CS214798B2 - Method of stabilization of active substances - Google Patents

Description

(54) Způsob stabilizace aktivních látek

Vynález se týká způsobu stabilizace aktivních látek vybraných ze skupiny zahrnující prostacyklin, 15-methylprostacyklin, 16,16-dimethylprostacyklin a jejich soli proti enol-esterové části molekuly, který se vyznačuje tím, že se uvedené aktivní látky spojí s farmaceuticky vhodným pufrem, jehož pH je nejméně 9, a který jako hlavní acidickou složku tlumivého roztoku obsahuje aminokyselinu, například glycin, alanin, arginin a valin.

Uvedený vynález se týká farmaceutických přípravků obsahujících prostacyklin - (PGI2, PGX], 15-methylprostacyklin, 16,16-dimethylprostacyklin nebo jejich farmaceuticky vhodné soli.

Prostacyklin a jeho soli jsou důležité v humánní medicíně a veterinární praxi, protože se vyznačují silným antikoagulačním účinkem na krevní destičky, urychlují hojení a brání vzniku nebo mají terapeutický efekt na žaludeční vředy.

Antikoagulačního působení na krevní destičky lze využít například k prevenci nebo mírnění vzniku thrombů nebo embolů při mimotělním krevním oběhu, např. ledvinové dialýze a při kardio-pulmonárním oběhu.

Při použití prostacyklinu a jeho solí jsou známé obtíže spočívající v tom, že prostacyklin a - - . jeho soli jsou nestabilní, zvláště ve vodném prostředí a . jsou převáděny na 6-oxo-PGFi_e a jeho soli, které jsou většinou farmakologicky neúčinné a mají velmi malou - nebo žádnou účinnost prostacyklinu a jeho solí.

O prostacyklinu a jeho solích je známo, že jsou více stabilní v alkalickém prostředí než v kyselém nebo neutrálním prostředí. Ačkoliv - bylo dosaženo určitého zlepšení ve stabilitě - - .použitím tris-pufru v alkalickém roztoku, - prostacyklin se přesto stále rozkládal. To_: . znamenalo, že prostacyklin musel být připraven krátce před použitím intravenosní infúze a farmakologický účinek se značně měnil podle doby použití uplynulé od přípravy roztoku. Tak vznikaly potíže při infúzním. podání, aby je bylo možno kontrolovat tak pečlivě, jak je žádoucí.

S překvapením bylo nalezeno značné zlepšení ve - - stabilitě prostacyklinu, 15-methylprostacyklinu, 16,16-dimethylprostacyklinu a jejich solí, z nichž nejvýhodnější je sodná sůl (dále jsou nazývány jako účinné složky) v kombinaci s farmaceuticky - vhodným pufrem s - aminokyselinou jako hlavní acidickou složkou pufru. Účinná složka a pufr mohou být ' spojeny v pevném stavu i v roztoku, přičemž se jako rozpouštědla obvykle používá - vody. Jsou-li účinná látka a pufr v roztoku, - - měřené pH je pH roztoku obsahujícího - - - účinnou složku a pufr a je - žádoucí, aby uvedený přípravek nebo pufr měl pH nejméně - 9.

Jestliže - účinná látka a pufr jsou spojeny v pevném stavu, hodnotou pH pufru nebo přípravku rozumíme - hodnotu pH měřenou některým - z - následujících způsobů. Jestliže pevná látka je zmrazený - roztok, potom se měří pH roztoku vzniklého roztáním tohoto zmrazeného roztoku. Pro - jiné pevné stavy se měří pH roztoku vzniklého po rozpuštění spojené aktivní složky a pufru ve vodě pro injekci o - hodnotě pH 7.

Pro zvláštní případ lyofilizátů takového roztoku, - měří se pH roztoku vzniklého rozpuštěním vzorku lyofilizátů v minimálním objemu vody pro injekci o pH rovném 7 potřebném k získání čirého roztoku,

V pevné fázi má lyofilizace takového roztoku za - následek zlepšenou stabilitu účinné látky. Lyofilizace může být provedena různým způsobem, například v ampulkách nebo v lahvičkách. Roztoky mohou být také zmrazený a skladovány; při —20 °C - pro použití - jako zmrazené injekce, případně zředěné injekce po roztáni.

