CN114728875A

CN114728875A - 金属盐及其用途

Info

Publication number: CN114728875A
Application number: CN202080006947.7A
Authority: CN
Inventors: S·瓦尔德; E·J·马丁内斯; S·斯特拉特福德; A·比伊斯特; J·本森; J·拉夫瑞
Original assignee: Insbona
Current assignee: Insbona
Priority date: 2019-12-13
Filing date: 2020-12-11
Publication date: 2022-07-08
Also published as: US20220041541A1; WO2021119397A9; EP4073025B1; AU2020401286A1; US11459292B2; US20210179539A1; TW202136188A; EP4073025A1; ZA202206588B; EP4073025A4; MX2022007164A; US20230095288A1; JP2023509845A; CA3161274A1; US11878956B2; US11174220B2; WO2021119397A1

Abstract

本发明涉及表现出改善的物理性能和稳定性的2‑[3‑[(3R)‑3‑[[2‑氯‑3‑(三氟甲基)苯基]甲基‑(2,2‑二苯基乙基)氨基]丁氧基]苯基]乙酸的金属盐。本发明也涉及包含有效量的金属盐的药物组合物，以及治疗癌症的方法，所述方法包括给有此需要的对象施用包含本发明的盐的药物组合物。

Description

金属盐及其用途

背景

肝X受体(LXR)是一种核受体转录因子。已经发现，LXR调节剂可用于治疗多种疾病，包括癌症。需要提供具有改善的稳定性和物理性能的这样的化合物的盐。

发明概述

本发明提供了LXRβ激动剂的金属盐。本发明还提供了制备LXRβ激动剂的这样的金属盐的方法，包括所述金属盐的药物组合物，和用这样的组合物治疗癌症的方法。

因此，在一个方面，本发明表征了2-[3-[(3R)-3-[[2-氯-3-(三氟甲基)苯基]甲基-(2,2-二苯基乙基)氨基]丁氧基]苯基]乙酸(化合物1)的金属盐(例如，药学上可接受的金属盐)。

在某些实施方案中，所述2-[3-[(3R)-3-[[2-氯-3-(三氟甲基)苯基]甲基-(2,2-二苯基乙基)氨基]丁氧基]苯基]乙酸的金属盐是多价金属盐。

在某些实施方案中，所述2-[3-[(3R)-3-[[2-氯-3-(三氟甲基)苯基]甲基-(2,2-二苯基乙基)氨基]丁氧基]苯基]乙酸的金属盐是锌盐，例如，2:1 (化合物1:锌)盐。

在某些实施方案中，所述2-[3-[(3R)-3-[[2-氯-3-(三氟甲基)苯基]甲基-(2,2-二苯基乙基)氨基]丁氧基]苯基]乙酸的金属盐是铝盐，例如，3:1 (化合物1:铝)盐。

在某些实施方案中，所述2-[3-[(3R)-3-[[2-氯-3-(三氟甲基)苯基]甲基-(2,2-二苯基乙基)氨基]丁氧基]苯基]乙酸的金属盐是铋盐，例如，3:1 (化合物1:铋)盐。

在某些实施方案中，所述2-[3-[(3R)-3-[[2-氯-3-(三氟甲基)苯基]甲基-(2,2-二苯基乙基)氨基]丁氧基]苯基]乙酸的金属盐是钙盐，例如，2:1 (化合物1:钙)盐。

在某些实施方案中，所述金属盐是无定形的。在某些实施方案中，所述金属盐(例如，无定形锌盐)具有如通过傅立叶变换红外光谱法(FTIR)所测量的在约1590±10 cm^-1处相对于游离酸增加强度的峰及在约1710±10 cm^-1处相对于游离酸降低强度的峰。在某些实施方案中，所述金属盐具有如通过热重量分析法所测量的小于1%的因分解的质量损失。

在另一个方面，本发明表征了生产化合物1的锌盐(例如，2:1锌盐)的方法。该方法包括将化合物1或其盐(例如，1:1钠盐或游离化合物)和锌盐(例如，氯化锌或乙酸锌)以足以产生化合物1的锌盐的量组合。

在生产锌盐的方法的某些实施方案中，所述方法包括将化合物1或其盐和锌盐溶解在溶剂中以形成混合物。在某些实施方案中，所述溶剂是水。在某些实施方案中，所述溶剂是有机溶剂(例如，甲醇)和水的混合物(例如，按体积计9:1的有机溶剂和水)。在生产锌盐的方法的某些实施方案中，所述方法进一步包括使混合物的温度在环境温度和40℃之间循环。在生产锌盐的方法的某些实施方案中，其中所述循环进行24小时。

在另一个方面，本发明表征了通过前述方法中的任一种生产的化合物1的药学上可接受的锌盐。

在另一个方面，本发明表征了生产化合物1的铝盐(例如，3:1铝盐)的方法。该方法包括将化合物1或其盐(例如，1:1钠盐或游离化合物)和铝盐(例如，硫酸铝)以足以产生化合物1的铝盐的量组合。

