CZ292825B6

CZ292825B6 - Deriváty indazolu, jejich použití, farmaceutické kompozice na jejich bázi a meziprodukty pro jejich výrobu

Info

Publication number: CZ292825B6
Application number: CZ19983492A
Authority: CZ
Inventors: Anthony Marfat
Original assignee: Pfizer Inc.
Priority date: 1996-05-03
Filing date: 1997-04-01
Publication date: 2003-12-17
Also published as: OA10904A; HN1997000046A; SK148298A3; NO312959B1; MY132499A; AP0102304A0; NO985095D0; AP1146A; HRP970227A2; EA199800882A1; AP2001002294A0; CA2252982A1; AR006906A1; ZA973804B; HK1019443A1; ID16856A; KR20000010751A; IL152083A0; IL126547A0; PE64598A1

Abstract

Deriváty indazolu vzorce I, kde R je alkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, -(CH.sub.2.n.).sub.n.n.-cykloalkyl se 3 až 7 C v cykloalkylu, kde n je 0 až 2, nebo aryl se 6 až 10 C, přičemž tento aryl je popřípadě substituován 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými z halogenu, OH, alkylu s 1 až 5 C, alkenylu se 2 až 5 C, alkoxylu s 1 až 5 C, trifluormethylu, nitro, skupiny CO.sub.2.n.R.sub.9.n., C(O)NR.sub.9.n.R.sub.10.n., NR.sub.9.n.R.sub.10.n. a SO.sub.2.n.NR.sub.9.n.R.sub.10.n.; R.sub.1.n. je alkyl s 1 až 4 C; R.sub.2.n. je skupina vzorce i R.sub.4.n. je H; R.sub.5.n. je R.sub.9.n., OR.sub.9.n., CH.sub.2.n.OR.sub.9.n., CN, C(O)R.sub.9.n., CO.sub.2.n.R.sub.9.n., C(O)NR.sub.9.n.R.sub.10.n. nebo NR.sub.9.n.R.sub.10.n.; nebo R.sub.4.n. a R.sub.5.n., brány dohromady, představují =O; a R.sub.9.n. a R.sub.10.n. je každý nezávisle H nebo alkyl s 1 až 4 C; a jejich farmaceuticky vhodné soli. Použití derivátů vzorce I pro výrobu léčiv pro léčení chorob, u nichž je indikována inhibice fosfodiesterázy (PDE) typu IV nebo inhibice produkce faktoru nekrózy nádorů (TNF). Farmaceutické kompozice na bázi derivátů a meziprodukty pro přípravu těchto derivátů.ŕ

Description

Oblast techniky

Vynález se týká substituovaných derivátů indazolu, které jsou selektivními inhibitory fosfodiesterázy (PDE) typu IV nebo produkce faktoru nekrosy nádorů (TNF) a jako takové jsou užitečné při léčbě astma, arthritis, bronchitis, chronické obstruktivní choroby dýchacích cest, psoriasis, alergické rhinitis, dermatitis a jiných zánětlivých chorob, jakož i AIDS, septického šoku a jiných chorob zahrnujících produkci TNF. Vynález se také týká použití těchto sloučenin pro výrobu léčiv pro léčení těchto chorob u savců, zejména lidí, a farmaceutických kompozic, které tyto sloučeniny obsahují. Vynález se také týká meziproduktů pro výrobu výše uvedených sloučenin.

Dosavadní stav techniky

Od té doby, co se zjistilo, že cyklický adenosinfosfát (AMP) je intracelulámím druhým mediátorem (E. W. Sutherland and T. W. Rall, Pharmacol Rev., 12, 265, 1960), se stala inhibice fosfodiesteráz cílem pro modulaci, a v důsledku toho pro terapeutickou intervenci u řady chorobných procesů. V pozdější době byly zjištěny určité třídy PDE (J. A. Beavo et al., TiPS, 11, 150, 1990) a jejich selektivní inhibice vedla ke zlepšené chemoterapii (C. D. Nicholson aM. S. Hahid, TiPS, 12, 19, 1991). Zejména se zjistilo, že inhibice PDE typu IV může vést k inhibicí uvolňování mediátoru zánětu (M. W. Verghese et al., J. Mol. Cell Cardiol., 12 (suppl. II) S 61, 1989) a relaxaci hladkého svalu dýchacích cest (T. J. Torphy, Directions for New Anti-Astma Drugs, ed. S. R. 0'Donnell a C. G. A. Persson, 1988, 37, Birkhauser-Verlag). Sloučeniny, které inhibují PDE typu IV, ale které mají špatnou účinnost proti jiným typům PDE, budou tedy inhibovat uvolňování mediátorů zánětů a vyvolávat relaxaci hladkého svalstva dýchacích cest bez toho, že by měly kardiovaskulární účinky nebo účinky proti krevním destičkám.

O TNF je známo, že se podílí na mnoha infekčních a autoimunitních chorobách (W. Friers, FEBS Letters, 285, 199, 1991). Dále se ukázalo, že TNF je hlavním mediátorem zánětlivé odpovědi pozorované při sepsi a septickém šoku (C. E. Spooner et al., Clinical Immunology and Immunopathology, 62 Sil, 1992).

Podstata vynálezu

Předmětem vynálezu jsou deriváty indazolu obecného vzorce I kde (I)

-1 CZ 292825 B6

R představuje alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, skupinu -fCřDn-cykloalkyl se 3 až 7 atomy uhlíku v cykloalkylové části, kde n představuje číslo 0 až 2, nebo arylskupinu se 6 až 10 atomy uhlíku, přičemž tato arylskupina je popřípadě substituována 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, hydroxyskupiny, alkylskupiny s 1 až 5 atomy uhlíku, alkenylskupiny se 2 až 5 atomy uhlíku, alkoxyskupiny s 1 až 5 atomy uhlíku, trifluormethylskupiny, nitroskupiny, skupiny CO2R9, C(O)NR₉Ri₀, NR9R10 a SO2NR9R1Q;

Ri představuje alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku;

R2 představuje skupinu obecného vzorce

R* R⁵

R4 představuje vodík;

R₅ představuje skupinu R₉, OR₉, CH₂OR₉, kyanoskupinu, C(O)R₉, CO₂R₉, C(O)NR₉Ri₀ nebo NR₉R₁₀;

nebo R4 a R₅, brány dohromady, představují skupinu =0; a

R₉ a R10 představuje každý nezávisle vodík nebo alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku;

a jejich farmaceuticky vhodné soli.

Do rozsahu derivátů indazolu obecného vzorce I spadají i některá výhodná provedení, z nichž je možno uvést zejména

- i) provedení, kde R představuje cyklohexylskupinu, cyklopentylskupinu, methylencyklo- propylskupinu, izopropylskupinu, fenylskupinu nebo 4-fluorfenylskupinu;

- ii) provedení i) kde Ri představuje alkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku;

- iii) provedení ii), kde Ri představuje ethylskupinu;

- iv) provedení ii), kde R₂ představuje skupinu obecného vzorce

R⁴ R⁵

- v) provedení, kde deriváty indazolu vzorce I jsou zvoleny ze souboru sestávajícího z l-(l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-yl)-4-oxocyklohexankarbonitrilu;

methylesteru trans-4-kyano-4-( l-cyklopentyl-3-ethyl-l H-indazol-6-yl)cyklohexankarboxylové kyseliny;

methylesteru cis-4-kyano-4-(l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-yl)cyklohexankarboxylové kyseliny;

l-(l-cyklohexyl-3-ethyl-lH-indazol-6-yl)-4-oxocyklohexankarbonitrilu;

methylesteru cis-4-kyano-4-(l-cyklohexyl-3-ethyl-lH-indazol-6-yl)cyklohexankarboxylové kyseliny;

methylesteru trans-4-kyano-4-( l-cyklohexyl-3-ethyl-l H-indazol-6-yl)cyklohexankarboxylové kyseliny;

cis-4-kyano-4-(l-cyklohexyl-3-ethyl-lH-indazol-6-yl)cyklohexankarboxylové kyseliny; trans-4-kyano-4-(l-cyklohexyl-3-ethyl-lH-indazol-6-yl)cyklohexankarboxylové kyseliny; l-(cyklohexyl-3-ethyl-lH-indazol-6-yl)cis—4-hydroxymethylcyklohexankarbonitrilu;

amidu cis-4-kyano-4-(l-(cyklohexyl-3-ethyl)-lH-indazol-6-yl)cyklohexankarboxylové kyseliny; a amidu trans-4-kyano-4-( l-(cyklohexyl-3-ethyl)-l H-indazol-6-yl)cyklohexankarboxylové kyseliny.

Předmětem vynálezu jsou dále také sloučeniny obecného vzorce XXXX

(XXXX) kde R, R], R₉ a R_]0 mají význam uvedený u obecného vzorce I a

X představuje brom, skupinu -C(O)O-alkyl s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylové části, -CH₂CN, karboxyskupinu, -CH₂OH nebo -C(O)H;

přičemž když R] představuje methylskupinu a X představuje brom, potom je R odlišný od fenylskupiny substituované v poloze para nitroskupinou nebo aminoskupinou a fenylskupiny substituované skupinou vzorce OCH₃ nebo COONa.

Ve výhodném provedení ve sloučeninách obecného vzorce XXXX R představuje cyklohexylskupinu, cyklopentylskupinu, methylencyklopropylskupinu, izopropylskupinu, fenylskupinu nebo 4-fluorfenylskupinu a Ri představuje ethylskupinu. X s výhodou představuje brom.

-3CZ 292825 B6

Předmětem vynálezu jsou dále také sloučeniny obecného vzorce XIX

kde R, Ri, R₉ a Ri₀ mají význam uvedený u obecného vzorce I,

Ve výhodném provedení ve sloučeninách obecného vzorce XIX R představuje cyklohexylskupinu, cyklopentylskupinu, methylencyklopropylskupinu, izopropylskupinu, fenylskupinu nebo 4-fluorfenylskupinu a Rj představuje ethylskupinu.

Pokud není uvedeno jinak, rozumí se pod pojmem halogen fluor, chlor, brom nebo jod. Přednostním halogenem je fluor, chlor a brom.

Pokud není uvedeno jinak, rozumí se pod pojmem „alkyl“, jak se ho používá v tomto textu, nasycený jednomocný uhlovodíkový zbytek s řetězcem přímým nebo rozvětveným.

Pokud není uvedeno jinak, rozumí se pod pojmem „alkoxy“, jak se ho používá v tomto textu, skupina vzorce O-alkyl, kde „alkyl“ má výše uvedený význam.

Pokud není uvedeno jinak, rozumí se pod pojmem „alkenyl“, jak se ho používá v tomto textu, nenasycený jednomocný uhlovodíkový zbytek s řetězcem přímým nebo rozvětveným obsahující jednu nebo více dvojných vazeb.

Pokud není uvedeno jinak, rozumí se pod pojmem „cykloalkyl“, jak se ho používá v tomto textu, nasycený jednovazný uhlovodíkový zbytek s cyklickým řetězcem, jako cyklobutyl, cyklopentyl nebo cykloheptyl.

Pokud není uvedeno jinak, rozumí se pod pojmem „aiyl“, jak se ho používá v tomto textu, organický zbytek odvozený od aromatického uhlovodíku odstraněním jednoho vodíkového atomu, jako je fenyl nebo naftyl.

Pokud není uvedeno jinak, pod pojmem „farmaceuticky vhodné soli“, se v tomto textu rozumí soli, které tvoří kyselé nebo bazické skupiny přítomné ve sloučeninách obecného vzorce I. Jako příklady farmaceuticky vhodných solí je možno uvést sodné, vápenaté nebo draselné soli skupin karboxylové kyseliny a hydrochloridové soli aminoskupin. Jinými farmaceuticky vhodnými solemi, které tvoří aminoskupiny, jsou hydrobromidy, sulfáty, hydrogensulfáty, fosfáty, hydrogenfosfáty, dihydrogenfosfáty, acetáty, sukcináty, citráty, tartráty, laktáty, mandeláty, methansulfonáty a p-toluensulfonáty.

Určité sloučeniny obecného vzorce I mohou obsahovat centra asymetrie, a mohou se tedy vyskytovat v různých enantiomemích formách. Do rozsahu tohoto vynálezu spadají všechny optické izomery a stereoizomery sloučenin obecného vzorce I a jejich směsi. S ohledem na sloučeniny obecného vzorce I do rozsahu vynálezu spadá použití racemátu, jednotlivé enantiomemí formy, jednotlivé diastereomemí formy nebo jejich směsi. Sloučeniny obecného vzorce I se také mohou vyskytovat ve formě tautomerů. Předmětem vynálezu je také použití všech těchto tautomerů a jejich směsí.

-4CZ 292825 B6

Předmětem vynálezu je dále farmaceutická kompozice pro inhibici fosfodiesterázy (PDE) typu IV nebo produkce faktoru nekrózy nádorů (TNF) u savců, která zahrnuje účinné množství sloučeniny obecného vzorce I nebo její farmaceuticky vhodné soli a farmaceuticky vhodný nosič.

