HU228048B1 - Blood pool agents for nuclear magnetic resonance diagnostics - Google Patents

Description

Véredény szerek mágneses magrezonancia diagnosztikához

A jelen találmány epesavak konjogátomal ás kelátképző aktivitással rendelkező molekulák, fémion komplexeinek kontrasztanyagokkéntl - konkrétan véredény szerekként! ~ új alkalmazására vonatkozik a mágneses rezonancia-képalkotás” (M.R.I.) néven ismert diagnózis-eljárásban.

Keiátképzö anyagokból és megfelelő fémekből képzett komplexeket már alkalmaznak kontrasztanyagokként a következő diagnózis eljárásokban: röntgensugár-képalkotás, mágneses magrezonancia-képalkotás (M.R.I.j és szcintigráfia.

Közelebbről, a mágneses rezonancia-képalkotást (M.R.J.) alkalmazó orvosi diagnózis - egy elismerten hatásos diagnózis technika a klinikai gyakorlatban - [lásd; Stark, D. 0., Bradíey, W. G·,, dr., Eds., Magnói ic Resonance Imaging The C. V. Mosby Company, St. Louis, Missouri (USA) (1988.)] elsősorban paramágneses gyógyászati készítményeket, előnyösen két-háromvegyérfékű paramágneses fémionok poüamino poilkarbonsav bgandumokkai és/vagy azok származékaival vagy analógjaival képzett kelét komplexeit tartalmazó készítményeket alkalmaz.

A képek, amelyek alapvetően a víz protonok NMR jeléből származnak, különböző paraméterek, így például protonsürüség

Aktaszám; 94777-4023-MOI/KmO

és Ή és Τ₂ relaxációs· idők közötti komplex kölcsönhatás eredményei. Kontraszt-kiemelés elérhető exogén kémiai anyagok adagolásával, amelyek lényegesen megváltoztatják, a közeli víz protonok rezonancia tulajdonságait [lásd: Lauffer, R. B. Chem. Rév., 87, SOI (198?.)].

Az NMR képalkotáshoz alkalmazott paramágneses kontrasztanyagok azon víz protonok relaxációs idejének módosításával hatnak, amelyek azon szövetekben vannak jelen, amelyekben a kontrasztanyagok koncentrálódnak, ezért azok növelik a kontrasztot különböző szövetek között vagy egészséges és beteg szövetek között,

A gadolíníum paramágneses komplexek - azok bipoláris kölcsönhatáson keresztül, a közeli vízmolekulák protonrelaxációs Idejének csökkentésére való nagyfokú képességüknek megfelelően - tanulmányok, publikációk és szabadalmak tárgyai voltak. Egyesek közülük a klinikai alkalmazásban MRI kontrasztanyagokként vannak jelen:

Gd-DTRA, a gadoiíníum dietilén-triamino-penteecetsavval alkotott komplexének N-metil-glükaminsója, a MAGNEVIST®; a Gd-DOTA, a gadolíníum 1,4,7,10-fetraazacIklo-dodekán-1,4,7,1 O-tetraecetsavval képzett komplexének N-meíil-giűkamin sója, a DOTAREM®; a Gd~HRDÖ₃A, a gadoHnium [TÖ-(2~hidroxipropílj-l ,4,7,1 Ö-tetraaza-cikicdodoekán-1,4,7-triaoetsavval alkotott komplexe, a FROHÁNCE®; a Gd-DTPA-βΜΑ, a gadolíníu m d l e t i I é n -1 ri a m i no - p e n t a eee í s a v - b I sz {m e 111 a m í d} - d a I a I k o i ο ί í komplexe, az QMNS8CAN®

A fent felsorolt, és a kereskedelmi forgalomban kapható kontrasztanyagok általános alkalmazásúak. Ténylegesen adagolás után az MRl kontrasztanyagok díffundálnak a vérben és a

84777-4Ö23~MOi/KmO * * * fest különböző részeinek sejten kívüli állományában kiválasztásuk előtt. Ezért azok ebben a tekintetben hasonlóak a röntgensugár felhasználásával végrehajtott orvosi diagnózishoz alkalmazott jódozotf vegyületekhez.

Jelenleg az orvosi szakterületen szükség van olyan kontrasztanyagokra, amelyek specifikus szervekre vagy a vérkeringés? rendszer képalkotására irányulnak, amelyek nem határozhatók meg jól a már kereskedelmi forgalomban kapható termékek alkalmazásával. Utóbbi elérésére az első közelítés a kontrasztanyagnak makromolekulákhoz, így például proteinekhez kovalens kötéssel történő kapcsolásából vagy annak stabil molekuláris aggregátumok, így például liposzómák belsejébe történő bezárásából vagy úgynevezett szuperparamágnases részecskék alkalmazásából áll.

Például a gadoiínlum dieiiíén-tfiamino-peniaecetsavval képzett komplexét (Gd-DTPA) humán albumlnhoz (HSA), polilizinhez vagy dextránhoz kapcsolták [lásd; Oksendal A. N. és munkatársai: d. Magn. Résén. Imaging, 157 (1993.); Rocklage S. M., Contrast Agents, Magn, Rés. Imaging, Mosby Year Book, 327-437 (1992.)1 annak érdekében, hogy minimalizálják vagy akár megszüntessék a vérből sejten kívüli folyadékba történő diffúziót, ezáltal biztosítsák a szer vérkeringés! rendszerben való magasabb fokú visszatartását (retencióját). Ez a megoldás, bár eléri a kívánt hatást, kellemetlen mellékhatásokkal jár, mivel maga a szer nehezen választódik ki.

Elférő stratégia a szuperparamágneses, polietilén-glikolokkal vagy szénhidrogénekkel bevont részecskék alkalmazása, annak érdekében, hogy csökkentsék az endotéliális retikuium vagy más rendszerek által a májbeli felvételt [lásd:

94777-4023-MO!/KmO

Töcock C., Bíoehim. Biophys. Aota, 77, (1993.); Bogdanoy, A. A. és mis; Radlology, 701, (1993.)}, ezáltal meghosszabbítsák az anyagok vérben való tartós bennmaradását. Ebben az esetben is megvalósulnak a fent említett mellékhatások, valamint jelentkeznek a magas előállításl költséggel kapcsolatos problémák.

Ezért az Igény egy hatásos, alacsony toxlcltású és elfogadhatóan ésszerű költségű véredény-szerre továbbra is jelen van.

A találmány specifikusan kiválasztott, általunk már korábban a WO-A-95/32741 nemzetközi közzétételi számú nemzetközi szabadalmi bejelentésben Ismertetett vegyületek véredény-szerekkéntl új alkalmazására (a szóban forgó vegyületek epesav és kelátképzőszer konjugációjából állíthatók elő, és alkalmasak paramágneses két-háromvegyértékü fémionok kelát komplexben való megkötésére), továbbá új vegyúíetekre, azok előállítási eljárására és azok véredény szerekként! alkalmazására vonatkozik.

A szóban forgó vegyületek jó máj-epe általi kiválasztási tulajdonságokat mutatnak [lásd: Aneili P. L. és munkatársai, Aota Radiologioa, 38, 125 (1997,)), amely a máj-epe rendszer láthatóvá tételére ígéretes kontrasztanyagokká teszí azokat.

Meglepetéssel tapasztaltuk, hogy a vegyületek egy specifikus osztálya elegendően hosszú Ideig marad az érrendszerben, hogy megfelelő legyen kontrasztanyagokkénti alkalmazásra az érrendszerről, különösen e koszorúerekről való képalkotásra.

Ez a hatás tisztén bizonyítható állatokban (így például nyúl, majom) fn v/vo vizsgálatok végrehajtásával. Az érrendszerben a tartós bennmaradás könnyen láthatóvá tehető az állat vérmintáinak a kontrasztanyag adagolása után megfelelő időiníervaí94 77 7-4 023 - ΜO i/KraÖ

Λ lomokban felvett proton-relaxációs értékeinek (1/T\) pontsorra!

ábrázolásakor.

Mivel a Gd(lll) komplexek paramágneses anyagok, a magas

1./T-í értékek bizonyítják a kontrasztanyag vérben lévő magas koncentrációját.

A hagyományos sejten kívüli kontrasztanyagok és a véredény-szerek közötti különbséget jő! megvilágítják Lauffer és munkatársai a Rádíology, 529, (1998.) szakirodalmi helyen, amelyben a vérben a TG profilokat a kontrasztanyag adagolása után. eltelt idő függvényében Ismertetik.

Közelebbről, a találmány szerint! komplexek például nyúlnak való adagolásukkor megfelelő biztonsági indexszel kompatibilis dózisban alkalmasak olyan relaxációs sebesség változások kiváltására a vérben (ÁV1h~ben kifejezve), amelyek magasabbak, mint 5 s¹ 10 perccel az adagolás után, ezáltal ígéretesek az érrendszerről való képalkotás céljából kontrasztanyagokként! alkalmazásra.

Azt találtuk, hogy ez a hatás nem egyedül az epesavak jelenlétével függ össze, hanem a komplexek kémiai szerkezetétől függ. Valójában úgy tűnik, hogy a keláiképzo-egységnek előnyösen a szteroid vázhoz kell kapcsolódnia az epesav 3., 7. vagy 12. helyzetében lévő kötésen keresztül.

Bebizonyítottuk, hogy bármely kötés a kelátképző-egység és az epesav között, amely magában foglalja a 24. pozícióban levő karbonsav csoportot [lásd: (!/A) ábra], olyan komplexeket eredményezne, amelyek jelenléte az érrendszerben nem kielégítő.

Ezért a találmány célja az (!) általános képletü vegyüietek paramágneses, két-háromvegyértékü fémionokkal, ezen belül

94777-4023- Μ017K mO $

»* » (3 + ) (3+) ,(3+}

Fe (2 + )

Fe (3+)

Cu^li +>

Cr {3+3

Eu '3~!

vagy Mn^í2+} ionokká? képzett komplexeinek véredény-szsrekkénti alkalmazása; a szóban forgó komplexekben

X jelentése egy poliamíno-políkarbonsav ligandum vagy ennek származéka, ez alábbi csoportból kiválasztva; etilén-dlamino-tetraecetsav (EDTA), d íet i lén-tr lám ino-pentaecetsav (DTPA), 1.4,7.1 Ö-tetraaza-ciklododekán-1 ,4,7,10-tetraecetsav (DOTA), 1,4.7,10-letraaza-olklododekán-1,4,7-triecetsav (D0₃A), j[1O^;-(2-hidroxi-propil)-1,4,7,18-tefraaza-ciklododekán-1,4,7-triecetsav (HPDO3.A), 4-karboxi-5,8,11 -trlsz(karboxímetil)-1 -fenil-2-o.xa-5,8,11 -triazatridekán-13-on-sav (BOPTA);

Y jelentése egy epesav-származék, amely lehet kolinsav, kenodezoxi-kolinsav, dezoxi-kolinsav, urzodezoxi-kolinsav vagy iitokolinsav maradéka, amint azt az (l/B) ábra képletei mutatják; akár eredeti formájukban, akár funkciós csoporttal ellátva azokban a pozíciókban, amelyek reaktív csoportként hidroxilcsoportot tartalmaznak, függetlenül a végtermékek sztereo kérni áj ától; a szóban forgó származék magában foglalja a savcsoport a 24. pozícióban taurinnai és glicinnel képzett konjugátumát;

L jelentése az X bármely pozíciójában kapcsolódó, adott esetben egy vagy több karboxitcsoportof tartalmazó lánc, amely ezáltal egy amidcsoportiá transzformálódik, és az Y szénatomjainak 3., 7. és 12. helyzeteiben kapcsolódó lánc, és az a (II) általános képlettel rendelkezik, amelyben m értéke 1-10 közötti egész szám, amelyben az 1 feletti értékekre A különböző jelentésű lehet,

A a (III) általános képlettel rendelkező csoport,

S4777-4Ö23-MOi/KmO < φφ « φ

Κ#» Φ «* η és g értéke lehet 0 vagy 1, de .azok egyidőbe.n nem lehetnek egyaránt 0, p értéke Ö-10, jelentése agy oxigénatom vagy egy -NR-csoport, amelyben

R helyettesítő jelentése hidrogénatom vagy 1-5 szénatomos alkilcsoport, amely lehet helyettesítetíen vagy egy -COOH~ c s ο ρ o r 11 a I h e I y e t te s í t e 11.

Különösen előnyös vegyüietek azok, amelyben az L jelű helyképző láncok a (Illa) és (lllbj általános képletnek.

Előnyösek azok a szerkezetek is, amelyekben 2 jelentése oxigénatom, és ezért L a 3,, 7. és 12. helyzetekben jelen lévő hídroxilcsoporton keresztül képződik, függetlenül a végtermékek sztereokémiájától.

Különösen előnyösek az (i) általános képletű vegyüietek. amelyekben az X maradék az alábbi csoportok közül van kiválasztva; EDTA, DTFA, DÓJA, D0₃A, BOPTA: L jelentése (illa) vagy (Illb) csoport;

Y jelentése előnyösen a kohnsav, a dezoxiköbnsav, a kenődezoxikoSínav, a lííokollnssv maradéka, amely L-hez a 3. helyzetben egy amlnocsoporttal kapcsolódik, és a savas csoport a

24. helyzetben eredeti formájában, vagy annak íaurin- vagy glicinszármazéka formájában van jelen.

Y helyettesítő Is lehet eltérő funkciós csoporttal ellátva, például egy vagy főbb hidroxilesoport ketocsoporfokká történő konverzióján keresztül.

Különösen előnyösek a fent meghatározott paramágneses fémionok közül a gadolínlum- vagy mangán-ionokkal képzett komplexek.

S4777-4023-MO!/KmO ί» * X « «

Előnyösek a ÖV) általános képletű vegyületek, amelyekben az (3) általános képletű vegyületben az

X maradék jelentése annak központi láncán helyettesített DTPA, amelyben R? helyettesítő jelentése hidrogénatom vagy -COOH csoport,

V jelentése kolínsav-, dezoxíkoíinsav-, dezoxíkoíinsav-, Htokoh'nsav-maradék és L a (Hl) általános képlet szerinti szerkezettel rendelkezik.

Különösen előnyösek a (IVa) általános képletű vegyületek, amelyekben Rí helyettesítő jelentése COOH-csoport, Y a (IV) általános képletű vegyületekre fent meghatározott jelentésű és L a (Illa) vagy (131b) általános képlet szerinti szerkezetű csoport.

A találmány további tárgyai a kővetkező új vegyületek, amelyek a (IV) általános képletö vegyületek csoportjához tartoznak, továbbá ezek előállítására irányuló eljárások. f3p(S),5pj-3-{{4-[bisz-(2-(bisz(karboximetíi)-aminoj-etil]~aminoj-4-karboxi-1 -oxo-buti lj-(karboxlrnetii)-amlno}-koián-24~oe~sav (IVa/Α képlet);

(3 β( S},53l~3-í(4~[blsz-í24hisz(karboxÍ mell Ij-aminoj-etiij-aminoj-4-karböxí-í-oxo-butHj-amincJ-kolán-24-oe-sav (IVa/B képlet); (3p(S)_;ő0_t7pj~3~j(4-(bísz~|2-{bisz(karboximettl)-aminoj-etilj-amino]-4-karboxl-1-oxö-butilJ~amínoj-7“h5droxikolán-24-oe-sav (IVa/C képlet);

(3a(S),5pj-3-[2“[~(5-(bisz[2-jbísz(karboximefil)-eminoj~efitj~aminol-5-karboxípentilj-amino]-2-oxo-etoxi]-kotán-24-oe-sav (IVe/D képlet);

94?77-4ö23-MOI/Xm:O [3a(S), 5 3)-3-t[4~(blsz-(2-[bisz(karboxlmeiil)-amínol-eií Π-amino]-4-karboxfel-oxo-buliij-anilnol-í z-oxokoián-Sé-oe-sav (IVa/E képiéi);

[3p(S),5^.,7al-3~([4-|bísz-(2-[bisz(karboxifnet}l)-amino]-etli]>aminoj~4~karfc-0xM ~öxo-buíH]~amfno)-?~hidroxikölán-24-oe-sav (IVa/F képiéi);

N²-bisz[2-{bisz(karboxímeiH)-aminol~et}n~N-[(3p..5p,7aJ2a)-7,12-dihidroxi-24-oxo-24-[(2-S2oifoet}l)-amino]~kolán-3-H]-L-giüíamtn (IVa/G képlet);

N²-bísz[2-(b{Sz( karboxí fnetU)-amíno]-etí ί]-Ν-[(3β,5β)-24-οχο-24- [ (2 -s z u! f o e t Π) - a m I π o ] - k o I á n ~ 3 ~ 11 ]- L - g 1 u t a m ί n (t V a Ζ H képlet); [3β(8),5β, 12a]-3-H4-(bisz-{2-[blsz(karboximelH)-amlno]-etil]-amino] -4-karboxi-1-oxObutin~3mibo]~12~hidíoxikQlán-24~oe-sav (SVaZI képlet);

[3&(R)_!50,12al-3-[_:[4-[bisz-[2-|bisz(karboximetji)-ammo]-eíiÍ]-ammop4~karbox!~1-oxo~buiií]-amino]-í2-hidroxikoíán-24~oe-sav (ÍVa/J képlet);

[3p(RS)_J:50,12aj~3-((4-<bísz-[2-[bisz(karbQxím'étiO-aminol-etí:ll-amín:o]-4-karbO'Xí-1-ox.o>'butin^:-amino>-12-hidroxiko1án-24-oe-sav (IVaZK képlet);

[3α(8),5β, r2a}~3~[[4-[bisz-[2-[bisz(karboxlmetH)~amino]~eiH]~amino]-'4»karböxM-oxö~butH}-amino]~12-htdroxlkölán-24~oe-sav (IVa/L képlet);

{3p(RS),5p_f7a ,12a|~3~([4-{biez-{2-[bisz(karboximetil)-aminol- e t Η1 - a m i η o ] -4 - k a f fe ο x 1 -1 - ο χ o - b u t i l} - a m i η o ] - 7, 12 - d 1 h Id r ό χ I k οI á n -24-oe-sav (IVaZM képlei);

[30(3),53,7 α, 12a]~3-0[[5~[blsx-[2~[bísz(karböximetn}~amlnoj~

-ei H j~am inol~5~karboxi pent ll]~aml no J~karhönüj~öxi )-7,12-bibidroxikoián-24-oe-sav (IVaZN képlel);

94?77~4ö23-MQl/KrcG * 9 Φ « Φ Φ ♦ ·* Φ * Φ φβτ* Φ [3a(S),5^)-3-(2[[5”[biSz{2-(bisz(karbox}metil)-amfnoJ“etHi-amino}”5-kafboxipentH>ammoJ-2~oxöstoxsl-koíán-24-oe-sav (IVa/O képiét).

Ehhez a csoporthoz tartozó, más vegyületek, amelyek gadotíníum-kompiexeit a WÖ-A-95/32741 nemzetközi közzétételi számú szabadalmi bejelentésben ismertettünk, a következők; [33(8),53,70,12a]-3-[H-[feísz[2-[bisz{karboximetil)-amíno]-etil}-aminol-4~karboxl-1 -oxo~butilj-amíno-7,12-dihldroxikoláπ-24-oe~sav (IVa/P képlet);

{33(S),53,7a,12aj-3-[[4~[[5-[bisz[2-[bisz(karboxlmatil)-amlnoj-etílj-amino]~5-karboxípentíll-aminoj-1,4~diGxo~öutilj-aminoj-7,12-dlhidroxikolán-24-oe-sav (IVa/'Q képlet).

Előnyösek a (IVb) általános képletű vegyületek is, amelyek szintén a központi pozícióban helyettesített DTPA-származékok, ahol Y jelentése a (IV) általános képletű vegyöletekre fent meghatározottak szerinti és L a (Illa) szerkezeti képlet szerinti.

A találmány továbbá a következő új vegyöletekre, amelyek a (IVb) általános képletű vegyületek csoportjához tartoznak, továbbá ezek elöáliitására Irányuló eljárásokra vonatkozik:

(33,53,7a, 12a]~3~n[bi sz(2“[bisz{karbö,ximetil)-ami noJ-etUj-a minő j-aoetilj-am íno]~7,12-di hidroxi kólán-24~oe-sav (IVb/Α képlet);

(33,53)-3-[[ΙΠΡ lsz[2-[bisz(karboxi metil)-ami nőj-éti l]-amínoj~acetin-amino]-acetin-aminoj-kolán-24-oe-sav (IVb/8 képlet).

Ehhez a csoporthoz tartozó más vegyületek, amelyek gadolíniom-komplexeit a WO-A-95/32741 nemzetközi közzétételi számú szabadalmi bejelentésben ismertettük, a következők: (33,53,7a, 12a)-3-[[[fbi sz[2-[bisz( karboxi meti i)-amino}~eti Í j-amin o ] - a ce t i I) - a m í n o j - a c e t i I j - a m i η ο 1 -7,12 - ö i h i d r ο χ í k o I á n - 2 4 - o e - s a v (IVb/C képlet);

94777-4023-IVIÖi/KmÖ (3β,5β, 7α, 12n.)~3~l(6-n(bisz|2-[bisz(karbGximetil)-aminoj-etli~ -efilj-aminol-acetllj-aminöbl-oxohexiij-aminöj-?, 12-dihidroxikolán-24-oe-sav (IVb/C- képlel).

Különösen előnyösek azok a (V) általános képletü vegyü letek, amelyekben az (I) általános képletben X maradék jelenté se DTPA_f Y a (IV) általános képtetű vegyületekre fent megbatározott jelentésű és t a (lila) általános képlet szerinti szerkezetű.

Ehhez a csoporthoz tartozó más vegyületek, amelyek gadoHnium-komplexslt a WÖ~A~35/32741 nemzetközi közzétételi számú szabadalmi bejelentésben ismertettük, a kővetkezők: (3p,5b,7a_J12a)~3-{ÍN-(N-(2~y2-(bisz(karboximetll)~amino]-etHl-(karboximetil)-amino}-etil]-N-(karboximetli)~glici IpgHcHJ-aminöJ-7_; 12-dlhidröxi~köián~24~0e-sav (V/A képlet);

18-(((33, δβΥα, 12a)-23-karboxl-7,12~hidroxi-24~nGrkolán-3-iij~aminoj-3,6,9-tnsz{karboximefÍl)~11,1 S~dloxö-3_;6,9,12-telraaza—oktadekánsav (V7B képlet).

Szintén előnyösek a (VI) általános képlete vegyületek, amelyekben az (!) általános képletben X maradék jelentése DO₃A, Y a (IV) általános képletü vegyületekre fent meghatározott jelentésű és L a (IIla) vagy (Hlb) képletek szerinti szerkezetű.

A (VI) általános képletü vegyületek közül különösen előnyős a ίΟ-|3-[((3α,δβ_?7α,12β)-23~Κ8Γ0οχί-7,12-άΙ1ιίεΐΓθ·χί-2'4-ηθΓkoián~3~llj~oxn~2-hidroxi-propilj-1,4,7,10-tetraaza-ciklododekán-1,4,7-trlecetsav (Vl/A képlet), amely gadölínium-komplexéi a WO-A-95/32741 nemzetközi közzétételi számú szabadalmi bejelentésben ismertettük.

