NO322551B1 - Anvendelse av gelaterte komplekser som "blood-pool"-midler for kjernemagnetisk resonansdiagnostikk - Google Patents
Anvendelse av gelaterte komplekser som "blood-pool"-midler for kjernemagnetisk resonansdiagnostikk Download PDFInfo
- Publication number
- NO322551B1 NO322551B1 NO20013154A NO20013154A NO322551B1 NO 322551 B1 NO322551 B1 NO 322551B1 NO 20013154 A NO20013154 A NO 20013154A NO 20013154 A NO20013154 A NO 20013154A NO 322551 B1 NO322551 B1 NO 322551B1
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- amino
- bis
- acid
- carboxymethyl
- ethyl
- Prior art date
Links
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 title claims description 8
- 229910052688 Gadolinium Inorganic materials 0.000 claims abstract description 48
- UIWYJDYFSGRHKR-UHFFFAOYSA-N gadolinium atom Chemical compound [Gd] UIWYJDYFSGRHKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 48
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 48
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 7
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 claims abstract description 6
- 150000007529 inorganic bases Chemical class 0.000 claims abstract description 5
- 229910001437 manganese ion Inorganic materials 0.000 claims abstract 3
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims description 241
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 168
- 125000000267 glycino group Chemical group [H]N([*])C([H])([H])C(=O)O[H] 0.000 claims description 117
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 96
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 91
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 68
- MBBZMMPHUWSWHV-BDVNFPICSA-N N-methylglucamine Chemical compound CNC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBBZMMPHUWSWHV-BDVNFPICSA-N 0.000 claims description 42
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 32
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims description 32
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 claims description 20
- -1 glucamine Chemical compound 0.000 claims description 20
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 claims description 20
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 18
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 18
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 claims description 15
- 230000005298 paramagnetic effect Effects 0.000 claims description 13
- XOAAWQZATWQOTB-UHFFFAOYSA-N taurine Chemical compound NCCS(O)(=O)=O XOAAWQZATWQOTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 11
- HSINOMROUCMIEA-FGVHQWLLSA-N (2s,4r)-4-[(3r,5s,6r,7r,8s,9s,10s,13r,14s,17r)-6-ethyl-3,7-dihydroxy-10,13-dimethyl-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]-2-methylpentanoic acid Chemical compound C([C@@]12C)C[C@@H](O)C[C@H]1[C@@H](CC)[C@@H](O)[C@@H]1[C@@H]2CC[C@]2(C)[C@@H]([C@H](C)C[C@H](C)C(O)=O)CC[C@H]21 HSINOMROUCMIEA-FGVHQWLLSA-N 0.000 claims description 9
- 239000011572 manganese Substances 0.000 claims description 9
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 claims description 9
- 239000003613 bile acid Substances 0.000 claims description 8
- 239000003446 ligand Substances 0.000 claims description 8
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 claims description 7
- 229960001231 choline Drugs 0.000 claims description 6
- OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N choline Chemical compound C[N+](C)(C)CCO OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 6
- 229960003080 taurine Drugs 0.000 claims description 6
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 5
- WDLRUFUQRNWCPK-UHFFFAOYSA-N Tetraxetan Chemical compound OC(=O)CN1CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC1 WDLRUFUQRNWCPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 125000003630 glycyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 claims description 5
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 5
- HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoethan-1-ol Chemical compound NCCO HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- HHLZCENAOIROSL-UHFFFAOYSA-N 2-[4,7-bis(carboxymethyl)-1,4,7,10-tetrazacyclododec-1-yl]acetic acid Chemical compound OC(=O)CN1CCNCCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC1 HHLZCENAOIROSL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N Morpholine Chemical compound C1COCCN1 YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 claims description 4
- 239000011575 calcium Substances 0.000 claims description 4
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims description 4
- 150000002643 lithocholic acids Chemical class 0.000 claims description 4
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 claims description 4
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 claims description 4
- 239000011591 potassium Substances 0.000 claims description 4
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 claims description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- IQUHNCOJRJBMSU-UHFFFAOYSA-N H3HP-DO3A Chemical compound CC(O)CN1CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC1 IQUHNCOJRJBMSU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 3
- CUGDYSSBTWBKII-LXGUWJNJSA-N (2r,3r,4r,5s)-6-(dimethylamino)hexane-1,2,3,4,5-pentol Chemical compound CN(C)C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO CUGDYSSBTWBKII-LXGUWJNJSA-N 0.000 claims description 2
- 125000006527 (C1-C5) alkyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims description 2
- ZBCBWPMODOFKDW-UHFFFAOYSA-N diethanolamine Chemical compound OCCNCCO ZBCBWPMODOFKDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 150000002332 glycine derivatives Chemical class 0.000 claims description 2
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 125000000468 ketone group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 claims description 2
- 150000003512 tertiary amines Chemical class 0.000 claims description 2
- 125000000218 acetic acid group Chemical group C(C)(=O)* 0.000 claims 6
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 claims 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 claims 1
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 claims 1
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 30
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 abstract description 5
- 239000003858 bile acid conjugate Substances 0.000 abstract description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 abstract description 2
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 135
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 114
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 54
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 47
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 42
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 description 42
- 229910001868 water Inorganic materials 0.000 description 41
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 38
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 37
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 37
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 36
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 35
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 32
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 24
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 23
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 23
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 22
- 238000003818 flash chromatography Methods 0.000 description 22
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 22
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 22
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 21
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 21
- WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M Lithium hydroxide Chemical compound [Li+].[OH-] WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 18
- 239000002872 contrast media Substances 0.000 description 18
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 18
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 17
- 229960003194 meglumine Drugs 0.000 description 17
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 16
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 13
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 12
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 11
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 11
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 11
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 229910003317 GdCl3 Inorganic materials 0.000 description 9
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 9
- MEANOSLIBWSCIT-UHFFFAOYSA-K gadolinium trichloride Chemical compound Cl[Gd](Cl)Cl MEANOSLIBWSCIT-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 9
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 9
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 9
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 9
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 9
- 229940126062 Compound A Drugs 0.000 description 8
- NLDMNSXOCDLTTB-UHFFFAOYSA-N Heterophylliin A Natural products O1C2COC(=O)C3=CC(O)=C(O)C(O)=C3C3=C(O)C(O)=C(O)C=C3C(=O)OC2C(OC(=O)C=2C=C(O)C(O)=C(O)C=2)C(O)C1OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 NLDMNSXOCDLTTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 8
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 8
- 235000011007 phosphoric acid Nutrition 0.000 description 8
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 7
- PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N Manganese Chemical compound [Mn] PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 150000004649 carbonic acid derivatives Chemical class 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 6
- 238000002595 magnetic resonance imaging Methods 0.000 description 6
- 229910052748 manganese Inorganic materials 0.000 description 6
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 6
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 6
- SMYLHQLFDXEFSK-SANMLTNESA-N (4s)-4-[bis[2-[bis[2-[(2-methylpropan-2-yl)oxy]-2-oxoethyl]amino]ethyl]amino]-5-[(2-methylpropan-2-yl)oxy]-5-oxopentanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)CN(CC(=O)OC(C)(C)C)CCN([C@@H](CCC(O)=O)C(=O)OC(C)(C)C)CCN(CC(=O)OC(C)(C)C)CC(=O)OC(C)(C)C SMYLHQLFDXEFSK-SANMLTNESA-N 0.000 description 5
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 5
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 5
- 239000013065 commercial product Substances 0.000 description 5
- ZWWWLCMDTZFSOO-UHFFFAOYSA-N diethoxyphosphorylformonitrile Chemical compound CCOP(=O)(C#N)OCC ZWWWLCMDTZFSOO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 5
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 5
- 239000003349 gelling agent Substances 0.000 description 5
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 5
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 5
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 5
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 5
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 5
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 5
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 4
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 4
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 4
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 4
- 238000012631 diagnostic technique Methods 0.000 description 4
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 4
- HJUFTIJOISQSKQ-UHFFFAOYSA-N fenoxycarb Chemical compound C1=CC(OCCNC(=O)OCC)=CC=C1OC1=CC=CC=C1 HJUFTIJOISQSKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229960002989 glutamic acid Drugs 0.000 description 4
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 4
- ZRSNZINYAWTAHE-UHFFFAOYSA-N p-methoxybenzaldehyde Chemical compound COC1=CC=C(C=O)C=C1 ZRSNZINYAWTAHE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 4
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 4
- SJMDMGHPMLKLHQ-UHFFFAOYSA-N tert-butyl 2-aminoacetate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)CN SJMDMGHPMLKLHQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- BNWCETAHAJSBFG-UHFFFAOYSA-N tert-butyl 2-bromoacetate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)CBr BNWCETAHAJSBFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 4
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 3
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 3
- 238000005251 capillar electrophoresis Methods 0.000 description 3
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 3
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 3
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 3
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 3
- 238000010829 isocratic elution Methods 0.000 description 3
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 3
- VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N methane Natural products C VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IOQPZZOEVPZRBK-UHFFFAOYSA-N octan-1-amine Chemical compound CCCCCCCCN IOQPZZOEVPZRBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 3
- 125000000467 secondary amino group Chemical group [H]N([*:1])[*:2] 0.000 description 3
- BJLLOMORJCWXON-VKHMYHEASA-N (2s)-5-oxopyrrolidine-1,2-dicarboxylic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCC(=O)N1C(O)=O BJLLOMORJCWXON-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- SMYLHQLFDXEFSK-UHFFFAOYSA-N 4-[bis[2-[bis[2-[(2-methylpropan-2-yl)oxy]-2-oxoethyl]amino]ethyl]amino]-5-[(2-methylpropan-2-yl)oxy]-5-oxopentanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)CN(CC(=O)OC(C)(C)C)CCN(C(CCC(O)=O)C(=O)OC(C)(C)C)CCN(CC(=O)OC(C)(C)C)CC(=O)OC(C)(C)C SMYLHQLFDXEFSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N Borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101100283604 Caenorhabditis elegans pigk-1 gene Proteins 0.000 description 2
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 2
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000000921 Gadolinium Chemical class 0.000 description 2
- 239000007836 KH2PO4 Substances 0.000 description 2
- 229910021380 Manganese Chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- GLFNIEUTAYBVOC-UHFFFAOYSA-L Manganese chloride Chemical compound Cl[Mn]Cl GLFNIEUTAYBVOC-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000029936 alkylation Effects 0.000 description 2
- 238000005804 alkylation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 239000002585 base Substances 0.000 description 2
- LDECUSDQMXVUMP-UHFFFAOYSA-N benzyl 3-[6-[[2-(butylamino)-1-[3-methoxycarbonyl-4-(2-methoxy-2-oxoethoxy)phenyl]-2-oxoethyl]-hexylamino]-6-oxohexyl]-4-methyl-2-oxo-6-(4-phenylphenyl)-1,6-dihydropyrimidine-5-carboxylate Chemical compound O=C1NC(C=2C=CC(=CC=2)C=2C=CC=CC=2)C(C(=O)OCC=2C=CC=CC=2)=C(C)N1CCCCCC(=O)N(CCCCCC)C(C(=O)NCCCC)C1=CC=C(OCC(=O)OC)C(C(=O)OC)=C1 LDECUSDQMXVUMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 229910000355 cerium(IV) sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 238000003926 complexometric titration Methods 0.000 description 2
- 150000005690 diesters Chemical class 0.000 description 2
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- HZHFFEYYPYZMNU-UHFFFAOYSA-K gadodiamide Chemical compound [Gd+3].CNC(=O)CN(CC([O-])=O)CCN(CC([O-])=O)CCN(CC([O-])=O)CC(=O)NC HZHFFEYYPYZMNU-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- YMAWOPBAYDPSLA-UHFFFAOYSA-N glycylglycine Chemical compound [NH3+]CC(=O)NCC([O-])=O YMAWOPBAYDPSLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N iodomethane Chemical compound IC INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000005291 magnetic effect Effects 0.000 description 2
- 239000011565 manganese chloride Substances 0.000 description 2
- 235000002867 manganese chloride Nutrition 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 2
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 238000001728 nano-filtration Methods 0.000 description 2
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 125000001147 pentyl group Chemical group C(CCCC)* 0.000 description 2
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 2
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 2
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- QEVHRUUCFGRFIF-MDEJGZGSSA-N reserpine Chemical compound O([C@H]1[C@@H]([C@H]([C@H]2C[C@@H]3C4=C(C5=CC=C(OC)C=C5N4)CCN3C[C@H]2C1)C(=O)OC)OC)C(=O)C1=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C1 QEVHRUUCFGRFIF-MDEJGZGSSA-N 0.000 description 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 2
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 2
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N trimethylamine Chemical compound CN(C)C GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N triphenylphosphine Chemical compound C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VHSFUGXCSGOKJX-SNVBAGLBSA-N (2r)-5-oxo-1-phenylmethoxycarbonylpyrrolidine-2-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)[C@H]1CCC(=O)N1C(=O)OCC1=CC=CC=C1 VHSFUGXCSGOKJX-SNVBAGLBSA-N 0.000 description 1
- VHSFUGXCSGOKJX-JTQLQIEISA-N (2s)-5-oxo-1-phenylmethoxycarbonylpyrrolidine-2-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCC(=O)N1C(=O)OCC1=CC=CC=C1 VHSFUGXCSGOKJX-JTQLQIEISA-N 0.000 description 1
- 125000000008 (C1-C10) alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003837 (C1-C20) alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RAZLJUXJEOEYAM-UHFFFAOYSA-N 2-[bis[2-(2,6-dioxomorpholin-4-yl)ethyl]azaniumyl]acetate Chemical compound C1C(=O)OC(=O)CN1CCN(CC(=O)O)CCN1CC(=O)OC(=O)C1 RAZLJUXJEOEYAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YEDUAINPPJYDJZ-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxybenzothiazole Chemical compound C1=CC=C2SC(O)=NC2=C1 YEDUAINPPJYDJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- ZGTMUACCHSMWAC-UHFFFAOYSA-L EDTA disodium salt (anhydrous) Chemical compound [Na+].[Na+].OC(=O)CN(CC([O-])=O)CCN(CC(O)=O)CC([O-])=O ZGTMUACCHSMWAC-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 108010008488 Glycylglycine Proteins 0.000 description 1
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 239000003810 Jones reagent Substances 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N L-Ornithine Chemical compound NCCC[C@H](N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002616 MRI contrast agent Substances 0.000 description 1
- 239000007832 Na2SO4 Substances 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N Orn-delta-NH2 Natural products NCCCC(N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N Ornithine Natural products OC(=O)C(C)CCCN UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YGYAWVDWMABLBF-UHFFFAOYSA-N Phosgene Chemical compound ClC(Cl)=O YGYAWVDWMABLBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010039918 Polylysine Proteins 0.000 description 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- FKNQFGJONOIPTF-UHFFFAOYSA-N Sodium cation Chemical compound [Na+] FKNQFGJONOIPTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 229910001413 alkali metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910001420 alkaline earth metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N alumane Chemical group [AlH3] AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003121 arginine Drugs 0.000 description 1
- 239000003637 basic solution Substances 0.000 description 1
- OMCLKKMMLVBMEQ-UHFFFAOYSA-N benzyl 2-hydroxyacetate;trifluoromethanesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C(F)(F)F.OCC(=O)OCC1=CC=CC=C1 OMCLKKMMLVBMEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002051 biphasic effect Effects 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N carbonic acid Chemical compound OC(O)=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001767 cationic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000007810 chemical reaction solvent Substances 0.000 description 1
- JOPOVCBBYLSVDA-UHFFFAOYSA-N chromium(6+) Chemical compound [Cr+6] JOPOVCBBYLSVDA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010668 complexation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 210000004351 coronary vessel Anatomy 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 239000013058 crude material Substances 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- FAMRKDQNMBBFBR-BQYQJAHWSA-N diethyl azodicarboxylate Substances CCOC(=O)\N=N\C(=O)OCC FAMRKDQNMBBFBR-BQYQJAHWSA-N 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 1
- FAMRKDQNMBBFBR-UHFFFAOYSA-N ethyl n-ethoxycarbonyliminocarbamate Chemical compound CCOC(=O)N=NC(=O)OCC FAMRKDQNMBBFBR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000031 ethylamino group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])N([H])[*] 0.000 description 1
- 210000003722 extracellular fluid Anatomy 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- LGMLJQFQKXPRGA-VPVMAENOSA-K gadopentetate dimeglumine Chemical compound [Gd+3].CNC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO.CNC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO.OC(=O)CN(CC([O-])=O)CCN(CC([O-])=O)CCN(CC(O)=O)CC([O-])=O LGMLJQFQKXPRGA-VPVMAENOSA-K 0.000 description 1
- RYHQMKVRYNEBNJ-BMWGJIJESA-K gadoterate meglumine Chemical compound [Gd+3].CNC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO.OC(=O)CN1CCN(CC([O-])=O)CCN(CC([O-])=O)CCN(CC([O-])=O)CC1 RYHQMKVRYNEBNJ-BMWGJIJESA-K 0.000 description 1
- GFSTXYOTEVLASN-UHFFFAOYSA-K gadoteric acid Chemical compound [Gd+3].OC(=O)CN1CCN(CC([O-])=O)CCN(CC([O-])=O)CCN(CC([O-])=O)CC1 GFSTXYOTEVLASN-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940083124 ganglion-blocking antiadrenergic secondary and tertiary amines Drugs 0.000 description 1
- 229960002449 glycine Drugs 0.000 description 1
- 229940043257 glycylglycine Drugs 0.000 description 1
- 125000004968 halobutyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000002440 hepatic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008241 heterogeneous mixture Substances 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 239000007972 injectable composition Substances 0.000 description 1
- 229910001411 inorganic cation Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002075 inversion recovery Methods 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 229960003646 lysine Drugs 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 229910044991 metal oxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000004706 metal oxides Chemical class 0.000 description 1
- MGJXBDMLVWIYOQ-UHFFFAOYSA-N methylazanide Chemical compound [NH-]C MGJXBDMLVWIYOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000051 modifying effect Effects 0.000 description 1
- 125000000896 monocarboxylic acid group Chemical group 0.000 description 1
- 238000003541 multi-stage reaction Methods 0.000 description 1
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 description 1
- 238000013421 nuclear magnetic resonance imaging Methods 0.000 description 1
- 229960003104 ornithine Drugs 0.000 description 1
- 230000003071 parasitic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- XYFCBTPGUUZFHI-UHFFFAOYSA-O phosphonium Chemical compound [PH4+] XYFCBTPGUUZFHI-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 229920001467 poly(styrenesulfonates) Polymers 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920000656 polylysine Polymers 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 229940071643 prefilled syringe Drugs 0.000 description 1
- 150000003141 primary amines Chemical class 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- LVTJOONKWUXEFR-FZRMHRINSA-N protoneodioscin Natural products O(C[C@@H](CC[C@]1(O)[C@H](C)[C@@H]2[C@]3(C)[C@H]([C@H]4[C@@H]([C@]5(C)C(=CC4)C[C@@H](O[C@@H]4[C@H](O[C@H]6[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O6)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]6[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O6)[C@H](CO)O4)CC5)CC3)C[C@@H]2O1)C)[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 LVTJOONKWUXEFR-FZRMHRINSA-N 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002510 pyrogen Substances 0.000 description 1
- HNJBEVLQSNELDL-UHFFFAOYSA-N pyrrolidin-2-one Chemical compound O=C1CCCN1 HNJBEVLQSNELDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 210000003660 reticulum Anatomy 0.000 description 1
- 150000003334 secondary amides Chemical class 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001415 sodium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 1
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 230000003637 steroidlike Effects 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- WCEPRISXWGVUQB-UHFFFAOYSA-N tert-butyl 2-[2-bromoethyl-[2-[(2-methylpropan-2-yl)oxy]-2-oxoethyl]amino]acetate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)CN(CCBr)CC(=O)OC(C)(C)C WCEPRISXWGVUQB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000007056 transamidation reaction Methods 0.000 description 1
- UCPYLLCMEDAXFR-UHFFFAOYSA-N triphosgene Chemical compound ClC(Cl)(Cl)OC(=O)OC(Cl)(Cl)Cl UCPYLLCMEDAXFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000281 trometamol Drugs 0.000 description 1
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 1
- 239000012608 weak cation exchange resin Substances 0.000 description 1
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 1
- ORZHVTYKPFFVMG-UHFFFAOYSA-N xylenol orange Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CC1=C(O)C(C)=CC(C2(C3=CC=CC=C3S(=O)(=O)O2)C=2C=C(CN(CC(O)=O)CC(O)=O)C(O)=C(C)C=2)=C1 ORZHVTYKPFFVMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/06—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/06—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations
- A61K49/08—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by the carrier
- A61K49/10—Organic compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/06—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations
- A61K49/08—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by the carrier
- A61K49/085—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by the carrier conjugated systems
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S977/00—Nanotechnology
- Y10S977/902—Specified use of nanostructure
- Y10S977/904—Specified use of nanostructure for medical, immunological, body treatment, or diagnosis
- Y10S977/927—Diagnostic contrast agent
- Y10S977/928—X-ray agent
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S977/00—Nanotechnology
- Y10S977/902—Specified use of nanostructure
- Y10S977/904—Specified use of nanostructure for medical, immunological, body treatment, or diagnosis
- Y10S977/927—Diagnostic contrast agent
- Y10S977/929—Ultrasound contrast agent
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S977/00—Nanotechnology
- Y10S977/902—Specified use of nanostructure
- Y10S977/904—Specified use of nanostructure for medical, immunological, body treatment, or diagnosis
- Y10S977/927—Diagnostic contrast agent
- Y10S977/93—MRI contrast agent
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Radiology & Medical Imaging (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Magnetic Resonance Imaging Apparatus (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Description
Foreliggende oppfinnelse vedrører ny anvendelse av metall-ionkompiekser av gallesyrekonjugater med molekyler som har gelaterende aktivitet som kontrastmidler i diagnostikktek-nikken kjent som "magnetisk resonans imaging" (MRI), spesielt som blood pool-midler.
