CZ71099A3 - Deriváty indazolu, farmaceutické kompozice na jejich bázi, meziprodukty a způsob léčení chorob - Google Patents

Abstract

Deriváty indazolu obecného vzorce I, kde obecné symboly mají specifický významajejich farmaceuticky vhodné soli, farmaceutické kompozice najejich bázi a použití těchto sloučenin pro inhibici fosfodiesterasy PDEtypu IV nebo produkce faktoru nekrosy nádorů u savců. Meziprodukty pro přípravu výše uvedených sloučenin.

Description

Oblast techniky

Vynález se týká derivátů indazolu, které jsou selektivními inhibitory fosfodiesterasy (PDE) typu IV nebo produkce faktoru nekrosy nádorů (TNF) a jako takové jsou užitečné při léčbě asthma, arthritis, bronchitis, chronické obstruktivní choroby dýchacích cest, psoriasis, alergické rhinitis, dermatitis a jiných zánětlivých chorob, poruch centrálního nervového systému, jako je deprese a multiinfarktová demence, AIDS, septického šoku a jiných chorob zahrnujících produkci TNF. Vynález se také týká způsobu používání těchto sloučenin při léčbě výše uvedených chorob u savců, zejména lidí, a farmaceutických kompozic, které tyto sloučeniny obsahují.

Dosavadní stav techniky

Deriváty indazolu, které jsou selektivními inhibitory PDE typu IV a produkce faktoru nekrosy nádorů, jsou rovněž popsány a nárokovány v následujících souvisejících, ještě nevyřízených prozatímných patentových přihláškách: US prozatímní přihláška č. 60/021 072, podaná 27. června 1996; US prozatímní přihláška č. 60/020 385, podaná 25. června 1996 a US prozatímní přihláška č. 60/016 861, podaná 3. května 1995. Tyto dokumenty jsou zde citovány náhradou za přenesení celého jejich obsahu do tohoto textu.

Od té doby, co se zjistilo, že cyklický adenosinfosfát (AMP) je intracelulárním druhým mediátorem (E. W.

Φ Φ φ φ φ φ φ φ φ φ · · • φφφ φφφ

Sutherland and Τ. W. Rall, Pharmacol Rev., 12, 265, 1960), se stala inhibice fosfodiesteras cílem pro modulaci, a v dů sledku toho pro terapeutickou intervenci u řady chorobných procesů. V pozdější době byly zjištěny určité třídy PDE (J. A. Beavo et al., Trends in Pharm. Sci. (TiPS), 11, 150,

1990) a jejich selektivní inhibice vedla ke zlepšené chemoterapii (C. D. Nicholson a M. S. Hahid, TIPS, 12, 19,

1991) . Zejména se zjistilo, že inhibice PDE typu IV může vést k inhibici uvolňování mediátoru zánětu (M. W. Verghese et al., J. Mol. Cell Cardiol., 12 (suppl. II) S 61, 1989) a relaxaci hladkého svalstva dýchacích cest (T. J. Torphy, Directions for New Anti-Asthma Drugs, ed. S. R. 0'Donnell a C. G. A. Persson, 1988, 37, Birkhauser-Verlag). Sloučeniny, které inhibují PDE typu IV, ale které mají nízkou účinnost proti jiným typům PDE, budou tedy inhibovat uvolňování mediátorů zánětů a vyvolávat relaxaci hladkého svalstva dýchacích cest bez toho, že by měly kardiovaskulární účinky nebo účinky proti krevním destičkám. Také bylo publikováno, že inhibitory PDE_IV jsou užitečné při léčení diabetes insipidus (Kidney Int. 37: 362, 1990; Kidney Int. 35: 494) a poruch centrálního nervového systému, jako je deprese a multiinfarktová demence (mezinárodní přihláška PCT WO 92/19594, publikovaná 12. listopadu 1992).

O TNF je známo, že se podílí na mnoha infekčních a autoimunitních chorobách (W. Friers, Fed. of Euro. Bio. Soc. (FEBS) Letters, 285, 199, 1991). Dále se ukázalo, že TNF je hlavním mediátorem zánětlivé odpovědi pozorované při sepsi a septickém šoku (C. E. Spooner et al., Clinical Immunology and Immunopathology, 62 Sil, 1992).

Podstata vynálezu

Předmětem vynálezu jsou deriváty indazolu obecného vzorce I «·

(I) atomy až 2, kde

R představuje vodík, alkylskupinu s 1 až 9 uhlíku, skupinu -(CH₂)_m-(5- až 10-členný heterocyklyl), kde m před- stavuje číslo alkoxyalkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v alkoxylové a 1 až 6 atomy uhlíku v alkylové části, alkenylskupinu se 2 až 6 atomy uhlíku nebo skupinu -(Z₁)_b(Z₂)_c-aryl se 6 až 10 atomy uhlíku v arylové části, kde bac představuje každý nezávisle číslo 0 nebo 1, Z₃ představuje alkylenskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo alkenylenskupinu se 2 až 6 atomy uhlíku a Z₂ představuje kyslík, síru, skupinu S0₂ nebo NR₁₂, přičemž uvedené skupiny R jsou popřípadě substituovány jedním až třemi substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, hydroxyskupiny, alkylskupiny s 1 až 5 atomy uhlíku, alkenylskupiny se 2 až 5 atomy uhlíku, alkoxyskupiny s 1 až 6 atomy uhlíku, trifluormethylskupiny, nitroskupiny, skupiny CO₂R₁₂, C(O)NR₁₂R₁₃, NR₁₂R₁₃ a SO₂NR^₂R237

Rj představuje vodík, alkylskupinu s 1 až 9 atomy uhlíku, alkenylskupinu se 2 až 3 atomy uhlíku nebo fenylskupinu, přičemž alkylové, alkenylové a fenylové zbytky v R-^ jsou popřípadě substituovány 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z methylskupiny, ethylskupiny, trifluormethylskupiny a halogenu?

9 9

9 9 9 9

9

99

R₂ představuje R_ig nebo skupinu vzorce

-C(0)NR₁₂(CHR₁₂)_mC(O)NR₁₂O(CH₂)q(aryl) se 6 až 10 atomy uhlíku v arylové části,

-C(=NR₃₂)NH(CH₂)p(aryl) se 6 až 10 atomy uhlíku v arylové části,

-C(O)NR₈(CHR₁₂)_mC(O)NR₁₂(CH₂)_pOR₁₂, -C(O)NR₁₂(CHRi2)_mS(alkyl) s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, -C(=NOC(O)R₂₅)R₂₆,

-cr₁₇r₁₈chr₂₈nr₉so₂(CH₂)pA,

-CR₁₇R₁₈CHR₂₈NR_gP(O)(OR₁₂)C(O)(alkyl) s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části,

-CR₁₇R₁₈CHR₂₈NR_gP(O)(alkoxy)₂ s 1 až 4 atomy uhlíku v každé z alkoxylových částí, -Z₃-R₇ nebo -(CR₁₇R₁₈)_mNR₉(C(O))_qR₁₀, kde p představuje číslo 0 až 2, m představuje číslo 1 až 6 a q představuje číslo 1 nebo 2; nebo R² představuje skupinu obecného vzorce Ia, lb, Ic, Id, Ie, If, Ig, Ih nebo li, • · 9 · •

9

9 99

9 9 9

9 9 9

999 999

9

9.9 9 9

(Ih) <Ii>

• · · · · • « · » · ·* » • 9 9 • 99 99 99 přičemž ve výše uvedených vzorcích Ia až li jsou struktury obecných vzorců lf a Ig ke zbytku molekuly obecného vzorce I připojeny přes uhlíkový atom v poloze 5, 6 nebo 7 obecného vzorce lf a Ig, přerušovaná čára v obecných vzorcích Ic a Id představuje jednoduchou nebo dvojnou vazbu, s tou výjimkou, že když přerušovaná čára označuje dvojnou vazbu v obecných vzorcích Ic a Id Rg chybí, n představuje číslo 0 až 2, p představuje číslo 0 až 6 a m představuje číslo 0 nebo 1;

R₃ představuje skupinu vzorce -C(O)N(CH₃)(OCH₃) nebo

-(CH₂)_nOH, kde n představuje číslo 0 až 4;

R₄ a R₅ představuje každý nezávisle vodík, ethylskupinu nebo skupinu -CO₂H nebo -C(O)NHOH;

R₆ představuje vodík, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, skupinu -0C(0)(alkyl) s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylové části nebo OC(O)(aryl) se 6 až 10 atomy uhlíku v arylové části;

R₇ představuje arylskupinu se 6 až 10 atomy uhlíku nebo pěti- až desetičlenný heterocyklyl, přičemž každá ze skupin ve významu R_? je popřípadě substituována 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, trifluormethylskupiny, kyanoskupiny, nitroskupiny,

-CO₂R₁₂, alkoxyskupiny s 1 až 4 atomy uhlíku,

-OC(O)(alkyl) s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, -NR₁₂C(O)(alkyl) s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, -C(O)NH₂, -C(O)NHOH,

-C(O)O(alkyl) s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, alkylskupiny s 1 až 4 atomy uhlíku, • · • · · · 9 • 99 9

9 ·

999 999

-S(O)_nR^₂/ kde n představuje číslo 0 až 2, benzoylskupiny, -NR₁₂R₁₃, -0R₁₂, alkanoylskupiny s 1 až 6 atomy uhlíku, -Y-j^-faryl) se 6 až 10 atomy uhlíku v arylové části, -C(O)O(aryl) se 6 až 10 atomy uhlíku v arylové části, -NH(aryl) se 6 až 10 atomy uhlíku v arylové části, -C(O)NH(aryl) se 6 až 10 atomy uhlíku v arylové části, -C(O)NR^₂O(CH₂)_n~ (aryl) se 6 až 10 atomy uhlíku v arylové části, kde n představuje číslo 1 až 3 a skupiny -SO₂NH(aryl) se 6 až 10 atomy uhlíku v arylové části;

Rg představuje vodík, alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo skupinu -(CH₂)_n(aryl), kde n představuje číslo 0 až 4, se 6 až 10 atomy uhlíku v arylové části;

R_g představuje vodík nebo skupinu -0R₁₂, -(CH₂)_mA nebo

-CH₂O(CH₂)_mA, kde m představuje číslo 0 až 2;

R₁₀ představuje alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, skupinu -OR₁₂, -CR₁₂ ^r13^OR12' ^-CR12^R13^NR12^R13'

-CR₁₂(0R₁₃)CR₁₂R₁₃OR₁₂, 2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-ylskupinu, -NR₁₂C(O)NR₁₂R₁₃, -S(CR₁₂R₁₃)_nCH₃, kde n představuje číslo 0 až 5, -NR₁₂(CH₂)g(pyridyl), kde q představuje číslo 0 nebo 1,

-P(O)(alkoxy)₂ s 1 až 4 atomy uhlíku v každé z alkoxylových částí, -NR₁₂R₁₃, -NR₁₂OR₁₃,

NR^₂NR2.₃Rjl3_ / “NRi₂CH₂ ^ri^ , OCH₂NRj_₂C(O)R2_^ , -OCH₂C(O)NR₁₅R₁₆, -OCHR₁₂OC(O)(alkyl) s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, -OCHR₁₂C(O)(alkoxy) s 1 až 3 atomy uhlíku v alkoxylové části,

-O(CH₂)_mR_i:L nebo -NR₁₂(CH₂)_mR₁₁, kde m představuje číslo 0 až 2;

R_1;l představuje vodík nebo A;

• 4 · · • · 4 · • 4 4 4 • 4 4 4 · · ·

4

4 4 4

R₁₂ ^{a R}i3 představuje každý nezávisle vodík nebo alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku;

Rj₄ představuje methylskupinu nebo fenylskupinu;

R₁₅ představuje vodík, methylskupinu, ethylskupinu nebo skupinu -CH2CH2OH;

R_lg představuje vodík, methylskupinu, ethylskupinu skupinu -CH₂C(O)NH₂ nebo -CH₂CH₂OH;

R₁₇ představuje nezávisle při každém svém výskytu vodík, hydroxyskupinu, kyanoskupinu, halogen, alkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, skupinu NR₁₂R₁₃, -C(O)OR₁₂, “C(O)R^2/ CH-—CR^2^Ri3 , “C=CR^2z ^^R2^R^12^13^z -CH2OR₁₂, -C(O)NR₁₂ ^r13' -C(Y5)H nebo -CH2NRi2C(0)C(°)N^Ri2Ri3z přičemž když R17 představuje hydroxyskupinu, potom R₁₈ představuje atom vodíku nebo alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku;

R₁₈ při každém svém výskytu nezávisle představuje vodík, fluor, kyanoskupinu nebo alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, přičemž uvedená methylskupina je popřípadě substituována 1 až 3 fluorovými substituenty ; nebo

R₁₇ a ^2.8' k^ranY dohromady, představují oxoskupinu (=0);

R₁₉ představuje fenyl-, naftyl-, pyrrolyl-, furyl-, thienyl-, oxazolyl-, pyridyl-, pyrimidinyl-, pyridazinyl-, chinolyl-, isochinolyl-, 5,6,7,8-tetrahydrochinolyl- nebo 5,6,7,8-tetrahydroisochinolylskupinu, z nichž každá, s výjimkou fenylskupiny, je popřípadě substituována 1 až 3 substituenty R₂₃ a fenylskupina uvedená v definici R_ig je popřípadě subtituována 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z R₂₃ a R₂₄;

^R20 ^R21 představuje skupinu -C(O)R₂₁, -C(O)C(O)R₂₁, -C(O)C(Y₂)C(O)R₂₁ nebo

A. x**» představuje vodík, skupinu -OR₂₂, -NHR₂₂, -NHOH, -NHNH₂, -(CH₂)_nY₃(fenyl) nebo -(CH₂)_nY₃(pyridyl), kde n představuje číslo 0 až 4;

R₂₂ představuje vodík, alkylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku nebo skupinu -(CH₂)_nY₃(fenyl) nebo -(CH₂)_nY₃(pyridyl), kde n představuje číslo 0 až 4

R₂₃ při každém svém výskytu nezávisle představuje halogen, alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 7 atomy hlíku, alkylendioxyskupinu se 2 až 6 atomy uhlíku, trifluormethylskupinu, -NR₁₂R₁₃, nitroskupinu, -C(NR₁₂)NR₁₂R₁₃, -c(o)nr₁₂r₁₃c(o)r₁₂, -c(nor₁₂)r₁₃, -c(ncn)nr₁₂r₁₃, -C(NCN)SR₁₂, -(CH₂)_m(CN), kde m představuje číslo 0 až 3, hydroxyskupinu, -C(O)R₁₂, -C(O)NR₁₂OR₁₃, -c(o)nr₁₂nr₁₂r₁₃, -oc(o)nr₁₂r₁₃, -nr₁₂c(o)r₁₂, —C(O)C(O)NRj.2^R13 ' ~^*^2^R12^Í ~^^2^R12^/ — SO2NR^2^13 ⁹ ~C(O)NRj2^R13^{9 -RR}12®®2^R13 uebo —NR^2^(O)NR2_2^R13'

• · • · ··» · ·**

R24 při každém svém výskytu nezávisle představuje imidazolyl-, pyrazolyl-, triazolyl-, tetrazolyl-, oxazolyl-, isoxazolyl-, oxadiazolyl-, thiadiazolyl-, thiazolyl-, oxazolidinyl-, thiazolidinylnebo imidazolidinylskupinu, z nichž každá je popřípadě substituována 1 až 3 substituenty R₂₃;

R₂₅ představuje skupinu -NR₁₂R₁₃, -NH(aryl) s se 6 až atomy uhlíku v arylové části, alkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo aryloxyskupinu se 6 až 10 atomy uhlíku;

R₂₆ představuje vodík, alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo skupinu -(CH₂)^4(fenyl), kde m představuje číslo 0 až 4 a fenylová část uvedené skupiny -(CH₂)_mY₄(fenyl) je popřípadě substituována halogenem, skupinou OR₁₂, alkanoyloxyskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, aryloxyskupinou se 6 až 10 atomy uhlíku, skupinou -NR₁₂R₁₃, -NH(aryl) se 6 až 10 atomy uhlíku nebo -NHC(O)(alkyl) s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části;

R₂₇ představuje při každém svém výskytu nezávisle halogen, skupinu -(CH₂)pNR₁₂C(O)CH₃, kde p představuje číslo 1 až 5, nitroskupinu, kyanoskupinu, —NRj₂R^₃ , -CO₂R^₂' ~θ^12 ' ~^Y1)^12^3^z -NR₁₂C(NCN)S(alkyl) s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylové části, -NR₁₂C(NCN)NR₁₂R₁₃,

-NR₁₂C (O) NR^l ₂R_{t 3} , -NR^l ₂C (O) C (O) NR_X jjRj ₃ , -C(=NR₁₂)NR₁₂R₁₃, -S(O)_mCH₃, kde m představuje číslo 0 až 2, -C(=NR₁₂)S(alkyl) s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylové části, -NR₁₂SO₂(alkyl) s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylové části, -OC(O)R₁₂, -oc(o)nr₁₂r₁₃, -nr₁₂so₂cf₃, -nr₁₂c(o)c(o)or₁₂, -NR₁₂C(O)R₁₂, -NR₁₂C(O)OR₁₂, imidazolyl-, • 4 4

4 4

4 4 00 0 thiazolyl-, oxazolyl-, pyrazolyl-, triazolyl- nebo tetrazolylskupinu;

R₂s představuje vodík, fluor, kyanoskupinu nebo alkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku, přičemž uvedená alkylskupina je popřípadě substituována 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, skupiny -C(O)NR₁₂ ^Ri3 ^a ~C(O)OR₁₂;

R_2g představuje fenylskupinu popřípadě substituovanou 1 nebo 2 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího ze skupiny -NR₁₂R₁₃, nitroskupiny, halogenu a skupiny -0R₁₂, -NHR_3Q, -NR_3QR₃₁ a -C(O)OR₁₂;

R₃₀ a R₃₁ představuje každý nezávisle alkylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku nebo alkenylskupinu se 2 až 8 atomy uhlíku;

R₃₂ představuje pyridin-4-ylskupinu popřípadě substituovanou 1 nebo 2 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu a alkylskupiny s 1 až 4 atomy uhlíku;

A při každém svém výskytu nezávisle představuje alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, pyridyl-, morfolinyl-, piperidyl-, imidazolyl-, thienyl-, pyrimidinyl-, thiazolyl-, triazolyl, chinolyl-, fenyl- nebo naftylskupinu, přičemž každá z výše uvedených skupin ve významu A je popřípadě substituována 1 až 3 substituenty R₂₇, nebo A představuje skupinu -(CH₂)gS(alkyl) s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, kde q představuje číslo 1 nebo 2;

• » ·

W představuje kyslík, skupinu NOH, NNH₂, NOC(O)CH₃ nebo NNHC(O)CH₃;

představuje kyslík nebo síru;

Y₂ představuje kyslík, skupinu NOH nebo dva atomy vodíku;

Y₃ představuje vazbu nebo skupinu -CH=CH-;

Y₄ představuje vazbu, kyslík, síru nebo skupinu -NH

Y₅ představuje kyslík, skupinu NR₁₂, NOR₁₂, NCN, c(cn)₂, cr₁₂no₂, cr₁₂c(o)or₁₂, cr₁₂c(o)nr₁₂r₁₃,

C(CN)NO₂, C(CN)C(O)OR₁₂ nebo C(CN)C(O)NR₁₂R₁₃; a

Z₃ představuje skupinu -NR₁₂~, -(CH₂)_m-, “^CH2C(O)NH

-nhch₂c(o)-, -ch₂c(y₁)ch₂-, -CH=CH-, —C=C—, -CHfY-jH)-, -C(Y₁)-, -ch₂c(y₁), -c(y₁)ch₂-, -c(y₁)c(y₁)-, -ch₂nr₁₂, -ch₂-y₁-,

-C(Y₁)NR₈(CHR₁₂)_n-, -NRqCÍY-l) (CHR₁₂)_n-, -NHCH₂, -y₁-ch₂-, -soch₂, -ch₂so-, -so₂ch₂-, -ch₂so₂-, -OC(Y·^-, -N=N-, -NHSO₂-, -SO₂NH-, -C (Υ_χ ) C (Υ_χ )NH -NHC(O)O-, -OC(O)NH- nebo NHC(O)NH-, kde n představuje číslo 0 až 4 a m představuje číslo 1 až 3;

a jejich farmaceuticky vhodné soli.

Předmětem vynálezu jsou také sloučeniny obecného vzorce XXXX

(XXXX) » · ·»· kde R a mají výše uvedený význam a X představuje skupinu -C(O)C1. Sloučeniny výše uvedeného vzorce jsou meziprodukty užitečnými pro přípravu sloučenin obecného vzorce I.

Jako příklady konkrétnějšího provedení je možno uvést sloučeniny obecného vzorce I, kde R₂ představuje skupinu -Z-j-Ry, kde Z₃ představuje skupinu -CCYjJNH-, -C(O)CH₂-, -NHC(Y₁)-, -Y₁-CH₂-, -0C(0)-, -CH=CH- nebo -C(Y₁)C(Y₁)- a R₇ představuje popřípadě substituovanou arylskupinu nebo heteroarylskupinu zvolenou ze souboru sestávajícího z fenyl-, pyridyl-, pyrazinyl-, thienyl-, pyrimidinyl-, 2,4-dioxopyrimidin-5-yl-, isoxazolyl-, isothiazolyl-, pyridazinyl- a 1,2,4-triazinylskupiny. Konkrétněji R₇ představuje substituovanou fenylskupinu,

2,6-dihalogensubstituovanou fenylskupinu nebo 3,5-dihalogenpyrid-4-ylskupinu.

Jako jiné příklady konkrétnějšího provedení je možno uvést sloučeniny obecného vzorce I, kde R₂ představuje skupinu -Z₃-R₇, kde Z₃ představuje skupinu -C(O)NH(CH₂)_nnebo -NHC(O)(CH₂)_n-, kde n představuje číslo 0 nebo 1 a R_? představuje fenylskupinu nebo pyridylskupinu popřípadě substituovanou 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, nitroskupiny, trifluormethylskupiny , -CO₂CH₃, methylskupiny, methoxyskupiny a -c(o)nh₂.

Jako jiné příklady konkrétnějšího provedení je možno uvést sloučeniny obecného vzorce I, kde R₂ představuje skupinu -Z₃-R₇, kde Z₃ představuje skupinu -C(O)NH- a R₇ představuje fenylskupinu nebo pyridylskupinu popřípadě substituovanou 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, alkylskupiny s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupiny s 1 až 4 atomy uhlíku, kyano- 14 • 4 44 • 4 4 <

• 4 4 4 * · 4 · 4 • 4

4 4· skupiny, karboxyskupiny a skupiny -0C(0)(alkyl) s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části.

Jako jiné příklady konkrétnějšího provedení je možno uvést sloučeniny obecného vzorce I, kde R₂ představuje skupinu R_ig, kde R_ig představuje popřípadě substituovanou pyrimidinylskupinu nebo popřípadě substituovanou pyridazinylskupinu.

Jako jiné příklady konkrétnějšího provedení je možno uvést sloučeniny obecného vzorce I, kde R₂ představuje zbytek obecného vzorce Ih, kde R_2Q představuje skupinu

kde R₂₁ představuj eskupinu -OR₂₂, -NHR₂₂ nebo -NHOH a R₂₂ představuje vodík, alkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, benzylskupinu nebo pyridylmethylskupinu.

Jako jiné příklady konkrétnějšího provedení je možno uvést sloučeniny obecného vzorce I, kde R₂ představuje fenylskupinu substituovanou zbytkem R₂₄, kde ^R24 představuje oxadiazolyl-, thiadiazolyl- nebo tetrazolylskupinu, z nichž každá je popřípadě substituována alkylskupinou s 1 až 2 atomy uhlíku, nebo R₂ představuje fenylskupinu substituovanou kyanomethylskupinou, hydroxyskupinou nebo formylskupinou.

Jako jiné příklady konkrétnějšího provedení je možno uvést sloučeniny obecného vzorce I, kde R₂ představuje ····· · · ·· · · • * · ♦ · · · ♦ · · ♦ • 9 · · · · · · • · · · ·····»·· • · » · 9 9

999 9 999 999 99 99 skupinu -Ζβ-Ry, kde Z₃ představuje skupinu -CCY-jjNH- a R_? představuje fenyl-, pyrazinyl-, pyrimidinyl-, isoxazolylnebo pyridylskupinu, z nichž každá je popřípadě substituována 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, methoxykarbonylskupiny, trifluormethylskupiny, benzoylskupiny, acetylskupiny, dimethylaminoskupiny, hydroxyskupiny, nitroskupiny, methylskupiny, kyanoskupiny, methylsulfonylskupiny a methylthioskupiny.

Jako jiné příklady konkrétnějšího provedení je možno uvést sloučeniny obecného vzorce I, kde R₂ představuje skupinu -C(=NOC(O)R₂₅R26z kde R₂₅ představuje aminoskupinu a R₂₆ představuje vodík, alkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku nebo -(CH₂)_m(fenyl), kde m představuje číslo 1 až 4 a uvedená fenylová část je popřípadě substituována halogenem, hydroxyskupinou, acetoxyskupinou, aminoskupinou nebo acetamidoskupinou.

Jako jiné příklady konkrétnějšího provedení je možno uvést sloučeniny obecného vzorce I, kde R₂ představuje skupinu -(CR₁₇R₁₈)_mNR_g(C(O))gR₁₀, kde m představuje číslo 2, q představuje číslo 2, R₁₇ představuje vždy nezávisle vodík, kyanoskupinu nebo methylskupinu a R_lg představuje vždy nezávisle vodík nebo methylskupinu, R_g představuje vodík nebo methylskupinu a R_lo představuje aminoskupinu, hydroxyskupinu, methoxyskupinu nebo hydroxyaminoskupinu.

Jako jiné příklady konkrétnějšího provedení je možno uvést sloučeniny obecného vzorce I, kde R₂ představuje skupinu -(CR₁₇R₁₈)_mNR_g(C(O))gR₁₀, kde m představuje číslo 2, q představuje číslo 1, R₁₇ představuje vždy nezávisle vodík, -C(O)NH₂, -C=CH, kyanoskupinu, formylskupinu, hydroxymethy1skupinu nebo trifluormethylskupinu a R₁₈ představuje vždy nezá visle vodík nebo kyanoskupinu a R₁₀ představuje alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku.

Jako jiné příklady konkrétnějšího provedení je možno uvést sloučeniny obecného vzorce I, kde R₂ představuje zbytek obecného vzorce Ic, Id nebo Ie, přičemž v obecných vzorcích Ic a Id R_g představuje vodík, hydroxyskupinu, alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku nebo alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku.

Jako jiné příklady konkrétnějšího provedení je možno uvést sloučeniny obecného vzorce I, kde R₂ představuje skupinu -C(O)NRg(CHR₁₂)_mC(O)NR₁₂(CH₂)pOR₁₂ nebo -C(O)NR₁₂(CHR₁₂)_lnS(alkyl) s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, kde R_g, R^₂z ^{m a} P mají výše uvedený význam.

