CN1278734A

CN1278734A - 用于治疗类风湿性关节炎的方法和组合物

Info

Publication number: CN1278734A
Application number: CN98811034A
Authority: CN
Inventors: T·巴尔洛萨里; S·巴耐尔杰; A·豪普特
Original assignee: BASF SE
Current assignee: BASF SE
Priority date: 1997-10-06
Filing date: 1998-09-24
Publication date: 2001-01-03
Also published as: EP1021200A1; HUP0101715A3; SK4272000A3; US6015790A; WO1999017792A1; JP2001518515A; CA2305688A1; DK1021200T3; NO20001758D0; PT1021200E; ZA989036B; AU9592698A; ATE212855T1; ES2173626T3; WO1999017709A2; AU9502498A; HUP0101715A2; BR9812875A; TR200000903T2; NO20001758L

Abstract

本发明提供了用于在被试者中治疗类风湿性关节炎的组合物和方法,其中如本文所定义的一种或多种通式(Ⅰ)的化合物单独地或者与一种或多种其它的抗关节炎药物联合提供了对类风湿性关节炎的抑制。

Description

用于治疗类风湿性关节炎的方法和组合物

发明背景

类风湿性关节炎通常被认为是一种认为与自身反应的T细胞的活性有关的自身免疫病(参见例如Harris，E．D．，Jr．《新英格兰药物杂志》322：1277－1289(1990))。尽管在治疗方面有所进展，但类风湿性关节炎仍然是严重的健康问题。尽管很少会致命，但关节炎是发病、损失工作的时间、丧失生产力以及生活质量下降的主要原因。类风湿性关节炎造成了严重的疼痛以及关节移动性的丧失，并且可以使得完成甚至很简单的任务都变得困难起来。

目前针对类风温性关节炎的治疗方法和方式包括将诸如乙酰水杨酸(阿斯匹林)、布洛芬、萘普生和其它这类药剂这样的非甾类抗炎药、金化合物、青霉胺、氨甲蝶呤、细胞毒性剂(例如硫唑嘌呤)、4－氨基喹啉剂和免疫调制剂给药。但是，需要能够抑制或改善诸如发炎、肿胀、异常的血管再生、骨侵蚀或软骨侵蚀等症状的改进的类风湿性关节炎的疗法。优选地，这种改进的治疗方法应当能够与其它的治疗方法相结合，应当迅速奏效以使症状消退或稳定下来，并且应当完全被耐受。优选地，这种治疗方式在易感个体的预防中也应当是有用的。

发明概述

本发明涉及多拉抑制素(Dolastatin)－15衍生物，其制备以及在治疗哺乳动物、例如人的类风湿性关节炎中的应用。本发明的多拉抑制素－15衍生物为通式Ⅰ的化合物：R¹ R² N－CHX－CO－A－B－D－(E)_s－(F)_t－(G)_u－K (Ⅰ)

下面将详细地讨论通式Ⅰ。在本文中具体地给出了一些通式Ⅰ的化合物的例子。例如，通式Ⅰ的化合物可以是下列物质，其中R¹和R²各为甲基或乙基；X为异丙基、仲丁基或叔丁基；s为1；t和u各为0；A为缬氨酰基、异亮氨酰基或2－叔丁基甘氨酰基；B为N－甲基缬氨酰基、1－异亮氨酰基或2－叔丁基甘氨酰基；D为噻唑烷基－羰基、3，4－脱氢脯氨酰基或脯氨酰基；E为脯氨酰基、噻唑烷基－4－羰基、高脯氨酰基、羟脯氨酰基或3，4－脱氢脯氨酰基；并且K为具有通式R⁵－N－R⁶的取代的氨基部分，其中R⁵为氢或C₁－C₄烷氧基，且R⁶为一价基团，诸如(1)－或(2)－金刚烷基；具有v=1的(CH₂)_v－苯基；α，α－二甲基苄基；C₁－C₁₂直链或支链羟烷基，诸如又称作3－羟基－1，1－二甲基丙基的－C(CH₃)₂－CH₂－CH₂－OH；C₃－C₁₀环烷基，诸如二环[3．3．0]辛－1－基、1－甲基环戊基或1－甲基环己基；或C₁－C₁₂直链或支链烷基，诸如－C(CH₃)₃，又称作叔丁基；又称作1，1－二甲基丙基；

又称作1－甲基－1－乙基丙基；

又称作(S)－或(R)－1－甲基－2，2－二甲基－丙基；

又称作(S)－或(R)－1－乙基－2－甲基丙基；又称作1－异丙基－2－甲基－丙基；或－C(CH₃)₂－CH－(CH₃)₂，又称作1，1－二甲基－2－甲基丙基；－CH(CH₃)₂，又称作异丙基；－CH(CH₃)CH₂CH₃，又称作仲丁基[(S)或(R)]；或－CH(CH₃)CH(CH₃)₂，又称作1，2－二甲基丙基。

本发明还涉及用于治疗哺乳动物、例如人中的类风湿性关节炎的方法，其中使用了一种或多种本文所述的多拉抑制素－15衍生物。在本发明的方法中，将一种或多种多拉抑制素－15衍生物以治疗有效的量单独地或在药理可接受的载体中进行给药，以便治疗患有类风湿性关节炎或者对该病易感的哺乳动物中的类风湿性关节炎。

在本发明的另一方面中，将一种或多种多拉抑制素－15衍生物与一种或多种其它的抗关节炎药物联合向患有类风湿性关节炎或者对该病易感的哺乳动物给药。

在一个具体的实施方案中，将两种或多种多拉抑制素－15衍生物单独地或者与一种或多种其它的抗关节炎药物联合向患有类风湿性关节炎或者对该病易感的哺乳动物给药。两种或多种多拉抑制素－15衍生物的给药或者多拉抑制素－15衍生物与一种或多种其它抗关节炎药联合给药增强了对类风湿性关节炎的治疗。例如，这种联合提供了更强的抑制作用或更少的副作用，和／或能使得将更低剂量的已知抗关节炎药给药以便产生与更高剂量所产生的同样的效果成为可能。其它的抗关节炎药可以是、但不限于一种或多种下列物质：(1)非甾类抗炎剂，诸如乙酰水杨酸(阿斯匹林)、布洛芬或萘普生；(2)有机金的衍生物，诸如硫代苹果酸金钠、金硫葡糖或金诺芬；(3)D－青霉胺；(4)4－氨基喹啉剂，诸如羟氯喹；(5)硫唑嘌呤；(6)氨甲蝶呤；(7)环孢菌素；(8)血管生成抑制剂，诸如AGM－1470(Ingber等人，《自然》348(1990)555)；(9)抗T细胞的单克隆抗体；(10)抗粘着分子的单克隆抗体；(11)抗细胞因子和生长因子的单克隆抗体；(12)肿瘤坏死因子受体(TNFR)－IgG；(13)IL－1受体拮抗剂；以及(14)ICE抑制剂。

本发明的另一个主题为包括单一或与一种或多种其它的抗关节炎药联合的一种或多种通式Ⅰ的多拉抑制素－15衍生物的药物组合物。该药物组合物可以选择性地包括药物可接受的载体、稀释剂或者协助加工的化合物，例如粘合剂、填充剂和防腐剂。

附图的简要描述

图1描绘了作为具有通式Ⅰ的结构式的多拉抑制素－15衍生物例子的化合物ⅰ－ⅹⅶ。

图2是一幅表明平均关节炎得分随着用Ⅱ型胶原免疫接种后的天数变化的曲线图，其中针对的是用盐水(对照)、地塞米松(标准疗法)和图1中的化合物ⅱ治疗的小鼠。治疗开始于免疫接种后第26天并截止于免疫接种后第35天。

图3是一幅表明平均关节炎得分随着用Ⅱ型胶原免疫接种后的天数变化的曲线图，其中针对的是用载体(对照)、地塞米松(标准疗法)和图1中的化合物ⅱ治疗的小鼠。治疗开始于免疫接种后第48天并且持续21天。

图4是一幅表明对用载体、地塞米松(标准疗法)和图1的化合物ⅱ治疗的小鼠通过组织病理学分析测得的滑膜炎和软骨损伤程度的曲线图。在用Ⅱ型胶原免疫接种后第48天时开始治疗小鼠，并且治疗持续21天。在免疫接种后第71天时进行尸体剖检。

发明详述

本发明涉及在治疗哺乳动物的类风湿性关节炎中有用的多拉抑制素－15衍生物。正如以下进一步描述的那样，本发明的多拉抑制素－15衍生物是具有通式Ⅰ所示结构的化合物。将该化合物以治疗有效量进行给药。正如本文所使用的，术语“治疗有效量”是指足以引起所希望的生物学响应的量。在本发明中，治疗所希望的生物学响应为对类风湿性关节炎的抑制。正如本文所使用的，“抑制”包括任何或者所有的下列情况：(1)改善已有的症状；(2)预防或减缓症状的发展；(3)预防或推迟在易感的被试者中所述疾病的开始或出现，即预防。一般与类风湿性关节炎有关的症状包括、但不限于发炎、肿胀、异常的血管再生、骨侵蚀和软骨侵蚀。当把治疗有效量的通式Ⅰ的多拉抑制素－15衍生物的化合物给药时，抑制了一种或多种所述的症状。通式Ⅰ的化合物

从印度洋海兔Dolabella auricularia中已经分离出许多作为细胞生长抑制剂的具有显著活性的短肽(Bai等人，《生物化学药理学》40：1859-1864(1990)；Beckwith等人，《国家癌症学会杂志》85：483-488(1993)及其中所引用的参考文献)。这些短肽包括多拉抑制素s1－10(颁发给Pettit等人的美国专利4，816，444)和多拉抑制素－15(欧洲专利申请398558)。例如，多拉抑制素－15显著地抑制了国家癌症学会的P388淋巴细胞白血病细胞系的生长，而这正是抗各种类型的人类恶性肿瘤的功效的强烈的预言者。但是，这种化合物仅以痕量存在于海兔中并且难于分离、其合成非常昂贵并且具有在水中溶解度差的缺点。

通式Ⅰ的化合物是多拉抑制素－15的衍生物。令人感到惊奇的是，已经确定通式Ⅰ的化合物在用于治疗类风湿性关节炎的方法中是有用的。如本文中以及在有关的于1995年6月7日提交的共同未决的申请U．S．S．N．08／472，453中所述，可以合成在本发明的方法中所用的通式Ⅰ的多拉抑制素－15的衍生物，其中所述申请的教导是以其全文插入本文的。

正如在有关的于1995年6月7日提交的共同未决的申请U．S．S．N．08／472，453中所述，通式Ⅰ的多拉抑制素－15的衍生物通常包括L－氨基酸，但它们还可以含有一个或多个D－氨基酸。通式Ⅰ的化合物还可以与生理上相容的酸一起呈盐的形式存在，所述的酸诸如、但却不限于盐酸、柠檬酸、酒石酸、乳酸、磷酸、甲磺酸、醋酸、甲酸、马来酸、富马酸、苹果酸、琥珀酸、丙二酸、硫酸、L－谷氨酸、L－天冬氨酸、丙酮酸、粘酸、苯甲酸、葡糖醛酸、草酸、抗坏血酸和乙酰甘氨酸。

对于本发明来说，术语“一价基团”意思是指能够与第二个中性分子碎片形成一个共价键的电中性的分子碎片。一价基团包括氢原子、烷基(例如甲基、乙基、丙基和叔丁基)、环烷基、羟烷基、金刚烷基、卤原子(例如氟、氯和溴原子)、芳基(例如苯基、苄基和萘基)以及烷氧基(例如甲氧基和乙氧基)。在相邻的σ－键合的原子上的两个一价基团还可以在该相邻的原子之间形成一个pi键。例如，通过一个聚亚甲基单元还可以将两个一价基团连接在一起以形成一个环状结构。例如，其中R和R’为一价基团的单元－N(R)R’可以与氮原子一起形成杂环。此外，与同一原子相连的两个一价基团也可以形成一个二价基团，诸如亚烷基(例如亚丙基)或氧原子。

