CN1251527A - 使用延迟和/或持续释放的维生素d制剂治疗前列腺疾病的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及治疗前列腺疾病的方法,所述疾病例 如是前列腺癌和增生,所述方法是给药持续释放剂型或延迟持 续释放剂型的1α-羟基前维生素D或活化维生素D或它们的 组合。持续释放剂型和延迟持续释放剂型都可增加活性维生素 D的血浓,但无显著的与其它口服给药维生素D有关的高钙血 症的危险,并对患病的前列腺组织产生有益的作用。
Description
交叉参考相关申请
本申请是于1995年6月7日申请之第08/485,354号专利申请的部分继续申请,后者是1994年2月22日申请的第08/196,116号专利申请的分案申请,现为第5,529,991号专利。上述专利是于1994年1月6日申请的PCT/US93/059612的371(a),而所述PCT申请是于1992年6月22日申请的第07/901,886号专利申请的部分继续申请,现已放弃。所有上述文献在此并入作为参考。有关联邦资助之研究或开发的声明
不适用发明背景
本发明涉及治疗过度增殖性前列腺疾病的方法,具体而言是涉及传送活性维生素D化合物的延迟和/或持续释放口服药物的应用,更具体而言是涉及延迟和/或持续释放活化维生素D或口服1α-羟基前维生素D,以抑制这些疾病中过度增殖细胞的活性并促进细胞的分化。
前列腺仅存在于雄性哺乳动物中,而且会产生某些增殖性疾病。前列腺之基底和基质细胞的增殖作用导致良性的前列腺增生,这是一种常见的前列腺疾病。另一种常见的前列腺疾病是前列腺癌,特别是前列腺的腺癌。前列腺增生和前列腺癌在老年男性中都有高的发病率。在55岁以上的男性中,每4人中约有1人患有某些形式的前列腺疾病。
在美国男性中,前列腺癌目前是在肺癌之后的第二癌症致死原因。前列腺癌的死亡率随年龄呈对数增长,而美国黑人的死亡率比白人的死亡率高二倍。在国际范围中,美国黑人和北欧人的死亡率是最高的,而在日本是最低的。据预测,在2000年之前,前列腺疾病的年发病率将增加90%,而年死亡率则增加37%。虽然前列腺癌在老年人中是相对无痛苦的肿瘤,但该疾病患者的寿命总地降低约10年。前列腺的腺癌是最常见的致命性病理前列腺癌,而且最经常涉及前列腺之周围区域中上皮细胞的恶性转化。
前列腺癌治疗的改善现已集中在早期检测上。近年来,检测某些前列腺分泌之蛋白或肽的筛选实验已增加了诊断无症状患者中患有该疾病的能力,所述前列腺分泌的蛋白或肽例如是标记物(如前列腺特异性抗原(PSA)、前列腺酸磷酸酯酶(PAP)、前列腺抑制素(PIP))。
在低于65岁的男性患者中治疗前列腺癌的方法主要是对该组织进行外科手术如前列腺切除术和/或放射性疗法,但是,这些攻击性方法对总存活率的影响仍有争论。对65岁以上患者进行治疗的方法长久以来是采用保守疗法,并基于消除或控制睾酮的产生。该结果通常是通过外科手术切除睾丸、给药垂体促性腺激素抑制剂如雌激素或黄体化激素释放激素(LHRH)类似物或者组合使用这些治疗方法来实现的。雌激素如己烯雌酚是从垂体腺中释放黄体化激素(LH)的强效抑制剂,该黄体化激素是调节睾酮产生的促性腺激素,因而,给药雌激素能够使睾酮血浆浓度下降至睾丸切除的水平。给药3mg/天剂量的己烯雌酚,通常能够实现最大的睾酮血浆浓度抑制作用。其他雌激素如经结合的雌激素在降低睾酮血浆浓度上与己烯雌酚几乎是同样有效的。但是,己烯雌酚具有较差的心血管分布特性,而且心血管疾病的死亡在使用大剂量己烯雌酚治疗的患者中并不是不常见的。因此,虽然最大至3mg/天剂量的己烯雌酚通常是安全的,但该治疗方法并不适合于已有心血管疾病的男性患者。
前列腺癌经常转移至骨盆和腰椎,导致骨丢失以及相关的疼痛。激素调节通常对转移前列腺癌产生明显的缓解作用,改善骨疼痛以及其他与疾病有关的症状。因此,雄激素消除或控制在晚期转移前列腺癌的治疗中也是一种主要的辅助疗法。
尽管激素治疗会首先使症状缓解,但大多数患有局部不可切除或转移性疾病的患者的病情还会继续发展,而且对进一步的激素疗法不产生反应。在该大部分的患者中,其他形式的治疗也是无效的。放射疗法通常能够缓解骨疼痛的症状,但不能治愈。疾病还会随时间而发展,并产生致命的结果。
如以上所述,前列腺增生是另一种常见的前列腺增殖性疾病。该疾病在45岁以上的男性中发生,而且随年龄增加。前列腺增生在尿道周围区域开始,并进而开始局部增殖和发展压迫剩余的正常腺体。增生可压迫和阻碍尿道。治疗方法包括手术、以及给药垂体促性腺激素抑制剂和/或5α-还原酶抑制剂。
在生理和生化学的另一个领域中,在过去二十年中对维生素D进行的广泛研究已确定除其在骨和矿物代谢中的传统作用外的重要生理作用。在不参与钙体内平衡的不同器官的细胞中发现了1α,25-二羟基维生素D3的特异性核受体。例如,Miller等人(52 Cancer Res.(1992)515-520)已证实了在人前列腺癌细胞系--LNCaP中的1α,25-二羟基维生素D3的生理活性的、特异性的受体。
已有报道称,某些维生素D化合物和类似物是恶性细胞增殖作用的强效抑制剂和细胞分化作用的诱导剂/刺激剂。已表明1α,25-二羟基维生素D3可调节许多恶性细胞的生长并促进它们的分化。例如,颁与Suda等人的第4,391,802号美国专利公开了1α-羟基维生素D化合物,特别是1α,25-二羟基维生素D3和1α-羟基维生素D3,由于诱导恶性细胞(具体为白血病细胞)分化为非恶性的巨噬细胞(单核细胞)而具有强效的抗白血病活性,而且可用于治疗白血病。已有人报道了1α,25-二羟基维生素D3和其它维生素D3类似物对前列腺癌细胞系的抗增殖作用和分化作用。近来,有人报道了维生素D受体基因多型性和前列腺癌危险之间的关联,提示维生素D受体可能在研究前列腺癌并有可能对其进行治疗中具有作用。
这些以前的研究绝大多数集中于维生素D3化合物。即使此等化合物的确能够有效地促进分化培养基中的恶性细胞,但是由于它们作为影响钙代谢的药剂的高效用,其在分化治疗中作为抗癌剂的实际应用受到了严重的限制。在体内有效作为抗白血病剂所需要的剂量时,由于其固有的钙血症活性,这些相同的化合物可明显诱导血钙浓度的增高并至危险的水平。也就是说,高血钙症的危险阻碍或者严重地限制了临床使用1α,25-二羟基维生素D3和其它维生素D3类似物作为抗癌剂。这表明仍需要有更大的特异性活性和选择性的维生素D药物,即、具有抗增殖作用和分化作用但高钙血症活性低的维生素D化合物和/或制剂。具体而言,所需要的维生素D药物能够口服给药,以达到抗增殖作用和分化作用所必须的活性维生素D血浓,但没有高钙血症的危险。此等维生素D药物的需要在治疗前列腺增生和肿瘤性前列腺疾病中是最为迫切的。
发明简述
本发明提供治疗前列腺疾病的方法,所述前列腺疾病例如是那些以过度增殖细胞生长和/或异常细胞分化为特征者,如前列腺癌和前列腺增生。所述方法包括:向患有所述疾病的患者给药延迟和/或持续释放的维生素D制剂,抑制异常的细胞生长并促进细胞分化。所述延迟和/或持续释放的维生素D制剂包括在延迟和/或持续释放剂型中的1α-羟基前维生素D化合物和/或活性维生素D化合物。
本发明的前述和其他优点是通过其一个方面实现的,在该方面中提供抑制人前列腺癌或增生细胞之过度增殖活性的方法,其包括用有效量的维生素D制剂治疗所述细胞,所述维生素D制剂为延迟和/或持续释放的维生素D剂型。治疗步骤包括:抑制此等前列腺细胞的增殖作用,诱导并增强该前列腺细胞的分化,而优选的给药途径为口服给药。持续释放维生素D制剂包括在持续释放基质中的1α-羟基前维生素D和/或活性维生素D。该延迟持续释放制剂进一步包括活性成分的肠溶包衣。
用于本发明之持续释放或延迟持续释放制剂中的优选1α-羟基前维生素D化合物是1α,25-二羟基前维生素D3、1α,24-二羟基前维生素D3、1α-羟基前维生素D3、1α,25-二羟基前维生素D2、1α,24-二羟基前维生素D2、1α-羟基前维生素D2、1α,25-二羟基前维生素D4、1α,24-二羟基前维生素D4、以及1α-羟基前维生素D4。活性维生素D化合物中优选的是1α,25-二羟基维生素D3、1α,24-二羟基维生素D3、1α-羟基维生素D3、1α,25-二羟基维生素D2、1α,24-二羟基维生素D2、1α-羟基维生素D2、1α,25-二羟基维生素D4、1α,24-二羟基维生素D4、以及1α-羟基维生素D4。
在单元剂量剂型中,1-羟基前维生素D化合物的有效或治疗量为0.01μg/kg/天-2.0μg/kg/天,类似地,延迟和/或持续释放剂型中的活性维生素D的量为0.01μg/kg/天-2.0μg/kg/天。
本发明进一步提供治疗人前列腺癌的方法,其包括向患有前列腺癌的男性患者给药有效量的维生素D化合物以降低或稳定癌症的细胞异常增殖活性,该化合物是延迟和/或持续释放剂型的1α-羟基前维生素D或活性维生素D,而且其高钙血症的危险大大低于给药单独或者在已知剂型中的1α,25-二羟基维生素D3时的危险。因此,除缓解前列腺病症外,通过提供延迟和/或持续释放维生素D口服药物,本发明的制剂还克服了目前已知口服维生素D制剂的固有缺陷。
在一个实施方案中,所述口服药物是持续释放(SR)维生素D,其包括在持续释放基质中的1α-羟基前维生素D化合物或活性维生素D化合物(以后分别称为“SR前D”和“SR活性D”)。1α-羟基前维生素D优选为以下式(I)或(II)所代表者。式(I)和(II)化合物包括1α-羟基前维生素D、1α,24-二羟基前维生素D和1α,25-二羟基前维生素D。
根据本发明之药物的SR前D制剂,即、1α-羟基前维生素D作为活性成分,1α-羟基前维生素D作为活性维生素D的前体药物,抑制前列腺疾病中的异常细胞增殖并诱导或增强细胞分化。给药1α-羟基前维生素D可实现活性1α-羟基维生素D或其代谢物的血浓持续增加,而且与口服1α,25-二羟基维生素D3相比,高钙血症显著降低。
在SR前D中,1α-羟基前维生素D的形式为在室温下仍保持较为稳定,而且是无溶剂的。然后将此1α-羟基前维生素D以口服剂量剂型给药于动物或人。由于1α-羟基前维生素D是从口服剂量剂型中释放的,所以它能够被肠道吸收。1α-羟基前维生素D是无活性的,即、不能结合在维生素D受体蛋白上,而且不能刺激肠道钙吸收。在1α-羟基前维生素D被动物或人的体内温度加热时,它能够热转化为相应的活化1α-羟基维生素D。热转化为活性形式需要足够长的时间,使得该转化作用中的大多数发生在1-羟基前维生素D已被动物或人的肠道吸收后的时间中。因此,与口服给药相应的活化维生素D本身相比,SR前D产生的相应活化维生素D的血浓可持续更长的时间,并可明显更低地刺激肠道的钙吸收。
在本发明的SR活性D制剂中,活化维生素D掺入在适合于口服给药的持续释放基质中。也就是说,活化维生素D配制成结合在基质中的形式,该基质在暴露于肠道中时能够持续释放活性物质。
在第二个实施方案中,本发明的口服组合物是延迟持续释放(DSR)维生素D,即、带有肠溶包衣的持续释放维生素D。包含1α-羟基前维生素D或活化维生素D的基质被肠溶包衣适当地包衣,所述包衣可抵抗胃液中的崩解作用。然后将维生素D之肠溶包衣的持续释放制剂,即、延迟持续释放维生素D(以下分别称为“DRS前D”和“DSR活化或活性D”),给药于动物或人。在本发明的DSR前D或DSR活化D通过小肠的近端部分时,肠溶包衣溶解。包含1α-羟基前维生素D或活性维生素D的基质暴露于肠液中,然后持续地逐渐释放1α-羟基前维生素D或活化维生素D,它们由此被肠道吸收。因为由羟基化的前维生素产生的1α-羟基维生素的活化维生素D大部分在小肠的近端部分以后被吸收,降低了对肠道钙吸收的刺激。这也降低了高钙血症和高钙尿症的危险,由此增加了治疗窗。逐步释放也能够使活化维生素D化合物在血清中的浓度持续更长的时间,并因此对患病的前列腺组织产生有益的作用。
本发明的口服DSR组合物也可适当地包括活化前维生素D和活化维生素D的组合(以下称为“DSR活化前D和D”)。本发明的该实施方案包括一种或多种以下将定义的式(I)、(II)、(III)和/或(IV)化合物,它们包含在经肠溶包衣的、适合于口服给药的持续释放制剂中。