Předmětem vynálezu je dále také použití derivátu indazolu obecného vzorce I nebo jeho farmaceuticky vhodné soli pro výrobu léčiva pro léčení chorob, u nichž je indikována inhibice fosfodiesterázy (PDE) typu TV nebo inhibice produkce faktoru nekrózy nádorů (TNF).

Předmětem vynálezu je dále také farmaceutická kompozice pro prevenci nebo léčbu astma, zánětů kloubů, rheumatoidní arthritis, dnavé arthritis, rheumatoidní spondylitis, osteoarthritis a jiných artritických stavů; sepse, septického šoku, endotoxického šoku, sepse vyvolané gram negativními bakteriemi, syndromu toxického šoku, syndromu akutního respiračního distresu, cerebrální malárie, chronické zánětlivé choroby plic, silikosy, pulmonámí sarkoidózy, resorpce kosti, reperfuzního poranění, reakce graft-versus-host, odmítání alloštěpu, horečky a myalgie vyvolané infekcí (například bakteriální, virovou nebo fungální infekcí), jako je chřipka, sekundární kachexie vyvolané infekcí nebo maligním procesem, sekundární kachexie vyvolané syndromem získané imunitní nedostatečnosti (AIDS), AIDS, HIV, ARC (,AIDS related compelx“), tvorby keloidů, tvorby jizvové tkáně, Crohnovy choroby, ulcerativní kolitis, pyresis, roztroušené sklerózy, diabetes mellitus typu 1, autoimunitní diabetes, systemického lupus erythrematosus, bronchitis, chronické obstrukční choroby dýchacích cest, psoriasis, Bechetovy choroby, anafylaktoidní purpury, nefritis, chronické glomerulonefritis, zánětlivé choroby střev, leukémie, alergické rhinitis nebo dermatitis, u savců, který zahrnuje farmaceuticky účinné množství sloučeniny obecného vzorce I nebo její farmaceuticky vhodné soli spolu s farmaceuticky vhodným nosičem.

Dále je předmětem vynálezu použití derivátu indazolu obecného vzorce I nebo jeho farmaceuticky vhodné soli pro výrobu léčiva pro léčení astma, zánětů kloubů, rheumatoidní arthritis, dnavé arthritis, rheumatoidní spondylitis, osteoarthritis a jiných artritických stavů; sepse, septického šoku, endotoxického šoku, sepse vyvolané gram negativními bakteriemi, syndromu toxického šoku, syndromu akutního respiračního distresu, cerebrální malárie, chronické zánětlivé choroby plic, silikosy, pulmonámí sarkoidózy, resorpce kosti, reperfuzního poranění, reakce graft-versus-host, odmítání alloštěpu, horečky a myalgie vyvolané infekcí sekundární kachexie vyvolané infekcí nebo maligním procesem, sekundární kachexie vyvolané syndromem získané imunitní nedostatečnosti (AIDS), AIDS, HIV, ARC („ADIS related complex“), tvorby keloidů, tvorby jizvové tkáně, Crohnovy choroby, ulcerativní kolitis, pyresis, roztroušené sklerózy, diabetes mellitus typu 1, autoimunitní diabetes, systemického lupus erythrematosus, bronchitis, chronické obstrukční choroby dýchacích cest, psoriasis, Bechetovy choroby, anafylaktoidní purpury, nefritis, chronické glomerulonefritis, zánětlivé choroby střev, leukémie, alergické rhinitis, deprese, multiinfarktové demence nebo dermatitis, u savců.

Přítomnost určitých struktur podobných „aminalu“ nebo „acetalu“ ve sloučenině obecného vzorce I může mít a následek vznik nestabilních sloučenin. Tyto struktury se mohou vyskytovat v případě, kdy ke stejnému atomu uhlíku jsou připojeny dva heteroatomy. Tak například, když R představuje alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku substituovanou hydroxyskupinou, je možné, aby hydroxyskupina byla připojena ke stejnému atomu uhlíku, který je připojen k dusíkovému atomu, k němuž je vázán zbytek R. Takové nestabilní sloučeniny samozřejmě nespadají do rozsahu tohoto vynálezu.

-5CZ 292825 B6

Následuje podrobnější popis vynálezu,

V následujících reakčních schématech 1 až 4 je ilustrována příprava sloučenin podle vynálezu. Pokud není uvedeno jinak, R a R¹ mají v těchto schématech význam uvedený výše.

-6CZ 292825 B6

Schéma 1 (pokračování)

-8CZ 292825 B6

Schéma 3

XVI I

XVIII

-9CZ 292825 B6

Schéma 3 (pokračování)

XVII I

I⁵

XX

I⁶

XXI

-10CZ 292825 B6

Schéma 3 (pokračování)

XXI I

-11 CZ 292825 B6

Schéma 4

Sloučeniny obecného vzorce I je možno připravovat způsoby známými odborníkům v tomto oboru za použití jednoho nebo více postupů znázorněných v předcházejících schématech 1 až 4 5 a následujících příkladech provedení. Při postupu podle schématu 1 se ve stupni 1 nitruje karboxylová kyselina obecného vzorce II, která je dostupná ze známých obchodních zdrojů nebo je ji možno připravit způsoby známými odborníkům v tomto oboru, za standardních podmínek nitrace (HNO3/H2SO4/ 0 °C). Ve stupni 2 postupu podle schématu 1 se výsledný nitrovaný derivát obecného vzorce III hydrogenuje za použití standardních postupů hydrogenace (H^-Pd/C 10 za tlaku) při teplotě okolí (20 až 25 °C) po dobu několika (2 až 10) hodin, čímž se získá sloučenina obecného vzorce IV. Ve stupni 3 postupu podle schématu 1 se aminobenzoová kyselina obecného vzorce IV nechá reagovat sbází, jako uhličitanem sodným za vodných podmínek. Reakční směs se mírně zahřívá, dokud se nerozpustí většina výchozí látky, poté

-12CZ 292825 B6 ochladí na nižší teplotu (okolo 0 °C) a nechá reagovat s dusičnanem sodným ve vodě. Po asi 15 minutách se reakční směs pomalu převede do vhodné nádoby obsahující drcený led a silnou kyselinu, jako kyselinu chlorovodíkovou. Reakční směs se 10 až 20 minut míchá a poté při teplotě okolí přidá k roztoku přebytku /erc-butylthiolu ve vhodném aprotickém rozpouštědle, jako ethanolu. Hodnota pH reakční směsi se přídavkem anorganické báze, přednostně nasyceného vodného uhličitanu sodného, upraví na 4 až 5. Reakční směs se 1 až 3 hodiny míchá při teplotě okolí a přidá se kní roztok vodného chloridu sodného. Vzniklá směs se přefiltruje, čímž se oddělí sulfid obecného vzorce V.

Ve stupni 4 postupu podle schématu 1 se sulfid obecného vzorce V převede na odpovídající indazolkarboxylovou kyselinu obecného vzorce VI tak, že se sulfid obecného vzorce V při teplotě místnosti nechá reagovat se silnou bází, přednostně íerc.butoxidem draselným, v dimethylsulfoxidu (DMSO). Reakční směs se několik hodin (1 až 4 hodiny) míchá a poté okyselí silnou kyselinou, jako kyselinou chlorovodíkovou nebo sírovou, a poté extrahuje obvyklými postupy. Ve stupni 5 postupu podle schématu 1 se indazolkarboxylová kyselina obecného vzorce VI obvyklými postupy známými odborníkům v tomto oboru převede na odpovídající ester obecného vzorce VII. Ve stupni 6 postupu podle schématu 1 se alkyluje ester obecného vzorce VII, tak, že se podrobí obvyklým alkylačním podmínkám (silná báze/různá alkylační činidla a popřípadě katalyzátor na bázi mědi, jako bromid měďný) v polárním aprotickém rozpouštědle, jako tetrahydrofuranu (THF), N-methylpyrrolidinonu nebo dimethylformamidu (DMF) při teplotě okolí nebo vyšší (25 až 200 °C) po dobu 6 až 24, přednostně asi 12 hodin za vzniku sloučeniny obecného vzorce VIII. Ve stupni 7 postupu podle schématu 1 se sloučenina obecného vzorce VIII obvyklými postupy redukce esterů na alkoholy známými odborníkům v tomto oboru převede na odpovídající alkohol obecného vzorce IX. Redukce se přednostně provádí za použití redukčního činidla na bázi hydridu kovu, jako lithiumaluminiumhydridu, v polárním aprotickém rozpouštědle při nízké teplotě (asi 0 °C). Ve stupni 8 postupu podle schématu 1 se alkohol obecného vzorce IX obvyklými postupy známými odborníkům v tomto oboru oxiduje na odpovídající aldehyd obecného vzorce X. Tak je například oxidaci možno provést za použití katalytického množství rutenistanu tetrapropylamonného a nadbytku N-methylmorfolin-N-oxidu, jak je to popsáno v J. Chem. Soc., Chem. Commun., 1625 (1987), v bezvodém rozpouštědle, přednostně methylenchloridu.

Ve schématu 2 je znázorněn alternativní způsob výroby aldehydu obecného vzorce X. Ve stupni 1 postupu podle schématu 2 se sloučenina obecného vzorce XI nitruje za obvyklých nitračních podmínek (kyselina dusičná a sírová) za vzniku sloučeniny obecného vzorce ΧΠ. Nitroderivát obecného vzorce ΧΠ se ve stupni 2 postupu podle schématu 2 redukuje obvyklými postupy známými odborníkům v tomto oboru na odpovídající amin obecného vzorce ΧΠΙ. V přednostním provedení se sloučenina obecného vzorce XII redukuje na amin obecného vzorce XIII za použití bezvodého chloridu cínatého v bezvodém aprotickém rozpouštědle, jako ethanolu. Ve stupni 3 postupu podle schématu 2 se amin obecného vzorce XIII převede na odpovídající indazol obecného vzorce XIV tak, že se připraví odpovídající diazoniumfluorforáty způsobem popsaným v A. Roe, Organic Reactions, sv. 5, Wiley, New York, 1949, str. 198 až 206 a následnou cyklizací za přítomnosti katalyzátoru fázového přenosu, způsobem popsaným vR. A. Bartsch a I. W. Yang, J. Het. Chem. 21, 1063 (1984). Ve stupni 4 postupu podle schématu 2 se alkyluje sloučenina obecného vzorce XIV za použití standardních postupů známých odborníkům v tomto oboru (tj. silná báze, polární aprotické rozpouštědlo aalkylhalogenid) za vzniku N-alkylované sloučeniny obecného vzorce XV. Ve stupni 5 postupu podle schématu 2 se ve sloučenině obecného vzorce XV vymění halogen za kov za použití alkyllithia, jako n-butyllithia, v polárním aprotickém rozpouštědle, jako tetrahydrofuranu, při nízké teplotě (při -50 až-100, přednostně při -78 °C). Po následném rozložení dimethylformamidem při nízké teplotě a zahřátí na teplotu okolí se získá aldehyd obecného vzorce X.

Ve schématu 3 je ilustrována příprava sloučeniny obecného vzorce XXU, která je sloučeninou obecného vzorce I. Ve stupni 1 postupu podle schématu 3 se aldehydový zbytek ve sloučenině obecného vzorce X převede na vhodnou odstupující skupinu, jako halogen nebo methan

-13CZ 292825 B6 sulfonyloxy nebo jinou odstupující skupinu známou odborníkům v tomto oboru. Výsledná sloučenina se poté nechá reagovat s kyanatanem sodným v polárním rozpouštědle, jako dimethylformamidu, za vzniku sloučeniny obecného vzorce XVI. Ve stupni 2 postupu podle schématu 3 se sloučenina obecného vzorce XVI nechá za bazických podmínek reagovat s methylakrylátem (nebo podobným derivátem, v závislosti na tom, jaká skupina R₂ se má zavést) v aprotickém rozpouštědle, jako dimethyletheru ethylenglykolu (DME) při vysoké teplotě, přednostně při teplotě zpětného toku, za vzniku sloučeniny obecného vzorce XVII. Ve stupni 3 postupu podle schématu 3 se sloučenina obecného vzorce XVII převede na sloučeninu obecného vzorce XVIII za použití silné báze, jako hydridu sodného, a polárního aprotického rozpouštědla, jako dimethylformamidu nebo tetrahydrofuranu, při zvýšené teplotě, přednostně při teplotě zpětného toku.

Ve stupni 4 postupu podle schématu 3 se sloučenina obecného vzorce XVIII obvyklým postupem dekarboxyluje, například za použití chloridu sodného v dimethylsulfoxidu při teplotě asi 140 °C, za vzniku sloučeniny obecného vzorce XIX. Ve stupni 5 postupu podle schématu 3 se derivatizuje sloučenina obecného vzorce XIX na odpovídající dithian-2-ylidincyklohexankarbonitril obecného vzorce XX tak, že se nechá reagovat s 2-lithio-l,3-dithianem. Ve stupni 6 postupu podle schématu 3 se sloučenina obecného vzorce XX převede na odpovídající ester obecného vzorce XXI za použití chloridu rtuťnatého a kyseliny chloristé v polárním protickém rozpouštědle, jako methanolu. Ve stupni 7 postupu podle schématu 3 se sloučenina obecného vzorce XXI hydrolyticky převede na odpovídající karboxylovou kyselinu obecného vzorce XXII. Přitom se využívá obvyklých hydrolytických postupů, jako je použití vodného hydroxidu sodného v polárním rozpouštědle, nebo kteréhokoliv z mnoha existujících způsobů hydrolýzy známých odborníkům v tomto oboru. Takové postupy jsou například popsány v T. Green a P. G. M. Wuts, Protecting Groups in Organic Synthesis, 2. vydání (John Wiley and Sons, New York, 1991). Syntetické stupně znázorněné ve schématu 3 jsou podobné syntetickým postupům popsaným v PCT publikaci WO 93/19751 a WO 93/17949 pro přípravu odpovídajících sloučenin obsahujících katechol.

