem odpařen nebo může být přidáno vhodné rozpouštědlo pro vykrystalizování komplexní soli.
Výhodné anorganické kationty vhodné pro převedení chelatovaných komplexů podle vynálezu na sůl jsou zvláště ionty alkalických kovů nebo kovů alkalických zemin jako je draslík, sodík, vápník, hořčík ajejich směsi. Zvláště výhodný je iont sodíku.
Mezi výhodné kationty, které se odvozují z organických bází, vhodné pro výše uvedený úěel, mj. zahrnují primární, sekundární a terciární aminy, jako je ethanolamin, diethanolamin, morfolin, glukamín, N-methylglukamin, Ν,Ν-dimethylglukamin, přičemž zvláště výhodný je N-methylglukamin.
Mezi výhodné kationty odvozené od aminokyselin patří například kationty odvozené od taurinu, glycinu, lysinu, argininu nebo omithinu.
Alternativa tohoto procesu je příprava injekční formulace bez izolace komplexní soli. V tomto případě je nezbytný požadavek, aby hotové roztoky neobsahovaly volné ionty kovů, které jsou toxické pro organismus.
To je možno zkontrolovat například titrací s barevnými indikátory jako je xylenolová oranž. Měl by být zdůrazněn také konečný krok purifikace komplexní soli.
Při tomto typu procesu reagují chelataění činidlo, sůl nebo oxid kovu a jakákoli báze určená pro převedení do formy soli, ve stechiometrických poměrech ve vodě pro injekce, a potom po úkon25 ěení reakce se odfiltrují pyrogeny a produkt se distribuuje ve vhodných zásobnících a potom teplotně sterilizuje.
Injekční farmaceutické preparáty se typicky připravují rozpuštěním účinné složky připravené výše popsaným způsobem a pomocných látek ve vodě vhodné čistoty z farmakologického hledis30 ka za získání farmaceutického prostředku vhodného pro enterální nebo parenterální podávání, v molámích koncentracích 0,01 M až 1,0 M (0,01 M až 100 M). Získané kontrastní činidlo se vhodným způsobem sterilizuje.
Kontrastní látky se podávají v závislosti na diagnostických požadavcích v dávce 0,01 až
0,3 mmol/kg tělesné hmotnosti.
Dávky pro parenterální podávání se v principu pohybují od 0,001 do přibližně 1,0 mmol/kg tělesné hmotnosti. Výhodné dávky pro parenterální podávání se pohybují od 0,01 do přibližně 0,5 mmol/kg tělesné hmotnosti.
Dávky pro enterální podávání jsou obecně od 0,5 do přibližně 10 mmol/kg tělesné hmotnosti, s výhodou od 1,0 do přibližně 10 mmol/kg tělesné hmotnosti.
Nové formulace podle předkládaného vynálezu jsou dobře tolerované; navíc je jejich rozpustnost ve vodě další důležitou vlastností, která je určuje pro výhodné použití při metodě nukleární magnetické rezonance.
Diagnostické prostředky podle předkládaného vynálezu se užívají běžným způsobem. Prostředky mohou být pacientovi, typicky teplokrevnému živočichu, podávány jak systémově, tak i místně do orgánu nebo tkáně, která má být magnetickou rezonancí zviditelněna.
Protokoly analýzy a zařízení mohou být nalezeny v pracích jako Stark, D. D., Bradley, W. G., Magnetic Rezonance Imaging, Mosby Year Book, St. Louis, Mo, 1992.
- 19CZ 302195 B6
Použité experimentální podmínky budou ilustrovány podrobněji v následující experimentální části.
Přehled obrázků na výkresech
Obr. I popisuje profil rychlosti relaxace (vyjádřený jako A 1/Tt) v průběhu času získaný po vstříknutí sloučeniny z příkladu 1 králíkovi v dávce 0,1 mmol/kg;
io obr. 2 popisuje profil rychlosti relaxace získaný pro vstříknutí sloučeniny z příkladu 9 WO 95/32741 v dávce 0,1 mmol/kg;
obr. 3 popisuje profil rychlosti relaxace získaný pro vstříknutí sloučeniny z příkladu 15 WO 95/32741 v dávce 0,1 mmol/kg;
obr. 4 popisuje profil rychlosti relaxace získaný pro vstříknutí sloučeniny z příkladu 4 opici v dávce 0,05 mmol/kg.
2o Příklady provedení vynálezu Experimentální část
Příklad 1
Gadoliniový komplex kyseliny [3p,(S),5pJ-3-[[4-[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]-4-karboxy-l-oxobutyl]amino]-cholan-24-ové převedené na sůl s 1-deoxy-1-{methy Iamino)-D-glucitolem (1 :3)
/
A) Methylester kyseliny [3p,(S),5p]-3-[[5-(l,l-dimethylethoxy)-4-[bis[2[bis[2-(Ud i m ethy I etho xy )-2-oxoethy 1] am i no] ethy I] am i no]-1,5~d i oxopenty 1 ] am i no] c ho I an-2 4-o vé
3,6 g methylesteru kyseliny (3p,5p)-3-aminocholan-24-ové (připraveného analogicky s postupem popsaným ve WO-A 95/32741: příklad 5) (9,24 mmol), 8,5 g t-butylesteru kyseliny N,Nbis[2—[bis[2—(1,1-dimethylethoxy)-2_oxoethyl]amino]ethyl]-L-glutamové (připraveného jak bylo popsáno ve WO-A 95/32741: příklad 15) (11,39 mmol) a 1,64 g diethylkyanofosfonátu (9,39 mmol) bylo rozpuštěno ve 160 ml DMF. Roztok se ochladí na 0 °C, přikape se 1,28 ml
Et3N (9,24 mmol) a reakční směs se ponechá 30 min při pokojové teplotě. Po 1 h se roztok odpaří za sníženého tlaku, zbytek se vloží do EtOAc, promyje 5% NaHCO? a potom roztokem soli.
-20CZ 302195 B6
Organická fáze se oddělí, suší nad Na2SO4 a potom odpaří za sníženého tlaku. Surovina se čistí bleskovou chromatografií za získání 9,5 g požadovaného produktu (8,50 mmol).
Výtěžek: 92 %
Vlhkost K. F.: 3,47 %
Elementární analýza C Η N % vypočteno: 66,63 9,74 5,01 % nalezeno? 67,42 10,08 5,07 3 po sušení při teplotě 120 °C ve vakuu TLC: Stacionární fáze: deska silikagel 60F 254 Merck io Eluent -4:6 EtOAc/n-hexan
Detekce: 0,5% KMnO4 v l M NaOH Rf = 0,46
Spektra ’Η-NMR, i3C-NMR, IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
B) Methylester kyseliny [3p,(S),5p]-3-[[4-karboxy-4-[bis[2-[bÍs-(karboxyethyl)amino]15 ethyl]amino]-l-oxobutyl]amino]cholan-24-ové
K míchanému roztoku 9,3 g sloučeniny připravené v kroku A) (8,32 mmol) v 50 ml CH2CI2 se přidá 5,1 ml CF3COOH (66,6 mmol); po 10 min při teplotě 0 až 5 °C se roztok odpaří. Zbytek se převede do 50 ml CF3COOH a po 24 h při teplotě místností se přidá dalších 30 ml CF3COOH pro ukončení reakce. Po 5 h se reakční směs odpaří a zbytek se smísí s CH2CI2, přičemž pokaždé se rozpouštědlo odpaří za sníženého tlaku pro získání prášku. Pevná látka se promyje H2O, zfíltruje a suší za získání požadovaného produktu (6,9 g; 8,24 mmol).
Výtěžek: 99 % Teplota tání: 205 °C Vlhkost K, F.: 7,78% Elementární analýza % vypočteno:
% nalezeno?
C Η N
60.27 8,18 6,69
59.28 8,11 6,68 3 po sušení při teplotě 120 °C ve vakuu
TLC: Stacionární fáze: deska silikagel 60F 254 Merck Eluent = 6:4:1 CHCf/MeOH/25% NH4OH
Detekce: 0,5% KMnO4 v 1 M NaOH Rf = 0,28
Spektra 'H-NMR, ’3C-NMR, IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
C) Kyselina [3p,(S),5p]-3-[[4-[bis[2[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]^l-karboxy-loxobuty l] am i no]cho lan-2 4-ová
K suspenzi 6,14 g sloučeniny připravené v kroku B) (7,33 mmol) v 50 ml H2O se přidá 50 ml l M NaOH (50 mmol), přičemž pH 13 bylo udržováno pomocí pH-statu. Po 2 h při pokojové teplotě se reakční směs okyselí (pH 0,5) 12 M HCl za poskytnutí suspenze, která se zfíltruje, promyje H2O a suší za poskytnutí požadovaného produktu (5,64 g; 6,85 mmol).
Výtěžek: 93 %
Teplota tání: 205 °C Vlhkost K. F.: 9,02 %
Elementární analýza % vypočteno:
% nalezeno?
C H
59,84 8,08
59,56 8,15
N Cl, Na 6,81
6,80 <0,1 3 po sušení při teplotě 120 °C ve vakuu
-21 CZ 302195 B6
TLC: Stacionární fáze: deska silikagel 60F 254 Merck
Eluent = 6:4:1 CHCIVMeOH/25% NH4OH
Detekce: 0,5% KMnO4 v 1 M NaOH Rf= 0,25
Spektra 1 H-NMR, l3C-NMR, IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
D Gadoliniový komplex kyseliny [3p,(S),5p]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboxymethyl)-amino]ethyl]amino]-4-karboxy-l-oxobutyl]amino]cholan-24-ové převedený nasul s 1-deoxy-l(methylamino)-D-glucitolem (1:3)
4,53 g sloučeniny připravené v kroku C) (5,5 mmol) se suspenduje v 50 ml H2O a solubilizuje se s 10 ml 2 M vodného roztoku megluminu (20 mmol) za získání roztoku s pH 6,8. Potom se přidá 11 ml 0,5 M vodného roztoku GdCl3 (5,5 mmol) v průběhu 1 h, přičemž pH 6,8 se udržuje přidáním 6,5 ml 2 M vodného roztoku megluminu (13 mmol). Postup reakce se monitoruje kapilární elektroforézou. Po 2 h se roztok zfiltruje přes membránu Miilipore”, provede se nanofiltrace a roztok se odpaří. Zbytek se suší za poskytnutí požadované sloučeniny (6,15 g; 4,17 mmol). Výtěžek: 76 %
Teplota tání: 220 °C
Vlhkost K. F.: 8,44%
AnalýzaCE: 100 %(% plochy)
Kapilára: tavený křemen 0,56 m x 50 mm s bankovou celou
Napětí: 25 kV
Pufr: 0,05 M borát pH 9,3, 0,3 mM EDTA
Teplota: 40 °C
Čas ukončení: 20 min
Detekce (UV): 200 až 210 nm
Nástřik: hydrostatický (50 mbar (5 kPa), 5 s)
Koncentrace vzorku: 1 mg ml_i
Přístroj: Hewlett Packard 3 D HPCE
Kondicionování: t(min) úkon promytí H2O promytí OJ M NaOH promytí H2O promytí pufrem zahájení analýzy
| Elementární analýza | C | H | Gd | N | Cl, Na |
| % vypočteno: | 47,65 | 7,35 | 10,06 | 6,27 | |
| % nalezeno? | 47,83 | 7,36 | 10,01 | 6,24 | <0,1 |
a po sušení při teplotě 120 °C ve vakuu
Spektra IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
Analogicky se připravují následující sloučeniny a související gadoliniové komplexy:
Gadoliniový komplex kyseliny [3p,(S),5p,7p-3-[[4-[bis[2-[bis(karboxymethyl)-amino]ethyl]amino]—4-karboxy-l-oxobutyl]amino]-7-hydroxycholan-24—ové převedený na sůl s 1-deoxy1—(methylamino)-D-gIucitolem (1 : 3)
-22CZ 302195 B6
Gadoliniový komplex kyseliny [3p,(S),5p]~3-[2-[-[5-[bis[2-[bis(karboxymethyl)aniino]ethyl]amino]-5~karboxypentyl]amino]-2-oxoethoxy]cholan-24-ové převedený na sůl s 1-deoxv-l(methy lamino)-D-glucÍto lem (1 : 3)
Příklad 2
Gadoliniový komplex kyseliny [3p,(S),5p]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]-4-karboxy-l-oxobutyl]amino]-12-oxocholan-24-ové převedený na sůl s 1-deoxy-lio (methylaminoj-D-glucitolem (1 : 3)
A) Methylester kyseliny (3p,5p)-3-azido-12--oxocho!an-24-ové
12,5 ml Jonesova činidla [33,3 mmol Cr(VI)] se přikapává do roztoku 17,8 g methylesteru kyseliny (3p,5p,12a)-3-azido-12-hydroxychoIan-24-ové (41,1 mmol) (připraveného analogicky jako bylo popsáno při přípravě methylesteru kyseliny (3p,5p,7a,12a)-3-azido-7,12-dÍhydroxycholan-24—ové v dokumentu WO-A-95/32741: příklad 5) v acetonu (600 ml) během 90 min při teplotě místnosti. Po 20 h se směs zfiltruje a roztok se odpaří. Zbytek se rozpustí v CHCb (400 ml) a roztok se promyje nasyceným vodným roztokem NaHCO-ι a potom H2O. Roztok se suší a odpaří za poskytnutí surového materiálu, který se krystalizuje z 96% EtOH za získání 14,1 g požadovaného produktu (32,9 mmol).
Výtěžek: 84 %
Teplota tání: 153 °C
Vlhkost K. F.:<0,l % [a]20D = +83,25 (c 2,1, CHCI,) Elementární analýza C % vypočteno: 69,90 % nalezeno: 69,98
H
9,15
9,32
N
9,78
9,69
TLC: Stacionární fáze: deska silikagel 60F 254 Merck
Eluent: směs 8 : 2 n-hexan/EtOAc
Detekce: 0,5% KMnO4 v 1 M NaOH Rf = 0,43
Spektra 1 H-NMR, I3C-NMR, IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
B) Methylester kyseliny (3p,5p)-3-amino-l 2-oxocholan-24-ové
Roztok 16,4 g sloučeniny A) (38,2 mmol) v THF (130 ml) se hydrogenuje v přítomnosti 5% Pd/C (1,6 g) při pokojové teplotě a tlaku 4 MPa 15 h Parrově® autoklávu. Reakční směs se zfiltruje (papír a filtrační držák 0,5 pm membrána Millipore®) a odpaří. Surovina se čistí bleskovou chromatografií za získání ! 1,8 g požadovaného produktu (29,2 mmol).
Výtěžek: 77 %
-23 CZ 302195 B6
Teplota tání: 129 až 13O°C Vlhkost K. F.; 1,04% [a]2Wi> - +87,8 (c 2,02, CHCh) Elementární analýza C % vypočteno: 74,40 % nalezeno: 72,72
Η N
10,24 3,47
10,00 3,35
TLC: Stacionární fáze: deska sílikagel 60F 254 Merck Eluent: směs 95 : 5 MeOH/Et3N
Detekce: 0,5% KMnO4 v I M NaOH R, - 0,31
Spektra *H-NMR, l3C-NMR, IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
C) Methylester kyseliny [3p(S).5Pl-3-[[4-[bis[2-[bis[2-(], l-dimethylethoxy)-2-oxoethy tlam inojethyl ]am ino J-5-( 1,1-d i methy lethoxy )-l ,5-dioxopentyl]amino]-12-oxochoIan-24ové
Roztok DCC (6,24 g; 30,3 mmol) v CH2CI2 (25 ml) se přikapává v průběhu 30 min do roztoku 1(1 ,l-dimethylethyl)esteru kyseliny N,N-bis[2[bis[2-( l, l-dimethylethoxy)-2-oxoethyl]amino]ethyl]-L-glutamové (připraveného podle popisu v dokumentu WO-A-95/32741: příklad 15) (21,5g; 28,9 mmol), sloučeniny B) (11,1 g; 27,5 mmol) a HOBT (1 -hydroxybenzotriazol) (3,72 g; 27,5 mmol) v CH2CI2 (300 ml) při 0 °C pod dusíkem. Směs se ponechá ohřát pri teplotě místnosti. Po 21 li se reakční směs zfíltruje a roztok se promyje nasyceným vodným roztokem NaHCO3, potom H2O, a nakonec se odpaří. Surový materiál se čistí bleskovou chromatografií za získání 24,5 g požadovaného produktu (21,7 mmol).
