CZ290933B6

CZ290933B6 - Analogy vitaminu D, způsob jeho přípravy a pouľití a farmaceutický prostředek na jeho bázi

Info

Publication number: CZ290933B6
Application number: CZ19991358A
Authority: CZ
Inventors: Martin John Calverley; Henrik Pedersen
Original assignee: Leo Pharmaceutical Products Ltd. A/S (Lovens Kemis
Priority date: 1996-10-30
Filing date: 1997-10-27
Publication date: 2002-11-13
Also published as: PL192660B1; RO120338B1; US6310226B1; AU722659B2; PT937038E; PL333068A1; DE69712086D1; GB9622590D0; DE69712086T2; WO1998018759A1; EP0937038B1; KR100526644B1; DK0937038T3; HK1022298A1; JP2001503403A; CN1107669C; HUP9904333A3; JP3907010B2; EP0937038A1; ES2173425T3

Abstract

Analog vitaminu D vzorce I, kde X je vod k nebo hydroxyskupina; R.sup.1.n. a R.sup.2.n. je methyl nebo ethyl; Q je methylen, ethylen, tri- nebo tetramethylen a m e b²t pop° pad substituov n oxyskupinou, nebo -OR.sup.3.n., kde R.sup.3.n. je vod k, methyl nebo ethyl; Y je bu jednoduch vazba, nebo C.sub.1.n.-C.sub.2.n.hydrokarbylen, kde pod ozna en m hydrokarbylen se rozum dvojmocn² zbytek z skan² po odebr n 2 atom vod ku z odpov daj c ho uhlovod ku, kter² m e b²t nasycen² nebo v p° pad C.sub.2.n.hydrokarbylenu tak nenasycen²; p°i em jeden nebo v ce atom uhl ku obsa en²ch v R.sup.1.n., R.sup.2.n., a/nebo Y m e b²t pop° pad substituov no jedn m nebo v ce atomy fluoru, nebo hydroxylovou skupinou, v etn jeho diastereomer a jejich sm s . Zp sob p° pravy tohoto analogu a jeho pou it pro v²robu l iva pro l en nebo prevenci chorob charakterizovan²ch abnorm ln bun nou diferenciac a/nebo bun nou proliferac , a °ady dal ch chorob; farmaceutick prost°edky obsahuj c tento analog.\

Description

Oblast techniky

Tento vynález se týká dosud neznámé třídy sloučenin, které vy kazují silnou aktivitu v indukování diferenciace a inhibice nežádoucí proliferace určitých buněk, včetně kožních buněk a rakovinných buněk, stejně jako imuno-modulace a protizánětlivých účinků, farmaceutických přípravků obsahujících tyto sloučeniny, dávkových jednotek těchto přípravků a jejich použití při léčení a/nebo prevenci chorob charakterizovaných abnormální buněčnou diferenciací a/nebo buněčnou proliferací, jako je například psoriáza a jiné poruchy keratinizace, dermatózy spojené sHIV, hojení ran, rakovina, včetně rakoviny kůže, a poruchy, nebo nerovnováha, v imunitním systému, jako je reakce hostitel versus štěp a reakce štěp versus hostitel a transplantační odmítnutí a autoimunitní choroby, jako je diskoidní a systémový lupus erythematodes, diabetes mellitus a chronické dermatózy' autoimunního typu, jako sklerodermie a prostý pemfigus, azánětlivé nemoci, jako je revmatická artritida a astma, stejně jako řada jiných stavů nemocí, včetně hyperparatyreoidismu, konkrétně sekundárního hyperparatyreoidismu spojeného s poškozením ledvin, kognitivní poruchou nebo senilní demencí (Azhleimerova nemoc) a další neurodegenerativní nemoci, hypertenze, akné, holohlavost, kožní atrofie. jako steroidy indukovaná kožní atrofie, stárnutí kůže, včetně fotostámutí, a jejich použití pro podporu osteogeneze a léčení/prevenci osteoporózy a osteomalacie.

Vynález se konkrétně týká určitého analogu vitaminu D, způsobu jeho přípravy a použití a farmaceutického prostředku na jeho bázi.

Dosavadní stav techniky

Byla již popsána řada analogů vitaminu D, které vykazují určitý stupeň selektivity v rámci buněčnou diferenciaci indukující /buněčnou proliferaci inhibující aktivity in vitro v porovnání s účinky metabolismu vápníku in vivo (měřeno ve zvýšené koncentraci séra vápníku a/nebo zvýšení vylučování vápníku močí), které nepříznivě omezují dávku, kterou lze bezpečně podávat. Jedním z prvních žních se ukázal kalcipotriol (INN) nebo kalcipotrien (USÁN), které byly vyvinuty na základě této selektivity a nyní jsou světově uznávány jako účinná a bezpečná léčiva pro topické léčení psoriázy.

Studie s jiným analogem (EB 1089) vybraným na této bázi podporuje koncept, že systemický podávané analogy vitaminu D mohou inhibovat proliferaci buněk rakoviny prsu in vivo při subtoxických dávkách (Colston, K. W. a kol., Biochem. Pharmacol. 44, 2273-2280 (1992)).

Byly posuzovány slibné imunosupresívní aktivity analogů vitaminu D (Binderup, L., Biochem. Pharmacol. 43, 1885-1892 (1992)). Řada analogů 20-epi-vitaminu D takto byla identifikována jako potentní inhibitory aktivace T-lymfocytů in vitro (Binderup, L. a kol., Biochem. Pharmacol. 42, 1569-1575 (1991)). Dva ztěchto analogů, MC 1288 a KH 1060, systematicky podávané, vykazovaly imunosupresívní aktivity in vivo na experimentálních živočišných modelech. Aditivní nebo synergické účinky byly pozorovány v kombinaci s nízkými dávkami cyklosporinu A. KH 1060, samotný nebo v kombinaci s cyklosporinem A, byl rovněž prokázán jako bránící autoimunitní destrukci transplantovaných ostrůvků u diabetické NOD myši (Bouillon, R. a kol. In: Vitamin D, Proceeding of the Niht Workshop on Vitamin D, Orlando, Florida, Walter de gruyter, Berlin, 1992, str. 551-552). MC 1288 byl schopný prodloužit přežití srdečních a malých střevních štěpů u krys (Johnsson, C. a kol. In: Vitamin D, Proceeding of the Ninth Workshop on Vitamin D, Orlando, Florida, Walter de gruyter, Berlin, 1994, str. 549-550). Nicméně ve všech těchto studiích dávky analogů, které produkovaly výraznou imunosupresi,

-1 CZ 290933 B6 indukovaly také zvýšení hladin kalciového séra. Přetrvává tudíž potřeba nových analogů s přijatelnou kombinací prodloužené léčebné aktivity s minimálními toxickými účinky.

Podstata wnálezu

kde

X je vodík nebo hydroxyskupina;

R¹ a R² je methyl nebo ethyl;

Q je methylen, ethylen, tri- nebo tetramethylen a může být popřípadě substituován oxyskupinou -OR³, kde R³ je vodík, methyl nebo ethyl;

Y je buď jednoduchá vazba, nebo Ci-C₂hydrokarbylen. kde pod označením hydrokarbylen se rozumí dvojmocný zbytek získaný po odebrání 2 atomů vodíku zodpovídajícího uhlovodíku, který může být nasycený nebo v případ C₂hydrokarbylenu také nenasycený;

přičemž jeden nebo více atomů uhlíku obsažených v R¹, R², a/nebo Y může být popřípadě substituováno jedním nebo více atomy fluoru, nebo hydroxylovou skupinou, včetně jeho diastereomerů a jejich směsí.

Příklady Q s oxysubstituentem zahrnují, ale neomezují se na ně, hydroxymethylen, (1- nebo 2-) hydroxyethylen, (1-, 2- nebo 3-) hydroxytrimethylen a odpovídající dvojmocné zbytky, v nichž je hydroxyskupina etherifikována methylem nebo ethylem.

Příklady Y (pokud jím není jednoduchá vazba), zahrnují ale neomezují se na ně, methylen, hydroxymethylen, difluormethylen, ethylen, ethyliden, (:CH-CH₂), CH=CH, feC, (1- nebo 2-)hydroxyethylen.

Analog vitaminu D podle vynálezu se může vyskytovat ve formě diastereoizomeru v čisté formě; nebo směsi takových diastereoizomeru, přičemž sloučenina může být v krystalické formě buď jako taková, nebo jako solvát, jako hydrát, nebo může být v amorfní formě.

-2CZ 290933 B6

Sloučeniny vzorce I totiž zahrnují více než jednu diastereoizomemí formu (E a Z konfigurace dvojné vazby v bočním řetězci, a dále R a S konfigurace na uhlíku nesoucím skupinu X, když se R¹ a R² liší od sebe navzájem a od X, a E a Z konfigurace, když je dvojná vazba přítomna ve skupinách Y nebo R (1 nebo 2)). Dále jsou předpokládána také proléčiva sloučenin vzorce I, v nichž jedna nebo více hydroxyskupin jsou maskovány jako skupiny, které mohou být konvertovány na hydroxyskupiny in vivo.

Sloučeniny I, v nichž X je hydroxyskupina, jsou také preferovány, ale sloučeniny I, v nichž X je vodík, jsou současně dalším typem proléčiva. Tyto sloučeniny jsou relativně inaktivní in vitro, ale po podání pacientovi jsou konvertovány na aktivní sloučeniny vzorce I enzymatickou hydroxylací bočního řetězce najednou nebo více místech v -(Yj-CEOVR² dílu molekuly.

Ve výhodném provedení vynálezu je v obecném vzorci I X hydroxyskupina a Y jednoduchá vazba a/nebo R¹ a R² jsou stejné a znamenají methyl nebo ethyl.

Jako zvláště výhodné analogy vitaminu D podle vynálezu je možno uvést

a) 1 (S),3 (R),25-Trihydroxy-20(S)-9,10-seko-cholesta-5(Z),7(E), 10( 19),23 (E)-tetraen,

b) 1 (S)-3(R)-Dihydroxy-20(S)-(6'-hydroxy-6'-methyl-^l'(E)-hepten-T-yl)-9,10-sekopregna-5(Z),7(E), 10( 19)-trien,

c) l(S),3(R),22(S),25-Tetrahydroxy-20(R)-9,10-seko-cholesta-5(Z),7(E), 10(19), 23(E)-tetraen,

d) 22(S)-Ethoxy-1 (S),3 (R),25-trihydroxy-20(R)-9,10-seko-cholesta-5(Z),7(E), 10( 19),23(E)-tetraen a

e) l(S),3(R)-Dihydroxy-20(R)-(r(R)-methoxy-5'-hydroxy-5'-ethyl-3'(E)-hepten-T-yl)-

9,10-seko-pregna-5(Z),7(E), 10( 19)-trien.

Předmětem vynálezu je dále také způsob přípravy analogu vitaminu D vzorce I definovaného výše, jehož podstata spočívá v tom, že (S),3(R)-bis(terc.butyldimethylsilyloxy)-20(S)-formylmethyl-9,10-seko-pregna-5(E),7(E), 10(19)-trien nebo l(S),3(R)-bis-terc.butyldimethylsilyloxy)-20(S)-(2-formylethyl)-9,l-sekopregna-5(E),7(E), 10(19)-trien nebo 1 (S),3(R)-bis-terc.butyldimethylsilyloxy)-20(R)-(3formylpropyl)-9,10-seko-pregna-5(E),7(E),10(19)-trien nebo odpovídající derivát jednoho z nich, v nichž methylen vázaný na C-20 nese methoxy-, ethoxy- nebo terc.butyldimethylsilyloxysubstituent, se nechá reagovat buď s Wittigovým činidlem obsahujícím karbonylovou skupinu jako je methyl(trifenylfosforanyliden)acetát a získaný produkt se nechá reagovat s organolithiem, nebo Grignardovým činidlem nebo redukčním činidlem, nebo s lithio-derivátem popřípadě hydroxylovaného alkylfenylsulfonu s následnou redukční eliminací, například amalgamem sodným, za vzniku produktu, který se podrobí v libovolném pořadí izomerizaci UV-světlem za přítomnosti tripletového senzibilizátoru, například antracenu, a odebrání silylových skupin

-3CZ 290933 B6

Sloučeniny I mohou být získány v krystalické formě buď přímo koncentrováním z organického rozpouštědla, nebo krystalizací nebo rekrystalizací z organického rozpouštědla nebo směsi uvedeného rozpouštědla a spolurozpouštědla, které může být organické nebo anorganické, například voda. Krystaly mohou být izolovány ve formě v podstatě bez rozpouštědla, nebo jako solváty, jako je hydrát. Vynález pokrývá všechny krystalické modifikace a formy a také jejich směsi.

