CZ20032958A3 - Anti-inflammatory 17.beta.-carbothioate ester derivatives of androstane with a cyclic ester group in position 17.alpha - Google Patents

Description

Oblast techniky

Předkládaný vynález se týká nových protizánětlivých a protialergických sloučenin ze skupiny androstanu a způsobu jejich výroby. Dále se předkládaný vynález týká farmaceutických prostředků obsahujících tyto sloučeniny a jejich léčebného využití, zvláště pro léčbu zánětlivých a alergických stavů.

ž-šw

Dosavadní stav techniky

Glukokortikoidy, které mají protizánětIivé vlastnosti, jsou známé a široce používané pro léčbu zánětlivých poruch nebo onemocnění jako astmatu a rinitidy (zánětu nosní sliznice, rýmy). US patent č. 4 335 121 například předkládá S-fluormethylester 6a,9a-difluor-17a-(1 -oxo-propoxy)-113-hydroxy-16a-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-173-karbothiové kyseliny (známý pod rodovým označením propionát fluticasonu) a jeho deriváty.

Použití glukokortikoidů obecně a zvláště pak u dětí bylo do určité míry omezováno možnými vedlejšími účinky. Vedlejší účinky, spojované s glukokortikoidy, zahrnují supresi osy hypothalamus-hypofýzanadledvinky (HPA, hypothalamic-pituitary-adrenal axis), účinky na růst kostí u dětí a na hustotu kostí u starších osob, oční komplikace íí. (vytváření zákalu a zeleného očního zákalu) a atrofie pokožky. Některé glukokortikoidní sloučeniny mají také komplexní vazby v metabolismu, kde tvorba aktivních metabolitů může činit farmakodynamiku a farmakokinetiku takových sloučenin obtížně srozumitelnou. I když moderní steroidy jsou daleko bezpečnější než ty, které byly původně předloženy, stále zůstává předmětem výzkumu vytvoření nových • ·

molekul, majících vynikající protizánětlivé vlastnosti, předvídatelné farmakokinetické a farmakodynamické vlastnosti, přitažlivý profil vedlejších účinků a vyhovující léčebný režim.

Určité nové androstanové deriváty jsou uvedeny ve WO 02/12 265 a ve WO 02/12 266 (Glaxo Group) přičemž oba tyto dokumenty byly zveřejněny až po nejdřívějším datu přednosti této patentové přihlášky.

Podstata vynálezu

Původci tohoto vynálezu identifikovali nové řady glukokortikoidů, které v podstatě vyhovují výše uvedeným požadavkům.

V jednom aspektu tohoto vynálezu je zde tedy poskytnuta sloučenina o vzorci (I)

kde ‘ R- představuje C₁.₆alkyl nebo C^ghalogenalkyl;

R₂ představuje C₃.₈cykloalkyl nebo C₃.₈cykloalkenyl, z nichž každý může být volitelně substituován jednou nebo více ze skupin, zvolených z oxoskupiny, methylu, methylenu, halogenu;

R₃ představuje vodíkový atom, methyl (který může být buď v konfiguraci alfa nebo beta), nebo methylen;

R₄ a R₅ jsou stejné nebo odlišné a každý představuje vodíkový atom nebo halogen; a

;---1-představuje jednoduchou nebo dvojitou vazbu;

a solváty takových sloučenin.

Příklady solvátů zahrnují hydráty.

Odkazy zde uvedené na sloučeniny podle tohoto vynálezu zahrnují jak sloučeniny podle vzorce (I), tak i jejich solváty.

' Bude zřejmé, že tento vynález zahrnuje do svého rozsahu veškeré stereoizomery (včetně enantiomeru a diastereoizomerů) sloučenin o vzorci (I) a jejich směsi.

Příklady C^ghalogenalkylu, který může představovat zahrnují C.,_₆alkyl substituovaný 1-3 halogenovými atomy a s výhodou jedním halogenovým atomem. Upřednostňované halogenové atomy jsou zvoleny z bromu, chloru a fluoru.

Příklady C₃.₈cykloalkylových skupin, které může představovat zbytek R₂, zahrnují cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl a cyklohexyl a substituované deriváty jako methylcyklopropyl (například 1 -methylcyklopropyl nebo 2-methylcyklopropyl), dichlorcyklopropyl (například 2,2-dichlorpropyl), methyldichlorcyklopropyl (například 1-methyl-2,2-dichlorcyklopropyl), exomethylencyklobutyl (například 3-exomethylencyklobutyl), tetramethylcyklopropyl (například 2,2,3,3-tetramethylcyklopropyl) a met* thylcyklobutyl (například 1-methylcyklobutyl). Další příklady zahrnují dimethylcyklobutyl (například 3,3-dimethylcyklobutyl), difluorcyklobutyl (například 3,3-difluorcyklobutyl), methylcyklopentyl (například 1-methylcyklopentyl). Ještě další příklad zahrnuje oxocyklobutyl (například

3-oxocyklobutyl).

Příklady C₃.₈cykloalkenylových skupin, které může představovat R₂, zahrnují alkenylové skupiny, obsahující jednu nebo více dvojných

» · · · φ

- 4 vazeb (ne však aromatické skupiny), jako cyklohexenyl, například cyklohex-2,3-enyl.

Původci tohoto vynálezu upřednostňují, aby R, představoval fluormethyl, chlormethyl, brommethyl nebo 2'-fluorethyl a zvláště fluormethyl.

R₂ s výhodou představuje C₃.₈cykloalkyl nebo C₃.₈cykloalkenyl, '^rř přičemž každý z nich může být volitelně substituován jednou nebo více skupinami, zvolenými z methylu, methylenu a halogenu. V jiném aspektu R₂ představuje C₃.₈cykloalkyl nebo C₃.₈cykloalkenyl, přičemž každý z nich může být substituován oxosloučeninou, například 3-oxocyklobutylem.

Původci tohoto vynálezu upřednostňují, aby R₂ představoval C₃.₈cykloalkyl, volitelně substituovaný jednou nebo více z methylových a/nebo halogenových skupin. Zvláště pak upřednostňují, aby R₂ představoval C₃.₆cykloalkyl, a ještě lépe C₃.₄cykloalkyl, volitelně substituovaný jednou nebo více z methylových nebo chlorových skupin.

Původci předkládaného vynálezu také upřednostňují, aby R₂ představoval C₃.₆cykloalkyl, substituovaný methylenem.

V jedné skupině upřednostňovaných sloučenin je R₂ nesubstituovaný, nebo substituovaný nejvýše jednou methylovou nebo •5 chlorovou skupinou. Ještě lépe je R₂ substituovaný jednou methylovou & skupinou, zvláště pak v poloze 1, například 1-methylcyklopropylen nebo

1-methylcyklobutylem.

V jiné skupině upřednostňovaných sloučenin je R₂ substituovaný více než jednou methylovou skupinou, například 2,2,3,3-tetramethylcyklopropylem.

Původci tohoto vynálezu upřednostňují, aby R₃ představoval methyl a zvláště methyl v konfiguraci alfa.

Upřednostňovány jsou sloučeniny o vzorci (I) u nichž zbytky R₄ a R_s, které mohou být shodné nebo odlišné, každý představuje vodíkový atom, fluor nebo chlor a zejména vodíkový atom nebo fluor. Zvláště upřednostňovány jsou sloučeniny, u nichž jsou R₄ i R₅ představovány fluorovým atomem.

Výraz *s výhodou představuje dvojnou vazbu.

Je třeba chápat, že předkládaný vynález zahrnuje veškeré kombinace zvláštních a upřednostňovaných skupin, které byly uvedeny výše.

Upřednostňované sloučeniny o vzorci (I) zahrnují:

S-fluormethylester 17a-(cyklobutylkarbonyl)oxy-6a,9a-difluor-11 β-hydroxy-16a-methyl-3-oxoandrosta-1,4-dien-17β·^3ή3θΐΙιΐονέ kyseliny; S-fluormethylester 17a-(cyklopentyl karbony l)oxy-6ot,9ct-difluor-11β-hydroxy-16cc-methyl-3-oxoandrosta-1,4-dien-173-karbothiové kyseliny; S-fluormethylester 17a-(cyklohexylkarbonyl)oxy-6a,9a-difluor-11 β-hydroxy-16ct-methyl-3-oxoandrosta-1,4-dien-17p-karbothiové kyseliny; S-fluormethylester 17a-(cyklopropylkarbonyl)oxy-6a,9a-difluor-11 β-hydroxy-16a-methyl-3-oxoandrosta-1,4-dien-17p-karbothiové kyseliny; S-fluormethylester 6ct,9a-difluor-11 β-hydroxy-l6ct-methyM 7a-(1 -methy lcyklopropylkarbonyl)oxy-3-oxo-androsta-1 ,4-dien-17p-karbothiové kyseliny;

S-fluormethylester-6a,9oc-difluor-11 β-hydroxy-l 6a-methyl-3-oxo-17a-(2,2,3,3-tetramethyl-cyklopropylkarbonyl)oxy-androsta-1,4-dien-17β-karbothiové kyseliny;

S-fluormethylester 17a-(2,2-dichlor-1 -methylcyklopropylkarbonyl)oxy-6a,9a-difluor-11 β-hydroxy-l 6a-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17 βkarbothiové kyseliny;

S-fluormethylester 17a-(2,2-dichlorcyklopropylkarbonyl)oxy-6a,9adifluor-11 β-hydroxy-l 6a-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17βkarbothiové kyseliny;

S-fluormethylester 6α,9a- difluor-11 β-hydroxy-l6a-methyl-17a-(3-methylencyklobutylkarbonyl)oxy-3-oxo-androsta-1,4-dien-17p-karbothiové ’Γ kyseliny;

-r·’ S-fluormethylester 6a,9a- difluor-11p-hydroxy-16a-methyl-17a-(2-methylcyklopropylkarbonyl)oxy-3-oxo-androsta-1,4-dien-17p-karbothiové kyseliny;

S-fluormethylester 6a,9a- difluor-11 p-hydroxy-16a-methyl-17a-(1-methylcyklobutylkarbonyl)oxy-3-oxo-androsta-1,4-dien-17p-karbothiové kyseliny;

S-fluormethylester 6a,9a-difluor-17a-(3,3-dimethylcyklobutylkarbonyl)oxy-11 β-hydroxy-l 6a-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17p-karbothiové kyseliny;

S-fluormethylester 6a,9a-difluor-17a-(3,3-difluorcyklobutylkarbonyl)oxy-11 p-hydroxy-16a-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17P-karbothiové kyseliny;

S-fluormethylester 6a,9a-difluor-11 β-hydroxy-l6a-methy 1-17a-(1 -methy lcyklopentylkarbonyl)oxy-3-oxo-androsta-1 ,4-dien-17p-karbothiové kyseliny;

S-fluormethylester 6a,9a-difluor-11 β-hydroxy-l6a-methyl-3-oxo-17a-(3-oxocyklo.butylkarbonyl)oxy-androsta-1,4-dien-17p-karbothiove kyseliny.

Zvláště upřednostňovanou sloučeninou je:

- 7 S-fluormethylester 6α,9α- difluor-11 p-hydroxy-16a-methyl-17α-(1 - methylcyklopropylkarbonyl)oxy-3-oxó-androsta-1,4 - dien - 173-karbothiové kyseliny.

Jinou zvláště upřednostňovanou sloučeninou je:

S-fluormethylester 6a,9a-difluor-11 β-hydroxy-l 6a-methyl-3-oxo-17a -(2,2,3,3-tetramethylcyklopropylkarbonyl)oxy-androsta- 1,4 - dien - 17β karbothiové kyseliny.

Jinou zvláště upřednostňovanou sloučeninou je:

S-fluormethylester 6a,9a-difluor-11 β-hydroxy-l6a-methyl-17a -(1-methylcyklobutylkarbonyl)oxy-3-oxo-androsta-1,4-dien- 17β - karbo thiové kyseliny.

Sloučeniny o vzorci (I) mají potenciálně příznivé protizánětlivé nebo protialergické účinky, zvláště při místním podání, které jsou prokázány například jejich schopností vázat se na glukokortikoidový receptor a nedovolit rozvoj odpovědi prostřednictvím tohoto receptoru s dlouhotrvajícím účinkem. Proto jsou sloučeniny o vzorci (I) vhodné pro léčbu zánětlivých a/nebo alergických poruch, zvláště při léčbě podávané jednou za den.

Příklady chorobných stavů, při nichž jsou použitelné sloučeniny podle tohoto vynálezu, zahrnují choroby pokožky jako exém, lupénku, alergickou dermatitidu, neurodermatitidu, svědění a reakce přecitlivělosti; zánětlivé stavy v nose, krku nebo na plících jako astma (včetně alergenem vyvolané astmatické reakce), rhinitidu (včetně senné rýmy), nosní polypy, chronické obstruktivní plicní onemocnění, intersticiální plicní onemocnění a fibrózu; zánětlivé stavy střev jako vředovitou kolitidu a Crohnovu chorobu; a autoimunitní onemocnění jako revmatoidní arthritidu.

• ·	• · • ··· • ·	• · ·	• · • • • ·	• • •	• • • · ·· ··
• • •	« • •	• • « ·	• • •	• · • •
•
•	•	• ·	• ·		• ··	• ·		•

Sloučeniny podle tohoto vynálezu mohou být také použity při léčbě spojivek a zánětu spojivek.

Odborníci v oboru ocení, že zde uvedený odkaz na léčbu je rozšířen i na profylaxi, stejně jako na léčbu zavedených podmínek.