在另一个方面，本发明表征了药物组合物，其含有前述金属盐中的任一种和药学上可接受的赋形剂。

在某些实施方案中，所述药物组合物包括小于1.5重量%的钠。在某些实施方案中，所述药物组合物基本上不含有化合物1的1:1钠盐。在某些实施方案中，所述药物组合物是在单位剂型中。

在另一个方面，本发明表征了治疗癌症的方法。该方法包括施用有效量的前述盐或药物组合物中的任一种。

在治疗癌症的方法的某些实施方案中，所述对象具有已经对以前施用的免疫疗法应答失败的癌症(例如，尽管用免疫疗法治疗，所述对象的癌症已经进展)。

在治疗癌症的方法的某些实施方案中，所述癌症对免疫疗法具有抗性(例如，所述癌症已经被确定对免疫疗法具有抗性诸如通过遗传标记或样品中MDSC (例如，单核细胞和/或粒细胞MDSC)的水平，或可能对免疫疗法具有抗性，诸如已经对免疫疗法应答失败的癌症)。

在另一个方面，本发明表征了治疗对象中已经对免疫疗法应答失败的癌症的方法。该方法包括与免疫疗法组合地给所述对象施用有效量的前述盐或药物组合物中的任一种。

在另一个方面，本发明表征了治疗对象中对免疫疗法具有抗性的癌症的方法。该方法包括与免疫疗法组合地给所述对象施用有效量的前述盐或药物组合物中的任一种。

在治疗癌症的任何方法的某些实施方案中，所述癌症是乳腺癌、结肠癌、肾细胞癌、肺癌(例如，非小细胞肺癌)、肝细胞癌、胃癌、卵巢癌、胰腺癌、食管癌、前列腺癌、肉瘤、胶质母细胞瘤、弥漫性大B细胞性淋巴瘤、白血病或黑素瘤。在某些实施方案中，所述癌症是转移性癌症。在治疗癌症的任何方法的某些实施方案中，所述有效量是有效地抑制癌症的转移性定植的量。

在治疗癌症的任何方法的某些实施方案中，所述癌症是药物抗性的癌症或已经对先前疗法应答失败(例如，对先前治疗具有抗性的癌症，或已经对先前治疗应答失败的癌症，所述先前治疗使用威罗菲尼、达卡巴嗪、CTLA-4抑制剂、PD-1抑制剂、干扰素疗法、BRAF抑制剂、MEK抑制剂、放射疗法、替莫唑胺、伊立替康、CAR-T疗法、赫赛汀、perjeta、他莫昔芬、希罗达、多西紫杉醇、铂试剂诸如卡铂、紫杉烷类诸如紫杉醇和多西他赛、ALK抑制剂、MET抑制剂、力比泰、注射用紫杉醇、阿霉素、吉西他滨、阿瓦斯丁、halaven、奈拉替尼、PARP抑制剂、brilanestrant、mTOR抑制剂、托泊替康、健择、VEGFR2抑制剂、叶酸盐受体拮抗剂、demcizumab、福他布林或PDL-1抑制剂)。

