MXPA99006988A - Metodo para el tratamiento de enfermedades prostaticas empleando formulaciones de vitamina d de liberacion retardada y/o prolongada. - Google Patents

Abstract

La invencion proporclona metodos terapeuticos para inhibir mejorar o bien aliviar la actividad celular hiperproliferativa de enfermedades de la prostata como, por ejemplo, cancer de prostata asi como hiperplasia prostatica, que incluyen la administracion a un paciente que requiere del mismo de un analogo activo de la vitamina D. Se promueve, induce o mejora la diferenciacion celular sin provocar al paciente hipercalcemia e hipercalciuria que limitan la dosis.

Description

particu armente, a vitamina D activada de liberación retardada y/o prolongada o bien lalfa-hidroxiprevitamina D oral, con el objeto de inhibir la actividad celular hiperproliferativa de estas enfermedades y promover la diferenciación celular. La glándula próstata se encuentra exclusivamente en mamíferos machos y es el blanco de ciertas enfermedades hiperproliferativas . Una proliferación de células básales y de estroma de la glándula próstata provoca una hiperplasia prostética benigna que es una enfermedad común de la próstata. Otra enfermedad común de la próstata es el cáncer de la próstata, especialmente el adenocarcinoma prostético. El adenocarcinoma de la próstata es el más común de los cánceres fatales patofisiológicos de la próstata y, típicamente involucra una transformación maligna de las células epiteliales en la región periférica de la glándula próstata. Tanto la hiperplasia prostética como el cáncer de la próstata tienen una tasa elevada de incidencia en la población masculina humana de edad avanzada. Aproximadamente, una cuarta parte de los hombres de 55 años y más padecen de alguna forma de enfermedad de la próstata. El cáncer de la próstata es actualmente la segunda causa más frecuente de fallecimiento por cáncer después del cáncer del pulmón entre los varones norteamericanos. Las tasas de mortalidad para cáncer de la próstata se incrementan logarítmicamente con la edad y son dos veces más elevadas en la población norteamericana de color que entre los blancos. A nivel internacional, las tasas de mortalidad son las más elevadas en las personas de color norteamericanas y en Europa del norte y son las más bajas en Japón. Se proyecta que para el año 2000, se observará un incremento del 90% de la incidencia anual de la enfermedad y un incremento del 37% de las tasas de mortalidad anuales. Aun cuando el cáncer de la próstata puede ser un neoplasma relativamente indolente en los ancianos, la disminución global de la esperanza de vida en pacientes con esta enfermedad es de aproximadamente 10 años. El adenocarcinoma de la próstata es el más común de los cánceres de la próstata patofisiológicos fatales, e involucra muy frecuentemente una transformación maligna de las células epiteliales en la región periférica de la glándula próstata. La mejora del tratamiento del cáncer de la próstata se ha centrado en una detección temprana. En años recientes, pruebas de tamizado que detectan ciertas proteínas o péptidos secretados por la glándula próstata, es decir, marcadores (por ejemplo, antígeno específico de próstata (PSA), fosfatasa de ácido prostética (PAP), inhibina prostética (PIP) ) , han incrementado la capacidad de diagnosticar la enfermedad en pacientes asintomáticos. El tratamiento del cáncer de la próstata en hombres de una edad inferior a los 65 años se ha enfocado en la intervención quirúrgica radical, por ejemplo, prostatectomía y/o radioterapia, pero el impacto de estos enfoques agresivos sobre la supervivencia global sigue en tela de juicio. El enfoque para el tratamiento de hombres mayores de 65 años históricamente ha sido más conservador, y se basa en la ablación o el control de la producción de testosterona. Este resultado se logra habitualmente mediante castración quirúrgica, mediante la administración de inhibidores de la gonadotropina pituitaria como, por ejemplo, estrógenos o bien análogos de la hormona de liberación de hormona luteinizante (LHRH) , o bien una combinación de estos métodos de tratamiento. Los estrógenos, como por ejemplo dietilestilbestrol, son inhibidores potentes de la liberación de la glándula pituitaria de la hormona luteinizante (LH) , la gonadotropina que regula la producción de testosterona, y por consiguiente la administración de estrógeno puede provocar una caída de la testosterona a niveles de castración. La supresión máxima de la testosterona plasmática se logra típicamente por una dosificación de 3 mg/día de dietilestilbestrol. Otros estrógenos tales como estrógenos conjugados son aproximadamente igualmente efectivos para disminuir los niveles plasmáticos que dietilestilbestrol. Sin embargo, el dietilestilbestrol tiene un perfil cardiovascular relativamente insatisfactorio, y el fallecimiento por enfermedad cardiovascular es frecuente en pacientes tratados con grandes dosis de dietilestilbestrol. Así, mientras que dosificaciones de hasta 3 mg/día de dietilestilbestrol son típicamente seguras, este régimen de tratamiento no es indicado en el caso de hombres con una enfermedad cardiovascular preexistente. Un carcinoma prostético forma frecuentemente metástasis en la pelvis y vértebras lumbares, provocando pérdida ósea y dolor asociado. Una manipulación hormonal puede resultar frecuentemente en una acción significativamente paliativa del cáncer metastásíco de la próstata, con una mejora del dolor óseo y otros síntomas asociados con la enfermedad. Una ablación de andrógeno es, por consiguiente también una terapia colateral mayor en cáncer metastásico avanzado de la próstata. A pesar de la mejora inicial con tratamiento hormonal, una mayoría de los pacientes con enfermedad metastásica o bien localmente no removible avanzan y no responden a terapias hormonales adicionales. En este gran grupo de pacientes, otras formas de tratamiento son mucho menos efectivas. La radioterapia puede frecuentemente aliviar los síntomas de dolor óseo, pero no es una cura. Con el paso del tiempo, la enfermedad avanzará hasta un desenlace fatal. Como observado arriba, la hiperplasia prostética es otra enfermedad hiperproliferativa común de la glándula próstata. El trastorno afecta a hombres de más de 45 años de edad y su frecuente se incrementa con la edad. La hiperplasia prostática empieza en la región periuretral en forma de una proliferación localizada y progresa hasta comprimir el resto de la glándula normal. La hiperplasia puede comprimir y obstruir la uretra. El tratamiento incluye una intervención quirúrgica, y la administración de inhibidores de gonadotropina pituitaria y/o inhibidores de la enzima 5alfa- reductasa. En otra área de la fisiología y de la bioquímica, el área de la vitamina D, una investigación extensiva durante las últimas dos décadas estableció funciones biológicas importantes para la vitamina D aparte de su función clásica en el metabolismo óseo y mineral. Receptores nucleares específicos para lalfa, 25-dihidroxivitamina D3, la forma hormonaImente activa de la vitamina D, están presentes en células de diversos órganos no involucrados en la homeostasis del calcio. Por ejemplo, Miller et al., 52 Cáncer Res. (1992) 515-520, han demostrado receptores específicos, biológicamente activos para lalfa, 25-dihidroxivitamina D3 en la línea de células de carcinoma prostético humana, LNCaP. Se ha reportado que ciertos compuestos de vitamina D y análogos son inhibidores potentes de la proliferación de las células malignas y son inductores/estimuladores de la diferenciación celular. Por ejemplo, la Patente Norteamericana No. 4,391,802 de Suda et al., divulga que compuestos de lalfa-hidroxivitamina D, específicamente lalfa, 25-dihidroxivitamina D3 y lalfa-hidroxivitamina D3, poseen una actividad potente contra la leucemia en virtud de la inducción de la diferenciación de células malignas (específicamente células de leucemia) para macrófagos no malignos (monocitos), y son útiles en el tratamiento de la leucemia. Las acciones antiproliferativas y de diferenciación de lalfa, 25-dihidroxivitamina D3 y otros análogos de la vitamina D3 han sido reportadas en relación a líneas de células de cáncer de la próstata. Más recientemente, una asociación entre el polimorfismo de gen de receptor de la vitamina D y riesgo de cáncer de próstata ha sido reportada, lo que sugiere que los receptores de la vitamina D pueden tener una función en el desarrollo, y posiblemente en el tratamiento, del cáncer de la próstata. Estos estudios previos se han enfocado exclusivamente sobre los compuestos de vitamina D3. Aun cuando estos compuestos pueden efectivamente ser potentes para promover la diferenciación de células malignas en cultivo, su uso práctico en terapia de diferenciación como agentes anticáncer es severamente limitado porque son igualmente potentes como agentes que afectan el metabolismo del cáncer. A los niveles requeridos in vivo para un uso efectivo como por ejemplo agentes contra la leucemia, los mismos compuestos pueden inducir niveles de calcio en la sangre notablemente elevados y potencialmente peligrosos en virtud de su actividad calcénica inherente. Es decir, el uso clínico de lalfa, 25-dihidroxivitamina D3 y otros análogos de vitamina D3 como g agentes anticáncer no puede llevarse a la práctica, o bien es muy limitado, debido al riesgo de hipercalcemia. Esto indica la necesidad de compuestos con una mayor actividad específica y selectividad de acción, es decir, compuestos de vitamina D con efectos antiproliferativos y de diferenciación pero que tienen una actividad calcémica menor. Particularmente, existe la necesidad de terapias con vitamina D que pueden administrarse oralmente para ofrecer los niveles sanguíneos de vitamina D activa necesarios para efectos antiproliferativos y prodiferenciativos sin el riesgo de hipercalcemia. La necesidad de dichas terapias con vitamina D no es mayor que en tratamiento de enfermedades prostéticas neoplásica e hiperplásicas de la próstata. COMPENDIO DE LA INVENCIÓN La presente invención ofrece un tratamiento de condiciones de enfermedad prostética, tales como las caracterizadas por un crecimiento celular hiperproliferativo y/o una diferenciación de célula anormal, por ejemplo, cáncer de próstata e hiperplasia prostética. El método incluye la administración de una terapia con vitamina D de liberación retardada y/o prolongada a un paciente que padece de dichas enfermedades para inhibir el crecimiento anormal de células y para promover la diferenciación celular. La terapia con vitamina D de liberación retardada y/o prolongada incluye compuestos de lalfa-hidroxiprevitamina D y/o compuestos de vitamina D en una formulación de liberación retardada y/o prolongada. Lo anterior, y otras ventajas de la presente invención se obtienen en un aspecto de la misma en un método para inhibir la actividad hiperproliferativa de cáncer prostético humano o células hiperplásicas, que comprende el tratamiento de las células con una cantidad efectiva de una terapia con vitamina D que es una formulación de vitamina D de liberación retardada y/o prolongada. El paso del tratamiento incluye la inhibición de la proliferación de tales células prostéticas y la inducción y realce de la diferenciación en tales células prostéticas, y la vía preferida de administración es la vía oral. La formulación de vitamina D de liberación prolongada incluye lalfa-hidroxiprevitamina D y/o una vitamina D activa en una matriz de liberación prolongada. La formulación de liberación prolongada retardada incluye además un revestimiento entérico del ingrediente activo o de los ingredientes activos. Entre los compuestos de lalfa-hidroxiprevitamina D preferidos para la liberación prolongada o bien para la formulación de liberación sostenida retardada de conformidad con la presente invención se encuentran lalfa, 25-dihidroxiprevitamina D3, lalfa-hidroxiprevitamina D3, lalfa, 25-dihidroxiprevitamina D2, lalfa, 24-dihidroxiprevitamina D2, lalfa-hidroxiprevitamina D2, lalfa, 25-dihidroxiprevitamina D4, lalfa, 24-dihidroxiprevitamina D4, y lalfa-hidroxiprevitamina D4. Entre los compuestos de vitamina D activos se prefieren lalfa, 25- dihidrovitamina D3, lalfa, 24-dihidroxivitamina D3, lalfa- hidroxivitamina D3, lalfa, 25-dihidrdoxivitamina D2, lalfa, 24- dihidroxivitamina D2, lalfa-dihidroxivitamina D2, lalfa, 25- dihidroxivitamina D4, lalfa, 24-dihidroxivitamina D4, y lalfa- hidroxivitamina D4. La cantidad efectiva o cantidad terapéutica del compuesto de lalfa-hidroxiprevitamina D, en forma de dosificación unitaria, es de 0.01 µg/kg/día a 2.0 µg/kg/día, y de manera similar, la cantidad de vitamina D activa en forma de liberación retardada y/o prolongada es de 0. Olµg/kg/día a 2.0 µg/kg/día. La invención incluye además un método para el tratamiento para el tratamiento de cáncer de la próstata humano, que comprende la administración a un sujeto de sexo masculino que tiene cáncer de próstata de una cantidad efectiva de compuesto de vitamina D dicho compuesto es lalfa-hidroxiprevitamina D o una vitamina D activa en forma de liberación retardada y/o prolongada y que tiene un riesgo de hipercalcemia substancialmente menor que el riesgo provocado por lalfa, 25-hidroxivitamina D3 administrada sola o bien en formulaciones previamente conocidas, para disminuir o estabilizar la actividad proliferativa anormal celular del cáncer. Así, además de mejorar las condiciones prostéticas las formulaciones de la presente invención superan el carácter inadecuado inherente de las formulaciones de vitamina D orales actualmente conocidas, proporcionando un fármaco oral de vitamina D de liberación retardada y/o prolongada. En una modalidad, el fármaco oral es una vitamina D de liberación prolongada (SR) que incluye un compuesto de lalfa- hidroxiprevitamina D o bien un compuesto activo de vitamina D en una matriz de liberación prolongada (a continuación *SR pre D" y *SR activa D" , respectivamente). La lalfa- hidroxiprevitamina D se encuentra de preferencia representada por la fórmula (I) o bien (II) de conformidad con lo definido a continuación. Los compuestos de las fórmulas (I) y (II) incluyen lalfa-hidroxiprevitamina D, lalfa, 24-dihidroxiprevitamina D, y lalfa, 25-dihidroxiprevitamina D. De conformidad con la formulación SR pre D del fármaco de la invención, es decir lalfa-hidroxiprevitamina D como ingrediente activo, la lalfa-hidroxiprevitamina D actúa como profármaco para la vitamina D activa con el objeto de inhibir la proliferación de células anormales de enfermedades prostéticas y para inducir o mejorar la diferenciación celular. El incrementos sostenido del nivel sanguíneo de la lalfa-hidroxivitamina D activa o su metabolito proporcionado por administración por lalfa-hidroxiprevitamina D se logra con una hipercalcemia significativamente menor que la que resulta de administraciones orales de la 1 alfa, 25- dihidroxivitamina D3. En la SR pre D, la lalfa-hidroxiprvitamina D se proporciona en una forma que permanece relativamente estable a temperatura ambiente, y es exenta de solvente. La lalfa- hidroxiprevitamina D es después administrada a un animal o a un ser humano en una formulación de dosificación oral. Conforme se libera la lalfa-hidroxiprevitamina D a partir de la formulación de dosificación oral, es absorbida a partir de los intestinos. La lalfa-hidroxiprevitamina D es inactiva, es decir, no se une a la proteína receptora de vitamina D y no estimula la absorción intestinal del calcio. Conforme la lalfa-hidroxiprevitamina D es calentada por la temperatura del animal o del ser humano, es convertida térmicamente en la lalfa-hidroxivitamina D activada correspondiente. La conversión térmica a la forma activa requiere de un periodo de tiempo suficientemente largo de tal manera que la mayoría de esta conversión ocurre en el periodo de tiempo después de la absorción de la lalfa-hidroxiprevitamina D del intestino del animal o ser humano. Así SR pre D produce un nivel sanguíneo sostenido mayor de la vitamina D activada correspondiente con una estimulación significativamente menor de la absorción intestinal de calcio que lo que se obtiene mediante la administración oral de la vitamina D activada correspondiente misma. En la formulación de SR activa D de la presente invención, una vitamina D activada es incorporada en una matriz de liberación 'sostenida adecuada para administración oral. Es decir, la vitamina D activada es formulada de tal manera que esté unida en una matriz que proporciona una liberación sostenida cuando está expuesta al contenido del intestino.