Jako příklady konkrétních sloučenin obecného vzorce I lze uvést:

(3,5-dichlorpyridin-4-yl)amid l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny;

(2,6-dichlorfenyl)amid l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6karboxylové kyseliny;

(3,5-dichlorpyridin-4-yl)amid l-cyklobutyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny;

(3,5-dichlorpyridin-4-yl)amid 3-ethyl-l-isopropyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny;

(3,5-dichlorpyridin-4-yl)amid l-cyklopropylmethyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny;

(3,5-dichlorpyridin-4-yl)amid l-cyklohexyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny;

• ·· · · ·· 9 9

99

9 9 9 (3,5-dichlorpyridin-4-yl)amid 3-ethyl-l-(4-fluorfenyl)-1Η-indazol-6-karboxylové kyseliny;

hydroxykarbamoylmethylamid l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny;

(2-methylsulfanylethyl)amid l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny;

hydroxykarbamoylmethylmethylamid l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny;

(1-benzyloxykarbamoylethyl)amid S-l-cyklopentyl-3-ethyl-1H-indazo1-6-karboxylové kyseliny;

(1-hydroxykarbamoylethyl)amid R-l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny;

l-cyklopentyl-3-ethyl-6-thiofen-2-yl-lH-indazol; a l-cyklopentyl-3-ethyl-6-fenyl-lH-indazol;

a farmaceuticky vhodné soli výše uvedených sloučenin.

Předmětem vynálezu je dále farmaceutická kompozice pro inhibici fosfodiesterasy (PDE) typu IV nebo produkce faktoru nekrózy nádorů (TNF) u savců, která zahrnuje účinné množství sloučeniny obecného vzorce I nebo její farmaceuticky vhodné soli a farmaceuticky vhodný nosič.

Předmětem vynálezu je dále také způsob inhibice fosfodiesterasy (PDE) typu IV a produkce faktoru nekrózy nádorů (TNF), jehož podstata spočívá v tom, že se pacientovi podá účinné množství sloučeniny obecného vzorce I nebo její farmaceuticky vhodné soli.

9

- 18 Předmětem vynálezu je dále také farmaceutická kompozice pro prevenci nebo léčbu asthma, zánětů kloubů, rheumatoidní arthritis, dnavé arthritis, rheumatoidní spondylitis, osteoarthritis a jiných arthritických stavů; sepse, septického šoku, endotoxického šoku, sepse vyvolané gram negativními bakteriemi, syndromu toxického šoku, syndromu akutního respiračního distresu, cerebrální malárie, chronické zánětlivé choroby plic, silikosy, pulmonární sarkoidosy, resorpce kosti, reperfušního poranění, reakce graft-versus-host, odmítání alloštěpu, horečky a myalgie vyvolané infekcí, jako je chřipka, sekundární kachexie vyvolané infekcí nebo maligním procesem, sekundární kachexie vyvolané syndromem získané imunitní nedostatečnosti (AIDS), AIDS, HIV, ARC (AIDS related complex), tvorby keloidů, tvorby jizvové tkáně, Crohnovy choroby, ulcerativní kolitis, pyresis, roztroušené sklerosy, diabetes mellitus typu 1, autoimunitní diabetes, diabetes insipidus, systemického lupus erythrematosis, bronchitis, chronické obstrukční choroby dýchacích dest, psoriasis, Bechetovy choroby, anafylaktoidní purpury, nefritis, chronické glomerulonefritis, zánětlivé choroby střev, leukémie, alergické rhinitis, deprese, multiinfarktové demence nebo dermatitis, u savců, který zahrnuje terapeuticky účinné množství sloučeniny obecného vzorce I nebo její farmaceuticky vhodné soli spolu s farmaceuticky vhodným nosičem.

Dále je předmětem vynálezu způsob léčby nebo prevence výše uvedených chorob, při němž se pacientu podává účinné množství sloučeniny obecného vzorce I nebo její farmaceuticky vhodné soli.

Pokud není uvedeno jinak, rozumí se pod pojmem halogen fluor, chlor, brom nebo jod. Přednostním halogenem je fluor, chlor a brom.

«· ··

Pokud není uvedeno jinak, rozumí se pod pojmem alkyl, jak se ho používá v tomto textu, nasycený jednomocný uhlovodíkový zbytek s řetězcem přímým, cyklickým nebo rozvětveným. Pokud se jedná o alkylskupiny s cyklickým řetězcem, je zřejmé, že v takových alkylskupinách musí být přítomny alespoň 3 atomy uhlíku. Jako příklady cyklických zbytků lze uvést cyklopropyl-, cyklobutyl-, cyklopentyl-, cyklohexyl- a cykloheptylskupinu.

Pokud není uvedeno jinak, rozumí se pod pojmem alkoxy, jak se ho používá v tomto textu, skupina vzorce O-alkyl, kde alkyl má výše uvedený význam.

Pokud není uvedeno jinak, rozumí se pod pojmem alkanoyl skupina vzorce -C(O)-alkyl, kde alkyl má výše uvedený význam.

Pokud není uvedeno jiná, pod pojmem aryl se rozumí organický zbytek odvozený od aromatického uhlovodíku odstraněním jedenoho vodíkového atomu. Jako příklad arylskupin lze uvést fenylskupinu nebo naftylskupinu.

Pokud není uvedeno jinak, rozumí se pod pojmem pěti- nebo desetičlenný heterocyklyl, jak se ho používá v tomto textu, aromatická nebo nearomatická heterocyklická skupina obsahující jeden nebo více heteroatomů zvolených ze souboru sestávajícího z kyslíku, síry a dusíku. Do rozsahu heterocyklických skupin spadají také kruhové systémy s anelovanou benzoskupinou a kruhové systémy substituované jednou nebo více oxoskupinami. Jako příklad pětičlenné heterocyklické skupiny je možno uvést thiazolylskupinu a jako příklad desetičlenné heterocyklické skupiny je možno uvést chinolinylskupiny. Jako nearomatické heterocyklické skupiny lze uvést pyrrolidinyl-, pyrrolidinyl, piperidino-, morfolino-, thiomorfolino- a piperazinyl- skupinu. Jako

4

příklady aromatických heterocyklických skupin lze uvést pyridinyl-, imidazolyl-, pyrimidinyl-, pyrazolyl-, triazolyl-, pyrazinyl-, tetrazolyl-, furyl-, thienyl-, isoxazolyl- a thiazolylskupinu. Heterocyklickou skupinou s anelovaným benzenovým kruhem je například benzimidazolylskupina.

Pod pojmem heteroaryl se rozumí aromatické heterocyklické skupiny, kde přívlastek heterocyklický má význam uvedený v předchozím odstavci.

Pokud není uvedeno jinak, rozumí se pod pojmem cykloalkyl, jak se ho používá v tomto textu, nasycený jednomocný uhlovodíkový zbytek s cyklickým řetězcem, jako cyklobutyl, cyklopentyl nebo cykloheptyl.

Pokud není uvedeno jinak, rozumí se pod pojmem aryl, jak se ho používá v tomto textu, organický zbytek odvozený od aromatického uhlovodíku odstraněním jednoho vodíkového atomu, jako je fenyl nebo naftyl.

Pokud není uvedeno jinak, pod pojmem farmaceuticky vhodné soli se v tomto textu rozumí soli, které tvoří kyselé nebe bázické skupiny přítomné ve sloučeninách obecného vzorce I.

Určité sloučeniny obecného vzorce I mohou obsahovat centra asymetrie, a mohou se tedy vyskytovat v různých enantiomerních formách. Do rozsahu tohoto vynálezu spadají všechny optické isomery a stereoisomery sloučenin obecného vzorce I a jejich směsi. Sloučeniny obecného vzorce I se také mohou vyskytovat ve formě tautomerů. Předmětem vynálezu je také použití všech těchto tautomerů a jejich směsí.

• ···· ·· · • © © · • · • se · • ·· ·· • · · · © « • · · β · • · ·© · · · © © · · • ··· ·· ©·

Následuje podrobnější popis vynálezu.

V následujících reakčních schématech 1 až 8 je ilustrována příprava sloučenin podle vynálezu. Pokud není uvedeno jinak, R a R_1# R_?, Rg a R₁₂ mají v těchto schématech význam uvedený výše. Zkratkou Me se označuje methylskupina a zkratkou Ph fenylskupina.

• 999 ··· • 9 96 ··

99 9 9 9 9 • 9 9 9·· • 9 9 999 999 • 9 9 9 • 99 ··· ·· 99

Schéma 1

• · ·

Schéma

Xtiebo XI

XVII

XXII

·« ·· > · · 4

I · · « • · · · · «

Schéma 6

XXXI

XXXI!

XXXIII

XXXIV

- 29 ·· ·· • · · « • · · « • * · · · · « • « • · «·

Schéma 7

XXXIII

XXXVII

ΦΦ φφ

- 30 Schéma 8

XXXVIII

4 4 4 4 * 4» ·· 4 4 • · · ·· 4 4 4 4 4 4 • 4 4 4 4444

4 · 4 4 4 444444

4 4 4 4 4 • 44 4 444 444 44 44

Sloučeniny obecného vzorce I je možno připravovat způsoby známými odborníkům v tomto oboru za použití jednoho nebo více postupů znázorněných v předcházejících schématech 1 až 8 a následujících příkladech provedení. Při postupu podle schématu 1 se ve stupni 1 nitruje karboxylové kyselina obecného vzorce II, která je dostupná ze známých obchodních zdrojů nebo je ji možno připravit způsoby známými odborníkům v tomto oboru, za standardních podmínek nitrace (HNO₃/H₂SO₄/ 0°C). Ve stupni 2 postupu podle schématu 1 se výsledný nitrovaný derivát obecného vzorce III hydrogenuje za použití standardních postupů hydrogenace (H₂-Pd/C za tlaku) při teplotě okolí (20 až 25 °C) po dobu několika (2 až 10) hodin, čímž se získá sloučenina obecného vzorce IV. Ve stupni 3 postupu podle schématu 1 se aminobenzoová kyselina obecného vzorce IV nechá reagovat s bází, jako uhličitanem sodným za vodných podmínek. Reakční směs se mírně zahřívá, dokud se nerozpustí většina výchozí látky, poté ochladí na nižší teplotu (okolo 0°C) a nechá reagovat s dusitanem sodným ve vodě. Po asi 15 minutách se reakční směs pomalu převede do vhodné nádoby obsahující drcený led a silnou kyselinu, jako kyselinu chlorovodíkovou. Reakční směs se 10 až 20 minut míchá a poté při teplotě okolí přidá k roztoku přebytku terc.butylthiolu ve vhodném aprotickém rozpouštědle, jako ethanolu. Hodnota pH reakční směsi se přídavkem anorganické báze, přednostně nasyceného vodného uhličitanu sodného, upraví na 4 až 5. Reakční směs se 1 až 3 hodiny míchá při teplotě okolí a přidá se k ní roztok vodného chloridu sodného. Vzniklá směs se přefiltruje, čímž se oddělí sulfid obecného vzorce V.

Ve stupni 4 postupu podle schématu 1 se sulfid obecného vzorce V převede na odpovídající indazolkarboxylovou kyselinu obecného vzorce VI tak, že se sulfid obecného vzorce V při teplotě místnosti nechá reagovat se silnou bází, přednostně terč.butoxidem draselným, v dimethylsulfo·· 4 • · · • · · xidu (DMSO). Reakční směs se několik hodin (1 až 4 hodiny) míchá a poté okyselí silnou kyselinou, jako kyselinou chlorovodíkovou nebo sírovou, a poté extrahuje obvyklými postupy. Ve stupni 5 postupu podle schématu 1 se indazolkarboxylová kyselina obecného vzorce VI obvyklými postupy známými odborníkům v tomto oboru převede na odpovídající ester obecného vzorce VII. Ve stupni 6 postupu podle schématu 1 se alkyluje ester obecného vzorce VII, tak, že se podrobí obvyklým alkylačním podmínkám (silná báze/různá alkylační činidla a popřípadě katalyzátor na bázi mědi, jako bromid měďný) v polárním aprotickém rozpouštědle, jako tetrahydrofuranu (THF), N-methylpyrrolidinonu nebo dimethylformamidu (DMF) při teplotě okolí nebo vyšší (25 až 200°C) po dobu 6 až 24, přednostně asi 12 hodin za vzniku sloučeniny obecného vzorce VIII. Ve stupni 7 postupu podle schématu 1 se sloučenina obecného vzorce VIII obvyklými postupy redukce esterů na alkoholy známými odborníkům v tomto oboru převede na odpovídající alkohol obecného vzorce IX. Redukce se přednostně provádí za použití redukčního činidla na bázi hydridu kovu, jako lithiumaluminiumhydridu, v polárním aprotickém rozpouštědle při nízké teplotě (asi 0’C). Ve stupni 8 postupu podle schématu 1 se alkohol obecného vzorce IX obvyklými postupy známými odborníkům v tomto oboru oxiduje na odpovídající aldehyd obecného vzorce X. Tak je například oxidaci možno provést za použití katalytického množství rutenistanu tetrapropylamonného a nadbytku N-methylmorfolin-N-oxidu, jak je to popsáno v J. Chem. Soc., Chem. Commun., 1625 (1987), v bezvodém rozpouštědle, přednostně methylenchloridu. Ve stupni 9 postupu podle schématu 1 se ester obecného vzorce VIII převede na odpovídající kyselinu obecného vzorce XI způsoby známými odborníkům v tomto oboru, jako je postup, při n ěmž se výchozí sloučenina nechá reagovat s hydroxidem sodným v methanolu a reakční směs se po dobu několika (2 nebo více) hodin zahřívá ke zpětnému toku. Kyselina obecného vzorce XI je podobně jako aldehyd obecného • 9 • 9 9 9 • · · 9 vzorce X užitečná jako meziprodukt pro přípravu různých sloučenin obecného vzorce I.

Ve schématu 2 je znázorněn alternativní způsob výroby aldehydu obecného vzorce X a kyseliny obecného vzorce XI, jakož i způsob přípravy sloučenin obecného vzorce XVII. Ve stupni 1 postupu podle schématu 2 se sloučenina obecného vzorce XII nitruje za obvyklých nitračních podmínek (kyselina dusičná a sírová) za vzniku sloučeniny obecného vzorce XIII. Nitroderivát obecného vzorce XII se ve stupni 2 postupu podle schématu 2 redukuje obvyklými postupy známými odborníkům v tomto oboru na odpovídající amin obecného vzorce XIV. V přednostním provedení se sloučenina obecného vzorce XIII redukuje na amin obecného vzorce XIV za použití bezvodého chloridu cínatého v bezvodém aprotickém rozpouštědle, jako ethanolu. Ve stupni 3 postupu podle schématu 2 se amin obecného vzorce XIV převede na odpovídající indazol obecného vzorce XV tak, že se připraví odpovídající diazoniumtetrafluorboráty způsobem popsaným v A. Roe, Organic Reactions, sv. 5, Wiley, New York, 1949, str. 198 až 206 a následnou cyklizací za přítomnosti katalyzátoru fázového přenosu, způsobem popsaným v R. A. Bartsch a I. W. Yang, J. Het. Chem. 21, 1063 (1984). Ve stupni 4 postupu podle schématu 2 se alkyluje sloučenina obecného vzorce XV za použití standardních postupů známých odborníkům v tomto oboru (tj. silná báze, polární aprotické rozpouštědlo a alkylhalogenid) za vzniku N-alkylované sloučeniny obecného vzorce XVI. Ve stupni 5 postupu podle schématu 2 se ve sloučenině obecného vzorce XVI vymění halogen za kov za použití alkyllithia, jako n-butyllithia, v polárním aprotickém rozpouštědle, jako tetrahydrofuranu, při nízké teplotě (při -50 až -100, přednostně při -78°C). Po následném rozložení dimethylformamidem při nízké teplotě a zahřátí na teplotu okolí se získá intermadiární aldehyd obecného vzorce X, nebo se směs obsahující sloučeninu obecného vzorce • ·

9999 · · ·· • · · · · · * · · · • * · · · ······ • · · · · • · 999 ··· ·· 99

XVI rozloží oxidem uhličitým, zahřeje na teplotu okolí a poté rozloží kyselinou, jako kyselinou chlorovodíkovou, za vzniku kyseliny obecného vzorce XI. Ve stupni 6 postupu podle schématu 2 se sloučenina obecného vzorce XVI převede na sloučeninu obecného vzorce I, kde R₂ představuje zbytek R_ig, který, jak je uvedeno výše, představuje arylskupinu, heteroarylskupinu nebo heterocyklickou skupinu. Ve stupni 6 postupu podle schématu 2 připraví sloučenina obecného vzorce

XVII tak, že se sloučenina obecného vzorce XVI nechá reagovat se sloučeninou obecného vzorce R_igB(OH)₂, kde R_lg má výše uvedený význam, za přítomnosti tetrakis(trifenylfosfin)palladia(0) ve vhodném uhličitanu sodného při teplotě zpětného toku, během 4 hodin.

Ve schématu 3 je ilustrována příprava sloučeniny obecného vzorce I, kde R-^ představuje vodík a R₂ představuje skupinu -C(O)NHR₇, kde R₇ má výše uvedený význam. Ve stupni 1 postupu podle schématu 3 se sloučenina obecného vzorce XVIII nechá reagovat s etherátem fluoridu boritého v ethanolu neobsahujícím chloroform při teplotě okolo -20°C. Krátce poté, asi po 5 minutách, se ke vzniklé směsi přidá terc.butylnitrit. Reakční směs se asi 2 hodiny míchá při asi 0°C a přidá se k ní octan draselný a poté 18-crown-6. Získá se sloučenina obecného vzorce XIX. Ve stupni 2 postupu podle schématu 3 se sloučenina obecného vzorce XIX nechá reagovat s koncentrovanou kyselinou sírovou v methanolu při teplotě zpětného toku po dobu asi 8 hodin a výsledná směs se míchá asi 18 hodin při teplotě okolí, čímž se získá sloučenina obecného vzorce XX. Ve stupni 3 postupu podle schématu 3 se sloučenina obecného vzorce XX nechá reagovat se sloučeninou obecného vzorce R-X, kde R má výše uvedený význam a X představuje odstupující skupinu, jako chlor, brom nebo jod, přednostně brom, za přítomnosti hydridu sodného v dimethylformamidu po dobu 10 až 24, přednostně 24, hodin, při teplotě okolí, čímž se získá ester obecného vzorce XXI. Ve ·· • ·· · · · · ·· ·· · ·· ·· · · · · • · · · · · · · • · · · · · ····«· • · · 9 9 9

999 9 999 999 99 99

- 35 stupni 4 postupu podle schématu 3 se ester obecného vzorce XXI způsobem popsaným ve stupni 9 postupu podle schématu 1 převede na kyselinu obecného vzorce XXII. Ve stupni 5 postupu podle schématu 3 se sloučenina obecného vzorce XXII nechá reagovat s thionylchloridem za přítomnosti dimethylformamidu (jako katalyzátoru) v bezvodém toluenu při teplotě zpětného toku po dobu asi 3 hodin, čímž se získá odpovídající chlorid kyseliny. Odděleně se sloučenina obecného vzorce R₇-NH₂, kde R_? má výše uvedený význam, přidá do směsi hydridu sodného v bezvodém tetrahydrofuranu ochlazeném na teplotu okolo 0°C. K této druhé směsi se přidá výše uvedený chlorid kyseliny v tetrahydrofuranu. Reakční směs se 4 až 24 hodin míchá při teplotě místnosti, čímž se získá sloučenina obecného vzorce XXIII.

Ve schématu 4 je ilustrována příprava sloučenin obecného vzorce I, kde R₂ představuje skupinu -C(O)NHR₇ nebo -C(O)NH(CH₂)_nR₇, kde n představuje číslo 1 až 4 a R_? má výše uvedený význam. Ve stupni 1 postupu podle schématu 4 se kyselina obecného vzorce XI převede na odpovídající chlorid kyseliny obecného vzorce XXIV tak, že se nechá reatovat s thionylchloridem za přítomnosti dimethylformamidu (jako katalyzátoru) v bezvodém toluenu při teplotě zpětného toku po dobu asi 3 hodin. Chlorid kyseliny obecného vzorce XVIV je možno převést na sloučeninu obecného vzorce XXV tak, že se nechá reagovat se sloučeninou obecného vzorce R₇-NH₂, kde R₇ má výše uvedený význam, za přítomnosti hydridu sodného v bezvodém tetrahydrofuranu při teplotě okolo 0°C a vzniklá směs se poté během 4 až 24 hodin zahřeje na teplotu místnosti. Tomuto postupu se dává přednost v případě, že R₇ představuje substituovanou nebo nesubstituovanou pyridiny1skupinu. Při jiném způsobu se je sloučeninu obecného vzorce XXIV možno převést na sloučeninu obecného vzorce XXV tak, že se nechá reagovat se sloučeninou obecného vzorce R₇-NH₂, kde R₇ má výše uvedený význam, za přítomnosti hydridu sodného ··* · • · ·· »· ·· ·· · · · · • · · · · · • · · ··· ··· • « · · ··· «·· ·· ·· v bezvodém dimethylformamidu při teplotě při teplotě místnosti po dobu 4 až 24 hodin. Tomuto postupu se dává přednost v případě, že R₇ představuje substituovanou nebo nesubstituovanou pyrimidinylskupinu. Při dalším jiném způsobu je sloučeniu obecného vzorce XXIV možno převést na sloučeninu obecného vzroce XXV tak, že se k reakční směsi obsahující připravený chlorid kyseliny přidá sloučenina obecného vzorce R₇-NH₂, kde R₇ má výše uvedený význam, a reakční směs se krátce, asi 15 minut, zahřívá na teplotu 200°C.

Ve stupni 3 postupu podle schématu 4 se sloučenina obecného vzorce XXIV převede na sloučeninu obecného vzore XXVI, kde n představuje číslo 1 až 4 a R_? má výše uvedený význam, tak, že se nechá reagovat se sloučeninou obecného vzorce H₂N-C(O)NH(CH₂)_nR₇, kde n představuje číslo 1 až 4 a R₇ má výše uvedený význam, za přítomnosti triethylaminu a popřípadě dimethylaminopyridinu (DMAP) v methylenchloridu při teplotě okolí po dobu 10 až 48 hodin. Při alternativním postupu je sloučeninu obecného vzorce XXIV možno převést na sloučeninu obecného vzorce XXVI tak, že se nechá reagovat se sloučeninou obecného vzorce H₂N-(CH₂)_nR₇, kde n představuje číslo 1 až 4 a R₇ má výše uvedený význam, v bezvodém pyridinu při asi 40°C po dobu asi 1 hodiny. Tomuto alternativnímu provedení stupně 3 postupu podle schématu 4 se dává přednost, když R₇ představuje heterocyklický zbytek obsahující dusík, jako je pyridinylskupina.

Ve schématu 5 je ilustrována příprava sloučenin obecného vzorce I, kde R₂ představuje skupinu -Z-R₇, kde Z₃ představuje skupinu -C(O)NH- a R_? představuje arylskupinu, jako fenylskupinu nebo naftylskupinu, substituovanou skupinou -C(O)NHOH. Při postupu podle schématu 5 se jako výchozí látky používá sloučeniny obecného vzorce XXVII, kde X představuje arylskupinu. Sloučenina obecnéhovzorce XXVII ·· · ·· 44 4 4 « 4 • · · · · 4 4 · • * * · 44444444 • · 4 4 · · ··· · ♦·· 4*4 ·· 44 se připraví postupem znázorněným ve schématu 4. Ve stupni 1 postupu podle schématu 5 se sloučenina obecného vzorce XXVII hydrolyzuje na odpovídající kyselinu obecného vzorce XXVIII. Tento stupeň je možno provádět za použití způsobů známých odborníkům v tomto oboru, například tak, že se sloučenina obecného vzorce XXVII nechá reagovat s hydroxidem sodným v methanolu 30 minut až 1 hodinu při teplotě zpětného toku. Ve stupni 2 postupu podle schématu 5 se kyselina obecného vzorce XXVIII převede na sloučeninu obecného vzorce XXIX tak, že se nechá reagovat s hydrochloridem l-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidu a hydrochloridem 0-benzylhydroxylaminu v methylenchloridu po dobu 4 až 24 hodin při teplotě okolí. Ve stupni 3 postupu podle schématu 5 se sloučenina obecného vzorce XXIX převede na sloučeninu obecného vzorce XXX tak, že se výchozí sloučenina nechá reagovat za přítomnosti 10% palladia na uhlíku v ethylacetátu a methanolu pod atmosférou vodíku (asi 206,1 kPa) po dobu 30 minut až 1 hodiny při teplotě okolí.

Ve schématu 6 je znázorněna příprava sloučenin obecného vzorce I, kde R₂ představuje skupinu -C(O)NR₁₂(CHR₁₂)_mSR (sloučenina obecného vzorce XXXI), kde R představuje alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, m představuje číslo 1 až 6 a R₁₂ má význam uvedený výše, nebo kde R₂ představuje skupinu -C(O)NR₁₂(CHR₁₂)_mC(O)NHOMe (sloučenina obecného vzorce XXXIV), kde R₁₂ má výše uvedený význam, m představuje číslo 1 až 6 a Me představuje methylskupinu.

Ve stupni 1 postupu podle schématu 6 se sloučenina obecného vzorce XI nechá reatovat se sloučeninou obecného vzorce H₂N-(CHR₁₂)_mSR, kde R, R₁₂ a m mají výše uvedený význam, hydrochloridem 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidu a triethylaminem v methylenchloridu po dobu asi 18 hodin při teplotě místnosti, čímž se získá sloučenina obecného vzorce XXXI. Ve stupni 2 postupu podle schématu 6 se v souladu s postupem znázorněným ve schématu 4 připraví sloučenina obecného vzorce XXXII. Ve stupni 3 postupu podle schématu 6 se připraví sloučenina obecného vzorce XXXIII tak, že se sloučenina obecného vzorce XXXII v ethanolu nebo methanolu a hydroxidu sodném po dobu asi 1 hodiny zahřívá ke zpětnému toku. Ve stupni 4 postupu podle schématu 6 se připraví sloučenina obecného vzorce XXXIV tak, že se sloučenina obecného vzorce XXXIII nechá reagovat s hydrochloridem methoxylaminu, hydrochloridem l-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidu, hydrátem 1-hydroxybenzotriazolu a triethylaminem v methylenchloridu po dobu asi 18 hodin při teplotě okolí.

Ve schématu 7 je znázorněna příprava sloučenin obecného vzorce I, kde R₂ představuje skupinu -C(0)NH(CHR₁₂)_mC(0)N(CHg)OH (sloučenina obecného vzroce XXXV) kde m představuje číslo 1 až 6, nebo kde R₂ představuje skupinu -C(O)NR₁₂(CHR₁₂)mC(O)NHOH (sloučenina obecného vzorce XXXVII), kde R₁₂ má výše uvedený význam a m představuje číslo 1 až 6. Ve stupni 1 postupu podle schématu 7 se připraví sloučenina obecného vzorce XXXV tak, že se sloučenina obecného vzorce XXXII nechá reagovat se sodíkem a hydrochloridem N-methylhydroxylaminu v methanolu po dobu asi 16 hodin při teplotě okolí. Ve stupni 2 postupu podle schématu 7 se připraví sloučenina obecného vzorce XXXVI tak, že se sloučenina obecného vzorce XXXIII nechá reagovat s O-benzylhydroxylaminem, hdrátem 1-hydroxybenzotriazolu, hydrochloridem 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidu a triethylaminem v methylenchloridu po dobu asi 18 hodin při teplotě okolí. Ve stupni 4 postupu podle schématu 7 se připraví sloučenina obecného vzorce XXXVII tak, že se sloučenina obecného vzorce XXXVI nechá reagovat za přítomnosti 10% palladia na uhlíku v ethylacetátu a methanolu pod atmosférou vodíku (asi 206,1 kPa) po dobu 30 minut až 1 hodiny při teplotě okolí.