94777-4023-MOi/KmO

-12X «φνΦ X *χ *Φ

X Φ * X Φ Φ ♦ jr «Φφ Φ φ χ «Φ «»>« Φ ΦΦφΧ φ *

Φ φ X Φ φ ΦΛ*· « »·*

Hasonlóan azon (Vll) általános képletű vegyületek. előnyösek, amelyekben a (!) általános képletben X maradék jelentése EDTA, Y a (IV) általános képletű vegyületekre fent meghatározott jelentésű és L a (ill) általános képlet szerinti szerkezetű csoport.

Különösen előnyösek a (VII) általános képletű vegyületek mangánnal képzett komplexei,

A (VII) általános képletű vegyületek közül különösen előnyösek a következők:

[3<x(S)_t5p, 12a]“3“[{[(5-n2-[bisz(karboximetil)-amíno]-etjl]-(karboxlmetll)-amlno)-5-'karboxipentllj~amino)-karbonil)-oxi)-12-h Idroxíkoián-24-oe-sav (VM/Á képlet);

[3β(8),5β ,7α, 12aj-3-((4-[iód[2-(bisz(karböximetil)-aminoJ-etiij~ -(karboxi meti i)-amino)-3-karboxipentil)-amino)-1,4-díoxo-bofll)-ammof-7,12-dihídroxikolán-24-oe-sav (Vlí/B képlet); (3a(S),5pj~3~(2-{[5-{[2-[bíSz(karboximetH)~amino]-etil]-(karboximetil)-amino]-5-karboxipentii)-aminö}~2-oxoetoxí]~kolán-24oe-sav (VJI/C képlet);

[3p(S),5p, 12ap3-([4-[{2-([bisz(kafboxímetií)-amlno]-etHj-(karboximetd)-amino]-4-karböxi~1 -oxobot il)-ami nőj-í2-hidroxi kólán-24-oe-sav (Vll/D képlet);

(33(S)_;5p}-3-{(4~n2-(lbisz(karboximetil)-aminOj-efd)-(karboxime~ ííl)~amino]~4~karboxi~1 ~oxöbutilj-aminöj-12-oxokolán-24~öe~sav (Vll/E képlet).

Az (!) általános képletű vegyületek előállíthatők a konvergens szintézis eljárásával, amely szerint:

1) funkciós csoporttal rendelkező Hgandumot, azaz olyan ligandomot, amely alkalmas egy paramágneses fémion ko94?7?-4023-MÖbKmO ordináíására és egyidejűleg megfelelő funkciós csoport segítségével az epesavhoz való stabil kötődésre állítunk elő;

2) funkciós csoporttal ellátott epesavat állítunk elő;

3) kapcsolási reakciót hajtunk végre a két különböző szinton között:

4} a védőcsoportokat le has ltjuk;

5) a paramágneses fémiont komplexáljuk;

amely eljárást részletesen a fent idézett WO-A-95/32741 nemzetközi közzétételi számú szabadalmi bejelentés ismertet.

A találmány szerinti llgandumok előállítására irányuló előnyös eljárások közül néhány szerint két szinten között amidkőtést képzőnk, a szóban forgó szlntonok közül egy a paramágneses ion kelátképzö rendszerének prekurzora (szinton

A), a másik a végső komplexben lévő epesav maradék prekurzora (szinton Bj.

Az alábbiakban ismertetett eljárások nem tekintendők a találmány szerinti vegyületek szintézisére irányuló korlátozásnak.

Az amldkötés létrehozható:

a) karbonsav funkciós csoportot tartalmazó A-szintonok primer vagy szekunder amino funkciós csoportot tartalmazó B-szintonokkal való reagáifatásávai;

b) primer vagy szekunder amino funkciós csoportot tartalmazó A-szintonok karbonsav funkciós csoportot tartalmazó 8-szintonokkal való reagáítatásával;

ej DTPA-dianhídrid (kereskedelmi forgalomban kapható termék) primer vagy szekunder amino funkciós csoportot tartalmazó 8-szintonnal való reagáifatásávai.

A találmányhoz alkalmazott A- és B-szinlonok közül néhányat a következő táblázat ismertet.

S 4 7 7 7 ~ 4 02 3 - M 01 / K m O « X««4 9 <» ** * » V * * * » t ♦ 4 4 4 V « 4 4

4**4 4 *XÍ* * » 4 * 4 ** * 4β** X V*

1. táblázat

A-szinton

B-szinfon ®«0<X^-^X0C<K

A* ©^«•''^Ν'·''' ^'te^'eOOíSa i@u0Q£ 'v.

CÖÖiStí 'X,

JK

COOM® íSuOCXX

A r^j

A tSuOOC COQíBu

jk^ceosu «uOOC'^te'· ©öoocr i ssíioo: ~i-

^^X^COOMe íSuOOCv

XOOH

XCOSíSe !S®OCC'^f<·’

J

SuOOC nA

ΗΟΟίλ. , ~ COWÍ

Γ+Ύ

H

„CÖOMs

S4777-4823-MOS/KffiO

Φ φ * χ * * * φ Κ ♦» φ Φ » φ > X φ Φ ♦ * *

X ΦΦΦ * »**

Természetesen az alkalmazott szintonokat megfelelő védőcsoporttal látjuk el azoknál a csoportoknál, amelyek az amídkőtés képzésére alkalmazott körülmények között parazitareakciók előfordulását eredményezhetnék. A két szinton közötti kötés képzése után egy vagy több védőcsoport-mentesítésí lépés végrehajtása szükséges az eredeti csoportok visszaállítása érdekében.

Alternatív megoldásként az Ilyen típusú eljárásokhoz képest a kelátképző alegység bevihető epesav-származékfoól kiindulva soklépéses reakciókkal, mint az 1. reakciővázlatban szemléltetett, a kísérleti részben a 3. példában ismertetett vegyület szintézise esetében.

A találmány a 2. reakcíóvázíat szerinti új eljárásra ís vonatkozik, amelyben

R₄ helyettesítő jelentése egy amíno-védöcsoport;

Rs helyettesítő jelentése egyenes vagy elágazó szénláncú 1-10 szénatomos alkil- vagy arilcsoport;

R₂ és R₃ helyettesítők jelentése függetlenül hidrogénatom, egyenes vagy elágazó szénláncú 1-20 szénatomos, helyettesitetlen vagy árucsoportokká! helyettesített alkilcsoport, vagy a szóban forgó csoportok 3-10 szénatomos gyűrűt képeznek;

amely eljárás transzamidálási reakciót alkalmaz, és a kiindulási pirrolidinon nitrogénatomjávai szomszédos kiráíís centrum sztereokémiájának fenntartását lehetővé téve szekunder amidet eredményez. Az R₄ és R§ csoportok egymásra tekintettel való kiválasztása fontos abból a szempontból, hogy a hasítás különböző körülmények kozott kell hogy megtörténjen. Az R₄ csoport94 7 77 - 4 02 3- ,M O i ! K m O

- 18 » » Φ» < ξ, * « Φ * ·* * * * * Φ 0

Λ ♦> « Φ Φ Φ >X 4 *

Φ ♦ ·*·» * «»« Φ ** Μ * ra lehetséges példák a ksrbobenzlloxl-csoport (Cbz) és R_s csoportra a metílosoporf vagy a t-butil-csoport.

Ez az eljárás általában alkalmazható glütaminsav-y-amidok előállítására, és igen hasznos és előnyös a találmány szerinti vegyületek, különösen glutamínsav-y-amidok 3-amino-származékainak vagy a fentebb ismertetett Y maradékok előállítására. Az eljárás lehetővé teszi a végtermék előállítását a glutamínsav és a megfelelő amin közötti y-ammokötés képzésére költséges kondenzálószerek alkalmazása nélkül.

Ennek a teljesen új szintézis eljárásnak alkalmazására példa a [3p{S),5p,12aj~3~([44bisz(karböxlmeíH)-aminö]-etííj~aminoj~4~karboxl~1-oxobutin~amínoj~12-hldroxiko!án-24~oe-sav előállítása, amely vegyület hagyományos szintézisét a kísérleti rész 4, példája ismerteti, míg alternatív megoldást ismertet az 5. példa és a teljes szintézis reakciővázlatát a 3. reakciővázlat mutatja be.

Analóg módon állítható elő a WO-A-95/32741 nemzetközi közzétételi számú szabadalmi bejelentésben már ismertetett [3β{3)_;5β,7α, 12α]-3-j[4-íbisz|2-jbisz( kar boxí metil )-ami no]-etiíj~aminoT-4-karböxi-1 -oxo buti lj-aminoj-7,12-di hidroxi-kot án-24oe-sav nevű koiinsav-szarmazék.

Az (1) általános képleté keiátképzőszerekkei komplex sók képzésére alkalmas fémionok a következő kétvegyértékű vagy háromvegyértékü ionok: Fe^í2*\ Cu^u*\ Cri⁴*², Gd .{2*>

Dy'³*\ Yb^s,s+) vagy Mn'

A találmány szerinti, új kelátkompíexek diagnosztikai alkalmazáséról megemlítendő,, hogy azok alkalmazhatók kontrasztanyagokként, különösen véredény-szerekként a mágneses rezo§4777- 4Q23. Μ O! / K m O ♦ Φ X X * Φ ♦ χ Φ Φ φ 9' ϊ ί Φ Φ ♦ ΦΧ « * ♦«'ί * * * _Λ ' « * <Φ * 4Μβφ > W nancía segítségével végrehajtott képalkotási diagnosztikai eljárásban.

A komplexeket hagyományos módszerrel állítjuk elő olyan eljárással, amely szerint a paramágneses fém oxidjái vagy megfelelő sóját vízben feloldjak vagy viz-alkohol oldatban szuszpendáljuk, keverés mellett a kelátképzőszer vizes vagy vizes-alkoholos oldatához adjuk és szükség esetén kíméletesen vagy forráspontig melegítjük, amíg a reakció befejeződik, Ha a komplex a reakcíőelegyben oldhatatlan, szűrhetjük azt. Amenynylben az oldható, visszanyerhetjük az oldószer bepáriásávai, amíg maradékot kapunk, például poriasztásos szárítás segítségével.

Amennyiben a keletkező komplex még mindig tartalmaz szabad savcsoportokat, azt egy szerves vagy szervetlen bázissal való reakcióval semleges sóvá alakítjuk, amely fiziológiailag kompatibilis kationokat képez az oldatokban.

Ezen semleges sók előállítása érdekében vizes oldatban vagy szuszpenzióban semlegességig elegendő mennyiségű bázist adhatunk a szabad savcsoportokat tartalmazó komplexekhez, A keletkező oldatot ezáltal könnyen bepérolhatjuk vagy megfelelő oldószert adhatunk, hozzá a komplex ső klkrisfályosífása érdekében.

Előnyös szervetlen kationok a találmány szerinti keletkomplexek sőképzesére, különösen az alkáli- vagy alkáíiföldfém ionok, így például a kálium-, nátrium-, kalcium- és magnézium-ionok és azok elegyei, Különösen előnyös a náfriumion.

Szerves bázisokból származó, a fent említett célra megfelelő, előnyös kationok többek között a primer, szekunder és ter94?7?-4Q23-MOI/KmO * a* $ φ « * *

X * *«χ ·Λ V

ϊ.**» κ V#** < *.*♦ *

Ί * 4 X

elér aminok, így például az etanolamin, a dietanolamin, a morfolin, a glükamín, az N-metH-glükamin és az Η,Ν-dlmetllglükamín-ionok, különösen előnyős az N^metU-gíükarmin.

Amínosavakból származó előnyös kationok például a faurín, a gliein, a Iizln, az arginln vagy az ornitin ionjai.

Ehhez az eljáráshoz képest alternatív eljárás szerint injektálható kiszerelést állítunk elő a komplex sö Izolálása nélkül. Ebben az esetben a végső oldatok nem tartalmazhatnak olyan szabad fémionokat, amelyek a szervezetre nézve toxikusak.

Azt például titrálássai, színezett indikátorok, Igy például xllenol-narancs alkalmazásával ellenőrizhető, A komplex só végső tisztítási lépése is elvégezhető.

Ilyen típusú eljárásban injekciókhoz a kelátképzőszert, a sót vagy a fémoxidot és bármely sőképzö bázist sztöchíometrikus arányokban vízben reagáltatjük, majd a reakció befejezése után a pirogéneket leszűrjük és a terméket megfelelő tárolókba osztjuk és hőkezeléssel sterilizáljuk.

Az injektálható gyógyászati kiszereléseket tipikusan a fent ismertetett módon előállított hatóanyag és segédanyagok farmakológiái szempontból megfelelő tisztaságú vízben való feloldásával állítjuk elő bőrbe történő vagy parenterális adagolásra alkalmas gyógyászati kiszerelés előállítása érdekében, 0,01-1,0 mól koncentrációban. A keletkező kontrasztanyagot megfelelően sterilizáljuk.

A kontrasztanyagokat a diagnózis követelményeitől függően 0,01-0,3 mmol/testsúly kg dózisban adagoljuk.

Alapvetően a dózisok parenterális adagolásra 0,001-1,0 mmol/testsúly kg tartományban vannak. Előnyös dózisok ? 7 7 - 4 δ 2 3 - Μ O i / K m O

- 19 ·**· parenterális adagolásra a 0,01-0,5 mmol/testsúly kg tartományban vannak.

A dózisok bőibe történő adagolásra általában O_f5~tői körülbelül 10 mmoí/kg, előnyösen körülbelül 1 ,ö~tő! körülbelül 10 mmol/testsúly kg tartományban vannak.

A találmány szerinti új kiszereléseket a szervezet jói tűri; sőt, azok vízoldhatósága egy további fontos tulajdonságuk, amely különösen alkalmassá teszi azokat mágneses magrezonanciában való alkalmazásra.

A találmány szerinti diagnosztikum készítmények hagyományosan alkalmazhatók. A készítmények adagolhatok egy betegnek, tipikusan egy melegvérű állatnak mind szervezetileg, mind helyileg a szervbe vagy a szövetbe annak mágneses rezonancia segítségével történő láthatóvá tételére.

Az analízis-eljárások és készülékek megtalálhatok olyan munkákban, mint például Stark, D, D._s Bradley, W, G,, Magnetio Resonanoe Imaging, Mosby Year Book, Sí. Louis, MG (1992.) című müvében,

A kísérleti körülményeket részletesen ismertetjük a kísérleti részben.

A következőkben szabadalmi bejelentésünk leírásának kísérleti részét ismertetjük

1. példa

PPíSl^Spl-S-CIA-IbiszIg-tblszIkarboximetiö-aminol-etH}-amin~4-karboxi~1-oxobütll]-amino5~kolán-24-oe-sav gadolínium komplexe 1-dezoxl~1-(metll-amino)-0-glucitollal képzett (1:3 arányú) sója [lásd: (Vili) képletö vegyülő t]

94777-4023-MOL-KtoO **

Α) [3β(8)₅δβ}-3”[[δ-(1₅4-Οΐ™οΙίΙ-βΙοχΙ)~4~[^ί5ζ[2-[ΐϊΐ5ζ(2“(1_f1-dÍmeti!”etoxi)’2”OxoeOSl“amino|-etH]-amino]1_s5-dl· oxopentiíl-aminoJ-kolán^-oe-sav-metH-észter

3,6 g (9,24 mmol} mennyiségű (3p₅53)-3-amíno~koián-24oe-sav-metii-észtert (amelyet a WO-A-95/32741 nemzetközi közzététel· számú szabadalmi bejelentés 5. példájában ismertetett eljárással analóg módon állítunk elő) 8,5 g (11,39 mmol) mennyiségű N,N-bisz(2-(blsz(2-(1 , 1 -dimetil~etoxi)~2-oxoetín~aminoj~efil]-L-glutamlnsav-terc-buth-észtert (amelyet a WO-A-95/32741 nemzetközi közzétételi számú szabadalmi bejelentés 15. példájában Ismertetett eljárással állítunk elő) és 1,64 g (9,39 mmol) mennyiségű dietd-cianofoszfonátot 160 ml DMF-ben feloldunk. Az oldatot 0 *C hőmérsékletre hűtjük, 1,28 ml (8,24 mmol) Et₃N-t cseppentünk bele, és a reakciőeiegyet 30 percig szobahőmérsékleten hagyjuk. 1 óra múlva az oldatot csökkentett nyomáson bepároljuk, a maradékot EtOAc-tai felvesszük, 5 %-os NaHCOs-tal, majd sóoldattaí mossuk. A szerves fázist elválasztjuk, Na₂SO4-on szárítjuk és csökkentett nyomáson bepároljuk. A nyers anyagot fíash-kromatográfiás eljárással tisztítjuk, így 9,5 g mennyiségű kívánt terméket kapunk (8,56 mmol).

Hozam: 92 %.

K.F.: 3,47 %.

Elemek szermti analízis:
	€	H	N
számított %:	66,63	9,74	5,01
talált %:a	67,42	10,08	5,07

S4?77’4023-MOI/KmG

⁸ jelentése: 120 °0 hőmérsékleten vákuumban történő szárítás után.

TLC: Álló fázis; szilikagéi lap 60F 254, Merck

Eiuens: 4:6 arányú EtOAc/n-hexán

Detektálás: 1 M NaOH-ben oldott 0,5 %-os KMnCh, R_f~0,46. az a “²C-NMR, az ÍR és az MS spektrumok a jelzett szerkezettel összhangban vannak.

B) [3p(S>»5p3-3-íf4-Karfooxi-4-[fo1sz[24bjsz(karboxf-etíÍ)~araino]~etil>-amíno]-t~oxobotH]-amfn©]“kolán-24~oe-sav~

-metii-észter

9,3 g (8,32 mmol) mennyiségű, az A) lépésben előállított vegyület 50 ml CH₂CI₂-ban kevert oldatát 5,1 ml (68,6 mmol) CFaCOOH-hoz adjuk; TO perc múlva 0-5 ^ÖC hőmérsékleten az oldatot bepároljuk. A maradékot 50 ml CF₃COOH-ban felveszszűk, 24 óra múlva szobahőmérsékleten, további 30 ml CFTCOOH-hoz adjuk, igy a reakciót befejezzük, 5 óra múlva a reakoióeiegyet bepároljuk, a maradékot CHsCf-dal kezeljük az oldószert minden alakiammal csökkentett nyomáson bepárolva, így port kapunk. A szilárd anyagot H₂0~vel mossuk, szűrjük és szárítjuk, így 6,9 g mennyiségű kívánt terméket kapunk (8,24 mmol).

Hozam: 99 %, olvadáspont: 205 °C

K F : 7,78 %.

Elemek szerinti analízis:

OHM számított %; 60,27 8,18 6,69 talált %:³ 59,28 8,11 6,68

94777-4823~WOi/Xmö ⁸ jelentése: 120 °C hőmérsékleten vákuumban történő szárítás után.

TLC: Álló fázis: szilikagéi lap 60F 254, Merck

Eluens: 8:4:1 arányú CHCU/MeOH/25 % NH₄OH.

Detektálás: 1 M NaOH-ban oldott 0,5 %-os KMnÖ₄, R_f=ö_:28. az 'Η-NMR, a ^Í3C~NMR, az IR és az MS spektrumok a jelzett szerkezettel összhangban vannak.

C) [3p(S)_s5p)-3-([4-ibisz[2”[bisz(karboximetíi)-emmo]“

- e f i 11» a m i η o ] - 4 - k a r b ο x i ~ 1 - ο χ o b u t i I ] - a ra i η o ] - k oi á n - 2 4 - o e ~ sav

6,14 g (7,33 mmol) mennyiségű, a B) lépésben előállított vegyűlet 50 ml H₂0-ben képzett szuszpenzióját 50 mi (50 mmoi) 1 M NaÖH-hoz adjuk a kémhatás pH-szíát készülék segítségévei pH 13 értéken tartása mellett. 2 óra múlva szobahőmérsékieten a reakeióelegyet 12 M HCI-dal savanyítjuk (pH-0,5), így szuszpenziót kapunk, amelyet szűrünk, H₂0~zel mosunk és szárítunk, igy 5,64 g mennyiségű kívánt terméket kapunk (6,85 mmol).

Hozam: 93	%, olvadáspont: 205 °C.
K.F.: 9,02 «	Fö.
Elemek szerinti	analízis: C	Η N	Cl, Ha
számított %:	59,84	8,08 6.81
talált %:3	59,36	8,15 8,80	<0,1

* jelentése: 120 °C hőmérsékleten vákuumban történő szárítás után.

TLC: Álló fázis; szilikagéi lap 50F 254, Merck

Eluens: 6:4:1 arányú CHCi₃/MeOH/25 % NH₄0H.

Detektálás: 1 M NaOH~ban oldott 0,5 %-os KMnO₄, R_f=0,25.

34777-4023-MOl/KmO * X

szerkezettel összhangban vannak.

D) [3g(Sh5pp3-[|4-[bisz|2»[bisz(karboxÍmetil>-ammo3-'eti!]“aminoj-4-karfooxi-lOxobutii]“amíno]»koián-24-Oesav gadolínium komplexe 1-dezexM»(metil-araisw}~!D»

-glucholtal képzett (1:3 arányú) sója

4,53 g (5,5 mmo!) mennyiségű C) lépésben előállított vagy ületet 50 ml H₂O-ben szuszpendáiunk és 10 ml (20 mmo!) 2 M meglumíne vizes oldatával oldhatóvá tesszük, így pH~S,8 értéknél oldatot kapunk. Ezután 1 óra alatt 11 ml (5,5 mmol) 0,5 M GdC!_s vizes oldatot adunk hozzá a pH-6,8 értéken tartásával,

8,5 ml (13 mmo!) 2 M meglumin vizes oldat hozzáadásával. A reakció lefutását kapilláris elekíroforézissel követjük. 2 óra múlva az oldatot Míllipore® membránon szűrjük, nanoszörón szűrjük és bepároijuk. A maradékot szántjuk, így 6,15 g menynyiségű kívánt vegyületet kapunk (4,17 mmol).

Hozam: 78 %, olvadáspont. 220 «0.

K.F.; 8,44 %.

CE-vIzsgálat: 100 területié

Kapilláris: kondenzált szillka, 0,56 m x 50 mm, gömb cellává!

Feszültség;

Pufféi;

Hőmérséklet:

Leállítás! idő

Detektálási hullámhossz (UV);

kV

EDTA perc

200-210 nm

S4?77-4Ö23~MO!/XMO niektálás:

hidrosztatikus (50 mbar, 5 mp)

1 mg mi

Hewlett Packard 3D HPCE β**

Minta koncentráció;

Műszer:

A kísérleti körülmények szabá-

lyozásának időr	endje:	$	(perc) eljárási lépés
		2	mosás H20~zel
		0	mosás 0,1 M NaOH	-dal
		1	mosás HsO-zet
		6	mosás pufferrel
		9	elemzés kezdete
Elemek szerinti	analízis:
	C	H	Gd N	Cl, Na
számított %:	47,65	7,35	10,06 6,27
talált %:a	47,83	7,36	10,01 6,24	<0,1
a jelentése: 120	*C hőmérsékleten vákuumban történő szárítás

után.