En una segunda modalidad, la composición oral de la presente invención es una vitamina D de liberación retardada y prolongada (DSR) , por ejemplo, una vitamina D de liberación prolongada con un revestimiento entérico. La matriz que contiene la vitamina D activada o lalfa-hidroxiprevitamina D se encuentra recubierta adecuadamente con un revestimiento entérico que resiste a la desintegración en los jugos gástricos. La formulación de liberación prolongada, con revestimiento entérico de vitamina D es decir, la vitamina D de liberación retardada prolongada, a continuación *DRS pre D" y *DRS D activada o activa", respectivamente, es después administrada oralmente a un ser humano o a un animal. Conforme la pre D DSR o bien D activada DSR de la invención se desplaza más allá de la porción cercana del intestino delgado, se disuelve el revestimiento entérico. La matriz que contiene la vitamina adicional D activa o bien lalfa-hidroxiprevitamina D se encuentra expuesta a los flujos intestinales, y la lalfa-hidroxiprevitamina D o bien la vitamina D activada es gradualmente liberada durante el curso de un cierto periodo de tiempo y absorbida a partir de los intestinos. Puesto que la porción principal de la vitamina D activada de lalfa-hidroxivitamina correspondiente proveniente de la previta ina hidroxilada es absorbida en un punto más allá de la porción próxima del intestino delgado, ocurre una estimulación reducida de la absorción de calcio del intestino. Esto reduce el riesgo de hipercalcemia e hipercalciuria, incrementando así la ventana terapéutica. La liberación gradual permite también un nivel sostenido más elevado de compuesto activado de vitamina D en el suero y por consiguiente proporciona un efecto benéfico sobre el tejido prostético enfermo. La composición de SER oral de la presente invención puede también incluir adecuadamente una combinación de previtamina D activada y vitamina D activada (conocida a continuación como *pre D activada y D DSR"). Esta modalidad de la presente invención incluye uno o varios de los compuestos de las fórmulas (I), (II), (III), y/o (IV), definidas a continuación, contenidas en una formulación de liberación sostenida, con revestimiento entérico, adecuada para administración oral. Así, para el tratamiento de enfermedades prostéticas, por ejemplo cáncer de la próstata o bien hiperplasia, se administra a un paciente una cantidad efectiva de SR vitamina D que es una lalfa-hidroxiprevitamina D y/o vitamina' D activa en una matriz deliberación prolongada, o bien una cantidad efectiva de vitamina D activada DSR o bien pre D activada DSR, o bien una cantidad efectiva de pre D activada y D DSR, incrementando así el nivel sanguíneo de vitamina D activada en un ser humano o en una animal, inhibiendo la proliferación celular prostética, e induciendo o incrementando la diferenciación celular. Para el tratamiento de condiciones de la próstata de conformidad con la presente invención, vitamina D de tipo SR o bien vitamina D de tipo DSR se administra adecuadamente sola o bien como ingrediente activo (es decir, como primer agente anticáncer) o bien en una mezcla que incluye un segundo agente anticáncer, un agente de ablación de andrógeno, un inhibidor de 5alfa-reductasa o bien combinaciones de los mismos. En otro aspecto, la invención es una composición farmacéutica que incluye un primer agente anticáncer que es un vitamina D de tipo SR o bien vitamina D de tipo DSR y un agente seleccionado dentro del grupo que consiste de (i) un segundo agente anticáncer (ii) , un agente óseo (iii) un agente de ablación de andrógeno (i) un inhibidor de 5alfa-reductasa y combinaciones de los mismos, y un vehículo fisiológimcamente aceptable, el compuesto activo de vitamina D se encuentra presente en un rango de dosificación de aproximadamente 0. Olµg/kg/día a aproximadamente 2. Oµg/kg/día; la previtamina D activa se encuentra también presente en un rango de dosificación de 0.01 µg/kg/día a 2.0 µg/kg/día. Otras ventajas y una concepción más cabal de las adaptaciones especificas, variaciones en cuanto a composición, y atributos físicos se obtendrán a partir de una examen de la siguiente descripción detallada de modalidades preferidas en combinación con las figuras del dibujo y reivindicaciones anexas. Se entiende expresamente que los dibujos son con el propósito de ilustrar y describir la invención solamente y no tienen el propósito de definir ni limitar la presente invención. BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS La modalidad ejemplar preferida de la presente invención se describirá a continuación en relación con el dibujo anexo donde designaciones similares se refieren a elementos similares y donde: La figura 1 es una gráfica de la conversión con el paso del tiempo de ciertas lalfa-hidroxiprevita inas en forma de vitamina; y La figura 2 es una gráfica de los residuos desesperados de la concentración de vitamina D activa versus tiempo después de administración de D activada DSR. DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN La presente invención ofrece un método efectivo para el tratamiento de enfermedades hiperplásicas y neoplásicas. Particularmente, la presente invención se refiere a métodos terapéuticos para inhibir, mejorar o bien aliviar la actividad celular hipe proliferativa o bien enfermedades de la próstata, por ejemplo cáncer prostético e hiperplasia prostética. La presente invención ofrece un tratamiento novedoso para un paciente que padece de una enfermedad hiperproliferativa como, por ejemplo, cáncer de la próstata o bien hiperplasia protática, que incluye la administración de un fármaco que es lalfa-hidroxiprevitamina D o bien una vitamina D activa DSR o bien previtamina D activa. El fármaco se proporciona al paciente sin provocar hipercalcemia ni hipercalciuria que limitan la dosis, es decir, niveles inaceptablemente altos de calcio en la sangre y de calcio en la orina, respectivamente, estos atributos se logran a través de ciertas propiedades químicas y físicas de las composiciones de la presente invención. De conformidad con la invención, cuando se administran cantidades efectivas de terapias de vitamina D SR o bien vitamina D DSR a pacientes con cáncer de próstata o bien hiperplasia prostética, la actividad proliferativa de las células prostéticas anormales es inhibida o aliviada, y se induce o promueve la diferenciación celular, con un nivel significativamente menor de hipercalcemia e hipercalciuria que lo que se observa después de la administración de la misma cantidad de vitamina D activada en formulaciones previamente conocidas, así, el fármaco de la presente invención tiene un índice terapéutico mejorado. Las cantidades efectivas de ingrediente activo en formulaciones de SR y DSR para el tratamiento de condiciones prostéticas neoplásicas e hiperplásicas se encuentran dentro de rangos de aproximadamente 0.01 µg/kg/día a aproximadamente 2. Oµg/kg/día en el caso de lalfa-hidroxiprevitamina D y de 0. Olµg/kg/día a 2.0 µg/kg/día en el caso de vitamina D activa. Se sabe que la vitamina D3 debe ser hidroxilada en las posiciones C-1 y C-25 antes de su activación, es decir, antes que produzca una respuesta biológica. Un metabolismo similar parece ser requerido para activar otras formas de vitamina D, por ejemplo vitamina D2 y vitamina D4. Por consiguiente, como se emplea aquí, el término *vitamina D activada" o bien vitamina D activa" se refieren a un compuesto de vitamina D o analógica que ha sido hidroxilado en al menos la posición C-1 del anillo A de la molécula y se une o se convierte/ etaboliza en un compuesto que se une con el receptor de vitamina D (VDR) . En otras palabras, en cuanto a este último, lalafa-hidroxivitamina D es hidroxilada adicidnalmente en un compuesto que es capaz de unirse con el receptor de vitamina D. De manera similar el término 'previtamina D activada" se refiere a un compuesto de previtamina D que ha sido hidroxilado en al menos la posición C-1 del anillo A y es convertido/metabolizado en un compuesto que e une con el receptor de vitamina D. Así mismo, como se emplea aquí, el término 'inferior" como modificador para alquilo o acilo se refiere a una cadena de hidrocarburo ramificada o recta que tiene de 1 a 4 átomos de carbono. Ejemplos específicos de tales cadenas de hidrocarburo son metilo, etilo, propilo, butilo, isobutilo, t-butilo, etenilo, propenilo, butenilo, isobutenilo, isopropenilo, formilo, acetilo, propionilo o bien butirilo. El término 'ácido aromático" se refiere a un grupo benzoilo insubstituido o bien a un grupo benzoilo substituido como por ejemplo nitrobenzoilo o dinitrobenzoilo . El término 'trata" o bien 'tratamiento" se refiere al alivio, mejora, reparación o prevención de enfermedades prostéticas así como a la inhibición de la hiperproliferación celular anormal y promoción, inducción y/o incremento de la diferenciación celular. Los compuestos de lalfa-hidroxiprevitamina D y compuestos de vitamina D activos en las formas SR y DSR de la presente invención son los compuestos que tienen una actividad antiproliferativa y de diferenciación celular efectiva (es decir, la reversión de transformación maligna) , particularmente en relación a células de enfermedades prostéticas como, por ejemplo, cáncer de la próstata e hiperplasia prostética, pero tienen una tendencia más baja o la incapacidad de provocar lo efectos colaterales indeseados de hipercalcemia y/o hipercalciuria. En otras palabras, las composiciones o fármacos de la presente invención actúan como agentes antiproliferativos y agentes de diferenciación celular cuando están expuestos a células malignas o bien otras célula hiperproliferativas sin alterar significativamente el metabolismo del calcio. La acción de liberación retardada y prolongada de las formulaciones de la presente invención hacen que dichas formulaciones sean agentes útiles y preferidos para inhibir con seguridad la hiperproliferación y para lograr una diferenciación de las células malignas. Las formulaciones de la presente invención, por consiguiente, superan las limitaciones de las formulaciones activas conocidas de vitamina D antes mencionadas, y pueden considerarse como agentes preferidos para el control y tratamiento de enfermedades malignas como por ejemplo cáncer de la próstata así como hiperplasia prostética benigna. Las modalidades preferidas de las composiciones o fármacos de la presente invención empleadas en los métodos terapéuticos para mejorar ciertas condiciones prostéticas se describen a continuación. Una primera modalidad el fármaco de la presente invención es una formulación SR que incluye lalfa-hidroxiprevitamina D sustancialmente pura o bien una vitamina D activa contenida en una matriz de liberación prolongada. Se a encontrado que cuando se administra oralmente lalfa-hidroxiprevitamina D substancialmente pura, ésta produce un incremento prolongado mayor en el nivel sanguíneo de vitamina" D activada y un nivel significativamente menor de hipercalcemina e hipercalciuria que cuando se administra oralmente la misma cantidad de vitamina D activada en formunalciones previamente conocidas. Por consiguiente la lalfa-hidroxiprevitamina D es útil para el tratamiento de condiciones prostéticas. Como se emplea aquí, el término 'substancialmente pura" se refiere a lalfa- hidroxiprevitamina D con un grado de pureza de al menos el 85%. El término 'prolongado" como se emplea aquí se refiere a un nivel sanguíneo que permanece relativamente constante (es decir +/- 10 pg/ml o bien +/- 10% del valor medio) durante un periodo de tiempo mayor que un periodo definido, es decir, típicamente mayor que 4 horas. Se sabe que la vitamina D3 es sintetizada de manera endógena en la piel de los animales y de los seres humanos a partir de 7-dehidrocolesterol por medio de una reacción fotoquímica mediada por radiaciones ultravioleta que rompe el anillo B del 7-dehidrocolesterol entre el carbono 4 y el carbono 9 para formar la previtamina D3. El trieno previtamina D3 es inestable y con el paso del tiempo se convierte térmicamente en vitamina D3. A temperatura corporal normal existe un equilibrio entre la previtamina D3 y la vitamina D3 como se muestra a continuación.

