CZ2003757A3 - Imunogenní prostředek - Google Patents
Imunogenní prostředek Download PDFInfo
- Publication number
- CZ2003757A3 CZ2003757A3 CZ2003757A CZ2003757A CZ2003757A3 CZ 2003757 A3 CZ2003757 A3 CZ 2003757A3 CZ 2003757 A CZ2003757 A CZ 2003757A CZ 2003757 A CZ2003757 A CZ 2003757A CZ 2003757 A3 CZ2003757 A3 CZ 2003757A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- proteins
- vaccine
- cbpx
- present
- protein
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims description 31
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 title claims description 22
- 238000009472 formulation Methods 0.000 title 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 claims abstract description 77
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims abstract description 15
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 98
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 93
- 101710099976 Photosystem I P700 chlorophyll a apoprotein A1 Proteins 0.000 claims description 16
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 16
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 claims description 12
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 claims description 12
- 101100420868 Anuroctonus phaiodactylus phtx gene Proteins 0.000 claims description 11
- 230000028993 immune response Effects 0.000 claims description 11
- 101710164918 Choline-binding protein Proteins 0.000 claims description 10
- 101710183389 Pneumolysin Proteins 0.000 claims description 10
- 206010033078 Otitis media Diseases 0.000 claims description 9
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 claims description 8
- 229920002704 polyhistidine Polymers 0.000 claims description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 4
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 4
- 230000003053 immunization Effects 0.000 claims description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 3
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims description 2
- 206010061372 Streptococcal infection Diseases 0.000 claims description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 abstract description 37
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 abstract description 37
- 239000000427 antigen Substances 0.000 abstract description 32
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 abstract description 31
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 abstract description 31
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 abstract description 31
- 241000193998 Streptococcus pneumoniae Species 0.000 abstract description 6
- 229940031000 streptococcus pneumoniae Drugs 0.000 abstract description 6
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 abstract description 4
- 101100453077 Botryococcus braunii HDR gene Proteins 0.000 abstract description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 abstract 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 85
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 19
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 16
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 14
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 13
- OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N choline Chemical compound C[N+](C)(C)CCO OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 229960001231 choline Drugs 0.000 description 10
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 10
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 9
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 7
- 230000004044 response Effects 0.000 description 7
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 6
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 6
- 108091016312 choline binding proteins Proteins 0.000 description 6
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 6
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 6
- 230000004224 protection Effects 0.000 description 6
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 6
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 5
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 5
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 5
- 241000606768 Haemophilus influenzae Species 0.000 description 5
- 229940001442 combination vaccine Drugs 0.000 description 5
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 5
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 5
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 5
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 4
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 4
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 4
- 208000035109 Pneumococcal Infections Diseases 0.000 description 4
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 230000005875 antibody response Effects 0.000 description 4
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 4
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 229940035032 monophosphoryl lipid a Drugs 0.000 description 4
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 4
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 4
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 4
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 4
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 4
- 108010077805 Bacterial Proteins Proteins 0.000 description 3
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 3
- 102100037840 Dehydrogenase/reductase SDR family member 2, mitochondrial Human genes 0.000 description 3
- 241000991587 Enterovirus C Species 0.000 description 3
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 3
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 3
- 241000588650 Neisseria meningitidis Species 0.000 description 3
- 201000005702 Pertussis Diseases 0.000 description 3
- 101710188053 Protein D Proteins 0.000 description 3
- 101710132893 Resolvase Proteins 0.000 description 3
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 3
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 3
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 3
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 3
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 3
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 3
- 108700039582 histidine triad Proteins 0.000 description 3
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 3
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 3
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 3
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 3
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 3
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 3
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 3
- 239000007764 o/w emulsion Substances 0.000 description 3
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 3
- 108010021711 pertactin Proteins 0.000 description 3
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 3
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 3
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 3
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 2
- 208000031729 Bacteremia Diseases 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- 201000009906 Meningitis Diseases 0.000 description 2
- 241000588655 Moraxella catarrhalis Species 0.000 description 2
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 2
- 102000005348 Neuraminidase Human genes 0.000 description 2
- 108010006232 Neuraminidase Proteins 0.000 description 2
- 208000009362 Pneumococcal Pneumonia Diseases 0.000 description 2
- 206010035728 Pneumonia pneumococcal Diseases 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 2
- 108091081062 Repeated sequence (DNA) Proteins 0.000 description 2
- 108010006785 Taq Polymerase Proteins 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N adenosine Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 2
- 229940037003 alum Drugs 0.000 description 2
- AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N alumane Chemical class [AlH3] AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K aluminium phosphate Chemical compound O1[Al]2OP1(=O)O2 ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 2
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N d-alpha-tocopherol Natural products OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 229960003983 diphtheria toxoid Drugs 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- 229940047650 haemophilus influenzae Drugs 0.000 description 2
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 2
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 229940124733 pneumococcal vaccine Drugs 0.000 description 2
- 229960001973 pneumococcal vaccines Drugs 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 230000001915 proofreading effect Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 2
- 210000000434 stratum corneum Anatomy 0.000 description 2
- 208000022218 streptococcal pneumonia Diseases 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- 229960000814 tetanus toxoid Drugs 0.000 description 2
- 229960001295 tocopherol Drugs 0.000 description 2
- 229930003799 tocopherol Natural products 0.000 description 2
- 235000010384 tocopherol Nutrition 0.000 description 2
- 239000011732 tocopherol Substances 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N α-tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N 0.000 description 2
- NJNWCIAPVGRBHO-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxyethyl-dimethyl-[(oxo-$l^{5}-phosphanylidyne)methyl]azanium Chemical group OCC[N+](C)(C)C#P=O NJNWCIAPVGRBHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010068327 4-hydroxyphenylpyruvate dioxygenase Proteins 0.000 description 1
- 208000008190 Agammaglobulinemia Diseases 0.000 description 1
- 101710105077 Agglutinin-1 Proteins 0.000 description 1
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 241000710929 Alphavirus Species 0.000 description 1
- 201000001178 Bacterial Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 108010071134 CRM197 (non-toxic variant of diphtheria toxin) Proteins 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000178270 Canarypox virus Species 0.000 description 1
- 241000282461 Canis lupus Species 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- 201000006082 Chickenpox Diseases 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 238000011537 Coomassie blue staining Methods 0.000 description 1
- 101150036540 Copb1 gene Proteins 0.000 description 1
- 230000006820 DNA synthesis Effects 0.000 description 1
- 241000702421 Dependoparvovirus Species 0.000 description 1
- 241000194033 Enterococcus Species 0.000 description 1
- 241000194032 Enterococcus faecalis Species 0.000 description 1
- 241000194031 Enterococcus faecium Species 0.000 description 1
- 241000709661 Enterovirus Species 0.000 description 1
- 101000874355 Escherichia coli (strain K12) Outer membrane protein assembly factor BamA Proteins 0.000 description 1
- 241000701959 Escherichia virus Lambda Species 0.000 description 1
- 108060002716 Exonuclease Proteins 0.000 description 1
- 101000597577 Gluconacetobacter diazotrophicus (strain ATCC 49037 / DSM 5601 / CCUG 37298 / CIP 103539 / LMG 7603 / PAl5) Outer membrane protein Proteins 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 241000606790 Haemophilus Species 0.000 description 1
- 101100406392 Haemophilus influenzae (strain ATCC 51907 / DSM 11121 / KW20 / Rd) omp26 gene Proteins 0.000 description 1
- 101710133291 Hemagglutinin-neuraminidase Proteins 0.000 description 1
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 description 1
- 208000017604 Hodgkin disease Diseases 0.000 description 1
- 101000873843 Homo sapiens Sorting and assembly machinery component 50 homolog Proteins 0.000 description 1
- 241000701085 Human alphaherpesvirus 3 Species 0.000 description 1
- 206010020983 Hypogammaglobulinaemia Diseases 0.000 description 1
- -1 IL-β Proteins 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 description 1
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 1
- 108010002616 Interleukin-5 Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 241000186781 Listeria Species 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000005505 Measles Diseases 0.000 description 1
- 108010090054 Membrane Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000012750 Membrane Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 208000005647 Mumps Diseases 0.000 description 1
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 1
- 241000588653 Neisseria Species 0.000 description 1
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 101710116435 Outer membrane protein Proteins 0.000 description 1
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 1
- 241000709664 Picornaviridae Species 0.000 description 1
- 102100035181 Plastin-1 Human genes 0.000 description 1
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 1
- 241000607768 Shigella Species 0.000 description 1
- 241000710960 Sindbis virus Species 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102100035853 Sorting and assembly machinery component 50 homolog Human genes 0.000 description 1
- 241000191940 Staphylococcus Species 0.000 description 1
- 241000191963 Staphylococcus epidermidis Species 0.000 description 1
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 1
- 241000193996 Streptococcus pyogenes Species 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 1
- 241000906446 Theraps Species 0.000 description 1
- 108010031133 Transferrin-Binding Protein A Proteins 0.000 description 1
- 241000700618 Vaccinia virus Species 0.000 description 1
- 206010046980 Varicella Diseases 0.000 description 1
- 241000710959 Venezuelan equine encephalitis virus Species 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710151579 Zinc metalloproteinase Proteins 0.000 description 1
- FHICGHSMIPIAPL-HDYAAECPSA-N [2-[3-[6-[3-[(5R,6aS,6bR,12aR)-10-[6-[2-[2-[4,5-dihydroxy-3-(3,4,5-trihydroxyoxan-2-yl)oxyoxan-2-yl]ethoxy]ethyl]-3,4,5-trihydroxyoxan-2-yl]oxy-5-hydroxy-2,2,6a,6b,9,9,12a-heptamethyl-1,3,4,5,6,6a,7,8,8a,10,11,12,13,14b-tetradecahydropicene-4a-carbonyl]peroxypropyl]-5-[[5-[8-[3,5-dihydroxy-4-(3,4,5-trihydroxyoxan-2-yl)oxyoxan-2-yl]octoxy]-3,4-dihydroxy-6-methyloxan-2-yl]methoxy]-3,4-dihydroxyoxan-2-yl]propoxymethyl]-5-hydroxy-3-[(6S)-6-hydroxy-2,6-dimethylocta-2,7-dienoyl]oxy-6-methyloxan-4-yl] (2E,6S)-6-hydroxy-2-(hydroxymethyl)-6-methylocta-2,7-dienoate Chemical compound C=C[C@@](C)(O)CCC=C(C)C(=O)OC1C(OC(=O)C(\CO)=C\CC[C@](C)(O)C=C)C(O)C(C)OC1COCCCC1C(O)C(O)C(OCC2C(C(O)C(OCCCCCCCCC3C(C(OC4C(C(O)C(O)CO4)O)C(O)CO3)O)C(C)O2)O)C(CCCOOC(=O)C23C(CC(C)(C)CC2)C=2[C@@]([C@]4(C)CCC5C(C)(C)C(OC6C(C(O)C(O)C(CCOCCC7C(C(O)C(O)CO7)OC7C(C(O)C(O)CO7)O)O6)O)CC[C@]5(C)C4CC=2)(C)C[C@H]3O)O1 FHICGHSMIPIAPL-HDYAAECPSA-N 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 235000021028 berry Nutrition 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000006037 cell lysis Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 210000004081 cilia Anatomy 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 230000005757 colony formation Effects 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000001461 cytolytic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 229940009976 deoxycholate Drugs 0.000 description 1
- KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N deoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 230000000249 desinfective effect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000001784 detoxification Methods 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 206010013023 diphtheria Diseases 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 1
- 230000006862 enzymatic digestion Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009088 enzymatic function Effects 0.000 description 1
- 238000001976 enzyme digestion Methods 0.000 description 1
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000012869 ethanol precipitation Methods 0.000 description 1
- 102000013165 exonuclease Human genes 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000002949 hemolytic effect Effects 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 208000033447 immunodeficiency 67 Diseases 0.000 description 1
- 230000006054 immunological memory Effects 0.000 description 1
- 230000002480 immunoprotective effect Effects 0.000 description 1
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 208000022760 infectious otitis media Diseases 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 230000029226 lipidation Effects 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229940031346 monovalent vaccine Drugs 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 208000010805 mumps infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 210000004897 n-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- MHWLWQUZZRMNGJ-UHFFFAOYSA-N nalidixic acid Chemical compound C1=C(C)N=C2N(CC)C=C(C(O)=O)C(=O)C2=C1 MHWLWQUZZRMNGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000210 nalidixic acid Drugs 0.000 description 1
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 1
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 1
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 1
- 150000003833 nucleoside derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 206010033675 panniculitis Diseases 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 108010049148 plastin Proteins 0.000 description 1
- 229920002627 poly(phosphazenes) Polymers 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 229940031937 polysaccharide vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 1
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 1
- 230000000601 reactogenic effect Effects 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 201000005404 rubella Diseases 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 239000012723 sample buffer Substances 0.000 description 1
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 1
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 208000007056 sickle cell anemia Diseases 0.000 description 1
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 238000010911 splenectomy Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000000021 stimulant Substances 0.000 description 1
- 210000004304 subcutaneous tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 1
- STCOOQWBFONSKY-UHFFFAOYSA-N tributyl phosphate Chemical compound CCCCOP(=O)(OCCCC)OCCCC STCOOQWBFONSKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001005 tuberculin Drugs 0.000 description 1
- 125000001493 tyrosinyl group Chemical class [H]OC1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 1
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 description 1
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 1
- 230000001018 virulence Effects 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/09—Lactobacillales, e.g. aerococcus, enterococcus, lactobacillus, lactococcus, streptococcus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/09—Lactobacillales, e.g. aerococcus, enterococcus, lactobacillus, lactococcus, streptococcus
- A61K39/092—Streptococcus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/0208—Specific bacteria not otherwise provided for
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/095—Neisseria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/102—Pasteurellales, e.g. Actinobacillus, Pasteurella; Haemophilus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/125—Picornaviridae, e.g. calicivirus
- A61K39/13—Poliovirus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/29—Hepatitis virus
- A61K39/292—Serum hepatitis virus, hepatitis B virus, e.g. Australia antigen
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
- A61P27/16—Otologicals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55572—Lipopolysaccharides; Lipid A; Monophosphoryl lipid A
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/60—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characteristics by the carrier linked to the antigen
- A61K2039/6031—Proteins
- A61K2039/6068—Other bacterial proteins, e.g. OMP
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Immunology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Virology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Oncology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
Oblast techniky
Předkládaný vynález se týká kombinace 2 nebo více proteinů S. pneumoniae, jejich výroby a jejich použití v medicíně jako vakcíny. Taková kombinace je zejména užitečná pro ochranu dětí a starých lidí' před streptokokovou infekcí.