Ve schématu 8 je znázorněna příprava sloučeniny obecného vzorce XXXVIII. Ve stupni 1 postupu podle schématu 8 se sloučenina obecného vzorce XVI, připravená způsobem znázorněným ve schématu 2, nechá reagovat s n-butyllithiem v bezvodém tetrahydrofuranu při nízké teplotě, jako je asi -78°C, po dobu 30 minut, reakční směs se rozloží sloučeninou obecného vzorce Ry-CN, kde Ry má výše uvedený význam, a výsledná směs se během asi 30 minut až 1 hodiny zahřeje na teplotu okolí, čímž se získá sloučenina obecného vzorce XXXVIII. Tímto postupem se přednostně připravují sloučeniny obecného vzorce XXXVIII, kde Ry představuje heteroarylový zbytek obsahující dusík. Ve stupních 2 a 3 schématu 8 jsou znázorněny alternativní způsoby výroby sloučenin obecného vzorce XXXVIII, kterým se dává přednost při přípravě sloučenin, kde Ry představuje substituovanou nebo nesubstituovanou arylskupinu. Ve stupni 2 postupu podle schématu 8 se sloučenina obecného vzorce XVI nechá reagovat způsobem popsaným ve stupni 1 postupu podle schématu 8, přičemž se však namísto sloučeniny obecného vzorce Ry-CN použije sloučeniny obecného vzorce Ry-C(O)H, kde Ry má výše uvedený význam. Ve stupni 3 postupu podle schématu 8 se sloučenina obecného vzorce XXXIX oxiduje za vzniku sloučeniny obecného vzorce XXXVIII způsoby známými odborníkům v tomto oboru, jak jsou popsány ve stupni 8 postupu podle schématu 1.

Sloučeniny obecného vzorce I je také možno připravovat za použití jednoho nebo většího počtu syntetických postupů, které jsou popsány ve zveřejněných patentových přihláškách nebo patentech. Konkrétně za použití meziproduktů popsaných výše ve schématech 1 až 8, meziproduktů obecných vzorců VIII, X, XI, XVI a XXIV, bude odborník v tomto oboru schopen připravit sloučeniny obecného vzorce I za použití obdobných syntetických postupů, které byly popsány pro sloučeniny obecného vzorce I, v nichž je indazolový kruh nahrazen kruhem indazolovým Tyto obdobné • · postupy jsou popsány v US patentu č. 5 449 676 (vydaném 12. září 1995); US patentu č. 5 459 151 (vydaném 17. října 1995); US patentu č. 5 491 147 (vydaném 13. října 1996); evropské patentové přihlášce EP 470 805 (zveřejněné 12. října 1992); evropské patentové přihlášce EP 497 564 (zveřejněné 5. srpna 1992); evropské patentové přihlášce EP 723 962 (zveřejněné 15. července 1996); WO 93/00968 (zveřejněné 23. ledna 1992); WO 93/15044 (zveřejněné 5. srpna 1993); WO 93/15045 (zveřejněné 5. srpna 1993); WO 93/18024 (zveřejněné 16. září 1993); WO 93/25517 (zveřejněné 23. prosince 1993); WO 94/02465 (zveřejněné 3. února 1994); WO 95/01338 (zveřejněné 12. ledna 1995); WO 95/04045 (zveřejněné 9. února 1995); WO 95/04046 (zveřejněné 9. února 1995); WO 95/05386 (zveřejněné 23. února 1995); WO 95/20578 (zveřejněné 3. srpna 1995); WO 95/22520 (zveřejněné 24. srpna 1995); WO 95/27692 (zveřejněné 19. října 1995); WO 96/00218 (zveřejněné 4. února 1996); a WO 96/21435 (zveřejněné 18. července 1996). Všechny výše uvedené dokumenty jsou zde citovány náhradou za přenesení celého jejich obsahu do tohoto textu.

Konkrétně, sloučeniny obecného vzorce I, kde R₂ představuje skupinu -Z₃R₇, je možno připravovat podobnými postupy, jaké jsou popsány ve WO 93/02465, WO 95/01338, WO 93/25517, WO 95/20578, WO 96/00218 a EP 497 564 uvedených výše. Sloučeniny obecného vzorce I, kde R₂ představuje skupinu R_ig, je možno připravovat podobnými postupy, jaké jsou popsány v US patentu 5 491 147, WO 95/27692 a WO 95/22520 uvedených výše. Sloučeniny obecného vzorce I, kde R₂ představuje zbytek obecného vzorce If nebo Ig je možno připravovat podobnými syntetickými pstoupy, jaké jsou popsány ve výše uvedené WO 95/22520. Sloučeniny obecného vzorce I, kde R₂ představuje zbytek obecného vzorce Ih je možno připravovat podobnými postupy, jaké jsou popsány ve výše uvedeném US patentu č. 5 459 151. Sloučeniny obecného • · · · • · · vzorce I, kde R₂ představuje skupinu -C(=NOC(O)R₂₅R₂₆, je možno připravovat podobnými postupy, jaké jsou popsány v EP 470 805, uvedené výše. Sloučeniny obecného vzorce I, kde R₂ představuje skupinu -(CR₁₇R₁₈)_mNR₉(C(O))gR₁₀, je možno připravovat podobnými postupy popsanými ve výše uvedených WO 92/00968, WO 95/05386, WO 93/15044 a WO 93/15045. Sloučeniny obecného vzorce I, kde R₂ představuje skupinu -CR-^yR^gCHR^NR₉SO₂(CH₂)_pA, -CR₁₇R₁₈CHR₂₈NR₉P(O)(OR₁₂)C(O)(alkyl) s 1 až 4 atomy uhlíkuv alkylové části nebo -CR₁₇R₁₈CHR₂₈NR₉P(O)(alkoxy)₂ s 1 až 4 atomy uhlíku v každé z alkoxylových částí, je možno připravovat podobnými postupy, jaké jsou popsány ve výše uvedené WO 95/05386. Sloučeniny obecného vzorce I, kde R₂ představuje skupinu obecného vzorce Ic, Id nebo Ie, je možno připravovat podobnými postupy, jaké jsou popsány ve výše uvedené WO 93/18024. Sloučeniny obecného vzorce I, kde R₂ představuje skupinu obecného vzorce li je možno připravovat podobnými postupy, jaké jsou popsány ve výše uvedené EP 723 962. Sloučeniny obecného vzorce I, kde R₂ představuje skupinu -C(=NR₃₂)NH(CH₂)p(aryl) se 6 až 10 atomy uhlíku v arylové části je možno připravovat podobnými postupy, jaké jsou popsány ve výše uvedené WO 96/21435.

Sloučeniny obecného vzorce I je možno štěpit na jednotlivě enantiomery za chirální kapalinovou chromátografií za následujících podmínek: sloupec: Chiralcel^^R^ OD (250 x 4,6 mm), mobilní fáze: směs hexanu, 2-propanolu a diethylaminu v poměru 50 : 50 : 0,1; rychlost průtoku: 1 ml/min; detekce: UV (230 nm); teplota: okolní (20 až 25°C),· vstřikovaný objem: 20 μΐ. Sloučeniny obecného vzorce I lze rovněž štěpit na jednotlivé enantiomery za použití jiných postupů známých odborníkům v tomto oboru, jak jsou například popsány v J. March, Advanced Organic Chemistry (4. vydání,

J. Wiley & Sons), 1992, str. 118 až 125.

• ·

- 42 Sloučeniny obecného vzorce I, které mají bázickou povahu, jsou schopny tvořit řadu různých solí s nejrůznějšími anorganickými a organickými kyselinami. Přestože tyto soli musí být pro podávání živočichům farmaceuticky vhodné, často je v praxi žádoucí izolovat sloučeninu obecného vzorce I z reakční směsi nejprve ve formě farmaceuticky nevhodné soli, potom tuto nevhodnou sůl převést na volnou bázi zpracováním alkalickým činidlem a nakonec převést vzniklou volnou bázi na farmaceuticky vhodnou adiční sůl s kyselinou. Adiční soli bázických sloučenin podle vynálezu s kyselinami se snadno vyrábějí tak, že se na výchozí sloučeninu v podobě báze působí v podstatě ekvivalentním množstvím zvolené minerální nebo organické kyseliny ve vodném rozpouštědlovém prostředí nebo ve vhodném organickém rozpouštědle, jako je methanol nebo ethanol. Požadovanou pevnou sůl je pak možno získat po šetrném odpaření rozpouštědla. Požadovanou sůl s kyselinou je rovněž možno vysrážet z roztoku volné báze v organickém rozpouštědle tak, že se k tomuto roztoku přidá vhodná minerální nebo organické kyselina. Soli sloučenin obecného vzorce I s kationty je možno připravovat podobným postupem, přičemž se však použije reakce karboxylové skupiny s vhodným reakčím činidlem obsahujícím vhodný kationt, jako kationt odvozený od sodíku, draslíku, vápníku, hořčíku, amoniový kationt, kationt odvozený od N,N'-dibenzylethylendiaminu, N-methylglukaminu (megluminu), ethanolaminu, tromethaminu nebo diethanolaminu.

Pro podávání člověku při kurativní a profylaktické léčbě zánětlivých chorob přicházejí obvykle v úvahu orální dávky sloučenin obecného vzorce I a jejich farmaceuticky vhodných solí podle vynálezu (tyto sloučeniny jsou dále označovány názvem účinné sloučeniny podle vynálezu) ležící v rozmezí od 0,1 do 1000 mg za den, vztaženo na průměrného dospělého pacienta o hmotnosti 70 kg, přičemž tato dávka se může podávat najednou nebo v podobě několika dílčích dávek. Jedntlivé tablety a kapsle by tedy obvykle měly obsahovat 0,1 až 100 mg účinné sloučeniny ve vhodném farmaceutickém vehikulu nebo nosiči. Dávky v případě intravenosního podávání obvykle leží v rozmezí od 0,1 do 10 mg (jedna dávka). Pro intranasální nebo inhalační podávání přichází v úvahu farmaceutický prostředek v podobě roztoku obsahujícího účinnou sloučeninu v množství 1 až 10 g/litr. Skutečnou dávku, která se bude nejlépe hodit pro každého jednotlivého pacienta, stanoví v praxi ošetřující lékař.

Tato dávka se bude měnit podle věku, hmotnosti a odpovědi léčeného pacienta. Výše uvedené dávky mají povahu příkladů vhodných pro průměrné případy, ale v jednotlivých konkrétních případech je samozřejmě možno používat jak vyššího, tak nižšího dávkování. Do rozsahu vynálezu spadá použití sloučeniny podle vynálezu v libovolném dávkování.

Pro podávání člověku za účelem inhibice TNF se může použít různých konvenčních cest. Tak se může použít orálního, parenterálního, topického nebo rektálního podávání (čípky). Obvykle se bude účinná sloučenina podle vynálezu podávat orálně nebo parenterálně v dávce ležící v rozmezí od asi 0,1 do 25 mg/kg tělesné hmotnosti léčeného subjektu za den. Přednostní dávka bude ležet v rozmezí od asi 0,3 do asi 5 mg/kg, v podobě jediné nebo několika dílčích dávek. Přirozeně však bude docházet k určitým změnám dávkování v závislosti na stavu léčeného subjektu. Ošetřující lékař v každém jednotlivém případě stanoví optimální dávku pro konkrétního pacienta.

Pro aplikaci člověku se účinné sloučeniny podle vynálezu mohou podávat samotné, ale obvykle se podávají ve směsi s farmaceutickým ředidlem nebo nosičem, který je zvolen s ohledem na zamýšlenou cestu podávání v souladu se standardní farmaceutickou praxí. Tak například, když se má použít orálního dávkování, jsou vhodnými farmaceutickými • · ··· · ·· · prostředky tablety, které jako excipienty obsahují škrob nebo laktosu, nebo tobolky, obsahující účinnou látku buď samotnou nebo ve směsi s excipienty. Pro orální podávání se může použít také elixírů nebo suspenzí, které obsahují aromatizační látky nebo barvicí činidla. Sloučeniny obecného vzorce I se také mohou podávat ve formě parenterálních injekcí, například intravenosně, intramuskulárně nebo subkutánně. Pro parenterální podávání se nejlépe hodí farmaceutické prostředky v podobě sterilního vodného roztoku, který může také obsahovat jiné přísady, například dostatečné množství solí nebo glukosy pro isotonizaci roztoku.

Účinné sloučeniny je rovněž možno podávat topicky při léčení zánětlivých stavů kůže, a to například ve formě krémů, gelů, past a mastí v souladu se standardní farmaceutickou praxí.

Účinné sloučeniny lze podávat také jiným savcům než člověku. V tomto případě bude dávkování záviset na druhu savce a chorobě nebo stavu, které mají být léčeny. Živočichům je účinné sloučeniny možno podávat ve formě tobolek, bolů, tablet nebo kapalných drenčů a dále také injekčně nebo ve formě implantátů. Takové prostředky se připravují obvyklým postupem v souladu se standardní veterinární praxí. Alternativně je sloučeniny možno podávat spolu s krmivém.

Pro tento účel lze připravit koncentrovanou krmivovou přísadu nebo premix, které se mísí s normálním krmivém pro zvířata

Schopnost sloučenin podle vynálezu nebo jejich farmaceuticky vhodných solí inhibovat fosfodiesterasu IV (PDE_iv) je možno stanovit následující zkouškou.

až 40 g plicní tkáně člověka se umístí do 50 ml pufru Tris/fenylmethylsulfonylfluorid (PMSF)/sacharosa o pH 7,4 a homogenizuje za použití zařízení Tekmar Tissumizer^^R^

9 9 • · · ·· ··9 99 9

99 (Tekmar Co., 7143 Kemper Road, Cincinnati, Ohio 45249) po dobu 30 sekund při nejvyšší rychlosti. Homogenát se odstřeďuje 70 minut při 48 000 x g při teplotě 4°C. Supernatant se 2 x přefiltruje přes filtr s průměry pórů 0,22 μπι a nanese na sloupec Mono-Q FPLC (Pharmacia LKB Biotechnology, 800, Centennial Avenue, Piscataway, New Jersey 08854), který je předem ekvilibrován v pufru Tris/PMSF o pH 7,4. Pro nanášení vzorku na sloupec se používá průtoku 1 ml/min a následující promývání a eluce se provádí průtokovou rychlostí 2 ml/min. Vzorek se eluuje ze sloupce za použití vzestupného stupňovitého gradientu chloridu sodného v pufru Tris/PMSF o pH 7,4. Sbírají se frakce o objemu 8 ml. Frakce se zkoušejí na specifickou aktivitu PDE_IV, což se provádí hydrolýzou [³H]cAMP, přičemž se využívá schopnosti známého inhibitoru PDE_IV (například rolipramu) inhibovat tuto hydrolýzu. Vhodné frakce se spojí, zředí ethylenglykolem (2 ml ethylenglykolu/5 ml enzymatického přípravku) a zředěný roztok se skladuje až do použití při teplotě -20°C.

Sloučeniny se rozpustí v dimethylsulfoxidu na koncentraci lOmM a roztoky se zředí v poměru 1 : 25 vodou (400μΜ koncentrace sloučeniny, 4% koncentrace dimethylsulfoxidu) . Požadované koncentrace se nastaví následujícím sériovým ředěním ve 4% roztoku dimethylsulfoxidu. Výsledná kon centrace dimethylsulfoxidu ve zkumavce je 1%. Pokus se zopakuje za použití dále uvedených látek, které se v uvedeném pořadí přidají do skleněné zkumavky o rozměrech 12 x 75 mm (všechny uváděné koncentrace jsou výsledné koncentrace ve zkumavce):

i) 25 μΐ sloučeniny nebo dimethylsulfoxidu (1% v případě kontrolního a slepého pokusu) ii) 25 μΐ Tris pufru o pH 7,5 iii) [³H]cAMP (ΙμΜ) • ·*·· » · ·· ·· •· · ·· ·· · ·· · iv) 25 μΐ roztoku enzymu PDEj_V (v případě slepého pokusu se enzym předběžně inkubuje 5 minut ve vroucí vodě).

Obsah zkumavek se protřepe a potom se zkumavky umístí na 20 minut do vodní lázně o teplotě 37°C, načež se reakce zastaví přenesením zkumavek do lázně s vroucí vodou na dobu 4 minut. Do každé zkumavky umístěné v ledové lázni se přidá promývací pufr (0,5 ml, O,1M roztok 4-(2-hydroxyethyl )-l-piperazinethansulfonové kyseliny (HEPES)/O,1M roztok chloridu sodného, pH 8,5. Obsah každé zkumavky se nanese na sloupec Aff-gel 601 (Biorad Laboratories, P.O.

Box 1229, 85A Marcus Drive, Melville, New York, 11 747) (boronátový afinitní gel, objem lože 1 ml), který byl předběžně ekvilibrován v promývacím pufru. [³H]cAMP se vymyje 2

O , x 6 ml promývaciho pufru a potom se eluuje [^JH]5'AMP pomoci 4 ml 0,25M kyseliny octové. Po vířivém promíchání se 1 ml eluátu přidá ke 3 ml scintilační kapaliny umístěné ve vhodO né nádobě, směs se promíchá vířením a potom se spočítá [ H]

Procentická inhibice se vypočítá z následujícího vzorce:

průměr cpm - průměr cpm (zkouš. slouč.) (slepý pokus) inhibice (%) = 1 - průměr cpm - průměr cpm (kontrol.pokus) (slepý pokus) cpm = počet radioaktivních impulsů/min

Hodnota IC₅₀ je definována jako koncentrace sloučeniny, která inhibuje z 50 % specifickou hydrolýzu [³H]cAMP na [³H]5'AMP.

··· • * · · ··· ···

Schopnost sloučenin podle vynálezu a jejich farmaceuticky vhodných solí inhibovat produkci TNF, a tedy účinnost těchto látek při léčbě chorob zahrnujících produkci TNF, je demonstrována v následujícím testu in vitro.

Periferní lidská krev (100 ml) od dobrovolného dárce se zachytí do ethylendiamintetraoctové kyseliny (EDTA). Izolují se jednojaderné buňky (za použití Ficoll/Hypaque) a promyjí se třikrát neúplným HBSS. Buňky se resuspendují na konečnou koncentraci 1 x 10⁶ buněk/ml v předehřátém RPMI (obsahujícím 5% FCS, glutamin, pen/strep a nystatin). Monocyty se navzorkují do misek s 24 jamkami při koncentraci 1 x 10⁶ buněk/1,0 ml. Buňky se inkubují při 37°C (v atmosféře 5% oxidu uhličitého), v průběhu 2 hodin se nechají přilnout k povrchu jamek a potom se nepřilnuté buňky odstraní jemným opláchnutím. Poté se k buňkám přidá zkušební sloučenina (objem roztoku 10 μΐ, zkoušejí se vždy 3 až 4 koncentrace) a následuje jednohodinová inkubace. Do příslušných jamek se přidá LPS (10 μΐ). Misky se inkubují přes noc (18 hodin) při 37°C. Na konci inkubace se analyzuje TNF pomocí metody sandwich ELISA (souprava R & D Quantikine Kit). Pro každou sloučeninu se metodou lineární regresní analýzy stanoví hodnota IC₅₀.

Vynález je blíže objasněn v následujících příkladech provedení. Tyto příklady mají výhradně ilustrativní charakter a rozsah vynálezu v žádném ohledu neomezují.

Příklady provedení vynálezu

Preparativní postup 1

Methylester l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

A. 3-Nitro-4-propylbenzoová kyselina

9,44 g (57,5 mmol, 1,0 ekv.) 4-propylbenzoové kyseliny se zčásti rozpustí v 50 ml koncentrované kyseliny sírové. Vzniklá směs se ochladí v ledové lázni a během 1 až 2 minut se k ní přikape roztok 4,7 ml (74,7 mmol, 1,3 ekv.) koncentrované kyseliny dusičné v 10 ml koncentrované kyseliny sírové. Reakční směs se 1 hodinu míchá při 0°C a nalije do llitrové kádinky zpola naplněné ledem. Po lOminutovém míchání se filtrací oddělí vyloučená bílé pevná látka, která se promyje 1 x vodou a vysuší. Získá se 12,01 g (100 %) sloučeniny uvedené v nadpisu o teplotě tání 106 až 109°C. IR (KBr) 3200-3400, 2966, 2875, 2667, 2554, 1706, 1618,

1537, 1299, 921 cm^-1; ¹H NMR (300 MHz, DMSO-dg): 8 0,90 (t, 3H, J = 7,4 Hz), 1,59 (m, 2H), 2,82 (m, 2H), 7,63 (d, IH, J = 8,0 Hz), 8,12 (dd, IH, J = 1,7, 8,0 Hz), 8,33 (d, IH, J = 1,7 Hz); ¹³C NMR (75,5 MHz, DMSO-dg); δ 14,2, 23,7, 34,2, 125,4, 130,5, 132,9, 133,6, 141,4, 149,5, 165,9; Analýza pro ^C10^Hll^NO4·¹^^4H2^O: vypočteno: C 56,20, H 5,42, N 6,55, nalezeno: C 56,12, H 5,31, N 6,81

B. 3-Amino-4-propylbenzoová kyselina

Směs 11,96 g (57,2 mmol) 3-nitro-4-propylbenzoové kyseliny a 1,5 g 10% palladia na uhlíku (50% vodná vlhkost) ve 250 ml methanolu se umístí do Parrova hydrogenačního zařízení a třepe za tlaku vodíku 171,75 kPa při teplotě ·· • · · · • · · · ··· ··· • · · · · · ·

- 49 okolí (20 až 25°C). Po 1 hodině se reakční směs přefiltruje přes celit. Filtrát se zkoncentruje a zbytek se vysuší.

Získá se 9,80 g (96 %) světle žluté krystalické pevné látky o teplotě tání 139,5 až 142,5°C.

IR (KBr) 3200-2300, 3369, 3298, 2969, 2874, 2588, 1690,

1426, 916, 864 cm“¹; ¹H NMR (300 MHz, DMSO-dg): δ 0,90 (t, 3H, J = 7,2 Hz), 1,52 (m, 2H), 2,42 (m, 2H), 5,08 (brs, 2H), 6,96 (d, IH, J = 7,8 Hz), 7,05 (dd, IH, J = 1,7, 7,8 Hz), 7,20 (d, IH, J = 1,7 Hz); MS (CL, NH3) m/z 180 (M+H⁺, báze); Analýza pro C10H₁₃NO₂.1/3H₂O: vypočteno: C 64,85, H 7,89, N 7,56, nalezeno: C 64,69, H 7,49, N 7,86

C. 3-Karboxy-6-propylbenzendiazoterc.butylsulfid

Směs 8,80 g (49,1 mmol, 1,0 ekv.) 3-amino-4-propylbenzoové kyseliny a 2,34 g (22,1 mmol, 0,45 ekv.) uhličitanu sodného v 55 ml vody se mírně zahřívá teplometem, dokud se nerozpustí většina výchozí látky. Reakční směs se ochladí v ledové lázni a přikape se k ní 3,73 g (54,0 mmol, 1,0 ekv.) dusitanu sodného ve 27 ml vody. Po 15 minutách se reakční směs převede do kapací nálevky a během 10 minut přikape do kádinky obsahující 55 g drceného ledu a 10,6 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové. Po lOminutovém míchání se obsah kádinky převede do kapací nálevky a během 5 minut při teplotě místnosti přikape k roztoku 5,31 ml (47,1 mmol,

0,96 ekv.) terč.butylthiolu ve 130 ml ethanolu. Hodnota pH vzniklé směsi se přídavkem nasyceného vodného roztoku uhličitanu sodného nastaví na 4 až 5. Reakční směs se 1 hodinu míchá při teplotě místnosti a přidá se k ní 200 ml vodného roztoku chloridu sodného. Vzniklá směs se přefiltruje. Oddělená pevná látka se promyje 1 x vodou a přes noc suší. Získá se 12,25 g (89 %) rezavě hnědého prachu (pozor zapáchá) o teplotě tání 102°C (za rozkladu).

IR (KBr) 3200-2400, 2962, 2872, 2550, 1678, 1484, 1428,

1298, 1171 cm¹; ¹H NMR (300 MHz, DMSO-dg): δ 0,84 (t, 3H, J ·· 4 «

- 50 = 7,3 Hz), 1,48 (m, 2H), 1,55 (s, 9H) , 2,42 (m, 2H), 7,29 (d, 1H, J = 1,6 Hz), 7,50 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 7,86 (dd, 1H, J = 1,7, 7,9 Hz), 13,18 (brs, 1H); MS (termosprej,NH₄OAc) m/z (M+H⁺, báze); Analýza pro C₁₄H₂₀ ^N2⁰2^S: vypočteno: C 59,96, H 7,19, N 9,99, nalezeno: C 59,71, H 7,32, N 10,02

D. 3-Ethyl-lH-indazol-6-karboxylová kyselina

Roztok 12,0 g (42,8 mmol, 1 ekv.) 3-karboxy-6-propylbenzendiazoterc.butylsulfidu ve 150 ml dimethylsulfoxidu se během 15 minut přikape k roztoku 44,6 g (398 mmol, 9,3 ekv.) terc.butoxidu draselného ve 200 ml dimethylsulfoxidu o teplotě místnosti. Po dvouhodinovém míchání při teplotě místnosti se reakční směs nalije do 1,5 litru 1M kyseliny chlorovodíkové o teplotě 0°C. Vzniklá směs se 5 minut míchá a poté extrahuje 2 x 350 ml ethylacetátu. Ethylacetátové extrakty (pozor - zápach) se spojí, promyjí 2 x 250 ml vody, vysuší síranem hořečnatým a přefiltrují. Filtrát se zkoncentruje a zbytek se vysuší. Získaná zlatohnědá pevná látka se trituruje s 1 litrem směsi diethyletheru a hexanů v poměru 1:3a vysuší. Získá se 7,08 g (87 %) zlatohnědého krystalického prachu o teplotě tání 248 až 251°C.

IR (KBr) 3301, 3300-2400, 2973, 2504, 1702, 1455, 1401, 1219 cm^-1; ^XH NMR (300 MHz, DMSO-d_g) ? δ 1,31 (t, 3H, J = 7,6 Hz), 2,94 (q, 2H, J = 7,6 Hz), 7,63 (dd, 1H, J = 1,1, 8,4 Hz), 7,81 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 8,06 (d, 1H, J = 1,1 Hz), 12,95 (brs, 1H); MS (Cl, NH₃) m/z 191 (M+H⁺, báze); Analýza pro ^C10^H10^N2°2^: vypočteno: C 63,14, H 5,30, N 14,73, nalezeno 62,66, H 5,42, N 14,80.