Previtamina D¿ Vitamina D3 Conforme la vitamina D es metabolizada adicionalmente in vivo, este equilibrio se desplaza hacia la forma de la vitamina D3. Una conversión similar y un estado de equilibrio similar existen para lalfa-hidroprevitamina D. La lalfa-hidroxiprevitamina D de la presente invención tiene de preferencia la fórmula general (I) : (I) donde Ra es una cadena lateral que tiene al menos 7 átomos de carbono, y puede estar ramificada o no ramificada, saturada o no saturada, heterosubstituida o bien no heterosubstituida, cíclica o no cíclica, y donde el isómero térmico de la lalfa- hidroxiprevitamina D de la fórmula general (I) es una vitamina activa D e incrementa el calcio sérico de la rata deficiente en vitamina D como se determina por métodos estándares empleados por bioquímicos en el área de vitamina D. Entre la lalfa-hidroxiprevitamina D preferida de esta modalidad de la presente invención se encuentran las que tienen la fórmula (II) : (II) donde B y C son ya sea hidrógeno o bien un enlace carbono-carbono que forma un doble enlace entre C-22 y C-23; R1 y R2 son cada uno independientemente hidrógeno, hidroxi, flúor, alquilo inferior, fluoroalquilo inferior, O-alquilo inferior, alquenilo inferior, fluoroalquenilo inferior, O-alquenilo inferior, 0-acilo inferior, 0-acilo aromático, cicloalquilo inferior, o bien conjuntamente con el carbono sobre el cual están unidos forman un anillo de ciclocarbono C3 - C8; R3 es hidrógeno, fluoro, alquilo inferior, alquenilo inferior, fluoroalquilo inferior, fluoroalquenilo inferior, O-alquilo inferior, O-alquenilo inferior, O-acilo inferior, O-acilo aromático o bien cicloalquilo inferior; X1 es hidrógeno o bien hidroxilo; y X2 es hidrógeno, hidroxilo o bien conjuntamente con R1 o bien R2 constituye un doble enlace. Entre los compuestos de la fórmula (II) , es decir entre los compuestos de lalfa-hidroxi-previtamina D preferidos se encuentran: lalfa, 25-dihidroxiprevitamina D3 (lalfa, 25- (OH) 2 preD3) ; lalfa, 24, 25-trihidroxiprevitamina D3 (lalfa, 24, 25- (OH) 3 preD3) ; lalfa, hidroxiprevitamina D3 (lalfa- (OH)preD3) ; lalfa-dihidroxiprevitamina D3 (lalfa, 24- (OH) 2 pre D3) ; lalfa, 24-dihidroxi-25-fluor-previtamina D3 (lalfa, 24- (OH) 2 - 25-FpreD3) ; lalfa, 25-dihidroxiprevitamina D2 ( lalfa, 25- (OH) 2 preD2) ; lalfa, 24, 25-trihidroxiprevitamina D2 ( lalfa, 24, 25- (OH) 3 preD2) ; lalfa-hidroxiprevitamina D2 ( lalfa- (OH) preD2) ; lalfa, 24-dihidroxiprevitamina D2 ( lalfa, 24- (OH) 2 preD2) ; lalfa, 24-dihidroxi-25-fluor-previtamina D2 ( lalfa, 24- (OH) 2 - 25-FpreD2) ; lalfa, 25-dihidroxiprevitamina D4 (lalfa, 25- (OH) 2 preD ) ; lalfa, 24, 25-trihidroxiprevitamina D ( lalfa, 24 , 25- (OH) 3 preD4) ; lalfa-hidroxiprevitamina D4 (lalfa- (OH) preD4) ; lalfa, 24-dihidrdoxiprevitamina D4 (lalfa, 24- (OH) 2 preD4) ; y lalfa, 24-dihidroxi-25-fluor-previtamina D4 lalfa, 24- (OH) 2-25- FpreD4) , . entre estos compuestos de la fórmula (II) que tienen un centro quiral en la cadena lateral, por ejemplo, en C24, se entiende que ambos epímeros (por ejemplo, R y S) y la mezcla racémica se encuentran dentro del alcance de la presente invención. En una modalidad preferida, los compuestos de las fórmulas (I) o (II) se proporcionan en una forma substancialmente pura, cristalina, exenta de solvente. Como tal la lalfa-hidroxiprevitamina D permanece bastante estable a temperatura ambiente con una conversión mínima en la forma de lalfa-hidroxivitamina D. Los compuestos de las fórmulas (I) o bien (II) , es decir, lalfa-hidroxiprevitamina D, pueden ser fabricados fácilmente en forma cristalina de conformidad con el procedimiento descrito en Vandewalle et al, patente norteamericana número 4,539,153. Los compuestos de lalfa-hidroxiprevitamina D de esta modalidad pueden ser procesados de conformidad con métodos convencionales de la farmacia para producir agentes farmacéuticos para su administración a pacientes, por ejemplo, mamíferos, incluyendo seres humanos. Por ejemplo, formas de dosificación de los compuestos de las fórmulas (I) o bien (II) con excipientes convencionales, incluyen mezclas adecuadas para administración oral. Formas de dosificación de la lalfa-hidroxiprevitamina D pueden ser combinadas con vehículo farmacéuticamente aceptable no tóxico, como por ejemplo almidón de maíz, lactosa, o bien sucrosa que no reaccionan de manera negativa con los compuestos activos. La formulación puede ser producida en tableta, cápsula, polvos, pastillas y pildoras. Cualesquiera que sea el método de formulación empleado, se debe tomar precauciones para evitar una exposición extendida a solventes y calor puesto que bajo estas condiciones presentarán una tendencia a que una porción de la lalfa-hidroxiprevitamina D se convierta en la forma de lalfa-hidroxivitamina D. Puesto que se evitan de preferencia calor y disolución, el método preferido de formulación de tableta es el método conocido como granulación en seco, es decir, la lalfa-hidroxiprevitamina D se encuentra exenta de solvente y es estable térmicamente a temperatura ambiente. La lalfa-hidroxiprevitamina D se administra al animal o al ser humano en formulación de dosificación oral. Conforme la lalfa-hidroxiprevitamina D es liberada- de la formulación de dosificación oral, es absorbida a partir del intestino. La lalafa-hidroxiprevitamina D no interactúa con la proteína de receptor de vitamina D de los enterocitos y, por consiguiente, no estimula la absorción intestinal de calcio.

Se sabe también que el enlace de la vitamina D activada con la proteína de receptor de vitamina D del enterocito induce la liberación de encimas que degradan una parte significativa de la vitamina D activada no unida presente en el intestino. Dicha degradación disminuye la cantidad de vitamina D activada disponible para su absorción en el torrente sanguíneo. Puesto que la lalfa-hidroxiprevitamina D no se une con la proteína de receptor de vitamina D no existe dicha inducción de enzima. Así, se observa una menor degradación en el intestino y una mayor cantidad se encuentra disponible para su absorción en el torrente sanguíneo que en el caso de la vitamina D activada correspondiente. Conforme la lalfa-hidroxiprevitamina D es calentada por la temperatura del cuerpo del animal o del ser humano, es térmicamente convertida en la vitamina D activada correspondiente. El tiempo de reacción para la conversión térmica en la forma activa es suficientemente largo de tal manera que la mayor parte de la conversión se observa con el paso del tiempo después de la absorción de lalfa-hidroxiprevitamina D. Así, la formulación de dosificación oral de lalfa-hid^oxiprevitamina D produce un nivel sanguíneo sostenido mayor de la vitamina D activada correspondiente con una estimulación significativamente menor de la absorción intestinal de calcio de lo que es posible con una cantidad de dosificación oral comparable de la vitamina D activada misma.