Dosavadní stav techniky
Streptococcus pneumoniae je Gram-pozitivní bakterie odpovědná za významnou morbiditu a mortalitu (zejména u mladých a starých jedinců), způsobující invazivní onemocnění jako je pneumonie, bakteremie a meningitida, a onemocnění asociovaná s kolonizací, jako je akutní otitis media. Výskyt pneumokokové pneumonie v US pro jedince starší 60 let je 3 až 8 na 100000. Ve 20% případech tato infekce způsobuje bakteriemii a další manifestace, jako je meningitis, s mortalitou blížící se 30%, i při antibiotické terapií.
Pneumococcus j-e enkapsulovaný chemicky vázaným polysacharidem, který určuje serotypovou specificitu. Existuje 90 známých serotypů pneumokoků a kapsula je pro pneumokoky základní determinantou virulence, protože kapsule nejen chrání vnitřní povrch bakterie před komplementem, ale je též slabě imunogenní. Polysacharidy jsou T-independentní antigeny a nemohou být zpracovány nebo prezentovány na'MHC molekulách, aby mohly interagovat s T-lymfocyty. Nicméně, mohou stimulovat imunitní systém alternativním mechanismem, který zahrnuje zesítění povrchových receptorů na B-lymfocytech.
• ·
V několika experimentech bylo prokázáno, že ochrana proti invazivnímu pneumokokovému onemocnění nej silněji koreluje s protilátkami specifickými pro kapsulu a že ochrana je specifická pro serotyp.
Streptococcus pneumoniae je nej častější příčinou invazivních bakteriálních onemocnění a otitis media u kojenců a mladších dětí. Obdobně, u starých jedinců dochází ke špatné odpovědi na pneumokokové vakcíny [Roghmann et al., (1987), J. Gerontol. 42:265-270], což je důvodem zvýšené incidence bakteriální pneumonie v této populaci [Verghese a Berk, (1983) Medicine (Baltimore) 62:271-285].
23-valentní nekonjugovaná nekonjugovaná pneumokokové vakcína vykazovala.různou klinickou účinnost, od 0% do 81% (Fedson et al. (1994) Arch Intern Med. 154: 2531-2535). Zdálo se, že účinnost souvisí s rizikovou skupinou, která je imunizována, jako jsou staří pacienti, pacienti s Hodginovou nemocí, po splenektomii, se srpkovitou anemií a agammaglobulinemií (Fine et al. (1994) Arch Intern Med. 154:2666-2677), a také s manifestací onemocnění. 23-valentní vakcína nevykazuje ochranu před pneumokokovou pneumonií (u některých rizikových jedinců, jako jsou staří lidé) a před otitis media.
Strategie, které byly navrženy pro překonání tohoto chybění imunogenicity u dětí, včetně navázání polysacharidů na velké imunogenní proteiny, které napomáhají v indukci T-lymfocytů a které indukují imunologickou paměť k polysacharidovému antigenu, se kterým jsou konjugované.
Nicméně, stále trvá potřeba vylepšené pneumokokové vakcíny, zejména takové, která by byla více účinná'v prevenci nebo • · · · • ·
zmírnění pneumokokových onemocnění (zejména pneumonie) u starých jedinců a dětí.
Předkládaný vynález poskytuje takovou zlepšenou vakcínu.
Podstata vynálezu
V jednom aspektu poskytuje předkládaný vynález imhnogenní prostředek obsahující alespoň 2 proteiny S. pneumoniae vybrané ze skupiny zahrnující rodinu polyhistidinové triády (PhtX), rodinu vazebného proteinu pro cholin (CbpX), CbpX zkrácené formy, LytX rodinu, LytX zkrácené formy, chimérické proteiny CbpX zkrácená forma-LytX zkrácená forma, pneumolysin (Ply), PspA, PsaA, Spl28, SplOl, Spl30, Spl25 a Spl33. Ve výhodném provedení je jeden protein z rodiny poly-histidinové triády (PhtX). V jiném výhodném provedení je jeden z proteinů z rodiny vazebného proteinu pro cholin (CbpX), nebo zkrácená forma bpx, nebo chimérický protein.CbpX. zkrácená forma-LytX zkrácená forma.
V souvisejícím aspektu předkládaný vynález poskytuje vakcínu pro léčbu nebo zmírnění otitis media u dětí nebo pneumonie u starých jedinců. Volitelně vakcína dále obsahuje adjuvans, což je výhodně induktor TH1 reakce.
V ještě dalším příbuzném aspektu vynález poskytuje způsob pro výrobu vakcíny podle předkládaného vynálezu, ve kterém jsou selektovány a izolovány 2 různé proteiny S. pneumoniae, které jsou smíseny s farmaceuticky přijatelným nosičem.
Popis předkládaného vynálezu
9999
Předkládaný vynález poskytuje vylepšenou vakcínu pro prevenci nebo zmírnění pneumokokové infekce u starých jedinců (např. pneumonie) a/nebo u dětí (např. otitis media), kde uvedená vakcína je na bázi pneumokokových proteinů. V jednom výhodném provedení je vakcína vhodná pro prevenci nebo zmírnění pneumokokové infekce starých jedinců. Protože většina dospělých se již setkala se Streptococcus pneumoniae, je vakcína podle předkládaného vynálezu určena pro dosycení existující imunitní reakce u dospělých a starých jedinců na protektivní úroveň, pomocí podání alespoň 2 pneumokokových proteinů identifikovaných v předkládaném vynálezu.
Pneumokokové proteiny jsou podány za absence polysacharidů S. pneumoniae.
V předkládaném vynálezu je pacient považován za starého jedince, pokud je mu více než 55 let, obvykle více než 60 let, typicky více než 65 let. V jednom provedení tedy vynález poskytuje vakcinační prostředek obsahující pneumokokové proteiny pro prevenci pneumonie u starých jedinců.
V jiném provedení předkládaný vynález poskytuje vakcinační prostředek, vhodný pro použití u dětí (obvykle ve věku 0 až 2 let) obsahující dva nebo více pneumokokové proteiny identifikované v předkládaném vynálezu.
Pneumokokové proteiny.podle předkládaného vynálezu
Proteiny. Streptococcus pneumoniae podle předkládaného vynálezu jsou buď proteiny přítomné na povrchu, alespoň během části životního cyklu pneumokoka, nebo jsou to proteiny, které jsou secernovány nebo uvolňovány pneumokokem. Výhodně je kombinace proteinů podle předkládaného vynálezu vybrána ze 2 různých kategorií, jako jsou proteiny mající motiv signální • ·· · sekvence typu II LXXC (kde X je jakákoliv aminokyselina, např., z rodiny polyhistidinové triády (PhtX).), proteiny vážící cholin (CbpX), proteiny mající motiv signální sekvence typu I (např., SplOl), proteiny mající LPXTG motiv (kde X je jakákoliv aminokyselina, např., Spl28, Spl30), toxiny (např. Ply), atd. Výhodnými příklady v těchto kategoriích (nebo motivech) jsou následující proteiny nebo jejich imunologicky funkční ekvivalenty.
Imunogenní prostředek podle předkládaného vynálezu obsahuje alespoň 2 proteiny vybrané ze skupiny zahrnující rodinu polyhistidinové triády (PhtX), rodinu vazebných proteinů pro cholin (CbpX), CbpX zkrácené formy, LytX rodinu, LytX zkrácené formy, chimérické proteiny CbpX zkrácená forma-LytX zkrácená forma (nebo fúzní proteiny), pneumolysin (Ply), PspA, PsaA, Spl28, SplOl, Spl30, Spl25 a Spl33. Nicméně, když je CbpX PspC, pak není druhý protein PspA nebo PsaA. Výhodně imunogenní prostředek obsahuje 2 nebo více proteinů vybraných ze skupiny zahrnující rodinu Póly Histidinové Triády (PhtX), rodinu vazebných proteinů pro cholin (CbpX), CbpX zkrácené formy, LytX rodinu, LytX zkrácené formy, chimérické proteiny (nebo fúze) CbpX zkrácená forma-LytX zkrácená forma, pneumolysin (Ply), PspA, PsaA a Spl28. Lépe imunogenní prostředek obsahuje 2 nebo více proteinů vybraných ze skupiny zahrnující rodinu póly histidinové triády (PhtX), rodinu vazebných proteinů pro cholin (CbpX), CbpX zkrácené formy,
LytX rodinu, LytX zkrácené formy, chimérické proteiny (nebo fůze) CbpX zkrácená forma-LytX zkrácená forma, pneumolysin (Ply) a Spl28.
. Pht (Póly Histidinová Triáda) rodina obsahuje proteiny PhtA, PlitB, PhtD a PhtE. Rodina je charakterizována lipidační sekvencí, dvě domény jsou separovány regionem bohatým na • · ···· • · · ·
prolin a několika histidinovými triádami, které se snad účastní na vazbě kovů nebo nukleosidů nebo na enzymatické aktivitě, (3-5) stočenými regiony, a konzervovaným N-koncem a heterogenním C-koncem. Tato rodina je přítomná u všech testovaných kmenů pneumokoků. Homologní proteiny byly také zjištěny v jiných Streptokokách a Neisseriích. Mezi výhodné členy rodiny patří PhtA, PhtB a PhtD. Výhodněji obsahuje rodina PhtA. nebo PhtD. Je třeba si uvědomit, že termíny Pht A, B, D a E označují proteiny mající sekvence popsané vé výše uvedených citacích, stejně jako jejich přirozené (a uměle vyrobené) variace, které mají sekvenci z alespoň 90% identickou jako uvedené proteiny. Výhodně je sekvence alespoň z 95% identická a nejlépe je alespoň z 97% identická.
S ohledem na PhtX proteiny je PhtA popsán ve WO 98/18930, a je též označován jako Sp36. Jak bylo uvedeno výše, jedná se o protein z rodiny polyhistidinové triády a obsahuje typ II signálního motivu LXXC.
PhtD je popsán ve WO 00/37105, a je též označován jako SpO36D. Jak bylo uvedeno výše, jedná se také o protein z rodiny polyhistidinové triády a obsahuje typ II signálního motivu LXXC.
PhtB je popsán ve WO 00/37105, a je též označován jako SpO36B. Jiným členem PhtB rodiny je C3-degradující polypeptid, jak je popsán ve WO 00/17370. Tento protein patří též do rodiny polyhistidinové triády a obsahuje typ II LXXC signálního motivu. Výhodný imunologicky funkční ekvivalent je protein Sp42 popsaný ve WO 98/18930. Zkrácená forma PhtB (přibližně 79k.D) je popsána ve WO 99/15675 a je též považována za člena PhtX rodiny.
·· ····
PhtE je popsán ve WO 00/30299 a je označován jako BVH-3.
Členové rodiny vazebných proteinů pro cholin (CbpX), byly původně identifikovány jako pneumokokové proteiny, které mohou být přečištěny cholinovou-afinintní chromatografií. Všechny vazebné proteiny pro cholin jsou nekovalentně navázány na fosforylcholinové skupiny kyseliny teichoové buněčné stěny a kyseliny lipoteichoové asociované s buněčnou membránou. Strukturálně obsahují několik regionů společných celé rodině, ačkoliv se celkový přesný charakter proteinů může lišit (v aminokyselinové sekvenci, délce atd.). Obecně vazebné proteiny pro cholin obsahují N- terminální region (N) , konzervované repetitivní regiony (Rl a/nebo R2), a region bohatý na prolin (F) a konzervovaný vazebný region pro cholin (C), tvořený mnoha repetitivními úseky, který tvoří přibližně jednu polovinu proteinu. Termín rodina vazebných proteinů pro cholin (CbpX) označuje'skupinu zahrnující vazebné proteiny pro cholin, jak jsou definovány ve WO 97/41151, PbcA, SpsA, PspC, CbpA, CbpD a CbpG. CbpA je popsán v WO97/41151. CbpD a CbpG jsou popsány ve WO 00/29434. PspC je popsán v WO
97/09994. PbCA je popsán v WO 98/21337. SpsA je vazbný protein pro cholin popsaný ve WO 98/39450.,Výhodně jsou vazebné proteiny pro cholin vybrané ze skupiny zahrnující CbpA, PbcA, SpsA a PspC.
Jiným výhodným provedením jsou CbpX zkrácené formy, kde CbpX je definován výše a zkrácené formy označují CbpX proteiny, kterým chybí 50% nebo více vazebného regionu pro cholin (C). Výhodně takovým proteinům chybí celý vazebný region pro cholin. Výhodněji u takových zkrácených forem chybí (i) vazebný region pro cholin a (ii) a část N-koncové poloviny proteinu, za zachování alespoň jednoho repetitivního regionu (Rl nebo R2). Ještě výhodněji obsahuje zkrácená forma 2 • 4
4444 · · ·
44 repetitivní regiony (Rl a R2). Příklady takových výhodných provedení jsou NRlxR2 a RlxR2, jak jsou popsány ve WO 99/51266 nebo WO 99/51188, ale i další vazebné proteiny pro cholin bez podobného vazebného regionu spadají do rozsahu předkládaného vynálezu.