在治疗癌症的任何方法的一个实施方案中，所述免疫疗法当存在时是CTLA-4抑制剂、PD-1抑制剂、PD-L1抑制剂或过继性T-细胞转移疗法。在某些实施方案中，所述免疫疗法包括PD-1抑制剂诸如PD-1抗体、PD-L1抑制剂诸如PD-L1抗体、CTLA-4抑制剂诸如CTLA-4抗体、CSF-1R抑制剂、IDO抑制剂、A1腺苷抑制剂、A2A腺苷抑制剂、A2B腺苷抑制剂、A3A腺苷抑制剂、精氨酸酶抑制剂或HDAC抑制剂。在某些实施方案中，所述免疫疗法包括PD-1抑制剂(例如，纳武单抗、派姆单抗、皮地利珠单抗、BMS 936559和阿特珠单抗)。在某些实施方案中，所述免疫疗法包括PD-L1抑制剂(例如，阿特珠单抗和度伐单抗)。在某些实施方案中，所述免疫疗法包括CTLA-4抑制剂(例如，伊匹木单抗)。在某些实施方案中，所述免疫疗法包括CSF-1R抑制剂(例如，吡昔替尼和4-(2,4-二氟苯胺基)-7-乙氧基-6-(4-甲基哌嗪-1-基)喹啉-3-甲酰胺)。在某些实施方案中，所述免疫疗法包括IDO抑制剂(例如，去甲哈尔满、迷迭香酸和α-甲基-色氨酸)。在某些实施方案中，所述免疫疗法包括A1腺苷抑制剂(例如，8-环戊基-1,3-二甲基黄嘌呤、8-环戊基-1,3-二丙基黄嘌呤、8-苯基-1,3-二丙基黄嘌呤、巴米茶碱、BG-9719、tonapofylline、FK-453、FK-838、罗咯茶碱或N-0861)。在某些实施方案中，所述免疫疗法包括A2A腺苷抑制剂(例如，ATL-4444、伊曲茶碱、MSX-3、普瑞丁奈、SCH-58261、SCH-412348、SCH-442416、2-丁基-9-甲基-8-(三唑-2-基)嘌呤-6-胺、VER-6623、VER-6947、VER-7835、viadenant或ZM-241,385)。在某些实施方案中，所述免疫疗法包括A2B腺苷抑制剂(例如，N-[5-(1-环丙基-2,6-二氧代-3-丙基-7H-嘌呤-8-基)吡啶-2-基]-N-乙基吡啶-3-甲酰胺、3-乙基-1-丙基-8-[1-[[3-(三氟甲基)苯基]甲基]吡唑-4-基]-7H-嘌呤-2,6-二酮、MRS-1706、MRS-1754、N-[2-[[2-苯基-6-[4-(3-苯基丙基)哌嗪-1-羰基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基]氨基]乙基]乙酰胺、PSB-603、PSB-0788或PSB-1115)。在某些实施方案中，所述免疫疗法包括A3A腺苷抑制剂(例如，KF-26777、MRS-545、MRS-1191、MRS-1220、MRS-1334、6-乙基-5-乙基硫烷基羰基-2-苯基-4-丙基吡啶-3-甲酸丙酯、MRS-3777、MRE-3005-F20、MRE-3008-F20、PSB-11、OT-7999、VUF-5574和SSR161421)。在某些实施方案中，所述免疫疗法包括精氨酸酶抑制剂(例如，精氨酸酶抗体、(2s)-(+)-氨基-5-碘乙酰氨基戊酸、NG-羟基-L-精氨酸、(2S)-(+)-氨基-6-碘乙酰氨基己酸或(R)-2-氨基-6-二羟硼基-2-(2-(哌啶-1-基)乙基)己酸。在某些实施方案中，所述免疫疗法包括HDAC抑制剂(例如，丙戊酸、SAHA或罗米地辛)。

在治疗癌症的任何方法的另一个实施方案中，所述方法进一步包括给所述对象施用额外的抗癌症疗法(例如，抗增殖剂)。

在特定实施方案中，所述抗增殖剂是：化疗或细胞毒性剂、分化诱导剂(例如，视黄酸、维生素D、细胞因子)、激素剂、免疫学试剂或抗血管生成剂。化疗和细胞毒性剂包括、但不限于：烷化剂、细胞毒性的抗生素、抗代谢药、长春花生物碱、依托泊苷和其它(例如，紫杉醇、泰素、多西他赛、泰索帝、顺铂)。具有抗增殖活性的额外化合物的列表可以参见：L.Brunton, B. Chabner和B. Knollman (编). Goodman and Gilman’s ThePharmacological Basis of Therapeutics, 第十二版, 2011, McGraw Hill Companies,New York, NY。

在某些实施方案中，所述抗增殖剂是PD-1抑制剂、VEGF抑制剂、VEGFR2抑制剂、PD-L1抑制剂、BRAF抑制剂、CTLA-4抑制剂、MEK抑制剂、ERK抑制剂、威罗菲尼、达卡巴嗪、曲美替尼、达拉菲尼、度伐单抗、mTOR抑制剂、CAR-T疗法、阿比特龙、恩杂鲁胺、阿帕鲁胺、5-氟尿嘧啶(5-FU)、FOLFOX (即，亚叶酸、5-氟尿嘧啶和奥沙利铂)、FOLFIRI (即，亚叶酸、5-氟尿嘧啶和伊立替康)、赫赛汀、希罗达、PD-1抗体(例如，派姆单抗或纳武单抗)、PD-L1抗体、CTLA-4抗体(例如，伊匹木单抗)、雷莫芦单抗、rindopepimut、glembatumumab、vedotin、ANG1005和/或ANG4043。

在治疗癌症的任何方法的某些实施方案中，所述癌症是肾细胞癌，且所述抗增殖剂是PD-1抑制剂、PD-L1抑制剂或mTOR抑制剂。在其它实施方案中，所述癌症是弥漫性大B细胞性淋巴瘤且所述抗增殖剂是CAR-T疗法。在某些实施方案中，所述癌症是前列腺癌且所述抗增殖剂是阿比特龙、恩杂鲁胺或阿帕鲁胺。在某些实施方案中，所述癌症是肝细胞癌、胃癌或食管癌且所述抗增殖剂是5-FU、FOLFOX、FOLFIRI、赫赛汀或希罗达。在某些实施方案中，所述癌症是肉瘤且所述抗增殖剂是吉西他滨。在其它实施方案中，所述癌症是胰腺癌且所述抗增殖剂是伊立替康、顺铂、注射用紫杉醇、紫杉烷(例如，紫杉醇或多西他赛)或卡培他滨。