Az ÍR és az MS~spektrumok a jelzett szerkezettel összhí vannak.

A következő vegyűíeteket és a megfelelő gadolínium komplexeket analóg módon állítjuk elő:

[3p(S),58,7dj-3-([4-(blsz[2~(bísz(karboximetíi)-aminoj-8tll]-amínö]-4~kaFboxi~1 -oxobutilj-aminoj~7“hidroxl~koíán-24“Oe“Sav gadoíínium-komplexe 1-όοζοχΗ1“^δΙΙΙ“3ηιίηΌ)-0~3ίυοΗοΙΐ3ΐ képzett (1:3 arányú) sója:

[3á(S)_!50j-3~[2-i54bíszl2~(btsz(karbox!metn)-aminoi-etn]-emlnol-δ-karboxi pentilj-aminoj-2~oxo-etoxij~kolán«24-oe~sav gadöiíníum-kompíexe 1-dezoxí~1~(metd-amino)~D-g1ucitollal képzett (1:3 arányú) sója

77 7-4 02 3 - Μ Ο ί / K m O

2, példa (3;p(Sh5^]-3’[[4-Cbisz[2«lhls2(karboxjme{H}-amln:O3-etH]-amino3“4“RarboxM-oxobuíí1l'amIno]-12-oxokolán’24’Oe' sav 1-όβζοχΜ-(π?6ίΙΙ-®ϊηΙηο)-0«δΙυ€ΐΙοΙΐ3ΐ képzett (1:3 arányú) sója [lásd: (IX) képletű vegyület]

A) (3p_s5p)»3»Azldo-12-oxokolán»24»oe“Sav-metÍI-észter

12,5 ml (33,3 mmol, Cr(VI)J Jenes-reagenst cseppentünk

17,8 g (41,1 mmol) mennyiségű (3p,58,12a)-3-azido-12~hid~ roxikolán-24-oe-sav-metil-észter 90 perc alatt szobahőmérsékleten (amelyet a WO-A-95/32741 nemzetközi közzétételi számú szabadalmi bejelentés leírásának 5. példájában Ismertetett (3β,5β,7α, 12a-3~azido-7,12-dlhidroxikolán-24-oe-sav-metil-észter előállításával analóg módon állítunk elő) 800 ml acetonban képzett oldatába cseppentjük. 20 óra múlva az elegyet szűrjük és az oldatot bepereljük. A maradékot 400 ml CHCí₃-ban feloldjuk, és az oldatot telített vizes NaH€O₃-tai, majd H_sö-zel mossuk. Az oldatot szárítjuk és bepároljuk, így nyers anyagot kapunk, amelyet 36 %-os EtOH-ból átkristályosítunk, így 14,1 g mennyiségű kívánt terméket kapunk (32,9 mmol).

Hozam: 84 %, olvadáspont: 153 ^CC.

KF.: <0,1 %.

[a]^*83,25 (0-2,1, CHCb).

Elemek szerinti analízis C számított %; talált %:³

H

9,15

9,32

N

9,78

9,69

68,90 6,98

TLC: Álló fázis: sziiikagél lap 60F 254, Merck Eluens: 8:2 arányú n-hexán/EtOAc,

S4?77-4023-MOÍ7KmO

- 26 ··

Detektálás: 1 Μ MaOH-ban oldott 0,5 %-os KMnűfo R?=0,43. Az 'H-NMR, a '³C~NMR, az IR és az MS spektrumok a jelzett szerkezettej összhangban vannak.

B> (3β_>5β)-3-Αιη*ηο-12-οχοίίθΙ^η-24-θδ’88ν-ηι©ΙϊΙ-όδζί©Γ

16,4 g (38,2 mmoi) mennyiségű A) lépésben előállított vegyidet 138 ml THF-ban képzett oldatát 1,6 g mennyiségű 5 %-os Pd/C jelenlétében, szobahőmérsékleten és 40 bar nyomáson 15 percig Parr^' autoklávban hidrogénezzük. A reakoióelegyet szűrjük (papír és FH 0,5 gm Millipore® membrán) és bepároljuk. A nyers anyagot ílash-kromatográíiás eljárással tisztítjuk, így

11,8 g mennyiségű kívánt terméket kapunk (29,2 mmoi).

Hozam: 77 %, olvadáspont: 129-130 *C.

K.F.: 1,04 %.

[aj2°=+87,8 (0=2,02 CHCU).

Elemek szerinti analízis:

C számított %: talált %:⁸

H

10,24

10,00

N

3,47

3,35

74,40 72 72

TLC: Álló fázis: szillkagél lap 60 F 254, Merck

Eluens: 95:5 arányú MeOH/Et₃N.

Detektálás: 1 M NaÖH-ban oldott 0,5 %-os KMnCh, Rí=Ö,31.

Az a ^í3C~MMR, az ÍR és az MS spektrumok a jelzett szerkezettel összhangban vannak

C) [3β(5)3β]~3~ίΗ-[ΒΙδζ[2->Ιβζ[2-(1_?1~<Ιίηιοΐ!ΐ-δ1οχΙ)-2-oxoetin~amino]-eti1]-amino]>S-(1_s1-dímetII‘etoxí)-1_s5“dl· ο χ o - p e n t i t ] - a m i η o|»12 - ο χ o k ο I á n ~ 2 4 - o e - s a v ~ me tH - é s z f e r 6,24 g (30,3 mmoi) mennyiségű DCC 25 ml CH₂CI₂-öan képzett oldatát 0 *C hőmérsékleten nitrogéngáz alatt 30 perc alatt

94777-4 0 2 3- Μ ΟI / K m O

- 2'

21,5 g (28,9 mmol)- mennyiségű N,H-bíS2[2>tblsz|2~(1,1-dímetít-etoxO-2-oxoetíí}-amino}-et!l>-L-giutaminsav-1 -(1,1 ~dimetíi~etíi)~ -észter (amelyet a WG-A-95/32741 nemzetközi közzétételi számú szabadalmi bejelentés 15. példájában ismertetett eljárással állítunk elő), 11,1 g (27,5 mmol) mennyiségű B-vegyüiet és 3,72 g (27,5 mmol) mennyiségű 1 -(hidroxi-benzotriazol) (HŐST) 300 ml CH₂CI₂-ben képzett oldatéhoz cseppentjük. Az eiegyet szobahőmérsékletre engedjük melegedni. 21 óra múlva a reakcióelegyet szűrjük és az oldatot NaHCGs telített vizes oldatéval, majd H₂O~zel mossuk, ezután bepároljük, A nyers anyagot flasb-kromatográfiás eljárással tisztítjuk, így 24,5 g mennyiségű kívánt terméket kapunk (21,7 mmol).

Hozam; 79 %.

[a}^-+T2,17 (c-2,07 GHCh).

TLC; Álló fázis; szilikagél lap SÖF 254, Merck

Eiuens: 1:1 arányú EtGAc/n-hexán.

Detektálás: 1 M NaOH-ban oldott 0,5 %-os KMnO₄, R_f-0,45.

Az ¹ H-NMR, a '³C-NMR, az SR és az MS spektrumok a jelzett szerkezettel összhangban vannak.

D) [3β (S), 5 PI~3-[[4-(Bisz(2 -[hlszf karboxi metiij-ami no] -etiSl-amíno]-4-karboxS-1 »oxobutíl]~amíno]»12-oxokoíán-24-oe-sav ml (1,0 mól) TFA-t 0 ^ÖC hőmérsékleten, 1 óra alatt

23,8 g (21.0 mmol) mennyiségű C) lépésben előállított vegyölet 50 ml CH₂GI₂~ban képzett oldatához cseppentünk. A reakcíóeiegyet szobahőmérsékleten keverjük, majd 2 óra múlva bepárol· juk. A maradékot 100 mi (1,3 mól) TFA-val felvesszük és az oldatot további 24 óráig keverjük. A reakcióelegyet bepároljuk,

94777-4023-MOS/KmO

CH₂Gl2-vai felvesszük és újból bepároijuk. A nyers anyagot 150 mi 1 M MaOH-ban jégfürdőben hűtés mellett feloldjuk, és az oldatot 15 óráig (pH-ΊΟ) szobahőmérsékleten keverjük. A reakcioelegy kémhatását 3,30 ml 30 %~os NaOH-dal pH~13~ra állítjuk és 4 óra műivé Millipore® membrán alkalmazásával szűrjük azt (HAS: 0,45 pm). A szürletet 12.5 ml 30 %-os HCI-val és 19 ml 1 M HCI-val pH~1,80-ra savanyítjuk. A csapadékot szűrjük, H₂O-zel mossuk és szárítjuk, így 15,8 g mennyiségű kívánt terméket kapunk (18,9 mmol).

Hozam: 90 %, olvadáspont: 172-175 °C.

K.F.: 1,98 %.

(aj2°s₊4'3_t54 (c-2,02 1 M MeOH). HPLC: 97 % {lerü!et%>

Állő fázis:

Zorbax ECLIPSE SC8-C8 3,5 pm:

150 x 4,8 mm;

Hőmérséklet: 40 ^eC;

Mozgó fázis: gradiens elúció;

A-0,017 Μ Η3ΡΌ4, 0,3 mM EDTA H₂O-ban;

8=CH₃CN

Gradiens; perc	A%	844
0	85	15
40	65	35
50	85	35
Áramlási sebesség; 1,5	ml/perc

Detektálás (UV): 210 nm;

94?77-4S23-M0i/Km0

X

C

6,69

6,37 0,25

Na

0,18

Elemek szerinti analízis C számított %: 58,85 talált %: 56,57

7,71

7,68

TLC: Állő fázis: szilikagél lap 60F 254, Merek Eluens; 5:4:2 arányú CH₃Ch/MeOH/2S % NH₄OH

Detektálás: 1 M NaOH-ban oldott 0,5 %-os KMnCrt, R_f~0,28. Az 'H-NMR, a '³C-NMR, az IR és az MS spektrumok a jelzett szerkezettel összhangban vannak.

E) [ 3 β (S), S β j - 3 - [ [4 -1 b i s z [ 2 - [b I s z {k a rfe ο χ I m e t N} - a ml no]-etil] >aml no] -4»karboxí~1 «©xobn ti I]-amino]-12-oxoko Ián-24-oe-sav gadeiímum-kompfexe í-dezoxi-1 -(metií-aml« no)~D-gfucitolSaI képzett (1:3 arányú) sója

49,0 ml (45,0 mmol) 0,918 M megiumín vizes oldatát 14,0 g (16, 7 .mmol)· mennyiségű D) lépésben előáll flott vegyüiet 106ml H₂O-ben képzett szuszpenziőjához cseppentjük szobahőmérsékleten, így tiszta oldatot kapunk (pH~8,5). A kémhatást pH=8,5 értéken tartva 55,7 ml (51,1 mmol) 0,918 meglumln vizes oldat hozzáadásával, pH-sztát alkalmazásával 31,6 ml (15,9 mmol) 0,503 M GdCI₃ vizes oldatot cseppentünk hozzá. A hozzáadások végén az elegyet Milüpore® membránon (HAWP 0,45 pm) szűrjük, nanoszürön szűrjük, kémhatását p-H=7,0-ra •állítjuk 0,100 ml (0,092 mmol, 0,918 M meglumln vizes oldattal) és bepároljuk. A maradékot szárítjuk, így 22,0 g mennyiségű kívánt terméket kapunk (14,0 mmol).

Hozam: 84 %, olvadáspont: 100-105 °C.

K.F.: 5,06 %.

HPLC elemzés; 97 % (területi)

S4?77-4023-MOi/KmO »· *

AHő fázis:

Hőmérséklet

Mozgó fázis;

Gradiens;

MY'PORUT'Y™ Elité C18 5 gm; 250 x 4,8 mm H'ypersU oszlop; 40 °C;

gradiens elúcíó;

Α-Ο,ΟΊ M &H₂PÖ4 vízben;

perc A% 8%

95 5

65 35

SS 35

Áramlási sebesség: 1 mí/perc Detektálás (UV): 210 nm;

Elemek szerinti analízis:

	C	H	N	Gd	Na, Cl
számított %:	47,23	7,16	6,22	9,97
talált %:	45,70	7,32	6,00	9,41	<0,1

Az IR és az MS spektrumok a jelzett szerkezettel összhangban vannak.

3, példa (3p,5p,7a,12a>«3-n|bisz[2-[b*ísz(karboximety)-amtno3-etH]-amino]-acetil]-ammol-7,12“dsbldroxíkolán~24-oesav gadof ímum-kemplexe 1~dezexM-(meW-amino)~D-gíueiiollaí képzett (1:2 arányú) sója [lásd: (X) képletö vegyület]

A) (3p_s5p₅7a_?12a)-3-[[[bisz[2»[bÍsz[2-(1_s1-dimetn~etoxi)~2-oxoetii]-emino]-etil]-amino]~acetil]“amlno]-T_}12”díhidroxikolán~24-oe-sav-metil-észter

S47?7-40234ViOI/Km:O

24,8 g (51,9 mmol) mennyiségű (38_t5.8,7a,12a)-3-í(amino~ -acetil)“aminoj-7,12-dihidroxlkolán~24-oe~sav~mefii-észterf (amelyet a WO-A-95/32741 nemzetközi közzétételi számú szabadalmi bejelentés 5. példájában ismertetett eljárással állítunk elő) 38,7 g (110 mmol) mennyiségű N-(2-brómetil)-N-{2-(1,1 -dímetil~etoxí')-2-oxoetílj~glicin-1,1 -dimetil-etil-észter (amelyet a WÖ-A-95/32741 nemzetközi közzétételi számú szabadalmi bejelentés 15, példájában ismertetett eljárással állítunk elő) 390 ml €H₃CN~foen képzett kevert oldatában szuszpendálunk. 245 ml 2 M foszfátpuffer (pH-8) hozzáadásával kétfázisú oldatot kapunk, amelyet szobahőmérsékleten 144 éráig élénken keverünk. A szerves fázist elválasztjuk, bepároljuk, és a maradék olajat 250 ml CR₂Cl₂~ban feloldjuk, Az oldatot H₂O-zel mossuk, Na₂SÖ4-on szárítjuk és bepároljuk, A nyers anyagot flash-kromatográfíás eljárással (eluens: 95:5 arányú CH₃CS₃~CH₃OH) tisztítjuk, így 24,8 g mennyiségű kívánt terméket kapunk (24,3 mmol).

Hozam: 47 %,

Lajir=*9,45 (0=0,5, CHCI₃)<

Elemek szerinti analízis:

CRN számított %: 84,88 9,47 5,49 talált %: 64,55 9,44 5,48

TLC: Átlő fázis: szilikagél lap 60F 254, Merck

Eluens: 88:12 CHCWMeOH.

Detektálás: 1 M HaOH-ban oldott 0,5 %-os KMnCu, Rf=Ö,57,

Az 'H-NMR, a ¹³C-NMR, az IR és az MS spektrumok a jelzett szerkezettel összhangban vannak.

34777-4023-MOb'KmO iX &.

« » < ♦ Λ « *4 ♦ « .

* *** * ♦ í

Β) (3β, 5β,7α, 12a)-3“[([Sisz[2“[bisz( karboxí metil )-amino}-eOll-amlnol-acetlll-am8nö|>7_t12-díhidroxlkolán-24-oesav

318 ml (636 mmol) 2 ivl kíQH vizes oldatát cseppenként, 15 perc alatt 21,6 g (21,1 mmol) mennyiségű A) lépésben előállított vegyűlet 310 ml EtOH-fean képzett oldatához adjuk. 23 éra múlva az EtOH-t bepároljuk, és a reakciőelegyet további 2 óráig keverjük. Az oldatot .255 ml 2,6 M HCI-ba csepegtetjük és a pH-t 30 %-os IMaOH-val 1,4-re állítjuk. 1,5 óra múlva a csapadékot szűrjük, 300 ml 0,1 M HCI-vai mossuk és szárítjuk, így 13,1 g mennyiségű kívánt terméket kapunk (16,7 mmol).

Hozam; 78 %, olvadáspont; 128-132 °C (bomlás),

HPLC elemzés; 97,8 % (terüiet%)

Álló fázis; Lichrosorb RP-Select 8 5 pm;

250 x 4 mm Merck KG a A;

Hőmérséklet; 45 ⁸C;

Mozgó fázis; gradiens elűciő;
A~G,Ö1 M KHsP0 í v ifst ’	í: és 0,017 Μ H3PO4
V I Z W vfí v B-CHsCN Gradiens; perc A%	B%
0 95 £ ο n	5 GA.
45 20	öu 80
Áramlási sebesség: 1 ml/perc Detektálás (ÖV); 210 nm; Komplexometriás liter; 95,5 % (0,1	M GdCH.)
[α}ο°~+13{<53 (c 5, 1 M HaOH).

94777-4023-MOUKmO * * φ « ««

X #

Η3Ο 4,89

Elemek szerinti analízis:

számított %:	C 58,30	H 7,98	N 7,16	Cl
talált %:	54,83	8,12	8,84	1,82

C) (3 β, 5 β, 7 α ₍ 12 α) ~ 3 ~ [ [ [ fol s ζ ( 2 - [ b i s ζ (k a r fo ο x i m e t » 1) - a m I η o ] - e ti I ] - a m i η ο 1 · a c e ti I ]»a m i n o] - 712 - d i h i d r ο x i - k ο 1 á n -2 4 - o e sav gadolínium-komplexe 1 -dezoxi~1 ~<rnetsf~amíno}-D« -glucftotlal képzett (1:2 arányú ) sója

11,3 g (13,8 mmol) mennyiségű 8) lépésben előállított vegyüietet 40 mi H₂Ö-ben szuszpendáiunk és 44,7 ml (44,7 mmo!) 1 M-os meglumin vizes oldata hozzáadásával (pH=8 értékig) feloldjuk. 1 óra alatt, a pH 6,5 értéken tartásával 73,8 ml (73,5 mmol) 1 M-os meglumin vizes oldat hozzáadásával 13,7 ml (13,7 mmo!) 1 M-os GdCG vizes oldatát csepegtetjük a reakeióeiegybe. A reakciőeiegyet nanoszürőn szűrjük és 0,3 ml 0,1 M-os megluminna! a kémhatását pM~6,8~re állítjuk. Bepárlás és szárítás után 17,2 g mennyiségű kívánt terméket kapunk .411ő fázis:

Hőmérséklet: Mozgó fázis:

(12,9 mmol).

Hozam: 93 %, olvadáspont: 245-249 °C (bomlás).

Szabad ligandum: <0,1 % (0,001 M GdCG)

HPLC elemzés: 100 % (terü!et%)

Lichrospher 100 RP-8 5 pm;

250 x 4 mm oszlop, Merck KGaA;

’C;

izokratikus elúció előkevert fázissal:

g n-oktliamlnt és 0,3 mmo! Na₂EDTAadunk 21 rs 740 ml H₂O elegy éhez. Az oldatot H₃PÖ<$~va! pH-7-re pufféról

94?7?~4G23-MQi/KmO

Áramlási sebesség: 1 ml/perc Detektálás (ÜV): 210 nm:

Elemek szerinti analízis:

c	H	Gd	N
számított %;	47,05	7,06	11/84	8,33
talált %:	45,19	/,21	« < J 4w	6,07	H2O 4

Az ÍR és az MS spektrumok a jelzett szerkezettel összhangban vannak.

4« példa [3p(S),Sp_?T2a]»3-|[4«(&isz[2-(bisz(karboximé{il )-amínol» »e 1111 - a m i n o] -4 ♦ k a rb ο χ I -1«ο χ o b u f i I}«a m I n o] -12 - h í d roxikoIán-24-oe-sav gadoHnium-komplexe 1 -dezoxM -(metlI’amlnol-D-glucítolíal képzett (1:3 arányú) sója [lásd: (XI) képletű vegyűlet}

A) [3p(S}_s53_s12a]-3-([4-(bisz[2~[bisz[2-(1_J1-dlme«l-etoxi)- 2 ο χ o e 111}«a m I η o}«e t 11 ] - asm s π o j ~ δ - (11 - d i m e t i 1-e t ο χ I) -1, S»

-dloxO“pentflJ“amirso]-12«hSdrdxíkolán-24-oe«sav-metjl·

-észter

2,23 g (22 mmol) mennyiségű trietil-amint adunk 0 °C hőmérsékleten 8/93 g (22 mmol) mennyiségű (3β.,δβ,12α>-3-θπ?ΐηο·-12-hidroxi kolán-24~oe~sav-metll-észter (amelyet a

WO-A-95/32741 nemzetközi közzétételi számú szabadalmi bejelentés 5. példájában ismertetett eljárással analóg eljárással állítunk elő), 16,41 g (22 mmol) mennyiségű N,N-blsz(2-(blszl2~(1,1~dímetí!etoxi}-2-oxoetil}~amino]-etil}-L-glutam!nsav-1-(1,1-dimetiletin-észter (amelyet a WO-A-95/32741 nemzetközi közzétételi számú szabadalmi bejelentés 15 példájában ismertetett eljárással állítunk elő) és 3,91 g (2.4 mmol) mennyiségű dietíl947?7-4Ö23-MOI/krnG »

* *

Λ $

·» « x * φ Λ '^9 -v ♦ « < 4» **#» < «

Jt 4 W

-cianofoszfonát 300 ml DMF-ben képzett, ö °C hőmérsékletű oldatához. Az elegyet 1,5 óráig 0 ^CC hőmérsékleten és 18 óráig szobahőmérsékleten tároljuk, bepároljuk, és a maradékot EtOAe-ban feloldjuk. Az oldatot NaHCO₃ telített vizes oldatával és H₂0-zel mossuk, NajSCU-on szárítjuk és bepároljuk. A nyers anyagot flash-kromatográfiás eljárással tisztítjuk, így 20,67 g mennyiségű kívánt terméket kapunk (18,2 mmol).

Hozam: 83 %.

[αΙο^-δ,Ζδ (e~2,0, CHCIs).

Elemek szerinti analízis:

CRN számított %· 65,69 talált %: 88,54

TLC: Álló fázis: szílikagél I Eiuens: 1:1 n-hexán/EtÖAc

9,80 4,94

9,95 4,99 ap 8ÖF 254, Merck

R_f=Ö,Ö9.

Detektálás: 10 %-os HsSCh-ben feloldott Ce(SO₄)2-4H₂O (0,18 %) és (ΝΗ4>_δ:Μθ₇Ο₂4'4Η₂Ο (3,83 %).

Az ’H-IMMR, a ^S3C~NMR, az ÍR és az MS spektrumok a jelzett szerkezettel összhangban vannak.