Uvedený roztok a všechny -roztoky dále uváděné pro lékařské účely jsou rozuměny sterilní roztoky.

Prostacyklin a jeho analoga, - zejména 15-methylprostacyklin a 16,16-dimethylprostacyklin a jejich soli mohou být připraveny metodami popsanými v patentu VB číslo 854 463 pro přípravu sloučenin obdobné struktury. Metody zahrnují dehydrohalogenaci sloučenin obecného vzorce I

kde

X značí brom nebo jod,

Y značí OH, NHR4 nebo OR, kde R značí alkyl s - 1 až 4 atomy uhlíku, nebo farmaceuticky vhodný kation např. sodíku, R4 značí alkyl s 1 až 4 atomy uhlíku,

R1, R2, R3 jsou nezávisle vybrány ze skupiny, kterou tvoří atom vodíku a alkyl s 1 až 4 atomy uhlíku, zejména methylskupina jako základní složka;

například je-li R1 atom- vodíku, R2 a R³ jsou oba methylskupiny a naopak, a převedením, je-li to nutné, vzniklé sloučeniny, kde Y značí NHR⁴ nebo - OR, kde R a R4 značí alkyl o 1 až 4 atomech' uhlíku, na požadovanou účinnou látku.

Při výběru aminokyseliny použité v pufru je dávána přednost aminokyselinám prostým síry, nejvýhodnější aminokyselinou je glycin, především proto, že je snadno dostupný a při jeho - syntetické přípravě ho není nutno štěpit na optické izomery. Mohou být ale také použity - jiné aminokyseliny, např. valin, alanin a arginin.

Celková koncentrace aminokyseliny (tj. včetně její soli) má být tak nízká, jak je to možné pro získání stabilního pufru, např. v - rozmezí od 20 mol/m3 30 mol/m3, výhodně asi 25 mol/m3, protože přítomnost většího množství aminokyseliny působí snížení stability aktivní sloučeniny zvýšením iontové síly roztoku spojené aktivní sloučeniny a pufru. Aminokyselina musí být dostatečně rozpustná, aby zajistila dostatečnou tlumivou kapacitu pufru.

Je-li v roztoku -pufru přítomen chlorid sodný, což je výhodné, přidané množství chlori214798 du sodného- by nemělo být takové, aby roztok byl farmaceuticky . nepřijatelný. Výhodné je použít tu samou molární koncentraci chloridu sodného, jako je koncentrace aminokyseliny. - Příliš mnoho chloridu sodného by zvýšilo iontovou sílu roztoku spojené aktivní sloučeniny a pufru; nepříznivým a nežádoucím způsobem by ovlivňovalo stabilitu účinné složky. Jiné soli, např. chlorid draselný, mohou být také přítomny jako .. takové, nebo jako složky, pokud jsou farmaceuticky přijatelné.

Výhodné pH pufru je 10,2 až 11,6, zvláště výhodné je asi 10,5, je-li měření prováděno vhodnou metodou, jak je výše uvedeno.

Jako příklad přípravy tlumivého roztoku obsahujícího prostacyklin podle vynálezu byl připraven roztok glycinu ve vodě obsahující také chlorid sodný. K tomuto roztoku byl přidán hydroxid sodný, jako báze pro zvýšení hodnoty pH na požadovanou hodnotu a potom byl přidán prostacyklin.

Ačkoliv ve výše uvedeném příkladu byl použit jako báze - hydroxid sodný, může být použita jakákoliv jiná báze, která je dostatečně silná tak, aby upravila pH tlumivého roztoku na požadovanou hodnotu. Použitá báze by měla být taková, která dává farmaceuticky vhodný roztok, například ^?' ta, která není škodlivá pro příjemce. Množství použité aminokyseliny, např. glycinu a báze, např. hydroxidu sodného by mělo být tak nízké, jak je nutné pro stabilizaci aktivní sloučeniny pro požadované časové období. Užití přebytku obou složek, buď aminokyseliny nebo báze, způsobuje zadržení vody v lyofilizovaném materiálu, které ? přináší úbytek aktivní složky. pH roztoku je důležitý faktor pro stanovení farmaceutické použitelnosti. Jestliže roztok pufru má být zaveden do přístroje, například při ledvinové dialýze, potom pH může být až 12 nebo dokonce více, ? ale jestliže roztok pufru má být použit ve . velkém objemu pro nitrožilní použití, . například při kardio-pulmonárním obtoku, potom? pH aplikovaného roztoku by se mělo pohybovat v rozmezí od 8,4 do 9. Snížení hodnoty pH může být provedeno krátce před použitím.