Jako neomezující příklady farmaceuticky vhodných solí sloučenin podle vynálezu je možno uvést soli s kyselinou chlorovodíkovou, kyselinou bromovodíkovou, kyselinou dusičnou, kyselinou sírovou, kyselinou fosforečnou, kyselinou methansulfonovou, kyselinou p-toluensulfonovou, kyselinou octovou, kyselinou glukonovou, kyselinou vinnou, kyselinou maleinovou a kyselinou jantarovou. V případě sloučenin obecného vzorce I, kde R³ představuje skupinu obecného vzorce COOR⁹, kde R⁹ představuje atom vodíku, jsou možné i soli s kationty, jako jsou soli se sodíkem, draslíkem, vápníkem, hořčíkem, amoniem, Ν,Ν'-dibenzylethylendiaminem, N-methylglukaminem (megluminem), ethanolaminem, tromethaminem a diethanolaminem.

Pro podávání člověku při kurativní a profylaktické léčbě zánětlivých chorob přicházejí obvykle v úvahu orální dávky sloučenin obecného vzorce I a jejich farmaceuticky vhodných solí podle vynálezu (tyto sloučeniny jsou dále označovány názvem „účinné sloučeniny podle vynálezu“) ležící v rozmezí od 0,1 do 1000 mg za den, vztaženo na průměrného dospělého pacienta o hmotnosti 70 kg. Pro typického dospělého pacienta se tedy hodí tablety a kapsle, z nichž každá obsahuje 0,1 až 100 mg účinné sloučeniny ve vhodném farmaceutickém vehikulu nebo nosiči. Dávky v případě intravenózního podávání obvykle leží v rozmezí od 0,1 do 10 mg (jedna dávka). Pro intranasální nebo inhalační podávání přichází v úvahu farmaceutický prostředek v podobě roztoku obsahujícího účinnou sloučeninu v množství 1 až 10 g/litr. Skutečnou dávku, která se bude nejlépe hodit pro každého jednotlivého pacienta, stanoví v praxi ošetřující lékař. Tato dávka se bude měnit podle věku, hmotnosti a odpovědi léčeného pacienta. Výše uvedené dávky mají povahu příkladů vhodných pro průměrné případy, ale v jednotlivých konkrétních případech je samozřejmě možno používat jak vyššího, tak nižšího dávkování. Do rozsahu vynálezu spadá použití sloučeniny podle vynálezu v libovolném dávkování.

Pro podávání člověku za účelem inhibice TNF se může použít různých konvenčních cest. Tak se může použít orálního, parenterálního, topického nebo rektálního podávání (čípky). Obvykle se

-14CZ 292825 B6 bude účinná sloučenina podle vynálezu podávat orálně nebo parenterálně v dávce ležící v rozmezí od asi 0,1 do 25 mg/kg tělesné hmotnosti léčeného subjektu za den. Přednostní dávka bude ležet v rozmezí od asi 0,3 do asi 5 mg/kg. Přirozeně však bude docházet k určitým změnám dávkování v závislosti na stavu léčeného subjektu. Ošetřující lékař v každém jednotlivém případě stanoví optimální dávku pro konkrétního pacienta.

Pro aplikaci člověku se účinné sloučeniny podle vynálezu mohou podávat samotné, ale obvykle se podávají ve směsi s farmaceutickým ředidlem nebo nosičem, který je zvolen s ohledem na zamýšlenou cestu podávání v souladu se standardní farmaceutickou praxí. Tak například, když se má použít orálního dávkování, jsou vhodnými farmaceutickými prostředky tablety, které jako excipienty obsahují škrob nebo laktosu, nebo tobolky, obsahující účinnou látku buď samotnou, nebo ve směsi s excipienty. Pro orální podávání se může použít také elixírů nebo suspenzí, které obsahují aromatizační látky nebo barvicí činidla. Sloučeniny obecného vzorce I se také mohou podávat ve formě parenterálních injekcí, například intravenosně, intramuskulámě nebo subkutánně. Pro parenterální podávání se nejlépe hodí farmaceutické prostředky v podobě sterilního vodného roztoku, který může také obsahovat jiné přísady, například dostatečné množství solí nebo glukosy pro izotonizaci roztoku.

Účinné sloučeniny je rovněž možno podávat topicky při léčení zánětlivých stavů kůže, a to například ve formě krémů, gelů, past a mastí v souladu se standardní farmaceutickou praxí.

Účinné sloučeniny lze podávat také jiným savcům než člověku. V tomto případě bude dávkování záviset na druhu savce a chorobě nebo stavu, které mají být léčeny. Živočichům je účinné sloučeniny možno podávat ve formě tobolek, bolů, tablet nebo kapalných drenčů a dále také injekčně nebo ve formě implantátů. Takové prostředky se připravují obvyklým postupem v souladu se standardní veterinární praxí. Alternativně je sloučeniny možno podávat spolu s krmivém. Pro tento účel lze připravit koncentrovanou krmivovou přísadu nebo premix, které se mísí s normálním krmivém pro zvířata.

Schopnost sloučenin podle vynálezu nebo jejich farmaceuticky vhodných solí inhibovat fosfodiesterázu IV (PDE_iv) je možno stanovit následující zkouškou.

až 40 g plicní tkáně člověka se umístí do 50 ml pufru Tris/fenylmethylsulfonylfluorid (PMSF)/sacharosa o pH 7,4 a homOgenizuje za použití zařízení Tekmar Tissumizer® (Tekmar Co., 7143 Kemper Road, Cincinnati, Ohio 45249) po dobu 30 sekund při nejvyšší rychlosti. Homogenát se odstřeďuje 70 minut při 48 000 x g při teplotě 4 °C. Supematant se 2 x přefiltruje přes filtr s průměry pórů 0,22 pm a nanese na sloupec Mono-Q FPLC (Pharmacia LKB Biotechnology, 800, Centennial Avenue, Piscataway, New Jersey 08854), který je předem ekvilibrován v pufru Tris/PMSF o pH 7,4. Pro nanášení vzorku na sloupec se používá průtoku 1 ml/min a následující promývání a eluce se provádí průtokovou rychlostí 2 ml/min. Vzorek se eluuje ze sloupce za použití vzestupného stupňovitého gradientu chloridu sodného v pufru Tris/PMSF o pH 7,4. Sbírají se frakce o objemu 8 ml. Frakce se zkoušejí na specifickou aktivitu PDEiv, což se provádí hydrolýzou [³H]cAMP, přičemž se využívá schopnosti známého inhibitoru PDEiv (například rolipramu) inhibovat tuto hydrolýzu. Vhodné frakce se spojí, zředí ethylenglykolem (2 ml ethylenglykolu/5 ml enzymatického přípravku) a zředěný roztok se skladuje až do použití při teplotě -20 °C.

Sloučeniny se rozpustí v dimethylsulfoxidu na koncentraci lOmM a roztoky se zředí v poměru 1 : 25 vodou (400 μΜ koncentrace sloučeniny, 4% koncentrace dimethylsulfoxidu). Požadované koncentrace se nastaví následujícím sériovým ředěním ve 4% roztoku dimethylsulfoxidu. Výsledná koncentrace dimethylsulfoxidu ve zkumavce je 1%. Pokus se zopakuje za použití dále uvedených látek, které se uvedeném pořadí přidají do skleněné zkumavky o rozměrech 12 x 75 mm (všechny uváděné koncentrace jsou výsledné koncentrace ve zkumavce):

-15CZ 292825 B6

i) 25 μΐ sloučeniny nebo dimethylsulfoxidu (1% v případě kontrolního a slepého pokusu) ii) 25 μΐ Tris pufru o pH 7,5 iii) [³H]cAMP (ΙμΜ) iv) 25 μΐ roztoku enzymu PDEiv (v případě slepého pokusu se enzym předběžně inkubuje 5 minut ve vroucí vodě).

Obsah zkumavek se protřepe a potom se zkumavky umístí na 20 minut do vodní lázně o teplotě 37 °C, načež se reakce zastaví přenesením zkumavek do lázně s vroucí vodou na dobu 4 minut. Do každé zkumavky umístěné v ledové lázni se přidá promývací pufr (0,5 ml, 0,lM roztok 4-(2-hydroxyethyl)-l-piperazinethansulfonové kyseliny (HEPES)/0,lM roztok chloridu sodného, pH 8,5. Obsah každé zkumavky se nanesen na sloupec Aff-gel 601 (Biorad Laboratories, P.O. Box 1229, 85A Marcus Drive, Melville, New York, 11 747) (boronátový afínitní gel, objem lože 1 ml), který byl předběžně ekvilibrován v promývacím pufřu. [³H]cAMP se vymyje 2x6ml promývacího pufru a potom se eluuje [³H]5'AMP pomocí 4 ml 0,25M kyseliny octové. Po vířivém promíchání se 1 ml eluátu přidá ke 3 ml scintilační kapaliny umístěné ve vhodné nádobě, směs se promíchá vířením a potom se spočívá [³HJ.

Procentická inhibice se vypočítá z následujícího vzorce:

průměr cpm - průměr cpm (zkouš. slouč.) (slepý pokus) inhibice (%) = 1 - -------------------------------------------průměr cpm - průměr cpm (kontrol, pokus) (slepý pokus) cpm = počet radioaktivních impulzů/min

Hodnota IC₅₀ je definována jako koncentrace sloučeniny, která inhibuje z 50 % specifickou hydrolýzu [³H]cAMP na [³H]5'AMP.

Schopnost sloučeniny podle vynálezu a jejich farmaceuticky vhodných solí inhibovat produkcí TNF, a tedy účinnost těchto látek při léčbě chorob zahrnujících produkci TNF, je demonstrována v následujícím testu in vitro.

Periferní lidská krev (100 ml) od dobrovolného dárce se zachytí do ethylendiamintetraoctové kyseliny (EDTA). Izolují se jednojademé buňky (za použití Ficoll/Hypaque) a promyjí se třikrát neúplným HBSS. Buňky se resuspendují na konečnou koncentraci 1 x 10⁶ buněk/ml v předehřátém RPMI (obsahujícím 5% FCS, glutamin, pen/step a nystatin). Monocyty se navzorkují do misek s 24 jamkami při koncentraci 1 x 10⁶ buněk/1,0 ml. Buňky se inkubují při 37 °C (v atmosféře 5% oxidu uhličitého) v průběhu 2 hodin se nechají přilnout k povrchu jamek a potom se nepřilnuté buňky odstraní jemným opláchnutím. Potom se k buňkám přidá zkušební sloučenina (objem roztoku 10 μΐ, zkoušejí se vždy 3 až 4 koncentrace) a následuje jednohodinová inkubace. Do příslušných jamek se přidá LPS (10 μΐ). Misky se inkubují přes noc (18 hodin) při 37 °C. Na konci inkubace se analyzuje TNF pomocí metody sandwich ELISA (souprava R & D Quantikine Kit). Pro každou sloučeninu se metodou lineární regresní analýzy stanoví hodnota ICjo.

Vynález je blíže objasněn v následujících příkladech provedení. Tyto příklady mají výhradně ilustrativní charakter a rozsah vynálezu v žádném ohledu neomezují.

-16CZ 292825 B6

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

A. 3-Nitro-4-propylbenzoová kyselina

9,44 g (57,5 mmol, 1,0 ekv.) 4-propylbenzoové kyseliny se zčásti rozpustí v 50 ml koncentrované kyseliny sírové. Vzniklá směs se ochladí v ledové lázni a během 1 až 2 minut se kní přikape roztok 4,7 ml (74,7 mmol, 1,3 ekv.) koncentrované kyseliny dusičné v 10 ml koncentrované kyseliny sírové. Reakční směs se 1 hodinu míchá při 0 °C a nalije do 1 litrové kádinky zpola naplněné ledem. Po lOminutovém míchání se filtrací oddělí vyloučená bílá pevná látka, která se promyje 1 x vodou a vysuší. Získá se 12,01 g (100 %) sloučeniny uvedené v nadpisu o teplotě tání 106 až 109 °C.