Jak bylo uvedeno výše, sloučeniny o vzorci (I) jsou vhodné pro humánní nebo veterinární lékařství, zejména jako protizánětlivá a protialergická činidla, zvláště pak pro léčbu podávanou jednou za den.

Jako další aspekt tohoto vynálezu je zde proto poskytnuta sloučenina o vzorci (I), nebo fyziologicky přijatelný solvát takové sloučeniny, pro použití v humánním nebo veterinárním lékařství, zvláště pro léčbu pacientů -s zánětlivým a/nebo alergickým onemocněním. Zvláštní pozornost je věnována farmaceutickým prostředkům, určeným pro podávání jednou denně.

Podle jiného aspektu tohoto vynález je zde uvedeno použití sloučeniny o vzorci (I), nebo jejího fyziologicky přijatelného solvátu, pro výrobu léčiva k léčbě pacientů s zánětlivým a/nebo alergickým onemocněním, určeným pro podávání jednou denně.

V ještě dalším nebo alternativním aspektu je zde poskytnut způsob léčby lidského nebo zvířecího subjektu s zánětlivým a/nebo alergickým onemocněním, přičemž tento způsob zahrnuje podávání účinného množství sloučeniny o vzorci (I), nebo jejího fyziologicky přijatelného solvátu, zmíněnému lidskému nebo zvířecímu subjektu a zvláště pak podávání jednou denně.

Sloučeniny podle předkládaného vynálezu mohou být formovány pro podávání jakýmkoliv vhodným způsobem a tento vynález proto do svého rozsahu rovněž zahrnuje farmaceutické prostředky, obsahující

Í-.

·· *· 99 999 99 sloučeninu ο vzorci (I) nebo její fyziologiocky přijatelný solvát, pokud je to žádoucí, ve směsi společně s jedním nebo více z fyziologicky přijatelných ředidel nebo nosičů.

Dále je zde poskytnut způsob výroby takových farmaceutických prostředků, který zahrnuje smísení přísad.

Sloučeniny podle tohoto vynálezu mohou být například formovány pro orální, bukální, sublingvální, parenterální, místní nebo rektální podání a zvláště pro místní póclání?^'*'*'·'·⁷* ' , ......

Tak jak je zde použito, zahrnuje místní podání podávání prostřednictvím insuflace a inhalace. Příklady různých typů prostředků pro místní podání zahrnují masti, pleťové vody, krémy, gely, pěny, prostředky pro transdermální náplastě, prášky, spreje, aerosoly, tobolky nebo zásobníky pro použití v inhalátoru nebo insuflátoru, nebo kapky (například oční nebo nosní kapky), roztoky/suspenze pro rozprašování, čípky, pesary, zádržové klystýry a žvýkací tablety či pelety, nebo tablety či pelety pro rozpouštění v ústech (například pro léčbu aftů), nebo liposomy či mikroopouzdřené prostředky.

Prostředky pro místní podávání do plic výhodně zahrnují suché práškové prostředky a sprejové prostředky.

Suché práškové prostředky pro místní podávání do plic mohou být například předkládány v tobolkách a zásobnících vyrobených ze želatiny, určených pro použití v inhalátoru nebo insuflátoru. Takové prostředky obecně obsahují práškovou směs pro inhalaci, tvořenou sloučeninami podle tohoto vynálezu a vhodným práškovým základem, jako je laktóza nebo škrob. Použití laktózy se upřednostňuje. Každá tobolka nebo zásobník může obecně obsahovat od 20 mikrogramů do 10 mg sloučeniny podle vzorce (I), volitelně v kombinaci s jinou aktivní

přísadou. Alternativně může být sloučenina podle tohoto vynálezu předkládána i bez pomocných látek. Balení přípravku může vyhovovat jednotlivé dávce nebo více dávkám. V případě poskytnutí více dávek může být prostředek předem odměřen (například v zařízení Diskus, viz GB 2 242 134 nebo v zařízení Diskhaler, viz GB 2 178 965, 2 129 691, 2 169 265), nebo je odměřován během použití, například v zařízení Turbuhaler (viz EP 69 715). Příkladem zařízení pro poskytnutí jediné dávky je Rotahaler (viz GB 2 064 336).

Inhalační zařízení Diskus zahrnuje podélní pruh, vytvořený ze základní plochy (plátu), mající množství zahloubení, umístěných podélně, a přiklápěcí plochu, vzduchotěsně, ale odklopitelně ji utěsňující, čímž je vytvořeno množství zásobníků. Každý z těchto zásobníků obsahuje inhalovatelný prostředek s obsahem sloučeniny o vzorci (I), s výhodou doplněný laktózou. Plocha je s výhodou dostatečně pružná k tomu, aby byla svinuta do svitku. Základní plocha a přiklápěcí plocha budou mít s výhodou začáteční části, které nebudou utěsněné jedna ke druhé a alespoň jedna z těchto počátečních částí bude vytvořena tak, aby byla připojena na navíjecí prostředky. Vzduchotěsné utěsnění mezi základní plochou a přiklápěcí plochou je s výhodou rozšířeno na celou jejich šířku. Na začátku základní plochy může být přiklápěcí plocha od této základní plochy s výhodou v podélném směru odloupnuta.

Největší pozornost je věnována farmaceutickým prostředkům, které nejsou v tlakové nádobě a mohou být podávány do plic jako suchý prášek místním způsobem, prostřednictvím ústní dutiny (zvláště takové, které neobsahují pomocnou látku, nebo jsou formovány s ředidlem či nosičem jako je laktóza nebo škrob a zejména laktóza).

Sprejové prostředky mohou být například formovány jako vodné roztoky nebo suspenze, nebo jako aerosoly, poskytované z tlakových

* · • · · ♦ · · · «

- 11 balení, jako jsou inhalátory uvolňující odměřenou dávku, za použití vhodného zkapalněného hnacího média. Aerosolovými prostředky, vhodnými pro inhalace, mohou být buď suspenze nebo roztoky a obecně obsahují sloučeninu vzorce (I) a vhodné hnací medium, jako fluorované uhlovodíkové sloučeniny či chlorofluorované uhlovodíkové sloučeniny nebo jejich směsi, zvláště hydrofluoralkany, zejména

1.1.1.2- tetrafluorethan; 1,1,1,2,3,3,3-heptafluor-n-propan, nebo jejich směsi. Aerosolový prostředek může volitelně obsahovat přídavné pomocné látky, které jsou v oboru dobře známé, jako povrchově aktivní látky, napříklacfkyselinu olejovou nebo lecitin a pomocná rozpouštědla* jako ethanol. Jeden příklad prostředku neobsahuje pomocné látky a sestává v podstatě z (například sestává z) sloučeniny vzorce (I) (s výhodou v nesolvatované formě, jako například ve Formě 1) (volitelně v kombinaci s jiným léčebně účinným činidlem) a z hnacího média, zvoleného z 1,1,1,2-tetrafluorethanu, 1,1,1,2,3,3,3-heptafluor-n-propanu a směsí takových látek. Jiný prostředek například obsahuje sloučeninu o vzorci (I) ve formě částic, hnací médium zvolené z

1.1.1.2- tetrafluorethanu, 1,1,1,2,3,3,3-heptafluor-n-propanu a směsí takových látek, a suspendujícího činidla, které je rozpustné v hnacím médiu, například kyseliny oligomléčné nebo jejího derivátu, jak je popsáno ve WO 94/21 229. Upřednostňovaným hnacím médiem je

1.1.1.2- tetrafluorethan. Jak je uvedeno na jiném místě tohoto popisu vynálezu, nezdá se, že by sloučenina o vzorci (I) s

1.1.2- tetrafluorethanem vytvářela solvát. Prostředky dávkované pod tlakem budou obecně uchovávány v plechovém zásobníku (například v hliníkové nádobce), uzavřeném ventilem (například odměrným ventilem) a vybaveným hnacím členem, opatřeným náústkem.

Léčiva, určená pro podávání inhalačním způsobem, mají kontrolovanou velikost částice. Optimální velikost částice pro inhalaci do systému průdušek je obvykle 1 až 10 mikrometrů a lépe 2 až 5 mikrometrů. Částice o velikosti větší než 20 mikrometrů jsou obecně

příliš velké na to, aby se inhalací dostaly do úzkých oblastí dýchacích cest. K dosažení takových velikostí částice mohou být částice sloučeniny vzorce (I), jak jsou vyráběny, ovlivněny běžnými prostředky pro zmenšení velikosti částice, například mikromletím. Požadovaný podíl může být oddělen proséváním, nebo pomocí vzduchového třídiče. Částice budou s výhodou krystalické, připravené například způsobem, zahrnujícím míchání tekoucího roztoku sloučeniny vzorce (I) jako léčiva v kapalném rozpouštědle s protékajícím tekutým antirozpouštědlem uvedeného léčiva v spojité průtokové nádobě za přítomnosti ultrazvuku (jak je například popsáno v mezinárodní patentové přihlášce PCT/GB 99/04 368).

Jinou možností je způsob, který zahrnuje přivádění proudu roztoku látky v tekutém rozpouštědle a proudu tekutého antirozpouštědla uvedené látky kolmo na sebe do válcové mísící komory, mající osový výstupní kanál tak, že tyto proudy jsou důkladně promíchávány za tvorby víru a tím je vyvoláno srážení krystalických částic uvedené látky (jak je popsáno například v mezinárodní patentové přihlášce PCT/GB 00/04 327). Pokud je použita pomocná látka, jako je laktóza, obecně bude velikost částice pomocné látky mnohem větší než velikost částice inhalovaného léčiva podle předkládaného vynálezu. Pokud je tedy pomocnou látkou laktóza, bude typicky přítomna jako rozemletá laktóza, v níž bude nejvýše 85 % laktózových částic mít MMD (hmotnostní střední průměr) v rozmezí 60 až 90 mikrometrů a nejméně 15 % bude mít MMD menší než 15 mikrometrů.

Prostředky pro místní podávání do nosu (například pro léčbu rhinitidy) zahrnují tlakové aerosolové přípravky a vodné přípravky, podávané do nosu prostřednictvím tlakového čerpadla. Zvláštní pozornost je věnována prostředkům, které nejsou uchovávány pod tlakem a jsou upraveny pro místní podání do nosní dutiny. Takové prostředky s výhodou obsahují vodu jako ředidlo nebo nosič. Vodné

prostředky pro podání do plic nebo do nosu mohou být doplněny obvyklými pomocnými látkami, jako jsou pufrační činidla, činidla upravující napětí a podobně. Vodné prostředky mohou být podávány do nosu také pomocí rozprašování.

Jiné možné úpravy zahrnují následující:

Mastě, krémy a gely mohou být například formovány s vodným nebo olejovým základem za přidání vhodného zahušťovadla a/nebo želírujícího činidla a/nebo rozpouštědel. Takové základy'tedy mohou obsahovat například vodu a/nebo olej, jako tekutý parafin nebo rostlinné oleje, jako podzemnicový olej nebo ricinový olej; nebo rozpouštědlo jako polyethylenglykol. Zahušťovadla a želírující činidla, která lze použít v závislosti na povaze základu, zahrnují měkký parafin, stearát hlinitý, cetostearylalkohol, polyethylenglykoly, tuk z ovčí vlny, včelí vosk, karboxypolymethylen a celulózové deriváty a/nebo monostearát glycerolu a/nebo neiontová emulgační činidla.

Pleťové vody mohou být formovány s vodným nebo olejovým základem a budou obecně rovněž obsahovat jedno či více z emulgačních činidel, stabilizujících činidel, dispergujících činidel, suspendujících činidel nebo zahušťovadel.

Prášky pro vnější nanášení mohou být formovány za pomoci jakéhokoliv vhodného práškového základu, například talku, laktózy nebo škrobu. Kapky mohou být formovány s vodným nebo nevodným základem a dále mohou obsahovat jedno nebo více z dispergujících činidel, solubilizačních činidel, suspendujících činidel nebo jednu či více z konzervačních látek.

Prostředky podle tohoto vynálezu mohou být výhodně pufrovány přídavkem vhodných pufračních činidel.

Podíl aktivní sloučeniny vzorce (I) v místně nanášených prostředcích podle předkládaného vynálezu závisí na přesném typu připravovaného prostředku, ale obecně bude v rozmezí od 0,001 do 10 % hmotnostních. Obecně však bude pro většinu typů přípravků použitý podíl výhodně v rozmezí od 0,005 do 1 % hmotnostního a ještě lépe od 0,001 % hmotnostního do 5 % hmotnostních. Ovšem v prášcích pro inhalaci nebo insuflaci bude použitý podíl v rozmezí od 0,1 % hmotnostního do 5 % hmotnostních.

Aerosolové prostředky jsou sÁýhVdouHpřipraveny tak, aby každá odměřená dávka nebo každé uvolnění (výstřik) aerosolu obsahovalo 20 mikrogramů až 2 000 mikrogramů a lépe přibližně 20 mikrogramů až 500 mikrogramů sloučeniny vzorce (I). Podávání může probíhat jednou denně nebo několikrát za den, například 2x, 3x, 4x nebo 8x denně, přičemž se pokaždé poskytují například jedna, dvě nebo tři dávky. Celková denní dávka poskytovaná ve formě aerosolu bude v rozmezí od 100 mikrogramů do 10 mg a lépe od 200 mikrogramů do 2 000 mikrogramů. Celková denní dávka a odměřená dávka poskytnutá z tobolky nebo zásobníku v inhalátoru nebo insuflátoru bude obecně dvojnásobná ve srovnání s dávkami, poskytovanými z aerosolových prostředků.