V roztoku mohou být také obsaženy ? jiné tlumivé roztoky, ale jejich množství by nemělo podstatně snížit stabilitu aktivní sloučeniny v roztoku. Například v roztoku může být přítomno -určité množství uhličitanu, ? odvozeného z prostacyklinu, například sodná sůl prostacyklinu může obsahovat do 5 % hmotnostních uhličitanu sodného.

Protože účinná látka má značnou farmakologickou účinnost, je potřebná dávka ? velmi malá. Například na osobu o průměrné lidské hmotnosti 70 kg je zapotřebí pro jednohodinovou infúzi pouze několik miligramů účinné látky. Množství účinné látky v daném tlumivém roztoku před lyofilizací závisí na plánovaném použití lyofilizátu po rekonstituci. Rekonstituce může být provedena tlumivým roztokem prostým účinné - lát ky, takže poměr účinné látky .. k tlumivým složkám může být mnohem větší v lyofilizátu než v roztoku určeném k podání.

Jestliže je lyofilizován roztok obsahující pouze tlumivé látky, účinnou látku a chlorid sodný, . nejsou účinnost a vzhled lyofilizátu zcela uspokojující. Proto se před lyofilizací přidává do roztoku vhodná přísada. Výhodnou přísadou je mannitol. Vhodná koncentrace přísady je od 25 do 50 mg/ml tlumivého roztoku. Důsledkem použití koncentrace nižší . než 25 mg/ml (pro mannitol] je nedostatečné zlepšení účinnosti a vzhledu. Jestliže se . použije koncentrace mannitolu vyšší než 50 mg/ml, následuje pouze malé nebo žádné zlepšení účinnosti a vzhledu a stabilita účinné látky může být ovlivněna . nežádoucím způsobem. Přísada poskytuje v lyofilizátu nosný materiál a zlepšuje jeho účinnost a vzhled. Nelze použít jakýchkoliv přísad; například těch, které po rekonstituci lyofilizátu nadměrně pění jako například . polyvinylpyrrolidon. Nemělo by se také použít přísad ovlivňujících pH tlumivého roztoku jako . je například sám glycin.

Je-li to žádoucí, může tlumivý roztok také . obsahovat další léčivo kromě vlastní účinné složky. Toto další léčivo . může také být obsaženo v lyofilizátu, nebo .. může být přidáno k . roztoku lyofilizátu po rekonstituci. Toto léčivo· může částečně nebo zcela nahradit přísadu.

Jako solvens pro přípravu tlumicího roztoku lze použít vody pro injekci (podle Evropského lékopisu), nebo vody pro injekci nebo infúzi vyhovující . požadavkům této aplikace. Pro rekonstituci lyofilizátu před použitím může být použito vody pro injekci o pH v rozmezí 5,5 až 7, s výhodou 7, nebo tlumivého roztoku obsahujícího aminokyselinu o hodnotě pH nejméně 9, s výhodou asi 10,5, nebo vody pro injekci s přísadou. některého tlumivého roztoku. Rekonstituce lyofilizátu může být také provedena jeho rozpuštěním v infúzním roztoku, jako je salinický fyziologický roztok vhodný pro infúzi. Pro tento účel je možno použít také glukózy.

Lyofilizace tlumivého roztoku může být provedena jakýmkoli běžným způsobem, při kterém je snížen obsah vody v lyofilizátu tak, jak je žádoucí k zajištění stability účinné složky.

Množství účinné složky požadované pro terapeutický účinek je proměnné podle způsobu podání. Všeobecně . je . vhodná dávka pro savce . v rozmezí mezi 0,01 až 200 mg na kilogram tělesné hmotnosti, vhodně od 0,01 . do 10 mg/kg, výhodně. od 0,1 do 1,0 mg/kg a zvláště výhodně od 0,2 do 0,5 mg/ /kg.