LytX rodina jsou proteiny asociované s membránou asociované s buněčnou lýzou. N-koncová doména obsahuje vazebnou doménu pro cholin, ale LytX rodina nemá všechny vlastnosti uvedené u CbpA rodiny a tak je pro předkládaný vynález LytX rodina považována za rodinu odlišnou od CbpX rodiny. Na rozdíl od CbpX rodiny C-koncová doména obsahuje katalytickou doménu rodiny LytX proteinu. Rodina zahrnuje LytA, B a C. S.ohledem na LytX rodinu je LytA popsán v Ronda et al·, Eur J Biochem, 164:621-624 (1987). LytB je popsán ve WO 98/18930, a je též označován jako Sp46. LytC je také popsán v WO 98/18930, a je též označován jako Sp91. Výhodným členem této rodiny je LytC.
Jiným výhodným provedením jsou LytX zkrácené formy, kde LytX je definován výše a zkrácené formy označují LytX proteiny bez 50% nebo více vazebného regionu pro cholin. Výhodně takové proteiny neobsahují celý vazebný region pro cholin. Příklady takových zkrácených forem jsou uvedeny v příkladech provedení vynálezu.
Ještě dalším výhodným provedením předkládaného vynálezu jsou chimérické proteiny (nebo fúze) CbpX zkrácená forma-LytX zkrácená forma. Výhodně tyto formy obsahují NRlxR2 (nebo RlxR2) CbpX a C-koncovou část (C-térm. tj. bez vazebných domén pro cholin) LytX (např., LytCCterm nebo Sp91Cterm). Výhodněji je CbpX vybraný ze skupiny zahrnující CbpA, PbcA, SpsA a
PspC. Ještě výhodněji se jedná o CbpA. Výhodně je LytX LytC (též označovaný jako Sp91).
Jiným provedením předkládaného vynálezu je PspA nebo PsaA zkrácená forma bez vazebné domény pro cholin (C) a exprimovaná jako fúzní protein s LytX. Výhodně je LytX LytC.
Pneumolysin je multifunkční toxin s různými cytolytickými (hemolytickými) a komplement-aktivačními aktivitami (Rubins et al., Am. Respi. Cit Care Med, 153:1339-1346 (1996)). Toxin není secernován pneumokoky, ale uvolňuje se po lýze pneumokoků v důsledku působení autolysinu. Mezi jeho efekty patří, například, stimulace produkce zánětlivých cytokinů lidskými monocyty, inhibice pohybu řasinek v epitelu respiračního traktu u člověka, a snížení baktericidní aktivity a migrace neutrofilů. Nejvýznamnějším účinkem pneumolysinu je lýza erytrocytů, která zahrnuje vazbu na cholesterol. Protože se jedná, o toxin, musí být detoxifikován (tj musi být netoxický pro člověka, když je poskytnut v dávce vhodné pro ochranu) před tím, než je podán in vivo. Exprese a klonování přirozeného nebo nativního pneumolysinu je známá v oboru. Viz, například, Walker et al. (Infect Immun, 55:1184-1189 (1987)), Mitchel et al. (Biochim Biophys Acta, 1007:67-72 (1989) a Mitchell et al (NAR, 18:4010 (1990)). Detoxifikace ply může být provedena chemickými prostředky, např. pomocí formalinu nebo glutarahdehydu nebo jejich kombinací. Takové metody jsou dobře známé v oboru pro různé toxiny. Tak vynález zahrnuje deriváty pneumokokových proteinů, jako jsou například mutované proteiny. Termín mutovaný, jak je zde použit, označuje to, že molekula, na které byla provedena delece, adice nebo substituce jedné nebo více aminokyselin za použití dobře známých technik, jako je místně cílená mutagenese nebo jiná běžná metoda. Například, jak je popsáno výše, mutantní ply
.« .... .····· • · · ::.
♦ · ·· protein může být pozměněn tak, že je biologicky inaktivni a zachovává si imunogenní epitopy, viz, například, WO 90/06951,
Berry et al. (Infect Immun, 67:981-985 (1999)) a WO 99/03884.
Termín Ply, jak je zde použit, označuje mutovaný nebo detoxifikovaný pneumolysin vhodný pro lékařské použití (tj. netoxický).
PsaA a PspA a jsou oba známé v oboru. Například, PsaA a varianty s transmembránovou delecí byly popsány v Berry & Paton, Infect Immun 1996 Dec;64(12):5255-62. PspA a varianty s transmembránovou deleci byly popsány v, například, US 5804193, WO .92/14488 a WO 99/53940.
Spl28 a Spl30 jsou popsány ve WO 00/76540.
Spl25 je příkladem povrchového proteinu pneumokoka s LPXTG motivem zakotveným v buněčné stěně (kde X je jakákoliv aminokyselina). Bylo zjištěno, že jakýkoliv protein s touto třídou pneumokokového povrchového proteinu s tímto motivem je užitečný v předkládaném vynálezu a proto se považuje za další protein podle předkládaného vynálezu. Spl25 sám je popsán ve WO 98/18930, a je také znám jako ZmpB — zinková metaloproteinasa.
SplOl je popsán ve WO 98/06734 (kde má označení #y85993).
Je charakterizován signální sekvencí typu I.
Spl33 je popsán ve WO 98/06734 (kde má označení #y85992).
Je také charakterizován signální sekvencí typu I.
Proteiny podle předkládaného vynálezu mohou být také výhodně kombinovány. Mezi výhodné kombinace patří, například, ··
PhtD + NRlxR2, PhtD + NRlxR2-Sp91Cterm chimérické nebo fúzní proteiny, PhtD + Ply, PhtD + Spl28, PhtD + PsaA, PhtD + PspA, PhtA + NRlxR2, PhtA + NRlxR2-Sp91Cterm chimérické nebo fúzní proteiny, PhtA + Ply, PhtA + Spl28, PhtA + PsaA, PhtA + PspA, NRlxR2 + LytC, NRlxR2 + PspA, NRlxR2 + PsaA, NRlxR2 + Spl28, RlxR2 + LytC, RlxR2 + PspA, RlxR2 + PsaA, RlxR2 + Spl28, RlxR2 + PhtD, RlxR2 + PhtA. Výhodně je NRlxR2 (nebo RlxR2) z CbpA nebo PspC. Výhodněji je z CbpA.
Zejména výhodná kombinace pneumokokových proteinů obsahuje Ply (nebo jeho zkrácenou formu nebo imunologicky funkční ekvivalent) + PhtD (nebo jeho zkrácenou formu nebo imunologicky funkční ekvivalent) + NRlxR2 (nebo RlxR2).
Výhodně je NRlxR2 (nebo RlxR2) z CbpA nebo PspC. Výhodněji je z CbpA.
Předkládaný vynález také zahrnuje imunologicky funkční ekvivalenty proteinů podle předkládaného vynálezu. Imunologicky funkční ekvivalent je definován jako peptid nebo protein obsahující alespoň jeden protektivní epitop z proteinu podle předkládaného vynálezu. Takové epitopy jsou obvykle vystaveny na povrchu, jsou vysoce konzervovány a mohou vyvolat baktericidní protilátkovou reakci u hostitele nebo mohou zabránit toxickým účinkům. Výhodně může být použit funkční ekvivalent obsahující alespoň 15 a výhodně 30 nebo více sousedících aminokyselin z proteinu podle předkládaného vynálezu, za podmínky, že tyto ekvivalenty jsou schopné vyvolat v podstatě stejnou imunologickou reakci jako přirozený protein. Pozice potenciálních B-lymfocytárních epitopů v proteinové sekvenci může snadno určena pomocí identifikace peptidů, které jsou jak vystavené na povrchu, tak antigenní, kde toto určení lze provést za použití kombinace dvou metod: 2D-strukturální predikce a predikce antigenního indexu.
·· *·
Predikce 2D-struktury může být provedena za použití PSIPRED programu (od David Jones, Brunel Bioinformatics Group, Dept. Biological Sciences, Brunel University, Uxbridge UB8 3PH, UK). Antigenní index může být vypočítán způsobem podle Jamesona a Wolfa (CABIOS
4:181-186 [1988]) .
Předkládaný, vynález má výhody oproti jiným S. pneumoniae polysacharidovým vakcínám v tom, (imunogenní) prostředky obsahující více S. pneumoniae proteinů mohou poskytovat větší zkříženou ochranu před více. serotypy, mohou více inhibovat adherenci a tvorbu kolonií a mohoupotenciálně vyvolávat tvorbu protilátek, které mohou neutralizovat toxické/enzymatické funkce patogenu. Dále, další povrchové antigeny poskytují prostředky pro další stimulaci opsonofagocytosy.
Předkládaný vynález také zahrnuje kombinované vakcíny, které poskytují ochranu před různými patogeny. Mnoho pediatrických vakcín se v současnosti podává ve formě kombinovaných vakcín, aby se redukoval počet injekcí, které dítě musí dostat. Tak mohou být pediatrické vakcíny obsahující antigeny z jiných patogenů formulovány s vakcínami podle předkládaného vynálezu. Například mohou být vakcíny podle předkládaného vynálezu formulovány·s (nebo podávány samostatně, ale ve stejnou dobu) dobře známou 'trivalentní' kombinovanou vakcínou obsahující Diphtherický toxoid (DY), tetanícký toxoid (IT), pertussovou složku [typicky detoxifikovsný Pertussický toxoid (Pl) a filamentosní haemagglutinin (FHA) volitelně s pertactinem (PRN) a/nebo agglutininem 1+2], například s prodávanou vakcínou IFANRIXDTPa™ (SmithKline Beecham Biologicals), která obsahuje DT, IT, PT, FHA a PRN antigeny, nebo s pertusovou složkou tvořenou *«F >··* «· ··· * · • · · • · • · · ·· celými buňkami, jako je například vakcína prodávaná SmithKline Beecham Biologicals s.a. jako Tritanrix™. Kombinovaná vakcína může také obsahovat další antigen, jako je povrchový antigen viru hepatitidy B (HBsAg), antigeny Polio viru (například inaktivovaný trivalentní polio virus — IPV), proteiny vnější membrány Moraxella catarrhalis, non-typické proteiny Haemophilus influenzae, proteiny vnější membrány N.
meningitidis B.
Příklady výhodných proteinových antigenů Moraxella catarrhalis, které mohou být obsaženy v kombinované vakcíně (zejména pro prevenci otitis media) jsou: OMP106 [WO 97/41731 (Antex) & WO 96/34960 (PMC)]; OMP21; LbpA a/nebo
LbpB [WO 98/55606 (PMC)]; ThpA a/nebo ThpB [WO 97/13785 & WO 97/32980 (PMC)]; CopB Welminen ME, et al. (1993) Infect.
Immun. 61:2003-2010]; UspAl a/nebo UspA2 [WO 93/03761 (University of Texas)]; OmpCD; HasR (PCT/EP99/03824); PilQ (PCT/EP99/03823); OMP85 (PCT/EP00/01468); lipo06 (GB9917977.2); LipolO (GB 9918208.1); lipoll (GB 9918302.2); lipol8 (GB 9918038.2); P6 (PCT/EP99/03038); D15 (PCT/EP99/ 03822); OmplAl (PCT/EP99/06781); Hly3 (PCT/EP99/03257); a OmpE. Příklady netypických antigenů Haemophilus inftuenzae, které mohou být obsaženy v kombinované vakcíně (zejména pro prevenci otitis media) jsou: Fimbrinový protein [(US 5766608
Ohio State Research Foundation)] a fúze obsahující peptidy odvozené od tohoto proteinu (např. LBl(f) fúzní peptidy; US 5843464 (OSU) nebo WO 99/64067]; OMP26 [WO 97/01638 (Cortecs)]; P6 [HP 281673 (State University of New York)]; TbpA a/nebo ThpB; Hia; Hsf; Hin47; Hif; Hmwl; Hmw2; Hmw3; Hmw4; Hap; D15 (WO 94/12641); protein D (EP 594610); P2; a P5 -(WO 94/26304) .
V jiném provedení mohou být různé antigeny uvedené výše obsaženy v imunogenním prostředku podle předkládaného vynálezu jako antigeny přítomné na povrchu vnějších membránových vesikul (záhybů) vyrobených z bakterií, ze kterých jsou získány.
Dalšími zahrnutými kombinacemi jsou proteiny S. pneumoniae podle předkládaného vynálezu v kombinaci s virovými antigeny, například od chřipkového viru (atenuované, rozdělené nebo podjednotkové [např. povrchové glykoproteiny neuraminidasa (NA) a haemaglutinin (HA). Viz např., Chaloupka I. et al, Eur. Journal Clin. Microbiol. Infect. Dis. 1996, 15: 121-127], RSV (např. F a G antigeny nebo F/G fúze, viz např. Schmidt A. C. et al, J Virol, May 2001, p 4594 - 4603), PIV3 (např. HN a F proteiny, viz Schmidt et al., výše), Varicella (např., atenuované, glykoproteiny I-V, atd.), a jakékoliv (nebo všechny) složky
MMR (spalničky, zarděnky, příušnice).
Polysacharidové antigeny podle předkládaného vynálezu
Předkládaný vynález také zahrnuje kombinované vakcíny s 2 nebo více S. pneumoniae proteiny v kombinaci s polysacharidy jinými než z S,. pneumoniae. Takové polysacharidy mohou být izolovány například z H. influenzae, H. influenzae typu B (Hib), N. meningitidis skupin A, C, W, Y, Streptokoků jiných než S. pneumoniae (např. Streptococcus skupiny B, S. pyogenes, atd.), Staphylococcus (např., S. aureus, S. epidermidis), E. coli, Enterococcus (např., E. faecalis a E. faecium) atd. Výhodně jsou polysacharidy z H. influenzae typu B (Hib), a/nebó N. meningitidis skupin A, C, W135, a/nebo Y.