治疗癌症的方法可以进一步包括施用抗增殖剂诸如烷化剂、铂试剂、抗代谢药、拓扑异构酶抑制剂、抗肿瘤抗生素、抗有丝分裂剂、芳香酶抑制剂、胸苷酸合酶抑制剂、DNA拮抗剂、法呢基转移酶抑制剂、泵抑制剂、组蛋白乙酰基转移酶抑制剂、金属蛋白酶抑制剂、核糖核苷还原酶抑制剂、TNFα激动剂/拮抗剂、内皮缩血管肽A受体拮抗剂、视黄酸受体激动剂、免疫-调节剂、激素和抗激素剂、光动力剂、酪氨酸激酶抑制剂、反义化合物、皮质类固醇、HSP90抑制剂、蛋白体抑制剂(例如，marizomib)、CD40抑制剂、抗-CSI抗体、FGFR3抑制剂、VEGF抑制剂、MEK抑制剂、细胞周期蛋白D1抑制剂、NF-kB抑制剂、蒽环类抗生素、组蛋白脱乙酰基酶、驱动蛋白抑制剂、磷酸酶抑制剂、COX2抑制剂、mTOR抑制剂、神经钙蛋白拮抗剂、IMiD和/或用于治疗增殖性疾病的其它药剂。

在治疗癌症的任何方法的某些实施方案中，所述癌症是乳腺癌诸如三重阴性的乳腺癌、结肠癌、肾细胞癌、肺癌(例如，非小细胞肺癌)、肝细胞癌、胃癌、卵巢癌、胰腺癌、食管癌、前列腺癌、肉瘤、胶质母细胞瘤、弥漫性大B细胞性淋巴瘤、白血病(例如，急性髓样白血病)或黑素瘤。在治疗癌症的任何方法的某些实施方案中，所述癌症是黑素瘤。在治疗癌症的任何方法的某些实施方案中，所述癌症是乳腺癌。在前述方法中的任一种的某些实施方案中，癌症是肾细胞癌。在治疗癌症的任何方法的某些实施方案中，所述癌症是胰腺癌。在治疗癌症的任何方法的某些实施方案中，所述癌症是非小细胞肺癌。在治疗癌症的任何方法的某些实施方案中，所述癌症是结肠癌。在治疗癌症的任何方法的某些实施方案中，所述癌症是卵巢癌。在治疗癌症的任何方法的某些实施方案中，所述癌症是胶质母细胞瘤。在治疗癌症的任何方法的某些实施方案中，所述癌症是前列腺癌。在治疗癌症的任何方法的某些实施方案中，所述癌症是弥漫性大B细胞性淋巴瘤。在某些实施方案中，所述癌症是白血病(例如，急性髓样白血病)。

在治疗癌症的任何方法的特定实施方案中，所述癌症是对先前治疗具有抗性的或已经对先前治疗应答失败的黑素瘤(例如，转移性黑素瘤)，所述先前治疗使用威罗菲尼、达卡巴嗪、干扰素疗法、CTLA-4抑制剂、BRAF抑制剂、MEK抑制剂、PD1抑制剂、PDL-1抑制剂和/或CAR-T疗法。在治疗癌症的任何方法的某些实施方案中，所述癌症是对先前治疗具有抗性或已经对先前治疗应答失败的胶质母细胞瘤，所述先前治疗使用替莫唑胺、放射疗法、阿瓦斯丁、伊立替康、VEGFR2抑制剂、CAR-T疗法和/或mTOR抑制剂。在治疗癌症的任何方法的某些实施方案中，所述癌症是对先前治疗具有抗性或已经对先前治疗应答失败的非小细胞肺癌诸如转移性非小细胞肺癌(例如，EGFR-野生型非小细胞肺癌和/或鳞状非小细胞肺癌)，所述先前治疗使用EGFR抑制剂、铂试剂(例如，卡铂)、阿瓦斯丁、ALK抑制剂、MET抑制剂、紫杉烷(例如，紫杉醇和/或多西他赛)、健择、力比泰、放射疗法、PD-1抑制剂、PD-L1抑制剂和/或CAR-T疗法。在治疗癌症的任何方法的某些实施方案中，所述癌症是对先前治疗具有抗性或已经对先前治疗应答失败的乳腺癌(例如，三重阴性的乳腺癌)，所述先前治疗使用赫赛汀、perjeta、他莫昔芬、希罗达、多西他赛、卡铂、紫杉醇、注射用紫杉醇、阿霉素、吉西他滨、阿瓦斯丁、halaven、奈拉替尼、PARP抑制剂、PD-1抑制剂、PD-L1抑制剂、CAR-T疗法、阿帕鲁胺和/或mTOR抑制剂。在治疗癌症的任何方法的某些实施方案中，所述癌症是对先前治疗具有抗性或已经对先前治疗应答失败的卵巢癌(例如，晚期卵巢癌)，所述先前治疗使用PARP抑制剂、阿瓦斯丁、铂试剂诸如卡铂、紫杉醇、多西他赛、托泊替康、健择、VEGR2抑制剂、叶酸盐受体拮抗剂、PD-1抑制剂、PD-L1抑制剂、CAR-T疗法、demcizumab和/或福他布林。