Množství aktivní sloučeniny obsažené v ampulí pro infúzní aplikaci leží v rozmezí od 0,1 do 1,5 mg/kg, výhodně od 0,5 do 1,0 mg/kg. V humánní praxi může být účinná látka několikrát účinnější než u jiných sav2147 9 8 ců a proto může být použito dávkování v rozmezí nižších koncentračních dávek uvedených výše.

Pro humánní a veterinární praxi je výhodné zajistit kombinaci nejméně dvou nádobek, jako je například vícesložkové balení. První je lahvička nebo ampule obsahující lyofílizát pufrované aktivní sloučeniny, jak je výše popsáno a druhá je lahvička nebo ampule obsahující další množství pufru ve vodném roztoku nebo lyofilizovaného, a které neobsahuje účinnou složku. Lyofílizát účinné složky může být rekonstituován vodným tlumivým roztokem a nebo, jestliže obsahy druhých lahviček jsou rovněž lyofilizovány, vhodným solventem z třetí lahvičky. Rekonstituovaný přípravek může být dále ředěn tak, aby bylo zajištěno požadované dávkování bezprostředně před podáním. Tak například lyofílizát přípravku o koncentraci 0,5 mg účinné složky o pH 11,5 může být zředěn 50 nebo 500 ml vodného roztoku dextrozy nebo solným roztokem o takovém pH, že výsledný roztok má hodnotu pH mezi 10,0 až 10,5.

Podstatou vynálezu tedy je způsob stabilizace aktivních látek vybraných ze skupiny zahrnující prostacyklin, 15-methylprostacyklin, 16,16-dimethylprostacyklin a jejich soli proti hydrolýze enol-esterové části molekuly, který se vyznačuje tím, že se uvedené aktivní sloučeniny nebo jejich soli spojí s farmaceuticky vhodným pufrem, jehož pH je nejméně 9 a který jako hlavní acidickou složku obsahuje aminokyselinu.

Při přípravě tohoto roztoku je možno použít různých přísad, které se do roztoku přidají ve vhodném rozpouštědle.

Přípravky obsahující stabilizované aktivní sloučeniny je možno lyofilizovat a používat ve formě injekcí, nebo ve formě roztoků pro injekce nebo infúze, získané rozpuštěním uvedeného lyofilizátu ve vhodném rozpouštědle nebo použitím roztátých zmrazených injekcí.

Vynález je ilustrován následujícími příklady.

Přikladl

Sterilní roztok obsahující prostacyklin (0,2 mg/ml) a mannitol (50 mg/ml) se připraví v následujících pufrech: glycin, arginin, valin, alanin, uhličitan a trispufr. Koncentrace tlumivých složek jsou:

pufr obsahující aminokyseliny:

mol/m³ aminokyseliny, 25 mol/m³ chloridu sodného a hydroxid sodný do vytvoření pH 10,5, uhličitanový pufr:

448 mg/ml hydrogenuhličitanu sodného a 1614 mg/ml uhličitanu sodného tris-pufr:

6054 mg/ml tris-báze a 2,5 ml 0,lN hydroxidu sodného v 1 litru.

ml dávky každého z těchto roztoků se lyofilizuje v lahvičkách vymražením na —40° Celsia za vakua, s následujícím sušením v první fázi při 0 °C a v druhé fázi sušení při 20 °C. Uzavření lahviček se provede v dusíkové atmosféře. Lyofilizované produkty se podrobí testu stability při teplotě uvedené v tabulce I.

V produktech odebraných v době uvedené v tabulce I se stanoví obsah prostacyklinu vysokotlakou kapalinovou chromatografií (HPLC). HPLC se provádí s lyofilizovanými preparáty rozpuštěnými v 10 ml 0,025proc. roztoku tetramethylamonium hydroxidu.

Použije se kolony o rozměrech 25 cm x x 4,2 mm (vnitřní průměr) z nerezové oceli naplněné Partisilem ODS připraveným dále uvedeným postupem. Kolona se plní metodou podle Webera a McKerrela, J. Chromatog., 122, 243 (1976) a používá se chloridu uhličitého jako média pro naplnění kolony.