因此,在治疗前列腺疾病如前列腺癌或增生时,可向患者口服给药有效量的SR维生素D,其为在持续释放基质中的1α-羟基前维生素D和/或活性维生素D,或有效量的DSR活化维生素D或DSR活化前D,或有效量的DSR活化前D和D,由此在动物或人中增加活化维生素D的血浓,抑制前列腺细胞增殖,并诱导或增强细胞分化。
在根据本发明治疗前列腺疾病时,可适当地以活性成分(即、第一抗癌剂)单独给药SR维生素D或DSR维生素D,或者以包含第二抗癌剂、雄激素消除剂、5α-还原酶抑制剂或它们之组合的混合物的形式给药。
另一方面,本发明提供药物组合物,其包括为SR维生素D或DSR维生素的第一抗癌剂和选自于以下组中的药剂:(i)第二抗癌剂、(ii)骨治疗剂、(iii)雄激素消除剂、和(iv)5α-还原酶抑制剂以及它们的组合,以及生理上可接受的载体。活性维生素D化合物的剂量范围是约0.01-2.0μg/kg/天;活性前维生素D的剂量也为约0.01-2.0g/kg/天。
在参考附图详细阅读优选实施方案的具体描述后,可了解本发明的其它优点和具体的适应症、组分的变化和物理特性。应完全可以理解的是,这些附图仅是用于说明和描述本发明,而不是对本发明范围的限制。附图简述
以下将参考附图来详细描述本发明的优选实施方案,其中类似的标号表示类似的部分。在附图中:
图1是将某些1α-羟基前维生素D转化为维生素形式的时间图;以及
图2是在给药DSR活化D后活性维生素D浓度的预测结果对时间的图。
发明详细描述
本发明提供有效治疗肿瘤性和增生性疾病的方法。具体而言,本发明涉及抑制、改善或缓解前列腺疾病之过度增殖性细胞活性的治疗方法,所述疾病例如是前列腺癌和前列腺增生。本发明提供治疗患有过度增殖性疾病之患者的新方法,所述疾病例如是前列腺癌或前列腺增生,该方法包括给药为1α-羟基前维生素D或DSR活性维生素D或活性前维生素D的药物。向患者给药所述药物时,不产生剂量限制性的高钙血症和高钙尿症,即、分别为非生理性升高且有害的血钙浓度和尿钙浓度。这些特性可通过本发明组合物的某些化学和物理性质来实现。
根据本发明,在向患有前列腺癌或前列腺增生的患者给药有效量的SR维生素D或DSR维生素D药物时,异常前列腺细胞的增殖活性被抑制或缓解,而细胞的分化作用则被诱导或促进,与按已知制剂给药相同量的活化维生素D相比,明显降低了高钙血症和高钙尿症。因此,本发明的药物具有更高的治疗指数。在治疗前列腺肿瘤或增生疾病的SR和DSR制剂中,活性成分的有效量对于1α-羟基前维生素D为约0.01-2.0μg/kg/天,而对于活性维生素D则为0.01-2.0μg/kg/天。
已知的是,在活化前,即、产生生理反应前,维生素D3必须在C-1和C-25位被羟基化。活化其它形式的维生素D,如维生素D2和维生素D4,也似乎需要类似的代谢过程。因此,在此所用术语“活化维生素D”或“活性维生素D”是指已至少在分子的A环的C-1位被羟基化并结合或转化/代谢为结合维生素D受体(VDR)的维生素D化合物或类似物。换言之,对于后者,1α-羟基维生素D被进一步羟基化为能够结合VDR的化合物。类似地,术语“活化前维生素D”是指已至少在A环的C-1位被羟基化并转化/代谢为结合VDR之化合物的前维生素D化合物。
同样,对于烷基或酰基而言,在此所用术语“低级”是指具有1-4个碳原子的直链或支链烃链。此等烃链的具体例子是:甲基、乙基、丙基、丁基、异丁基、叔丁基、乙烯基、丙烯基、丁烯基、异丁烯基、异丙烯基、甲酰基、乙酰基、丙酰基或丁酰基。术语“芳香酰基”是指未被取代的苯甲酰基或经取代的苯甲酰基,如硝基苯甲酰基或二硝基苯甲酰基。术语“治疗”是指缓解、改善、修复或防止前列腺疾病以及抑制细胞的异常或过度增殖作用,并促进、诱导和/或增强细胞的分化作用。
本发明之SR和DSR剂型的1α-羟基前维生素D化合物和活性维生素D化合物是那些特别是对前列腺疾病如前列腺癌和前列腺增生的细胞具有有效的抗增殖活性和细胞分化活性(即、反转恶性转化),但产生高钙血症和/或高钙尿症之副作用的能力低或者无此能力者。换言之,本发明的组合物或药物在与恶性或其它过度增殖细胞接触时可起到抗增殖剂和细胞分化剂的作用,但不明显改变钙的代谢。本发明制剂的延迟持续释放作用可使它们用于安全地抑制过度增殖作用并实现恶性细胞的分化,而且是此方面的优选药剂。因此,本发明的制剂克服了上述已知活性维生素D制剂的缺陷,并可作为用于控制和治疗恶性疾病如前列腺癌以及良性前列腺增生的优选药剂。
以下将描述在用于缓解某些前列腺疾病之治疗方法中的本发明组合物或药物的优选实施方案。
本发明药物的第一实施方案是包括基本上纯的1α-羟基前维生素D或活性维生素D的SR制剂,所述活性成分包含在持续释放基质中。现已发现,在口服给药基本上纯的1α-羟基前维生素D时,与按已知制剂口服给药相同量的活化维生素D相比,可形成活化维生素D之血浓的更大持续增加,而且明显降低了高钙血症和高钙尿症。因此,1α-羟基前维生素D可用于治疗前列腺疾病。在此所用术语“基本上纯的”是指至少85%纯的1α-羟基前维生素D。在此所用术语“持续”是指血浓可在大于规定时间的期间(通常大于4小时)保持相对恒定(即±10pg/ml或±10%的平均值)。
已知的是,维生素D3是在动物和人的皮肤中内源性地通过紫外线介导的光化学反应由7-脱氢胆固醇合成的,该反应在C-4和C-9之间断开7-脱氢胆固醇的B环,形成前维生素D3。三烯前维生素D3是不稳定的,而且随时间热转化为维生素D3。在正常体温下,在前维生素D3和维生素D3之间存在一个如下所示的平衡:随着维生素D3在体内进一步代谢,该平衡向维生素D3方向移动。对于1α-羟基前维生素D也存在类似的转化和平衡状态。
本发明的1α-羟基前维生素D优选具有以下通式(I):其中:Ra是具有至少7个碳原子的侧链,而且可为直链或支链的、饱和或不饱和的、经杂取代或未经杂取代的、环状的或非环状的,且通式(I)之1α-羟基前维生素D的热异构体是活性维生素D,并可增加维生素D缺乏鼠的血清钙,其是由维生素D领域的生化学家使用标准方法测定的。
在本发明之此实施方案中的1-羟基前维生素D优选为以下通式(II)者:其中:B和C分别是氢或在C-22和C-23之间形成双键的碳-碳键;R1和R2分别独立地是氢、羟基、氟、低级烷基、低级氟代烷基、O-低级烷基、低级烯基、低级氟代烯基、O-低级烯基、O-低级酰基、O-芳香酰基、低级环烷基、或与它们所连接的碳一起形成C3-C8环碳环;R3是氢、氟、低级烷基、低级烯基、低级氟代烷基、低级氟代烯基、O-低级烷基、O-低级烯基、O-低级酰基、O-芳香酰基或低级环烷基;X1是氢或羟基;而X2是氢、羟基、或与R1或R2构成双键。优选的式(II)的化合物,即、优选的1α-羟基前维生素D化合物是:
1α,25-二羟基前维生素D3[1α,25-(OH)2前D3];
1α,24,25-三羟基前维生素D3[1α,24,25-(OH)3前D3];
1α-羟基前维生素D3[1α-(OH)前D3];
1 ,24-二羟基前维生素D3[1α,24-(OH)2前D3];
1α,24-二羟基-25-氟-前维生素D3[1α,24-(OH)2-25-F前D3];
1α,25-二羟基前维生素D2[1α,25-(OH)2前D2];
1α,24,25-三羟基前维生素D2[1α,24,25-(OH)3前D2];
1α-羟基前维生素D2[1α-(OH)前D2];
1α,24-二羟基前维生素D2[1α,24-(OH)2前D2];
1α,24-二羟基-25-氟-前维生素D2[1α,24-(OH)2-25-F前D2];
1α,25-二羟基前维生素D4[1α,25-(OH)2前D4];
1α,24,25-三羟基前维生素D4[1α,24,25-(OH)3前D4];
1α-羟基前维生素D4[1α-(OH)前D4];
1α,24-二羟基前维生素D4[1α,24-(OH)2前D4];和
1α,24-二羟基-25-氟-前维生素D4[1α,24-(OH)2-25-F前D4]。
应理解的是,对于那些在侧链(如C-24)中具有手性中心的式(II)化合物,差向异构体(如R和S)和外消旋化合物也在本发明的范围中。
在优选实施方案中,式(I)或(II)的化合物以基本上纯、晶体、无溶剂的形式使用,因为此等1α-羟基前维生素D在室温下仍保持相当大的稳定性,仅有少量转化为1α-羟基维生素D的形式。式(I)或(II)的化合物,即、1α-羟基前维生素D,可根据Vandewalle等人的第4,539,153号美国专利中描述的方法容易地以晶体形式制造。
此实施方案的1α-羟基前维生素D化合物可根据药学中常规的方法来处理,以制造用于给药于患者如包括人的哺乳动物的药剂。例如,式(I)或(II)的化合物与常规赋形剂的制剂包括适合于口服给药的混合物。1α-羟基前维生素D的制剂可与任何非毒性的药学载体复合,所述载体例如是玉米淀粉、乳糖、或蔗糖,它们不损坏性地与活性成分反应。制剂可制成片剂、胶囊剂、粉末剂、含片和锭剂。无论使用何种配制方法,都应小心谨慎以避免与溶剂和热接触时间过长,因为此等条件会使部分1α-羟基前维生素D转化为1α-羟基维生素D的形式。因为优选避免热和溶解,片剂的制造方法优选为干制粒法,即、1α-羟基前维生素D是无溶剂的,而且在室温下是热稳定的。
以口服制剂将1α-羟基前维生素D给药于动物或人。在1α-羟基前维生素D从口服制剂中释放时,被肠道吸收。1α-羟基前维生素D不与肠细胞中的维生素D受体蛋白相互作用,因此不会刺激肠道的钙吸收。
还已知的是,活化维生素D与肠细胞的维生素D受体蛋白结合会诱导一种酶的释放,该酶可降解肠道中绝大部分未结合的活化维生素D。该降解作用降低了可被吸收入血清中的活化维生素D的量。因为1α-羟基前维生素D不与维生素D受体蛋白结合,所以不会产生所述的酶诱导作用。因此,在肠道中几乎不发生降解作用,与相应的活化维生素D相比,可有更大的量被吸收入血液中。
在1α-羟基前维生素D被动物或人的体内温度温热时,其热转化为相应的活化维生素D。该热转化为活化形式所需的反应时间是足够长的,使得大多数的转化作用是在1α-羟基前维生素D已被吸收之后发生的。因此,与活化维生素D本身的可比口服剂量相比,1α-羟基前维生素D口服制剂产生持续的、更大的相应活化维生素D血浓,而肠道钙吸收的刺激作用则明显降低。所以,对于治疗前列腺肿瘤和增生细胞来说,与活化维生素D本身的可比口服剂量相比,口服给药1α-羟基前维生素D可提供持续的、更大的活性维生素D血浓,而无明显的钙血症活性。
本发明药物之SR制剂中的活性维生素D优选是具有通式(III)的1α-羟基维生素D:其中:Ra是具有至少7个碳原子的侧链,而且可为直链或支链的、饱和或不饱和的、经杂取代或未经杂取代的、环状的或非环状的,或者任何与维生素D受体蛋白结合的维生素D化合物或类似物。
在本发明之此实施方案的1α-羟基维生素D化合物中,优选那些具有式(IV)者:其中:B和C分别是氢或在C-22和C-23之间形成双键的碳-碳键;R1和R2分别独立地是氢、羟基、氟、低级烷基、低级氟代烷基、O-低级烷基、低级烯基、低级氟代烯基、O-低级烯基、O-低级酰基、O-芳香酰基、低级环烷基、或与它们所连接的碳一起形成C3-C8环碳环;R3是氢、氟、低级烷基、低级烯基、低级氟代烷基、低级氟代烯基、O-低级烷基、O-低级烯基、O-低级酰基、O-芳香酰基或低级环烷基;X1是氢或羟基;而X2是氢、羟基、或与R1或R2构成双键。优选的式(IV)的化合物,即、优选的1α-羟基维生素D化合物是:
1α,25-二羟基维生素D3[1α,25-(OH)2D3];
1α,24,25-三羟基维生素D3[1α,24,25-(OH)3D3];
1α-羟基维生素D3[1α-(OH)D3];
1α-羟基-25-氟-维生素D3[1α-(OH)-25-FD3];
1α,24-二羟基维生素D3[1α,24-(OH)2D3];
1α,24-二羟基-25-氟维生素D3[1α,24-(OH)2-25-FD3];
1α,25-二羟基维生素D2[1α,25-(OH)2D2];
1α,24,25-三羟基维生素D2[1α,24,25-(OH)3D2];
1α-羟基维生素D2[1α-(OH)D2];
1α-羟基-25-氟-维生素D2[1α-(OH)-25-FD2];
1α,24-二羟基维生素D2[1α,24-(OH)2D2];