• · · 9
Jak bylo uvedeno výše, problém spojený s polysacharidovým přístupem k vakcinaci spočívá v tom, že polysacharidy sami o sobě jsou slabými imunogeny. Pro překonání tohoto problému mohou být polysacharidy konjugovány na proteinové nosiče, které jsou pomocnými stimulanty T-lymfocytů. Proto je výhodné, aby byly polysacharidy použité v předkládaném vynálezu navázané na takové proteinové nosiče. Příklady takových nosičů, které jsou v současnosti běžně používané pro produkci polysacharidových imunogenů jsou difterický a tetanický toxoid (DT, DT CRM197, jiné DT mutanty, např. v pozici Glu-148, atd. [viz, např., US 4709017, WO 93/25210, WO 95/33481, atd.].a TT (a TT fragment C), v příslušném pořadí), přílipkový haemokyanin (KLH), OMPC z N. meningitidis, a přečištěný proteinový derivát tuberkulinu (PPD).
Dalším nosičem pro imunogenní prostředky na bázi polysacharidů (nebo vakcíny) je protein D z Haemophilus influenzae (EP 594610-B), nebo jeho fragmenty. Fragmenty vhodné pro použití jsou fragmenty obsahující T-helper epitopy. Konkrétně, fragment proteinu D bude výhodně obsahovat Nkoncovou 1/3 proteinu.
Polysacharid může být navázán na proteinový nosič jakoukoliv známou metodou (například Likhite, U.S. Patent 4372945 a Armor et al., U.S. Patent 4474757). Výhodně je provedena CDAP konjugace (WO 95/08348). Pro zesílení imunogenicify mohou mít polysacharidy upravenou velikost (mohou být depolymerizovány), mhou obsahovat adjuvans, mhou být lyofilizovány nebo mohou být konjugovány na různé proteinové nosiče.
TH1 adjuvans podle předkládaného vynálezu
Vakcíny podle předkládaného vynálezu obsahují výhodně adjuvans. Mezi. vhodná adjuvans patří soli hliníku, jako je gelový hydroxid hlinitý (kamenec) nebo fosforečnan hlinitý, ale mohou také obsahovat vápník, hořčík, železo nebo zinek, nebo obsahovat nerozpustnou suspenzi acylovaného tyrosinu, nebo acylovaných sacharidů, kationtově nebo aniontově derivatizovaných,polysacharidu, nebo polyfosfazenů.
Je výhodné, aby vybrané adjuvans bylo přednostním induktorem odpovědi TH1 typu. Vysoké koncentrace cytokinů Thl-typu upřednostňují indukci buněčné imunitní reakce na daný antigen, zatímco vysoké koncentrace cytokinů Th2-typu vedou přednostně k indukci protilátkové imunitní reakce na antigen.
Je důležité si uvědomit, že odlišení imunitní reakce Thl a Th2 typu není absolutní. Ve skutečnosti se u jedinců bude rozvíjet imunitní reakce, která je převažujícím způsobem typu Thl nebo Th2. Nicméně, často je výhodné rozdělovat rodiny cytokinů tak, jak je popsáno na myších CD4 +ve T lymfocytárních klonech v Mosmann a-Coffman (Mosmann, T.R. a Coffinan, R.L. (1989) Thl and TH2 cells: different patterns of lymphokine secretion lead to different functional properties. Annua'1 Review of Immunology, 7, p 145-173)..Tradičně'jsou reakce Thl-typu asociované s produkcí INF-γ a IL-2 cytokinů Tlymfocyty. Další cytokiny často přímo asociované s indukcí imunitní reakce Thl-typu nejsou produkovány T-lymfocyty, jako je IL-12. Naopak, reakce Th2-typu jsou asociované se sekrecí IL-4, IL-5, IL-β, IL-10. Vhodné adjuvantní systémy, které podporují hlavně reakce Thl typu, jsou: Monofosforyl lipid A nebo a jeho deriváty, zejména 3-de-0-acylovaný monofosforyl lipid A (3D-MPL) (pro jeho přípravu viz GB 2220211 A); kombinace monofosforyl- lipidu A, výhodně 3-de-0-acylovaného monofosforyl-lipidu A, a soli hliníku (například fosforečnanu hlinitého nebo hydroxidu hlinitého) nebo emulze olej ve vodě.
V takových kombinacích jsou antigen a 3D-MPL obsaženy ve stejné struktuře, což umožňuje účinné dodání antigenních a imunostimulačních signálů. Studie prokázaly, že 3D-MPL je schopen dále zesilovat imunogenicitu antigenu adsorbovaného na kamenec [Thoelen et al. Vaccine (1998) 16:708-14; EP 689454Bl] .
Posílený systém je například kombinace monofosforyl lipidu' A a saponinového derivátu, zejména kombinace QS21 a 3D-MPL, jak je popsána ve WO 94/00153, nebo méně reaktogenní prostředek, kde je QS21 utlumen cholesterolem a který je popsán ve WO 96/33739.
Zejména účinný adjuvantní prostředek obsahující QS21, 3DMPL a tokoferol v emulzi olej ve vodě je popsán ve WO 95/17210, a tento prostředek je výhodným prostředkem.
Výhodně vakcína dále obsahuje saponin, výhodněji QS21. Prostředek může dále obsahovat emulsi olej ve vodě a tokoferol (WO 95/17210).
Předkládaný vynález také poskytuje způsob pro přípravu vakcinačního prostředku, který zahrnuje smísení proteinu podle předkládaného vynálezu s farmaceuticky přijatelnou přísadou, jako je 3D-MPL.
Nemethylované CpG obsahující oligonukleotidy (WO 96/02555) jsou také přednostními induktory TH1 reakce a jsou použitelné v předkládaném vynálezu.
• · · · · · · • · · ·· · ·
V dalším aspektu předkládaného vynálezu je poskytnuta vakcína, jak zde byla popsaná, pro použití v medicíně. Jedním provedením'vynálezu je způsob pro prevenci nebo zmírnění pneumonie u starších jedinců, při kterém je uvedenému staršímu pacientovi podáno bezpečné a účinné množství vakcíny podle předkládaného vynálezu a volitelně Thl adjuvans.
V dalším provedení vynález poskytuje způsob pro prevenci nebo zmírnění otitis media u kojenců (do 24 měsíců) nebo batolat (24 měsíců až 5 let), při kterém je uvedenému kojenci nebo batoleti podáno bezpečné a účinné množství vakcíny obsahující Streptococcus pneumoniae proteiny podle předkládaného vynálezu a volitelně Thl adjuvans.
Vakcinační prostředky podle předkládaného vynálezu
Vakcinační prostředky podle předkládaného vynálezu mohou být použity pro chránění nebo léčbu savců (výhodně lidí) vnímavých k infekci, pomocí podání uvedené vakcíny systémovým nebo slizničním způsobem. Toto podání může být formou intramuskulárnír, intraperitoneální, intradermální nebo podkožní; nebo prostřednictvím sliznice, jak je tomu u orálního/alimentárního podání a podání do respiračního, genitourinárního traktu. Intranasální podání vakcín pro léčbu pneumonie nebo otitis media je výhodné (protože může být zabráněno nasofaryngeálnímu přenášení pneumokoků, což zmírní infekci v jejím nejčasnějším stadiu). Ačkoliv může být vakcína podle předkládaného vynálezu podána v jedné dávce, mohou být její složky podány také současně nebo v různou dobu (například, pokud je ve vakcíně obsažen polysacharid, může být podán samostatně ve stejnou dobu nebo 1-2 týdny po podání kombinace bakteriálních proteinů, za účelem optimální koordinace imunitní reakce. Kromě jediného způsobu podání »· «· • · ·· «··· ·· • · · · · · · • · · · · · · mohou být použity dva různé způsoby podání. Například, virové antigeny mohou být podány ID (intradermálně), zatímco bakteriální proteiny mohou být podány IM (intramuskulárně) nebo IN (intranasálně). Pokud jsou přítomné polysacharidy, tak mohou být podávány IM (nebo ID) a bakteriální proteiny mohou být podávány IN (nebo ID). Dále, vakcíny podle předkládaného vynálezu mohou být podány IM pro první dávku a IN pro dosycovací injekce.
Množství konjugovaného antigenu v každé dávce vakcíny je vybráno jako množství, které indukuje imunoprotektivní reakci bez významnějších nežádoucích účinků typických u vakcín.
Takové množství se velmi liší podle toho, jaký imunogen je použit a jak je prezentován. Obsah proteinových antigenů ve vakcíně je obvykle v rozmezí 1-100 μg, výhodně 5-50 μg a nejlépe 5-25 μg. Pokud jsou použity polysacharidy, tak se předpokládá, že každá dávka bude obsahovat 0,1-100 μg polysacharidů, výhodně 0,1-50 μρ, výhodněji 0,1-10 μρ, kdy 1 až 5 μg je výhodná dávka.
Optimální množství složek pro každou konkrétní vakcínu může být zjištěno za použití standardních studií využívajících pozorování vhodných imunitních reakcí u jedinců. Po iniciální vakcinaci může být jedinci podána jedna nebo více dosycovacích imunizací, které jsou podány v adekvátním dobu. Typicky bude vakcína obsahovat antigen (proteiny), adjuvans a přísady nebo farmaceuticky přijatelné nosiče.
Příprava vakcín je obecně popsána ve Vaccine Design (The subunit and adjuvans approach (ed. Powell M.F. & Newman M.J.) (1995) Plenům Press New York). Enkapsulace v liposomech je popsána ve Fullerton, US Patent 4235877.
• · · ·· «· · · · · «· · · · · · ♦ · ··· · · · · · • · ··· · ♦ · * · ··· ··· · ·
........ ··
Ačkoliv mohou být vakcíny podle předkládaného vynálezu podány jakýmkoliv způsobem, je podání popsaných vakcín do do kůže (ID) jedním z provedení předkládaného vynálezu. Lidská kůže je tvořena vnější rohovitou pokožkou, která se nazývá stratům corneum, pod kterou leží epidermis. Pod epidermis je vrstva označovaná jako dermis a pod touto vrstvou je podkožní tkáň.. Výzkumníci prokázali, že injekce vakcíny do kůže, konkrétně do dermis, stimuluje imunitní reakci, která může být také asociována s mnoha dalšími výhodami. Intradermální vakcinace vakcínami podle předkládaného vynálezu tvoří výhodný rys předkládaného vynálezu.
Běžná technika intradermální vakcinace, mantoux technika, obsahuje kroky desinfekce kůže, a potom napnutí kůže jednou rukou zavedení tenké jehly (26-31 gauge) v úhlu 10-15°. Jakmile se hrana jehly zavede, tak se tělo jehly sníží a posunuje se dále, což se projeví zvedáním kůže při mírném tlaku, Potom se velmi pomalu injikuje kapalina, která vytvoří puchýř na kůži a potom se jehla vyjme.
Nověji byly popsány prostředky, které jsou specificky určené pro podání kapaliny do nebo skrz kůži, jako jsou například prostředky popsané ve WO 99/34850 a EP 1092444, a také tryskové injekční prostředky popsané například ve WO
| 01/13977 | ; US | 5480381 | , US | 5599302, | US | 5334144 | , US | 5993412 | , US |
| 5649912, | US | 5569189, | US | 5704911, | US | 5383851, | US | 5893397, | US |
| 5466220, | US | 5339163, | US | 5312335, | US | 5503627, | US | 5064413, | US |
| 5520639, | US | 4596556, | US | 4790824, | US | 4941880, | US | 4940460, | WO |
97/37705 a WO 97/13537. Mezi alternativní metody intradermálního podání vakcíny patří použití běžných injekčních stříkaček a jehel, nebo použití zařízení pro balistické podání solidních vakcín (WO 99127961), nebo použití transdermálních náplastí (WO 97/48440; WO 98/28037); nebo aplikace na povrch kůže (transdermální nebo tr.anskutánní podání) (WO 98/20734 ; WO 98/28037).
Když jsou vakcíny podle předkládaného vynálezu podávány do kůže, nebo přesněji do dermis, tak jsou vakcíny v malém objemu kapaliny, konkrétně v objemu mezi přibližně 0,05 ml a 0,2 ml.
Obsah antigenů v kožních nebo intradermálních vakcínách podle předkládaného vynálezu může být podobný jako v běžných intramuskulárních vakcínách. Tak mohou být proteinové antigeny přítomny v intradermálních vakcínách v dávce v rozmezí 1-100 pg, výhodně .5-50 pg. Obdobně, pokud je polysacharid konjugovaný s antigenem přítomen, tak je polysacharid přítomen v dávce 0,1-100 pg, výhodně 0,1-50 pg, výhodněji 0,1-10 pg, a nejlépe v dávce mezi 1 a 5 pg. Nicméně, charakteristikou kožních nebo intradermálních vakcín je to, že mohou být tvořeny nízkou dávkou. Proto jsou proteinové antigeny v nízkodávkových vakcínách výhodně přítomny v dávce pouze 0,1 až 10 pg, výhodně 0,1 až 5 pg na dávku; a pokud je polysacharid konjugovaný s antigenem přítomen, tak je polysacharid přítomen v dávce 0,011 pg, výhodně 0,01-0,5 pg polysacharidu na dávku.
Termín intradermální podání, jak je zde použit, označuje podání vakcíny do regionu dermis v kůži. Nicméně, vakcína nemusí být lokalizována výlučně v dermis. Dermis je vrstva kůže lokalizovaná mezi přibližně 1,0 a přibližně 2,0 mm od povrchu lidské kůže, ale existují určité variace mezi jedinci a různými částmi .těla. Obecně se předpokládá, že bude dosaženo dermis, pokud se pronikne 1,5 mm pod povrch kůže. Dermis je umístěna mezi stratům corneum a epidermis na povrchu a podkožní vrstvou směrem dolů. Podle způsobu podání může být vakcina nakonec lokalizována primárně nebo pouze v dermis, nebo může být nakonec umístěna v epidermis a dermis.