Náplň kolony se připraví následujícím způsobem: 10 g Partisilu (10 >m) se suší při 80 °C za vakua dvě a půl hodiny ve 250 mililitrové baňce s kulovitým dnem. Přidá se oktadecyltrichlorsilan (10 ml) a vysušený toluen (100 ml) a roztok se vaří tři hodiny pod zpětným chladičem za míchání lopatkovým míchadlem. Zpětný chladič je uzavřen chlorkalciovým uzávěrem. Směs se nechá zchladnout a pak se zfiltruje 0,5 μΐη miliporézním filtrem. Silikagel na filtru se promyje 250 ml methanolu, za míchání pevného podílu, poté s 250 ml horkého acetonu a suší při 80 °C za vakua asi dvě hodiny. Produkt (11 g) se zpracuje s trimethylchlorsilanem (10 ml) tak, jak je výše uvedeno, refluxováním po dobu 45 minut za vzniku konečného produktu.

Jako mobilní fáze se použije voda (1200 mililitrů), ve které se rozpustí 5 g kyseliny borité, 7,6 g tetraboritanu sodného a přidá se 800 ml methanolu. Teplota kolony je teplota okolí tj. 25 až 30 °C, a průtok*mobilní fáze je 3,6 ml/min, pracuje se při tlaku 20 MPa. Detekce produktů se provádí detektorem Pye Unichem LC3 při vlnové délce 205 nm, 0,16 aufs (jednotek absorbance plné stupnice) od 0 do 100 ^g/ml roztoků.

Množství prostacyklinu se stanoví měřením výšky píku a porovnáním s referenčním vzorkem o známé koncentraci.

Získané výsledky jsou shrnuty v tabulce

I. Koncentrace prostacyklinu v původním vzorku byla 0,2 mg/ml.

2Ť4798 dní (144 hod) °C pufr

TABULKA I

HPLC stanovení obsahu zbývajícího prostacyklínu (%) 66 hodin °C 50 °C 37 °C °C

glycin	0	0	3	90	96
arginin valin alanin uhličitan	0	2	3,5	45	62
tris	0	0	stopy	stopy	35

Z tabulky I je zřejmé, že při normální skladovací teplotě, tj. kolem 37 °C nebo .nižší, jsou pufry na bázi aminokyselin lepší, než ostatní dva zkoušené pufry. Ačkoliv uhličitanový pufr je horší, než pufr obsahující aminokyseliny je zřejmé, že určité množství uhličitanu může být v pufrech obsahujících aminokyseliny.

pufr

TABULKA II obsah zbývajícího prostacyklínu (%) po 66 hodinách °C 37 °C arginin valin alanin

P ř í k 1 a d 2

Lyofilizovaná injekce prostacyklínu (1 mg) prostacyklin 1000mg mannitol 50 000 mg

NaCl (25 mol/m³) 2 932mg glycin (25 mol/m³) 3 760mg

NaOH vytvoření pH 10,5

Použitím obecného způsobu uvedeného v příkladu 1 se lyofilizuje 1 mg prostacyklinové injekce obsahující výše uvedené přísady 'za získání zbytku obsahujícího do 5% hmot. vody.

Příklad 3

Na míchaný roztok PGF_2a — methylesteru (50 mg) v etheru (1 ml) se působí hydrogenuhličitanem sodným (115,0 mg, 10 ' mol- . ekvivalentů) a vodou (1 ml) a pak se ' po kapkách přidá během 2 hodin vodný trijodid draselný (0,7 molární, 0,261 ml). Po míchání přes noc se reakční směs protřepe s etherem a vodným thiosíranem sodným. Etherová fáze se oddělí, promyje vodou, suší síranem hořečnatým a odpaří za vzniku žlutého gumovitého zbytku methylesteru 5f-jod-9-deoxy-6f,9a-epoxy-prostaglandinu F_b,·