在治疗癌症的任何方法的某些实施方案中，所述额外的抗癌疗法，如果存在的话，包括化学疗法。

在治疗癌症的任何方法的某些实施方案中，所述化学疗法包括多西他赛。在某些实施方案中，所述方法包括每七天一次给对象施用有效量的多西他赛。在某些实施方案中，所述多西他赛的有效量是至少28 mg/m²。在某些实施方案中，所述多西他赛的有效量是约28 mg/m²至约35 mg/m²。

在治疗癌症的任何方法的某些实施方案中，所述额外的抗癌疗法包括化学疗法和免疫疗法。在治疗癌症的任何方法的某些实施方案中，所述抗癌疗法包括卡铂或顺铂、培美曲塞和派姆单抗。在某些实施方案中，所述方法包括每21天1次给所述对象施用有效量的派姆单抗。在某些实施方案中，所述派姆单抗的有效量是约200 mg。在某些实施方案中，所述方法包括每21天1次给所述对象施用有效量的卡铂或顺铂。在某些实施方案中，使用下式计算卡铂或顺铂的有效量：总剂量(mg) = (曲线下靶面积) x (对象的肾小球滤过率+25)，其中所述曲线下靶面积是4 mg/mL*min至6 mg/mL*min，且通过Cr-EDTA清除测量对象的肾小球滤过率。在某些实施方案中，所述卡铂或顺铂的有效量是约300 mg/m²至约360 mg/m²。在某些实施方案中，所述方法包括每21天1次给所述对象施用有效量的培美曲塞。在某些实施方案中，所述培美曲塞的有效量是500 mg/m²。在治疗癌症的任何方法的某些实施方案中，所述方法进一步包括给所述对象施用有效量的叶酸、维生素B12和/或皮质类固醇。在某些实施方案中，所述方法包括每天2次给所述对象施用有效量的皮质类固醇持续3天，然后施用培美曲塞。

在治疗癌症的任何方法的某些实施方案中，所述方法进一步包括给所述对象施用有效量的他汀(例如，罗舒伐他汀或阿托伐他汀)。

在治疗癌症的任何方法的某些实施方案中，所述方法进一步包括给所述对象施用有效量的止吐剂(例如，昂丹司琼、格拉司琼、帕洛诺司琼、甲氧氯普胺、氟哌啶醇、地塞米松、阿瑞匹坦、福沙匹坦、劳拉西泮、屈大麻酚、丙氯拉嗪或氯丙嗪)、止泻剂(例如，阿片剂激动剂或奥曲肽)、食欲刺激剂(例如，乙酸甲地孕酮、甲氧氯普胺、屈大麻酚、泼尼松或地塞米松)、全身兴奋剂、二膦酸盐(例如，羟乙磷酸盐、氯膦酸盐、替鲁膦酸盐、帕米膦酸盐、奈立膦酸盐、opladronate、阿屈膦酸盐、伊班膦酸盐、利塞膦酸盐或唑来膦酸盐)、促性腺激素释放激素激动剂(例如，布舍瑞林、组氨瑞林、亮丙瑞林、曲普瑞林、戈舍瑞林或那法瑞林)和/或生长因子(例如，非格司亭)。

在治疗癌症的任何方法的某些实施方案中，所述癌症对抗癌疗法(例如，含铂的化学疗法、PD-1抑制剂、PD-L1抑制剂、CTLA-4抑制剂、抗有丝分裂剂、拓扑异构酶抑制剂、抗代谢药、血管生成抑制剂、激酶抑制剂和/或烷化剂)具有抗性。在治疗癌症的任何方法的某些实施方案中，在用抗癌疗法(例如，含铂的化学疗法、PD-1抑制剂、PD-L1抑制剂、血管生成抑制剂、激酶抑制剂和/或烷化剂)治疗时或以后，所述癌症进展。在治疗癌症的任何方法的某些实施方案中，所述癌症已经被确定为，或被预测为，对抗癌疗法(例如，PD-1抑制剂、PD-L1抑制剂、CTLA-4抑制剂、拓扑异构酶抑制剂、抗代谢药、血管生成抑制剂、激酶抑制剂和/或烷化剂)具有抗性。