B) [3 β (S) _f 5 β, 12 α ] - 3 - [ [4 - [ b I s z [2~(b i s z (k a r b © x l m e t i I) - a miη o ] - e t i l ] - a m in © 1 ~ 4 ~ ka r b © x H1 -o x © b u f H ] - a m l π © 1~ 12 ~ h i d r © x í koián-24«oe-sav

19,72 g (17,4 mmol) mennyiségű A) lépésben előállított vegyületet 106 ml CF₃Cö₂H-ban szobahőmérsékleten feloldunk. 26 óra múlva az oldatot bepároljuk, és a maradékot vízzel kezeljük; a szilárd anyagot szűrjük, FhO-zel kezeljük és vákuumban részlegesen bepároljuk, A keletkező köztiterméket vízben szuszpendáljuk és 1 M RaÖH-daí feloldjuk (pH = l3 kémhatásig).

94777-4023-MQbK.mO ν $

* Λ őre múlva szobahőmérsékleten 0,5 M HCI~ot csepegtetünk az oldatba (pH~1,4 kémhatásig). 15 óra múlva szobahőmérsékleten a csapadékot szűrjük, H₂0~zel mossuk és szárítjuk, így nyers anyagot kapunk, amelyet Amberlhe® XAD 1800 gyantán kromatográfiás eljárással tisztítunk, így 9,92 g mennyiségű kívánt terméket kapunk (11,8 mmol).

Hozam: 68 %. Olvadáspont: 184 °C (bomlás)

Komplexometrlás liter (0,1 M GdCI₃): 99,3 %.

Savas ther (0,1 N NaöH): 99,8 %.

[α}^2δλ=(ο~2,δ, 1M :NaO«).

λ (nm) 589 578 548	438	405 365
[aj + 23,81 + 24,59 4- 27,90 +· 48,87 + 55,61 -s- 71,40
Elemek szerinti analízis: C	H	N
számított %: 58,70	7,93	6,88
talált %: 58,22	8,18	8,59 H2O 0,70 %
TLC: Álló fázis: sziiikagél	lap 60 F	254, Merck

Eluens: 5:4:2 CHCl₃/MeOH/25 % NH₄GH R^0,13.

Detektálás: Ce(SO₄)₂-4H₂O (0,13 %) és (ΝΗ4)βΜο_?Ο₂₄·4Η₂Ο (3,83 %) 10 % H₂SO₄~bsn

Az ’H-NMR, a '³G-NMR, az IR és az MS spektrumok a jelzett szerkezettel összhangban vannak.

C) i3p(S}_>5p_}12ab3-[(4-[btsz<2-{bisz(karboximetil}-amínö]-eti!]-aminöl-4-karböxM-öxöbwlii]«amínöl«12>hicl· roxikolán-24-oe’Sav gadolíníum komplexe 1-dezoxi»1« -(mefilamínoj-D-glucttoliaí képzett (1:3 arányú) sója 8,39 g (10 mmol) mennyiségű 8) lépésbe előállított vegyületet 30 ml H₂ö~ben szuszpendálunk, majd 38,5 ml (36,5 mmol)

94777-4023-MOS/KmO * >

A

9S

M vizes meglumin hozzáadásával feloldjuk (pH-δ kémhatásig). 9,85 ml (10,1 mmol) 1,025 M GdCI₃ vizes oldatát adjuk hozzá 1 óra alatt a kémhatás pH-8 értéken tartásával 19,3 ml (19,3 mmol) 1 M vizes megtűrnie hozzáadásával. Az oldatot nenoszűron szűrjük és a kémhatását pH~7,O~ra állítjuk 1 M' vizes megluminnal. Bepárlás és szárítás után 8,57 g kívánt terméket kapunk (5,4 mmol).

Hozam: 54 %. Olvadáspont: 1 [aju - + 9,45 (c-0,5, CHCI3). Elemek szerinti analízis:	50-151	3 °C (170 °C, bomlás).
C H	N	Gd
számított %: 47,17 7,28	6,21	9,96
talált %: 43,40 7,31	5,88	9,31 H,O7;14%
Az ÍR ás az MS spektrumok a	jelzet	í szerkezettel összhangban

vannak.

A C) lépésben előállított vegyülettel analóg módon a (3β(δ),5β, 12aj~3~n4-{hisz[2~{bisz(karboxímeH!)-aminoj-eHI]~aml· noj~4~karböxi-1 -oxobuíHj-amino]~12-bidroxíkQÍán~24~öe~sav gadoHnium komplexe (1:3 arányú) nátriumsóját állítjuk elő.

26,92 g (32,8 mmol) B) lépésben előállított vegyüietet 100 ml HsO-ben szuszpendálunk és 58 ml (112 mmol) 2 M NaOH hozzáadásával feloldjuk (pH-δ kémhatásig). 3 óra alatt 58,2 ml (29,77 mmol) 0,512 M GdCb vizes oldatát adjuk hozzá a kémhatás pH-8 értéken tartásával 28,95 ml (57,9 mmol) 2 M NaOH hozzáadásával. Az oldat kémhatását pH-6,.7-re állítjuk 4 ml (8 mmol) 2 M NaOH dal és az oldatot nanoszürön szűrjük. Fa94777-4023-MOPKmO ♦ ♦♦ gyasztva szárítás után 29,86 g mennyiségű kívánt terméket kapunk (28,2 mmol).

Hozam: 88 %. Olvadáspont: >300 °C
Íajo°“^6y45 (c-0,5. CHCb),
Elemek szerinti analízí	s:
C	H N	Gd		Na
számított %; 46,49	5,71 5,29	14,85	6,51
talált %; 43,98	6,34 4,92	13,86	6.16	H2O 4,63 %

Az ÍR és az MS spektrumok a jelzett szerkezettel összhangban vannak.

5, példa

Alternatív eljárás [3^(S},5p,12a]-3«[[4-(bisz[2(folsz(kar boximetin-amlnol-etil]-ammo>4-karboxj-1-oxobutH]-aml· nö]-12-hldrox»koíán»24-oe«sav előállítására a 3. reakció váztat szerint

A} (S J - 5 - Ο χ o -1»2 - p i r roll dl n - d i k a r b ο n s a v > 2 - m éti I»1 - (f e η 11 metííj-diészter

7,1 g (50 mmol) mennyiségű CHM-ot adunk 6,58 g (25 mmol) mennyiségű (S)-S-oxo~1 _f2-plrrohdin-dikarbonsav-1 -(fenilmetil)-észter és 3,55 g (27,5 mmol) mennyiségű N,N-düzopfopil-eíiíamin 33 ml CR₂C1₂~ben képzett oldatához, és a reakciőelegyet 6,5 óráig vlsszafolyatjuk, Szobahőmérsékletre hűtés és 50 ml CH₂CI₂-dal hígítás után a reakcióelegyet H₂O~ -zel, 2 %-os vizes Ma^GOa-tel, 0,2 M HCI-val és H₂Ö~zel mossuk. Na₂SÖ4-on szárítás és bepárlás után 6,8 g mennyiségű kívánt terméket kapunk (24,5 mmol).

Hozam: 98 %.

HPLC-eiemzés. 98,5 % (területi)

94777-4023-MOUKmO

- 39 Álló fázis:

Hőmérséklet

Llchroscrb RP-Select B 5 p.m 250 x 4 mm Merck KGaA;

’C;

Mozgó fázis:

gradiens elucíe;

A~Ö,Ö1? M: H₃PO,í vízben;

Gradiens: perc	A%	B%
0	80	20
15	80	20
35	40	60
Áramlási sebesség: 1	ml/perc
Detektálás (UV) 2	10 n m;:
(aj25 = (c=2: CHCh).
a (nM) 589 578	548	Λ X* oo5
(aj - 42,97 - 44,79 - 50;	09 - 100,43
Elemek szerinti analízis
C	H	N
számított %: 80,64	5,45	5,05
talált %; 60,94	5,54	5,00
Az 'H-NMR, a i3C-	NMR, az 1F	ξ és az

zett szerkezettel összhangban vannak.

Β Π 3 β (S1, 5 β , 12 α j - 3 ~ [ [ δ ~ M e tö x 5 -1 , δ - d i ο χ o -4 - [[(f e ni I - m e toxi|»ka!'fooníí3>amínöl»pentHl“amino]-12''hidröxikotán’24oe-sav-mettl-észter

8,92 g (22 mmol) mennyiségű (3p,5p₍12a)3-amino-12-hid^ Γθχ^οΙβη~24-οο--33ν~?η8ίΗ~όδζΙοΗ (amelyet a WO-A-95/32741 nemzetközi közzétételi számú szabadalmi bejelentés 5. példájában Ismertetett kollnsav-származékkal analóg eljárással állítunk

84777~4Ö23-M0l/KmO

elő) adunk 6,1 g (22 mmol) mennyiségű A) lépésben előállított vegyűiet 55 ml dloxánban képzett oldatához, és a keletkező elegyet 50 *C hőmérsékleten 24 éráig, majd 105 ’C hőmérsékleten 29 óráig melegítjük. Az oldószert csökkentett nyomáson bepároljuk, és a maradékot flash-kromatográfiás eljárással (gradiens elúció EtOAc ~ n-hexán alkalmazásával), majd 1:1 arányú EtOAc - n~hexán elegyévei történő átknstáíyositássaí tisztítjuk, így 11,2 g mennyiségű kívánt terméket kapunk (16.4 mmol).

Hozam: 75 %. Olvadáspont: 140 ’C.

HPLC elemzés: 99,2 % (terűlet%)

Álló fázis: Lichrosorb RP-Select 8 5 pm;

250 x 4 mm Merck KGaA; Hőmérséklet: 45 ’C;

Mozgó fázis:	gradiens elúció;
	A-0,G17 B=CH3CI	M H; 4	«PO.; vízben
Gradiens;	perc	A%	8%
	0	65	35
	25	15	85
	30	15	85

Áramlási sebesség: 1 mí/perc Detektálás (UV); 210 nm;

laf% = (0-2,01, CHCb). a (nM) 589 578 548 365 fa] +24,14 + 25,13 + 28,51 + 73,81

94777-4023-MOI/KmO

4,11

4,13

Elemek szerinti analízis:

C H számított %' 68.70 8,43 talált %: 89,38 3,72

TLC: Álló fázis: szillkagél lap 80F 254, Merck Eluens: EtAOc

Detektálás: Cec'SChhAHjO (0,2 %) és {NH₄)₆Mo₇O₂d-4H₂O (3,8 %) 10 % HzSOd-ban R_f=0,11.

Az ¹H-NMR, a ¹³C-NMR, az ÍR és az MS spektrumok a jelzett szerkezettel összhangban vannak.

C) (38{S)₅5p,12aj-3-[[4~[biszp-(1_s1-d!meíiíetox0-2~oxoéti 11 -a min o] -éti 11 -am i no] -5 -m e t ο χ i > 1, i οχ ο p e n t i I] -a m l· no}-12-hidroxikoián-24~oe-sav-met1l-észter g mennyiségű 5 %-os Pd/C-ot adunk 10,4 g (15,3 mrnol) mennyiségű 8) lépésben előállított vegyület 100 ml NaÖH-ban képzett oldatához; a szuszpenzíőt 3,5 áráig hidrogéngáz atmoszférában szobahőmérsékleten keverjük (felvett K₂: 348 ml;

15,5 mmoi). Millipore® FH szűrön (0,45 um) történő szűrés után az oldatot csökkentett nyomáson bepereljük, így maradékot kapunk, amelyet 60 ml CH₃CN-ban feloldunk. Cseppenként, 10 perc alatt, szobahőmérsékleten 80 ml 2 M vizes foszfátpufferí (pH=3), majd 11,33 g (33,7 mmoi) mennyiségű N-(2-brőmetil)-N-[2-(1, 1 -dimetiletoxi)~2-oxoetii]-glicin-1,1-dímetilefií-észter (amelyet a WO-A-95/32741 nemzetközi közzétételi számú szabadalmi bejelentés 15. példában ismertetett eljárással állítunk elő) 15 ml CH₃CN~han képzett oldatát adjuk hozzá. Az elegyet 39 óráig keverjük. Elválasztás után a szerves fázist csökkentett nyomáson hepároljuk, és a maradékot 200 ml AcOEt-ban fel94777-4023-MOI/KmO « φ oldjuk. Az oldatot H₂O~zeí mossuk, hla₂SO₄~on szárítjuk és bepároljuk. A nyers anyagot flash-kromatográfiás eljárással (gradiens elűció EtOAc - n~hexán alkalmazásával) tisztítjuk, így 11,36 g mennyiségű kívánt terméket kapunk (10,4 mmol).

Hozam: 68 %. Olvadáspont: 56-58 ’C.

HPLC elemzés: 100 % (terül et%) (α]²⁰λ (c 2,01; CHCh) λ (nm)

589

546

Z\ ·£* oo5 jaj -6,97 -7,41 -8,61 -32,89

Elemek szerinti analízis:

C Η N számított %: 84,93 talált %; 65,06

TLC: Álló fázis: szlllks Eluens: EtAOc

3,42 5,13

9,36 5,11 lap 80F 254, Merck

Detektálás: Ce(SO4₂-4H₂G (0,2 %) és (ΝΗ₄)δΜο₇θ24'4Η₂Ο (3,8 %) 10 % K₂SO₄-ban R_?=0,45.

Az ^H-NMR, a '³C~NMR, az IR és az MS spektrumok a jelzett szerkezettel összhangban vannak.

D) (3:p(S),5p,12a]-3-[[4-[fo8Sz[2-[bísz(karboximetH)-amin o| ~ e 111 ] - a m i η o ] ~4 - k a r b ο x i -1 - ο x o h u ί 11 ] - a m i n o} ~12»h i d roxikolán-24~oe-sav

8,5 g (7,8 mmol) mennyiségű 0) lépésben előállított vegyüleí 50 ml dioxánban képzett oldatát 117 ml (234 mmol) 2 M LiOH vizes oldatához adjuk. A keletkező elegyet szobahőmérsékleten 72 óráig keverjük, majd 37 %-os HCI lassú hozzáadásával pH=8~ra savanyítjuk. Az oldatot csökkentett nyomáson való bepárlássaí 50 g mennyiségre töménylfjük és 40 ml H₂ö~zel

94777-4023-MOUKroO

- 43 hígítjuk. Az oldatot 37 %-os HCI hozzáadásával pH~2,5-re savanyítjuk, 50-55 °C hőmérsékletre melegítjük, és 2 N HCI hozzáadásával erőteljes keverés mellett igen lassan pH = 1,3-ra savanyítjuk. 5 perc múlva a heterogén elegyet lassan, keverés mellett 15 őrára szobahőmérsékleten engedjük hűlni. A csapadékot szűrjük, H₂0-zet mossuk és szárítjuk, így 5,92 g mennyiségű kívánt terméket kapunk (7 mmol).

Hozam: 90 %, olvadáspont: 180-198 ’C.

HPLC: 99,9 % (területi)

Álló fázis: Zorbax ECLIPSE SCB-C8 3,5 pm;

150 x 4.8 mm oszlop;

RockIand Technologies Inc.

Hőmérséklet: 40 ’C:

Mozgó fázis:

gradiens elúció;

A~Q,017 M H₃PO₄, 0,3 mM EDTA H₂O~ban; B=CH₃CN

Gradiens:	perc	A%	B%
	0	85	15
	40	85	35
	50	65	35

Áramlási sebesség: 1,5 ml/pero Detektálás (ÖV): 210 nm;

Savas t i tér (0,1 N NaOH): 99 % [α]^2δλ=^ί(ο~2₁04, 1M NaOH). λ (nm) 589 578 548 438 [aj + 24,80 + 25,83 + 29,22 + 49,02

405 385

58,43 + 75,59

94777-4023-MOi/KmO

Elemek szerinti analízis:

Cl, Li szám hóit %: 58,70 talált %:

57,90

7,93 8,88

7,97 8,87 <0,1 H₂G 0,95

Az 'H-NMR, a ^í3C~NNlR, az IR és az MS spektrumok a jelzett szerkezettel összhangban vannak.

8. példa [3p₍5p;7a,12a3-3-[[[|[fois2(2-{foSsz(karboximetíl)>amih©]-etil]-ami no]-acetil] -amino]-acetil]-amino] ~?_s12-dihidroxskoíán-24-oe-sav gadoHnlum komplexe 1-dezoxl-1~ -(metílamino)-D-gSuchoilai képzett <1:2 arányú) sója [lásd: (XH) képletü vegyület]

A) N-((bjsz|2-[folsz|2-(1,1-dímetiietoxí«2-oxoetilí-ammo]- e t 11 ] - a rn i η o ] - a c e t i l ] - g i l c i n

8,5 g (49,3 mmol) mennyiségű glieil-giieinf 100 ml 1:1 arányú Hjö - EtÖH elegyben szuszpendáiunk és pH~1ö kémhatás mellett 4,8 ml 10 M NaOH-dal feloldjuk. 2 óra alatt 42 g (110,9 mmol) mennyiségű N-(2-brőmetH)-N-[2-(1,1 -dimetiletoxi)•2-oxoetilj-glicin-l,1 -dimetiíetil-észter 40 ml EföH-ben képzett oldatát csepegtetjük hozzá 5,8 ml 10 M NaOH hozzáadásával a kémhatás pH = í 0,5 értéken tartása mellett. Az oldat gyorsan emulzióvá alakul, amelyet 2,5 óra múlva 10 M NaOH hozzáadásával feloldunk. 22 óra múlva az oldószert bepároijuk, az elegye! vízzel hígítjuk és CHaOb-dal extraháljuk. A szerves fázist HjO-zei mossuk, szárítjuk és bepároljuk, így maradékot kapunk, amelyet flash-kromatográfíás eljárással tisztítunk. A maradékot vízben oldjuk, a kémhatást 1 M HCI hozzáadásával pH~4,5-re állítjuk, és az oldatot kloroformmal extraháijuk. A szerves fázist

94777-4023-MOI/KmO # « ** «<

♦ * * * * *

H₂O-zel mossuk, szárítjuk és bepároijuk, így 13 g mennyiségű kívánt terméket kapunk (19,3 mmol).

Hozam: 39 %.

Elemek szerinti analízis:

C H számított %: 56,85 8,56 talált %: 56,67 5,68

N

8,30

8,30

TLC: Állő fázis: szílikagél lap 60F 254, Merck

Eluens: 6:3:1 arányú CHCI₃/Me0H/2S % NH₄OH ^=0,65,

Detektálás: 1 M NaOH-ban oldott 1 %-os KMn0₄

Az ¹Ή-ΝΜΡ, a ¹³C~MMR, az ÍR és az MS spektrumok a jelzett szerkezettel összhangban vannak.

8) [3p₅S^,7a_s12a]-3~I[[nbisz[2~[bísz[2-(1_s1-dimetHetoxh-2~Gxoetn]~ammö]~etii]~amin0]~aceWJ’amino]~acetíl]»

-ammol”7,12-dihidroxlk0fán-24-oe-sav>meti1”észter

Cseppenként 5 perc alatt 2,8 ml (20,2 mmol) mennyiségű TEA-t adunk 13,6 g (20,2 mmol) mennyiségű A) lépésben előállított vegyület, 8,52 g (20,2 mmol) mennyiségű [3β,5β,7α,12α)-3-amíno-7,12~díhídroxíkoíán-24-oe-sav~metil-észter és 3,4 ml (22,2 mmol) DEPC 290 mi OMF-ban képzett, 0 *C hőmérsékleten kevert oldatához. 1 őre múlva a reakeióelegyet szobahőmérsékletre melegítjük és az oldatot 6,5 óráig keverjük, 0,3 ml (2 mmol) DEPC~t adunk hozzá és az oldatot további 15,5 óráig keverjük. A DMF-ot bepároljuk, a maradékot EtÖAc-ban feloldjuk, vizes NaHCOs-tal, majd vízzel mossuk és szárítjuk. Flash-kromatográfiás eljárással történő tisztítás után 13,7 g mennyiségű kívánt terméket kapunk (12,7 mmol).

94777-4023-MOi/KmO ♦ * I

Hozam: 83 %.

[ag^s=+5,26 (c-1,5; CHCU).

Elemek szerinti .analízis:

C Η N számított %; 83,48 9,25 8,49 talált %: 83,22 9,40 8,40

Az ¹H-NMR, a ^C-NMR, az SR és az MS spektrumok a jelzett szerkezettel összhangban vannak.

C) [3p_s5p_}7a_s12aJ-3-[OnbtszP[bisz[karboximetil)-amIno} »ett S] -aminol-aceíiS]-amS no]-acetil]-arnino]-?, 12-dlhídroxiko8án-24-oe-sav

12.85 g (12 mmol) mennyiségű B) lépésben előállított vegyületet 210 ml TFA-ban -5-0 *C hőmérsékleten történő keverés mellett feloldunk. 18 óra múlva a TFA-t bepároljük, igy maradékot kapunk, amelyet 90 ml 0,8 M NaOH-ban pH~13 kémhatás mellett feloldunk, és 15 őréig szobahőmérsékleten keverjük. Az oldatot 80 mi térfogatra pároljuk, 105 ml 0,6 M HGI-oldatba csepegtetjük és 2 óráig keverjük. A szilárd anyagot szűrjük, 0,5 M HCI-val mossuk és szárítjuk, így nyers anyagot kapunk, amelyet kromatográfiás eljárással tisztítunk, A kívánt vegyületet tartalmazó frakciókét a só formában bepároljük, igy maradékot kapunk, amelyet vízben oldunk és 1 M HCI-oldatba csepegtetjük a kémhatás pH-1,45 értéken tartásával. A csapadékot szűrjük, 0,5 M HCI-val mossuk és szárítjuk, így 2,8 g mennyiségű kívánt terméket kapunk (3,1 mmol).

Hozam: 26 % Olvadáspont: 120-125 °O,

HPLC vizsgálat- 98 % (területié)

94777-4023-MO!/KmO

V

- 47 * V ♦ ψ kX« *

« ί

Az ⁵H-NMR, a ’³0~NMR, az ÍR és az MS spektrumok a jelzett szerkezettel összhangban vannak.

D) [30,50_í7a_s12a]~3-[[[[[bisz[2~[bísz[karboximetíl)~amino]-etii]-am!tto]-acetfl]-amino]”acetll]-amino]“7_í12'-dihfdroxikolán-24~oe-sav gadolimum komplexe 1-dezoxi~1-(metHamínoj-O'-gtuciíoHal képzett (1:2 arányú) sőja 2,59 g (3,08 mmol) mennyiségű C) lépésben előállított vegyületet 20 mi vízben szuszpendálunk, és 3,8 ml (3,8 mmol) 1 M meglumln vizes oldat hozzáadásával feloldjuk (pH=5 kémhatásig), 0,501 g (2,77 mmol) mennyiségű GdsCb-ot adunk az elegyhez 50 *C hőmérsékletre melegítés közben. 1 óra múlva 2,8 ml (2,8 mmol) 1 Mi megíumint adunk hozzá, így a csapadékot feloldjuk. 24 óra múlva a reakcióelegyet szűrjük és a kémhatást pH~6,8~ra állítjuk 0,4 ml t M vizes meglumln hozzáadásával. Bepárlás és szárítás után 4,2 g kívánt terméket kapunk (3,00 mmol).

Hozam: 99,7 %. Olvadáspont: 209-213 °C (bomlás) HPLC-vlzsgálet.' 99,7 % (terület%)

Szabad ligandum: <0,1 % (0,001 GdCb)

Elemek szerinti analízis:

számított %:	C 46,84	H 6,99	N 7,08	Gd 11,38
talált %:	44,01	7,35	8,88	10,39	H2O 4,35

Az IR és az MS spektrumok a jelzett szerkezettel összhangban vannak.