Výtěžek: 79 % fa]20D = +12,17 (c 2,07, CHCI,)
TLC: Stacionární fáze: deska sílikagel 60F 254 Merck Eluent: směs 1:12 EtOAc/n-hexan
Detekce: 0,5% KMnO4 v 1 M NaOH Rt - 0,45
Spektra ’Η-NMR, l 3C-NMR, IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
D) Kyselina [3P(S),5p]-3-[[4_[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]-4-karboxy-loxobutyI]amino]-12-oxocholan-24-ová ml TFA (1,0 mol) se přikapává k roztoku 23,8 g sloučeniny připravené v kroku C) (21,0 mmol) v CH2CI2 (50 ml) pri 0 °C v průběhu 1 h. Reakční směs se míchá při teplotě místnosti a potom se po 2 h odpaří. Zbytek se převede do TFA (100 ml; 1,3 mol) a roztok se míchá dalších 24 h. Reakční směs se potom odpaří, převede do CH2CI2 a znovu odpaří. Surový materiál se rozpustí ve 150 ml 1 M NaOH, ochladí se ledovou lázní a roztok se míchá 15 h (pH 10) pri pokojové teplotě. Reakční směs se upraví na pH 13 3,30 ml 30% NaOH a po 4 h se zfíltruje membránou Millipore® (HAS 0,45 pm). Filtrát se okyselí 12,5 ml 30% HCl a 19 ml 1 M HCl na pH 1,60. Sraženina se zfíltruje, promyje H2O a suší za poskytnutí 15,8 g požadovaného produktu (18,9 mmol).
Výtěžek: 90 %
Teplota tání: 172 až 175 °C
Vlhkost K. F.: 1,98% [a]20D = +43,54 (c 2,02, 1 M NaOH)
HPLC: 97 %(% plochy)
Stacionární fáze: Zorbax ECLIPSE XDB-Cg 3,5 pm; 150 x 4,6 mm Teplota: 40 °C
-24CZ 302195 B6
Mobilní fáze: gradientově eluce;
| A = 0,017 M H3PO4, 0,3 mM EDTA v H2O; | |||||
| B = CH3CN | |||||
| Gradient: | min % A % B | ||||
| 5 | 0 85 15 40 65 35 50 65 35 | ||||
| Průtok: | 1,5 ml min-1 | ||||
| Detekce (UV): | 210 nm | ||||
| 10 Elementární analýza C | H | N | Cl | Na | |
| % vypočteno: | 58,84 | 7,71 | 6,69 | ||
| % nalezeno: | 56,57 | 7,68 | 6,37 | 0,25 | 0,18 |
TLC: Stacionární fáze: deska silikagel 60F 254 Merck Eluent: 5:4:2 CHCl3/MeOH/25% NH4OH
Detekce: 0,5% KMnO4 v 1 M NaOH Rf = 0,28
Spektra 'H-NMR, 13C-NMR, IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
E) Gadoliniový komplex kyseliny [3p(S),53]-3-[[4-[bis[2-[bís(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]—4-karboxy-l-oxobutyl]amino]-12-oxocholan-24-ové převedený na sůl s 120 deoxy-l-(methylamino)-D“glucitolem (1 : 3)
49,0 ml 0,918 M vodného roztoku megluminu (45,0 mmol) se prikapává do suspenze 14,0 g sloučeniny připravené v kroku D) (16,7 mmol) v H2O (100 ml), při pokojové teplotě, za získání čirého roztoku (pH 6,5). Do tohoto roztoku se přikapává 31,6 ml 0,503 M vodného roztoku GdCh (15,9 mmol) při udržování pH 6,5 přidáním 55,7 ml 0,918 M vodného roztoku megluminu (51,1 mmol) pH-statem. Na konci přidávání se směs zfiltruje přes membránu Millipore® (HAWP 0,45 pm), nanofiltruje, pH se upraví na 7,0 pomocí 0,100 ml 0,918 M vodného roztoku megluminu (0,092 mmol) a odpaří. Zbytek se suší za získání 22,0 g požadovaného produktu (14,0 mmol). Výtěžek: 84 %
Teplota tání: 100 až 105 °C
Vlhkost K. F.: 5,06 %
Stanovení HPLC: 97 % (% plochy)
Stacionární fáze: HYPURITY™ Elitě Cl 8 5 pm; 250 x 4,6 mm kolona s materiálem Hypersil;
Teplota: 40 °C
Mobilní fáze: gradientova eluce;
A = 0,01 M KH2PO4 ve vodě B = CH3CN
Gradient: min
50
Průtok:
ml min
Detekce (UV):210nm Elementární analýza % vypočteno:
% nalezeno:
Spektra IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
| % A % B 95 5 65 35 65 35 Γ1 | ||||
| c | H | N | Gd | Na,CI |
| 47,23 | 7,16 | 6,22 | 9,97 | |
| 45,70 | 6,00 | 9,41 | 1 'V, i |
-25CZ 302195 B6
Příklad 3
Gadoliniový komplex kyseliny [3p,5P,7a,12a]-3-[[[[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]acetyl]amino]-7,12-dihydroxycholan-24-ové převedený na sůl s I-deoxy-l-(methy Iamino)-D-glucitolem (1:2)
Cd3*
A) Methylester kyseliny (3p,5p,7a,12a)-3-[[[bis[2-[bis[2-(l,l-dimethylethoxy)-2-oxoethyl]amino]ethyl]amino]acetyl]amino]-7,12-dihydroxycholan-24-ové
24,8 ml methylesteru kyseliny (3p,5p,7a,12a)-3-[(aminoacetyl)aminoj-7,12-dihydroxycholan24-ové (připraveného způsobem popsaným ve WÓ-A-95/32741: příklad 5) (51,9 mmol) se suspenduje vmíchaném roztoku 38,7 g 1,1-dimethylethylesteru N-(2-bromethyl)-N-[2-{l,Idimethylethoxy)-2-oxoethyl]glycinu (připraveného způsobem popsaným ve WO-A-95/32741: příklad 15) (110 mmol) ve 390 ml CH2CN. Přidání 245 ml 2 M fosfátového pufru pH 8 poskytne dvoufázový roztok, který se důkladně míchá pří pokojové teplotě 144 hod. Organická fáze se oddělí a odpaří a zbylý olej se rozpustí ve 250 ml CH2C12. Roztok se promyje H2O, suší (Na2SO4) a odpaří. Surový materiál se čistí bleskovou chromatografií (eluent = 95 : 5 CHCI3/CH3OH) za získání požadovaného produktu (24,8 g; 24,3 mmol).
Výtěžek: 47 % [α]2θο = +9,45 (c 1,5, CHCI,) Elementární analýza C H % vypočteno: 64,68 9,47 % nalezeno: 64,55 9,44
N
5,49
5,46
TLC: Stacionární fáze: deska silikagel 60F 254 Merck
Eluent: směs 88 : 12 CHCfi/MeOH
Detekce: 0,5% KMnO4 v 1 M NaOH Rf = 0,57
Spektra 'H-NMR, l3C-NMR, IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
B) Kyselina (3p,5p,7a,12a)-3-[[bis[2-[bis(karboxymethyI)amino]ethyl]amino]acetyl]amino]7,12-dihydroxycholan-24-ová
318 ml 2M vodného roztoku LiOH (636 mmol) se po kapkách přidává v průběhu 15 min k roztoku sloučeniny připravené v kroku A) (21,6 g; 21,1 mmol) v 310 ml EtOH, Po 23 h se EtOH odpaří a reakční směs se míchá další 2 h. Roztok se prikapává do 255 ml 2,6 M HCl a pH se nastaví na 1,4 30% NaOH. Po 1,5 h se sraženina zfiltruje, promyje 300 ml 0,1 M HCl a suší za získání požadovaného produktu (13,1 g; 16,7 mmol).
Výtěžek: 78 %
-26CZ 302195 B6
Teplota tání: 129 až 132 °C rozklad Stanovení HPLC: 97,8 % (% plochy)
Stacionární fáze: Lichrosorb RP-Select B 5 pm; 250 x 4 mm Merck KGaA; Teplota: 45 °C
Mobilní fáze: gradientová eluce;
A = 0,01 M KH2PO4 a 0,017 M H3PO4 v H2O
| B = CH3CN | ||
| min | % A | %B |
| 0 | 95 | 5 |
| 5 | 20 | 80 |
| 45 Průtok: l ml min-1 Detekce (UV): 210 nm | 20 | 80 |
Komplexometrický titr: 95,5 % (0,1 M GdCl3) 15 [oí]2°d = +13,93 (c 5, 1 M NaOH)
| Elementární analýza | C | H | N | Cl |
| % vypočteno: | 58,30 | 7,98 | 7,16 | |
| % nalezeno: | 54,63 H2O 4,89 | 8,12 | 6,64 | 1,82 |
C) Gadoliniový komplex kyseliny (3p^,7a,12a)-3-[[[bis[2-[bÍs(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]acetyljamino]--7,12-dihydroxycholan-24-ové převedený na sůl s l-deoxy-l(methylamino)-I>-glucitolem (1 : 2)
11,3 g sloučeniny připravené v kroku B) (13,8 mmol) se suspenduje ve 40 ml H2O a rozpustí přidáním 44,7 ml 1 M vodného roztoku megluminu (44,7 mmol) až do dosažení pH 6. Do směsi se prikapává v průběhu 1 h 13,7 ml 1 M vodného roztoku GdCl3 (13,7 mmol) při udržování pH 6,5 přidání 73,5 ml 1 M vodného roztoku megluminu (73,5 mmol). Reakční směs se nanofiltruje a pH se upraví na 6,8 přidáním 0,3 ml 0,1 M megluminu. Po odpaření a usušení se získá požadovaný produkt (17,2 g; 12,9 mmol).
Výtěžek: 93 %
Teplota tání: 245 až 249 °C rozklad
Volný ligand: < 0,1% (0,001 M GdCl3)
Stanovení HPLC: 100 % (% plochy)
Stacionární fáze: kolona Lichrosfer 100 RP-8 5 pm; 250 x 4 mm Merck KGaA;
Teplota: 40 °C
Mobilní fáze: isokratická eluce předem smíšenou fází: 1 g n-oktylaminu a 0,3 mmol Na2 EDTA se přidají k 260 ml CH3CN a 740 ml H2O. Roztok se pufruje na pH 7 H3PO4.
Průtok: 1 ml min 1
Detekce (UV): 210 nm Elementární analýza % vypočteno:
% nalezeno:
C H Gd
47,05 7,06 11,84
45,19 7,21 11,2
H2O 4,16
N
6,33
6,07
Spektra IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou
-27CZ 302195 B6
Příklad 4
Gadoliniový komplex kyseliny [3p(S),5p,I2a]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]^t-karboxy-l-oxobutyt]amino]-12-hydroxycholan-24-ové převedený na sůl s 1-deoxy1—(methylamino)-D-glucitolem (1 : 3)
A) Methylester kyseliny [3p(S),5p, 12a]-3-[[4~[bis[2-( 1,1 -dimethy lethoxy )-2-oxoethylJamino]ethy i]aminoj-5-( 1, 1-dimethy lethoxy)-] ,5-dioxopentyl]amino]-12-hydroxycholan24-ové
Triethylamin (2,23g; 22 mmol) se přidá k roztoku 8,93 g methylesteru kyseliny (3β,5β,12α)-3amino-12-hydroxycholan-24-ové (připravenému analogicky s derivátem kyseliny cholové popsaném ve WO-A-95/32741: příklad 5) (22 mmol), 16,41 g 1-(1,1—dimethy lethy l)esteru kyseliny N,N-bís[2-[bis[2-( 1,1-dimethy lethoxy )-2~oxoethy l]amino]ethyl]-L-glutamové (připravenému podle popisu ve WO-A-95/32741: příklad 15) (22 mmol) a 3,91 g diethylkyanofosfonátu (24 mmol) v 300 ml DMF při 0 °C. Po 1,5 h při 0 °C a 18 h při pokojové teplotě se reakční směs odpaří a zbytek se rozpustí v EtOAc. Roztok se promyje nasyceným roztokem NaHCOs a H2O, suší se Na2SO4 a odpaří. Surový materiál se čistí bleskovou chromatografií za poskytnutí požadovaného produktu (20,67 g; 18,2 mmol).
Výtěžek: 83 % [a]M„ =-6,75 (c 2,0, CHCI,)
Elementární analýza % vypočteno:
% nalezeno:
C Η N
65,69 9,60 4,94
66,54 9,95 4,99
TLC: Stacionární fáze: deska silikagel 60F 254 Merck Eluent: 1 : 1 n-hexan/EtOAc Rf= 0,09
Detekce: Ce(SO4)2.4H2O (0,18 %) a (NH4)6Mo7O24.4H2O (3,83 %) v 10% H2SO4 Spektra ‘H-NMR, ‘ C-NMR, IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
B) Kyselina [3β($),5β, 12a]-3-[[4~[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]-4-karboxy-l-oxobutyl]amino]-12-hydroxycholan-24-ová
Sloučenina připravená v kroku A) (19,72 g; 17,4 mmol) se rozpustí ve 105 ml CF3CO2H při pokojové teplotě. Po 26 h se roztok odpaří a zbytek se smísí s H2O; pevná látka se odfiltruje, promyje H2O a částečně suší ve vakuu. Získaný meziprodukt se suspenduje v H2O a rozpustí s 1 M NaOH do pH 13. Po 5 h při pokojové teplotě se do roztoku přikapává 0,5 M HCI až do pH 1,4. Po 15 h při pokojové teplotě se sraženina odfiltruje, promyje H2O a suší za získání surového materiálu, který se čistí chromatografií na pryskyřici Amberlite® XAD 1600 za získání požadovaného produktu (9,92 g; 11,8 mmol).
-28CZ 302195 B6
Výtěžek: 68 %
Teplota tání: 184 °C rozklad Komplexometrický titr: (0,1 M GdCl3): 99,3 % Titr kyselinou (0,1 N NaOH): 99,8 % [α]20λ (c 2,0; 1 M NaOH)
| X(nm) 589 | 578 | 546 | 436 | 405 | 365 |
| [a] + 23,61 | + 24,59 | + 27,90 | + 46,67 | + 55,61 | + 71,40 |
| Elementární analýza | C | H | N | ||
| % vypočteno: | 58,70 | 7,93 | 6,68 | ||
| % nalezeno: | 58,22 | 8,16 | 6,59 |
H2O 0,70 %
TLC: Stacionární fáze: deska silikagel 60F 254 Merck
Eluent: 5:4:2 CHCl3/MeOH/25% NH4OH Rf = 0,13
Detekce: Ce(SO4)2.4H2O (0,18 %) a(NH4)6Mo7O24.4H2O (3,83 %) v 10% H2SO4
Spektra 'H-NMR, t3C-NMR, IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
C) Gadoliniový komplex kyseliny [3p(S),5p,12a]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]^t-karboxy-l^oxobutyl]amino]-12-hydroxycholan-24-ové převedený na sůl s 1-deoxy-t-( methy lam ino)-D-gluc ito I em (1 : 3)
Sloučenina připravená v kroku B) (8,39 g; 10 mmol) se suspenduje v H2O (30 ml) a rozpustí se přidáním 1 M vodného roztoku megluminu (35,5 ml; 36,5 mmol) až do pH 6. V průběhu 1 h se přidá 1,025 M vodný roztok GdCl3 (9,85 ml; 10,1 mmol) při udržování pH 6 přidáváním 1 M vodného roztoku megluminu (19,3 ml; 19,3 mmol). Roztok se nanofiltruje a pH se nastaví na
7,0 1 M vodným roztokem megluminu. Po odpaření a usušení se získá požadovaný produkt (8,57 g; 5,4 mmol).
Výtěžek: 54 %
Teplota tání: 150 až 166 °C (170 °C rozklad)
| Elementární analýza | C | H | N | Gd |
| ao % vypočteno | 47,17 | 7,28 | 6,21 | 9,96 |
| % nalezeno | 43,40 | Λ31 | 5,68 | 9,31 |
| H2O 7,14% |
Spektra IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
D) Analogicky se sloučeninou připravenou v kroku C) se připraví gadoliniový komplex kyseliny [3B(S),5B,12a]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]-4-karboxy-loxobutyl]amino]-12-hydroxycholan-24~ové převedený na sodnou sůl (1 : 3)
Sloučenina připravená v kroku B) (26,92 g; 32,08 mmol) se suspenduje v H2O (100 ml) a roz40 pustí přidáním 2 M NaOH (56 mmol); 112 mmol) do pH 6. Přidá se 0,512 M vodný roztok GdCl3 (58,2 ml; 29,77 mmol) v průběhu 3 h při udržování pH 6 přidáním 2 M NaOH (28,95 ml;
57,9 mmol). pH roztoku se nastaví na 6,7 2 M NaOH (4 ml; 8 mmol) a roztok se nanofiltruje. Po lyofilizaci se získá požadovaný produkt (29,86 g; 28,2 mmol).