Así, la administración oral de lalfa-hidroxiprevitamina D proporciona mayores niveles sanguíneos sostenidos de vitamina De activa para el tratamiento de células neoplásicas e hiperplásicas prostéticas sin una actividad calcémica significativa que con una administración oral comparable de la vitamina D activa. La vitamina D activa de la formulación de SR del fármaco de la presente invención es de preferencia lalfa-hidroxivitamina D que tiene la fórmula general (III) : (lll) donde Ra es una cadena lateral que tiene al menos 7 átomos de carbono, y puede estar ramificada o no ramificada saturada o insaturada, heterosubstituida o no heterosubstituida, cíclica o no cíclica, o bien cualquier compuesto de vitamina D o bien homólogo que se une con la proteína de receptor de vitaminca D. Entre los compuestos de lalfa-hidroxivitamina D preferidos de esta modalidad e la presente invención se encuentran los que tienen la fórmula (IV) : donde B y C son ya sea hidrógeno o bien un enlace de carbono-carbono que forma un doble enlace entre C-22 y C-23; R1 y R2 son cada uno independientemente hidrógeno, hidroxi, fluoro, alquilo inferior, fluoroalquilo inferior, O-alquilo inferior, alquenilo inferior, fluoroalquenilo inferior, O-alquenilo inferior, O-acilo inferior, O-acilo aromático, cicloalquilo inferior, o bien conjuntamente con el carbono sobre el cual están unidos, forman un anillo de ciclocarbono C3 - Cs; R3 es hidrógeno, fluoro, alquilo inferior, alquenilo inferior, fluoroalquilo inferior, fluoroalquenilo inferior, O-alquilo inferior, O-alquenilo inferior, O-acilo inferior, O-acilo aromático o bien cicloalquilo inferior; X1 es hidrógeno o hidroxilo; y X2 es hidrógeno, hidroxilo o bien conjuntamente con ya sea R1 o bien R2, constituye un doble enlace, de preferencia entre los compuestos de la fórmula (IV) es decir, los compuestos lalfa-hidroxivitamina D preferidos se encuentran: lalfa, 25-dihidroxiprevitamina D3 (lalfa, 25- (OH) 2 D3) ; lalfa, 24, 25-trihidroxiprevitamina D3 (lalfa, 24, 25- (OH) 3 D3) ; lalfa, hidroxiprevitamina D3 (lalfa- (OH) D3) ; lalfa-hidroxi-25-fluoro-previtamina D3 (lalfa- (OH) -25-D3) ; lalfa, 24-dihidroxiprevitamina D3 (lalfa, 24- (OH) 2 D3) ; lalfa, 24-dihidroxi-25-fluoro-vitamina D3 (lalfa, 24- (OH) 2 -25- FD3) ; lalfa, 25-dihidroxiprevitamina D2 ( lalfa, 25- (OH) 2 D2) ; lalfa, 24, 25-trihidroxiprevitamina D2 ( lalfa, 24 , 25- (OH) 3D2) ; lalfa-hidroxivitamina D2 ( lalfa- (OH) D2) ; lalfa-hidroxi-25-fluoro-vitamina D2 ( lal fa- (OH) -25-FD2) lalfa-dihidroxivitamina D2 ( lalfa, 24- (OH) 2D2) ; lalfa, 24-dihidroxi-25-fluoro-vitamina D2 ( lalfa, 24- (OH) 2-25- FD2) ; lalfa, 25-dihidrovitamina D4 ( lal fa, 25- (OH) 2 D ) ; lalfa, 24 , 25-trihidroxivitamina D4 ( lalfa, 24 , 25- (OH) 3 D4 ) ; lalfa-hidroxivitamina D ( lalfa- (OH) D4 ) ; lalfa-hidroxi-25-fluoro-vitamina D4 ( lalfa- (OH) -25-FD4 ) ; lalfa, 24-dihidroxivitamina D4 ( lalfa, 24- (OH) 2 D4 ) ; y lalfa, 24-dihidroxi-25-fluoro-vitamina D ( lalfa, 24- (OH) 2-25- FD4 . Entre estos compuestos activos de vitamina D que tienen un centro quiral en la cadena lateral por ejemplo, lalfa, 24-dihidroxivitamina D2 se entiende que ambos epímeros (por ejemplo con R y S) y la mezcla racémica se encuentran dentro del alcance de la presente invención. Los compuestos de la fórmula (III) y (IV) de esta modalidad pueden ser procesados de conformidad con métodos convencionales de la farmacia para producir agentes farmacéuticos de liberación prolongada (más específicamente descritos a continuación) para su administración a pacientes, por ejemplo, mamíferos, incluyendo seres humanos. Por ejemplo, las formas de dosificación de los compuestos de las fórmulas (III) y (IV) con excipientes convencionales, incluyen mezclas adecuadas para administración oral. Formas de dosificación de la lalfa-hidroxivitamina D pueden ser combinadas con cualquier vehículo farmacéuticamente aceptable no tóxico como por ejemplo almidón de maíz, lactosa o sucrosa, que no reacciona de manera negativa con los compuestos activos. La formulación SR puede ser producida en forma de tableta o cápsula. Una formulación muy preferida de esta modalidad es una matriz que enlaza la lalfa, 25-dihidroxivitamina D3 con un excipientes farmacéuticamente aceptable y que permite una liberación lenta y relativamente constante de la 1,25-dihidroxivitamina D3 en un periodo de 4 a 8 horas . El medio para proporcionar una liberación prolongada (es decir, controlada) del ingrediente activo puede seleccionarse entre cualesquiera de los sistemas de administración de liberación prolongada conocidos para el control de la liberación de un ingrediente activo en el transcurso de aproximadamente 4 o más horas incluyendo el sistema de matriz de cera y el sistema Eudragit RS/RL (de Rohm Phar a, GmbH, Weiterstadt, Alemania) . El sistema de matriz de cera dispersa el ingrediente activo o bien los ingredientes activos en un aglomerante de cera que se disuelve lentamente en los fluidos corporales para liberar gradualmente el ingrediente activo o bien los ingredientes activos . El sistema de administración de fármaco oral de liberación controlada preferido es el sistema Eudragit RL/RS en el cual el ingrediente activo vitamina D activada se combina con una matriz de liberación prolongada, y se rocía en granulos que tienen una dimensión de maya 25/30. Los granulos son después revestidos uniformemente con una laca polimérica delgada insoluble en agua pero lentamente permeable al agua. Los granulos recubiertos pueden ser mezclados con aditivos opcionales como por ejemplo antioxidantes, estabilizadores, aglomerante, lubricante, auxiliares de procesamiento y similares. La mezcla puede ser compactada en una tableta que, antes de su uso, es dura y seca o b en puede vaciarse en una cápsula. Después de tragar la tableta o la cápsula y después que dicha tableta o cápsula entre en contacto con los fluidos intestinales acuosos, la laca delgada empieza a hincharse y permite lentamente la permeación de los fluidos intestinales.

Conforme el fluido intestinal permea lentamente el revestimiento de laca, se liberan lentamente los ingredientes activos. Para el momento en el cual la tableta ha pasado a través del tracto intestinal, aproximadamente 4 a 8 horas, los ingredientes activos habrán sido lenta pero totalmente liberados. Por consiguiente, la tableta ingerida proporcionará una liberación prolongada de la vitamina D activada así como de cualquier otro ingrediente activo. El sistema Eudragit consiste de lacas de alta permeabilidad (RL) y lacas de baja permeabilidad (RE) . La permeabilidad del revestimiento el lapso de tiempo de la liberación del fármaco puede ser titulada variando la proporción RS/RL en el material de revestimiento. Para detalles adicionales sobre el sistema Eudragit RL/RS, se hace referencia publicaciones técnicas disponibles en Rohm Tech, Inc. 195 Canal Street, Maiden, Massachusetts, 02146.

Véase también D. Lehmann, D. Dreher 'Coating of tablets and small particles with acrylic by fluid bed technology" (Revestimiento de tabletas y pequeñas partículas con resinas acrílicas por tecnología de cama fluida), Int. J. Pharm.