Předmětem vynálezu je dále také farmaceutický prostředek, který obsahuje účinné množství jednoho nebo více analogů vitaminu D definovaných výše, společně s farmaceuticky přijatelnými netoxickými nosiči a/nebo pomocnými prostředky.

Tento farmaceutický prostředek je výhodném provedení v jednotkové dávkové formě obsahuje od 10'⁷ do 10“’ % hmotnostního, vztaženo na dávkovou jednotku, analogu vitaminu D vzorce I.

Konečně je předmětem vynálezu také použití analogu vitaminu D definovaného výše pro výrobu léčiva pro léčení nebo prevenci chorob charakterizovaných abnormální buněčnou diferenciací a/nebo buněčnou proliferací, jako je například psoriáza a jiné poruchy keratinizace. dermatózy spojené s HIV, hojení ran, rakovina, včetně rakoviny kůže a poruchy nebo nerovnováha v imunitním systému, jako je reakce hostitel versus štěp a reakce štěp versus hostitel a transplantační odmítnutí, a autoimunitní choroby, jako je diskoidní a systémový lupus erythematodes, diabetes mellitus a chronické dermatózy autoimunního typu, například sklerodermie a prostý pemfigus, a zánětlivé nemoci, jako je revmatická artritida a astma, jakož i řada jiných chorobných stavů, včetně hyperparatyreoidismu, zejména sekundárního hyperparatyreoidismu spojeného s poškozením ledvin, kognitivní poruchou nebo senilní demencí (Alzheimerova nemoc) a další neurodegenerativní nemoci, hypertenze, akné, holohlavost, kožní atrofie, například steroidy indukovaná kožní atrofie, stárnutí kůže, včetně fotostámutí, a také pro podporu osteogeneze a léčení/prevenci osteoporózy a osteomalacie.

Sloučeniny podle předloženého vynálezu poskytují doposud nepopsanou řadu analogů lalfahydroxy-20-epi-vitaminu D, charakterizovaných přítomností distální uhlík-uhlík dvojné vazby na bočním řetězci, tj. umístěné takovým způsobem, že žádný uhlík vázaný dvojnou vazbou není přímo navázán na C-20. [Řada analogů 20-epi-vitaminu D, které neobsahují žádný boční řetězec vázaný dvojnou vazbou nebo 22,23-dvojnou vazbu (C-22 je vázán přímo na C-20) je popsána v mezinárodní patentové přihlášce s číslem zveřejnění WO 91/00271. Zprávy o sloučeninách, které mají přirozenou konfiguraci na C-20 a obsahují 23,23- nebo 24,24a-dvojnou vazbu, byly vydány (Uskokovic, M.R. a kol. ve: Vitamin D: gene Regulation, Structure-Function Analysis and Clinical Application, vydal Norman, A.W, Bouillon, R. a Thomaset, M. Berlin: walter de gruyter, 1991, str. 139-145, Baggiolini E.G., a kol., US 5 087 619-A (1992), Chodynski M. a Kol., Steroidy 56, 311-315 (1991))]. Po podání předloženého vynálezu byla zveřejněna přihláška (Kutner, A.; a kol. EP 742 203 (1996)) popisující řady, které se zdají být formálně překrývající se sloučeninami I. Nicméně opětovnou kontrolou uvedené přihlášky se prokázalo, že se počítá výhradně se sloučeninami, které mají přirozenou konfiguraci na C-20, neboť přes nejasnost v obecném vzorci zde není uveden žádná zmínka o konfiguraci a citovány jsou pouze meziprodukty mající přirozenou konfiguraci. Je třeba zmínit, že jediná příkladná sloučenina je ve skutečnosti 20-epimer sloučeniny 0106. Příkladná sloučenina je uvedena jako nikoliv více potentní ve svém účinku na diferenciaci rakovinných buněk („stejně aktivní“ str. 13 řádek 27), než je přirozený vitamin D hormon (calcitriol). Naopak naše testy se sloučeninou 0106 ukázaly, že je nejméně lOkrát silnější. Obdobně tři další sloučeniny podle předloženého vynálezu (0101, 0103, 0105) byly shodně nalezeny jako mnohem silnější ve svých účincích na rakovinné buňky, než jejich 20-epimery syntetizované za účelem srovnání. Opravdu, u řady nyní popsaných sloučenin bylo zjištěno, že vykazují výjimečně vysokou aktivitu při inhibici proliferace rakovinných buněk, spojenou s vysoce imunosupresivními účinky.

Sloučenina vzorce I může být připravena obecným postupem podle schématu 1. V tomto schématu je výchozí materiálem jádro vitaminu D tvořící blokový aldehyd II, kde je uhlík,

-4CZ 290933 B6 aldehydu umístěn výhodně tak, aby generoval dvojnou vazbu bočního řetězce uvedenou ve vzorci I. Následně pak symbol Q_a označuje, že tato připojená skupina může být buď shodná s Q ve sloučenině I, nebo to může být alternativně skupina, která se může konvertovat na Q ve kterémkoliv následném stupni syntézy. Dále se může totožnost Q_a měnit z meziproduktu na meziprodukt podle pořadí reakcí.

Skutečné významy budou zjevné z konkrétního popisu.

Dále je znázorněno schéma syntézy:

II reaguje s reagentem k zavedení dvojné vazby vedlejšího řetězce a prodloužení řetězce.

Typicky to může být Wittigova (nebo Wittogova typu) reakce nebo reakce Julia- typu). Tyto postupy jsou v oblasti chemie vitaminu D dobře známé. Meziprodukty, které mají E nebo Z konfiguraci dvojné vazby vytvořené za nestereospecifických reakčních podmínek, mohou být v tomto stupni běžně oddělovány.

Symbol Y_a je použit k označení výhodné identity s nebo přeměnitelnosti na Y (viz výše pro analogické použití Q_a), a symbol W má analogický vztah ke skupině C(R')(R)(X) v I.

Zbývající kroky syntézy zahrnují:

Volitelnou konverzi skupiny Q_a na Q;

Volitelnou konverzi skupiny Y_a na Y;

Volitelnou konverzi skupiny W na C(R’)(R²)(X);

Tripletem senzitizovanou fotoizomeraci trienu vitaminu D (5E na 5Z); a

Odstranění silylových chránících skupin jádra vitaminu D;

Pořadí kroků 1 až 6 se může měnit (tj. krok fotoizomerace (5) může předcházet reakci (kroku 1) zavádění dvojné vazby, a řada kroků může být kombinována (tj. podmínky kroku desilylace (6) mohou rovněž způsobit odebrání chránící skupiny z alkoholové skupiny X (krok 4). Příklady podmínek a reagujících látek jsou pro specifické reakce (tedy kroky 5 a 6) velmi dobře známé ze stavu techniky týkající se syntéz analogů vitaminu D. Alternativní cesty ktěm, které dokládají některý’ z meziproduktů II, III nebo TV nebo sloučeninu I jsou dostupné, a pro odborníka ze stavu techniky jsou zřejmé.

Schéma 1

Uvedené sloučeniny jsou uvažovány pro použití ve farmaceutických prostředcích, které jsou vhodné pro lokální nebo systémové léčení lidských nebo veterinárních chorob, jak je popsáno výše.

Předložené sloučeniny mohou být použity v kombinaci s jinými farmaceuticky nebo léčivými modalitami. Pro léčení psoriázy lze použít předložené sloučeniny v kombinaci například se steroidy nebo sjiným léčením, například světelným- nebo UV-světelným léčením nebo kombinovaným PUVA-léčením. Pro léčení rakoviny mohou být předložené sloučeniny použity v kombinaci s jinými protirakovinnými léčivy nebo protirakovinným léčením, jako je léčení ozařováním. Při prevenci odhojení štěpu a reakce štěpu versus hostitel, nebo při léčení autoimunních chorob, mohou být předložené sloučeniny výhodně použity v kombinaci s dalšími imunosupresivními/imunoregulujícími léčivy nebo léčením například s cyklosporinem A.

Požadované množství sloučeniny vzorce I (dále označované jako účinná složka) pro léčebný účinek se bude samozřejmě měnit v souvislosti s konkrétní sloučeninou, cestou podání a savcem, který je léčen. Sloučeniny podle vynálezu mohou být podávány parenterálně, intra-artikulámě, enterálně nebo topicky. Dobře se absorbují, když se podávají enterálně, a to je také preferovaná cesta podávání při léčení systémových chorob. Při léčení dermatologických nemocí, jako je psoriáza, nebo očních chorob, se dává přednost topickým nebo enterálním formám.

-6CZ 290933 B6

Ačkoliv je možné podávat účinnou látku samotnou jako surovou chemikálii, dává se přednost její přítomnosti jako farmaceutické formulaci, prostředku. Běžně obsahuje účinná látka od 0,1 ppm do 0,1 % hmotnostních z prostředku.

Prostředky, jak pro veterinární tak pro humánní lékařské použití, podle předloženého vynálezu takto obsahují účinnou složku ve spojení s farmaceuticky přijatelným nosičem a popřípadě s další léčebnou přísadou (přísadami). Nosič (nosiče) musí být „přijatelné“ ve smyslu kompatibility s ostatními přísadami složení a nesmí příjemci škodit.

Prostředky tedy zahrnují formulace ve formě vhodné pro orální, oftalmické, rektální, parenterální (včetně subkutánního, intramuskulárního a intravenózního), transdermální, intra-artikulámí a topické, nasální nebo bukální podání.

Termínem „dávková jednotka“ se míní jednotná, tedy jednotlivá dávka, která je schopná být podána pacientovi, a se kterou lze snadno manipulovat a balit ji, zůstává jako fyzicky a chemicky stabilní dávková jednotka, obsahující buď aktivní materiál jako takový, nebo ve směsi s pevnými nebo kapalnými farmaceutickými ředidly nebo nosiči.

Prostředky (formulace) jsou běžně přítomné ve formě dávkové jednotky a mohou být připraveny jakýmkoliv postupem velmi dobře známým z farmacie. Všechny metody zahrnují krok vnesení účinné složky do spojení nosičem, který tvoří jednu nebo více přídavných složek. Obecně jsou prostředky připravovány přivedením stejnoměrně a těsně účinné složky do spojení s kapalným nosičem nebo jemně děleným pevným nosičem nebo oběma, a potom, pokud je to nezbytné, tvarováním produktu do požadované formy.

Prostředky podle předloženého vynálezu vhodné pro orální podání mohou být ve formě diskrétních jednotek jako kapslí, sáčků, tablet nebo pastilek, kdy každá obsahuje určené množství účinné složky; ve formě prášku nebo granulí; ve formě roztoku nebo suspenze ve vodných kapalinách nebo nevodných kapalinách; nebo ve formě emulze oleje ve vodě nebo emulze vody v oleji. Účinná složka může být rovněž podávána ve formě velkých tablet, lektvaru nebo past}·.

Prostředky pro rektální podání mohou být ve formě čípku s účinnou složkou a nosičem, nebo ve formě krystýru.

Prostředky pro parenterální podání běžně obsahují sterilní olejový nebo vodný přípravek z účinné látky, který je výhodně izotonický s krví příjemce. Transdermální prostředky mohou být ve formě náplasti.

Prostředky vhodné pro intraartikulámí nebo oftalmické podání mohou být ve formě sterilního vodného přípravku účinné složky, která může být v mikrokrystalické formě, například ve formě vodné mikrokrystalické suspenze. Lipozomální prostředky nebo systémy biodegradovatelných polymerů mohou být rovněž použity pro nesení účinné složky při intraartikulámím i oftalmickém podání.

Prostředky vhodné pro topické nebo oftalmické podání zahrnují kapalné nebo částečně kapalné přípravky, jako jsou mazání, omyvadla, gely, léčebné prostředky pro přiložení, emulze oleje ve vodě nebo vody v oleji jako jsou krémy, masti nebo pasty; nebo roztoky nebo suspenze, jako kapky.