Výtěžek: 88 %
Teplota tání: >300 °C
| Elementární analýza | C | H | N | Gd | Na |
| % vypočteno | 46,49 | 5,71 | 5,29 | 14,85 | 6,51 |
| % nalezeno | 43,98 | 6,34 | 4,92 | 13,86 | 6,16 |
-29CZ 302195 B6
H2O 4,63 %
Spektra IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
Příklad 5
Alternativní způsob výroby kyseliny [3p(S),5p,12a]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino] ethyl]amino]—4-karboxy-l-oxobutyl]amino]-l2-hydroxycholan_24~ové podle schématu 3 io A) 2-methyl~1-fenylmethyl)d i ester kyseliny (S)-5-oxo-l,2-pyrrolídindikarboxyIové
7,1 g CH31 (50 mmol) se přidá k roztoku 6,58 g 1-(fenylmethyl)esteru kyseliny (S)-5-oxo-I,2pyrrolidindikarboxytové (25 mmol) a Ν,Ν-dtisopropy lethy laminu (3,55 g; 27,5 mmol) v CH2CI2 (33 ml) a reakční směs se vaří pod zpětným chladičem 6,5 h. Po ochlazení na teplotu místnosti a zředění CH2C12 (50 ml) se reakční směs promyje H2O, 2% vodným roztokem Na2CO3, 0,2 M HCI a H2O. Po usušení nad Na2SO4 a odpaření se získá požadovaný produkt (6,8 g; 24,5 mmol). Výtěžek: 98 %
Stanovení HPLC: 98,5 % (% plochy)
Stacionární fáze: Lichrosorb RP-Select B 5 pm; 250 x 4 mm Merck KGaA
Teplota: 45 °C
Mobilní fáze: gradientova eluce;
A = 0,017 M H3PO4 ve vodě B = CH3CN
| Gradient: | min | % A | %B |
| 0 | 80 | 20 | |
| 15 | 80 | 20 | |
| 35 | 40 | 60 |
Průtok: 1 ml min
Detekce (UV):210nm [a]\(c2;CHCI3)
Á(nm) 589 578 546 [a] - 42,97 -44,79 -50,09
Elementární analýza C H % vypočteno: 60,64 5,45 % nalezeno: 60,94 5,54
365
-100,43
N
5,05
5,00
Spektra ’Η-NMR, l3C-NMR, IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
B) Methylester kyseliny [3p(S),5p,l2p]-3-[[5-methoxy-l,5-dioxo-4-[[(fenyImethoxy)karbonyl]amino]pentyl]amino]-12-hydroxycholan-24-ové
8,92 g methylesteru kyseliny (3p,5p,12a)-3-amino-12-hydroxycholan-24~ové (připraveného analogicky s derivátem kyseliny cholové popsaným ve WO-A-95/32741; příklad 5) (22 mmol) se přidá k roztoku sloučeniny A) (6,1 g; 22 mmol) v dioxanu (55 ml) a získaná směs se zahřívá na 50 °C 24 h, potom na 105 °C 29 h. Roztok se odpaří za sníženého tlaku a zbytek se čistí bles45 kovou chromatografií (gradientová eluce směsí EtOAc/n-hexan) s následnou krystalizaci se směsí 1 : 1 EtOAc/n-hexan za získání požadovaného produktu (11,2 g; 16,4 mmol).
Výtěžek: 75 %
Teplota tání: 140 °C
Stanovení HPLC: 99,2 % (% plochy)
-30CZ 302195 B6
Stacionární fáze: kolona Lichrosorb RP-Select B 5 gm; 250 x 4 mm Merck KGaA Teplota: 45 °C
Mobilní fáze: gradientova eluce;
A = 0,017 M H3PO4 ve vodě
ΙΟ
| B = CH3CN | |||
| Gradient: min | %A | %B | |
| 0 | 65 | 35 | |
| 25 | 15 | 85 | |
| 30 | 15 | 85 | |
| Průtok: 1 ml min-1 | |||
| Detekce (LTV): 210 nm | |||
| [α]20λ (c 2,01; CHC13) | |||
| X(nm) 589 578 546 | 365 | ||
| [a] +24,14 +25,13 | +28,51 | +73,81 | |
| Elementární analýza | C | H | N |
| % vypočteno: | 68,70 | 8,43 | 4,11 |
| % nalezeno: | 69,36 | 8,72 | 4,13 |
TLC: Stacionární fáze: deska silikagel 60F 254 Merck
Eluent: EtOAc
Detekce: Ce(SO4)2.4H2O (0,2 %) a (NH4)6Mo7O24.4H2O (3,8 %) v 10% H2SO4 Rf-0,ll
Spektra ’Η-NMR, 1 * * * * * * * * * * * 13 * * * * * *C-NMR, IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
C) Methylester kyseliny [3p(S),5p,12p]-3-[[4-[bis[2-[bis[2-(l,l-dimethylethoxy)-2-oxo25 ethy I jam ino]ethyl]amino]-5-methoxy-l,5-dioxopentyl]amino]-12-hydroxycholan-24-ové g 5% Pd/C se přidá k roztoku sloučeniny B) (10,4 g; 15,3 mmol) v MeOH (100 ml); suspenze se míchá 3,5 h v atmosféře vodíku (absorbovaný H2: 348 ml; 15,5 mmol) při pokojové teplotě. Po filtraci pres filtr Millipore® FH (0,45 gm) se roztok odpaří za sníženého tlaku za poskytnutí zbytku, který se rozpustí v CH3CN (60 mí). Přidá se 2 M vodný fosfátový pufr pH 8 (60 ml), potom roztok 1,1 -dimethylethylesteru N-(2-bromethy 1)-Ν-[2-( 1,1 -dimethylethoxy )-2-oxoethyljglycinu (připraveného podle postupu popsaného ve WO-A-95/32741: příklad 15) (11,86 g;
33,7 mmol) v CH3CN (15 ml) po kapkách během 10 min při teplotě místnosti. Směs se míchá
h. Po separaci se organická fáze odpaří za sníženého tlaku a zbytek se rozpustí v AcOEt (200 ml). Roztok se promyje H2O, suší (Na2SO4) a odpaří. Surový materiál se čistí bleskovou chromatografíí (gradientová eluce směsí EtOAc/n-hexan) za získání požadovaného produktu (11,36 g; 10,4 mmol).
Výtěžek: 68 %
Teplota tání: 55 až 58 °C
Stanovení HPLC: 100 % (% plochy) [a]\(c 2,01;CHCl3) λ(ηιη) 589 578 546 [a] - 6,97- 7,41- 8,61 Elementární analýza C H % vypočteno: 64,93 9,42 % nalezenu. 65,06 9,36
365
32,89
N
5,13
5,11
TLC: Stacionární fáze: deska silikagel 60F 254 Merck
-31 CZ 302195 B6
Eluent: EtOAc
Detekce: Ce(SO4)2.4H2O(0,2 %) a (NH4)ftMo7O24.4H2O (3,8 %) v 10% H2SO4 Rr = 0,45 Spektra 'H-NMR, l’C-NMR, IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
D) Kyselina [3p(S),5p, 12p]-3-[4-[bis[2-fbis(karboxymethyl)amino]ethyI]amino]—4-karboxyI -oxobuty IJamino] -12-hydroxycholan-24—ová
Roztok sloučeniny C) (8,5 g; 7,8 mmol) vdioxanu (50 ml) se smíchá s 2 M vodným roztokem LiOH (117 ml; 234 mmol). Získaná směs se míchá pri teplotě místnosti 72 h, potom se okyselí na pH 6 pomalým přidáváním 37% HCl. Roztok se zakoncentruje na 50 g odpařením za sníženého tlaku a zředěním H2O (40 ml). Roztok se okyselí na pH 2,5 přidáním 37 % HCl, zahřeje se na 50 až 55 °C a za silného míchání se velmi pomalu okyselí na pH 1,3 2 N HCl. Po 5 min se heterogenní směs nechá pomalu ochladit na teplotu místnosti za míchání po dobu 15 h. Sraženina se zfíltruje, promyje H2O a suší za získání požadovaného produktu (5,92 g; 7 mmol).
Výtěžek: 90 %
Teplota tání: 180 až 198 °C
Stanovení HPLC: 99,9 % (% plochy)
Stacionární fáze: kolona Zorbax ECLIPSE XDB-C8 3,5 pm; 150 x 4,6 mm Rockland Technologies, Inc.;
Teplota: 40 °C
Mobilní fáze: gradientová eluce;
A = 0,017 M H3PO4, 0,3 mM EDTA ve vodě;
Gradient:
| B = CHjCN | ||
| min | % A | %B |
| 0 | 85 | 15 |
| 40 | 65 | 35 |
| 50 | 65 | 35 |
Průtok: 1,5 ml min
Detekce: (UV): 210 nm
Titr kyseliny (0,1 N NaOH): 99% [α]2θλ (c 2,04; 1 N NaOH)
| λ(ηηη) 589 578 546 | 436 405 | 365 | ||
| [a] +24,80 +25,83 | +29,22 | +49,02 | +58,43 | +75,59 |
| Elementární analýza | C | H | N | Cl, Li |
| % vypočteno: | 58,70 | 7,93 | 6,68 | |
| % nalezeno: | 57,90 | 7,97 | 6,57 | <0,1 |
H2O 0,95
Spektra 'H-NMR, nC-NMR, IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
Příklad 6
Gadoliniový komplex kyseliny [3β,5β,7α,12α]-3-[ [[[[bis[2~[bis( karboxy methy l)amino]ethyl]amino]acetyl]amino]acetyl]amino]-7,12-dihydroxycholan-24—ové převedený na sůl s 1-deoxy45 l-(methylamino)-D-glucÍtolem (1 : 2)
- 32 CZ 302195 B6
A) N-[[Bis[2-[bis[2-(lJ-dimethylethoxy-2-oxoethyl]-arnino]ethyl]amino]acetyl]glycin
6,5 g glycylglycinu (49,3 mmol) se suspenduje ve 100 ml směsi 1 : 1 H2O/EtOH a rozpustí se při pH 10 přidáním 10 M NaOH (4,8 ml). Do roztoku se přikapává v průběhu 2h roztok 1,Ιό imethylethylesteru N-(2-bromethyl}-N[2-( 1, 1-dimethy lethoxy )-2-oxoethyl]glycinu (42 g;
110,9 mmol) ve 40 ml EtOH pri udržování pH 10,5 10 M NaOH (5,8 mmol). Roztok se rychle změní na emulzi, která se rozpustí po 2,5 h přidáním 10 M NaOH. Po 22 h se odpaří rozpoušio tědlo, směs se zředí vodou a extrahuje CH2C12. Organická fáze se promyje H2O, suší a odpaří za získání zbytku, který se čistí bleskovou chromatografií. Zbytek se rozpustí ve vodě, pH se nastaví na 4,5 přidáním 1 M HCI a roztok se extrahuje chloroformem. Organická fáze se promyje H2O, suší a odpaří za získání 13 g požadovaného produktu (19,3 mmol).
Výtěžek: 39 %
Elementární analýza C Η N % vypočteno: 56,95 8,66 8,30 % nalezeno: 56,67 8,68 8,30
TLC: Stacionární fáze: deska silikagel 60F 254 Merck Eluent: 6:3:1 CHCl3/MeOH/25% NH4OH Rť= 0,65
Detekce: 1% KMnO4 v 1 M NaOH
Spektra 1 H-NMR, 13C-NMR, IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
B) Methylester kyseliny (3β,5β,7α, 12ct]—3—[[[[[bis[2—[bis[2—(1, Ϊ-dimethylethoxy)-2-oxoethyl]amino]ethyl]amino]acetyl]amino]]acetyl]amino]-7,12-dihydroxycholan-24—ové
2,8 ml TEA (20,2 mmol) se po kapkách přidá v průběhu 5 min k roztoku obsahujícímu 13,6 g sloučeniny připravené v kroku A) (20,2 mmol), 8,52 g methylesteru kyseliny (3β,5β7α,12α}-3_ amino-7,12-dihydrocholan_24-ové (20,2 mmol) a DEPC (3,4 ml; 22,2 mmol) v DMF (290 ml) míchanému pri 0 °C. Po 1 h se reakční směs ohřeje na teplotu místnosti a roztok se míchá 6,5 h. Přidá se 0,3 ml DEPC (2 mmol) a roztok se míchá dalších 15,5 h. DMF se odpaří, zbytek se rozpustí v EtOAc, promyje vodným NaHCO3, potom vodou a nakonec se suší. Po čištění bleskovou chromatografií se získá 13,7 g požadovaného produktu (12,7 mmol).
Výtěžek: 63 % [a]“D = +5,26 (c l,5;CHCh) Elementární analýza C % vypočteno: 63,48 % nalezeno: 63,22
Η N
9,25 6,49
9,40 6,40
Spektra Έ-ΝΜΚ, t-NMR, ÍR a MS jsou v souiadu s uvedenou strukturou.
- jj CZ 302195 B6
C) Kyselina (3β,5β,7α, 12a]-3-[[[[[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyI]amino]acetyl]amino]]acetyl]amino]-7,12-dihydroxycholan-24-ová
12,85 g sloučeniny připravené v kroku B) (12 mmol) se rozpustí v TFA (210 ml) za míchání 5 5/0 °C. Po 16 h se TFA odpaří za poskytnutí zbytku, který se rozpustí v 90 ml 0,8 M NaOH při pH 13 a míchá se při pokojové teplotě 15 h. Roztok se zakoncentruje na 50 ml, přikapává se do
105 ml 0,6 M HCI a míchá se 2 h. Pevná látka se odfiltruje, promyje 0,1 HCI a suší za získání surového materiálu, který se chromatograficky čistí. Frakce obsahující požadovanou sloučeninu ve formě soli se odpaří za získání zbytku, který se rozpustí ve vodě a přikapává do 1 M HCI, při io udržování pH 1,45. Sraženina se zfiltruje, promyje 0,1 M HCI a suší za získání 2,6 g požadovaného produktu (3,1 mmol).
Výtěžek: 26 %
Teplota tání: 120 až 125 °C
Stanovení HPLC: 98 % (% plochy) í s Spektra 'H-NMR, l3C-NMR, IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
D) Gadoliniový komplex kyseliny ^^,7a,12a]-3-([[[[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]acetyl]amino]acetyl]amino3-7,12-di-hydroxycholan-24-ové převedený na sůl s l-deoxy-l-(methylamino)-D-glucitolem (1 : 2)
2,59 g sloučeniny připravené v kroku C) (3,08 mmol) se suspenduje ve vodě (20 ml) a rozpustí přidáním 1 M vodného roztoku megluminu (3,08 ml; 3,08 mmol) do pH 5. Do směsi se přidá Gd2O3 (0,501 g; 2,77 mmol) a směs se zahřívá na 50 °C. Po 1 h se přidá IM meglumin (2,8 ml; 2,8 mmol) pro rozpuštění sraženiny. Po 24 h se reakční směs zfiltruje a pH se nastaví na 6,8 1 M vodným megluminem (0,4 ml). Po odpaření a usušení se získá 4,2 g (3,00 mmol) požadovaného produktu
Výtěžek: 99 %
Teplota tání: 209 až 213 °C rozklad Stanovení HPLC: 99,7 % (% plochy) Volný ligand: < 0,1 % (0,001 GdCb)
Elementární analýza C % vypočteno: 46,84 % nalezeno: 44,01
H3O4,95
Η N Gd
6,99 7,08 11,36
7,35 6,68 10,39
Spektra IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
Příklad 7
Gadoliniový komplex kyseliny ^(S)^]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]-4-karboxy-l-oxobutyl](karboxymethyl)amino]cholan-24-ové převedené na sůl s 1deoxy-l-(inethylamino)-D-glucitolem (1 :4)
-34CZ 302195 B6
A) Methylester kyseliny ^,5p]-3-[[2-0,l-<Hmethylethoxy)-2-oxoethyl]amino]cholan-24~ové
40,0 g methylesteru kyseliny (3p,5p)-3-aminocholan-24-ové (připraveného jako v příkladu 1 výše) (103 mmol) se suspenduje v DMF (1,0 I) při teplotě místnosti pod dusíkem. Přidá se triethylamin (13,0 g; 129 mmol) a potom roztok 1,1-dimethytesteru kyseliny bromooctové (24,0 g; 123 mmol) v DMF (30 ml), který se přikapává do reakční směsi během 1 h až do rozpuštění. Po 3 dnech se směs zakoncentruje a zředí 4% vodným roztokem NaHCO3. Získaná suspenze se zfilio truje, sraženina se promyje H2O a suší za získání 33,7 g požadovaného produktu (66,9 mmol). Výtěžek: 65 %
Teplota tání: 62 až 64 °C [a]20D = +23,55 (c 1,96, MeOH)
| Elementární analýza | C | H | N |
| % vypočteno: | 73,91 | 10,60 | 2,78 |
| % nalezeno: | 74,67 | 10,85 | 2,78 |
| H2O<0,l |
TLC: Stacionární fáze: deska silikagel 60F 254 Merck Eluent: směs 7 : 3 n-hexan/EtOAc Rf = 0,31
Spektra 'H-NMR, 13C-NMR, IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
B) Methylester kyseliny [3p(S),5p]-3-[[4-[bis[-2-[bis[2-(l,l-ílimethylethoxy)-2-oxoethyl]aminojethy l]amino]-541,1 -dimethy lethoxy}-1,5-dioxopenty l][2-( 1,1 -dimethylethoxy)-2oxoethy I] am i nojcho I an-24-ové
Diisopropy lethy lamin (19,5 g; 151 mmol) se po kapkách přidá v průběhu 20 min do roztoku sloučeniny A) (33,0 g; 65,5 mmol), l-(l,2-ditnethy lethy l)esteru kyseliny N,N-bis[2-[bis[2(1 .l-dimethy lethoxy )-2-oxoethyl Jarní no]ethyl]-L-glutamové (připraveného podle popisu ve WO-A-95/32741: příklad 15) (53,8 g; 72,1 mmol) a (benzotriazol-l-yloxy)tris(dimethylan30 amino)fosfoniumhexafluorfosfátu (BOP) (40,6 g; 91,8 mmol) v DMF (400 ml), míchanému při pokojové teplotě pod dusíkem. Po 2 dnech se reakční směs zakoncentruje a převede do EtOAc. Roztok se promyje H2O, suší (Na2SO4) a odpaří. Surový materiál se dvakrát čistí bleskovou chromatografií za získání 38,7 g požadovaného produktu (31,4 mmol).