更具体地讲，对通式Ⅰ的化合物而言：R¹ 为烷基、诸如C₁－C₃；环烷基、诸如环丙基；烷基磺酰

基、诸如C₁－C₃；氟代烷基、诸如氟代乙基、二氟代

乙基、氟代异丙基；可以被烷基、诸如甲基取代的氨基

磺酰基；R² 为氢；烷基、诸如C₁－C₃；氟代烷基、诸如氟代乙基、

二氟代乙基、氟代异丙基；环烷基、诸如环丙基；R¹－N－R² 合起来可以是吡咯烷基或哌啶子基残基；A 为缬氨酰基、异亮氨酰基、亮氨酰基、别异亮氨酰基、

2，2－二甲基甘氨酰基、2－环丙基甘氨酰基、2－环戊

基甘氨酰基、3－叔丁基丙氨酰基、2－叔丁基甘氨酰基、

3－环己基丙氨酰基、2－乙基甘氨酰基、2－环己基甘

氨酰基、正亮氨酰基或正缬氨酰基残基；B 为N－烷基－缬氨酰基、－正缬氨酰基、－亮氨酰基、

－异亮氨酰基、－2－叔丁基甘氨酰基、－3－叔丁基丙

氨酰基、－2－乙基甘氨酰基、－2－环丙基甘氨酰基、

－2－环戊基甘氨酰基、正亮氨酰基或－2－环己基甘氨

酰基残基，其中N－烷基优选N－甲基或N－乙基；D 为脯氨酰基、高脯氨酰基、羟脯氨酰基、3，4－脱氢脯

氨酰基、4－氟代脯氨酰基、3－甲基脯氨酰基、4－甲

基脯氨酰基、5－甲基脯氨酰基、氮杂环丁烷－2－羰基、

3，3－二甲基脯氨酰基、4，4－二氟代脯氨酰基、噁唑烷

－4－羰基或噻唑烷－4－羰基残基；E 为脯氨酰基、高脯氨酰基、羟脯氨酰基、3，4－脱氢脯

氨酰基、4－氟代脯氨酰基、3－甲基脯氨酰基、4－甲

基脯氨酰基、5－甲基脯氨酰基、氮杂环丁烷－2－羰

基、3，3－二甲基脯氨酰基、4，4－二氟代脯氨酰基、

噁唑烷－4－羰基或噻唑烷－4－羰基残基；F和G 独立地选自由脯氨酰基、高脯氨酰基、羟脯氨酰基、

噻唑烷基－4－羰基、1－氨基戊基－1－羰基、缬氨酰

基、2－叔丁基甘氨酰基、异亮氨酰基、亮氨酰基、3

－环己基丙氨酰基、苯丙氨酰基、N－甲基苯丙氨酰基、

四氢异喹啉基－2－组氨酰基、1－氨基吲哚基－1－羰

基、3－吡啶基丙氨酰基、2－环己基甘氨酰基、正亮

氨酰基、正缬氨酰基、新戊基甘氨酰基、色氨酰基、

甘氨酰基、2，2－二甲基甘氨酰基、丙氨酰基、β－丙

氨酰基和3－萘基丙氨酰基残基所组成的组中；X 为氢、烷基(诸如C₁－C₅)、环烷基(诸如C₃－C₇)、

－CH₂－环己基或芳烷基(诸如苄基或苯乙基)；s，t和u独立地为0或1；并且K 为羟基、烷氧基(诸如C₁－C₄)、苯氧基、苄氧基或者

取代的或未取代的氨基部分。

此外，通式Ⅰ的化合物可以与生理上耐受的酸一起呈其盐的形式存在。

本发明化合物的一个小类包括其中的R¹－N－R²为吡咯烷基或哌啶基残基的通式Ⅰ的化合物。

本发明化合物的另一个小类包括其中的K为通式R⁵－N－R⁶的氨基部分的通式Ⅰ的化合物，其中：R⁵ 为氢、或羟基、或C_1－7烷氧基、或苄氧基、或苯氧基或

C_1－12直链或支链羟烷基(诸如3－羟基－1，1－二甲基

丙基)、或C_1－7直链或支链烷基(其可以被一个或多个氟原子取代)、或C_3－10－环烷基(诸如二环[3．3．O]辛－1－基、1－甲基环戊基或1－甲基环己基)；或苄基(它可以被多达3个取代基所取代，而所述取代基可以独立地为CF₃、硝基、C_1－7烷基磺酰基、C_1－4烷氧基、苯氧基、苄氧基、卤素、C_1－4－烷基、氰基、羟基、N(CH₃)₂、COOMe、COOEt、COOiPr或COONH₂)；为氢、或C_1－12直链或支链烷基(它可以被一个或多个氟原子所取代)、或C_1－12直链或支链羟烷基(诸如3－羟基－1，1－二甲基丙基)、或C_3-10－环烷基(诸如二环[3．3．0]辛－1－基、或1－甲基环戊基或1－甲基环己基)；或者－(CH₂)_v－C_3－7－环烷基(v=0，1，2或3)、或去甲麻黄碱基、或去甲伪麻黄碱基、或喹啉基、或吡唑基、或－CH₂－苯并咪唑基、或(1)－金刚烷基、或(2)－金刚烷基、－CH₂－金刚烷基、或α－甲基－苄基、或α－二甲基苄基、或－(CH₂)_v－苯基(v=0，1，2或3；它可以被多达2个取代基所取代，而所述取代基可以独立地为CF₃、硝基、C_1－7烷基磺酰基、C_1－4烷氧基、苯氧基、苄氧基、卤素、可以形成环状系统的C_1－4－烷基、氰基、羟基、N(CH₃)₂、COOMe、COOEt、COOiPr或COONH₂)、或－(CH₂)_m－萘基(m=0或1)；或－(CH₂)_w－二苯甲基(w=0，1或2)；或联苯基或吡啶甲基或苯并噻唑基或苯并异噻唑基或苯并吡唑基或苯并噁唑基或－(CH₂)_m－芴基(m=0或1)；或嘧啶基或－(CH₂)_m－2，3－二氢化茚基(m=0或1)；或－(CH₂CH₂O)_y－CH₃(y=0，1，2，3，4或5)或－(CH₂CH₂O)_y－CH₂CH₃(y=0，1，2，3，4或5)、或NH－C₆H₅(它可以被多达2个取代基所取代，而所述取代基可以独立地为CF₃、硝基、C_1－7烷基磺酰基、C_1－4烷氧基、卤素、可以形成环状系统的C_1－4烷基、氰基、羟基、COOMe、COOEt、COOiPr或COONH₂)、或－NCH₃－C₆H₅或－NH－CH₂－C₆H₅或－NCH₃－CH₂－C₆H₅或可以被多达2个取代基取代的5元杂芳基，而所述的取代基可以独立地为CF₃、硝基、硫甲基、硫乙基、C_3－6－环烷基、－CH₂－COOEt、与杂环形成二环系的C_3－4－亚烷基、苯基；或者－CHR⁷－5元杂芳基(它可以被多达2个取代基取代，而所述取代基可以独立地为CF₃、硝基、氰基、卤素、COOMe、COOEt、COOiPr、CONH₂、C_1－4－烷基、C_1－4－烷氧基、苯基、苄基、萘基、或C_1－7－烷基磺酰基[R⁷=氢、直链或支链的C_1－5烷基、苄基；或R⁷和R⁵一起形成基团－(CH₂)₃－或－(CH₂)₄－])。

该小类包括通式Ⅰ的化合物，其中s、t和u独立地为0或1；R¹、R²和X为低级烷基，A为低级烷基氨基酸、B为N－低级烷基化的低级烷基氨基酸；D、E、F、G和K如前面所定义的那样。考虑到前面的内容，三组所述的化合物从而可以由下面的通式Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ来描述：

R¹R²N－CXH－CO－A－B－Pro－Pro－F－G－K Ⅱ

R¹R²N－CXH－CO－A－B－Pro－Pro－F－K Ⅲ

R¹R²N－CXH－CO－A－B－Pro－Pro－K Ⅳ

－CHR⁷－5元杂芳基例如可以由下列残基之一来表示：

－NR⁵CHR⁷－5元杂芳基例如可以由下列残基表示：

5－元杂芳基例如可以由下列残基表示：

在本发明化合物的另一个小类中，R⁵－N－R⁶可以共同形成选自由下列结构组成的组中的结构：

本发明化合物的再一个小类例如包括其中的s、t和u为1并且K为羟基、烷氧基、苯氧基或苄氧基部分的通式Ⅰ的化合物。

本发明化合物的再一个小类例如包括其中的s和t为1、u为0并且K为羟基、烷氧基、苯氧基或苄氧基部分的通式Ⅰ的化合物。

本发明化合物的另一个小类例如包括其中的s为1、t和u为0并且K为羟基、烷氧基、苯氧基或苄氧基部分的通式Ⅰ的化合物。

在具体的实施方案中，通式Ⅰ的化合物是这样的一种化合物，其中R¹和R²各为甲基或乙基；X为异丙基、仲丁基或叔丁基；s为1；t和u各为0；A为缬氨酰基、异亮氨酰基或2－叔丁基甘氨酰基；B为N－甲基缬氨酰基、1－异亮氨酰基或2－叔丁基甘氨酰基；D为脯氨酰基、噻唑烷基－4－羰基或3，4－脱氢脯氨酰基；E为脯氨酰基、噻唑烷基－4－羰基、高脯氨酰基、3，4－脱氢脯氨酰基或羟脯氨酰基；并且K为具有通式R⁵－N－R⁶的取代的或未取代的氨基部分。

在进一步的实施方案中，多拉抑制素－15衍生物是这样的一种通式Ⅰ的化合物，其中R¹和R²各为甲基或乙基；X为异丙基、仲丁基或叔丁基；s为1；t和u各为0；A为缬氨酰基、异亮氨酰基或2－叔丁基甘氨酰基；B为N－甲基缬氨酰基、1－异亮氨酰基或2－叔丁基甘氨酰基；D为脯氨酰基、噻唑烷基－4－羰基或3，4－脱氢脯氨酰基；E为脯氨酰基、噻唑烷基－4－羰基、高脯氨酰基、3，4－脱氢脯氨酰基或羟脯氨酰基；并且K为具有通式R⁵－N－R⁶的取代的氨基部分，其中R⁵为氢或C₁－C₄烷氧基，并且R⁶为例如由下列一价基团表示的C₁－C₁₂直链或支链烷基或C₁－C₁₂直链或支链羟烷基：－C(CH₃)₂－CH₂－CH₂－OH，又称作3－羟基－1，1－二甲基丙基；－C(CH₃)₃，又称作叔丁基；

又称作1，1－二甲基丙基；

又称作1－甲基－1－乙基丙基；又称作(S)－或(R)－1－甲基－2，2－二甲基丙基；

又称作(S)－或(R)－1－乙基－2－甲基丙基；

又称作1－异丙基－2－甲基丁基；或－C(CH₃)₂－CH(CH₃)₂又称作1，1－二甲基－2－甲基丙基；－CH(CH₃)₂，又称作异丙基；－CH(CH₃)CH₂CH₃，又称作(S)－或(R)－仲丁基－CH(CH₃)CH(CH₃)₂，又称作1，2－二甲基丙基

在另一个实施方案中，本发明的多拉抑制素－15衍生物是这样的一种通式Ⅰ的化合物，其中R¹和R²各为甲基或乙基；X为异丙基、仲丁基或叔丁基；s为1；t和u各为0；A为缬氨酰基、异亮氨酰基或2－叔丁基甘氨酰基；B为N－甲基缬氨酰基、1－异亮氨酰基或2－叔丁基甘氨酰基；D为脯氨酰基、噻唑烷基－4－羰基、3，4－脱氢脯氨酰基；E为脯氨酰基、噻唑烷基－4－羰基、高脯氨酰基、3，4－脱氢脯氨酰基或羟脯氨酰基；并且K为具有通式R⁵－N－R⁶的取代的氨基部分，其中R⁵为氢或C₁－C₄烷氧基，并且R⁶为一价基团，诸如C₃－C₁₀环烷基(例如环丁基、环戊基、环己基或1－甲基环戊基、或1－甲基环己基或二环[3．3．0]辛－1－基)；(1)－或(2)－金刚烷基；具有v=1的(CH₂)_v－苯基或α，α－二甲基苄基。

在进一步的实施方案中，本发明的多拉抑制素－15衍生物是这样的一种通式Ⅰ的化合物，其中R¹和R²各为甲基；X为异丙基；s为1；t和u各为0；A为缬氨酰基；B为N－甲基缬氨酰基；D为脯氨酰基；E为脯氨酰基；并且K为具有通式R⁵－N－R⁶的取代的氨基部分，其中R⁵为氢并且R⁶为叔丁基。该化合物对应着图1中所描述的化合物ⅱ。在实施例3和4中描述了通式Ⅰ的化合物ⅱ的使用结果，并以图形的方式示于图2、3和4中。

可以将本发明的多拉抑制素－15衍生物选择性地在药物可接受的载体中进行给药。药物可接受的载体是本领域普通技术人员众所周知的。载体的选择将部分由通式Ⅰ的具体化合物以及由用于多拉抑制素－15衍生物给药的具体方法来确定。

本发明的又一个主题为包括单独地或者与一种或多种其它的抗关节炎药物(诸如本文所述的那些药物)联合的一种或多种通式Ⅰ的多拉抑制素－15衍生物的药物组合物。该药物组合物可以选择性地包括药物可接受的载体、稀释剂或协助加工的化合物，例如粘合剂、填充剂和防腐剂。

另一方面，本发明包括一种使用通式Ⅰ的多拉抑制素－15衍生物来治疗哺乳动物中的类风湿性关节炎的方法。对本发明来说，短语“治疗类风湿性关节炎的方法”和“抑制类风湿性关节炎”可以相互交换使用。正如本文所使用的那样，术语“抑制”包括下列情况的任意一种或全部：(1)改善已有的症状；(2)预防或减缓症状的发展；(3)预防或推迟在易感的被试者中所述疾病的开始或出现，即预防。

本发明的治疗方法包括将治疗有效量的通式Ⅰ的一种或多种化合物给药。可以将通式Ⅰ的化合物单独地或者与适合所希望的给药途径的药物接受的载体或稀释剂联合给药。可以通过对药品而言是常规的任何方式给药，其中包括口服和非肠道的方式(诸如皮下、静脉、肌内、腹膜内、鼻腔或直肠的途径)。所述的药物组合物还可以包含其它的治疗活性成分。

在本发明的另一方面，在患有类风湿性关节炎或者对其易感的哺乳动物中，将一种或多种多拉抑制素－15衍生物单独地或者与一种或多种其它抗关节炎药联合给药。将一种或多种多拉抑制素－15衍生物与一种或多种其它的抗关节炎药联合给药促进了对类风湿性关节炎的治疗。例如，联合提供了更强的抑制作用或者更少的副作用，和／或可以使得将更低剂量的已知抗关节炎药给药以产生相同的效果成为可能。所述的其它的抗关节炎药可以是、但并不限于下列物质：(1)非甾类抗炎剂，诸如乙酰水杨酸(阿斯匹林)、布洛芬或萘普生；(2)有机金的衍生物，诸如硫代苹果酸金钠、金硫葡糖或金诺芬；(3)D－青霉胺；(4)4－氨基喹啉剂，诸如羟氯喹；(5)硫唑嘌呤；(6)氨甲蝶呤；(7)环孢菌素；(8)血管生成抑制剂，诸如AGM－1470(Ingber等人，《自然》348(1990)555)；(9)抗T细胞的单克隆抗体；(10)抗粘着分子的单克隆抗体；(11)抗细胞因子和生长因子的单克隆抗体；(12)肿瘤坏死因子受体(TNFR)－IgG；(13)IL－1受体拮抗剂；以及ICE抑制剂。