Roztok methylesteru 5f-jod-9-deoxy-6f,9a-epožyprostaglandinu Fl_a (100 mg) v methanolickém methoxidu sodném připraveném ze sodíku (46 mg) a suchého methanolu (0,70 mililitru) se ponechá 5 hodin v dusíkové atmosféře, pak se zbaví rozpouštědla za vysokého vakua. Pevný amorfní zbytek se promyje benzenem, ponechá stát přes noc na vzduchu a pak míchá s 1N vodným roztokem hydroxidu sodného (0,5 ml) za vzniku suspenze bezbarvých ' jehliček. Krystaly se· shromáždí, promyjí několika kapkami 1N ' vodného hydroxidu sodného a suší na vzduchu za vzniku sodné soli 9-deoxy-6,9a-epoxy-A⁵-prostaglandinu Fia. Inhibice . srážlívosti lidských krevních destiček vyvolané kyselinou arachovou při koncentraci této soli 0,2 ng/ml a nestabilita ve vodě .při kyselém pH spolu s dalším důkazem je slučitelná s konfigurací (5Z) -5,6-didehydr o-9-deoxy-6,9a-epoxy prostaglandinu Fl_a.

Vysoké rozlišení 1³C NMR spektra roztoku krystalů v perdeuterodimethylsulfoxidu poskytuje očekávaných 20 rezonancí, jejichž chemické posuny odpovídají zcela chemické struktuře stanovené pro prostacyklin. Nebyly zjištěny žádné nečistoty.

Příklad 4

Methylester 5£-jod-9-deoxy-6£,9£-epoxyprostagla.ndinu F_Ia (500 mg) se míchá přes ' noc s methanolickým methoxidem sodným· připraveným ze sodíku (0,23 g, 10 ekviv.) a methanolu (3,5 ml) pod dusíkem při teplotě místnosti. Přidá se 1N hydroxid sodný (2,5 ml) ke žlutému reakčnímu roztoku pro zhydrolyzování esterové skupiny a za 2 hodiny se methanol odpaří . za vakua při teplotě místnosti. Zbytek vodného roztoku vytvoří samovolně . bezbarvé jehličky požadované sodné soli, které se ochladí na 0 °C, seberou, promyjí šetrně 1N vodným roztokem hydroxidu sodného, suší na vzduchu a uskladní v uzavřené zkumavce. Tato sůl má

I I maxima v .(KBr tableta) 1692 cm^_1 (O—C=C)

I a bylo pozorováno dvacet rezonancí při 182,7 (C-l), 158,2 (C^6), 140,0 a 134,3 (C-13,14),

100.7 (C-5), 87,5 (С-15), 80,6 а 75,5 (С-9,11),

58,0. (С-12), 49,0, 45,8, 42,4, 41,9, 37,5, 35,8 (С-18), 31,6, 29,9, 29,3, 26,7 (С-19), 18,4 (С-20) ppm od TMS v DMSO-d6. Produktem je sodná sůl (5Z)-5,6-didehydro-9-deoxy-6,9Qr-epoxyprostaglandinu F_lcr (syn. prostacyklin sodný). Výtěžek 383 mg.

Příklad 5

Na methylester 5f-jod-9-deoxy-6f,9or-epoxyprostaglandinu Fi_a se působí 1,5-diazabicyklo-5-nonenem (DBN) při teplotě místnosti, v nepřítomnosti rozpouštědla několik málo hodin.

DBN a jodovodík se vhodně oddělí adsorpcí na koloně SiOz, připravené ze suspenze S1O2 v octanu ethylnatém) Et3N v poměru 50:1, vinylether se eluuje jakýmkoliv systémem rozpouštědel. IR spektroskopie [tenký film, v max 1738 (СОгМе) a 1696 cm-¹ (O—C-C)], ^XH NMR v C6D6-Et3N 19:1 [4,22, triplet tripletů¹², J 6,9 a 1,0 Hz (C-5 vinylový proton)], a ¹³C NMR C6D6-Et3N, 19:1 [význačnými znaky byly rezonance při

159.8 (C-l), 155,8 (C-l), 155,8 (C-6), 137,2 a 130,6 (C-13, 14), 95,3 (C-5), 84,1 (C-15), 77,3 a 72,2 (C-9, 11) a 51,1 (Me-ester) ppm měřeno od TMS].