Prostředky vhodné pro podávání do nosní nebo bukální dutiny zahrnují prášek, samovolné hnací a sprejové prostředky, jako aerosoly a atomizery.

Spolu s výše uvedenými přísadami mohou prostředky podle předloženého vynálezu zahrnovat jednu nebo více dalších přísad, jako jsou ředidla, pojivá, konzervační látky apod.

-7CZ 290933 B6

Prostředky mohou dále obsahovat další terapeuticky účinné sloučeniny, které se obvykle používají při léčení výše uvedených patologických stavů, jako jsou jiné imunosupresivní látky pro léčení imunologických nemocí nebo steroidy pro léčení dermatologických nemocí.

Předložený vynález se dále týká metod léčení pacientů trpících jedním z uvedených patologických stavů, uvedené postupy sestávají z podávání pacientovi, který toto léčení potřebuje, účinného množství jedné nebo více sloučenin vzorce I, samotných nebo v kombinaci s jednou nebo více dalšími terapeuticky účinnými sloučeninami obvykle používanými při léčení uvedených patologických stavů. Léčení s uvedenými sloučeninami a/nebo s dalšími terapeuticky účinnými sloučeninami může být současně nebo v intervalech.

Při systémovém léčení jsou podávány denní dávky od 0,001 do 2 pg na kilogram tělesné hmotnosti, výhodně od 0,002 do 0,3 pg/kg hmotnosti savce, například 0,003 až 0,3 pg/kg sloučeniny vzorce I, což typicky odpovídá denní dávce od 0,2 do 25 pg pro dospělého člověka. Při topickém léčení dermatologických poruch jsou podávány masti, které nebo omývací prostředky obsahující od 0,1 do 500 pg/g, a přednostně od 0,1 do 100 pg/g, sloučeniny vzorce I. Při topickém použití voftalmologii se podávají masti, kapky nebo gely obsahující od 0,1 do 500 pg/g, a přednostně od 0,1 do 100 pg/g, sloučeniny vzorce I. Orální prostředky jsou formulovány přednostně jako tablety, kapsle nebo kapky, obsahující od 0,05 do 50 pg, přednostně od 0,1 do 25 pg, sloučeniny vzorce I na dávkovou jednotku.

Vynález je dále ilustrován následujícími, ale neomezujícími, přípravami a příklady provedení:

Přípravy a příklady provedení

Příkladné sloučeniny I jsou uvedeny v tabulce 1, zatímco výchozí materiály a meziprodukty obecného vzorce II, III a IV jsou uvedeny v tabulce 2. Tabulka 3 uvádí seznam sloučenin, které jsou meziprodukty ve znázorněné vzájemné přeměně sloučenin II. Struktury těchto meziproduktů jsou uvedeny ve schématu 2, a použité reakce jsou velmi dobře známé v oblasti chemie vitaminu D.

V následujícím popisu jsou použity standardní zkratky:

Me = methyl,

Et = ethyl,

TBSX = t. butyldimethylsilyl.

Tabulka 1: Příkladné sloučeniny I (Podrobnosti jsou uvedeny pro sloučeniny, u kterých je uvedeno číslo příkladu, ostatní sloučeniny mohou být připraveny použitím analogických reakčních sekvencí z příslušné sloučeniny z tabulky 2

Sloučenina číslo	Příklad číslo	Q	Konfigurace dvojné vazby	Y	X	R‘	R²
0101	01	ch₂	E	jednoduchá vazba	OH	Me	Me
0102	02	ch₂	Z	jednoduchá vazba	OH	Me	Me
0103	03	ch₂	E	jednoduchá vazba	OH	Et	Et
0104	04	ch₂	Z	jednoduchá vazba	OH	Et	Et
0105	05	(ch₂)₂	E	jednoduchá vazba	OH	Et	Et
0106	06	(CH₂)₃	E	jednoduchá vazba	OH	Me	Me
0107	07	(CH₂)₃	Z	jednoduchá vazba	OH	Me	Me
0108	08	CH(OH)#	E	jednoduchá vazba	OH	Me	Me
0109	09	CH(OH)##	E	jednoduchá vazba	OH	Me	Me
0110	10	CH(OEt)#	E	jednoduchá vazba	OH	Me	Me
0111	11	CH(OH)-CH₂##	E	jednoduchá vazba	OH	Et	Et

-8CZ 290933 B6

Tabulka 1 - pokračování

Sloučenina číslo	Příklad číslo	Q	Konfigurace dvojné vazby	Y	X	R'	R²
0112	12	CH(OMe)-CH₂##	E	jednoduchá vazba	OH	Et	Et
0113	13	(CH,)₄	E	jednoduchá vazba	OH	Me	Me
		CH.	E	jednoduchá vazba	OH	4CH₂)4-
		CH,	E	jednoduchá vazba	OH	ethinyl	ethinyl
0114	14	CH,	E	jednoduchá vazba	OH	H###	cyklopropyl
	(14)	CH,	E	jednoduchá vazba	OH	τ iii [{H H ιΊτί li tt tt	cyklopropyl
	(14)	CH.	E	jednoduchá vazba	OH	ϊ 111111 /11 í' lirTtrlf trp	cyklopropyl
		CH,	E	jednoduchá vazba	OH	H###	3-pentyl
		CH,	E	jednoduchá vazba	OH	Me	Me
0115	15	CH,	E	ch₂	OH	Et	Et
0116	16	CH,	E	CH=CH (E)	OH	Et	Et
		CH,	E	cf₂	OH	Et	Et
		CH,	E	CH(OH)	OH	Et	Et
		CH=2	E	jednoduchá vazba	OH	Uil IIIIII ηιιτι litr	1-fluoro-
							cyklopropyl

Poznámky k tabulce 1:

#	22-konfigurace: S.
##	22-konfigurace: R,
###	Směs epimerů,
II tl tl It tr rf frTT ίΤίτττΤΤ	R-konfigurace,
II II II 1! H 1 1 1 1 IT 11 11. tt tttrtttr	S-konfigurace

Tabulka 2: Výchozí materiály a meziprodukty obecného vzorce II, III a IV (Podrobnosti jsou uvedeny pro sloučeniny, u kterých je uvedeno číslo příkladu, ostatní sloučeniny mohou být 15 připraveny použitím analogických reakčních sekvencí z příslušné sloučeniny II

Přípr. č.	Sloučenina č.	Typ	Q(a)	Konfigurace dvojné vazby	Y(a)	W
*	0201	I	jednoduchá v
**	0202	II	ch₂
**	0203	II	(CH,),
**	0204	II	(CH₂)₃
05	0205	II	CH(OEt) #
06	0206	II	CH(O-TBS) #
07	0207	II	CH(O-TBS)-CH, ##
08	0208	II	CH(O-TBS) ##
09	0301a	III	ch₂	E	jednoduchá vazba	CO₂Me
09	0302a	III	ch₂	Z	jednoduchá vazba	CO₂Me
10	0303a	III	(CH₂)₂	E	jednoduchá vazba	CO₂Me
11	0304a	III	(CH₂)₃	E	jednoduchá vazba	CO₂Me
11	0305a	III	(CH₂)₃	Z	jednoduchá vazba	CO₂Me
12	0306a	III	CH(O-TBS)#	E	jednoduchá vazba	CO₂Me
13	0307a	II	CH(O-TBS)##	E	jednoduchá vazba	CO₂Me
14	308a	II	CH(OEt)#	E	jednoduchá vazba	CO₂Me
15	0309a	III	CH(O-TBS)-CH₂##	E	jednoduchá vazba	CO₂Me
16	0301b	III	ch₂	E	jednoduchá vazba	C(OH)(Me)₂
17	0302b	III	ch₂	Z	jednoduchá vazba	C(OH)(Me)₂
18	0303b	III	(CH₂)₂	E	jednoduchá vazba	C(OH)(Me)₂
19	0304b	III	(ch₂)₃	E	jednoduchá vazba	C(OH)(Me)₂
20	0305b	III	(ch₂)₃	Z	jednoduchá vazba	C(OH)(Me)₂
21	0306b	III	CH(O-TBS)#	E	jednoduchá vazba	C(OH)(Me)₂
22	0307b	III	CH(O-TBS)##	E	jednoduchá vazba	C(OH)(Me)₂
23	0308b	III	CH(OEt)#	E	jednoduchá vazba	C(OH)(Me)₂
24	0309b	III	CH(O-TBS)-CH₂##	E	jednoduchá vazba	C(OH)(Et)₂

-9CZ 290933 B6

Tabulka 2 - pokračování

Přípr. Č.	Sloučenina č.	Typ	Q(a)	Konfigurace dvojné vazbv	Y(a)	W
25	0401b	IV	ch₂	E	jednoduchá vazba	C(OH)(Me),
26	0405b	IV	(ch₂)₂	E	jednoduchá vazba	C(0H)(Me),
27	0406b	IV	(ch,)₃	E	jednoduchá vazba	C(OH)(Me),
28	0407b	IV	(CH,)₃	Z	jednoduchá vazba	C(OH)(Me),
29	0408b	IV	CH(O-TBS)#	E	jednoduchá vazba	C(0H)(Me)₂
30	0409b	IV	CH(O-TBS)##	E	jednoduchá vazba	C(0H)(Me),
31	0410b	IV	CH(OEt) #	E	jednoduchá vazba	C(0H)(Me),
32	0411b	IV	CH(O-TBS)-CH₂ ##	E	jednoduchá vazba	C(OH)(Et),
33	0402b	IV	CH,	Z	jednoduchá vazba	C(OHXMe),
34	0401a	IV	CH,	E	jednoduchá vazba	CO₂Me
35	0402a	IV	CH,	Z	jednoduchá vazba	CO,Me
36	0403a	IV	CH,	E	jednoduchá vazba	C(OHXEt),
37	0404b	IV	ch₂	Z	jednoduchá vazba	C(OH)(Et),
38	0207a	II	CH(OMe)-CH₂ ##
39	0310a	III	CH(OMe)-CH₂ ##	E	jednoduchá vazba	CO₂Me
40	0310b	III	CH(OMe)-CH₂ ##	E	jednoduchá vazba	C(OH)(Et),
41	0412b	IV	CH(OMe)-CH₂ ##	E	jednoduchá vazba	C(OH)(Et),
42	0204a	II	(CH,)₄
43	0311a	III	(CH₂)₄	E	jednoduchá vazba	CO₂Me
44	0311b	III	(CH₂)₄	E	jednoduchá vazba	C(OH)(Me),
45	0413b	IV	(CH,)₄	E	jednoduchá vazba	C(0H)(Me)₂
46	0312a	III	CH,	E	jednoduchá vazba	C(O)C₃H₅
47	0312b	III	CH,	E	jednoduchá vazba	CH(OH)C₃H₅
48	0414b	IV	CH,	E	jednoduchá vazba	CH(OH)C₃H₅
49	0313b	III	CH₂	E	CH₂	C(OH)(Et)₂
50	0415b	IV	ch₂	E	ch₂	C(OH)(Et)₂
51	0314a	III	ch₂	E	CH=CH (E)	CO₂Me
52	0314b	III	CH,	E	CH=CH (E)	C(OH)(Et)₂
53	0416b	IV	CH,	E	CH=CH (E)	C(OH)(Et)₂

Poznámky k tabulce 2:

Popisy se týkají schématu 1, kde jsou použitelné.

* Výchozí materiál, popsaný v: Calverley, M. J., Tetrahedron, Vol 43, str. 4609-4619 (1987).

** Výchozí materiály, popsaní v: Calverley, M. J. a Pedersen, H. Nové analogy vitaminu D,

WO 9 410 139-A1 (1994), Přípravy 1,2 a 3.