1α,24-二羟基-25-氟维生素D2[1α,24-(OH)2-25-FD2];
1α,25-二羟基维生素D4[1α,25-(OH)2D4];
1α,24,25-三羟基维生素D4[1α,24,25-(OH)3D4];
1α-羟基维生素D4[1α-(OH)D4];
1α-羟基-25-氟-维生素D4[1α-(OH)-25-FD4];
1α,24-二羟基维生素D4[1α,24-(OH)2D4];和
1α,24-二羟基-25-氟-维生素D4[1α,24-(OH)2-25-FD4]。
应理解的是,对于那些在侧链中具有手性中心的活性维生素D化合物,如1α,24-二羟基维生素D2,差向异构体(如R和S)和外消旋化合物也在本发明的范围中。
此实施方案的式(III)和(IV)化合物可根据药学中常规的方法来处理,以制造用于给药于患者如包括人的哺乳动物的持续释放药剂(以下将更具体描述)。例如,式(III)和(IV)的化合物与常规赋形剂的制剂包括适合于口服给药的混合物。1α-羟基维生素D的制剂可与任何非毒性的药学载体复合,所述载体例如是玉米淀粉、乳糖、或蔗糖,它们不损坏性地与活性成分反应。SR制剂可制成片剂或胶囊剂。
此实施方案中特别优选的制剂是结合1α,25-二羟基维生素D3及药学可接受的赋形剂的基质,而且其可在4-8小时的时间内缓慢且相对稳定地释放1,25-二羟基维生素D3。
可从已知用于在约4小时或更长时间内控制活性成分释放的持续释放给药系统中选择用于持续(即、控制)释放活性成分的装置,其包括蜡基质系统、以及Eudragit RS/RL系统(Rohm Pharma GmbH,Weiterstadt,德国)。
蜡基质系统将活性成分分散在蜡粘结剂中,该粘结剂在体液中缓慢溶解,以逐渐释放活性成分。
优选的控释口服给药系统是Eudragit RL/RS系统,其中,活性成分——活化维生素D与持续释放基质混合,然后喷雾成粒径为25/30目的颗粒。用薄聚合物漆将颗粒均匀包衣,所述聚合物漆是非水溶性的,但可缓慢渗透水。经包衣的颗粒与任选的添加剂如抗氧剂、稳定剂、粘合剂、润滑剂、加工助剂等混合。可将混合物压制成片剂,该片剂在使用前是硬且干燥的,或者可将该混合物放入胶囊中。在吞服片剂或胶囊,而且与肠液接触后,所述漆开始溶涨,并缓慢使肠液透过。随着肠液缓慢透过漆包衣,活性成分也开始缓慢释放。在片剂由肠道中通过时,约4-8小时,活性成分则被缓慢并完全地释放。因此,吞服的片剂实现了活化维生素D以及任何其它活性成分的持续释放。
Eudragit系统包括高渗透性的漆(RL)和低渗透性的漆(RS)。包衣的渗透性以及药物释放所需要的时间可通过改变RS与RL包衣材料的比例来逐步改变。
对于Eudragit RL/RS系统的进一步详情,可参考Rohm Tech,Inc.(195 Canal Street,Maiden,Massachusetts,02146)的技术文献。也可参考:K.Lehmann,D.Dreher“Coating of tablets and small particles withacrylic resins by fluid bed technology”,Int.J.Pharm.Tech. & Prod.Mfr.2(r),31-43(1981)。
在本发明之药物或组合物的第二实施方案中,一种或多种活化维生素D化合物或者一种或多种基本上纯的1α-羟基前维生素D或者它们的组合被包容在肠溶包衣的持续释放制剂中。换言之,经肠溶包衣的持续释放制剂是式(I)和(II)、或者(III)和(IV)或它们组合的延迟持续(DSR)制剂。
令人惊奇地发现,本发明的DSR活化D制剂明显地增加活化维生素D化合物的治疗窗。也就是说,对于活化维生素D,与按照活化维生素D的已知口服制剂口服给药相同量的这些化合物相比,在口服给药DSR活化维生素D制剂时,高钙血症和高钙尿症的危险被显著地降低,而治疗效果明显增加。另外,与活化维生素D化合物的已知口服制剂相比,DSR活化D制剂可实现更高的活化维生素D持续血浓。
为制备本发明此实施方案的DSR制剂,如上所述,将经包衣的式(I)、(II)、(III)或(IV)化合物颗粒成型为片剂或放入胶囊中,然后用肠溶包衣材料包衣所述片剂和胶囊,所述肠溶包衣材料在pH为6.0-7.0时溶解,由此形成DSR制剂。此等pH依赖性的肠溶包衣材料是在肠液中溶解但在胃液中不溶解的Eudragit L/S。也可使用其它的肠溶包衣材料,如邻苯二甲酸乙酸纤维素(CAP),该材料可耐受胃液的溶解作用,但在肠酯酶的水解作用下容易崩解。
无需对肠溶包衣材料进行特殊的选择,只要能够在4-8小时的时间内实现持续或控制释放而且将释放延迟至DSR制剂到达肠道即可。虽然对于本发明不是必须的,但优选的是,释放延迟至DSR制剂超过小肠的近端部分。
本领域技术人员还可认识到,本发明的制剂还可进行包胶,制成其它定时释放的给药系统,如脂质体给药系统、具有缓慢释放性质的多糖、salistic或其他聚合物植入剂或微球。在此等定时释放给药系统中,活性成分可合适地用不同的可降解包衣进行保护,例如通过微包胶、多层包衣等,而且此等装置可实现连续给药其中所包含的组分。
虽然以上描述了优选实施方案,但应认识到,对用于本发明中的活性维生素D化合物的种类的限制仅在于,所述维生素D化合物本身或其体内代谢物与维生素D受体蛋白结合。对于1α-羟基前维生素D的限制仅在于,其热转化为活性维生素D化合物,由此其或其体内代谢物与VDR结合。
1α-羟基前维生素D和活性维生素D的化合物,式(I)、(II)、(III)和(IV)的优选者,可在上述实施方案的药物组合物中用作活性化合物。此等组合物可适当地包括生理可接受的赋形剂或载体。这些药物组合物构成了本发明的另一个方面。制剂还可包括助剂,如防腐剂或稳定助剂。
如以上所述,本发明的药理活性化合物可根据药学常规方法进行处理,以制成用于给药于患者如包括人的哺乳动物的药剂。例如,式(I)或(II)的化合物可以与常规赋形剂的混合物形式使用,所述赋形剂例如是适用于肠道(如口服)或非胃肠道给药而且不损坏性地与活性化合物反应的药物学上可接受的载体物质。
用于式(III)和(IV)化合物之合适的药物学上可接受的载体包括但不限于:水、盐溶液、醇、阿拉伯胶、植物油(如玉米油、棉籽油、花生油、橄榄油、椰子油)、鱼肝油、油酯如Polysorbate 80、聚乙二醇、明胶、碳水化合物(如乳糖、直链淀粉或淀粉)、硬脂酸镁、滑石、硅酸、粘性石蜡、脂肪酸单甘油酯和二甘油酯、季戊四醇脂肪酸酯、羟甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、等等。另一方面,式(I)和(II)的化合物可以基本上无溶剂的形式进行配制。
对于口服给药,特别合适的是以上所述的片剂、糖衣片、锭剂、粉末、或胶囊。如果需要甜味载体,可使用甜味剂。通常情况下,在治疗前列腺过度增殖性疾病时,本发明组合物可根据本发明的实施方案配制在制剂中,该制剂包括在合适基质中和/或经肠溶包衣的约0.1-2.0μg/kg/天的1α-羟基前维生素D和约0.1-2.0μg/kg/天的活性维生素D。
还可进一步理解到,在具体情况下活性化合物的实际优选用量可根据所用具体化合物的功效、配制的具体组分、给药形式以及所治疗的具体部位和生物而变化。例如,对于具体患者的具体剂量取决于患者年龄、性别、体重、健康状况、饮食、给药的时间和方式、排泄速率、复合用药、以及所治疗疾病的严重性。用于某一宿主的剂量可根据常规方法来确定,例如通过合适的常规药理学方法比较所用化合物与已知药剂的不同活性。
根据本发明的组合物还可包括其它治疗用物质或者包括多种在此及权利要求书中所述的化合物的混合物。根据本发明的上述实施方案有利的是,式(I)、(II)、(III)和(IV)的化合物或其混合物可与其它治疗剂一起口服给药,剂量为0.1-2.0μg/天的1α-羟基前维生素D和约0.1-2.0μg/天的活性维生素D。
与已知的雄激素消除或控制剂或睾酮浓度降低剂如雌激素(如己烯雌酚)、LHRH类似物以及5α-还原酶抑制剂如非那司提(finasteride)、抗雌激素物质(如TamoxifenTM)和抗雄激素物质(如氟他胺(flutamide))一起给药有效剂量的SR或DSR形式的本发明抗过度增殖化合物,也包括在本发明的范围内。(例如见:第5,372,996号美国专利,其容纳在此并入作为参考)。通过这些组合,可期望得到协同生物作用,并可产生更强的治疗作用。同时,与单独或大剂量地使用这些化合物相比,本发明的治疗方法可显著降低用这些药物进行治疗时的副作用,如雌激素的有害心血管作用。这些共同给药的雄激素控制剂或睾酮浓度降低剂的可能剂量范围是0.002-0.20μg/kg/天。
共同给药有效剂量的第一抗癌剂和第二抗癌剂也包括在本发明的范围中,所述第一抗癌剂是本发明之DSR或SR制剂中的1α-羟基前维生素D或活性维生素D,而第二抗癌剂例如是细胞毒性剂,这对于激素治疗后复发的转移性前列腺癌尤为如此。所述第二抗癌剂可合适地包括:雌莫司汀(estramustine)磷酸盐、松龙苯芥、顺铂、5-氟尿嘧啶、苯丙氨酸氮芥、羟基脲、丝裂霉素、去甲氧柔红霉素、氨甲蝶呤、阿霉素和柔红霉素。复合使用式(III)或(IV)的活性维生素D或者式(I)或(II)的1α-羟基前维生素D和各种抗癌剂,可期望对癌细胞产生显著增强的细胞毒性作用,并由此增加治疗效果。具体而言,与单独使用各抗癌剂相比,低浓度地使用上述组合的抗癌药物即可明显增加生长抑制作用,而且与单独或大剂量地使用抗癌剂相比,可显著降低与这些抗癌药物有关的副作用。这些共同给药的第二抗癌剂的可能剂量范围是0.1-1μg/kg/天。
共同给药有效剂量的式(I)、(II)、(III)或(IV)化合物和其它已知可缓解骨疾病的激素或药物如雌激素,也包括在本发明的范围内。以上应注意的是,前列腺癌经常转移至骨上,导致骨丢失和相关的疼痛。此等骨治疗剂可包括结合雌激素或其等价物、降钙素、二膦酸酯、钙添加剂、钴胺素、百日咳毒素和硼。这些共同给药的治疗剂的可能剂量范围见表1。表1:可与式(I)之1α-羟基维生素D共同给药的各种药剂的可能口服剂量范围
药剂 | 剂量范围 | ||
宽的 | 优选的 | 最优选的 | |
结合雌激素或等价物(mg/天) | 0.3-5.0 | 0.4-2.4 | 0.6-1.2 |
氟化钠(mg/天) | 5-150 | 30-75 | 40-60 |
降钙素(IU/天) | 5-800 | 25-500 | 50-200 |
二膦酸酯(mg/天) | 0.50-20 | 1-15 | 5-10 |
钙添加剂(mg/天) | 250-2500 | 500-1500 | 750-1000 |
钴胺素(μg/天) | 5-200 | 20-100 | 30-50 |
百日咳毒素(mg/天) | 0.1-2000 | 10-1500 | 100-1000 |
硼(mg/天) | 0.10-3000 | 1-250 | 2-100 |
如TamoxifenTM的抗雌激素物质也是已知的骨治疗剂,其可与本发明的化合物和组合物复合使用。
以下将根据实施例进一步阐明本发明的实施方案,这些实施例不应被理解为是对本发明范围的限制,其仅是用于说明本发明。在以下实施例中,高压液相色谱(HPLC)是在Waters色谱仪上使用Zorbax SilODS柱来进行的。
1-羟基前维生素D转化为1-羟基维生素D所需要的时间实施例1:1-OH-D2、1,24-(OH)2前D2和1,25-(OH)2D3
进行一系列实验,针对三种1α-羟基前维生素D在体内从前维生素转化为维生素,所述三种1α-羟基前维生素D为:1α-羟基前维生素D2、1α,24-二羟基前维生素D2和1α-羟基前维生素D3。将各1α-羟基前维生素D溶解在乙醇中,恒温保存在37℃的水浴中,然后以2小时的间隔取样。对各样品进行分析性HPLC分离,以定量由前维生素D向维生素形式的热转化。对所收集的数据进行归一化,计算任何维生素形式在初始制剂中的浓度(小于等于10%)。结果见图1,该图是%前维生素对以小时为单位的时间所作的图。对每个前维生素进行线性回归。由此,测定热转化的半衰期,即、50%的前维生素热转化为维生素形式所需要的时间,结果如下:
1α-羟基前维生素D2 12.9小时