Místní prostředky mohou být podávány prostřednictvím jednoho nebo více nanesení na postiženou oblast za den; na plochu pokožky mohou být výhodně použity okluzivní obvazy. Spojitého nebo prodlouženého dodávání aktivních prostředků je možné dosáhnout za použití adhezivního zásobníkového systému.

Pro vnitřní podávání mohou být sloučeniny podle tohoto vynálezu formovány například běžným způsobem pro orální, parenterální nebo rektální podání. Prostředky pro orální podání zahrnují sirupy, léčebné nápoje, prášky, granule, tablety a tobolky, které typicky obsahují běžné

pomocné látky jako pojivá, plniva, kluzné látky, rozvolňovadla, zvlhčující činidla, suspenzní činidla, emulgační činidla, konzervační látky, pufrační sole, příchutě, barviva a/nebo sladidla podle potřeby. Formy jednotky dávkování se upřednostňují tak, jak je popsáno níže.

Upřednostňovanými formami prostředků pro vnitřní podání jsou jednotkové dávkovači formy, tj. tablety a tobolky. Takové jednotkové dávkovači formy obsahují od 0,1 mg do 20 mg a lépe od 2,5 mg do 10 mg sloučenin podle tohoto vynálezu.

Sloučeniny podle předkládaného vynálezu mohou být vnitřně podávány obecně v takových případech, u nichž je indikována systémová adreno-kortikální léčba.

Obecně řečeno, prostředky pro podávání vnitřně mohou obsahovat od 0,05 do 10 % aktivní přísady v závislosti na typu prostředku. Denní dávka se může pohybovat od 0,1 mg do 60 mg, například od 5 do 30 mg, v závislosti na léčeném stavu a na požadované délce léčby.

Výhodné může být pomalé uvolňování prostředků nebo použití enterických potahovaných prostředků a to zvláště pro léčbu zánětlivých střevních onemocnění.

Farmaceutické prostředky podle tohoto vynálezu mohou být rovněž použity v kombinaci s jiným léčebně účinným činidlem, například s agonistou β₂ adrenergního receptoru, antihistiminikem nebo antialergikem. Tento vynález tedy v dalším aspektu poskytuje kombinaci, zahrnující sloučeninu vzorce (I) nebo její fyziologicky přijatelný solvát společně s jiným léčebně účinným činidlem, například s agonistou β₂ adrenergního receptoru, s antihistaminikem, s antialergikem nebo s anticholinergikem.

- 16 Příklady agonistů β₂ adrenergního receptorů zahrnují salmeterol (například jako xinafoát), salbutamol (jako sulfát), formoterol (například jako fumarát), fenoterol nebo terbutalin například (jako sulfát). Přednost se dává agonistům β₂ adrenergního receptorů s dlouhým účinkem, zvláště takovým, jejichž léčebný účinek přetrvává 24 hodin.

Zvláště upřednostňovanými agonisty β₂ adrenergního receptorů s dlouhým účinkem jsou sloučeniny o vzorci (X):

hoch₂

HO

CHCH₂NHCR¹⁴R¹⁵(CH₂)_m—O—(CH₂)_n· OH

(X) nebo sole či solváty takových látek, kde:

m je celé číslo od 2 do 8;

n je celé číslo od 3 do 11 a lépe od 3 do 7;

s tou výhradou, že m + n je 5 až 19 a lépe 5 až 12;

R¹¹ je-XSO₂NR¹⁶R¹⁷ kde X je -(CH₂)_p- nebo C₂.₆alkylen;

R¹⁶ a R¹⁷ jsou nezávisle zvoleny z vodíkového atomu, Ct^alkylu,

C₃.₇cykloalkylu, C(O)NR¹⁸R¹⁹, fenylu a fenyl(C₁.₄alkylu)-, nebo R^1S a R^17, společně s dusíkovým atomem na který jsou vázány, vytvářejí 5-, 6-, nebo 7-členný kruh obsahující dusíkový atom, a R¹⁶ a R¹⁷ jsou každý volitelně substituovaný jednou nebo dvěma skupinami, zvolenými z halogenu C^alkylu, C^ghalogenalkylu,

C-j.galkoxylu, hydroxysubstituovaného C^alkoxylu, -CO₂R¹⁸, -SO₂NR¹³R¹⁹,

-CONR¹⁸R¹⁹, NR^,SC(O)R¹⁹ nebo 5-, 6- nebo 7-členného heterocyklického kruhu;

- 17 ·· ·* ·· · ·· · ··< ···· « ·· • · ··· β · · · Φ β • ·· · · · · · · · ·· • · « · · · · «· ·· ·· ·· ··« ··

R¹⁸ a R¹⁹ jsou nezávisle zvoleny z vodíkového atomu, C^alkylu, C₃.₆cykloalkylu, fenylu a fenyl(C₁.₄alkylu)-; a p je celé číslo od 0 do 6 a lépe od 0 do 4;

R¹² a R¹³ jsou nezávisle zvoleny z vodíkového atomu, C^alkylu, C^galkoxylu, halogenu, fenylu a C^ghalogenalkylu; a R¹⁴ a R¹⁵ jsou nezávisle zvoleny z vodíkového atomu a C^alkylu, s tou výhradou, že celkový počet uhlíkových atomů v R¹⁴ a R¹⁵ nepřevyšuje 4.

Ve sloučeninách o vzorci (I) je skupina R¹¹ s výhodou vázána do polohy meta vzhledem k vazb'F-O^(ČH₂)_n-. ' - '

R¹¹ s výhodou představuje -SO2NR¹⁶R¹⁷, kde R¹⁶ a R¹⁷ jsou nezávisle zvoleny z vodíkového atomu a C^alkylu, přičemž R¹¹ je výhodněji skupina -SO2NH₂

R¹⁴ a R¹⁵ jsou s výhodou nezávisle zvoleny z vodíkového atomu a methylu a ještě lépe jsou R¹⁴ a R¹⁵ vodíkovými atomy.

Index m je vhodně 4, 5 nebo 6 a n je vhodně 3, 4, 5 nebo 6; s výhodou je m 5 nebo 6 a n je 3 nebo 4, tak, že m + n je 8, 9 nebo 10 a s výhodou 9.

Konkrétněji jsou upřednostňovanými sloučeninami o vzorci (X) sloučeniny o vzorci (Xa)

nebo sole či solváty takových sloučenin, kde R¹¹ odpovídá definici uvedené výše pro vzorec (X).

9

9 9

99 9 9

- 18 «· ·· ·· • · · 9 9 • · β·· θ Ο

9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9

9 9 99

Dalšími konkrétněji upřednostňovanými sloučeninami o vzorci (X) jsou sloučeniny o vzorci (Xb):

HOCH,

^-CHCH₂NH(CH₂)₇ _O— (CH, OH

(Xb) nebo sole či solváty takových sloučenin, kde R¹¹ odpovídá definici uvedené výše pro vzorec (X).

Ve sloučeninách o vzorcích (Xa) a (Xb) je skupina R¹¹ s výhodou připojena do polohy meta vzhledem ke skupině -O-(CH₂)_n-, -O-(CH₂)₄nebo -O-(CH₂)₃-.

Ve sloučeninách o. vzorcích (Xa) a (Xb) je R¹¹ s výhodou -SO2NR¹⁶R¹⁷, přičemž R¹⁶ a R¹⁷ jsou nezávisle zvoleny z vodíkového atomu a C^alkylu a R¹¹ je ještě výhodněji -SO2NH₂.

V- definici R¹¹, kde R¹⁶ a R¹⁷ společně s dusíkovým atomem, na který jsou vázané, vytvářejí 5-, 6-, nebo 7-členný kruh s obsahem dusíkového atomu, znamená výraz 5, 6 nebo 7-členný kruh s obsahem dusíkového atomu pětičlenný, šestičlenný nebo sedmičlenný, nasycený nebo nenasycený kruh, který zahrnuje sulfonamidový dusíkový atom a volitelně jeden nebo dva další heteroatomy, nezávisle zvolené z dusíku, síry a kyslíku. Vhodné příklady takového kruhu zahrnují piperidinyl, morfolinyl a piperazinyl.

V definici R¹¹, specifikující volitelné substituenty v polohách R¹⁶ a R¹⁷, výraz pěti, šesti nebo sedmičlenný heterocyklický kruh označuje pěti, šesti nebo sedmičlenný, plně nebo částečně nasycený nebo nenasycený kruh, který zahrnuje 1, 2, 3 nebo 4 heteroatomy, nezávisle zvolené z dusíku, síry a kyslíku. Vhodné příklady takového kruhu

- 19 • 9 99 * · · · · β • · βββ e β

9 9 · 9 9 9

9 9 9 9 9

99 ·9 · • 9 9

9 9

0 9 9

99999 • 99

9 zahrnují pyrrolyl, furyl, thienyl, pyridinyl, pyrazinyl, pyridazinyl, imidazolyl, tetrazolyl, tetrahydrofuranyl, oxazolyl, triazolyl, thiadiazolyl, piperidinyl, morfolinyl a piperazinyl.

V definici sloučeniny (X) výraz alkylen zahrnuje jak struktury cis, tak struktury trans. Vhodné příklady alkylenových skupin zahrnují -CH=CH-.

Sloučeniny o vzorcích (X), (Xa) a (Xb) zahrnují asymetrické centrum, jmenovitě uhlíkový atom skupiny

-CHOH.

Předkládaný vynález zahrnuje jak (S), tak (R) enantiomery buď ve formě v podstatě čisté, nebo smísené v jakýchkoliv poměrech.

Podobně pokud jsou R¹⁴ a R¹⁵ rozdílnými skupinami, je uhlíkový atom, na který jsou připojeny, asymetrickým centrem a předkládaný vynález zahrnuje jak enantiomery (S), tak i (R), buď ve formě v podstatě čisté nebo, smísené v jakýchkoliv poměrech.

Sloučeniny o vzorcích (X), (Xa) a (Xb) tedy zahrnují veškeré enantiomery a diastereoizomery, stejně jako směsi takových látek v jakýchkoliv poměrech.

Nejupřednostňovanější sloučeninou o vzorci (X) je 3-(4-{[6-({(2R)2 - hydroxy-2-[4-hydroxy-3-(hydroxymethyl)fenyl]ethyl}amíno)hexyl]oxy} butyl)benzensulfonamid nebo jeho sůl čí solvát.

Solemi a solváty sloučenin o vzorcích (X), (Xa) a (Xb), které jsou vhodné pro použití v lékařství, jsou takové, jejichž protiiont nebo

- 20 asociované rozpouštědlo jsou farmaceuticky přijatelné. Ovšem sole a solváty, mající farmaceuticky nepřijatelné protiionty nebo asociovaná rozpouštědla, patří také do rozsahu předkládaného vynálezu a hodí se pro použití jako například meziprodukty při výrobě jiných sloučenin o vzorcích (X), (Xa) a (Xb) a jejich farmaceuticky přijatelných solí a solvátů.

Vhodné sole podle tohoto vynálezu zahrnují sole, vytvářené jak organickými, tak anorganickými kyselinami nebo bázemi. Farmaceuticky přijatelné kyselé adiční sole zahrnují sole, vytvářené z kyseliny chlorovodíkové, bromovódíkové, sírové, citrónové, vinné, fosforečné, mléčné, pyrohroznové, octové, trifluoroctové, trifenyloctové, sulfamové, sulfanilové, jantarové, šťavelové, fumarové, maleinové, jablečné, glutamové, asparagové, oxaloctové, methansulfonové, ethansulfonové, od arylsulfonových kyselin (například p-toluensulfonové, benzensulfonové, naftalensulfonové nebo naftalendisulfonové kyseliny), od kyseliny salicylové, glutarové, glukonové, trikarballylové (C₆H₅O₆), skořicové, substituované skořicové (například methylem, methoxylem nebo halogenem substituované kyseliny skořicové, včetně 4-methyl- a 4-methoxyskořicové kyseliny), askorbové, olejové, naftoové, hydroxynaftoové (například kyseliny 1- nebo 3-hydroxy-2-naftoové), naftalenakrylové (například naftalen-2-akrylové), benzoové, 4-methoxybenzoové, 2- nebo 4-hydroxybenzoové, 4-chlorbenzoové, ά 4-fenylbenzoové, benzenakrylové (například 1,4-benzendiakrylové) a kyseliny isethionové.

Farmaceuticky přijatelné bazické sole zahrnují amonné sole, sole alkalického kovu jako jsou sodné a draselné sole, kovové sole alkalických zemin jako sole vápníku a hořčíku a sole s organickými bázemi, jako je dicyklohexylamin a N-methyl-D-glukamin.

β · · · • · ·· · ·

- 21 Sloučeniny ο vzorci (X), (Xa) a (Xb) mohou být připravovány podle odkazu na Příklad X uvedený níže, ananlogickými způsoby nebo jinými běžnými způsoby, známými jako takovými (per se).

Vzhledem k tomu, že sloučeniny o vzorci (I) jsou dlouho účinkujícími látkami, prostředek s obsahem sloučeniny vzorce (I) a agonisty p₂-adrenergního receptoru s dlouhým účinkem budou s výhodou podávány jednou za den a dávka každé z těchto složek bude zvolena tak, aby prostředek vykazoval léčebný účinek v průběhu 24 hodin nebo delší při léčbě chorob dýchacího traktu (například při léčbě astmatu nebo chronického obstrukčního plicního onemocnění, tj. COPD a zejména astmatu).