E. Methylester 3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

8,78 g (45,8 mmol, 1,1 ekv.) hydrochloridu l-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidu se v jedné dávce přidá k roztoku 7,92 g (41,6 mmol, 1,0 ekv.) 3-ethyl-lH51

-indazol-6-karboxylové kyseliny, 16,9 ml (416 mmol, 10 ekv.) methanolu a 5,59 g (45,8 mmol, 1,1 ekv.) dimethylaminopyridinu ve 250 ml dichlormethanu o teplotě místnosti. Po 18 hodinách při teplotě místnosti se reakční směs zkoncentruje na 150 ml a zředí 500 ml ethylacetátu. Ethylacetátová směs se promyje 2 x 100 ml IM kyseliny chlorovodíkové, 1 x 100 ml vody a 1 x 100 ml vodného roztoku chloridu sodného, vysuší síranem sodným a přefiltruje. Filtrát se zkoncentruje a zbytek se vysuší. Výsledná hnědá pevná látka (7,8 g) se přečistí na sloupci silikagelu za použití gradientu 30 až 50% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Získá se 6,41 g (75 %) zlatohnědé pevné látky o teplotě tání 107 až 108°C.

IR (KBr) 3100-2950, 1723, 1222 cm^-1; ^ΧΗ NMR (300 MHz,

CDC1₃): δ 8,19 (m, 1H), 7,7 - 7,8 (m, 2H), 3,96 (s, 3H),

3,05 (q, 2H, J = 7,7 Hz), 1,43 (t, 3H, 7,7 Hz); MS (Cl, NH₃) m/z 205 (M+H⁺, báze); Analýza pro ^cn^Hi2^N2°2^{: v}YP°čteno: C 64,70, H 5,92, N 13,72, nalezeno: C 64,88, H 6,01, N 13,96

F. Methylester l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

1,17 g (29,4 mmol, 1,05 ekv.) hydridu sodného (60% olejová disperze) se v jedné dávce přidá k roztoku 5,7 g (27,9 mmol, 1,0 ekv.) methylesteru 3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny ve 125 ml bezvodého dimethylformamidu o teplotě místnosti. Po 20 minutách se ke vzniklé směsi přikape 3,89 ml (36,6 mmol, 1,3 ekv.) cyklopentylbromidu. Reakční směs se přes noc míchá při teplotě místnosti a poté nalije do 1 litru vody. Vodná směs se extrahuje 3 x 450 ml ethylacetátu. Organické extrakty se spojí, promyjí 3 x 400 ml vody a 1 x 200 ml vodného roztoku chloridu sodného, vysuší síranem sodným a přefiltrují. Filtrát se zkoncentruje a zbytek se vysuší. Výsledný jantarově zbarvený olej se přečistí na sloupci silikagelu za použití 10% ethylacetátu v

- 52 hexanech (samospád), jako elučního činidla. Získá se 5,48 g (72 %) čirého oleje. ¹H NMR (300 MHz, CDClg): δ 8,16 (d, IH, J = 1,0 Hz), 7,7 (m, 2H), 5,00 (kvintet, IH, J = 7,5 Hz), 3,97 (s, 3H), 3,01 (g, 2H, J = 7,6 Hz), 2,2 (m, 4H),2,0 (m, 2H), 1,8 (m, 2H), 1,39 (t, 3H, J = 7,6 Hz); HRMS pro ^C16^H20^N2°2^: vypočteno: 272,1526, nalezeno: 272,15078

G. (l-Cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-yl)methanol

K roztoku 1,02 g (7,05 mmol, 1,0 ekv.) methylesteru l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny v 50 ml bezvodého tetrahydrofuranu o teplotě 0°C se přidá 7 ml (7,0 mmol, 1,0 ekv) 1M roztoku lithiumaluminiumhydridu v tetrahydrofuranu. Po 20 minutách se ke vzniklé směsi opatrně přidá 1 ml methanolu. Reakční směs se nalije do 500 ml 5% kyseliny sírové a extrahuje 3 x 50 ml ethylacetátu. Organické extrakty se spojí, promyjí 2 x 40 ml vody a 1 x 40 ml vodného roztoku chloridu sodného, vysuší síranem sodným a přefiltrují. Filtrát se zkoncentruje a zbytek se vysuší. Výsledný čirý olej (1,58 g) se přečistí na sloupci silikagelu. Získá se 1,53 g (89 %) čirého oleje. IR (CHC1₃) 3606, 3411, 3009, 2972, 2875, 1621, 1490 cm^-1; ¹H NMR (300 MHz, CDC13): δ 7,65 (d, IH, J = 8,0 Hz), 7,42 (s, IH), 7,06 (dd, IH, J = 1,0, 8,2 HZ), 4,92 (kvintet, IH, J = 7,7 Hz), 4,84 (s, 2H), 2,98 (q, 2H, J = 7,6 Hz), 2,2 (m, 4H), 2,0 (m, 2H), 1,7 )m, 3H), 1,38 (t, 3H, J = 7,6 Hz); MS (termosprej, NH4Ac) m/z 245 (M+H⁺, báze); HRMS pro C15H₂₀N₂O + H: vypočteno: 245,1654, nalezeno: 245,1675

H. l-Cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karbaldehyd

106 mg (0,301 mmol, 0,05 ekv.) ruthenistanu tetrapropylamonného se přidá k suspenzi 1,47 g (6,02 mmol, 1,0 ekv.) (l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-yl)methanolu, 1,06 g (9,03 mmol, 1,5 ekv.) N-oxidu N-methylmorfolinu a 3,01 g

molekulového síta 0,4 nm ve 12 ml bezvodého dichlormethanu o teplotě místnosti. Po 20 minutách se reakční směs nechá projít přes krátký sloupec silikagelu za použití dichlormethanu, jako elučního činidla. Frakce, které obsahují produkt, se zkoncentrují a zbytek se podrobí mžikové chromatografii na sloupci silikagelu za použití 15% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Získá se 924 mg (63 %) světle žluté pevné látky o teplotě tání 41°C.

IR (KBr) 3053, 2966, 2872, 2819, 1695 cm“¹; ^ΧΗ NMR (300 MHz, CDC13): δ 10,13 (s, 1H), 7,93 (d, 1H, J = 0,9 Hz), 7,77 (d, 1H, J = 8,4 Mz), 7,60 (dd, 1H, J = 1,2, 8,4 Hz), 5,00 (kvintet, 1H, J = 7,5 Hz), 3,01 (g, 2H, J = 7,6 Hz), 2,2 (m, 4H), 2,0 (m, 2H), 1,7 (m, 2H), 1,39 (t, 3H, J = 7,5 Hz); MS (Cl, NH3) m/z 243 (M+H⁺, báze); Analýza pro C15H₁₈N₂O: vypočteno: C 74,35, H 7,49, N 11,56, nalezeno: C 74,17, H 7,58, N 11,79

Preparativní postup 2 l-Cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karbaldehyd

A. 4-Brom-2-nitro-l-propylbenzen

125 g (628 mmol, 1,0 ekv.) l-brom-4-propylbenzenu se v jedné dávce přidá k roztoku 600 ml koncentrované kyseliny sírové a 200 ml vody o teplotě 10°C. Ke vzniklé směsi se za intenzivního mechanického míchání během 30 minut přikape směs 43,2 ml (691 mmol, 1,1 ekv.) koncentrované kyseliny dusičné (69 až 71%, 16M) ve 150 ml koncentrované kyseliny sírové a 50 ml vody o teplotě místnosti. Ledová lázeň se nechá zahřát na teplotu místnosti. Reakční směs se 68 hodin míchá při teplotě místnosti a nalije do 41itrové kádinky, která je naplněna volně sypaným drceným ledem. Po lhodinovém míchání se reakční směs převede do 4litrové dělicí nálevky a extrahuje 4 x 800 ml isopropyletheru.

• · ·

Organické extrakty se spojí, promyjí 3 x 800 ml vody a 1 x 500 ml vodného roztoku chloridu sodného, vysuší síranem sodným a přefiltrují. Filtrát se zkoncentruje a zbytek se vysuší. Výsledná žlutá kapalina (150 ml) se přečistí chromatografií na silikagelu (2 sloupce, vždy s náplní 3 kg silikagelu) za použití 2% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Získá se 63,9 g (42 %) žluté kapaliny. Požadovaný regioisomer je méně polárním ze dvou isomerů, které vznikly v poměru 1:1. Teplota varu: 108°C, 267 Pa IR (CHC1₃) 3031, 2966, 2935, 2875, 1531, 1352 cm^-1; ^ΧΗ NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 8,01 (d, IH, J = 2,1 Hz), 7,62 (dd, IH,

J = 2,1, 8,3 Hz), 7,23 (d, IH, J = 8,3 Hz), 2,81 (m, 2H) , 1,67 (m, 2H), 0,98 (t, 3H, J = 7,4 Hz); ¹³C NMR (75,5 Hz, CDC13): δ 13,94, 23,74, 34,43, 119,6, 127,4, 133,3, 135,7, 135,7, 136,4, 149,8; GCMS (El) m/z 245/243 (M⁺), 147 (báze); HRMS pro CgH10NO₂Br + H: 243,9973, nalezeno: 243,9954

B. 5-Brom-2-propylfenylamin

121 g (639 mmol, 3,0 ekv.) chloridu cínatého (bezvodého) se v jedné dávce přidá k roztoku 51,9 g (213 mmol, 1,0 ekv.) 4-brom-2-nitro-l-propylbenzenu ve 1200 ml absolutního ethanolu a 12 ml (6 ekv.) vody o teplotě místnosti. Po 24 hodinách při teplotě místnosti se v rotačním odpařováku odstraní většina ethanolu. Zbytek se nalije do 4litrové kádinky ze tří čtvrtin naplněné drceným ledem a vodou. K reakční směsi se za míchání po částech přidá 150 g pelet hydroxidu sodného až do pH = 10, dokud se většina hydroxidu cíničitého nerozpustí. Reakční směs se rozdělí na poloviny, z nichž každá se extrahuje 2 x 750 ml ethylacetátu. Všechny čtyři ethylacetátové extrakty se spojí, promyjí 1 x 500 ml vždy 1M hydroxidu sodného, vody a vodného roztoku chloridu sodného, vysuší síranem sodným a přefiltrují. Filtrát se zkoncentruje, vysuší a žlutý kapalný zbytek se přečistí na sloupci silikagelu (1,2 kg) za použití směsi ethylacetátu ·· · · · · ···· a hexanů v poměru 1 : 12, jako elučního činidla. Získá se 41,83 g (92 %) světle žluté kapaliny.

IR (CHC1₃) 3490, 3404, 3008, 2962, 2933, 2873, 1620, 1491 cm^-1; ¹H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,8 - 6,9 (m, 3H), 3,90 (brs, 2H), 2,42 (m, 2H,), 1,62 (m, 2H), 0,99 (t, 3H, J = 7,3 Hz); GCMS (El) m/z 215/213 (M⁺), 186/184 (báze); Analýza pro ^C9^H12^^{Br: v}YP°čteno: C 50,49, H 5,65, N 6,54, nalezeno: C 50,77, H 5,70, N 6,50

C. 6-Brom-3-ethyl-lH-indazol

49,22 g (230 mmol, 1,0 ekv.) 5-brom-2-propylfenylaminu se umístí do 3litrové nádoby, chladí v ledové lázni a přidá se k němu roztok 57,5 ml (690 mmol, 3,0 ekv.) koncentrované kyseliny chlorovodíkové ve 165 ml vody ochlazený na 0°C. Vyloučená pevná látka se mele, dokud nevznikne jemná bílá suspenze. K této suspenzi se přidá ještě 100 ml vody a poté během 10 minut přikape roztok 15,9 g (230 mmol, 1,0 ekv.) dusitanu sodného v 75 ml vody. Ledová lázeň se odstaví a reakční směs se 30 minut míchá při teplotě místnosti a přefiltruje přes nálevku se skleněnou fritou předem ochlazenou na 0°C. Filtrát se ochladí a v ledové lázni se k němu za mechanického míchání během 10 minut přikape roztok/suspenze 32,8 g (313 mmol, 1,36 ekv.) tetrafluorboritanu amonného v 110 ml vody o teplotě 0°C. Vzniklá hustá bílá suspenze (aryldiazoniumtetrafluorborát) se 1,5 hodiny míchá při 0°C. Reakční směs se přefiltruje a oddělená pevná látka se promyje 1 x 200 ml 5% vodného tetrafluorboritanu amonného (ochlazeného na 0°C), 1 x 150 ml methanolu (ochlazeného na 0°C) a poté 1 x 200 ml diethyletheru a suší za vysokého vakua a poté 1 hodinu při teplotě místnosti. Získá se 54,47 g (76 %) diazoniové soli ve formě špinavě bílé pevné látky.

Do tříhrdlé baňky se umístí 1500 ml chloroformu neobsahujícího ethanol a poté 34,16 g (348 mmol, 2,0 ekv.) > · · 9 • · · · · *

- 56 octanu draselného (práškovitého a vysušeného) a 2,3 g (8,7 mmol, 0,05 ekv.) 18-crown-6. Po 10 minutách se ke vniklé směsi přidá v jedné dávce diazoniová sůl. Reakční směs se 18 hodin míchá pod atmosférou dusíku při teplotě místnosti a poté přefiltruje. Oddělená pevná látka se promyje 2x chloroformem a filtrát se zkoncentruje. Získá se 47 g surového produktu (hnědé krystaly), který se podrobí chromatografií na silikagelu (1,23 kg) za použití elučního gradientu 15%, 20% a 40% ethylacetát v hexanech. Získá se 21,6 g (55% výtěžek ve druhém stupni, celkový výtěžek 42 %) zlatohnědých krystalů o teplotě tání 112 až 114°C.

IR (KBr) 3205, 3008, 2969, 2925, 1616, 1340, 1037 cm”¹; ^ΤΗ

NMR (300 MHz,	CDC13):	δ 9,86	(bs, IH), 7,61	(d,	IH, J = 1,3
Hz), 7,57 (d,	IH, J =	8,4 Hz)	, 7,24 (dd, IH	, J :	= 1,5, 8,6
Hz), 2,99 (q,	2H, J =	7,6 Hz)	, 1,41 (t, 3H,	J =	7,6 Hz); MS
(Cl, NH3) m/z	227/225	(M+H+,	báze); Analýza	pro	CgH9N2Br:

vypočteno: C 48,02, H 4,03, N 12,45, nalezeno: C 48,08, H 3,87, N 12,45

D. 6-Brom-l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol

2,46 g (61,4 mmol, 1,05 ekv.) hydridu sodného (60% olejová disperze) se po 0,5g dávkách přidá k roztoku 13,17 g (58,5 mmol, 1,0 ekv.) 6-brom-3-ethyl-lH-indazolu v 500 ml bezvodého dimethylformamidu o teplotě 10°C. Vzniklá směs se 20 minut míchá při teplotě místnosti, načež se k ní přikape roztok 8,8 ml (81,9 mmol, 1,4 ekv.) cyklopentylbromidu v 10 ml bezvodého dimethylformamidu. Po 18 hodinách se reakční směs nalije do 2 litrů vody a vodná směs se extrahuje 2x1 litrem ethylacetátu. Organické extrakty se spojí, promyjí 2 x 750 ml vody, 1 x 500 ml vodného roztoku chloridu sodného, vysuší síranem sodným a přefiltrují. Filtrát se zkoncentruje a vysuší. Surový produkt (20,7 g) se přečistí na sloupci silikagelu (1,1 kg) za použití 3% ethylacetátu v hexanech,

.. * »· ·· · » • * » · .·.· * · · · · · ··· ··· • · » · · · ·*· · ··· ··· ·· ··

- 57 jako elučního činidla. Získá se 10,6 g (62 %) jantarové kapaliny.

IR (CHC1₃) 2875, 1606, 1501, 1048 cm^-1; ¹H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,56 )d, 1H, J = 1,3 Hz), 7,52 (d, 1H, J = 8,7 Hz), 7,17 (dd, 1H, J = 1,5, 8,5 Hz), 4,83 (kvintet, 1H, J = 7,6 Hz), 2,96 (q, 2H, J = 7,6 Hz), 2,15 (m, 4H), 2,0 (m,

2H), 1,65 (m, 2H), 1,36 (t, 3H, J = 7,7 Hz); MS (termosprej, NH^OAc) m/z 295/293 (M+H⁺, báze); Analýza pro ^ci4^Hi7^N2^Br: vypočteno: C 57,35, H 5,84, N 9,55, nalezeno: C 57,48, H 5,83, N 9,90

E. (l-Cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karbaldehyd

11,6 ml (28,4 mmol, 1,0 ekv.) n-butyllithia (2,45M v hexanech) se přidá k roztoku 8,32 g (28,4 mmol, 1,0 ekv.) 6-brom-l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazolu ve 200 ml bezvodého tetrahydrofuranu ochlazenému na -78°C. Po 30 minutách při -78°C se ke vzniklé směsi přikape 8,8 ml (114 mmol, 4,0 ekv.) bezvodého dimethylformamidu. Reakční směs se míchá při -78°C dalších 30 minut, poté během 1 hodiny zahřeje na teplotu místnosti a přidá se k ní 125 ml 1M kyseliny chlorovodíkové. Po lOminutovém míchání se v rotačním odpařováku odstraní většina tetrahydrofuranu. Zbytek se zředí 500 ml vody a vodná směs se extrahuje 2 x 250 ml ethylacetátu. Organické extrakty se spojí, promyjí 1 x 100 ml vody a 1 x 100 ml vodného roztoku chloridu sodného, vysuší síranem sodným a přefiltrují. Filtrát se zkoncentruje a vysuší. Výsledný žlutý olej se přečistí na sloupci silikagelu za použití 15% ethylacetátu v hexanech (samospád), jako elučního činidla. Získá se 4,70 g (68 %) žluté krystalické pevné látky, jejíž ¹H NMR (300 MHz, CDC1₃) je identické se spektrem sloučeniny z preparativního postupu 1.

• 9999 9 9 9 9	9 9 · •	• ·
9 9 9	•
9 9	•
99 9	·· ·	• «

·· ·· ♦ 9 9 · • 9 9 9 • «·· ··* • » 99 99

Preparativní postup 3

A. 3-Nitro-4-propylbenzoová kyselina

9,44 g (57,5 mmol, 1,0 ekv.) 4-propylbenzoové kyseliny se zčásti rozpustí v 50 ml koncentrované kyseliny sírové. Vzniklá směs se ochladí v ledové lázni a během l až 2 minut se k ní přikape roztok 4,7 ml (74,7 mmol, 1,3 ekv.) koncentrované kyseliny dusičné v 10 ml koncentrované kyseliny sírové. Reakční směs se 1 hodinu míchá při 0°C a nalije do llitrové kádinky zpola naplněné ledem. Po lOminutovém míchání se filtrací oddělí vyloučená bílé pevná látka, která se promyje 1 x vodou a vysuší. Získá se 12,01 g (100 %) sloučeniny uvedené v nadpisu o teplotě tání 106 až 109°C. IR (KBr) 3200-3400, 2966, 2875, 2667, 2554, 1706, 1618,

1537, 1299, 921 cm“¹; ¹H NMR (300 MHz, DMSO-dg): δ 0,90 (t, 3H, J = 7,4 Hz), 1,59 (m, 2H), 2,82 (m, 2H), 7,63 (d, IH, J = 8,0 Hz), 8,12 (dd, IH, J = 1,7, 8,0 Hz), 8,33 (d, IH, J = 1,7 Hz); ¹³C NMR (75,5 MHz, DMSO-dg): δ 14,2, 23,7, 34,2, 125,4, 130,5, 132,9, 133,6, 141,4, 149,5, 165,9; Analýza pro ^C10^Hll^NO4·¹/^4H2^O: vypočteno: C 56,20, H 5,42, N 6,55, nalezeno: C 56,12, H 5,31, N 6,81

B. 3-Amino-4-propylbenzoová kyselina

Směs 11,96 g (57,2 mmol) 3-nitro-4-propylbenzoové kyseliny a 1,5 g 10% palladia na uhlíku (50% vodná vlhkost) ve 250 ml methanolu se umístí do Parrova hydrogenačního zařízení a třepe za tlaku vodíku 171,75 kPa při teplotě okolí. Po 1 hodině se reakční směs přefiltruje přes celit. Filtrát se zkoncentruje a zbytek se vysuší. Získá se 9,80 g (96 %) světle žluté krystalické pevné látky o teplotě tání 139,5 až 142,5°C.

IR (KBr) 3200-2300, 3369, 3298, 2969, 2874, 2588, 1690,

1426, 916, 864 cm^-1; ¹H NMR (300 MHz, DMSO-dg): δ 0,90 (t, • *

- 59 3H, J = 7,2 Hz), 1,52 (m, 2H), 2,42 (m, 2H), 5,08 (brs, 2H), 6,96 (d, IH, J = 7,8 Hz), 7,05 (dd, IH, J = 1,7, 7,8 Hz), 7,20 (d, IH, J = 1,7 Hz); MS (CL, NH₃) m/z 180 (M+H⁺, báze); Analýza pro C₁₀H₁₃NO₂ . 1/3H₂O: vypočteno: C 64,85, H 7,89, N 7,56, nalezeno: C 64,69, H 7,49, N 7,86

C. 3-Karboxy-6-propylbenz endia z oterč.butylsulf id

Směs 8,80 g (49,1 mmol, 1,0 ekv.) 3-amino-4-propylbenzoové kyseliny a 2,34 g (22,1 mmol, 0,45 ekv.) uhličitanu sodného v 55 ml vody se mírně zahřívá teplometem, dokud se nerozpustí většina výchozí látky. Reakční směs se ochladí v ledové lázni a přikape se k ní 3,73 g (54,0 mmol, 1,0 ekv.) dusitanu sodného ve 27 ml vody. Po 15 minutách se reakční směs převede do kapací nálevky a během 10 minut přikape do kádinky obsahující 55 g drceného ledu a 10,6 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové. Po lOminutovém míchání se obsah kádinky převede do kapací nálevky a během 5 minut při teplotě místnosti přikape k roztoku 5,31 ml (47,1 mmol,

0,96 ekv.) terc.butylthiolu ve 130 ml ethanolu. Hodnota pH vzniklé směsi se přídavkem nasyceného vodného roztoku uhličitanu sodného nastaví na 4 až 5. Reakční směs se 1 hodinu míchá při teplotě místnosti a přidá se k ní 200 ml vodného roztoku chloridu sodného. Vzniklá směs se přefiltruje. Oddělená pevná látka se promyje 1 x vodou a přes noc suší. Získá se 12,25 g (89 %) rezavě hnědého prachu (pozor zapáchá) o teplotě tání 102°C (za rozkladu).

IR (KBr) 3200-2400, 2962, 2872, 2550, 1678, 1484, 1428,

1298, 1171 cm“¹; ¹H NMR (300 MHz, DMSO-dg): δ 0,84 (t, 3H, J = 7,3 Hz), 1,48 (m, 2H), 1,55 (s, 9H), 2,42 (m, 2H), 7,29 (d, IH, J = 1,6 Hz), 7,50 (d, IH, J = 8,0 Hz), 7,86 (dd, IH, J = 1,7, 7,9 Hz), 13,18 (brs, IH); MS (termosprej,NH₄OAc) m/z (M+H⁺, báze); Analýza pro ^ci4^H20^N2°2^S: vypočteno: C 59,96, H 7,19, N 9,99, nalezeno: C 59,71, H 7,32, N 10,02 ··· ···

- 60 D. 3-Ethyl-lH-indazol-6-karboxylová kyselina

Roztok 12,0 g (42,8 mmol, 1 ekv.) 3-karboxy-6-propylbenzendiazoterc.butylsulfidu ve 150 ml dimethylsulfoxidu se během 15 minut přikape k roztoku 44,6 g (398 mmol, 9,3 ekv.) terč.butoxidu draselného ve 200 ml dimethylsulfoxidu o teplotě místnosti. Po dvouhodinovém míchání při teplotě místnosti se reakční směs nalije do 1,5 litru 1M kyseliny chlorovodíkové o teplotě 0°C. Vzniklá směs se 5 minut míchá a poté extrahuje 2 x 350 ml ethylacetátu. Ethylacetátové extrakty (pozor - zápach) se spojí, promyjí 2 x 250 ml vody, vysuší síranem hořčenatým a přefiltrují. Filtrát se zkoncentruje a zbytek se vysuší. Získaná zlatohnědá pevná látka se trituruje s 1 litrem směsi diethyletheru a hexanů v poměru 1:3a vysuší. Získá se 7,08 g (87 %) zlatohnědého krystalického prachu o teplotě tání 248 až 251°C.

IR (KBr) 3301, 3300-2400, 2973, 2504, 1702, 1455, 1401, 1219 cm^-1; ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆)? δ 1,31 (t, 3H, J = 7,6 Hz), 2,94 (q, 2H, J = 7,6 Hz), 7,63 (dd, 1H, J = 1,1, 8,4 Hz), 7,81 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 8,06 (d, 1H, J = 1,1 Hz), 12,95 (brs, 1H); MS (Cl, NH₃) m/z 191 (M+H⁺, báze); Analýza pro ^C10^H10^N2°2^{: v}YP^očteno: C 63,14, H 5,30, N 14,73, nalezeno 62,66, H 5,42, N 14,80.

E. Methylester 3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

8,78 g (45,8 mmol, 1,1 ekv.) hydrochloridu l-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidu se v jedné dávce přidá k roztoku 7,92 g (41,6 mmol, 1,0 ekv.) 3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny, 16,9 ml (416 mmol, 10 ekv.) methanolu a 5,59 g (45,8 mmol, 1,1 ekv.) dimethylaminopyridinu ve 250 ml dichlormethanu o teplotě místnosti. Po 18 hodinách při teplotě místnosti se reakční směs zkoncentruje na 150 ml a zředí 500 ml ethylacetátu. Ethylacetátová směs se promyje 2 x 100 ml 1M kyseliny chlorovodíkové, 1 x 100 ml ···

- 61 <*···· · · ·· • · · · · · · ·«· • * ♦ · ♦ · ♦ • · · · · φ φφφ • · · · · ···« ·····« ·· ·· vody a 1 χ 100 ml vodného roztoku chloridu sodného, vysuší síranem sodným a přefiltruje. Filtrát se zkoncentruje a zbytek se vysuší. Výsledná hnědá pevná látka (7,8 g) se přečistí na sloupci silikagelu za použití gradientu 30 až 50% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Získá se 6,41 g (75 %) zlatohnědé pevné látky o teplotě tání 107 až 108°C.