在一个具体的实施方案中，将至少两种或多种多拉抑制素－15衍生物单独地或者与一种或多种其它抗关节炎药联合向患有类风湿性关节炎或对其易感的哺乳动物给药。

正如本文所述，向哺乳动物(比如人)给药的剂量包括治疗有效量的通式Ⅰ的化合物。可以使用公知的方法凭经验确定剂量，并且该剂量将取决于许多因素，诸如所用具体化合物的生物活性、作用机理、毒性分布；给药方式；接受者的年龄、健康状况和体重；症状的自然持续时间和程度；治疗的频率；其它治疗的给药；以及所希望的效果。

通式Ⅰ化合物的典型的日常剂量为口服时每千克体重为大约1至大约100毫克、通过非肠道给药时每千克体重为大约1至大约100毫克。

本发明的多拉抑制素－15衍生物可以以常规的固态或液态药物的形式给药，例如未包衣的或(膜)包衣的片剂、胶囊、粉剂、颗粒剂、栓剂或溶液。这些药剂是以常规方式生产的。针对这一目的，可以将所述活性物质与常规的药物助剂一起加工，诸如片剂粘合剂、填充剂、防腐剂、片剂崩解剂、流动调节剂、增塑剂、湿润剂、分散剂、乳化剂、溶剂、缓释组合物、抗氧化剂和／或推进剂气体(参见H．Sücker等人：《药物技术》Thieme-Verlag，Stuttgart，1978)。以这种方式获得的给药形式通常含有按重量计约为1至约为90％的活性物质。

如果将多于一种的多拉抑制素－15衍生物给药的话，可以将它们同时(一齐)或者分次(依次)给药，只要将它们以适合于产生所希望的治疗效果的这样一个顺序和间隔给药即可。如果将两种或多种多拉抑制素－15衍生物同时给药的话，可以将它们单独地(以单个的衍生物)或者以物理结合的形式(以混合物或结合物)给药。同样的是当将一种或多种多拉抑制素－15衍生物与一种或多种其它的抗关节炎药一起给药时的情况。可以将它们同时或依次地、并且独立地或者以结合物或混合物的形式给药。包括一种或多种多拉抑制素－15衍生物的或者包括一种或多种多拉抑制素－15衍生物和一种或多种其它的抗关节炎药的药物组合物也是本发明的主题。

以上详细地描述了通式Ⅰ的化合物。在一个具体的实施方案中，本发明的方法使用了这样的一种通式Ⅰ的多拉抑制素－15衍生物，其中R¹和R²各为甲基或乙基；X为异丙基、仲丁基或叔丁基；s为1；t和u各为0；A为缬氨酰基、异亮氨酰基或2－叔丁基甘氨酰基；B为N－甲基缬氨酰基、1－异亮氨酰基或2－叔丁基甘氨酰基；D为脯氨酰基、噻唑烷基－4－羰基或3，4－脱氢脯氨酰基；E为脯氨酰基、噻唑烷基－4－羰基、高脯氨酰基、3，4－脱氢脯氨酰基或羟脯氨酰基；并且K为具有通式R⁵－N－R⁶的取代的或未取代的氨基部分。

在进一步的实施方案中，本发明的方法使用了这样的一种通式Ⅰ的多拉抑制素－15衍生物，其中R¹和R²各为甲基或乙基；X为异丙基、仲丁基或叔丁基；s为1；t和u各为0；A为缬氨酰基、异亮氨酰基或2－叔丁基甘氨酰基；B为N－甲基缬氨酰基、1－异亮氨酰基或2－叔丁基甘氨酰基；D为脯氨酰基、噻唑烷基－4－羰基或3，4－脱氢脯氨酰基；E为脯氨酰基、噻唑烷基－4－羰基、高脯氨酰基、3，4－脱氢脯氨酰基或羟脯氨酰基；并且K为具有通式R⁵－N－R⁶的取代的氨基部分，其中R⁵为氢或C₁－C₄烷氧基，并且R⁶为例如由下列一价基团表示的C₁－C₁₂直链或支链烷基或C₁－C₁₂直链或支链羟烷基：－C(CH₃)₂-CH₂-CH₂-OH，又称作3－羟基－1，1－二甲基丙基；－C(CH₃)₃，又称作叔丁基；又称作1，1－二甲基丙基；又称作1－甲基-1-乙基丙基；又称作(S)－或(R)-1-甲基－2，2－二甲基丙基；

又称作(S)－或(R)－1－乙基－2－甲基丙基；又称作1－异丙基－2－甲基丁基；或－C(CH₃)₂－CH(CH₃)₂又称作1，1－二甲基－2－甲基丙基；－CH(CH₃)₂，又称作异丙基；－CH(CH₃)CH₂CH₃，又称作(S)－或(R)－仲丁基－CH(CH₃)CH(CH₃)₂，又称作1，2－二甲基丙基

在另一个实施方案中，本发明的方法使用了这样的一种通式Ⅰ的化合物，其中R¹和R²各为甲基或乙基；X为异丙基、仲丁基或叔丁基；s为1；t和u各为0；A为缬氨酰基、异亮氨酰基或2－叔丁基甘氨酰基；B为N－甲基缬氨酰基、1－异亮氨酰基或2－叔丁基甘氨酰基；D为脯氨酰基、噻唑烷基－4－羰基、3，4－脱氢脯氨酰基；E为脯氨酰基、噻烷基－4－羰基、高脯氨酰基、3，4－脱氢脯氨酰基或羟脯氨酰基；并且K为具有通式R⁵－N－R⁶的取代的氨基部分，其中R⁵为氢或C₁－C₄烷氧基，并且R⁶为一价基团，诸如C₃－C₁₀环烷基(例如环丁基、环戊基、环己基、1－甲基环戊基、1－甲基环己基或二环[3．3．0]辛－1－基)；(1)－或(2)－金刚烷基；具有v=1的(CH₂)_v－苯基或α，α－二甲基苄基。

在进一步的实施方案中，本发明的方法使用了这样的一种通式Ⅰ的多拉抑制素－15衍生物，其中R¹和R²各为甲基；X为异丙基；s为1；t和u各为0；A为缬氨酰基；B为N－甲基缬氨酰基；D为脯氨酰基；E为脯氨酰基；并且K为具有通式R⁵－N－R⁶的取代的氨基部分，其中R⁵为氢并且R⁶为叔丁基。该化合物对应于图1中所描述的化合物ⅱ。在实施例3和4中描述了化合物ⅱ在治疗类风温性关节炎中的使用，其结果示于图2、3和4中。合成方法

通过公知的肽合成的方法可以制备出通式Ⅰ的化合物，诸如那些在本文中以及在1995年6月7日提交的美国专利申请系列号为08／470，453中所述的方法，这些教导插入本文仅供参考。从单个氨基酸顺序地或者通过连接合适的小的肽片段可以装配出肽。在顺序装配中，肽链从C－末端开始以每个步骤一个氨基酸的数目逐步延伸。在片段偶联的过程中，不同长度的片段可以相互连接，并且通过从氨基酸的顺序装配或者通过更短的肽的片段偶联也可以获得所述的片段。

在顺序装配和片段偶联中，都必须通过形成酰胺键来连接所述的单元，而这可以通过各种酶促和化学的方法来实现。本文所述的用于形成肽的酰胺键的方法同样适合于非肽的酰胺键的形成。

用于形成酰胺键的化学方法在关于肽化学的标准的参考文献中进行了详细的描述，其中包括Muller的《有机化学的方法》第)XV／2册，1－364，Thieme Verlag，Stuttgart，(1974)；Stewart与Young的《固相肽合成》31－34和71－82，Pierce化学公司，Rockford，IL(1984)；Bodansky等人的《肽合成》85－128，John Wiley&Sons，纽约(1976)；《肽合成的实践》M．Bodansky，A．Bodansky，Springer－Verlag，1994以及在肽化学中其它的权威著作。优选的方法包括叠氮化物法、对称的与混合的酸酐法、使用原位生成的或预制的活性酯、使用氨基酸的尿烷保护的N－羧酸酐以及使用偶联剂形成酰胺键，所述偶联剂诸如二环己基碳化二亚胺(DCC)、二异丙基碳化二亚胺(DIC)、1－乙氧羰基－2－乙氧基－1，2－二氢喹啉(EEDQ)、新戊酰氯、1－乙基－3－(3－二甲基氨基丙基)碳化二亚胺盐酸化物(EDCI)、正丙烷－膦酸酐(PPA)、N，N－双(2－氧代－3－噁唑烷基)酰氨基磷酰氯(BOP-Cl)、溴代－三－吡咯烷磷六氟磷酸盐(PyBrop)、二苯磷酰叠氮化物(DPPA)、Castro’s试剂(BOP，PyBop)、O－苯并三唑基－N，N，N’，N’－四甲基脲盐(HBTU)、O－氮杂苯并三唑－N，N，N’，N’－四甲基脲盐(TATU)、二乙基磷酰氰(DEPCN)、2，5－二苯基－2，3－二氢－3－氧代－4－羟基噻吩二氧化物(Steglich’s试剂；HOTDO)以及1，1’－羰基二咪唑(CDI)。偶联剂可以单独地或者与添加剂结合使用，所述添加剂诸如N，N－二甲基－4－氨基吡啶(DMAP)、N－羟基－苯并三唑(HOBt)、N－羟基苯并三嗪(HOOBt)、N－羟基琥珀酰亚胺(HOSu)或2－羟基吡啶。

尽管在酶促肽合成中保护基的使用通常不是必须的，但是不参与酰胺键形成的反应基的可逆的保护对化学合成中的两种反应物而言都是必须的。通常用于化学肽合成的三种常规的保护基技术为：苄氧羰基(Z)、叔丁氧羰基(Boc)和9－芴基甲氧羰基(Fmoc)技术。在各种情况下确定的是在链延伸单元的α－氨基上的保护基。Muller的《有机化学的方法》第ⅹⅴ／1卷，第20－906页，Thieme Verlag，Stuttgart(1974)提供了对氨基酸保护基的详细的综述。

可以在溶液中、在悬浮液中或者通过类似于Merrifield在《美国化学协会杂志》85(1963)2149中所述的方法使用于装配肽链的单元反应。在一种方法中，采用Z、Boc或Fmoc保护基技术，其中Merrifield技术中的反应物之一结合到不溶的聚合物载体(下文中也称作树脂)上来顺序地或者通过片段偶联装配成肽。这通常需要采用Boc或Fmoc保护基技术在聚合物载体上顺序地装配肽，其间伴随着不断延长的肽链在C末端共价地结合到不溶的树脂颗粒上。这一步骤使得通过过滤可以除去试剂和副产物，从而消除了对重结晶中间体的需要。

可以将受到保护的氨基酸连接到任何合适的聚合物上，其中所述聚合物必须不溶于所用的溶剂并且具有允许过滤的稳定的物理形式。该聚合物必须含有可以将第一个受到保护的氨基酸共价地连接于其上的官能团。很多的聚合物都适于这一目的，例如纤维素、聚乙烯醇、聚甲基丙烯酸酯、磺化聚苯乙烯、氯甲基化苯乙烯／二乙烯基苯共聚物(Merrifield树脂)、4－甲基二苯甲胺树脂(MBHA－树脂)、苯乙酰氨甲基树脂(Pam－树脂)、对－苄氧基－苄基－醇－树脂、二苯甲基－胺－树脂(BHA－树脂)、4－(羟甲基)－苯甲酰基－氧甲基－树脂、Breipohl等人的树脂(《四面体通讯》28(1987)565；由BACHEM提供)、4－(2，4－二甲氧苯基氨甲基)苯氧树脂(由Novabiochem提供)或o－氯代三苯甲基－树脂(由Biohellas提供)。

适合于肽合成的溶剂包括在反应条件下呈惰性的任何溶剂，例如，水、N，N－二甲基甲酰胺(DMF)、二甲基亚砜(DMSO)、乙腈、二氯甲烷(DCM)、1，4－二噁烷、四氢呋喃(THF)、N－甲基－2－吡咯烷酮(NMP)以及这些溶剂的混合物。

可以在合适的惰性有机溶剂中进行在聚合物载体上的肽合成，在所述溶剂中所用的氨基酸衍生物和起始物质是可溶的。由于其树脂溶胀性，特别有用的溶剂例如有DMF、DCM、NMP、乙腈、DMSO及其混合物。

在合成之后，从聚合物载体上移走(通常称作切割)肽。实现该切割的条件是肽合成的现有技术中众所周知的并且该条件部分地取决于所用树脂的类型。最常用的切割反应是酸或钯催化的，例如酸催化的切割是在液态无水的氟化氢、无水的三氟甲磺酸、稀释的或浓缩的三氟醋酸以及醋酸／二氯甲烷／三氟乙醇的混合物中进行的。钯催化的切割可以在有诸如吗啉之类的弱碱存在下在THF或THF－DCM混合物中进行。在这些条件下还切下某些保护基。

在某些衍生化反应之前，也可能必须对肽进行部分去保护。例如，通过将合适的N，N－二烷基氨基酸偶联到在溶液中或聚合物载体上的肽、或者通过在含有NaCNBH₃和合适的醛的DMF／1％醋酸中使与树脂结合的肽发生还原性烷基化作用或者通过在有醛或酮和Pd／C存在下使溶液中的肽氢化，可以制备出在N－末端二烷基化的肽。

本文所公开的各种非天然存在的氨基酸以及各种非氨基酸部分可以从商业来源获得或者可以使用本领域公知的方法从商购可得的物质合成出来。例如，根据E．Wuensch，Huben Weyl的《有机化学的方法》第XV／1卷，第306页，Thieme Verlag，Stuttgart(1974)及其中所引用的文献，可以制备出带有R¹和R²部分的氨基酸结构单元。通过将合适的内酰胺桥接的二肽单元(R．Freidinger，《有机化学杂志》(1982)104－109)掺入所述肽链中，可以制备出具有γ－或δ－内酰胺桥的肽。通过将合适的二肽单元(P．Jouin等人《四面体通讯》(1992)第2087-2810页；P．Wipf等人《四面体通讯》(1992)第907-910页；W．R．Tully《药物化学杂志》(1991)第2060-2065页；U．Schmidt等人《合成》(1987)第233－236页)掺入所述肽链中，可以制备出包含二肽结构单元的带有噻唑基、噁唑基、噻唑啉基或噁唑啉基的肽。