Komplekser dannet av gelaterende midler og passende metaller er allerede anvendt som kontrastmidler i de følgende diagnostiske teknikker: røntgen imaging, kjernemagnetisk resonans imaging (MRI) og scintigrafi.
Spesielt anvender medisinske diagnoser som anvender magnetisk resonans imaging (MRI), en anerkjent kraftig diag-nostisk teknikk i klinisk praksis (Stark, D.D., Bradley, W.G., Jr., Eds. "Magnetic Resonance Imaging" The CV. Mosby Company, St. Louis, Missouri (USA), 1988), hovedsakelig paramagnetiske farmasøytiske sammensetninger, fortrinnsvis inneholdende gelaterte komplekser av bi-trivalente paramagnetiske metallioner med polyaminopolykarboksylligander og/eller deres derivater eller analoger.
Bildene, som egentlig fås fra NMR-signaler til vannproto-ner, er resultatet av en kompleks interaksjon mellom forskjellige parametere, slik som protontetthet og Ti- og T2-relaksasjonstider. En kontrastøkning kan oppnås gjennom ad-ministrasjonen av endogene kjemiske substanser som signifi-kant endrer resonansegenskapene til nærliggende vannproto-ner (se Lauffer, R.B. Chem. Rev. 1987, 87, 901).
De paramagnetiske kontrastmidler anvendt for NMR-imaging virker modifiserende på relaksasasjonstidene til vannproto-nene tilstede i vevene hvor kontrastmidlene er konsentrert, og de kan derfor øke kontrasten mellom forskjellige vev eller mellom friske og syke vev.
Paramagnetiske gadoliniumkomplekser har på grunn av deres høye evne til å redusere relaksasjonstider til protonene i nærliggende vannmolekyler gjennom dipolar interaksjon, vært målet for studier, publikasjoner og patenter.
Noen av dem er for tiden i klinisk anvendelse som MRI-kontrastmidler: Gd-DTPA, N-metylglukaminsalt av gadoliniumkomplekset med dietylentriaminopentaeddiksyre, MAGNEVIST®; Gd-DOTA, N-metylglukaminsalt av gadoliniumkomplekset med 1,4,7,10-tetra-azacyklododekan-1,4,7,10-tetraeddiksyre, DOTAREM®; Gd-HPD03A, gadoliniumkompleks med [10-(2-hydroksypropyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-l,4,7-trieddiksyre, PRO-HANCE®; Gd-DTPA-BMA, gadoliniumkompleks med dietylentra-minopentaeddiksyre bis(metylamid), OMNISCAN®.
Kontrastmidlene listet over og kommersielt tilgjengelig er ment for generell anvendelse. Etter administrasjon diffun-derer M.R.I. kontrastmidlene faktisk i blod og i de ekstracellulære områder i forskjellige deler av kroppen før de skylles ut. Med hensyn på dette er de derfor lignende de ioderte forbindelser anvendt for røntgenmedisinsk diagnose.
For tiden trenger den medisinske profesjon kontrastmidler som er rettet mot spesifikke organer eller for avbildning av blodsystemet, som ikke kan bli godt definert ved hjelp av produktene som allerede finnes kommersielt tilgjengelig. Den første tilnærming for å oppnå det sistnevnte består i kovalent binding av kontrastmiddel til makromolekyler, slik som proteiner, eller innglobalisering av det inne i stabile makromolekylære aggregater slik som liposomer, eller videre ved å anvende såkalte superparamagnetiske partikler.
For eksempel ble gadoliniumkomplekset med dietylentriaminopentaeddiksyre (Gd-DTPA) bundet til humant albumin (HSA), polylysin eller dekstran (Oksendal A.N. et al., J. Magn. Reson. Imaging, 157, 1993; Rocklage S.M., "Contrast Agents, Magn. Res. Imaging, Mosby Year Book, 372-437, 1992) for å minimalisere eller til og med undertrykke diffusjonen fra blod inn i det ekstracellulære fluid for således å gi en høyere retensjon av midlet i blodsystemet. En slik til-nærmingsmåte, selv om den ønskede effekt oppnås, lider av ubehagelige bieffekter fordi midlet selv utskilles med vanskelighet.
En annen strategi er anvendelsen av superparamagnetiske partikler belagt med polyetylenglykoler eller hydrokarboner for å redusere det hepatiske opptak av endotelial retikulum eller av andre systemer (Tilcock C, Biochim. Biophys. Acta, 77, 1993; A.A. et al., Radiology, 701, 1993), for således å forlenge varigheten av midlet i blod. Også i dette tilfellet opptrer de ovennevnte bieffekter, samt problemer som skyldes de høye produksjonskostnader.
Fordringen til et effektivt blood pool-middel, som har lav toksisitet og rimelige økonomiske kostnader, er derfor enda ikke møtt.
Den foreliggende oppfinnelse vedrører den nye anvendelse som blood pool-midler av spesifikt valgte forbindelser, allerede tidligere beskrevet av søkeren i internasjonal pa-tentsøknad WO-A-95/32741 for MR-imaging av det hepatobilære system. Nevnte forbindelser resulterer fra konjugeringen av en gallesyre med et gelaterende middel, som er i stand til
å gelatere ionene av paramagnetiske bi-trivalente metaller.
Det har overraskende blitt funnet at en spesifikk klasse av nevnte forbindelser forblir i det vaskulære system i en tilstrekkelig lang tid slik at de er verdifulle for anvendelse som kontrastmidler for avbildningen av det vaskulære system, spesielt for koronarer.
Denne effekt kan klart vises ved å utføre in vivo-tester i dyr (slik som kanin, ape). Varigheten i det vaskulære system kan faktisk visualiseres øyeblikkelig når protonrelak-sjonsverdiene (l/Ti) av blodprøvene fra dyret, tatt ved passende tidsintervaller etter administrasjon av kontrastmidlet, plottes.
Fordi Gd(III)-komplekser er paramagnetiske spesier, bevit-ner høye 1/Ti-verdier om høye konsentrasjoner av kontrastmidlet i blod.
Forskjellen mellom et konvensjonelt ekstracellulært kontrastmiddel og et blood pool-middel er godt klargjort i ar-tikkelen til Lauffer et al., Radiology, 529, 1998 hvor Ti-profiler i blod som en funksjon av tiden tilbakelagt etter adminstrasjonen av kontrastmidlet er rapportert.
Spesielt er kompleksene av den foreliggende oppfinnelse, når de administreres for eksempel til kaninen ved en dose-ring kompatibel med en rimelig sikkerhetsindeks, i stand til å indusere endringer i relaksasjonshastigheter (målt i " Al/Ti) i blod høyere enn 5 s"<1> 10 minutter etter administrasjon, og er således lovende for anvendelse som kontrastmidler for avbildning av det vaskulære system.
Det har blitt funnet at denne type effekt ikke bare kan være relatert til nærværet av gallesyrer, men den avhenger av kompleksenes kjemiske struktur. Det synes faktisk som om den gelaterende enhet fortrinnsvis bør være bundet til det steroidale skjelett gjennom en binding i 3-, 7- eller 12-stillingen på gallesyren.
Det har faktisk blitt vist at enhver binding mellom den gelaterende enhet og gallesyren som involverer karboksylgrup-pen i 24-stillingen ville gi - komplekser som har utilfreds-stillende varighet i det vaskulære system.
Foreliggende oppfinnelse vedrører således anvendelse av det gelaterte kompleks av bi-trivalente paramagnetiske metallioner valgt fra gruppen bestående av Fe(<2+>), Fe(<3+>), Cu(<2+>>, Cr(<3+>), Gd(<3+>), Eu(<3+>), Dy(3+), Yb(3+) eller Mn(<2+>) med forbindelsene med formel (I), samt saltene derav med fysiologisk kompatible organiske baser valgt fra primære, sekundære, tertiære aminer eller basiske aminosyrer, eller med uorganiske baser hvis kationer er natrium, kalium, magnesium, kalsium eller blandinger derav:
hvori:
X er resten av en polyaminokarboksylligand eller derivater derav, valgt fra gruppen bestående av etylendiaminote-traeddiksyre (EDTA), dietylentriaminopentaeddiksyre (DTPA), 1,4,7,10-tetraazacyklododekan-l,4,7,10-tetraeddiksyre (DOTA), 1,4,7,10-tetraazacyklododekan-l,4,7-trieddiksyre (D03A), [10-(2-hydroksypropyl)-1,4,7,10-tetraazacyklodo-dekan-l, 4 , 7-trieddiksyre (HPD03A), 4-karboksy-5,8,11-tris(karboksymetyl)-1-fenyl-2-oksa-5,8,11-triazatridekan-13-syre (BOPTA); Y er derivatet av en gallesyre valgt fra gruppen bestående av restene av kol-, kenodeoksykol-, deoksykol-, urso-deoksykol-, litokolsyrer,
både som sådan og funksjonalisert i stillingene som har hydroksygruppen som den reaktive gruppe, uavhengig av stereokjemien til sluttproduktene,
derivatene omfatter også konjugatet av syregruppen i 24-stillingen med taurin og glysin;
L er en kjede bundet til en hvilken som helst stilling i X, eventuelt omfattende en av karboksylgruppene som således transformeres til en amidgruppe, og til C-3-, C-7-, Om-stillingene i Y, som har den følgende formel (II)
hvor
m er et heltall som strekker seg fra 1 til 10, hvori for verdier over 1, A kan ha forskjellige betydninger,
A har den følgende formel (III),
n og q kan være 0 eller 1, men er ikke på samme tid null,
P kan strekke seg fra 0 til 10,
Z er et oksygenatom eller en -NR-gruppe,
hvor
R er et hydrogenatom, eller en (C1-C5)-alkylgruppe usubstituert eller substituert med en -COOH-gruppe;
for fremstillingen av diagnostiske formuleringer for å oppnå bilder av blodsystemet i det humane eller animalske legeme, ved hjelp av kjernemagnetisk resonans.
Spesielt foretrukne forbindelser er de hvor avstandskjedene L har de følgende generelle formler (Illa) og (Illb).
Også foretrukket er strukturene hvor Z er oksygenatomet og L derfor er dannet gjennom hydroksygruppene tilstede i 3-, 7-, 12-stillingene, uavhengig av stereokjemien til sluttproduktene .
Spesielt foretrukne er forbindelsene med formelen (I) hvor resten X er valgt fra gruppen bestående av EDTA, DTPA, DOTA, D03A, BOPTA; L er valgt fra gruppen bestående av (Illa), (Illb);
Y er fortrinnsvis valgt fra gruppen bestående av restene av kol-, deoksykol-, kenodeoksykol-, litokolsyrer, bundet til L med en aminogruppe i 3-stillingen og syregruppen i 24-stillingen er tilstede som den er eller som dens taurin-eller glycinderivat.
Y kan også være funksjonalisert annerledes, for eksempel gjennom konversjon av en eller flere hydroksygrupper til ketogrupper.
Spesielt foretrukne komplekser med paramagnetiske metallioner definert over er kompleksene med gadolinium eller med mangan.
Foretrukket er forbindelsene med generell formel (IV), hvori generell formel (I) resten X er DTPA, substituert på sentralkjeden, og hvor Ri er et hydrogenatom eller -COOH-gruppen,
Y er valgt fra gruppen bestående av kol-, deoksykol-, kenodeoksykol-, litokolrester og L har strukturen med formelen
(III) .
Spesielt foretrukne er forbindelser med generell formel
(IVa)
hvor Ri er -COOH-gruppen og Y har betydningene definert over for forbindelsene med generell formel (IV) og L har strukturene (Illa) eller (Illb). Ytterligere mål for den foreliggende oppfinnelse er anvendelsen av de følgende forbindelser, som tilhører klassen med generell formel (IVa); [3p(S),50]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]etyl]-amino]-4-karboksy-l-oksobutyl](karboksymetyl)amino]kolan-24-syre [30(S),5p]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]etyl]-amino]-4-karboksy-l-oksobutyl]amino]kolan-24-syre; [3p(S),50,7p]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]etyl]-amino]-4-karboksy-l-oksobutyl]amino]-7-hydroksykolan-24-syre; [3a(S),5p]-3-[2[-[5-[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]etyl]-amino]-4-karboksy-l-oksobutyl]-amino]]kolan-24-syre; [3P(S),5p]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]etyl]-amino]-4-karboksy-l-oksobutyl]amino]-12-oksokolakolan-24-syre; [3p(S),5p,7a]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]-etyl]amino]-4-karboksy-l-oksobutyl]amino]-7-hydroksykolan-24-syre; N2-bis [2- [bis (karboksymetyl) amino] etyl] -N- [ (3(3, 5p, 7a, 12a) - 7,12-dihydroksy-24-okso-24-[(2-sulfoetyl)amino]kolan-3-yl]-L-glutamin N2-bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]etyl]-N-[(3p,5p) -24-okso-24-[(2-sulfoetyl)amino]kolan-3-yl]-L-glutamin; [3p(S),5p,12a]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]-etyl]amino]-4-karboksy-l-oksobutyl]amino]-12-hydroksykolan-24-syre; [3p(R),5p, 12a]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]-etyl]amino]-4-karboksy-l-oksobutyl]amino]-12-hydroksykolan-24-syre; [3p(RS),5p,12a]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]-etyl]amino]-4-karboksy-l-oksobutyl]amino]-12-hydroksykolan-24-syre; [3a(S),5p,12a]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]-etyl]amino]-4-karboksy-l-oksobutyl]amino]-12-hydroksykolan-24-syre; [3p(RS),5p,7a,12a]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboksymetyl)-amino]etyl]amino]-4-karboksy-l-oksobutyl]amino]-7,12-dihydroksykolan-24-syre; [3a(S),5p,7a,12a]-3-[[[[5-[bis[2-[bis(karboksymetyl)-amino]etyl]amino]-5-karboksypentyl]amino]karbonayl]oksy]-7,12-dihydroksykolan-24-syre; [3a(S),5p]-3-[2[[5-[bis[2-[bis(karboksymetyl)-amino]etyl]amino]-5-karboksypentyl]amino]-2-oksoetok-sy]kolan-24-syre;
Andre forbindelser som tilhører denne klasse, hvis komplekser med gadolinium har blitt beskrevet i patentsøknad WO-A-95/32741, er de følgende: [3P(S),5P,7a,12a]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]-etyl]amino]-4-karboksy-l-oksobutyl]amino]-7,12-dihydroksykolan-24-syre; [3P(S),5p,7a,12a]-3-[[4-[[5-[bis[2-[bis(karboksymetyl)-amino]etyl]amino]-5-karboksypentyl]amino]-1,4-dioksobu-tyl]amino]-7,12-dihydroksykolan-24-syre; Også foretrukket er forbindelsene med generell formel (IVb), som også er DTPA-derivater substituert i sentral-stillingen, hvor Y har betydningene definert over for forbindelser med formel (IV) og L har strukturen (Illa). Den foreliggende oppfinnelse vedrører videre anvendelsen av de følgende forbindelser, som tilhører klassen med generell formel (IVb): [3p, 5(3, 7a, 12a]-3-[[ [bis [2-[bis (karboksymetyl) amino]etyl]amino]acetyl]amino]-7,12-dihydroksykolan-24-syre (3P,5P)-3-[[[[[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]etyl]amino]-acetyl]amino]acetyl]amino]kolan-24-syre
Andre forbindelser som tilhører denne klasse, hvis komplekser med gadolinium har blitt beskrevet i patentsøknad WO-A-95/32741, er de følgende: (3p,5p,7a,12a)-3-[[[[[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]-etyl]amino]acetyl]amino]acetyl]amino)-7,12-dihydroksykolan-24-syre; (3p,5p,7a,12a)-3-[[6[[[bis[2-{bis(karboksymetyl)amino]-etyl]amino]acetyl]amino]-1-oksoheksyl]amino]- 1,12-dihydroksykolan-24-syre;
Spesielt foretrukne er også forbindelsene med generell formel (V), hvori generell formel (I) resten X er DTPA, Y har betydningen definert over for forbindelser (IV) og L har strukturen med formelen {Illa).
Andre forbindelser som tilhører denne klasse, hvis komplekser med gadolinium har blitt beskrevet i patentsøknad WO-A-95/32741, er de følgende: (3p,5p,7a,12a)-3-[[N-[N-[ 2-[[ 2-[bis(karboksymetyl)-amino]etyl](karboksymetyl)amino]etyl]-N-(karboksymetyl)gly-kyl]glykyl]amino]-7,12-dihydroksykolan-24-syre; 18-[[(3p,5p,7a,12a)-23-karboksy-7,12-hydroksy-24-norkolan-3-yl]amino]-3,6,9-tris(karboksymetyl)-11,18-diokso-3,6,9,12-tetraazaoktadekansyre.
Også foretrukne er forbindelsene med formelen (VI), hvori formelen (I) resten X er D03A, Y har betydningen definert over for forbindelser med formelen (IV) og L er valgt fra strukturene (Illa) og (Illb).
Blant forbindelsene med formelen (VI), er 10-[3-[[(3a,50,7a,120)-23-karboksy-7,12-dihydroksy-24-norkolan-3-yl]oksy]-2-hydroksypropyl]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-1,4,7-trieddiksyre spesielt foretrukket, hvis kompleks med gadolinium har blitt beskrevet i patentsøknad WO-A-95/32741.
Likeledes er forbindelsene med generell formel (VII) foretrukket, hvori formel (I) resten X er EDTA, Y har betydningen definert over for forbindelser med formel (IV) og L har strukturen med formel (III).
Spesielt foretrukne er kompleksene av forbindelser med formel (VII) med mangan.
Blant forbindelsene med formel (VII) er de følgende spesielt foretrukne: [3a(S),5p,12a]-3-[[[[5-[[2-[bis(karboksymetyl)amino]-etyl](karboksymetyl)amino]-5-karboksypentyl]amino]kar-bonayl]oksy]-12-hydroksykolan-24-syre [3p(S),5p,7a,12a]-3-[[4-[[5-[[2-[bis(karboksymetyl)-amino]etyl](karboksymetyl)amino]-5-karboksypentyl]amino]-1,4-dioksobutyl]amino]-7,12-dihydroksykolan-24-syre [3a(S),5P]-3-[2-[[5-[[2-[bis(karboksymetyl)amino]-etyl](karboksymetyl)amino]-5-karboksypentyl]amino]-2-oksoetoksy]kolan-24-syre [3p(S),50,12a]-3-[[4-[[2-[[bis(karboksymetyl)amino]-etyl](karboksymetyl)amino]-4-karboksy-l-oksobutyl]amino]-12-hydroksykolan-24-syre
m [3p(S),5P]-3-[[4-[[2-[[bis(karboksymetyl)amino]-etyl](karboksymetyl)amino]-4-karboksy-l-oksobutyl]amino]-12-oksokolan-24-syre
Forbindelsene med generell formel (I) kan fremstilles ved
■fremgangsmåten med konvergent syntese som omfatter:
1) syntese av en funksjonalisert ligand, dvs. av en ligand som er i stand til å koordinere et paramagnetisk metallion mens den binder stabilt til gallesyren ved hjelp av en passende funksjonell gruppe; 2) syntese av en funksjonalisert gallesyre; 3) koblingsreaksjon mellom de to forskjellige syntoner; 4} spalting av alle beskyttelsesgrupper; 5) kompleksering av det paramagnetiske metallion; illustrert i detalj i den ovennevnte patentsøknad WO-A-95/32741.