IR (KBr) 3100-2950, 1723, 1222 cm^-1; ¹H NMR (300 MHz,

CDC1₃): δ 8,19 (m, IH), 7,7 - 7,8 (m, 2H), 3,96 (s, 3H) ,

3,05 (q, 2H, J = 7,7 Hz), 1,43 (t, 3H, 7,7 Hz); MS (Cl, NH₃) m/z 205 (M+H⁺, báze); Analýza pro C₁₁H₁₂ ^N2°2^: vypočteno: C 64,70, H 5,92, N 13,72, nalezeno: C 64,88, H 6,01, N 13,96

F. Methylester l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

1,17 g (29,4 mmol, 1,05 ekv.) hydridu sodného (60% olejová disperze) se v jedné dávce přidá k roztoku 5,7 g (27,9 mmol, 1,0 ekv.) methylesteru 3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny ve 125 ml bezvodého dimethylformamidu o teplotě místnosti. Po 20 minutách se ke vzniklé směsi přikape 3,89 ml (36,6 mmol, 1,3 ekv.) cyklopentylbromidu. Reakční směs se přes noc míchá při teplotě místnosti a poté nalije do 1 litru vody. Vodná směs se extrahuje 3 x 450 ml ethylacetátu. Organické extrakty se spojí, promyjí 3 x 400 ml vody a 1 x 200 ml vodného roztoku chloridu sodného, vysuší síranem sodným a přefiltrují. Filtrát se zkoncentruje a zbytek se vysuší. Výsledný jantarově zbarvený olej se přečistí na sloupci silikagelu za použití 10% ethylacetátu v hexanech (samospád), jako elučního činidla. Získá se 5,48 g (72 %) čirého oleje. ¹H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 8,16 (d, IH,

J = 1,0 Hz), 7,7 (m, 2H), 5,00 (kvintet, IH, J = 7,5 Hz),

3,97 (s, 3H), 3,01 (q, 2H, J = 7,6 Hz), 2,2 (m, 4H),2,0 (m, 2H), 1,8 (m, 2H), 1,39 (t, 3H, J = 7,6 Hz); HRMS pro ^c16^H20^N2°2^: vypočteno: 272,1526, nalezeno: 272,15078

I · · · » · · · ·· · ♦··

G. l-Cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylová kyselina

Směs 5,24 g (19,2 mmol, 1,0 ekv.) methylesteru l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny ve 120 ml methanolu a 60 ml IM hydroxidu sodného se zahřívá ke zpětnému toku. Po 1 hodině se reakční směs ochladí na teplotu místnosti, zkoncentruje na objem 75 ml, IM kyselinou chlorovodíkovou okyselí na pH 1 a extrahuje 2 x 200 ml ethylacetátu. Organické extrakty se spojí, promyjí 1 x 150 ml vody a 1 x 150 ml vodného roztoku chloridu sodného a přefiltrují. Filtrát se zkoncentruje a zbytek se vysuší. Získá se 4,79 g (96 %) bílé pevné látky. Malý vzorek se překrystaluje ze směsi ethylacetátu a hexanů, aby se získaly analytické údaje: teplota tání 157 až 159°C, IR (KBr) 3100 až 2500, 1683, 1298 cm-1; ¹H NMR (300 MHz, DMSO-dg): δ 13,0 (brs, IH), 8,21 (s, IH), 7,79 (d, IH, J = 7,9 Hz), 7,62 (sdd, IH, J = 1,2, 8,4 Hz), 5,18 (kvintet, IH, J = 7,5 Hz), 2,92 (q, 2H, J = 7,6 Hz), 2,1 (m, 2H), 2,0 (m, 2H), 1,85 (m, 2H), 1,6 (m, 2h), 1,29 (t, 3H, J = 7,6 Hz); MS (Cl, NH₃) m/z 259 (M+H⁺, báze); analýza pro ^ci5^H18^N2°2^: vypočteno: C 69,79, H 7,02, N 10,85, nalezeno: C 69,77, H 7,02, N 10,85

Příklad 1 (3,5-Dichlorpyridin-4-yl)amid 2-cyklopentyl-2H-indazol-6-karboxylové kyseliny a (3,5-dichlorpyridin-4-ylamid l-cyklopentyl-2H-indazol-6-karboxylové kyseliny

l.A lH-Indazol-6-karboxylová kyselina

15,1 g (100 mmol, 1,0 ekv.) 3-amino-4-methylbenzoové kyseliny částečně rozpuštěné ve 150 ml bezvodého tetrahydrofuranu ae přikape k roztoku 18 ml (146 mmol, 1,46 ekv.) etherátu fluoridu boritého ve 450 ml ethanolu neobsahujícího chloroform o teplotě -20°C. Po 5 minutách se ke

- 63 vzniklé směsi přikape 14 ml (106 mmol, 1,06 ekv.) 90% terc.butylnitritu. Reakční směs se 2 hodiny míchá při 0°C a po částech se k ní přidá 49 g (500 mmol, 5,0 ekv.) octanu draselného a poté v jedné dávce 2,65 g (10 mmol, 0,1 ekv.) 18-crown-6. Reakční směs se 48 hodin míchá při teplotě místnosti a poté zkoncentruje v rotačním odpařováku. Ke zbytku se přidá 500 ml směsi acetonu a ethylacetátu v poměru 3 : 7 a 1M kyselina chlorovodíková. Výsledná směs se 2 hodiny míchá a přidá se k ní vodný roztok chloridu sodného. Vzniklá směs se přefiltruje a filtrát se převede do dělicí nálevky. Vrstvy se oddělí a vodný vrstva se extrahuje 2 x 100 ml směsí acetonu a ethylacetátu v poměru 3:7.

Organické vrstvy se spojí, vysuší síranem hořečnatým a přefiltrují. Filtrát se zkoncentruje. K pevnému zbytku se přidá 250 ml kyseliny octové. Reakční suspenze se zahřívá v parní lázni dokud z větší části nepřejde do roztoku. Poté se parní lázeň odstaví a k dosud horkému roztoku kyseliny octové se pomalu přidá 300 ml roztoku chlorovodíku v etheru (který se připraví tak, že se 350 ml diethyletheru za chlazení v ledové lázni po dobu 10 minut nechá probublávat plynný chlorovodík). Ke vzniklé směsi se přidá 250 ml diethyletheru a etherová směs se 1 hodinu míchá při teplotě místnosti, přefiltruje a filtrát se vysuší. Získaný zlatohnědý prášek se suspenduje v 500 ml směsi acetonu a ethylacetátu v poměru 3 : 7, k suspenzi se přidá 100 ml vodného roztoku chloridu sodného a reakční směs se 1 hodinu míchá při teplotě místnosti. Vrstvy se oddělí a vodná vrstva se extrahuje 1 x 100 mle thylacetátu. Spojené organické vrstvy se vysuší síranem hořečnatým, přefiltrují a filtrát se zkoncentruje. Zbytek se suší 18 hodin za vysokého vakua při teplotě místnosti. Získá se 7,81 g (48 %) hnědého prášku o teplotě tání 275’C, MS (Cl, NH₃) m/z 180 (M+18⁺, báze).

l.B Methylester lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

,) lH-indazol-6a 1 ml koncentroSměs 7,59 g (46,8 mmol,, 1,0 ekv -karboxylové kyseliny ve 500 ml methanolu váné kyseliny sírové se 8 hodin zahřívá ke zpětnému toku, poté 18 hodin míchá při teplotě místnosti a zkoncentruje na 200 ml. Zkoncentrovaná směs se zředí 1 litrem ethylacetátem a promyje 1 x 250 ml nasyceného vodného hydrogenuhličitanu sodného, 1 x 250 ml vody a 1 x 250 ml vodného roztoku chloridu sodného a vysuší síranem sodným. Vodné promývací louhy se extrahují dvěma dávkami ethylacetátu, čímž se získá další produkt. Organické vrstvy se spojí, zkoncentrují a zbytek se vysuší. Získá se 6,75 g (82 %) žlutooranžové zlatohnědé pevné látky. NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 10,8 (brs, IH), 8,28 (dd, IH, J = 0,9, 1,9 Hz), 8,15 (d, IH, J = 1,0 Hz), 7,8 (m, 2H), 3,97 (s, 3H) ; MS (Cl, NH₃) m/z 177 (M+H⁺, báze).

l.C Methylester l-cyklopentyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny a methylester 2-cyklopentyl-2H-indazol-6-karboxylové kyseliny

1,60 g (39,9 mmol), 1,05 ekv.) hydridu sodného (60% olejová disperze) se při teplotě místnosti v jedné dávce přidá k roztoku 6,70 g (38,0 mmol, 1,0 ekv.) methylesteru lH-indazol-6-karboxylové kyseliny ve 150 ml bezvodého dimethylformamidu. Po 30 minutách se ke vzniklé směsi přikape 4,5 ml (41,8 mmol, 1,1 ekv.) cyklopentylbromidu. Reakční směs se 24 hodin míchá při teplotě místnosti, zředí 1,2 litru ethylacetátu, promyje 3 x 350 ml vody, 1 x 250 ml vodného roztoku sodného, vysuší síranem sodným a přefiltruje. Filtrát se zkoncentruje, čímž se získá 12 g jantarového oleje. Tento zbytek se přečistí mžikovou chromatografii na sloupci 700 g silikagelu za použití 20% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Získá se 4,26 g methylesteru l-cyklopentyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny (výtěžek 46 %, méně polární isomer) a 3,66 g

• · ·· · • ♦ ·· methylesteru 2-cyklopentyl-2H-indazol-6-karboxylové kyseliny (výtěžek 39 %, polárnější isomer). Obě sloučeniny se získají ve formě oranžového oleje. Údaje pro ΙΗ-indazolový regioisomer: IR (CHC1₃) 2996, 2955, 2874, 1717, 1249 cm^-1; HRMS vypočteno pro C₁₄H₁₆N₂O₂: 244,1213, nalezeno: 244,1220

l.D l-Cyklopentyl-lH-indazol-6-karboxylová kyselina

Směs 3,93 g (16,1 mmol, 1,0 ekv.) methylesteru l-cyklopentyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny, 100 ml methanolu a50 ml 1M hydroxidu sodného se 30 minut zahřívá ke zpětnému toku, ochladí na teplotu místnosti a většina methanolu se odstraní v rotačním odpařováku. Zbytek se zředí 325 ml vody a vodná směs se 2M kyselinou chlorovodíkovou okyselí na pH 1. Výsledná směs se 5 minut míchá, přefiltruje a pevná látka se promyje dvakrát vodou a přes noc suší.

Získá se 3,42 g (92 %) žlutého prášku o teplotě tání 172 až 175°C. Analýza pro C₁₃H₁₄N₂O₂: vypočteno: C 67,79, H 6,13, N 12,16, nalezeno: C 67,62, H 5,82, N 12,19

l.E 2-Cyklopentyl-2H-indazol-6-karboxylová kyselina

Způsobem popsaným v příkladu l.D se za použití 3,28 g (lš,4 mmol) methylesteru 2-cyklopentyl-2H-indazol-6-karboxylové kyseliny, jako výchozí látky a 100 ml methanolu a 40 ml ÍM hydroxidu sodného získá 2,71 g (88 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě světle žlutého prášku o teplotě tání 190 až 193°C. Analýza pro ^ci3^Hi4^N2°2^{: v}YP°čteno: C 67,79, H 6,+3, N 12,16, nalezeno: C 67,40, H 6,04, N 12,38

l.F (3,5-Dichlorpyridin-4-yl)amid 1-cyklopentyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

Suspenze 495 mg (2,15 mmol, 1,0 ekv.) 1-cyklopentyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny, 204 μΐ (2,79 mmol,

- 66 1,3 ekv.) thionylchloridu a 10 μΐ dimethylformamidu v 10 ml bezvodého toluenu se 3 hodiny zahřívá ke zpětnému toku, poté ochladí na teplotu okolí a v rotačním odpařováku zkoncentruje do sucha. V oddělené nádobě se k suspenzi 198 mg (4,95 mmol, 2,3 ekv.) hydridu sodného (60% olejová disperze) v 10 ml bezvodého tetrahydrofuranu o teplotě 0C přikape roztok 333 mg (2,04 mmol, 0,95 ekv.) 3,5-dichlor-4-aminopyridinu v 10 ml bezvodého tetrahydrofuranu. Výsledná směs se 15 minut míchá při teplotě místnosti a znovu ochladí na 0°C. Poté se k ní přikape dříve připravený roztok chloridu kyseliny v 10 ml bezvodého tetrahydrofuranu. Reakčn ísměs se přes noc míchá při teplotě místnosti a přidá se k ní 4,5 ml IM kyseliny chlorovodíkové. Výsledná směs se zředí 200 ml dichlormethanu promyje vodou, 10% vodným uhličitanem sodným a vodou (vždy 1 x 30 ml), poté vysuší síranem sodným a přečistí mžikovou chromatografii na sloupci silikagelu za použití 2% methanolu v dichlormethanu, jako elučního činidla. Získá se 0,76 g (94 %) produktu ve formě žluté amorfní pěny. ¹H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 8,58 (s, 2H), 8,19 (d, 1H, J = 0,9 Hz), 8,09 (d, 1H, J = 0,7 Hz), 7,93 (brs, 1H), 7,84 (dd, 1H, J = 0,7, 8,4 Hz), 7,63 (dd, 1H, J = 1,4, 8,4 Hz), 5,08 (kvintet, 1H), 2,2 (m, 4H), 2,0 (m, 2H), 1,75 (m, 2H); MS (Cl, NH₃) m/z 375 (M+H⁺, báze); Analýza pro ^ci8^H16^N4^OC^2^: C 57,62, H 4,30, N 14,93, nalezeno: C 57,68, H 4,55, N 14,55

l.G (3,5-Dichlorpyridin-4-yl)amid 2-cyklopentyl-2H-indazol-6-karboxylové kyseliny

Způsobem popsaným v příkladu l.F se za použití 424 mg 2-cyklopentyl-2H-indazol-6-karboxylové kyseliny, jako výchozí látky, získá 406 mg (59 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě bílé amorfní pěny. NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 8,57 (s, 2H), 8,36 (d, 1H, J = 1,4 Hz), 8,06 (d, 1H, J = 0,7 Hz), 7,84 (brs, 1H), 7,78 (dd, 1H, J = 0,7, 8,6 Hz),

7,64 (dd, 1H, J = 1,5, 8,7 Hz), 5,00 (kvintet, 1H), 2,35 (m,

- 67 ·· ♦ ♦ ·· 4 > · · ft · · ·♦* «

2H), 2,25 (m, 2H), 2,0 (m, 2H), 1,8 (m, 2H); MS (Cl, NH₃) m/z 375 (M+H⁺, báze); Analýza pro C₁₈H₁₆N₄OC1₂: vypočteno; C 57,62, H 4,30, N 14,93, nalezeno; C 57,39, H 4,59, N 14,56

Příklad 2

3-Nitro-4-propylbenzoová kyselina

9,44 g (57,5 mmol, 1,0 ekv.) 4-propylbenzoové kyseliny se zčásti rozpustí v 50 ml koncentrované kyseliny sírové. Vzniklý roztok se ochladí v ledové lázni a během 1 až 2 minut se k němu přikape roztok 4,7 ml (74,7 mmol, 1,3 ekv.) koncentrované kyseliny dusičné v 10 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové. Výsledná směs se 1 hodinu míchá při 0°C a poté nalije do llitrové kádinky zpola naplněné ledem. Po lOminutovém míchání se vzniklá bílé pevné látka odfiltruje, promyje 1 x vodou a vysuší. Získá se 12,01 g (100 %) sloučeniny uvedené v nadpisu o teplotě tání 106 až 109°C. IR (KBr) 3200-3400, 2966, 2875, 2667, 2554, 1706, 1618, 1537, 1299, 921 cm^-1; ³H NMR (300 MHz, DMSO-dg): δ 0,90 (t, 3H, J = 7,4 Hz), 1,59 (m, 2H), 2,82 (m, 2H), 7,63 (d, IH, J = 8,0 Hz), 8,12 (dd, IH, J = 1,7, 8,0 Hz), 1,59 (m, 2H), 2,82 (m, 2H), 7,63 (d, IH, J = 8,0 Hz), 8,12 (dd, IH, J = 1,7, 8,0 Hz), 8,33 (d, IH, J = 1,7 Hz); ¹³C NMR (75,5 MHz, DMSO-dg): δ 14,2, 23,7, 34,2, 125,4, 130,5,

132,9, 133,6, 141,4, 149,5, 165,9; Analýza pro θι₀ ^Η11^Ν04*¹/⁴ H₂O: vypočteno: C 56,20, H 5,42, N 6,55, nalezeno: C 56,lě,

H 5,31, N 6,81

Příklad 3

3-Amino-4-propylbenzoová kyselina

Směs 11,96 g (57,2 mmol) 3-nitro-4-propylbenzoové kysleiny a 1,5 g 10% palladia na uhlíku (50% vodná vlhkost) • ·

- 68 ·· 0 0 • 0 ·· • 0 0 * • 0 0 0 0 • 0 00 0 ··0 0 0 0 • · 0 0 0 0 ve 250 ml methanolu se umístí do Parrova hydrogenačního zařízení a třepe při teplotě okolí za tlaku vodíku 171,75 kPa. Po 1 hodině se reakční směs přefiltruje přes celit, filtrát se zkoncentruje a zbytek se vysuší. Získá se 9,80 g (96 %) světle žluté krystalické pevné látky o teplotě tání 139,5 až 142,5°C; IR (KBr): 3200-2400, 3369, 3298, 2969, 2874, 25588, 1690, 1426, 1260, 916, 864 cm^-1; ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆): δ 0,90 (t, 3H, J = 7,2 Hz), 1,52 (m, 2H),

2,42 (m, 2H), 5,08 (brs, 2H), 6,96 (d, IH, J = 7,8 Hz), 7,05 (dd, IH, J = 1,7, 7,8 Hz), 7,20 (d, IH, J = 1,7 Hz); MS (Cl, NH₃) m/z 180 (M+H⁺, báze); Analýza pro C₁₀H₁₃NO₂·1/3H₂O: vypočteno: C 64,85, H 7,89, N 7,56, nalezeno: C 64,69, H 7,49, N 7,86

Příklad 4

3-Karboxy-6-propylbenzendiazoterc.butylsulfid

Směs 8,80 g (49,1 mmol, 1,0 ekv.) 3-amino-4-propylbenzoové kyseliny a 2,34 g (22,1 mmol, 0,45 ekv.) uhličitanu sodného v 55 ml vody se mírně zahřívá teplometem, dokud se nerozpustí většina výchozí látky. Reakční směs se ochladí v ledové lázni a přikape se k ní 3,73 g (54,0 mmol, 1,0 ekv.) dusitanu sodného ve 27 ml vody. Po 15 minutách se reakční směs převede do kapací nálevky a během 10 minut přikape do kádinky obsahující 55 g drceného ledu a 10,6 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové. Po lOminutovém míchání se obsah kádinky převede do kapací nálevky a během 5 minut při teplotě místnosti přikape k roztoku 5,31 ml (47,1 mmol,

0,96 ekv.) terc.butylthiolu ve 130 ml ethanolu. Hodnota pH vzniklé směsi se přídavkem nasyceného vodného roztoku uhličitanu sodného nastaví na 4 až 5. Reakční směs se 1 hodinu míchá při teplotě místnosti a přidá se k ní 200 ml vodného roztoku chloridu sodného. Vzniklá směs se přefiltruje. Oddělená pevná látka se promyje 1 x vodou

- 69 • ·· 99 • · · · 9 · • 9 · 9 · 9 * · ······ • · «9

9 99 · 99 9 · a přes noc suší. Získá se 12,25 g (89 %) rezavě hnědého prachu (pozor zapáchá) o teplotě tání 102C (za rozkladu).

IR (KBr) 3200-2400, 2962, 2872, 2550, 1678, 1484, 1428,

1298, 1171 cm“¹; ¹H NMR (300 MHz, DMSO-dg): δ 0,84 (t, 3H, J = 7,3 Hz), 1,48 (m, 2H), 1,55 (s, 9H), 2,42 (m, 2H), 7,29 (d, IH, J = 1,6 Hz), 7,50 (d, IH, J = 8,0 Hz), 7,86 (dd, IH, J = 1,7, 7,9 Hz), 13,18 (brs, IH) ; MS (termosprej,NH₄0Ac) m/z (M+H⁺, báze); Analýza pro C^^q^C^S: vypočteno: C 59,96, H 7,19, N 9,99, nalezeno: C 59,71, H 7,32, N 10,02

Příklad 5

3-Ethyl-lH-indazol-6-karboxylová kyselina

Roztok 12,0 g (42,8 mmol, 1 ekv.) 3-karboxy-6-propylbenzendiazoterc.butylsulfidu ve 150 ml dimethylsulfoxidu se během 15 minut přikape k roztoku 44,6 g (398 mmol, 9,3 ekv.) terč.butoxidu draselného ve 200 ml dimethylsulfoxidu o teplotě místnosti. Po dvouhodinovém míchání při teplotě místnosti se reakční směs nalije do 1,5 litru 1M kyseliny chlorovodíkové o teplotě 0°C. Vzniklá směs se 5 minut míchá a poté extrahuje 2 x 350 ml ethylacetátu. Ethylacetátové extrakty (pozor - zápach) se spojí, promyjí 2 x 250 ml vody, vysuší síranem hořčenatým a přefiltrují. Filtrát se zkoncentruje a zbytek se vysuší. Získaná zlatohnědá pevná látka se trituruje s 1 litrem směsi diethyletheru a hexanů v poměru 1:3a vysuší. Získá se 7,08 g (87 %) zlatohnědého krystalického prachu o teplotě tání 248 až 251°C.

IR (KBr) 3301, 3300-2400, 2973, 2504, 1702, 1455, 1401, 1219 cm“¹; ¹H NMR (300 MHZ, DMSO-dg)? δ 1,31 (t, 3H, J = 7,6 Hz) , 2,94 (q, 2H, J = 7,6 Hz), 7,63 (dd, IH, J = 1,1, 8,4 Hz), 7,81 (d, IH, J = 8,4 Hz), 8,06 (d, IH, J = 1,1 Hz), 12,95 (brs, IH); MS (Cl, NH₃) m/z 191 (M+H⁺, báze); Analýza pro ^C10^H10^N2°2^: vypočteno: C 63,14, H 5,30, N 14,73, nalezeno 62,66, H 5,42, N 14,80.

> · ·· ·

Příklad 6

Methylester 3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

8,78 g (45,8 mmol, 1,1 ekv.) hydrochloridu l-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidu se v jedné dávce přidá k roztoku 7,92 g (41,6 mmol, 1,0 ekv.) 3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny, 16,9 ml (416 mmol, 10 ekv.) methanolu a 5,59 g (45,8 mmol, 1,1 ekv.) dimethylaminopyridinu ve 250 ml dichlormethanu o teplotě místnosti. Po 18 hodinách při teplotě místnosti se reakční směs zkoncentruje na 150 ml a zředí 500 ml ethylacetátu. Ethylacetátová směs se promyje 2 x 100 ml 1M kyseliny chlorovodíkové, 1 x 100 ml vody a 1 x 100 ml vodného roztoku chloridu sodného, vysuší síranem sodným a přefiltruje. Filtrát se zkoncentruje a zbytek se vysuší. Výsledná hnědá pevná látka (7,8 g) se přečistí na sloupci silikagelu za použití gradientu 30 až 50% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Získá se 6,41 g (75 %) zlatohnědé pevné látky o teplotě tání 107 až 108°C.

IR (KBr) 3100-2950, 1723, 1222 cm^-1; ^ΤΗ NMR (300 MHz,

CDC1₃): δ 8,19 (m, IH), 7,7 - 7,8 (m, 2H), 3,96 (s, 3H),

3,05 (q, 2H, J = 7,7 Hz), 1,43 (t, 3H, 7,7 Hz); MS (Cl, NH₃) m/z 205 (M+H⁺, báze); Analýza pro C₁₁H₁₂ ^N2°2^{: v}YP°čteno: C 64,70, H 5,92, N 13,72, nalezeno: C 64,88, H 6,01, N 13,96

Příklad 7

Methylester l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

1,17 g (29,4 mmol, 1,05 ekv.) hydridu sodného (60% olejová disperze) se v jedné dávce přidá k roztoku 5,7 g (27,9 mmol, 1,0 ekv.) methylesteru 3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny ve 125 ml bezvodého dimethylformamidu ·· ·· ♦ · · » · · ·

999 ··· • · • ♦ * · · ··· · • · ·· · * o teplotě místnosti. Po 20 minutách se ke vzniklé směsi přikape 3,89 ml (36,6 mmol, 1,3 ekv.) cyklopentylbromidu. Reakční směs se přes noc míchá při teplotě místnosti a poté nalije do 1 litru vody. Vodná směs se extrahuje 3 x 450 ml ethylacetátu. Organické extrakty se spojí, promyjí 3 x 400 ml vody a 1 x 200 ml vodného roztoku chloridu sodného, vysuší síranem sodným a přefiltrují. Filtrát se zkoncentruje a zbytek se vysuší. Výsledný jantarově zbarvený olej se přečistí na sloupci silikagelu za použití 10% ethylacetátu v hexanech (samospád), jako elučního činidla. Získá se 5,48 g (72 %) čirého oleje. ¹H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 8,16 (d, 1H, J = 1,0 Hz), 7,7 (m, 2H), 5,00 (kvintet, 1H, J = 7,5 Hz), 3,97 (s, 3H), 3,01 (q, 2H, J = 7,6 Hz), 2,2 (m, 4H),2,0 (m, 2H), 1,8 (m, 2H), 1,39 (t, 3H, J = 7,6 Hz); HRMS pro ^C16^H20^N2°2^: vypočteno: 272,1526, nalezeno: 272,15078

Příklad 8 l-Cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylová kyselina

Směs 5,24 g (19,2 mmol, 1,0 ekv.) methylesteru l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny ve 120 ml methanolu a 60 ml 1M hydroxidu sodného se zahřívá ke zpětnému toku. Po 1 hodině se reakční směs ochladí na teplotu místnosti, zkoncentruje na objem 75 ml, 1M kyselinou chlorovodíkovou okyselí na pH 1 a extrahuje 2 x 200 ml ethylacetátu. Organické extrakty se spojí, promyjí 1 x 150 ml vody a 1 x 150 ml vodného roztoku chloridu sodného a přefiltrují. Filtrát se zkoncentruje a zbytek se vysuší. Získá se 4,79 g (96 %) bílé pevné látky. Malý vzorek se překrystaluje ze směsi ethylacetátu a hexanů, aby se získaly analytické údaje: teplota tání 157 až 159°C, IR (KBr) 3100 až 2500, 1683, 1298 cm-1; ¹H NMR (300 MHz, DMSO-dg): δ 13,0 (brs, 1H), 8,21 (s, 1H), 7,79 (d, 1H, J = 7,9 Hz), 7,62 (sdd, 1H, J = 1,2, 8,4 Hz), 5,18 (kvintet, 1H, J = 7,5 Hz), ·· ·

- 72 2,92 (q, 2H, J = 7,6 Hz), 2,1 (m, 2H), 2,0 (m, 2H), 1,85 (m, 2H), 1,6 (m, 2h), 1,29 (t, 3H, J = 7,6 Hz); MS (Cl, NH₃) m/z 259 (M+H⁺, báze); analýza pro ^ci5^hiqⁿ2°2^: vypočteno: C 69,79, H 7,02, N 10,85, nalezeno: C 69,77, H 7,02, N 10,85

Příklad 9 (3,5-Dichlorpyridin-4-yl)amid l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

9.A l-Cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylová kyselina

7,73 ml (18,9 mmol, 1,0 ekv.) n-butyllithia v hexanech (2,45M) se přikape k roztoku 5,55 g (18,9 mmol, 1,0 ekv. ) 6-brom-l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazolu ve 100 ml bezvodého tetrahydrofuranu o teplotě -78°C. Reakční směs se během několika hodin zahřeje na teplotu místnosti a poté nalije do 600 ml vody. Vodná směs se okyselí na pH 1 a extrahuje 2 x 230 ml ethylacetátu. Organické extrakty se spojí, promyjí 1 x 150 ml vody a 1 x 100 ml vodného roztoku, vysuší síranam sodným a přefiltrují. Filtrát se zkoncentruje a vysuší. Získá se 4,9 g (100 %) špinavě bílých krystalů o teplotě tání 153 až 155°C. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆): δ je shodné se spektrem produktu získaného podle příkladu 12.