# 22-konfigurace: S ## 22-konfigurace: R

-10CZ 290933 B6

Schéma 2

-11 CZ 290933 B6

Tabulka 3: Meziprodukty ilustrující vzájemnou přeměnu sloučenin II (Schéma 2)

Přípr. Číslo	Sloučenina číslo	22-konfigurace	n	R⁴
1	0001	R	0	—
1	0002	S	0	—
*	0003	R	1	—
2a	0004	R	0	Et
2b	0005	R	0	TBS
*	0006	R	1	TBS
2c	0006a	R	1	Me
*	0007	S	0	TBS
3a	0008	R	0	Et
3b	0009	R	0	TBS
*	0010	R	1	TBS
3c	0010a	R	1	Me
*	0011	S	0	TBS
4a	0012	S	0	Et
4b	0013	s	0	TBS
*	0014	R	1	TBS
4c	0014a	R	1	Me
*	0015	R	0	TBS

Poznámky k tabulce 3

Popisy odpovídající schématu 2, kde jsou použitelné. Adukty oxidu siřičitého (sloučeniny 0008 až 0015) byly vytvořeny a použity jako epimemí směsi na C-6. Prvním krokem každé posloupnosti je reakce s Grignardovým činidlem CH₂=CH-(CH₂)_n-MgBr, po níž následuje oddělení meziproduktu (0001 až 0003) majícího požadovanou 22-konfiguraci, a zbývajícími sekvencemi jsou

0001 -> 0004 -> 0008 -> 0012 -> 0205;

0001 -> 0005 -> 0009 0013 -> 0206;

0003 0006 -> 0010 -> 0014 -> 0207;

0003 0006a -> 00010a -> 0014a -> 0207a;

0002 -> 0007 -> 0011 —> 0015 —> 0208.

Byly připraveny reakcemi analogickými k ilustrované přípravě. Obecně:

Ether označuje diethylether. Petrolether označuje pentanovou frakci. Tetrahydrofuran (THF) byl sušen nad sodíkem/benzofenonem. Reakce rutinně probíhaly pod atmosférou argonu, pokud není uvedeno jinak. Pro chromatografické čištění produktů na koloně je specifikováno pouze složení konečného elučního činidla: typicky bylo promývání zahajováno se směsí obsahující více petroletheru.

Pro ’H jaderná magnetická rezonanční spektra (300 MHz) jsou citovány hodnoty (δ) (v ppm) chemického posunu, pokud není upřesněno jinak, pro roztoky deuteriochloroformu vztažené na vnitřní tetramethylsilan (δ = 0,00) nebo chloroform (δ - 7,25). Je dána hodnota multipletu, buď definovaného (dublet (d), triplet (t), kvartet (q)), nebo nikoliv (m), v přibližně střední hodnotě, pokud rozmezí není definováno (s = singlet, b = široké). Zdánlivé interakční konstanty (J) jsou stanoveny jako absolutní hodnoty (často k nejbližší jednotce) v hertzech pro vybrané definované multiplety. Následující parciální spektra byla společná pro konkrétní typy popsaných sloučenin a nejsou tudíž popisována jednotlivě: Pro sloučeniny typů II (včetně meziproduktů 0001 až 0007

-12CZ 290933 B6 ve schématu 2) a III: δ 0,05 (12H, bs), 0,86 (9H, s), 0,89 (9H, s), 2,30 (1H, bd, J 14), 2,55 (1H, dd, J 5 14), 2,86 (1H, bd), 4,21 (1H, m), 4.52 (1H, m), 4.93 (1H, m), 4,98 (1H, m), 5,81 (1H, d, J 11), 6,45 (1H, d, J 11); sloučeniny typu IV: 0,05 (12h, m), 0,87 (18 h, s), 2,20 (1H, dd), 2,44 (1H, dd), 2,81 (H, bd, J 11), 4,18 (H, m), 4,36 (H, m), 4,85 (1H, m), 5,17 (1H, m), 6,00 (H, d, J 11), 6,22 (H, d, J 11); sloučeniny typu I: 2,31 (1H, dd, J 6,5 13), 2,59 (1H, dd, J 3 13), 2,83 (1H, dd, J 4 11), 4,22 (1H, m), 4,42 (1H, m), 5,00 (1H, bs), 5,33 (1H, bs), 6,02 (1H, d, J 11), 6,37 (1H, d, J 11).

Některé, nebo všechny, charakteristické signály, které do těchto běžných spekter nejsou zahrnuty, jsou u jednotlivých sloučenin uvedeny.

Příprava 01: Sloučeniny 0001 a 0002

Do roztoku, udržovaného při asi 25 °C, sloučeniny 0201 (2,013 g, 3,5 mmol) v suchém THF (6 ml) byl přidán injekční stříkačkou bromid hořečnatý (1M v THF) (9 mmol). Po míchání při stejné teplotě po 30 min byla reakční směs rozdělena mezi ether a nasycený roztok chloridu amonného. Organická vrstva byla oddělena, promyta nasyceným roztokem chloridu sodného, sušena nad bezvodým síranem hořečnatým, a filtrována a koncentrována ve vakuu za vzniku oleje. Purifikací chromatografií na silikagelu (100 g) (eluens: 20% etheru v petroletheru) se získaly sloučeniny uvedené v názvu.

0001: (eluovaná první): δ 0,57 (3 H, s), 0,83 (3 H, d, J = 6,6), 1,25 až 2 (14 H, m), 2,07 (lH,t, J 9), 4,41 (1 H, bs), 5,13 (1H, dt, J2 11), 5,22 (1H, dt, J 2 17), 5,86 (1H, ddd, J 5 11 17);

0002: δ 0,58 (3H, s), 0,85 (3 H, d, J 7), 1,2 až 2,1 (15 H, m), 4,36 (1H, m), 5,2 (1H, bd, J 11), 5,28 (1 H, bd, J 17), 5,92 (1 H, ddd, J 5 11 17).

Příprava 02a: Sloučenina 0004

Do roztoku, udržovaném při asi -40 °C, 18-crown-6-etheru (0,35 g, 1,33 mmol) a sloučeniny 0001 (0,637 g, 1,06 mmol) v suchém THF (20 ml), byl přidán po částech hydrid draselný (20% disperze voleji) (3 mmol), následně bromethan (1 ml, 14 mmol). Po míchání při stejné teplotě po 10 min a potom při 25 °C po 90 min byla reakční směs rozdělena mezi ether a vodu. Organická vrstva byla oddělena, promyta nasyceným roztokem chloridu sodného, sušena nad bezvodým síranem hořečnatým, a filtrována a koncentrována ve vakuu za vzniku oleje. Purifikací chromatografií na silikagelu (150 g) (eluens: 20 % etheru v petroletheru) se získala sloučenina uvedená v názvu.

δ 0,54 (3H, s), 0,8 až 0,97 (3 H, d), 1,05 až 1,97 (13 H, m), 1,16 (3H, t, J 7), 2,04 (1 H, t, J 9), 3,25(1 H, m), 3,51 (1 H, m), 3,74 (1 H, dd,J3,4 7), 5,13(1 H, m), 5,15 (1H, m), 5,76(1 H, m).

Příprava 02b: Sloučenina 0005

Do roztoku, udržovaného při asi 5 °C, 2,6-lutidinu (0,75 ml, 6,5 mmol) a sloučeniny 0001 (0,955 g, 1,67 mmol) v suchém dichlormethanu (5 ml) byl přidán injekční stříkačkou t.butyldimethylsilyl-trifluormethansulfonat (0,860 g, 3,3 mmol). Po míchání při stejné teplotě po 1 h byla reakční směs rozdělena mezi ether a vodu. Organická vrstva byla oddělena, promyta nasyceným roztokem chloridu sodného, sušena nad bezvodým síranem hořečnatým, a filtrována a koncentrována ve vakuu za vzniku oleje. Purifikací chromatografií na silikagelu (100 g) (eluens: 20 % ether v petroletheru) se získala sloučenina uvedená v názvu.

-13CZ 290933 B6

Příprava 02c : Sloučenina 0006a

Do roztoku, udržovaného při asi -40 °C, 18-crown-6-etheru (0,35 g, 1,33 mmol) a sloučeniny 0,003 (0,617 g, 1,0 mmol) v suchém THF (20 ml), byl přidán po částech hydrid draselný (20% disperze v oleji) (3 mmol), následně jodmethan (0,9 ml, 14 mmol). Po míchání při stejné teplotě po 10 min a potom při 25 °C po 90 min byla reakční směs rozdělena mezi ether a vodu. Organická vrstva byla oddělena, promyta nasyceným roztokem chloridu sodného, sušena nad bezvodým síranem hořečnatým, a filtrována a koncentrována ve vakuu za vzniku oleje. Purifikací chromatografií na silikagelu (150 g) (eluens: 20% ether v petroletheru) se získala sloučenina uvedená v názvu.

Příprava 03a: Sloučenina 0008

Do roztoku, udrženého při asi -40 °C, sloučeniny 0004 (0,630 g, 1 mmol) v etheru (6 ml), byl rychle přidán kapalný oxid siřičitý (100 mmol). Po míchání při stejné teplotě po 10 min a potom při -10 °C po 40 min byla reakční směs koncentrována ve vakuu. Bez dalšího čištění byl tento produkt obsahující sloučeninu uvedenou v názvu použit v dalším kroku.

Příprava 03b: Sloučenina 0009

Sloučenina uvedená v názvu byla použita analogicky s postupem z přípravy 03a, ale s použitím sloučeniny 0005 (1,060 g, 1,48 mmol) v etheru (3 ml) jako výchozím materiálem.

Příprava 03c: Sloučenina 0010a

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogicky s postupem z přípravy 03a, ale s použitím sloučeniny 0006a (0,820g, 1,3 mmol) v etheru (3 ml) jako výchozím materiálem.

Příprava 04a: Sloučenina 0012

Roztok, udržovaný při asi -70 °C, sloučeniny 0008 získané jako surový produkt ze sloučeniny 0004 (0,630 g, 1 mmol) v dichlormethanu (8 ml) a methanolu (3 ml), byl zpracováván ozonizovaným kyslíkem, dokud výchozí materiál nebyl dále detekován tenkovrstvou chromatografií. Potom byl roztok propláchnut dusíkem a byl přidán trifenylfosfin (0,4 g). Po míchání při stejné teplotě po 10 min a potom při 0 °C po 30 min byla reakční směs koncentrována ve vakuu. Zbytek byl sušen ve vysokém vakuu za vzniku pevné látky. Purifíkace chromatografií na silikagelu (100 g) (eluens: 30% ether v petroletheru) poskytla sloučeninu uvedenou v názvu.

Příprava 04b: Sloučenina 0013

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogicky s postupem přípravy 03a, ale s použitím jako výchozího materiálu sloučeniny 0009 získané jako surový produkt ze sloučeniny 0005 (1,48 mmol) v dichlormethanu (12 ml) a methanolu (4 ml). Byl zpracován trifenylfosfin (0,650 g).

- 14CZ 290933 B6

Příprava 04c: Sloučenina 0014a

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogicky s postupem přípravy 03a, ale s použitím jako výchozího materiálu sloučeniny 0010a získané jako surový produkt ze sloučeniny 0006a (1,3 mmol) v dichlormethanu (12 ml) a methanolu (4 ml). Byl zpracován trifenylfosfin (0,650 g).

Příprava 05: Sloučenina 0205

Do intenzivně míchané směsi, udržované při asi 25 °C, sloučeniny 0012 (0,300 g, 0,43 mmol) v toluenu (5 ml), byl přidán 5% vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného (5 ml) a směs byla odplyněna. Po míchání při stejné teplotě po 5 min a potom při 85 °C po 90 min byla reakční směs rozdělena mezi ether a vodu. Organická vrstva byla oddělena, promyta nasyceným roztokem chloridu sodného, sušena nad bezvodým síranem hořečnatým a koncentrována ve vakuu za vzniku oleje. Purifikací chromatografií na silikagelu (30 g) (elues: 20% ether v petroletheru) se získala sloučenina uvedená v názvu.

δ 0,59 (3H, s), 0,75 až 0,95 (3 H, d), 1,15 až 2,15 (14 H, m), 1,26 (3 H, t, J 7), 3,42 (1 H, m), 3,71 (1 H, m), 3,82 (H, m), 9,72 (1 H, d, J 1).

Příprava 06: Sloučenina 0206

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogicky k postupu přípravy 05, ale s použitím sloučeniny 0013 (0,468 g, 0,59 mmol) jako výchozího materiálu v toluenu (7 ml) a 5% vodném roztoku hydrogenuhličitanu sodného (7 ml). Purifikací chromatografií na silikagelu (50 g) (eluens: 02% ether v petroletheru) se získala sloučenina uvedená v názvu.