Noen av de foretrukne fremgangsmåter ved fremstilling av ligandene av den foreliggende oppfinnelse involverer dannelsen av en amidbinding mellom to syntoner, en av de er forløperen til det gelaterende system av det paramagnetiske ion {Synton A), den andre er forløperen til gallesyreresten inneholdt i sluttkomplekset {Synton B).
Fremgangsmåtene beskrevet heri under skal ikke anses som begrensende for syntesen av forbindelsene av den foreliggende oppfinnelse.
Amidbindingen kan dannes:
a) ved å reagere Syntoner A inneholdende en karboksyl-funksjon med Syntoner B inneholdende en primær eller sekundær aminofunksjon; b) ved å reagere Syntoner A inneholdende en primær eller sekundær aminofunksjon med Syntoner B inneholdende en kar-bo ks yl fun ks j on ; c) ved å reagere DTPA-dianhydrid {kommersielt tilgjengelig produkt) med en Synton B inneholdende en primær eller
sekundær aminosyrefunksjon.
En liste med noen av syntonene A og B anvendt for denne oppfinnelse er rapportert i den følgende tabell. De anvendte syntoner er selvfølgelig passende beskyttet på de grupper som kunne gi opphav til parasittiske reaksjoner under de anvendte betingelser for dannelsen av amidbindingen. Etter dannelse av amidbindingen mellom de to syntoner, bør et eller flere avbeskyttingstrinn for gjenoppretting av de originale grupper forventes.
Alternativt til denne type prosesser kan det gelaterende subenhet introduseres ved multitrinnsreaksjoner startende fra et gallesyrederivat, hvilket er tilfelle i syntesen av forbindelsen beskrevet i eksempel 3 i den eksperimentelle del, illustrert i det følgende skjema 1.
En ny fremgangsmåte er illustrert i det følgende skjema 2:
hvor
R4 er en aminobeskyttende gruppe;
R5 er et rett eller forgrenet C1-C10 alkyl eller aryl,
R2 og R3 er uavhengige et hydrogenatom, rett eller forgrenet C1-C20 alkyl, usubstituert eller substituert med arylgrupper, eller gruppene danner en C3-C10 cykel;
hvilken fremgangsmåte gjør bruk av en transamideringsreak-sjon og tillater opprettholdelse av stereokjemien ved det kirale senter nær nitrogenatomet i startpyrrolidinonen og gir et sekunært amid. Det kombinerte valg av grupper R4 og R5 er viktig idet spalting skal skje under vekslende betingelser. Mulige eksempler på R4 er karbobenzyloksy (Cbz)-gruppen og på R5 er metylgruppen eller t-butylgruppen.
Denne fremgangsmåte er generelt appliserbar for å oppnå glutaminsyre y-amider og den er svært nyttig og fordelaktig ved fremstillingen av forbindelsene, spesielt glutaminsyre y-amider med 3-aminoderivater av rester i, som definert over. Faktisk tillater den å oppnå sluttforbindelsen og unngår anvendelsen av de dyre kondensasjonsmidler for dannelsen av y-amidobindingen mellom glutaminsyre og det korresponderende amin.
Et eksempel på anvendelsen av denne fullstendig nye synte-seprosedyre er syntesen av [30(S),50,12a]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboksymetyl)-amino]etyl]amino]-4-karboksy-l-oksobutyl] amino] -12-hydroksykolan-24-syre, hvis konvensjonelle syntese er rapportert i eksempel 4 i den eksperimentelle del, mens derimot den alternative er rapportert i eksempel 5 og det fullstendige synteseskjema er vist i det følgende s kj erna 3.
Analogt ble kolsyrederivatet allerede beskrevet i patent-søknad WO-A-95/32741, [3p(S),5p,7a,12a]-3-[[4-[bis[2- .
[bis(karboksymetyl)amino]etyl]amino]-4-karboksy-l-oksobutyl] amino]-7,12-dihydroksykolan-24-syre fremstilt.
Metallioner passende for å danne komplekssalter med de gelaterende midler med generell formel (I) er de bivalente eller trivalente ioner av elementene valgt fra gruppen bestående av: Fe(<2+»>, Fe(<3+>), Cu(2+\ Cr(<3+>), Gd(3+), Eu(<3+>>, Dy<<3+>), Yb(<3+>) eller Mn<<2+>).
Hva gjelder den diagnostiske anvendelse av de nye gelaterte komplekser av oppfinnelsen, kan de anvendes som kontrastmidler, spesielt for anvendelse som blood pool-midler i den avbildende diagnostiske teknikk ved hjelp av magnetisk resonans .
Fremstillingen av kompleksene utføres konvensjonelt, i henhold til en fremgangsmåte hvor oksidet eller det passende salt av det paramagnetiske metall, løst i vann eller suspendert i en vann-alkoholløsning, tilsettes til en vandig eller vann-alkoholløsning av det gelaterende middel, under omrøring og, om nødvendig, varmet mildt eller til koketem-peraturen, inntil fullførelse av reaksjonen. Hvis komplek-set er uløselig i reaksjonsløsningsmidlet, kan det filtreres. Hvis det er løselig, kan det gjenvinnes ved å dampe av løsningsmidlet til et residu, for eksempel ved spray-tørking.
I tilfelle det resulterende kompleks fremdeles inneholder frie syregrupper, kan det transformeres til et nøytralt salt ved reaksjon med en organisk eller uorganisk base som danner fysiologisk kompatible kationer i løsninger.
For fremstillingen av disse nøytrale salter kan en tilstrekkelig mengde av basen tilsettes til kompleksene inneholdende frie syregrupper i vandig løsning eller suspensjon til nøytralitet. Den resulterende løsning kan således passende dampes inn eller et passende løsningsmiddel kan tilsettes for å krystallisere komplekssaltet.
Foretrukne uorganiske kationer egnet for å danne salt med de gelaterte komplekser av oppfinnelsen omfatter spesielt alkali- eller alkalijordmetallioner slik som kalium, natrium, kalsium, magnesium og blandingene derav. Spesielt foretrukket er natriumionet.
Foretrukne kationer avledet fra organiske baser er egnet for det ovennevnte formål omfatter, inter alia, de av primære, sekundære og tertiære aminer, slik som etanolamin, dietanolamin, morfolin, glukamin, N-metylglukamin, N,N-di-metylglukamin, N-metylglukamin er spesielt foretrukket. Foretrukne kationer avledet fra aminosyrer omfatter, for eksempel, de fra taurin, glysin, lysin, arginin eller orni-tin.
Et alternativ til denne fremgangsmåte består i å fremstille den injiserbare formulering uten å isolere komplekssaltet. I dette tilfellet er det påbudt at sluttløsningene ikke inneholder frie metallioner, som er toksiske for kroppen.
Dette kan sjekkes ved titrering, for eksempel, med fargede indikatorer slik som Xylenol Orange. Et endelig rensetrinn av komplekssaltet kan også forutses.
I denne type fremgangsmåte reageres gelateringsmidlet, saltet eller metalloksidet, og alle saltdannende baser, i
de støkiometriske forhold i vann for injeksjoner, deretter, etter fullføring av reaksjonen, filtreres pyrogener og produktet fordeles i egnede beholdere og steriliseres deretter termisk.
De injiserbare farmasøytiske formuleringer fremstilles typisk ved å løse opp den aktive ingrediens, fremstilt som beskrevet over, og eksipientene i vann av passende renhet fra det farmakologiske synspunkt, fordi en farmasøytisk formulering egnet for den enterale eller parenterale administrasjon, i konsentrasjoner som strekker seg fra 0,01 til 1,0 molar. Det resulterende kontrastmiddel steriliseres passende.
Kontrastmidlene administreres, avhengig av de diagnostiske krav, ved en dose på 0,01-0,3 mmol/kg kroppsvekt.
I prinsippet strekker dosene for den parenterale administrasjon seg fra 0,001 til ca. 1,0 mmol/kg kroppsvekt. De foretrukne doser for den parenterale adminstrasjon strekker seg fra 0,01 til ca. 0,5 mmol/kg kroppsvekt.
Dosene for den enterale administrasjon strekker seg, generelt, fra 0,5 til ca. 10 mmol/kg, og fortrinnsvis fra ca. 1,0 til ca. 10 mmol/kg kroppsvekt.
De nye formuleringer av den foreliggende oppfinnelse viser god tolererbarhet; dessuten er deres vannløselighet et videre, viktig trekk som gjør dem spesielt egnet for anvendelse i kjernemagnetisk resonans.
De diagnostiske sammensetninger av den foreliggende oppfinnelse anvendes konvensjonelt. Sammensetningene kan administreres til en pasient, typisk et varmblodig dyr, både systemisk og topisk i organet eller i vevet som skal visualiseres ved magnetisk resonans.
Analyseprotokollene og apparatene kan bli funnet i arbeider slik som Stark, D.D., Bradley, W.G., Magnetic Resonance Imaging, Mosby Year Book, St. Louis, Mo, 1992.
De anvendte eksperimentelle betingelser vil bli illustrert
i detalj i den eksperimentelle delen.
Eksperimentell del
EKSEMPEL 1
Gadolinumkompleks av [3p (S),50]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboksymetyl) amino]etyl]amino]-4-karboksy-l-oksobutyl]-amino]kolan-24-syre omdannet til salt med 1-deoksy-l-(metylamino)-D-glukitol (1:3) A) [30(S) ,50]-3-t[5-(1,1-dimetyletoksy)-4-[bis[2-[bis[2-(1,1-dimetyletoksy)-2-oksoetyl]amino]-etyl]amino]-1,5-di-oksopentyl]amino]kolan-24-syremetylester 3,6 g, (30,50)-3-aminokolan-24-syremetylester (fremstilt analogt med prosedyren beskrevet i WO-A-95/32741: eksempel 5) (9,24 mmol), 8,5 g N,N-bis[2-[bis[2-(1,1-dimetyloksy)-2-oksoetyl]amino]-etyl]-L-glutaminsyre-t-butylester (fremstilt som beskrevet i WO-A-95/32741: eksempel 15) (11,39 mmol) og 1,64 g dietylcyanofosfonat (9,39 mmol) løses i 160 ml DMF. Løsningen avkjøles til 0°C, 1,28 ml Et3N (9,24 mmol) dryppes deri og reaksjonsblandingen etterlates i 30 minutter ved romtemperatur. Etter 1 time dampes løsningen inn under redusert trykk, residus tas opp i EtOAc, vaskes med 5% Na-HC03 og deretter med saltløsning. Den organisk fase separeres, tørkes over Na2S04 og dampes deretter inn under redusert trykk. Råproduktet renses ved flashkromatografi for å erholde 9,5 g av det ønskede produkt (8,50 mmol).
Utbytte: 92%
K.F.: 3,47%
a etter tørking ved 120°C under vakuum
TLC: Stasjonær fase: silikagelplate 60F 254 fra Merck Eluent =4:6 EtoAc/n-heksan
Deteksjon: 0,5% Kmn04 i 1 M NaOH Rf= 0,46
<1>H-NMR, <13>C-NMR, IR og MS spektrene er konsistente med den indikerte struktur. B) [30(S),50]-3-[[4-karboksy-4-[bis[2-[bis(karboksy-etyl)amino]etyl]amino]-1-oksobutyl]amino]kolan-24-syre metylester.
En omrørt løsning av 9,3 g med forbindelsen fremstilt i trinn A) (8,32 mmol) i 50 ml CH2C12 tilsettes 5,1 ml CF3COOH (66,6 mmol); etter 10 minutter ved en temperatur på 0-5°C dampes løsningen inn. Residue tas opp i 50 ml CF3COOH og, etter 24 timer ved romtemperatur, tilsettes ytterligere 30 ml CF3COOH for å fullføre reaksjonen. Etter 5 timer dampes reaksjonsblandingen inn og residuet behandles med CH2CL2, hver gang inndampende løsningsmiddel under redusert trykk inntil et pulver oppnås. Det faste stoff vaskes med H20, filtreres og tørkes for å erholde det ønskede produkt (6,9 g; 8,24 mmol).
Utbytte: 99% smp.: 205°C
K.F.: 7,78%
a etter tørking ved 120°C under vakuum
TLC: Stasjonær fase: silikagelplate 60F 254 Merck
Eluent =6:4:1 CHCl3/MeOH/25% NH4OH.
Deteksjon: 0,5% Kmn04 i 1 M NaOH Rf= 0,28
<1>H-NMR, <13>C-NMR, IR og MS spektrene er konsistente med den indikerte struktur. C) [3p(S),5p]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboksymetyl)-amino]etyl]amino]-4-karboksy-l-oksobutyl]amino]kolan-24-syre.
En suspensjon av 6,14 g av forbindelsen fremstilt i trinn B) (7,33 mmol) i 50 ml H20 tilsettes 50 ml 1 M NaOH (50 mmol) som holder pH lik 13 ved hjelp av et pH-statapparat. Etter 2 timer ved romtemperatur surgjøres reaksjonsblandingen (pH 0,5) med 12 M HC1 for å gi en suspensjon som filtreres, vaskes med H20 og tørkes for å gi det ønskede produkt (5,64 g; 6,85 mmol).
Utbytte: 93% smp.: 205°C
K.F.: 9,02%
a etter tørking ved 120°C under vakuum
TLC: Stasjonær fase: silikagelplate 60F 254 Merck
Eluent =6:4:1 CHCl3/MeOH/25% NH4OH
Deteksjon: 0,5% Kmn04 i 1 M NaOH Rf= 0,25
<1>H-NMR, <13>C-NMR, IR og MS spektrene er konsistente med den indikerte struktur. D) Gadoliniumkompleks av [3p(S),5p]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]etyl]amino]-4-karboksy-l-oksobutyl] amino] kolan-24-syre omdannet til salt med 1-deoksy-l-(metylamino)-D-glukitol (1:3).
4,53 g av forbindelsen fremstilt i trinn C) (5,5 mmol) suspenderes i 50 ml H20 og løses med 10 ml 2 M meglumin vandig løsning (20 mmol) for å oppnå en løsning ved pH 6,8. Etter det, tilsettes 11 ml 0,5 M GdCl3 vandig løsning (5,5 mmol)
i en 1 time, pH holdes ved 6,8 ved tilsetting av 6,5 ml 2 M meglumin vandig løsning (13 mmol). Reaksjonens progresjon
måles ved kapillær elektroforese. Etter 2 timer filtreres løsningen gjennom en Millipore® membran, nanofiltreres og dampes inn. Residuet tørkes for å gi den ønskede forbindelse (6,15 g); 4,17 mmol).
Utbytte: 76% smp.: 220°C
K.F.: 8,44%
CE assay: 100% (areal%)
%funnet:<a> 47,83 7,36 10,01 6,24 <0,1
a etter tørking ved 120°C under vakuum
IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
De følgende forbindelser og de beslektede gadoliniumkomplekser fremstilles analogt: Gadoliniumkompleks av [3P(S),5p,7p]-3-[[4-[bis[2-[bis-(karboksymetyl)amino]etyl]amino]-4-karboksy-l-oksobutyl]-amino]-7-hydroksykolan-24-syre omdannet til salt med 1-deoksy-1-(metylamino)-D-glukitol (1:3);
Gadoliniumkompleks av [3a(S),5P]-3-[2[-[5-[bis[2-[bis-(karboksymetyl)amino]etyl]amino]-5-karboksypentyl]amino]-2-oksoetoksy]kolan-24-syre omdannet til salt med 1-deoksy-l-(metylamino)-D-glukitol (1:3);
EKSEMPEL 2
Gadoliniumkompleks av [3p(S),5p]-3-[[4-[bis[2-[bis-(karboksymetyl)amino]etyl]amino]-4-karboksy-l-oksobutyl] amino] -12-oksokolan-24-syre omdannet til salt med 1-de-oksy-1-(metylamino)-D-glukitol (1:3);
A) (3P, 5p)-3-azido-12-oksokolan-24-syre-metylester 12,5 ml av Jones reagens [33,3 mmol Cr(VI)] dryppes til en løsning av 17,8 g (30,50,12a)-3-azido-12-hydroksykolan-24-syre-metylester (41,1 mmol) (fremstilt analogt med frem-gangsmåten beskrevet for (30, 50, 7a,12a)-3-azido-7,12-hydroksykolan-24-syre-metylester i WO-A-95/32741: eksempel 5) i aceton (600 ml) i 90 minutter ved romtemperatur. Etter 20 timer filtreres blandingen og løsningen dampes inn. Residuet løses i CHCI3 (400 ml) og løsningen vaskes med mettet vandig NaHC03 deretter med H2O. Løsningen tørkes og dampes inn for å gi et råprodukt som krystalliseres fra 96% EtOH for å erholde 14,1 g av det ønskede produkt (32,9 mmol).
Utbytte: 84% smp.: 153°C
K.F.: < 0,1%
[a]<20>D = +83,25 (c 2,1, CHC13)
TLC: Stasjonær fase: silikagelplate 60F 254 Merck.
Eluent =8:2 n-heksan/EtOAc
Deteksjon: 0,5% Kmn04 i 1 M NaOH Rf= 0,43
<1>H-NMR, <13>C-NMR, IR og MS spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
B) (30,50)-3-amino-12-oksokolan-24-metylsyreester
En løsning av 16,4 g med forbindelse A) (38,2 mmol) i THF (130 ml) hydrogeneres i nærvær av 5% Pd/C (1,6 g) ved romtemperatur og ved 40 bar i 15 timer i en Parr®-autoklav. Reaksjonsblandingen filtreres (papir og FH 0,5 um Millipore®-membran) og dampes inn. Råproduktet renses ved flashkromatografi for å gi 11,8 g av det ønskede produkt (29,2 mmol).
Utbytte: 77% smp.: 129-130°C
K.F.: 1,04%
[a]<20>D = +87,8 (c 2,02, CHC13)
TLC: Stasjonær fase: silikagelplate 60F 254 Merck.
Eluent = 95 : 5 MeOH/Et3N
Deteksjon: 0,5% Kmn04 i 1 M NaOH Rf= 0,31
<1>H-NMR, <13>C-NMR, IR og MS spektrene er konsistente med den indikerte struktur. C) [3(3(S),5p]-3-[[4-[bis[2-[bis[2-(1,1-dimetyletoksy)-2-oksoetyl]amino]etyl]amino]-5-(1,1-dimetyletoksy)-1,5-dioks-opentyl]amino]-12-oksokolan-24-syre metylester.
En løsning av DCC (6,24 g; 30,3 mmol) i CH2C12 (25 ml) dryppes over 30 minutter til en løsning av N,N-bis[2-[bis-[2-(1,1-dimetyletoksy)-2-oksoetyl]amino]etyl]-L-glutaminsyre 1-(1,1-dimetyletyl)ester (fremstilt som beskrevet i WO-A-95/32741: eksempel 15) (21,5 g; 28,9 mmol), forbindelse B) (11,1 g; 27,5 mmol) og HOBT (1-hydroksybenzotri-azol) (3,72 g; 27,5 mmol) i CH2C12 (300 ml) ved 0°C under nitrogen. Blandingen etterlates for å varme til romtemperatur. Etter 21 timer filtreres reaksjonsblandingen og løs-ningen vaskes med NaHC03 mettet vandig løsning, deretter H20, og dampes deretter inn. Råproduktet renses ved flashkromatografi for å gi 24,5 g av det ønskede produkt
(21,7 mmol).
Utbytte: 79%
[a]<20>D = +12,17 (c 2,07, CHC13)
TLC: Stasjonær fase: silikagelplate 60F 254 Merck.
Eluent =1:1 EtOAc/n-heksan
Deteksjon: 0,5% Kmn04 i 1 M NaOH Rf= 0,45
<X>H-NMR, <13>C-NMR, IR og MS spektrene er konsistente med den indikerte struktur. D) [30(S),5p]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]-etyl]amino]-4-karboksy-l-oksobutyl]amino]-12-oksokolan-24-syre. 80 ml TFA (1,0 mol) dryppes i en løsning av 23,8 g med forbindelsen fremstilt i trinn C) (21,0 mmol) i CH2C12 (50 ml) ved 0°C, over 1 time. Reaksjonsblandingen omrøres i romtemperatur deretter, etter 2 timer, dampes den inn. Residuet tas opp i TFA (100 ml; 1,3 mol) og løsningen omrøres i ytterligere 24 timer. Reaksjonsblandingen dampes deretter inn, tas opp i CH2C12 og dampes igjen inn. Råproduktet lø-ses i 150 ml 1 M NaOH, avkjøles med et isbad og løsningen omrøres i 15 timer (pH 10) ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen justeres til pH 13 med 3,30 ml 30% NaOH og, etter 4 timer, filtreres den gjennom en Millipore®-membran (HAS 0,45 pm). Filtratet surgjøres med 12,5 ml 30% HC1 og 19 ml 1 M HC1 til pH 1,60. Presipitatet filtreres, vaskes med H20 og tørkes for å gi 15,8 g av det ønskede produkt (18, 9 mmol).