Tech. & Prod. Mfr. 2 (r) , 31-43 (1981). En la segunda modalidad del fármaco o composición de la presente invención, uno o varios compuestos de vitamina D activada o bien una o varias lalfa-hidroxiprevitamina D substancialmente pura o combinaciones de los mismos se incluyen en una formulación de liberación prolongada con revestimiento entérico. En otras palabras, una formulación de liberación prolongada con revestimiento entérico es una formulación retardada, prolongada (DSR) de los compuestos de la fórmula (I) y (II), o bien (III) y (IV) o bien combinaciones de los mismos. Sorprendentemente se ha encontrado que la formulación de D activada de liberación retardada, prolongada de la presente invención incrementa significativamente la ventana terapéutica del compuesto activado de vitamina D. Es decir, el riesgo de hipercalcemia y de hipercalciuria es significativamente reducido y la efectividad terapéutica es significativamente incrementada para vitamina D activada cuando se administra oralmente en la formulación D activada de liberación retardada, prolongada en comparación con la misma cantidad de vitamina D activada administrada oralmente en formulaciones orales conocidas a la fecha de estos compuestos. Además, la formulación de D activada de liberación retardada, prolongada permite un nivel sanguíneo sostenido más alto de la vitamina D activada de lo que se puede obtener con formulaciones orales previamente conocidas del compuesto de vitamina D activada. Para preparar las formulaciones de liberación retardada, prolongada de esta modalidad del medicamento de la presente invención, los granulos revestidos de las fórmulas (I), (II), (III), o bien (IV), arriba descritas se forman ya sea en una tableta o bien se colocan en una cápsula, y la tableta o cápsula es revestida con un material de revestimiento entérico que se disuelve a un pH de 6.0 a 7.0 para formar la formulación de liberación retardada, prolongada. Un material de revestimiento entérico dependiente del pH de este tipo es Eudragit L/S que se disuelve en el fluido intestinal pero no en los jugos gástricos. Otros materiales de revestimiento entérico pueden emplearse tales como acetato ftalato de celulosa (CAP) que es resistente a la disolución por los jugos gástricos pero que se desintegra fácilmente debido al efecto hidrolítico de las esterasas intestinales. La elección particular de material de revestimiento entérico no es importante en la medida en que se obtiene una liberación prolongada o controlada durante un periodo de 4 a 8 horas y en la medida en que la liberación es retardada hasta que la formulación de DSR alcance el intestino. Aún cuando no es esencial para la invención, se prefiere que la liberación sea retardada hasta que la formulación de DSR haya alcanzado más allá de la parte próxima del intestino delgado. Los expertos en la material observarán que las formulaciones de la presente invención pueden también estar encapsuladas en otros sistemas de administración de liberación con el paso del tiempo como por ejemplo sistema de administración de liposoma, polisacáridos que presentan un mecanismo de liberación lenta, implantes salísticos o de otros polímeros o bien microesferas. En sistemas de administración de liberación con el paso del tiempo de este tipo, el compuesto activo es adecuadamente protegido con revestimientos degradables de manera diferenciada, por ejemplo, mediante microencapsulación, revestimientos múltiples, etc., y tales medios permiten una dosificación continua de las composiciones contenidas aquí. Mientras se describieron arriba las modalidades preferidas, se entenderá que la única limitación en cuanto al tipo de compuesto activo de vitamina D empleado en esta invención es que el compuesto de vitamina D en sí o bien su metabolito in vivo se una con la proteína de receptor de vitamina D. La única limitación en cuanto a lalalfa-hidroxiprevitamina D es que se convierta térmicamente en un compuesto activo de vitamina D en el cual se une con el VDR o bien su metabolito in vivo se une con el VDR. Los compuestos de lafa-hidroxiprevitamina D y vitamina D activa, de preferencia de las fórmulas (I), (II), (III) y (IV) son útiles como compuestos activos en las composiciones farmacéuticas de las modalidades descritas arriba. Tales composiciones pueden incluir adecuadamente excipientes o vehículos fisiológicamente aceptables. Estas composiciones farmacéuticas constituyen otro aspecto de la invención. Las formas de dosificación pueden también contener adyuvantes, por ejemplo adyuvantes de conservación o estabilización. Como indicado arriba, los compuestos farmacológicamente activos de esta invención pueden ser procesados de conformidad con métodos convencionales de farmacia para producir agentes farmacéuticos para su administración a paciente, por ejemplo, de mamíferos, incluyendo seres humanos. Por ejemplo, los compuestos de las fórmulas (I) o bien (II) pueden ser empleados en mezclas con excipientes convencionales, por ejemplo, substancias vehículos farmacéuticamente aceptables adecuadas para aplicación enteral (por ejemplo, oral) o bien parenteral que no reaccionan de manera negativa con los compuestos activos. Vehículos farmacéuticamente aceptables adecuados para los compuestos de las fórmulas (III) y (IV) incluyen, sin limitarse a ellos, agua, soluciones de sales, alcoholes, goma arábiga, aceites vegetales, por ejemplo, (aceite de maíz, aceite de semilla de algodón , aceite de cacahuate, aceite de olivo, aceite de coco) , aceites de hígado de pescado, esteres aceitosos tales como Polysorbate 80, polietilenglicoles, gelatina, carbohidratos, (por ejemplo, lactosa, amilosa, o bien almidón) , estearato de magnesio, talco, ácido silícico, parafina viscosa, monoglicéridos de ácidos grasos y diglicéridos de ácidos grasos, ésters de pentaeritritol ácido graso, hidroximetilcelulosa, polivinilpirolidona, etc. los compuestos de las fórmulas (I) y (II) deben, por otra parte, ser formulados como substancialmente exentos de solvente. Para aplicación oral, las tabletas, grageas, polvos o cápsulas de conformidad con lo descrito arriba son particularmente adecuados. Se puede emplear un endulzante si se desea un vehículo endulzado. Generalmente, par el tratamiento de enfermedades hiperproliferativas prostéticas, las composiciones de esta invención se proporcionan en dosificaciones y comprenden de aproximadamente O.lµg/kg/día a aproximadamente 2.0 µg/kg/día a aproximadamente 2.0µ/kg/día para lalfa-hidroxiprevitamina D y aproximadamente de O.lµg/kg/día a 2. Oµg/kg/día en el caso de vitamina D activa con un 'vehículo farmacéuticamente aceptable en una matriz adecuada y/o con revestimiento entérico de conformidad con las modalidades de la presente invención. Se observará que las cantidades preferidas de compuesto activo en un caso específico variarán de conformidad con la eficacia del compuesto específico empleado, las composiciones particulares formuladas, el modo de aplicación, y el sitio particular y el organismo a tratar. Por ejemplo, la dosis específica para un paciente particular depende de la edad, del peso corporal, del estado general de salud de la dieta, del momento y del modo de administración, de la velocidad de expresión, y de fármacos empleados en combinación y de la severidad del trastorno particular al cual se aplica la terapia. Dosificaciones para un huésped dado pueden ser determinadas usando consideraciones convencionales, como por ejemplo mediante la comparación habitual de las actividades diferenciales de los compuestos sujetos y de una gente conocida, tales como por medio de un protocolo farmacológico convencional apropiado. Las composiciones de conformidad con la presente invención pueden también contener otras substancias terapéuticamente valiosas o bien pueden contener más que uno de los compuestos especificados aquí y en las reivindicaciones en mezclas. De manera provechosa, los compuestos de las fórmulas (I), (II), (III) y (IV) o bien combinaciones de los mismos juntos con otros agentes terapéuticos pueden ser administrados oralmente de conformidad con las modalidades descritas arriba en cantidades de dosificación de 0.1 a 2.0 µg por día para lalfa-hidroxiprevitamina D y de O.lµg a 2.0 µg/día en el caso de vitamina D activa. Dentro del alcance de la presente invención se incluye la coadministración dosificaciones efectivas de los compuestos antihiperproliferativos de la presente invención en forma de SR o bien DSR con ablación conocida de andrógeno o bien agentes de control o bien agentes de disminución de los niveles de testosterona como por ejemplo estrógenos (por ejemplo, dietilstilbestrol) , análogos de LHRH, e inhibidores de la enzima 5alfa-reductasa como, por ejemplo, finasterida, antiestrógenos (por ejemplo, Tamoxifen®), y antiandrógenos (por ejemplo, flutamida) (véase, por ejemplo, la patente norteamericana número 5,372,996, que se incorpora aquí por referencia) . Se anticipa que un efecto simbiótico puede obtenerse por estas varias combinaciones y proporcionará un efecto terapéutico incrementado. Así mismo existe el potencial de proveer terapia donde los efectos colaterales adversos con algunos de estos agentes, por ejemplo, los efectos cardiovasculares negativos de estrógeno, son considerablemente reducidos en comparación con el caso en el cual estos agentes se emplean solos en dosificaciones más grandes. Rangos posibles de dosis de estos agentes de disminución de niveles de testosterona o bien control de andrógeno coadministrados son de 0.002 a 0.20 µg/kg/día. Incluido adicionalmente dentro del alcance de la presente invención es la coadministración y dosificaciones efectivas de la lalfa-hidroxiprevitamina D o bien la vitamina activa D en las formulaciones DSR o bien SR de la presente invención como primer agente anticáncer con un segundo agente anticáncer, por ejemplo, un agente citotóxico, particularmente en cáncer metastásico de la próstata don de la recidiva ha ocurrido después de un tratamiento hormonal. Tales agentes pueden incluir adecuadamente fosfato de estramustina, prednimustina, cisplatina, 5-fluoro-uracilo, melfalano, hidroxiurea, mitomicina, idarubicina, metotrexato, adriamicina y daunomicina. Se anticipa que una vitamina D activa de la fórmula (III) o bien (IV) o bien una lalfa- hidroxiprevitamina D la fórmula (I) o bien (II) empleada en combinación con varios fármacos anticáncer puede provocar un efecto citotóxico significativamente incrementado sobre las células cancerosas, ofreciendo así un efecto terapéutico incrementado. Específicamente, conforme se obtiene un efecto inhibitorio del crecimiento significativamente incrementado con las combinaciones antes mencionadas mediante el empleo de concentraciones más bajas de los fármacos anticáncer en comparación con los regímenes de tratamiento en los cuales los fármacos se emplean solos, existe el potencial de proporcionar una terapia en la cual los efectos adversos asociados con los fármacos anticáncer se reducen de manera considerables en comparación con lo observado normalmente con los fármacos anticáncer empleados solos en dosis más grandes. Posibles rangos de dosis de estos segundos agentes anticáncer coadministradós son de 0.1 a lµg/kg/día. También dentro del alcance de la presente invención se encuentra la coadministración de dosificaciones efectivas del compuesto de las fórmulas (I), (II), (III), o bien (IV) con otras hormonas o agentes, como por ejemplo, estrógenos, que se saben mejoran las enfermedades óseas o bien los trastornos óseos. Se observa arriba que el cáncer de la próstata presenta frecuentes metástasis en los huesos, provocando pérdida ósea y dolor asociado. Tales agentes óseos pueden incluir estrógenos conjugados o bien sus equivalente, calcitonina, bifosfonatos, complementos ' de calcio, cobalamina, toxina de la tos ferina y boro. Posibles rangos de dosis para estos agentes coadministrados se proporcinan en la tabla 1. Tabla 1 Posibles rangos orales de dosis para varios agentes coadministrados con lalfa-hidroxivitamina D de la fórmula (I) Agente Rangos de dosis Amplio Preferido Más preferido Estrógenos conjuga- 0.3-5.0 0.4-2.4 0.6-1.2 O equivalente (mg/ Día) Fluoruro de sodio - 5-150 30-75 40-60 (mg/día) calcitonina (Ul/día) 5-800 25-500 50-200 bisfosfonatos (mg/ 0.50-20 1-15 5-10 día) complementos de cal- 250-2500 500-1500 750-1000 cío (mg/día) Cobalamina (µg/día) 5-200 20-100 30-50 Toxina de tos ferina 0.1-2000 10-1500 100-100 (mg/día) Boro (mg/día) 0.10-3000 1-250 2-100 Antiestrógenos tales como Tamoxifen® son también agentes óseos conocidos que pueden ser empleados en combinación con los compuestos y composiciones de la presente invención. Las modalidades de la presente invención se explican adicionalmente a través de los siguientes ejemplos que no deben considerarse como limitativos del alcance de la presente invención. En los siguientes ejemplos, se efectúo una cromatografía de líquidos de alta presión (HPLC) en un cromatógrafo Waters empleando una columna Zorbax Sil ODS. Lapso de tiempo para la conversión de alfa-hidroxiprevitamina D en lalfa-hidroxivitamina D Ejemplo 1: lalfa-0H-D2, lalfa, 24- (OH) 2preD2 y lalfa, 25- (OH) 2D3 Se realizaron varios experimentos enfocados hacia la conversión in vitro de la previtamina en vitamina para 3 lalfa-hidroxiprevitamina D's: lalfa-hidroxiprevitamina D2, lalfa, 24-dihidroxiprevitamina D2 y lalfa-hidroxiprevitamina D3. Cada lalfa-hidroxiprevitamina D fue disuelta en etanol, incubada a una temperatura de 37°C en un baño María, y las muestras fueron tomadas a intervalos de 2 horas. Se llevó a cabo una separación analítica por HPLC en cada muestra con el objeto de cuantificar la conversión térmica de la forma de previtamina a la forma de vitamina. Los datos recogidos fueron normalizados para explicar la presencia de cualquier forma de vitamina en la formulación inicial (<10%) . Los resultados aparecen en la figura 1 que es una gráfica del porcentaje de previtamina versus tiempo en horas. Se generaron líneas de regresión lineal para cada previtamina. A partir de éstas, la vida media de conversión térmica, es decir, el tiempo para que el 50% de las previtaminas se conviertan térmicamente en la forma de vitamina, se determino la siguiente manera: lalfa-hidroxiprevitamina D2 12.9 h lalfa, 24-dihidroxiprevitamina D2 12.2 h lalfa, 25-dihidroxiprevitamina D3 17.7 h estos datos indican que ha una temperatura corporal normal, la conversión del 50% de lalfa-hidroxiprevitamina D en lalfa-hidroxivitamina in vitro es mayor que 12 horas. In vivo, uno podría esperar una velocidad similar de conversión. Así, contrario a la creencia generalizada, las lalfa-hidroxiprevitaminas tienen una velocidad de conversión adecuada para una formulación farmacéutica oral. Biodisponibilidad y prueba de farmacocinética de lalfa-hidroxiprevitamina D Ejemplo 2: lalfa, 24- (OH) 2preD2 Se llevó a cabo un experimento que evaluó la biodisponibilidad oral de lalfa, 24-dihidroxiprevitamina D2 (*1, 24- (OH) 2preD2" ) . En este experimento, ratas normales mantenidas en una dieta normal fueron asignadas de manera aleatoria a grupos de tratamiento y grupos de control. Las ratas recibieron administraciones orales de dosis únicas de lalafa, 24- (OH) 2preD2 en aceite de coco fraccionado (FCO) (1.5 g, lo que fue aproximadamente 7.5µg/kg). El grupo de control recibió solamente el vehículo. Para ambos grupos, se obtuvo sangre a las 6 horas después de la administración y se analizó dicha sangre para determinar los niveles séricos de la forma de vitamina, lalfa, 24-dihidroxivitamina D2. Los datos se resumen en la tabla 2 a continuación. Tabla 2 Niveles séricos de lalfa, 24-dihidroxivitamina D2 (lalfa, 24- (0H)2D2) en ratas a las 6 horas después de dosis orales únicas de lalfa, 24-dihidroxiprevitamina D2 (lalfa, 24- (OH) 2preD2) Compuesto de prueba Dosis (µg) n lalfa, 24- (OH) 2D2 sérica (pg/mL) * Vehículo 0.000 5 13.8 +/- 4.2 lalfa, 24-(OH)2preD2 1.5 5 65.5 +/- 10.1 *los valores son media +/- desviación estándar. Estos datos confirman que lalfa, 24- (OH) 2preD2 administrada oralmente es biodisponible de conformidad con lo evidenciado por un nivel incrementado de lalfa, 24- (OH) 2 D2 en circulación. Estos resultados sen sorprendente e inesperados . Ejemplo 3: lalfa, 25- (OH)2preD3 Ratas destetadas de sexo masculino recibieron una dieta deficiente en vitamina D y con un nivel normal de calcio (0.47%) . Después de un periodo de 4 semanas, las ratas fueron divididas en dos grupos y recibieron oralmente o bien lalfa, 25- (ÓH) 2preD3 (0.25 µg/kg) en un vehículo como por ejemplo lactosa o bien el vehículo solo (control) . Cuatro horas después de la administración, las ratas fueron sacrificadas y se midió su nivel sanguíneo de lalfa, 25- (OH) 2D3 empleando una técnica estándar. Después este procedimiento demuestra que el nivel sanguíneo de lalfa, 25- (OH) 2D3 en ratas que recibieron lalfa, 25- (OH)2preD3 es significativamente elevado en comparación con el nivel sanguíneo de los animales de control. Ejemplo 4: lalfa, 25- (OH) 2preD3 Ratas destetadas de sexo masculino recibieron una dieta deficiente en vitamina D que contenía Ca normal (0.47%) y P normal (0.3%). Después de 4 semanas con esta dieta, las ratas fueron separadas en 17 grupos y recibieron oralmente o bien lalfa, 25 (OH) 2D3 o bien lalfa, 25- (OH) 2preD3 en un vehículo como por ejemplo lactosa o bien el vehículo solo (control) . Un grupo es sacrificado 8 horas después de la administración con el vehículo. Ocho grupos recibieron oralmente una dosis única ya sea de lalfa, 25- (OH) 2preD3 o bien lalfa, 25- (OH) 2D3 y fueron sacrificados 2,4,6,9,12,18,24 y 48 horas después de la administración. Se recogió la sangre y se analizo para determinar los niveles de lalfa, 25- (OH) 2D3. Los resultados demuestran que las dosificaciones con lalfa, 25- (OH) 2 preD3 resulta en niveles séricos incrementados de lalfa, 25- (OH) 2D3. Los resultados demuestran adicionalmente que el incremento de lalfa, 25- (OH) 2D3 en el suero es más gradual y sostenido durante una duración mayor que las características farmacocinéticas de lalfa, 25- (OH) 2D3 observado después de administración con lalfa, 25- (OH) 2D3 Ejemplo 5: comparación de biodisponibilidad - lalfa, 25- (OH) 2 preD3 versus lalfa, 25- (OH) 2D3 Ratas de tres semanas de edad fueron mantenidas en una dieta deficiente en vitamina D que contenía niveles normales de calcio y fósforo durante 3-6 semanas hasta que se observará una hipocalcemia notable. Las ratas fueron después asignadas aleatoriamente a grupos de tratamiento y recibieron oralmente dosis únicas de lalfa, 25- (OH) 2preD3 o bien lalfa, 25- (OH) 2D3 en aceite de coco fraccionado (0.255µg, lo que corresponde a aproximadamente a 1.5µg/kg). Un grupo de control recibió solamente el vehículo. Para todos los grupos de tratamiento, la sangre fue obtenida 12 horas después de la administración, y se analizó la sangre para determinar los niveles séricos de la forma de vitamina. Los datos se resumen en la tabla 3 a continuación. Tabla 3 Niveles séricos de lalfa, 25-dihidroxivitamina D3 (lalfa, 25- (OH)2 D) en ratas raquíticas 12 horas después de dosis orales únicas de lalfa, 25-dihidroxiprevitamina D3 (lalfa, 25- (OH) 2 preD3) Compuesto de prueba Dosis (µg n lalfa, 24- (OH) 2D2 sérica (pg/mL)* Vehículo 0.000 8 14.7 +/- 5.1 lalfa,25-(OH)2preD3 0.255 6 615.4 +/- 298.1** lalfa, 25- (OH) 2D3 0.255 6 326 +/-192.0 **p<0.01 en relación a lalfa, 25- (OH) 2D3 Estos datos muestran que lalfa, 25- (OH) 2preD3 oral produjo significativamente más lalfa, 25- (OH) 2D3 sérica que lalfa, 25- (OH)2D3 oral. Estos datos confirman que lalfa, 25- (OH) 2preD3 administrada oralmente es biodisponible de conformidad con lo evidenciado con lalfa, 25- (OH) 2D3 en circulación. Muestran también que lalfa, 25- (OH) 2 preD3 tiene una mayor biodisponibilidad que la forma activa de la vitamina lalfa, 25- (OH) 2D3. Análisis con VDR Ejemplo 6: lalfa, 25- (OH) 2 preD3 La afinidad con enlace VDR de lalfa, 25- (OH) 2preD3 se comparó con la afinidad de enlace de lalfa, 25- (OH) 2D3 su forma de vitamina activa. lalfa, 25- (OH) 2preD3 o bien lalfa, 25- (OH) 2D3 fueron incubadas con la proteína de receptor de vitamina D y cantidades de trazador de 3H-lalfa, 25- (OH) 2D3 bajo condiciones estándares para un ensayo de enlace competitivo. La cantidad de lalfa, 25- (OH) 2preD3 y competidor lalfa, 25- (OH) 2D3 variaron entre 7.8 y 1000 pg o bien 1.0 y 25 pg, respectivamente.