1α,24-二羟基前维生素D2 12.2小时
1α-羟基前维生素D3 17.7小时这些数据表明,在正常体温下,1α-羟基化前维生素D在体外50%转化为1α-羟基化维生素需要超过12小时。在体内时,预期为相似的转化速率。因此,与常规的想法相反,1α-羟基前维生素的转化速率适合于口服给药制剂。
1α-羟基前维生素D的生物利用度和药代动力学实验实施例2:1α,24-(OH)2前D2
进行以下实验,以估测1α,24-二羟基前维生素D2(“1α,24-(OH)2前D2”)的口服生物利用度。在该实验中,随机将保持正常饮食的正常小鼠分为治疗组和对照组。向小鼠口服给药单一剂量的1α,24-(OH)2前D2,该药物在经分馏的椰子油(FCO)(1.5μg,其约为7.5μg/kg)中。对照组仅给药载体。这两个组都在给药后6小时的时候采取血样,并分析维生素形式--1α,24-二羟基维生素D2的血清浓度。
结果见下表2。表2:口服给药单一剂量的1α,24-二羟基前维生素D2(1α,24-(OH)2前D2)后6小时的时候小鼠中1α,24-二羟基维生素D2(1α,24-(OH)2D2)的血清浓度
*值是平均值±SD
实验化合物 | 剂量(μg) | n | 血清1α,24-(OH)2D2(pg/ml)* |
载体 | 0.000 | 5 | 13.8±4.2 |
1α,24-(OH)2前D2 | 1.5 | 5 | 65.5±10.1 |
这些数据证实,口服给药的1α,24-(OH)2前D2是可生物利用的,其证据是增加了血清中1α,24-(OH)2D2的浓度。这些结果是令人惊奇的,而且也是出乎意料之外的。实施例3:1α,25-(OH)2前D3
用缺乏维生素D但具有正常钙含量(0.47%)的饲料喂养雄性刚断奶的小鼠。四周过后,将这些小鼠分为二个组,并口服给药在载体(如乳糖)中的1α,25-(OH)2前D3(0.25μg/kg)或者仅给药载体(对照)。给药后4小时的时候,将小鼠杀死,然后使用标准技术测定1α,25-(OH)2D3的血浓。
该实验表明,给药1α,25-(OH)2前D3的小鼠中1α,25-(OH)2D3的血浓明显高于正常动物的血浓。实施例4:1α,25-(OH)2前D3
用缺乏维生素D但包含正常钙(0.47%)和磷(0.3%)的饲料喂养雄性刚断奶的小鼠。用此饲料喂养4周后,将小鼠分为17个组,并口服给药在载体(如乳糖)中的1α,25-(OH)2D3或1α,25-(OH)2前D3或者只给药载体(对照)。给药载体后8小时的时候,将一组小鼠杀死。8个组口服给药单一剂量的1α,25-(OH)2前D3或1α,25-(OH)2D3,然后在给药后的第2、4、6、9、12、18、24和48时将它们杀死。收集血样,并分析1α,25-(OH)2D3的浓度。
结果表明,给药1α,25-(OH)2前D3会导致1α,25-(OH)2D3血清浓度的增加。该结果进一步证实,与给药1α,25-(OH)2D3后观察到的药代动力学相比,上述1α,25-(OH)2D3血清浓度的增加是逐渐的,并持续更长的时间。实施例5:1α,25-(OH)2前D3与1α,25-(OH)2D3的生物利用度比较
用缺乏维生素D但包含正常钙和磷的饲料喂养三周龄小鼠3-6周,直至观察到高血钙症。然后随机将小鼠分为治疗组,并口服给药单一剂量的1α,25-(OH)2前D3或1α,25-(OH)2D3,这些活性成分是在经分馏的椰子油(0.255μg,其约为1.5μg/kg)中。对照组仅给药载体。对于治疗组,在给药后的12小时时采取血样,并分析维生素形式的血清浓度。
数据结果见下表3。表3:给药单一剂量的1α,25-二羟基前维生素D3(1α,25-(OH)2前D3)后12小时的时候在Rachitic小鼠中1α,25-二羟基维生素D3(1α,25-(OH)2D3)的血清浓度
**p<0.01相对于1α,25-(OH)2D3
实验化合物 | 剂量(μg) | n | 1α,25-(OH)2D3血清浓度(pg/ml±SD) |
载体 | 0.000 | 8 | 14.7±5.1 |
1α,25-(OH)2前D3 | 0.255 | 6 | 615.4±298.1** |
1α,25-(OH)2D3 | 0.255 | 6 | 326.8±192.0 |
这些数据表明,与口服1α,25-(OH)2D3相比,口服1α,25-(OH)2前D3产生显著更高的1α,25-(OH)2D3血清浓度。这些数据还证实,口服给药1α,25-(OH)2前D3是可生物利用的,其证据是1α,25-(OH)2D3循环浓度增加。它们还表明,1α,25-(OH)2前D3比维生素的活化形式1α,25-(OH)2D3具有更大的生物利用度。
VDR结合分析实施例6:1α,25-(OH)2前D3
比较1α,25-(OH)2前D3和其活性维生素形式--1α,25-(OH)2D3的VDR结合亲和性。
在标准的竞争结合实验条件下,用维生素D受体蛋白和痕量的3H-1α,25-(OH)2D3培养1α,25-(OH)2前D3或1α,25-(OH)2D3。1α,25-(OH)2前D3和1α,25-(OH)2D3竞争剂的量分别在7.8-1000pg或1.0-25pg之间变化。
在结合培养的同时,在相同温度和时间长度培养一试管的1α,25-(OH)2前D3,估测已平衡为维生素形式的1α,25-(OH)2前D3的量。HPLC分析表明,在培养结束时,约2%的1α,25-(OH)2前D3已平衡至维生素形式。用实验过程中产生的维生素形式的量校正1α,25-(OH)2前D3形式的结合浓度。结合分析的结果见表4。表4:1α,25-二羟基前维生素D3与维生素D受体在内外的结合
1α,25-(OH)2前D3的量(pg/试管) | 总的可检测的结合(pg/试管) | 经校正的结合(pg/试管) |
7.8 | ND | ND |
15.6 | ND | ND |
31.3 | ND | ND |
62.5 | 1.88 | 0.6 |
125 | 3.02 | 0.5 |
250 | 6.32 | 1.3 |
500 | 12.0 | 2.0 |
1000 | 20.5 | 0.5 |
表4中的数据表明,1α,25-(OH)2前D3对VDR仅有非常低或者没有亲和性,即、对该受体的亲和性低于1α,25-(OH)2D3之亲和性的0.01。因此,在其具有生理活性之前,1α,25-(OH)2前D3必须平衡为1α,25-(OH)2D3的形式。实施例7:1α,24-(OH)2前D2
如实施例6所述比较1α,24-(OH)2前D2和其活性形式--1α,24-(OH)2D2的VDR结合亲和性。结果表明,与其活性形式--1α,24-(OH)2D2相比,1α,24-(OH)2前D2基本上没有受体亲和性。实施例8:1α,24-(OH)2前D4
如实施例6所述比较1α,24-(OH)2前D4和其活性形式--1α,24-(OH)2D4的VDR结合亲和性。结果表明,与其活性形式--1α,24-(OH)2D4相比,1α,24-(OH)2前D4基本上没有受体亲和性。
1-羟基前维生素D的急性高血钙症实验实施例9:1α,25-(OH)2前D3
用缺乏维生素D但包含正常钙(0.47%)和磷(0.3%)的饲料喂养刚断奶的雄性小鼠。用该饲料喂养约4-6周后,将小鼠分为5个组,并口服给药在载体(如乳糖)中的1α,25-二羟基维生素D3(0.06或0.12μg/kg/天)或1α,25-二羟基前维生素D3(0.06或0.12μg/kg/天)或者仅给药载体(对照),共3天。在最后给药后的24小时时,将所有的动物放血,并分析血样中的血清钙和血清磷。结果表明,与可比剂量的1α,25-二羟基前维生素D3相比,给药1α,25-二羟基维生素D3导致血清钙和血清磷大幅升高。
活性维生素D之延迟持续释放剂型
(DSR活性维生素D)的生物利用度和药代动力学实验实施例10:等份的Eudragit L100和S100组成的制剂及其实验
将合适量的活化维生素D溶解在乙醇中,然后与表5中所列的基质成分相混合,然后喷雾在850g 25/30目非常精细的珠上。干燥后,用表5中所列的肠溶包衣来包衣所述珠。
表5
组 分 | 成 分 | 量(g) |
基质 | Eudragit RS100 | 50 |
甲醇 | 50 | |
含有药物的乙醇 | ||
蒸馏水 | 5 | |
丙酮 | 至500 | |
肠溶包衣 | ATEC(柠檬酸乙酰基三乙基酯,增塑剂) | 54 |
甲醇 | 600 | |
蒸馏水 | 30 | |
Eudragit L100 | 153 | |
Eudragit S100 | 153 | |
滑石 | 40 | |
丙酮 | 至4000 |
在配制完成后,将所述珠(500mg/胶囊)填充在#0明胶胶囊中,用于向狗给药。
向狗(Beagles,雄性和雌性,分别为13kg和9kg)给药5个胶囊/天的上述制剂(DSR-008)。给药后24小时但在下一次给药之前的时候抽出用于基线值测量的血样,并测定血清钙。2天后终止给药,而血清钙浓度已明显高于正常值。
向雌狗给药5个胶囊/天的上述制剂(DSR-008),共7天。雌狗的正常血清钙范围是10.0-12.4mg/dl,其平均值为11.2mg/dl。在本实验中,血清钙的基线值为11.7mg/dl;随后几天的值分别为:12.1、12.3、12.7、13.1、13.5和15.1mg/dl。
这些结果表明,在DSR制剂中的活性维生素D的生理活性可持续较长的时间。实施例11:非等份的Eudragit L100和S90组成的制剂及其实验
将合适量的活化维生素D溶解在乙醇中,然后与表6中所列的基质成分相混合,然后喷雾在850g 25/30目非常精细的珠上。干燥后,用表6中所列的肠溶包衣来包衣所述珠。
表6
组 分 | 成 分 | 量(g) |
基质 | Eudragit RS100 | 10 |
甲醇 | 10 | |
含有药物的乙醇 | ||
蒸馏水 | 1 | |
丙酮 | 至100 | |
肠溶包衣 | ATEC(柠檬酸乙酰基三乙基酯,增塑剂) | 68 |
甲醇 | 750 | |
蒸馏水 | 35 | |
Eudragit L100 | 338 | |
Eudragit S90 | 49 | |
滑石 | 50 | |
丙酮 | 至5000 |
在配制完成后,将所述珠(500mg/胶囊)填充在#0明胶胶囊中,用于向狗给药。
向狗(与实施例10相同)给药5个胶囊/天的上述制剂(DSR-010)。给药后24小时但在下一次给药之前的时候抽出用于基线值测量的血样,并测定血清钙。2天后终止给药,而血清钙浓度已明显高于正常值。
向雌狗给药5个胶囊/天的上述制剂(DSR-010),共2天。雌狗的正常血清钙范围是10.0-12.4mg/dl,其平均值为11.2mg/dl。在本实验中,血清钙的基线值为10.9mg/dl;随后几天的值分别为:13.8和16.1mg/dl。
这些结果表明,在DSR制剂中的活性维生素D具有较高的生物利用度。实施例12:与硬脂酸基质组成的制剂及其实验
将合适量的活化维生素D溶解在乙醇中,然后与表7中所列的基质成分相混合,然后喷雾在850g 25/30目非常精细的珠上。干燥后,用表7中所列的肠溶包衣来包衣所述珠。
表7
组 分 | 成 分 | 量(g) |
基质 | 硬脂酸 | 10 |
含有药物的乙醇 | ||
丙酮 | 至90 | |
肠溶包衣 | ATEC(柠檬酸乙酰基三乙基酯,增塑剂) | 68 |
甲醇 | 750 | |
蒸馏水 | 35 | |
Eudragit L100 | 338 | |
Eudragit S90 | 49 | |
滑石 | 50 | |
丙酮 | 至5000 |
在配制完成后,将所述珠(500mg/胶囊)填充在#0明胶胶囊中,用于向狗给药。
向狗(与实施例10相同)给药5个胶囊/天的上述制剂(DSR-012)。给药后24小时但在下一次给药之前的时候抽出用于基线值测量的血样,并测定血清钙。2天后终止给药,而血清钙浓度已明显高于正常值。
向雌狗给药5个胶囊/天的上述制剂(DSR-012),共2天。雌狗的正常血清钙范围是10.6-12.0mg/dl,其平均值为11.3mg/dl。在本实验中,血清钙的基线值为11.4mg/dl;随后几天的值分别为:14.2和15.5mg/dl。