Utbytte: 90% smp.: 172-175°C
K.F.: 1,98%
[a]<20>D = +43,54 (c 2,02, 1 M NaOH)
HPLC: 97% (areal%)
Stasjonær fase: Zorbax ECLIPSE XDB-C8 3,5 um;150 x 4,6 mm; Temperatur: 40°C;
Mobil fase: gradienteluering;
A = 0,017 M H3PO4, 0,3 mM EDTA i H20;
B = CH3CN
Strømningshastighet: 1,5 ml min 1; Deteksjon (UV): 210 nm;
TLC: Stasjonær fase: silikagelplate 60F 254 Merck
Eluent: 5:4:2 CHCl3/MeOH/25% NH40H Rf= 0,28
<1>H-NMR, <13>C-NMR, IR og MS spektrene er konsistente med den indikerte struktur. E) Gadoliniumkompleks av [3p(S),5p]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]etyl]amino]-4-karboksy-l-oksobutyl] amino] -12-oksokolan-24-syre omdannet til salt med 1-de-oksy-1-(metylamino)-D-glukitol (1:3).
49,0 ml 0,918 M meglumin vandig løsning (45,0 mmol) dryppes inn i en suspensjon av 14,0 g med forbindelsen fremstilt i trinn D) (16,7 mmol) i H2O (100 ml), ved romtemperatur, for å gi en klar løsning (pH 6,5). 31,6 ml 0,503 M GdCl3 vandig løsning (15,9 mmol) dryppes deri pH holdes ved 6,5 med tilsetting av 55,7 ml 0,918 M meglumin vandig løsning
(51,1 mmol) ved hjelp av en pH-stat. Ved slutten av tilsettingen filtreres blandingen gjennom en Millipore®-membran (HAWP 0,45 um), nanofiltreres, justeres til pH 7,0 med 0,100 ml 0,918 M meglumin vandig løsning (0,092 mmol) og dampes inn. Residuet tørkes for å gi 22,0 g av det ønskede
produkt (14,0 mmol).
Utbytte: 84% smp.: 100-105°C
K.F.: 5,06%
HPLC-analyse: 97% (areal%)
Stasjonærfase: HYPURITY™ Elite C18 5 um; 250 x 4,6 mm kolonne av Hypersil;
Temperatur: 40°C;
Mobilfase: gradienteluering;
A = 0,01 M KH2P04 i vann;
B = CH3CN
Strømningshastighet: 1 ml min 1; Deteksjon (UV): 210 nm;
IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
EKSEMPEL 3
Gadoliniumkompleks av [30,50,7a,12a]-3-[[[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]etyl]amino]acetyl]amino]-7,12-dihydroksykolan-24-syre omdannet til salt med 1-deoksy-l-(me-tylamino) -D-glukitol (1:2);
A) [3P,5P, 7a,12a]-3-[[[bis[2-[bis[2-(1,1-dimetyl-etoksy)-2-oksoetyl]amino]etyl]amino]acetyl]amino]-7,12-dihydroksykolan-24-syre-metylester
24,8 g (3p,5P,7a,12a)-3-[(aminoacetyl)amino]-7,12-dihydroksykolan-24-syre-metylester (fremstilt i henhold til prosedyren beskrevet i WO-A-95/32741: eksempel 5) (51,9 mmol) suspenderes i en omrørt løsning av 38,7 g N-(2-brometyl)-N-[2-(1,1-dimetyloksy)-2-oksoetyl]glysin-1,1-dimetyletylester (fremstilt i henhold til prosedyren beskrevet i WO-A-95/32741: eksempel 15) (110 mmol) i 390 ml CH3CN. Tilsettingen av 245 ml 2 M fosfatbuffer pH 8 gir en bifasisk løs-ning som omrøres kraftig ved romtemperatur i 144 timer. Den organiske fase separeres og dampes inn og restoljen løses i 250 ml CH2CI2. Løsningen vaskes med H20, tørkes (Na2S04) og
dampes inn. Råproduktet renses med flashkromatografi (eluent = 95 : 5 CHCI3/CH3OH) for å gi det ønskede produkt (24, 8 g; 24, 3 mmol) .
Utbytte: 47%
[a]<20>D = +9,45 (c 1,5, CHC13)
TLC: Stasjonær fase: silikagelplate 60F 254 Merck
Eluent = 88 : 12 CHci3/MeOH
Deteksjon: 0,5% Kmn04 i 1 M NaOH Rf= 0,57
<1>H-NMR, <13>C-NMR, IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
B) [3p,5P,7a,12a]-3-[[[bis[2-[bis(karboksymetyl)-amino]etyl]amino]acetyl]amino]-7,12-dihydroksykolan-24-syre
318 ml 2 M LiOH vandig løsning (636 mmol) tilsettes dråpevis, over 15 minutter, til en løsning av forbindelsen fremstilt i trinn A) (21,6 g; 21,1 mmol) i 310 ml EtOH. Etter 23 timer dampes EtOH inn og reaksjonsblandingen omrøres i ytterligere 2 timer. Løsningen dryppes ti 255 ml 2,6 M HC1 og pH justeres til 1,4 med 30% NaOH. Etter 1,5 time, filtreres prespitatet, vanligvis med 300 ml 0,1 M HC1 og tør-kes for å gi det ønskede produkt (13,1 g; 16,7 mmol).
Utbytte: 78% smp.: 129-132°C
HPLC-analyse: 97,8% (areal%)
Stasjonær fase: Lichrosorb RP-Select B 5 um; 250 x 4 mm kolonne Merck KGaA;
Temperatur: 45°C;
Mobil fase: gradienteluering;
A = 0,01 M KH2P04 og 0,017 M H3PO4 i H20
B = CH3CN
Strømningshastighet: 1 ml min<-1>;
Deteksjon (UV): 210 nm;
Kompleksometrisk titrering: 95,5% (0,1 M GdCl3)
[a]<20>D = +13,03 (c 5, IM NaOH)
C) Gadoliniumkompleks av (3p,5p,7a,12a)-3-[[[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]etyl]amino]acetyl]amino]-7,12-dihydroksykolan-24-syre omdannet til salt med 1-deoksy-l-(me-tylamino) -D-glukitol (1:2)
11,3 g av forbindelsen fremstilt i trinn B) (13,8 mmol) suspenderes i 40 ml H20 og løses ved tilsetting av 44,7 ml 1 M meglumin vandig løsning (44,7 mmol) opptil pH 6.
13,7 ml 1 M GdCl3 vandig løsning (13,7 mmol) dryppes til blandingen over 1 time pH holdes ved 6,5 ved tilsetting av 73,5 ml 1 M meglumin vandig løsning (73,5 mmol). Reaksjonsblandingen nanofiltreres og pH justeres til 6,8 med 0,3 ml 0,1 M meglumin. Etter inndamping og tørking erholdes det ønskede produkt (17,2 g; 12,9 mmol).
Utbytte: 93% smp.: 245-249°C dec.
Fri ligand: < 0,1% (0,001 M GdCl3)
HPLC-analyse: 100% (areal%)
Stasjonær fase: Lichrospher 100 RP-8 5 um; 250 x 4 mm kolonne Merck KGaA;
Temperatur: 40°C;
Mobil fase: isokratisk eluering med forhåndsblandet fase: 1 g n-oktylamin og 0,3 mmol Na2EDTA tilsettes til 260 ml CH3CN og 740 ml H20. Løsningen bufres til pH 7 med H3PO4. Strømningshastighet: 1 ml min"<1>;
Deteksjon (UV): 210 nm;
IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
EKSEMPEL 4
Gadoliniumkompleks av [3(3 (S), 5p, 12a] -3- [ [4-[bis [2- [bis-(karboksymetyl)amino]etyl]amino]-4-karboksy-l-oksobutyl] amino]-12-hydroksykolan-24-syre omdannet til salt med 1-deoksy-l-(metylamino)-D-glukitol (1:3);
A) [3p(S) ,5(3,12a] -3- [ [4-[bis [2- [bis [2- (1,1-dimetyl-etoksy) -2-oksoetyl]amino]etyl]amino]-5-(1,1-dimetyletoksy)-1,5-dioksopentyl]amino]-12-hydroksykolan-24-syre-metylester
Trimetylamin (2,23 g; 22 mmol) tilsettes til en løsning av 8,93 g (30, 50, 12a)-3-amino-12-hydroksykolan-24-syre-metylester (fremstilt analogt med kolsyrederivatet beskrevet i WO-A-95/32741: eksempel 5) (22 mmol), 16,41 g N,N-bis[2-[bis[2-(1,1-dimetyletoksy)-2-oksoetyl]amino]-etyl]-L-glutaminsyre 1-(1,1-dimetyletyl)ester (fremstilt som beskrevet i WO-A-95/32741: eksempel 15) (22 mmol) og 3,91 g dietylcyanofosfonat (24 mmol) i 300 ml DM F ved 0°C. Etter 1,5 time ved 0°C og 18 timer ved romtemperatur, dampes reaksjonsblandingen inn og residuet løses i EtOAc. Løsningen vaskes med NaHC03 mettet vandig løsning og H2O, tørkes (Na2S04) og dampes inn. Råproduktet renses ved flashkromatografi for å gi det ønskede produkt (20, 67 g; 18,2 mmol).
Utbytte: 83%
[a]<20>D = - 6,75 (c 2,0, CHC13)
TLC: Stasjonær fase: silikagelplate 60F 254 Merck
Eluent =1:1 n-heksan/EtOAc Rf= 0,09
Deteksjon: Ce (S04) 2'4H20 (0,18%) og (NH4) 6Mo7024-4H20 (3,83%)
i 10% H2S04
<1>H-NMR, <13>C-NMR, IR- og1MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
B) [30(S),50,12a]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboksymetyl)-amino]etyl]amino]-4-karboksy-l-oksobutyl]amino]-12-hydrok-sykolan-24-syre
Forbindelsen fremstilt i trinn A) (19,72 g; 17,4 mmol) lø-ses i 105 ml CF3CO2H ved romtemperatur. Etter 26 timer dampes løsningen inn og residuet behandles med H2O; det faste filtreres, vaskes med H2O og tørkes delvis under vakuum. Det resulterende intermediat suspenderes i H2O og løses med 1 M NaOH opp til pH 13. Etter 5 timer ved romtemperatur dryppes 0,5 M HC1 i løsningen opp til pH 1,4. Etter 15 timer ved romtemperatur filtreres prespitatet, vaskes med H20 og tørkes for å gi et råprodukt som renses ved kromatografi over resin Amberlite® XAD 1600 resin for å erholde det ønskede produkt (9,92 g; 11,8 mmol).
Utbytte: 68% smp.: 184°C (dek.)
Kompleksometrisk titrering (0,1 M GdCl3):99,3%
Sur titrering (0,1 N NaOH): 99,8%
[ a] 20X (c 2,0; 1 M NaOH)
Mnm) 589 578 546 436 405 365
[a] ■+ 23,61 + 24,59 + 27, 90 + 46,67 + 55,61 + 71,40
TLC: Stasjonær fase: silikagelplate 60F 254 Merck
Eluent = 5:4:2 CHCl3/MeOH/25% NH4OH Rf= 0,13 Deteksjon: Ce (S04) 2-4H20 (0,18%) og (NH4) 6Mo7024-4H20 (3,83%)
i 10% H2S04
<1>H-NMR, <13>C-NMR, IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
C) Gadoliniumkompleks av [3p(S),5p,12a]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]etyl]amino]-4-karboksy-l-oksobutyl] amino] -12-hydroksykolan-24-syre omdannet til salt med 1-deoksy-l-(metylamino)-D-glukotol (1:3)
Forbindelsen fremstilt i trinn B) (8,39 g; 10 mmol) suspenderes i H20 (30 ml) og løses ved tilsetting av 1 M vandig meglumin (36,5 ml; 36,5 mmol) opp til pH 6. En 1,025 M GdCla vandig løsning (9,85 ml; 10,1 mmol) tilsettes over 1 time pH holdes på 6 ved tilsetting av 1 M vandig meglumin (19,3 ml; 19,3 mmol). Løsningen nanofiltreres og pH justeres til 7,0 med 1 M vandig meglumin. Etter inndamping og tørking erholdes det ønskede produkt (8,57 g; 5,4 mmol).
Utbytte: 54% smp.: 150-166°C (170°C dek.)
IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
D) Analogt med forbindelsen fremstilt i trinn C), fremstilles gadoliniumkomplekset av [30(S),50,12a]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]etyl]amino]-4-karboksy-l-oksobutyl] amino] -12-hydroksykolan-24-syre omdannet til salt med natrium (1:3)
Forbindelsen fremstilt i trinn B) (26,92 g; 32,08 mmol) suspenderes i H20 (100 ml) og løses ved tilsetting av 2 M NaOH (56 ml; 112 mmol) til pH 6. En 0,512 M GdCl3 vandig løsning (58,2 ml; 29,77 mmol) tilsettes over 3 timer pH holdes på 6 ved tilsetting av 2 M NaOH (28,95 ml;
57,9 mmol). Løsningens pH justeres til 6,7 med 2 M NaOH
(4 ml; 8 mmol) og løsningen nanofiltreres. Etter frysetør-king erholdes det ønskede produkt (29,86 g; 28,2 mmol).
Utbytte: 88% smp.: > 300°C
IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
EKSEMPEL 5
Alternativ fremgangsmåte ved fremstillingen av [3p(S),5p,-12a]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]etyljamino]-4-karboksy-l-oksobutyl]amino]-12-hydroksykolan-24-syre i henhold til skjema 3
A) (S)-5-okso-l,2-pyrrolidindikarboksylsyre 2-metyl 1-(fenylmetyl) diester
7,1 g CH3I (50 mmol) tilsettes til en løsning av 6,58 g (S)-5-okso-l,2-pyrrolidindikarboksylsyre 1-(fenylmetyl) ester (25 mmol) og N,N-diisopropyletylamin (3,55 g;
27,5 mmol) i CH2C12 (33 ml) og reaksjonsblandinger refluk-seres i 6,5 timer. Etter avkjøling til romtemperatur og fortynning med CH2C12 (50 ml) vaskes reaksjonsblandingen med H20, 2% aq. Na2C03, 0,2 M HC1 og H20. Etter tørking over Na2S04 og inndamping erholdes det ønskede produkt (6,8 g; 24,5 mmol).
Utbytte: 98%
HPLC-analyse: 98,5% (areal%)
Stasjonær fase: Lichrosorb RP-Select B 5 pm; 250 x 4 mm kolonne Merck KGaA;
Temperatur: 45°C;
Mobil fase: gradienteluering;
A = 0,017 M H3PO4 i vann
B = CH3CN
Strømningshastighet: 1 ml min<-1>;
Deteksjon (UV): 210 nm;
[a]<20>^ (c 2; CHC13)
A. (nm) 589 578 546 365
[a] - 42,97 - 44,79 - 50,09 - 100,43
<1>H-NMR, <13>C-NMR, IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
B) [30(S),50,12a]-3-[[5-metoksy-l,5-diokso-4-[[(fenyl-metoksy)karbonyl]amino]pentyl]amino]-12-hydroksykolan-24-syre-metylester
8,92 g (30,50,12a)-3-amino-12-hydroksykolan-24-syre-metylester (fremstilt analogt med kolsyrederivater beskrevet i WO-A-95/32741: eksempel 5) (22 mmol) tilsettes til en løs-ning av forbindelse A) (6,1 g; 22 mmol) i dioksan (55 ml) og den resulterende blanding varmes til 50°C i 24 timer, deretter til 105°C i 29 timer. Løsningsmidlet dampes inn under redusert trykk og residuet renses ved flashkromatografi (gradienteluering med EtOAc/n-heksan) etterfulgt av krystallisasjon med en 1 : 1 EtOAc/n-heksanblanding, for å gi det ønskede produkt (11,2 g; 16,4 mmol).
Utbytte: 75% smp.: 140°C
HPLC-analyse: 99,2% (areal%)
Stasjonær fase: Lichrosorb RP-Select B 5 um; 250 x 4 mm kolonne Merck KGaA;
Temperatur: 45°C;
Mobil fase: gradienteluering;
A = 0,017 M H3PO4 i vann
B = CH3CN
Strømningshastighet: 1 ml min-<1>;
Deteksjon (UV): 210 nm;
[ a] 20X (c 2,01; CHCI3)
X(nm) 589 578 546 365
[a] + 24,14 + 25,13 + 28,51 + 73,81
TLC: Stasjonær fase: silikagelplate 60F 254 Merck
Eluent = EtOAc
Deteksjon: Ce (S04) 2'4H20 (0,2%) og (NH4) 6Mo7024-4H20 (3,8%) i 10% H2S04 Rf= 0,11
<1>H-NMR, <13>C-NMR, IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
C) [3p(S),5p,12a]-3-[[4-[bis[2-[bis[2-(1,1-dimetyl-etoksy) -2-oksoetyl]amino]etyl]amino]-5-metoksy-l,5-diokso-pentyl]amino]-12-hydroksykolan-24-syre-metylester
1 g 5% Pd/C tilsettes til en løsning av forbindelse B)
(10,4 g; 15,3 mmol) i MeOH (100 ml); suspensjonen omrøres i 3,5 timer under hydrogenatmosfære (absorbert H20: 348 ml; 15,5 mmol) ved romtemperatur. Etter filtrering og et Millipore® FH-filter (0,45 um), dampes løsningen inn under re-
dusert trykk for å gi et residue som løses i CH3CN (60 ml) . 2 M vandig pH 8 fosfatbuffer (60 ml) tilsettes, deretter tilsettes en løsning av N-(2-brometyl)-N-[2-(1,1-dimetyle-toksy) -2-okso-etyl] glycin 1,1-dimetyletylester (fremstilt i henhold til prosedyren beskrevet i WO-A-95/32741: eksempel 15) (11,86 g; 33,7 mmol) i CH3CN (15 ml) dråpevis over 10 minutter ved romtemperatur. Blandingen omrøres i 39 timer. Etter separasjon dampes den organiske fase inn under redusert trykk og residuet løses i AcOEt (200 ml). Løsningen vaskes med H2O, tørkes (Na2S04) og dampes inn. Råproduktet renses ved flashkromatografi (gradienteluering med EtOAc/n-heksan) for å gi det ønskede produkt (11,36 g; 10,4 mmol).
Utbytte: 68% smp.: 55-58°C
HPLC-analyse: 100% (areal%)
[ a] 20X (c 2,01; CHC13)
X(nm) 589 578 546 365
[a] - 6,97 - 7,41 - 8,61 - 32,89
TLC: Stasjonær fase: silikagelplate 60F 254 Merck
Eluent: EtOAc
Deteksjon: Ce (S04) 2"4H20 (0,2%) og (NH4) 6Mo7024-4H20 (3,8%) i 10% H2S04 Rf= 0,45
<1>H-NMR, <13>C-NMR, IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
D) [3P(S),5P,12a]-3-[4-[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]-etyl] amino] -4-karboksy-,l-oksobutyl] amino] -12-hydroksykolan-24-syre
En løsning av forbindelse C) (8,5 g; 7,8 mmol) i dioksan (50 ml) tilsettes 2 M LiOH vandig løsning (117 ml;
234 mmol). Den resulterende blanding omrøres ved romtempe-
råtur i 72 timer, surgjøres deretter til pH 6 ved langsom tilsetting av 37% HC1. Løsningen konsentreres til 50 g ved inndamping under redusert trykk og fortynnes med H2O
(40 ml). Løsningen surgjøres til pH 2,5 ved tilsetting av 37% HC1, varmes ti 50-55°C og, under sterk omrøring, sur-gjøres den svært langsomt til pH 1,3 med 2 N HC1. Etter 5 minutter etterlates den heterogene blanding for å langsomt avkjøle til romtemperatur, under omrøring, i 15 timer. Prespitatet filtreres, vaskes med H2O og tørkes for å gi det ønskede produkt (5,92 g; 7 mmol).