Příklady antihistaminik zahrnují methapyrilen nebo loratadin. Příklady protialergicky účinných látek (antialergik) zahrnují cromoglykát (například sodný), ketotifen a nedocromil (např. sodný). Příklady anticholinergních účinných látek (anticholinergik) zahrnují ipratropium (například bromid ipratropia), tiotropium, atropin nebo oxitropium. Kterákoliv z výše uvedených sloučenin může být použita ve formě svých možných solí nebo solvátů.

Další vhodné kombinace zahrnují například další protizánětlivě působící činidla, jako NSAID, tedy nesteroidní protizánětlivě působící léčiva (například inhibitory fosfodiesterázy 4, tj. PDE4, leukotrienové antagonisty, inhibitory íNOS, inhibitory tryptázy a elastázy, antagonisty beta-2 integrinu a adenosinové 2a antagonisty), nebo proti infekční činidla (například antibiotika a protivirová činidla).

Zvláštní pozornost je věnována sloučeninám o vzorci (I) v kombinaci s inhibitorem fosfodiesterázy 4, PDE4. Inhibitorem specifickým vůči PDE4, který se hodí pro tento aspekt předkládaného

- 22 vynálezu, může být jakákoliv sloučenina, která inhibuje enzym fosfodiesterázu 4 nebo o níž bylo zjištěno, že působí jako inhibitor PDE4 a patří mezi inhibitory pouze PDE4, nikoli mezi sloučeniny, inhibující stejně jako PDE4 také jiné fosfodiesterázy. Obecně se upřednostňuje použití inhibitoru PDF4, majícího poměr IC₅₀, který se dán podílem IC₅₀ pro katalytickou formu PDE4, navazující rolipram s vysokou afinitou a IC₅₀ pro formu, navazující rolipram s nízkou afinitou, přibližně v hodnotě 0,1 nebo vyšší. Pro účely tohoto popisu vynálezu je katalytické místo pro cAMP, které váže R a S rolipram s nízkou afinitou, označeno jako vazebné místo s nízkou' afinitou (LDPE 4) a jiná forma tohoto katalytického místa, která váže rolipram s vysokou afinitou, je označena jako vazebné místo s vysokou afinitou (HPDE 4).

Tento výraz HPDE by neměl být zaměňován za výraz hPDE4, který se používá k označení lidské fosfodiesterázy 4, PDE4. Pro zjištění a ověření vazebného stanovení [³H]-rolipramu byly provedeny počáteční pokusy. Podrobnosti o této práci jsou uvedeny v odstavci Vazebná stanovení, podrobně popsaném níže.

Upřednostňovanými inhibitory PDE4 pro použití podle předkládaného vynálezu budou takové sloučeniny, které mají prospěšný léčebný poměr, to znamená takové sloučeniny, které přednostně inhibují katalytickou aktivitu cAMP, kde je enzym PDE4 ve formě navazující rolipram s nízkou aktivitou, čímž jsou sníženy vedlejší účinky, které jsou zjevně spojené s inhibici formy, navazující rolipram s vysokou afinitou. Jiným způsobem vyjádření téhož je, že upřednostňované sloučeniny budou mít poměr IC₅₀, který se dán podílem IC₅₀ pro katalytickou formu PDE4, navazující rolipram s vysokou afinitou a IC₅₀ pro formu, navazující rolipram s nízkou afinitou, přibližně v hodnotě 0,1 nebo vyšší.

• ·

- 23 • ·

Dalším upřesněním tohoto měřítka je vyjádření, že pokud má inhibitor PDE4 poměr IC₅₀ v hodnotě 0,1 nebo vyšší, uvedený poměr je poměrem hodnoty IC₅₀ pro kompetici s vazbou 1 nmol.l'¹ [³H]R-rolipramu k formě PDE4, která váže rolipram s vysokou aktivitou a hodnoty IC₅₀ pro inhibici katalytické aktivity PDE4 té formy, která váže rolipram s nízkou afinitou, za použití 1 μιτιοΙ.Ι'¹ [³H]-cAMP jako substrátu.

Příklady vhodných inhibitorů PDE4 jsou:

** * (^R)-(⁺)-1 -(4-brórnbenzyl)-4-[(3^cyl<lopentyloxy)-4-methoxyfenyl]-2-pyrrolidon;

3-(cyklopentyloxy-4-methoxyfenyl)-1 -(4-N'-[N2-kyano-S-methylisothioureido]benzyl)-2-pyrrolidon;

c/s-[4-kyano-4-(3-cyklopentyloxy-4-methoxyfenyl)cyklohexan-1 -karboxylová] kyselina;

c/s-[4-kyano-4-(3-cyklopropylmethoxy-4-difluormethoxyferiyl)cyklohexan-1 -ol];

acetát (R)-(+)-ethyl[4-(3-cyklopentyloxy-4-methoxyfenyl)pyrrolidin-2-ylidenu]; a acetát (S)-(-)-ethyl[4-(3-cyklopentyloxy-4-methoxyfenyl)pyrrolidin-2-ylidenuj.

Nejupřednostňovanější jsou takové inhibitory PDE4, mající poměr IC₅₀ větší než 0,5 a zvláště pak ty sloučeniny, které mají uvedený poměr vyšší než 1,0.

Upřednostňovanými sloučeninami jsou c/s-[4-kyano-4-(3-cyklopentyloxy-4-methoxyfenyl)cyklohexan-1 -karboxylová] kyselina; 2-karbomethoxy-4-kyano-(3-cyklopropylmethoxy-4-difluormethoxyfenyl)cyklohe xan-1 -on a c/s-[4-kyano-4-(3-cyklopropylmethoxy-4-difluormethoxyfenyl)cyklohexan-1-olj; které jsou příklady sloučenin, navazujícími se

- 24 především na vazebné místo s nízkou afinitou a majícími poměr IC₅₀ o hodnotě 0,1 nebo vyšší.

Další zajímavé sloučeniny zahrnují:

Sloučeniny uvedené v patentu US č. 5 552 438, zveřejněném 3. září 1996, přičemž tento patent i v něm uvedené sloučeniny jsou do předkládaného vynálezu plně začleněny jako odkaz. Sloučeninou uvedenou v patentu US č. 5 552 438, které je věnována zvláštní pozornost, je c/s-4-kyano-4-[3-(cyk(opentyloxy)-4-methoxyfenyl]cyklohexan-1-karboxylové kyselina (známá také jako cilomalast) a její sole, estery, prekursory nebo fyzikální formy;

sloučeninu AWD-12-281 od firmy Astra (N. Hofgen se spoluautory, 15th EFMC Int. Symp. Med. Chem. (Sept. 6-10, Edinburgh) 1998, abst. P.98); 9-benzyladeninový derivát označený jako NCS-613 (INSERM); D-4418 od firmy Chiroscience a Schering-Plough; benzodiazepinový inhibitor PDE4, identifikovaný jako CI-1018 (PD-168787;

Parke-Davis/Warner-Lambert); benzodioxolový derivát firmy Kyowa Hakko, uvedený ve WO 99/16766; sloučeninu V-11294A od firmy Napp (L. J. Landells se spoluautory, Eur. Resp. J. [Annu. Cong. Eur. Resp. Soc., Sept. 19-23, Geneva, 1998], 1998, 1_2(suppl. 28): abst. P2393); roflumilast (CAS reference č. 162 401-32-3) a ftalazinon (WO 99/47 505) od firmy Byk-Gulden; nebo sloučeninu identifikovanou jako T-440 (Tanabe Seiyaku, K. Fuji se spoluautory, J. Pharmacol. Exp. Ther. 284(1), 162, 1998).

Vazebná stanovení fosfodiesterázy a rolipramu

Způsob stanovení 1A • ·

- 25 Bylo stanoveno, že PDE4, isolovaná z lidských monocytů a hrPDE (lidská rekombinantní PDE4) existují primárně ve formě s nízkou afinitou. Aktivita testovaných sloučenin vůči formě PDE4 s nízkou afinitou tedy může být stanovena za použití standardních stanovení pro katalytickou aktivitu PDE4 za použití 1 qmol.l'¹ [³H]-cAMP jako substrátu (Torphy se spoluautory, J. Biol. Chem. 267(3), 1798-1804, 1992).

Jako zdroj proteinu byly použity vysokorychlostní supernatanty z mozku potkana albína a připraveny byly oba enantiomery [³H]-rolipramu se specifickou aktivitou 26,6 Ci/mmol. Standardní podmínky stanovení byly byly oproti zveřejněnému postupu pozměněny tak, aby byly shodné s podmínkami pro stanovení PDE, kromě poslední, týkající sě cAMP: 50 mmol.l'¹ Tris-HCl (pH7,5), 5 mmol.I’¹ MgCI₂, 50 pmol.l'¹ 5'-AMP a 1 nmol.l'¹ [³H]-rolipram (Torphy se spoluautory, J. Biol. Chem. 267(3), 1798-1804, 1992). Stanovení probíhalo 1 hodinu při teplotě 30 °C. Reakce byla ukončena a navázaný ligand byl od volného ligandu oddělen za použití sběrače buněk (cell harvester) Brandel. Kompetice o vazebné místo s vysokou afinitou byla stanovována za podmínek, které /byly shodné jako podmínky pro měření aktivity PDE o nízké afinitě, jen s tím rozdílem, že nebyl přítomen [³H]-cAMP.

Způsob stanovení 1B

Měření aktivity fosfodiesterázy

Aktivita PDE byla stanovována za použití enzymového stanovení [³H]-cAMP SPA nebo [³H]-cGMP SPA tak, jak je popsáno dodavatelem (Amersham Life Sciences). Reakce probíhaly v 96-jamkových mikrotitračních destičkách při teplotě místnosti, v 0,1 ml reakčního pufru, obsahujícího (konečné koncentrace): 50 mmol.l'¹ Tris-HCl o pH 7,5; 8,3 mmol.l'¹ MgCI₂; 1,7 mmol.l'¹ EGTA, [³H]-cAMP nebo [³H]-cGMP

(přibližně 2000 dpm, tj. rozpadů za minutu/pmol), enzym a různé koncentrace inhibitorů. Stanovení bylo ponecháno probíhat 1 hodinu a bylo ukončeno přídavkem 50 μΙ SPA yttrium-křemičitanových perliček v přítomnosti síranu zinečnatého. Destičky byly protřepány a ponechány 20 minut ustát- při teplotě- místnosti. Vytvoření radioaktivně označeného substrátu bylo hodnoceno za použití scintilační spektrometrie.

Stanovení vazby í³H1R-rolipramu

Vazebné* stanovení ’[³H]R-roliprámu' bylo' provedeno pozměněním metody Schneidera a spolupracovníků, viz Nicholson se spoluautory, Trends Pharmacol Sci. 12, 19-27, 1991 a McHale se spoluautory. Mol. Pharmacol 39, 109-113, 1991. R-rolipram se navazuje na katalytické ‘místo PDE4, viz Torphy se spoluautory, Mol. Pharmacol. 39, 376-384, 1991. Následně tedy kompetice o vazbu [³H]R-rolipramu poskytuje nezávislé potvrzení inhibičních schopností neznačených (kompetujících) konkurentů vzhledem k PDE4. Stanovení bylo prováděno 1 hodinu při teplotě 30 °C v 0,5 ml pufru, obsahujího (v konečných koncentracích): 50 mmol.l'¹ Tris-HCI o pH 7,5; 5 mmol.l'¹ MgCI₂; 0,05% hovězí sérový albumin; 2 nmol.l'¹ [³H]R-rolipram (5,7 x 10⁴ dpm/pmol) a různé koncentrace radioaktivně neznačených inhibitorů. Reakce byla ukončena přídavkem 2,5 ml ledově chladného reakčního pufru (bez [³H]R-rolipramu) a rychlou vakuovou filtrací (Brandel cell harvester) přes filtry Whatman GF/B, které byly nasáklé 0,3% polyethyleniminem. Filtry byly promyty v dalších 7,5 ml studeného pufru, vysušeny a počet rozpadů byl změřen prostřednictvím kapalinové scintilační spektrometrie.

Předkládaná vynález tedy v dalším aspektu poskytuje kombinaci, zahrnující sloučeninu vzorce (I), nebo její fyziologicky přijatelný solvát a inhibitor PDE4.

- 27 • φ

Výše uvedená kombinace může být výhodně předkládána pro použití ve formě farmaceutického prostředku a farmaceutické prostředky, obsahující výše uvedenou kombinaci spolu s farmaceuticky přijatelným ředidlem nebo nosičem, tedy představují další aspekt tohoto vynálezu. ....................................

Jednotlivé sloučeniny takových kombinací mohou být podávány buď následně, nebo souběžně v oddělených nebo spojených farmaceutických prostředcích. Vhodné dávky známých léčebných činidel budou snadno stanovitelné odborníky v oboru.

Sloučeniny o vzorci (I) a jejich solváty mohou být připraveny za použití dále popsané metodologie, což představuje další aspekt tohoto vynálezu.

Způsob podle předkládaného vynálezu pro přípravu sloučeniny vzorce (I) zahrnuje alkylací thiokyseliny o vzorci (II)

kde R₂, R₃, R₄, R_s a odpovídají definici uvedené výše pro sloučeninu (I).

V tomto způsobu může sloučenina o vzorci (II) reagovat například za standardních podmínek s vhodným alkyl- nebo halogenalkylhalogenidem.