下面的步骤意欲说明用于制备通式Ⅰ的化合物的方法。当氨基酸适用时，采用公知的三字母代码缩写氨基酸。所用的其它的含义为：Me₂Val=N，N－二甲基缬氨酸、MeVal=N－甲基缬氨酸、TFA=三氟醋酸、Ac=醋酸、Bu=丁基、Et=乙基、Me=甲基、Bzl=苄基、Nal=3－萘基丙氨酸、Cha=3－环己基丙氨酸、Npg=新戊基甘氨酸、Abu=2－氨基丁酰基、Dab=2，4－二氨基丁酰基、iPr=异丙基。

一般的合成步骤

Ⅰ．本发明通式Ⅰ的化合物或者通过采用如上所述标准的Z－和Boc－

方法的传统的溶液合成或者在由应用生物系统公司提供的全自动

431A型合成仪上通过标准的固相合成方法来合成。针对Boc和Fmoc

保护基技术而言，所述设备采用了不同的合成循环。

在固相合成的情况下，N，N－二烷基－五肽或六肽的酸从固相载体

中释放出来并进一步与溶液中相应的C－末端胺偶联。BOP－Cl和

PyBrop用作用于在N－甲基氨基酸之后偶联氨基酸的试剂。反应时

间相应地延长了。对N－末端的还原性烷基化作用而言，将肽－树

脂在N末端去保护，然后使其与溶于DMF／1％醋酸的并添加有3当量

NaCNBH₃的摩尔数过量了3倍的醛或酮反应。在反应完成后(阴性

Kaiser测试)，用水、异丙醇、DMF和二氯甲烷洗涤树脂数次。

在溶液合成中，对于在N－甲基氨基酸之后偶联氨基酸而言，分别

使用Boc－保护的氨基酸NCAs(N－叔丁氧羰基－氨基酸－N－羧酸

酐)、Z－保护的氨基酸NCAs(N－苄氧羰基－氨基酸－N－羧酸酐)

或者使用新戊酰氯作为缩合剂是最为有利的。N－末端的还原性烷基

化作用例如可以通过使用NaCNBH₃或氢气、Pd／C使N－末端去保护

的肽或氨基酸与相应的醛或酮反应来实现。

a)针对Boc保护基技术的合成循环：

1． 30％三氟醋酸的DCM溶液 1×3分钟

2． 50％三氟醋酸的DCM溶液 1×1分钟

3． DCM洗涤

4． 5％二异丙基乙胺的DCM溶液 5×1分钟

5． 5％二异丙基乙胺的NMP溶液 1×1分钟

6． NMP洗涤 5×1分钟

7．加入预活化的保护的氨基酸(DCC和1当

量

HOBt的NMP／DCM溶液)；

肽偶联(第一部分) 1×30分钟

8．向反应混合物中加入DMSO直到它含有

20％(体积)的DMSO；

肽偶联(第二部分) 1×16分钟

9．向反应混合物中加入3．8当量的二异丙基

乙胺；

肽偶联(第三部分) 1×7分钟

10．DCM洗涤 3×1分钟

11．如果转化不完全的话，重复偶联(返回第

6步)

12．10％的乙酐、5％二异丙基乙胺的DCM溶

液 1×2分钟

13．10％乙酐的DCM溶液 1×4分钟

14．DCM洗涤 4×1分钟

15．返回第1步。

BOP－Cl和PyBrop用作用于在N－甲基氨基酸之后偶联氨基酸的试

剂。反应时间相应地延长了。在溶液合成中，对这种类型的偶联而

言，分别使用Boc－保护的氨基酸NCAs(N－叔丁氧羰基－氨基酸

－N－羧酸酐)或Z－保护的氨基酸NCAs是最为有利的。

b)针对Fmoc保护基技术的合成循环：

1． DMF洗涤 1×1分钟

2． 20％哌啶的DMF溶液 1×4分钟

3． 20％哌啶的DMF溶液 1×16分钟

4． DMF洗涤 5×1分钟

5．加入预活化的保护的氨基酸(由1当量

TBTU

和5当量DIPEA的DMF溶液活化)； 1×61分钟

肽偶联

6． DMF洗涤 3×1分钟

7．如果转化不完全的话，重复偶联(返回第

5步)

8． 10％乙酐的DMF溶液 1×8分钟

9． DMF洗涤 3×1分钟

10．返回第2步。

BOP-Cl和PyBrop用作用于在N－甲基氨基酸之后偶联氨基酸的试

剂。该反应的时间相应地延长了。

Ⅱ．N－末端的还原性烷基化作用

将以上在Ⅰa或Ⅰb中制得的肽－树脂去掉N－末端的保护(Ⅰb中的

第2－4步或者Ⅰa中的第1－6步)，然后使其与溶于DMF／1％醋酸的

并添加有3当量NaCNBH₃的摩尔数过量了3倍的醛或酮反应。在反

应完成后(阴性Kaiser测试)，用水、异丙醇、DMF和二氯甲烷洗

涤树脂数次。

Ⅲ．如Ⅰa与Ⅱ中得到的肽－树脂的加工

在减压下干燥肽－树脂并且将其转移到TEFLON HF装置(由

PENINSULA提供)的反应容器中。加入清除剂，例如茴香醚(1ml／g

树脂)，并且在含有色氨酸的肽的情况下加入硫醇以除去吲哚甲酰

基、例如乙基二硫醇(0．5ml／g树脂)，然后在用液氮冷却的同时，

在氟化氢(10 ml／g树脂)中缩合。使该混合物加温至0℃并且在

该温度下搅拌45分钟。然后在减压下除去氟化氢，并用醋酸乙酯

洗涤剩余物以便除去剩余的清除剂。用30％的醋酸提取肽并进行

过滤，并将滤液冻干。

Ⅳ．如Ⅰb与Ⅱ中得到的肽－树脂的加工

在减压下干燥肽－树脂，然后使其经历取决于氨基酸组成的下列切

割步骤之一(Wade，Tregear，Howard Florey Fmoc工场手册，

Melbourne 1985)。

切割条件：

TFA 清除剂反应时间

1． 95％ 5％的水 1．5小时

2． 95％ 5％的乙硫醇／茴香 1．5小时

醚(1∶3)

将在合适的TFA混合物中的肽－树脂的悬浮物在室温下搅拌所述的

一段时间，然后过滤掉树脂并用TFA和DCM洗涤。浓缩滤液和洗液，

并且通过加入乙醚使肽沉淀。在冰浴中冷却后，过滤出沉淀，在30

％的醋酸中溶解该沉淀并将其冻干。

Ⅴ．当使用o－氯代三苯甲基－树脂(由Biohellas提供)时，在室

温下搅拌在醋酸／三氟乙醇／二氯甲烷混合物(1∶1∶3)中的肽－

树脂的悬浮物1小时。然后用空吸过滤掉树脂，并用切割溶液彻底

地洗涤。将合并的滤液在真空下浓缩并用水处理。通过过滤或离心

取出沉淀的固体，用乙醚洗涤并在减压下干燥。

Ⅵ．肽的纯化和鉴定

通过凝胶层析(SEPHADEX G－10，G－15／10％HOAc，SEPHADEX

LH2O／MeOH)、中压层析(固定相：HD－SIL C－18，20－45微米，100

埃；流动相：具有A=0．1％TFA／MeOH、B=0．1％TFA／水的梯度)或

者制备HPLC(固定相：水δ－Pak C－18，15微米，100埃；流动相：

具有A=0．1％ TFA／MeOH、B=0．1％TFA／水的梯度)进行纯化。

通过分析HPLC(固定相：100 2．1mm VYDAC C－18，51，300埃；流动相：用0．1％TFA缓冲的乙腈－水的梯度，40℃)测定得到的产物的纯度。

通过氨基酸分析和快原子轰击质谱进行鉴定。

具体的合成步骤实施例1A∶N，N－二甲基－Val－Val－N－甲基－Val－Pro－Pro－Val－Phe－NH₂

使相应于批量大小为0．84mmol的1．98g Fmoc－RINK－树脂(换算为0．46mmol／g)如以上Ⅰb中所述与1．26mmol的以下各物质反应

Fnoc－Phe－OH

Fmoc－Val－OH

Fmoc－Pro－OH

Fmoc－N－甲基－Val－OH

Fmoc－Val－OH

以PyBrop作偶联剂偶联上N－甲基氨基酸之后的氨基酸。在完成了重复的合成循环后，肽－树脂进行N－末端的去保护(Ⅰb中的第2－4步)，并进一步如Ⅱ中所述使其与甲醛的水溶液反应，然后在减压下干燥。将得到的树脂如Ⅳ中所述进行TFA切割。通过凝胶过滤(SEPHADEX－LH－2O)纯化粗产物(590mg)。产量为295mg。实施例1A：

实施例1也可以通过传统的溶液相方法来制备。在下面的段落中描述了N，N－二甲基－Val－Val－N－甲基－Val－Pro－Pro－Val－Phe－NH₂及其有关的中间体的合成。

a)Z－MeVal－Pro－OMe

将66．25 g(250mmol)的Z－MeVal－OH溶解在250ml无水二氯

甲烷中。在加入36．41ml(262．5mmol)三乙胺后，将反应混合

物冷却到－25℃并加入32．37ml(262．5mmol)的新戊酰氯。在

搅拌2．5小时之后，将溶于250ml二氯甲烷并在0℃下用36．41 ml

(262．5mmol)三乙胺中和的41．89g(250mmol)的H－Pro－OMe

－HCl加入反应混合物中。在－25℃下继续搅拌2小时并在室温下

过夜。用二氯甲烷稀释反应混合物，并用饱和的NaHCO₃水溶液(3X)、

水(1X)、5％的柠檬酸(3X)和饱和的NaCl溶液彻底地洗涤。通

过硫酸钠干燥有机相、将其过滤并蒸发至干。用石油醚搅拌残留物

(91．24g)过夜并进行过滤。得到62．3g产物。

b)H－MeVal－Pro－OMe

将48．9g(130mmol)的Z－MeVal－Pro－OMe溶解于490ml甲

醇中。在加入10．9ml(130mmol)浓盐酸和2．43g 10％的钯／

炭后，使反应混合物氢化。过滤并蒸发至干，生产出36．43g的产

物。

c)Z－Val－MeVal－Pro－OMe

在40℃下，将18．1g(65mmo1)的H－MeVal－Pro－OMe、21．6 g

(78mmol)的Z－Val－N－羧酸酐和22．8ml(130mmol)的二

异丙基乙胺在110ml的DMF中搅拌2天。在蒸发出DMF之后，加

入二氯甲烷，并用饱和的NaHCO₃水溶液(3X)、水(1X)、5％的柠

檬酸(3X)和饱和的NaCl溶液洗涤有机相。通过硫酸钠干燥有机

相、将其过滤并蒸发至干。得到为粘性油状物的产物(29．3g)。

d)H－Val－MeVal－Pro－OMe

将29．3g(61．6 mmol)的Z－Val－MeVal－Pro－OMe溶解于230ml

的甲醇中。在加入1．15g 10％的钯／炭后，使反应混合物氢化。

过滤并蒸发至干，生产出21．96g的产物。

e)Z－Val－Val－MeVal－Pro－OMe

将15．29g(61mmol)的Z－Val－OH和21．96g(61mmol)的H

－Val－MeVal－Pro－OMe溶解于610ml的二氯甲烷中并冷却到0

℃。在加入8．16ml(73．2mmol)N－甲基吗啉、2．77g(20．3mmol)

HOBt和11．74g(61mmol)EDCI之后，将反应混合物在室温下搅

拌过夜，用二氯甲烷稀释反应混合物并用饱和的NaHCO₃水溶液

(3X)、水(1X)、5％的柠檬酸(3X)和饱和的NaCl溶液彻底地洗

涤。通过硫酸钠干燥有机相，过滤并蒸发至干以生产出31．96g的

产物。

f)Z－Val－Val－MeVal－Pro－OH

将31．96g(57mmol)的Z－Val－Val－MeVal－Pro－OMe溶解于

250ml的甲醇中。加入102．6ml的1N的LiOH溶液，并在室温下

搅拌混合物过夜。在加入500ml水后，用醋酸乙酯洗涤水相三次。

通过硫酸钠干燥有机相，过滤并蒸发至干，生产出30．62g为白色

固体的所希望的产物。

g)Z－Val－Val－MeVal－Pro－Pro－Val－Phe－NH₂

将25g(43．3mmol)的Z－Val－Val－MeVal－Pro－OH和15．59g

(43．3mmol)的H－Pro－Val－Phe－NH₂悬浮在430ml无水二氯

甲烷中。在冷却到0℃后，加入5．81ml(52mmol)的N－甲基吗

啉、1．97g(15mmol)的HOBt和8．33g(43．3mmol)的EDCI，

并在室温下搅拌该反应混合物过夜。蒸发掉溶剂，将残留物溶解在

640ml的二氯甲烷中，并用饱和的NaHCO₃水溶液(4X)、水(1X)、

5％的柠檬酸(3X)和饱和的NaCl溶液彻底地洗涤。通过硫酸钠干

燥有机相，过滤并蒸发至于以生产出33．04g的产物。在硅胶柱上

通过层析法用20％的甲醇／己烷分离粗产物。得到18．32g所希望

的产物。

h) N，N－二甲基－Val－Val－MeVal－Pro－Pro－Val－Phe－NH₂

将18．32g的Z－Val－Val－MeVal－Pro－Pro－Val－Phe－NH₂溶

解于80ml的甲醇中。在氮气气氛下加入O．4g 10％的钯／炭，并

在室温下使反应混合物氢化4小时。在加入6．22ml(81．24mmol)

37％的甲醛水溶液后，继续氢化5小时。过滤和蒸发溶剂得到了15．6

g的粗产物。通过将所述的肽溶解于水中、调节pH为2并用醋酸

乙酯萃取水相三次来实现进一步的纯化。然后将水相调节到pH为

8－9并用醋酸乙酯萃取四次。用水洗涤有机相并通过硫酸钠干燥、

过滤并蒸发以生产出11．3g为白色粉末的纯化的产物。通过快原

子轰击质谱鉴定该化合物([M+H]^＋=797)。实施例2A：N，N－二甲基－Val－Val－NMe－Val－Pro－{1－[噻唑－(2)－基]－2－苯基}－乙酰胺