Utbytte: 90% smp.:180-198°C
HPLC-analysen: 99,9% (areal%)
Stasjonær fase: Zorbax ECLIPSE XDB-C8 3,5 um; 150 x 4,6 mm kolonne Rockland Technologies, Inc.;
Temperatur: 40°C;
Mobil fase: gradienteluering;
A = 0,017 M H3PO4, 0,3 mM EDTA i vann;
B = CH3CN
Strømningshastighet: 1,5 ml min<-1>;
Deteksjon (UV): 210 nm;
Surtitrering (0,1 N NaOH): 99%
[ a] 20X (c 2,04; 1 N NaOH)
X{ nm) 589 578 546 436 405 365
[a] + 24,80 + 25,83 + 29,22 + 49,02 + 58,43 + 75,59
IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
EKSEMPEL 6
Gadoliniumkompleks av [3(3, 5(3, la, 12a]-3-[ [ [ [ [bis [2-[bis-(karboksymetyl)amino]etyl]amino]acetyl]amino]acetyl]amino]-1,12-dihydroksykolan-24-syre omdannet til salt med 1-deok-sy-1-(metylamino)-D-glukitol (1:2)
A) N-[[bis[2-[bis[2-(1,1-dimetyletoksy)-2-oksoetyl]-amino]etyl]amino]acetyl]glysin
6,5 g glykylglysin (49,3 mmol) suspenderes i 100 ml av en 1 : 1 H20/EtOH-blanding og løses ved pH 10 med 10 M NaOH (4,8 ml). N-(2-brometyl)-N[2-(1,1-dimetyletoksy)-2-okso-etyl] glysin-1,1-dimetyletylester (42 g; 110,9 mmol) i 40 ml EtOH dryppes deri over 2 timer, pH holdes ved 10,5 med 10 M NaOH (5,8 ml). Løsningen blir hurtig til en emulsjon som løses etter 2,5 timer ved tilsetting av 10 M NaOH. Etter 22 timer dampes løsningsmidlet inn, blandingen fortynnes med
vann og ekstraheres med CH2C12. Den organiske fase vaskes med H20, tørkes og dampes inn for å gi et residue som renses ved flashkromatografi. Residuet løses i vann, pH justeres til 4,5 ved tilsetting av 1 M HC1 og løsningen ekstraheres med kloroform. Den organiske fase vaskes med H20, tørkes og dampes inn for å gi 13 g av det ønskede produkt (19,3 mmol).
Utbytte: 39%
TLC: Stasjonær fase: silikagelplate 60F 254 Merck
Eluent = 6:3:1 CHCl3/MeOH/25% NH4OH Rf= 0,65 Deteksjon: 1% Kmn04 i 1 M NaOH
<1>H-NMR, <13>C-NMR, IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
B) [3(3, 5p, 7a, 12a] -3- [ [ [ [ [bis [2-[bis [2-(1,1-dimetyl-etoksy) -2-oksoetyl]amino]etyl]amino]acetyl]amino]acetyl]-amino]-7,12-dihydroksykolan-24-syre-metylester
2,8 ml TEA (20,2 mmol) tilsettes dråpevis over 5 minutter til en løsning inneholdende 13,6 g av forbindelsen fremstilt i trinn A) (20,2 mmol), 8,52 g (3p,5p,7a,12a)-3-amino-7,12-dihydroksykolan-24-syre-metylester (20,2 mmol) og DEPC (3,4 ml; 22,2 mmol) i DMF (290 ml) omrørt ved 0°C. Etter 1 time varmes reaksjonen til romtemperatur og løsnin-gen omrøres i 6,5 timer. 0,3 ml DEPC (2 mmol) tilsettes og løsningen omrøres i ytterligere 15,5 timer. DMF dampes inn, residuet løses i EtOAc, vaskes med NaHC03 deretter med vann og tørkes til sist. Etter rensing med flashkromatografi be-holdes 13,7 g av det ønskede produkt (12,7 mmol).
Utbytte: 63%
[a]<20>D = +5,26 (c 1,5; CHC13)
<1>H-NMR, <13>C-NMR, IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
C) (3p,5p,7a,12a)-3- [[[[[bis[2-[bis(karboksymetyl)-amino]etyl]amino]acetyl]amino]acetyl]amino]-7,12-dihydroksykolan-24-syre
12,85 g av forbindelsen fremstilt i trinn B) (12 mmol) lø-ses i TFA (210 ml) omrørende ved -5/0°C. Etter 16 timer dampes TFA inn for å gi et residue som løses i 90 ml 0,8 M NaOH ved pH 13 og omrøres ved romtemperatur i 15 timer.
Løsningen konsentreres til 50 ml, dryppes til 105 ml 0,6 M HC1 og omrøres i 2 timer. Det faste stoff filtreres, vaskes med 0,1 M HC1 og tørkes for å erholde et råprodukt som renses ved kromatografi. Fraksjonene inneholdende den ønskede forbindelse i saltformen dampes inn for å gi et residue som løses i vann og dryppes til 1 M HC1, som holder pH 1,45. Prespitatet filtreres, vaskes med 0,1 M HC1 og tørkes for å gi 2,6 g av det ønskede produkt (3,1 mmol).
Utbytte: 26% smp.:120-125°C
HPLC-analyse: 98% (areal%)
<1>H-NMR, <13>C-NMR, IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
D) Gadoliniumkompleks av (3p, 5p, 7a, 12a)-3- [ [ [ [ [bis [2-[bis(karboksymetyl)amino]etyl]amino]acetyl]amino]acetyl]ami no]-7,12-dihydroksykolan-24-syre omdannet til salt med 1-deoksy-1-(metylamino)-D-glukitol (1:2)
2,59 g av forbindelsen fremstilt i trinn C) (3,08 mmol) suspenderes i vann (20 ml) og løses ved tilsetting av 1 M meglumin vandig løsning (3,08 ml; 3,08 mmol) til pH 5.
GCI2O3 (0,501 g; 2,77 mmol) tilsettes til blandingen oppvar-mende til 50°C. Etter 1 time tilsettes 1 M meglumin (2,8 ml; 2,8 mmol) for å løse prespitatet. Etter 24 timer filtreres reaksjonsblandingen og pH justeres til 6,8 med 1 M vandig meglumin (0,4 ml). Etter inndamping og tørking erholdes 4,2 g (3,00 mmol) av det ønskede produkt. Utbytte: 99% smp.:209-213°C dek.
HPLC-analyse: 99,7% (areal%)
Fri ligand: < 0,1% (0,001 GdCl3)
IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
EKSEMPEL 7
Gadoliniumkompleks av [3P(S),50]-3-[[4-[bis[2-[bis-(karboksymetyl)amino]etyl]amino]-4-karboksy-l-oksobutyl]-(karboksymetyl)amino]kolan-24-syre omdannet til salt med 1-deoksy-1-(metylamino)-D-glukitol (1:4)
A) (3p, 5p)-3-[[2-(1,1-dimetyletoksy)-2-oksoetyl]-amino]kolan-24-syre-metylester
40,0 g (30,50)-3-aminokolan-24-syre-metylester (fremstilt som i eksempel a over) (103 mmol) suspenderes i DMF (1,0 1) ved romtemperatur under nitrogen. Trietylamin (13,0 g;
129 mmol) tilsettes, deretter dryppes en løsning av bromed-diksyre 1,1-dimetyletylester (24,0 g; 123 mmol) i DMF
(30 ml) til reaksjonsblandingen over 1 time inntil oppløs-ning. Etter 3 dager konsentreres blandingen og fortynnes med 4% NaHC03 vandig løsning. Den resulterende suspensjon filtreres, prespitatet vaskes med H20 og tørkes for å gi 33,7 g av det ønskede produkt (66,9 mmol).
Utbytte: 65% smp.: 62-64°C
[a]<20>D = + 23,55 (c 1,96, MeOH)
TLC: Stasjonær fase: silikagelplate 60F 254 Merck
Eluent =7:3 n-heksan/EtOAc Rf= 0,31
<1>H-NMR, <13>C-NMR, IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
B) [30(S),50]-3-[[4-[bis[2-[bis[2-(1,1-dimetyletoksy)-2-oksoetyl]amino]etyl]amino]-5-(1,1-dimetyletoksy)-1,5-di-oksopentyl][2-(1,1-dimetyletoksy)-2-oksoetyl]amino]kolan-24-syre metylester
Diisopropyletylamin (19,5 g; 151 mmol) tilsettes dråpevis over 20 minutter til en løsning av forbindelse A) (33,0 g; 65,5 mmol), N,N-bis[2-[bis[2-(1,1-dimetyletoksy)-2-okso-etyl] amino]etyl]-L-glutaminsyre 1-(1,1-dimetyletyl)ester
(fremstilt som beskrevet i WO-A-95/32741: eksempel 15)
(53,8 g; 72,1 mmol) og (benzotriazol-l-yloksy)tris-(dimetylanamino)fosfonium-heksafluorfosfat (BOP) (40,6 g; 91,8 mmol) i DMF (400 ml), omrørt ved romtemperatur under nitrogen. Etter 2 dager konsentreres reaksjonsblandingen og
tas opp i EtOAc. Løsningen vaskes med H2O, tørkes (Na2S04) og dampes inn. Råproduktet renses to ganger ved flash-kromatogrfi for å gi 38,7 g av det ønskede produkt
(31,4 mmol).
Utbytte: 48%
[a]<20>D = - 54,50 (c 2,51; CHC13)
TLC: Stasjonær fase: silikagelplate 60F 254 Merck
Eluent =7:3 n-heksan/EtOAc Rf= 0,22
■"■H-NMR, <13>C-NMR, IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
C) [3p(S),5p]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]-etyl]amino]-4-karboksy-l-oksobutyl]-(karboksymetyl)-amino]kolan-24-syre
Til en løsning av forbindelse B) (38,7 g; 31,4 mmol) i EtOH (350 ml), omrørt ved romtemperatur, tilsettes 500 ml av en 2 LiOH-løsning dråpevis over 1 time. Etter 16 timer konsentreres reaksjonsblandingen ti 500 ml og 2 M LiOH-løsning
(350 ml) tilsettes igjen, oppvarming til 50°C. Etter 24 timer avkjøles reaksjonsblandingen til romtemperatur og dryppes til 320 ml 6 M HC1 kraftig omrørt ved 5°C. pH i den resulterende suspensjon justeres til 1,0 med 55 ml 2 M NaOH.
Løsningen filtreres, vaskes med 0,1 M CH1 og tørkes. Råproduktet suspenderes i H20 og løses ved tilsetting av 1 M NaOH, deretter dryppes den basiske løsning til 0,5 M HC1-løsning. Prespitatet filtreres, vaskes med 0,05 M HC1, H20 og tørkes for å gi 23,5 g av det ønskede produkt
(26,7 mmol) .
Utbytte: 85% smp.:178-182°C
[a]405 2 0 = + 24, 10 (c 1,49; 1 M NaOH)
HPLC-analysen: 100% (areal%)
Stasjonær fase: Hypurity Elite C-18 5um; kolonne 250 x
4,6 mm;
Temperatur: 40°C;
Mobil fase: gradienteluering;
A = 0,01 M KH2P04, 0,3 mM EDTA i vann;
B = CH3CN
Strømningshastighet: 1 ml min 1; Deteksjon (UV): 210 nm;
IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
D) Gadoliniumkompleks av [3p(S),5p]-3-[[4-[bis[2-[bis-(karboksymetyl)amino]etyl]amino]-4-karboksy-l-oksobutyl] -
(karboksymetyl)amino]kolan-24-syre omdannet til salt med 1-deoksy-1-(metylamino)-D-glukitol (1:4)
En suspensjon av forbindelsen fremstilt i trinn C) (12,9 g; 14,6 mmol) i H20 (100 ml) tilsettes 1 M meglumin vandig løsning (72,0 ml; 72,0 mmol) ved romtemperatur for å erholde en klar løsning som har pH 6,2. En 0,393 M GdCl3 vandig løsning (37,2 ml; 14,6 mmol) tilsettes dråpevis, pH holdes på 6,2 ved tilsetting av 1 M meglumin (30,0 ml; 30,0 mmol) ved hjelp av en pH-stat. Ved slutten av tilsettingen filtreres reaksjonsblandingen gjennom papir og deretter gjennom Millipore®-membran (HAWP 0,45 um) , nanofiltreres, justeres til pH 7,0 ved tilsetting av 1 M meglumin (0,20 ml; 0,20 mmol) og dampes inn. Det faste stoff tørkes for å gi 24,0 g av det ønskede produkt (13,2 mmol).
Utbytte: 91% smp.:90-92°C
HPLC-analysen: 100% (areal%)
Stasjonær fase: Licrospher 100 RP-8 5 um; kolonne Merck KGAa 250 x 4 mm;
Temperatur: 40°C;
Mobil fase: isokratisk eluering med forhåndsblandet mobilfase: 1 g n-oktylamin tilsettes til 400 ml acetnitril og 600 ml vann. Løsningen bufres til pH 6 med H3P04; Strømningshastighet: 1 ml min"<1>;
Deteksjon (UV): 210 nm;
IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
EKSEMPEL 8
Gadoliniumkompleks av [3p (R) , 5(3,12a]-3-[ [4-[bis [2-[bis-(karboksymetyl)amino]etyl]amino]-4-karboksy-l-oksobutyl]-amino]-12-hydroksykolan-24-syre omdannet til salt med natrium(l:3)
Ved å følge reaksjonsskjerna 3 og den eksperimentelle prosedyre gitt i eksempel 5 ble(R)-5-okso-l,2-pyrrolidindi-karboksylsyre-1-(fenylmetyl)ester (produkt kommersielt tilgjengelig) foresteret med metyljodid i nærvær av N,N-diisopropyletylamin og den således erholdte (R)-metylester ble reagert med (30,50,12a)-3-amino-12-hydroksykolan-24-syre-metylester (fremstilt analogt med kolsyrederivatet beskrevet i WO-A-95/32741: eksempel 5) for å gi [30(R),50,-12a]-3-[[4-[bis[2-[bis[2-(1,1-dimetyletoksy)-2-okso-etyl] amino]etyl]amino]-5-metoksy-l,5-dioksopentyl]amino]-12-hydroksykolan-24-syre metylester. Etter fjerning (H2/Pd) av Cbz-beskyttelsesgruppen og alkylering med N-(2-brom-etyl)-N-[2-(1,1-dimetyletoksy)-2-oksoetyl]-glysin-1,1-dimetyletylester (fremstilt i henhold til prosedyren beskrevet i WO-A-95/32741: eksempel 15) i CH3CN/fosfatbuffer pH 8, ble en heksaester erholdt som ble transformert (aq. LiOH/dioksan) til den beslektede heksasyre. Sistnevnte ble kompleksert, i henhold til prosedyren rapport i eksempel 4, puntk D) for å erholde det ønskede produkt med 44% totalt utbytte,
smp.: > 300°C
IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
EKSEMPEL 9
Gadoliniumkompleks av [30(RS),50,12a]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]etyl]amino]-4-karboksy-l-oksobutyl] amino] -12-hydroksykolan-24-syre omdannet til salt med natrium (1:3)
Forbindelsen ble syntetisert fra (30,50,12a)-3-amino-12-hydroksykolan-24-syre-metylester (fremstilt analogt med kolsyrederivatet beskrevet i WO-A-95/32741: eksempel 5) og N,N-bis[2-[bis[2-(1,1-dimetyletoksy)-2-oksoetyl]amino]-etyl]-DL-glutaminsyre 1-(1,1-dimetyletyl)ester (fremstilt fra DL-glutaminsyre, som beskrevet i WO-A-95/32741: eksempel 15) for L-isomeren) i henhold til prosedyre gitt i detalj i eksempel 4. Produktet ble erholdt med 61% totalt utbytte.
smp.: > 300°C
HPLC-analysen: 99% (areal%)
Stasjonær fase: Zorbax ECLIPSE XDB-C8 3,5 um; 150 x 4,6 mm kolonne Rockland Technologies, Inc;
Temperatur: 40°C;
Mobil fase: gradienteluering;
A = 0,005 M KH2P04, 0, 005 M K2HP04, 0,3 mM EDTA i vann;
B = CH3CN
Strømningshastighet: 1,0 ml min<-1>;
Deteksjon (UV): 210 nm;
Den kromatografiske metoden viser to topper, i nesten lik prosent, som er relatert til diastereoisomerer som skyldes RS-stereosentere i DTPA-resten.
IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
EKSEMPEL 10
Gadoliniumkompleks av [3a(S),50,12a]-3-[[4-[bis[2-[bis-(karboksymetyl)amino]etyl]amino]-4-karboksy-l-oksobutyl]-amino]-12-hydroksykolan-24-syre omdannet til salt med natrium (1:3)
(3a,50,12a)-3-amino-12-hydroksykolan-24-syre-metylester
(3a,50,12a)-3,12-dihydroksykolan-24-syre-metylester ble reagert under Mitsunobu-betingelser (Mitsunobu, 0. Synthe-sis 1981, 1-28; Denike, J.K. et al. Chem. Phys. Lipids 1995, 77, 261-267) med trifenylfosfin, dietylazodikarboksy-lat og maursyre i THF for å gi (30,50,12a)-3-foryloksy-12-hydroksykolan-24-syre-metylester. Sistnevnte ble avbe-
skyttet (MeOH/HCl) til (3p,5p,12a)-3,12-dihydroksykolan-24-syre metylester som ble underkastet reaksjonsserien beskrevet i WO-A-95/32741: eksempel 5 for kolsyrederivatet.
(3p,5P,12a)-3-amino-12-hydroksykolan-24-syre-metylester ble erholdt med 32% totalt utbytte,
smp.: 90-92°C
[a]<20>D = +53, 46 (c 1,3; CH3OH)
TLC: Stasjonær fase: silikagelplate 60F 254 Merck
Eluent = 9 : 1 : 0,15 CHCl3/CH3OH/25% NH4OH Rf= 0,21 <1>H-NMR, <13>C-NMR, IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
Ved å følge reaksjonsskjerna 3 og den eksperimentelle prosedyre gitt i eksempel 5, ble (S)-5-okso-l,2-pyrrolidindikar-boksylsyre 2-metyl-l-(fenylmetyl)diester reagert med forbindelse A). Den således erholdte [3a(S),5P,12a]-3-[[4-[bis[2-[bis[2-(1,1-dimetyletoksy)-2-oksoetyl]amino]etyl]-amino]-5-metoksy-l,5-dioksopentyl]amino]-12-hydroksykolan-24-syre-metylester ble hydrogenert (fø/Pd) for å fjerne Cbz-beskyttelsesgruppen. Den etterfølgende alkylering med N-(2-brometyl)-N-[2-(1,1-dimetyletoksy)-2-oksoetyl]glysin-1,1-dimetyletylester (fremstilt i henhold til prosedyren beskrevet i WO-A-95/32741: eksempel 15) i CH3CN/fosfatbuffer pH 8, ga den beslektede heksaester. Sistnevnte ble transformert (aq. LiOH/dioksan) til heksasyren som ble kompleksert, i henhold til prosedyren rapportert i eksempel 4, punkt D) for å erholde det ønskede produkt med 33% totalt utbytte,
smp.: > 300°C
HPLC-analyse: 100,0% (areal%)
IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
EKSEMPEL 11
Gadoliniumkompleks av [3p(S),50,7a]-3-[[4-[bis[2-[bis-(karboksymetyl)amino]etyl]amino]-4-karboksy-l-oksobutyl] amino] -7-hydroksykolan-24-syre omdannet til salt med natrium (1:3)
Forbindelsen ble syntetisert fra (3P,5P,7a)-3-amino-7-hydroksykolan-24-syre-metylester (fremstilt analogt med kolsyrederivatet beskrevet i WO-A-95/32741: eksempel 5) og N,N-bis[2-[bis[2-(1,1-dimetyletoksy)-2-oksoetyl]amino]-etyl]-L-glutaminsyre-1-(1,1-dimetyletyl)ester (fremstilt som beskrevet i WO-A-95/32741: eksempel 15) i henhold til prosedyren gitt i detalj i eksempel 4. Produktet ble erholdt med 89% totalt utbytte,
smp.: > 300°C
IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
EKSEMPEL 12
[3P(RS),5p,7a,12a]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboksymetyl)-amino]etyl]amino]-4-karboksy-l-oksobutyl]amino]-7,12-dihydroksykolan-24-syre
Forbindelsen ble syntetisert fra (30,50,7a,12a)-3-amino-7,12-dihydroksykolan-24-syre-metylester (fremstilt som beskrevet i WO-A-95/32741: eksempel 5) og N,N-bis[2-[bis[2-(1,1-dimetyletoksy)-2-oksoetyl]amino]-etyl]-DL-glutaminsyre 1-(1,1-dimetyletyl) ester (fremstilt, fra DL-glutaminsyre, som beskrevet i WO-A-95/32741: eksempel 15 for L-isomeren) i henhold til prosedyren gitt i detalj i eksmepel 4 for fremstillingen av forbindelse B). Produktet ble erholdt med 65% totalt utbytte,
smp.: 224°C dek.