Výtěžek: 48 %.
[a]20D - -54,50 (c 2,51, CHCI3)
TLC: Stacionární fáze: deska silikagel 60F 254 Merck Eluent: směs 7 : 3 n-hexan/EtOAc Rf= 0,22
Spektra 'H-NMR, 13C-NMR, IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
C) Kyselina [3p(S),5pJ-3-[[4-[b!s[2-[b!s(karboxymethyl)aminn]ethyl]amino]-4-karboxy-Ioxobutyl](karboxymethyl)aminolcholan-24—ová
-35CZ 302195 B6
Do roztoku sloučeniny B) (38,7 g; 31,4 mmol) v EtOH (350 ml), míchaného při pokojové teplotě se po kapkách přidá v průběhu 1 h 500 ml 2 M roztoku LiOH. Po 16 h se reakční směs zakoncentruje na 500 ml a znovu se přidá 2 M roztok LiOH (350 ml) při zahřívání na 50 °C. Po 24 h se reakční směs ochladí na teplotu místnosti a přikapává se do 320 ml 6 M HCI, přičemž směs se důkladně míchá při 5 °C. pH získané suspenze se upraví na 1,0 55 ml 2 M NaOH. Roztok se zfiltruje, promyje 0,1 M HCI a suší. Surový materiál se suspenduje v H2O a rozpustí přidáním 1 M NaOH, a potom se bazický roztok přikapává do 0,5 M roztoku HCI. Sraženina se zfiltruje, promyje 0,05 M HCI, H2O a suší za poskytnutí 23,5 g požadovaného produktu (26,7 mmol).
Výtěžek: 85 %
Teplota tání: 178 až 182 °C [α]405,0 = +24,10 (c 1,49, 1 M NaOH)
Stanovení HPLC: 100 % (% plochy)
Stacionární fáze: kolona Hypurity Elitě C-18 5 pm; 250 x 4,6 mm
Teplota: 40 °C
Mobilní fáze: gradientová eluce;
A = 0,01 M KH2PO4, 0,3 mM EDTA ve vodě
| B = CH3CN | ||
| Gradient: min | % A | %B |
| 0 | 95 | 5 |
| 40 | 65 | 35 |
| 50 | 65 | 35 |
| Průtok: 1 ml min 1 |
Detekce (UV): 210 nm
| Elementární analýza C | H | N | Na | Cl | |
| % vypočteno: | 58,62 | 7,78 | 6,36 | ||
| % nalezeno: | 57,71 h2o<o,i | 8,07 | 6,20 | 0,13 | 0,55 |
Spektra ‘H-NMR, 13C-NMR, IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
D) Gadoliniový komplex kyseliny [3p(S),5p]~3-[[4-[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]-4_karboxy-l-oxobutyl](karboxymethyl)amino]cholan-24-ové převedený na sůl s l-deoxy-l-(methylamino)-D-glucitolem (1:4)
Suspenze sloučeniny připravené v kroku C) (12,9 g; 14,6 mmol) v H2O (100 ml) se smísí s 1 M vodným roztokem meglumin (72,0 ml; 72,0 mmol) při pokojové teplotě za získání čirého roztoku s pH 6,2, Po kapkách se přidá 0,393 M vodný roztok GdCI3 (37,2 ml; 14,6 mmol) při udržování pH 6,2 přidáváním 1 M megluminu (30,0 ml; 30,0 mmol) pomocí pH-statu. Na konci přidávání se reakční směs filtruje přes papír a potom přes membránu Millipore® (HAWP 0,45 pm), nanofiltruje, upraví na pH 7,0 přidáním 1 M megluminu (0,20 ml; 0,20 mmol) a odpaří. Pevná látka se suší za získání 24,0 g požadovaného produktu (13,2 mmol).
Výtěžek: 91 %
Teplota tání: 90 až 92 °C
Stanovení HPLC: 100 % (% plochy)
Stacionární fáze: kolona Lichrosfer 100 RP-8,5 pm; Merck KGAa 250 x 4 mm
Teplota: 40 °C
Mobilní fáze: isokratická eluce předem smíchanou mobilní fází: 1 g n-oktylaminu se přidá k 400 ml acetonitrilu a 600 ml vody. Roztok se pufruje na pH 6 H3PO4
-36 CZ 302195 B6
Průtok: 1 ml min Detekce (UV): 210 nm
| Elementární analýza % vypočteno: | C 46,96 | H 7,38 | N 6,17 | Gd 8,66 | Na, Cl |
| 5 % nalezeno: | 44,27 | 7,59 | 5,76 | 8,21 | <0,1 |
H2O 6,61
Spektra IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
Příklad 8
Gadoliniový komplex kyseliny [3p(R),5p,12a]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]-4-karboxy-l-oxobutyl]amino]-12-hydroxycholan-24-ové převedený na sodnou sůl (1:3)
Podle reakčního schématu 3 a experimentálního postupu uvedeného v příkladu 5 byl esterifikován l-(fenylmethyl)ester kyseliny (R)-5-oxo-l ,2-pyrrolidindíkarboxylové (komerčně dostupný produkt) methyIjodidem v přítomnosti Ν,Ν-diisopropylethylaminu a takto získaný (R)methylester byl ponechán reagovat s methylesterem kyseliny (3p,5p,12a)-3-amino-12-hydroxycholan-24—ové (připraveným analogicky jako derivát kyseliny cho lové popsaný ve WOA 95/32741: příklad 5) za získání methylesteru kyseliny [3β(Ρ),5β,12α]-3_[[4—[bis[2-[bis[2(1,1 -d i methy lethoxy)-2-oxoethy l]amino]ethy I]amino]-5-methoxy-1,5-dioxopenty l]amino]25 12-hydroxycholan-24—ové. Po odstranění (H2/Pd) ochranné skupiny Cbz a po alkylaci 1,Ιό i methy lesterem N-(2-bromethyl)-N-[2-( 1,1 -dimethylethoxy)-2-oxoethyl]-glycinu (vyrobeným způsobem popsaným ve WO-A-95/32741: příklad 15) v pufru CH3CN/fosfát pH 8, byl získán hexaester, který byl převeden (vodný LiOH/dioxan) na příbuznou hexakyselinu. Tato látka byla převedena na komplex způsobem popsaným v příkladu 4, bod D) za získání požadovaného produktu s celkovým výtěžkem 44 %.
Teplota tání: > 300 °C
| Elementární analýza | C | H | N | Gd | Na |
| % vypočteno: | 46,49 | 5,71 | 5,29 | 14,85 | 6,51 |
| % nalezeno: | 44,02 | 6,13 | 5,10 | 14,09 | 6,17 |
H2O 4,50 %
Spektra IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
-37 CZ 302195 B6
Příklad 9
Gadoliniový komplex kyseliny [3p(RS),5p,12a]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]-4-karboxy-l-oxobutyl]amino]-12-hydroxycholan-24-ové převedený na sodnou sůl (I : 3)
Sloučenina byla syntetizována z methylesteru kyseliny (3p,5p,12a]-3-amino-12-hydroxycholan-24- ové (vyrobené analogicky s derivátem kyseliny cholové popsaným ve WO-A95/32741: příklad 5) a l-( 1,1-dimethy lethyljesteru kyseliny N,N-bis[2-[bis[2-( 1,1 -dimethyIethoxy)-2-oxoethyl]amino]ethyl]-DL-gIutamové (připraveného z kyseliny DL glutamové, jak bylo popsáno ve WO-A-95/32741: příklad 15 pro L isomer) způsobem podrobně popsaným v příkladu 4. Produkt byl získán sól % celkovým výtěžkem.
Teplota tání: > 300 °C
Stanovení HPLC: 99 % (% plochy)
Stacionární fáze: kolona Zorbax ECL1PSE XDB-C8 3,5 gm;
150 x 4,6 mm Rockland Technologies, lne.
Teplota: 40 °C
Mobilní fáze: gradientova eluce;
A = 0,005 M KH2PO4, 0,005 M K2HPO4, 0,3 mM EDTA ve vodě B = CH3CN
Gradient: min % A % B
90 10
90 10
50 50
Průtok: 1,0 ml min Detekce (UV): 210 nm
Chromatografícká metoda ukazuje dva vrcholy v téměř stejných množstvích, které souvisí s diastereoisomery v důsledku stereochemického centra RS ve zbytku DTPA.
| Elementární analýza | C | H | N | Gd | Na |
| % vypočteno: | 46,49 | 5,71 | 5,29 | 14,85 | 6,51 |
| % nalezeno: | 43,98 | 6,34 | 4,98 | 13,86 | 6,16 |
H2O 4,63%
Spektra IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
- 38CZ 302195 B6
Příklad 10
Gadoliniový komplex kyseliny [3p(S),5p,12a]-3-[[4-[bis[2_[bis(karboxymethyl)amÍno]ethyl]amino]-4-karboxy-l-oxobuty l]amino]-12-hydroxycholan-24-ové převedený na sodnou sůl (1:3)
Methylester kyseliny (3a,5p,12a]-3-amino-12-hydroxycholan-24-ové
Methylester kyseliny (3a,5p,12aJ-3,12-dihydroxycholan-24—ové byl ponechán reagovat za podmínek Mitsunobuovy reakce (Mitsunobu, O., Synthesis 1981, 1 - 28; Denike, J. K, a další, Chem. Phys. Lipids, 1995, 77, 261 - 267) s trifenylfosfmem, diethylazodikarboxylátem a kyselinou mravenčí v THF za poskytnutí methylesteru kyseliny (33,5p,l2a)-3-fonnyloxy-12hydroxycholan-24-ové, Z této látky byly odstraněny ochranné skupiny (MeOH/HCl) za získání methylesteru kyseliny (3p,5p,12a)-3,12-dihydroxycholan-24-ové, se kterým byla prováděna řada reakcí popsaných ve WO-A 95/32741: příklad 5 pro derivát kyseliny cholové. Methylester kyseliny (3a,5p,12a)-3-amino-12-hydroxycholan-24-ové byl získán v celkovém výtěžku 32 %.
Teplota tání: 90 až 92 °C [<x]20d= +53,46 (c 1,3, CH3OH) Elementární analýza C H % vypočteno: 74,03 10,69 % nalezeno: 74,20 10,99
N
3,44
3,26
TLC: Stacionární fáze: deska silikagel 60F 254 Merck
Eluent: směs 9 : 1 : 0,15 CHCl3/CH3OH/25% NH4OH Rf = 0,21
Spektra 'H-NMR, 13C-NMR, IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
Podle schématu reakce 3 a experimentálního postupu uvedeného v příkladu 5 byla provedena reakce 2-methyl-l-(fenylmethyl)diesteru kyseliny (S)-5-oxo-l,2-pyrrolidindÍkarboxylové se sloučeninou A). Methylester kyseliny 3a(S),5p,12a]-3-[[4-[bis[2-[bis[2-(l ,1-dioxopentyl]amino]-12—hydroxycholan-24-ové získaný tímto způsobem byl hydrogenován (H2/Pd) pro odstranění ochranné skupiny Cbz. Následná alkylace s 1,1-dimethylethylesterem N-(2-bromethyl)-N-[2-( 1 ,l-dimethylethoxy)-2-oxoethyl]glycinu (připraveným způsobem popsaným ve WO-A-95/32741: příklad 15) v pufru CH3CN/fosfát pH 8, poskytla příslušný hexaester. Tato látka byla převedena (vodný LiOH/dioxan) na hexakyselinu, která byla převedena do komplexu způsobem popsaným v příkladu 4, bod D), za získání požadovaného produktu s 33% celkovým výtěžkem.
Teplota tání: > 300 °C
Stanovení HPLC: 100,0 % (% plochy) Elementární analýza C H % vypočteno: 46,49 5,71
N Gd Na
5,29 14,85 6,51
-39CZ 302195 B6 % nalezeno: 42,04 6,37 4,76 13,28 5,91
H2O 9,79 %
Spektra IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
Příklad 11
Gadoliniový komplex kyseliny [3p(S),5p,7a]-3-[[4—[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]-4—karboxy-1-oxobutyl] amí no]-7-hydroxycho lan—24-ové převedený na sodnou sůl io (1:3)
Tato sloučenina byla syntetizována z methylesteru kyseliny (3p,5p,7a]-3-amino-7-hydroxy15 cholan-24-ové (připraveného analogicky s derivátem kyseliny cholové popsaným ve WOA 95/32741: příklad 5) a l-(l,l-dimethylethyl)esteru kyseliny N,N-bis[2-[bis[2-( 1,1 -dimethylethoxy)-2-oxoethyl]ammo]-ethyl]-L-glutamové (připraveného jak bylo popsáno ve WO A95/328741: příklad 15) způsobem podrobně uvedeným v příkladu 4. Produkt byl získán s celkovým výtěžkem 89 %.
Teplota tání: > 300 °C
| Elementární analýza | C | H | N | Gd | Na |
| % vypočteno: | 46,49 | 5,71 | 5,29 | 14,85 | 6,51 |
| % nalezeno: | 43,88 | 6,50 | 4,91 | 13,62 | 6,04 |
H2O7,11 %
Spektra IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
Příklad 12
Kyselina [3p(RS),5p,7a,12a]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]-4-karboxy-1 -oxobutyl]amino]-7,12-dihydroxycholan-24~ová
3*
40CZ 302195 B6
Sloučenina byla syntetizována z methylesteru kyseliny (3p,5p,7ct,12a]-3-amino-7,12-dihydroxycholan—24—ové (vyrobeného jak bylo popsáno ve WO-A 95/32741: příklad 5) a l-(1,1dimethylethyl)esteru kyseliny N,N-bis[2-[bis[2-( 1 ,l-dimethylethoxy)-2-oxoethyl]amino]ethyl]-DL-glutamové (vyrobeného z kyseliny DL glutamové, jak bylo popsáno ve WO5 A95/32741: příklad 15 pro L isomer) způsobem podrobně popsaným v příkladu 4 pro přípravu sloučeniny B). Produkt byl získán s celkovým 65% výtěžkem.
Teplota tání: 224 °C rozklad
Stanovení HPLC: 97 % (% plochy)
Stacionární fáze: kolona Zorbax ECLIPSE XDB-C8 3,5 μιη; ίο 150 x 4,6 mm Rockland Technologies, lne.