- 28 *·· ·»

Pokud R₁ představuje fluormethyl, je upřednostňovaným halogenalkylovým halogenidovým reakčním činidlem bromfluormethan.

Sloučeniny vzorce (II) mohou být připraveny z odpovídajícího 17a-hydroxylového derivátu vzorce (III): - ..... ......

kde R₂, R₃, R₄, R_s a----- odpovídají definici uvedené výše pro sloučeninu (I), za použití metodiky popsané například G. H. Phillippsem a spoluautory v Journal of Medicinal Chemis.try 37, 3717-3729, 1994. Sloučenina vzorce (III) může například reagovat se sloučeninou o vzorci R₂COOH nebo s jejím aktivovaným derivátem, například s aktivovaným esterem, anhydridem nebo halogenidem (například s chloridem kyseliny). Reakce může být prováděna v přítomnosti organického rozpouštědla, například triethylaminu, obvykle společně s dimethylaminopyridinem (DMAP).

Sloučeniny vzorce (III) mohou být připraveny podle postupů popsaných v GB 2 088 877B. Sloučeniny vzorce (III) mohou být připraveny také způsobem, zahrnujícím následující kroky:

Krok (a) zahrnuje oxidaci roztoku, obsahujícího sloučeninu vzorce (IV). Krok (a) bude s výhodou prováděn v přítomnosti rozpouštědla, obsahujícího methanol, vodu, tetrahydrofuran, dioxan nebo diethylenglykol dimethylether. Například pro zvýšení výtěžku a výrobní kapacity jsou upřednostňovanými rozpouštědly methanol, voda nebo tetrahydrofuran a ještě lépe voda nebo tetrahydrofuran, zvláště pak voda a tetrahydrofuran. Upřednostňovanými rozpuštědly jsou dioxan a diethylenglykol dimethylether, které mohou být volitelně (a s výhodou) použity spolu s vodou. Rozpouštědlo bude s výhodou přítomné v množství od 3 do 10 objemů vzhledem k množství výchozího materiálu (1 jednotce hmotn.), lépe mezi 4 a 6 objemy a speciálně 5 objemů. . Oxidační činidlo je s výhodou přítomné v množství od 1 do 9 molámích ekvivalentů vzhledem k množství výchozího materiálu. Pokud je například použit 50% (hm./hm.) vodný roztok kyseliny jodisté, může být oxidační činidlo přítomné v množství od 1,1 do 10 jednotek hmotnosti vzhledem k poměrnému množství výchozího materiálu (jedn. hmotnosti), lépe od 1,1 do 3 jednotek hmotnosti a zvláště 1,3 jedn. hmotnosti.

Krok oxidace s výhodou zahrnuje použití chemického oxidačního činidla. Výhodněji bude oxidačním činidlem kyselina jodistá nebo kyselina jodičná, anebo sůl takových látek. Nejvýhodněji bude oxidačním činidlem kyselina jodistá nebo jodistan sodný, zvláště pak kyselina jodistá. Kromě toho (nebo nadto) bude rovněž zřejmé, že oxidační krok může zahrnovat jakoukoli vhodnou oxidační reakci, například takovou,

- 30 která využívá vzduch a/nebo kyslík. Pokud oxidační reakce využívá vzduch a/nebo kyslík, bude rozpouštědlem použitým ve zmíněné reakci s výhodou methanol. Krok (a) bude s výhodou zahrnovat inkubaci reakčních činidel při teplotě místnosti nebo při mírně vyšší teplotě, jako kolem 25 °C, například po dobu 2 hodin. Sloučenina vzorce (V) může být z reakční směsi isolována rekrystalizaci za přídavku antirozpouštědla. Vhodným antirozpouštědlem pro sloučeninu vzorce (V) je voda. Původci tohoto vynálezu překvapivě zjistili, že je vysoce žádoucí řídit podmínky, za nichž se sloučenina vzorce (V) sráží, přídavkem antirozpouštědla, *» v. ť - . Ην-Μ.

například vody. Pokud se provádí rekrystalizace za použití mražené vody (například směsi ledu a vody o teplotě 0 až 5 °C), bylo zjištěno, že i když mohou být očekávány lepší vlastnosti antirozpouštědla, vytvořený krystalický produkt je velmi objemný, připomíná měkký gel a velmi obtížně se filtruje.

Aniž by bylo žádoucí se vázat teorií, předpokládá se, že tento produkt o malé hustotě obsahuje v krystalové mřížce velké množství solvatovaného rozpouštědla. Naproti tomu při teplotě kolem 10 °C nebo vyšší (například při teplotě místnosti) je vytvořen granulární produkt o pískovité soudržnosti (konzistenci), který se velmi snadno filtruje. Za těchto podmínek krystalízace typicky začíná přibližně po 1 hodině a je skončena typicky v průběhu několika hodin (například 2 hodin). Aniž by se původci vynálezu chtěli vázat teorií, předpokládají, že tento granulární produkt obsahuje v krystalové mřížce jen málo solvatovaného rozpouštědla nebo žádné.

Krok (b) bude typicky zahrnovat přídavek reakčního činidla, které je vhodné pro přeměnu karboxylové kyseliny na karbothiovou kyselinu, například plynného sirovodíku spolu s vhodným vazebným činidlem, například s karbonyldiimidazolem (CDI), v přítomnosti vhodného rozpouštědla, například dimethylformamidu.

··

- 31 β eee • · 4

Solváty sloučenin vzorce (I), které nejsou fyziologicky přijatelné, mohou být vhodné jako meziprodukty pro přípravu sloučenin vzorce (I), nebo jejich fyziologicky přijatelných solvátů.

-Výhody sloučenin-vzorce (I) a/nebo jejich solvátů mohou zahrnovat skutečnost, že se tyto sloučeniny zdají vykazovat vynikající protizánětlivé účinky, a to s předvídatelným farmakokinetickým a farmakodynamickým chováním, s přitažlivým profilem vedlejších účinků (projevujícím se například zvýšenou selektivitou pro glukokortikoidový receptor oproti progesteronovemu ^J receptoru a/nebo zvýšenou selektivitou pro glukokortikoidovým receptorem zprostředkovanou trans-represi oproti trans-aktivaci) a jsou slučitelné s běžným léčebným režimem u lidských pacientů. Další výhody mohou zahrnovat fakt, že tyto sloučeniny mají žádoucí fyzikální a chemické vlastnosti, umožňující snadnou výrobu a skladování.

Vynález je ozřejměn následujícími Příklady, na něž se neomezuje.

Příklady provedení vynálezu

Obecné

LCMS (kapalinová chromatografie/hmotnostní spektrometrie) byla prováděna na koloně Supelcosil LCABZ+PLUS (3,3 cm x 4,6 mm vnitř, průměr), eluované prostřednictvím 0,1% HCO₂H a 0,001 mol.l'¹ acetátu amonného ve vodě (rozpouštědlo A) a 0,05% HCO₂H a 5% vody v acetonitrilu (rozpouštědlo B) za použití následujícího elučního gradientu: 0 až 0,7 min 0% B; 0,7 až 4,2 min 100% B; 4,2 až 5,3 min 0% B; 5,3 až 5,5 % B při rychlosti toku 3 ml/min. Hmotnostní spektra byla zaznamenána na spektrometru Fisons VG Platform za použití elektrosprejového pozitivního a negativního módu (kmitání) (ES+ve a ES-ve).

© ©e© • © • · © © ©

- 32 Meziprodukty

Meziprodukt 1: 17a-(cyklobutylkarbonyl)oxy-6a,9a-difluor--11β-hydroxy-16a-methyl-3-oxoandrosta~1,4-dien-17p-karbothiová kyselina

Roztok 6a,9ct-difluor-11 β-17ct-dihydroxy-16ot-methyl-3-oxoandrosta-1,4-dien-17p-karbothiové kyseliny (připravený podle postupu, popsaného. v GB 20 88877B, 1 g, 2,42 mmol) v bezvodém «dichlormethanu (20 ml) ajtriethylamin ,(0,,88^ml, 6,32 mmol) byly při teplotě menší než 5 °C a pod dusíkovou atmosférou ovlivňovány roztokem cyklobutankarbonylchíoridu (0,72 ml, 6,31 mmol) v bezvodém dichlormethanu (5 ml) v průběhu přibližně 2 minut. Roztok byl při teplotě menší než 5 °C míchán po dobu 45 minut a poté byl naředěn dichlormethanem (20 ml) a následně promyt 5% roztokem sodného hydrogenuhličitanu (20 ml), 1 mol.I'¹ kyselinou chlorovodíkovou (20 ml) a vodou (20 ml). Organický roztok byl vysušen (Na₂SO₄) a odpařen k poskytnutí bělavé pěny (1,47 g), která byla rozpuštěna v acetonu (30 ml) a ovlivněna 1-methylpiperazinem (1 ml, 9 mmol). Po uplynutí 2,5 hodiny byl roztok pomalu přidán do míchané směsi 2 mol.l'¹ kyseliny chlorovodíkové (55 ml) a ledu (55 ml), sraženina byla shromážděna a vysušena pod vakuem k poskytnutí v nadpisu uvedené sloučeniny ve formě bílé pevné látky (1,12 g, 93,5 %): retenční čas pří LCMS byl 3,79 minuty, m/z 495 MH⁺.

Meziprodukt 2: 17a-(cyklopentylkarbonyl)oxy-6a,9a-difluor-11 β-hydroxy-16a-methyl-3-oxoandrosta-1,4-dien-17β^3ΦοίΝονέ kyselina

Tento meziprodukt byl připraven za použití podobných postupů, jaké byly popsány pro meziprodukt 1. Retenční čas při LCMS byl 4,00 minuty, m/z 509 MH⁺.

- 33 • · · · · · * · · · ’ · β · · · • · · · « · v • · · · · · *· ·· ··

Meziprodukt 3: 17a-(cyklohexylkarbonyl)oxy-6a,9a-difluor-11 β-hydroxy-16oc-methyl-3-oxoandrosta-1,4-dien-17 β-karbothiová kyselina

Tento meziprodukt byl připraven za použití podobných postupů, jaké byly popsány pro meziprodukt 1. Retenční čas při LCMS byl 4,17 minuty, m/z 523 MH⁺.

Meziprodukt 4: 17a-(cyklopropylkarbonyl)oxy-6a,9ct-difluor-11 β-hydroxy-16cc-methyl-3-oxoandrosta-1,4^ΐβη-17β^3^οίΙ·)ίονέ kyselina

Tento meziprodukt byl připraven za použití podobných postupů, jaké byly popsány pro meziprodukt 1. Retenční čas při LCMS byl 3,65 minuty, m/z 481 MH⁺.

Meziprodukt 5: 6a,9a-difluor-11 β-hydroxy-16α-methyl-17ct’(1-methy lcyklopropy lkarbonyl)oxy-3-oxoandrosta-1,4^ίβη-17β^3^οίΙΐίονέ kyselina

Tento meziprodukt byl připraven za použití podobných postupů, jaké byly popsány pro meziprodukt 1. Retenční čas při LCMS byl 3,75 minuty, m/z 495MH7

Meziprodukt 6: 6a,9a-difluor-11 β-Ι^π^-16α-ιτΐθΠ^Ι-3-οχο17a-(2,2,3,3-tetramethylcyklopropylkarbonyl)oxyandrosta-1,4^ϊβη-17β -karbothiová kyselina

Tento meziprodukt byl připraven za použití podobných postupů, jaké byly popsány pro meziprodukt 1. Retenční čas při LCMS byl 4,12 minuty, m/z 537 MH⁺.

Meziprodukt 7: 17a-(2,2-dichlor-1 -methyicyklopropylkarbonyl)oxyβ e · « · · « • · · « *· «·

- 34 6a,9a-difluor-11 β-hydroxy-l 6a-methyl-3-oxoandrosta-1,4-dien-173-kar bothiová kyselina

Tento meziprodukt byl připraven za použití podobných postupů, jaké- byly popsány - pro meziprodukt -1 . Retenční--čas při LCMS byl 4,20 minuty, m/z 563,565 MH⁺.

Meziprodukt 8: 17a-(2,2-dichlorcyklopropylkarbonyl)oxy-6a,9a-difluor-11 β-hydroxy-l6a-methyl-3-oxoandrosta-1,4-dien-17β - karbothiová kyselina

Tento meziprodukt byl připraven za použití podobných postupů, jaké byly popsány pro meziprodukt 1. Retenční čas při LCMS byl 4,14 minuty, m/z 549,551 MH⁺.

Meziprodukt 9: 6a,9a-difluor-11 β- hydroxy-16a-methyl-17oc-(3-methylencyklobutylkarbonyl)oxy-3-oxoandrosta-1,4-dien-17β - karbothiová kyselina

Tento meziprodukt byl připraven za použití podobných postupů, jaké byly popsány pro meziprodukt 1. Retenční čas při LCMS byl 4,10 minuty, m/z 507MHL

Meziprodukt 10: -6a,9a-difluor-11 β-hydroxy-l 6cc-methyl-17cc-(2-methylcyklopropylkarbonyl)oxy-3-oxoandrosta-1,4-dien-17β^3Φοίίιίονέ kyselina

Tento meziprodukt byl připraven za použití podobných postupů, jaké byly popsány pro meziprodukt 1. Retenční čas při LCMS byl 3,90 minuty, m/z 495ΜΗΓ.