δ 0,06 (6 H, s), 0,55 (3 H, s), 0,8 až 0,95 (3 H, d), 0,94 (9 H, s), 1,15 až 2,1 (14 H, m), 4,09 (1 H, m), 9,62 (1H, m).

Příprava 07: Sloučenina 0207

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogicky k postupu přípravy 06, ale s použitím sloučeniny 0014 jako výchozího materiálu.

δ 0,05 (6 H, s), 0,49 (3 H, s), 0,85 (3 H, d), 0,88 (9 H, s), 1,15 až 2,05 (14 H, m), 2,52 (2 H, m), 4,24(1 H, m), 9,77(1 H, t, J 2).

Příprava 08: Sloučenina 0208

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogicky k postupu přípravy 06, ale s použitím sloučeniny 0015 jako výchozího materiálu.

Příprava 09: Sloučenina 0301a a 0302a

Do směsi, udržované při asi -20 °C, kyseliny benzoové (10 mg) a methyl(trifenylfosforanyliden)acetátu (0,646 g, 1,93 mmol) v suchém methanolu (8 ml) byla přidána po kapkách sloučenina 0202 (0,630 g, 1,07 mmol) v suchém THF (2 ml). Po míchání při stejné teplotě po 15 min a potom při 22 °C přes noc byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a vodu. Organická vrstva byla oddělena, promyta nasyceným roztokem chloridu sodného, sušena nad bezvodým síranem hořečnatým a koncentrována ve vakuu za vzniku oleje. Purifikací chromato

-15CZ 290933 B6 grafií na silikagelu (100 g) (eluens: 02% ethylacetát a petroletheru) se získaly sloučeniny uvedené v názvu.

0301a (eluovaná první): δ 0,56 (3 H, s), 0,84 (3 H, d), 1,1 až 2,15 (15 H. m), 2,49 (1H, m), 3,71 (3 H, s), 5,8 (1H, d, J 16), 6,94 (1H, m);

0302a: δ 0,57 (3 H, s), 0,75 až 1 (3 H, d), 1,2 až 2,1 (14 H, m), 2,6 (1 H. m), 2,86 (1 H, m), 3,69 (3 H, s), 5,82 (1 H, m), 6,25 (1 H, d).

Příprava 10: Sloučenina 0303a

Do roztoku, udržovaného při asi 25 °C, sloučeniny 0203 (0,360 g, 0,6 mmol) v odplyněném toluenu (20 ml), byl přidán v jediné dávce methyl (trifenylfosforanyliden)acetát (0,400 g,

1,2 mmol). Po míchání při stejné teplotě po 5 min a potom při 100 °C po 2 h byla reakční směs částečně zkoncentrována ve vakuu a zředěna etherem a methanolem. Roztok byl ponechán stranou, aby zkrystalizoval, a potom byl filtrován za získání sloučeniny uvedené v názvu.

Ukazatele; t.t. 82-83 °C; δ 0,53 (3 H, s), 0,85 (3 H, d), 1,2 až 2,15 (17 H, m), 2,27 (1H, m), 3,72 (3 H, s), 5,81 (1 H, d, J 16), 6,97 (1 H, dt, J 7 16).

Příprava 11: Sloučenina 0304a a 0305 a

Do roztoku, udržovaného při asi 25 °C, sloučeniny 0204 (0,110 g, 0,16 mmol) v odplyněném toluenu (6 ml), byl přidán v jediné dávce methyl(trifenylfosforanyliden)acetát (0,130 g, 039 mmol). Po míchání při stejné teplotě po 5 min a potom při 100 °C po 3 h byla reakční směs částečně zkoncentrovaná ve vakuu a zředěna etherem. Roztok byl ponechán stranou, aby zkrystalizoval, byl zfiltrován a koncentrován ve vakuu za vzniku oleje. Purifikací chromatografii na silikagelu (30 g) (eluens: 05% ether v petroletheru) se získaly sloučeniny uvedené v názvu.

0304a: δ 0,52 (3H, s), 0,83 (3 H, d, J 6,4), 1,1 až 2,05 (18 H, m), 2,16 (2 H, m), 3,71 (3 H, s), 5,8 (1 H, d,J 16), 6,97(1 H, dt, J 7 16);

0305a (eluovaná první): δ 0,52 (3 H, s), 0,84 (3 H, d), 1,1 až 2,05 (18 h, m), 2,63 (2 H, m), 3,69 (3 H, s), 5,76 (1 H, dt, J 2 11,5), 6,22 (1 h, dt, J 7,5 11,5).

Příprava 12: Sloučenina 0306a

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogicky k postupu přípravy 11, ale s použitím sloučeniny 0206 (0,520 g, 0,72 mmol) jako výchozího materiálu. Byl zpracován methyl(trifenylfosforanyliden)acetát (0,500 g, 1,5 mmol).

δ 0,05 (6 H, s), 0,48 (3 H, s), 0,8 až 0,95 (3 H, d), 0,92 (9 H, s), 1,1 až 2,05 (14 H, m), 3,74 (3 H, s), 4,24 (1 H, m), 5,94 (1 H, dd, J 1,5 16), 6,95 (1 H, dd, J 5 16).

Příprava 13: Sloučenina 0307a

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogicky k postupu přípravy 12, ale s použitím sloučeniny 0208 jako výchozího materiálu.

-16CZ 290933 B6

Příprava 14: Sloučenina 0308a

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogicky k postupu přípravy 11, ale s použitím sloučeniny 0205 (0,216 g, 0,34 mmol) jako výchozího materiálu. Byl zpracován methyl(trifenylfosforanyliden)acetát (0,220 g, 0,66 mmol). Purifikací chromatografií na silikagelu (15 g) (eluens 05% ether v petroletheru) se získala sloučenina uvedená v názvu.

δ 0,53 (3 H, s), 0,85 (3 H, d), 1,15 až 2 (13 H, m), 1,18 (3 H, t, J 7), 2,05 (1 H, t, J 9), 3,31 (1 H, m), 3,48 (1 H, m), 3,74 (3 H, s), 4,01 (1 H, m), 5,93 (1H, dd, J 1 16), 6,87 (1 H, dd, J 6 16).

Příprava 15: Sloučenina 0309a

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogicky k postupu přípravy 11, ale s použitím sloučeniny 0207 (0,045 g, 0,006 mmol) jako výchozím materiálem v odplyněném toluenu (2 ml). Byl použit methyl (trifenylfosforanyliden)acetát (0,45 g, 0,12 mmol). Purifikací na silikagelu (30 g) (eluens: 1% ether v petroletheru) se získala sloučenina uvedená v názvu.

δ 0,05 (6 H, s), 0,46 (3 H, s), 0,83 (3 H, d, J 7), 0,88 (9 H_: s), 1,2 až 2,1 (14 H, m), 2,32 (2 H, m), 3,72 (3 H, s), 3,81 (1 H, m), 5,83 (1 H, d, J 16), 6,9 (1 H, dt, J 8 16).

Příprava 16: Sloučenina 0301b

Do roztoku, udržovaného při asi -20 °C, sloučeniny 0301a (0,091 g, 0,14 mmol) v suchém etheru (5 ml), bylo přidáno injekční stříkačkou methyl-lithium (1,6 M v etheru) (1,6 mmol). Po míchání při stejné teplotě po 1 h byla reakční směs zchlazena vodou a rozdělena mezi ether a vodu. Organická vrstva byla oddělena, promyta nasyceným roztokem chloridu sodného, sušena nad bezvodým síranem hořečnatým, a koncentrována ve vakuu za vzniku oleje. Purifikací chromatografií na silikagelu (50 g) (eluens: 05% ethylacetát v petroletheru) se získala sloučenina uvedená v názvu.

δ 0,55 (3 H, s), 0,81 (3 H, d), 1 až 2,06 (16 H, m), 1,29 (6H, s), 2,3 (1 H, m), 5,57 (2 H, m).

Příprava 17: Sloučenina 0302b

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogicky k postupu u přípravy 16, ale s použitím sloučeniny 0302a (0,184 g, 0,286 mmol) jako výchozím materiálem v suchém THF (3 ml). 10% ethylacetát v petroletheru byl použit jako eluens.

δ 0,55 (3 H, s), 0,85 (3 H, d), 1 až 2,08 (15 H, m), 1,35 (6H, s), 2,18 (1 H, m), 5,28 (1 H, m), 5,5 (1 H, d, J 12).

Příprava 18: Sloučenina 0303b

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogicky k postupu u přípravy 16, ale s použitím sloučeniny 0303a (0,237 g, 0,36 mmol) v suchém THF (3 ml) jako výchozím materiálu v suchém THF (3 ml) a ethyl-lithiem (2,4 M v etheru) (0,9 mmol) jako reakčním činidlem. 20% ether v petroletheru byl použit jako eluens.

δ 0,52 (3 H, s), 0,85 (6 H, t, J 7,5), 0,85 (3 H, d), 1,1 až 2,25 (19 H, m), 1,51 (2 H, q, J 7,5), 1,52 (2 H, q, J 7,5), 5,38 (1 H, d, J 16), 5,57 (1 H, dt, J Ί 16).

- 17CZ 290933 B6

Příprava 19: Sloučenina 0304b

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogicky k postupu u přípravy 16, ale s použitím sloučeniny 0304a (0,067 g, 0,1 mmol) jako výchozím materiálem v suchém THF (3 ml) a methyl-lithiem (1,6 M v etheru) (0,5 mmol). Purifikací chromatografií na silikagelu (15 g) (eluens: 20% ether v petroletheru) se získala sloučenina uvedená v názvu.

δ 0.52 (3 H, s), 0,83 (6 H, d, J 6,5), 1,1 až 2,1 (21 H, m), 1,29 (6 H, s), 5,59 (2 H, m).

Příprava 20: Sloučenina 0305b

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogicky k postupu u přípravy 16, ale s použitím sloučeniny 0305a (0,055 g, 0,082 mmol) jako výchozím materiálem v suchém THF (3 ml) a methyl-litiem (1,6 M v etheru) (0,4 mmol). Purifikací chromatografií na silikagelu (15 g) (eluens: 20% ether v petroletheru) se získala sloučenina uvedená v názvu.

δ 0.53 (3 H, s), 0,83 (3 H, d, J 6,4), 1,1 až 2,1 (19 H, m), 1,36 (6 H, s), 2,15 až 2,37 (2 H. m), 5,3 (1 H, dt, J 7,4 12), 5,47 (1 H, bd, J 12).

Příprava 21: Sloučenina 0306b

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogicky k postupu u přípravy 16, ale s použitím sloučeniny 0306a (0,100 g, 0,13 mmol) jako výchozím materiálem v suchém THF (3 ml) a methyl-lithiem (1,6 M v etheru) (0,4 mmol). Purifikací chromatografií na silikagelu (15 g) (eluens: 20% ether v petroletheru) se získala sloučenina uvedená v názvu.

δ 0,00 (3 H, s), 0,03 (3 H, s), 0,49 (3 H, s), 0,82 (3 H, d), 0,9 (9 H, s), 1,15 až 2,05 (15 H, m),

1,31 (6 H, s), 4,08 (1 H, dd, J 3 6), 5,6 (1 H, dd, J 6 16), 5,68 (1 H, d, J 16).

Příprava 22: Sloučenina 0307b

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogicky k postupu u přípravy 16, ale s použitím sloučeniny 0307a (0,037 g, 0,094 mmol) jako výchozím materiálem v suchém THF (3 ml) a methyl-lithiem (1,6 M v etheru) (0,5 mmol). Purifikací chromatografií na silikagelu (15 g) (eluens: 20% ether v petroletheru) se získala sloučenina uvedená v názvu.

δ 0,00 (3 H, s), 0,03 (3 H, s), 0,54 (3 H, s), 0,8 (3 H, d, J 6,8), 0,89 (9H, s), 1,15 až 2,05 (15 H, m), 1,32 (6 H, s), 4,3 (1 H, m), 5,64 (1 H, dd, J 5 16), 5,79 (1 H, dd, J 1 16).