9.B l-Cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karbonylchlorid

791 μΐ (10,8 mmol, 1,4 ekv.) thionylchloridu se přidá k roztoku 2,00 g (7,74 mmol, 1,0 ekv.) 1-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny a 100 μΐ dimethylformamidu ve 100 ml bezvodého toluenu o teplotě místnosti. Reakční směs se 2 hodiny zahřívá ke zpětnému toku, poté ochladí na teplotu místnosti a zkoncentruje v rotačním odpařováku. Zbytek se vysuší za vysokého vakua při teplotě místnosti. Získá se 2,16 g (100 %) hnědých krystalů ©« ·· • · · · • · · · ·· · · · · • · ·« ·· o teplotě tání 46 až 48°C; MS (Cl, NH₃) m/z 279 (M+H⁺, ³⁷C1), 277 (M+H⁺, ³⁶C1)

9.C (3,5-dichlorpyridin-4-yl)amid l-cykÍopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

Způsobem popsaným v příkladu lf se za použití 1,08 g (3,87 mmol) l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karbonylchloridu, jako výchozí látky, získá 1,327 g (85 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě světle žluté krystalické pevné látky o teplotě tání 174 až 176°C; MS (Cl, NH₃) m/z 405 (M+H⁺, ³⁷C1), 403 (M+H⁺, ³⁵Cl); Analýza pro ^C20^H20^N4^OC12^: vypočteno: C 59,56, H 5,00, N 13,89, nalezeno: C 60,23, H 5,42, N 14,09

Příklad 10 (4,6-Dichlorpyrimidin-5-yl)amid l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny μΐ (0,680 mmol, 1,3 ekv.) thionylchloridu se přidá k roztoku 135 mg (0,523 mmol, 1,0 ekv.) 1-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny a 10 μΐ dimethylformamidu v 5 ml bezvodého toluenu o teplotě místnosti. Reakční směs se 2 hodiny zahřívá ke zpětnému toku, poté ochladí na teplotu místnosti a v rotačním odpařováku zkoncentruje do sucha. Zbytek se několik hodin suší za vysokého vakua při teplotě místnosti. Do oddělené nádoby obsahující roztok 86 mg (0,523 mmol, 1,0 ekv.) 5-amino-4,6-dichlorpyrimidinu v 5 ml bezvodého dimethylformamidu o teplotě místnosti se přidá 21 mg (0,523 mmol,

1,0 ekv.) hydridu sodného (60% olejové disperze). Po 10 minutách se ke vzniklé směsi přidá dříve připravený roztok chloridu kyseliny v 5 ml bezvodého dimethylformamidu.

Reakční směs se 24 hodin míchá při teplotě místnosti, poté • ΦΦ φ Φ φ · φ φ φ φ ·« · *· ·· · · · · • φ φ · φ φ · φ φ · · φ φ φ φφφφφφ φ φ φ φ φ φ φφφ φ φφφ φφφ φ φφ

1,5 hodiny zahřívá na 70°C, ochladí na teplotu místnosti a zředí 75 ml ethylacetátu. Zředěná směs se promyje 2 x 15 ml vody a l x 16 ml vodného roztoku chloridusodného a vysuší síranem hřoečnatým. Surový produkt se přečistí na sloupci silikagelu za použití 20% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Získá se 31 mg (15 %) bílé krystalické pevné látky o teplotě tání 171 až 172°C. Analýza pro ^C19^H19^N5^OC12^{: C 46 * * * * * * * * * 56}'⁴⁴' ^H 4/74, N 17,32, nalezeno: C 56,38, H 4,76, N 17,33.

Příklad 11

Fenylamid l-cyklopentl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny μΐ (0,629 mmol, 1,3 ekv.) thionylchloridu se přidá k roztoku 125 mg (0,484 mmol, 1,0 ekv.) 1-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny a 5 μΐ dimethy 1 formamidu v 5 ml bezvodého toluenu o teplotě místnosti. Reakční směs se 2 hodiny zahřívá ke zpětnému toku, poté ochladí na teplotu místnosti a v rotačním odpařováku zkoncentruje do sucha. Zbytek se suší několik hodin za vysokého vakua při teplotě místnosti. Surový chlorid kyseliny se rozpustí v 5 ml dichlormethanu a vzniklý roztok se přidá k roztoku 49 μΐ (0,532 mmol, 1,1 ekv.) anilinu a 67 μΐ (0,484 mmol, 1,0 ekv.) triethylaminu v 5 ml dichlormethanu. Po 18 hodinách při teplotě místnosti se reakční směs zředí 75 ml ethylacetátu, promyje vždy 1 x 15 ml 1M kyseliny chlorovodíkové, vody a vodného roztoku chloridu sodného, vysuší síranem sodným a přefiltruje. Filtrát se zkoncentruja a vysuší. Získá se 180 mg jantarově zbarveného oleje, který se přečistí na sloupci silikagelu. Získá se 160 mg špinavě bílé pevné látky, která se překrystaluje z ethylacetátu v hexanech za vzniku 130 mg (81 %) bílé krystalické pevné látky o teplotě tání 146 až 147°C. Analýza

4444 *>

44

4 4 4 • 4 4 ·

444 444

4

44

- 75 pro C₂₁H₂₃N₃O: C 75,65, H 6,95, N 12,60, nalezeno: C 75,65, H 7,02, N 12,55.

Příklad 12

Methylester 4-[(l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karbonyl)amino]benzoové kyseliny

Způsobem popsaným v příkladu 11 se za použití 300 mg (1,16 mmol, 1,0 ekv.) l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny a 193 mg (1,28 mmol, 1,1 ekv.) methyl-4-aminobenzoátu, jako výchozí látek, získá 415 mg (91 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě bílých krystalů o teplotě tání 129 až 132°C. Analýza pro C₂₃H₂₅N₃O₃: C 70,56,

H 6,44, N 10,73, nalezeno: C 70, 36, H 6,43, N 10,61

Příklad 13 (3-Chlorfenyl)amid l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

Způsobem popsaným v příkladu 11 se za použití 150 mg (0,581 mmol, 1,0 ekv.) l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny a 68 μg (0,639 mmol, 1,1 ekv.) 3-chloranilinu, jako výchozí látek, získá 211 mg (99 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě čirého oleje; HRMS pro ^C21^H22^N3^OC^^+H: vypočteno: 368,1532, nalezeno: 368,1567

Příklad 14 (3-Methoxyfenyl)amid l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylová kyselina mg (0,708 mmol, 1,0 ekv.) dimethylaminopyridinu se přidá k roztoku 196 mg (0,708 mmol, 1,0 ekv.) 1-cyklo- 76 • 9 99 » 9 9 9 » ♦ 9 ·

999 9··

9 • 9 99 pentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karbonylchloridu, 99 μΐ (0,708, 1,0 ekv.) triethylaminu a 80 μΐ (0,708 mmol, 1,0 ekv.) m-anisidinu v 5 ml dichlormethanu o teplotě místnosti. Po 48 hodinách se reakční směs zředí 75 ml ethylacetátu, prmyje 2 x 15 ml 1M kyseliny chlorovodíkové, 1 x 15 ml vody a 1 x 15 ml vodného roztoku chloridu sodného, vysuší síranem hořečnatým a přefiltruje. Filtrát se zkoncentruje, čímž se získá 0,27 g jantarově zbarvené pevné látky, která se přečistí chromatografii na silikagelu za použití gradientu 10% až 20% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Získá se 118 mg čirého oleje. Tento olejovitý produkt se nechá vykrystalovat z petroletheru, čímž se získá 75 mg (29 %) bílého prášku o teplotě tání 91 až 93°C. Analýza pro ^C22^H25^N3°2^: vypočteno: C 72,71, H 6,95, N 11,56, nalezeno: C 7ě,35, H 7,15, N 11,47

Příklad 15

Pyridin-4-ylamid l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny μΐ (0,629 mmol, 1,3 ekv.) thionylchloridu se přidá k roztoku 125 mg (0,484 mmol, 1,0 ekv.) 1-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny a 5 μΐ dimethylformamidu v 5 ml bezvodého toluenu o teplotě místnosti. Reakční směs se 2 hodiny zahřívá ke zpětnému toku, poté ochladí na teplotu místnosti a v rotačním odpařováku zkoncentruje do sucha. Zbytek se suší několik hodin za vysokého vakua při teplotě místnosti. Surový chlorid kyseliny se rozpustí v 5 ml dichlormethanu a ke vzniklému roztoku se přidá 50 mg (0,532 mmol, 1,1 ekv.) 4-aminopyridinu. Reakční směs se 1 hodinu zahřívá při 40°C, ochladí na teplotu místnosti, přes noc nechá stát a přidá se k ní 10 ml vody. Vodná směs se v rotačním odpařováku zkoncentruje do sucha. Zbytek se vyjme do 50 ml vody a 25 ml • ·444 • 4 *

- 77 4 ·

• 4

444 4 • · 44 44

44 4 4*4

4 4 4 4 4 •4 44 444 444

4 4 4

444 44* 44 4 4 dichlormethanu. Vrstvy se oddělí a vodná vrstva se extrahuje 1 x 25 ml dichlormethanu. Organické extrakty se spojí, promyjí vždy 1 x 10 ml vody a vodného roztoku chloridu sodného, vysuší síranem sodným a přefiltrují. Filtrát se zkoncentruje a vysuší. Získá se 133 mg bílé pěny, která se přečistí na sloupci silikagelu za použití 25% methanolu v dichlormethanu, jako elučníeho činidla. Získá se 122 mg bílých jehliček, který se překrystalují ze směsi ethylacetátu a hexanů, za vzniku 101 mg (62 %) za vzniku bílých lesklých destiček o teplotě tání 144 až 146°C. Analýza pro ^C20^H22^N4^O: vypočteno: C 71,83, H 6,63, N 16,75, nalezeno: C 72,00, H 7,03, N 16,16

Příklad 16

Pyridin-3-ylamid l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

Způsobem popsaným v příkladu 15 se za použití 58 mg (0,210 mmol, 1,0 ekv.) l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karbonylchloridu a 22 mg (0,231 mmol, 1,1 ekv.) 3-aminopyridinu, jako výchozích látek, vyrobí 24 mg sloučeniny uvedené v nadpisu (34 %) ve formě bílých krystalů o teplotě tání 133 až 135°C. HRMS pro C₂₀H₂₂N₄O+H: vypočteno:

335,1872, nalezeno: 335,1900

Příklad 17

Pyridin-2-ylamid l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

Způsobem popsaným v příkladu 15 se za použití 49 mg (0,177 mmol, 1,0 ekv.) l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karbonylchloridu a 18 mg (0,195 mmol, 1,1 ekv.) 2-aminopyridinu, jako výchozích látek, vyrobí 17 mg sloučeniny • 9 » · 9 » 9 9

9

- 78 uvedené v nadpisu (34 %) ve formě žluté amorfní pěny. HRMS pro C₂₀H₂₂N₄O+H: vypočteno: 335,1872, nalezeno: 335,1874

Příklad (Pyridin-4-ylmethyl)amid l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

Způsobem popsaným v příkladu 15 se za použití 51 mg (0,184 mmol, 1,0 ekv.) l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karbonylchloridu a 20 μΐ (0,193 mmol, 1,05 ekv.) 4-(aminomethyl)pyridinu, jako výchozích látek, vyrobí 13 mg sloučeniny uvedené v nadpisu (20 %) ve formě bílých krystalů o teplotě tání 147 až 149°C. HRMS pro C₂₁H₂₄N₄O+H: vypočteno: 349,2028 nalezeno: 349,2031

Příklad 19 (2-Pyridin-4-yleethyl)amid l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

Způsobem popsaným v příkladu 15 se za použití 78 mg (0,282 mmol, 1,0 ekv.) l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karbonylchloridu a 36 μΐ (0,295 mmol, 1,05 ekv.) 4-(2-aminoethyl)pyridinu, jako výchozích látek, vyrobí 35 mg sloučeniny uvedené v nadpisu (35 %) ve formě bílých krystalů o teplotě tání 123 až 126°C. Analýza pro C₂₂H₂₆N₄O.l/4H₂0: C 72,01, H 7,28, N 15,27, nalezeno: 71,77, H 7,45, N 15,23

Příklad 20

Způsobem popsaným v příkladu 15 se za použití 91 mg (0,329 mmol, 1,0 ekv.) l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karbonylchloridu a 52 mg (0,362 mmol, 1,1 ekv.) 5-aminochonolinu, jako výchozích látek, vyrobí 38 mg (30 %) slouče• · • · • · ·· · · · · niny uvedené v nadpisu ve formě světle žlutéhp prášku o teplotě tání 176 a 178°C. Analýza pro ^C24^H24^N4^O: vypočteno:

C 74,96, H 6,29, N 14,57, nalezeno: C 74,33, H 6,53, N 14,31

Příklad 21 (2,6-Dichlorfenyl)amid l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

1,1 ml (15,1 mmol, 1,3 ekv.) thionylchloridu se přidá k roztoku 3,00 g (11,6 mmol, 1,0 ekv.) 1-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny a 150 μΐ dimethyl formamidu v 60 ml bezvodého toluenu o teplotě místnosti. Reakční směs se 2 hodiny zahřívá ke zpětnému toku, poté ochladí na teplotu místnosti a zkoncentruje v rotačním odpařováku. Zbytek se vysuší za vysokého vakua při teplotě místnosti, čímž se získá 3,40 g žlutohnědých krystalů. K tomuto zbytku se přidá 1,88 g (11,6 mmol, 1,0 ekv.) 2,6-dichloranilinu. Reakční směs se pod atmosférou dusíku zahřívá na 200°C. Po 15 minutách se reakční směs ochladí na teplotu místnosti a přidá se k ní 75 ml ethylacetátu a 50 ml nasyceného vodného hydrogenuhličitanu sodného. Vzniklá směs se 10 minut míchá a oddělí se vrstvy. Organická vrstva se promyje 1 x 20 ml nasyceného hydrogenuhličitanu sodného, 1 x 20 ml vody a 1 x 20 ml vodného roztoku chloridu sodného, vysuší síranem sodným a přefiltrují. Filtrát se zkoncentruje a zbytek se vysuší. Hnědá pevná látka se překrystaluje z ethylacetátu v hexanech, čímž se získá 3,78 g (81 %) zlatohnědé krystalické pevné látky o teplotě tání 177 až 179°C. Analýza pro C₂₁H₂₁N₃OC1: vypočteno: C 52,69, H 5,26, N 10,45, nalezeno: C 62,67, H 5,20, N 10,43

Příklad 22

4-[(l-cyklopentyl-3-ethyl-l-indazol-6-karbonyl)amino]benzoová kyselina

- 80 Směs 380 mg (0,971 mmol, 1,0 ekv.) methylesteru 4-[(l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karbonyl)amino ] benzoové kyseliny, 4 ml ÍM hydroxidu sodného a 20 ml methanolu 40 minut zahřívá ke zpětnému toku, ochladí na teplotu místnosti a zkoncentruje v rotačním odpařováku. Zbytek se zředí 150 ml vody, vodný roztok se okyselí na pH 1 a extrahuje 2 x 50 ml ethylacetátu. Organické extrakty se spojí, promyjí vždy 1 x 25 ml vody a vodného roztoku chloridu sodného, vysuší síranem sodným a přefiltrují. Filtrát se zkoncentruje a zbytek se vysuší za vysokého vakua při teplotě místnosti. Získá se 298 mg (81 %) bílé krystalické pevné látky o teplotě tání 249 až 251°C. Analýza pro ^C22^H23^N3°3^{: C 70}'⁰⁰' ^h 6,14, N 11,13, nalezeno: C 69,66, H 6,13, N 11,08

Příklad 23 (4-Benzyloxykarbamoylfenyl)amid l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

140 mg (0,728 mmol, 1,1 ekv.) hydrochloridu l-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidu se v jedné dávce přidá k roztoku 250 mg (0,662 mmol, 1,0 ekv.) 4-[(l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karbonyl)amino]benzoové kyseliny, 106 mg (0,662 mmol, 1,0 ekv.) hydrochloridu O-benzylhydroxylaminu, 101 mg (0,662 mmol, 1,0 ekv.) hydrátu 1-hydroxybenzotriazolu a 194 μΐ (1,39 mmol, 2,1 ekv.) triethylaminu ve 25 ml dichlormethanu o teplotě místnosti. Po 18 hodinách se reakční směs zředí 150 ml ethylacetátu, ethylacetátová směs se promyje vždy 1 x 25 ml ÍM kyseliny chlorovodíkové, vody a vodného roztoku chloridu sodného a vysušísíranem sodným. Surový produkt se přečistí mžikovou chromatografií na sloupci silikagelu za použití 2% methanolu v dichlormethanu, jako elučního činidla. Získá se 212 mg (66 %) bílé krystalické pevné látky o teplotě tání 194 až 198^eC.

· · > · · ·

9· · · · • · • · · · « « * ·· 9 ·· ·· • a · · : i · : :

999 · ··· ···

- 81 Analýza pro C₂₉H_3QN₄O₃: C 72,17, H 7,10, N 11,61, nalezeno:

C 71,62, H 6,47, N 11,85

Příklad 24 (4-Hydroxykarbamoylfenyl)amid l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

Směs 187 mg (0,387 mmol, 1,0 ekv.) (4-benzyloxykarbamoylfenyl)amidu l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny a 200 mg 10% palladia na uhlíku v 10 ml ethylacetátu a 10 ml methanolu se umístí do Parrova hydrogenačního zařízení a 1 hodinu třepe za tlaku vodíku 206,1 kPa při teplotě místnosti. Reakční směs se přefiltruje přes celit a filtrát se zkoncentruje a zbytek se vysuší. Získaná zlatohnědá pevná látka se přečistí mžikovou chromatografii na sloupci silikagelu za použití gradientu 4%, 10% a 20% methanolu v dichlormethanu, jako elučního činidla. Získá se 74 mg (49 %) zlatohnědé pevné látky o teplotě tání 175°C (za rozkladu). HRMS pro C₂₂H₂₄N₄O₃+H: vypočteno: 393,1928, nalezeno: 393,1949

Příklad 25

25.A Methylester l-cyklobutyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

Způsobem popsaným v preparativním postupu 3 se za použití 750 mg (3,67 mmol, 1,0 ekv.) methylesteru 3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny a 0,38 ml (4,04 mmol, 1,1 ekv.) cyklobutylbromidu, jako výchozích látek, získá 307 mg (32 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě čirého oleje. HRMS pro C₁₅H₁₈N₂O₂+H: vypočteno 259,1447, nalezeno: 259,14550

- 82 • · · * · ·· · * • · : ι ’ • · ♦ * · • · » · > * • · · ··* • ·

25.B Methylester 3-ethyl-l-isopropyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

Způsobem popsaným v preparativním postupu 3 se za použití 750 mg (3,67 mmol, 1,0 ekv.) methylesteru 3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny a 0,38 ml (4,04 mmol, 1,1 ekv.) 2-brompropanu, jako výchozích látek, získá 359 mg (40 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě čirého oleje. HRMS pro C₁₄H₁₈N₂O2+H: vypočteno 247,1448, nalezeno: 247,14530

25.C Methylester l-cyklopropylmethyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

Způsobem popsaným v preparativním postupu 3 se za použití 750 mg (3,67 mmol, 1,0 ekv.) methylesteru 3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny a 0,39 ml (4,04 mmol, 1,1 ekv.) cyklopropylmethylbromidu, jako výchozích látek, získá 338 mg (36 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě čirého oleje. HRMS pro C₁₅H₁₈N₂O₂+H: vypočteno 259,1447, nalezeno: 259,1435

25.D Methylester l-cyklohex-2-enyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

Způsobem popsaným v preparativním postupu 3 se za použití 750 mg (3,67 mmol, 1,0 ekv.) methylesteru 3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny a 0,46 ml (4,04 mmol, 1,1 ekv.) 3-bromcyklohexanu, jako výchozích látek, získá 467 mg (45 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě čirého oleje. HRMS pro C₁₇H₂₀N₂O₂+H: vypočteno 284,1525, nalezeno: 284,1512

25.E Methylester 3-ethyl-l-[6-(4-fenylbutoxy)hexyl]-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny • 0

· ·

Způsobem popsaným v preparativním postupu 3 se za použití 137 mg (0,671 mmol, 1,0 ekv.) methylesteru 3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny a 273 mg (0,872 mmol, 1,3 ekv.) 6-(4-fenylbutoxy)hexylbromidu, jako výchozích látek, získá 163 mg (56 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě žlutého oleje. HRMS pro C₂₇H₃₆N₂O₃+H: vypočteno 437,2804, nalezeno: 437,2833

Příklad 26

26.A l-Cyklobutyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylová kyselina

Způsobem popsaným v preparativním postupu 3 se za použití 225 mg (0,906 mmol, 1,0 ekv.) methylesteru 1-cyklobutyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny, jako výchozí látky, vyrobí 168 mg (76 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě bílé krystalické pevné látky o teplotě tání 148 až 150°C. HRMS pro C₁₄H₁₆N₂O₂+H: vypočteno: 245,1290, nalezeno: 245,1302

26.B 3-Ethyl-l-isopropyl-lH-indazol-6-karboxylová kyselina

Způsobem popsaným v preparativním postupu 3 se za použití 300 mg (1,22 mmol, 1,0 ekv.) methylesteru 1-ethyl-l-isopropyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny, jako výchozí látky, vyrobí 260 mg (92 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě světle žluté krystalické pevné látky o teplotě tání 160 až 163°C. Analýza pro C₁₃H₁₆N₂O₂: vypočteno: C 67,21, H 6,94, N 12,05, nalezeno: C 67,07,

H 7,04, N 12,16

26.C l-Cyklopropylmethyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylová kyselina » 9 9 · • · · · · 9

- 84 Způsobem popsaným v preparativním postupu 3 se za použití 294 mg (1,14 mmol, 1,0 ekv.) methylesteru 1-cyklopropylmethyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny, jako výchozí látky, vyrobí 261 mg (94 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě světle žluté pevné látky o teplotě tání 126 až 130°C. Analýza pro ^ci4Hi6N2°2^: vypočteno: C 68,83, H 6,60, N 11,46, nalezeno: C 68,39, H 6,67, N 11,41

26. D 3-Ethyl-l-[6-(4-fenylbutoxy)hexyl]-lH-indazol-6-karboxylová kyselina

Způsobem popsaným v preparativním postupu 3 se za použití 147 mg (0,337 mmol, 1,0 ekv.) methylesteru 1-ethyl-l-[(6-(4-fenylbutoxy)hexyl]-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny, jako výchozí látky, vyrobí 137 mg (96 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě světle žlutého oleje. HRMS pro ^C26^H34^N2°3^+H: vypočteno: 423,2648, nalezeno: 423,26795.

Příklad 27

27. A Methylester l-cyklohexyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

Směs 417 mg (1,47 mmol, 1,0 ekv.) methylesteru 1-cyklohex-2-enyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny a 50 mg 10% palladia na uhlíku (50% vodná vlhkost) ve 20 ml ethylacetátu se umístí do Parrova hydrogenačního zařízení a třepe 45 minut za tlaku vodíku 309,15 kPa. Reakční směs se přefiltruje přes celit. Filtrát se zkoncentruje v rotačním odpařováku a zbytek se vysuší za vysokého vakua při teplotě místnosti. Získá se 399 mg (95 %) čirého oleje. HRMS pro ^C17^H22^N2°2^+H: vypočteno: 287,1759, nalezeno: 287,1783

27.B l-Cyklohexyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylová kyselina

- 85 • * ♦ • · fc. · · · · ·· ···

Způsobem popsaným v preparativním postupu 3 se za použití 366 mg (1,28 mmol, 1,0 ekv.) methylesteru 1-cyklohexyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny, jako výchozí látky, vyrobí 325 mg (93 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě světle žluté pevné látky o teplotě tání 196 až 197°C. HRMS pro C₁₆H₂qN₂O₂+H: vypočteno: 273,1603, nalezeno: 273,1596.