IR (KBr) 3200-3400, 2966, 2875, 2667, 2554, 1706, 1618, 1537, 1299, 921 cm’¹; Ή NMR (300 MHz, DMSO-de): δ 0,90 (t, 3H, J = 7,4 Hz), 1,59 (m, 2H), 2,82 (m, 2H), 7,63 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 8,12 (dd, 1H, J = 1,7, 8,0 Hz), 8,33 (d, 1H, J = 1,7 Hz); ^I3C NMR (75,5 MHz, DMSO-d₆): δ 14,2, 23,7, 34,2, 125,4, 130,5, 132,9, 133,6, 141,4, 149,5, 165,9; Analýza pro C10H11NO4.I/4H2O: vypočteno: C 56,20, H 5,42, N 6,55, nalezeno: C 56,12, H 5,31, N 6,81

B. 3-Amino-4-propylbenzoová kyselina

Směs 11,96 g (57,2 mmol) 3-nitro-4-propylbenzoové kyseliny a 1,5 g 10% palladia na uhlíku (50% vodná vlhkost) ve 250 ml methanolu se umístí do Parrova hydrogenačního zařízení a třepe za tlaku vodíku 171,25 kPa při teplotě okolí. Po 1 hodině se reakční směs přefiltruje přes celit. Filtrát se zkoncentruje a zbytek se vysuší. Získá se 9,80 g (96 %) světle žluté krystalické pevné látky o teplotě tání 139,5 až 142,5 °C.

IR (KBr) 3200-2300, 3369, 3298, 2969, 2874, 2588, 1690, 1426, 916, 864 cm’¹; 'HNMR (300 MHz, DMSO-de): δ 0,90 (t, 3H, J = 7,2 Hz), 1,52 (m, 2H), 2,42 (m, 2H), 5,08 (brs, 2H), 6,96 (d, 1H, J = 7,8 Hz), 7,05 (dd, 1H, J = 1,7, 7,8 Hz), 7,20 (d, 1H, J = 1,7 Hz); MS (CL, NH₃) m/z 180 (Μ+Ηζ báze);

Analýza pro C10HBNO2.I/3H2O: vypočteno: C 64,85, H 7,89, N 7,56, nalezeno: C 64,69, H 7,49, N 7,86

C. 3-Karboxy-6-propylbenzendiazoterc.butylsulfid

Směs 0,80 g (49,1 mmol, 1,0 ekv.) 3-amino-4-propylbenzoové kyseliny a 2,34 g (22,1 mmol, 0,45 ekv.) uhličitanu sodného v 55 ml vody se mírně zahřívá teplometem, dokud se nerozpustí většina výchozí látky. Reakční směs se ochladí v ledové lázni a přikape se kní 3,73 g (54,0 mmol, 1,0 ekv.) dusitanu sodného ve 27 ml vody. Po 15 minutách se reakční směs převede do kapací nálevky a během 10 minut přikape do kádinky obsahující 55 g drceného ledu a 10,6 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové. Po lOminutovém míchání se obsah kádinky převede do kapací nálevky a během 5 minut při teplotě místnosti přikape k roztoku 5,31 ml (47,1 mmol, 0,96 ekv.) fórc-butylthiolu ve 130 ml ethanolu. Hodnota pH vzniklé směsi se přídavkem nasyceného vodného roztoku uhličitanu sodného nastaví na 4 až 5. Reakční směs se 1 hodinu míchá při teplotě místnosti a přidá se k ní 200 ml vodného roztoku chloridu sodného. Vzniklá směs se přefiltruje. Oddělená pevná látka se promyje 1 x vodou a přes noc suší. Získá se 12,25 g (89 %) rezavě hnědého prachu (pozor zapáchá) o teplotě tání 102 °C (za rozkladu).

IR (KBr) 3200-2400, 2962, 2872, 2550, 1678, 1484, 1428, 1298, 1171 cm’¹; ^!HNMR (300 MHz, DMSO-d₆): δ 0,84 (t, 3H, J = 7,3 Hz), 1,48 (m, 2H), 1,55 (s, 9H), 2,42 (m, 2H), 7,29 (d, 1H, J= 1,6 Hz), 7,50 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 7,86 (dd, 1H, J= 1,7, 7,9 Hz), 13,18 (brs, 1H);

-17CZ 292825 B6

MS (termosprej, NH|OAc) m/z (Μ+Ι-Γ, báze); Analýza pro C]4H₂₀N₂O₂S: vypočteno: C 59,96, H 7,19, N 9,99, nalezeno: C 59,71, H 7,32, N 10,02

D. 3-Ethyl-lH-indazol-6-karboxylová kyselina

Roztok 12,0 g (42,8 mmol, 1 ekv.) 3-karboxy-6-propylbenzendiazoterc.butylsulfídu ve 150 ml dimethylsulfoxidu se během 15 minut přikape k roztoku 44,6 g (398 mmol, 9,3 ekv.) terc-butoxidu draselného ve 200 ml dimethylsulfoxidu o teplotě místnosti. Po dvouhodinovém míchání při teplotě místnosti se reakční směs nalije do 1,5 litru 1M kyseliny chlorovodíkové o teplotě 0 °C. Vzniklá směs se 5 minut míchá a poté extrahuje 2 x 350 ml ethylacetátu. Ethylacetátové extrakty (pozor - zápach) se spojí, promyjí 2 x 250 ml vody, vysuší síranem horečnatým a přefiltrují. Filtrát se zkoncentruje a zbytek se vysuší. Získaná zlatohnědá pevná látka se trituruje s 1 litrem směsi diethyletheru a hexanů v poměru 1:3a vysuší. Získá se 7,08 g (87 %) zlatohnědého krystalického prachu o teplotě tání 248 až 251 °C.

IR (KBr) 3301, 3300-2400, 2973, 2504, 1702, 1455, 1401, 1219 cm'¹; *HNMR (300MHz, DMSO-d6): δ 1,31 (t, 3H, J = 7,6 Hz), 2,94 (q, 2H, J = 7,6 Hz), 7,63 (dd, 1H, J = 1,1, 8,4 Hz), 7,81 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 8,06 (d, 1H, J = 1,1 Hz), 12,95 (brs, 1H); MS (Cl, NH3) m/z 191 (M+H⁺, báze); Analýza pro CiOH|oN₂Ó₂: vypočteno: C 63,14, H 5,30, N 14,73, nalezeno 62,66, H 5,42, N 14,80.

E. Methylester 3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

8,78 g (45,8 mmol, 1,1 ekv.) hydrochloridu l-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidu se v jedné dávce přidá k roztoku 7,92 g (41,6 mmol, 1,0 ekv.) 3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny, 16,9 ml (416 mmol, 10 ekv.) methanolu a 5,59 g (45,8 mmol, 1,1 ekv.) dimethylaminopyridinu ve 250 ml dichlormethanu o teplotě místnosti. Po 18 hodinách při teplotě místnosti se reakční směs zkoncentruje na 150 ml a zředí 500 ml ethylacetátu. Ethylacetátová směs se promyje 2 x 100 ml 1M kyseliny chlorovodíkové, 1 x 100 ml vody a 1 x 100 ml vodného roztoku chloridu sodného, vysuší síranem sodným a přefiltruje. Filtrát se zkoncentruje a zbytek se vysuší. Výsledná hnědá pevná látka (7,8 g) se přečistí na sloupci silikagelu za použití gradientu 30 až 50% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Získá se 6,41 g (75 %) zlatohnědé pevné látky o teplotě tání 107 až 108 °C.

IR (KBr) 3100-2950, 1723, 1222 cm’¹; ’HNMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8,19 (m, 1H), 7,7 - 7,8 (m, 2H), 3,96 (s, 3H), 3,05 (q, 2H, J = 7,7 Hz), 1,43 (t, 3H, 7,7 Hz); MS (Cl, NH3) m/z 205 (Μ+Η^1-, báze); Analýza pro CnHi2N₂O₂: vypočteno: C 64,70, H 5,92, N 13,72, nalezeno: C 64,88, H 6,01, N 13,96

F. Methylester l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

1,17 g (29,4 mmol, 1,05 ekv.) hydridu sodného (60% olejová disperze) se v jedné dávce přidá k roztoku 5,7 g (27,9 mmol, 1,0 ekv.) methylesteru 3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny ve 125 ml bezvodého dimethylformamidu o teplotě místnosti. Po 20 minutách se ke vzniklé směsi přikape 3,89 ml (36,6 mmol, 1,3 ekv.) cyklopentylbromidu. Reakční směs se přes noc míchá při teplotě místnosti a poté nalije do 1 litru vody. Vodná směs se extrahuje 3 x 450 ml ethylacetátu. Organické extrakty se spojí, promyjí 3 x 400 ml vody a 1 x 200 ml vodného roztoku chloridu sodného, vysuší síranem sodným a přefiltrují. Filtrát se zkoncentruje a zbytek se vysuší. Výsledný jantarově zbarvený olej se přečistí na sloupci silikagelu za použití 10% ethylacetátu v hexanech (samospád), jako elučního činidla. Získá se 5,48 g (72 %) čirého oleje. *HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 8,16 (d, 1H, J = 1,0 Hz), 7,7 (m, 2H), 5,00 (kvintet, 1H, J = 7,5 Hz), 3,97 (s, 3H), 3,01 (q, 2H, J = 7,6 Hz), 2,2 (m, 4H), 2,0 (m, 2H), 1,8 (m, 2H), 1,39 (t, 3H, J = 7,6 Hz); HRMS pro Ci₆H₂oN₂0₂: vypočteno: 272,1526, nalezeno: 272,15078

-18CZ 292825 B6

G. (l-Cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-yl)methanol

K roztoku 1,02 g (7,05 mmol, 1,0 ekv.) methylesteru l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6karboxylové kyseliny v 50 ml bezvodého tetrahydrofuranu o teplotě 0 °C se přidá 7 ml (7,0 mmol, 1,0 ekv.) 1M roztoku lithiumaluminiumhydridu v tetrahydrofuranu. Po 20 minutách se ke vzniklé směsi opatrně přidá 1 ml methanolu. Reakční směs se nalije do 500 ml 5% kyseliny sírové a extrahuje 3 x 50 ml ethylacetátu. Organické extrakty se spojí, promyjí 2 x 40 ml vody a 1 x 40 ml vodného roztoku chloridu sodného, vysuší síranem sodným a přefiltrují. Filtrát se zkoncentruje a zbytek se vysuší. Výsledný čirý olej (1,58 g) se přečistí na sloupci silikagelu. Získá se 1,53 g (89 %) čirého oleje.

IR (CHClj) 3606, 3411, 3009, 2972, 2875, 1621, 1490 cm’¹; *HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,65 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 7,42 (s, 1H). 7,06 (dd, 1H, J = 1,0, 8,2 Hz), 4,92 (kvintet, 1H, J = 7,7 Hz), 4,84 (s, 2H), 2,98 (q, 2H, J = 7,6 Hz), 2,2 (m, 4H), 2,0 (m, 2H), 1,7 (m, 3H), 1,38 (t, 3H, J = 7,6 Hz); MS (termosprej, NFfiAc) m/z 245 (M+H^-, báze); HRMS pro C15H20N2O + H: vypočteno: 245,1654, nalezeno: 245,1675

H. l-Cyklopentyl-3-ethyl-l H-indazol-6-karbaldehyd

106 mg (0,301 mmol, 0,05 ekv.) ruthenistanu tetrapropylamonného se přidá k suspenzi 1,47 g (6,02 mmol, 1,0 ekv.) (l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-yl)methanolu, 1,06 g (9,03 mmol,

I. 5 ekv.) N-oxidu N-methylmorfolinu a 3,01 g molekulového síta 0,4 nm ve 12 ml bezvodého dichlormethanu o teplotě místnosti. Po 30 minutách se reakční směs nechá projít přes krátký sloupec silikagelu za použití dichlormethanu, jako elučního činidla. Frakce, které obsahují produkt, se zkoncentrují a zbytek se podrobí mžikové chromatografii na sloupci silikagelu za použití 15% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Získá se 924 mg (63 %) světle žluté pevné látky o teplotě tání 41 °C.