HPLC-analyse: 97% (areal%)
Stasjonær fase: Zorbax ECLIPSE XDB-C8 3,5 um; 150 x 4,6 mm kolonne Rockland Technologies, Inc;
Temperatur: 40°C;
Mobil fase: gradienteluering;
A = 0,017 M H3PO4, 0,3 mM EDTA i vann;
B = CH3CN
Strømningshastighet: 1,0 ml min"<1>;
Deteksjon (UV): 210 nm;
Den kromatografiske metoden viser to topper, i nesten lik prosent, som er relatert til diastereoisomerer som skyldes RS-stereosentere i DTPA-resten.
IR-, NMR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
EKSEMPEL 13
Gadoliniumkompleks av [3a(S),50,7a,12a]-3-[[[[5-[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]etyl]amino]-5-karboksypentyl]-amino]karbonyl]oksy]-7,12-dihydroksykolan-24-syre omdannet til salt med natrium (1:3)
A) [3a(S),50,7a,12a]-3-[[[[6-(1,1-dimetyletoksy)-5-[bis[2-[bis[2-(1,1-dimetyletoksy)-2-oksoetyl]amino]etyl]-amino]-6-oksoetyl]amino]karbonyl]oksy]-7,12-dihydroksykolan-24-syre-metylester
Metode 1: en løsning av bis(triklormetyl)karbonat (2,9 g; 9,7 mmol) i vannfri CH2CI2 (40 ml) ble dråpevis tilsatt, under nitrogen, til en løsning av (3a,50,7a,12a)-3,7,12-trihydroksykolan-24-syre-metylester (kommersielt produkt)
(10,0 g; 23,7 mmol) og pyridin (2,3 ml; 28,4 mmol) i vannfri CH2C12 (100 ml) av kjølt til 0°C. Blandingen blir deretter tilatt å varme og etter 1 time ved romtemperatur ble løsningen avkjølt igjen til 0°C, N-N-diisopropyletylamin (7,9 ml; 47,3 mmol) ble deretter tilsatt en løsning av N<2>,N<2->bis[2-[bis[2-(1,1-dimetyletoksy)-2-oksoetyl]amino]-etyl]-L-lysin-(1,1-dimetyletyl) ester (anelli, P.L. et al. Bioconjugate Chem. 1999, 10, 137) (17,6 g; 23,7 mmol) i vannfri CH2C12 (50 ml) ble tilsatt dråpevis. Løsningen ble omrørt 3 timer ved romtemperatur og deretter vasket med H20 (2 x 100 ml), tørket over Na2S04 og dampet inn. Råproduktet ble renset ved flashkromatografi for å gi det ønskede produkt (14,8 g; 12,4 mmol).
Utbytte: 52%.
<1>H-NMR, <13>C-NMR, IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
Metode 2: En løsning av [3a,50,7a,12a]-3-[(klorkarbo-nyl)oksy]-7,12-dihydroksykolan-24-syre-metylester (Janout, V., Lanier, M.; Regen, S.L.J. Am. Chem. Soc. 1997, 119, 640) (6,1 g; 12,6 mmol) i vannfri CH2C12 (150 ml) ble av-kjølt til 0°C under nitrogen og deretter ble N,N-diisopropyletylamin (4,8 ml; 27,6 mmol) tilsatt. Deretter ble en løsning av N2, N2-bis[2-[bis[2-(1,1-dimetyletoksy)-2-okso-etyl] amino]etyl]-L-lysin-(1,1-dimetyletyl)ester (9,3 g; 12,6 mmol) i vannfri CH2CI2 (20 ml) tilsatt dråpevis. Løs-ningen ble omrørt 3 timer ved romtemperatur deretter vasket med H20 (2 x 100 ml), tørket over Na2S04 og dampet inn. Råproduktet ble renset ved flashkromatografi for å gi det ønskede produkt (11,9 g; 9,9 mmol).
Utbytte: 79%.
■"■H-NMR, <13>C-NMR, IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
B) [3a(S),5p,7a,12a]-3-[[[[5-[bis[2-[bis(karboksymetyl) amino]etyl]amino]-5-karboksypentyl]amino]kar-bonyl] oksy]-7,12-dihydroksykolan-24-syre
En 2 M aq. løsning av LiOH (141 ml) ble tilsatt dråpevis til en løsning av forbindelse A) (11,2 g; 9,4 mmol) i 1,4-dioksan (141 ml) ved romtemperatur. Etter 104 timer ble løsningen konsentrert (150 ml) og tilsatt dråpevis til 2 M aq. HC1 (175 ml): slutt pH var 1,9. Prespitatet ble filtrert, vasket med H20 (5 x 50 ml) og vakuumtørket. Det ube-handlede ble renset ved flashkromatografi. Det oppnådde faste stoff ble løst i 10% aq. CH3CN og pH justert til 1 ved tilsettingen av kons. HC1 deretter ble løsningen lastet på en Amberlite® XAD 16.00 resinkolonne (250 ml) og eluert med en CH3CN/H20-gradient. Fraksjonene inneholdende produktet ble dampet inn for å gi det ønskede produkt (4,3 g;
4,8 mmol).
Utbytte: 51% smp.: 184-191°C
K.F.: 4,36%
[a]<20>D = + 19,5 (c 1; 1 M NaOH)
HPLC-analysen: 97,3% (areal%)
Stasjonær fase: Hypurity Elite C 18 5 um; 250 x 4,6 mm kolonne pakket av Hypersil;
Temperatur: 40°C;
Mobil fase: gradienteluering;
A = 0,01 M KH2P04, 0,3 mM EDTA i vann;
B = CH3CN
Strømningshastighet: 1 ml min-<1>; Deteksjon (UV): 200 nm;
■""H-NMR, <13>C-NMR, IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
C) Gadoliniumkompleks av [3a(S),50,7a,12a]-3-[[[[5-[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]etyl]amino]-5-karboksypen-tyl] amino]karbonyl]oksy]-7,12-dihydroksykolan-24-syre omdannet til salt med natrium (1:3)
Forbindelse fremstilt i trinn B) (4,7 g; 5,2 mmol) ble suspendert i H2O (100 ml) og løst ved tilsetting av 1 M NaOH (10 ml) inntil pH var 6,5. En løsning av GdCl3 (1,9 g;
5,2 mmol) i H20 (17 ml) ble tilsatt pH ble holdt på 6,5 med 1 M NaOH (15,6 ml). Etter 1 time ved romtemperatur ble løs-ningen lastet på en Amberlite® XAD 16.00 resin kolonne
(250 ml) som ble eluert med en CH3CN/H20-gradient. Fraksjonene inneholdende produktet ble dampet inn for å gi det øn-
skede produkt (4,2 g; 3,8 mmol).
Utbytte: 72% smp.: > 300°C
K.F.: 9,49%
[ct]<20>D = + 2,63 (c 2; H20)
HPLC-analyse: 100% (areal%) (samme metode som i trinn B)
<1>H-NMR, <13>C-NMR, IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
EKSEMPEL 14
Mangankompleks av [3p(S),5p,12a]-3-[[4-[[2-[bis(karboksymetyl) amino]etyl](karboksymetyl)amino]-4-karboksy-l-oksobutyl] amino] -12-hydroksykolan-24-syre omdannet til salt med natrium (1:3)
A) [3P(S),5p,12a]-3-[[4-amino-5-metoksy-l,5-dioksopen-tyl]amino]-12-hydroksykolan-24-syre-metylester
3,4 g 5% Pd/C tilsettes til en løsning av [3P(S),5p,12a]-3-[[5-metoksy-l,5-diokso-4-[[(fenylmetoksy)karbonyl]-amino]pentyl]amino]-12-hydroksykolan-24-syre-metylester
(eksempel 5, produkt B) (34,14 g; 50 mmol) i MeOH (340 ml). Suspensjonen ble omrørt, ved romtemperatur, over 3,5 timer under en hydrogenatmosfære. Etter filtrering gjennom et Millipore®-filter FH (0,45 um) ble løsningen dampes inn til tørrhet for å gi det ønskede produkt (27,1 g; 49,3 mmol). Utbytte: 98,6%.
Vekttap (50°C; høyvakuum): < 0,1%
[a]<20>D = +36,61 (c 2,01; CHC13)
Surtitrering (0,1 M HC1): 94,6%
<1>H-NMR, <13>C-NMR, IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
B) [3p(S),5P,12a]-3-[[4-[[2-[bis[2-(1,1-dimetyletoksy)-2-oksoetyl]amino]etyl][2-(1,1-dimetyletoksy)-2-okso-etyl] amino] -5-metoksy-l,5-dioksopentyl]amino]-12-hydroksy-kolan-24-syre-metylester
Forbindelse fremstilt i trinn A) (16,0 g; 29,1 mmol) og N-(2-brometyl)-N-[2-(1,1-dimetyletoksy)-2-oksoetyl]-glysin-1,1-dimetyletylester (13,3 g; 37,8 mmol) (fremstilt i henhold til prosedyren beskrevet i WO-A-95/32741: eksempel 15) ble løst i EtOAc (120 ml). Etter tilsetting av 2 M fosfatbuffer pH 8 (120 ml) ble blandingen kraftig omrørt i 2 timer, deretter ble den vandige fase erstattet med frisk 2 M fosfatbuffer pH 8 (120 ml) og omrørt i ytterligere 70 timer. Blandingen ble varmet til 40°C i 12 timer, og avkjølt til romtemperatur, separert og den organiske fase dampet inn for å gi et residue som ble løst i CH2CI2 (150 ml), vasket med vann (2 x 100 ml) , tørket over Na2S04 og dampet inn. Råproduktet ble renset ved flashkromatografi for å gi det ønskede produkt (12,3 g; 15,0 mmol).
Utbytte: 52%.
TLC: Stasjonær fase: silikagelplate 60F 254 Merck
Eluent =1:1= EtOAc/n-heksan Rf= 0,40
Deteksjon: 1% Kmn04 i 1 M NaOH
<1>H-NMR, <13>C-NMR, IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
C) [3p(S),5P,12a]-3-[[4-[[2-[bis[2-(1,1-dimetyletoksy)-2-oksoetyl]amino]etyl][2-(1,1-dimetyletoksy)-2-okso-etyl] amino]-5-metoksy-l,5-dioksopentyl]amino]-12-hydroksy-kolan-24-syre-metylester
Tert-butylbromacetat (3,9 g; 20,1 mmol) ble tilsatt dråpevis til en løsning av en forbindelse fremstilt i trinn B)
(11,0 g; 13,4 mmol) og N,N-diisopropyletylamin (3,5 ml; 20,1 mmol) i CH3CN. Blandingen ble omrørt 24 timer ved romtemperatur og deretter ble mer N,N-diisopropyletylamin (0,9 ml; 4,0 mmol) og tert-butylbromacetat (0,8 g;
4,0 mmol) tilsatt. Blandingen ble omrørt i ytterligere 70 timer, separert og den organiske fase dampet inn for å gi et residue som ble løst i CH2CI2 (150 ml), vasket med vann (2 x 100 ml) , tørket over Na2S04 og dampet inn. Råproduktet ble renset ved flashkromatografi for å gi det ønskede produkt (10,7 g; 11,5 mmol).
Utbytte: 85%.
TLC: Stasjonær fase: silikagelplate 60F 254 Merck
Eluent =1:1= EtOAc/n-heksan Rf= 0,46
Deteksjon: 1% Kmn04 i 1 M NaOH
<1>H-NMR, <13>C-NMR, IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
D) [3p(S),5P,12a]-3-[[4-[[2-[bis(karboksymetyl)amino]-4-karboksy-l-oksobutyl]amino]-12-hydroksykolan-24-syre
En 2 M aq. løsning av LiOH (120 ml) ble tilsatt dråpevis til en løsning av forbindelse fremstilt i trinn C) (9,2 g; 9,8 mmol) i 1,4-dioksan (120 ml) ved romtemperatur. Etter 24 timer ble løsningen konsentrert (100 ml) og tilsatt dråpevis til 2 M aq. HC1 (135 ml): slutt pH var 1,9. Prespitatet ble filtrert, vasket med H20 (5 x 50 ml) og vakuumtør-ket for å gi det ønskede produkt (7,3 g; 9,6 mmol).
Utbytte: 98% smp.: 163-168°C
K.F.: 1,81%
[a]<20>D = +29,03 (cl, IM NaOH)
HPLC-analyse: 100% (areal%)
Stasjonær fase: Zorbax Eclipse XDB-C8 3,5 um; 150 x 4,6 mm kolonne pakket av Rockland Technologies Inc.;
Temperatur: 40°C;
Mobil fase: gradienteluering;
A = 0,01 M KH2P04, 0,01 M K2HPO4, 0,3 mM EDTA i vann;
B = CH3CN
Strømningshastighet: 1 ml min<-1>; Deteksjon (UV): 200 nm;
<1>H-NMR, <13>C-NMR, IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
E) Mangankompleks av [3p(S),5p,12a]-3-[[4-[[2-[bis-(karboksymetyl)amino]etyl](karboksymetyl)amino]-4-karboksy-l-oksobutyl] amino] -12-hydroksykolan-24-syre omdannet til salt med natrium (1:3)
Forbindelsen fremstilt i trinn D) (5,3 g; 7,2 mmol) ble suspendert i H20 (250 ml) og løst ved tilsetting av 1 M NaOH (36 ml) inntil pH var 6,5. Løsning av MnCl2"4H20
(1,4 g; 7,2 mmol) i H20 (50 ml) ble tilsatt pH beholdt ved 6,5 med 1 M NaOH (7,9 ml). Etter 1 time ved romtemperatur ble løsningen desaltet med nanofiltrering, deretter inndam-pet for å gi det ønskede produkt.
Utbytte: 98% smp.: > 300°C
K.F.: 13,54%
[a]<20>D = + 2,63 (c 2; H20)
CE-analyse: 100% (areal%)
Kapillær: Kondensert silika 0,72 m x 50 um Spenning: 30 kV
Buffer: 0,07 M borat, pH 9,3, 0,3 mM EDTA
Temperatur: 25°C
Stopptid: 20 minutter
Deteksjon (UV); 200 nm;
Injeksjon: hydrodynamisk (50 mbar, 4 s);
Prøvekonsentrasjon: 1 mg ml<-1>;
Instrumentering: Hewlett Packard 3D HPCE
Prekondisjonering tidstabell: t (min) handling
<1>H-NMR, <13>C-NMR, IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
På den samme måte startende fra forbindelse B) i eksempel 2 ble gadoliniumkomplekset av [3p(S),50]-3-[[4-[[2-[[bis(karboksymetyl) amino]etyl]-(karboksymetyl)amino]-4-karboksy-l-oksobutyl] amino] -12-oksokolan-24-syre fremstilt.
EKSEMPEL 15
Mangankompleks av [3a(S),50,7a,12a]-3-[[[[5-[[2-[bis-(karboksymetyl)amino]etyl](karboksymetyl)amino]-5-kar-boksypentyl]amino]karbonyl]oksy]-12-hydroksykolan-24-syre omdannet til salt med natrium (1:3)
A) N<2->[2-[bis[2-(1,1-dimetyletoksy)-2-oksoetyl]-amino]-etyl] -N2- [2- (1,1-dimetyletoksy) -2-oksoetyl] -N6- [ (fenyl-metoksy)karbonyl]-L-lysin-metylester N-(2-brometyl)-N-[2-(1,1-dimetyletoksy)-2-oksoetyl]glysin-1,1-dimetylester (25,6 g; 72,55 mmol) (fremstilt i henhold til prosedyren beskrevet i WO-A-95/32741: eksempel 15) løst i CH3CN
(25 ml) ble tilsatt dråpevis til en løsning av N<6->[(fenyl-metoksy)karbonyl]-L-lysin metylesterhydroklorid (20 g; 60,46 mmol) og N,N-diisopropyletylamin (12,64 ml;
72,55 mmol) i CH3CN (250 ml). Reaksjonsblandingen ble om-rørt ved romtemperatur. Etter 5 dager til ble N,N-diisopropyletylamin (17,7 ml; 101,6 mmol) og tert-butylbromacetat (18,8 g; 13,5 ml; 101,6 mmol) tilsatt til løsningen. Etter 24 timer ble løsningsmidlet dampet inn og residuet ble behandlet med Et20 (200 ml). Blandingen ble filtrert, løs-ningen vasket med 0,1 M HC1 (2 x 100 ml), tørket over Na2S04 og dampet inn under redusert trykk. Råproduktet ble renset ved flashkromatografi for å gi det ønskede produkt (13,03 g; 19,2 mmol).
Utbytte: 32%.
K.F. : < 0,1%
[a]<20>D = -22,47 (c 1,93, CHC13)
TLC: Stasjonær fase: silikagelplate 60F 254 Merck
Eluent =3:7= EtOAc/n-heksan Rf= 0,40
Deteksjon: Ce(S04)2, 4H20 (0,18%) og (NH4) 6Mo7024'4 H20 (3,83%) i 10% H2S04
<1>H-NMR, <13>C-NMR, IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
B) (3a,5P,7a,12a]-3-[(klorkarbonyl)oksy]-12-hydroksy-kolan-24-syre-metylester
ADVARSEL: alle operasjoner må utføres under et godt venti-lert avtrekk
En 20% løsning av fosgen i toluen (100 ml; 202,2 mmol) ble tilsatt dråpevis til en løsning av (3a,50,7a,12a)-3,12-dihydroksykolan-24-syre-metylester (14,7 g; 36 mmol) i vannfri CH2C12 (350 ml) avkjølt til 0°C under nitrogen. Løs-ningen ble omrørt i 3 timer ved romtemperatur deretter dampet inn ( FORSIKTIG) for å gi det ønskede produkt (15,2 g; 32,4 mmol).
Utbytte: 90%
<1>H-NMR, <13>C-NMR, IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
C) [3a(S),5p,12a]-3-[[[[5-[[2-[bis[2-(1,1-dimetyletoksy)-2-oksoetyl]amino]etyl][2-(1,1-dimetyletoksy)-2-oksoetyl]amino]-6-metoksy-6-oksoheksyl]amino]karbonyl]ok-sy] -12-hydroksykolan-24-syre-metylester
5% Pd/C (1,3 g) ble tilsatt til en løsning av forbindelse fremstilt i trinn A) (12,3 g; 18,1 mmol) i MeOH (120 ml) og suspensjonen ble omrørt i 3 timer under hydrogenatmosfære ved romtemperatur. Etter filtrering gjennom et Millipore®-filter (FT 0,45 um) ble løsningen dampet inn under redusert trykk. Råmaterialet ble løst i vannfri CH2CI2 (20 ml) og tilsatt dråpevis til en løsning av forbindelse fremstilt i trinn B) (8,7 g; 18,54 mmol) og N,N-diisopropyletylamin (DIEA) (6,5 ml; 37,07 mmol) i vannfri CH2C12 (200 ml) ved 0°C og under nitrogen. Etter 3 timer ble reaksjonsblandingen vasket med H20 (2 x 100 ml) , den organiske fase ble separert, tørket over Na2S04 og dampet inn under redusert trykk. Råproduktet ble renset ved flashkromatografi for å gi det ønskede produkt (8,6 g; 8,8 mmol).
Utbytte: 49%.
K.F.: < 0,1%
TLC: Stasjonær fase: silikagelplate 60F 254 Merck
Eluent =3:7= EtOAc/n-heksan Rf= 0,30
Deteksjon: Ce(S04)2, 4H20 (0,18%) og (NH4) 6Mo7024-4 H20 (3,83%) i 10% H2S04
<X>H-NMR, <13>C-NMR, IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
D) [3a(S) , 5p\12cc]-3-[ [ [ [5-[ [2-[bis (karboksymetyl) amino]etyl](karboksymetyl)amino]-5-karboksypen-tyl] amino]karbonyl]oksy]-12-hydroksykolan-24-syre
2 M LiOH (133 ml; 266 mmol) ble tilsatt til en løsning av forbindelse fremstilt i trinn C) (8,5 g; 10,64 mmol) i 1,4-dioksan (130 ml). Den resulterende løsning ble omrørt ved romtemperatur i 24 timer og deretter nøytralisert til pH 7 ved tilsetting av 2 N HC1 (120 ml). Løsningen ble konsentrert ved inndamping under redusert trykk for å gi halve volumet og svært langsomt surgjort til pH 1,5 under kraftig omrøring for å gi et hvitt prespitat som ble filtrert, vasket med H2O (2 x 100 ml) og tørket for å gi det ønskede produkt (6,45 g; 8,13 mmol).