这些结果表明,在DSR制剂中的活性维生素D的生理活性具有较高的生物利用度。实施例13:DSR 1α,25-(OH)2D3
向狗给药如本发明所述配制成的1α,25-二羟基维生素D3胶囊(DSR)。另一只狗给药类似剂量的在经分馏的椰子油(FCO)中的1α,25-二羟基维生素D3。在给药后的第0、0.5、1、1.5、2、3、4、6、9、15、24、36和72小时抽血。分析血样中的活性维生素D浓度。与给药在分馏椰子油中的药物的动物相比,给药胶囊制剂的动物显示出活性维生素D血浓上升较慢,血液中活性维生素D的最大浓度较低,而且活性维生素D血浓持续升高的时间长。
图2描述了由本实施例得到的活性维生素D血浓。
这些实验证实,与给药在分馏椰子油中的1α,25-二羟基维生素D3后观察到的1,25-二羟基维生素D3药代动力学相比,给药本发明制剂的动物中的1α,25-二羟基维生素D3血清浓度更为缓慢地上升,而且持续更长的时间。实施例14:活性维生素D的延迟持续血清浓度
向患者给药2微克之本发明所述剂型的1α,25-(OH)2D3。在给药后的0、2、6、8和12小时收集血样,并分析1α,25-(OH)2D3的浓度。结果表明,在2、6和8小时时的1α,25-(OH)2D3浓度增加超过在0小时时的浓度,但低于导致高血钙症时所认为的浓度。这些结果表明1α,25-(OH)2D3是延迟持续释放的。实施例15:急性高钙血症实验
每天一次向患者给药2.0微克之按本发明配制的骨化三醇,共7天。在最后给药后收集过夜尿,并在最后给药后24小时时抽血,分析钙含量。未观察到高钙血症和高钙尿症,这也表明为低毒性的。
活性维生素D的前列腺细胞VDR结合实施例16:1α,24-(OH)2D2
用Skowronski等人方法(136 Endocrinology(1995)20-26,该文献的内容在此并入作为参考)证实维生素D化合物在前列腺细胞中与VDR的结合。将前列腺衍生的细胞系培养至接近融合,然后洗涤并刮集。离心洗涤细胞,然后将细胞沉淀物重新悬浮在经缓冲的盐溶液中,该溶液包含蛋白酶抑制剂。用超声破碎细胞,并同时在冰上冷却。在4℃、207000×g下离心经破碎的细胞35分钟,分析由此得到的上清液以检测结合情况。200μl可溶性提取物(1-2mg蛋白/ml上清液)用1nM的3H-1α,25-(OH)2D3培养,并在4℃下于16-20小时中增加1α,24-(OH)2D2的浓度(0.01-100nM)。用羟基磷灰石通过标准方法分离结合及游离的激素。从测定的总结合中减去在250倍过量的非放射性1α,25-(OH)2D3存在时得到的非特异性结合,由此计算特异性结合。结果表明,1α,24-(OH)2D2对前列腺VDR具有强的亲和性,这说明1α,24-(OH)2D2对前列腺细胞具有强的生理活性。实施例17:1α,24-(OH)2D4
使用活性维生素D类似物1α,24-二羟基维生素D4重复实施例16的方法,并测定特异性结合。结果表明,1α,24-(OH)2D4对前列腺VDR具有强的亲和性,这说明1α,24-(OH)2D2对前列腺细胞具有强的生理活性。实施例18:1α,25-(OH)2D4
使用活性维生素D类似物1α,25-二羟基维生素D4重复实施例16的方法,并测定特异性结合。结果表明,1α,25-(OH)2D4对前列腺VDR具有强的亲和性,这说明1α,25-(OH)2D2对前列腺细胞具有强的生理活性。
活性维生素D对前列腺细胞增殖的抑制作用实施例19:1α,24-(OH)2D2
使用Skowronski等人的方法(132 Endocrinology(1993)1952-1960,以及136 Endocrinology(1995)20-26,这两个文献的内容在此并入作为参考)证实对细胞增殖的抑制作用。将得自于人前列腺之腺癌的细胞系--LnCaP和PC-3接种在六孔组织培养板上,它们的密度为约50000个细胞/板。在连接细胞并稳定后,约为2-3天,用包含载体或浓度为10-11-10-17M的活性维生素D类似物--1α,24-(OH)2D2的培养基补充前述培养基。包含测试类似物或载体的培养基每3天更换一次。6-7天后,除去培养基,并冲洗细胞,用冷却的5%三氯乙酸沉淀,然后用冷乙醇洗涤。将细胞溶解在0.2 N氢氧化钠中,然后通过标准方法测定DNA的量。结果表明,根据本发明用1α,24-(OH)2D2培养的培养基与对照培养基相比具有显著更少的细胞。实施例20:1α,24-(OH)2D4
使用活性维生素D类似物1α,24-(OH)2D4重复实施例19的方法,并测定细胞数量。用1α,24-(OH)2D4培养的培养基与对照培养基相比具有显著更少的细胞。实施例21:1α,25-(OH)2D4
使用活性维生素D类似物1α,25-(OH)2D4重复实施例19的方法,并测定细胞数量。用1α,25-(OH)2D4培养的培养基与对照培养基相比具有显著更少的细胞。
活性维生素D对前列腺细胞分化的刺激作用实施例22:1α,24-(OH)2D2
使用Skowronski等人的方法(132 Endocrinology(1993)1952-1960,以及136 Endocrinology(1995)20-26,这两个文献的内容在此并入作为参考),将得自于人前列腺之转移腺癌的细胞系--LnCaP的细胞接种在六孔组织培养板上,其密度为约50000个细胞/板,而且已知该细胞可表达PSA。在连接细胞并稳定后,约为2-3天,用包含载体或浓度为10-11-10-17M的活性维生素D类似物--1α,24-(OH)2D2的培养基补充前述培养基。6-7天后,除去培养基,并在-20℃下储存,用于前列腺特异性抗原(PSA)的分析。
冲洗细胞,然后通过标准方法测定DNA的量。重新悬浮细胞,并测定细胞数量。用标准的已知方法测定PSA。以PSA量/细胞计,用1α,24-(OH)2D2培养的培养基与对照培养基相比具有显著更多的PSA。实施例23:1α,24-(OH)2D4
使用活性维生素D类似物1α,24-(OH)2D4重复实施例22的方法,并测定PSA。以PSA量/细胞计,用1α,24-(OH)2D4培养的培养基与对照培养基相比具有显著更多的PSA。实施例24:1α,25-(OH)2D4
使用活性维生素D类似物1α,25-(OH)2D4重复实施例22的方法,并测定PSA。以PSA量/细胞计,用1α,25-(OH)2D4培养的培养基与对照培养基相比具有显著更多的PSA。
临床研究实施例25:1α,24-(OH)2前D2
患有晚期非雄激素依赖性前列腺癌的患者参加1α,24-(OH)2前D2的开标研究。合格的患者至少为40岁,有前列腺之腺癌的组织证据,而且患有以前对激素治疗有反应的进行性疾病。在允许参加研究后,患者开始26周持续口服1α,24-(OH)2前D2的治疗过程,但中止使用以前的钙添加剂、维生素D添加剂、以及维生素D激素替代治疗。在治疗过程中,在规定的时间间隔处检测患者以下项目:(1)高钙血症、高磷血症、高钙尿症、高磷尿症和其它毒性;(2)转移疾病发展的证据;以及(3)对预定实验药物剂量的耐受性。
分两个阶段进行该研究。在第一阶段中,对一系列组的患者给药逐渐增高剂量的1α,24-(OH)2前D2,由此测定其每日口服的最大耐受剂量(MTD)。所有给给药都是在早饭之前进行。第一组患者用25μg的1α,24-(OH)2前D2进行治疗。随后的组用50、75和100μg/天的剂量治疗。在研究阶段不间断地连续给药,除非血清钙超过11.6mg/dl或者观察到3或4级的其它毒性,在这些情况下,暂时停止给药,直至没有所观察到的毒性作用,然后在浓度已下降10.0μg时重新开始。
该研究第一阶段的结果表明,1 ,24-(OH)2前D2的MTD为20.0μg/天以上,该水平高于1α,25-(OH)2D3的10-40倍。从参加患者身上定时收集的血样分析揭示,1α,24-(OH)2前D2的循环浓度与给药剂量成比例地增加,在最高剂量时升高至100pg/ml以上的最大浓度,而且1α,25-(OH)2D3的循环浓度被抑制,通常至检测不到的水平。血清和尿钙剂量依赖性地升高。对于用1α,24-(OH)2前D2之MTD治疗的患者,至少在6个月的时间中称与转移性疾病有关的骨疼痛显著减少。
在第二阶段中,用0.5-1.0倍于MTD的1α,24-(OH)2前D2治疗患者24个月。2年后,用于评估转移性疾病进展的CAT扫描、X-射线和骨扫描都表明在较低剂量时疾病稳定或者部分减轻,而且在高剂量时有部分或完全的减轻。实施例26:DSR 1α,25-(OH)2D2
用DSR剂型的1α,25-(OH)2D2(活性维生素D化合物)重复实施例25的研究。阶段一研究的结果表明,用DSR 1α,25-(OH)2D2之MTD治疗至少6个月的患者中与转移性疾病有关的骨疼痛显著降低。阶段二研究的结果表明,2年后,用于评估转移性疾病进展的CAT扫描、X-射线和骨扫描都表明在较低剂量时疾病稳定或者部分减轻,而且在高剂量时有部分或完全的减轻。
总之,本发明提供通过口服给药SR或DSR剂型的1α-羟基前维生素D或活化维生素D或它们的组合来治疗如前列腺癌和前列腺增生的前列腺疾病的方法。本发明的制剂显著降低了与已知活化维生素D制剂有关的高钙血症和高钙尿症。另外,与已知的活化维生素D口服制剂相比,本发明的制剂可产生更高的活化维生素浓度,而且持续的时间更长,这使得到达患病前列腺细胞时的活性维生素D的血浓更高。
虽然已具体地描述了本发明,但本领域技术人员应认识到,还可在本发明的范围内进行各种改进,其包括改变、添加和省略。因此,这些改进也应在本发明的范围之内,而且本发明的范围仅应局限在所附权利要求书的法律解释范围内。
Claims (24)
1、抑制人前列腺癌或增生的过度增殖细胞活性的方法,其包括:向患有所述疾病并具有胃或小肠的患者给药有效量的口服药物,所述药物包括维生素D化合物,所述维生素D化合物是包含在基质中的1α-羟基前维生素D或活性维生素D,所述基质具有可释放地结合并在持续的时间内控释所述活性维生素D的装置。
2、如权利要求1所述的方法,其中,所述口服药物进一步包括防止释放所述维生素D化合物的肠溶包衣,该肠溶包衣在胃中耐受溶解作用,但在肠道的中间和远端部分中易于溶解,由此使得在所述药物通过肠道的中间部分后才释放所述维生素D化合物。
3、如权利要求2所述的方法,其中,所述小肠具有近端、中间和远端部分,而且所述肠溶包衣进一步耐受小肠近端部分的溶解作用,但在肠道的中间和远端部分中易于溶解,由此使得在所述药物通过肠道的中间部分后才释放所述维生素D化合物。
4、如权利要求2所述的方法,其中,所述肠溶包衣耐受pH低于6.0的环境的溶解作用。
5、如权利要求3所述的方法,其中,所述肠溶包衣耐受pH低于6.0的环境的溶解作用。
6、如权利要求1所述的方法,其中,所述1α-羟基前维生素D是1α,25-二羟基前维生素D3、1α,24-二羟基前维生素D3、1α-羟基前维生素D3、1α,25-二羟基前维生素D2、1α,24-二羟基前维生素D2、1α-羟基前维生素D2、1α,24-二羟基前维生素D4、1α,25-二羟基前维生素D4或1α-羟基前维生素D4。
7、如权利要求1所述的方法,其中,所述活性维生素D是1α,25-二羟基维生素D3、1α,24-二羟基维生素D3、1α-羟基维生素D3、1α,25-二羟基维生素D2、1α,24-二羟基维生素D2、1α-羟基维生素D2、1α,24-二羟基维生素D4、1α,25-二羟基维生素D4或1α-羟基维生素D4。
8、治疗以异常分化或细胞增殖为特征的前列腺疾病的方法,其包括:向需要此等治疗的男人给药有效抑制增殖作用的量的口服药物,所述药物是包含在基质中的1α-羟基前维生素D化合物或维生素D化合物,所述维生素D化合物是活性维生素D或1α-羟基前维生素D,所述基质具有可释放地结合并在持续的时间内控释所述维生素D的装置。
9、如权利要求8所述的方法,其中,所述1α-羟基前维生素D之有效抑制增殖作用的量是0.01-2.0μg/kg/天。
10、如权利要求8所述的方法,其中,所述活性维生素D之有效抑制增殖作用的量是0.01-2.0μg/kg/天。