IR (KBr) 3053, 2966, 2872, 2819, 1695 cm’¹; ’HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 10,13 (s, 1H), 7,93 (d, 1H, J = 0,9 Hz), 7,77 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,60 (dd, 1H, J = 1,2, 8,4 Hz), 5,00 (kvintet, 1H, J = 7,5 Hz), 3,01 (q, 2H, J = 7,6 Hz), 2,2 (m, 4H), 2,0 (m, 2H), 1,7 (m, 2H), 1,39 (t, 3H, J = 7,5 Hz); MS (Cl, NH₃) m/z 243 (M+H\ báze); Analýza pro CisHigN₂O: vypočteno: C 74,35, H 7,49, N 11,56, nalezeno: C 74,17, H 7,58, N 11,79

Příklad 2

A. 4-Brom-2-nitro-l-propylbenzen

125 g (628 mmol, 1,0 ekv.) l-brom-4-propylbenzenu se v jedné dávce přidá k roztoku 600 ml koncentrované kyseliny sírové a 200 ml vody o teplotě 10 °C. Ke vzniklé směsi se za intenzivního mechanického míchání během 30 minut přikape směs 43,2 ml (691 mmol, 1,1 ekv.) koncentrované kyseliny dusičné (69 až 71%, 16M) ve 150 ml koncentrované kyseliny sírové a 50 ml vody o teplotě místnosti. Reakční směs se 68 hodin míchá při teplotě místnosti a nalije do 41itrové kádinky, která je naplněna volně sypaným drceným ledem. Po 1 hodinovém míchání se reakční směs převede do 41itrové dělicí nálevky a extrahuje 4 x 800 ml izopropyletheru. Organické extrakty se spojí, promyjí 3 x 800 ml vody a 1 x 500 ml vodného roztoku chloridu sodného, vysuší síranem sodným a přefiltrují. Filtrát se zkoncentruje a zbytek se vysuší. Výsledná žlutá kapalina (150 ml) se přečistí chromatografíí na silikagelu (2 sloupce, vždy s náplní 3 kg silikagelu) za použití 2% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Získá se 63,9 g (42 %) žluté kapaliny. Požadovaný regioizomer je méně polárním ze dvou izomerů, které vznikly v poměru 1:1. Teplota varu: 108 °C, 267 Pa

IR (CHC1₃) 3031, 2966, 2935, 2875, 1531, 1352 cm’¹; ’HNMR (300MHz, CDC1₃): δ 8,01 (d, 1H, J = 2,1 Hz), 7,62 (dd, 1H, J = 2,1, 8,3 Hz), 7,23 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 2,81 (m, 2H), 1,67

-19CZ 292825 B6 (m, 2H), 0,98 (t, 3H, J = 7,4 Hz); ¹³C NMR (75,5 Hz, CDC13): δ 13,94, 23,74, 34,43, 119,6, 127,4, 133,3, 135,7, 135,7, 136,4, 149,8; GCMS (El) m/z 245/243 (M⁺), 147 (báze); HRMS pro C9HioN0₂Br + H: 243,9973, nalezeno: 243,9954

B. 5-Brom-2-propylfenylamin

121 g (639 mmol, 3,0 ekv.) chloridu cínatého (bezvodého) se v jedné dávce přidá k roztoku 51,9 g (213 mmol, 1,0 ekv.) 4-brom-2-nitro-l-propylbenzenu ve 1200 ml absolutního ethanolu a 12 ml (6 ekv.) vody o teplotě místnosti. Po 24 hodinách při teplotě místnosti se v rotačním odpařováku odstraní většina ethanolu. Zbytek se nalije do 41itrové kádinky ze tří čtvrtin naplněné drceným ledem a vodou. K reakční směsi se za míchání po částech přidá 150 g pelet hydroxidu sodného až do pH = 10, dokud se většina hydroxidu cíničitého nerozpustí. Reakční směs se rozdělí na poloviny, z nichž každá se extrahuje 2 x 750 ml ethylacetátu. Všechny čtyři ethylacetátové extrakty se spojí, promyjí 1 x 500 ml vždy 1M hydroxidu sodného, vody a vodného roztoku chloridu sodného, vysuší síranem sodným a přefiltrují. Filtrát se zkoncentruje, vysuší a žlutý kapalný zbytek se přečistí na sloupci silikagelu (1,2 kg) za použití směsi ethylacetátu a hexanů v poměru 1:12, jako elučního činidla. Získá se 41,83 g (92 °/o) světle žluté kapaliny.

IR (CHC1₃) 3490, 3404, 3008, 2962, 2933, 2873, 1620, 1491 cm’¹; HNMR (300 MHz, CDCIj): δ 6,8 - 6,9 (m, 3H), 3,90 (brs, 2Η), 2,42 (m, 2H), 1,62 (m, 2Η), 0,99 (t, 3Η, J = 7,3 Hz); GCMS (El) m/z 215/213 (M ), 186/184 (báze); Analýza pro C₉H₁₂NBr: vypočteno: C 50,49, H 5,65, N 6,54, nalezeno: C 50,77, H 5,70, N 6,50

C. 6-Brom-3-ethyl-lH-indazol

49,22 g (230 mmol, 1,0 ekv.) 5-brom-2-propylfenylaminu se umístí do 3 litrové nádoby, chladí v ledové lázni a přidá se k němu roztok 57,5 ml (690 mmol, 3,0 ekv.) koncentrované kyseliny chlorovodíkové ve 165 ml vody ochlazený na 0 °C. Vyloučená pevná látka se mele, dokud nevznikne jemná bílá suspenze. Ktéto suspenzi se přidá ještě 100 ml vody a poté během 10 minut přikape roztok 15,9 g (230 mmol, 1,0 ekv.) dusitanu sodného v 75 ml vody. Ledová lázeň se odstaví a reakční směs se 30 minut míchá při teplotě místnosti a přefiltruje přes nálevku se skleněnou fritou předem ochlazenou na 0 °C. Filtrát se ochladí a v ledové lázni se k němu za mechanického mícháni během 10 minut přikape roztok/suspenze 32,8 g (313 mmol, 1,36 ekv.) tetrafluorboritanu amonného v 110 ml vody o teplotě 0 °C. Vzniklá hustá bílá suspenze (aryldiazoniumtetrafluorborát) se 1,5 hodiny míchá při 0 °C. Reakční směs se přefiltruje a oddělená pevná látka se promyje 1 x 200 ml 5% vodného tetrafluorboritanu amonného (ochlazeného na 0 °C), 1 x 150 ml methanolu (ochlazeného na 0 °C) a poté 1 x 200 ml diethyletheru a suší za vysokého vakua a poté 1 hodinu při teplotě místnosti. Získá se 54,47 g (76 %) diazoniové soli ve formě špinavě bílé pevné látky.

Do 31itrové baňky se umístí 1500 ml chloroformu neobsahujícího ethanol a poté 34,16 g (348 mmol, 2,0 ekv.) octanu draselného (práškovitého a vysušeného) a 2,3 g (8,7 mmol, 0,5 ekv.) 18-crown-6. Po 10 minutách se ke vzniklé směsi přidá v jedné dávce diazoniová sůl. Reakční směs se 18 hodin míchá pod atmosférou dusíku při teplotě místnosti a poté přefiltruje. Oddělená pevná látka se promyje 2x chloroformem a filtrát se zkoncentruje. Získá se 47 g surového produktu (hnědé krystaly), který se podrobí chromatografii na silikagelu (1,23 kg) za použití elučního gradientu 15%, 20% a 40% ethylacetát v hexanech. Získá se 21,6 g (55% výtěžek ve druhém stupni, celkový výtěžek 42 %) zlatohnědých krystalů o teplotě tání 112 až 114 °C.

IR (KBr) 3205, 3008, 2969, 2925, 1616, 1340, 1037 cm'¹; *HNMR (300 MHz, CDC13): δ 9,86 (bs, 1H), 7,61 (d, 1H, J = 1,3 Hz), 7,57 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,24 (dd, 1H, J = 1,5, 8,6 Hz), 2,99 (q, 2H, J = 7,6 Hz), 1,41 (t, 3H, J = 7,6 Hz); MS (Cl, NH3) m/z 227/225 (M+H⁺, báze); Analýza pro C9H₉N₂Br: vypočteno: C 48,02, H 4,03, N 12,45, nalezeno: C 48,08, H 3,87, N 12,45

-20CZ 292825 B6

D. 6-Brom- l-cyklopentyl-3-ethyl-l H-indazol

2,46 g (61,4 mmol, 1,05 ekv.) hydridu sodného (60% olejová disperze) se po 0,5 g dávkách přidá k roztoku 13,17 g (58,5 mmol, 1,0 ekv.) 6-brom-3-ethyl-lH-indazoIu v 500 ml bezvodého dimethylformamidu o teplotě 10 °C. Vzniklá směs se 20 minut míchá při teplotě místnosti, načež se kní přikape roztok 8,8 ml (81,9 mmol, 1,4 ekv.) cyklopentylbromidu v 10 ml bezvodého dimethylformamidu. Po 18 hodinách se reakční směs nalije do 2 litrů vody a vodná směs se extrahuje 2 x 1 litrem ethylacetátu. Organické extrakty se spojí, promyjí 2 x 750 ml vody, 1 x 500 ml vodného roztoku chloridu sodného, vysuší síranem sodným a přefiltrují. Filtrát se zkoncentruje a vysuší. Surový produkt (20,7 g) se přečistí na sloupci silikagelu (1,1 kg) za použití 3% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Získá se 10,6 g (62 %) jantarové kapaliny.

IR (CHC1₃) 2875, 1606, 1501, 1048 cm'¹; *HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,56 (d, 1H, J=l,3Hz), 7,52 (d, 1H, J = 8,7 Hz), 7,17 (dd, 1H, J = 1,5, 8,5 Hz), 4,83 (kvintet, 1H, J = 7,6Hz), 2,96 (q, 2H, J = 7,6 Hz), 2,15 (m, 4H), 2,0 (m, 2H), 1,65 (m, 2H), 1,36 (t, 3H, J = 7,7 Hz); MS (termosprej, NH4OAC) m/z 295/293 (M+H⁺, báze); Analýza pro CuHpNjBr: vypočteno: C 57,35, H 5,84, N 9,55, nalezeno: C 57,48, H 5,83, N 9,90

E. (l-Cyklopentyl-3-ethyl-l H-indazol-6-karbaldehyd

11,6 ml (28,4 mmol, 1,0 ekv.) n-butyllithia (2,45M v hexanech) se přidá k roztoku 8,32 g (28,4 mmol, 1,0 ekv.) 6-brom-l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazolu ve 200 ml bezvodého tetrahydrofuranu ochlazenému na -78 °C. Po 30 minutách při -78 °C se ke vzniklé směsi přikape 8,8 ml (114 mmol, 4,0 ekv.) bezvodého dimethylformamidu. Reakční směs se míchá při -78 °C dalších 30 minut, poté během 1 hodiny zahřeje na teplotu místnosti a přidá se kní 125 ml 1M kyseliny chlorovodíkové. Po lOminutovém míchání se v rotačním odpařováku odstraní většina tetrahydrofuranu. Zbytek se zředí 500 ml vody a vodná směs se extrahuje 2 x 250 ml ethylacetátu. Organické extrakty se spojí, promyjí 1 x 100 ml vody a 1 x 100 ml vodného roztoku chloridu sodného, vysuší síranem sodným a přefiltrují. Filtrát se zkoncentruje a vysuší. Výsledný žlutý olej se přečistí na sloupci silikagelu za použití 15% ethylacetátu v hexanech (samospád), jako elučního činidla. Získá se 4,70 g (68 %) žluté krystalické pevné látky, jejíž ’HNMR (300 MHz, CDCI3) je identická se spektrem sloučeniny z příkladu 8.

F. (l-Cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-yl)acetonitril

4,44 ml (35,0 mmol, 1,5 ekv.) trimethylsilylchloridu se přikape k suspenzi 5,65 g (23,3 mmol, 1,0 ekv.) l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karbaldehydu a 3,84 g (44,3 mmol, 1,9 ekv.) bromidu lithného ve 115 ml bezvodého acetonitrilu o teplotě místnosti. Po 15 minutách se reakční směs ochladí v ledové lázni a přikape se kní 6,84 ml (38,7 mmol, 1,66 ekv.) 1,1,3,3-tetramethyldisiloxanu. Reakční směs se během 2 hodin nechá zahřát na teplotu místnosti, poté 6 hodin zahřívá ke zpětnému toku, ochladí na teplotu místnosti a zředí 300 ml dichlormethanu. Zředěná směs se přefiltruje přes celit. Filtrát se zkoncentruje a zbytek se vysuší za vysokého vakua při teplotě místnosti. Získá se 13,08 g zlatohnědé olejovité pevné látky.

Tato pevná látka se rozpustí ve 200 ml bezvodého dimethylformamidu. Ke vzniklému roztoku se přidá 259 g (52,9 mmol, 2,27 ekv.) kyanidu sodného. Výsledná směs se 2 hodiny míchá při teplotě místnosti a poté nalije do 500 ml vody. Vodná směs se extrahuje 3 x 200 ml ethylacetátu. Organické extrakty se spojí, promyjí 3 x 200 ml vody a 1 x 200 ml vodného roztoku chloridu sodného, vysuší síranem sodným a přefiltrují. Filtrát se zkoncentruje a zbytek se vysuší. Výsledná hnědá olejovitá látka se přečistí na sloupci silikagelu za použití gradientu 10% až 20% ethylacetát v hexanech, jako elučního činidla. Získá se 2,98 g nečistého produktu a 2,05 g regenerované (nečisté) výchozí látky.

Regenerovaná výchozí látka se znovu podrobí výše popsaným reakčním podmínkám, přičemž se použije 50 ml 1,1,3,3-tetramethyldisiloxanu, poté 50 ml dimethylformamidu a 940 mg kyanidu

-21CZ 292825 B6 sodného. Po chromatografii na silikagelu se získá 0,62 g nečistého produktu, který se poté spojí s2,98g nečistého produktu. Po opětovné chromatografii na silikagelu za použití 10% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla, se získá 3,27 g (55 %) žlutého oleje.