94777-4023-MOÍ/KmO « * « « * Jöö«* *

7. példa [3$(S)y5p3~3~([4«íbisz[2~[foisz-{karboximetn)”amínö]-etil3>

-amino]” 4 - k a r fe g χ í«1 - οχ o fe u ti I ] - (k a r fe οχ i m e 11!} - am In g - (k a r > fooxímetíf)-amioo]-kolán-24«oe-sav gadolínium komplexe 1”dezGxl”1“(metllamÍnp)”D-glucUoHaI képzett (1:4 arányú) sója (lásd: (Xill) képletü vegyület]

A) (3p_PS^()-3”[(2~(1_í1'DimetiIetGxij”2-oxoetil]~ammo]~

- k ο I á n - 2 4 ~ o e - s a v ~ m et i I - é s z t e r

40,0 g (103 mmoi) mennyiségű (3^,5^)-3-amin:okoián-24-oesav-metil-észtert (amelyet a fenti 1. példában ismertetett eljárás szerint állítunk eiö) 1,0 liter DMF-ban szobahőmérsékleten nitrogéngáz alatt szuszpendálunk, 13,0 g (129 mmoi) mennyiségű trietii-amint adunk hozzá, majd 1 óra alatt 24,0 g (123 mmoi) mennyiségű ferGmecetsav-1₍í-dímeíH~etH-észter 30 ml DMF-ban képzett oldatát csepegtetjük a reakoíóelegybe feloldódásig, 3 nap múlva a reakcióelegyet bepároljuk és NaHCO-s 4 %-os vizes oldatával hígítjuk. A keletkező szuszpenziót szűrjük, a csapadékot H₂Ö~zei mossuk és szár ltjuk, így 33,7 g mennyiségű kívánt terméket kapunk (86,9 mmoi).

Hozam: 65 % olvadáspont; 62-64 *C.

(a]^=+23.,56 (0=1,96, MeOH).

Elemek szerinti analízis:

C Η N számított %: 73,31 10,60 2,78 talált %: 74,67 10,36 2,78 H₂O < 0,1

TLC: Álló fázis: szilikagél lap SÖF 254, Merck

Eiuens: 7:3 n-bexán/EtOAc R_;=O,31,

S4777-4ö23-MOi/KmO

Φφ r

ΦΦ

- 49 ·>φ* « φ * <

♦ χ *«* * Φ ·* χ· * φ> ·< * ♦ φ * φ

X Φ « χΦφ.φ: < * ’ <β9* Φ φ*

Az H-NMR, a ³C-NMR, az ÍR és az MS spektrumok a jelzett szerkezettel összhangban vannak.

8) [3Ú(S)₅SpI-3-[[4-[felezi2~[biez[2~(1_s1-dímetUetoxtE2-oxoetlil-aminoJ-etíll-amtRol-S-Clj,! “dímetiletoxIj-ljS-di· oxopentil]-(1 ^w(1>1 “^iroetHetoxi>-2-oxoeíin-amino]-kolán-24-oe»sav~me$íl-észter

Cseppenkéni 20 perc alatt 19,5 g (151 mmol) mennyiségű dhzoproplí-etllamlnt adunk 33,0 g (65,5 mmol) mennyiségű A) lépésben előállított vegyület 53,8 g (72,1 mmol) mennyiségű N,N-blsz|2~[bisz(2~(1, 1 ~dimetlletoxi)-2-oxoeti^-amíno]-etil|-L-glutamlnsav~1 ~(1 ,1 -dímetlletílj-észter (amelyet a

WO-A-95/32741 nemzetközi közzétételi számú szabadalmi bejelentés 15. példában ismertetett eljárással állítunk elő) és

40.6 g (91,8 mmol) mennyiségű (benzotriazol-í ~iíoxl)-trlsz(di~ metnán-amino)-foszfőníum~hexaíluorfoszfáí (BGP) 400 ml DMF-ban képzett, szobahőmérsékleten, nitrogéngéz alatt kevert oldatába, 2 nap múlva a reakdőelegyet bepároijuk és EíöAe-íai felvesszük. Az oldatot K₂O-zei mossuk, Na₂SO4-on szárítjuk és bepároljuk. A nyers anyagot flash-kromatográfíás eljárással kétszer tisztítjuk. így 38,7 g mennyiségű kívánt terméket kapunk (31,4 mmol).

Hozam; 48 %.

[ag°=-54,5ö (0=2,51, CHCA).

TLC: Álló fázis: szilikagél lap 6ÖF 254, Merck

Eluens: 7:3 arányú n-hexán/EtOAc R?=0,22.

Az 'H-NMR, a ⁵³C~NMR, az IR és az MS spektrumok a jelzett szerkezettel összhangban vannak

94777-4Q23-MOkKmÖ ♦·*

- 50 C) [3^(Sh5pl-3-[[4-|bisz[2-[blsz(karboxlmetil)-amino]-etil]-ami nol-4~karböxi»1 -oxobetif]-(karboxi metil )~ami~ no]-kolán-24-oe~sav

38,7 g (31,4 mmol) mennyiségű B) lépésben előállított vegyüíet 380 ml EíÖH-ban képzett, szobahőmérsékleten kevert oldatához. 1 óra alatt, eseppenként 500 ml 2 M LíOH-oldatot adunk. 18 óra múlva a reakcióeiegyet 500 ml térfogatra pároljak és 50 *C hőmérsékletre melegítés közben ismét 350 ml 2 M LíOH-otdatot adunk hozzá. 24 óra múlva a reakcióeiegyet szobahőmérsékletre hűljük és 320 mi, 5 °C hőmérsékleten élénken kevert, 8 M HCI-otdatba csepegtetjük. A keletkező szuszpenzió kémhatását 55 ml 2 M HaOH hozzáadásával pH = 1,0~ra állítjuk. A szilárd anyagot szűrjük, 0,1 M HCi-va! mossuk és szárítjuk. A nyers anyagot HzO-ban szuszpendáljuk és 1 M NaOH hozzáadásával oldjuk, majd a bázikus oldatot 0,5 M HCí-oldatba csepegtetjük. A csapadékot szűrjük, 0,05 M HCí-val és H₂O-zel mossuk és szárítjuk, így 23,5 g menny iségő kívánt terméket kapunk (28,7 mmol).

Hozam; 85 %. Olvadáspont: 178-182 °C.

íaj⁴%^-í-24,10 (0=1,49, 1 M NaOH).

HPLC vizsgálat: 100 % (ferület%)

Álló fázis: Hypunty Elité C-18 5 pm;

250 x 4,8 mm oszlop;

Hőmérséklet: 40 °C;

Mozgó fázis: gradiens elűció;

A=0.01 M KHjPCK 0,3 mM EDTA vízben

94777-4023-MOÍ/kmö

Gradiens; perc A%	8¾ 5 35 35
0 40 50	35 65 85
Áramlási sebesség:	1 ml/perc
Detektálás (UV):	210 nm;
Elemek szerinti anal	ízís:

C Η N Ha

Cl számított %: 58,62 7,78 6,36 talált %: 57,71 8,07 6,20 0,13 0,55 H₂O <0,1

Az 'H-NMR, a ^i?'C-NMR, az SR és az MS spektrumok a jelzett szerkezettel összhangban vannak.

D) [3 β(δ),5β]-3«[(4-[bisz(2-[foisz-f karboxi metilj-aml no] »é ti i ] - a m i no| -4- ka rb ox i -1 -o x©bút li| -(k a rb o xi m e t i í >-a m i no]-koián-24-oe-sav gadoíinium komplexe i-dezoxM“(metilamino)~D-g1ucítollal képzett (1:4 arányú) sója

12,9 g (14,8 mmol) mennyiségű C) lépésben előállított vegyület 100 mi H₂O-ben képzett szuszpenzióját adjuk 72,0 ml (72,0 mmol) 1 M meglumln vizes oldatához szobahőmérsékleten, igy pH-8,2 kémhatású tiszta oldatot kapunk. Cseppenként 37,2 ml (14,6 mmol) 0,383 M GdCb vizes oldatot adunk hozzá 30,0 ml (30,0 mmol) 1 M meglumln hozzáadásával, pH-sztát segítségével a kémhatás pH~6,2 értéken tartása mellett. Az adagolások után a reakciőelegyet papíron, majd Miltípore® membránon (HAWF 0,45 pm) szűrjük, nanoszürön szűrjük, kémhatását 0,20 ml (0,20 mmol) 1 M meglumin hozzáadásával pH-7-re állítjuk és bepároljuk. A szilárd anyagot szárítjuk, így 24,0 g mennyiségű kívánt terméket kapunk (13,2 mmol).

S4777-4G23-MÖÍ/KmÖ

Hozam; 81 % Olvadáspont: 90-92 °C.

HPLC vizsgálat' 100 % (terulet%)

Álló fázis; Lichrospher RP-8 5 um:

250 x 4 mm Merck KGaA;

Hőmérséklet: 40 °C;

Mozgó fázis: izökratíkus elűciő előkevert fázissal:

g n-oktílamint adunk 400 ml acetonítril és 600 ml víz elegyéhez, Az oldatot HsPCh-val pH=?-re pufferellak.

Áramlási sebesség: 1	ml./perc
Detektálás (UV): I	>10 nm;
Elemek szerinti analiz	is:
C	H	N	Gd	Na,
számított %: 46,86	7,38	6,17	8,66
talált %: 44,27	7,59	5,76	8,21	<0,1

Az ÍR és az MS spektrumok a jelzett szerkezettel összhangban vannak.

8. példa [3 β (R), 5 β»12 a] -3 - [|4 - [ b 1 sz( 2 - [ b i s z - (k a r b ο χ i met H} - a mi η o ] -éti S ] ~ a m in o> -4 - k a r b ox l· 1 - ο χ o b u ti I ] ~ a m i η ο] ~ 12 ~ h í d roxikolán~24-oe»sav gadolínium komplexe (1:3 arányú) nátriumsőja [lásd: (XIV) képletö vegyűlet]

A 3. reakcíövázlat szerint és az 5, példában ismertetett eljárás alkalmazásával (R)-5-oxo-1 _;2-pirrolidin~dikarhönsay-'1 -(feniimetilj-észiert (kereskedelmi forgalomban kapható termák) észteresítünk melíl-joőiddal N,N~düzopropíl-etií-amin jelenlétében, és az Igy kapott (R)-metli-észtert (3β,5β, 12a}-3~amino~12-hl droxl ko iá n-24-oe~sa v-metil-észterre I (amelyet a

S477?-4023-MOl/KmO

- 53 WO-A-95/32741 nemzetközi közzétételi számú szabadalmi bejelentés 5. példájában ismertetett kolinsav-származékkal analóg eljárással állítunk elő) reagáitatjuk, így {3β(Η),5β,12α]-3-{(4-|bisz[2-ibisz-{2~(1 ,.1-dlmetHeloxi)-2-oxoeti}]-amino»etil]-amino]~5-metoxí-1.5-dioxopentH j-aml no}- 12-hidroxi kólán-24-oe-sav-metíl-észtert kapunk. A Cbz-yédőcsoport eltávolítása (H_s/Pd) és N~(2-brömetil}-N~[2~{1,1 -dimetil etoxi }~2~öxoetn)-g1icin~1, 1 -dímelií-etít-észterrel (amelyet a WO-A-95/32741 nemzetközi közzétételi számú szabadalmi bejelentés 15. példában ismertetett eljárással állítunk elő) CH₃CN - foszfát puffer (pH~8) jelenlétében történő aikiiezés után hexaésztert kapunk, amelyet a megfelelő bexasavvá alakítunk (vizes LiOH - dioxán). Utóbbit a

4. példa D) pontjában ismertetett eljárással komplexáljuk, így a kívánt terméket 44 %-os teljes hozammal kapjuk.

Olvadáspont: > 300 ’C.

Elemek szerinti analízis:

számított %;	C H 48,49 5,71	N 5,29	Gd 14,85	Na 6,51
talált %:	44,02 6,13	5,10	14,09	8,17 H2O 4,50 %

Az IR és az MS spektrumok a jelzett szerkezettel összhangban vannak.

9. példa [ 3 β < R S), 5 β, 12 α] - 3 - [(4 - [b i sz (2 - [ b i sz «< k a rb ο χ l m e t H) - a m I no] - ef 1I] -a ml n o] -4- ka r foo xl -1 -ο χ o b y ti l ] -a m I n o] -12 - h I d roxikolán-24-oe-sav gadolínium komplexe (1:3 arányú) nátriumsója [lásd: (XV) képletű vegyűiet]

A vegyűietet (3β,5β, 12a)-3-aminö-12~hldroxiköÍán-24--öesav-metü-észterből (amelyet a WO-A-95/32741 nemzetközi

S4777-4Ö23-MObKmO közzétételt számú szabadalmi bejelentés 5. példájában Ismertetett kohnsav-szérmazékkal analóg eljárással állítunk elő) és N,N-biszf.2-|biszf.2~(1,1 -dimetiletöxi)~2-ox'QetHj-amínö]-etil:j-L·· -giuíaminsav-1-(1, 1dimetíSefil)-észferből (amelyet a

WO-A-95/32741 nemzetközi közzétételi számú szabadalmi bejelentés 15. példájában ez L-ízomerre ismertetett eljárással, DL~ -glutaminsavből állítunk elő) a 4. példában részletesen megadott eljárással állítjuk elő. A terméket 81 %-os teljes hozammal kapjuk.

Olvadáspont: >3ÖÖ *0.

HPLC vizsgálat;	99 % (területi)
Álló fázis:	Zorbax ECLÍPSE XDB-C8 3,5 p.m
	150 x 4,8 mm os:	dop:
	Rockland Technologies Inc.
Hőmérséklet:	40 CC;
Mozgó fázis:	gradiens elúcíő;
	A=0,Ö5 M KH2PO	0,005 M K2HP
	0,3 mM EDTA víz	ben
	B-CHsGN
Gradiens:	perc A %	8%
	0 90	10
	5 90	10
	20 50	50

Áramlási sebesség: 1,0 ml/perc

Detektálás (ÜV): 210 nm;

A kromatográfiás eljárás két csúcsot mutat közel egyenlő százalékos arányban, amely a DTPA-maradékban az RS szfereocentrumnak megfelelő dlasztareoizomerekre vonatkozik.

94777-4023-MOI/KmO

		- 55	-
Elemek szer	Inti analízis:
	C H	N	Gd	Ha
számított %:	48,49 5.71	5,29	14,85	8,51
talált %:	43,98 8,34	4,98	13,88	8,18 H2O 4,83 %

Az ÍR és az MS spektrumok a jelzett szerkezettel összhangban vannak.

10. példa [3a(S)_s5p_J12o.]-3-n4~[biszp-[blsz-(karboxÍmetil)-amlno]-etlí]«aminol-4-karboxi>1 -oxobutil]-amíno]»12-hidroxIkolán-24-oe«sav gadoiíníum komplexe (1:3 arányú) nátrlumsőja [lásd: (XVI) képletö vegyület] (3 α, 5 β, 12 α > - 3-a m i η o-12«h I d r ο χ i k o l á n - 2 4 - o e - s a v - m e t SI «észter {3«,5β₍ 12a)-3-ammo-12-hidröxíkoián~24-oe-sav~metíí-ész~ tért reagáítatunk Mitsunohu körülmények között [Mitsunobe, 0. Synthesis, (1981.), 1-28; Oenike, J. K. és munkatársai: Chem. Pbys. Lípíds, 77, 261-267 (1995.)) trííenHfoszfínnaí, dietil-azodikarboxháttal és hangyasavval THF-ban, így (3α,5β,12α)-3-formiioxi-12-hidroxikolán-24-oe-sav~mefíl-észtert kapunk.

Utóbbit védöosoport-mentesltjük (MeOH - HCI), igy (3α,5β,12«}~ -3,12~dihídroxikölán-24~oe~sav~metil~észfert kapunk, amelyet a WO-A-95/32741 nemzetközi közzétételi számú szabadalmi bejelentés 5. példájában a kolinsav-származékra ismertetett reakciósorozattal kezelünk. 32 %-os teljes hozammal (3α,5β,12α)-3~amíne-12-hidroxikoíán-24-oe-sav-metn-észterf kapunk. Olvadáspont: 90-92 ’C.

(aj^ + 53,48 (o - 1,3, CH₃OH).

94777-4O23-MOi/KrR0 * « * «« Μ

Elemek szerinti analízis.

Ο Η N számított %: 74,03 10,69 3,44 talált %: 74,20 10,99 3,26

TLC; Álló fázis; sziilkagél lap 60F 254, Merck

Eluens: 9:1:0,5 CHOI₃/CH₃OH/25 % NH<OH

Rf=Ö,21,

Az K-NMR, a ¹³C~NMR, az IR és az MS spektrumok a jelzett szerkezettel összhangban vannak.

A 3. reakclővázlat szerint és az 5. példában ismertetett eljárás alkalmazásával íS)-5-oxo-1,2-pírrolidin-dikarbonsav-2-metil-1-(fenilmetil)-diésztert reagáltatunk az A) lépésben előállított vegyülettel. Az így kapott [3α(8),5β, 12aj-3-[(4-jbisz(2-jbisz-[2-(1,1 -dlmeti I etoxi )-2-oxoeth}-amino-eííí]~ami no j-5-metoxl-1,5-díoxopen ti í j-am i ηο)~12-ί·Η0ΓθχίΚοί0η~24~οβ~33ν-ηΐΘΐΗ~ό8ζίβΗ hidrogénezzük (H₂/Pd), így a Cbz-vedőcsoportot eltávolítjuk. Az ezt kővető N-(2-brómetll)-N-j2-(1,1-dimetlletoxi)-2-oxoetilj-glícin~1,1-dimetiiettl-észterrel (amelyet a WO-A-95/32741 nemzetközi közzétételi számú szabadalmi bejelentés 15. példájában ismertetet eljárással állítunk elő), €H₃CN-foszfát pufferhen pH-8 kémhatás mellett végrehajtott alkilezéssel a megfelelő hexaészterf kapjuk. Utóbbit a hexasavvá alakítjuk (vizes LÍÖH/diaxán}, amelyet a 4. példa D) pontjában Ismertetett eljárással komplexálunk, így a kívánt terméket 33 %-os teljes hozammal kapjuk.

Olvadáspont: >300 “C.

HPLC vizsgálat: 100 % (területi)

94777-4G23~MOí/KmQ

Elemek szerinti analízis:

	C Η N	Gd	Na
számított %	43,49 5,71 5,29	14,85	5,51
talált %:	42,04 6,37 4.75	1 3,28	5,91 H2O 9,79 %

Áz IR és az MS spektrumok a jelzett szerkezettel összhangban vannak.

[3P(S}_s58₅12a]“3-[[4~(blsz[2-(bisz-(karboximetít)-ammo]-etít]-amino]»4-karboxí-1-oxobutH]“amlno]~12-hidroxikotán-24-oe-sav gadoHmum komplexe (1:3 arányú) nátriumsója [lásd: (XVO) képletü vegyület]

A vegyűletet (38,5(5,7a)-3-amino-7-hldroxíkoíán-24-oe-sav-metil-észterböl (amelyet a WO-A-95/32741 nemzetközi közzétételi számú szabadalmi bejelentés 5, példájában ismertetett kolínsavval analóg eljárással állítunk elő) és N_:N-bisz{2~(bísz[2 -(1,1~dí met Uetoxi)~2~oxöeíil)~aminö]~eíilJ~L~gl utam insav-1 -(1,1 -dimetil-etil)-észterböi (amelyet a WÖ-A-95/32741 nemzetközi közzétételi számú szabadalmi bejelentés 15. példájában ismertetett eljárással állítunk elő) a 4. példában részletesen ismertetett eljárás szerint állítjuk elő. A terméket 89 %-os teljes hozammal kapjuk.

Olvadáspont: > 300 ’C,

Elemek szerinti analízis:

számított %:	C 46,49	H 5,71	N 5,29	Gd 14,85	Na 6,51
talált %:	43.88	6,50	4,91	13,62	6,04 H->0 7,1	1 %

Az IR és az MS spektrumok a jelzett szerkezettel összhangban vannak.

94777-4023-MOi/KmO

- 58 ο ♦

12. példa [3p{S)3hJa/12a]-3-[(4-[biszP-(btsz-(karboximetHhamIno]-etiO-aminoI-4«karboxi-1<Oxofoytll]-amtnoJ-12’dih5droxiköSán-24-oe-sav (lásd; (XVIff) képletű vegyület]

A vegyületet <3β,5β,7α,.12a)-3~aminO“7~dihidroxikoíán-24~ ~oe-sav~metil-észterből; (amelyet a WO~A-95/32741 nemzetközi közzétételi számú szabadalmi bejelentés 5. példájában ismertetett eljárással állítunk ele) és N,N-bí'Sz[24blS2[2-(í.,1-d!metiletoxí)-2-oxoetil]-amino]~etil]-L-glutamínsav-1~(1,1 -dimetíl-etil}~észterbői (amelyet a WO-A-95/32741 nemzetközi közzétételi számú szabadalmi bejelentés 15. példájában az L·· -izomerre ismertetett eljárással DL-glutaminsavből állítunk elő) részletesen a 4. példában a B) lépés szerinti vegyület előállítására ismertetett eljárás szerint állítjuk elő. A terméket 85 %-os teljes hozammal kapjuk.

Olvadáspont: 224 ^SC (bomlás)

HPLC- vizsgálat: 57 % (területi)

Álló fázis: Zorbax ECLIPSE XDB-C8 3.5 pm;

150 x 4,6 mm oszlop;

Rooki and Technologies I nc.

Hőmérséklet: 40 °C;

Mozgó fázis: gradiens elúció;

A-0,017 M H₃PO,,

0,3 mM EDTA vízben 8~CH₃CM

94777-4923-MOVKmO

Gradiens: perc A% 8%

0 95 5

40 65 35

50 55 35

Áramlási sebesség; 1,0 ml/perc

Detektálás (UV): 210 nm:

A kromatográfiás eljárás két csúcsot mutat közel egyenlő százalékos arányban, amely a DTPA-maradékban az RS sztereocentrumnak megfelelő díasztereoizomerekre vonatkozik.

Elemek szerinti analízis:

C Η N Ll, Cl számított %: 57,60 7,78 6,55 talált %: 54,34 7,81 6,19 <0,1 H₂O 5,12 %

Az ÍR és az MS spektrumok a jelzett szerkezettel összhangban vannak.