Teplota: 40 °C
Mobilní fáze: gradientová eluce:
A - 0,017 Μ H3PO4, 0,3 mM EDTA ve vodě;
B = CH3CN
| 15 | Gradient: | min | % A | %B |
| 0 | 95 | 5 | ||
| 40 | 65 | 35 | ||
| 50 | 65 | 35 |
Průtok: 1,0 ml min
Detekce (LV): 210 nm
Chromatografícká metoda ukazuje dva vrcholy v téměř stejném množství, které souvisí s diastereo isomery v důsledku přítomnosti stereochem ického centra RS ve zbytku DTP A.
| Elementární analýza % vypočteno: | C 57,60 | H 7,78 | N 6,55 | Li, Cl |
| 25 % nalezeno: | 54,34 | 7,81 | 6,19 | <0,1 |
H2O 5,12%
Spektra IR, NMR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
Příklad 13
Gadoliniový komplex kyseliny [3a(S),5p,7a,12a]-3-[[[[5-[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyI]amino]-5-karboxypentyl]amino]karbonyl]oxy]-7,12-dihydroxychoIan-24-ové převedený na sodnou sůl (1 : 3)
A) Methylester kyseliny [3 p(S), 5 β,7α,12α]-3-[[[[6-{ 1,1 -dimethy lethoxy)—5—[bis[2—[b is[2(l, l-dirnethylethoxy)-2-oxoethyl]amino]ethyl]amino]-6-oxohexyl]amino]karbonyl]oxy40 7,12—d i hydroxye ho lan—24—ové
-41 CZ 302195 B6
Metoda 1: Roztok bis(trichlormethyl)karbonátu (2,9 g; 9,7 mmol) v bezvodém CH2CI2 (40 ml) byl prikapáván v atmosféře dusíku k roztoku methylesteru kyseliny (3a,5p,7a,12a)-3,7,12-trihydroxycholan-24-ové (komerční produkt) (10,0 g; 23,7 mmol) a pyridinu (2,3 ml; 28,4 mmol) v bezvodém CH2C12 (100 ml) chlazeném na 0 °C. Směs byla potom ponechána ohřát a po 1 h při pokojové teplotě byl roztok znovu ochlazen na 0°C, byl přidán N,N-diisopropyIethylamin (7,9 ml; 47,3 mmol) a potom byl přikapán roztok (1,1 -d i methy lethy I)esteru N2,N2-bis[2[bis[2(l,f-dimethylethoxy)-2-oxoethyl]amino]ethyl]-L-lysinu (Anelli, P. L. a další, Bioconjugate Chem. 1999, 10, 137) (17,6 g; 23,7 mmol) v bezvodém CH2CI2 (50 ml). Roztok byl míchán 3 h při pokojové teplotě, potom promyt H2O (2 x 100 ml), sušen nad Na2SO4 a odpařen. Surový produkt byl čištěn bleskovou chromatografií za získání požadovaného produktu (14,8 g; 12,4 mmol). Výtěžek: 52 %.
Spektra 'H-NMR, l3C-NMR, IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
Metoda 2: Roztok methylesteru kyseliny [3a,5^7a,12a]-3-[(chlorkarbonyl)oxy]-7,12-dihydroxycholan-24-ové (Janout, V, Lanier, M., Regen, S. L. J., Am. Chem.Soc. 1997, 119, 640) (6,1 g; 12,6 mmol) v bezvodém CH2CI2 (150 ml) byl ochlazen na 0 °C v atmosféře dusíku a byl přidán N,N-d i isopropy lethy lamin (4,8 ml; 27,6 mmol). Potom byl přikapán (1,1-dimethylethyl)ester Ν2, N 2-bi s[2-[ bi s [2( 1,1 -d i methyl ethoxy )-2-oxoethyl] amino] ethy l]-L-ly sinu (9,3 g;
12,6 mmol) v bezvodém CH2C12 (20 ml). Roztok byl míchán 3 h při pokojové teplotě, potom byl promyt H2O (2 x 100 ml), sušen nad Na2SO4 a odpařen. Surovina byla čištěna bleskovou chromatografií za získání požadovaného produktu (11,9 g; 9,9 mmol). Výtěžek: 79 %.
Spektra 'H-NMR, nC-NMR, IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
B) Ky se 1 i na [3 β( S), 5 β, 7α, 12a]-3-[ [ [[5-[b i s [2—[ b i s(karboxy methy l)am i no]ethy 1 ] am i no]-5karboxypentyl]amino]karbonyl]oxy]-7,12-d i hydroxy cholan-24-ová
M vodný roztok LiOH (141 ml) byl přikapán k roztoku sloučeniny A) (11,2 g; 9,4 mmol) v f,4—dioxanu (141 mmol) při teplotě místnosti. Po 104 h byl roztok zakoncentrován (150 ml) a byl přikapán k 2 M vodnému HCl (175 ml): konečné pH bylo 1,9. Sraženina byla odfiltrována, promyta H2O (5 x 50 ml) usušena ve vakuu. Surový produkt byl čištěn bleskovou chromatografií. Získaná pevná látka byla rozpuštěna v 10% vodném CH3CN a pH bylo upraveno na 1 přidáním koncentrované HCl, potom byl roztok nanesen na kolonu obsahující pryskyřici Amberlite* XAD 16.00 (250 ml) a eluován gradientem CH3CN/H2O. Frakce obsahující produkt byly odpařeny za získání požadovaného produktu (4,3 g; 4,8 mmol).
Výtěžek: 51 %.
Teplota tání: 184 až 191 °C
Vlhkost K. F.: 4,36 % [a]20r> = + 19,5 (c 1,1 M NaOH)
Stanovení HPLC: 97,3 % (% plochy)
Stacionární fáze: kolona Hypurity Elitě C 18,5 gm; 250 x 4,6 mm s materiálem Hypersil;
Teplota: 40 °C
Mobilní fáze: gradientova eluce
A = 0,01 M KH2PO4, 0,3 mM EDTA ve vodě B = CH3CN
| Gradient: | min | % A | %B |
| 0 | 95 | 5 | |
| 20 | 65 | 35 | |
| 50 | 65 | 35 | |
| Průtok: | 1 ml min | -1 |
Detekce (UV): 200 nm
-42CZ 302195 B6
Elementární analýza C Η N Cl % vypočteno: 57,45 7,85 6,23 % nalezeno: 55,22 7,91 6,08 <0,1
Spektra ’Η-NMR, 13C-NMR, IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
C) Gadoliniový komplex kyseliny [3p(S),5p,7a,12a]-3-[[[[5~[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]-5-karboxypentyl]amino]karbonyl]oxy-7,12-dihydroxycholan-24-ové převedené na sodnou sůl (1 : 3) io Sloučenina připravená v kroku B) (4,7 g; 5,2 mmol) byla suspendována v H2O (100 ml) a rozpuštěna přidáním l M NaOH (10 ml) až do dosažení pH 6,5. Byl přidán roztok GdCL (1,9 g; 5,2 mmol) v H2O (17 ml) při udržování pH 6,5 1 M NaOH (15,6 ml). Po 1 h při pokojové teplotě byl roztok nanesen na kolonu pryskyřice Arnberlite® XAD 16.00 (250 ml), která byla eluována gradientem CH3CN/H2O. Frakce obsahující produkt byly odpařeny za poskytnutí požadované látky (4,2 g; 3,8 mmol).
Výtěžek 72 %.
Teplota tání: > 300 °C Vlhkost K. F.: 9,49 % [a]wD = + 2.63(c 2, H2O)
Stanovení HPLC: 100 % (% plochy) (stejná metoda jako v kroku B)
| Elementární analýza | C | H | N | Gd | Na | Cl |
| % vypočteno: | 46,15 | 5,76 | 5,00 | 14,05 | 6,17 | |
| % nalezeno: | 41,80 | 6,28 | 4,54 | 12,64 | 5,73 | <0,1 |
Spektra lH-NMR, l3C_NMR, IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
Příklad 14
Manganový komplex kyseliny [3p(S),5p,12a]-3-[[4-[[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]3« (karboxymethyl)amino]-4_karboxy-l-oxobutyl]amino]-] 2~hydroxycholan-24-ové převedený na sodnou sůl (1 : 3)
Na'
A) Methylester kyseliny [3p(S),5p,12aj-3-[[4-amino-5-methoxy-l,5-dioxopentyl]amino]12-hydroxycholan-24-ové
3,4 g 5% Pd/C se přidá k roztoku methylesteru kyseliny [3P(S),5pJ2a]-3 -[[5-methoxy-l,5dioxo-4~[[(fenylmethoxy)karbonyl]amino]pentyl]amino]-l 2-hydroxycholan-24-ové (příklad 5, io produkt B) (34,14 g; 50 mmol) v MeOH (340 ml) Suspenze byla míchána při pokojové teplotě
-43 CZ 302195 Β6
3,5 h v atmosféře vodíku. Po filtraci přes filtr Millipore’0 FH (0,45 pm) byl roztok odpařen do sucha za získání požadovaného produktu (27,1 g; 49,3 mmol).
Výtěžek 98,6 %.
Úbytek hmotnosti (50 °C; vysoké vakuum): < 0,1 %
Elementární analýza % vypočteno:
% nalezeno:
C Η N
67,85 9,55 5,10
68,58 9,72 5,12 [α]2υρ = + 36,61 (c 2,01, CHCL)
Titr kyseliny (0,1 M HCI): 94,6 %
Spektra ‘H-NMR, i3C-NMR, IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
B) Methylester kyseliny [3p(S),5p,I2a]-3-[[4-[[2-[bis[2-(l,1-dimethylethoxy)-2-oxoethyl]amino]ethyl][2-( 1, 1-dimethy lethoxy)-2-oxoethyl]amtno]-5-methoxy-1,5-díoxopentyl]amino]-12-hyd roxy c ho lan-24-ové
Sloučenina připravená v kroku A) (16,0 g; 29,1 mmol) a 1,1-dimethylethylester N-(2-bromethyl)-N-[2-( 1,1 -dimethylethoxy)-2-oxoethyl]glycinu (13,3 g; 37,8 mmol) (připravený způsobem popsaným ve WO-A95/32741: přiklad 15) byly rozpuštěny v EtOAc (120 ml). Po přidáni 2 M fosfátového pufru pH 8 (120 ml) byla směs důkladně míchána 2 h, potom byla vodná fáze nahrazena čerstvým 2 M fosfátovým pufrem pH 8 (120 ml) a míchána dalších 70 h. Směs byla zahřáta na 40 °C 12 h, ochlazena na teplotu místnosti, oddělena a organická fáze byla odpařena za získání zbytku, který byl rozpuštěn v CH2CI2 (150 ml), promyt vodou (2 x 100 ml), sušen nad Na2SO4 a odpařen. Surový materiál byl čištěn bleskovou chromatografií za poskytnutí požadovaného produktu (12,3 g; 15,0 mmol).
Výtěžek: 52 %
Elementární analýza % vypočteno:
% nalezeno:
C Η N
65,90 9,46 5,12
65,99 9,72 5,03
TLC: Stacionární fáze: deska silikagel 60F 254 Merck Eluent: 1:1= EtOAc/n-hexan Rf= 0,40
Detekce: 1 % KMnO4 v 1 M NaOH
Spektra 'H-NMR, 13C-NMR, IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
C) Methylester kyseliny [3p(S),5p,12a]-3-[[4-[[2-[bis[2-(l,l-dimethylethoxy)-2-oxoethyI]amino]ethyl][2-( 1,1-dimethy lethoxy)-2-oxoethyl Jam i no]-5-methoxy-l ,5-dioxopentylJamino]12-hydroxycholan-24-ové
Terc-butylbromacetát (3,9 g; 20,1 mmol) přidáván k roztoku sloučeniny připravené v kroku B) (11,0 g; 13,4 mmoJ) a N,N-diisopropylethylaminu (3,5 ml; 20,1 mmol) vCH3CN. Směs byla míchána 24 h při pokojové teplotě a potom bylo přidáno větší množství Ν,Ν-diisopropylethylaminu (0,9 ml; 4,0 mmol) a terc-butylbromacetátu (0,8 g; 4,0 mmol). Směs byla míchána dalších 70 h, oddělena a organická fáze byla odpařena za poskytnutí zbytku, který byl rozpuštěn v CH2C12 (150 ml), promyt vodou (2 x 100 ml), sušen nad Na2SO4 a odpařen. Surový materiál byl čištěn bleskovou chromatografií za získání požadovaného produktu 10,7 g; 11,5 mmol).
Výtěžek: 85 %.
Elementární analýza % vypočteno:
% nalezeno:
C Η N
65,57 9,39 4,50
66,27 9,62 4,52
TLC: Stacionární fáze: deska silikagel 60F 254 Merck
-44CZ 302195 B6
Eluent: 1:1= EtOAc/n-hexan Rf = 0,46
Detekce: 1% KMnO4 v 1 M NaOH
Spektra 'H-NMR, l3C-NMR, IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
D) Kyselina [3p(S),5β, 12ot]-3-[[4-[[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl](karboxymethyl)amino]-4-karboxy-1 -oxobuty l]amino]-l 2~hydroxycholan-24-ová
M vodný roztok LiOH (120 ml) byl po kapkách přidán k roztoku sloučeniny připravené v kroku C) (9,2 g; 9,8 mmol) v 1,4-dioxanu (120 mt) při pokojové teplotě. Po 24 h byl roztok zakoncentrován (100 ml) a po kapkách byl přidán do 2 M vodné HCI (135 ml): konečné pH bylo 1,9. Sraženina byla odfiltrována, promyta H2O (5 x 50 ml) a sušena ve vakuu za získání požadovaného produktu (7,3 g; 9,6 mmol).
Výtěžek 98 %
Teplota tání: 163 až 168 °C
Vlhkost K.F.: 1,81 % [a]20D = + 29,03 (c 1,1 M NaOH)
Stanovení HPLC: 100 % (% plocha)
Stacionární fáze: kolona Zorbax Eclipse XDB-C8 150 x 4,6 mm s materiálem Rockland Technologies Inc.
Teplota: 40 °C
Mobilní fáze: gradientová eluce
A = 0,01 M KH2PO4, 0,01 M K2HPO4 0,3 mM EDTA ve vodě
B = CH3CN
Gradient: min
5
Průtok: 1 ml min 1 Detekce (UV): 200 nm Elementární analýza % vypočteno:
% nalezeno:
% A 93 93 60
C
60,23
58,60 %B
H
8,06
8,25
N
5,69
5,49
Li
Cl <0,1 <0,1
Spektra ’Η-NMR, 13C-NMR, IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
E) Komplex manganu s kyselinou |^(S)^,l2a]-3-([4-[[2-[bis(karboxymethyí)amino]ethyl](karboxymethyl)amino]-4-karboxy-l—oxobuty l]amino]-l 2-hydroxycholan-24-ovou převedený na sůl se sodíkem (1:3)
Sloučenina připravená v kroku D) (5,3 g; 7,2 mmol) byla suspendována v H2O (250 ml) a rozpuštěna přidáním 1 M NaOH (36 ml) až do dosažení pH 6,5, Byl přidán roztok MnCl2.4H2O (1,4 g; 7,2 mmol) v H2O (50 ml) při udržování pH 6,5 1 M NaOH (7,9 ml). Po 1 h při teplotě místnosti byl roztok odsolen nanofíltrací, potom odpařen za získání požadovaného produktu. Výtěžek: 98 %
Teplota tání: > 300 °C
Vlhkost K. F.: 13,54% [ct]20D = + 2,63 (c 2, HjO)
Test CE: 100 % (% plochy)
Kapilára: tavený křemen 0,72 m x 50 gm
-45CZ 302195 B6
Napětí: 30 kV
Pufr: 0,07 M borát, pH 9,3, 0,3 mM EDTA
Teplota: 25 °C
Čas ukončení:20 min
Detekce (UV): 200 nm
Nástřik: hydrodynamický (5 kPa, 4 s)
| Koncentrace vzorku: 1 mg ml Přístroj: Hewlett Packard 3D HPCE | |
| Kondicionování: t(min) | úkon |
| 2 | proplach H2O |
| 2 1 | proplach 0,1 M NaOH proplach H2O |
| 5 | proplach pufrem |
| Elem. analýza | C | H | N | Mn | Na | Cl |
| % vypočteno: | 51,87 | 6,35 | 4,90 | 6,41 | 8,05 | |
| % nalezeno: | 45,50 | 6,95 | 4,30 | 5,28 | 6,86 | <0, |
Spektra IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
Stejným způsobem byl připraven ze sloučeniny B) z příkladu 2 gadoliniový komplex kyseliny 20 Í33(S),5p]-3-[[4-f[2[[bis(karboxymethyl)amino]ethyl](karboxymethyl)amino|^-karboxy-]oxobutyl]amino]-12-oxocholan-24-ové.
Příklad 15
Komplex manganu s kyselinou [3a(S),5p,12a]-3-[[[[5-[[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl](karboxymethyl)amino]-5-karboxypentyl]amino]karbonyl]oxy]-1 2-hy droxy c ho lan-24-ovou převedený na sůl se sodíkem (1:3)
3*
Na*
A) Methy lester N2-[2-bis[2~( 1,1 -d imethy lethoxyý-2-oxoethy l]amino]ethyl]-N2~[2~( 1,1di methy lethoxy)-2-oxoetliyl]-N6-[( fenyl methoxy )karbonyl]-L-ly sinu
1,1 -dimethy lethy lester N-(2-bromethyl)-N~[2-(1,1-dimethyl ethoxy )-2-oxoethyl]glyc inu (25,6 g; 72,55 mmol) (připravený způsobem popsaným ve WO-A-95/32741: příklad 15) rozpuštěný v CH3CN (25 ml) byl po kapkách přidán k roztoku hydrochloridu methylesteru NĎ[(fenyl methoxy )karbonyl]-L-ly sinu (20 g; 60,46 mmol) a Ν,Ν-diisopropy lethy laminu (12,64 ml; 72,55 mmol) v CH3CN (250 ml), Reakční směs byla míchána při pokojové teplotě. Po 5 dnech byly k roztoku přidány další Ν,Ν-diisopropy lethy lamin (17,7 ml; 101,6 mmol) a terc-butylbromacetát (18,8 g; 13,5 ml; 101,6 mmol). Po 24 h bylo rozpouštědlo odpařeno a zbytek byl smíchán s Et2O (200 ml). Směs byla zfíltrována, roztok byl promyt 0,1 M HCI (2 x 100 ml), sušen
-46CZ 302195 B6 nad Na2SO4 a odpařen za sníženého tlaku. Surový materiál byl čištěn bleskovou chromatografií za získání požadovaného produktu (13,03 g; 19,2 mmol).