• φ , φφ Φφ'

Ο 99 9

- 35 φφ φ

Meziprodukt 11: 6a,9a-difluor-11 β-hydroxy-l 6cc-methyl-17α-(1 -methylcyklobutylkarbonyl)oxy-3-oxoandrosta-1,4-dien-17β - karbothiová kyselina

Tento meziprodukt byl připraven za použití podobných postupů, jaké byly popsány pro meziprodukt 1. Retenční čas při LCMS byl 4,13 minuty, m/z 509 MH⁺.

Meziprodukt 12: 6a,9a-difluor-17a-(3,3-dimethylcyklobutylkarbonyl)oxy-11 β-hydroxy-l 6a-methyl-3-oxoandrosta-1,4-dien-17β - karbothiová kyselina .. . . .....

Tento meziprodukt byl připraven za použití podobných postupů, jaké byly popsány pro meziprodukt 1. Retenční čas při LCMS byl 4,09 minuty, m/z 523 MH⁺.

Meziprodukt 13: 6a,9a-difluor-17a-(3,3-difluorcyklobutylkarbonyl)oxy-11 β-hydroxy-16α-methyl-3-oxoandrosta-1,4-dien-17β - karbo thiová kyselina

Tento meziprodukt byl připraven za použití podobných postupů, jaké byly popsány pro meziprodukt 1. Retenční čas při LCMS byl 3,78 minuty, m/z 531 MH⁺.

Meziprodukt 14: 6ct, 9ot-d ifl uor-11 β-hydroxy-l 6a-methyl-17a-(1-methy Icyklopentyl karbony l)oxy-3-oxoandrosta-1,4-dien-17β^3^οίΐΊίονέ kyselina

Tento meziprodukt byl připraven za použití podobných postupů, jaké byly popsány pro meziprodukt 1. Retenční čas při LCMS byl 4,05 minuty, m/z 523 MH⁺.

- 36 ♦ ·· ·· ·φ · φφ · • · · φ φ φφ φφφ « · *ΦΦ 9 9 9 9 φ φ φ • 9 9 Φ · 9 φ φ φφ φφφφφ • ΦΦΦΦΦΦ ΦΦΦ •· ·· 99 φφφ φφ _e

Meziprodukt 15: 6ct,9cc-difluor-11 β-hydroxy-l6oc-methyl-3-oxo17α(3 - oxocyklobutylkarbonyl)oxy - androsta - 1,4 - dien - 17β - karbothiová kyselina

Tento meziprodukt byl připraven za použití podobných postupů, jaké byly popsány pro meziprodukt 1. Retenční čas při LCMS byl 3,41 minuty, m/z 509 MH⁺.

Příklady

Příklad 1:

S-fluormethylester 17a-(cyklobutylkarbon-yl)oxy-6a,9ct-difluor11 β-hydroxy-l 6a-methyl-3-oxoandrosta-1,4-dien-173-karbothiové kyseliny

Hydrogenuhličitan sodný (112 mg, 1,33 mmol) byl přidán k roztoku meziproduktu 1 (600 mg, 1,21 mmol) v bezvodém

N,N-dimethylformamidu (6 ml) a směs byla ochlazena pod dusíkovou atmosférou na -20 °C. Přidán byl bromfluormethan (0,15 ml, 2,7 mmol) a směs byla míchána 2 hodiny při teplotě -20 °C. Následně byl přidán diethylamin (0,6 ml, 5,8 mmol) a směs byla míchána při téže teplotě 15 minut; poté byla přidána do důkladně míchané 2 mol.l'¹ kyseliny chlorovodíkové (25 ml). Po přídavku vody (75 ml) a míchání po dobu dalších 30 minut byla shromážděna bílá sraženina a vysušena pod vakuem (606 mg). Tento materiál byl čištěn sloupcovou chromatografií na silikagelu k poskytnutí v nadpisu uvedené sloučeniny ve formě bílé pevné látky (520 mg, 81 %): retenční čas při LCMS je 3,67 minuty, m/z 527 MH⁺.

Příklad 2:

17a-(cyklopentylkarbonyl)oxy-6a,9a-difluor-11 p-hydroxy-16amethyl-3-oxoandrosta-1,4-dien-17p-karbothiová kyselina

Tato sloučenina byla připravena z meziproduktu 2 za použití podobných postupů, jaké. byly popsány v Příkladu 1; retenční čas při LCMS je 3,92 minuty, m/z 541 MH⁺.

Příklad 3:

S-fluormethylester 17a^í(čýklohexýlkarbóhyl)oxy-6á'ⁱ9a-difluor-11βhydroxy-16a-methyI-3-oxoandrosta-1,4-dien-17p-karbothiové kyseliny

Tato sloučenina byla připravena z meziproduktu 3 za použití podobných postupů, jaké byly popsány v Příkladu 1; retenční čas při LCMS je 4,02 minuty, m/z 555 MH⁺.

Příklad 4:

S-fluormethylester 17a-(cyklopropylkarbonyl)oxy-6a,9a-difluor113-hydroxy-16a-methyl-3-oxoandrosta-1,4-dien-17p-karbothiové kyseliny

Tato sloučenina byla připravena z meziproduktu 4 za použití podobných postupů, jaké byly popsány v Příkladu 1; retenční čas při LCMS je 3,54 minuty, m/z 513 MH⁺.

Příklad 5:

S-fluormethylester 6cc,9ct-difluor-11 β- hydroxy-16a-methyl-17a(1 -methylcyklopropylkarbonyl)oxy-3-oxoandrosta-1,4-dien-17βΛθΓbothiové kyseliny

Á.'

- 38 Tato sloučenina byla připravena z meziproduktu 5 za použití podobných postupů, jaké byly popsány v Příkladu 1; retenční čas při LCMS je 3,66 minuty, m/z 527 MH⁺.

.... .. Příklad 6: _______

S-fluormethylester 6ot, 9ot-d if I uor-11 β-hydroxy-l6a-methyl-3-oxo-17a-(2,2,3,3-tetramethylcyklopropylkarbonyl)oxyandrosta-1,4-dien-17§-karbothiové kyseliny .•rí-r.''· * ítpm**»·*--:·' -- .Τ'Tato sloučenina byla připravena z meziproduktu 6 za použití podobných postupů, jaké byly popsány v Příkladu 1; retenční čas při LCMS je 4,02 minuty, m/z 569 MH⁺.

Příklad 7:

S-fluormethylester 17a-(2,2-dichlor-1 -methy Icyklopropy Ikarbonyl)oxy-6a,9a-difluor-11 β-hydroxy-l 6a-methyl-3-oxoandrosta-1,4-dien-^-karbothiové kyseliny

Tato sloučenina byla připravena z meziproduktu 7 za použití podobných postupů, jaké byly popsány v Příkladu 1; retenční čas při LCMS je 3,79 minuty, m/z 595,597,599 MH⁺.

Příklad 8:

S-fluormethylester 17ct-(2,2-dichlorcyklopropylkarbonyl)oxy-6a,9a-difluor-11 β-hydroxy-16α-methyl-3-oxoandrosta-1,4-dien-17βΛ3^οίΝονέ kyseliny

Tato sloučenina byla připravena z meziproduktu 8 za použití e o

- 39 • · ·

podobných postupů, jaké byly popsány v Příkladu 1; retenční čas při LCMS je 3,68 minuty, m/z 581,583 MH⁺.

Příklad 9:

S-fluormethylester 6a,9oc-difluor-11 β- hydroxy-16oc-methyl-17a-(3-methylencyklobutylkarbonyl)oxy-3-oxoandrosta-1,4-dien-17β-^3Η>οίΙΐϊονέ kyseliny

Tato sloučenina byla připravena z meziproduktu 9 za použití podobných postupů, jaké byly popsány v Příkladu 1; retenční čas při LCMS je 3,68 minuty, m/z 539 MH⁺.

Příklad 10:

S-fluormethylester 6a,9oc-difluor-11 β- hydroxy-16oc-methyl-17a-(2-methylcyklopropylkarbonyl)oxy-3-oxoandrosta-1,4-dien-17β^3Γ0οίΙιΐονέ kyseliny

Tato sloučenina byla připravena z meziproduktu 10 za použití podobných postupů, jaké byly popsány v Příkladu 1; retenční čas při LCMS je 3,57 minuty, m/z 527 MH⁺.

Příklad 11:

S-fluormethylester 6ct, 9ct-dif luor-11 β- hydroxy-16cc-methyl-17<x-(1 methy Icyklobuty I karbony l)oxy-3-oxoandrosta-1,4-dien-17β^3±οthiové kyseliny

Tato sloučenina byla připravena z meziproduktu 11 za použití podobných postupů, jaké byly popsány v Příkladu 1; retenční čas při

A

A

- 40 ·· ·· *· • · · · 9 A « eeee · · • · · · · · · • · · · A A ·· ·· »A ·

LCMS je 3,73 minuty, m/z 541 MH⁺.

Příklad 12:

S-fluormethylester 6a,9a-difluor-17a-(3,3-dimethylcyklobutylkarbonyl)oxy-11 β-hydroxy-l 6a-methyl-3-oxoandrosta-1,4-dien-17β-karbothiové kyseliny

K míchanému a chlazenému (0 °C) roztoku meziproduktu 12 (585 mg, 1,12 mmol) v ethylacetátu (15 ml) byly ’ přidány voda (1,8 ml, benzyltributylamoniumchlorid (35 mg) a diizopropylethylamin (0,21 ml). Ke směsi míchané byl přidán roztok bromfluormethanu (0,075 ml) v ethylacetátu (0,75 ml) a směs byla při teplotě místnosti míchána 18 hodin. Poté byl přidán roztok 2% diethylaminu v soustavě acetonitrikvoda (4:1, 1 ml) a směs byla míchána 10 minut. Organická fáze byla oddělena, promyta následně 0,5 mol.l'¹ kyselinou chlorovodíkovou, vodou a 1% roztokem hydrogenuhličitanu sodného; poté byla vysušena a odpařena.-Zbytek (570 mg) byl čištěn preparativní HPLC k poskytnutí v nadpisu uvedené sloučeniny ve formě krémově zbarvené pevné látky (490 mg, 79 %): retenční čas při LCMS je 3,75 minut, m/z 555 MH⁺.

Příklad 13:

S-fluormethylester 6a,9a-difluor-17a-(3,3-difluorcyklobutylkarbonyl)oxy-11 β-hydroxy-l 6a-methyl-3-oxoandrosta-1,4-dien-17β-karbothiové kyseliny

Tato sloučenina byla připravena z meziproduktu 13 za použití podobných postupů, jaké byly popsány v Příkladu 12; retenční čas při LCMS je 3,47 minuty, m/z 563 MH⁺.

- 41 ·« 9» • · 9 9 9 • e «ββ · · • · · « · · · • · · · · · ·· ·· ·· • · · · · • * · · 9 • 9 9 9 · · · • · · 9 ·«· 99 9

Příklad 14:

S-fluormethylester 6a,9a-difluor-11 β- hydroxy-16a-methyl-17α-(1 methylcyklopentylkarbonyl)oxy-3-oxoandrosta-1,4^ίθη-17βkarbothiové kyseliny....... ................................ ...........................

Tato sloučenina byla připravena z meziproduktu 14 za použití podobných postupů, jaké byly popsány v Příkladu 12; retenční čas při LCMS je 3,71 minuty, m/z 555 MH⁺.

'Z ·

.....Příklad 15:

S-fluormethylester 6cc,9a-difluor-11 β-hydroxy-l6a-methyl-3-oxo-17a-(3-oxocyklobutylkarbonyl)oxy-androsta-1,4-dien-17p-karbothiové kyseliny

Tato sloučenina byla připravena z meziproduktu 15 za použití podobných postupů, jaké byly popsány v Příkladu 12; retenční čas při LCMS je 3,24minuty, m/z 541 MH⁺.

Příprava agonisty 3₂-adrenergního receptorů s dlouhým účinkem

Příklad X:

Acetát 3-(4-{[6-({(2R)-2-hydroxy-2-[4-hydroxy-3-(hydroxy-methyl)fenyl]-ethyl}amino)-hexyl]oxy}butyl)benzensulfonamidu (i) di(tertbutyl)-2-(2,2-dimethyl-4H-1,3-benzodioxin-6-yl)-2-oxoethylimidodikarbonát

Do míchané suspenze 2-brom-1 -(2,2-dimethyl-4H-1,3-benzodioxin-6-yl)ethanonu od firmy Glaxo (DE 3 513 885, 1985) (61,8 g) a di-tΦ· *· • · · β β ββί • · · · • · · · ·· Φ· «· • · • ·

Φ ·

ΦΦΦ • ····

Φ ·

- 42 φφ ·

·· ·· φ φφ butyliminodikarboxylátu (47,15 g) v acetonitrilu (600 ml) byl pod dusíkovou atmosférou přidán uhličitan česný (70,4 g). Po důkladném míchání, které probíhalo 24 hodin při teplotě 21 °C, byla směs naředěna vodou (přibližně 800 ml) a produkt byl extrahován diethyletherem (1 I a poté 200 ml). Spojené organické vrstvy byly promyty solným roztokem, vysušeny (MgSOJ a zahuštěny na objem přibližně 400 ml. Filtrací byly shromážděny bílé krystaly, které byly promyty diethyletherem a vysušeny k poskytnutí v nadpisu uvedené sloučeniny (24,4 g): 6(CDCI₃) 7,78 (1H, dd, J 8, 2 Hz), 7,65 (1H, brs), 6,87 (1H, d, J 8 Hz), 4,97 (2H, s), 4,88 (2H, s), 1,56 (6H, s) a~1,48 (18H, s).'Další zahuštění matečných výluhů poskytlo další produkt (13,8 g). Třetí část produktu (7,1 g) byla získána chromatografováním matečných výluhů na silikagelu, odpařením příslušného eluátu a rozmělněním s diethyletherem.