11、治疗人前列腺癌的方法,其包括:向患有前列腺癌的男性患者给药有效量的组合物,所述组合物包括第一抗癌剂,该抗癌剂为1α-羟基前维生素D、持续释放剂型的活性维生素D化合物或者延迟持续释放剂型的活性维生素D化合物。
12、如权利要求11所述的方法,其中,所述组合物的高钙血症危险大大低于1α,25-二羟基维生素D3。
13、如权利要求11所述的方法,其中,所述组合物是以混合物的形式给药,该混合物包括第二抗癌剂,其选自于:雌莫司汀磷酸盐、松龙苯芥、顺铂、5-氟尿嘧啶、苯丙氨酸氮芥、羟基脲、丝裂霉素、去甲氧柔红霉素、氨甲蝶呤、阿霉素和柔红霉素
14、如权利要求13所述的方法,其中,所述第二抗癌剂在所述混合物中的量为0.002-0.02μg/kg/天。
15、药物组合物,其包括:
(a)第一抗癌剂,其为维生素D化合物,选自于:1α-羟基前维生素D、SR活性维生素D、DSR活性维生素D、以及它们的组合;以及
(b)选自于以下组中的药剂:(i)第二抗癌剂、(ii)骨治疗剂、(iii)雄激素控制剂、(iv)5α-还原酶抑制剂以及它们的组合。
16、如权利要求15所述的药物组合物,其中,所述活性维生素D化合物选自于以下组:1α,25-二羟基维生素D3、1α,24-二羟基维生素D3、1α-羟基维生素D3、1α,25-二羟基维生素D2、1α,24-二羟基维生素D2、1α-羟基维生素D2、1α,24-二羟基维生素D4、1α,25-二羟基维生素D4和1α-羟基维生素D4。
17、如权利要求15所述的药物组合物,其中,所述1α-羟基前维生素D化合物选自于以下组:1α,25-二羟基前维生素D3、1α,24-二羟基前维生素D3、1α-羟基前维生素D3、1α,25-二羟基前维生素D2、1α,24-二羟基前维生素D2、1α-羟基前维生素D2、1α,24-二羟基前维生素D4、1α,25-二羟基前维生素D4和1α-羟基前维生素D4。
18、如权利要求15所述的药物组合物,其中,所述第二抗癌剂选自于:雌莫司汀磷酸盐、松龙苯芥、顺铂、5-氟尿嘧啶、苯丙氨酸氮芥、羟基脲、丝裂霉素、去甲氧柔红霉素、氨甲蝶呤、阿霉素和柔红霉素。
19、如权利要求15所述的药物组合物,其中,所述活性维生素D化合物的剂量是0.01-2.0μg/kg/天。
20、如权利要求15所述的药物组合物,其中,所述1α-羟基前维生素D化合物的剂量是约0.01-2.0μg/kg/天。
21、如权利要求15所述的药物组合物,其中,所述雄激素控制剂选自于以下组:雌激素、LHRH类似物、抗雌激素物质和抗雄激素物质。
22、如权利要求15所述的药物组合物,其中,所述5α-还原酶抑制剂是非那司提。
23、如权利要求15所述的药物组合物,其中,所述骨治疗剂选自于以下组:结合雌激素、抗雌激素物质、降钙素、氟化钠、二膦酸酯、钙添加剂、钴胺素、百日咳毒素和硼。
24、治疗人以降低前列腺癌或增生的过度增殖细胞的活性的方法,其包括:向需要此等治疗的男人给药治疗有效量的1α-羟基前维生素D或活性维生素D,它们的剂型为持续释放剂型或者延迟持续释放剂型,以降低或稳定前列腺癌或增生细胞的活性,并降低高钙血症的危险。
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Cited By (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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CN103142554A (zh) * | 2013-03-21 | 2013-06-12 | 青岛正大海尔制药有限公司 | 骨化三醇控释胶囊及其制备方法 |
CN103142537A (zh) * | 2013-03-21 | 2013-06-12 | 青岛正大海尔制药有限公司 | 骨化三醇缓释剂片 |
CN103142553A (zh) * | 2013-03-21 | 2013-06-12 | 青岛正大海尔制药有限公司 | 一种骨化三醇缓释胶囊及其制备方法 |
CN103142555A (zh) * | 2013-03-21 | 2013-06-12 | 青岛正大海尔制药有限公司 | 一种阿法骨化醇缓释胶囊及其制备方法 |
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Families Citing this family (59)
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---|---|---|---|---|
US6538037B2 (en) * | 1991-01-08 | 2003-03-25 | Bone Care International, Inc. | Methods for preparation and use of 1α,24(S)-dihydroxyvitamin D2 |
US20040009958A1 (en) * | 1991-01-08 | 2004-01-15 | Bone Care International, Inc. | Methods for preparation and use of 1alpha,24(S)-dihydroxyvitamin D2 |
US5763429A (en) * | 1993-09-10 | 1998-06-09 | Bone Care International, Inc. | Method of treating prostatic diseases using active vitamin D analogues |
US5547957A (en) * | 1993-10-15 | 1996-08-20 | Merck & Co., Inc. | Method of treating androgenic alopecia with 5-α reductase inhibitors |
TW382595B (en) * | 1993-10-15 | 2000-02-21 | Merck & Co Inc | Pharmaceutical composition for use in arresting and reversing androgenic alopecia |
US20040043971A1 (en) * | 1995-04-03 | 2004-03-04 | Bone Care International, Inc. | Method of treating and preventing hyperparathyroidism with active vitamin D analogs |
US20020183288A1 (en) * | 1995-04-03 | 2002-12-05 | Bone Care International, Inc. | Method for treating and preventing hyperparathyroidism |
US6242434B1 (en) * | 1997-08-08 | 2001-06-05 | Bone Care International, Inc. | 24-hydroxyvitamin D, analogs and uses thereof |
US20020128240A1 (en) * | 1996-12-30 | 2002-09-12 | Bone Care International, Inc. | Treatment of hyperproliferative diseases using active vitamin D analogues |
US6566353B2 (en) * | 1996-12-30 | 2003-05-20 | Bone Care International, Inc. | Method of treating malignancy associated hypercalcemia using active vitamin D analogues |
FR2759293B1 (fr) * | 1997-02-11 | 1999-04-30 | Ethypharm Lab Prod Ethiques | Microgranules contenant du cisplatine, procede de fabrication, preparation pharmaceutique et utilisation en polychimiotherapie ou en association avec une radiotherapie |
US20030129194A1 (en) * | 1997-02-13 | 2003-07-10 | Bone Care International, Inc. | Targeted therapeutic delivery of vitamin D compounds |
HUP0002454A2 (hu) * | 1997-02-13 | 2000-12-28 | Bone Care International, Inc. | D-Vitamin-molekularésszel rendelkező konjugátumok és ilyen konjugátumokat tartalmazó gyógyászati készítmények |
US6605599B1 (en) | 1997-07-08 | 2003-08-12 | Bristol-Myers Squibb Company | Epothilone derivatives |
US6087350A (en) * | 1997-08-29 | 2000-07-11 | University Of Pittsburgh Of The Commonwealth System Of Higher Education | Use of pretreatment chemicals to enhance efficacy of cytotoxic agents |
US20020076442A1 (en) * | 1997-09-02 | 2002-06-20 | Martin Burke | Vitamin d3 analog loaded polymer formulations for cancer and neurodegenerative disorders |
US6849616B1 (en) * | 1998-03-27 | 2005-02-01 | Pharmacia Italia S.P.A. | Methods to potentiate intravenous estramustine phosphate |
AU762481C (en) | 1998-03-27 | 2004-08-19 | Oregon Health Sciences University | Vitamin D and its analogs in the treatment of tumors and other hyperproliferative disorders |
US6479474B2 (en) * | 1999-07-08 | 2002-11-12 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Dietary calcium as a supplement to vitamin D compound treatment of multiple sclerosis |
WO2002006218A2 (en) * | 2000-07-18 | 2002-01-24 | Bone Care International, Inc. | STABILIZED 1α-HYDROXY VITAMIN D |