V jiném aspektu předkládaný vynález poskytuje DNA kódující jeden nebo více proteinů S. pneumoniae, takže jsou tyto proteiny generované in šitu. DNA může být přítomna v jakémkoliv z mnoha systémů pro její podání známých odborníkům v oboru, včetně systémů pro expresi nukleové kyseliny, bakteriálních a'virových expresních systémů, Mnoho technik pro. přenos genů je známo v oboru a jsou popsány například v Rolland, Crit Rev. Therap. Drug Carrier Systems 15:143-198, 1998 a odkazech citovaných v této publikaci.
Vhodné systémy pro expresi nukleové kyseliny obsahují nutné DNA sekvence pro expresi u pacienta (jako-je vhodný promotor a terminační signál). Když je expresním systémem rekombinatní živý mikroorganismus, jako je virus nebo bakterie, tak může být požadovaný gen insertován do genomu živého rekombinantního viru nebo bakterie. Inokulace a in vivo infekce tímto živým vektorem povede k expresi antigenu in vivo a k indukci imunitní reakce. Viry a bakterie vhodné pro tento účel jsou například: poxviry (např.; virus vakcinie, virus kuřecích neštovic, canarypoxvirus), alfaviry (Sindbis virus, Semliky Forest Virus, virus venezuelské koňské encefalitidy), adenoviry, adeno-asociovaný virus, picornaviry (poliovirus, rhinovirus), herpesviry (virus varicella zoster virus), Listeria, Salmonella, Shigella, Neisseria, BCG. Tyto viry a bakterie mohou být virulentní nebo různými způsoby oslabené, aby byly získány živé vakcíny. Takové živé vakcíny tvoří rovněž součást předkládaného vynálezu..
V dalším aspektu předkládaný vynález poskytuje způsob přípravy vakcíny podle předkládaného vynálezu, kde tento * «· ·· ···· ·· ···· ···· · · · · · · ··· ♦ · · ···· • · · ·4 · · · ·* · · způsob zahrnuje smísení kombinace proteinů podle předkládaného vynálezu.
Výhodně jsou antigenní prostředky (a vakcíny), které obsahují polysacharidy popsané výše, lyofilizovány do doby použití, kdy jsou rekonstituovány za použití ředidla.
Výhodněji jsou lyofilizovány za přítomnosti 3D-MPL a jsou rekonstituovány za použití salinického roztoku.
Lyofilizace vakcín je dobře známá v oboru. Obvykle se kapalná vakcina suší vymrážením za přítomnosti činidla zabraňujících tvorbě sraženin, jak je například sacharid, např. sacharosa nebo laktosa (která je přítomná v počáteční koncentraci 10-200 mg/ml). Lyofilizace má obvykle několik kroků., například začíná cyklus při —69 °C, postupně se teplota upraví na —24 °C během 3 hodin, potom se tato teplota udržuje po dobu 18 hodin, potom se postupně upraví na —16 °C během 1 hodin, potom se tato teplota udržuje po dobu 6 hodin, potom se během 3 hodin upraví na +34 °C a nakonec se tato teplota udržuje po dobu 9 hodin,
Imunogenní prostředky a vakcíny podle předkládaného vynálezu mohou být hodnoceny na různých zvířecích modelech nebo za použití lidského séra. Například následující zvířecí modely mohou být použity pro hodnocení pneumokokové infekce. C3H/HeJ Myši (stáří 6 až 8 týdnů) mohou být imunizovány s.c.
p.g proteinu s 50 μg CFA adjuvans, a za 3-4 týdny potom se provede dosycovací imunizace 15 μρ proteinu s IFA. Pro demonstrování pasivní a aktivní ochrany před systémovou infekcí může být myším intraperitoneálně podáno imunní sérum nebo protein před intraperitoneální injekcí 15 až 90 LD50 pneumokoků v týden 8-10. Dále mohou být proteiny testovány • ·· *» ··*· *· ···· ······ · · · 9 »·»···* « · ♦ 4 ··· · « · · · · ·
9 9 94 49 * 44 4 9 v myším modelu kolonizace nasopharyngu (Wu et al., Microbial Pathogenesis 1997; 23:127-137).
Kromě myší jsou mláďata krys citlivé na kolonizaci a infekci S. pneumoniae. V modelech pasivní ochrany může být podání myšího imunního séra (100 μΐ i.p. nebo 10 μΐ i.n.) provedeno před intranasálním podáním S.pneumoniae (10 μΐ) u krysích mláďat stáří 2-5 dnů. Kolonizace může být určena kultivací nasálních výplachů (20-40 μΐ se instiluje, 10 μΐ se odebere).
Výhodné interakce mezi proteinovými složkami v kombinované vakcíně mohou být demonstrovány podáním dávky každého proteinu ve vakcíně, která je sub-protektivní v monovalentní vakcíně. Zvýšená protektivní účinnost ve srovnání s monovalentními vakcínami může být přisouzena výhodným interakcím mezi jednotlivými složkami.
Vynález je dále ilustrován v následujících příkladech. Příklady jsou provedeny za použití standardních technik, které jsou známé a rutinní pro odborníky v oboru, nebo které jsou popsány podrobně. Příklady jsou uvedeny pro dokreslení předkládaného vynálezu a nijak neomezují jeho rozsah.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1. Konstrukce a exprese antigenů
NRlxR2
CbpA je 75 kDa povrchový protein skládající se z několika domén. N-koncová doména obsahuje 2 vysoce konzervované repetitivní sekvence (R1 a R2) a C-koncová doména obsahuje 10 • ·· ·* »« 9 · ·· ·«· ···· · · · · · ·· tandemových, přímo repetitivních sekvencí o 20 aminokyselinách. Připravila se CbpA zkrácená forma pro produkci NR1XR2, -tj. forma bez vazebné domény pro cholin.
NR1XR2 gen se amplifikoval, pomocí PCR, z DNA získané z kmene serotypu 4 S. pneumoniae (viz, např., WO 97/41157, nebo WO 99/51266). PCR se provedla za použití Expand High Fidelity PCR Systému, nebo Hi-Fi (Roche). Skládala se ze směsi obsahující Taq polymerasu a proofreading polymerasu.
V důsledku vlastní 3'-5' exonukleasové proofreading aktivity vede použití Hi-Fi ke 3krát vyšší spolehlivosti DNA syntézy ve srovnání s Taq polymerasou.
PCR fragmenty se klonovaly v pGEM-T vektoru od pGEM-T Vector Systems (Promega). Tento krok je nutný pro usnadnění trávení PCR fragmentu restrikčními enzymy pro další ligaci. pGEM-T vektor je použit v lineární formě a obsahuje 3'-T přesahy. Tyto přesahy usnadňují inserci PCR produktů získaných termostabilními polymerasami, které přidávají jediný deoxyadenosin, bez závislosti na templátu, k 3' koncům amplifikovaného fragmentu.
Fragmenty a vektory se přečistily po enzymatickém trávení (Ndel a Xbal trávení) podle Before-Parsons et al. (Nucleic Acids Research, 23, 4926-4927, 1995). Agarosové řezy se zcela lyofilizovaly během 3-4 hodin. 1:1 roztok ethanol-TE se přidal k lyofilizovanému gelu. Vzorek se mírně mísil po dobu 1 hodiny a agarosa se lisovala a zcela se odstranila odstředěním. DNA se získala z eluátu pomocí srážení ethanolem.
DNA kódující NRlxR2 se klonovala do vektoru obsahujícího dlouhý promotor L z fágu λ. Požadovaný protein může být ·» ·· ···· *· ΦΦΦΦ
Φφφφ ♦ Φ · ·Φ *
ΦΦΦ · · · «ΦΦΦ
ΦΦΦΦΦ 99 · ΦΦ Φ» indukován teplem, když je přítomen v AR 58 kmenu E.coli, nebo kyselinou nalidixovou, když je přítomen v AR 120 kmenu E.coli.
Prekultivace bakterií se provedla přes noc při teplotě 30 °C. Tato prekultura se naředila přibližně 40-krát v celkovém objemu 20 mi a ponechala se při 30 °C do dosažení O.D. 0,40,6. Potom se provedla tepelná indukce při 42 °C. Vzorky se odebíraly v různou dobu. Jeden ml kultury se odstřeďoval 5 minut při 7000 rpm. Supernatant kultury se konzervoval při -20 °C a peleta (celkový extrakt) se resuspendovala v 500 μΐ vzorkového pufru (western blot nebo SDS-PAGE analýza), nebo v 500 μΐ lyzačního pufru, a provedla se inkubace po dobu 30 minut při 37°C (ELISA). Složení lyzačního pufru je: SDS 0,1%, deoxycholát 0,1%, Na citrát: 0,015 M.
Vzorky se zpracovaly na SDS-PAGE, kde se vnesly na 4-20 % gel (Novex, Invitrogen) . Migrace se provedla, při 200 V.
Provedlo se barvení Coomassie modří. Vzorky se vnesly na 4-20 % gel (Novex, Invitrogen) pro Westernovou hybridizaci.
Migrace se provedla při 200 V. Gely se přenesly na nitrocelulosu a skvrny se vizualizovaly králičí CC-NR1XR2 polyklonální protilátkou (první protilátky) a a-králičí protilátkou navázanou na alkalickou fosfatasu (druhá protilátka).
Proužek velikosti přibližně 55 kDa se pozoroval při SDSPAGE analýze. Klon 28B2 se vybral podle SDS-PAGE analýzy a přenesl se pro fermentaci. Tento klon se sekvenoval a jeho sekvence se potvrdila (aminokyseliny 39 (tj. po signální sekvenci) až 446 = 406 aminokyselin).
Také se studovala rozpustnost NR1XR2, po lýze přes noc indukovaných bakterií následované odstředěním. Provedla se • 99 99 9999 99 9999
99 99 9 99 9
9«
SDS-PAGE analýza a ELISA. NR1XR2 se zdál být získaný hlavně (>95%) v solubilní frakci.
RlxR2, PhtD, Sp91, (N)RJxR2-Sp91[C-koncová doména], a Ply
Tyto geny byly také klonovány, sekvenovány a exprimovány, podobně .jako NRlxR2. RlxR2 obsahuje aminokyseliny 177 až 443 CbpA (S. pneumoniae serotyp 4N), PhtD obsahuje aminokyseliny 21 (tj. po signální sekvenci) až do konce (aminokyselina 839
S. pneumoniae, serotypu 4N), Sp91 začíná aminokyselinou 20 (VAA) a končí koncem sekvence. Pro fúzní proteiny, RlxR2Sp91Cterm obsahuje aminokyseliny 177-446 CbpA a aminokyseliny 271 až translační stop kodon; NRlxR2-Sp9lCterm obsahuje aminokyseliny 39-446 CbpA a aminokyseliny 271 až translační stop kodon. Pro fúzní proteiny se 2 další aminokyseliny (GS) nacházejí mezi (N)RlxR2 a Sp91Cterm sekvencemi. Pro všechny konstrukty byl ATG kodon vložen 5' k začátku genu pro umožnění transkripce a translace, což znamená, že před každou sekvencí zmíněnou výše existuje další N-terminální methionin.
Příklad 2. Sérologie
Za použití séra z klinických studií se pomocí ELISA měřily protilátkové reakce, které se přirozeně vyvíjejí na proteiny S. pneumoniae.
2.1 Postup • Vzorky séra o Párové sérum od kojenců odebírané ve věku 2 až 4 měsíce a až 12 měsíců, v příslušném pořadí (N = 20, studie DTP a HBV) .
Sérum od dospělých věku ~20 let (N = 50).
♦ Φ· · φ φ · • φ φ • φ φ • φ φ φ · φφφφ ο Sérum od dospělých věku ~65 let (N = 140).
• ELISA test
Imunoplotny se potáhly přes noc při 4 °C 1 pg/ml každého proteinu. Sériová dvou-násobná ředění séra (od ředění 1/10) se potom inkubovala po dobu 1 hodiny při teplotě místnosti (RT) za třepání. Imunodetekce se provedla za použití monoklonální protilátky proti .lidskému IgG konjugované s peroxidasou (Strateck, HP6043) ředěné 4000-krát a provedla se inkubace po dobu 30 minut při teplotě místnosti za třepání. Po detekci se střední titry vypočetly za použití SoftMaxPro. Séra s titry >
se považovala za pozitivní. Pro výpočet geometrického průměru se titr 5 (polovina hraniční hodnoty) arbitrárně přiřadil k negativnímu séru.
Koncentrace IgG v pg/ml se určily srovnáním optických densit (OD) s OD křivkou chromopure IgG (Jackson) zachyceného na plotně polyklonálními kozími protilátkami proti lidskému IgG a detekovaného za použití stejné peroxydasou značené protilátky jako výše.
2.2 Výsledky
2.2.1 Sérologie Střep proteinu u kojenců
Nejvyšší titry protilátek a stupně seropozitivity v séru od kojenců věku 2 až 4 měsíce byly získány pro PhtD, PsaA, Spl28, NRlxR2 a méně pro Sp91 a Ply. Žádné nebo slabé odpovědi byly detekovány pro SplOl a Spl30. Sp46 a PhtA nebyly testovány (z důvodu dostupnosti materiálu).
• «« 0* 00·0 0· 0000
00 00 0 00 0
000 000 0000 00000 00 0 ·· * ·
Protilátková reakce se obvykle snížila v séru stejných jedinců, které bylo odebráno ve věku 6 až 12 měsíců, což ukazuje, že tyto vysoké titry byly způsobeny zejména přítomností pasivně přenesených protilátek od matky.
Nicméně, u některých dětí se imunitní reakce na některé protřeny zvyšovala s. věkem, pravděpodobně v důsledku přirozené expozice pneumokokům. Antigenem odpovědný za tuto serokonverzi byl jasně PsaA. U některých jedinců bylo také pozorováno zvýšení koncentrace protilátek k PhtD, NRlxR2, Spl28, Sp91 a Ply. Byly pozorovány pouze marginální variace v protilátkové reakci na SplOl a Spl30. (Viz obr. 1 a 2).