在治疗癌症的任何方法的某些实施方案中，当在免疫组织化学测定(例如，具有肿瘤比例评分的免疫组织化学测定)中试验时，所述癌症具有小于1%的PD-L1表达水平。在治疗癌症的任何方法的某些实施方案中，当在免疫组织化学测定(例如，具有肿瘤比例评分的免疫组织化学测定)中试验时，所述癌症具有约1%的PD-L1表达水平。在治疗癌症的任何方法的某些实施方案中，当在免疫组织化学测定(例如，具有肿瘤比例评分的免疫组织化学测定)中试验时，所述癌症具有约1%至约49%(例如，约1%至约20%、约5%至约30%、约15%至约40%、约25%至约49%)的PD-L1表达水平。在治疗癌症的任何方法的某些实施方案中，所述癌症是转移性的和/或局部晚期的。在治疗癌症的任何方法的某些实施方案中，所述癌症是不可切除的。

定义

本文中使用的术语“施用”表示将组合物(例如，如本文中所述的盐或包括盐的制剂)施用给对象或系统。向动物对象（例如，向人）的施用可以是通过任何适当的途径。例如，在某些实施方案中，施用可以是支气管的(包括通过支气管滴注)、含服的、肠内的、真皮间的、动脉内的、真皮内的、胃内的、骨髓内的、肌肉内的、鼻内的、腹膜内的、鞘内的、静脉内的、心室内的、粘膜的、鼻的、口服的、直肠的、皮下的、舌下、局部的、气管的（包括通过气管内滴注）、透皮的、阴道的和玻璃体的。

“生物样品”或“样品”是指来自对象的流体或固体样品。生物样品可以包括细胞；细胞的核酸、蛋白或膜提取物；或血液或生物流体，包括(例如，血浆、血清、唾液、尿、胆汁)。固体生物样品包括取自粪便、直肠、中枢神经系统、骨、乳房组织、肾组织、子宫颈、子宫内膜、头或颈、胆囊、腮腺组织、前列腺、脑、垂体、肾组织、肌肉、食管、胃、小肠、结肠、肝、脾、胰腺、甲状腺组织、心脏组织、肺组织、膀胱、脂肪组织、淋巴结组织、子宫、卵巢组织、肾上腺组织、睾丸组织、扁桃体和胸腺的样品。流体生物样品包括取自血液、血清、血浆、胰腺流体、CSF、精液、前列腺流体、精液、尿、唾液、痰、粘液、骨髓、淋巴和泪液的样品。样品可以通过标准方法得到，所述方法包括、例如，静脉穿刺术和外科手术活组织检查。在某些实施方案中，所述生物样品是血液、血浆或血清样品。在某些实施方案中，所述生物样品是来自活组织检查的肿瘤样品。

术语“癌症”表示由恶性赘生性细胞的增殖造成的任何癌症，诸如肿瘤、赘生物、癌、肉瘤、白血病和淋巴瘤。

“确定细胞类型的水平”是指通过本领域已知的方法直接地或间接地检测细胞类型。“直接确定”是指进行处理（例如，对样品进行测定或试验，或者如本文所定义的术语“分析样品”）以获得物理实体或值。“间接确定”是指从另一方或来源（例如，直接获取物理实体或值的第三方实验室）接收物理实体或价值。测量细胞水平的方法通常包括、但不限于流式细胞计量术和免疫组织化学。本文提供了示例性的方法。在前述方法中的任一种的某些实施方案中，可以如在Iclozan等人. Cancer Immunol. Immunother. 2013, 62(5): 909-918中所述确定MDSC和/或活化的T-细胞的水平。在前述方法中的任一种的某些实施方案中，可以如在Kitano等人. Cancer Immunol. Res. 2014, 2(8)；812-821中所述确定MDSC和/或活化的T-细胞的水平。

本文中使用的“被确定为药物抗性的”癌症表示，基于对化学治疗剂的无应答性或降低的应答性，具有药物抗性的癌症，或基于预后测定(例如，基因表达测定)，预测具有药物抗性的癌症。

“药物抗性的”癌症是指对一种或多种化学治疗剂(例如，本文描述的任何药剂)没有应答或表现出减少的应答的癌症。

术语“有效量”是指，当根据治疗剂定量施用方案施用给遭受疾病、障碍和/或病症或对疾病、障碍和/或病症敏感的群体时，足以治疗所述疾病、障碍和/或病症的量。在某些实施方案中，治疗有效量是降低疾病、障碍和/或病症的一种或多种症状的发生率和/或严重程度和/或延迟其发作的量。本领域普通技术人员会明白，术语“有效量”实际上不要求在特定个体中实现成功治疗。相反，有效量可以是当施用给需要这种治疗的患者时在显著数目的对象中提供特定期望的药理学应答的量。特别理解，特定对象实际上可能是“有效量”“难治的”。仅举一个例子，难治的对象可以具有低生物利用度，使得临床效力不可得到。在某些实施方案中，对有效量的提及可以是对在一种或多种特定组织(例如，受疾病、障碍或病症影响的组织)或流体(例如，血液、唾液、血清、汗液、泪液、尿)中测得的量的提及。本领域普通技术人员会明白，在某些实施方案中，可以以单剂量配制和/或施用有效量。在某些实施方案中，可以以多个剂量配制和/或施用有效量，例如，作为定量施用方案的部分。