AU2002228648A1 (en) * | 2000-11-16 | 2002-05-27 | Pharmacia And Upjohn Company | Combined therapy against tumors comprising estramustine phosphate and lhrh agonists or antagonists |
US20040071789A1 (en) * | 2002-02-14 | 2004-04-15 | Baron John A | Calcium supplementation to reduce prostate cancer risk |
US7129230B2 (en) * | 2001-03-12 | 2006-10-31 | Nestec S.A. | Method and product for treating cancer in pets |
US20030191093A1 (en) * | 2001-12-03 | 2003-10-09 | Novacea, Inc. | Pharmaceutical compositions comprising active vitamin D compounds |
US20080260834A1 (en) * | 2002-08-20 | 2008-10-23 | Martin Burke | Vitamin d3 analog loaded polymer formulations for cancer and neurodegenerative disorders |
US20040126318A1 (en) * | 2002-09-12 | 2004-07-01 | Ehrenpreis Eli D. | Methods, formulations and kits for monitoring and diagnosing gastric emptying and gastroparesis, and formulations for determining gastrointestinal motility |
US7148211B2 (en) * | 2002-09-18 | 2006-12-12 | Genzyme Corporation | Formulation for lipophilic agents |
US20040053895A1 (en) * | 2002-09-18 | 2004-03-18 | Bone Care International, Inc. | Multi-use vessels for vitamin D formulations |
WO2004047673A2 (en) * | 2002-11-21 | 2004-06-10 | Novacea, Inc. | Treatment of liver disease with active vitamin d compounds |
US20060189586A1 (en) * | 2003-06-11 | 2006-08-24 | Cleland Jeffrey L | Pharmaceutical compositions comprising active vitamin D compounds |
AU2004247108A1 (en) * | 2003-06-11 | 2004-12-23 | Novacea, Inc | Treatment of immune-mediated disorders with active vitamin D compounds alone or in combination with other therapeutic agents |
CA2528359A1 (en) * | 2003-06-11 | 2004-12-23 | Novacea, Inc. | Treatment of cancer with active vitamin d compounds in combination with radiotherapeutic agents and treatments |
WO2005011660A1 (en) * | 2003-07-29 | 2005-02-10 | Abbott Laboratories | Use of vitamin d to down regulate the renin-angiotensin-aldosterone system |
WO2005029078A1 (en) * | 2003-09-17 | 2005-03-31 | Guava Technologies, Inc. | Compositions and methods for analysis of target analytes |
EP1663250A4 (en) * | 2003-09-24 | 2006-12-20 | Bioxell Spa | TREATMENT OF MALFUNCTION OF BLADDER |
SG110107A1 (en) * | 2003-09-24 | 2005-04-28 | Bioxell Spa | Compound and use in treatment |
WO2005117542A2 (en) * | 2004-05-10 | 2005-12-15 | Novacea, Inc. | Treatment of pancreatic cancer with active vitamin d compounds in combination with other treatments |
US20080293647A1 (en) * | 2004-11-12 | 2008-11-27 | Luciano Adorini | Combined Use Of Vitamin D Derivatives And Anti-Proliferative Agents For Treating Bladder Cancer |
CA2924200C (en) * | 2005-10-12 | 2017-09-05 | Proventiv Therapeutics, Llc | Methods and articles for treating 25-hydroxyvitamin d insufficiency and deficiency |
US9024039B2 (en) * | 2005-12-12 | 2015-05-05 | Women & Infants' Hospital Of Rhode Island | Heterocycles and derivatives thereof and methods of manufacture and therapeutic use |
HUE029572T2 (en) * | 2006-02-03 | 2017-03-28 | Opko Renal Llc | Treatment of Vitamin D Insufficiency and Deficiency with 25-Hydroxy-D2 and 25-Hydroxy-D3 |
US20100009949A1 (en) * | 2006-03-24 | 2010-01-14 | Bioxell S.P.A. | Novel method |
US8329677B2 (en) | 2006-06-21 | 2012-12-11 | Cytochroma, Inc. | Method of treating and preventing secondary hyperparathyroidism |
WO2008134518A2 (en) * | 2007-04-25 | 2008-11-06 | Cytochroma Inc. | Methods and compounds for vitamin d therapy |
KR101495578B1 (ko) * | 2007-04-25 | 2015-02-25 | 사이토크로마 인코포레이티드 | 비타민 d 부족 및 결핍의 치료 방법 |
EP3542792B1 (en) | 2007-04-25 | 2023-06-28 | EirGen Pharma Ltd. | Controlled release 25-hydroxyvitamin d |
WO2008134523A1 (en) | 2007-04-25 | 2008-11-06 | Proventiv Therapeutics, Llc | Method of safely and effectively treating and preventing secondary hyperparathyroidism in chronic kidney disease |
US8221803B1 (en) | 2007-06-25 | 2012-07-17 | OncoNatural Solutions, Inc. | Composition for prostate health |
KR101852042B1 (ko) | 2008-04-02 | 2018-04-25 | 사이토크로마 인코포레이티드 | 비타민 d 결핍 및 관련 장애에 유용한 방법, 조성물, 용도 및 키트 |
US20100158998A1 (en) * | 2008-12-23 | 2010-06-24 | Michael Fox | Formulations comprising vitamin d or derivatives thereof |
EP2448406B1 (en) | 2009-02-26 | 2016-04-20 | Relmada Therapeutics, Inc. | Extended release oral pharmaceutical compositions of 3-hydroxy-n-methylmorphinan and method of use |
LT2552484T (lt) | 2010-03-29 | 2020-04-27 | Opko Ireland Global Holdings, Ltd. | Būdai ir kompozicijos, skirti paratiroidų lygiams sumažinti |
US8999393B1 (en) * | 2013-01-09 | 2015-04-07 | Edgemont Pharmaceuticals Llc | Sustained release formulations of lorazepam |
KR101847947B1 (ko) | 2013-03-15 | 2018-05-28 | 옵코 아이피 홀딩스 Ⅱ 인코포레이티드 | 안정화되고 변형된 비타민 d 방출 제형 |
JP6282939B2 (ja) * | 2014-06-05 | 2018-02-21 | 株式会社ファンケル | 耐酸性錠剤 |
AR101476A1 (es) | 2014-08-07 | 2016-12-21 | Acerta Pharma Bv | Métodos para tratar cánceres, enfermedades inmunes y autoinmunes, y enfermedades inflamatorias en base a la tasa de ocupación de la tirosin quinasa de bruton (btk) y a la tasa de resíntesis de la tirosin quinasa de bruton (btk) |
CN114681468A (zh) | 2014-08-07 | 2022-07-01 | 欧普科爱尔兰环球控股有限公司 | 利用25-羟基维生素d的辅助疗法 |
TW202214257A (zh) | 2016-03-28 | 2022-04-16 | 愛爾蘭商歐科愛爾蘭全球控股股份有限公司 | 維生素d治療之方法 |