使相应于批量大小为3mmol的4．11g的Fmoc－Pro－对－烷氧基苄基－醇－树脂(换算为0．73mmol／g)如Ⅰb中所述与4．5mmol的以下各物质反应

Fmoc－N－MeVal－OH

Fmoc－Val－OH

Fmoc－Val－OH在这种情况下，随着反应时间的增加使N－甲基氨基酸之后的氨基酸与采用PyBrop或Bop－Cl的双重偶联剂反应。在合成结束后，肽－树脂进行N－末端去保护(Ⅰb中的第2－4步)，并且如Ⅱ中所述使其与甲醛水溶液进一步反应，然后在减压下干燥。将以这种方式得到的树脂进行如Ⅳ中所述的TFA切割。把粗产物(750mg)直接用于接下来的偶联。在室温下，随着192微升DIPEA的DMF溶液的加入，使100mg的该化合物与45mg的(S)－2－[1－氨基－2－苯乙基]噻唑以及230mg的PyBop反应2天。通过凝胶层析(SEPHADEX LH－20，甲醇)纯化反应混合物，并合并所述产物的级分。得到83mg的产物。实施例1BMe₂Val－Val－MeVal－Pro－Pro－NHCH(CH₃)₂

a)Z－MeVal－Pro－OMe

将66．25g(250mmol)的Z－MeVal－OH溶解在250ml无水二氯

甲烷中。在加入36．41 ml(262．5mmol)三乙胺后，将反应混合

物冷却到－25℃并加入32．27ml(262．5mmol)的新戊酰氯。在

搅拌2．5小时之后，将溶于250ml二氯甲烷并在0℃下用36．41ml

(262．5mmol)三乙胺中和的41．89g(250mmol)的H－Pro－OMe

×HCl加入反应混合物中。在－25℃下继续搅拌2小时并在室温下

水(1X)、5％的柠檬酸(3X)和饱和的NaCl溶液彻底地洗涤。通

(91．24g)过夜并进行过滤。得到62．3g产物。

b)H－MeVal－Pro－OMe

将48．9g(130mmol)的Z－MeVal－Pro－OMe溶解于490ml甲

醇中。在加入10．9ml(130mmol)浓盐酸和2．43g 10％的钯／

物。

c)Z－Val－MeVal－Pro－OMe

在40℃下，将18．1g(65mmol)的H－MeVal－Pro－OMe、21．6g

(78mmol)的Z－Val－N－羧酸酐和22．8ml(130mmol)的二

异丙基乙胺在110ml的DMF中搅拌2天。在蒸发出DMF后，加入

二氯甲烷，并用饱和的NaHCO₃水溶液(3X)、水(1X)、5％的柠檬

酸(3X)和饱和的NaCl溶液洗涤有机相。通过硫酸钠干燥有机相

并蒸发至干。得到为粘性油状物的产物(29．3g)。

d)H－Val－MeVal－Pro－OMe

将29．3g(61．6mmol)的Z－Val－MeVal－Pro－OMe溶解于230ml

过滤并蒸发至干，生产出21．96g的产物。

e)Z－Val－Val－MeVal－Pro－OMe

将15．29g(61mmol)的Z－Val－OH和21．96g(6lmmol)的H

－Val－MeVal－Pro－OMe溶解于610ml的二氯甲烷中并冷却到0

℃。在加入8．16ml(73．2mmol)N－甲基吗啉、2．77g(20．3mmol)

HOBt和11．74g(61mmol)EDCI之后，将反应混合物在室温下搅

拌过夜，用二氯甲烷进行稀释并用饱和的NaHCO₃水溶液(3X)、水

(1X)、5％的柠檬酸(3X)和饱和的NaCl溶液彻底地洗涤。通过

硫酸钠干燥有机相，过滤并蒸发至干以生产出31．96g的产物。

f)Z－Val－Val－MeVal－Pro－OH

将31．96g(57mmol)的Z－Val－Val－MeVal－Pro－OMe溶解于

250ml的甲醇中。加入102．6ml的1N的LiOH溶液，并在室温下

搅拌混合物过夜。在加入500ml水后，用醋酸乙酯洗涤水相三次，

在0℃下调节其pH为2并用醋酸乙酯萃取三次。通过硫酸钠干燥

有机相，过滤并蒸发至干，生产出30．62g为白色固体的所希望的

产物。

g)Z－Val－Val－MeVal－Pro－Pro－NHCH(CH₃)₂

将2g(3．35mmol)的Z－Val－Val－MeVal－Pro－OH和0．664g

(3．35mmol)的H－Pro－NHCH(CH₃)₂溶解于34ml无水二氯甲烷

中。在冷却到0℃后，加入1．35ml(12．1mmol)的N－甲基吗啉、

O．114g(0．84mmol)的HOBt和0．645g(3．35mmol)的EDCI，

并在室温下搅拌该反应混合物过夜。加入80ml二氯甲烷，并用饱

和的NaHCO₃水溶液(3X)、水(1X)、5％的柠檬酸(3X)和饱和的

NaCl溶液(1X)彻底地洗涤有机相。通过硫酸钠干燥有机相，过

滤并蒸发至干以生产出1．96g的产物，所述产物并不进一步地纯

化便用于接下来的反应中。

h)Me₂Val－Val－MeVal－Pro－Pro－NHCH(CH₃)₂

将1．96g的Z－Val－Val－MeVal－Pro－Pro－NHCH(CH₃)₂溶解于

11ml的甲醇中。在氮气气氛下加入0．054g 10％的Pd／C，并在

室温下使反应混合物氢化4小时。在加入0．86ml(11．24mmol)

37％的甲醛水溶液和0．281g 10％的Pd／C后，继续氢化5小时。

过滤并蒸发溶剂得到了2．77g的粗产物。通过将所述的肽溶解于

水中、调节pH为2并用醋酸乙酯萃取水相三次来实现进一步的纯

化。然后将水相调节到pH为8－9并用二氯甲烷萃取四次。通过硫

酸钠干燥有机相、过滤并蒸发以生产出1．37g为白色泡沫的纯化

的产物。采用中压液相层析(10分钟内为10－50％的A；320分钟

内为50－90％的A)进一步纯化该化合物。合并含有所述产物的级

分、将其冻干并重新溶解在水中，用1N的LiOH调节pH为9。在

用二氯甲烷萃取后，通过硫酸钠干燥有机相，将其过滤并蒸发至干。

冻干后生产出500mg的纯的产物，而所述产物通过快原子轰击质

谱进行鉴定([M+H]⁺=593)。实施例2BMe₂Val－Val－MeVal－Pro－Pro－NHC(CH₃)₃

a)Z－Val－Val－MeVal－Pro－Pro－NHC(CH₃)₃

将2g(3．35mmol)的Z－Val－Val－MeVal－Pro－OH和0．692g

(3．35mmol)的H－Pro－NHC(CH₃)₃溶解于34ml无水二氯甲烷

中。在冷却到0℃后，加入1．35ml(12．1mmol)的N－甲基吗啉、

0．114g(0．84mmol)的HOBt和0．645g(3．35mmol)的EDCI，

和的NaHCO₃水溶液(3X)、水(1X)、5％的柠檬酸(3X)和饱和的

NaCl溶液(1X)彻底地洗涤有机相。通过硫酸钠干燥有机相，过

滤并蒸发至干以生产出1．8g的产物，所述产物并不进一步地纯化

便用于接下来的反应中。

b)Me₂Val－Val－MeVal－Pro－Pro－NHC(CH₃)₃

将1．8g的Z－Val－Val－MeVal－Pro－Pro－NHC(CH₃)₃溶解于10

ml的甲醇中。在氮气气氛下加入0．045g 10％的Pd／C，并在室温

下使反应混合物氢化4小时。在加入0．86ml(11．24mmol)37％

的甲醛水溶液和0．252g 10％的Pd／C后，继续氢化5小时。过滤

并蒸发溶剂得到了1．82g的粗产物。采用中压液相层析(10分钟

内为10－50％的A；320分钟内为50－90％的A)进一步纯化该化

合物。合并含有所述产物的级分、将其冻干并重新溶解在水中，用

1N的LiOH调节pH为9。在用二氯甲烷萃取后，通过硫酸钠干燥有

机相并蒸发至干。冻干后生产出547mg的纯的产物，而所述产物

通过快原子轰击质谱进行鉴定([M+H]⁺=607)。生物活性的评价体内法

采用称作胶原诱导的关节炎(CIA)的类风湿性关节炎的标准动物模型(例如参见Banerjee等人，《免疫学杂志》142：2237－2243(1989))来测试图1中命名为化合物ⅱ的通式Ⅰ的多拉抑制素－15衍生物。CIA是一种有用的类风湿性关节炎的动物模型，该模型可作为探察发炎的滑膜炎的病因学以及调查潜在新的治疗措施的体内系统。在本发明中同样可以使用另一合适的模型，例如在大鼠中佐剂诱导的关节炎(例如参见Ward等人，《类风湿性关节炎》(1962)5：557－564)。

小鼠中的胶原诱导的关节炎是由皮内注射在完全弗氏佐剂中乳化的小鸡Ⅱ型胶原诱导的，其中症状的开始通常出现在免疫接种后第26天或附近。

一般说来，似乎提供了抑制类风湿性关节炎的可接受水平的任何剂量方案都是合适的。采用本领域普通技术人员众所周知的技术可以确定给药的任何可接受的方法。此外，如前所述，可以将通式Ⅰ的多拉抑制素－15衍生物与已知在类风湿性关节炎的治疗中有用的其它药物联合给药。实施例3：胶原诱导的关节炎－预防模型

在所有的实验中均使用DBA－1小鼠，该小鼠是对胶原诱导的关节炎易感的小鼠的一个品系(例如参见《The FASEB》2：2950(1988))。在第0天，用100μg溶于完全弗氏佐剂的小鸡Ⅱ型胶原对小鼠进行皮内免疫接种。

对三个治疗组进行评价，并且所述小组由盐水治疗的动物(对照)、地塞米松治疗的动物(标准疗法)和化合物ⅱ治疗的动物组成。在免疫接种后第26天、恰好在症状开始前对所有的小组开始治疗，并且在免疫接种后第35天时结束治疗。将地塞米松以5mg／kg／天的剂量进行腹膜内注射，将化合物ⅱ以50mg／kg／天的剂量用盐水作载体通过管饲法口服给药，并且将盐水每天一次进行口服给药以作为对照。平均关节炎得分：

通过每天观察每只爪子来记录关节炎严重的程度。用0－5的整数尺度来定量地描述每只爪子中红斑、肿胀、畸形和关节僵硬的水平，其中0=正常、而5=最严重。所有四只爪子的总和表示平均的关节炎得分，分值为20则为最大值。在图2中以图形的方式描绘出结果。

结果表明在治疗结束后6天内，用化合物ⅱ治疗的动物没有一只具有类风湿性关节炎的迹象。但是，地塞米松治疗的动物在治疗结束后立即显示出类风湿性关节炎的迹象。实施例4：胶原诱导的关节炎－治疗模型

在所有的实验中均使用DBA－1小鼠。在第0天，用100μg小鸡Ⅱ型胶原对小鼠进行皮内免疫接种。症状的开始出现在免疫接种后大约第35天。

对三个治疗组进行评价，并且所述小组由载体治疗的动物(对照)、地塞米松治疗的动物(标准疗法)和化合物ⅱ治疗的动物组成。在免疫接种后第48天、当所有动物的关节炎得分已经达到3－4时对所有的小组开始治疗。三个小组中小鼠的平均关节炎得分在治疗开始时是等同的。将所有的动物治疗21天。将地塞米松以5mg／kg／天的剂量进行腹膜内注射，将化合物ⅱ以50mg／kg／天的剂量用盐水作载体通过管饲法口服给药，并且将载体通过管饲法单独给药(0．25ml)以作为对照。平均关节炎得分：

通过每天给每只爪子评分来记录关节炎严重的程度。用0－5的整数尺度来定量地描述红斑、肿胀、畸形和关节僵硬的水平，其中0=正常、而5=最严重。所有四只爪子的总和表示平均的关节炎得分，其中分值为20为最大值。在图3中以图形的方式描绘出结果。

结果表明与对照组相比，用化合物ⅱ治疗的动物显示出在平均关节炎得分上的明显的下降(如Mann－Whitney测试测定的，P值小于0．01－0．05)。组织病理学的结果：

将来自各治疗组的五只小鼠在免疫接种后第71天进行尸体剖检，并根据来自每只小鼠的所有四只爪子的关节进行组织病理学研究。将有疾患的关节的滑膜炎症和软骨的损伤分成0－3个等级。结果示于图4中。与载体治疗的动物相比，用化合物ⅱ和地塞米松的治疗明显地抑制了滑膜炎和软骨损伤。实施例5：佐剂诱导的关节炎大鼠－预防模型

在第0天，用1．2mg溶于不完全弗氏佐剂的热灭活的M．Tuberculosis对雄性路易斯大鼠进行皮内免疫接种。治疗组(10只动物／组)由盐水治疗的动物(对照)、1mg／kg／天的氨甲蝶呤治疗的动物(标准疗法)以及分别用10、5和2．5mg／kg／天的化合物ⅱ治疗的三个小组组成。治疗开始于免疫接种的当天(第0天)并且每隔一天继续一次，共给药12次。所有的治疗都是通过管饲法口服给药的。在第12、16、19和23天时，通过以类似于实施例3和4的方式确定平均的关节炎得分来评价所述的动物。在第23天时终止实验，并且结果表明化合物ⅱ以依赖于剂量的方式防止了关节炎迹象的出现(发炎的爪子和四肢)。即用10mg／kg的化合物ⅱ治疗的动物没有一只显示出疾病的迹象(0／10)，而在5mg和2．5mg的剂量下分别有2／10的动物和7／10的动物显示出疾病的迹象。在对照组中，7／10的动物显示出疾病的迹象。正如预计的那样，氨甲蝶呤预防了关节炎。根据实施例，已经制备出并且可以制备出下列化合物：