2.2.2 Sérologie Střep proteinu u mladších dospělých
Podle geometrických průměrů titrů jsou PhtD, PhtA a NRlxR2 nejvíce imunogenními proteiny v hodnocené populaci mladších dospělých, a po nich následuje Spl28, Ply a Sp91. Všichni jedinci mají detekovatelné protilátky k těmto proteinům. Nejnižší reakce byly zjištěny pro Sp46, a.zejména pro Spl30 a SplOl. PsaA nebyl testován (nebylo k dispozici dostatečné množství séra) (viz obr.. 3 a 4) .
2.2.3 Sérologie Střep proteinu u starších dospělých
Bylo zjištěno zřetelné snížení koncentrace protilátek k Střep proteinům u starších dospělých ve srovnání s mladšími dospělými. U starších lidí je nej lepším imunogenem PhtD, a po něm Spl28, NRlxR2, Sp91, Ply a PsaA. Pouze marginální reakce byly zjištěna pro SplOl a Spl30. Sp46 a PhtA nebyly testovány (špatná dostupnost materiálu) (viz obr. 5 a 6).
• ·· 0» ···· ··' »00 0 00 0 · · 0 0 0 0 0
0 0 0 0 0 0 «00 0 00« 000 0·0« • 00 00 0· · 00 ·0
Tabulka 1: Geometrický průměr koncentrace IgG (GMC), v μg/ml, u starších lidí
| Protein | IgG (GMG, μg/ml) |
| PhtD | 19 |
| NRlxR2 | 3,5 |
| Sp91 | 2,5 |
| Ply | 2,3 |
Všechny publikace, včetně patentů a patentových přihlášek, citované v předkládaném vynálezu, jsou zde uvedeny ve své úplnosti jako odkazy.
Byla popsána výhodná provedení předkládaného vynálezu. Je zřejmé, že existují různé modifikace popsaných provedení, která spadají do rozsahu předkládaného vynálezu.
Claims (10)
- nároky to* *· *··· ·« ·»·· » · ♦ · · * · ·Patentové1. Imunogenní prostředek vyznačující se tím, že obsahuje alespoň 2 proteiny S. pneumoniae, kde jeden z proteinů je vybraný ze skupiny zahrnující rodinu polyhistidinové triády (PhtX) a druhý protein je vybrán ze skupiny zahrnující rodinu vazebných proteinů pro cholin (CbpX), CbpX zkrácené formy, LytX rodinu, LytX zkrácené formy, chimérické proteiny CbpX zkrácená forma-LytX zkrácená forma, pneumolysin (Ply), PspA, PsaA, Spl28, SplOl, Spl30, Spl25 a Spl33.
- 2. Imunogenní prostředek vyznačující se tím, že obsahuje alespoň 2 proteiny S. pneumoniae, kde jeden z proteinů je vybraný ze skupiny zahrnující rodinu vazebných proteinů pro cholin (CbpX), CbpX zkrácené formy a chimérické proteiny CbpX zkrácená forma-LytX zkrácená forma, a druhý protein je vybrán ze skupiny zahrnující rodinu polyhistidinové triády (PhtX), LytC, pneumolysin (Ply), PspA a Spl28.
- 3. Imunogenní prostředek podle nároků 1-2 vyznačující se tím, že PhtX je PhtA, PhtB nebo PhtD.
- 4. Imunogenní prostředek podle nároků 1-3 vyznačující se tím, že CbpX je CbpA nebo PspC.
- 5. Imunogenní prostředek podle nároků 1-4 vyznačující se tím, že dále obsahuje adjuvans.
- 6. Vakcína vyznačující se tím, že obsahuje imunogenní prostředek podle nároku 5.·· ·<·««4»·9 · · ♦ ···· »·· * » » · · · ···9 9 9 9 9 9 9 9 · 99 9 9 9 9 9 9 9 9 >NΊ. Způsob pro vyvolání imunitní reakce vyznačuj ící se t í m, že zahrnuje imunizaci savce imunogenním prostředkem podle nároků 1-5.
- 8. Způsob pro prevenci nebo zmírnění Streptokokové infekce u pacienta staršího 55 let vyznačující se tím, zahrnuje podání bezpečného a účinného množství vakcíny podle nároku 6 uvedenému pacientovi.
- 9. Použití vakcíny podle nároku 7 pro výrobu léčiva pro prevenci pneumonie u pacientů starších 55 let.
- 10. Způsob pro prevenci nebo zmírnění otitis media u kojenců vyznačující se tím, že zahrnuje podání bezpečného a účinného množství vakcíny podle nároku 6 uvedenému pacientovi.
- 11. Způsob pro výrobu vakcíny podle nároku 6 vyznačující se tím, že zahrnuje kroky:selektování a izolování dvou různých proteinů S. pneumoniae; a smísení uvedených proteinů dohromady s farmaceuticky přijatelným nosičem.
99 9» 99 9 9 99 9999 9 9 9 • 9 • 9 9 < · • 9 • V · 9 % 9 ' 9 • · • 9 * 1 9 9 ♦ t ♦ • · »9 9 9 i 9 ♦ 9 1 99
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GBGB0022742.1A GB0022742D0 (en) | 2000-09-15 | 2000-09-15 | Vaccine |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ2003757A3 true CZ2003757A3 (cs) | 2003-10-15 |
| CZ305343B6 CZ305343B6 (cs) | 2015-08-12 |
Family
ID=9899575
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ2003-756A CZ305324B6 (cs) | 2000-09-15 | 2001-09-12 | Imunogenní prostředek, způsob jeho přípravy, vakcína s jeho obsahem a léčivo obsahující pneumokokový polysacharidový antigen v kombinaci s proteinovým antigenem Streptococcus pneumoniae |
| CZ2003-757A CZ305343B6 (cs) | 2000-09-15 | 2001-09-12 | Imunogenní prostředek, vakcína s jeho obsahem, její použití a způsob její výroby |
Family Applications Before (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ2003-756A CZ305324B6 (cs) | 2000-09-15 | 2001-09-12 | Imunogenní prostředek, způsob jeho přípravy, vakcína s jeho obsahem a léčivo obsahující pneumokokový polysacharidový antigen v kombinaci s proteinovým antigenem Streptococcus pneumoniae |
Country Status (24)
| Country | Link |
|---|---|
| US (5) | US20060051361A1 (cs) |
| EP (6) | EP2140878B1 (cs) |
| JP (3) | JP4880184B2 (cs) |
| KR (5) | KR100991916B1 (cs) |
| CN (3) | CN101502648B (cs) |
| AT (1) | ATE516815T1 (cs) |
| AU (4) | AU2002220548B2 (cs) |
| BR (2) | BR0113821A (cs) |
| CA (2) | CA2421998C (cs) |
| CY (1) | CY1111915T1 (cs) |
| CZ (2) | CZ305324B6 (cs) |
| DK (1) | DK1317279T3 (cs) |
| ES (4) | ES2545876T3 (cs) |
| GB (1) | GB0022742D0 (cs) |
| HU (2) | HUP0301043A3 (cs) |
| IL (4) | IL154608A0 (cs) |
| MX (2) | MXPA03002265A (cs) |
| NO (2) | NO336186B1 (cs) |
| NZ (2) | NZ524287A (cs) |
| PL (2) | PL209247B1 (cs) |
| PT (1) | PT1317279E (cs) |
| SI (1) | SI1317279T1 (cs) |
| WO (2) | WO2002022168A2 (cs) |
| ZA (2) | ZA200301526B (cs) |
Families Citing this family (75)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7078042B2 (en) * | 1995-09-15 | 2006-07-18 | Uab Research Foundation | Pneumococcal surface protein C (PspC), epitopic regions and strain selection thereof, and uses therefor |
| US7122368B1 (en) | 1997-07-02 | 2006-10-17 | Sanofi Pasteur Limited | Nucleic acid and amino acid sequences relating to Streptococcus pneumoniae for diagnostics and therapeutics |
| US6800744B1 (en) | 1997-07-02 | 2004-10-05 | Genome Therapeutics Corporation | Nucleic acid and amino acid sequences relating to Streptococcus pneumoniae for diagnostics and therapeutics |
| US20010016200A1 (en) | 1998-04-23 | 2001-08-23 | Briles David E. | Pneumococcal surface protein C (PspC), epitopic regions and strain selection thereof, and uses therefor |
| US7128918B1 (en) * | 1998-12-23 | 2006-10-31 | Id Biomedical Corporation | Streptococcus antigens |
| PL203917B1 (pl) * | 1999-03-19 | 2009-11-30 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Kompozycja immunogenna, sposób jej wytwarzania oraz zastosowanie |
| US7074415B2 (en) * | 2000-06-20 | 2006-07-11 | Id Biomedical Corporation | Streptococcus antigens |
| GB0115176D0 (en) | 2001-06-20 | 2001-08-15 | Chiron Spa | Capular polysaccharide solubilisation and combination vaccines |
| US7262024B2 (en) | 2001-12-20 | 2007-08-28 | Id Biomedical Corporation | Streptococcus antigens |
| US8691243B2 (en) | 2002-04-02 | 2014-04-08 | Ben-Gurion University Of The Negev Research And Development Authority | Protein-based Streptococcus pneumoniae vaccine |
| CA2481107A1 (en) * | 2002-04-02 | 2003-10-09 | Yaffa Mizrachi Nebenzahl | Protein-based streptococcus pneumoniae vaccines |
| CN1809380B (zh) | 2002-10-11 | 2010-05-12 | 启龙有限公司 | 广泛防御高毒性脑膜炎球菌谱系的多肽-疫苗 |
| GB0227346D0 (en) | 2002-11-22 | 2002-12-31 | Chiron Spa | 741 |
| US8229903B2 (en) * | 2002-12-19 | 2012-07-24 | International Business Machines Corporation | Suggesting data interpretations and patterns for updating policy documents |
| PT1587537E (pt) * | 2003-01-30 | 2012-05-30 | Novartis Ag | Vacinas injetáveis contra múltiplos serogrupos meningocócicos |
| BRPI0408094A (pt) | 2003-03-13 | 2006-02-14 | Glaxosmithkline Biolog Sa | processo para purificação de uma citolisina bacteriana, citolisina bacteriana, conjugado de polissacarìdeo capsular-pneumolisina bacteriano, composição imunogênica, vacina, processo de produção da vacina, método de tratamento ou prevenção de infecção por streptococcus pneumoniae, e, uso da pneumolisina ou do conjugado de polissacarìdeo-pneumolisina bacteriano |
| EP1477802A1 (en) * | 2003-05-16 | 2004-11-17 | Erasmus Universiteit Rotterdam | Method for selecting and producing vaccine components and vaccines based thereon |
| NZ546430A (en) | 2003-10-02 | 2009-04-30 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Liquid vaccines for multiple meningococcal serogroups |
| GB0323103D0 (en) | 2003-10-02 | 2003-11-05 | Chiron Srl | De-acetylated saccharides |
| CN101072586A (zh) * | 2004-09-21 | 2007-11-14 | 圣诺菲·帕斯图尔公司 | 多价脑膜炎球菌源性多糖－蛋白质缀合物及疫苗 |
| AU2011253684B8 (en) * | 2005-04-08 | 2013-07-11 | Wyeth Llc | Multivalent pneumococcal polysaccharide-protein conjugate composition |
| DK1868645T3 (da) | 2005-04-08 | 2012-04-10 | Wyeth Llc | Multivalent pneumokok-sakkarid-protein-konjugat-sammensætning |
| GB0522765D0 (en) | 2005-11-08 | 2005-12-14 | Chiron Srl | Combination vaccine manufacture |
| GB0524066D0 (en) | 2005-11-25 | 2006-01-04 | Chiron Srl | 741 ii |
| TWI457133B (zh) | 2005-12-13 | 2014-10-21 | Glaxosmithkline Biolog Sa | 新穎組合物 |
| SI1962899T1 (sl) | 2005-12-22 | 2011-11-30 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Pnevmokokna polisaharidna konjugatna vakcina |
| CA2635208C (en) * | 2005-12-28 | 2018-03-20 | The Uab Research Foundation | Streptococcus pneumonia having a capsular polysaccharide repeating unit {>2)glucose 1(1>3) glucose 2 (1>3) rhamnose (1>3)ribitol (5>phosphate} |
| US8808707B1 (en) | 2006-05-08 | 2014-08-19 | Wyeth Llc | Pneumococcal dosing regimen |
| CA2661210A1 (en) * | 2006-08-17 | 2008-02-21 | The Uab Research Foundation | Diagnosing pneumococcal pneumonia |
| PE20090281A1 (es) * | 2007-05-24 | 2009-03-28 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Composicion antigenica liofilizada |
| ES2626662T3 (es) | 2007-06-26 | 2017-07-25 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | Vacuna que comprende conjugados de polisacárido capsular de Streptococcus pneumoniae |
| GB0713880D0 (en) | 2007-07-17 | 2007-08-29 | Novartis Ag | Conjugate purification |
| AU2008280799B2 (en) * | 2007-07-23 | 2013-07-11 | Sanofi Pasteur Limited | Immunogenic polypeptides and monoclonal antibodies |
| US20160228500A9 (en) * | 2007-07-23 | 2016-08-11 | Martina Ochs | Immunogenic Polypeptides and Monoclonal Antibodies |
| GB0714963D0 (en) | 2007-08-01 | 2007-09-12 | Novartis Ag | Compositions comprising antigens |
| EP2225265A2 (en) * | 2007-09-14 | 2010-09-08 | Katholieke Universiteit Leuven | Streptococcus pneumoniae vaccines |
| CN105044337A (zh) * | 2008-02-01 | 2015-11-11 | 圣诺菲·帕斯图尔有限公司 | 用于诊断肺炎链球菌的试验 |
| CN102015651B (zh) | 2008-03-03 | 2014-12-31 | Irm责任有限公司 | 作为tlr活性调节剂的化合物和组合物 |
| US20120064103A1 (en) | 2009-03-24 | 2012-03-15 | Novartis Ag | Combinations of meningococcal factor h binding protein and pneumococcal saccharide conjugates |
| WO2010144734A1 (en) | 2009-06-10 | 2010-12-16 | Novartis Ag | Benzonaphthyridine-containing vaccines |
| TWI445708B (zh) | 2009-09-02 | 2014-07-21 | Irm Llc | 作為ｔｌｒ活性調節劑之化合物及組合物 |
| US9950062B2 (en) | 2009-09-02 | 2018-04-24 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Compounds and compositions as TLR activity modulators |
| SG178904A1 (en) | 2009-09-10 | 2012-04-27 | Novartis Ag | Combination vaccines against respiratory tract diseases |