KR102121400B1 (ko) * | 2018-07-31 | 2020-06-17 | (주)에이치케이바이오텍 | 신령버섯균사체 액체배양 추출물을 포함하는 전립선 비대증의 예방 또는 치료용 조성물 |
Family Cites Families (19)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US2216719A (en) * | 1935-07-06 | 1940-10-08 | Hartford Nat Bank & Trust Co | Vitamin |
US2434015A (en) * | 1942-11-21 | 1948-01-06 | Du Pont | Stable provitamin d composition |
US4335120A (en) * | 1979-03-21 | 1982-06-15 | Hoffmann-La Roche Inc. | Administration of biologically active vitamin D3 and vitamin D2 materials |
US4230701A (en) * | 1979-03-21 | 1980-10-28 | Hoffmann-La Roche Inc. | Administration of biologically active vitamin D3 and vitamin D2 materials |
JPS57149224A (en) * | 1981-03-13 | 1982-09-14 | Chugai Pharmaceut Co Ltd | Tumor-suppressing agent |
ATE19623T1 (de) * | 1981-07-17 | 1986-05-15 | Duphar Int Res | Verfahren zur herstellung von 1-alpha-hydroxy vitamin d oder 1-alpha hydroxy previtamin d derivaten und previtamin d oder tachysteroladdukten mit geeigneten dienophilen. |
JPS5910562A (ja) * | 1982-07-07 | 1984-01-20 | Teijin Ltd | プレ−1α−ヒドロキシコレカルシフエロ−ル類の製造法 |
DE3448360C2 (zh) * | 1983-05-09 | 1991-10-02 | Wisconsin Alumni Res Found | |
US4505906A (en) * | 1984-01-30 | 1985-03-19 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Hydroxyvitamin D2 isomers |
US4684524A (en) * | 1984-03-19 | 1987-08-04 | Alza Corporation | Rate controlled dispenser for administering beneficial agent |
US4728643A (en) * | 1984-11-02 | 1988-03-01 | The General Hospital Corporation | Method of treating psoriasis |
EP0215956A4 (en) * | 1985-03-14 | 1988-09-07 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | AGENTS FOR TREATING SKIN DISEASES. |
ZA886284B (en) * | 1987-08-31 | 1990-04-25 | Advanced Polymer Systems Inc | Controlled release formulations |
AU5185790A (en) * | 1989-02-16 | 1990-09-05 | University Of Georgia Research Foundation, Inc., The | Treatment of tibial dyschondroplasia |
US5372996A (en) * | 1989-03-10 | 1994-12-13 | Endorecherche, Inc. | Method of treatment of androgen-related diseases |
US5013728A (en) * | 1990-05-04 | 1991-05-07 | Colgate - Palmolive Company | Composition for treating osteoporosis and hormonal imbalance |
JPH04198129A (ja) * | 1990-11-28 | 1992-07-17 | Sumitomo Pharmaceut Co Ltd | 活性型ビタミンd↓3類含有組成物 |
IL110117A0 (en) * | 1994-06-24 | 1994-10-07 | Univ Ben Gurion | Pharmaceutical compositions comprising vitamin-d analogs |
CZ291915B6 (cs) * | 1995-06-14 | 2003-06-18 | Schering Aktiengesellschaft | Deriváty vitaminu D se substituenty v poloze C-25, způsob jejich výroby, meziprodukty pro tento způsob, jakož i jejich použití pro výrobu léčiv |
-
1996
- 1996-12-30 US US08/775,447 patent/US5795882A/en not_active Expired - Lifetime
-
1997
- 1997-12-10 BR BR9715022-3A patent/BR9715022A/pt not_active IP Right Cessation
- 1997-12-10 NZ NZ336511A patent/NZ336511A/xx unknown
- 1997-12-10 MX MXPA99006988A patent/MXPA99006988A/es not_active IP Right Cessation
- 1997-12-10 PL PL97334348A patent/PL334348A1/xx unknown
- 1997-12-10 WO PCT/US1997/022034 patent/WO1998029105A2/en active IP Right Grant
- 1997-12-10 EP EP97949716A patent/EP0951286B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1997-12-10 AT AT97949716T patent/ATE340581T1/de not_active IP Right Cessation
- 1997-12-10 CN CNB971819750A patent/CN100345547C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1997-12-10 JP JP53001798A patent/JP2001512418A/ja not_active Ceased
- 1997-12-10 AU AU78883/98A patent/AU724153B2/en not_active Ceased
- 1997-12-10 KR KR1019997006004A patent/KR20000062405A/ko not_active Application Discontinuation
- 1997-12-10 DE DE69736745T patent/DE69736745D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1997-12-10 HU HU0003526A patent/HUP0003526A2/hu unknown
- 1997-12-10 CA CA002276465A patent/CA2276465A1/en not_active Abandoned
Cited By (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103142554A (zh) * | 2013-03-21 | 2013-06-12 | 青岛正大海尔制药有限公司 | 骨化三醇控释胶囊及其制备方法 |
CN103142537A (zh) * | 2013-03-21 | 2013-06-12 | 青岛正大海尔制药有限公司 | 骨化三醇缓释剂片 |
CN103142553A (zh) * | 2013-03-21 | 2013-06-12 | 青岛正大海尔制药有限公司 | 一种骨化三醇缓释胶囊及其制备方法 |
CN103142555A (zh) * | 2013-03-21 | 2013-06-12 | 青岛正大海尔制药有限公司 | 一种阿法骨化醇缓释胶囊及其制备方法 |
CN103142555B (zh) * | 2013-03-21 | 2014-10-01 | 青岛正大海尔制药有限公司 | 一种阿法骨化醇缓释胶囊及其制备方法 |
CN103142553B (zh) * | 2013-03-21 | 2014-10-01 | 青岛正大海尔制药有限公司 | 一种骨化三醇缓释胶囊及其制备方法 |
CN103142537B (zh) * | 2013-03-21 | 2014-11-12 | 青岛正大海尔制药有限公司 | 骨化三醇缓释剂片 |
CN113573706A (zh) * | 2019-03-15 | 2021-10-29 | 洛利制药有限责任公司 | 用维生素d和表没食子儿茶素没食子酸酯(egcg)等药物治疗纤维瘤 |
CN110917163A (zh) * | 2019-12-11 | 2020-03-27 | 正大制药(青岛)有限公司 | 一种帕立骨化醇固体口服制剂 |
CN110917169A (zh) * | 2019-12-11 | 2020-03-27 | 正大制药(青岛)有限公司 | 帕立骨化醇胶囊剂及其制备方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
HUP0003526A2 (en) | 2001-03-28 |
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BR9715022A (pt) | 2001-09-18 |
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DE69736745D1 (de) | 2006-11-09 |
JP2001512418A (ja) | 2001-08-21 |
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AU7888398A (en) | 1998-07-31 |
AU724153B2 (en) | 2000-09-14 |
US5795882A (en) | 1998-08-18 |
WO1998029105A2 (en) | 1998-07-09 |
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