本文中使用的术语“对先前疗法应答失败”或“先前疗法难治的”表示尽管用所述疗法治疗仍然进展的癌症。

“水平”是指与参照相比细胞类型的水平。该参照可以是如本文所定义的任何有用的参照。细胞类型的“降低的水平”或“增加的水平”是指与参照相比细胞水平的降低或增加(例如，降低或增加约5%、约10%、约15%、约20%、约25%、约30%、约35%、约40%、约45%、约50%、约55%、约60%、约65%、约70%、约75%、约80%、约85%、约90%、约95%、约100%、约150%、约200%、约300%、约400%、约500%或更多；与参照相比，降低或增加超过约10%、约15%、约20%、约50%、约75%、约100%或约200%；降低或增加小于约0.01倍、约0.02倍、约0.1倍、约0.3倍、约0.5倍、约0.8倍或更少；或增加超过约1.2倍、约1.4倍、约1.5倍、约1.8倍、约2.0倍、约3.0倍、约3.5倍、约4.5倍、约5.0倍、约10倍、约15倍、约20倍、约30倍、约40倍、约50倍、约100倍、约1000倍或更多)。可以以质量/体积(例如，g/dL、mg/mL、 μg/mL、ng/mL)或相对于样品中的总细胞的百分比表达细胞类型的水平。在前述方法中的任一种的某些实施方案中，所述参照是来自健康对象（诸如不具有癌症的对象）的样品。在前述方法中的任一种的某些实施方案中，所述参照是具有经证实在障碍的治疗中有益的水平(例如，MDSC诸如单核细胞和/或粒细胞MDSC或活化的T-细胞的水平)的人工样品。

本文中使用的“转移性小结节”表示在原始肿瘤的部位以外的部位处在体内的肿瘤细胞的聚集。

本文中使用的“转移性肿瘤”表示这样的肿瘤或癌症，其中形成肿瘤的癌细胞具有高潜力或已开始经由淋巴系统或经由血源性传播自一个位置转移或传播至对象内的另外一个或多个位置，例如，在对象内创建继发肿瘤。这样的转移行为可能指示恶性肿瘤。在一些情况下，转移行为可能与肿瘤细胞的细胞迁移和/或侵入行为的增加相关联。

可定义为转移性的癌症的例子包括、但不限于：肺癌(例如，非小细胞肺癌)、乳腺癌、卵巢癌、结直肠癌、胆道癌、膀胱癌、脑癌（包括胶质母细胞瘤和髓母细胞瘤）、宫颈癌、绒毛膜癌、子宫内膜癌、食管癌、胃癌、血液学赘生物、多发性骨髓瘤、白血病、上皮内赘生物、肝癌、淋巴瘤、神经母细胞瘤、口癌、胰腺癌、前列腺癌、肉瘤、皮肤癌(包括黑素瘤)、基底细胞癌、鳞状细胞癌、睾丸癌、间质瘤、生殖细胞肿瘤、甲状腺癌和肾癌。

本文中使用的“非转移性细胞迁移癌”表示不经由淋巴系统或经由血源性传播而迁移的癌症。

本文中使用的术语“药物组合物”表示与一种或多种药学上可接受的载体一起配制的活性化合物或其药学上可接受的盐。在某些实施方案中，活性化合物或盐以适用于以治疗方案施用的单位剂量量存在，所述治疗方案显示当向相关群体施用时达成预定治疗效果的统计上显著的可能性。在某些实施方案中，可以特别配制药物组合物用于以固体或液体形式施用，包括适用于下列的那些：口服给药，例如，灌服剂(水性或非水性溶液或混悬液)，片剂，例如，用于含服、舌下、及全身吸收的那些，大丸剂，粉剂，颗粒剂，用于应用至舌的糊剂；胃肠外施用，例如，通过皮下、肌肉内、静脉内或硬膜外注射，例如，作为无菌溶液或混悬液，或持续释放制剂；局部应用，例如，作为应用于皮肤、肺或口腔的乳膏剂、软膏剂或控释贴剂或喷雾剂；阴道内地或直肠内地，例如，作为子宫托、乳膏剂或泡沫；舌下地；经眼地；透皮地；或鼻地、肺的和应用于其它粘膜表面。

本文中使用的“药学上可接受的赋形剂”表示在对象中具有无毒和非炎症性质的任何无活性成分(例如，能悬浮或溶解活性化合物的媒介物)。典型赋形剂包括、例如抗粘剂、抗氧化剂、粘合剂、包衣剂、压缩助剂、崩解剂、染料(色料)、软化剂、乳化剂、填充剂(稀释剂)、成膜剂或包衣剂、矫味剂、香味剂、助流剂(流动促进剂)、润滑剂、防腐剂、印刷用油墨、吸附剂、悬浮或分散剂、甜味剂或水合的水。