3. Xaa Val Xab Pro Xac

4. Xaa Val Xab Pro Xad

5. Xaa Val Xab Pro Xae

6. Xaa Val Xab Pro Xaf

7. Xaa Val Xab Pro Xag

8. Xaa Val Xab Pro Xah

9. Xaa Val Xab Pro Xai

10. Xaa Val Xab Pro Xak

1i. Xaa Val Xab Pro Xal

12. Xaa Val Xab Pro Xam

13. Xaa Val Xab Pro Xan

14. Xaa Val Xab Pro Xao

15. Xaa Val Xab Pro Xap

16. Xaa Val Xab Pro Xaq

17. Xaa Val Xab Pro Xar

18. Xaa Val Xab Pro Xas

19. Xaa Val Xab Pro Xat

20. Xaa Val Xab Pro Xau

21. Xaa Val Xab Pro Xav

22. Xaa Val Xab Pro Xaw

23. Xaa Val Xab Pro Xax

24. Xaa Val Xab Pro Xay

25. Xaa Val Xab Pro Xaz

26. Xaa Val Xab Pro Xba

27. Xaa Val Xab Pro Xbb

28. Xaa Val Xbc Pro Xay

29. Xaa Val Xab Pro Xbd

30. Xaa Val Xab Pro Xbe

31. Xaa Val Xab Pro Xbf

32. Xaa Val Xab Pro Xbg

33. Xaa Val Xab Pro Xbh

34. Xaa Val Xab Pro Xbi

35. Xaa Val Xab Pro Xbk

36. Xaa Val Xab Pro Xbl

37. Xaa Val Xab Pro Xbm

38. Xaa Val Xab Pro Xbn

39. Xaa Val Xab Pro Xbo

40. Xaa Val Xab Pro Xbp

41. Xaa Val Xab Pro Xbq

42. Xaa Val Xab Pro Xbr

43. Xaa Val Xab Pro Xbs

44. Xaa Val Xab Pro Xbt

45. Xaa Val Xab Pro Xbu

46. Xaa Val Xab Pro Xbv

47. Xaa Val Xab Pro Xbw

48. Xaa Val Xab Pro Xbx

49. Xaa Val Xab Pro Xby

50. Xaa Val Xab Pro Xbz

51. Xaa Val Xab Pro Xca

52. Xaa Val Xab Pro Xcb

53. Xaa Val Xab Pro Xcc

54. Xaa Val Xab Pro Xcd

55. Xaa Val Xab Pro Xce

56. Xaa Val Xab Pro Xcf

57. Xaa Xdf Xab Pro Xay

58. Xaa Val Xab Pro Xch

59. Xaa Val Xab Pro Xci

60. Xaa Val Xab Pro Xck

61. Xaa Val Xab Pro Xcl

62. Xaa Val Xab Pro Xcm

63. Xaa Val Xab Pro Xcn

64. Xaa Val Xab Pro Xco

65. Xaa Val Xab Pro Xcp

66. Xaa Val Xab Pro Xcq

67. Xaa Val Xab Pro Xcr

68. Xaa Val Xab Pro Xcs

69. Xaa Val Xab Pro Xct

70. Xaa Val Xab Pro Xcu

71. Xcw Val Xab Pro Xcv

72. Xcx Val Xab Pro Xcv

73. Xaa Val Xab Pro Pro Xcy

74. Xaa Val Xab Pro Pro Xcz

75. Xaa Val Xda Pro Xcv

76. Xaa Xdb Xab Pro Xcv

77. Xdc Val Xab Pro Xcv

78. Xaa Ile Xab Pro Xcv

79. Xdd Val Xab Pro Xcv

80. Xde Val Xab Pro Xcv

81. Xaa Xdf Xab Pro Xcv

82. Xaa Val Xab Pro Xcg

83. Xaa Val Xab Pro Pro Xdg

84. Xaa Val Xab Pro Pro Xdh

85. Xaa Val Xab Pro Pro Xdi

86. Xaa Val Xab Pro Pro Xdk

87. Xaa Val Xdl Pro Xcv

88. Xde Val Xab Pro Xay

89. Xaa Val Xdl Pro Xay

90. Xaa Val Xab Pro Xdm

91. Xaa Val Xab Pro Xdn

92. Xaa Val Xab Pro Xdo

93. Xaa Val Xab Pro Xdp

94. Xaa Val Xab Pro Xdq

95. Xaa Val Xab Pro Pro Xdr

96. Xaa Val Xab Pro Xds

97. Xaa Val Xbc Pro Xcv

98. Xaa Ile Xab Pro Xay

99. Xcw Val Xab Pro Xay

100. Xaa Val Xbc Pro Xal

101. Xaa Val Xdl Pro Xal

102. Xaa Xdf Xab Pro Xal

103. Xaa Ile Xab Pro Xal

104. Xdd Val Xab Pro Xal

105. Xde Val Xab Pro Xal

106. Xcx Val Xab Pro Xcy

107. Xcw Val Xab Pro Xal

108. Xcx Val Xab Pro Xal

109. Xcw Val Xab Pro Xav

110. Xcx Val Xab Pro Xav

111. Xcw Val Xab Pro Xaw

112. Xcx Val Xab Pro Xaw

113 Xab Val Xab Pro Xay

114. Xab Val Xab Pro Xcv

115. Xab Val Xab Pro Xal

116. Xab Val Xab Pro Xam

117. Xab Val Xab Pro Xan

118. Xab Val Xab Pro Xao

119. Xab Val Xab Pro Xav

120. Xab Val Xab Pro Xaw

121. Xab Val Xab Pro Xat

122. Xab Val Xab Pro Xau

123. Xab Val Xab Pro Xbf

124. Xab Val Xab Pro Xbm

125. Xab Val Xab Pro Xbn

126. Xab Val Xab Pro Xbo

127. Xab Val Xab Pro Xch

128. Xaa Val Xab Pro Xdt

129. Xaa Val Xab Pro Xdu

130. Xaa Val Xab Pro Xdv

131. Xaa Val Xab Pro Xdw

132. Xaa Val Xab Pro Xdx

133. Xaa Val Xab Pro Xdy

134. Xaa Val Xab Pro Xdz

135 Xaa Val Xab Pro Xea

136. Xaa Val Xab Pro Xeb

137. Xaa Val Xab Pro Xec

138. Xaa Val Xab Pro Xed

139．Xaa Val Xab Pro Xef

140. Xaa Val Xab Pro Xeg

141. Xaa Val Xab Pro Xeh

142. Xaa Val Xab Pro Xei

143. Xaa Val Xab Pro Xek

144. Xaa Val Xab Pro Xel

145. Xaa Val Xab Pro Xem

146. Xaa Val Xab Pro Xen

147. Xaa Val Xab Pro Xeo

148. Xaa Val Xab Pro Xep

149. Xaa Val Xab Pro Xeq

150. Xaa Val Xab Pro Xer

151. Xaa Val Xab Pro Xcq

152. Xaa Val Xab Pro Pro Val Phe

153. Xaa Val Xab Pro Xet Val Phe NH₂

154. Xaa Val Xer Pro Pro Val Phe NH₂

155. Xaa Val Xbc Pro Pro Val Phe NH₂

156. Xaa Ile Xab Pro Pro Val Phe NH₂

157．Xaa Leu Xab Pro Pro Val Phe NH₂

158. Xde Val Xab Pro Pro Val Phe NH₂

159. Xdd Val Xab Pro Pro Val Phe NH₂

160. Xes Val Xab Pro Pro Val Phe NH₂

161. Xeu Val Xab Pro Pro Val Phe NH₂

162. Xaa Val Xab Pro Pro Phe Phe NH₂

163. Xaa Val Xab Pro Pro Val NH₂

163. Xaa Val Xab Pro Xev

165．Xaa Val Xab Pro Pro NH₂

166. Xaa Val Xab Pro Pro

167. Xaa Val Xab Pro Xew

168. Xaa Val Xab Xex

169 Xdd Val Xab Pro Pro NH₂

170. Xaa Xdf Xab Pro Pro NH₂

171. Xaa Val Xab Pro Xey

172. Xaa Val Xab Pro Xez

173. Xfa Val Xab Pro Pro Val Phe NH₂

174. Xaa Val Xab Pro Pro Xfb

175. Xaa Val Xab Pro Xfc

176. Xaa Val Xab Pro Xfd

177. Xaa Val Xab Pro Xfe

178. Xaa Val Xab Pro Xff

179. Xaa Val Xab Pro Xfg

180. Xaa Val Xab Pro Xfh

181. Xaa Val Xab Pro Xfi

182. Xaa Val Xab Pro Xfj

183. Xaa Val Xdl Pro Pro NH₂

184. Xaa Val Xfk Pro Pro NH₃

185. Xaa Val Xfl Pro Xfh

186. Xaa Val Xfk Pro Xfh

187. Xcx Val Xab Pro Xfh

188. Xaa Val Xab Pro Pro Xdf Phe NH₂

189. Xaa Val Xab Pro Pro Leu Phe NH₂

190. Xaa Val Xab Pro Pro Ile Phe NH₂

下面列出了所合成的新化合物的MS－鉴定的实施例：实施例快速原子轰击质谱的分析

3． 565

4． 579

5． 593

6． 607

7． 621

8． 635

11． 607

12． 607

13． 621

14． 649

15． 635

16． 635

17． 635

18 635

19． 621

20． 621

21． 635

22． 635

25． 633

26． 647

27． 66l

31． 623

32． 671

33． 667

34． 681

35． 655

36． 655

37． 669

38． 621

39． 635

41． 649

42． 621

43． 633

44． 667

45． 607

46． 647

47． 668

48． 655

49． 669

50． 685

51． 629

52． 625

53． 721

55． 579

58． 623

61． 597

62． 621

63． 609

64． 625

65． 635

66． 591

67． 715

68． 685

69． 685

70． 591

71． 607

72． 621

74． 706

75． 579

76． 579

77． 579

78． 607

79． 607

80． 607

81． 607

82． 637

83． 692

84． 706

85． 706

86． 706

87． 607

90． 635

92． 659

93． 617

94． 636

95． 678

128． 671

131． 625

139． 625

151． 637

152． 798

153． 810

154． 812

155． 812

156． 812

157． 812

258． 812

159． 811

160． 825

161． 88l

162． 845

163． 649

164． 737

165． 550

166． 55l

167． 731

168． 550

169． 566

170． 566

171． 635

172． 704

173． 853

174． 740

175． 619

176． 845

177． 649

178． 691

179． 717

180． 641

181． 579

182． 595

183． 566

184． 566

185． 669

186． 656

187． 669

188． 811

189． 812

190． 812

在描述通式Ⅰ的化合物中所用的符号具有下列含义：Xaa：N，N－二甲基缬氨酸Xab：N－甲基缬氨酸

Xbc： N－甲基－异亮氨酸

Xcc：脯氨酸金刚烷基(1)酰胺

Xcw： N－甲基－N－乙基－缬氨酸

Xcx： N，N－二乙基缬氨酸

Xda：N－甲基－2－氨基丁酰基

Xdb：2－氨基丁酰基

Xdc：N，N－二甲基－2－氨基丁酰基

Xdd：N，N－二甲基－2－叔丁基甘氨酸

Xde：N，N－二甲基－异亮氨酸

Xdf：2－叔丁基甘氨酸

Xdl： N－甲基－2－叔丁基甘氨酸

Xer：N－甲基亮氨酸

Xes：N－乙酰基－N－甲基缬氨酸

Xet：2－哌啶酸

Xeu：N，N－二丁基缬氨酸

Xfa： N，N－二丙基缬氨酸

Xfk：N－乙基缬氨酸Xfl：N－甲基－3－叔丁基丙氨酸等同的方案

本领域普通技术人员仅仅采用常规的实验，便会认识到或者能够确定出许多与本文所述的发明的具体实施方案等同的方案。这类等同的方案意欲包括在下列权利要求的范围内。

Claims

1．一种用于治疗哺乳动物中的类风湿性关节炎的方法，该方法包括将治疗有效量的通式Ⅰ的化合物及其与生理上耐受的酸形成的盐向所说的哺乳动物给药：R¹ R² N－CHX－CO－A－B－D－(E)_s－(F)_t－(G)_u－K (Ⅰ)其中R¹ 为烷基、环烷基、烷基磺酰基、氟代烷基或氨基磺酰基；R² 为氢、烷基、氟代烷基或环烷基；

R¹－N－R² 合起来可以是吡咯烷基或哌啶子基残基；A 为缬氨酰基、异亮氨酰基、亮氨酰基、别异亮氨酰基、2，2－二甲基甘氨酰基、2－环丙基甘氨酰基、2－环戊基甘氨酰基、3－叔丁基丙氨酰基、2－叔丁基甘氨酰基、3－环己基丙氨酰基、2－乙基甘氨酰基、2－环己基甘氨酰基、正亮氨酰基或正缬氨酰基残基；B 为N－烷基－缬氨酰基、－正缬氨酰基、－亮氨酰基、－异亮氨酰基、－2－叔丁基甘氨酰基、－3－叔丁基丙氨酰基、－2－乙基甘氨酰基、－2－环丙基甘氨酰基、－2－环戊基甘氨酰基、正亮氨酰基或－2－环己基甘氨酰基残基；D 为脯氨酰基、高脯氨酰基、羟脯氨酰基、3，4－脱氢脯氨酰基、4－氟代脯氨酰基、3－甲基脯氨酰基、4－甲基脯氨酰基、5－甲基脯氨酰基、氮杂环丁烷－2－羰基、3，3－二甲基脯氨酰基、4，4－二氟代脯氨酰基、噁唑烷－4－羰基或噻唑烷－4－羰基残基；E 为脯氨酰基、高脯氨酰基、羟脯氨酰基、3，4－脱氢脯氨酰基、4－氟代脯氨酰基、3－甲基脯氨酰基、4－甲基脯氨酰基、5－甲基脯氨酰基、氮杂环丁烷－2 －羰基、3，3－二甲基脯氨酰基、4，4－二氟代脯氨酰