De manera concurrente con las incubaciones para enlace, se incubó un tubo de lalfa, 25- (OH) 2preD3 a la misma temperatura y durante el mismo período para evaluar la cantidad de lalfa, 25- (OH) 2preD3 que se había equilibrado para formar la vitamina. Un análisis de HPLC indicó que al final del período de incubación aproximadamente el 2% de la lalfa, 25- (OH) 2preD3 se había equilibrado en forma de vitamina. El nivel de enlace de la forma lalfa, 25- (OH) 2preD3 fue corregido por la cantidad de forma de vitamina que había sido generada durante el procedimiento de ensayo. Los resultados de los análisis de ensayo se proporcionan en la Tabla 4. Tabla 4 Enlace de lalfa, 25-dihiroxiprevitamina D3 con el receptor de la vitamina D in vitro Cantidad de enlace total enlace corregido l,25-preD3 detectado (pg/tubo) (pg/tubo) (pg/tubo) 7.8 ND ND 15.6 ND ND 31.3 ND ND 62.5 1.88 0.6 125 3.02 0.5 250 6.32 1.3 500 12.0 2.0 1000 20.5 0.5 Los datos mostrados en la tabla 4 arriba muestran que lalfa, 25- (OH) 2preD3 tuvo poca o ninguna afinidad para el receptor de vitamina D, es decir, presentó una afinidad para el receptor menor que 0.01 de la afinidad de la lalfa, 25- (OH)2D3, así que lalfa, 25- (OH) 2preD3 debe equilibrarse en la forma lalfa, 25- (OH) 2D3 antes de ser biológicamente activa. Ejemplo 7: lalfa, 24- (OH) 2preD2 Se llevó a cabo una comparación de las afinidades de enlace de VDR entre lalfa, 24- (OH) 2preD2 y su forma de vitamina, lalfa, 24- (OH) 2D2, de conformidad con lo descrito en el ejemplo 6. Los resultados muestran que lalfa, 24- (OH) 2preD2 tiene una afinidad sustancialmente menor para el receptor que su forma de vitamina, lalfa, 24- (OH) 2D2. Ejemplo 8: lalfa, 24- (OH) 2preD4 Se llevó a cabo una comparación de las afinidades de enlace de VDR entre lalfa, 24- (OH) 2preD4 y su forma de vitamina, lalfa, 24- (OH) 2D4, de conformidad con lo descrito en el ejemplo 6. Los resultados muestran que, lalfa, 24- (OH) 2preD4 presenta una afinidad sustancialmente menor para el receptor que su forma de vitamina, lalfa, 24- (OH) 2D4. Prueba de hipercalcemia aguda de lalfa-hidroxiprevitamina D Ejemplo 9: lalfa, 25- (OH) 2preD3 Ratas destetadas de sexo masculino fueron alimentadas con una dieta deficiente en vitamina D que contenía Ca normal (0.47%), y P(o.3%) normal. Después de aproximadamente 4-6 semanas con esta dieta, las ratas fueron separadas en cinco grupos y recibieron ' oralmente ya sea lalfa, 25- dihidroxivitaminaD3 (0.06 o bien 0.12 µg/kg/día) o bien lalfa, 25-dihidroxiprevitamina D3 (0.06 o bien 0.12 µg/kg/día) en un vehículo como por ejemplo lactosa, o bien el vehículo solo (control), durante 3 días. Todos los animales fueron desangrados 24 horas después de la última dosis y la sangre es analizada para determinar el calcio sérico y el fósforo sérico. Los resultados muestran que la dosificación con lalfa, 25-dihidroxivitamina D3 provoca una elevación mayor del calcio sérico y del fósforo sérico que una dosificación comparable con lalfa, 25-dihidroxiprevitamina D3. Biodisponibilidad y prueba de farmacocinética de la forma de liberación retardada, sostenida de vitamina D activa (vitamina D activa DSR) Ejemplo 10: Formulación con partes iguales de Eudragit L100 y S100 y prueba de la misma Una cantidad apropiada de vitamina D activada fue disuelta en etanol y combinada con los componentes de matriz listados en la Tabla 4 y rociada en 850 g de perlas de malla 25/30. Después del secado, las perlas fueron revestidas con el revestimiento entérico presentado en la tabla 5. T.ABLA 5 componente ingrediente cantidad (g) Matriz Eudragit RS100 50 Metanol 50 Etanol con fármaco Agua destilada 5 Acetona qs a 500 Revestimiento ATEC (acetiltrietilcitrato, 54 entérico plastificante) Metanol 600 Agua destilada 30 Eudragit L100 153 Eudragit S100 153 Talco 40 Acetona qs a 4000 Después de la formulación, las perlas (500 mg/cápsula) fueron empacadas en cápsulas de gelatina No. 0 para administración a perros . Perros (Beagles, machos y hembras, 13 kg y 9 kg, respectivamente) recibieron 5 cápsulas/día de la formulación (DSR-008) . La sangre fue tomada para determinación de línea basal, 24 horas después de la dosificación pero antes de la dosificación subsecuente, y se determinó el nivel de calcio en el suero. Se suspendió la adíinistración de la dosis después de 2 días con niveles de calcio en el suero significativamente arriba de lo normal. Cinco cápsulas/día de la formulación anterior (DSR-008) fueron administradas a una perra durante 7 días. El rango normal de calcio en el suero en perras es de 10.0 a 12.4 mg/dl con una media de 11.2 mg/dl. El calcio en el suero en línea basal en este experimento fue de 11.7 mg/dl; los valores subsecuentes en días sucesivos fueron los siguientes: 12.1, 12.3, 12.7, 13.1, 13.5, y 15.1 mg/dL. Estos resultados demuestran que la actividad biológica de la vitamina D activa en esta formulación de DSR se observa en un período sostenido. Ejemplo 11: Formulación con cantidades desiguales de Eudragit L100 y S90, y prueba de la misma Una cantidad apropiada de vitamina D activada fue disuelta en etanol y combinada con los componentes de matriz listados en la tabla 6 y rociado en 850 g de perlas de malla 25/30. Después de secado, las perlas fueron revestidas con el revestimiento entérico presentado también en la Tabla 6. TABLA 6 componente ingrediente cantidad (g) Matriz Eudragit RS100 10 Metanol 10 Etanol con fármaco Agua destilada 1 Acetona qs a 100 Revestimiento ATEC (acetiltrietilcitrato, 68 entérico plastificante) Metanol 750 Agua destilada 35 Eudragit L100 338 Eudragit S90 49 Talco 50 Acetona qs a 5000 Después de la formulación, las perlas (500 mg/cápsula) fueron empacadas en cápsulas de gelatina No. 0 para administración a perros. Perros (como en el ejemplo 10), recibieron 5 cápsulas/día de la formulación (DSR-010) . La sangre fue tomada para determinación de línea basal, 24 horas después de la dosificación pero antes de la dosificación subsecuente, y se determinó el nivel de calcio en el suero. Se suspendió la administración de la dosis después de 2 días con niveles de calcio en el suero significativamente arriba de lo normal.