| CN101690810B (zh) * | 2009-10-21 | 2011-08-17 | 辽宁益康生物股份有限公司 | 一种鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合征、禽流感四联灭活疫苗佐剂及其制备方法 |
| WO2011057148A1 (en) | 2009-11-05 | 2011-05-12 | Irm Llc | Compounds and compositions as tlr-7 activity modulators |
| WO2011084549A1 (en) | 2009-12-15 | 2011-07-14 | Novartis Ag | Homogeneous suspension of immunopotentiating compounds and uses thereof |
| KR20120107121A (ko) * | 2009-12-22 | 2012-09-28 | 사노피 파스퇴르 리미티드 | 면역원성 조성물 |
| CA2784447A1 (en) | 2009-12-22 | 2011-06-30 | Sanofi Pasteur Limited | Adjuvanted immunogenic compositions and related methods |
| GB201003920D0 (en) * | 2010-03-09 | 2010-04-21 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Method of treatment |
| GB201003922D0 (en) | 2010-03-09 | 2010-04-21 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Conjugation process |
| AU2011232421B2 (en) | 2010-03-23 | 2015-08-13 | Novartis Ag | Compounds (cystein based lipopeptides) and compositions as TLR2 agonists used for treating infections, inflammations, respiratory diseases etc. |
| WO2012072769A1 (en) | 2010-12-01 | 2012-06-07 | Novartis Ag | Pneumococcal rrgb epitopes and clade combinations |
| RU2589256C2 (ru) * | 2010-12-03 | 2016-07-10 | Санофи Пастер Лимитид | Композиции и способы для иммунизации против streptococcus pneumoniae |
| WO2012156391A1 (en) * | 2011-05-17 | 2012-11-22 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | Vaccine against streptococcus pneumoniae |
| CN104519910B (zh) | 2012-03-07 | 2017-05-03 | 诺华股份有限公司 | 肺炎链球菌抗原的含佐剂制剂 |
| JP2014000016A (ja) * | 2012-06-15 | 2014-01-09 | National Agriculture & Food Research Organization | 豚丹毒菌の新規な抗原タンパク質、その遺伝子、及び組換えベクターとその利用 |
| RU2510281C2 (ru) * | 2012-06-22 | 2014-03-27 | Общество с ограниченной ответственностью "Эпитоп" (ООО "Эпитоп") | ВАКЦИНА ПРОТИВ ПНЕВМОНИИ, ВЫЗЫВАЕМОЙ Streptococcus pneumoniae, НА ОСНОВЕ ГИБРИДНОГО БЕЛКА |
| ES2640320T3 (es) * | 2012-10-17 | 2017-11-02 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | Composición inmunogénica que comprende 1 o más conjugados de sacáridos capsulares de Streptococcus pneumoniae y un componente proteico que comprende proteína E y/o PilA de Haemophilus influenzae |
| GB201218660D0 (en) | 2012-10-17 | 2012-11-28 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Immunogenic composition |
| CN104870193B (zh) | 2013-01-01 | 2017-12-22 | 爱克发印艺公司 | (乙烯、乙烯醇缩醛)共聚物和它们在平版印刷版前体中的用途 |
| EP2950819B1 (en) | 2013-02-01 | 2018-03-28 | GlaxoSmithKline Biologicals SA | Intradermal delivery of immunological compositions comprising toll-like receptor agonists |
| US11160855B2 (en) | 2014-01-21 | 2021-11-02 | Pfizer Inc. | Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof |
| US20150344530A1 (en) * | 2014-05-29 | 2015-12-03 | Subhash V. Kapre | Synthetic Peptides as Carriers for Conjugation with Polysaccharides |
| US9107906B1 (en) | 2014-10-28 | 2015-08-18 | Adma Biologics, Inc. | Compositions and methods for the treatment of immunodeficiency |
| BR112018068758A2 (pt) | 2016-03-16 | 2019-01-22 | Agfa Nv | método e aparelho para processar uma chapa de impressão litográfica |
| US11844829B2 (en) | 2016-12-28 | 2023-12-19 | Zalvac Ab | Microparticles from Streptococcus pneumoniae as vaccine antigens |
| US10259865B2 (en) | 2017-03-15 | 2019-04-16 | Adma Biologics, Inc. | Anti-pneumococcal hyperimmune globulin for the treatment and prevention of pneumococcal infection |
| US10729763B2 (en) | 2017-06-10 | 2020-08-04 | Inventprise, Llc | Mixtures of polysaccharide-protein pegylated compounds |
| AU2018280272C1 (en) | 2017-06-10 | 2021-05-06 | Inventprise, Inc. | Multivalent conjugate vaccines with bivalent or multivalent conjugate polysaccharides that provide improved immunogenicity and avidity |
| EP4410802A3 (en) | 2018-02-12 | 2024-10-30 | Inimmune Corporation | Toll-like receptor ligands |
| CA3133185A1 (en) * | 2019-03-13 | 2020-09-17 | St. Jude Children's Research Hospital | Vaccine compositions and methods for reducing transmission of streptococcus pneumoniae |
| EP3778253A1 (en) | 2019-08-13 | 2021-02-17 | Agfa Nv | Method for processing a lithographic printing plate |
| WO2022035816A1 (en) | 2020-08-10 | 2022-02-17 | Inventprise, Llc | Multivalent pneumococcal glycoconjugate vaccines containing emerging serotype 24f |
| KR20230117105A (ko) | 2020-11-04 | 2023-08-07 | 엘리고 바이오사이언스 | 큐티박테리움 아크네스 재조합 파지, 그의 제조 방법 및 용도 |
| WO2024239063A1 (en) * | 2023-05-22 | 2024-11-28 | Gpn Vaccines Pty Ltd | Modified streptococcal immunogen and uses thereof |
Family Cites Families (94)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4235877A (en) | 1979-06-27 | 1980-11-25 | Merck & Co., Inc. | Liposome particle containing viral or bacterial antigenic subunit |
| US4372945A (en) | 1979-11-13 | 1983-02-08 | Likhite Vilas V | Antigen compounds |
| IL61904A (en) | 1981-01-13 | 1985-07-31 | Yeda Res & Dev | Synthetic vaccine against influenza virus infections comprising a synthetic peptide and process for producing same |
| BE889979A (fr) | 1981-08-14 | 1982-02-15 | Smith Kline Rit | Procede de preparation de polysaccharides bacteriens capsulaires antigeniques purifies, produits obtenus et leur utilisation |
| US5360897A (en) * | 1981-08-31 | 1994-11-01 | The University Of Rochester | Immunogenic conjugates of streptococcus pneumonial capsular polymer and toxin or in toxiad |
| US4761283A (en) * | 1983-07-05 | 1988-08-02 | The University Of Rochester | Immunogenic conjugates |
| US4882317A (en) * | 1984-05-10 | 1989-11-21 | Merck & Co., Inc. | Covalently-modified bacterial polysaccharides, stable covalent conjugates of such polysaccharides and immunogenic proteins with bigeneric spacers and methods of preparing such polysaccharides and conjugataes and of confirming covalency |
| US4596556A (en) | 1985-03-25 | 1986-06-24 | Bioject, Inc. | Hypodermic injection apparatus |
| US4709017A (en) | 1985-06-07 | 1987-11-24 | President And Fellows Of Harvard College | Modified toxic vaccines |
| US5173294A (en) | 1986-11-18 | 1992-12-22 | Research Foundation Of State University Of New York | Dna probe for the identification of haemophilus influenzae |
| US4790824A (en) | 1987-06-19 | 1988-12-13 | Bioject, Inc. | Non-invasive hypodermic injection device |
| US4941880A (en) | 1987-06-19 | 1990-07-17 | Bioject, Inc. | Pre-filled ampule and non-invasive hypodermic injection device assembly |
| US4940460A (en) | 1987-06-19 | 1990-07-10 | Bioject, Inc. | Patient-fillable and non-invasive hypodermic injection device assembly |
| US5339163A (en) | 1988-03-16 | 1994-08-16 | Canon Kabushiki Kaisha | Automatic exposure control device using plural image plane detection areas |
| US4912094B1 (en) | 1988-06-29 | 1994-02-15 | Ribi Immunochem Research Inc. | Modified lipopolysaccharides and process of preparation |
| US5006914A (en) * | 1988-12-02 | 1991-04-09 | Advanced Technology Materials, Inc. | Single crystal semiconductor substrate articles and semiconductor devices comprising same |
| EP0449856B1 (en) * | 1988-12-16 | 2001-09-12 | De Staat Der Nederlanden Vertegenwoordigd Door De Minister Van Welzijn, Volksgezondheid En Cultuur | Pneumolysin mutants and pneumococcal vaccines made therefrom |
| US5064413A (en) | 1989-11-09 | 1991-11-12 | Bioject, Inc. | Needleless hypodermic injection device |
| US5312335A (en) | 1989-11-09 | 1994-05-17 | Bioject Inc. | Needleless hypodermic injection device |
| SE466259B (sv) | 1990-05-31 | 1992-01-20 | Arne Forsgren | Protein d - ett igd-bindande protein fraan haemophilus influenzae, samt anvaendning av detta foer analys, vacciner och uppreningsaendamaal |
| CA2059693C (en) | 1991-01-28 | 2003-08-19 | Peter J. Kniskern | Polysaccharide antigens from streptococcus pneumoniae |
| CA2059692C (en) * | 1991-01-28 | 2004-11-16 | Peter J. Kniskern | Pneumoccoccal polysaccharide conjugate vaccine |
| US6592876B1 (en) | 1993-04-20 | 2003-07-15 | Uab Research Foundation | Pneumococcal genes, portions thereof, expression products therefrom, and uses of such genes, portions and products |
| EP0571538B1 (en) | 1991-02-15 | 1998-07-08 | The Uab Research Foundation | Structural gene of pneumococcal protein |
| US5980909A (en) * | 1991-02-15 | 1999-11-09 | Uab Research Foundation | Epitopic regions of pneumococcal surface protein A |
| US5476929A (en) | 1991-02-15 | 1995-12-19 | Uab Research Foundation | Structural gene of pneumococcal protein |
| US5552146A (en) | 1991-08-15 | 1996-09-03 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Methods and compositions relating to useful antigens of Moraxella catarrhalis |
| GB9118204D0 (en) | 1991-08-23 | 1991-10-09 | Weston Terence E | Needle-less injector |
| US5371197A (en) * | 1991-09-24 | 1994-12-06 | Merck & Co., Inc. | Protein-dimeric polysaccharide conjugate vaccine |
| CA2138137C (en) | 1992-06-18 | 2004-11-09 | R. John Collier | Diphtheria toxin vaccines |
| SG90042A1 (en) | 1992-06-25 | 2002-07-23 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccine composition containing adjuvants |
| US5383851A (en) | 1992-07-24 | 1995-01-24 | Bioject Inc. | Needleless hypodermic injection device |
| DK0618813T3 (da) * | 1992-09-16 | 2002-03-11 | Univ Tennessee Res Corp | Antigen for M-hybridprotein og bærer for gruppe A streptococcal vaccine |
| US5569189A (en) | 1992-09-28 | 1996-10-29 | Equidyne Systems, Inc. | hypodermic jet injector |
| US5334144A (en) | 1992-10-30 | 1994-08-02 | Becton, Dickinson And Company | Single use disposable needleless injector |
| GB9224584D0 (en) | 1992-11-23 | 1993-01-13 | Connaught Lab | Use of outer membrane protein d15 and its peptides as vaccine against haempohilus influenzae diseases |
| BR9405957A (pt) | 1993-03-23 | 1995-12-12 | Smithkline Beecham Biolog | Composições de vacina contendo lipidio A deacilatado 3-0 monofosforil |
| DK0699076T3 (da) | 1993-05-18 | 2003-03-03 | Univ Ohio State Res Found | Vaccine mod mellemørebetændelse |
| EP0720485B1 (en) | 1993-09-22 | 2003-11-19 | Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine | Method of activating soluble carbohydrate using novel cyanylating reagents for the production of immunogenic constructs |
| GB9326253D0 (en) * | 1993-12-23 | 1994-02-23 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccines |
| WO1995024176A1 (en) | 1994-03-07 | 1995-09-14 | Bioject, Inc. | Ampule filling device |
| US5466220A (en) | 1994-03-08 | 1995-11-14 | Bioject, Inc. | Drug vial mixing and transfer device |
| US5866135A (en) * | 1994-04-21 | 1999-02-02 | North American Vaccine, Inc. | Group A streptococcal polysaccharide immunogenic compositions and methods |
| US5917017A (en) | 1994-06-08 | 1999-06-29 | President And Fellows Of Harvard College | Diphtheria toxin vaccines bearing a mutated R domain |
| CA2560114A1 (en) | 1994-07-15 | 1996-02-01 | The University Of Iowa Research Foundation | Immunomodulatory oligonucleotides |
| US5565204A (en) * | 1994-08-24 | 1996-10-15 | American Cyanamid Company | Pneumococcal polysaccharide-recombinant pneumolysin conjugate vaccines for immunization against pneumococcal infections |
| US5599302A (en) | 1995-01-09 | 1997-02-04 | Medi-Ject Corporation | Medical injection system and method, gas spring thereof and launching device using gas spring |
| UA56132C2 (uk) | 1995-04-25 | 2003-05-15 | Смітклайн Бічем Байолоджікалс С.А. | Композиція вакцини (варіанти), спосіб стабілізації qs21 відносно гідролізу (варіанти), спосіб приготування композиції вакцини |