基、噁唑烷－4－羰基或噻唑烷－4－羰基残基；F和G 独立地选自由脯氨酰基、高脯氨酰基、羟脯氨酰基、

噻唑烷基－4－羰基、1－氨基戊基－1－羰基、缬氨

酰基、2－叔丁基甘氨酰基、异亮氨酰基、亮氨酰基、

3－环己基丙氨酰基、苯丙氨酰基、N－甲基苯丙氨酰

基、四氢异喹啉基－2－组氨酰基、1－氨基吲哚基－

1－羰基、3－吡啶基丙氨酰基、2－环己基甘氨酰基、

正亮氨酰基、正缬氨酰基、新戊基甘氨酰基、色氨酰

基、甘氨酰基、2，2－二甲基甘氨酰基、丙氨酰基、

β－丙氨酰基和3－萘基丙氨酰基残基所组成的组

中；X 为氢、烷基、环烷基、－CH₂－环己基或芳烷基；s，t和u独立地为0或1；并且K 为羟基、烷氧基、苯氧基、苄氧基或者取代的或未取

代的氨基部分。

2．权利要求1的方法，其中所说的哺乳动物是人。

3．权利要求2的方法，其中对所述通式Ⅰ的化合物而言，K为具有通式R⁵－N－R⁶的取代的氨基部分，其中：R⁵ 为氢、或羟基、或C_1－7烷氧基、或苄氧基、或苯氧基

或C_1－7直链或支链烷基(它可以被一个或多个氟原子

取代)、或C_1－12直链或支链羟烷基、或C_3－10－环烷基、

或苄基(它可以被多达3个取代基所取代，而所述取

代基可以独立地为CF₃、硝基、C_1－7烷基磺酰基、C_1－4

烷氧基、苯氧基、苄氧基、卤素、C_1－4－烷基、氰基、

羟基、N(CH₃)₂、COOMe、COOEt、COOiPr或COONH₂)；R⁶为氢、C_1－12直链或支链烷基(它可以被一个或多个氟原子所取代)、或C_1－12直链或支链羟烷基、或C_3－10－环烷基、或－(CH₂)_v－C_3-7－环烷基(v=0，1，2或3)、或去甲麻黄碱基、或去甲伪麻黄碱基、或喹啉基、或吡唑基、或－CH₂－苯并咪唑基、或(1)－金刚烷基或(2)－金刚烷基或－CH₂－金刚烷基、或α－甲基－苄基、或α－二甲基苄基、或－(CH₂)_v－苯基(v=0，1，2或3；它可以被多达2个取代基所取代，而所述取代基可以独立地为CF₃、硝基、C_1－7烷基磺酰基、C_1－4烷氧基、苯氧基、苄氧基、卤素、可以形成环状系统的C_1－4烷基、氰基、羟基、N(CH₃)₂、COOMe、COOEt、COOiPr或COONH₂)、或－(CH₂)_m－萘基(m=0或1)；或－(CH₂)_w－二苯甲基(w=0，1或2)；或联苯基或吡啶甲基或苯并噻唑基或苯并异噻唑基或苯并吡唑基或苯并噁唑基或－(CH₂)_m－芴基(m=O或1)；或嘧啶基或－(CH₂)_m－2，3－二氢化茚基(m=0或1)；或－(CH₂CH₂O)_y－CH₃(y=0，1，2，3，4或5)或－(CH₂CH₂O)_y－CH₂CH₃(y=0，1，2，3，4或5)、或NH－C₆H₅(它可以被多达2个取代基所取代，而所述取代基可以独立地为CF₃、硝基、C_1－7烷基磺酰基、C_1－4烷氧基、卤素、可以形成环状系统的C_1－4烷基、氰基、羟基、COOMe、COOEt、COOiPr或COONH₂)、或－NCH₃－C₆H₅、或－NH－CH₂－C₆H₅、或－NCH₃－CH₂－C₆H₅、或5元杂芳基(它可以被多达2个取代基所取代，而所述的取代基可以独立地为CF₃、硝基、硫甲基、硫乙基、C_3－6－环烷基、－CH₂－COOEt、与杂环形成二环系的C_3－4－亚烷基)、或苯基、或－CHR⁷－5元杂芳基(它可以被多达2个取代基所取代，而所述取代基可以独立地为CF₃、硝基、氰基、卤素、COOMe、COOEt、COOiPr、CONH₂、C_1－4－烷基、C_1－4－烷氧基、苯基、苄基、萘基、或C_1－7－烷基磺酰基[R⁷=氢、直链或支链的C_1－5烷基、苄基；或R⁷和R⁵一起形成基团－(CH₂)₃－或－(CH₂)₄－])。

4．权利要求3的方法，其中对所述通式Ⅰ的化合物而言，R¹和R²各为甲基或乙基；X为异丙基、仲丁基或叔丁基；s为1；t和u各为0；A为缬氨酰基、2－乙基甘氨酰基、异亮氨酰基或2－叔丁基甘氨酰基；B为N－甲基缬氨酰基、2－乙基甘氨酰基、异亮氨酰基或2－叔丁基甘氨酰基；D为脯氨酰基、4－氟代脯氨酰基、噻唑烷基－4－羰基、或3，4－脱氢脯氨酰基；E为脯氨酰基、4－氟代脯氨酰基、噻唑烷基－4－羰基、高脯氨酰基、3，4－脱氢脯氨酰基或羟脯氨酰基；并且K为具有通式R⁵－N－R⁶的取代的氨基部分，其中R⁵为氢或C₁－C₄烷氧基，且R⁶为选自由以下组成的一价基团的组中的C₁－C₁₂直链或支链烷基：－C(CH₃)₃，又称作叔丁基；

又称作1，1－二甲基丙基；又称作1－甲基－1－乙基丙基；

又称作(S)－或(R)－1－甲基－2，2－二甲基－丙基；

又称作(S)－或(R)－1－乙基－2－甲基丙基；

又称作1－异丙基－2－甲基－丙基；或－C(CH₃)₂－CH－(CH₃)₂，又称作1，1－二甲基－2－甲基丙基；－CH(CH₃)₂，又称作异丙基；－CH(CH₃)CH₂CH₃，又称作仲丁基[(S)或(R)]；或－CH(CH₃)CH(CH₃)₂，又称作1，2－二甲基丙基。

5．权利要求4的方法，其中所说的一价基团为又称作叔丁基的－C(CH₃)₃。

6．权利要求3的方法，其中对所述通式Ⅰ的化合物而言，R¹和R²各为甲基或乙基；X为异丙基、仲丁基或叔丁基；s为1；t和u各为0；A为缬氨酰基、2－乙基甘氨酰基、异亮氨酰基或2－叔丁基甘氨酰基；B为N－甲基缬氨酰基、2－乙基甘氨酰基、1－异亮氨酰基或2－叔丁基甘氨酰基；D为脯氨酰基、4－氟代脯氨酰基、噻唑烷基－4－羰基或3，4－脱氢脯氨酰基；E为脯氨酰基、4－氟代脯氨酰基、噻唑烷基－4－羰基、高脯氨酰基、3，4－脱氢脯氨酰基或羟脯氨酰基；并且K为具有通式R⁵－N－R⁶的取代的氨基部分，其中R⁵为氢或C₁－C₄烷氧基，且R⁶选自由(CH₂)_v－苯基(其中v是1)和α，α－二甲基苄基组成的一价基团的组中。

7．权利要求3的方法，其中对所述通式Ⅰ的化合物而言，R¹和R²各为甲基或乙基；X为异丙基、仲丁基或叔丁基；s为1；t和u各为0；A为缬氨酰基、2－乙基甘氨酰基、异亮氨酰基或2－叔丁基甘氨酰基；B为N－甲基缬氨酰基、2－乙基甘氨酰基、1－异亮氨酰基或2－叔丁基甘氨酰基；D为脯氨酰基、4－氟代脯氨酰基、噻唑烷基－4－羰基或3，4－脱氢脯氨酰基；E为脯氨酰基、4－氟代脯氨酰基、噻唑烷基－4－羰基、高脯氨酰基、3，4－脱氢脯氨酰基或羟脯氨酰基；并且K为具有通式R⁵－N－R⁶的取代的氨基部分，其中R⁵为氢或C₁－C₄烷氧基，且R⁶为C₁－C₁₂直链或支链羟烷基。

8．权利要求7的方法，其中R⁶为3－羟基－1，1－二甲基丙基。

9．权利要求3的方法，其中对所述通式Ⅰ的化合物而言，R¹和R²各为甲基或乙基；X为异丙基、仲丁基或叔丁基；s为1；t和u各为0；A为缬氨酰基、2－乙基甘氨酰基、异亮氨酰基或2－叔丁基甘氨酰基；B为N－甲基缬氨酰基、2－乙基甘氨酰基、异亮氨酰基或2－叔丁基甘氨酰基；D为脯氨酰基、4－氟代脯氨酰基、噻唑烷基－4－羰基或3，4－脱氢脯氨酰基；E为脯氨酰基、4－氟代脯氨酰基、噻唑烷基－4－羰基、高脯氨酰基、3，4－脱氢脯氨酰基或羟脯氨酰基；并且K为具有通式R⁵－N－R⁶的取代的氨基部分，其中R⁵为氢或C₁－C₄烷氧基，且R⁶为选自由(1)－金刚烷基、(2)－金刚烷基、环丁基、环戊基、环己基、1－甲基环戊基、1－甲基环己基和[3．3．0]辛－1－基组成的组中的C_3－10环烷基。

10．权利要求4的方法，其中对所述通式Ⅰ的化合物而言，R¹和R²各为甲基；X为异丙基；s为1；t和u各为0；A为缬氨酰基；B为N－甲基缬氨酰基；D为脯氨酰基；E为脯氨酰基；R⁵为氢并且R⁶为叔丁基。

11．权利要求3的方法，其中对所述通式Ⅰ的化合物而言，R¹和R²各为甲基；X为异丙基；s为1；t和u各为0；A为缬氨酰基；B为N－甲基缬氨酰基；D为脯氨酰基；E为脯氨酰基；R⁵为苄基并且R⁶为氢。

12．一种用于治疗哺乳动物中的类风湿性关节炎的方法，该方法包括将包含下列物质的药物组合物向所说的哺乳动物给药：

a)治疗有效量的通式Ⅰ的化合物：R¹ R² N－CHX－CO－A－B－D－(E)_s－(F)_t－(G)_u－K (Ⅰ)其中

R¹ 为烷基、环烷基、烷基磺酰基、氟代烷基或氨基磺

酰基；

R² 为氢，烷基、氟代烷基或环烷基；

R¹－N－R² 合起来可以是吡咯烷基或哌啶子基残基；

A 为缬氨酰基、异亮氨酰基、亮氨酰基、别异亮氨酰基、2，2－二甲基甘氨酰基、2－环丙基甘氨酰基、2

－环戊基甘氨酰基、3－叔丁基丙氨酰基、2－叔丁

基甘氨酰基、3－环己基丙氨酰基、2－乙基甘氨酰

基、2－环己基甘氨酰基、正亮氨酰基或正缬氨酰基

残基；B 为N－烷基－缬氨酰基、－正缬氨酰基、－亮氨酰

基、－异亮氨酰基、－2－叔丁基甘氨酰基、－3－

叔丁基丙氨酰基、－2－乙基甘氨酰基、－2－环丙

基甘氨酰基、－2－环戊基甘氨酰基、正亮氨酰基或

－2－环己基甘氨酰基残基；D 为脯氨酰基、高脯氨酰基、羟脯氨酰基、3，4－脱氢

脯氨酰基、4－氟代脯氨酰基、3－甲基脯氨酰基、4

－甲基脯氨酰基、5－甲基脯氨酰基、氮杂环丁烷－

2－羰基、3，3－二甲基脯氨酰基、4，4－二氟代脯氨

酰基、噁唑烷－4－羰基或噻唑烷－4－羰基残基；E 为脯氨酰基、高脯氨酰基、羟脯氨酰基、3，4－脱氢

脯氨酰基、4－氟代脯氨酰基、3－甲基脯氨酰基、4

－甲基脯氨酰基、5－甲基脯氨酰基、氮杂环丁烷－

2－羰基、3，3－二甲基脯氨酰基、4，4－二氟代脯氨

酰基、噁唑烷－4－羰基或噻唑烷－4－羰基残基；F和G 独立地选自由脯氨酰基、高脯氨酰基、羟脯氨酰基、

噻唑烷基－4－羰基、1－氨基戊基－1－羰基、缬氨

酰基、2－叔丁基甘氨酰基、异亮氨酰基、亮氨酰基、

3－环己基丙氨酰基、苯丙氨酰基、N－甲基苯丙氨

酰基、四氢异喹啉基－2－组氨酰基、1－氨基吲哚

基－1－羰基、3－吡啶基丙氨酰基、2－环己基甘氨

酰基、正亮氨酰基、正缬氨酰基、新戊基甘氨酰基、

色氨酰基、甘氨酰基、2，2－二甲基甘氨酰基、丙氨

酰基、β－丙氨酰基和3－萘基丙氨酰基残基所组成

的组中；X 为氢、烷基、环烷基、－CH₂－环己基或芳烷基；s，t和u独立地为0或1；并且K 为羟基、烷氧基、苯氧基、苄氧基或者取代的或未

取代的氨基部分；及其与生理上耐受的酸形成的盐；以及b)治疗有效量的第二种抗关节炎药，所述药物选自由非甾类抗炎剂、有机金的衍生物、D－青霉胺、4－氨基喹啉、硫唑嘌呤、氨甲蝶呤、环孢菌素、血管生成抑制剂、抗T细胞的单克隆抗体、抗粘着分子的单克隆抗体、抗细胞因子或生长因子的单克隆抗体、TNFR－IgG、IL－1受体拮抗剂和ICE抑制剂组成的组中。