13. példa [3 α (S), 5 β, 7 a _f 12 a] - 3 -f Π(5-[bI szf 2 -[ bis z (k a rb ο χ I m e 111) - am I η o} - a t11} - a m I η o ] - S - k a r fe ο x s p e n £ i I ] - a m I n o] - k a r b ο η Η} ~ ο χ I j -7,12-dihidrokcién~24-ce”Sav gadolínium komplexe (1:3 arányú) nátriumsőja [lásd: (XIX) képletű vegyűlet]

A) (3a(5)_í5p_s7a.,12a]-3-[[[[6-(1,1-dlmetnetcxI)-5-[bIszp~ -1 b I s z [ 2 - (1,1 - d I m e ti I e t ο x i) - 2- ο xo e 111} ~ a m I η o ] - e 111 ] - a m I η o) -6-oxo h e χ 11] - a ml η o ] ~ k s r b ο η 11 ] - ο χ I] - 7,12 ~ d I bldroxl-kolán-24-oe~sav-metibészter

1. eljárás

2,9 g (9,7 mmol) mennyiségű bisz(triklcrmetil)-karbonát 40 ml vízmentes CH₂CI₂-fean képzett oldatát adjuk cseppenként

94777-4923-MOI/KmO nitrogéngáz alatt 10 g (23.7 mmol) mennyiségű (3α,5β,7α, 12α)-3,7,12-trihídroxíkolán-24-oe-sav-meíH-észter (kereskedelmi forgalomban kapható termék) és 2.3 ml (26,4 mmol) piridín 100 ml vízmentes CH₂CÍ₂~ban képzett, 0 ’C hőmérsékletre hűtött oldatához. Az elegyet szobahőmérsékletre engedjük melegedni, és 1 óra szobahőmérsékleten történő tárolás után az oldatot ismét 0 °C hőmérsékletre bűtjük, 7,9 ml (47,3 mmol) Η,ΙΜ-diizopropíl-etilamlnt, majd cseppenként 17,6 g (23,7 mmol) mennyiségű N²,N²~blsz[2-[bisz(2-(1,1 ~dimetíletoxl)~2~Gxoetií]-amiHQ]~etilj-L-hzin~(1,1 -dimebl~eth)-észter [Aneili, P, L. és munkatársai, Bioconjugat© Chem., 10, 137 (1999.)] 50 ml vízmentes ChbC-ls-ben képzett oldatát adjuk hozzá. Az oldatot 3 óráig szobahőmérsékleten keverjük, majd 2x100 ml H₂ö-zel mossuk, Na₂SO4-on szárítjuk és bepároljuk. A nyers anyagot fiash-kromatográfiás eljárással tisztítjuk, így 14,8 g mennyiségű kívánt terméket kapunk (12,4 mmol).

Hozam: 52 %.

Az ÍH-NMR, a ⁿC-HMR, az ÍR és az MS spektrumok a jelzett szerkezettel összhangban vannak.

6,1 g (12,6 mmol) mennyiségű [3α6β,7α, 12a]-3-((klőrkarbo~ nilj-oxij-7,12-dihidroxikoíán-24-öe-sav~metíl-észter [Janóul, V,, Lanier, M.: Regen, S. L, J. Am. Chem. Soo., 119, 640 (1897,)] 150 ml vízmentes CH₂CI₂-ben képzett oldatát 0 °C hőmérsékletre hütjük nitrogéngáz alatt, majd 4,8 ml (27,8 mmol) N,N-dilzopropíl-etíl-amíht adunk hozzá. Ezután cseppenként 9,3 g (12,6 mmol) mennyiségű N^z,N’-blsz[2-[blsz[2-(1, 1-dimetííeíoxi)-2-oxoetilj-amlnol-ethj-L-lizln-(1,1 -dlmetii-etiij-észter 20 ml

94777-4ö23-MOÍ/KmO » <vízmentes CH₂CI₂~ban képzett oldatát adjuk hozzá. Az oldatot 3 óráig szobahőmérsékleten keverjük, majd 2x100 ml H₂Ö-zel mossuk, Ha₂SO4~on szárítjuk és bepároljuk. A nyers anyagot flash-kromatográfíás eljárással tisztítjuk, így 11,9 g mennyiségű kívánt terméket kapunk (9,9 mmoi).

Hozam: 79 %.

Az a ^S3C-NMR, az ÍR és az MS spektrumok a jelzett szerkezettel összhangban vannak.

B) [3a(S|_J53_í7aJ2a]“3-[[([§-{bisz(2-[bisz(karböxfeÉH)aml· no]-etil]-ami no]-S-karboxipenhl] «ami no]-karbon II]-oxi]»7,12-dihidroxikolán-24~oe-sav

Cseppenként szobahőmérsékleten 141 ml 2 M vizes UOH-oldatot adunk 11,2 g (3,4 mmoi) mennyiségű A) lépésben előállított vegyűlet 141 ml 1,4-dioxánban képzett oldatához. 104 óra múlva az oldatot cseppenként 150 ml térfogatra bepároljuk, és 175 ml 2 M vizes HCI-oldatho-z adjuk (a végső kémhatás pH=l_;S). A csapadékot szűrjük, 5x50 ml H₂ö-zeí mossuk és vákuumban szárítjuk. A nyers anyagot flash-kromatográfíás eljárással tisztítjuk. A kapott szilárd anyagot 10% vizes CHsCIM-ban feloldjuk és a kémhatást tömény HCI hozzáadásával pH = i~re állítjuk, majd az oldatot Amberliíe® XAD 16.00 gyanta oszlopra töltjük (250 ml) és CHsCH - H₂O gradiens alkalmazásával eluétjuk. A terméket tartalmazó frakciókat bepároljuk, így

4,3 g mennyiségű kívánt terméket kapunk (4,8 mmoi).

Hozam: 51 %. Olvadáspont: 184-191 °C.

K.F. 4,36 %.

|all^ö-*19,5 (.σ=Ί, 1M NaOH).

HPLC vizsgálat: 97,3 % (terület%)

94777-4023-MÖPKfnO

- β;

Álló fázis. Hypurity EB te C-18 5 μΐϊΐ;

250 x 4,6 mm Hypersíl-íel töltött oszlop;

Hőmérséklet: 40 °C;

Mozgó fázis: gradiens elúció;

A=O.Ö1 Μ KH₂FO₄, 0,3 mM EDTA vízben b=ch₃cn

G r a d I e n s: p e re A%		B%
0 95		5
20 65 j~ O £2		35
UU Vk? Áramlási sebesség: 1 ml/perc
Detektálás (UV): 200 nm;
Elemek szerinti analízis:
C H	N	Cl
számított %: 57,34 7,85	6,23
talált %; 55,22 7,81	6,08	<0,1
Az 'H-NMR, a i3C-NMR, az IR	és az MS spektrumok a jelzett

szerkezettel összhangban vannak

C) (3a(S)_s8p_!7a_J12cr]’'3[[[t5“[^tez[2”[b5Sz(karboximetiI)-aminol-etiSpaminol-S-karboxSpentÍipamsnol-karboniiJ-oxi]-7,12«díh8droxikoián>24'Oe-'S®v gadolinium komplexe (1:3 arányú) náfnumsöja

4,7 g (5,2 mmol) mennyiségű 8) lépésben előállított vegyületet 100 ml H₂ö-hen szuszpendálunk, és 10 ml 1 M NaOH hozzáadásával feloldjuk, amíg a kémhatás pH~6_;5 lesz. 1,9 g (5,2 mmol) mennyiségű GdCb 17 ml H₂G~ben képzett oldatát adjuk hozzá a kémhatás 15.8 ml 1 M NaOH alkalmazásával pH~6,5 értéken tartásával, 1 óra múlva szobahőmérsékleten az

S4777-4023-MO!/KmO oldatot Amberiite® XAD 16.00 gyanta oszlopra (250 ml) töltjük, amelyet CH₂CN ~ H₂G gradiens alkalmazásával eluálunk. A terméket tartalmazó frakciókat bepároljuk, így 4,2 g mennyiségű kívánt terméket kapunk (3,8 mmoi).

Hozam: 72 %. Olvadáspont: >300 °C.

K.F. 9,49 %.

[a]o°=+2_!63 (c = 2, H₂O)

HPLC-vlzsgálat: 100 % (terület%) (a B lépéssel azonos módon) Elemek szerinti analízis;

számított %:	C 46,15	H 6,76	N 5,00	Gd 14,06	Na Cl 6,17
talált %:	41,80	6,28	4,54	12,64	5,73 <0,1
Az ’H-HMR, a	:2C-NMf	7, az	R és az	MS spektrumok a jelzett

szerkezettel összhangban vannak.

14, példa [ 3 β (5) _s δ β, 12 α ]»3-([ 4 - [ [2 - [ bS sz (k a r fe ο χ i met 0) - a m i η o ] - e ti I ] ~(karboxi metil)-a minő]-4-karfeoxh1-oxobutil]-ami no]-12» -bldroxikolán-24-oe-sav mangán-komplexe (1:3 arányú) nátriumsója [lásd: (XX) képletü vegyület]

A) [3p(S),5p_f12aJ-3-[[4-amino~5~metoxi~1 ,δ-dioxopentil]-amino]-12-hidroxíkelán~24-oe-sav-metSI-észter

3,4 g mennyiségű 5 %-os Pd/C-ot adunk 34,14 g (5ö mmoi) mennyiségű (3β(6),5α, .12a]-3-([5~metoxi-1 ,S-dioxo-4-f((fenll'metoxi )~kar bon il)-amínej~pentllj-ami no]-12-bidroxi kelén -24-oe-sav-metíl-észter (5. példa B) lépésében előáliitott termék) 340 ml MeöH~han képzett oldatához. A szuszpenziót szobahőmérsékleten 3,5 óráig hldrogéngáz atmoszférában keverjük. Miihpore® szűrő FH (0,46 pm) alkalmazásával történő szűS4777-4023-MOI/KmO rés után az oldatot szárazra pároljuk, így 21,7 g mennyiségű kívánt terméket kapunk (49,3 mmol).

Hozam: 98,6 %,

Tömegveszteség (50 *C; nagy vákuumban); <0,1 %,

Elemek szerinti analízis;

C H számított %: 67,85 9,55 talált %: 68,58 9,72 ία)|^ο=·*-3δ,81 (0=2,01, CHCh)

N

5,10

5,12

Savas liter (0,1 M HCI): 94,6 %,

Az 'H-NMR, a ^!3C-NMR, az LR és az MS spektrumok a jelzett szerkezettel összhangban vannak.

8) C3^(S}₍5^,12a}-3-[[4-U2-(bísz[2-(1,1-dÍmetöetoxIl-2-‘OxoetíS]-amino}“etií]»(2~(1_í1“dímetíí©toxij~2“Oxoetii|-amíno]-5-metoxi-1,5-díoxepentií]«aminol-12-hidraxiko!án- 24- oe -s a v -me ti I - é s zte r

18,0 g (29,1 mmol) mennyiségű A) lépésben előállított vegyületet és 13,3 g (37,8 mmol) mennyiségű N-(2-brőmetíl)-N-(2-(1,1 ~dímeti!etoxi)~2-oxoetií]-giicin~1,1 -dimetil-etil-észtert (amelyet a WO-A-95/32741 nemzetközi közzétételi számú szabadalmi bejelentés 15, példájában ismertetett eljárással állítunk elő) 120 ml EtOAc-ban feloldunk, 120 ml 2 M foszfátpoffer (pH=8) hozzáadása után az elegyet 2 óráig élénken keverjük, majd a vizes fázist 120 ml friss 2 M foszfátpufferre! (pH «8) helyettesítjük és az elegyet további 70 óráig keverjük. Az elegyet 40 °C-on 12 óráig melegítjük, szobahőmérsékletre hütjük, elválasztjuk és a szerves fázist bepároljuk, így maradékot kapunk, amelyet 150 ml CH₂C!₂-ban feloldunk, 2x100 ml vízzel

94777-4G23-MO!/KmO mossuk, NasSO^-on szárítjuk és bepároljuk. A nyers anyagot flash-kromatográfiás eljárással tisztítjuk, így 12,3 g mennyiségű kívánt terméket kapunk (16,0 mmol).

Hozam: 52

Elemek szerinti analízis:

C Η N számított %: 65,90 9,48 5,12 talált %: 65,99 9,72 5,03

TLC: Álló fázis: szilikagéi lap 8ÖF 254, Merck

Eiuens. 1:1 arányú EtöAc/n-hexán R_{=Ö,4Ö,

Detektálás: 1 M NaOH-ben oldott 1 %-os KMnO₄

Az 'H-NMR, a ^1JC-NMR, az IR és az MS spektrumok a jelzett szerkezetiét összhangban vannak.

C> (3β(δ),δβ,12αΙ-3~Π4-[(2-[0ΐ5ζ[2-<1_ί1-άίΓη©ίΙ1ο<οχΙ)-2~ ο x o e ί 11 ] - a m in o j -éti I ] [2-(1,1 - d i m e ti I e t o x i)«2 - ο x o e 111 ] - a m í ~ n ©] - 5 - m e ί ο x i ~ 1,5 - d i © χ ο p e n t i I ] - a m I η © ] -12 - h i d r ο χ í k ο I á n -24“©e~aav-mefil~észter

3,9 g (20,1 mmol) mennyiségű terc-bufil-brőmacetátot adunk oseppenként 11,0 g (13,4 mmoí) mennyiségű Bj lépésben előállított vegyület és 3,5 ml (20,1 mmol) N,N-dnzopropiletllamin CH₂CN-ban képzett oldatához. Az elegyet 24 óráig szobahőmérsékleten keverjük, majd további 0,9 ml (1,0 mmol) N,N-diízopropilehlamlní és 0,8 g (4,0 mmol) mennyiségű terc-butil-brőmacetáíot adunk hozzá. Az elegyet további 70 óráig keverjük, elválasztjuk, és a szerves fázist bepároljuk, igy maradékot kapunk, amelyet 150 mi CHsCR-ban feloldunk, 2x100 ml vízzel mossuk, Na₂S04“On szárítjuk és bepároljuk. A nyers anyagot

94777-4023-MOl/KmO

* it

Φ « X φ Φ φ φφ X φ * «Φφ flash-kromafográílás eljárással tisztítjuk, így 10,7 g mennyiségű kívánt terméket kapunk (11,5 mmol).

Hozam: 85 %.

Elemek szerinti analízis:

C Η N számított % talált %;

65,87	9,39	4,50
88,27	9,62	4,52

TLC: Álló fázis: szilikagél lap 60F 254, Merck

Eiuens: 1:1 arányú EtOAo/n-hexán R_}~ö,48.

Detektálás: 1 M NaOH-ban oldott 1 %-os KMnO₄

Az ¹ H-NMR, a ^1a0-NMR, az IR és az MS spektrumok a jelzett szerkezettel összhangban vannak.

D) [3p(S)»Sp_>12al-3«|[4-[[2-[bisz(í<arfooximetsl)~amino3-eti í|-(karboxi metil )»a minő]-4-karboxM-oxobutilj-amin o ] -12 - h i dr ox lkot á n - 2 4 ~o e - sav

Oseppenként szobahőmérsékleten 120 ml 2 M vizes LiOH-oldatot adunk 9,2 g (9,8 mmo!) mennyiségű C) lépésben előállítóit vegyület 120 ml díoxánban készített oldatához. 24 óra múlva az oldatot bepároljük (180 ml térfogatra), és oseppenként 135 ml 2 M vizes HCl-oldathoz adjuk (a végső kémhatás pH~1,9). A csapadékot szűrjük, 5x50 ml H₂0~zel mossuk és vákuumban szárítjuk, így 7,3 g mennyiségű kívánt terméket kapunk (9,8 mmol).

Hozam: 98 %, vegyület: 163-188 *C,

K.F. 1,81 %.

íaj^+29,03 (CM, 1 M NaOH).

HPLC vizsgálat; 180 % (terület%)

94777-4023-MOh'KmO *

* 4

* X *

fi <>

♦ *.* ♦ >«·*' fe ;

<« * * >

« φ

Álló fázis:

Hőmérséklet Mozgó fázis:

Gradiens:

Zorbax ECLIPSE XDB-C8 3,5 pm; 153 x 4,8 mm oszlop;

Rockland Technologies Inc.

°C;

gradiens elúcíó;

4=0,01 M KH₂PO_4i 0,01 M &H₂P0₄,

0,3 mM EDTA vízben

B~CH₃CH perc A% 8%

93 7

93 7

50	50 40
Áramlási sebesség:	1,0 ml/perc
Detektálás (UV):	200 nm
Elemek szerinti anaí	zis:
C	H	N	U	Cl
számított %; 60,23	8,06	5,89
talált %: 53,60	8,25	5,49	< 0,1	<0,1
Az ! H-NMR, a t3C-N:k	ÍR. az IR	és az	MS spektrumok a jelzett
szerkezettel összhangban vannak.

É) [3p(S)_sS3,12a]~3-[[4-[(2-(bisz(karboximetil)-amInoJ-et{|](karboximetH)-amIno]-'4-karboxi-12’OxobutH]-amSrw]-12-hidroxlkolán-24-oe-sav mangán-komplexe (1:3 arányú) nátriumsója

5,3 g (7,2 mmol) mennyiségű D) lépésben előállított vegyületet 250 ml H₂0~ben szuszpendálunk és 36 mt 1M NaOH hozzáadásával feloldjuk, amíg a kémhatás pR~6,5 lesz. 1,4 g (7,2 mmol) mennyiségű MnCI₂-4H₂Ö 50 mi H₂O-ben képzett ol94?77-4G23-MOi/KmÖ

- 88 dalát adjuk hozzá a kémhatás 7,9 ml 1 M NaOH-daí pH-8,5 értéken tartása méh ett. 1 óra múlva szobahőmérsékleten az oldatot nanoszürövel sótalanítluk, majd hepároljuk, így a kívánt terméket kapjuk,

Hozam: 98 % olvadáspont: >300 *C.

K.F. 13,54 %.

= ajE,^ö=+2,S3 (c CE vizsgálat: Kapilláris;

= 2, H₂O).

108 % (ferület%) kondenzált szííika, 0,72 m x 50 pm

Puffer;

Hőmérséklet:

Leállítás! idő: 20 perc

Detektálási hullámhossz 200 nm

0,07 M borát, pH-9,3, 0,3 mM EDTA 25 »C (ÜV):

injektálás: hidrodinamikus (50 mbar, 4 mp)

Minta koncentráció:	1 mg ml
Műszer:	Hewlett	Fackard 3D HPCE
A kísérleti körülmények	t (perc)	eljárási	lépés
szabályozásának Idő-	2 kiöl	slítés H2C	>-zel
rendje;	2 kiöblítés 0,1	M NaOH-dal
	1 kiöl	öiítés H2C	5-zel
Elemek szerinti analízis:	5 kiöl	3ütés pufferrel
C H	N	Mn	Na C
számított %: 51,87 8,35 4,90	8,41	8,05
talált %: 45,50 8,9:	5 4,30	5,28	6,88 <0

94777-4023-MOVKmO

en Az ÍR és az MS spektrumok a jelzett szerkezettel összhangban vannak.

Azonos módon a 2. példa B) lépésében előállított vegyület kiindulást anyagként! felhasználásával (3p(S)-,60]~3-([4~[[2~nbjsz~ (karboximeífO-a.míno}-etil}-(karboximet!l)-amino}-4-karboxí~1 ~oxo~ buti!}-amíno}-12~oxokolán-24-oe-sav gadglíníum-komplexét állítjuk elő.

15. példa [3a(S)_s56_s12a3-3-([{[5-([2-(biez(karboximetíi)-amíno]-etílXkarfoöximetiö-aminöJ-S-karboxIpentill-aminoJ-karb ο η ii ] - ο x í ] -12 - h 1 d r o xi k ο I án - 24 ~ o e - s a v m a n g á n - k o m p 1 ex e (1:3 arányú) nátriumsúja [lásd; (XXI) képleté vegyület}

A) N²“[2~|bSsz[2-(1,1~dímetlletoxl}-2-oxoetíl3-amíno}-etlI}-N²-[2“(1»1-dímetiíetox0“2-oxoetjl}-N6-((feniimetoxi}-karb ο n 11} ~ L -1 i ζ í n ~ m e t i í - és zt e r

25,6 g (72,55 mmoí) mennyiségű N~(2^brómetif)-N-[2~{1,1~ - d· i m e 111 e f ο x i) -2 - ο χ o e f i1}- g Ι í c; ί η ~ 1,1 - d 1 m e ί ί l- e 111 - é s z t e r (eme 1 y e 1 a WO-A-95/32741 nemzetköz! közzétételi számú szabadalmi bejelentés 15. példájában ismerteteti eljárással állítunk elő) 25 ml CHsCN-ban képzett oldatát cseppenként 20 g (60,46 mmol) mennyiségű N⁸-((fenílmetoxt}-k.8rbonn}-L-lizin-metH-észt'©r-hidrokioríd és 12,64 tnl (72,55 mmoí) Ν,Η-diizopropil-etilamin 250 ml C-H₃CN~ban képzett oldatához adjuk. A reakcióelegyet szobahőmérsékleten keverjük. 5 nap múlva további 17,7 ml (101,6 mmol) Ν,Ν-diízöpropíl-etil-amint és 18,8 g (13,5 ml,

101,8 mmol) mennyiségű terc-butil-brőm-aceíátot adunk az oldathoz. 24 óra múlva az oldószert bepároijuk, és a maradékot 200 ml Et₂O-dal kezeljük. Az elegyet szűrjük, az oldatot

347?7-4Ö23-MOÍ/KmO * « * ·» > « ♦

2x100 ml 0,1 M HCI-oldatta! mossuk, Na₂S0₄-on szárítjuk és csökkentett nyomáson bepároljuk, A nyers maradékot flash-kromatográfiás eljárással tisztítjuk, így 13,03 mennyiségű kívánt terméket kapunk (19,2 mmol).

Hozam: 32 %.

K.F-: <0,1 % [ajo = -22,47 <0=1,93, CHC13).

Elemek szerinti analízis:

C Η N számított %: 61,83 8,45 6,18 talált %: 61,70 8,52 5,84

TLC; Állő fázis: szilikagél lap 60F 254, Merck

Eiuens; 3:7 EtOAc/n-hexán R_f0,40.

Detektálás: CefSO^js, 4 H2O (0,18 %) és (ΜΗ4)§Μθ7024’4 H₂O (3,83 %) 10 % h'₂SO₄-ben

Az a ¹³C~NMR, az ÍR és az MS spektrumok a jelzett szerkezettel összhangban vannak.

Β) (3a, δ β, 7 α, 12 α ) - 3 - [(ΚI ό r ka r b ο η íl) ο χ i] -12 - h ídro χ i k ο S á n - 2 4 - o e - s a v - m et 11 -é s 2 tér

FIGYELMEZTETÉS: minden műveleti lépést jól szellőző elszívó fülke alatt kell végezmi

Cseppenként ÍÖ0 ml (202,2 mmol) foszgén toluolban képzett 20 %-os oldatát adjuk 14,7 g (36 mmol) mennyiségű (3 α, 5 β, 7 α, 12 α) - 3,12 - d I h i d r ο χ I k ο 1 á η- 2 4 - oe - s a ν - m e I ί I - é szte r 350 ml vízmentes CH₂CI₂-ban képzett, nitrogéngáz alatt 0 °C hőmérsékletre hűtött oídatáboz. Az oldatot 3 óráig szobahőmérsékleten keverjük, majd bepároljuk (FIGYELMEZTETÉS). így 15,2 g mennyiségű kívánt terméket kapunk (32,4 mmol).