Příprava 23: Sloučenina 0308b

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogicky k postupu u přípravy 16, ale s použitím sloučeniny 0308a (0,133 g, 0,19 mmol) jako výchozím materiálem v suchém THF (3 ml) a methyl-lithiem (1,6 M v etheru) (0,96 mmol). Purifikací chromatografií na silikagelu (15 g) (eluens: 20% ether v petroletheru) se získala sloučenina uvedená v názvu.

δ 0,53 (3 H, s), 0,85 (3 H, d), 1 až 1,97 (14 H, m), 1,16 (3 H, t, J 7), 1,33 (6 H, s), 2,03 (1 H, t, J 9,5), 3,24 (1 H, m), 3,48 (1 H, m), 3,77 (1 H, dd, J 3 7), 5,57 (1 H, dd, J 7 16), 5,73 (1 H, d, J 16).

-18CZ 290933 B6

Příprava 24: Sloučenina 0309b

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogicky k postupu u přípravy 16, ale s použitím sloučeniny 0309a (0,024 g, 0,03 mmol) v suchém THF (2 ml) jako výchozím materiálem v suchém THF (3 ml) a ethyl-lithiem (1,2 M v etheru) (0,1 mmol) jako reakčním činidlem. Purifikací chromatografií na silikagelu (15 g) (eluens: 10% ether v petroletheru) se získala sloučenina uvedená v názvu.

δ 0.05 (6 H, s), 0,46 (3 H, s), 0,83 (3 H, d), 0,85 (6 H, t). 0,89 (9 H, s), 1,15 až 2,05 (15 H, m), 1,51 (4 H, q, J 7,5), 2,2 (2 H, m), 3,82 (1 H, t, J 7), 5,42 (1 H, d, J 16), 5,53 (1 H, dt, J 7 16).

Příprava 25: Sloučenina 0401b

Do roztoku, udržovaného při asi 10 °C, sloučeniny 0301b (0,091 g, 0,141 mmol) vodplyněném dichlormethanu (10 ml) byl přidán antracen (0,091 g, 0,512 mmol) a triethylamin (0,1 ml). Po ozáření UV lampou (typ: Hanau TQ 718Z2) při stejné teplotě po 22 min byla reakční směs částečně koncentrována ve vakuu a zředěna petroletherem. Roztok byl zfiltrován a koncentrován ve vakuu za vzniku oleje. Purifikací chromatografií na silikagelu (50 g) (eluens: 20% ethylacetát v petroletheru) se získala sloučenina uvedená v názvu.

δ 0,54 (3 H, s), 0,81 (3 H, d), 1,15 až 2,05 (16 H, m), 1,3 (6 H, s), 2,32 (1 H, m), 5,57 (2 H, m).

Příprava 26: Sloučenina 0405b

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem analogickým k postupu z přípravy 25, ale s použitím sloučeniny 0303b (0,120 g, 0,17 mmol) jako výchozím materiálem v dichlormethanu (7 ml) santracenem (0,150 g, 0,84 mmol). Doba ozařování byla 35 min. Purifikací chromatografií na silikagelu (15 g) (eluens: 10% ether v petroletheru) se získala sloučenina uvedená v názvu.

Příprava 27: Sloučenina 0406b

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem analogickým k postupu z přípravy 25, ale s použitím sloučeniny 0304b (0,063 g, 0,093 mmol) jako výchozím materiálem v odplyněném toluenu (4 ml) s antracenem (0,075 g, 0,42 mmol). Doba ozařování byla 35 min. Purifikací chromatografií na silikagelu (15 g) (eluens: 20% ether v petroletheru) se získala sloučenina uvedená v názvu.

δ 0,51 (3 H, s), 0,82 (3 H, d, J 6,4), 1,05 až 2,05 (21 H, m), 1,29 (6 H, s), 5,59 (2 H, m).

Příprava 28: Sloučenina 0407b

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem analogickým k postupu z přípravy 27, ale s použitím sloučeniny 0305b (0,033 g, 0,049 mmol) jako výchozím materiálem s antracenem (0,036 g, 0,2 mmol). Purifikací chromatografií na silikagelu (15 g) (eluens: 20% ether v petroletheru) se získala sloučenina uvedená v názvu.

-19CZ 290933 B6

Příprava 29: Sloučenina 0408b

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem analogickým k postupu z příprav} 27, ale s použitím sloučeniny 0306b (0,080 g, 0,103 mmol) jako výchozím materiálem santracenem (0,030 g, 0,17 mmol). Purifikací chromatografií na silikagelu (15 g) (eluens: 20% ether v petroletheru) se získala sloučenina uvedená v názvu.

δ 0,01 (3 H, s), 0,02 (3 H, s), 0,48 (3 H, s), 0,82 (3 H, d, J 6,8), 0,88 (9 H, s), 1,15 až 2 (15 H, m),

1,3 (3 H, s), 1,31 (3 H, s), 4,07 (1 H, dd, J 36), 5,6 (1 H, dd, J 6 16), 5,67 (1 H, d, J 16).

Příprava 30: Sloučenina 0409b

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogicky s postupem z přípravy 27, ale s použitím sloučeniny 0307b jako výchozím materiálem.

Příprava 31: Sloučenina 0410b

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogicky s postupem z přípravy 27, ale s použitím sloučeniny 0308b (0,060 g, 0,087 mmol) jako výchozím materiálem s antracenem (0,020 g, 0,12 mmol).

δ 0,52 (3 H, s), 0,86 (3 H, d), 1,05 až 1,95 (14 H, m), 1,16 (3 h, t, J 7), 1,32 (3 H, s), 1,33 (3 H, s),

1,98 (1 H, t, J 9), 3,24 (1 H, m), 3,48 (1 H, m), 3,76 (1H, dd, J 3 7), 5,57 (1 H, dd, J 7 16), 5,73 (1 H, d, J 16).

Příprava 32: Sloučenina 0411b

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogicky s postupem z přípravy 27, ale s použitím sloučeniny 0309b (0,020 g, 0,025 mmol) jako výchozím materiálem s antracenem (0,010 g, 0,06 mmol). Purifikací chromatografií na silikagelu (15 g) (eluens: 10% ether v petroletheru) se získala sloučenina uvedená v názvu.

Příprava 33: Sloučenina 0402b

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogicky k postupu z přípravy 25, ale s použitím sloučeniny 0302b (0,137 g, 0,213 mmol) jako výchozím materiálem v dichlormethanu (6 ml) s antracenem (0,137 g, 0,77 mmol). Doba ozařování byla 25 min. Purifikací chromatografií na silikagelu (50 g) (eluens: 05% ethylacetát v petroletheru) se získala sloučenina uvedená v názvu.

δ 0,54(3 H, s), 0,8 až 1 (3 H, d), 1,15 až 2,08 (15 H, m), 1,36 (6 H, s), 2,1 (1 H, m), 2,59 (1 H, m), 5,28 (1 H, m), 5,5 (1 H, d, J 12).

Příprava 34: Sloučenina 0401a

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogicky k postupu z přípravy 25, ale s použitím sloučeniny 0302a (0,389 g, 0,6 mmol) jako výchozím materiálem v dichlormethanu (6 ml) santracenem (0,389 g, 2,2 mmol). Doba ozařování byla 30 min. Purifikací chromatografií na silikagelu (50 g) (eluens: 02% ethylacetát v petroletheru) se získala sloučenina uvedená v názvu.

-20CZ 290933 B6 δ 0,54(3 H, s), 0,84 (3 Η, d), 1,2 až 2,15 (15 H, m), 2,45 (1 H, m), 3,72 (3 H. s), 5.8 (1 H, d,J 16), 6,94(1 H, d).

Příprava 35: Sloučenina 0402a

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogicky k postupu z přípravy 25. ale s použitím sloučeniny 0301a (0,153 g, 0,238 mmol) jako výchozím materiálem v dichlormethanu (6 ml) s antracenem (0,153 g, 0,858 mmol). Doba ozařování byla 25 min. Purifikaci chromatografií na silikagelu (50 g), (eluens: 01% ethylacetát v petroletheru) se získala sloučenina m ěděná v názvu.

δ 0,56 (3 H, s), 0,8 až 1 (3 H, d), 1,2 až 2,1 (14 H, m), 2,61 (1 H, m), 2,84 (1 H, m), 3,69 (3 H, s), 5,8(1 H, d), 6,24(1 H, m).

Příprava 36: Sloučenina 0403b

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogicky k postupu z přípravy 16, ale s použitím sloučeniny 0401a (0,252 g, 0,392 mmol) jako výchozím materiálem v suchém THF (8 ml) a ethyl-lithiem (1,4 M v etheru) (2,4 mmol) jako reakčním činidlem. Purifikaci chromatografií na silikagelu (50 g), (eluens: 05% ethylacetát v petroletheru) se získala sloučenina uvedená v názvu.

δ 0,54 (3 H, s), 0,83 (3 H, d), 0,85 (6, H, t), 1,2 až 2,1 (20 H, m), 2,2 (1 H, dd), 2,35 (1 H, m), 5,35(1 H, d,J 16), 5,54(1 H, m).

Příprava 37: Sloučenina 0404b

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogicky k postupu z přípravy 16, ale s použitím sloučeniny 0402a (0,082 g, 0,192 mmol) jako výchozím materiálem v suchém THF (3 ml) a ethyl-lithiem (1,4 M v etheru) (1,2 mmol) jako reakčním činidlem. Purifikaci chromatografií na silikagelu (50 g), (eluens: 02% ethylacetát v petroletheru) se získala sloučenina uvedená v názvu.

δ 0,54 (3 H, s), 0,85 (3 H, d), 0,89 (6, H, t), 1,15 až 2,08 (19 H, m), 2,18 (1 H, m), 2,6 (1 H, m), 5,25(1 H, d,J 12), 5,39(1 H, m).

Příprava 38: Sloučenina 0207a

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogicky k postupu z přípravy 06, ale s použitím sloučeniny 0014a jako výchozím materiálem.

Příprava 39: Sloučenina 0310a

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogicky k postupu přípravy 11, ale s použitím sloučeniny 0207a (0,050 g, 0,08 mmol) jako výchozím materiálem v odplyněném toluenu (2 ml). Byl použit methyl (trifenylfosforanyliden)acetát (0,045 g, 0,12 mmol). Purifikaci chromatografií na silikagelu (30 g) (eluens: 10% ether v petroletheru) se získala sloučenina uvedená v názvu.

Příprava 40: Sloučenina 0310b

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogicky k postupu přípravy 16, ale s použitím sloučeniny 0310a (0,034 g, 0,05 mmol) v suchém THF (2 ml) jako výchozím materiálem

-21 CZ 290933 B6 v suchém THF (3 ml) a ethyl-lithiem (1,2 M v ether) (0,1 mmol) jako reakčním činidlem. Purifikaci chromatografií na silikagelu (15 g) (eluens: 10% ether v petroletheru) se získaná sloučenina uvedená v názvu.

Příprava 41: Sloučenina 0412b

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogicky k postupu z přípravy 27, ale s použitím sloučeniny 0310b (0,018 g, 0.025 mmol) jako výchozím materiálem santracenem (0,010 g, 0,06 mmol). Purifikaci chromatografií na silikagelu (15 g) (eluens: 10% ether v petroletheru) se získala sloučenina uvedená v názvu.

Příprava 42: Sloučenina 0204a

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogicky k postupu iterační homogace, popsané v: Calverley, M.J. a Pederson, H. Novel vitamin D analogues, WO 9410139—Al (1994), Preparation 3, ale s použitím tosylátu připraveného ze sloučeniny 10 z tohoto patentu. Purifikaci chromatografií na silikagelu (100 g) (eluens: 05% ethylacetátu v petroletheru) se získala sloučenina uvedená v názvu.

δ 0,53 (3 H, s), 0,83 (3 H, d), 1,1 až 2,05 (20 H, m), 2,41 (2 H, dt), 9,76 (1 H, t).

Příprava 43: Sloučenina 0311a

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogicky k postupu z přípravy 11, ale s použitím sloučeniny 0204a (0,380 g, 0.6 mmol) jako výchozím materiálem. Byl použit methyl(trifenylfosforanyliden)acetát (0,500 g, 1,5 mmol).

δ 0,52 (3 H, s), 0,83 (3 H, d, J 6,4), 1,1 až 2,05 (20 H, m), 2,16 (2 H, m), 3,71 (3 H, s), 5,8 (1 H, d, J 16), 7,0(1 h,dt,J7 16).