Methylester vinyletheru (5Z)-5,6-didehydro-g-deóxy-e^tt-epoxyprostaglandinu se hydrolyzuje vodným hydroxidem sodným za vzniku syntetického prostaglandinu sodného.

Příklad 6 (5R,6R)-5-Jod-PGIi methylester (13,375 g, obsahující asi 2 % 5S,6S isomeru) se vnese do methanolického methoxidu sodného (z 6,23 g Na a 94 ml methanolu) při teplotě místnosti pod dusíkem a ponechá se při teplotě místnosti přes noc. Na výsledný žlutý roztok se působí IN vodným hydroxidem sodným (70 ml), sediment se odfiltruje, ponechá se dvě hodiny při teplotě místnosti a zbaví methanolu na odparce typu Buchi za vakua při teplotě místnosti. Na výsledný sirup se působí vodou (25 ml) a více než IN hydroxidem sodným (80 ml). Krystalizace probíhá samovolně za vzniku plsťovitých krystalů. Po ochlazení na 0 °C se pevný podíl izoluje, promyje ledem chlazeným IN vodným hydroxidem sodným (asi 40 ml), až je prací kapalina bezbarvá a suší se na vzduchu (dva dny) pro dosažení konstantní hmotnosti. Získá se 10,15 g bezbarvé sodné soli prostacyklinu o teplotě tání 164 až 166° Celsia (po vysušení při 100 °C).

P ř í к 1 a d 7

Sterilní solvens pro injekce prostacyklinu glycin (25 mol/m³) 94,0 mg chlorid sodný (25 mol/m³) 73,3 mg hydroxid sodný do vytvoření pH 10,5 voda pro injekce do 50 ml

Výše uvedené složky se použijí jako solvens podle postupu uvedeného v příkladu 1.

Claims (14)

1. PŘEDMĚT

   1. Způsob stabilizace aktivních látek vybraných ze skupiny zahrnující prostacyklin, 15-methylprostacyklin, 16,16-dimethylprostacyklin a jejich soli proti hydrolýze enol-esterové části molekuly, vyznačující se tím, že se prostacyklin, 15-methylprostacyklin, 16,16-dimethylprostacyklin nebo jejich soli, kombinuje s farmaceuticky vhodným pufrem, jehož pH je nejméně 9, založeným na aminokyselině jako hlavní acidické složce tlumivého roztoku.
2. 2. Způsob podle bodu 1 vyznačující setím, že účinná složka je v roztoku v rozpouštědle.
3. 3. Způsob podle bodu 2 vyznačující se tím, že použitým rozpouštědlem je voda.
4. 4. Způsob podle bodů 2 a 3 vyznačující se tím, že roztok obsahující účinnou látku a pufr je lyofilizován nebo zmrazen.

   '
5. 5. Způsob podle kteréhokoli z předchozích bodů vyznačující se tím, že aminokyselina neobsahuje síru.
6. 6. Způsob podle kteréhokoli z předchozích bodů vyznačující se tím, že aminokyselina je vybrána ze skupiny zahrnující glycin, alanin, arginin a valin.

   VYNÁLEZU
7. 7. Způsob podle kteréhokoli z předchozích bodů vyznačující se tím, že celková koncentrace aminokyseliny včetně její soli je v rozmezí 20 až 30 mol/m³.
8. 8. Způsob podle bodu 7 vyznačující se tím, že celková koncentrace aminokyseliny včetně její soli je 25 mol/m³.
9. 9. Způsob podle kteréhokoli z předchozích bodů vyznačující se tím, že se přidá farmaceuticky vhodné množství chloridu sodného.
10. 10. Způsob podle kteréhokoli z předchozích bodů vyznačující se tím, že pH přípravku je v rozmezí 10,2 až 11,6.
11. 11. Způsob podle kteréhokoli z předchozích bodů vyznačující se tím, že se přidá přísada, s výhodou mannitol.
12. 12. Způsob podle kteréhokoli z předchozích bodů vyznačující se tím, že účinnou složkou je prostacyklin nebo jeho sůl.
13. 13. Způsob podle kteréhokoli z předchozích bodů vyznačující se tím, že použitou solí je sodná sůl.
14. 14. Způsob podle bodu 13 vyznačující se tím, že účinnou látkou je sodná sůl prostacyklinu.