Výtěžek: 32 %.
Vlhkost K. F.: <0,1 % [a]“D =-22,47 (c 1,93, CHCla)
Elementární analýza CHN % vypočteno: 61,83 8,45 6,18 % nalezeno: 61,70 8,52 5,84
TLC: Stacionární fáze: deska sílikagel 60F 254 Merck ío Eluent: 3:7 = EtOAc/n-hexan Rf = 0,40
Detekce: Ce(SO4>2.4H2O (0,18 %) a (NH4)6Mo7O24.4H2O (3,83 %) v 10% H2SO4 Spektra 'H-NMR, *3C-NMR, IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
B) Methylester kyseliny (3a,5β,7α, 12a)-3-[(chlorkarbony l)oxy]-l 2-hydroxycholan-24-ové
Pozor: všechny operace musí byt prováděny v digestoři s dobrým odtahem
20% roztok fosgenu v toluenu (100 ml; 202,2 mmol) byl po kapkách přidán k roztoku methylesteru kyseliny (3a,5p,7a,12a)-3,12-dihydroxycholan-24-ové (14,7g; 36 mmol) v bezvodém
CH2CI2 (350 ml) ochlazeném na 0 °C v atmosféře dusíku. Roztok byl míchán 3 h při pokojové teplotě, potom odpařen (nutná opatrnost) za získání požadovaného produktu (15,2 g; 32,4 mmol). Výtěžek: 90 %
Spektra 'H-NMR, l3C-NMR, IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
C) Methylester kyseliny [3a(S),5p,12a]-3-[[[[5-[[2-[bis[2-(l,l-dimethylethoxy)-2-oxoethyl]amino]ethyl][2-( 1,1-dimethy lethoxy )-2-oxoethyl]amino]-6-methoxy-6—oxohexyl]amino]karbonyl]oxy]-12-hydroxycholan-24-ové
5% Pd/C (1,3 g) bylo přidáno k roztoku sloučeniny připravené v kroku A) (12,3 g; 18,1 mmol) v MeOH (120 ml) a suspenze byla míchána 3 h v atmosféře dusíku při pokojové teplotě. Po filtraci přes filtr Millipore® (FT 0,45 pm) byl roztok odpařen za sníženého tlaku. Surovina byla rozpuštěna v bezvodém CH2C12 (20 ml) a po kapkách přidána k roztoku sloučeniny připravené v kroku B) (8,7 g; 18,54 mmol) a Ν,Ν-diisopropylethylaminu (DIEA) (6,5 ml; 37,07 mmol) v bezvodém CH2C12 (200 ml) pri 0 °C a v atmosféře dusíku. Po 3 h byla reakční směs promyta H2O (2 x 100 ml), organická fáze byla oddělena, sušena nad Na2SO4 a odpařena za sníženého tlaku. Surový materiál byl čištěn bleskovou chromatografií za získání požadovaného produktu (8,6 g; 8,8 mmol).
Výtěžek: 49 %.
Vlhkost K. F.:<0,l %
Elementární analýza C H % vypočteno: 65,07 9,38 % nalezeno: 65,67 9,52
N
4,30
4,24
TLC: Stacionární fáze: deska sílikagel 60F 254 Merck Eluent: 3:7 = EtOAc/n-hexan Rf = 0,30
Detekce: Ce(SO4)2.4H2O (0,18 %) a (NH4)6Mo7O24.4H2O (3,83 %) v 10% H2SO4 Spektra 'H-NMR, 13C-NMR, IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
D) Kyselina [3a(S),5p,12a]-3-í[[[5-[[2-[bis(karboxymethyl)aminolethyll(karboxymethyl)amino]-5-karboxypentyl]amino]karbonyl]oxy]-12-hydroxycholan-24-ová
-47CZ 302195 B6
M LiOH (133 ml; 266 mmol) byl přidán k roztoku sloučeniny připravené v kroku C) (8,5 g; 10,64 mmol) v 1,4-dioxanu (130 ml). Získaný roztok byl míchán při pokojové teplotě 24 h a potom neutralizován na pH 7 přidáním 2 N HCI (120 ml). Roztok byl zakoncentrován odpařením za sníženého tlaku na polovinu objemu a velmi pomalu okyselen na pH 1,5 za důkladného míchání, za poskytnutí bílé sraženiny, která byla zfiltrována, promytá H?O (2 x 100 ml) a sušena, za získání požadovaného produktu 8,13 mmol).
Výtěžek: 76 %.
Teplota tání: 188,9°C
Vlhkost K. F.: 1,44% [a]20D = + 35,47 (c 2,01, 1 M NaOH)
Stanovení HPLC: 96,8 % (% plochy)
Stacionární fáze: kolona Zorbax Eclipse XDB-C8 150 x 4,6 mm
Rockland Technologies lne.
Teplota: 40 °C
Mobilní fáze: gradientová eluce
A = 0,017 Μ H5PO4 ve vodě B = CH3CN
| Gradient: min | % A | %B | |||
| 0 | 65 | 35 | |||
| 25 | 15 | 85 | |||
| 30 | 15 | 85 | |||
| Průtok: 1 ml min | 1 | ||||
| Detekce (UV);2l0nm | |||||
| Elementární analýza | C | H | N | Li | Cl |
| % vypočteno: | 59,91 | 8,12 | 5,37 | ||
| % nalezeno: | 58,44 | 8,04 | 5,03 | <0,1 | <0,1 |
Spektra 'H-NMR, nC-NMR, IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
E) Manganový komplex kyseliny [3a(S),5p,12a]-3-[[[[5-[[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl](karboxymethyl)amino]-5-karboxypentyl]amino]karbonyl]oxy]-12-hydroxycholan24-ové převedený na sodnou sůl (1 : 3)
Sloučenina připravená v kroku D) (5 g; 6,3 mmol) byla suspendována v H2O (50 ml) a rozpuštěna přidáním 1 M NaOH (18 ml; 18 mmol). Byl přidán 0,559 M vodný roztok MnCl2 (11,27 ml; 6,3 mmol) v průběhu 3 h při udržování pH 6,5 pomocí 1 M NaOH (7,8 ml). pH roztoku bylo upraveno na 6,8 1 M NaOH (0,9 ml; 0,9 mmol), roztok byl zfiltrován (HA 0,45 gm membrána Millipor®) a odsolen nanofiltrací. Roztok byl odpařen a sušen za získání požadovaného produktu (5,45 g; 6,05 mmol).
Výtěžek: 96 %
Teplota tání: > 300 °C
Vlhkost K. F.: 3,78 % [a]“D = + 2,74 (c 2, H,O)
Test CE: 100 % (% plochy)
Kapilára: tavený křemen 0,72 m x 50 gm
Napětí: 30 kV
Pufr: 0,07 M borát, pH 9,3, 0,3 mM EDTA
-48CZ 302195 B6
Teplota: 25 °C
Čas ukončení: 20 min
Detekce (UV):200 nm
Nástřik: hydrodynamický (5 kPa, 4 s)
Koncentrace vzorku: 1 mg ml-1 Přístroj: Hewlett Packard 3D HPCE
| Kondicionování: t(min) | úkon |
| 2 | proplach H2O |
| 2 1 | proplach 0,1 M NaOH proplach H2O |
| 5 | proplach pufrem |
| Elem. analýza | C | H | N | Mn | Na | Cl |
| % vypočteno: | 52,00 | 6,49 | 4,66 | 6,10 | 7,66 | |
| % nalezeno: | 49,54 | 7,17 | 4,44 | 5,65 | 7,58 | <0,1 |
Spektra IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
Příklad 16
Gadoliniový komplex N2-bis[2-[bis(karboxymethyl)amÍno]ethyl]-N-[(3p,5p,7a,l2a)-7,12dihydroxy-24-oxo-24[(2-sulfoethyI)amino]cholan-3-yl]_L-glutaminu převedený na sodnou sůl (1:3)
A) Fenylmethylester kyseliny [3f3(S),5p,7a,12a]-3-[[4-[bis[2-(l,1-dimethylethoxy)-2-oxoethyl]amino]ethyl]amino]-5-( 1 ,l-dimethylethoxy)-l ,5^dioxopentyl]amino]-7,12-dihydroxycholan-24-ové l-(U-dimethylethyl)ester kyseliny N?N-bis[2-[bis[2-(l,l-methylethoxy)-2-oxoethyl]amino]ethyI]-L-glutamové (Anelli, P. L. a další, Bioconjugate Chem. 1999, 10, 137) (37 g; 50 mmol), fenylmethylester kyseliny (3p,5p,7a,12a)-3-amino-7,12-dihydroxycholan-24-ové (Anelli, P. L., Lattuada, L., Uggeri, F., Synth. Commun, 1998, 28, 109) (31 g; 55 mmol) a diethylkyanofosfonát (komerční produkt) (9,6 g; 55 mmol; 9,2 ml) byly rozpuštěny v DMF (750 ml). Získaný roztok byl ochlazen na 0 °C a po kapkách byl přidán EhN (7,3 ml). Po 1 h při pokojové teplotě byl roztok odpařen, zbytek byl rozpuštěn v EtOAc (300 ml), promyt 5% vodným NaHCO3 (2 x 200 ml) a potom roztokem soli (2 x 200 ml). Organická fáze byla oddělena, sušena nad Na2SO4 a potom odpařena za sníženého tlaku. Surový materiál byl čištěn bleskovou chromatografií za získání požadovaného produktu (36 g; 29 mmol).
Výtěžek: 58 %
Vlhkost K. F.: 0,98%
-49CZ 302195 B6
Elementární analýza % vypočteno:
% nalezeno:
C Η N
65,64 9,21 4,57
66,31 9,20 4,51
TLC: Stacionární fáze: deska silikagel 60F 254 Merck
Eluent: 2:8 = EtOAc/n-hexan R, = 0,3
Detekce: AcOH/konc. H2SO4/p-anisaldehyd = 100 : 2 : I
Spektra ‘H-NMR, ' C NMR, IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
B) Triethy lamoniová sůl kyseliny [3p(S),5p,7a, 12cx]—3—[[4—[bis[2[bis[2—(1,1-dimethyIio ethoxy )-2-oxoethyl]amino]ethyl]amino]-5-( 1,1-dimethylethoxy)-1,5-dioxopentyl]amino]-7,12-díhydroxycholan-24~ové
5% Pd/C (3,6 g) bylo přidáno k roztoku sloučeniny připravené v kroku A) (36 g; 29,4 mmol) v EtOH (1,5 1) a suspenze byla míchána 3 h za sníženého tlaku pri pokojové teplotě. Po zfiltrová15 ní (přes filtr Millipore® FT 0,45 pm) byl roztok odpařen za sníženého tlaku. Surovina byla čištěna bleskovou chromatografií za získání požadovaného produktu (22 g; 18 mmol).
Výtěžek: 60 %
Teplota tání: 58 °C Vlhkost K. F.: 1,34%
| 20 Elementární analýza | C | H | N |
| % vypočteno: | 65,07 | 9,86 | 5,66 |
| % nalezeno: | 64,34 | 10,07 | 5,48 |
| TLC: Stacionární fáze: | deska silikagel 60F 254 Merck |
Eluent: 1 : 5 : 95 = Et3N/MeOH/CH3Cl2 Rf = 0,33 25 Detekce: AcOH/konc. H2SO4/p-anisaldehyd = 100 : 2 : 1
Spektra 'H-NMR, l3C-NMR, IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
C) N2-Bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethylj-N-[(3p,5p,7a, 12α)-7,12-dihydroxy-24-oxo24-[(2-sulfoethyl)amino]cholan-3-yl]-L-glutamin
Et3N (1,2 g; 12 mmol; 1,7 mmol) byl po kapkách přidán k roztoku sloučeniny B) (12,5 g; II mmol), kyseliny (2-aminoethansulfonové (komerční produkt) (1,5 g; 12 mmol) a diethylkyanofosfonátu (komerční produkt) (2,1 g; 12 mmol; 2 ml) v DMF (400 ml) pri 0 °C v atmosféře dusíku. Po 20 min byla reakční směs ponechána ohřát na teplotu místnosti a byla míchána 3 h. Roztok byl odpařen za sníženého tlaku, zbytek byl rozpuštěn v dioxanu (250 ml) a po kapkách byla přidána 0,5 M vodná H2SO4 (250 ml; 125 mmol). Získaná směs byla zahřívána na 90 °C 2 h. pH roztoku bylo upraveno od 1,4 do 7 2 N NaOH a rozpouštědlo bylo odpařeno za sníženého tlaku. Surový materiál byl Čištěn bleskovou chromatografií. Produkt byl rozpuštěn v H2O (250 ml) a 2 N HCI (12,5 ml) a odsolen elucí přes kolonu pryskyřice Amberlite XAD16,00 v gradientu (CH3CN/H2O za získání požadovaného produktu (1,5 g; 1,6 mmol).
Výtěžek: 14%
Teplota tání: >200 °C
Vlhkost K. F.: 5,87 %
Elementární analýza C H % vypočteno: 53,68 7,44 % nalezeno: 50,34 7,71
N
7,28
6,64
S
3,33
2,99
Spektra ]H-NMR, ,3C-NMR, IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
-50CZ 302195 B6
D) Gadoliniový komplex N2-bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyΙ]-Ν-[3β,5β,7α, 12a)-7,12dihydroxy-24-oxo-24_[(2-sulfoethyI)amino]cholan-3-yl]-L-glutaminu převedený na sodnou sul(1 : 3)
Produkt C) (880 mg; 0,915 mmol) byl rozpuštěn v H2O (50 ml) a po kapkách byl přidán 1 N
NaOH až do dosažení pH 6,8. Byl přidán Gd2O3 (165 mg; 0,46 mmol) a získaná suspenze byla zahřívána při 50 °C 6 h. Reakční směs byla zfíltrována na přístroji Millipore® (HA filtr 0,45 pm) a filtrát byl nanesen na kolonu slabé kationtové iontoměničové pryskyřice Dowex® CCR 3LB (Na+ forma, 20 ml). Eluát byl odpařen za sníženého tlaku a sušen za získání požadovaného prot o duktu (1,00 g; 0,75 mmol).
Výtěžek: 82 %.
Teplota tání: >250 °C Vlhkost K. F.: 13,95%
Stanovení HPLC: 100 % (% plochy) t5 Stacionární fáze: kolona Lichrospher 100 RP-8 5 pm; 250 x 4 mm, Merck KGaA
Teplota: 40 °C
Mobilní fáze: isokratická eluce předem smíchanou mobilní fází: 1 g n-oktylaminu se přidá do 300 ml acetonitrilu smíšeného se 700 ml vody. Roztok se pufruje na pH 6 pomocí H3PO4.
Průtok: 1 ml min-1
Detekce (UV): 200 nm
| Elementární analýza | C | H | N | S | Gd | Na |
| % vypočteno: | 43,78 | 5,54 | 5,92 | 2,71 | 13,30 | 5,83 |
| % nalezeno: | 36,82 | 6,04 | 5,11 | 2,18 | 10,64 | 5,35 |
Spektra IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
Stejným postupem byl připraven gadoliniový komplex N2-bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]-N-[(3p^)-24-oxo-24-[(2-suIfoethyI)amino]cholan-3-yl]-L“glutaminu,
Příklad 17
Gadoliniový komplex kyseliny [3a(S)^]-3-[2-[[5-[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]-5-karboxypentyl]amino]-2-oxoethoxy]cholan-24-ové převedený na sodnou sůl (1 : 3)
3‘
A) Methylester kyseliny (3a,5p)-3“(karboxymethoxy)cholan-24-ové
Triflát benzylglykolátu (Williams, M. A., Rapoport, H. J., Org. Chem. 1994, 59, 3616) (16,8 g; 40 56,3 mmol) byl v průběhu 15 min přidán k míchanému roztoku methylesteru kyseliny (3α,5β)3-hydroxychoían-24-ové (Dayai, B. a daiší, Steroids i98Í, 37, 239) (20 g; 51,2 mmoi) a N,Ndiisopropy Iethy lam inu (10 ml; 57,4 mmol) v bezvodém CH3CN (400 ml) pri -20 °C. Po 4 h při -51 CZ 302195 B6 °C byla směs ohřátá na pokojovou teplotu a míchána další 4 h. Rozpouštědlo bylo odpařeno a zbytek byl rozdělen mezi EtOAc (300 ml) a nasycený NaHCO3 (300 ml). Organická fáze byla sušena nad Na2SO4 a odpařena. Zbytek byl rozpuštěn v EtOH (200 ml), potom bylo přidáno 5% Pd/C (3 g) a směs byla míchána při pokojové teplotě 5 h v atmosféře vodíku. Po zfiltrování přes filtr Millipore® FH (0,45 pm) byl roztok odpařen a zbytek byl čištěn bleskovou chromatografií za získání požadovaného produktu (14,2 g; 31,7 mmol).