Utbytte: 7 6% smp.: 188,9°C
K.F.: 1,44%
[a]<20>D = +35,47 (c 1,01, 1 M NaOH)
HPLC-analyse: 96,8% (areal%)
Stasjonær fase: Zorbax Eclipse XDB-C8 3,5 um; 150 x 4,6 mm kolonne pakket av Rockland Technologies Inc.;
Temperatur: 40°C;
Mobil fase: gradienteluering;
A = 0,017 M H3PO4 i vann;
B = CH3CN
Strømningshastighet: 1 ml min<1>; Deteksjon (UV): 210 nm;
<X>H-NMR, <13>C-NMR, IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
E) Mangankompleks av [3a(S),5p,12a]-3-[[[[5-[[2[bis-(karboksymetyl)amino]etyl](karboksymetyl)amino]-5-kar-boksypentyl] amino]karbonyl]oksy]-12-hydroksykolan-24-syre omdannet til salt med natrium (1:3)
Forbindelsen fremstilt i trinn D) (5 g; 6,3 mmol) ble suspendert i H2O (50 ml) og løst ved tilsetting av 1 M NaOH (18 ml; 18 mmol). En 0,559 M aq. løsning av MnCl2
(11,27 ml; 6,3 mmol) ble tilsatt over 3 timer mens pH ble
holdt ved 6,5 ved hjelp av 1 M NaOH (7,8 ml). Løsningen ble juster til pH 6,8 med 1 M NaOH (0,9 ml; 0,9 mmol), filtrert (HA 0,45 um Millipore®-membran) og desaltet ved nanofiltrering. Løsningen ble dampet inn og tørket for å gi det ønskede produkt (5,45 g; 6,05 mmol).
Utbytte: 96% smp.: > 300°C
K.F.: 3,78%
[a]<20>D = +2,74 (c 2, H20)
CE-analyse: 100% (areal%)
Kapillær: Kondensert silika 0,72 m x 50 um
Spenning: 30 kV
Buffer: 0,07 M borat, pH 9,3, 0,3 mM EDTA
Temperatur: 25°C
Stopptid: 20 minutter
Deteksjon (UV); 200 nm;
Injeksjon: hydrodynamisk (50 mbar, 4 s);
Prøve kons ent ras jon: 1 mg ml<-1>;
Instrumentering: Hewlett Packard 3D HPCE
IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
EKSEMPEL 16
Gadoliniumkompleks av N<2->bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]-etyl]-N-[(3P,5p,7a,12a)-7,12-dihydroksy-24-okso-24-[(2-sulfoetyl)amino]kolan-3-yl]-L-glutamin omdannet til salt med natrium (1:3)
A) [3P(S),5p,7a,12a]-3-[[4-[bis[2-[bis[2-(1,1-dimetyl-etoksy) -2-oksoetyl]amino]etyl]amino]-5-(1,1-dimetyletoksy)-1,5-dioksopentyl]amino]-7,12-dihydroksykolan-24-syre-fenyl-metylester
N,N-bis[2-[bis[2-(1,1-dimetyletoksy)-2-oksoetyl]amino]-etyl]-L-glutaminsyre-1-(1,1-dimetyletyl)ester (Anelli, P.L. et al. Bioconjugate Chem. 1999, 10, 137) (37 g; 50 mmol) OP,5P,7a,12a)-3-amino-7,12-dihydroksykolan-24-syre-fenylmetylester (Anelli, P.L.; Lattuada, L.; Uggeri, F. Synth. Commun. 1998, 28, 109) (31 g; 55 mmol) og dietylcyanofosfonat (kommersielt produkt) (9,6 g; 55 mmol; 9,2 ml) ble løst i DMF (750 ml). Resulterende løsning ble avkjølt til 0°C og Et3N (7,3 ml) ble tilsatt dråpevis. Etter 1 time ved romtemperatur ble løsningen dampet inn under redusert trykk, residuet ble løst i EtOAc (300 ml), vasket med en 5% aq. NaHC03 (2 x 200 ml) og deretter med saltløs-ning (2 x 200 ml). Den organiske fase ble separert, tørket over Na2S04 og deretter dampet inn under redusert trykk. Råproduktet ble renset ved flashkromatografi for å gi det ønskede produkt (36 g; 29 mmol).
Utbytte: 58%.
K.F.: 0,98%
TLC: Stasjonær fase: silikagelplate 60F 254 Merck
Eluent =2:8= EtOAc/n-heksan Rf= 0,3
Deteksjon: AcOH/konk. H2S04/p-anisaldehyd = 100:2:1
<1>H-NMR, <13>C-NMR, IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
B) [3p(S),5p,7a,12a]-3-[[4-[bis[2-[bis[2-(1,1-dimety-letoksy) -2-oksoetyl]amino]etyl]amino]-5-(1,1-dimetyl-etoksy) -1,5-dioksopentyl]amino]-7,12-dihydroksykolan-24-syre-trietylammoniumsalt
5% Pd/C (3,6 g) tilsettes til en løsning av forbindelse fremstilt i trinn A) (36 g; 29,4 mmol) i EtOH (1,5 1) og suspensjonen ble omrørt i 3 timer under hydrogenatmosfære ved romtemperatur. Etter filtrering (gjennom et Millipore®-filter FT 0,45 um) ble løsningen dampet inn under redusert trykk. Råproduktet ble renset ved flashkromatografi for å gi det ønskede produkt (22 g; 18 mmol).
Utbytte: 60%. smp.: 58°C
K.F.: 1,34%
TLC: Stasjonær fase: silikagelplate 60F 254 Merck
Eluent = 1 : 5 : 95 = Et3N/MeOH/CH2Cl2 Rf= 0,33 Deteksjon: AcOH/konk. H2S04/p-anisaldehyd = 100:2:1
<1>H-NMR, <13>C-NMR, IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
C) N<2->bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]etyl]-N-[(30,50,7a,-12a)-7,12-dihydroksy-24-okso-24-[(2-sulfoetyl)amino]kolan-3-yl]-L-glutamin
Et3N (1,2 g; 12 mmol); 1,7 ml ble tilsatt dråpevis til en løsning av forbindelse B) (12,5 g; 11 mmol), (2-aminoetan-sulfonsyre (kommersielt produkt) (1,5 g; 12 mmol) og dietylcyanofosfonat (kommersielt produkt) (2,1 g; 12 mmol; 2 ml) i DMF (4 00 ml) ved 0°C og under nitrogen. Etter 20 minutter ble reaksjonsblandingen tillatt å stige til romtemperatur og omrørt i 3 timer. Løsningen ble dampet inn under redusert trykk, residuet ble løst i dioksan (250 ml) og 0,5 M aq. H2S04 (250 ml; 125 mmol) ble tilsatt dråpevis. Den resulterende blanding ble varmet ved 90°C i 2 timer. Løsningens pH ble justert fra 1,4 til 7 med 2 N NaOH og løsningsmidlet ble dampet inn under redusert trykk. Råproduktet ble renset ved flashkromatografi. Produktet ble løst i H20 (250 ml) og 2 N HC1 (12,5 ml) og desaltet ved eluering gjennom en Amberlite® XAD-16.00 resinkolonne med en CH3CN/H20-gradient for å gi det ønskede produkt (1,5 g; 1,6 mmol).
Utbytte: 14%. smp.: > 200°C
K.F.: 5,87%
<1>H-NMR, <13>C-NMR, IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
D) Gadoliniumkompleks.av N<2->bis[2-[bis(karboksymetyl)-amino]etyl]-N-[(30,50,7a,12a)-7,12-dihydroksy-24-okso-24-[(2-sulfoetyl)amino]kolan-3-yl]-L-glutamin omdannet til salt med natrium (1:3)
Produkt C) (880 mg; 0,915 mmol) ble løst i H20 (50 ml) og
1 N NaOH ble dråpevis tilsatt inntil pH 6,8 ble nådd. Gd203 (165 mg; 0,46 mmol) ble tilsatt og den resulterende suspensjon ble varmet ved 50°C i 6 timer. Reaksjonsblandingen ble filtrert gjennom et Millipore®-apparat (HA 0,45 um-filter) og filtratet ble lastet på en Dowex® CCR 3LB svak kation-bytte resinkolonne (Na<+->form, 20 ml). Eluatet ble dampet inn under redusert trykk og tørket for å gi det ønskede produkt (1,00 g; 0,75 mmol).
Utbytte: 82%. smp.: > 250°C
K.F.: 13,95%
HPLC-analyse: 100% (areal%)
Stasjonær fase: Licrospher 100 RP-8 5 um; 250 x 4 mm kolonne pakket av Merck KGAa;
Temperatur: 40°C;
Mobil fase: isokratisk eluering med forhåndsblandet mobilfase: 1 g n-oktylamin tilsettes til 300 ml acetnitril blan-det med 700 ml vann. Løsningen bufres til pH 6 med H3PO4; Strømningshastighet: 1 ml min<-1>;
Deteksjon (UV): 200 nm;
IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur .
På samme måte ble gadoliniumkomplekset av N<2->bis[2-[bis-(karboksymetyl)amino]etyl]-N-[(3p,50)-24-okso-24-[(2-sul-foetyl) amino]kolan-3-yl]-L-glutamin fremstilt.
EKSEMPEL 17
Gadoliniumkompleks av [3a(S),50]-3-[2-[[5-[bis[2-[bis-(karboksymetyl)amino]etyl]amino]-5-karboksypentyl]amino]-2-oksoetoksy]kolan-24-syre omdannet til salt med natrium
(1:3)
A) (3a,50)-3-(karboksymetoksy)kolan-24-syre-metylester syre
Benzylglykolattriflat (Williams, M.A.; Rapoport,H.J. Org. Chem. 1994, 59, 3616) (16,8 g; 56,3 mmol) ble tilsatt over en periode på 15 minutter til en omrørt løsning av (3a, 50)-3-hydroksykolan-24-syre-metylestersyre (Dayal, B. et al. Steroids 1981, 37, 239) (20 g; 51,2 mmol) og N,N-diisopropyletylamin (10 ml; 57,4 mmol) i vannfri CH3CN (400 ml) ved -20°C. Etter 4 timer ved -20°C ble blandingen varmet til romtemperatur og omrørt i ytterligere 4 timer. Løs-ningsmidlet ble dampet inn og residuet fordelt mellom EtOAc (300 ml) og mettet NaHC03 (300 ml) . Den organiske fase ble tørket over Na2S04 og dampet inn. Residuet ble løst i EtOH (200 ml) deretter ble 5% Pd/C (3 g) tilsatt og blandingen ble omrørt ved romtemperatur over 5 timer under en hydrogenatmosfære. Etter filtrering gjennom et Millipore®-filter FH (0,45 pm) ble løsningen dampet inn og residuet ble renset ved flashkromatografi for å gi det ønskede produkt (14,2 g; 31,7 mmol).
Utbytte: 62%
K.F. : < 0,1
■"^H-NMR, <13>C-NMR, IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
B) [3a(S),5p]-3-[2-[[5-[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]-etyl]amino]-5-karboksypentyl]amino]-2-oksoetoksy]kolan-24-syre
N<2>,N<2->bis[2-[bis[2-(1,1-dimetyletoksy)-2-oksoetyl]amino]-etyl]-L-lysin-(1,1-dimetyletyl)ester (Anelli, P.L. et al. Bioconjugate Chem. 1999, 10, 137) (18,56 g; 25 mmol), (18,6 g; 25 mmol), forbindelse A) (11,2 g; 25 mmol) og dietylcyanofosfonat (kommersielt produkt) (4,9 g; 28 mmol) ble løst i DMF (300 ml). Den resulterende løsning ble av-kjølt til 0°C og Et3N (4 ml) ble tilsatt dråpevis. Etter 6 timer ved romtemperatur ble løsningen dampet inn under redusert trykk, residuet ble løst i EtOAc (250 ml), vasket
med en 5% aq. NaHC03 (2 x 100 ml) og deretter med saltløs-ning (2 x 100 ml). Den organiske fase ble separert, tørket
over Na2SC>4 og deretter dampet inn under redusert trykk. Residuet ble løst i dioksan (300 ml) og 0,5 M aq. H2S04 (300 ml; 150 mmol) ble tilsatt dråpevis. Den resulterende blanding ble varmet ved 90°C i 2 timer. Løsningens pH ble justert til 7 med 2 N NaOH og løsningsmidlet ble dampet inn under redusert trykk. Råproduktet ble renset ved flashkromatografi. Produktet ble løst i H20 (300 ml) og 2 N HC1 (30 ml) og desaltet ved eluering gjennom en Amberlite® XAD-16.00 resinkolonne med en CH3CN/H20-gradient for å gi det ønskede produkt (9,03 g; 10,25 mmol).
Utbytte: 41%.
K.F.: 2,78%
<1>H-NMR, <13>C-NMR, IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
C) Gadoliniumkompleks av [3a(S),5p]-3-[2-[[5-[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]etyl]amino]-5-karboksypentyl]-amino]-2-oksoetoksy]kolan-24-syre omdannet til salt med natrium (1:3)
Produkt B) (5 g; 5,67 mmol) ble løst i H20 (200 ml) ved tilsetting av 1 N NaOH inntil pH 6,8 ble nådd. Gd203
(1,03 g; 2,84 mmol) ble tilsatt og den resulterende suspensjon ble varmet ved 50°C i 8 timer. Reaksjonsblandingen ble filtrert gjennom et Millipore®-apparat (HA 0,45 um filter) og filtratet ble dampet inn under redusert trykk og tørket for å gi det ønskede produkt (5,74 G; 5,21 mmol).
Utbytte: 92%. smp.: > 250°C
K.F.: 5,81%
<1>H-NMR, <13>C-NMR, IR- og MS-spektrene er konsistente med den indikerte struktur.
På samme måte, startende fra forbindelse A) i eksempel 15, ble gadoliniumkomplekset av [3a(S),5p]-3-[2-[[5-[[2-[bis(karboksymetyl)amino]etyl](karboksymetyl)amino]-5-kar-boksypentyl] amino]-2-oksoetoksy]kolan-24-syre fremstilt.
På samme måte, startende fra forbindelse A) i eksempel 15 og (3P, 50,7a,12a)-3-[(karboksy-l-oksopropyl)amino]-7,12-dihydroksykolan-24 syre metylestersyre (fremstilt i henhold til WO-A-95/32741: eksempel 12), ble gadoliniumkomplekset av [3P(S),5p,7a,12a]-3-[[4-[[5-[[2-[bis(karboksymetyl)-amino]etyl](karboksymetyl)amino]-5-karboksypentyl]amino]-1,4-dioksobuty]amino]-7,12-dihydroksykolan-24-syre fremstilt.
EKSEMPEL 18
Målinger av relaksasjonshastighet (Al/Ti) .
Effektiviteten til forbindelsene av oppfinnelsen som blood pool-midler ble evaluert ved å plotte forløpet av den lon-gitudinale relaksasjonshastighet l/Ti versus den tilbake- . lagte tiden etter administrasjon. Protonrelaksasjonstiden l/Ti i blodprøvene, samlet ved forhåndsbestemte tider, ble målt ved 39°C ved hjelp av et Brucker Minispec PC120-in-strument ved å anvende "inversion recovery" tre parameter sekvenser.
Forbindelsen fremstilt i eksempel 1, gadoliniumkompleks av [3P(S),5p]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]-etyl]amino]-4-karboksy-l-oksobutyl]amino]kolan-24-syre omdannet til salt med 1-deoksy-l-(metylamino)-D-glukitol (1:3), ble administrert til en kanin ved en dose på
0,1 mmol/kg. Diagrammet (fig. 1) representerer relaksa-sj onshastighetsprofilen.
Forbindelsen fremstilt i eksempel 9 i patentsøknad WO 95/32741, gadoliniumkompleks av [3p,5P,7a,12a]-3-[[N-[N[2-[[2-[bis(karboksymetyl)amino]etyl](karboksymetyl)-amino]etyl]-N-(karboksymetyl)glykyl]amino]-7,12-dihydroksykolan-24-syre omdannet til salt med 1-deoksy-l-(metylamino)-D-glukitol (1:2), ble administrert til en kanin ved en dose på 0,1 mmol/kg. Diagrammet (fig. 2) representerer relaksasjonshastighetsprofilen.
Forbindelsen fremstilt i eksempel 15 i patentsøknad WO 95/32741, gadoliniumkompleks av [3p(S),5p,7a,12a]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]etyl]amino]-4-karboksy-l-oksobutyl] amino] -7, 12-dihydroksykolan-24-syre omdannet til salt med 1-deoksy-l-(metylamino)-D-glukitol (1:3), ble administrert til kaninen ved en dose på 0,1 mmol/kg. Diagrammet (fig. 3) representerer relaksasjonshastighetsprofilen.
Forbindelsen fremstilt i eksempel 4, gadoliniumkompleks av [ [3P(S),5P,12a]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]-etyl]amino]-4-karboksy-l-oksobutyl]amino]-12-hydroksykolan-24-syre omdannet til salt med 1-deoksy-l-(metylamino)-D-glukitol (1:3), ble administrert til apen ved en dose på 0,05 mmol/kg. Diagrammet (fig. 4) er relaksasjonshastighetsprofilen.
EKSEMPEL 19
0,3 M farmasøytisk formulering av gadoliniumkomplekset med [3P(S),5p, 12a]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]-etyl]amino]-4-karboksy-l-oksobutyl]amino]-12-hydroksykolan-
24-syre omdannet til salt med 1-deoksy-l-(metylamino)-D-glukitol (1:3)
31,775 kg med gadoliniumkomplekset av [30(S),50,12a]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]etyl]amino]-4-karboksy-l-oksobutyl] amino]-12-hydroksykolan-24-syre omdannet til salt med 1-deoksy-l-(metylamino)-D-glukitol (1:3) (fremstilt som eksemplifisert i eksempel 4) og 100 g trometamolhydroklorid løses i 100 1 sterilt vann ved romtemperatur i en
farmasøytisk rustfri stålreaktor. Etter oppløsning justeres løsningens pH til 7,4 ved tilsetting av 1 M trometamol. Løsningen sterilfiltreres gjennom filteret på 0,22 mm diameter og fordeles i 20 ml flasker, som lukkes ved halo-butylpropper, forsegles med aluminiumringer og dampsterili-seres ved Fo = 18. HPLC viser en 0,294 M titrervæske.
EKSEMPEL 20
Forhåndsfylte plastikksprøyter inneholdende formuleringen fra eksempel 19. 20 ml porsjoner av løsningen fremstilt i eksempel 20 plas-seres i en CZ plastikksprøyte med tuppen lukket med en topp. Stempelet settes inn under vakuum og den forhåndsfylte sprøyte steriliseres i autoklav til en verdi på Fo = 18.
Claims (17)
1. Anvendelse av det gelaterte kompleks av bi-trivalente paramagnetiske metallioner valgt fra gruppen bestående av Fe(<2+>), Fe(<3+>>, Cu(<2+>), Cr(<3+>), Gd(<3+>), Eu(<3+>), Dy(3+>, Yb(3+) eller Mn<<2+>) med forbindelsene med formel (I), samt saltene derav med fysiologisk kompatible organiske baser valgt fra primære, sekundære, tertiære aminer eller basiske aminosyrer, eller med uorganiske baser hvis kationer er natrium, kalium, magnesium, kalsium eller blandinger derav:
hvori: X er resten av en polyaminokarboksylligand eller derivater derav, valgt fra gruppen bestående av etylendiaminote-traeddiksyre (EDTA), dietylentriaminopentaeddiksyre (DTPA), 1,4,7,10-tetraazacyklododekan-l,4,7,10-tetraeddiksyre (DOTA), 1,4,7,10-tetraazacyklododekan-l,4,7-trieddiksyre (D03A), [10-(2-hydroksypropyl)-1,4,7,10-tetraazacyklodo-dekan-l, 4 , 7-trieddiksyre (HPD03A), 4-karboksy-5,8,11-tris(karboksymetyl)-1-fenyl-2-oksa-5,8,11-triazatridekan-13-syre (BOPTA); Y er derivatet av en gallesyre valgt fra gruppen bestående av restene av kol-, kenodeoksykol-, deoksykol-, urso-deoksykol-, litokolsyrer, både som sådan og funksjonalisert i stillingene som har hydroksygruppen som den reaktive gruppe, uavhengig av stereokjemien til sluttproduktene, derivatene omfatter også konjugatet av syregruppen i 24-stillingen med taurin og glysin; L er en kjede bundet til en hvilken som helst stilling i X, eventuelt omfattende en av karboksylgruppene som således transformeres til en amidgruppe, og til C-3-, C-7-, Om- stillingene i Y, som har den følgende formel (II) hvor m er et heltall som strekker seg fra 1 til 10, hvori for verdier over 1, A kan ha forskjellige betydninger, A har den følgende formel (III), n og q kan være 0 eller 1, men er ikke på samme tid null, P kan strekke seg fra 0 til 10, Z er et oksygenatom eller en -NR-gruppe, hvor R er et hydrogenatom, eller en (C1-C5) -alkylgruppe usubstituert eller substituert med en -COOH-gruppe; for fremstillingen av diagnostiske formuleringer for å oppnå bilder av blodsystemet i det humane eller animalske legeme, ved hjelp av kjernemagnetisk resonans.