(ii) tert-buty 1-2-(2,2-dimethyl-4H-1,3-benzodioxin-6-yl)-2-oxóethylkarbamát

Do míchaného roztoku di(tert-butyl)-2-(2,2-dimethyl-4H-1,3-benzodioxin-6-yl)-2-oxoethylimidodikarbonátu (352,55 g) v dichlormethanu (3,6 I) byla při teplotě 21 °C přidána kyselina trifluoroctová (92 ml) a reakce byla míchána po dobu 1,5 hodiny. Poté byl přidán vodný roztok hydroxidu sodného (1,75 I) a fáze byly po 10 minutách odděleny. Organická fáze byla promyta vodou, vysušena nad síranem hořečnatým a odpařena do formy oleje. Ten byl přes noc skladován pod vysokým vakuem a poté byl rozetřen se soustavou hexan:ether (3:1) k poskytnutí surového produktu (226,61 g). Ten byl čištěn rekrystalizací z diethyletheru k poskytnutí v nadpisu uvedené sloučeniny (122,78 g). Další produkt (61,5 g) byl získán z matečných výluhů odpařením a chromatografií na materiálu Biotage za použití 15% ethylacetátu v hexanu. LCMS RT = 3,37 minuty.

(i i i) tert-buty l-(2R)-2-(2,2-d i methyl-4H-1,3-benzodioxin-6-yl)-2-hydroxyethyl karbamát

Do 1 mol.l¹ roztoku (R)-tetrahydro-l-methyl-3,3-difenyl-1 H,3H-pyr-------------rolo[1, 2-cj[1,3,2]oxazaboroiu v toluenu (56 ml) byl při teplotě 0 °C a pod dusíkovou atmosférou pomalu přidán 2 mol.l'¹ roztok boranu-dimethylsulfidu v tetrahydrofuranu (28 ml). Za udržování teploty na hodnotě nižší než 5 °C byl pomalu, v průběhu 50 minut, přidán roztok tert-buty 1-2-(2,2-d i methyl-4H-1,3-benzodioxin-6-yl)-2-oxoethy lkarbamátu (108,2 g) v tetrahydrofuranu (1,3 litru) a následně 2 mol.l'¹ roztok boranu-dimethylsulfidu v tetrahydrofuranu (252 ml). Po jedné hodině byla za chlazení přidána 2 mol.l'¹ HCI (170 ml) a směs byla rozdělena mezi ethylacetát a vodu. Organická vrstva byla promyta nasyceným roztokem NaHCO₃a solným roztokem a poté byla vysušena nad síranem hořečnatým. Roztok byl zahuštěn, produkt byl čištěn chromatografií na* bleskovém silikagelu (800 g) a pak byl postupně eluován soustavou hexan: ethylacetát 4:1 a následně 3:1 k poskytnutí v nadpisu uvedené sloučeniny (93,3 g); LCMS RT = 3,31 minuty.

(iv) (5R)-5-(2,2-dimethyl-4H-1,3-benzodioxin-6-yl)-1,3oxazolidin-2-on

Tert-buty l-(2R)-2-(2,2-d imethy I-4H-1,3-benzodioxin-6-yl)-2-hydro xyethylkarbamát (86,32 g) v dimethylformamidu (600 ml) byl po kapkách přidán do míchané suspenze hydridu sodného (60% olejová disperze, 11,9 g) v DMF (160 ml) pod dusíkovou atmosférou a za takového chlazení, aby vnitřní teplota zůstávala nižší než 0 °C. Směs byla míchána 2 hodiny při 21 °C, poté byla opět ochlazena na 0 °C a přidána byla 2 mol.l'¹ HCI (134 ml). Směs byla naředěna vodou a produkt byl dvojnásobně extrahován ethylacetátem. Získaný roztok byl dvojnásobně promyt solným roztokem, vysušen nad síranem hořečnatým a odpařen k

- 44 poskytnutí v nadpisu uvedené sloučeniny (63,55 g); LCMS RT - 2,66 minuty.

(v) 6-bromhexyl-but-3-inylether

3-butyn-1-ol (42,4 ml) byl 3 dny pod dusíkovou atmosférou důkladně míchán s 1,6-dibromhexanem (260 ml) a dvojsíranem tetrabutylamonným (2,4 g) v 50% vodném roztoku hydroxidu sodného (200 ml). Poté byla přidána voda (přibližně 700 ml) a organická vrstva ' ·'· ir .: · · •Ur*''»· /„O .....·, byla oddělena. Vodná vrstva byla dvojnásobně extrahována dichlormethanem (2 x 100 ml) a spojené organické vrstvy byly promyty vodou, vysušeny nad síranem hořečnatým a zahuštěny. Zbytek byl v petroletheru (teplota varu 40 až 60 °C) nanesen na sloupec silikagelu (1,5 kg) a tento sloupec byl eluován petroletherem (teplota varu 40 až 60 °C) k poskytnutí v nadpisu uvedené sloučeniny (103,3 g), δ (CDCI₃): 3,56 (2H, t, J 7 Hz), 3,47 (2H, t, J 7 Hz), 3,42 (2H, t, J 7 Hz), 2,45 (2H, m), 1,99 (1H, t, J 2Hz), 1,87 (2H, m), 1,60 (2H, m) a 1,50 až 1,33 (4H, m).

(vi) (5R)-3-[6-(but-3-inyloxy)hexyl]-5-(2,2-dimethyl-4H-1,3-benzodioxin-6-yl)-1,3-oxazolidin-2-on (5R)- 5-(2,2-dimethyl-4H-1,3-benzodioxin-6-yl)-1,3-oxazolidin-2-on (10 g) v DMF (100 ml) byl po kapkách přidán do míchané suspenze hydridu sodného (60% olejové disperze, 2,33 g) v DMF (50 ml) za míchání pod dusíkovou atmosférou a udržování vnitřní teploty na 0 °C. Míchání pokračovalo 1 hodinu při teplotě v rozmezí 0 až 5 °C. Směs byla opět ochlazena na 0 °C a v průběhu 1 minuty byl přidán roztok

6-bromhexyl-but-3-inyletheru (14,7 g) v DMF (50 ml). Tato směs byla míchána 2 hodiny při teplotě 20 až 30 °C. Pak byla přidána 2 mol.l'¹ HCI (9 ml) a směs byla rozdělena mezi vodu a diethylether. Vodná vrstva • · · ·

- 45 byla extrahována dalším diethyletherem a spojené organické vrstvy byly dvojnásobně promyty solným roztokem. Po vysušení nad síranem hořečnatým byl roztok zahuštěn a nanesen na sloupec silikagelu (600 g), který byl ekvilibrován v soustavě diethylether:petrolether (bod varu 40 -až- 60 °-C) (1:2).Tento sloupec byl eluován nejprve uvedenou směsí,. poté stejnou směsí v poměru 1:1a nakonec diethyletherem k poskytnutí v nadpisu uvedené sloučeniny (13,88 g); LCMS RT = 3,45 minuty.

(vii) 3-[4-({6-[(5R)-5-(2,2-dimethyl-4H-1,3-benzodioxin-6-yl)-2-oxo.....J .S-oxazolidin-S-yllhexylJoxyjbut-l-inyljbenzensulfonamid (5R)-3-[6-(but-3-inyloxy)hexyl]-5-(2,2-dimethyl-4H-1,3-benzodio xin-6-yl)-1,3-oxazolidin-2-on (1,79 g) byl míchán s 3-jodobenzensulfonamidem (1,4 g) v soustavě acetonitriktriethylamin (1:1, 42 ml) 10 minut pod dusíkovou atmosférou. Poté byly přidány jodid měďný (0,083 g) a dichlor-bis(trifenylfosfin)palladium (0,192 g) a směs byla míchána pod dusíkovou atmosférou 17 hodin při teplotě 21 °C. Poté byla odpařena do sucha a zbytek byl chromatografován na silikagelu (250 g) v·soustavě 30% ethylacetát:petrolether (bod varu 40 až 60 °C), poté ve stejné soustavě s obsahem 50% ethylacetátu, následně s obsahem 70% ethylacetátu a nakonec v ethylacetátu samotném k poskytnutí v nadpisu uvedené sloučeniny (2,35 g); LCMS RT = 3,44 minuty.

(viii) 3-[4-({6-[(5R)-5-(2,2-dimethyl-4H-1,3-benzodioxin-6-yl)-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-yl]hexyl}oxy)butyl]benzensulfonamid

3-[4-({6-[(5R)-5-(2,2-dimethyl-4H-1,3-benzodioxin-6-yl)-2-oxo-1,3 -oxazolidin-3-yl]hexyl}oxy)but-1-inyl]benzensulfonamid (2,35 g) byl míchán s oxidem platiny (0,3 g) v THF (30 ml) 2 hodiny pod vodíkovou atmosférou. Katalyzátor byl odstraněn filtrací za pomoci filtru a filtrační koláč byl vylouhován ethylacetátem. Spojené filtráty byly ponechány projít přes silikagel (200 g) v ethylacetátu a eluát byl odpařen k

poskytnutí v nadpisu uvedené sloučeniny (2,32 g); LCMS RT = 3,49 minuty.

(íx) 3-{4-[(6-{[(2R)-2-(2,2-dimethyl-4H-1,3-benzodioxin-6-yl)-2-.............hydroxyethyl]amino}hexyl)oxy]butyl}benzensulfonamid______________

3-[4-({6-[(5R)-5-(2,2-dimethyl-4H-1,3-benzodioxin-6-yl)-2-oxo-1,3 oxazolidin-3-yl]hexyl}oxy)butyl]benzensulfonamid (0,43 g) byl míchán v THF (10 ml) za pročišťování proudem dusíku po dobu 5 minut. Přidán byl trimethylsilanát draselný (0,43*g)'' á*smlěs byla míchán'a'*pod dusíkovou atmosférou 2,5 hodiny při teplotě 70 °C. Poté byla rozdělena mezi dichlormethan a fosforečný pufr o pH 6,4, přičemž vodná vrstva byla následně extrahována větším množstvím dichlormethanu. Spojené organické vrstvy byly promyty vodou, vysušeny nad síranem hořečnatým a zahuštěny. Zbytek byl čištěn na silikagelu (60 g) z něhož byl eluován následným použitím soustavy acetát:petrolether (bod varu 40 až 60 °C) (1:1), ethylacetátu, 10% a poté 20% methanolu v ethylacetátu, k poskytnutí v nadpisu uvedené sloučeniny (0,286 g); LCMS RT = 2,56 minuty.

(x) Acetát 3-(4-{[6-({(2R)-2-hydroxy-2-[4-hydroxy-3-(hydroxymethyl)-fenyl]-ethyl}amino)-hexyl]oxy}butyl)benzensulfonamidu

3-{4-[(6-{[(2R)-2-(2,2-dimethyl-4H-1,3-benzodioxin-6-yl)-2-hydroxyethyl]amino}hexyl)oxy]butyl}benzensulfonamid (0,283 g) byl míchán s kyselinou octovou (8 ml) a vodou (4 ml) 35 minut při 70 °C a poté byl odpařen do sucha. Zbytek byl dvojnásobně opakovaně odpařen z toluenu k poskytnutí v nadpisu uvedené sloučeniny (0,318 g); LCMS RT = 2,34 minuty, ES + ve 495 (MH)⁺.

Farmakologická aktivita

Farmakologická aktivita byla stanovována ve funkčním stanovení in vitro aktivity glukokortikoidového agonisty, která obecně předznačuje protizánětlivou nebo protialergickou aktivitu v podmínkách in vivo.

-----------Funkční stanovení bylo založeno......na.....práci K. P. Raye a spoluautorů, Biochem. J. 328, 707-715, 1997. Buňky A 549, stálým způsobem transfektované s reportérovým genem obsahujícím elementy schopné odpovědi na NF-κΒ z promotoru genu ELÁM spojeného s sPAP (vylučovaná alkalická fosfatáza), byly ovlivňovány testovanými sloučeninami ve vhodných dávkách po dobu jedné hodiny při 37 °C. Pak byly buňky stimulovány faktorem nekrózy tumoru (TNF, 10 ng/mf) po dobu 16 hodin, přičemž v průběhu tohoto období bylo měřeno množství vytvořené alkalické fosfatázy standardním kolorimetrickým stanovením. Byly sestrojeny křivky závislosti na dávce a z nichž byly odhadnuty hodnoty EC₅₀. V tomto testu sloučeniny z Příkladů 1 až 15 vykazovaly hodnoty EC_S0 menší než 2 nmol.l'¹.

Plošné testování aktivity progesteronového receptoru

Bylo popsáno, že buněčná linie T47D lidské rakoviny. prsu omezuje endogenní alkalickou fosfatázu v odpovědi na progestiny (Di Lorenzo se spoluautory, Cancer Research 51, 4470-4475, 1991). Buňky T47D byly zaočkovány do mikrotitračních destiček o 96 jamkách v hustotě 1 x 10⁵ buněk na jamku a byly pěstovány přes noc při teplotě 37 °C. Steroidy byly rozpuštěny v dimethylsulfoxidu (DMSO), přidány k buňkám (konečná koncentrace DMSO byla 0,7 %) a ty byly inkubovány 24 hodin při 37 °C. Poté byly promyty fosfátem pufrovaným fyziologickým roztokem (PBS) a byly lyžovány pufrem RIPA (1% IGEPAL, 0,5% deoxycholát sodný, 0,1% SDS, tj. dodecylsulfát sodný, ve fosfátem pufrovaném fyziologickém roztoku). Aktivita alkalické fosfatázy byla měřena spektrofotometricky (vlnová délka 405 nm) za použití

- 48 • »

p-nitrofenylfosfátu (1,5 mg/ml) jako substrátu, rozpuštěného v 1 mol.l¹ diethanolaminu, 0,28 mol.l'¹ NaCl a 0,5 mmol.l'¹ MgCI₂. Byly sestrojeny křivky závislosti na dávce, z nichž byly odhadnuty hodnoty EC₅₀.