94777-4023-MÖUKmÖ

Hozam: SQ %.

Az ’H-NMR, a ¹³C-NMR, az IR és az MS spektrumok a jelzett szerkezettel összhangban vannak.

«oxoetHpaminoj-etí!]-(2-(1,1~dímetiletexí)~2-oxoeiií]-amL· no]-6-meíoxi“6-oxohex1l3-amino]-karbonii]-oxi3-12-hidrox i kői á n - 24«oe -s a v - me ti i -é s z te r

1,3 g mennyiségű 5 %-os Pd/C-ot adunk 12,3 g (18,1 mrnol) mennyiségű A) lépésben előállított vegyölet 120 ml MeOH-ban képzett oldatához, és a szuszpenziót 3 óráig nitrogéngáz atmoszférában szobahőmérsékleten keverjük. Millipore®' szűrőn (FT 0,45 gm) szűrés után az oldatot csökkentett nyomáson bepároljuk. A nyers anyagot 20 ml vízmentes ChbCC-ban feloldjuk, és cseppenként 8,7 g (18,54 mrnol) mennyiségű B) lépésben előállított vegyület és 0 °C hőmérsékleten nitrogéngáz alatt

6,5 ml (37,07 mmoi) N,N-diízopropíletilamin (DIEA) 2ÖÖ ml vízmentes CH₂Cl₂-ban képzett oldatához adjuk. 3 éra múlva a reakcióelegyet 2x100 ml H₂Ö-zeS mossuk, a szerves fázist elválasztjuk, Na₂SÖ4-on szárítjuk és csökkentett nyomáson bepároljuk. A nyers anyagot flash-kromatográfiás eljárással tisztítjuk, így 8,6 g mennyiségű kívánt terméket kapunk (3,8 mrnol). Hozam; 49 %.

K.F.: <0,1 %.

Elemek szerinti analízis:

C Η N számított %: 65,07 9,38 4,30 talált %: 65,67 3,52 4,24

TLC: Álló fázis: sziilkagál lap SOF 254, Merck

S4777-4023-MO!7KmO

Eluens: 3:7 arányú EfOAefn-hexén R?~0_t30.

Detektálás: CefSíkb, 4 H₂0 (0,18 %) és· (NH₄)₆Mo₇G₂4'4 H₂O (3,83 %) 10 % H₂8Ö<_;-ben

Az ’H-NMR, a ^Í3C-NMR, az IR és az MS spektrumok a jelzett szerkezettel összhangban vannak.

D) [3a{S)_s5p/f2«3-3-[[(fS~[P-(bisz{karboxlmein)~aminö]~ -etil]-(karboxiraetU )-amirm]-S-fcarboxipen till-a mi no]-karb ο π i I] - ο χ i] -12 - h i d r ο x i k ο l á a - 24 - o e - s a v

133 ml (266 mmol) 2M LiOH-ot adunk 8,5 g (10,64 mmol) mennyiségű C) lépésben előállított vegyület 130 ml 1,4-dioxánban képzett oldatához. A keletkező oldatot szobahőmérsékleten 24 óráig keverjük, majd 120 ml 2 M HCI hozzáadásával pH=7-re semlegesítjük. Az oldatot csökkentett nyomáson való bepárléssel térfogatának felére töményítjük és igen lassan, élénk keverés mellett pH=1,6-re savanyítjuk, igy fehér csapadékot kapunk, amelyet szűrünk, 2x100 mi H₂O-zel mossuk és szárítjuk igy 8,45 g mennyiségű kívánt terméket kapunk (8,13 mmol).

Hozam: 76 %. Olvadáspont: 188,9 *C..

K.F: 1,44 %.

[alo⁰~+35,.47 (c * 2,01, 1 M NaOH),

RPLC-vizsgálat: 96,8 % (ferüleí%)

Áilö fázis; Zorbax ECLIPSE XD8-C8 3,5 um;

160 x 4,6 mm oszlop;

Rockiand Technologies Inc.

Hőmérséklet: 40 °C;

947 77 -4 02 3- Μ ΟI i KmÖ

- 73 Mozgó fázis: gradiens elúció:

A-0,017 Μ H3PO4 vízben B=CH₃CN

Gradiens: perc	A%
ö	85	35
25	15	85
30 Áramlási sebesség: 1J	15 0 ml/perc	85

Detektálás (ÜV): 210 nm;

Elemek szerinti analízis:

€ Η N Li Cl számított %: 59,91 8,12 5,37 talált %: 58,44 8,04 5,03 <0,1 <0,1

Az ¹ H-NMR, a ¹³C-NMR,_; az IR és az M8 spektrumok a jelzett szerkezettel összhangban vannak.

E) [3 α (S}, 5 β»12α] ~ 3 - (([ [5 - [ (2 ~ (fel s z < R a r b ο x f m e 111) - a m ί η o] -etíl]-(karboximetil)“amíoo]“S-karfeoxtpentil]«amino3-karb ο η i I] - 0 x i ] -12 - h 1 d r 0 xi R ο 1 á n ~ 24 ~ 0 e»s a v m a n g á n ~ k © m ρ I e x e (1:3 arányú) nátrmmsőja g (8,3 mmol) mennyiségű D) lépésben előállított vegyületet 50 ml H₂O~ben szuszpendáiunk, és 18 ml (18 mmol) 1 M NaOH hozzáadásával feloldjuk. 3 óra alatt 11,27 ml (6,3 mmol) 0,559 M vizes MnCI₂-oldatct adunk hozzá a kémhatás 7,8 ml 1 M NaOH alkalmazásával való pH~6,5 értéken tartásával. Az oldatot 0,9 ml (0,9 mmol) 1 M NaOH-dal pH~8,S~ra állítjuk, szűrjük (HA 0,45 pm MIIlipore® membrán) és nanoszürövel sőtalanltiuk. Az oldatot bepároljuk és szárítjuk, igy 5,45 g mennyiségű kívánt terméket kapunk (6.05 mmol).

S4777-4Ö23-MOPKmO

- / φ »

Hozam: 98 %

Olvadáspont. >380 ’C.

K.F.: 3,78 %.

[α$°=+27,74 (c - 2, H₂O).

CE vizsgálat: 100 % (t.erüiet%).

Kapilláris: kondenzált szilika, 0,72 m x 50

Feszültség:

Puffer:

pm kV

0,07 M borát, pH~9,3, 0,3 mM

Hőmérséklet:

LeálOtáss idő °C 20 perc

Detektálási hullámhossz (UV): Injektálás:

Μi ni a koncé n t ráció:

200 nm hidrodinamikus (50 mbar, 4 mp) 1 mg ml'¹

Műszer:

Hewlett Packard 3D HPCE

A kísérleti körülmények szádé-

I y o z á s á n a k í d ö re nője:	t (perc) eljár	ásí lépés
		kiöblítés	H2O-zel
	2	kiöblítés	0,1 M NaOH-ds
	1	kiöblítés	HsO-zel
Elemek szerinti analízi	5 s:	kiöblítés	pufferrel
0	Η N	Mn	Na Cl
számított %: 52,00	6,49 4,66	8,10	7,66
raláit %: 49,54	7,17 4,44	5,85	7.58 <6,1
Az IR és az MS spektrumok a jelzett	szerkezet	tel összhangba

vá n nek

94? 77-4623-MOí/KrnÖ

- 75 16. példa

N²-biszí2-fbisz(lcarbOximeíiS)-amino]-et5Í3-N-«3p_t53,7a_>12a)-7,12-díhidroxí-24-oxo-24-[(2-szylfoetil}-amino]-kot án-3«ii}-L-gl utam! nsav gadolinium komplexe (1:3 arányú) nátriumsója [lásd: (XXII) képletö vegyület]

A) [3^(S),5p,7a_}12a]-3-([44blsz[2-(bisz(2-(1,1-dtmetnet0xí>“2«öx0etíí]~ammoj«etil]-ammo]-5“(1_í1~dime~ íNetoxil-ljS-dioxopentill-aminoJ-T^X-dibidroxikölán^Aoe-sav-fenihmetli-észter g (50 mmol) mennyiségű Nl_sN-felsz(2-[bisz(2-<1,1 -dimetil· etoxi}~2~oxoefii]-amíno]-ehl]~L-glutaminsav-1-(1,1 -dimetli-etil)-észtert [Anelll, P..L. és munkatársai: Bioconjugate Chem., 1Ö, 137 (1999.)h 30 g (55 mmol) (3β,5β,7α, 12a)-3-amino-7,12-dihldrox.ikolán-24-oe-sav-fenil-metil-észteri (Anells, P.L.,

Lattuada. L, Uggerí, F.: Synth. Comm,, 28, 109 (1998.)] és

9,5 g (55 mmol, 9,2 mi) mennyiségű dietil-cianofoszfonátot (kereskedelmi forgalomban kapható termék) 750 mi DMF-ban feloldunk. A keletkező oldatot 0 °C hőmérsékletre hűljük, és cseppenként 7,3 ml .Et_sN-t adunk hozzá. 1 éra múlva az oldatot szobahőmérsékleten csökkentett nyomáson bepároljuk, a maradékot 300 mi EtOAc-ban feloldjuk, 2x200 ml 5 %-os vizes NaHCOs-ial, majd 2x200 ml sóoldattaí mossuk. A szerves fázist elválasztjuk, NsjSO^-on szárítjuk, majd csökkentett nyomáson bepároljuk. A nyers anyagot fíash-kromatográfiás eljárással tisztítjuk, így 36 g mennyiségű kívánt terméket kapunk (29 mmol).

Hozam: 58 %.

K.F; 0,98 %.

4 7 7 7 -402 3- Μ ΟI / K m O

Elemek szerinti analízis:

C H számított %: 65,64 9,21 talált %: 66,31 9,20

N

4,57

4,51

TLC: Álló fázis: szilikagél lap 60F 254, Merck

Eluens: 2:6 arányú EtOAe/n-bexán K_f-0,3,

Detektálás: AcOH/koncentrált H₂SO4/p-ánlzsaídehid=100:2:1, Az 'H-NMR, a ⁿC-NMR, az IR és az MS spektrumok a jelzett szerkezettel összhangban vannak.

-oxoeíi J|-am jno]-etíl]-amlno3-5-(1,1-dímetí letoxt)-1»5-di« oxopentil]-amSRo]“7_s12-dihidfOxi1cotán-24«oe“SaV't?'ieti!-ammóniumsó

3,6 g mennyiségű 5 %-os Pd/C-ot adunk 36 g (29,4 mmol) mennyiségű A) lépésben előállított vegyület 1,5 liter EíöH-ban képzett oldatához, és a szuszpenziót 3 óráig hldrogéngáz atmoszférában szobahőmérsékleten keverjük. Szűrés (Mililpore® szűrő FT 0,45 pm) után az oldatot csökkentett nyomáson bepároljuk. A nyers anyagot flash-kromatográfíás eljárással tisztítjuk, így 22 g mennyiségű kívánt terméket kapunk (18 mmoí}. Hozam: 60 %. Olvadáspont: 58 °C.

K.F. 1,34 %.

Elemek szerinti analízis:

C Η N számított %; 65,07 9,86 5,66 talált %·; 64,34 10,07 5,48

TLC: Álló fázis: szilikagél lap 60F 254, Merck

Eluens: 1:5:95 arányú Et₃N/MeOH/CH₂CI₂ R_f=0„33.

S4777-4023-yOh'KmO # > A «

Detektálás: AcOH/koneenírált HsSO^/p-ánizsaldehrd^lOO^: 1.

Az 'H-NMR, a ’X-NMR, az ÍR és az MS spektrumok a jelzett szerkezettel összhangban vannak.

C) N²-'BIszf2-[felez(karhoximetíl)-amlne|-eti1]-'N~

-[(3P,5p,7a,12a)-7_>12-djhSdroxi-24-oxo-24-[(2-szulfoetith ~ a m i η o ] - k ο I á n - 3 - i t ] - L ~ g I u t a m i n

Cseppenként 0 ’C hőmérsékleten nitrogéngáz alatt 1,2 g (12. mmol, 1,7 mljmennyíségű Et₃N~t adunk 12,5 g (11 mmol) mennyiségű B) lépésben előállított vegyűlet, 1,5 g (12 mmol) mennyiségű 2-aminoeíán-szulíonsav és 2,1 g (12 mmol, 2 mi) mennyiségű diefil-oianofoszfonát 400 ml DMF-ban képzett oldatához. 20 perc múlva a reakeióelegyet szobahőmérsékletre engedjük melegedni, és 3 óráig keverjük. Az oldatot csökkentett nyomáson bepároljuk, a maradékot 250 ml dioxánban feloldjuk és cseppenként 250 ml (125 mmol) 0,.5 M vizes H₂SO<«-at adunk hozzá. A keletkező elegyet 90 °C hőmérsékleten 2 óráig melegítjük. Az oldat kémhatását 2 N NaÖH alkalmazásával pH = 1,4-röl 7-re állítjuk, és az oldószert csökkentett nyomáson bepároljuk. A nyers anyagot flash-kromatográfíás eljárással tisztítjuk. A terméket 250 mi f-hO-ben és 12,5 ml 2 N HCI-ban feloldjuk, és Amberlite® XAD-16.0Ö gyanta oszlopon való elucíóval, CHsCN - H₂ö gradiens alkalmazásával sótalanrtjuk, így

1,5 g mennyiségű kívánt terméket kapunk (1,6 mmoi).

Hozam: 14 % Olvadáspont: >200 °C.

K.F.: 5,87 %.

94777-4023-MOI/KmO «Φ

Elemek szerinti analízis:

	C	H	N S
számított %:	53,66	7,44	7,28 3,33
talált %:	50.34	7,71	8,84 2,99
Az 1 H-NMR, a	*3c-nmr	az	R és az MS spektrumok a jelzett

szerkezettel összhangban vannak.

ö) N^z~foíSz[2-(bisz(karboxlmetil)-amíno]-etil3-N-[f3P,5p_i7a,12a)~7,12“dfbJdroxi-24«oxo«24-'[(2>szuffoeíí0-amínoJ-kolán-S-in-L-gtutamfn gadolínium komplexe (1:3 arányú) náíriumsója

880 mg (0,915 mmol) mennyiségű C) lépésben előállított terméket 50 ml H₂ö~ben feloldunk, és eseppenként 1 N NaÖB-ot adunk hozzá, amíg a kémhatás pB=6,8 lesz. 185 g (0,46 mmol) mennyiségű GdsOs-ot adunk hozzá, és a keletkező szuszpenzíót 50 °C hőmérsékleten 8 óráig melegítjük. A reakcióelegyet Mitlipore® készüléken (HA 0,45 pró szűrő) szűrjük, és a szűrletet Oowex® OCR 3LB gyenge katíoncserélő gyanta oszlopra (Ma* forma, 20 ml) töltjük. Az eluátumot csökkentett nyomáson hepároljuk és szárítjuk, Igy 1,00 g mennyiségű kívánt terméket kapunk (0,75 mmol).

Hozam: 82 %. Olvadáspont: >250 °C,

K.F.: 13,95 %..

HPLC-vízsgálat: 100 % (terület %),

Átló fázis: Líchrosphsr 100 RP-8 5 pm;

250 x 4 mm Merck KGaA;

et:

S477?-4Q23-MQI/KmO

Mozgó fázis: Izokraíikus eíueló előkevert mozgó fázissal:

g n-oktllamint adunk 300 ml aceíonitrll és 700 ml H₂ö elegyéhez Az oldatot pH~6-ra puíferoíjuk HsPCC-vaí.

Áramlási sebesség: 1 ml/perc

Detektálás (UV): 200 nm;

Elemek szerinti analízis:

	C Η M	S	Gd	Na
számított %	; 43,78 5,54 5,92	2,71	13,30	5,83
talált %;	36,82 6,04 5,11	2,18	10,64	5,35
Az IR és az	MS spektrumok a jelzet	szerkezettel	összhangban

vannak.

Azonos módon az N^a-bisz[2-{blsz(karboxlmetíl)-amlno]-etll]-N-[(3^,5j51-2:4~oxo-24-«2-szutfoeth>-amino]-kolán-3-U]-L-giutamin gadollnium komplexét állítjuk elő.

17, példa [3a (S }, 5β1«3 - [2 4(5 ~ [bi sz [ 2 - [b i sz( ka rb ox s me ti l) ~ am s n e] -@tH]~ammeI»S-karboxtpenfHÍ~amm0l~2~ox0etöxi]-köián-24-oe-sav gadelimum komplexe (1:3 arányú) nátriumsója [lásd: (XXlil) képletű vegyölet]

A) 3a_?5^)-3-(Karboxlmetoxl)-kofán«24-oe«sav»metiS-észter

16,8 g (56/3 mmol) mennyiségű benzll-gllkölét-lriflátot [Williams, N. A.; Rapoport, H. 4. örg. Chem,, 59, 3616 (1994.)] adunk 15 perc alatt 20 g (51,2 mmol) mennyiségű (3a₍5p)~3~hidro:xlkolán-24-oe-sav-m8til-észter (Daysl, 8. és munkatársai: Steroíds, 37, 239 (1981,)] és 10 ml (57,4 mmol) N,N-diizopropií-etliamin 400 ml vízmentes CH₃CN~ban -20 ’C hőmérsékleten

94777-4023-MOPXmO >í£SP» « 09 kevert oldatához. 4 őrá múlva -28 *C hőmérsékleten az elegyet szobahőmérsékletre melegítjük, és további 4 óráig keverjük. Áz oldószert bepároljuk, és a maradékot 300 mi EtOAc és 300 ml telített NaHCO₃ között elválasztjuk. A szerves fázist Na₂SÖ4~on szárítjuk és bepároljuk. A maradékot 200 ml EtOH-ban feloldjuk, majd 3 g mennyiségű 5 %-os Pd/C-ot adunk hozzá, és az elegyet szobahőmérsékleten 5 éráig nitrogéngáz atmoszférában keverjük. Millipore® szűrőn (PH 0,45 pm) szűrés után az oldatot bepereljük, és a maradékot flash-kromatográfiás eljárással tisztítjuk, így 14,2 g mennyiségű kívánt terméket kapunk (31,7 mmol).

Hozam; 82 %.

K.F: <0,1 %.

Elemek szerinti analízis:

C H számított %: 72,28 9,83 talált %: 71,97 9,81

Az a ^t3C-NMR, az ÍR és az M8 spektrumok a jelzett szerkezettel összhangban vannak.

B) [3a(S}_íSpl-3-[2-t[5“[bísz[2“[bísz(karboximeth)“ammo]~etN!-ami no-ammoJ-S-karboxi pentil]-ami no j~2-exöeföxi|~

-kólán-24-oe-sav

18,56 g (25 mmol) mennyiségű N\N²-feisz[2-(bisz[2-(1,1-dímetiletoxi)“2~oxoetl!j-aminoj-efílj-L-lizin~(1,1-dlmetiietiO-észtert [Anelli, P.L. és munkatársai: Bioconjugate Chem., TG, 137 (1999.)}, 11,2 g (25 mmol) mennyiségű A) lépésben előállított vegyületet és 4,9 g (28 mmol) mennyiségű dietíi-cisnoíoszfonátot 300 ml DMF-ban feloldunk. A keletkező olda9477?-4Ö23-MO!/KmO

J» tót 0 ’C hőmérsékletre hűljük és oseppenként 4 ml £t₃N~f adunk hozzá. 6 óra múlva szobahőmérsékleten az oldatot csökkentett nyomáson bepároljuk, a maradékot 258 ml EtOAc-ban feloldjuk, 2x100 ml 5 %-os vizes NaHCÜs-tat, majd 2x180 ml sóoldattal mossuk. A szerves fázist elválasztjuk, Na₂SÖ4-on szárítjuk, majd csökkentett nyomáson bepároljük. A maradékot 308 ml díoxánban feloldjuk és cseppenkénf 300 ml (150 mmol) 0,5 M vizes HsSCh-at adunk hozzá. A keletkező eiegyet 90 °C hőmérsékleten 2 óráig melegítjük. Az oldat kémhatását 2 N NaOH-dal pH~'7-re állítjuk, és az oldószert csökkentett nyomáson bepároljuk. A nyers anyagot flash-kromatográfrás eljárással tisztítjuk. A terméket 300 ml HbQ-ben és 30 mi 2 N HCi-ban feloldjuk és Amberiíte® XAD-16.80 gyanta oszlopon C.H₃CN - H₂O gradiens alkalmazásával való elúcíóval sótalanítjuk, így 9,03 g mennyiségű kívánt terméket kapunk (10,25 mmol).

Hozam: 41 %.

K.F,: 2,78 %.

Elemek szerinti analízis:

8,24 6,38

3,28 8,14 számított %: 59,98 talált %: 58,11

Az 'H-NMR, a ^?3C-NM.R, az IR és az MS spektrumok a jelzett szerkezettel összhangban vannak.

94777-4023-MOi/KmO

C) [3 α (S ), 5 β j - 3 - [ 2 - [[5 - [bi s z [2 - [b I s z (k a rb ο x i m ©ti I) - a m i n © ] -síi}]-amlno]-5-karboxipentiípara5noJ-2-oxo©íoxij-koJáR-24-oe-sav gadoíínium-kompíexe (1:3 arányú) nátriumsója g (5,67 mmol) mennyiségű B) lépésben előállított terméket 200 ml vízben feloldunk 1 N-os NaGH hozzáadásával, amíg pH~8,S kémhatást érünk el· 1,03 g (2,84 mmol) mennyiségű GdsÖs-ot adunk hozzá, és a keletkező szuszpenziót 50 °C hőmérsékleten 8 óráig melegítjük. A reakolóelegyet Mi Ili poré® készüléken szűrjük (HA 0,45 pm szűrd), a szürletet csökkentett nyomáson bepároijuk és szárítjuk, így 5,74 g mennyiségű kívánt terméket kapunk (5,21 mmol).

Hozam: 92 %, olvadáspont: >250 ’C.

K.F.: 5,81 %.

Elemek szerinti analízis:

számított %:	C 47,99	H 8,04	N 5,09	Gd 14,28	Na 6,26
talált %:	45,09	8,15	4,77	13,39	5,81

Az ÍR és az MS spektrumok a jelzett szerkezettel összhangban vannak

Azonos módon a 15. példa A) lépése szerinti vegyület kiindulási anyagként! felhasználásával (3a(S),5pJ-3-f2-((5-((2~íbi5z(karboxirnetií)“aminöj-eíül~{karboximeti!}~aminö)~5~karböxipenlil]~amino}~2~oxoeíoxij~kolán~24»oe-sav gadolínium- komplexét állítjuk elő.