IR (CHC1₃) 3062, 2972, 2874, 2255, 1623 cm’¹; ’HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,66 (d, 1H), J = 8,3 Hz), 7,39 (s, 1H), 6,97 (dd, 1H, J = 1,1, 8,4 Hz), 4,90 (kvintet, 1H, J = 7,6 Hz), 3,89 (s, 2H), 2,98 (q, 2H, J = 7,6 Hz), 2,2 (m, 4H), 2,0 (m, 2H), 1,7 (m, 2H), 1,37 (t, 3H, J = 7,4 Hz); MS (Cl, NH₃) m/z 254 (M+H*, báze); Analýza pro Ci6Hi₉N₃: vypočteno: C 75,86, H 7,56, N 16,59, nalezeno: C 75,84, H 7,94, N 16,60

G. Dimethylester 4-kyano-4-( l-cyklopentyl-3-ethyl-l H-indazol-6-yl)heptandiové kyseliny

530 μΐ (1,26 mmol, 0,1 ekv.) činidla Triton B (40% v methanolu) se přidá k roztoku 1,39 g (12,6 mmol, 1,0 ekv.) l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-yl)acetonitrilu ve 100 ml bezvodého acetonitrilu o teplotě místnosti. Reakční směs se zahřeje ke zpětnému toku a přikape se k ní 11,3 ml (126 mmol, 10,0 ekv.) methylakrylátu. Po 15 minutách se reakční směs ochladí na teplotu místnosti a zkoncentruje v rotačním odpařováku. Zbytek se zředí 300 ml etheru, promyje 1 x 50 ml 1M kyseliny chlorovodíkové, 1 x 50 ml vodného roztoku chloridu sodného, vysuší síranem sodným a přefiltruje. Filtrát se zkoncentruje a zbytek se vysuší. Výsledný hnědý olej se přečistí mžikovou chromatografii na sloupci silikagelu za použití 20% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Získá se 4,00 g (75 %) žlutého oleje.

IR (CHC1₃) 3031, 2972, 2955, 2874, 2250, 1735 cm’¹; ’HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,68 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,49 (s, 1H), 6,97 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 4,93 (kvintet, 1H, J = 7,6 Hz), 3,58 (s, 6H), 2,97 (q, 2H), J = 7,7 Hz), 2,45 (m, 6H), 2,2 (m, 6H), 2,0 (m, 2H), 1,8 (m, 2H), 1,37 (t, 3H, J = 7,7 Hz); MS (Cl, NH₃) m/z 426 (M+H\ báze); Analýza pro C₂₄H₃iN₃O4: vypočteno: C 67,74, H 7,34, N 9,88, nalezeno: C 67,76, Η 7,40, N 10,08.

H. Methylester (±)-5-kyano-5-(l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-yl)-2-oxocyklohexankarboxylové kyseliny

924 mg (23,1 mmol, 2,5 ekv.) hydridu sodného (60% olejové disperze) se v jedné dávce přidá k roztoku 3,93 g (9,24 mmol, 1,0 ekv.) dimethylesteru 4-kyano-4-(l-cyklopentyl-3-ethyl-lHindazol-6-yl)heptandionové kyseliny ve 100 ml bezvodého 1,2-dimethoxyethanu o teplotě místnosti. Reakční směs se 1,5 hodiny pod atmosférou dusíku zahřívá ke zpětnému toku, ochladí na teplotu místnosti a po 18 hodinách rozloží 50 ml vody. Vzniklá směs se nalije do 200 ml ethylacetátu a ethylacetátová směs se promyje 1 x 100 ml 1M kyseliny chlorovodíkové. Vodná vrstva se extrahuje 1 x 50 ml ethylacetátu. Organické extrakty se spojí, promyjí 1 x 50 ml vodného roztoku chloridu sodného, vysuší síranem sodným a přefiltrují. Filtrát se zkoncentruje a zbytek se vysuší. Výsledný žlutý olej se přečistí na sloupci silikagelu za použití 10% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Získá se 2,78 g (76 %) bílé amorfní pevné látky.

IR (KBr) 2954, 2871, 2240, 1663, 1619 cm’¹; *HNMR (300 MHz, CDC1₃): δ 12,27 (s, 1H), 7,70 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,57 (s, 1H), 7,15 (dd, 1H, J = 1,6, 8,5 Hz), 4,93 (kvintet, 1H, J = 7,6 Hz),

3,78 (s, 3H), 3,05 (m, 1H), 2,98 (q, 2H, J = 7,6 Hz), 2,9 (m, 1H), 2,75 (m, 2H), 2,6 (m, 1H), 2,35 (m, 2H), 2,2 (m, 4H), 2,0 (m, 2H), 1,75 (m, 2H), 1,38 (t, 3H, J = 7,6 Hz); MS (Cl, NH₃) m/z 394 (M+Ηζ báze); Analýza pro C₂7H₂N₃O₃: vypočteno: C 70,22, H 6,92, N 10,68, nalezeno: C 70,07, H 7,01, N 10,70

I. 1—(l-Cyklopentyl-3-ethyl-l H-indazol-6-yl)-4-oxocyklohexankarbonitril

Směs 2,72 g (6,91 mmol, 1,0 ekv.) methylesteru (±)-5-kyano-5-(l-cyklopentyl-3-ethyl-lHindazol-6-yl)-2-oxocyklohexankarboxylové kyseliny a 2,58 g (44,2 mmol, 6,4 ekv.) chloridu sodného v 50 ml dimethylsulfoxidu a 4 ml vody se pod atmosférou dusíku zahřívá v olejové lázni o teplotě 140 °C. Po 3 hodinách se reakční směs ochladí na teplotu místnosti, 72 hodin míchá

-22CZ 292825 B6 a nalije do 250 ml vody. Vodná směs se extrahuje 2 x 150 ml ethylacetátu. Organické extrakty se spojí, promyjí 2 x 100 ml vody a 1 x 100 ml vodného roztoku chloridu sodného a vysuší síranem sodným. Surový produkt se přečistí na sloupci silikagelu za použití 20% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Získá se 1,82 g (78 %) bílé krystalické pevné látky o teplotě tání 81 až 89 °C.

IR (KBr) 2969, 2961, 2872, 2236, 1716 cm'¹; *HNMR (300MHz, CDC1₃): 8 7.71 (d. 1H, J = 8,5 Hz), 7,58 (s, 1H), 7,16 (dd, 1H, J = 1,5, 8,5 Hz), 4,93 (kvintet, 1H, J = 7.6 Hz). 3,0 (m, 4H), 2,7 (m, 4H), 2,45 (m, 2H), MS (NHjOAc) m/z 336 (M+lÉ, báze); Analýza pro C21H25N3O: vypočteno: C 75,20, H 7,51, N 12,63, nalezeno: C 74,06, H 7,59, N 12,41; HRMS pro C21H25N3O + H: vypočteno: 336,20778, nalezeno: 336,2088

Příklad 3

A. 1 -(1 -Cyklopentyl-3-ethyl-l H-indazol-6-yl)-4-[ 1,3 ] dithian-2-y lidencyklohexankarbonitril

3,94 ml (9,84 mmol, 2,09 ekv.) n-butyllithia (2,5M v hexanech) se přikape k roztoku 1,88 ml (9,89 mmol, 2,1 ekv.) 2-trimethylsilyl-l,3-dithianu v 80 ml bezvodého tetrahydrofuranu o teplotě 0 °C. Po 25 minutách při 0 °C se reakční směs ochladí na -78 °C a přidá se k ní roztok 1,58 g (4,71 mmol, 1,0 ekv.) l-(l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-yl}-4-oxocyklohexankarbonitrilu ve 40 ml bezvodého tetrahydrofuranu. Po 1 hodině při -78 °C se reakční směs rozloží přídavkem 50 ml vodného roztoku chloridu sodného, poté zahřeje na teplotu místnosti a zředí 100 ml vody. Vodná směs se extrahuje 1 x 100 ml dichlormethanu a 1 x 50 ml vodného roztoku chloridu sodného. Organický extrakt se vysuší síranem sodným a přefiltruje. Filtrát se zkoncentruje a zbytek se vysuší. Výsledný čirý olej se přečistí na sloupci silikagelu za použití 10% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Získá se 1,51 g (73 %) bílé amorfní pevné látky.

IR (KBr) 2962, 2870, 2232, 1620, 1569, 108, 1434, 1217 cm’¹; 'HNMR (300MHz, CDC1₃): 8 7,67 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,53 (s, 1H), 7,15 (dd, 1H, J = 1,5, 8,6 Hz), 4,92 kvintet, 1H, J = 7,6 Hz), 3,36 (m, 2H), 3,0 (m, 6H), 2,42 (m, 2H), 2,34 (m, 2H), 2,2 (m, 6H), 2,0 (m, 4H),

1,78 (m, 2H), 1,37 (t, 3H, J = 7,5 Hz); MS (Cl, NH₃) m/z 438 (M+FT, báze); Analýza pro C₂₅H₃₁N₃S₂: vypočteno: C 68,60, H 7,14, N 9,60, nalezeno: C 68,26, H 7,29, N 9,58

B. Methylester trans-4-kyano-4-( 1 -cyklopentyl-3-ethyl-l H-indazol-6-yl)cyklohexankarboxylové kyseliny a methylester cis-4-kyano-4-(l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-yl)cyklohexankarboxylové kyseliny

Směs 1,45 g (3,31 mmol, 1,0 ekv.) l-(l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-yl)-4-[l,3]dithian2-ylidencyklohexankarbonitrilu, 3,59 g (13,2 mmol, 4,0 ekv.) chloridu rtuťnatého a 1,48 ml (16,9 mmol, 5,1 ekv.) 70% kyseliny chloristé v 60 ml methanolu se pod atmosférou dusíku zahřívá ke zpětnému toku. Po 2 hodinách se reakční směs ochladí na teplotu místnosti, zředí 250 ml dichlormethanu a přefiltruje přes celit. Filtrát se promyje 1 x 100 ml nasyceného vodného hydrogenuhličitanu sodného, 1 x 75 ml 10% vodného siřičitanu sodného a 1 x 100 ml vody, vysuší síranem sodným a přefiltruje. Filtrát se zkoncentruje a zbytek se vysuší. Výsledný čirý olej se přečistí na sloupci silikagelu za použití 15% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Získá s 340 mg (27 %) trans izomeru (méně polárního) ve formě bílé pevné látky a 794 mg (63 %) cis izomeru (polárnějšího) ve formě bílé pevné látky.

trans izomer: teplota tání 79 až 82 °C; IR (KBr) 2973,2949,2890,2871,2235,1721,1618,1484, 1453, 1217, 1170 cm’¹; ’HNMR (300 MHz, CDC1₃): 8 7,67 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,52 (s, 1H), 7,14 (dd, 1H, J = 1,4, 8,5 Hz), 4,93 (kvintet, 1H, J = 7,6 Hz), 3,74 (s, 3H), 2,97 (q, 2H, J = 7,6 Hz), 2,85 (m, 1H), 2,3 (m, 2H), 2,2 (m, 10H), 2,0 (m, 2H), 1,75 (m, 2H), 1,37 (t, 3H,

-23CZ 292825 B6

J = 7,6 Hz); MS (Cl, NH₃) m/z 380 (M+H⁺, báze); Analýza pro C23H29N3O2: vypočteno: C 72,79, H 7,70, N 11,07, nalezeno: C 73,05, H 7,80, N 11,03 cis izomer: teplota tání 112 až 114 °C; IR (KBr) 3065, 2952, 2866, 2234, 1731, 1622, 1487, 1445, 1220,1204 cm’¹;

'HNMR (300 MHz, CDCI3): δ 7,68 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,55 (s, 1H), 7,14 (dd, 1H, J = 1,3, 8,4 Hz), 4,93 (kvintet, 1H, J = 7,6 Hz), 3,73 (s, 3H), 2,98 (q, 2H. J = 7.6 Hz), 2,42 (m, 1H), 2,36 (m, 1H), 1,9 - 2,3 (m, 13H), 1,8 (m, 2H), 1,37 (t, 3H, J = 7,5 Hz); MS (Cl, NH₃) m/z 380 (M+lT, báze); Analýza pro C23H29N3O2: vypočteno: C 72,79, H 7,70, N 11,07, nalezeno: C 72,93, H 7,56, N 10,92

Příklad 4

Trans-4-kyano-4-(l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-yl)cyklohexankarboxylová kyselina

Směs 337 mg (0,888 mmol, 1,0 ekv.) methylesteru trans-4-kyano-4-(l-cyklopentyl-3-ethyllH-indazol-6-yl)cyklohexankarboxylové kyseliny v 10 ml methanolu, 2 ml tetrahydrofuranu a 2,7 ml (2,66 mmol, 3,0 ekv.) 1M hydroxidu sodného se míchá při teplotě místnosti. Po 3 hodinách se reakční směs zkoncentruje v rotačním odpařováku a zbytek se zředí vodou (100 ml). Vodná směs se okyselí na pH 1 a extrahuje 2 x 70 ml ethylacetátu. Organické extrakty se spojí, promyjí 1 x 50 ml vody a 1 x 50 ml vodného roztoku chloridu sodného, vysuší síranem sodným a přefiltrují. Filtrát se zkoncentruje a zbytek se vysuší. Výsledná bílá pevná látka se přečistí na sloupci silikagelu za použití 5% methanolu v dichlormethanu, jako elučního činidla. Získá se 197 mg (61 %) bílé amorfní pevné látky.