| US6440425B1 (en) | 1995-05-01 | 2002-08-27 | Aventis Pasteur Limited | High molecular weight major outer membrane protein of moraxella |
| US5730723A (en) | 1995-10-10 | 1998-03-24 | Visionary Medical Products Corporation, Inc. | Gas pressured needle-less injection device and method |
| US5843464A (en) | 1995-06-02 | 1998-12-01 | The Ohio State University | Synthetic chimeric fimbrin peptides |
| EP0832238A1 (en) | 1995-06-07 | 1998-04-01 | Biochem Vaccines Inc. | Streptococcal heat shock proteins members of the hsp70 family |
| GB9513074D0 (en) | 1995-06-27 | 1995-08-30 | Cortecs Ltd | Novel anigen |
| US6290970B1 (en) | 1995-10-11 | 2001-09-18 | Aventis Pasteur Limited | Transferrin receptor protein of Moraxella |
| US5893397A (en) | 1996-01-12 | 1999-04-13 | Bioject Inc. | Medication vial/syringe liquid-transfer apparatus |
| US6090576A (en) | 1996-03-08 | 2000-07-18 | Connaught Laboratories Limited | DNA encoding a transferrin receptor of Moraxella |
| GB9607549D0 (en) | 1996-04-11 | 1996-06-12 | Weston Medical Ltd | Spring-powered dispensing device |
| JP2000511411A (ja) | 1996-05-01 | 2000-09-05 | ザ ロックフェラー ユニヴァーシティ | 抗―肺炎球菌ワクチン用のコリン結合タンパク質 |
| US6245335B1 (en) * | 1996-05-01 | 2001-06-12 | The Rockefeller University | Choline binding proteins for anti-pneumococcal vaccines |
| US5744417A (en) | 1996-05-02 | 1998-04-28 | Lyondell Petrochemical Company | Supported catalyst |
| US7341727B1 (en) | 1996-05-03 | 2008-03-11 | Emergent Product Development Gaithersburg Inc. | M. catarrhalis outer membrane protein-106 polypeptide, methods of eliciting an immune response comprising same |
| US6230051B1 (en) | 1996-06-18 | 2001-05-08 | Alza Corporation | Device for enhancing transdermal agent delivery or sampling |
| JP2000514308A (ja) | 1996-08-16 | 2000-10-31 | スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション | 新規原核生物ポリヌクレオチド、ポリペプチドおよびそれらの使用 |
| US5882896A (en) | 1996-09-24 | 1999-03-16 | Smithkline Beecham Corporation | M protein |
| US5882871A (en) | 1996-09-24 | 1999-03-16 | Smithkline Beecham Corporation | Saliva binding protein |
| PT942983E (pt) * | 1996-10-31 | 2007-02-28 | Human Genome Sciences Inc | Antigénios e vacinas de streptococcus pneumoniae |
| WO1998021337A2 (en) | 1996-11-12 | 1998-05-22 | Regents Of The University Of Minnesota | C3 BINDING PROTEIN OF $i(STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE) |
| US5980898A (en) | 1996-11-14 | 1999-11-09 | The United States Of America As Represented By The U.S. Army Medical Research & Material Command | Adjuvant for transcutaneous immunization |
| KR100453132B1 (ko) | 1996-12-20 | 2004-10-15 | 앨자 코포레이션 | 경피 약제 플럭스를 향상시키기 위한 장치 및 방법 |
| DE19708537A1 (de) | 1997-03-03 | 1998-09-10 | Biotechnolog Forschung Gmbh | Neues Oberflächenprotein (SpsA-Protein) von Streptococcus pneumoniae etc. |
| FR2763244B1 (fr) * | 1997-05-14 | 2003-08-01 | Pasteur Merieux Serums Vacc | Composition vaccinale multivalente a porteur mixte |
| US5993412A (en) | 1997-05-19 | 1999-11-30 | Bioject, Inc. | Injection apparatus |
| ATE380867T1 (de) | 1997-06-03 | 2007-12-15 | Sanofi Pasteur Ltd | Lactoferrinrezeptorgen von moraxella |
| HUP0002475A3 (en) * | 1997-07-21 | 2002-01-28 | Baxter Healthcare S A Wallisel | Modified immunogenic pneumolysin compositions as vaccines |
| WO1999015675A1 (en) | 1997-09-24 | 1999-04-01 | Regents Of The University Of Minnesota | HUMAN COMPLEMENT C3-DEGRADING PROTEINASE FROM $i(STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE) |
| US6224880B1 (en) * | 1997-09-24 | 2001-05-01 | Merck & Co., Inc. | Immunization against Streptococcus pneumoniae using conjugated and unconjugated pneumoccocal polysaccharide vaccines |
| EP0916726A1 (en) * | 1997-11-13 | 1999-05-19 | Rijksuniversiteit te Groningen | Attaching substances to micro-organisms |
| CA2312900A1 (en) | 1997-12-02 | 1999-06-10 | Powderject Vaccines, Inc. | Transdermal delivery of particulate vaccine compositions |
| IT1298087B1 (it) | 1998-01-08 | 1999-12-20 | Fiderm S R L | Dispositivo per il controllo della profondita' di penetrazione di un ago, in particolare applicabile ad una siringa per iniezioni |
| US6709658B1 (en) * | 1998-02-12 | 2004-03-23 | Wyeth Holdings Corporation | Pneumococcal vaccines formulated with interleukin-12 |
| AU3479699A (en) | 1998-04-07 | 1999-10-25 | St. Jude Children's Research Hospital | A polypeptide comprising the amino acid of an n-terminal choline binding proteina truncate, vaccine derived therefrom and uses thereof |
| EP1067962B1 (en) | 1998-04-07 | 2010-03-24 | MedImmune, LLC | Derivatives of pneumococcal choline binding proteins for vaccines |
| WO1999053940A1 (en) | 1998-04-23 | 1999-10-28 | Uab Research Foundation | PNEUMOCOCCAL SURFACE PROTEIN C(PspC), EPITOPIC REGIONS AND STRAIN SELECTION THEREOF, AND USES THEREFOR |
| GB9812613D0 (en) | 1998-06-11 | 1998-08-12 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccine |
| MXPA01003073A (es) | 1998-09-24 | 2002-04-24 | Univ Minnesota | Polipeptido que degrada la proteina c3 complementaria humana a partir de streptococcus pneumoniae. |
| WO2000030299A1 (en) | 1998-11-17 | 2000-05-25 | Schlumberger Technology Corporation | Transmitting information over a communication link |
| WO2000029434A2 (en) | 1998-11-19 | 2000-05-25 | St. Jude Children's Research Hospital | PNEUMOCOCCAL CHOLINE BINDING PROTEINS, CbpG AND CbpD, DIAGNOSTIC AND THERAPEUTIC USES THEREOF |
| JP4689044B2 (ja) | 1998-12-21 | 2011-05-25 | メディミューン，インコーポレーテッド | ワクチン用の肺炎連鎖球菌タンパク質と免疫原断片 |
| EP1034792A1 (en) * | 1999-03-11 | 2000-09-13 | Pasteur Merieux Serums Et Vaccins | Intranasal delivery of pneumococcal polysaccharide vaccines |
| PL203917B1 (pl) * | 1999-03-19 | 2009-11-30 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Kompozycja immunogenna, sposób jej wytwarzania oraz zastosowanie |
| JP2003501110A (ja) | 1999-06-10 | 2003-01-14 | メディミューン，インコーポレーテッド | 肺炎連鎖球菌タンパク質とワクチン |
| MXPA01012721A (es) * | 1999-06-10 | 2004-10-14 | Uab Research Foundation | Vacuna de combinacion de proteinas de superficie neumococcicas. |
| US6319224B1 (en) | 1999-08-20 | 2001-11-20 | Bioject Medical Technologies Inc. | Intradermal injection system for injecting DNA-based injectables into humans |
| US6494865B1 (en) | 1999-10-14 | 2002-12-17 | Becton Dickinson And Company | Intradermal delivery device including a needle assembly |
-
2000
- 2000-09-15 GB GBGB0022742.1A patent/GB0022742D0/en not_active Ceased
-
2001
- 2001-09-12 CA CA2421998A patent/CA2421998C/en not_active Expired - Fee Related
- 2001-09-12 HU HU0301043A patent/HUP0301043A3/hu not_active Application Discontinuation
- 2001-09-12 CZ CZ2003-756A patent/CZ305324B6/cs not_active IP Right Cessation
- 2001-09-12 JP JP2002526417A patent/JP4880184B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2001-09-12 HU HU0301092A patent/HUP0301092A3/hu unknown
- 2001-09-12 EP EP09173889.8A patent/EP2140878B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-09-12 CN CN2009101285337A patent/CN101502648B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2001-09-12 JP JP2002526416A patent/JP4903975B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2001-09-12 EP EP10179135A patent/EP2305298A1/en not_active Withdrawn
- 2001-09-12 AU AU2002220548A patent/AU2002220548B2/en not_active Ceased
- 2001-09-12 EP EP10179133A patent/EP2305297A1/en not_active Ceased
- 2001-09-12 IL IL15460801A patent/IL154608A0/xx unknown
- 2001-09-12 CN CNB018157483A patent/CN1253205C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2001-09-12 IL IL15460701A patent/IL154607A0/xx unknown
- 2001-09-12 AU AU3819302A patent/AU3819302A/xx active Pending
- 2001-09-12 US US10/380,575 patent/US20060051361A1/en not_active Abandoned
- 2001-09-12 KR KR1020087020661A patent/KR100991916B1/ko not_active Expired - Fee Related
- 2001-09-12 EP EP10178332.2A patent/EP2314313B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-09-12 KR KR1020107014638A patent/KR20100091241A/ko not_active Ceased
- 2001-09-12 PL PL361395A patent/PL209247B1/pl unknown
- 2001-09-12 MX MXPA03002265A patent/MXPA03002265A/es active IP Right Grant
- 2001-09-12 AU AU2054802A patent/AU2054802A/xx active Pending
- 2001-09-12 PL PL361401A patent/PL210198B1/pl unknown
- 2001-09-12 BR BR0113821-9A patent/BR0113821A/pt not_active Application Discontinuation
- 2001-09-12 CA CA2422002A patent/CA2422002C/en not_active Expired - Fee Related
- 2001-09-12 NZ NZ524287A patent/NZ524287A/en not_active IP Right Cessation
- 2001-09-12 SI SI200131001T patent/SI1317279T1/sl unknown
- 2001-09-12 US US10/380,563 patent/US20040081662A1/en not_active Abandoned
- 2001-09-12 ES ES01984627.8T patent/ES2545876T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-09-12 EP EP01984626A patent/EP1317279B1/en not_active Revoked
- 2001-09-12 CN CNB018157467A patent/CN100486642C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2001-09-12 DK DK01984626.0T patent/DK1317279T3/da active
- 2001-09-12 KR KR10-2003-7003732A patent/KR20030031188A/ko not_active Ceased
- 2001-09-12 AT AT01984626T patent/ATE516815T1/de active
- 2001-09-12 ES ES01984626T patent/ES2368902T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-09-12 CZ CZ2003-757A patent/CZ305343B6/cs not_active IP Right Cessation
- 2001-09-12 WO PCT/EP2001/010570 patent/WO2002022168A2/en active Application Filing
- 2001-09-12 WO PCT/EP2001/010568 patent/WO2002022167A2/en active Search and Examination
- 2001-09-12 NZ NZ524286A patent/NZ524286A/en not_active IP Right Cessation
- 2001-09-12 KR KR1020037003731A patent/KR100805991B1/ko not_active Expired - Fee Related
- 2001-09-12 EP EP01984627.8A patent/EP1317280B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-09-12 BR BR0113822-7A patent/BR0113822A/pt not_active IP Right Cessation
- 2001-09-12 PT PT01984626T patent/PT1317279E/pt unknown
- 2001-09-12 KR KR1020117026231A patent/KR101268790B1/ko not_active Expired - Fee Related
- 2001-09-12 AU AU2002238193A patent/AU2002238193B2/en not_active Ceased
- 2001-09-12 MX MXPA03002264A patent/MXPA03002264A/es active IP Right Grant
- 2001-09-12 ES ES09173889.8T patent/ES2551097T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-09-12 ES ES10178332.2T patent/ES2659400T3/es not_active Expired - Lifetime
-
2003
- 2003-02-24 IL IL154608A patent/IL154608A/en not_active IP Right Cessation
- 2003-02-24 IL IL154607A patent/IL154607A/en not_active IP Right Cessation
- 2003-02-25 ZA ZA200301526A patent/ZA200301526B/en unknown
- 2003-02-25 ZA ZA200301524A patent/ZA200301524B/en unknown
- 2003-03-14 NO NO20031183A patent/NO336186B1/no not_active IP Right Cessation
- 2003-03-14 NO NO20031184A patent/NO337730B1/no not_active IP Right Cessation
-
2007
- 2007-05-07 US US11/745,006 patent/US20080081050A1/en not_active Abandoned
-
2010
- 2010-08-13 US US12/855,734 patent/US20110008419A1/en not_active Abandoned
-
2011
- 2011-09-12 JP JP2011198277A patent/JP2012006969A/ja active Pending
- 2011-10-06 CY CY20111100958T patent/CY1111915T1/el unknown
-
2013
- 2013-12-10 US US14/101,995 patent/US20140099339A1/en not_active Abandoned
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP1317280B1 (en) | Vaccine against streptococcus pneumoniae | |
| AU2002238193A1 (en) | Vaccine against streptococcus pneumoniae | |
| AU2002220548A1 (en) | Vaccine against streptococcus penumoniae | |
| HK1136785A (en) | Vaccine against streptococcus pneumoniae | |
| HK1057698B (en) | Vaccine against streptococcus pneumoniae |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20150912 |