Cinco cápsulas/día de la formulación anterior (DSR-010) fueron administradas a una perra durante 2 días. El rango normal de calcio en el suero en perras es de 10.0 a 12.4 mg/dl con una media de 11.2 mg/dl. El calcio en el suero en línea basal en este experimento fue de 10.9; los valores subsecuentes en días sucesivos fueron los siguientes: £3.8 y 16.1 mg/dL. Estos resultados demuestran que la vitamina D activa en esta formulación de DSR es fácilmente biodisponible. Ejemplo 11: Formulación con matriz de ácido esteárico, y prueba de dicha formulación. Una cantidad apropiada de vitamina D activada fue disuelta en etanol y combinado con los componentes de matriz listados en la tabla 7, y rociada en 850 g de perlas de malla 25/30. Después del secado, las perlas fueron . revestidas con el revestimiento entérico listado en la tabla 7. TABLA 7 componente ingrediente cantidad (g) Matriz Acido esteárico 10 Etanol con fármaco Acetona qs a 90 Revestimiento ATEC (acetiltrietilcitrato, 68 entérico plastificante) Metanol 750 Agua destilada 35 Eudragit L100 338 Eudragit S90 49 Talco 50 Acetona qs a 5000 Después de la formulación, las perlas (500 mg/cápsula) fueron empacadas en cápsulas de gelatina No. 0 para administración a perros. Perros (de conformidad con el ejemplo 10) recibieron 5 cápsulas/día de la formulación (DSR-012) . Se tomó sangre para determinación de línea basal, 24 horas después de la dosificación pero antes de la dosificación subsecuente, y se determinó el nivel de calcio en el ' suero. Se suspendió la administración de la dosis después de 2 días con niveles de calcio en el suero significativamente arriba de lo normal. Cinco cápsulas/día de la formulación anterior (DSR-012) fueron administradas a un perro durante 2 días. El rango normal de calcio en el suero en perros machos es de 10.6 a 12.0 mg/dl con una media de 11.3 mg/dl. El nivel sérico de calcio a línea basal fue de 11.4 mg/dl; los valores subsecuentes en días sucesivos fueron los siguientes: 14.2 y 15.5 mg/dl. Estos datos ilustran que la vitamina D activa en esta formulación de DSR es fácilmente biodisponible. Ejemplo 13: DSR lalfa, 25- (OH) 2D3 Un perro recibió una cápsula lalfa, 25-dihidroxivitamina D3 formulada de conformidad con lo ilustrado en esta invención (DSR) . Otro perro recibió una cantidad similar de la lalfa, 25-dihidroxivitamina D3 en aceite de coco fraccionado (FCO). Se tomo sangre a 0, 0.5, 1, 1.5, 2, 3, 4, 6, 9, 15, 24, 36, y 72 horas después de la administración de la dosis. La sangre se analiza para determinar los niveles de vitamina D activa. El animal que recibió el fármaco en la formulación, de cápsula mostró una elevación más lenta de la concentración sanguínea de vitamina D activa, una concentración máxima menor de vitamina D activa en la sangre y una elevación prolongada del nivel sanguíneo de vitamina D activa en relación al animal que recibió el fármaco en aceite de coco fraccionado. La gráfica de la figura 2 muestra los niveles sanguíneos de vitamina D activa esperados a partir del ejemplo anterior.

Estos procedimientos muestran que la administración a animales de la formulación descrita de conformidad con la presente invención resulta en niveles séricos de lalfa, 25-dihidroxivitamina D3 con una elevación más lenta y una duración más larga que las características farmacocinéticas de lalfa, 5-dihidroxivitamina D3 observadas después de administración de lalfa, 25-dihidroxivitamina D3 en aceite de coco fraccionado. Ejemplo 14: Niveles retardados y sostenidos de vitamina D activa en el suero Pacientes recibieron dos microgramos de lalfa, 25- (OH) 2D3 formulada de conformidad con lo descrito en esta invención. Se tomaron muestras de sangre 0, 2, 6, 8 y 12 horas después de la administración de la dosis y dichas muestras fueron analizadas para determinar los niveles de lalfa, 25- (OH) 2D3. Los resultados indican que los niveles de lalfa, 25 - (OH) 2D3 a las 2, 6 y 8 horas son incrementados en comparación con el nivel a 0 hora, pero se encuentran por debajo de los niveles considerados como causantes de hipercalcemia. Estos resultados indican una liberación retardada y prolongada de lalfa, 25- (OH)2D3. Ejemplo 15: Prueba de hipercalcemia aguda Pacientes que recibieron 2.0 microgramos de calcitriol formulado de conformidad con lo descrito en esta invención una vez al día durante 7 días. Una toma de orina durante la noche después de la primera dosis, y la sangre obtenida 24 horas después de la última dosis fueron analizadas para determinar el contenido de calcio. No se observó hipercalcemia ni hipercalciuria por lo que esto indica una baja toxicidad. Enlace con receptor de vitamina D de célula de la próstata de vitamina D activa Ejemplo 16: lalfa, 24- (OH) 2D2 El enlace de compuesto de vitamina D con receptores de vitamina D por parte de células de próstata se demuestra usando las técnicas de Skowronski et al., 136 Endocrinology (1995) 20-26, que se incorpora aquí por referencia. Líneas de células derivadas de próstata se cultivan hasta casi confluencia, se lavan y se cosechan mediante raspado. Las células se lavan por centrifugación, y la pella de células es resuspendida en una solución de sal regulada que contiene inhibidores de proteasa. Las células son fracturadas mediante sonicación mientras se enfrían en hielo. El sobrenadante obtenido mediante centrifugación de las células fracturadas al 20.7,000 x g durante 35 minutos a 4°C se ensaya para determinar el enlace. Se incuban 200 µL de extracto soluble (1-2 mg de proteína/ml de sobrenadante) con '1 nM 3H-lalfa,25- (OH)2D3 y concentraciones crecientes de lalfa, 24- (OH) 2-D2 (0.01-100 nM) durante 16-20 horas a una temperatura de 4°C. Las hormonas libres y unidas se separan con hidroxilapatita empleando procedimientos estándares. El enlace específico se calcula mediante la resta del enlace no específico obtenido en presencia de un exceso 250 veces de lalfa, 25- (OH) 2D no radioactivo del enlace total medido. Los resultados demuestran que lalfa, 25- (OH) 2D2 tiene una fuerte afinidad para el receptor de vitamina D de la próstata, lo que indica que lalfa, 24- (OH) 2D2 tiene una actividad biológica potente en cuanto a las células de la próstata. Ejemplo 17: lalfa, 24- (OH) 2D4 Se repitió el procedimiento del ejemplo 16 empleando el análogo de vitamina D activa, lalfa, 24-dihidroxivitamina D4 y se determinó el enlace específico. Los resultados demuestran que lalfa, 24- (OH) 2D tiene una fuerte afinidad para el receptor de vitamina D de la próstata, lo que indica que lalfa, 24- (OH) 2D2 tiene una actividad biológica potente en cuanto a células de la próstata. Ejemplo 18: lalfa, 25- (OH) 2D4 El procedimiento del ejemplo 16 se repitió empleando el análogo de vitamina D activa, lalfa, 25-dihidroxivitamina D4 y se determinó el enlace específico. Los resultados demuestran que lalfa, 25- (OH) 2D4 tiene una fuerte actividad para el receptor de vitamina D de la próstata," lo que indica que lalfa, 25- (OH) 2D2 tiene una actividad biológica potente en relación a las células de la próstata. Inhibición de la proliferación de células de próstata por vitamina D activa Ejemplo 19: lalfa, 24- (OH) 2D2 La inhibición de la proliferación de células se demuestra empleando las técnicas de Skowronski et al., 132 Endocrinology (1993) 1952-1960 y 136 Endocrinology (1995) 20- 26, ambos incorporándose aquí por referencia. Las líneas de células LNCaP y PC-3, que se derivan de adeonocarcinoma de próstata humana, se siembran en platos de cultivo de tejido de seis pozos a una densidad de aproximadamente 50,000 células/plato. Después de la fijación de las células y de su estabilización, aproximadamente 2-3 días, el medio es rellenado con medio que contiene el vehículo o bien análogo de vitamina D activa, lalfa, 24- (OH) 2D2 a concentraciones de 10"11 a 10-7 M. Se reemplaza el medio que contiene el análogo de prueba o el vehículo cada 3 días. Después de 6-7 días, el medio es removido, y se enjuagan las células, las cuales son precipitadas con ácido tricloroacético al 5% frío, y se lavan con etanol frío. Las células son solubilizadas con hidróxido de sodio 0.2N, y la cantidad de ADN se determina por procedimientos estándares. Los resultados muestran que los cultivos incubados con lalfa, 24- (OH) 2D2 de conformidad con la presente invención tienen un número significativamente menor de células que los cultivos de control. Ejemplo 20: lalfa, 24- (OH) 2D4 Se repite el procedimiento del ejemplo 19 empleando el análogo de vitamina D activa, lalfa, 24- (OH) 2D4 y se determina el número de células. Los cultivos incubados con lalfa, 24- (OH)2D4 tienen un número significativamente menor de células que los cultivos de control. Ejemplo 21: lalfa, 25- (OH) 2D4 Se repite el procedimiento del ejemplo 19 empleando el análogo de vitamina D activa, lalfa, 25- (OH) 2D4 y se determina el número de células. Los cultivos incubados con lalfa, 25- (OH)2D4 tienen un número significativamente menor de células que los cultivos de control. Estimulación de la diferenciación de células de próstata por vitamina D activa Ejemplo 22: lalfa, 24- (OH) 2D2 Empleando las técnicas de Skowronski et al., 132 Endocrinology (1993) 1952-1960 y 136 Endocrinology (1995) 20-26, que se incorporan ar±>as aquí por referencia, células de la línea de células LNCaP, que se deriva de un adenocarcinoma de próstata metastásico humano y conocido por expresar PSA, se siembran en platos de cultivo de tejido de seis pozos a una densidad de aproximadamente 50,000 células/plato. Después de la fijación y estabilización de las células, aproximadamente 2-3 días, el medio es rellenado con un medio que contiene vehículo o bien el análogo de vitamina D activa, lalfa, 24- (OH) 2D2 a concentraciones de 10"11 a 10"7 M. Después de 6-7 días, el medio es removido y almacenado a una temperatura de -20°C para análisis de antígeno específico de la próstata (PSA) . Las células son enjuagadas, precipitadas, y se determina la cantidad de .ADN por procedimientos estándares. Las células son resuspendidas y se determina el número de células. Se mide PSA por métodos estándares conocidos. Cultivos incubados con lalfa, 24- (OH) 2D2 tienen significativamente más PSA gue cultivos de control cuando se expresan como masa de PSA/célula. Ejemplo 23: lalfa, 24- (OH) 2D4 Se repitió el procedimiento del ejemplo 22 excepto que el análogo de vitamina D activa es lalfa, 254 (OH)2D. Se midió el PSA y los cultivos incubados con lalfa, 24- (OH) 2D4 tienen significativamente más PSA que los cultivos de control cuando se expresa como masa de PSA/célula. Ejemplo 24: lalfa, 25- (OH) 2D4 Se repitió el procedimiento del ejemplo 22, excepto que el análogo de vitamina D activa es lalfa, 25- (OH) 2D4. Se midió el PSA y los cultivos incubados con lalfa, 25- (OH) 2D tienen significativamente más PSA que los cultivos de control cuando se expresa como masa de PSA/célula. Estudios clínicos Ejemplo 25: lalfa, 24- (OH) 2preD2 Pacientes con cáncer de próstata andrógeno independiente avanzado participan en un estudio de etiqueta abierta de lalfa, 24- (OH) 2preD2. los pacientes que fueron integrados al estudio tenían una edad de al menos 40 años, presentaban evidencia histológica de adenocarcinoma de la próstata, y presentaban una enfermedad progresiva que había respondido previamente a intervención hormonal o intervenciones hormonales. Al ser admitidos en el estudio, los pacientes empezaron un curso de terapia con lalfa, 24- (OH) 2preD2 oral de una duración de 26 semanas, suspendiendo el uso previo de complementos de calcio, complementos de vitamina D, y terapias de reemplazo de hormona de vitamina D. Durante el tratamiento, los pacientes fueron monitoreados a intervalos regulares para determinar lo siguiente: (1) hipercalcemia, hiperfosfatemia, hipercalciuria, hiperfosfaturia y otra toxicidad; (2) evidencia de cambios en la progresión de la enfermedad metastásica; y (3) cumplimiento con la dosificación del fármaco de prueba prescrito. El estudio se llevó a cabo en dos fases. Durante la primera fase, se determinó la dosificación tolerada máxima (MTD) de lalfa, 24- (OH) 2preD2 oral diaria mediante la administración de dosificaciones progresivamente más altas a grupos sucesivos de pacientes. Todas las dosis se administran en la mañana antes del desayuno. El primer grupo de pacientes fue tratado con 25 µg de lalfa, 24- (OH) 2preD2. Grupos subsecuentes de pacientes fueron tratados con 50, 75 y 100 µg/día. La dosificación prosigue de manera interrumpida durante todo el lapso del estudio a menos que el nivel de calcio en el suero rebase 11.6 mg/dL o bien a menos que se observe otra toxicidad de grado 3 o 4, en cuyo caso se suspende la administración hasta la resolución del efecto tóxico observado o de los efectos tóxicos observados y después se reanuda en un nivel que ha sido disminuido en 10.0 µg. Los resultados de la primera fase del estudio muestran que la MTD para lalfa, 24- (OH) 2preD2 se encuentra por encima de 20.0 µg/día, un nivel que es de 10 a 40 veces más elevado que el obtenido con lalfa, 25- (OH) 2D3. El análisis de muestras de sangre recogidas a intervalos regulares de los pacientes que participaron en el ensayo reveló que los niveles de lalfa, 24- (OH) 2D2 en circulación se elevan proporcionalmente a la dosificación administrada, elevándose a niveles máximos muy por encima de 100 pg/mL en las dosificaciones más elevadas, y que los niveles circulantes de lalfa, 25- (OH) 2D3 son suprimidos, frecuentemente hasta niveles indetectables. Los niveles de calcio en el suero y en la orina son elevados de manera correspondiente a la dosis. Los pacientes tratados con la MTD de lalfa, 24- (OH) 2preD2 durante al menos seis meses reportan una disminución significativa del dolor óseo asociado con una enfermedad metastásica. Durante la segunda fase, los pacientes son tratados con lalfa, 24- (OH) 2preD2 durante 24 meses a 0.5 y 1.0 veces la MTD. Después de dos años, exploraciones de CAT, rayos X, y exploraciones óseas empleadas para evaluar la progresión de la enfermedad metastásica muestran una enfermedad estable o bien una remisión parcial en la dosificación más baja y una remisión parcial o total en la dosificación más elevada. Ejemplo 26: DSR lalfa, 25- (OH) 2D2 El estudio del ejemplo 25 se repite para el compuesto de vitamina D activa, lalfa, 25- (OH) 2D2 en forma DSR. Los resultados del estudio de fase 1 indican que los pacientes tratados con la MTD de DSR lalfa, 25- (OH) 2D2 durante al menos 6 meses reportan que el dolor óseo asociado con una enfermedad metastásica es significativamente menor. Los resultados del estudio de fase dos indican que después de dos años, exploraciones de CAT, rayos X, y exploraciones óseas empleadas para evaluar la progresión de la enfermedad metastásica muestran una enfermedad estable o bien una remisión parcial en la dosificación más baja y una remisión parcial o completa en la dosificación más elevada. En resumen, la presente invención ofrece métodos para el tratamiento de enfermedades prostéticas como por ejemplo cáncer de la próstata así como hiperplasia prostática mediante la administración de una formulación SR o bien DSR oral de lalfa-hidroxiprevitamina D o bien vitamina D activada o combinaciones de las mismas. Las formulaciones de la presente invención reducen significativamente el riesgo de hipercalcemia y de hipercalciuria asociado con las formulaciones conocidas a la fecha de vitamina D activada. Además, la formulación de la presente invención produce niveles más altos de vitamina D activada durante un tiempo prolongado mayor por admisión en comparación con lo que se obtiene con las formulaciones orales conocidas hasta la fecha de vitamina D activada, lo que resulta en niveles sanguíneos mejorados de vitamina D activa que alcanzan las células enfermas de la próstata. Mientras se ha descrito y ejemplificado la presente invención con cierta especificidad, los expertos en la materia observarán varias modificaciones, incluyendo variaciones, adiciones y omisiones que pueden hacerse en relación con lo que se ha descrito. Por consiguiente, se contempla que dichas modificaciones estén también abarcadas por la presente invención y que el alcance de la presente invención es limitado solamente por la interpretación legal más amplia de las reivindicaciones anexas.