IR (KBr) 3200-2500, 3060, 2963, 2871, 2245, 1729, 1702, 1621, 1453, 1219 cm’¹; 'HNMR (300 MHz, DMSO-d₆): δ 12,4 (brs, 1H), 7,77 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,69 (s, 1H), 720 (dd, 1H, J = 1,3, 8,5 Hz), 5,17 (kvintet, 1H, J = 7,6 Hz), 2,90 (q, 2H, J = 7,6 Hz), 2,75 (m, 1H), 1,9 - 2,3 (m, 16H), 1,7 (m, 2H), 1,28 (t, 3H, J = 7,6 Hz); MS (Cl, NH₃) m/z 366 (Μ+Ηζ báze); Analýza pro C22H27N3O2: vypočteno: C 72,29, H 7,45, N 11,50, nalezeno: C 71,98, H 7,75, N 11,21

Příklad 5

Cis-4—kyano-4-(l-€yklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-yl)cyklohexankarboxylová kyselina

Směs 381 mg (2,19 mmol, 1,0 ekv.) methylesteru cis-4-kyano-4-(l-cyklopentyl-3-ethyl-lHindazol-6-yl)cyklohexankarboxylové kyseliny ve 20 ml methanolu, 4 ml tetrahydrofuranu a 6,6 ml (6,57 mmol, 3,0 ekv.) 1M hydroxidu sodného se míchá při teplotě místnosti. Po 1,5 hodiny se reakční směs zkoncentruje v rotačním odpařováku a zbytek se zředí 100 ml vody. Vodná směs se okyselí na pH 1 a extrahuje 2 x 70 ml ethylacetátu. Organické extrakty se spojí, promyjí 1 x 50 ml vody a 1 x 50 ml vodného roztoku chloridu sodného, vysuší síranem sodným a přefiltrují. Filtrát se zkoncentruje a zbytek se vysuší. Výsledná bílá pevná látka (0,80 g) se přečistí na sloupci silikagelu za použití 5% methanolu v dichlormethanu, jako elučního činidla. Získá se 730 mg (91 %) bílé krystalické pevné látky a po překrystalování ze směsi ethylacetátu a hexanů 538 mg bílých krystalů o teplotě tání 197 až 199 °C.

IR (KBr) 3200-2600, 3061, 2961, 2948, 2939, 2871, 2245, 1732, 1625, 1451, 1255, 1185, 1169 cm¹; 'HNMR (300 MHz, DMSO-dí): δ 12,5 (brs, 1H), 7,77 (d, 1H, J = 8,6 Hz), 7,73 (s, 1H), 7,27 (dd, 1H, J = 1,5, 8,5 Hz), 5,13 (kvintet, 1H, J = 7,5 Hz), 2,90 (q, 2H, J = 7,6 Hz), 2,42 (m, 1H), 2,30 (m, 2H), 1,7 - 2,1 (m, 14H), 1,29 (t, 3H, J = 7,5 Hz); MS (Cl, NH₃) m/z 366 (M+H\ báze); Analýza pro C22H27N3O2: vypočteno: C 72,29, H 7,45, N 11,50, nalezeno: C 72,01, H 7,60, NI 1,29.

-24CZ 292825 B6

Příklad 6

A. 6-Brom-l-cyklohex-2-enyl-3-ethyl-lH-indazol

2,12 g (52,9 mmol, 1,05 ekv.) hydridu sodného (60% olejová disperze) se během 10 minut ve čtyřech dávkách přidá k roztoku 1+,35 g (50,4 mmol, 1,0 ekv.) 6-bromethyl-lH-indazolu ve 300 ml bezvodého dimethylformamidu o teplotě místnosti. Po 20minutovém míchání se ke vzniklé směsí přikape 9,0 ml (70,6 mmol, 1,4 ekv.) 3-bromcyklohexanu. Reakční směs se zkoncentruje a vysuší za vysokého vakua při teplotě místnosti. Získá se 7,52 g oranžovožluté pevné látky.

Tato pevná látka se rozpustí v bezvodém dimethylformamidu a ke vzniklému roztoku se přidá 1,56 g (31,8 mmol, 2,27 ekv.) kyanidu sodného. Reakční směs se 2,5 hodiny míchá při teplotě místnosti a poté nalije do 400 ml vody. Vodná směs se extrahuje 3 x 200 ml ethylacetátu. Organické extrakty se spojí, promyjí 3 x 150 ml vody a 1 x 150 ml vodného roztoku chloridu sodného, vysuší síranem sodným a přefiltrují. Filtrát se zkoncentruje a vysuší. Výsledný žlutý olej se přečistí na sloupci silikagelu za použití gradientu 5 až 10% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Získá se 1,40 g (38 %) žlutozeleného oleje.

MS (Cl, NH₃) m/z 269 (M+H, báze); Analýza pro Ci₇H₂]N₃: vypočteno: C 76,38, H 7,92, N 15,72, nalezeno: C 76,43, H 7,53, N 15,39

B. 6-Brom-l -cyklohexyl-3-ethyl-l H-indazol

Směs 10,22 g (33,5 mmol, 1,0 ekv.) 6-brom-l-cyklohex-2-enyl-3-ethyl-lH-indazolu a 1,5 g 10% platiny na uhlíku v 1 litru cyklohexanu se umístí do Parrova hydrogenačního zařízení a třepe za tlaku vodíku 13,74 až 34,35 kPa při teplotě místnosti. Po 1 hodině se reakční směs přefiltruje přes celit a filtrát se zkoncentruje v rotačním odpařováku. Zbytek se podrobí mžikové chromatografii za použití 5% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Získá se 9,70 g (94 %) světle žlutého oleje.

MS (Cl, NH₃) m/z 309/307 (M+Ff, báze); Analýza pro Ci5Hi₉N₂Br: Vypočteno: C 58,64, H 6,23, N 9,12, nalezeno: C 58,56, H 6,29, N 8,77

C. l-Cyklohexyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karbaldehyd

Způsobem popsaným v příkladu 2E se za použití 5,02 g (16,3 mmol, 1,0 ekv.) 6-brom-l-cyklohexyl-3-ethyí-lH-indazolu, jako výchozí látky, vyrobí sloučenina uvedená v nadpise (3,65 g, 87 %) ve formě světle žlutého oleje. MS (Cl, NH₃) m/z 257 (M+H*, báze); Analýza pro Ci₆H₂₀N₂O: vypočteno: C 74,97, H 7,87, N 10,93, nalezeno: C 75,00, H 7,70, N 10,74

D. (l-Cyklohexyl-3-ethyl-lH-indazol-6-yl)acetonitril

2,7 ml (21,0 mmol, 1,0 ekv.) trimethylsilylchloridu se přikape k suspenzi 3,58 g (14,0 mmol, 1,0 ekv.) l-cyklohexyl-3-ethyl-lH-indazoI-6-karbaldehydu a 2,31 g (26,6 mmol, 1,9 ekv.) bromidu lithného ve 100 ml bezvodého acetonitrilu o teplotě místnosti. Po 15 minutách se reakční směs ochladí v ledové lázni a přikape se k ní 4,1 ml (23,2 mmol, 1,66 ekv.) 1,1,3,3-tetramethyldisiloxanu. Reakční směs se během 30 minut nechá zahřát na teplotu místnosti, poté 3 hodiny zahřívá ke zpětnému toku, ochladí na teplotu místnosti a zředí 300 ml dichlormethanu. Dichlormethanová směs se přefiltruje přes celit. Filtrát se zkoncentruje a zbytek se vysuší za vysokého vakua při teplotě místnosti. Získá se 7,52 g oranžovožluté pevné látky.

Tato látka se rozpustí ve 100 ml bezvodého dimethylformamidu a ke vzniklému roztoku se přidá 1,56 g (31,8 mmol, 2,27 ekv.) kyanidu sodného. Reakční směs se 2,5 hodiny míchá při teplotě

-25CZ 292825 B6 místnosti a poté nalije do 400 ml vody. Vodná směs se extrahuje 3 x 200 ml ethylacetátu. Organické extrakty se spojí, promyjí 3 x 150 ml vody a 1 x 150 ml vodného roztoku chloridu sodného, vysuší síranem sodným a přefiltrují. Filtrát se zkoncentruje a vysuší. Výsledný žlutý olej se přečistí na sloupci silikagelu za použití gradientu 5 až 10% ethylacetátu v hexanech, jako 5 elučního činidla. Získá se 1,40 g (38 %) žlutozeleného oleje.

MS (Cl, NH3) m/z 268 (M+Ff, báze); Analýza pro CPH21N3: vypočteno: C 76,38, H 7,92, N 15,72, nalezeno: C 76,43, H 7,53. N 15,39

E. Dimethylester 4-kyano-4-(l-cyklohexyl-3-ethyl-lH-indazol-6-yl)heptandiové kyseliny

Způsobem popsaným v příkladu 2G se za použití 1,33 g (4,98 mmol, 1,0 ekv.) (l-cyklohexyl-3ethyl-lH-indazol-6-yl)acetonitrilu. jako výchozí látky, vyrobí sloučenina uvedená v nadpisu (1,38 g, 63 %) ve formě žlutého oleje. NIS (Cl, NH3) m/z 440 (M+hT, báze); Analýza pro 15 C25H33N3O4: vypočteno: C 68,32, H 7,57, N 9,56, nalezeno: C 68,18, H 7,52, N 9,28

F. Methylester 5-kyano-5-(l-cyklohexyl-3-ethyl-l H-indazol-6-yl)-2-oxocyklohexankarboxylové kyseliny

Způsobem popsaným v příkladu 2H se za použití dimethylesteru 4-kyano-4-(l-cyklohexyl-3ethyl-lH-indazol-6-yl)heptandiové kyseliny (1,33 g, 3,03 mmol, 1,0 ekv.), jako výchozí látky, vyrobí 983 mg (80 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě amorfní bílé pevné látky.

MS (Cl, NH3) m/z 408 (M+H⁺, báze); Analýza pro C24H29N3O3: vypočteno: C 70,75, H7,18, 25 N 10,31, nalezeno: C 70,75, H 7,33, N 10,19

G. l-(l-Cyklohexyl-3-ethyl-l H-indazol-6-yl)-4-oxocyklohexankarbonitril

Způsobem popsaným v příkladu 21 se za použití 933 mg (2,29 mmol, 1,0 ekv.) methylesteru 30 5-kyano-5-( l-cyklohexyl-3-ethyl-l H-indazol-6-yl)-2-oxocyklohexankarboxylové kyseliny, jako výchozí látky, vyrobí 588 mg (74 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě bílé amorfní pevné látky.

MS (Cl, NH₃) m/z 350 (Μ+1Γ, báze); Analýza pro C22H27N3O: vypočteno: C 75,62, H 7,79, 35 N 12,03, nalezeno: C 75,57, H 7,90, N 12,15

Příklad 7

Methylester cis-4-kyano-4-( 1 -cyklohexyl-3-ethyl-l H-indazol-6-yl)cyklohexankarboxylové kyseliny a methylester trans-4-kyano-4-(l-cyklohexyl-3-ethyl-lH-indazol-6-yl)cyklohexankarboxylové kyseliny

Způsobem popsaným v příkladu 3B se za použití 540 mg (1,20 mmol, 1,0 ekv.) l-(l-cyklo45 hexyl-3-ethyl-lH-indazol-6-yl)-4-[l,3]dithian-2-ylidencyklohexankarbonitrilu, jako výchozí látky, vyrobí 117 mg (25 %) titulního trans izomeru ve formě bílé olejovité pevné látky a 233 mg (50 %) titulního cis izomeru ve formě bílé krystalické pevné látky.

Trans izomer: ’H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,68 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,50 (d, 1H, J = 0,8 Hz), 50 7,13 (dd, 1H, J = 1,6, 8,5 Hz), 4,34 (m, 1H), 3,74 (s, 3H), 2,98 (q, 2H, J = 7,6 Hz), 2,85 (m, 1H),

2,35 (m, 2H), 1,9 - 2,2 (m, 12H), 1,8 (m, 2H), 1,55 (m, 2H), 1,37 (t, 3H, J = 7,6 Hz); Analýza pro C₂₄H3iN₃O₂: vypočteno: C 73,25, H 7,95, N 10,68, nalezeno: C 73,07, H 8,12, N 10,89

Cis izomer: *HNMR (300 MHz, CDCI3): δ 7,68 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,53 (d, 1H, J = 0,9 Hz), 55 7,14 (dd, 1H, J = 1,6, 8,5 Hz), 4,34 (m, 1H), 3,74 (s, 3H), 2,98 (2H, J = 7,6 Hz), 2,43 (m, 1H),

-26CZ 292825 B6

1,9-2,3 (m, 15H), 1,8 (m, 1H), 1,5 (m, 2H), 1,37 (t, 3H, J = 7,6 Hz); MS (Cl, NH₃) m/z 394 (M+H⁺, báze); Analýza pro C24H31N3O2: vypočteno: C 73,25, H 7,95, N 10,68, nalezeno: C 73,17, H 7,89, N 10,43

Příklad 8

Cis-4-kyano-4-( 1 -cyklohexyl-3-ethyl-l H-indazol-6-yl)cyklohexankarboxylová kyselina

Způsobem popsaným v příkladu 5 se za použití 201 mg (0,511 mmol, 1,0 ekv.) methylesteru cis-4-kyano-4-(l-cyklohexyl-3-ethyl-lH-indazol-6-yl)cyklohexankarboxylové kyseliny, jako výchozí látky, vyrobí 178 mg (92 %) bílé krystalické pevné látky. Z této látky se po překrystalování z ethylacetátu a hexanů získá 153 mg sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě bílého krystalického prášku o teplotě tání 192 až 194 °C.