Azonos módon, a 15. példa A) lépése szerinti vegyület és (3 β, 5 β, 7 α, 12 α) - 3 -((3 - ka r b οχ i -1 - οχ opr ο ρ 11) - a m i η o) - 7,12 ~d I h i dr οχ I kölán-24-oe-sav-metil-észter (amelyet a WO-A-95/32741 nem34777-4023-MOi/KmO

- 83 * «ί *ΦΦ φ φ * ΦΑ **** * *Φφφ Φ « φ *' ♦·» * ·Α* * >ί» zetközí közzétételi számú szabadalmi bejelentés 12. példájában ismertetett eljárással állítunk elő) kiindulási anyagokként! felhasználásával [3p{3).,öp._í7<x_>.12<z}-'3-[[4-[í6-|[2~[bisz(karboximotíl)-amino)-eti I ]-(karboxi metil )~aminöj-5~karboxipent I Ij-ami no]-1 ,4-0ίοκο-Ι>υ11ί]-8Γηίηο]ί-7₅12-€ίΐΚΙ0Γθχ.ΐ-ΚοΙίη-24-οβ-δ8ν gadolíníüm-komplexét állítjuk elő.

18. példa

A relaxációs sebesség (Δ1/Τ0 mérése

A találmány szerinti vegyületek véredény-szerekkénti hatékonyságát a longitudinális relaxációs sebesség (1/T_{) változásának az adagolás után eltelt Idő függvényében való ábrázolásával értékeljük. A vérminták előre meghatározott időpontokban gyűjtött proton relaxációs sebességét (1/T4 39 ’C hőmérsékleten mérjük Brucker Minlspec PCI20 műszer segítségével, Inverzió visszaállítás három paraméteres szekvencia alkalmazása v a I.

Az 1. példában előállított vegyületet, a [3β(8),δβ1-3-[{4-[blsz[2-tb!Sz(karboxlmetü)-aminoj~et!Íj-amin-4-karboxi-1-oxobu111 i ] - a m i η o} - k ο 1 én - 2 4 - o a - s a v g a d ο 1 ί η I u m - k o m ρ I e x e 1 - d e zox i -1 ~(met!i-amino)-Ö-glucltoiSal képzett (1:3 arányú) sóját adagoljuk nyúlnak 0,1 mmol/kg dózisban. Az 1. ábra szerinti diagram a relaxációs sebesség profilját mutatja be.

A WO 95/32741 nemzetközi közzétételi számú szabadalmi bejelentés 9. példájában előállított vegyületet, a (3p,5g_;7a,12a)-3'-[[N~[N42-([2-jbisz(karboximetil)~aminoj-etílj-(karboximetil)-amino]“etll]~N~(karboxímetil)~g|iclij-gllcín-aminQj-7,12-d!hidroxi-kolán~24-oe-sav gadoHnium-komplexe 1 -dezoxí-1-(metil-aminO)-O-gluoltollal képzett (1:2 arányú) sóját ada94777-4Ö23-MOi/KmO »-Χ ‘V * 4 4 •

* * » fc* χ Λ&

góljuk nyúlnak 0,1 mmol/kg dózisban. A 2. ábra szerinti diagram a relaxációs sebesség profilját mutatja be.

A WO-A-95/32741 nemzetközi közzétételi számú szabadalmi bejelentés 15. példájában előállított vegyűlet, a [SpCSI.SpJa, 12a]~3~n4-(bisz|2-[blsz(karboximetil)-amínoj-etilj-amlnö]-4-karboxi~1 ~öxöbutil]~amlnoj-7,i 2-díhidroxi~kolán-24oe-sav gadolírnom komplexe 1-dezoxi~1-(metil-amino)-D-gíucltoilal képzett (1:3 arányú) sóját adagoljuk nyúlnak 0,1 mmol/kg dózisban. A 3. ábra szerinti diagram a relaxációs sebesség profilját mutatja be.

A 4. példa szerint előállított vegyűlet, a Π3β(3Ο),5β,12α]-3-n4-[blsz(2-[bisz(karboxímetíl)~amlno[-etllj-aminoj-4~karboxi-1-oxobufilj-amlnoj-12-bldroxlkolán-24-oe-sav gadolínium komplexe 1 -dezoxi-1 -(metd-amínoj-D-glucítollaS képzett (1:3 arányú) sóját adagoljuk majomnak 0,05 mmol/kg dózisban. A 4. ábra szerinti diagram a relaxációs sebesség profilja.

13. példa (33(S)_}5p_s12aj~3“([4-[bisz[2-(bisz(karboximefíl)-amínol-etll]»amino]-4-karbox1-1-oxobutil]-amlnol“12-hidroxikolán-24-oe-sav gadolíníum-komplexe 1 -dezoxi-1 -(metií-amino)-D-gíucitolial képzett (1:3 arányú) sójából előállított ö_f3 M-os gyógyászati készítmény (3p(S),5p,12aj-3-n4-(bisz[2-(brsz(karboximetil)-aminöj~etílj“amínö]-4-karboxi~1~öxobutllj-aminoj-12-hidroxikölán-24-öe-sav gadolínium komplexe 1-dezoxl-1 ~(metíl-amino)~D~glecííollal képzett (1:3 arányú) sója 31,775 kg mennyiségét (amelyet a 4. példában ismertetett eljárással állítunk elő) és 100 g mennyiségű trometamol-hldroklorídot 100 liter steril vízben szobahőmérS4T77-4ö23-MOt/kmO *

«·

* fcfc «

* * V fc sékleten gyógyszerészeti rozsdamentes acél reaktorban feloldunk. Feloldás után az oldat pH-ját 1 M-os trometamol hozzáadásával 7,4-re állítjuk. Az oldatot 0,22 mm átmérőjű szűrőkön keresztül sterll-szűrjük és 20 ml űrtartalma ampullákba osztjuk, amelyeket haíobuöl-dugókkal zárunk, alumínium gyűrűvel lezárunk, és Fo~18 értéken göz-sieriltzáíunk. A HPLC elemzés 0,.294 M koncentrációt mutat.

20, példa

Előre feltöltött, a 19. példa szerinti készítményt tartalmazó műanyag fecskendők

A 19. példa szerint előállított oldat 20 ml részleteit CZműanyag fecskendőbe töltjük, amely vége burkolattal lezárt. A dugattyút vákuumban beillesztjük, és az elotöltöít fecskendőt aeíoklávban sterilizáljuk Fo=í8 értékre,

94777-4023- Μ 01 / k m G

ÍQ8

Két-háromvegyértékű paramágneses fémionok, ezen belül

Fe^;2+;, Fe'**¹, ionok íl) általános

Cr •'³⁺\ Cd^{3+

Eu^n<A Dy ^; vao' ín (2 + ) lelő vegyületekkel képzett kelét k lexei, kompatibilis szerves bázisokkal, ezen belül primer, szekunder, tercier aminokkal vagy bázikus aminosavakkal vagy olyan szervetlen bázisokkal, amelyek kationja nátrium, kálium, magnézium vagy kalcium képzett sói vagy ezek elegyei,

X-L-Y (I), ahol továbbá azok fízlolóolai

X jelentése poliamínokarbonsav ligandum vagy annak származékai maradéka, ezen belül etiléndiamlno-tetraecetsav (EDTA), díetiiénfríamíno-pentaecetsav (DTPA), 1,4,7,1 G-tetraaza-cik lobod okán-1,4,7, íO-tetraecetsav (DOTA), 1,4,7,18-tetraaza-ciklododekán-l ,4,7-triecetsav (DO3A), (1G-(2~hídroxl-propíl)~ -1,4,7,1 Ö~fetraaza-oíkiödodekán~l,4,7-tríecetsav (HPDOsA), 4~karboxí-5,8,1 T-trí sz( karboxi m etil) 1-fenil-2-oxa-S, 8,11-triaza-trid e k á η -1 3 - 0 e - s a ν (Β Ο Ρ T A);

Y jelentése epesav-származék, ezen belül az (l/B) ábra szerinti képletű kolinsav, kenodezoxi-kolinsav, dezoxi-kolinsav, urzodezoxi-kolinsav vagy Iitokolinsav maradéka, mind annak eredeti formájában, mind a hidroxilcsoportot reaktív csoportként tartalmazó pozíciókban funkciós csoporttal ellátva, függetlenül a végtermékek sztereokémiájától; amely származék a savcsoport konjugátumát is tartalmazza a 24, pozícióban taurinnai és ölicinnel;

ί _Wrx^Yb

H

OH . COOH . COOH «χ COOH

OH Y ί ι

ΗΟ '^{Κ χ}-'Ί''···' ΟΗ ϊοτ

HO

OH

Konnsav .kenodezoxkkölnsav dezöxiköiínsav

		, COOi	i
Z'Y. 1	Y^X. .«· x		k 1
Y <K			..•‘‘x5 γΎ. Ύ η
Cx,,px.., A ,	>K		Ηγ'Υ..··γ.γ:

ürzodezoxHkoiinsav

Claims (15)

1. L jelentése az X bármely pozíciójában csatlakozó, a (H) általános képletű lánc, amely adott esetben egy karboxiicsoportot tartalmaz, amely ezáltal egy amlócsoporttá alakul, és a 3., 7. és 12. pozíciókban Y-hoz csatlakozó lánc, un, amelyben m értéke 1-10 közötti egész szám, amelyben az 1 feletti értékekre A különböző jelentésű tehet,

   A a (Hl) általános képleté csoport,

   GL i mn.

   n és q értéke lehet ö vagy 1, de értékük nem lehet egyidejűleg 0; p értéke Ö-1Ö,

   Z jelentése oxigénatom vagy -NR.-csoport, amelyben

   R helyettesítő jelentése hidrogénatom vagy 1-5 szénatomos, heíyettesitetlen vagy egy -CÖÖH-esopörtfal helyettesített alkilcsoport, alkalmazása diagnosztikám készítmények előállítására az emberi és állati test vérkeringés! rendszeréről, mágneses magrezonancia alkalmazásával történő képalkotásra,
2. 2. Az 1, igénypont szerinti alkalmazás, amelyben a paramágneses ionok gadohmum- vagy mangán-ionok,
3. 3. Az 1, Igénypont szerinti alkalmazás, amelyben az L helykitöltő láncok (Illa) és (illb) képiéinek.

   ,COOH

   CH., : V2-S
4. 4- CHj _x N inihy

   4. Az 1, Igénypont szerinti alkalmazás, amelyben Z jelentése oxigénatom és L ezáltal a 3, 7, és 12, pozíciókban jelen lévő hídroxilcsoportokon keresztül képződik, függetlenül a végtermékek s z te r e o kémiáját ói,
5. 5. Áz 1. igénypont szerinti alkalmazás, amelyben

   X maradék jelentése EDTA, DTPA. ÖOTA, DC-Á. BOPTA;

   L jelentése (Illa) vagy (Illb) általános képletű csoport;

   Αχ0-5

   ..J ro ,οοοη

   O

   Y jelentése kolinsav-, dezoxíkoíínsav, kenodezoxíkoíínsav- vagy Htokoíinsav-maradék, eredeti formájában vagy amelyben egy vagy több hidroxílcsoport ketoesoportfá van alakítva, amely L-hez a 3. pozícióban egy aminocsoport segítségével kapcsolódik, a 24, pozícióban a savcsoport annak eredeti formájában vagy annak taorin vagy glieínszármazéka formájában jelen;

   a paramágneses ionok gaöoíínium- vagy mangán-ionok és a szerves bázisok jelentése etanoíamin, dietanolamin, morfolin, glükamin, N-metlI-glükamln vagy N-N-dimetii-gíükamin.

   8. Az 1. Igénypont szerinti alkalmazás, amelyben az (!) általános képlet szerinti vegyületekben

   X maradék jelentése DTFÁ annak központi láncán helyettesítve, (IV) általános képlet szerinti vegyületeket eredményezve

   HOOC -χ χ-' COOH

   V .Jp

   HOOC —X i ^V~COOK

   V x W, rX ' t V amelyben

   Rí helyettesítő jelentése hidrogénatom vagy COOH csoport,

   V jelentése kolínsav, dezoxí-koíinsav, kenodezoxi-koiinsav vagy i 11 o - k ο I i n s a v -maradék é s L (Hí) általános képlet szerinti szerkezetű.

   * φφφ « * * * A * * X * «*»ν «*♦ ·«« ** *
6. 7, A δ. igénypont szerinti alkalmazás, ahol a (IV) általános képletű vegyületekben Rí helyettesítő jelentése COOH-csoport, (IVa.) általános képletű vegyületeket eredményezve hooc.....\ k

   /---COOH x

   k-COOH (lVa\

   ΗΟΟΟ ahol Y jelentése kollnsav, dezoxi-kolinsav, kenodezoxi-kolinsav vagy lito-kolinsav maradék és L (illa) vagy (Hib) szerkezetű csoport.

   .CÖOH

   Π o
7. 8. A 7, igénypont szerinti alkalmazás, amelyben a (IVa) általános képletű vegyűietek a kővetkezők:

   (3p(S),őp}-3-f(4-[blsz-[2-jbisz(karboximetil)-amino}“etHi~amino)~4-karb ο x i -1 - ο χ o - b u t i 11- (k a r b ο x i m e 111) -a m I η o k olá n - 2 4 - o e - sav; [3fj(S)_í5pl-3-[[4-(bÍsz-[2~(bisz(karboximetii)-aminol-etii]~aminO]-4-kar~ b ο x i -1 - ο χ o - b u 1111 - a m i nőj- k o Ián- 24 - o e ~ s a v;

   (3p(S),5p)-3-([4-[bisz-[2-[bisz(karboximetH)-ammo)“etil)-aminOp4-karboxi-1 -öxo-büW}-amíno}-12~öxokolán~24-oe~sav; (3p(S),5p_!7öl~3-((4-[bisz-{2(bí5z(karboxfmetil)-amIno]-eíH]:~amíno]”4~karhoxi~1 ~oxo-bút ll}~a min ol-7-hidroxi kólán ~24-oe--s a v; IM^z-bisz(2-(bisz(karboximetil)~amino)-eüibN~((3^,5 β)~24-οχο-24-((2~szuifoetH)-aminö)-koián-3-Uj-t-g1utamín;

   N:^z-bisz[2~{bisz(karboxlmetii)~amlnoj-etiÍbN-((3p_:5p_;7a, 12a)~7,12- d i h i d r ο x j ~ 2 4 - ο χ o - 2 4 - {{2 ~ s z u I ί o e 1 i I) -a min o.] - k ο 1 á n - 3 - i I) L—g I u t a m i n:

   ♦ * β φ φ φ* * »

   Φ φ χφ Φ

   ΧΦΦ « φ φ φ φ φ

   Φ φ«« ΦΦ X XX [3p(S)₁5p,7pp3-[[4~(feisz-[2-[fe'isz(kafboxtmetü)~am!no|-etH]-ammo]~4-karboxi-1-oxo-butííl-amino|-7“hidroxíkotán-24-oe-sav: [3P(R)^,12a]~3~([4-{hisz-[2-{bisz{karboximetH}-arnmoj~etHI~ammo]-4~ - karboxi-1 - oxo-butil)-aminoj-12-hldroxikolán~24-oe-sav:

   [33(178),53,12aj-3-([4-[blsz-[2~[bisz(karbOximetll)-amlno}-etin-aminol-4-karboxi-1 -oxo-buíin-amino) -12-hidroxíkoíán-24-oe-sav; [3β(Η3),5β,7α, 12a]~3~H4-[blsz-[2~[biszf karboxi metil)-a mi noj-etil]~ami)-4-karboxi~1 -oxo-bidill-aminol-7,12-dihidroxikolán-24-oe~sav;

   1),53,7 a, 12a)~3~[[4-(bisz-(2-[bisz(karboximetll)-amino)-etil]-amino]-4~karboxi-1-oxo-butilj-amino]-7,12-dihldroxikoián-24-oe~sav; [3a(S), 53]-3-[f4~{bisz[24b isz(karboximetil)-amino)-etÍll-amino]-4-karboxi-1-oxo~butüj -amlnoH-koián-24-oe-sav.

   [3β(3),5β, 12a)-3-[[4~(b isz~[2~[bisz(karboxi metil )-a min o]-etil]-am in o]--4-karboxi-1 -oxo~b úti Ij-amino]-12-dihidroxi kóla η-24-oe-sav;

   [3α(8),5β, 12a}-3-[[4-(bisz-[2-(bisz(karboximetil)-aminoj-etil]~amino|-4-karboxi-1 -oxo-hutil]~am in o)-12-hidroxikolán-24-oe-sav.
8. 9. A 6, igénypont szerinti alkalmazás, amelyekben a (IV) általános képletü vegyöletben R1 hidrogén, (IVa) általános képletü vegyüíeteket e r e d mén y e z v e aooc—\ nooc· •COOH CCa.íK fíVb),

   Ν' ahol Y jelentése kőim-, dezoxi-kohn-, kenodezoxi-kolin- \ lito-kolinsav-maradék és L a (illa) képlet szerinti szerkezetű.

   CR.

   Í0-5

   ΠΠ&), ,ί'-ί.·' w'-'“ χχ »999 * *»♦·* itt* ,,.···' :· .ν».»».'· * * * ** » * ^χ ♦ όχ * * ♦ « * ♦ « « « »»·* * <** ««« ΐφ 8τ
9. 10, Α 9. igénypont szerinti alkalmazás, ahol a (IVb) általános képletü vegyületek a következők;

   (3β,5β,7α, 1 2a)~3~(nb!sz[2-(bísz(karboxrmetli}-amino]“et1l]--aminö}~ a c e íi I} ~ a m i η o ] ~ 7,12 - d I h 1d r ο χ I k ο I á n ~ 2 4 - o e - s a v (3p,5^)-3-j((((bisz(2~jblsz(karbeximetil)-amínoj-etll]-aminopacetltj~

   -ammo]-aceíHj-amino]-Roíán-24-oe-sav;

   (3β,5β,7α, 12a)~3~n[t[biszj2-[blsz(karboximebi)~aminöJ~eíilj-aminö)~acetilj~aminol-acetllj-aminoj-7,12--dihrdroxi-kolán-24-oe-sav; (3^,5^,7a₎t2a)-3-((6-[((bisz[2-[btsz(kart30ximetH)-am{nol-etH]-amíno]-acefil]-amino]~1~oxohexdj-amlno]-7,12~dihidroxlkölán~24~oe~sav.
10. 11, Az 1. igénypont szerinti alkalmazás, ahol az (I) általános képletben X maradék jelentése D7PA, (V) általános képletü vegyületeket eredményezve . ·····. ...-'χ . N

    HOOC U

    HOOC .·· - V

    OOOH

    Y jelentése kolin-, lito-kolinsav-maradék és L dezoxl-kolin-, kenödezoxi-kolina (Illa) képlet szerinti szerkezetű.

    vagy 'í

    H ]Ö-S

    CMJ o

    ra
11. 12. A 11. igénypont szerinti alkalmazás, ahol a (V) általános képletü vegyület a következő.· «* ·>Φ*Χ < «Χ*Φ » * « $·♦ χ >

    » #Χ» * * * « « * > « *

    99» **« ♦ » X b'0'Xirnetjl>-amÍno]~etlI}-N-(karboximeíiI)'~gíicil}-gHcUj-amfnop7,12~ -dlhidroxi-kolán-24-oe-sav;

    1 8-[[(3β,5β,7α, 12a)-23-ka.rboxi-7_> 12-hidroxi~24-norkoián-3-ilj-amino)~3,6,9-trisz<karboximetil)-11., 13~dioxo-3,8,9,12-teíraaza~ -oktadekánsav.
12. 13. Az 1. igénypont szerinti alkalmazás, ahol az (I) általános képletű vegyületekben X maradék jelentése DO3A, (VI) általános képletű vegyületeket eredményezve

    Hoo<y^_N Vő í i í !

    ' Xi X

    HOOCO../ v ί y ’CÖOH ahol Y jelentése kolín-, dezoxi-kolin-, kenodezoxi-kolín- vagy lifo-kolmsav-maradék és L a (Illa) vagy (lllb) képletek szerinti csoport.

    ..COOl·;

    'jö-S CH, 'X.

    CH., ,.n ro
13. 14.

    képletű

    Az 1. igénypont szerinti alkalmazás vegyületekben X maradék jelentése ahol az (1) általános EDTA, (VII) általános

    HOOC

    HOOC ezve

    .. COOl·!

    eooH * '♦ «»«« ♦*»

    X «

    * * « ♦ ♦ * * fe ahol Y jelentése kolin~, dezoxi-kolin-, kenodezoxi-kolin- vagy lito-koHnsav-maradék és L a (III) képlet szerinti szerkezetű.
14. 15. A 14. igénypont szerinti alkalmazás, ahol a (VII) általános képietö vegyület a kővetkező:

    {3a(S)'_>5^_!12a}-3-n.[[5-^:{[2~[bisz(karboxlm;etil)-arninoJ-etilj-<karboximetil)8mmoj~5~kafboxipentHj-aminö]~karbönii]-öxQ-12- hidroxtkolán-24oe-sav;

    [3β(8),5β,7α, 12ö.)-3-[(4~{[5-([2-[bisz(karboximetll)~amlno]-etHj-(karb o xi m et i I) - a m I no}-5-kafboxípentil]~ammöj-1,4-dioxobutir]~amino]~7,12~ -dihidroxikolán-24-oe-sav;

    [3p(S),5P)-3-[2~{[5~n2[bísz(karböximeth)-aminö}~etil]-(karboximetil) -aminOj~5-karboxipentiij-aminoj-2-oxoetoxi]~kolán-24-oe-sav; [3β(3),58,12a)-3~(H~([2-f(bisz(karboximetlh-am inol~etii]~(karboxímetií)-amlno1-4-karboxi-1 -oxobutil]-amino)-12hidfoxi-kölán~24~oe~sav; [3p(S)_t5p)“3“[H“Í(2-[(bísz(karboximetii)~amino)-etiil-(karboximetH)-aminoj~4-karboxi~1 ~oxobotil]~amino)-12~oxokolán-24--oe-sav.

    18. Az 1, Igénypont szerinti alkalmazás, ahol az (I) általános képletű vegyület a következő:

    [3α{3),5β,7ο12a]-3-[{((5-[bisz(2-(blsz(karboxÍmetil)-a minő j-etii járni nőj -S-karboxipentilj-aminoj-karbonilj-oxi]-?, T2~dihidroxikoián~24-oe-sav: (3a(S),5p]-3-|2-{(5-[feisz[2~jbíSz(kaFboximefn)-amino]-etiljámÍno] ~5~ ~kafboxipentil)-amino}~2~oxoetoxn-koíán-24-oe-sav;

    [3p{S),5p,7ö12«j-3-[[4~[[5~[bíszf2~[bisz{karboxirnetU}-anrünoj~ -etiljaminoj ••5-karboxlpentin~amlno]'-1,4-díoxobutiljamíno]-7,12-dihidroxikölán~24~oe~sav;

    1 0 -(3 - {[ (3 o, 5 β, 7 α, 12 α} - 2 3 ~ k a r b ο x i~ 7,12 - d í h i d r ο x i - 24-norkofán-3-í'í]oxij~2~ hidroxi prop i l]~1,4,7,1 ö-tetraazaciklododekán-1,4,7~lriecetsav.

    *^ν * » ♦ *

    » % *

    ϋ* « ♦ * ν φ * * fi fi fififi fifi «
15. 17. Az 1-16. igénypontok bármelyike szerinti alkaímazás, amelyben a kelátkompíex sókat nátriummal és N-metiígiükaminnal képezzük.