Příprava 44: Sloučenina 0311b

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogicky k postupu přípravy 16, ale s použitím sloučeniny 0311a (0,069 g, 0,1 mmol) jako výchozím materiálem v suchém THF (3 ml) a ethyl-lithiem (1,6 M v etheru) (0,5 mmol). Purifikaci chromatografií na silikagelu (15 g) (eluens: 20% ether v petroletheru) se získala sloučenina uvedená v názvu.

Příprava 45: Sloučenina 0413b

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogicky k postupu z přípravy 25, ale s použitím sloučeniny 0311b (0,055 g, 0,08 mmol) jako výchozím materiálem v odplyněném toluenu (4 ml) santracenem (0,038 g, 0,21 mmol). Doba ozařování byla 35 min. Purifikaci chromatografií na silikagelu (15 g), (eluens: 20% ether v petroletheru) se získala sloučenina uvedená v názvu.

δ 0,51 (3 H, s), 0,82 (3 H, d, J 6,4), 1,05 až 2,05 (23 H, m), 1,29 (6 H, s), 5,6 (2 H, m).

-22CZ 290933 B6

Příprava 46: Sloučenina 0312a

Do roztoku, udržovaného při asi 25 °C, sloučenina 0202 (0,120 g, 0,20 mmol) vodplyněném toluenu (6 ml) byl přidán v jedné dávce cyklopropylkarbonylmethylentrifenylfosforan (0,138 g, 0.40 mmol). Po míchání při stejné teplotě po 5 min a potom při 100 °C po 3 h byla reakční směs částečně koncentrována ve vakuu a zředěna etherem. Roztok byl ponechán stranou krystalizovat, byl zfiltrován a koncentrován ve vakuu za vzniku oleje. Purifikací chromatografií na silikagelu (30 g) (eluens: 05% ether v petroletheru) se získala sloučenina uvedená v názvu.

δ 0,57 (3 H, s). 0,8 až 0,9 (3 H, d), 0,8 až 0,9 (4 H, m), 1,07 (1 H, m), 2,52 (1 H, m), 6,21 (1 H, d, J 16), 6,88(1 H, ddd).

Příprava 47: Sloučenina 0312b

Do roztoku, udržovaného při asi 5 °C, sloučeniny 0312a (0,090 g, 0,14 mmol) v THF (1 ml) a methanolu (2 ml) obsahujícího heptahydrát chloridu čeřitého (0,2 mmol) byl přidán v jediné dávce tetrahydroboritan sodný (0,02 g, 0,5 mmol). Po míchání při stejné teplotě po 10 min byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a vodu. Organická vrstva byla oddělena, promyta nasyceným roztokem chloridu sodného, sušena nad bezvodým síranem hořečnatým a koncentrována ve vakuu za vzniku oleje. Purifikací chromatografií na silikagelu (30 g) (eluens: 10% ethylacetát v petroletheru) se získala sloučenina uvedená v názvu jako přibližně 1:1 směs epimerů. (Epimery mohou být v tomto stupni odděleny chromatografií, pokud je to požadováno.) δ 0,22 (1 H, m), 0,32 (1 H, m), 0,5 (2 H, m), 0,56 (3 H, s), 0,8 až 0,9 (3 H, d), 0,98 (1 H, m), 2,34 (1 H, m), 3,56 (1 H, m), 5,52 (1 H, dd, J 6,5, 15), 5,62 (1 H, dt, J 7 15).

Příprava 48: Sloučenina 0414b

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogicky k postupu z přípravy 25, ale s použitím sloučeniny 0312b (0,078 g, 0,12 mmol jako výchozím materiálem v dichlormethanu (5 ml) s antracenem (0,015 g, 0,084 mmol). Doba ozařování byla 35 min. Purifikací chromatografií na silikagelu (15 g) (eluens: 10% ethylacetát v petroletheru) se získala sloučenina uvedená v názvu.

Příprava 49: Sloučenina 0313b

Do roztoku, udržovaného při asi -25 °C, 3-ethyl-3-hydroxypentylfenylsulfonu (155 mg, 0,60 mmol) v suchém THF (4 ml) byl přidán pomocí injekční stříkačky di-isopropylamid lithný (3 ml, 1,2 mmol, 0,4 M roztoku v THF-hexanech, 3:1). Po míchání při stejné teplotě po 30 min byla reakční směs ochlazena na —40 °C po přidání roztoku sloučeniny 0202 (0,293 g, 0,50 mmol) v THF (2 ml). Po míchání při stejné teplotě po 30 min byl přidán po kapkách benzoylchlorid (0,15 ml, 1,3 mmol), a směs byla ponechána ohřát na teplotu místnosti během dalších 30 min. Reakční směs byla rozdělena mezi ether a vodu. Organická vrstva byla oddělena, promyta nasyceným roztokem chloridu sodného, sušena nad bezvodým síranem hořečnatým, a zfiltrována a koncentrována ve vakuu za vzniku oleje. Ten byl opětovně rozpuštěn v ethylacetátu (2 ml) a zředěn methanolem (12 ml, nasyceným a obsahujícím suspenzovaný hydrogenfosforečnan sodný). Do tohoto roztoku, udržovaného při asi 5 °C, byl přidán asi 5% amalgam sodný (4 g) a míchání pokračovalo při stejné teplotě 15 h. Reakční směs byla rozdělena mezi ethylacetát a vodu (dekantací ze rtuti) a organická vrstva byla oddělena, promyta nasyceným roztokem chloridu sodného, sušena nad bezvodým síranem hořečnatým, a filtrována a koncentrována ve vakuu za vzniku oleje. Purifikací chromatografií na silikagelu (50 g) (eluens: 10% ether v petroletheru) se získala sloučenina uvedená v názvu.

-23 CZ 290933 B6

Příprava 50: Sloučenina 0415b

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogicky k postupu z přípravy 25, ale s použitím sloučeniny 0313b (0,120 g, 0,18 mmol jako výchozím materiálem v dichlormethanu (7 ml) s antracenem (0,075 g, 0,42 mmol). Doba ozařováni byla 35 min. Purifikací chromatografií na silikagelu (15 g) (eluens: 10% ether v petroletheru) se získala sloučenina uvedená v názvu.

Příprava 51: Sloučenina 0314a

Do roztoku, udržovaného při asi 25 °C, sloučeniny 0202 (1,00 g, 1,70 mmol) v chloroformu (6 ml) byl přidán v jedné dávce methyl 4-(trifenylfosforanyliden)krotonát (0,645 g, 1,79 mmol). Po míchání při stejné teplotě po 5 min a potom při 60 °C po 24 h byla reakční směs částečně koncentrována ve vakuu a zředěna etherem. Roztok byl ponechán stranou krystalizovat, byl zfiltrován a koncentrován ve vakuu za vzniku oleje. Purifikací chromatografií na silikagelu (100 g), (eluens: 01% ethylacetát v petroletheru) se získala sloučenina uvedená v názvu.

Příprava 52: Sloučenina 0314b

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogicky k postupu z přípravy 16, ale s použitím sloučeniny 0314a (0,20 g, 0,3 mmol) v suchém THF (3 ml) jako výchozím materiálem v suchém THF (3 ml) a ethyl-lithiem (1,4 M v etheru) (0,9 mmol) jako reakčním činidlem. 20% ether v petroletheru byl použit jako eluens.

Příprava 53: Sloučenina 0416b

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogicky k postupu z přípravy 25, ale s použitím sloučeniny 0314b (0,104 g, 0,15 mmol) jako výchozím materiálem v dichlormethanu (7 ml) s antracenem (0,075 g, 0,42 mmol). Doba ozařování byla 35 min. Purifikací chromatografií na silikagelu (15 g) (eluens: 10% ether v petroletheru) se získala sloučenina uvedená v názvu.

Příklady 01 až 16:

Byly použity následující obecné postupy pro odebírání silylových chránících skupin a izolaci a purifikací: Do roztoku, uchovávaného při asi 5 °C, výchozího materiálu sloučeniny IV (asi 0,02 až 0,16 mmol) v suchém THF (2 až 5 ml; xml) byl přidán v jedné dávce tetrabutylamoniumfluorid trihydrát (asi 0,2 až 1,6 mmol, y g). Po míchání při stejné teplotě po 5 min a potom při 60 °C po 1 h byla reakční směs rozdělena mezi ethylacetát a 5% roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla oddělena, promyta nasyceným roztokem chloridu sodného, sušena nad bezvodým síranem hořečnatým a koncentrována ve vakuu za vzniku oleje. Purifikací chromatografií na silikagelu (15 g) (eluens: ethylacetát) se získala sloučenina uvedená v názvu.

Příklad 01: 1 (S),3(R),25-Trihydroxy-20(S)-9,10-seko-cholesta-5(Z),7(E), 10( 19),23 (E)— tetraen (sloučenina 0101)

Výchozí materiál: Sloučenina 0401b (0,063 g, 0,098 mmol); x = 5; Y = 0,308, δ 0,56 (3 H, s), 0,82 (3 H, d), 1,2 až 2,1 (18 H, m), 1,31 (6 H, s), 2,31 (1 H, m), 5,57 (2 H, m).

-24CZ 290933 B6

Příklad 02: l(S),3(R),25-Trihydroxy-20(S)-9.10-seko-cholesta-5(Z),7(E), 10(19),23(Z)tetraen (sloučenina 0102)

Výchozí materiál: Sloučenina 0402b (0.024 g. 0,037 mmol); x = 5; y = 132, 6 0,56 (3 H, s), 0,86 (3 H, d) 1,1 až 1,2 (17 H, m), 1,37 (6 H, s). 2,18 (1 H, m), 2,6 (1 H, m), 5,28 (1 H, m), 5,51 (1 H,d,J 12).

Příklad 03: 26,27-Dimethyl-l(S)-3(R).25-Trihydroxy-20(S)-9,10-seko-cholesta-5(Z),7(E),10(19), 23(E)-tetraen (sloučenina 0103)

Výchozí materiál: Sloučenina 0403b (0.108 g. 0,16 mmol); x = 5; y = 0,51, δ 0,57 (3 H, s), 0,83 (3 H, d), 0,86 (6 H, t), 1,15 až 2,1 (22 H. m), 2.34 (1 H, m), 5,36 (1 H, d), 5,55 (1 H, m).

Příklad 04: 26,27-Dimethyl-l(S),3(R).25-Trihydroxy-20(S)-9,10-seko-cholesta-5(Z),7(E),10(19), 23(Z)-tetraen (sloučenina 0104)

Výchozí materiál: Sloučenina 0404b (0.36 g, 0,054 mmol); x = 5; y = 0,17, δ 0,56 (3 H, s), 0,86 (3 H, d), 0,9 (6 H, t), 1,2 až 2,1 (21 H. m), 2.18 (1 H. m), 2,6 (1 H, m), 5,26 (1 h, d, J 12), 5,4 (1 H, m).

Příklad 05: 1 (S),3 (R)-Dihydroxy-20( S)—(5 '-hydroxy-5 '-ethyl-3 '(E)-hepten-1 '-y 1>—9,10seko-pregna-5(Z).7(E),10(19)-trien (sloučenina 0105)

Výchozí materiál: Sloučenina 0405b (0.048 g. 0,007 mmol); x = 4; y = 0,10, δ 0,54 (3 H, s), 0,85 (6 H, t, J = 7,5), 0,85 (3 H, d, J = 6), 1,15 až 2,25 (21 H, m), 1,51 (2 H, q, J 7,5), 1,52 (2 H, q, J 7,5), 5,38 (1 H, d, J 16), 5,57 (1 H, dt, J 7 16).

Příklad 06: 1 (S),3(R)-Dihydroxy-20(S)-(6'-hydroxy-6'-methyl-4'(E)-hepten-l '-yl)-9,10seko-pregna-5(Z),7(E),10(19)-trien (sloučenina 0106)

Výchozí materiál: Sloučenina 0406b (0,043 g, 0,06 mmol); x = 3; y = 0,21. δ 0,54 (3 H, s), 0,83 (3 H, d), 1,05 až 2,1 (23 H, m), 1,3 (6 H, s), 5,6 (2 H, m).