Příklady 5 a 11 byly testovány vzhledem k progesteronové aktivitě v souladu s výše uvedeným plošným testováním a selektivita byla stanovena vydělením ED₅₀ na progesteronovém receptoru hodnotou ED₅₀ na glukokortikoidovém receptoru. Selektivita příkladu 5 byla 353 (pro srovnání selektivita propionátu fluticasonu = 57) a selektivita Přikladu 11 byla 1 230 (pro srovnání'selektivita přopionaťu fluticasonu = 107).

V tomto popisu vynálezu a v následujících nárocích, pokud ze . souvislosti nevyplývá něco jiného, je třeba výraz obsahuje a jeho ^? varianty jako obsahují a obsahující chápat jako zahrnující uvedené celé číslo nebo krok nebo skupinu celých čísel, ne však jako vylučující jakékoliv jiné celé číslo nebo krok nebo skupinu celých čísel či kroků. Patenty a patentové aplikace, zmiňované v této přihlášce vynálezu, jsou zde začleněny jako odkaz.

Claims (26)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Esterový derivát androstanu vzorce (I) kde

   R, představuje C^alky! nebo C^ghalogenalkyl;

   R₂ představuje C₃.₈cykloalkyl nebo C₃.₈cykloalkenyl, z nichž každý může být volitelně substituován jednou nebo více ze skupin, zvolených z oxoskupiny, methylu, methylenu, halogenu;

   R₃ představuje vodíkový atom, methyl, který může být buď v konfiguraci alfa nebo beta, nebo methylen;

   R₄ a R₅ jsou stejné nebo odlišné a každý představuje vodíkový atom nebo halogen; a představuje jednoduchou nebo dvojitou.vazbu;

   a solváty takové sloučeniny.
2. 2. Esterový derivát androstanu podle nároku 1, kde R₂ představuje

   C₃.₈cykloalkyl nebo C₃.₈cykloalkenyl, z nichž každý můž být volitelně substituován jednou nebo více ze skupin, zvolených z methylu, methylenu a halogenu.
3. 3. Esterový derivát androstanu podle nároku 1 nebo 2, kde R₂ představuje C₃.₆cykloalkyl, volitelně substituovaný jednou nebo více z methylových nebo chlorových skupin.

   i

   Z*
4. 4. Esterový derivát androstanu podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3, kde R₁ představuje fluormethyl, chlormethyl, brommethyl nebo 2'-f I uorethy I.

   .....
5. 5. Esterový derivát androstanu podle nároku 4, kde R₁ představuje fluormethyl.
6. 6. Esterový derivát androstanu podle kteréhokoliv z nároků 1 až 5, kde R₃ představuje methyl.

   · * ·- * ν· jtt/f'F r-- na*’*··- .-·»·*· ¹ ί x*
7. 7. Esterový derivát androstanu podle kteréhokoliv z nároků 1 až 6, kde R₄ a R_s jsou stejné nebo odlišné a každý představuje atom vodíku, fluoru nebo chloru.
8. 8. Esterový derivát androstanu podle nároku 7, kde R₄ a R₅ jsou stejné nebo odlišné a každý představuje atom vodíku nebo fluoru.
9. 9. Esterový derivát androstanu podle nároku 8, kde jak R₄ tak i R₅ jsou atomem fluoru.
10. 10. Esterový derivát androstanu podle kteréhokoliv z nároků 1 až

    9, kde představuje dvojnou vazbu.
11. 11. Esterový derivát androstanu podle nároku 1, kterým je:

    S-fluormethylester 17cc-(cyklobutylkarbonyl)oxy-6oc,9a-difluor-11 β-hydroxy-16cc-methyl-3-oxoandrosta-1,4-dien-17p-karbothiové kyseliny;

    S-fluormethylester 17a-(cyklopentylkarbonyl)oxy-6a,9oc-difluor-11 β-hydroxy-16a-methyl-3-oxoandrosta-1,4-dien-1 ϊβΛθΦοίΐΊίονέ kyseliny;

    S-fluormethylester 17ct-(cyklohexylkarbonyl)oxy-6ct,9a-difluor-11 β-hydroxy-16cc-methyl-3-oxoandrosta-1,4-dien-17β^8Η>οίΜονέ kyseliny;

    - 51 S-fluormethylester 17a-(cyklopropylkarbonyl)oxy-6a,9a-difluor-11 β-hydroxy-16a-methýl-3-oxoandrosta-1,4-dien-17βΛ3Φο1Ιΐϊονέ kyseliny; nebo solvát kterékoliv z výše uvedených sloučenin.
12. 12. Esterový derivát androstanu podle nároku 1, kterým je:

    S-fluormethylester 6a, 9a-d ifl uor-11 β-hydroxy-l 6a-methy 1-17a-(1-methylcyklopropylkarbonyl)oxy-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β^3Η>οίΙιΐονό kyseliny;

    S-fluormethylester 6a, 9a-difl uor-11 β-hydroxy-l 6a-methyl-3-oxo-17a-(2,2,3,3-tetramethyl - cyklopropylkarbohyl)oxy - androsta-1,4^ίβη-17β-karbothiové kyseliny;

    S-fluormethylester 17a-(2,2-dichlor-1-methy1cyklopropylkarbonyl)oxy-6a,9a-difluor-11 β-hydroxy-l6a-methyl-3-oxo-androsta-1,4 - dien - 17β karbothiové kyseliny;

    S-fluormethylester 17a-(2,2-dichlorcyklopropylkarbonyl)oxy-6a,9adif.luor-11 β-hydroxy-l6a-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β^3ΦοίΙιίο vé kyseliny;

    S-fluormethylester 6a,9a-difluor-11 β-hydroxy-l6a-methyl-17a-(3 - me thylencyklobutylkarbonyl)oxy - 3 -oxo-androsta-1,4-dien-1/β^θ^οίΝονέ kyseliny;

    S-fluormethylester 6a,9a-difluor-11 β-hydroxy-l 6a-methy 1-17a-(2-me thylcyklopropylkarbonyl)oxy - 3 - oxo-androsta-1,4-dien-^-karbothiové kyseliny;

    nebo solvát kterékoliv z uvedených sloučenin.
13. 13. Esterový derivát androstanu podle nároku 1, kterým je:

    ·· ·· · ·· · • · · ···· ··· • ···· o e β · · ·

    -52- ;·::·· •· · · ·· ··· · ·

    S-fluormethylester 6a,9a-difluor-1 ip-hydroxy-16a-methyl-17a - (1-me thylcyklobutylkarbonyl)oxy-3-oxo-androsta-1,4- dien - 17β - karbothiové kyseliny;

    nebo solvát takové sloučeniny.
14. 14. Esterový derivát androstanu podle nároku 1, kterým je:

    S-fluormethylester 6a,9a-difluor-17a-(3,3-dimethylcyklobutylkarbonyl) oxy - 11 β -hydroxy-16a-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-173-karbothiové •.kyseliny; ___.

    S-fluormethylester 6a,9ct-difluor-17a-(3,3-difluorcyklobutyIkarbonyl) oxy - 11 β -hydroxy-16a-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17p-karbothiové kyseliny;

    S-fluormethylester 6a,9a-difluor-11 β-hydroxy-l 6a-methyl-17a-(1-me thylcyklopentylkarbonyl)oxy-3-oxo-androsta-1,4-dien - 17β - karbothiové kyseliny;

    S-fluormethylester 6a, 9a-dif luor-11 β-hydroxy-l 6a-methyl-3-oxo-17a-(3-oxocyklobutylkarbonyl)oxy-androsta-1,4-dien-17p-karbothiové kyseliny;

    nebo solvát kterékoliv z uvedených sloučenin.
15. 15. Esterový derivát androstanu vzorce (I) podle kteréhokoliv z nároků 1 až 14, nebo jeho fyziologicky přijatelný solvát, pro použití ve veterinárním nebo humánním lékařství.
16. 16. Použití esterového derivátu androstanu vzorce (i) podle kteréhokoliv z nároků 1 až 14, nebo jeho fyziologicky přijatelného solvátu, pro výrobu léčiva k léčbě zánětlivých a/nebo alergických stavů.
17. 17. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje esterový derivát androstanu vzorce (1) podle kteréhokoliv z nároků 1 až 14 nebo jeho fyziologicky přijatelný solvát ve směsi, pokud je to žádoucí, společně s jedním nebo více z fyziologicky přijatelných ředidel nebo nosičů.

    -.........
18. 18. Farmaceutický aerosolový-prostředek, vy z n a č u j í c í se tím, že obsahuje esterový derivát androstanu vzorce (1) podle kteréhokoliv z nároků 1 až 14 nebo jeho fyziologicky přijatelný solvát a flourouhlíkovou sloučeninu nebo chlorofluorouhlíkovou sloučeninu <r ” obsahující vodík jako hnací médium, volitelně v kombinaci s povrchově aktivní látkou nebo s pomocným rozpouštědlem.
19. 19. Farmaceutický prostředek podle nároku 17, vyznačující se tím, že dále obsahuje jiné léčebně účinné činidlo.
20. 20. Farmaceutický prostředek podle nároku 19, v y z n a č u j í c í se tím, že jako zmíněné jiné léčebně účinné činidlo obsahuje agonistu p₂-adrenergního receptoru.
21. 21. Farmaceutický prostředek podle nároku 20, v y z n a č u j í c í se tím, že jako zmíněného agonistu p₂-adrenergního receptoru obsahuje sloučeninu vzorce (X):

    nebo její sůl či solvát, kde:

    m je celé číslo od 2 do 8;

    n je celé číslo od 3 do 11;

    s tou výhradou, že m + n je 5 až 19;

    - 54 R¹¹ je -XSO2NR¹⁶R¹⁷, kde X je -(CH2)_p- nebo C₂.₆alkylen;

    R¹⁶ a R¹⁷ jsou nezávisle zvoleny z vodíkového atomu C.,.6alkylu, C3.7cykloalkylu, C(O)NR¹⁸R¹⁹, fenylu a fenyl(C.,_4alky!u)-, nebo R¹⁶ a R¹⁷· společně s dusíkovým atomem na který jsou vázány, vytvářejí 5-, 6-, nebo 7-členný kruh obsahující dusíkový atom, a R¹⁶ a R¹⁷ jsou každý volitelně substituovaný jednou nebo dvěma skupinami, zvolenými z halogenu, C^alkyiu, C^halogenalkylu, C^alkoxylu, hydroxysubstituovaného C.,.6alkoxylu, -CO2R¹⁸, -SO2NR¹⁸R¹⁹, -CONR¹⁸R¹⁹, NR¹⁸C(O)R¹⁹ nebo 5-, 6- nebo 7-členného heterocyklického kruhu;

    R¹⁸ a R¹⁹ jsou nezávisle zvoleny z vodíkového atomu, C^alkylu, C₃.₆cykloalkylu, fenylu a fenyl(C₁.₄alkylu)-; a p je celé číslo od 0 do 6 a lépe od 0 do 4;

    R¹² a R¹³ jsou nezávisle zvoleny z vodíkového atomu, C^alkylu,

    C^alkoxylu, halogenu, fenylu a C^halogenalkylu; a

    R¹⁴ a R¹⁵ jsou nezávisle zvoleny z vodíkového atomu a C₁.₄alkylu, s tou výhradou, že celkový počet uhlíkových atomů v R¹⁴ a R¹⁵ nepřevyšuje 4.
22. 22. Farmaceutický prostředek podle nároku 21, vyznačující se tím, že jako zmíněnou sloučeninu vzorce (X) obsahuje 3-(4-{[6-({(2R)-2-hydroxy-2-[4-hydroxy-3-(hydroxymethyl)fenyl]ethyl}amino)hexyl]oxy}butyl)benzensulfonamid, nebo jeho sůl či solvát.
23. 23. Způsob léčby lidského nebo zvířecího subjektu se zánětlivým a/nebo alergickým stavem, vyznačující se tím, že se zmíněnému lidskému nebo zvířecímu subjektu podává účinné množství esterového derivátu androstanu vzorce (I) podle kteréhokoliv z nároků 1 až 14, nebo jeho fyziologicky přijatelného solvátů.
24. 24. Způsob výroby esterového derivátu androstanu vzorce (I) podle nároku l.vyznačujícíse tím, že se provádí alkylace sloučeniny vzorce (II) • · • « ♦ kde R₂, R₃, R₄, R_s a odpovídají definici, uvedené v nároku 1.

    .ΛΛ
25. 25. Způsob výroby podle nároku 24, v y z-n a č u j í c í se tím, že alkylace se provádí reakcí sloučeniny vzorce (II) s vhodným alkylnebo halogenalkylhalidem.
26. 26. Sloučenina vzorce (II) ^Rs

    V.

    kde R₂, R₃, R₄, R_s a odpovídají definici, uvedené v nároku 1.