Výtěžek: 62 %.
Vlhkost K. F.: <0,1 Elementární analýza C H io % vypočteno: 72,28 9,89 % nalezeno: 71,97 9,81
Spektra 'H-NMR, l3C-NMR, IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
B) Kyselina [3a(S),5p]-3-[2~[[5-[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]-5-karboxy15 pentyljamino]-2-oxoethoxy ]cholan-24-ová (1,1 -dimethylethyl)ester N3,N2-bis[2-[bis[2-{ 1,1 -dimethyIethoxy)-2-oxoethyl]amino]ethy 1]-Llysinu (Anelli, P. L. a další, Bioconjugate Chem. 1999, 10, 137) (18,56 g; 25 mmol), sloučenina A) (11,2 g; 25 mmol) a diethylkyanofosfonát (komerční produkt) (4,9 g; 28 mmol) byly rozpuštěny v DMF (300 ml). Získaný roztok byl ochlazen na 0 °C a po kapkách bylo přidáno Et3N (4 ml). Po 6 h při pokojové teplotě byl roztok odpařen za sníženého tlaku, zbytek byl rozpuštěn v EtOAc (250 ml), promyt 5% vod. NaHCO3 (2 x 100 ml) a potom roztokem solí (2 x 100 ml). Organická fáze byla oddělena, sušena nad Na2SO4 a potom odpařena za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn v dioxanu (300 ml) a po kapkách byla přidána 0,5 M vod. H2SO4 (300 ml); 150 mmol). Získaná směs byla zahřívána na 90°C 2 h. pH roztoku bylo upraveno na 7 2N NaOH a rozpouštědlo bylo odpařeno za sníženého tlaku. Surovina byla čištěna bleskovou chromatografií. Produkt byl rozpuštěn v H2O (300 ml) a 2 N HCl (30 ml) a odsolen elucí na koloně pryskyřice Amberlite® XAD-16.00 v gradientu CH3CN/H2O za získání požadovaného produktu (9,03 g; 10,25 mmol).
Výtěžek: 41 %.
Teplota tání: 188,9 °C
Vlhkost K. F. :2,78%
Elementární analýza % vypočteno:
% nalezeno:
C Η N
59,98 8,24 6,36
58,11 8,28 6,14
Spektra 'H-NMR, nC-NMR, IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
C) Gadoliniový komplex kyseliny [3ct(S),5p]~3-[2-[[5-[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]-5-karboxypentyl]amino]-2-oxoethoxy]cholan-24-ové převedený na sodnou sůl (1 : 3)
Produkt B) (5 g; 5,67 mmol) byl rozpuštěn v H2O (200 ml) přidáním 1 N NaOH až do dosažení pH 6,8. Byl přidán Gd2O3 (1,03 g; 2,84 mmol) a získaná suspenze byla zahřívána na 50 °C 8 h. Reakční směs byla zfiltrována na přístroji Millipore® (HA filtr 0,45 pm) a filtrát byl odpařen za sníženého tlaku a sušen za poskytnutí požadovaného produktu (5,74 g; 5,21 mmol).
Výtěžek: 92 %.
Teplota tání: >250 °C Vlhkost K. F.: 5,81 %
Elementární analýza C Η N Gd Na % vypočteno: 47,99 6,04 5,09 14,28 6,26
-52CZ 302195 B6 % nalezeno: 45,09 6,15 4,77 13,39 5,81
Spektra IR a MS jsou v souladu s uvedenou strukturou.
Stejným způsobem, vycházeje ze sloučeniny A) z příkladu 15, byl připraven gadoliniový kom5 plex kyseliny [3a(S),5p]-3-[2[[5-[[2-[bis(karboxymethyl)amÍno]ethyl](karboxymethyl)amino]-5-karboxypentyl]amino]-2-oxoethoxy]cholan-24-ové.
Stejným způsobem, vycházeje ze sloučeniny A) z příkladu 15 methylesteru kyseliny (3β,5β,7α,12a)-3-[(3-karboxy-1 —oxopropyl)amÍno]-7,12-dihydroxycholan-24-ové (připraveného způsoío bem popsaným ve WO-A-95/32741: příklad 12), byl přípraven gadoliniový komplex kyseliny [3 β(8),5β,7α, 12a]-3-[4-[[5-[[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl](karboxymethyl)amino]-5karboxypentyl]amino]-l ,4-dioxobutyI]amino]-7,12-dihydroxycholan-24-ové.
Příklad 18
Měření relaxační rychlosti (ΔΙ/Τι)
Účinnost sloučenin podle vynálezu jako prostředků setrvávajících v krevním oběhu (blood pool agents) byla zjišťována vynesením vývoje podélné relaxační rychlosti 1/Tj proti času, který uplynul po podání. Protonová relaxační rychlost l/Τι vzorků krve odebíraných v určených časových intervalech byla měřena při 39 °C na přístroji Brucker Minispec PC 120 s použitím tříparametrových sekvencí typu „inversion recovery“.
Sloučenina připravená v příkladu 1, gadoliniový komplex kyseliny [3p(S),5p]—3—[[4—[bis[2— [bis(karboxymethyl)amino]ethyl]aminoJ-4-karboxy-I-oxobutyl]amino]cholan-24-ové, převedený na sůl s l-deoxy-l-(methylamino)-D-glucitolem (1 : 3), byla podána králíkovi v dávce 0,1 mmol/kg. Diagram (obr. 1) ukazuje profil relaxační rychlosti.
Sloučenina připravená v příkladu 9 patentové přihlášky WO 95/32741, gadoliniový komplex kyseliny ^,5p,7a,12a)-3-[[N-[N-[2-[[2-[bis(karboxymethyl)-amÍno]ethyl](karboxymethyl)am i nojethyl]-N-( kar boxy methy 1 )glycy 1 ] glycy l]amino]-7,12-dihydroxycholan-24-ové převedený na sůl s l-deoxy-l-(methylamino)-D-glucitolem (1 : 2), byla králíkovi podána v dávce 0,1 mmol/kg. Diagram (obr. 2) ukazuje profil relaxační rychlosti.
Sloučenina připravená v příkladu 15 patentové přihlášky WO 95/32741, gadoliniový komplex kyseliny [3β(5),5β,7α, 12a]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]-4-karboxyl-oxobutyl]amino]-7,12-dihydroxycholan-24-ové, převedený na sůl s l-deoxy-l-(methylamino)-D-glucitolem (1 : 3), byla podávána králíkovi v dávce 0,1 mmol/kg. Diagram (obr.3) ukazuje profil relaxační rychlosti.
Sloučenina připravená v příkladu 4, gadoliniový komplex kyseliny [[3p(S),5p,12a]—3—[[4— [bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]-4-karboxy-l-oxobutyl]amino]-12-hydroxycholan-24-ové převedený na sůl s l-deoxy-l-(methylamino)-D-glucitolem (1 : 3), byla podá45 vána opici v dávce 0,05 mmol/kg. Diagram (obr. 4) ukazuje profil relaxační rychlosti.
Příklad 19
0,3 M farmaceutická formulace gadoliniového komplexu s kyselinou [3β(5),5β,12α]-3-[[4[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]aminop4-karboxy- 1-oxobuty l]amino]-l 2-hydroxycholan-24-ovou převedenou na sůl s l-deoxy-l-(methylamino)~D-glucitolem (1 : 3)
-53 CZ 302195 B6
31,775 kg gadoliniového komplexu kyseliny [3p(S),5p,12a,]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]-4- karboxy-Ί -oxobutyljamino]-I2-hydroxycholan-24-ové převedené na sůl s I-deoxy-1 -(methylamino)-D-glucitolem (1:3) (připraveného podle příkladu 4) a 100 g hydrochloridu trometamolu se rozpustí ve 1001 sterilní vody při teplotě místnosti v reaktoru z nerezové oceli. Po rozpuštění se pH roztoku upraví na 7,4 přidáním 1 M trometamolu. Roztok se sterilně zfiltruje přes filtry o průměru 0,22 mm a rozplní se do 20ml lahviček, které se uzavřou halobutylovými zátkami, a zajistí hliníkovým kroužkem a sterilizují párou pri Fo = 18. HPLC ukáže títr 0,294 M.
Příklad 20
Předem naplněné plastové stříkačky obsahující prostředek z přikladu 19.
Dávky 20 ml roztoku připraveného v příkladu 19 se naplní do plastické stříkačky CZ s hrotem uzavřeným čepičkou. Ve vakuu se vloží píst a předem naplněná stříkačka se sterilizuje v autoklávu na hodnotu Fo - 18.
Claims (17)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Použití chelatovaných komplexů dvoj- nebo trojmocných paramagnetických kovových iontů zvolených ze skupiny Fe(2+), Fe(>), Cu(2ť), Cr(3+), Gd(3+), Eu(í+), Dy(T+), Yb(3+) nebo Mnq+), se sloučeninami obecného vzorce I, stejně jako jejích solí s fyziologicky kompatibilními organickými bázemi zvolenými z primárních, sekundárních, terciárních aminů nebo bazických aminokyselin, nebo s anorganickými bázemi jejichž kationty jsou sodík, draslík, hořčík, vápník nebo jejich směsi:X-L-Y (I), ve kterýchX je zbytek polyaminopolykarboxylové ligandu nebo jeho derivátu zvolených ze skupiny:kyselina ethylendiamintetraoctová (EDTA), kyselina diethylentriaminpentaoctová (DTPA), kyselina l,4,7,10-tetraazacyklododekan-l,4,7,10-tetraoctová (DOTA), kyselina 1,4,7,10tetraazacyklododekan-l,4,7-trioctová (DO3A), kyselina [ 10-(2-hydroxypropy 1)-1,4,7,10tetraazacyklododekan-l,4,7-trioctová (HPDO3A), kyselina4-karboxy-5,8,1 l-tris(karboxymethyl)~l-fenyl-2-oxa-5,8,11-triazatridekan-l 3-ová (BOPTA);Y je derivát žlučové kyseliny zvolený ze skupiny zbytků kyseliny cholové, chenodeoxycholové, deoxycholové, ursodeoxycholové, lithocholové, kyselina cholová kyselina chenodeoxycholová kyselina deoxycholová- 54CZ 302195 B6 jako takových i funkcionalizovaných v polohách obsahujících hydroxylovou skupinu jako 5 reaktivní skupinu, nezávisle na stereochemickém uspořádání konečných produktů, kde uvedený derivát také obsahuje konjugát skupiny kyseliny v poloze 24 s taurinem a glycinem;L je řetězec navázaný na jakoukoli polohu skupiny X, popřípadě obsahující jednu z karboxyloio vých skupin, která je takto převedena na amidoskupinu, a na polohu C-3, C-7, C-12 skupiny Y, a který má následující vzorec IISt kde m je celé číslo od 1 do 10, přičemž pro hodnoty vyšší než 1 může mít skupina A různé významy,A má následující vzorec 111 n a q mohou být 0 nebo 1, ale nejsou obě současně 0, p může být v rozmezí 0 až 10,Z znamená atom kyslíku nebo skupinu -NR, ve kteréR znamená atom vodíku nebo skupinu (C|-C5)alkyl, buď nesubstituovanou, nebo substituovanou skupinou -COOH;pro výrobu diagnostických piostředků pro získání zobrazení krevního systému člověka nebo zvířete metodou nukleární magnetické rezonance.-55CZ 302195 B6
- 2. Použití podle nároku 1, kde komplexy jsou vytvořeny s ionty gadolinia nebo manganu.
- 3. Použití podle nároku 1, kde mezerníkové řetězce L mají vzorce Ula a Illb
- 4. Použití podle nároku 1, kde Z je atom kyslíku, a proto je skupina L vytvořena prostřednictvím hydroxylových skupin přítomných v polohách 3, 7, 12, nezávisle na stereochemickém uspořádání konečných produktů.
- 5. Použití podle nároku 1, kde zbytek X je zvolen ze skupiny: EDTA, DTPA, DOTA, DO3A, BOPTA; Lje zvoleno ze skupiny lila nebo Illb;O a Y je zvoleno ze skupiny zbytků kyseliny cholové, deoxycholové, chenodeoxycholové a lithocholové, jako takových nebo ve kterých byly jedna nebo více hydroxylových skupin převedeny na ketoskupinu, navázaných na skupinu L aminovou skupinou v poloze 3, kyselinová skupina v poloze 24 je přítomna jako taková nebo ve formě taurinového nebo glycinového derivátu; komplexy uvedených sloučenin jsou vytvořeny s ionty gadolinia nebo manganu a kationty organických bází vhodné pro neutralizaci jsou zvoleny ze skupiny ethanolamin, diethanolamin, morfolin, glukamin, N-methylglukamin, Ν,Ν-dimethylglukamin nebo kationty anorganických bází jsou zvoleny ze skupiny sodík, draslík, hořčík, vápník nebo jejich směsí.
- 6. Použití podle nároku 1, kde ve sloučeninách obecného vzorce I zbytek X je DTPA, substituovaná na centrálním řetězci, za získání sloučenin vzorce IVHOOC—OOOHN.HOOC—/NOTOH0V), ve kterých skupina R| znamená atom vodíku nebo skupinu -COOH,- 56 CZ 302Í95 B6Y je zvoleno ze skupiny zbytků kyselin cholové, deoxycholové, chenodeoxycholové, lithocholové, a L má strukturu vzorce III,5
- 7. Použití podle nároku 6, kde ve sloučeninách vzorce IV R] znamená skupinu -COOH, za získání sloučenin vzorce IVaHOOC—HOOCVAy—COOH v,COOH (iVaXHOOC io ve kterých Y je zvoleno ze skupiny zbytků kyselin cholové, deoxycholové, chenodeoxycholové, lithocholové, a L má vzorec lila nebo Illb
- 8. Použití podle nároku 7, kde sloučenina obecného vzorce fVa je zvolena ze skupiny: kyselina [3p(S),5p]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyI]amino]^l-karboxy_l-oxobuty IJ( karboxy methy l)amino]cholan-24-ová;kyselina [3p(S),5p]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]aminoj^-karboxy-l-oxo20 butyl]amino]choIan-24-ová;kyselina [3P(S),5p]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]-4-karboxy-l-oxobuty 1 jam i no]-12-oxocholan-24-ová;kyselina [3P(S),5p,7a]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]-4-karboxy-loxobutyI]amino]-7-hydroxycholan-24-ová;25 N2-bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]-N-[(3p,5p)-24-oxo-24-[(2-sutfcethyl)amino]cholan—3-y l]-L-glutamin;N2-bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]-N-[(3p,5p,7a, 12α)-7,12-dihydroxv-24-oxo-24[(2-sulfoethyl)amino]cholan-3-yl]-L-glutamin;kyselina [3P(S),5p,7p]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]-4-karboxy-l30 oxobutyl]amino]-7-hydroxycholan-24-ová;kyselina [3p(R),5p,12a]-3-[[4- [bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]aminoJ-4-karboxy-loxobutyl]amino]-12-hydroxychoIan-24-ová;kyselina [3p(RS),5p,l 2a]-3-[[4-[bis[2-[bÍs(karboxymethyl)amino]ethyl]aminol—4-karboxy-loxobiityl]amino]-12-hydroxvcholan-24-ová;35 kyselina [3p(RS),5p,7a, 12a]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethy Ijaminoj^l-karboxy-1 -oxobuty l]amino]-7,12-dihydroxycholan-24-ová;kyselina [3P(S),5p,7a, 12a]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]^l—karboxy1 -oxobutyljaminoj-7,12-dihydroxycholan-24-ová;-57CZ 302195 B6 kyselina [3a(S),5p]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]—4-karboxy-l-oxobuty l]amino]cholan-24-ová;kyselina l3p(S),5p,12a]_3-[[4-[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]-4-karboxy-loxobuty 1 jam ino]-12-hydroxycholan-24-ová;5 kyselina [3a(S),5p,12a]-3-f[4-[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]-4-karboxy-loxobutyl]amino]-12-hydroxycholan-24-ová.