Příklad 07: 1 (S),3 (R)-Dihydroxy-20(S)-(6'-hydroxy-6'-methyl-4'(Z)-hepten-l -yl)-9,10seko-pregna-5(Z),7(E),10(19)-trien (sloučenina 0107)

Výchozí materiál: Sloučenina 0407b (0,026 g, 0,04 mmol); x = 3; y = 0,13, δ 0,54 (3 H, s), 0,03 (3 H, d), 1,05 až 2,1 (21 H, m), 1,36 (6 H, s), 2,3 (2 H, m), 5,3 (1 H, dt, J 7 12), 5,47 (1 H, bd, J 12).

Příklad 08: 1 (S),3(R),22(S),25-Tetrahydroxy-20(R)-9,10-seko-cholesta-5(Z),7(E)-l 0( 19),23(E)-tetraen (sloučenina 0108)

Výchozí materiál: Sloučenina 0408b (0,069 g. 0,09 mmol); x = 3; y = 0,25. δ 0,57 (3 H, s), 0,82 (3 H, d, J 6,5), 1,2 až 2,1 (18 H, m), 1,33 (6 H, s), 4,42 (1 H, m), 5,67 (1 H, dd, J 5 16), 5,81 (1 H, dd, J 1 16).

-25CZ 290933 B6

Příklad 09: 1 (S),3(R),22(R),25-Tetrahydroxy-20(R)-9,10-seko-cholesta-5(Z),7(E)-l 0(19),23(E)-tetraen (sloučenina 0109)

Výchozí materiál: Sloučenina 0409b (0,039 g, 0.05 mmol); x = 3, y = 0,10. δ 0,58 (3 H, s), 0,85 (3 H, d, J 6,8), 1,2 až 2,1 (18 H, m), 1,35 (6 H, s), 4,36 (1 H, t, J 4,5), 5,74 (1 H, dd, 5,5 16), 5,87 (1 H, d, J 16).

Příklad 10: 22(S)-Ethoxy-1 (S),3(R)-25-trihydroxy~20(R)-9,10-seko-cholesta-5(Z),7(E), 10(19),23 (E)-tetraen (sloučenina 0110)

Výchozí materiál: Sloučenina 0410b (0,040 g, 0,058 mmol); x = 3; y = 0,07. δ 0,54 (3 H, s), 0,86 (3 H, d, J 7), 1,1 až 2,1 (17 H, m), 1,17 (3 H, t, J 7), 1,34 (6 H, s), 3,25 (1 H, m), 3,48 (1 H, m), 3.76 (1 H, dd, J 3 7), 5,58 (1 H, dd, J 7 16), 5,74 (1 H, d, J 16).

Příklad 11: l(S),3(R)-Dihydroxy-20(R)-(r(R),-5'-dihydroxy-5'-ethyl-3'(E)-hepten-l'-yl)-

9,10-seko-pregna-5(Z),7(E),10(19)-trien (sloučenina 0111)

Výchozí materiál: Sloučenina 0411b (0,015 g, 0,018 mmol); x = 2; y = 0,05.

Příklad 12: 1 (S),3(Rý-Dihydroxy-20(R)-( 1 '-(R)-methoxy-5'-hydroxy-5'-ethyl-3'(E)-heptenl'-yl)-9,10-seko-pregna-5(Z),7(E),10(19)-trien (sloučenina 0112)

Výchozí materiál: Sloučenina 0412b (0,015 g, 0,021 mmol); x = 2; y = 0,05.

Příklad 13: 1 (S),3(R)-Dihydroxy-20(S)-(7'-hydroxy-7'-methyl-5'(E)-okten-l '-yl)-9,10seko-pregna-5(Z),7(E),10(l)-trien (sloučenina 0113)

Výchozí materiál: Sloučenina 0413b (0,034 g, 0,05 mmol); x = 3; y = 0,21. δ 0,54 (3 H, s), 0,83 (3 H, d), 1,05 až 2,1 (25 H, m), 1,3 (6 H, s), 5,6 (2 H, m).

Příklad 14: l(S),3(R)-Dihydroxy-20(S)-(4'-hydroxy-4'-cyklopropyl-2'(E)-buten-l'-yl)-

9,10-seko-pregna-5(Z),7(E),10(19)-trien (sloučenina 0114)

Výchozí materiál: Sloučenina 0414b (0,035 g, 0,053 mmol); x = 3; y = 0,15. δ 0,22 (1 H, m), 0,32 (1 H, m), 0,5 (2 H, m), 0,56 (3 H, s), 0,83 (3 H, d), 0,98 (1 H, m), 2,34 (1 H, m), 3,46 (1 H, m), 5,52 (1 H, dd), 5,62 (1 H, dt).

Příklad 15: l(S),3(R)-Dihydroxy-20(S)-(5'-hydroxy-5'-ethyl-2'(E)-hepten-r-yl)-9,10seko-pregna-5(Z),7(E),10(19)-trien (sloučenina 0115)

Výchozí materiál: Sloučenina 0415b (0,050 g, 0,073 mmol); x = 3, y = 0,18.

Příklad 16: l(S),3(R)-Dihydroxy-20(S)-(6'-hydroxy-6'-ethylokta-2'(E),4'(E)-dien-l'-yl}-

9,10-seko-pregna-5(Z),7(E),10(19)-trien (sloučenina 0116)

Výchozí materiál: Sloučenina 0416b (0,052 g, 0,075 mmol); x = 3, y = 0,20.

-26CZ 290933 B6

Příklad 17: Kapsle obsahující sloučeninu 0110

Sloučenina 0110 byla rozpuštěna v arašídovém oleji na konečnou koncentraci 1 pg sloučeniny 5 0110/ml oleje. Deset hmotnostních dílů želatiny, 5 hmotnostních dílů glycerinu, 0,08 hmotnostních dílů sorbatu draselného a 14 hmotnostních dílů destilované vody bylo smíseno dohromady za zahřívání a zformováno na měkké želatinové kapsle. Tyto potom byly plněny každá 100 μΐ sloučeniny 0110 v olejovém roztoku, a každá taková kapsle obsahovala 0,1 pg sloučeniny 0110.

Příklad 18: Dermatologický krém obsahující sloučeninu 0110

V 1 g mandlového oleje bylo rozpuštěno 0,05 mg sloučeniny 0110. Do tohoto roztoku bylo přidáno 40 g minerálního oleje a 20 g samoemulgačního včelího vosku. Směs byla zahřívána do 15 zkapalnění. Po přidání 40 ml horké vody byla směs dobře promísena. Získaný krém obsahuje přibližně 0,5 pg sloučeniny 0110 na gram krému.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY kde

X je vodík nebo hydroxyskupina;

30 R¹ a R² je methyl nebo ethyl;

Q je methylen, ethylen, tri- nebo tetramethylen a může být popřípadě substituován oxyskupinou -OR³, kde R³ je vodík, methyl nebo ethyl;

35 Y je buď jednoduchá vazba, nebo Ci-C₂hydroxykarbylen, kde pod označením hydrokarbylen se rozumí dvojmocný zbytek získaný po odebrání 2 atomů vodíku zodpovídajícího uhlovodíku, který může být nasycený nebo v případě C₂hydrokarbylenu také nenasycený;

-27CZ 290933 B6 přičemž jeden nebo více atomů uhlíku obsažených v R¹, R², a/nebo Y může být popřípadě substituováno jedním nebo více atomy fluoru, nebo hydroxylovou skupinou, včetně jeho diastereomerů a jejich směsí.
2. Analog vitaminu D podle nároku 1, vzorce I kde X je hydroxyskupina a X je jednoduchá vazba.
3. Analog vitaminu D podle nároků 1 až 2, vzorce I kde R¹ a R² jsou stejné a jsou methyl nebo ío ethyl.
4. Diastereoizomer analogu vitaminu D podle některého z nároků 1 až 2, v čisté formě; nebo směs takových diastereoizomerů, přičemž sloučenina je v krystalické formě buď jako taková, nebo jako solvát, jako hydrát, neboje v amorfní formě.
5. Analog vitaminu D podle nároku 1, kterým je

a) l(S),3(R),25-Trihydroxy-20(S)-9,10-seko-cholesta-5(Z),7(E),10(19),23(E)-tetraen

20 b) 1 (S),3(R)-Dihydroxy-20(S)-(6'-hydroxy-6'-methyl-4'(E)-hepten-l '-yl)-9,10-sekopregna-5(Z),7(E), 10( 19)-trien

c) 1 (S),3(R),22(S),25-Tetrahydroxy-20(R)-9,10-seko-cholesta-5(Z),7(E), 10( 19),23(E>tetraen

d) 22(S)-Ethoxy-1 (S),3(R),25-trihydroxy-20(R)-9,10-seko-cholesta-5(Z),7(E), 10( 19),23(E)-tetraen

e) l(S),3(R)-Dihydroxy-20(R)-(l'(R)-methoxy-5'-hydroxy-5'-ethyl-3'(E)-hepten-r-yl)-

30 9,10-seko-pregna-5(Z),7(E), 10( 19)-trien.
6. Způsob přípravy analogu vitaminu D vzorce I podle nároku 1, vyznačující se tím, že aldehyd, kterým je l(S),3(R)-bis(terc.butyldimethylsilyloxy)-20(S)-formylmethyl-

9,10-seko-pregna-5(E),7(E), 10( 19)-trien nebo 1 (S),3(R)-bis-terc.butyldimethylsilyloxy)-

35 20(S)-(2-formylethyl)-9,10-sekopregna-5(E),7(E),10(19)-trien nebo l(S),3(R)-bis-terc.butyldimethylsilyloxy)-20(R)-(3-formylpropyl)-9,10-sekopregna-5(E),7(E), 10( 19)-trien nebo odpovídající derivát jednoho z nich, v nichž methyl vázaný na C-20 nese methoxy-, ethoxynebo terč .butyldimethylsilyloxysubstituent,

40 se nechá reagovat buď sWittigovým činidlem obsahujícím karbonylovou skupinu jako je methyl(trifenylfosforanyliden)acetát a získaný produkt se nechá reagovat s organolithiem nebo Grignardovým činidlem nebo redukčním činidlem, nebo s lithio-derivátem popřípadě hydroxylovaného alkylfenylsulfonu s následnou redukční eliminací, například amalgamem sodným, za vzniku produktu, který se podrobí v libovolném pořadí izomerizaci UV-světlem za přítom50 nosti tripletového senzibilizátoru, například antracenu, a odebrání silylových skupin například působením tetrabutylamoniumfluoridu.
7. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje účinné množství jednoho nebo více analogů vitaminu D podle nároků 1 až 5, společně s farmaceuticky přijatel-

55 nými netoxickými nosiči a/nebo pomocnými prostředky.

-28CZ 290933 B6
8. Farmaceutický prostředek podle nároku 7, vyznačující se tím, že v jednotkové dávkové formě obsahuje od 10'⁷ do 10'¹ % hmotnostního, vztaženo na dávkovou jednotku, analogu vitaminu D vzorce I.
9. Použitím analogu vitaminu D podle některého z nároků 1 až 5 pro výrobu léčiva pro léčení nebo prevenci chorob charakterizovaných abnormální buněčnou diferenciací a/nebo buněčnou proliferaci, jako je například psoriáza a jiné poruchy keratinizace, dermatózy spojené s HIV, hojení ran, rakovina, včetně rakoviny kůže, a poruchy nebo nerovnováha v imunitním systému, jako je reakce hostitel versus štěp a reakce štěp versus hostitel a transplantační odmítnutí, a autoimunitní choroby, jako je diskoidní a systémový lupus erythematodes, diabetes mellitus a chronické dermatózy autoimunního typu, například sklerodermie a prostý pemfigus, a zánětlivé nemoci, jako je revmatická artritida a astma, jakož i řada jiných chorobných stavů, včetně hyperparatyreoidismu, zejména sekundárního hyperparatyreoisidmu spojeného s poškozením ledvin, kognitivní poruchou nebo senilní demencí-Alzheimerova nemoc a další neurodegenerativní nemoci, hypertenze, akné, holohlavost, kožní atrofie, například steroidy indukovaná kožní atrofie, stárnutí kůže, včetně fotostámutí, a také pro podporu osteogeneze a léčení/prevence osteoporózy a osteomalacie.