13．通式Ⅰ的化合物及其与生理上耐受的酸形成的盐用于制备治疗哺乳动物中的类风湿性关节炎的药物的用途，其中通式Ⅰ的化合物为：R¹ R² N－CHX－CO－A－B－D－(E)_s－(F)_t－(G)_u－K (Ⅰ)其中R¹ 为烷基、环烷基、烷基磺酰基、氟代烷基或氨基磺

酰基；R² 为氢、烷基、氟代烷基或环烷基；R¹－N－R²合起来可以是吡咯烷基或哌啶子基残基；A 为缬氨酰基、异亮氨酰基、亮氨酰基、别异亮氨酰

基、2，2－二甲基甘氨酰基、2－环丙基甘氨酰基、2

－环戊基甘氨酰基、3－叔丁基丙氨酰基、2－叔丁

基甘氨酰基、3－环己基丙氨酰基、2－乙基甘氨酰

基、2－环己基甘氨酰基、正亮氨酰基或正缬氨酰基

残基；B 为N－烷基－缬氨酰基、－正缬氨酰基、－亮氨酰

基、－异亮氨酰基、－2－叔丁基甘氨酰基、－3－

叔丁基丙氨酰基、－2－乙基甘氨酰基、－2－环丙

基甘氨酰基、－2－环戊基甘氨酰基、正亮氨酰基或

脯氨酰基、4－氟代脯氨酰基、3－甲基脯氨酰基、4

－甲基脯氨酰基、5－甲基脯氨酰基、氮杂环丁烷－

2－羰基、3，3－二甲基脯氨酰基、4，4－二氟代脯氨

脯氨酰基、4－氟代脯氨酰基、3－甲基脯氨酰基、4

－甲基脯氨酰基、5－甲基脯氨酰基、氮杂环丁烷－

2－羰基、3，3－二甲基脯氨酰基、4，4－二氟代脯氨

噻唑烷基－4－羰基、1－氨基戊基－1－羰基、缬氨

酰基、2－叔丁基甘氨酰基、异亮氨酰基、亮氨酰基、

3－环己基丙氨酰基、苯丙氨酰基、N－甲基苯丙氨

酰基、四氢异喹啉基－2－组氨酰基、1－氨基吲哚

基－1－羰基、3－吡啶基丙氨酰基、2－环己基甘氨

酰基、正亮氨酰基、正缬氨酰基、新戊基甘氨酰基、

色氨酰基、甘氨酰基、2，2－二甲基甘氨酰基、丙氨

酰基、β－丙氨酰基和3－萘基丙氨酰基残基所组成

取代的氨基部分。

14．一种用于制备治疗哺乳动物中的类风湿性关节炎的治疗组合物的方法，其特征在于把权利要求13中所限定的通式Ⅰ的化合物用作所说组合物的基本成分。

15．权利要求13的方法或权利要求14的方法，其中所说的哺乳动物是人。

16．权利要求13－15之任一的发明，其中对所述通式Ⅰ的化合物而言，K为具有通式R⁵－N－R⁶的取代的氨基部分，其中：R⁵ 为氢、或羟基、或C_1－7烷氧基、或苄氧基、或苯氧基

或C_1－7直链或支链烷基(它可以被一个或多个氟原子

取代)、或C_1－12直链或支链羟烷基、或C_3－10－环烷基、

或苄基(它可以被多达3个取代基所取代，而所述取

代基可以独立地为CF₃、硝基、C_1－7烷基磺酰基、C_1－4

烷氧基、苯氧基、苄氧基、卤素、C_1－4－烷基、氰基、

羟基、N(CH₃)₂、COOMe、COOEt、COOiPr或COONH₂)；R⁶ 为氢、C_1－12直链或支链烷基(它可以被一个或多个氟

原子所取代)、或C_1－12直链或支链羟烷基、或C_3－10－环烷基、或－(CH₂)_v－C_3－7－环烷基(v=0，1，2或3)、或去甲麻黄碱基、或去甲伪麻黄碱基、或喹啉基、或吡唑基、或－CH₂－苯并咪唑基、或(1)－金刚烷基或(2)－金刚烷基或－CH₂－金刚烷基、或α－甲基－苄基、或α－二甲基苄基、或－(CH₂)_v－苯基(v=0，1，2或3；它可以被多达2个取代基所取代，而所述取代基可以独立地为CF₃、硝基、C_1－7烷基磺酰基、C_1－4烷氧基、苯氧基、苄氧基、卤素、可以形成环状系统的C_1－4－烷基、氰基、羟基、N(CH₃)₂、COOMe、COOEt、COOiPr或COONH₂)、或－(CH₂)_m－萘基(m=0或1)；或－(CH₂)_w－二苯甲基(w=0，1或2)；或联苯基或吡啶甲基或苯并噻唑基或苯并异噻唑基或苯并吡唑基或苯并噁唑基或－(CH₂)_m－芴基(m=0或1)；或嘧啶基或－(CH₂)_m－2，3－二氢化茚基(m=0或1)；或－(CH₂CH₂O)_y－CH₃(y=0，1，2，3，4或5)或－(CH₂CH₂O)_y－CH₂CH₃(y=0，1，2，3，4或5)、或NH－C₆H₅(它可以被多达2个取代基所取代，而所述取代基可以独立地为CF₃、硝基、C_1－7烷基磺酰基、C_1－4烷氧基、卤素、可以形成环状系统的C_1－4烷基、氰基、羟基、COOMe、COOEt、COOiPr或COONH₂)、或－NCH₃－C₆H₅、或－NH－CH₂－C₆H₅、或－NCH₃－CH₂－C₆H₅、或5元杂芳基(它可以被多达2个取代基所取代，而所述的取代基可以独立地为CF₃、硝基、硫甲基、硫乙基、C_3－6－环烷基、－CH₂－COOEt、与杂环形成二环系的C_3－4－亚烷基)、或苯基、或－CHR⁷－5元杂芳基(它可以被多达2个取代基所取代，而所述取代基可以独立地为CF₃、硝基、氰基、卤素、COOMe、COOEt、COOiPr、CONH₂、C_1－4－烷基、C_1－4－烷氧基、苯基、苄基、萘基、或C_1－7－烷基磺酰基[R⁷=氢、直链或支链的C_1－5烷基、苄基；或R⁷和R⁵一起形成基团－(CH₂)₃－或－(CH₂)₄－])。

17．权利要求16的发明，其中对所述通式Ⅰ的化合物而言，R¹和R²各为甲基或乙基；X为异丙基、仲丁基或叔丁基；s为1；t和u各为0；A为缬氨酰基、2－乙基甘氨酰基、异亮氨酰基或2－叔丁基甘氨酰基；B为N－甲基缬氨酰基、2－乙基甘氨酰基、异亮氨酰基或2－叔丁基甘氨酰基；D为脯氨酰基、4－氟代脯氨酰基、噻唑烷基－4－羰基、或3，4－脱氢脯氨酰基；E为脯氨酰基、4－氟代脯氨酰基、噻唑烷基－4－羰基、高脯氨酰基、3，4－脱氢脯氨酰基或羟脯氨酰基；并且K为具有通式R⁵－N－R⁶的取代的氨基部分，其中R⁵为氢或C₁－C₄烷氧基，且R⁶为选自由以下组成的一价基团的组中的C₁－C₁₂直链或支链烷基：－C(CH₃)₃，又称作叔丁基；

又称作1，1－二甲基丙基；又称作1－甲基－1－乙基丙基；又称作(S)－或(R)－1－甲基－2，2－二甲基－丙基；

18．权利要求17的发明，其中所说的一价基团为又称作叔丁基的－C(CH₃)₃。

19．权利要求16的发明，其中对所述通式Ⅰ的化合物而言，R¹和R²各为甲基或乙基；X为异丙基、仲丁基或叔丁基；s为1；t和u各为0；A为缬氨酰基、2－乙基甘氨酰基、异亮氨酰基或2－叔丁基甘氨酰基；B为N－甲基缬氨酰基、2－乙基甘氨酰基、1－异亮氨酰基或2－叔丁基甘氨酰基；D为脯氨酰基、4－氟代脯氨酰基、噻唑烷基－4－羰基或3，4－脱氢脯氨酰基；E为脯氨酰基、4－氟代脯氨酰基、噻唑烷基－4－羰基、高脯氨酰基、3，4－脱氢脯氨酰基或羟脯氨酰基；并且K为具有通式R⁵－N－R⁶的取代的氨基部分，其中R⁵为氢或C₁－C₄烷氧基，且R⁶选自由(CH₂)_v－苯基(其中v是1)和α，α－二甲基苄基组成的一价基团的组中。

20．权利要求16的发明，其中对所述通式Ⅰ的化合物而言，R¹和R²各为甲基或乙基；X为异丙基、仲丁基或叔丁基；s为1；t和u各为0；A为缬氨酰基、2－乙基甘氨酰基、异亮氨酰基或2－叔丁基甘氨酰基；B为N－甲基缬氨酰基、2－乙基甘氨酰基、1－异亮氨酰基或2－叔丁基甘氨酰基；D为脯氨酰基、4－氟代脯氨酰基、噻唑烷基－4－羰基或3，4－脱氢脯氨酰基；E为脯氨酰基、4－氟代脯氨酰基、噻唑烷基－4－羰基、高脯氨酰基、3，4－脱氢脯氨酰基或羟脯氨酰基；并且K为具有通式R⁵－N－R⁶的取代的氨基部分，其中R⁵为氢或C₁－C₄烷氧基，且R⁶为C₁－C₁₂直链或支链羟烷基。

21．权利要求20的发明，其中R⁶为3－羟基－1，1－二甲基丙基。

22．权利要求16的发明，其中对所述通式Ⅰ的化合物而言，R¹和R²各为甲基或乙基；X为异丙基、仲丁基或叔丁基；s为1；t和u各为0；A为缬氨酰基、2－乙基甘氨酰基、异亮氨酰基或2－叔丁基甘氨酰基；B为N－甲基缬氨酰基、2－乙基甘氨酰基、异亮氨酰基或2－叔丁基甘氨酰基；D为脯氨酰基、4－氟代脯氨酰基、噻唑烷基－4－羰基或3，4－脱氢脯氨酰基；E为脯氨酰基、4－氟代脯氨酰基、噻唑烷基－4－羰基、高脯氨酰基、3，4－脱氢脯氨酰基或羟脯氨酰基；并且K为具有通式R⁵－N－R⁶的取代的氨基部分，其中R⁵为氢或C₁－C₄烷氧基，且R⁶为选自由(1)－金刚烷基、(2)－金刚烷基、环丁基、环戊基、环己基、1－甲基环戊基、1－甲基环己基和[3．3．0]辛－1－基组成的组中的C_3－10环烷基。

23．权利要求17的发明，其中对所述通式Ⅰ的化合物而言，R¹和R²各为甲基；X为异丙基；s为1；t和u各为0；A为缬氨酰基；B为N－甲基缬氨酰基；D为脯氨酰基；E为脯氨酰基；R⁵为氢并且R⁶为叔丁基。

24．权利要求17的发明，其中对所述通式Ⅰ的化合物而言，R¹和R²各为甲基；X为异丙基；s为1；t和u各为0；A为缬氨酰基；B为N－甲基缬氨酰基；D为脯氨酰基；E为脯氨酰基；R⁵为苄基并且R⁶为氢。

25．一种药物组合物，所述组合物包括：

a)治疗有效量的通式Ⅰ的化合物：R¹ R² N－CHX－CO－A－B－D－(E)_s－(F)_t－(G)_u－K (Ⅰ)其中R¹ 为烷基、环烷基、烷基磺酰基、氟代烷基或氨基磺酰基；R² 为氢、烷基、氟代烷基或环烷基；R¹－N－R² 合起来可以是吡咯烷基或哌啶子基残基；A 为缬氨酰基、异亮氨酰基、亮氨酰基、别异亮氨酰

基、2，2－二甲基甘氨酰基、2－环丙基甘氨酰基、2

－环戊基甘氨酰基、3－叔丁基丙氨酰基、2－叔丁

基甘氨酰基、3－环己基丙氨酰基、2－乙基甘氨酰

基、2－环己基甘氨酰基、正亮氨酰基或正缬氨酰基

残基；B 为N－烷基－缬氨酰基、－正缬氨酰基、－亮氨酰

基、－异亮氨酰基、－2－叔丁基甘氨酰基、－3－

叔丁基丙氨酰基、－2－乙基甘氨酰基、－2－环丙

基甘氨酰基、－2－环戊基甘氨酰基、正亮氨酰基或

脯氨酰基、4－氟代脯氨酰基、3－甲基脯氨酰基、4

－甲基脯氨酰基、5－甲基脯氨酰基、氮杂环丁烷－

2－羰基、3，3－二甲基脯氨酰基、4，4－二氟代脯氨

脯氨酰基、4－氟代脯氨酰基、3－甲基脯氨酰基、4

－甲基脯氨酰基、5－甲基脯氨酰基、氮杂环丁烷－

2－羰基、3，3－二甲基脯氨酰基、4，4－二氟代脯氨

噻唑烷基－4－羰基、1－氨基戊基－1－羰基、缬氨酰基、2－叔丁基甘氨酰基、异亮氨酰基、亮氨酰基、3－环己基丙氨酰基、苯丙氨酰基、N－甲基苯丙氨酰基、四氢异喹啉基－2－组氨酰基、1－氨基吲哚基－1－羰基、3－吡啶基丙氨酰基、2－环己基甘氨酰基、正亮氨酰基、正缬氨酰基、新戊基甘氨酰基、色氨酰基、甘氨酰基、2，2－二甲基甘氨酰基、丙氨酰基、β－丙氨酰基和3－萘基丙氨酰基残基所组成的组中；X 为氢、烷基、环烷基、－CH₂－环己基或芳烷基；s，t和u独立地为0或1；并且K 为羟基、烷氧基、苯氧基、苄氧基或者取代的或未

26．权利要求25的组合物，其中所述的化合物具有如权利要求14－24之任一所限定的通式。

27．权利要求25或26的组合物在治疗或预防中的应用，例如在治疗哺乳动物(例如人)中的类风湿性关节炎中的应用。