- 9. Použití podle nároku 6, kde ve vzorci IV R| znamená atom vodíku, za získání sloučenin obecného vzorce IVb ioHOOC—\ NHOOC—/ /—COOH (IVb).ve kterých Y je zvoleno ze skupiny zbytků kyselin cholové, deoxycholové, chenodeoxycholové, lithocholové, a L má strukturu lila
- 10. Použití podle nároku 9, kde sloučenina obecného vzorce IVb je zvolena ze skupiny: kyselina (3p,5p,7a,12a)-3-[[[bis[2-[bis(karboxymethyl)amíno]ethyI]amino]acetyl]amino]20 7,12-dihydroxycholan-24-ová;kyselina (3p,5p)-3-[[[[[bis[2“[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]acetyl]amino]acetyI]amino]cho!an-24-ová;kyselina (3p,5p,7a, 12a)-3-[[[[[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]acetyl]amino]acety l]amino]-7,12-dihydroxycholan-24-ová;25 kyselina (3 ρ,5β,7α, 12a)-3-[[6-[[[bis[2-[bis(karboxymethyl)am ino]cthyl]amino]acetyl]amino]1 -oxohexy l]am ino]-7,12-dihydroxycholan-24~ová.
- 11. Použití podle nároku 1, kde ve sloučenině obecného vzorce I zbytek X je DTPA, za získání sloučenin obecného vzorce VHOOC N' HOOC^ rNLCOOH ‘NTL-YCOOH (V), ve kterých Y je zvoleno ze skupiny zbytků kyselin cholové, deoxycholové, chenodeoxycholové, lithocholové, a L má strukturu vzorce lila-58 CZ 302195 B6 (ΙΠβ),
- 12. Použití podle nároku 11, kde sloučenina obecného vzorce V je zvolená ze skupiny: kyselina (3β,5β,7α, 12a)-3-[[N-[N-[2-[[2-[bis(karboxy methy l)amino]ethyl] (karboxy methy I)5 amino]ethy l]-N-(karboxymethyl)glycyl]glycy l]amino]-7,12-dihydroxycholan-24-ová;kyselina 18-[[(3β,5β,7α, 12a)-23-karboxy-7,12-hydroxy-24-norcholan-3-yl]amino]-3,6,9tris(karboxymethyl)-l 1,18—d i oxo-3,6,9,12-tetraazaoktadekanová.
- 13. Použití podle nároku 1, kde ve sloučenině obecného vzorce I zbytek X je DO3A, za získání ío sloučenin obecného vzorce VI,HOOC' 'X i 1 x COOH —-Ν Ν-η <-N N-JHOOC-^X \_J ''l-Y (VI), kde Y je zvoleno ze skupiny zbytků kyselin cholové, deoxycholové, chenodeoxycholové, litho15 cholové, a L je zvoleno ze struktur lila a Illb
- 14. Použití podle nároku 1, kde ve sloučeninách obecného vzorce I zbytek X je EDTA, za získání sloučenin obecného vzorce VIIHQaC^COOHL-YHOOC (VU),COOH25 kde Y je zvoleno ze skupiny zbytků kyselin cholové, deoxycholové, chenodeoxycholové, líthocholové, a L má strukturu vzorce III.-59CZ 302195 B6
- 15. Použití podle nároku 14, kde sloučenina obecného vzorce Vlije zvolená ze skupiny: kyselina [3α($),5β, ]2a]-3-[[[[5--[[2-[bis(karboxyrnethyl)amino]ethyl](karboxymethyl)amino)5-karboxypentylJamino]karbonyl]oxy]-l 2-hydroxycholan-24-ová;kyselina [3β(8),5β,7α, 12α]—3—[[4—[ [5—[ [2-f bis( karboxymethy l)am i no]ethyl](karboxy methy I)5 amino]-5-karboxypentyI]amino]-l,4-dioxobutyl]amino]-7,12-dihydroxycholan-24-ová;kyselina ^(S),5^]-3-[[2-[[5-[[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl](karboxymethyl)amino]-5karboxypentyl]amino]-2-oxoethoxy]cholan-24-ová;kyselina [3β(5).5β, 12a]-3-[[4-[[2-[[bis(karboxymethyl)amino]ethyl](karboxymethyl)amino]4-karboxy-l -oxobutyl]amino]-l 2-hydroxycholan-24_ová;io kyselina ^(S)^]-3-[[4~[[2-[[bis(karboxymethyl)aminojethyl](karboxymethyl)amino]-4karboxy-1 -oxobuty IJamino J-l 2-oxocholan-24o)vá,
- 16. Použití podle nároku 1, některé z následujících sloučenin:kyselina [3a(S)^,7a,12a]-3-[[[[5-[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]-5-karboxy 15 pentyl]amino]karbonyl]oxy]-7,12-dihydroxycholan-24-ová;kyselina [3a(S)^]-3-[2-[[5-[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]-5-karboxypentyl]amino]-2-oxoethoxy]cholan-24-ová;kyselina [3p(S)^.7a,12a]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboxymethyl)amino]ethyl]amino]-5-karboxypentyljamino]-l,4-dioxobutyl]amino]-7,12-dihydroxycholan-24-ová;20 kysel ina 10-[3-[[(3α,5β,7α, 12a)-23-karboxy-7,12-dihydroxy-24-norcholan-3-yl]oxy]-2hyd roxy propy 1]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-1,4,7—tri octová.
- 17. Použití podle některého z nároků 1 až 16, ve kterých jsou chelatované komplexní soli vytvo řeny se sodíkem a N-methylglukaminem,4 výkresy
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IT1998MI002802A IT1304501B1 (it) | 1998-12-23 | 1998-12-23 | Uso di derivati di acidi biliari coniugati con complessi metallicicome "blood pool agents" per l'indagine diagnostica tramite risonanza |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ20012330A3 CZ20012330A3 (cs) | 2002-01-16 |
| CZ302195B6 true CZ302195B6 (cs) | 2010-12-08 |
Family
ID=11381326
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ20012330A CZ302195B6 (cs) | 1998-12-23 | 1999-12-16 | Použití chelatovaných komplexu |
Country Status (20)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6461588B1 (cs) |
| EP (2) | EP1140209B1 (cs) |
| JP (1) | JP4733271B2 (cs) |
| KR (1) | KR100736298B1 (cs) |
| CN (2) | CN1263515C (cs) |
| AT (1) | ATE405296T1 (cs) |
| AU (1) | AU773876B2 (cs) |
| CA (1) | CA2355888C (cs) |
| CZ (1) | CZ302195B6 (cs) |
| DE (1) | DE69939398D1 (cs) |
| HK (1) | HK1042432B (cs) |
| HU (1) | HU228048B1 (cs) |
| IL (2) | IL143730A0 (cs) |
| IT (1) | IT1304501B1 (cs) |
| MX (1) | MXPA01006344A (cs) |
| NO (1) | NO322551B1 (cs) |
| PL (1) | PL196474B1 (cs) |
| RU (2) | RU2250765C2 (cs) |
| WO (1) | WO2000038738A1 (cs) |
| ZA (1) | ZA200104820B (cs) |
Families Citing this family (25)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| TW319763B (cs) | 1995-02-01 | 1997-11-11 | Epix Medical Inc | |
| IL134985A0 (en) | 1997-10-02 | 2001-05-20 | Epix Medical Inc | A method for contrast enhanced diagnostic imaging |
| IT1317862B1 (it) * | 2000-02-29 | 2003-07-15 | Bracco Spa | Coniugati di acidi biliari con chelati complessi di ioni metallici eloro uso. |
| IT1318485B1 (it) * | 2000-04-21 | 2003-08-25 | Bracco Spa | Uso di derivati di acidi biliari coniugati con complessi di ionimetallici nella visualizzazione diagnostica di sistemi microvascolari |
| US6900192B2 (en) * | 2000-10-06 | 2005-05-31 | Xenoport, Inc. | Bile-acid conjugates for providing sustained systemic concentrations of drugs |
| EP1229041A1 (en) * | 2001-02-05 | 2002-08-07 | Bracco Imaging S.p.A. | A process for the preparation of 3-Glutamido bile ester derivatives using N-tBoc methyl pyroglutamate |
| US7053076B2 (en) | 2001-08-29 | 2006-05-30 | Xenoport, Inc. | Bile-acid derived compounds for enhancing oral absorption and systemic bioavailability of drugs |
| EP1302465A1 (en) * | 2001-10-11 | 2003-04-16 | BRACCO IMAGING S.p.A. | Enhanced substrate imaging by reversible binding to a paramagnetic complex |
| US7850947B2 (en) | 2003-01-13 | 2010-12-14 | Bracco Imaging S.P.A. | Gastrin releasing peptide compounds |
| US7922998B2 (en) | 2003-01-13 | 2011-04-12 | Bracco Imaging S.P.A. | Gastrin releasing peptide compounds |
| US7226577B2 (en) | 2003-01-13 | 2007-06-05 | Bracco Imaging, S. P. A. | Gastrin releasing peptide compounds |
| US8420050B2 (en) * | 2003-01-13 | 2013-04-16 | Bracco Imaging S.P.A. | Gastrin releasing peptide compounds |
| US7611692B2 (en) | 2003-01-13 | 2009-11-03 | Bracco Imaging S.P.A. | Gastrin releasing peptide compounds |
| AU2003303714B2 (en) * | 2003-01-13 | 2009-02-19 | Bracco Imaging S.P.A. | Improved linkers for radiopharmaceutical compounds |
| KR20060121244A (ko) * | 2003-12-24 | 2006-11-28 | 브라코 이미징 에스.피.에이. | 개선된 가스트린 방출 펩티드 화합물 |
| CN101827631B (zh) | 2007-07-11 | 2013-04-24 | 得克萨斯系统大学董事会 | 用于成像中的粒子和标记物 |
| CN101845112B (zh) * | 2010-06-02 | 2011-09-14 | 华东理工大学 | 一种基于高分子纳米粒子的高灵敏性核磁共振成像造影剂的制备方法 |
| MX356514B (es) | 2011-01-20 | 2018-05-30 | Univ Texas | Marcadores de formación de imagen por resonancia magnética, sistemas de suministro y extracción, y métodos de fabricación y uso de los mismos. |
| EP2822605A1 (en) | 2012-03-05 | 2015-01-14 | Bracco Imaging S.p.A | Dynamic contrast enhanced mri method and agents for the assessment of the macromolecular transport within pathologic tissues |
| CN102766188B (zh) * | 2012-07-24 | 2016-01-13 | 上海交通大学 | 胆固醇衍生物、螯合物、重组高密度脂蛋白及其用途 |
| GB201421163D0 (en) * | 2014-11-28 | 2015-01-14 | Ge Healthcare As | Formulations of metal complexes |
| US10093741B1 (en) | 2017-05-05 | 2018-10-09 | Fusion Pharmaceuticals Inc. | IGF-1R monoclonal antibodies and uses thereof |
| AU2018261890A1 (en) | 2017-05-05 | 2019-11-28 | Centre For Probe Development And Commercialization | IGF-1R monoclonal antibodies and uses thereof |
| BR112019023246B1 (pt) | 2017-05-05 | 2023-11-14 | Centre For Probe Development And Commercialization | Compostos compreendendo uma fração quelante, métodos para produção dos mesmos e usos dos mesmos |
| CN112424214A (zh) * | 2018-05-30 | 2021-02-26 | 川斯勒佰尔公司 | 包含甾族部分的阳离子脂质 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0279307A2 (en) * | 1987-02-13 | 1988-08-24 | Abbott Laboratories | Bifunctional chelating agents |
| EP0417725A2 (de) * | 1989-09-14 | 1991-03-20 | Hoechst Aktiengesellschaft | Gallensäurederivate, Verfahren zu ihrer Herstellung, Verwendung als Arzneimittel |
| WO1995019186A2 (en) * | 1994-01-13 | 1995-07-20 | Nycomed Imaging A/S | Contrast media for x-ray and magnetic resonance imaging |
| WO1995032741A1 (en) * | 1994-05-26 | 1995-12-07 | Bracco S.P.A. | Bile acid conjugates, derivatives thereof with metal complexes and related uses |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IT1213029B (it) * | 1986-01-30 | 1989-12-07 | Bracco Ind Chimica Spa | Chelati di ioni metallici paramagnetici. |
| US5227474A (en) * | 1987-02-13 | 1993-07-13 | Abbott Laboratories | Bifunctional chelating agents |
| DE69534990T2 (de) * | 1994-04-20 | 2006-10-05 | Amersham Health Salutar Inc. | Kontrastmittel |
| JPH11116542A (ja) * | 1997-10-06 | 1999-04-27 | Sogo Pharmaceut Co Ltd | γ−グルタミン酸アミド類の製造法 |
-
1998
- 1998-12-23 IT IT1998MI002802A patent/IT1304501B1/it active
-
1999
- 1999-05-26 US US09/318,618 patent/US6461588B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-12-16 PL PL349488A patent/PL196474B1/pl unknown
- 1999-12-16 CZ CZ20012330A patent/CZ302195B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1999-12-16 EP EP99963556A patent/EP1140209B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-12-16 IL IL14373099A patent/IL143730A0/xx active IP Right Grant
- 1999-12-16 MX MXPA01006344A patent/MXPA01006344A/es active IP Right Grant
- 1999-12-16 DE DE69939398T patent/DE69939398D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1999-12-16 AT AT99963556T patent/ATE405296T1/de not_active IP Right Cessation
- 1999-12-16 CN CNB998157929A patent/CN1263515C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1999-12-16 EP EP08004643.6A patent/EP1935435B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-12-16 RU RU2001120351/15A patent/RU2250765C2/ru not_active IP Right Cessation
- 1999-12-16 JP JP2000590689A patent/JP4733271B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1999-12-16 WO PCT/EP1999/010002 patent/WO2000038738A1/en active IP Right Grant
- 1999-12-16 RU RU2004127136/04A patent/RU2395490C2/ru not_active IP Right Cessation
- 1999-12-16 HU HU0104715A patent/HU228048B1/hu not_active IP Right Cessation
- 1999-12-16 CA CA002355888A patent/CA2355888C/en not_active Expired - Fee Related
- 1999-12-16 KR KR1020017007945A patent/KR100736298B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1999-12-16 CN CNB2006100676912A patent/CN100450996C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1999-12-16 AU AU19807/00A patent/AU773876B2/en not_active Ceased
-
2001
- 2001-06-13 ZA ZA200104820A patent/ZA200104820B/en unknown
- 2001-06-13 IL IL143730A patent/IL143730A/en not_active IP Right Cessation
- 2001-06-22 NO NO20013154A patent/NO322551B1/no not_active IP Right Cessation
-
2002
- 2002-05-04 HK HK02103398.0A patent/HK1042432B/zh not_active IP Right Cessation
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0279307A2 (en) * | 1987-02-13 | 1988-08-24 | Abbott Laboratories | Bifunctional chelating agents |
| EP0417725A2 (de) * | 1989-09-14 | 1991-03-20 | Hoechst Aktiengesellschaft | Gallensäurederivate, Verfahren zu ihrer Herstellung, Verwendung als Arzneimittel |
| WO1995019186A2 (en) * | 1994-01-13 | 1995-07-20 | Nycomed Imaging A/S | Contrast media for x-ray and magnetic resonance imaging |
| WO1995032741A1 (en) * | 1994-05-26 | 1995-12-07 | Bracco S.P.A. | Bile acid conjugates, derivatives thereof with metal complexes and related uses |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Bioconjug. Chem. 1991 2 (2) s. 117-123 (abstrakt) * |
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CZ302195B6 (cs) | Použití chelatovaných komplexu | |
| JP4108120B2 (ja) | 胆汁酸抱合体、それらの金属錯体との誘導体、及び関連する使用方法 | |
| JP3723219B2 (ja) | カスケードポリマー錯体、その製造方法及びこれらを含有する医薬 | |
| JP5052726B2 (ja) | 金属イオンキレートとの胆汁酸複合体及びその使用 | |
| US6083479A (en) | Contrast media for infarction and necrosis imaging | |
| JPH08510458A (ja) | 沃素化された常磁性キレートおよびそれらの造影剤としての使用法 | |
| WO1994001393A1 (en) | Novel chelating agent, complex compound composed of said agent and metallic atom, and diagnostic agent containing said compound | |
| ITMI992656A1 (it) | Composti chelanti loro chelati con ioni metallici paramagnetici loro preparazione ed uso | |
| KR100376950B1 (ko) | 대환식킬레이트제,이들의킬레이트및진단분야에서의이의용도 | |
| KR20080027397A (ko) | 극성 라디칼과의 퍼플루오로알킬 함유 착물, 이의 제조방법 및 용도 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20171216 |