Analýza pro C23H29N3O2: vypočteno: C 72,79, H 7,70, N 11,07, nalezeno: C 72,25, H 7,99, N 10,97

Příklad 9 l-(Cyklohexyl-3-ethyl-lH-indazol-6-yl)-cis—4-hydroxymethylcyklohexankarbonitril

K míchanému produktu z příkladu 8 (220 mg, 0,58 mmol) v suchém tetrahydrofuranu (5 ml) se při 0 °C přikape roztok boranu v tetrahydrofuranu (1M, 1,3 ml, 1,3 mmol). Reakční směs se 1 hodinu míchá při 0 °C, rozloží pomalým přídavkem methanolu (1 ml) a nalije do vody (100 ml). Vodná směs se extrahuje ethylacetátem (2 x 100 ml). Organické extrakty se spojí, promyjí vodou (1 x 20 ml) a vodným roztokem chloridu sodného (1 x 20 ml), vysuší síranem hořečnatým a zkoncentrují na olejovitý zbytek. Odděleně se provede stejný postup za použití produktu z příkladu 8 (100 mg, 0,26 mmol) a boranu v tetrahydrofuranu (1M, 0,6 ml, 0,58 mmol). Surový produkt z obou postupů se spojí a chromatografuje na silikagelu za použití 2,5% (objemově) methanolu v methylenchloridu. Olejovitý produkt se překrystaluje z ethylacetátu v hexanech, čímž se získá 214 mg bílé pevné látky (67 %) o teplotě tání 117 až 119 °C.

MS (m/z) 367 (M+l, 20) 366 (M+, 100)

Příklad 10

Amid Cis-4-kyano-4-( 1 -cyklohexyl-3-ethyl)-1 H-indazol-6-yl)cyklohexankarboxylové kyseliny

Směs produktu z příkladu 8 (150 mg, 0,4 mmol), thionylchloridu (36 μΐ, 0,49 mmol) a dimethylformamidu (5 μΐ) v suchém methylenchloridu (3 ml) se 4 hodiny zahřívá ke zpětnému toku, poté ochladí na 0 °C a nechá sejí probublávat plynný amoniak. Přidá se 200 ml chloroformu a směs se promyje vodou (1 x 40 ml), vysuší síranem hořečnatým a zkoncentruje na pevnou látku. Tato látka se překrystaluje ze směsi ethylacetátu a hexanů. Získá se 125 mg bílé pevné látky (83 %) o teplotě tání 180 až 182 °C.

Hmotnostní spektrum (m/e) (M+l, 20), 379 (M+, 100)

-27CZ 292825 B6

Příklad 11

Amid trans-4-kyano-4-( l-(cyklohexyl-3-ethyl)-4 H-indazol-6-yl)cyklohexankarboxylové kyseliny

Sloučenina uvedená v nadpisu se vyrobí podobným postupem, jaký je popsán v příkladu 4. Teplota tání izolovaného produktu je 140 až 143 °C.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Deriváty indazolu obecného vzorce I (I) kde

R představuje alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, skupinu -(CH₂)_n-cykloalkyl se 3 až 7 atomy uhlíku v cykloalkylové části, kde n představuje číslo 0 až 2, nebo arylskupinu se 6 až 10 atomy uhlíku, přičemž tato arylskupina je popřípadě substituována 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, hydroxyskupiny, alkylskupiny s 1 až 5 atomy uhlíku, alkenylskupiny se 2 až 5 atomy uhlíku, alkoxyskupiny s 1 až 5 atomy uhlíku, trifluormethylskupiny, nitroskupiny, skupiny CO₂R₉, C(O)NR₉Ri₀, NR₉Ri₀a SO₂NR₉R₁₀;

Ri představuje alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku;

R₂ představuje skupinu obecného vzorce ,CN

R* R⁵

Ri představuje vodík;

R₅ představuje skupinu R₉, OR₉, CH₂OR₉, kyanoskupinu, C(O)R₉, CO₂Rí>, C(O)NR₉Ri₀ nebo NR₉Rio;

nebo Ri a R₅, brány dohromady, představují skupinu =0; a

R₉ a Rio představuje každý nezávisle vodík nebo alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku;

a jejich farmaceuticky vhodné soli.
2. Deriváty indazolu podle nároku 1 obecného vzorce I, kde R představuje cyklohexylskupinu, cyklopentylskupinu, methylencyklopropylskupinu, izopropylskupinu, fenylskupinu nebo 4-fluorfenylskupinu, a jejich farmaceuticky vhodné soli.
3. Deriváty indazolu podle nároku 2 obecného vzorce I, kde R] představuje alkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku a jejich farmaceuticky vhodné soli.
4. Deriváty indazolu podle nároku 3 obecného vzorce I, kde Rj představuje ethylskupinu, a jejich farmaceuticky vhodné soli.
5. Deriváty indazolu podle nároku 3 obecného vzorce I, kde R₂ představuje skupinu obecného vzorce

R4 R5 a jejich farmaceuticky vhodné soli.
6. Deriváty indazolu podle nároku 1 zvolené ze souboru sestávajícího z l-(l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-yl)-4-oxocyklohexankarbonitrilu;

methylesteru trans-4-kyano-4-( l-cyklopentyI-3-ethyl-l H-indazol-6-yl)cyklohexankarboxylové kyseliny;

methylesteru cis-4-kyano-4-( 1 -cyklopentyl-3-ethyl-1 H-indazol-6-yl)cyklohexankarboxylové kyseliny;

l-(l-cyklohexyl-3-ethyl-lH-indazol-6-yl)-4-oxocyklohexankarbonitrilu;

methylesteru cis-4-kyano-4-( l-cyklohexyl-3-ethyl-l H-indazol-6-yl)cyklohexankarboxylové kyseliny;

methylesteru trans-4-kyano-4-( 1 -cyklohexyl-3-ethyl-1 H-indazol-6-yl)cyklohexankarboxylové kyseliny;

cis-4-kyano-4-( l-cyklohexyl-3-ethyl-l H-indazol-6-yl)cyklohexankarboxylové kyseliny;

trans-4—kyano-4-(l-cyklohexyI-3-ethyl-lH-indazol-6-yl)cyklohexankarboxylové kyseliny;

l-(cyklohexyl-3-ethyl-lH-indazol-6-yl)cis-4-hydroxymethylcyklohexankarbonitrilu;

amidu cis-4-kyano-4-(l-(cyklohexyl-3-ethyl)-lH-indazol-6-yl)cyklohexankarboxylové kyseliny; a

-29CZ 292825 B6 amidu trans-4-kyano-4-( 1 -(cyklohexyl-3-ethyl)-1 H-indazol-6-yl)cyklohexankarboxylové kyseliny.
7. Sloučeniny obecného vzorce XXXX (XXXX) kde

R představuje alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, skupinu -(CH2)_n-cykloalkyl se 3 až 7 atomy uhlíku v cykloalkylové části, kde n představuje číslo 0 až 2, nebo arylskupinu se 6 až 10 atomy uhlíku, přičemž tato arylskupina je popřípadě substituována 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, hydroxyskupiny, alkylskupiny s 1 až 5 atomy uhlíku, alkenylskupiny se 2 až 5 atomy uhlíku, alkoxyskupiny s 1 až 5 atomy uhlíku, trifluormethylskupiny, nitroskupiny, skupiny CO2R9, C(0)NR9Rio, NR9R10 a SO2NR9R10;

Ri představuje alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku;

R₉ a R₁₀ představuje každý nezávisle vodík nebo alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku; a

X představuje brom, skupinu -C(O)O-alkyl s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylové části, -CH₂CN, karboxyskupinu, -CH₂OH nebo -C(O)H;

přičemž když Rj představuje methylskupinu a X představuje brom, potom je R odlišný od fenylskupiny substituované v poloze para nitroskupinou nebo aminoskupinou a fenylskupiny substituované skupinou vzorce OCH₃ nebo COONa.
8. Sloučeniny podle nároku 7, kde R představuje cyklohexylskupinu, cyklopentylskupinu, methylencyklopropylskupinu, izopropylskupinu, fenylskupinu nebo 4-fluorfenylskupinu a R] představuje ethylskupinu.
9. Sloučeniny podle nároku 8, kde X představuje brom.
10. Sloučeniny obecného vzorce XIX (XIX)

-30CZ 292825 B6 kde

R představuje alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, skupinu -(CHíjn-cykloalkyl se 3 až 7 atomy uhlíku v cykloalkylové části, kde n představuje číslo 0 až 2, nebo arylskupinu se 6 až 10 atomy uhlíku, přičemž tato arylskupina je popřípadě substituována 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, hydroxjskupiny, alkylskupiny s 1 až 5 atomy uhlíku, alkenylskupiny se 2 až 5 atomy uhlíku, alkoxyskupiny s 1 až 5 atomy uhlíku, trifluormethylskupiny, nitroskupiny, skupiny CO2R9, C(Ó)NR₉R]₀, NR9R10 a SO2NR9R10;

Ri představuje alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku;

R₉ a R10 představuje každý nezávisle vodík nebo alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku.
11. Sloučeniny podle nároku 10, kde R představuje cyklohexylskupinu, cyklopentylskupinu, methylencyklopropylskupinu, izopropylskupinu, fenylskupinu nebo 4-fluorfenylskupinu a Rj představuje ethylskupinu.
12. Farmaceutická kompozice pro inhibici fosfodiesterázy (PDE) typu IV nebo produkce faktoru nekrózy nádorů (TNF) u savců, vyznačující se tím, že zahrnuje terapeuticky účinné množství derivátu indazolu obecného vzorce I podle nároku 1 nebo jeho farmaceuticky vhodné soli a farmaceuticky vhodný nosič.
13. Použití derivátu indazolu obecného vzorce I podle nároku 1 nebo jeho farmaceuticky vhodné soli pro výrobu léčiva pro léčení chorob, u nichž je indikována inhibice fosfodiesterázy (PDE) typu IV nebo inhibice produkce faktoru nekrózy nádorů (TNF).
14. Farmaceutická kompozice pro prevenci nebo léčbu astma, zánětů kloubů, rheumatoidní arthritis, dnavé arthritis, rheumatoidní spondylitis, osteoarthritis a jiných artritických stavů; sepse, septického šoku, endotoxického šoku, sepse vyvolané gram negativními bakteriemi, syndromu toxického šoku, syndromu akutního respiračního distresu, cerebrální malárie, chronické zánětlivé choroby plic, silikosy, pulmonámí sarkoidózy, resorpce kosti, reperfuzního poranění, reakce graft-versus-host, odmítání alloštěpu, horečky a myalgie vyvolané infekcí sekundární kachexie vyvolané infekcí nebo maligním procesem, sekundární kachexie vyvolané syndromem získané imunitní nedostatečnosti (AIDS), AIDS, HIV, ARC („AIDS related complex“), tvorby keloidů, tvorby jizvové tkáně, Crohnovy choroby, ulcerativní kolitis, pyresis, roztroušené sklerózy, diabetes mellitus typu 1, autoimunitní diabetes, systemického lupus erythrematosus, bronchitis, chronické obstrukční choroby dýchacích cest, psoriasis, Bechetovy choroby, anafylaktoidní purpury, nefritis, chronické glomerulonefritis, zánětlivé choroby střev, leukémie, alergické rhinitis nebo dermatitis, u savců, vyznačující se tím, že obsahuje terapeuticky účinné množství derivátu indazolu obecného vzorce I podle nároku 1 nebo jeho farmaceuticky vhodné soli a farmaceuticky vhodný nosič.
15. Použití derivátu indazolu obecného vzorce I podle nároku 1 nebo jeho farmaceuticky vhodné soli pro výrobu léčiva pro léčení astma, zánětů kloubů, rheumatoidní arthritis, dnavé arthritis, rheumatoidní spondylitis, osteoarthritis a jiných artritických stavů; sepse, septického šoku, endotoxického šoku, sepse vyvolané gram negativními bakteriemi, syndromu toxického šoku, syndromu akutního respiračního distresu, cerebrální malárie, chronické zánětlivé choroby plic, silikosy, pulmonámí sarkoidózy, resorpce kosti, reperfuzního poranění, reakce graft-versus-host, odmítání alloštěpu, horečky a myalgie vyvolané infekcí sekundární kachexie vyvolané infekcí nebo maligním procesem, sekundární kachexie vyvolané syndromem získané imunitní nedostatečnosti (AIDS), AIDS, HIV, ARC („AIDS related complex“), tvorby keloidů, tvorby jizvové tkáně, Crohnovy choroby, ulcerativní kolitis, pyresis, roztroušené sklerózy, diabetes mellitus typu 1, autoimunitní diabetes, systemického lupus erythrematosus, bronchitis, chronické

-31 CZ 292825 B6 obstrukční choroby dýchacích cest, psoriasis, Bechetovy choroby, anafylaktoidní purpury, nefritis, chronické glomerulonefritis, zánětlivé choroby střev, leukémie, alergické rhinitis, deprese, multiinfarktové demence nebo dermatitis.