Příklad 28

28.A Methylester 3-ethyl-l-(4-fluorfenyl)-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

0,245 ml (2,24 mmol, 2,0 ekv.) l-brom-4-fluorbenzzenu se přidá k suspenzi 0,23 g (1,12 mmol, 1,0 ekv.) methylesteru 3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny, 0,23 g (1,67 mmol, 1,5 ekv.) uhličitanu draselného a přibližně 100 mg (0,348 mmol, 0,3 ekv.) bromidu měďného v 6 ml N-methylpyrrolidinonu o teplotě místnosti. Reakční směs se 28 hodin zahřívá na 175°C, poté ochladí na teplotu místnosti a nalije do 100 ml vody. Vodná směs se extrahuje 3 x 50 ml ethylacetátu. Organické extrakty se spojí, promyjí 2 x 50 ml vody a 1 x 50 ml vodného roztoku chloridu sodného. Vodné promývací roztoky se znovu extrahují 1 x 75 ml ethylacetátu. Ethylacetátové extrakty se spojí, vysuší síranem sodným a přefiltrují. Filtrát se zkoncentruje a vysuší. Získá se 0,6 g hnědého oleje, který se přečistí na sloupci silikagelu za použití 10% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Z9ská se 96 mg (29 %) bílé krystalické pevné látky o teplotě tání 72 až 74 °C, MS (Cl, NH₃) m/z 299 (M+H⁺, báze)

28.B 3-Ethyl-l-(4-fluorfenyl)-lH-indazol-6-karboxylová kyselina

Způsobem popsaným v preparativním postupu 3 se za použití 96 mg (0,322 mmol, 1,0 ekv.) methylesteru 3-ethyl-1-(4-fluorfenyl)-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny, jako výchozí látky, vyrobí 84 mg (92 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě bílé pevné látky o teplotě tání 204 až 205°C. HRMS pro C₁₆H₁₃N₂O₂F+H: vypočteno: 285,1040, nalezeno: 285,10257

Příklad 29 (3,5-Dichlorpyridin-4-yl)amid l-cyklobutyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

Způsobem popsaným v příkladu 10 se za použití 144 mg (0,589 mmol, 1,0 ekv.) l-cyklobutyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny, jako výchozí látky, vyrobí 44 mg (18 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě bílé krystalické pevné látky o teplotě tání 166 až 168°C. HRMS pro ^C19^H18^N4^OC12^+H: vypočteno: 389,0936

Příklad 30 (3,5-Dichlorpyridin-4-yl)amid 3-ethyl-l-isopropyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

Způsobem popsaným v příkladu 10 se za použití 232 mg (1,00 mmol, 1,0 ekv.) 3-ethyl-l-isopropyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny, jako výchozí látky, vyrobí 73 mg (20 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě špinavě bílé krystalické pevné látky o teplotě tání 145 až 148C. HRMS pro C_lgH₁₈N₄OCl₂+H: vypočteno: 377,0936, nalezeno: 377,0938

Příklad 31 (3,5-Dichlorpyridin-4-yl)amid l-cyklopropylmethyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

Způsobem popsaným v příkladu 10 se za použití 224 mg (0,917 mmol, 1,0 ekv.) l-cyklopropylmethyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny, jako výchozí látky, vyrobí 51 mg (14 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě špinavě bílé krystalické pevné látky o teplotě tání 148 až 150°C. HRMS pro C_igH₁₈N₄OCl₂+H: vypočteno: 389,0936, nalezeno: 389,091

Příklad 32 (3,5-Dichlorpyridin-4-yl)amid l-cyklohexyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

Způsobem popsaným v příkladu 10 se za použití 300 mg (1,10 mmol, 1,0 ekv.) l-cyklohexyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny, jako výchozí látky, vyrobí 83 mg (18 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě špinavě bílé krystalické pevné látky o teplotě tání 124 až 127°C. MS (Cl, NH₃) m/z 421 (M+H⁺, ³⁷C1+³⁷C1), 419 (M+H⁺, ³⁵C1+³⁷C1, báze), 4167 (M+H⁺, ³⁶C1+³⁶C1)

Příklad 33 (3,5-Dichlorpyridin-4-yl)amid 3-ethyl-l-[6-(4-fenylbutoxy)hexyl]-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

Způsobem popsaným v příkladu 1 se za použití 127 mg (0,301 mmol, 1,0 ekv.) 3-ethyl-l-[6-(4-fenylbutoxy)hexyl]-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny, jako výchozí látky, vyrobí 119 mg (70 %) čirého oleje, který se překrystaluje ze směsi etheru a hexanů. Získá se 72 mg (42 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě bílých krystalů o teplotě tání 76 až 79°C. HRMS pro C₃₁H₃₆N₄O₂C1₂+H: vypočteno 567,2294, nalezeno: 567,2288 φφ · · φ φ φ ♦ φ φ φ * φφφ φφφ

- 88 Příklad 34 (3,5-Dichlorpyridin-4-yl)amid 3-ethyl-l-(4-fluorfenyl) -1H-indazol-6-karboxylové kyseliny

Způsobem popsaným v příkladu 10 se za použití 80 mg (0,281 mmol, 1,0 ekv.) 3-ethyl-l-(4-fluorfenyl)-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny, jako výchozí látky, vyrobí 22 mg (18 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě bílé krystalické pevné látky o teplotě tání 197 až 199°C. HRMS pro ^C21^H15^N4^OCF2^F+H: 429,0688, nalezeno: 429,0704

Příklad 35

Methylester [(l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karbonyl)amino]octové kyseliny

134 mg (0,697 mmol, 1,0 ekv.) hydrochloridu l-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidu se v jedné dávce přidá k roztoku 180 mg (0,697 mmol, 1,0 ekv.) 1-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny, 87,5 mg (0,697 mmol, 1,0 ekv.) hydrochloridu methylesteru glycinu, 107 mg (0,697 mmol, 1,0 ekv.) hydrátu 1-hydroxybenzotriazolu a 194 μΐ (1,39 mmol, 2,0 ekv.) triethylaminu v 5 ml dichlormethanu o teplotě tmísntosti. Po 18 hodinách se reakční směs zředí 150 ml ethylacetátu, promyje vždy 1 x 25 ml 1M kyseliny chlorovodíkové, vody a vodného roztoku chloridu sodného a vysuší síranem sodným. Surový produkt se přečistí mžikovou chromatografii na sloupci silikagelu za použití 40% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Získá se 187 mg (66 %) voskovíté pevné látky o teplotě tání 89 až 93°C. Analýza pro C_lgH₂₃N₃O₃: vypočteno: C 65,63, H 7,04, N 12,76, nalezeno: C 65,74, H 7,02, N 12,74 • 00 0· • » · 0 0 · · 0 0 4 · 000 440

0 4 • 44 0 0 ·*

Příklad 36 [(l-Cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karbonyl)amino]octová kyselina

Způsobem popsaným v preparativním postupu 3 se za použití 170 mg (0,516 mg, 1,0 ekv.) methylesteru [(1-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karbonyl)amino]octové kyseliny, jako výchozí látky, vyrobí 155 mg (95 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě bílých krystalů o teplotě tání 182 až 184°C. Analýza pro C₁₇H₂₁N₃O₃: C 64,73, H 6,71, N 13,32, nalezeno: C 64,73, H 6,80, N 12,81

Příklad 37 (Benzyloxykarbamoylmethyl)amid l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

Způsobem popsaným v příkladu 23 se za použití 144 mg (0,457 mmol, 1,0 ekv.) [(l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboynl)amino]octové kyseliny, jako výchozí látky, vyrobí sloučenina uvedená v nadpisu ve formě bílé amorfní pevné látky. NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 4,93 (s, 2H), 3,00 (q, 2H, J = 7,6 Hz), 2,2 (m, 4H), 2,0 (m, 2H), 1,7 (m, 2H), 1,39 (t, 3H, J = 7,6 Hz); MS (Cl, NH₃) m/z 421 (M+H⁺, báze)

Příklad 38

Hydroxykarbamoylmethylamid l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

Směs 120 mg (0,285 mmol, 1,0 ekv.) (benzyloxykarbamoylmethyl )amidu l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kysleiny a 0,08 g 10% palladia na uhlíku (50% vodná vlhkost) v 10 ml methanolu a 10 ml ethylacetátu se umístí do Parrova hydrogenačního zařízení a třepe za tlaku 206,1 kPa po dobu 40 minut. Reakční směs se přefiltruje přes celit a filtrát se zkoncentruje a vysuší. Získá se 104 mg zlatohnědé pevné látky, která se trituruje s hexany. Získá se 69 mg (73 %) zlatohnědého krystalického prášku o teplotě tání 105°C (za rozkladu). HRMS pro C₁₇H₂2^N4°3⁺H: vypočteno: 331,1772, nalezeno: 331,1769

Příklad 39 (2-Methylsulfanylethyl)amid l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

Způsobem popsaným v příkladu 35 se za použití 57 mg (0,221 mmol, 1,0 ekv.) l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny a 20 mg (0,221 mmol, 1,0 ekv.) 2-(methylthio)ethylaminu, jako výchozích látek, vyrobí 53 mg (73 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě bílých krystalů o teplotě tání 81 až 83°C. Analýza pro ^ci8^H25^N3°8^: vypočteno: C 65,21, H 7,60, N 12,68, nalezeno: C 65,26, H 7,49, N 12,81

Příklad 40 (Methoxykarbamoylmethyl)amid l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

Způsobem popsaným v příkladu 37 se za použití 222 mg (0,704 mmol, 1,0 ekv.) [(l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karbonyl)amino]octové kyseliny a 59 mg (0,704 mmol,

1,0 ekv.) hydrochloridu methoxylaminu, jako výchozích látek, vyrobí 39 mg čirého oleje. Tento olej se nechá vykrystalovat z etheru v hexanech, čímž se získá 34 mg (14 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě bílých krystalů o teplotě tání • · · · · · • · · «»· ·· ·· * · · ·

135 až 136°C. Analýza pro ^ci8^H24^N4°3^: vypočteno: C 62,77, H 7,02, N 16,27, nalezeno: C 62,64, H 6,87, N 16,47

Příklad 41

Ethylester 3-[(l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karbonyl)aminojpropionové kyseliny

Způsobem popsaným v příkladu 35 se za použití 297 mg (1,15 mmol, 1,0 ekv.) l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny a 177 mg (1,15 mmol, 1,0 ekv.) hydrochloridu ethylesteru beta-alaninu, jako výchozích látek, vyrobí 372 mg (90 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě bílých krystalů o teplotě tání 74 až 76°C. Analýza pro ^C20^H27^N3°3^{: v}YP°čteno: C 67,21, H 7,61, N 11,76, nalezeno: C 67,40, H 7,56, N 11,99

Příklad 4 2

3-[(l-Cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karbonyl)amino]propionová kyselina

Směs 330 mg (0,923 mmol, 1,0 ekv.) ethylesteru 3-[(l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karbonyl)amino]propionové kyseliny v 10 ml ethanolu a 4 ml IM hydroxidu sodného se 1 hodinu zahřívá ke zpětnému toku. Reakční směs se ochladí na teplotu místnosti a zkoncentruje. Zbytek se zředí 75 ml vody a vodná směs se okyseí na pH 1 a extrahuje 3 x 35 ml ethylacetátu. Organické extrakty se spojí, promyjí 1 x 25 ml vody, 1 x 25 ml vodného roztoku chloridu sodného, vysuší síranem sodným a přefiltrují. Filtrát se zkoncentruje v rotačním odpařováku a zbytek se vysuší za vysokého vakua při teplotě místnosti. Získá se 297 mg (98 %) bílé pevné látky o teplotě tání 151 až 153°C. Analýza pro ·· ·· ♦ · · ♦ • · · · ··· ©·· ··

- 92 ^C18^H23^N3°3^: vypočteno: C 65,63, Η 7,04, N 12,76, nalezeno: C 65,75, H 7,12, N 12,91

Příklad 43 (2-Benzyloxykarbamoylethyl)amid l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

Způsobem popsaným v příkladu 37 se za použití 250 mg (0,759 mmol, 1,0 ekv.) 3-[(l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karbonyl)amino]propionové kyseliny a 121 mg (0,759 mmol, 1,0 ekv.) hydrochloridu O-benzylhydroxylaminu, jako výchozích látek, vyrobí 237 mg (72 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě bílé pevné látky o teplotě tání 134 až 136°C. Analýza pro ^C25^H30^N4°3^: vypočteno: C 69,10, H 6,9Ž, N 12,89, nalezeno: C 69,36, H 6,75, N 12,85

Příklad 44 (2-Hydroxykarbamoylethyl)amid l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

Způsobem popsaným v příkadu 38 se za použití 203 mg (0,467 mmol, 1,0 ekv.) (2-benzyloxykarbamoylethyl)amidu 1-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny, jako výchozí látky, a 50 mg hydroxidu palladnatého na uhlíku (Pearlmanova katalyzátoru), vyrobí 174 mg (91 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě bílého prášku o teplotě tání 166 až 169C. Analýza pro ^ci8^H24^N4°3^: vypočteno: C 62,77, H 7,02, N 16,27, nalezeno: c 62,58, H 7,12, N 16,27

Příklad 45

Ethylester [(l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karbonyl)methylamino]octové kyseliny • * • 9 9 · 9999 • · * 9 ········

9 9 · ·9 «·· · 999 ·99 99 99

- 93 Způsobem popsaným v příkladu 35 se za použití 284 mg (1,10 mmol, 1,0 ekv.) l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny a 169 mg (1,10 mmol, 1,0 ekv.) hydrochloridu ethylesteru sarkosinu, jako výchozích látek, vyrobí 220 mg (56 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě čirého oleje. Analýza pro C₂₀H₂₇N₃O₃: C 67,21, H 7,61, N 11,76, nalezeno: C 66,93, H 7,73, N 11,77

Příklad46 [l-Cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karbonyl)methylamino]octová kyselina

Způsobem popsaným v příkladu 42 se za použití 201 mg (0,562 mmol, 1,0 ekv.) ethylesteru [(l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karbonyl)methylamino]octové kyseliny, jako výchozí látky, vyrobí 185 mg (100 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě bílé amorfní pevné látky. Analýza pro ^C18^H23^N3°3·i/^4H2^O: vypočteno: C 64,74, H 7,09, N 12,58, nalezeno: C 64,73, H 7,55, N 12,47

Příklad 47 (Benzyloxykarbamoylmethyl)methylamid l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyse1iny

Způsobem popsaným v příkladu 37 se za použití 160 mg (0,486 mmol, 1,0 ekv.) [(l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karbonyl)methylamino]octové kyseliny, jako výchozí látky, vyrobí 134 mg (64 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě čirého oleje. HRMS pro ^c25^H30^N4°3^+H: vypočteno: 435,2398, nalezeno: 435,2376 ··· • · · ··

- 94 Příklad 48

Hydroxykarbamoylmethylmethylamid l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

Způsobem popsaným v příkladu 38 se za použití 126 mg (0,290 mmol, 1,0 ekv.) (benzyloxykarbamoylmethyl)methylamidu l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny, jako výchozí látky a 40 mg hydroxidu palladnatého na uhlíku (Pearlmanova katalyzátoru) vyrobí 78 mg (78 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě světle zlatohnědého prášku o teplotě tání 63°C (za rozkladu). HRMS pro ^C18^H24^N4°3^{+H: v}YP°čteno: 345,19285, nalezeno: 345,1912

Příklad 49 [(Hydroxymethylkarbamoyl)methy1]amid l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

390 mg (16,9 mmol, 20 ekv.) sodíku ve formě 3 až 8mm kuliček se během 30 minut po částech přidá do 10 ml methanolu. Ke vzniklé směsi se přikape roztok 707 mg (8,47 mmol, 10 ekv.) hydrochloridu N-methylhydroxylaminu v 10 ml methanolu. Reakční směs se 10 minut míchá a přikape se k ní roztok 297 mg (0,847 mmol, 1,0 ekv.) methylesteru [(1-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karbonyl)amino]octové kyseliny v 10 ml methanolu. Reakční směs se 16 hodin míchá při teplotě místnosti, zkoncentruje na polovinu počátečního objemu a zředí 150 ml vody. vodná směs se okyselí na pH 2 a extrahuje 2 x 50 ml ethylacetátu. Organické extrakty se spojí, promyjí 2 x 20 ml vody a 1 x 20 ml vodného roztoku chloridu sodného, vysuší síranem sodným a přefiltrují. Filtrát se zkoncentruje a zbytek se vysuší. Získá se 0,33 g čirého oleje, který se přečistí mžikovou chromatografii na sloupci silikagelu za použití 10% methanolu v dichlormetha95 nu, jako elučního činidla. Získá se 236 mg bílé pěny, z níž se triturací s pentanem vyrobí 150 mg (51 %) bílé amorfní pevné látky o teplotě tání 60°C (za rozkladu). Analýza pro ^C18^H24^N4°3-^H2^0: vypočteno: C 59,65, H 7,23, N 15,46, nalezeno: C 62,04, H 7,39, N 15,86

Příklad 50

50.A terc.Butylester S-(1-benzyloxykarbamoylethylJkarbamové kyseliny

Způsobem popsaným v příkladu 44 se za použití 500 mg (2,64 mmol, 1,0 ekv.) N-(terc.butoxykarbonyl)-L-alaninu a 422 mg (2,64 mmol, 1,0 ekv.) hydrochloridu O-benzylhydroxylaminu vyrobí 58š mg (75 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě bílé olejovité pevné látky. -*-H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 9,02 (brs, IH), 7,37 (m, 5H), 4,95 (m, IH), 4,90 (s, 2H), 4,03 (m, IH), 1,41 (s, 9H), 1,33 (d, 3H, J = 7,0 Hz); MS (Cl, NH₃) m/z 295 (M+H⁺, báze)

50.B Hydrochlorid S-2-amino-N-benzyloxypropionamidu

Plynný chlorovodík se 1 až 2 minuty nechá probublávat roztokem 561 mg (1,91 mmol, 1,0 ekv.) terc.butylesteru S-(l-benzyloxykarbamoylethyl)karbamové kyseliny v 10 ml bezvodého 1,4-dioxanu o teplotě 0°C. Reakční směs se 45 minut míchá při teplotě místnosti a zkoncentruje v rotačním odpařováku. Zbytek se vysuší za vysokého vakua při teplotě místnosti. Získá se 492 mg (>100%) bílé hygroskopické amorfní pevné látky. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d_g): δ 11,8 (s, IH), 8,38 (brs, 3H), 7,38 (m, 5H), 4,82 (m, 2H), 3,68 (m, IH), 1,29 (d, 3H, J = 6,9 Hz)

99 9

9

99

Příklad 51 (1-Benzyloxykarbamoylethyl)amid S-l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

Způsobem popsaným v příkladu 37 se za použití 200 mg (0,774 mmol, 1,0 ekv.) l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny 180 mg (0,774 mmol, 1,0 ekv.) hydrochloridu S-2-amino-N-benzyloxypropionamidu, jako výchozích látek, vyrobí 322mg (96 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě čirého oleje. HRMS pro ^C25^H30^N4°3^+H: vypočteno: 435,2396, nalezeno: 435,2424

Příklad 52 (1-Hydroxykarbamoylethyl)amid S-l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

Způsobem popsaným v příkladu 38 se za použití 288 mg (0,663 mmol, 1,0 ekv.) (1-benzyloxykarbamoylethyl)amidu S-l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny, jako výchozí látky a 90 mg hydroxidu palladnatého na uhlíku, jako katalyzátoru, vyrobí 170 mg (75 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě zlatohnědého prášku o teplotě tání 106°C (za rozkladu). HRMS pro C_lgH₂₄N₄O₃+H: vypočteno: 345,1927, nalezeno: 345,1923

Příklad 53 terč.Butylester R-(1-benzyloxykarbamoylethyl)karbamové kyseliny

Způsobem popsaným v příkladu 37 se za použití 500 mg (2,64 mmol, 1,0 ekv.) N-(terč.butoxykarbony1)-D-alaninu a

422 mg (2,64 mmol, 1,0 ekv.) hydrochloridu O-benzylhydroxyl97 • · v · ··«····· • « · · · · ··· · ··· ··* ·· ·· aminu vyrobí 592 mg (76 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě bílé olejovité pevné látky. ³H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 9,02 (brs, IH), 7,37 (m, 5H), 4,95 (m, IH), 4,90 (s, 2H),

4,03 (m, IH), 1,41 (s, 9H), 1,33 (d, 3H, J = 7,0 Hz); MS (Cl, NH₃) m/z 295 (M+H⁺, báze)

Příklad 54 (1-Hydroxykarbamoylethyl)amid R-l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

54.A Hydrochlorid R-2-amino-N-benzyloxypropionamid

Plynný chlorovodík se 1 až 2 minuty nechá probublávat roztokem 570 mg (1,94 mmol, 1,0 ekv.) terč.butylesteru R-(1-benzyloxykarbamoylethyl)karbamové kyseliny v 10 ml bezvodého 1,4-dioxanu o teplotě 0’C. Reakční směs se 45 minut míchá při teplotě místnosti a zkoncentruje v rotačním odpařováku. Zbytek se vysuší za vysokého vakua při teplotě místnosti. Získá se 512 mg (>100%) bílé hygroskopické amorfní pevné látky. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆): δ 11,8 (s, IH), 8,38 (brs, 3H), 7,38 (m, 5H), 4,82 (m, 2H), 3,68 (m,

IH), 1,29 (d, 3H, J = 6,9 Hz)

54.B (l-Benzyloxykarbamoylethyl)amid R-l-cyklopentyl-3-ethy1-IH-indazo1-6-karboxylové kyseliny

Způsobem popsaným v příkladu 37 se za použití 200 mg (0,774 mmol, 1,0 ekv.) l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny a 180 mg (0,774 mmol, 1,0 ekv.) hydrochloridu R-2-amino-N-benzyloxypropionamidu, jako výchozích látek, vyrobí 330 mg (98 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě čirého oleje: HRMS pro ^H25^N30^N4°3^+H: vypočteno: 435,2396, nalezeno: 435,2414 « φφφφ φφ φ • · • · · • · φφφ · φφ φφ φ φ φ φ φ · · φ φφφ φφφ φ « φφ φφ

54.C (1-Hydroxykarbamoylethyl)amid R-l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

Způsobem popsaným v příkladu 30 se za použití 295 mg (0,679 mmol, 1,0 ekv.)) (1-benzyloxykarbamoylethyl)amidu R-l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny, jako výchozí látky a 90 mg hydroxidu palladnatého na uhlíku, jako katalyzátoru, vyrobí 201 mg (86 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě zlatohnědého prášku o teplotě tání 102°C (za rozkladu). HRMS pro C_lgH₂₄N₄O₃+H: vypočteno:

345,1927, nalezeno: 345,1927

Příklad 55 l-Cyklopentyl-3-ethyl-6-thiofen-2-yl-lH-indazol

Roztok 76 mg (0,598 mmol, 1,2 ekv.) thiofen-2-boronové kyseliny v 0,5 ml methanolu se přidá k uspsenzí 146 mg (0,498 mmol, 1,0 ekv.) 6-brom-l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazolu a 17 mg (0,0149 mmol, 0,03 ekv.) tetrakis(trifenylfosfin)palladia(O) ve 2 ml toluenu a 0,5 ml 2M vodného uhličitanu sodného o teplotě místnosti. Reakční směs se 4 hodiny zahřívá ke zpětnému toku, poté ochladí na teplotu místnosti a zředí 50 ml ethylacetátu. Zředěná směs se promyje vždy 1 x 10 ml vody a vodného roztoku chloridu sodného a vysuší síranem hořečnatým. Surový produkt se přečistí mžikovou chromatografií na sloupci silikagelu za použití 3% ethylacetátuv hexanech, jako elučního činidla. Z9ská se 81 mg (55 %) čirého oleje, který během stání vykrystaluje: teplota tání 60 až 64°C. HRMS pro ^cis^H20^N2^S: vypočteno: 297,1427, nalezeno: 297,1484

Příklad 56 l-Cyklopentyl-3-ethyl-6-fenyl-lH-indazol ·· · · · ··

- 99 Způsobem popsaným v příkladu 55 se za použití 128 mg (0,437 mmol, 1,0 ekv.) 6-brom-l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazolu a 75 mg (0,612 mmol, 1,4 ekv.) fenylboronové kyseliny, jako výchozích látek, vyrobí 98 mg (77 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě bílých krystalů o teplotě tání 72 až 74°C. Analýza pro ^c3o^H22^N2^: vypočteno: C 82,77, H 7,64, N 9,65, nalezeno: C 81,95, H 7,82, N 9,75

Příklad 57 (3,5-Dichlorpyridin-4-yl)methylamid l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny

5,2 mg (0,130 mmol, 1,05 ekv.) hydridu sodného (60% olejová disperze) se přidá k roztoku 50 mg (0,124 mmol, 1,0 ekv.) (3,5-dichlorpyridin-4-yl)amidu l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny ve 3 ml bezvodého dimethylformamidu o teplotě místnosti. Po 30 minutách se ke vzniklé směsi přidá 7,7 μΐ (0,124 mmol, 1,0 ekv.) jodmethanu. Reakční směs se 4 hodiny míchá při teplotě místnsti, zředí 50 ml vody a extrahuje 2 x 20 ml ethylacetátu. Ethylacetátové extrakty se spojí, promyjí 2 x 5 ml vody a 1 x 5 ml vodného roztoku chloridu sodného, vysuší síranem sodným a přefiltrují, filtrát se zkoncentruje a vysuší. Získaný žlutý olej se přečistí mžikovou chromatografií na sloupci silikagelu za použití 25% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Získá se 27 mg (52 %) bílé krystalické pevné látky o teplotě tání 118 až 119°C. HRMS pro C₂₁H₂₂N₄OC1₃+H: vypočteno: 417,12519, nalezeno: 417,12270.

Příklad 58

Dimethylamid l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazolkarboxylové kyseliny

100 mg (0,246 mmol, 1,1 ekv.) hydrochloridu l-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidu se v jedné dávce přidá k roztoku 57,8 mg (0,224 mmol, 1,0 ekv.) 1-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny, 18 mg (0,224 mmol, 1,0 ekv.) hydrochloridu dimethylaminu, 34 mg (0,224 mmol, 1,0 ekv.) hydrátu hydroxybenzotriazolu a 66 μΐ (0,470 mmol, 2,1 ekv.) triethylaminu v 5,0 ml bezvodého methylenchloridu o teplotě místnosti. Reakční směs se 18 hodin míchá pod atmosférou dusíku a zředí 40 ml ethylacetátu. Výsledná směs se promyje 10 ml ÍM kyseliny chlorovodíkové a vysuší síranem sodným. Surový produkt se přečistí na sloupci silikagelu za použití směsi ethylacetátu a dichlormethanu v poměru 50 : 50, jako elučního činidla. Získás e 55 mg (86 %) čirého oleje. HRMS pro C₁₇H₂₃N₃O+H: vypočteno: 285,1843, nalezeno: 285,1841 ·· · • ·

Claims (20)

101 f> 1/ 7fC>PATENTOVÉ NÁROKY

1. Deriváty indazolu obecného vzorce I kde p

R představuje vodík, alkylskupinu s 1 až 9 atomy uhlíku, skupinu -(01^^-(5- až 10-členný heterocyklyl), kde m před- stavuje číslo 0 až 2, alkoxyalkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v alkoxylové a 1 až 6 atomy uhlíku v alkylové části, alkenylskupinu se 2 až 6 atomy uhlíku nebo skupinu -(Z₁)j₃(Z₂)_c-aryl se 6 až 10 atomy uhlíku v arylové části, kde bac představuje každý nezávisle číslo 0 nebo 1, Z^ představuje alkylenskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo alkenylenskupinu se 2 až 6 atomy uhlíku a Z₂ představuje kyslík, síru, skupinu S0₂ nebo NR₁₂, přičemž uvedené skupiny R jsou popřípadě substituovány jedním až třemi substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, hydroxyskupiny, alkylskupiny s 1 až 5 atomy uhlíku, alkenylskupiny se 2 až 5 atomy uhlíku, alkoxyskupiny s 1 až 6 atomy uhlíku, trifluormethylskupiny, nitroskupiny, skupiny CO₂R₁₂, C(O)NR₁₂R₁₃, NR₁₂R₁₃ a SO₂NR^₂R-^₃ f

R^ představuje vodík, alkylskupinu s 1 až 9 atomy uhlíku, alkenylskupinu se 2 až 3 atomy uhlíku nebo fenylskupinu, přičemž alkylové, alkenylové a fenylové zbytky v R-l jsou popřípadě substituovány

102 ····· · · ·« ·· ·· · ·· · · 4··· • · · · ···· • · · · ········ • · · · · · • · · * · · · · · ·· · ·

1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z methylskupiny, ethylskupiny, trifluormethylskupiny a halogenu;

R₂ představuje R₁₉ nebo skupinu vzorce

-C(O)NR₁₂(CHR₁₂)_mC(O)NR₁₂O(CH₂)_q(aryl) se 6 až 10 atomy uhlíku v arylové části,

-C(=NR₃₂)NH(CH₂)p(aryl) se 6 až 10 atomy uhlíku v arylové části,

-c(o)nr₈(chr₁₂)_mc(o)nr₁₂(ch₂)_por₁₂,

-C(O)NR₁₂(CHR₁₂)_mS(alkyl) s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, -C(=NOC(O)R₂₅)R₂₆,

-CR₃₇R₃qCHR₂gNRgSO₂(CH₂)pA,

-CR₁₇R₁₈CHR₂₈NR₉P(O)(OR₁₂)C(O)(alkyl) s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části,

-CR₁₇R₁₈CHR₂₈NR_gP(O)(alkoxy)₂ s 1 až 4 atomy uhlíku v každé z alkoxylových částí, -Z₃-R₇ nebo -(CR₁₇R₁₈)_mNR_g(C(O))qR₁₀, kde p představuje číslo 0 až 2, m představuje číslo 1 až 6 a q představuje číslo 1 nebo 2; nebo R² představuje skupinu obecného vzorce la, Ib, Ic, Id, Ie, If, Ig, Ih nebo li, <Ih>