Claims (1)

1. REIVINDICACIONES Un método para inhibir la actividad celular hiperproliferativa de cáncer prostético humano o * hiperplasia, que comprende la administración a un paciente que padece de dicha enfermedad y que tiene un estómago y un intestino delgado, de una cantidad efectiva de un fármaco oral que incluye un compuesto de vitamina D que es lalfa-hidroxiprevitamina D o una vitamina D activa contenida en una matriz, dicha matriz tiene un medio para enlazar de manera desprendible y para enlazar de manera controlable dicha vitamina D activa durante un período prolongado de tiempo. El método de la reivindicación 1, donde dicho fármaco oral comprende además un revestimiento entérico que evita la liberación de dicho compuesto de vitamina D, dicho revestimiento es resistente a la disolución en el estómago pero presenta predisposición a la disolución en el intestino para evitar la liberación de dicho compuesto de vitamina D hasta que el fármaco esté en el intestino. El método de la reivindicación 2, donde el intestino delgado tiene porciones próxima, media y distal, y dicho revestimiento entérico es además resistente a la disolución en la porción próxima del intestino pero predispuesto a la disolución en la porción media y distal del intestino con el objeto de evitar la liberación de dicho compuesto de vitamina D hasta que dicho fármaco haya viajado hacia la porción media del intestino. El método de la reivindicación 2, donde dicho revestimiento entérico es resistente a la disolución en un entorno que tiene un pH menor que 6.0. El método de la reivindicación 3, donde dicho revestimiento entérico es resistente a la disolución en un entorno que tiene un pH menor que 6.0. El método de la reivindicación 1, donde dicha lalfa- hidroxiprevitamina D es lalfa, 25-dihidroxiprevitamina D3, lalfa, 24-dihidroxiprevitamina D3, lalfa, -hidroxiprevitamina D3, lalfa, 25-dihidroxiprevitamina D2, lalfa, 24-dihidroxiprevitamina D2, lalfa-hidroxiprevitamina D2, lalfa, 24-dihidroxiprevitamina D4, lalfa, 25-dihidroxiprevitamina D4 o bien lalfa-hidroxiprevitamina D4. El método de la reivindicación 1, donde dicha vitamina D activa es lalfa, 25-dihidroxivitamina D3, lalfa, 24-dihidroxivitamina D3, lalfa-hidroxivitamina D3, lalfa, 25-dihidroxivitamina D, lalfa, 24-dihidroxiprevitamina D2, lalfa-hidroxiprevitamina D2, lalfa, 24-dihidroxiprevitamina D4, ialfa, 24-dihidroxivitamina D, lalfa-hidroxivitamina D2, lalfa, 24-dihidroxivitamina D, lalfa, 25-dihidroxivitamina D4 o bien lalfa-hidroxivitamina D4. 8. Un método para el tratamiento de enfermedades prostéticas caracterizadas por una diferenciación anormal de células o proliferación anormal de células, que comprende la administración a un ser humano de sexo masculino que requiere de dicho tratamiento de una cantidad efectiva para inhibir la proliferación de un fármaco oral que es un compuesto de lalfa-hidroxiprevitamina D o bien un compuesto de vitamina D contenido en una matriz, dicho compuesto de vitamina D es una vitamina D activa o bien una lalfa-hidroxiprevitamina D, dicha matriz tiene medios para el enlace liberable y el enlace controlable de dicho compuesto de vitamina D durante un período prolongado de tiempo. 9. El método de la reivindicación 8, donde dicha cantidad de inhibición de proliferación de lalfa-hidroxiprevitamina D es de 0.01 µg/kg/día a 2.0 µg/kg/día. 10. El método de la reivindicación 8, donde dicha cantidad efectiva para la inhibición de la proliferación de vitamina D activa es de 0.01 µg/kg/día a 2.0 µg/kg/día. 11. Un método para el tratamiento del cáncer de próstata humano, que comprende la administración a un paciente de sexo masculino que tiene cáncer de próstata de una cantidad efectiva de una composición que tiene un primer agente anticáncer que es lalfa-hidroxiprevitamina D, una forma de liberación prolongada de un compuesto de vitamina D activa o bien una forma de liberación retardada, prolongada de un compuesto de vitamina D activa. 12. El método de la reivindicación 11, donde dicha composición tiene un riesgo de hipercalcemia sustancialmente menor que el riesgo de lalfa, 25- dihidroxivitamina D3. 13. El método de la reivindicación 11, donde dicha composición se administra en una mezcla que incluye un segundo agente anticáncer seleccionado dentro del grupo que consiste de fosfato de estramustina, prednimustina, cisplatina, 5-fluoro-uracilo, melfalano, hidroxiurea, mitomicina, idarubicina, metotrexato, adriamicina y daunomicina. 14. El método de la reivindicación 13, donde dicho segundo fármaco anticáncer se encuentra presente en la mezcla dentro de un rango de aproximadamente 0.002 a 0.002 µg/kg/día. 15. Una composición farmacéutica, que comprende (a) un primer agente anticáncer que es un compuesto de vitamina D seleccionado dentro del grupo que consiste de lalfa-hidroxiprevitamina D, una vitamina D activa SR, una vitamina D activa DSR, y combinaciones de los mismos; y (b) un agente seleccionado dentro del grupo que consiste de (i) un segundo agente anticáncer, (ii) un agente óseo, (iii) un agente de control de andrógeno, (iv) un inhibidor de 5alfa-reductasa y combinaciones de los mismos . 16. La composición farmacéutica de la reivindicación 15, donde dicho compuesto de vitamina D activa se selecciona dentro del grupo que consiste de lalfa, 25- dihidroxivitamina D3, lalfa, 24-dihidroxivitamina D3, lalfa-hidroxivitamina D3, lalfa, 25-dihidroxivitamina D2, lalfa, 24-dihidroxivitamina D2, lalfa-hidroxivitamina D2, lalfa, 24-dihidroxivitamina D4, lalfa, 25-dihidroxivitamina D4 y lalfa-hidroxivitamina D4. 7. La composición farmacéutica de la reivindicación 15, donde dicho compuesto de lalfa-hidroxiprevitamina D se selecciona dentro del grupo que consiste de lalfa, 25- dihidroxiprevitamina D3, lalfa, 24-dihidroxiprevitamina D3, lalfa, -hidroxiprevitamina D3, lalfa, 25- dihidroxiprevitamina D2, lalfa, 24-dihidroxiprevitamina D2, lalfa-hidroxiprevitamina D2, lalfa, 24- dihidroxiprevitamina D4, lalfa, 25-dihidroxiprevitamina D4 y lalfa-'hidroxiprevitamina D4. 8. La composición farmacéutica de la reivindicación 15, donde dicho segundo agente anticáncer se selecciona dentro del grupo que consiste de fosfato de estramustina, prednimustina, cisplatina, 5-fluoro-uracilo, melfalano, hidroxiurea, mitomicina, idarubicina, metotrexato, adriamicina y daunomicina. 19. La composición farmacéutica de la reivindicación 15, donde dicho compuesto de vitamina D activa se encuentra presente en un rango de dosificación de aproximadamente 0.01 µg/kg/día a aproximadamente 2.0 µg/kg/día. 20. La composición farmacéutica de la reivindicación 15, donde dicho compuesto de lalfa-hidroxiprevitamina D se encuentra presente en un rango de dosificación de aproximadamente 0.01 µg/kg/día a aproximadamente 2.0 µg/kg/día. 21. La composición farmacéutica de la reivindicación 15, donde dicho agente de control de andrógeno se selecciona dentro del grupo que consiste de un estrógeno, análogo de LHRH, un antiestrógeno y un antiandrógeno . 22. La composición farmacéutica de la reivindicación 15, donde dicho inhibidor de enzima 5alfa-reductasa es finasterida. 23. La composición farmacéutica de la reivindicación 15, donde dicho agente óseo se selecciona dentro del grupo que consiste de un estrógeno conjugado, un antiestrógeno, calcitonina, fluoruro de sodio, un bisfosfonato, un complemento de calcio, cobalamina, toxina de tos ferina y boro. 24. Un método para el tratamiento de un ser humano con el objeto de aliviar la actividad celular hiperproliferativa de cáncer prostético o hiperplasia, que comprende la administración a un ser humano de sexo masculino que requiere de la misma de una cantidad terapéuticamente efectiva de lalfa-hidroxiprevitamina D o bien vitamina D activa en una formulación que es una forma de liberación prolongada o bien una forma de liberación retardada, prolongada, con el objeto de disminuir o estabilizar el cáncer de la próstata o bien una actividad celular hiperplásica y con un riesgo menor de hipercalcemia.