2. Anvendelse av forbindelsene ifølge krav 1, hvor kompleksene er dannet med gadolinium- eller manganioner.
3. Anvendelse av forbindelsene med formel (I) ifølge krav 1, hvor avstandskjedene L har formelene (Illa) og (Illb)
4. Anvendelse av forbindelsene med formel (I) ifølge krav 1, hvor Z er et oksygenatom og L derved er dannet gjennom hydroksygruppene til stede i 3-, 7-, 12-stillingene, uavhengig av sluttproduktenes stereokjemi.
5. Anvendelse av forbindelsene med formelen (I) ifølge krav 3, hvor resten X er vaglt fra gruppen bestående av: EDTA, DTPA, DOTA, D03A, BOPTA; L er valgt fra gruppen bestående av (Illa), (Illb); og Y er valgt fra gruppen bestående av rester av kol-, deoksykol-, kenodeoksykol-, litokolsyrer, som de er eller hvor en eller flere hydroksygrupper har blitt transformert til ketogrupper, bundet til L med en aminogruppe i 3-stillingen, syregruppen i 24-stillingen er til stede som den er eller som sitt taurin- eller glysinderivat; kompleksene av forbindelsene er dannet med gadolinium- eller manganionene og kationene av organiske baser egnet for nøytraliseringen er valgt fra gruppen bestående av etanolamin, dietanolamin, morfolin, glukamin, N-metylglukamin, N,N-dimetylglukamin eller kationene av uorganiske baser er valgt fra gruppen bestående av natrium, kalium, magnesium, kalsium eller blandinger derav.
6. Anvendelse av forbindelsene med generell formel (IV) ifølge krav 1, hvori formel (I) resten X er DTPA substituert på sentralkjeden og hvor Ri er et hydrogenatom eller -COOH-gruppen,
Y er valgt fra gruppen bestående av kol-, deoksykol-, kenodeoksykol-, litokolrester og L har strukturen med formel (III).
7. Anvendelse av forbindelsene med generell formel (IVa) ifølge krav 6, hvor Ri
er -COOH-gruppen og Y har betydningene definert over for forbindelsene med generell formel (IV) og L har strukturene (Illa) og (Illb).
8. Anvendelse av forbindelsene med generell formel (Iva) ifølge krav 7, valgt fra gruppen bestående av [30(S),50]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]-etyl]amino]-4-karboksy-l-oksobutyl](karboksymetyl)amino]-kolan-24-syre; [3p(S),5p]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]etyl]-amino]-4-karboksy-l-oksobutyl]amino]kolan-24-syre; [3p(S),5p]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]etyl]-amino]-4-karboksy-l-oksobutyl]amino]-12-oksokolan-24-syre; [3P(S),5p,7a]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]-etyl]amino]-4-karboksy-l-oksobutyl]amino]-7-hydroksykolan-24-syre; N<2->bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]etyl]-N-[(3p,5p)-24-okso-24-[(2-sulfoetyl)amino]kolan-3-yl]-L-glutamin; N2-bis [2- [bis (karboksymetyl) amino] etyl] -N- [ (3p, 5p, 7a, 12a) - 7,12-dihydroksy-24-okso-24-[(2-sulfoetyl)amino]kolan-3-yl]-L-glutamin; [3P(S),5p,7P]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]-etyl]amino]-4-karboksy-l-oksobutyl]amino]-7-hydroksykolan-24-syre; [3p(R),5p,12a]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]-etyl]amino]-4-karboksy-l-oksobutyl]amino]-12-hydroksykolan-24-syre; [3p(RS),5p, 12a]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]-etyl]amino]-4-karboksy-l-oksobutyl]amino]-12-hydroksykolan-24-syre; [3p(RS),5p,7a,12a]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboksymetyl)-amino]etyl]amino]-4-karboksy-l-oksobutyl]amino]-7,12-dihydroksykolan-24-syre; [3P (RS) , 5p, 7a, 12a] -3- [ [4- [bis [2- [bis (karboksymetyl) - amino]etyl]amino]-4-karboksy-l-oksobutyl]amino]-7,12-dihydroksykolan-24-syre; [3a(S),5P]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]-etyl]amino]-4-karboksy-l-oksobutyl]-amino]]kolan-24-syre; [3P (S) , 5p, 7a, 12a] -3- [ [4- [bis [2- [bis (karboksymetyl) amino] - etyl]amino]-4-karboksy-l-oksobutyl]amino]-12-hydroksykolan-24-syre; [3a(S),5p, 12a]-3-[[4-[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]-etyl]amino]-4-karboksy-l-oksobutyl]amino]-12-hydroksykolan-24-syre.
9. Anvendelse av forbindelsene med generell formel (IVb) ifølge krav 6,
hvor Y har betydningen definert over for forbindelser med generell formel (IV) og L har strukturen (Illa).
10. Anvendelse av forbindelsene med generell formel (IVb) ifølge krav 9, valgt fra gruppen bestående av: [3P, 5P, 7a, 12a]-3-[[[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]etyl]-amino]acetyl]amino]-7,12-dihydroksykolan-24-syre; Op,5p)-3-[[[[[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]etyl]-amino]acetyl]amino]acetyl]amino]kolan-24-syre; Op, 5P, 7a, 12a)-3- [ [ [ [ [bis [2- [bis (karboksymetyl) amino] - etyl]amino]acetyl]amino]acetyl]amino]-7,12-dihydroksykolan-24-syre; (3p,5p, 7a, 12a)-3-[[6-[[[bis[2-[bis(karboksymetyl)amino]-etyl]amino]acetyl]amino]-1-oksoheksyl]amino]-7,12-dihydroksykolan-24-syre.
11. Anvendelse av forbindelsene med generell formel (V) ifølge krav 5, hvor i generell formel (I) resten X er DTPA, Y har betydningen definert over for forbindelsene med generell formel (IV) og L har strukturen med formel (Illa)
12. Anvendelse av forbindelsene med generell formel (V) ifølge krav 11, valgt fra gruppeng bestående av: (3p,5p,7a, 12a)-3-[ [N-[N-[2-[ [2-[bis (karboksymetyl) amino]-etyl](karboksymetyl)amino]etyl]-N-(karboksymetyl)glykyl]-glykyl]amino]-7,12-dihydroksykolan-24-syre;
18- [ [ Op, 5p, 7a, 12a)-23-karboksy-7,12-hydroksy-24-norkolan-3-yl]amino]-3,6,9-tris(karboksymetyl)-11,18-diokso-3,6,9,12-tetraazaoktadekansyre.
13. Anvendelse av forbindelsene med generell formel (VI) ifølge krav 5, hvor i den generelle formel resten X er D03A, Y har betydningene definert over for forbindelsene med generell formel (IV) og L er valgt fra strukturene (Illa) og (Illb)
14. Anvendelse av forbindelsene med generell formel (VII) ifølge krav 1, hvor i generell formel (I) resten X er EDTA,
Y har betydningene definert over for forbindelsene med generell formel (IV) og L har strukturen med formel (III).
15. Anvendelse av forbindelsene med generell formel (VII) ifølge krav 14, valgt fra gruppen bestående av: [3a(S),5P,12a] -3-[[[[5-[[2-[bis(karboksymetyl)amino]-etyl](karboksymetyl)amino]-5-karboksypentyl]amino]-karbonyl]oksy]-12-hydroksykolan-24-syre; [3P (S) , 5p, 7a, 12a] -3- [ [4- [ [5- [ [2- [bis (karboksymetyl) - amino]etyl](karboksymetyl)amino]-5-karboksypentyl]amino]-1,4-dioksobutyl]amino]-7,12-dihydroksykolan-24-syre; [3P(S) , 5p]-3-[2-[[5-[[2-[bis(karboksymetyl)amino]-etyl](karboksymetyl)amino]-5-karboksypentyl]amino]-2-oksoetoksy]kolan-24-syre; [3p (S),5p, 12a]-3-[[4-[[2-[[bis(karboksymetyl)amino]-etyl](karboksymetyl)amino]-4-karboksy-l-oksobutyl]amino]-12-hydroksykolan-24-syre; [3P(S),5p]-3-[[4-[[2-[[bis(karboksymetyl)amino]-etyl](karboksymetyl)amino]-4-karboksy-l-oksobutyl]amino]-12-oksokolan-24-syre.
16. Anvendelse ifølge krav 1 av en av de følgende forbindelser: [3a(S) , 5p,7a,12a] -3- [ [ [ [5- [bis [2- [bis (karboksymetyl) amino] - etyl]amino]-5-karboksypentyl]amino]karbonyl]oksy]-7,12-dihydroksykolan-2 4-syre; [3a(S),5P]-3-[2-[[5-[bis[2-[bis(karboksymetyl)-amino]etyl]amino]-5-karboksypentyl]amino]-2-oksoetoksy]-kolan-24-syre; [3p(S) , 5p,7a,12a]-3-[ [4-[ [5-[bis[2-bis(karboksymetyl)amino]-etyl]amino]-5-karboksypentyl]amino]-1,4-dioksobutyl]amino]-7,12-dihydroksykolan-24-syre;
10- [3- [ [ (3a(S) , 5p,7a,12a)-23-karboksy-7,12-dihydroksy-24-norkolan-3-yl]oksy]-2-hydroksypropyl]-1,4,7,10-tetraaza-cyklododekan-l, 4,7-trieddiksyre.
17. Anvendelse av forbindelsene ifølge krav 1 til 16, hvori de gelaterte komplekssalter er dannet med natrium og N-metylglukamin.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IT1998MI002802A IT1304501B1 (it) | 1998-12-23 | 1998-12-23 | Uso di derivati di acidi biliari coniugati con complessi metallicicome "blood pool agents" per l'indagine diagnostica tramite risonanza |
| PCT/EP1999/010002 WO2000038738A1 (en) | 1998-12-23 | 1999-12-16 | Blood pool agents for nuclear magnetic resonance diagnostics |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO20013154D0 NO20013154D0 (no) | 2001-06-22 |
| NO20013154L NO20013154L (no) | 2001-08-23 |
| NO322551B1 true NO322551B1 (no) | 2006-10-23 |
Family
ID=11381326
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO20013154A NO322551B1 (no) | 1998-12-23 | 2001-06-22 | Anvendelse av gelaterte komplekser som "blood-pool"-midler for kjernemagnetisk resonansdiagnostikk |
Country Status (20)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6461588B1 (no) |
| EP (2) | EP1140209B1 (no) |
| JP (1) | JP4733271B2 (no) |
| KR (1) | KR100736298B1 (no) |
| CN (2) | CN1263515C (no) |
| AT (1) | ATE405296T1 (no) |
| AU (1) | AU773876B2 (no) |
| CA (1) | CA2355888C (no) |
| CZ (1) | CZ302195B6 (no) |
| DE (1) | DE69939398D1 (no) |
| HK (1) | HK1042432B (no) |
| HU (1) | HU228048B1 (no) |
| IL (2) | IL143730A0 (no) |
| IT (1) | IT1304501B1 (no) |
| MX (1) | MXPA01006344A (no) |
| NO (1) | NO322551B1 (no) |
| PL (1) | PL196474B1 (no) |
| RU (2) | RU2250765C2 (no) |
| WO (1) | WO2000038738A1 (no) |
| ZA (1) | ZA200104820B (no) |
Families Citing this family (25)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| TW319763B (no) | 1995-02-01 | 1997-11-11 | Epix Medical Inc | |
| IL134985A0 (en) | 1997-10-02 | 2001-05-20 | Epix Medical Inc | A method for contrast enhanced diagnostic imaging |
| IT1317862B1 (it) * | 2000-02-29 | 2003-07-15 | Bracco Spa | Coniugati di acidi biliari con chelati complessi di ioni metallici eloro uso. |
| IT1318485B1 (it) * | 2000-04-21 | 2003-08-25 | Bracco Spa | Uso di derivati di acidi biliari coniugati con complessi di ionimetallici nella visualizzazione diagnostica di sistemi microvascolari |
| US6900192B2 (en) * | 2000-10-06 | 2005-05-31 | Xenoport, Inc. | Bile-acid conjugates for providing sustained systemic concentrations of drugs |
| EP1229041A1 (en) * | 2001-02-05 | 2002-08-07 | Bracco Imaging S.p.A. | A process for the preparation of 3-Glutamido bile ester derivatives using N-tBoc methyl pyroglutamate |
| US7053076B2 (en) | 2001-08-29 | 2006-05-30 | Xenoport, Inc. | Bile-acid derived compounds for enhancing oral absorption and systemic bioavailability of drugs |
| EP1302465A1 (en) * | 2001-10-11 | 2003-04-16 | BRACCO IMAGING S.p.A. | Enhanced substrate imaging by reversible binding to a paramagnetic complex |
| US7850947B2 (en) | 2003-01-13 | 2010-12-14 | Bracco Imaging S.P.A. | Gastrin releasing peptide compounds |
| US7922998B2 (en) | 2003-01-13 | 2011-04-12 | Bracco Imaging S.P.A. | Gastrin releasing peptide compounds |
| US7226577B2 (en) | 2003-01-13 | 2007-06-05 | Bracco Imaging, S. P. A. | Gastrin releasing peptide compounds |
| US8420050B2 (en) * | 2003-01-13 | 2013-04-16 | Bracco Imaging S.P.A. | Gastrin releasing peptide compounds |
| US7611692B2 (en) | 2003-01-13 | 2009-11-03 | Bracco Imaging S.P.A. | Gastrin releasing peptide compounds |
| AU2003303714B2 (en) * | 2003-01-13 | 2009-02-19 | Bracco Imaging S.P.A. | Improved linkers for radiopharmaceutical compounds |
| KR20060121244A (ko) * | 2003-12-24 | 2006-11-28 | 브라코 이미징 에스.피.에이. | 개선된 가스트린 방출 펩티드 화합물 |
| CN101827631B (zh) | 2007-07-11 | 2013-04-24 | 得克萨斯系统大学董事会 | 用于成像中的粒子和标记物 |
| CN101845112B (zh) * | 2010-06-02 | 2011-09-14 | 华东理工大学 | 一种基于高分子纳米粒子的高灵敏性核磁共振成像造影剂的制备方法 |
| MX356514B (es) | 2011-01-20 | 2018-05-30 | Univ Texas | Marcadores de formación de imagen por resonancia magnética, sistemas de suministro y extracción, y métodos de fabricación y uso de los mismos. |
| EP2822605A1 (en) | 2012-03-05 | 2015-01-14 | Bracco Imaging S.p.A | Dynamic contrast enhanced mri method and agents for the assessment of the macromolecular transport within pathologic tissues |
| CN102766188B (zh) * | 2012-07-24 | 2016-01-13 | 上海交通大学 | 胆固醇衍生物、螯合物、重组高密度脂蛋白及其用途 |
| GB201421163D0 (en) * | 2014-11-28 | 2015-01-14 | Ge Healthcare As | Formulations of metal complexes |
| US10093741B1 (en) | 2017-05-05 | 2018-10-09 | Fusion Pharmaceuticals Inc. | IGF-1R monoclonal antibodies and uses thereof |
| AU2018261890A1 (en) | 2017-05-05 | 2019-11-28 | Centre For Probe Development And Commercialization | IGF-1R monoclonal antibodies and uses thereof |
| BR112019023246B1 (pt) | 2017-05-05 | 2023-11-14 | Centre For Probe Development And Commercialization | Compostos compreendendo uma fração quelante, métodos para produção dos mesmos e usos dos mesmos |
| CN112424214A (zh) * | 2018-05-30 | 2021-02-26 | 川斯勒佰尔公司 | 包含甾族部分的阳离子脂质 |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IT1213029B (it) * | 1986-01-30 | 1989-12-07 | Bracco Ind Chimica Spa | Chelati di ioni metallici paramagnetici. |
| US5057302A (en) * | 1987-02-13 | 1991-10-15 | Abbott Laboratories | Bifunctional chelating agents |
| US5227474A (en) * | 1987-02-13 | 1993-07-13 | Abbott Laboratories | Bifunctional chelating agents |
| DE3930696A1 (de) * | 1989-09-14 | 1991-03-28 | Hoechst Ag | Gallensaeurederivate, verfahren zu ihrer herstellung, verwendung als arzneimittel |
| NO940115D0 (no) * | 1994-01-13 | 1994-01-13 | Nycomed Imaging As | Kontrastmidler for roentgen- og magnettomografisk avbildning |
| DE69534990T2 (de) * | 1994-04-20 | 2006-10-05 | Amersham Health Salutar Inc. | Kontrastmittel |
| IT1269839B (it) * | 1994-05-26 | 1997-04-15 | Bracco Spa | Coniugati di acidi biliari, loro derivati con complessi metallici e relativi usi |
| JPH11116542A (ja) * | 1997-10-06 | 1999-04-27 | Sogo Pharmaceut Co Ltd | γ−グルタミン酸アミド類の製造法 |
-
1998
- 1998-12-23 IT IT1998MI002802A patent/IT1304501B1/it active
-
1999
- 1999-05-26 US US09/318,618 patent/US6461588B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-12-16 PL PL349488A patent/PL196474B1/pl unknown
- 1999-12-16 CZ CZ20012330A patent/CZ302195B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1999-12-16 EP EP99963556A patent/EP1140209B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-12-16 IL IL14373099A patent/IL143730A0/xx active IP Right Grant
- 1999-12-16 MX MXPA01006344A patent/MXPA01006344A/es active IP Right Grant
- 1999-12-16 DE DE69939398T patent/DE69939398D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1999-12-16 AT AT99963556T patent/ATE405296T1/de not_active IP Right Cessation
- 1999-12-16 CN CNB998157929A patent/CN1263515C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1999-12-16 EP EP08004643.6A patent/EP1935435B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-12-16 RU RU2001120351/15A patent/RU2250765C2/ru not_active IP Right Cessation
- 1999-12-16 JP JP2000590689A patent/JP4733271B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1999-12-16 WO PCT/EP1999/010002 patent/WO2000038738A1/en active IP Right Grant
- 1999-12-16 RU RU2004127136/04A patent/RU2395490C2/ru not_active IP Right Cessation
- 1999-12-16 HU HU0104715A patent/HU228048B1/hu not_active IP Right Cessation
- 1999-12-16 CA CA002355888A patent/CA2355888C/en not_active Expired - Fee Related
- 1999-12-16 KR KR1020017007945A patent/KR100736298B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1999-12-16 CN CNB2006100676912A patent/CN100450996C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1999-12-16 AU AU19807/00A patent/AU773876B2/en not_active Ceased
-
2001
- 2001-06-13 ZA ZA200104820A patent/ZA200104820B/en unknown
- 2001-06-13 IL IL143730A patent/IL143730A/en not_active IP Right Cessation
- 2001-06-22 NO NO20013154A patent/NO322551B1/no not_active IP Right Cessation
-
2002
- 2002-05-04 HK HK02103398.0A patent/HK1042432B/zh not_active IP Right Cessation
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| NO322551B1 (no) | Anvendelse av gelaterte komplekser som "blood-pool"-midler for kjernemagnetisk resonansdiagnostikk | |
| DE69514350T2 (de) | Gallensäurekonjugate, ihre metallkomplexe und verwandte verwendungen | |
| US5021236A (en) | Method of enhancing NMR imaging using chelated paramagnetic ions bound to biomolecules | |
| JP5052726B2 (ja) | 金属イオンキレートとの胆汁酸複合体及びその使用 | |
| JPS5829718A (ja) | Ｎｍｒ―診断法において緩和時間に影響を及ぼす薬剤およびその製法 | |
| JPH08510458A (ja) | 沃素化された常磁性キレートおよびそれらの造影剤としての使用法 | |
| WO2012059576A1 (en) | Cest systems exhibiting a concentration independent responsiveness | |
| US5733528A (en) | Paramagnetic chelates for nuclear magnetic resonance diagnosis | |
| WO1994001393A1 (en) | Novel chelating agent, complex compound composed of said agent and metallic atom, and diagnostic agent containing said compound | |
| KR100376950B1 (ko) | 대환식킬레이트제,이들의킬레이트및진단분야에서의이의용도 | |
| AU773189B2 (en) | Perfluoroalkylamide, the production thereof and the use thereof in diagnostics | |
| KR20030022381A (ko) | 극성 라디칼과의 퍼플루오로알킬 함유 착물, 이의 제조방법 및 용도 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM1K | Lapsed by not paying the annual fees |