<Ii) • · ·

104 přičemž ve výše uvedených vzorcích Ia až li jsou struktury obecných vzorců If a Ig ke zbytku molekuly obecného vzorce I připojeny přes uhlíkový atom v poloze 5, 6 nebo 7 obecného vzorce If a Ig, přerušovaná čára v obecných vzorcích Ic a Id představuje jednoduchou nebo dvojnou vazbu, s tou výjimkou, že když přerušovaná čára označuje dvojnou vazbu v obecných vzorcích Ic a Id Rg chybí, n představuje číslo 0 až 2, p představuje číslo 0 až 6 a m představuje číslo 0 nebo 1;

R₃ představuje skupinu vzorce -C(O)N(CH₃)(OCH₃) nebo

-(CH₂)_nOH, kde n představuje číslo 0 až 4;

R₄ a R₅ představuje každý nezávisle vodík, ethylskupinu nebo skupinu -CO₂H nebo -C(O)NHOH;

R₆ představuje vodík, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, skupinu -OC(O)(alkyl) s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylové části nebo OC(O)(aryl) se 6 až 10 atomy uhlíku v arylové části;

R₇ představuje arylskupinu se 6 až 10 atomy uhlíku nebo pěti- až desetičlenný heterocyklyl, přičemž každá ze skupin ve významu R₇ je popřípadě substituována 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, trifluormethylskupiny, kyanoskupiny, nitroskupiny,

-CO₂R₁₂, alkoxyskupiny s 1 až 4 atomy uhlíku,

-0C(0)(alkyl) s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, -NR₁₂C(O)(alkyl) s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové Části, -C(O)NH₂, -C(O)NHOH,

-C(O)O(alkyl) s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, alkylskupiny s 1 až 4 atomy uhlíku, » ·

- 105 -

-S(O)_nR₁₂, kde n představuje číslo 0 až 2, benzoylskupiny, -NR₁₂R₁₃, -0R₁₂, alkanoylskupiny s 1 až 6 atomy uhlíku, -^-( aryl) se 6 až 10 atomy uhlíku v arylové části, -C(O)O(aryl) se 6 až 10 atomy uhlíku v arylové části, -NH(aryl) se 6 až 10 atomy uhlíku v arylové části, -C(0)NH(aryl) se 6 až 10 atomy uhlíku v arylové části, -C(O)NR₁₂O(CH₂) (aryl) se 6 až 10 atomy uhlíku v arylové části, kde n představuje číslo 1 až 3 a skupiny -SO₂NH(aryl) se 6 až 10 atomy uhlíku v arylové části;

Rg představuje vodík, alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo skupinu -(CH₂)_n(aryl), kde n představuje číslo 0 až 4, se 6 až 10 atomy uhlíku v arylové části;

R_g představuje vodík nebo skupinu -0R₁₂, -(CH₂)_mA nebo

-CH₂O(CH₂)_mA, kde m představuje číslo 0 až 2;

R₁₀ představuje alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, skupinu ”ORl₂ ^r ^12^R13^(3R12 ¹ ”^^12*^13^^12^13 '

-CR₁₂(OR₁₃)CR₁₂R₁₃OR₁₂, 2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-ylskupinu, -NR₁₂C(O)NR₁₂R₁₃, -S(CR₁₂ ^Ri3)n^CH3' kde n představuje číslo 0 až 5, -NR12(CH₂)g(pyridyl), kde q představuje číslo 0 nebo 1,

-P(O)(alkoxy)2 s 1 až 4 atomy uhlíku v každé z alkoxylových částí, -NR₁₂ ^Ri3< ^-NRi2^OR13' —NRj₂NRj_3R11 * ~NR^2^2^14 , -OCH₂NR₁₂C(O)R₁₄, -OCH₂C(O)NR₁₅R₁₆, -OCHR₁₂OC(O)(alkyl) s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, -OCHR₁₂C(O)(alkoxy) s 1 až 3 atomy uhlíku v alkoxylové části,

-0(CH₂^R-^ nebo -NR₁₂(CH₂)_mR_lx, kde m představuje číslo 0 až 2;

R_1;L představuje vodík nebo A;

- 106

R₁₂ ^{a R}i3 představuje každý nezávisle vodík nebo alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku;

R₁₄ představuje methylskupinu nebo fenylskupinu;

R₁₅ představuje vodík, methylskupinu, ethylskupinu nebo skupinu -CH₂CH₂OH;

^r16 představuje vodík, methylskupinu, ethylskupinu skupinu -CH₂C(O)NH₂ nebo -CH₂CH₂OH;

R₁₇ představuje nezávisle při každém svém výskytu vodík, hydroxyskupinu, kyanoskupinu, halogen, alkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, skupinu NR₁₂R₁₃, -C(O)OR₁₂, —C(O)R^₂, CH=CRj₂R^₃; —C=CR^₂, —CH₂NRj₂r₁₃, -CH₂OR₁₂, -C(O)NR₁₂R₁₃, -C(Y₅)H nebo -CH₂NR₁₂C(O)C(O)NR₁₂R₁₃, přičemž když R₁₇ představuje hydroxyskupinu, potom R_lg představuje atom vodíku nebo alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku;

R₁₈ při každém svém výskytu nezávisle představuje vodík, fluor, kyanoskupinu nebo alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, přičemž uvedená methylskupina je popřípadě substituována 1 až 3 fluorovými substituenty ; nebo

R₁₇ a R₁₈, brány dohromady, představují oxoskupinu (=0);

R₁₉ představuje fenyl-, naftyl-, pyrrolyl-, furyl-, thienyl-, oxazolyl-, pyridyl-, pyrimidinyl-, pyridazinyl-, chinolyl-, isochinolyl-, 5,6,7,8-tetrahydrochinolyl- nebo 5,6,7,8-tetrahydroisochinolylskupinu, z nichž každá, s výjimkou fenylskupiny, je popřípadě substituována 1 až 3

- 107 substituenty ^r23 a fenylskupina uvedená v definici R_ig je popřípadě subtituována 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z R₂₃ a R₂₄;

představuje skupinu -C(O)R₂₁, -C(O)C(O)R₂₁, -C(O)C(Y₂)C(O)R₂₁ nebo

A_z·*

R₂₁ představuje vodík, skupinu -OR₂₂, -NHR₂₂, -NHOH,

-NHNH₂, -(CH₂)_nY₃(fenyl) nebo -(CH₂)_nY₃(pyridyl), kde n představuje číslo 0 až 4;

představuje vodík, alkylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku nebo skupinu -(CH₂)_nY₃(fenyl) nebo -(CH₂)_nY₃(pyridyl), kde n představuje číslo 0 až 4;

při každém svém výskytu nezávisle představuje halogen, alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 7 atomy hlíku, alkylendioxyskupinu se 2 až 6 atomy uhlíku, trifluormethylskupinu, -NR₁₂R₁₃, nitroskupinu, -C(NR₁₂)NR₁₂R₁₃, -c(o)nr₁₂r₁₃c(o)r₁₂, -c(nor₁₂)r₁₃, -c(ncn)nr₁₂r₁₃, -C(NCN)SR₁₂, -(CH₂)_m(CN), kde m představuje číslo 0 až 3, hydroxyskupinu, -C(O)R₁₂, -C(O)NR₁₂0R₁₃, -c(o)nr₁₂nr₁₂r₁₃, -oc(o)nr₁₂ ^ri₃, -nr₁₂c(o)r₁₂, —C(O) C(O)NR^₂Rj_3 / ~^θ2^12 ^z —SO₂R^2 1 — SO₂NR₃2^13' —C(O)NRj2^Ri₃ , —NR^₂SO₂R₃3 nebo

-nr₁₂c(o)nr₁₂r₁₃;

« · · · ·

108

4 9

R₂₄ při každém svém výskytu nezávisle představuje imidazolyl-, pyrazolyl-, triazolyl-, tetrazolyl-, oxazolyl-, isoxazolyl-, oxadiazolyl-, thiadiazolyl-, thiazolyl-, oxazolidinyl-, thiazolidinylnebo imidazolidinylskupinu, z nichž každá je popřípadě substituována 1 až 3 substituenty R₂₃;

R₂₅ představuje skupinu -NR₁₂ ^Ri3, -NH(aryl) s se 6 až

10 atomy uhlíku v arylové části, alkoxyskupinu s l až 6 atomy uhlíku nebo aryloxyskupinu se 6 až 10 atomy uhlíku;

R₂₆ představuje vodík, alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo skupinu -(CH₂ )^4(fenyl), kde m představuje číslo 0 až 4 a fenylová část uvedené skupiny -(CH₂)_mY₄(fenyl) je popřípadě substituována halogenem, skupinou 0R₁₂, alkanoyloxyskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, aryloxyskupinou se 6 až 10 atomy uhlíku, skupinou -NR₁₂R₁₃, -NH(aryl) se 6 až 10 atomy uhlíku nebo -NHC(O)(alkyl) s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části;

R₂₇ představuje při každém svém výskytu nezávisle halogen, skupinu -(CH₂)pNR₁₂ ^c(°)^CH3/ kde p představuje číslo 1 až 5, nitroskupinu, kyanoskupinu, —NRj2^Rl3 ¹ 2 ¹ ~O^Rx₂ / —C(Y^)NRj.2^R13 ^f

-NR₁₂C(NCN)S(alkyl) s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylové části, -NR₁₂C(NCN)NR₁₂R₁₃,

-NR-l₂C (0) NR-l₂Ri3 , -NR_{X 2}C (O) C (O) NRj 3 , -C(=NR₁₂)NR₁₂R₁₃, -S(O)_mCH₃, kde m představuje číslo 0 až 2, -C(=NR₁₂)S(alkyl) s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylové části, -NR₁₂SO₂(alkyl) s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylové části, -OC(O)R₁₂, -oc(o)nr₁₂R₁₃, -nr₁₂so₂cf₃, -nr₁₂c(o)c(o)or₁₂, -NR₁₂C(O)R₁₂, -NR₁₂C(O)OR₁₂, imidazolyl-,

109 thiazolyl-, oxazolyl-, pyrazolyl-, triazolyl- nebo tetrazolylskupinu;

R₂₈ představuje vodík, fluor, kyanoskupinu nebo alkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku, přičemž uvedená alkylskupina je popřípadě substituována 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, skupiny -C(O)NR₁₂R₁₃ a -C(O)OR₁₂;

R_2g představuje fenylskupinu popřípadě substituovanou 1 nebo 2 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího ze skupiny -NR₁₂R₁₃, nitroskupiny, halogenu a skupiny -0R₁₂, -NHR₃₀, -NR₃qR₃₁ a —C(0)ORj₂;

R₃₀ a R₃₁ představuje každý nezávisle alkylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku nebo alkenylskupinu se 2 až 8 atomy uhlíku;

R₃₂ představuje pyridin-4-ylskupinu popřípadě substituovanou 1 nebo 2 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu a alkylskupiny s 1 až 4 atomy uhlíku;

A při každém svém výskytu nezávisle představuje alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, pyridyl-, morfolinyl-, piperidyl-, imidazolyl-, thienyl-, pyrimidinyl-, thiazolyl-, triazolyl, chinolyl-, fenyl- nebo naftylskupinu, přičemž každá z výše uvedených skupin ve významu A je popřípadě substituována 1 až 3 substituenty 1*27' ^{nebo A} představuje skupinu -(CH₂)gS(alkyl) s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, kde q představuje číslo 1 nebo 2;

110 φφ φφ • φ » φ • φ φ · φφφ φφφ φ φ φφ φφ

W představuje kyslík, skupinu NOH, NNH₂, NOC(O)CH₃ nebo NNHC(O)CH₃;

Y-^ představuje kyslík nebo síru;

Y₂ představuje kyslík, skupinu NOH nebo dva atomy vodíku;

Y₃ představuje vazbu nebo skupinu -CH=CH-;

Y₄ představuje vazbu, kyslík, síru nebo skupinu -NH-;

Y₅ představuje kyslík, skupinu NR₁₂, NOR₁₂, NCN, c(cn)₂, cr₁₂no₂, cr₁₂c(o)or₁₂, cr₁₂c(o)nr₁₂r₁₃,

C(CN)NO₂, C(CN)C(O)OR₁₂ nebo C(CN)C(O)NR₁₂R₁₃; a

Z₃ představuje skupinu -NR₁₂-, (CH₂)_m-, -CH₂C(O)NH-,

-nhch₂c(o)-, -ch₂c(y₁)ch₂-, -ch=ch-, -c=c-, -ch(y₁h)-, -cíy-l)-, -ch₂c(y₁), -c(y₁)ch₂-, -c(y₁)c(y₁)-, -ch₂nr₁₂, -ch₂-y₁-, -C(Y₁)NR₈(CHR₁₂)_n-, -NR₈C(Y₁)(CHR₁₂)_n-, -NHCH₂~, —y₁—ch₂—, -soch₂, -ch₂so-, -so₂ch₂-, -ch₂so₂-, —OC(Y₁)—, -n=n-, -nhso₂-, -SO₂NH-, -C(Y₁)C(Y₁)NH-, -NHC(O)O-, -OC(O)NH- nebo NHC(O)NH-, kde n představuje číslo 0 až 4 a m představuje číslo 1 až 3;

a jejich farmaceuticky vhodné soli.

2. Deriváty indazolu podle nároku 1 obecného vzorce I, kde R₂ představuje skupinu -Z₃-R₇, kde Z₃ představuje Skupinu -C(Y₁)NH-, -C(O)CH₂-, -NHC(Y₁)-, -Y₁-CH₂-, -OC(O)-, -CH=CH- nebo -C(Y₁)C(Y₁)~ a R_? představuje popřípadě substituovanou arylskupinu nebo heteroarylskupinu zvolenou ze souboru sestávajícího z fenyl-, pyridyl-, pyrazinyl-,

111

9 99 99 ·· · 9 · 9 • 9 9 9 9

9 · 999 999 • 9 9 «99 99 99 thienyl-, pyrimidinyl-, 2,4-dioxopyrimidin-5-yl-, isoxazolyl-, isothiazolyl-, pyridazinyl- a 1,2,4-triazinylskupiny; a jejich farmaceuticky vhodné soli.

3. Deriváty indazolu podle nároku 2 obecného vzorce I, kde R_? představuje substituovanou fenylskupinu, 2,6-dihalogensubstituovanou fenylskupinu nebo 3,5-dihalogenpyrid-4-ylskupinu; a jejich farmaceuticky vhodné soli.

4. Deriváty indazolu podle nároku 1 obecného vzorce I, kde R₂ představuje skupinu -Z₃~R₇, kde Z₃ představuje skupinu -C(O)NH(CH₂)_n- nebo -NHC(O)(CH₂)_n-, kde n představuje číslo 0 nebo 1 a R₇ představuje fenylskupinu nebo pyridylskupinu popřípadě substituovanou 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, nitroskupiny, trifluormethylskupiny, -CO₂CH₃, methylskupiny, methoxyskupiny a -C(O)NH₂; a jejich farmaceuticky vhodné soli.

5. Deriváty indazolu podle nároku 1 obecného vzorce I, kde R₂ představuje skupinu -Z₃-R₇, kde Z₃ představuje skupinu -C(O)NH- a R₇ představuje fenylskupinu nebo pyridylskupinu popřípadě substituovanou 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, alkylskupiny s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupiny s 1 až 4 atomy uhlíku, kyanoskupiny, karboxyskupiny a skupiny -0C(0)(alkyl) s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části;

a jejich farmaceuticky vhodné soli.

6. Deriváty indazolu podle nároku 1 obecného vzorce I, kde R₂ představuje skupinu R_ig, kde R_ig představuje popřípadě substituovanou pyrimidinylskupinu nebo popřípadě substituovanou pyridazinylskupinu; a jejich farmaceuticky vhodné soli.

♦ · © • · · ·« · ·· ·

112 • * · · ·

7. Deriváty indazolu podle nároku 1 obecného vzorce I, kde R₂ představuje zbytek obecného vzorce Ih, kde R₂₀ představuje skupinu -C(O)R₂₁, -C(O)C(O)R₂₁ nebo

X_p·¹ kde R₂₁ představuje skupinu -OR₂₂, -NHR₂₂ nebo -NHOH a R₂₂ představuje vodík, alkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, benzylskupinu nebo pyridylmethylskupinu; a jejich farmaceuticky vhodné soli.

8. Deriváty indazolu podle nároku 1 obecného vzorce I, kde R₂ představuje fenylskupinu substituovanou zbytkem R₂₄, kde R₂₄ představuje oxadiazolyl-, thiadiazolyl- nebo tetrazolylskupinu, z nichž každá je popřípadě substituována alkylskupinou s 1 až 2 atomy uhlíku, nebo R₂ představuje fenylskupinu substituovanou kyanomethylskupinou, hydroxyskupinou nebo formylskupinou; a jejich farmaceuticky vhodné soli.

9. Deriváty indazolu podle nároku 1 obecného vzorce I, kde R₂ představuje skupinu -Z-j-Ry, kde Z₃ představuje skupinu -CCY-jjNH- a Ry představuje fenyl-, pyrazinyl-, pyrimidinyl-, isoxazolyl- nebo pyridylskupinu, z nichž každá je popřípadě substituována 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, methoxykarbonylskupiny, trifluormethylskupiny, benzoylskupiny, acetylskupiny, dimethylaminoskupiny, hydroxyskupiny, nitroskupiny, methylskupiny, kyanoskupiny, methylsulfonylskupiny a methylthioskupiny; a jejich farmaceuticky vhodné soli.

i

113

99 99 • · · * · 9 • 9 · 9 9 9 • 9 • 9 99

10. Deriváty indazolu podle nároku 1 obecného vzorce I, kde R₂ představuje skupinu -C(=NOC(O)R₂₅R₂₆, kde R₂₅ představuje aminoskupinu a R₂₆ představuje vodík, alkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku nebo -(CH₂)_m(fenyl), kde m představuje číslo 1 až 4 a uvedená fenylová část je popřípadě substituována halogenem, hydroxyskupinou, acetoxyskupinou, aminoskupinou nebo acetamidoskupinou;

a jejich farmaceuticky vhodné soli.

11. Deriváty indazolu podle nároku 1 obecného vzorce I, kde R₂ představuje skupinu -(CR₁₇R₁₈)_mNR_g(C(O))gR₁₀, kde m představuje číslo 2, q představuje číslo 2, R₁₇ představuje vždy nezávisle vodík, kyanoskupinu nebo methylskupinu a R₁₈ představuje vždy nezávisle vodík nebo methylskupinu, R_g představuje vodík nebo methylskupinu a R_lo představuje aminoskupinu, hydroxyskupinu, methoxyskupinu nebo hydroxyaminoskupinu; a jejich farmaceuticky vhodné soli.

12. Deriváty indazolu podle nároku 1 obecného vzorce I, kde R₂ představuje skupinu -(CR₁₇R₁₈)_mNR_g(C(O))gR₁₀, kde m představuje číslo 2, q představuje číslo 1, R₁₇ představuje vždy nezávisle vodík, -C(O)NH₂, -C=CH, kyanoskupinu, formylskupinu, hydroxymethylskupinu nebo trifluormethylskupinu a R₁₈ představuje vždy nezávisle vodík nebo kyanoskupinu a R_lo představuje alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku; a jejich farmaceuticky vhodné soli.

13. Deriváty indazolu podle nároku 1 obecného vzorce I, kde R₂ představuje zbytek obecného vzorce Ic, Id nebo Ie, přičemž v obecných vzorcích Ic a Id R₆ představuje vodík, hydroxyskupinu, alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku nebo alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku; a jejich farmaceuticky vhodné soli.

- 114 ·· · ·« ·· »··· • * · · « · · · • 9 9 9 9 · 999 999

9 9 9 9 9 9

999 · ··· 999 99 99

14. Deriváty indazolu podle nároku 1 obecného vzorce

I, kde R₂ představuje skupinu -C(O)NRg(CHR₁₂)_mC(O)NR₁₂(CH₂)pOR₁₂ nebo -C(O)NR₁₂(CHR₁₂)_mS(alkyl) s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, kde R_g, R₁₂, m a p mají význam uvedený v nároku 1; a jejich farmaceuticky vhodné soli.

15. Deriváty indazolu podle nároku 1, kterými jsou (3,5-dichlorpyridin-4-yl)amid l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny;

(2,6-dichlorfenyl)amid l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6karboxylové kyseliny;

(3,5-dichlorpyridin-4-yl)amid l-cyklobutyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny;

(3,5-dichlorpyridin-4-yl)amid 3-ethyl-l-isopropyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny;

(3,5-dichlorpyridin-4-yl)amid l-cyklopropylmethyl-3-ethyl-IH-indazo1-6-karboxylové kyseliny;

(3,5-dichlorpyridin-4-yl)amid l-cyklohexyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny;

(3,5-dichlorpyridin-4-yl)amid 3-ethyl-l-(4-fluorfenyl)-1H-indazol-6-karboxylové kyseliny;

hydroxykarbamoylmethylamid l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny;

(2-methylsulfanylethyl)amid l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny;

- 115 ··· ··· hydroxykarbamoylmethylmethylamid l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny;

(1-benzyloxykarbamoylethyl)amid S-l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny;

(1-hydroxykarbamoylethyl)amid R-l-cyklopentyl-3-ethyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny;

l-cyklopentyl-3-ethyl-6-thiofen-2-yl-lH-indazol; a l-cyklopentyl-3-ethyl-6-fenyl-lH-indazol;

a jejich farmaceuticky vhodné soli.

16. Sloučeniny obecného vzorce XXXX

R představuje vodík, alkylskupinu s 1 až 9 atomy uhlíku, skupinu -(CH₂)_m-(5- až 10-členný heterocyklyl), kde m představuje číslo 0 až 2, alkoxyalkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v alkoxylové a 1 až 6 atomy uhlíku v alkylové části, alkenylskupinu se 2 až 6 atomy uhlíku nebo skupinu -(Z₁)_b(Z₂)_c-aryl se 6 až 10 atomy uhlíku v arylové části, kde bac představuje každý nezávisle číslo 0 nebo 1, Z^ představuje alkylenskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo alkeny-

116 lenskupinu se 2 až 6 atomy uhlíku a Z₂ představuje kyslík, síru, skupinu S0₂ nebo NR₁₂, přičemž uvedené skupiny R jsou popřípadě substituovány jedním až třemi substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, hydroxyskupiny, alkylskupiny s 1 až 5 atomy uhlíku, alkenylskupiny se 2 až 5 atomy uhlíku, alkoxyskupiny s 1 až 6 atomy uhlíku, trifluormethylskupiny, nitroskupiny, skupiny CO₂R₁₂, c(o)nr₁₂r₁₃, nr₁₂r₁₃ a SO₂NR^₂R23;

R^ představuje vodík, alkylskupinu s 1 až 9 atomy uhlíku, alkenylskupinu se 2 až 3 atomy uhlíku nebo fenylskupinu, přičemž alkylové, alkenylové a fenylové zbytky v Rj jsou popřípadě substituovány 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z methylskupiny, ethylskupiny, trifluormethylskupiny a halogenu;

R₁₂ a R₁₃ nezávisle představuje vždy atom vodíku nebo alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku; a

X představuje skupinu vzorce -C(O)C1.

17. Farmaceutická kompozice pro inhibici fosfodiesterasy (PDE) typu IV nebo produkce faktoru nekrózy nádorů (TNF) u savců, vyznačující se tím, že obsahuje terapeuticky účinné množství derivátu indazolu podle nároku 1 obecného vzorce I nebo jeho farmaceuticky vhodné soli a farmaceuticky vhodný nosič.

18. Způsob inhibice fosfodiesterasy nebo produkce faktoru nekrózy nádorů (TNF), čující se tím, že se savci podá (PDE) typu IV vyznáterapeuticky

117 účinné množství derivátu indazolu podle nároku 1 obecného vzorce I nebo jeho farmaceuticky vhodné soli.

19. Farmaceutická kompozice pro prevenci nebo léčení asthma, zánětů kloubů, rheumatoidní arthritis, dnavé arthritis, rheumatoidní spondylitis, osteoarthritis a jiných arthritických stavů; sepse, septického šoku, endotoxického šoku, sepse vyvolané gram negativními bakteriemi, syndromu toxického šoku, syndromu akutního respiračního distresu, cerebrální malárie, chronické zánětlivé choroby plic, silikosy, pulmonární sarkoidosy, resorpce kosti, reperfušního poranění, reakce graft-versus-host, odmítání alloštěpu, horečky a myalgie vyvolané infekcí, sekundární kachexie vyvolané infekcí nebo maligním procesem, sekundární kachexie vyvolané syndromem získané imunitní nedostatečnosti (AIDS), AIDS, HIV, ARC (AIDS related complex), tvorby keloidů, tvorby jizvové tkáně, Crohnovy choroby, ulcerativní kolitis, pyresis, roztroušené sklerosy, diabetes mellitus typu 1, autoimunitní diabetes, diabetes insipidus, systemického lupus erythrematosis, bronchitis, chronické obstrukční choroby dýchacích dest, psoriasis, Bechetovy choroby, anafylaktoidní purpury, nefritis, chronické glomerulonefritis, zánětlivé choroby střev, leukémie, alergické rhinitis, deprese, multiinfarktové demence nebo dermatitis, u savců, vyznačující se tím, že obsahuje terapeuticky účinné množství derivátu indazolu podle nároku 1 obecného vzorce I nebo jeho farmaceuticky vhodné soli a farmaceuticky vhodný nosič.

20. Způsob léčení asthma, zánětů kloubů, rheumatoidní arthritis, dnavé arthritis, rheumatoidní spondylitis, osteoarthritis a jiných arthritických stavů; sepse, septického šoku, endotoxického šoku, sepse vyvolané gram negativními bakteriemi, syndromu toxického šoku, syndromu akutního respiračního distresu, cerebrální malárie,

118 • ··*· » » ·· Μ • · · ·· ·· · · · · • · · · ♦ · · « • · · · «···»··· • · · · · · ··· · ··· ··· ·· «φ chronické zánětlivé choroby plic, silikosy, pulxnonární sarkoidosy, resorpce kosti, reperfušního poranění, reakce graft-versus-host, odmítání alloštěpu, horečky a myalgie vyvolané infekcí, sekundární kachexie vyvolané infekcí nebo maligním procesem, sekundární kachexie vyvolané syndromem získané imunitní nedostatečnosti (AIDS), AIDS,

HIV, ARC (AIDS related complex), tvorby keloidů, tvorby jizvové tkáně, Crohnovy choroby, ulcerativní kolitis, pyresis, roztroušené sklerosy, diabetes mellitus typu 1, autoimunitní diabetes, diabetes insipidus, systemického lupus erythrematosis, bronchitis, chronické obstrukční choroby dýchacích dest, psoriasis, Bechetovy choroby, anafylaktoidní purpury, nefritis, chronické glomerulonefritis, zánětlivé choroby střev, leukémie, alergické rhinitis, deprese, multiinfarktové demence nebo dermatitis, u savců, vyznačující se tím, že se savci podá terapeuticky účinné množství derivátu indazolu podle nároku 1 obecného vzorce I nebo jeho farmaceuticky vhodné soli.