本文中使用的术语“药学上可接受的盐”表示本文所述的化合物的那些盐，其在合理的医学判断范围内，适用于与人类和动物的组织接触而没有不适当的毒性、刺激、变应性应答等，且与合理的收益/风险比相称。药学上可接受的盐是本领域众所周知的。例如，药学上可接受的盐描述在: Berge等人, J. Pharmaceutical Sciences 66:1-19, 1977和Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use (编辑P.H.Stahl和C.G. Wermuth), Wiley-VCH, 2008。所述盐可以在本文所述化合物的最终分离及纯化期间原位制备，或通过使游离碱性基团与合适的有机酸反应单独制备。

本文中使用的“无进展存活”表示在医疗或治疗期间及以后的时间长度，在此期间正在治疗的疾病(例如，癌症)不会变得更糟。

在本申请中使用的“增殖”涉及由构成(细胞)要素引起的相似形式(细胞)的再生或繁殖。

本文中使用的“减慢转移的传播”表示减少或停止新部位的形成；或减少、停止或逆转肿瘤负载。

本文中使用的术语”对象”表示人或非人动物(例如，哺乳动物诸如非人灵长类动物、马、牛或狗)。

术语“基本上”表示表现出全部或接近全部范围或程度的目标特征或性质的定性条件。生物领域的普通技术人员会理解，生物学现象和化学现象很少(就算有的话)达到完成和/或推进到完全或者实现或避免绝对结果。术语“基本上”因此在本文中用于捕获在许多生物学现象和化学现象中固有的完整性的潜在缺乏。

“治疗方案”表示定量施用方案，其在相关群体之间的施用与期望的或有益的治疗结果相关。

术语“治疗”（也称作“处理”）在它的最宽含义上表示物质（例如，所提供的组合物）的任何施用，其部分地或完全地减轻、改善、缓解、抑制特定疾病、障碍和/或病症的一种或多种症状、特征和/或原因，延迟其发作，降低其严重程度，和/或降低其发生率。在某些实施方案中，可以将这样的治疗施用给没有表现出相关疾病、障碍和/或病症的征象的对象和/或仅表现出疾病、障碍和/或病症的早期征象的对象。可替换地或额外地，在某些实施方案中，可以将治疗施用给表现出相关疾病、障碍和/或病症的一种或多种确定征象的对象。在某些实施方案中，治疗可以属于已经诊断为患有相关疾病、障碍和/或病症的对象。在某些实施方案中，治疗可以属于已知具有与发生相关疾病、障碍和/或病症的增加风险统计上相关的一种或多种易感性因素的对象。

本文中使用的术语“PD-1抑制剂”表示能够抑制在人类中由PDCD1基因编码的蛋白的活性的化合物诸如抗体。已知的PD-1抑制剂包括纳武单抗、派姆单抗、皮地利珠单抗、BMS936559和阿特珠单抗。

本文中使用的术语“PD-L1抑制剂”表示能够抑制在人类中由CD274基因编码的蛋白的活性的化合物诸如抗体。已知的PD-L1抑制剂包括阿特珠单抗和度伐单抗。

本文中使用的术语“CTLA-4抑制剂”表示能够抑制在人类中由CTLA4基因编码的蛋白的活性的化合物诸如抗体。已知的CTLA-4抑制剂包括伊匹木单抗。

本文中使用的术语“CSF-1R抑制剂”表示能够抑制在人类中由CSF1R基因编码的蛋白的活性的化合物诸如抗体。已知的CSF-1R抑制剂包括吡昔替尼和4-(2,4-二氟苯胺基)-7-乙氧基-6-(4-甲基哌嗪-1-基)喹啉-3-甲酰胺。

本文中使用的术语“IDO抑制剂”表示能够抑制在人类中由IDO1基因编码的蛋白的活性的化合物诸如抗体。已知的IDO抑制剂包括去甲哈尔满、迷迭香酸和α-甲基-色氨酸。

本文中使用的术语“A1腺苷抑制剂”表示能够抑制在人类中由ADORA1基因编码的蛋白的活性的化合物诸如抗体。已知的A1腺苷抑制剂包括8-环戊基-1,3-二甲基黄嘌呤、8-环戊基-1,3-二丙基黄嘌呤、8-苯基-1,3-二丙基黄嘌呤、巴米茶碱、BG-9719、tonapofylline、FK-453、FK-838、罗咯茶碱和N-0861。

本文中使用的术语“A2A腺苷抑制剂”表示能够抑制在人类中由ADORA2A基因编码的蛋白的活性的化合物诸如抗体。已知的A2A腺苷抑制剂包括ATL-4444、伊曲茶碱、MSX-3、普瑞丁奈、SCH-58261、SCH-412,348、SCH-442,416、2-丁基-9-甲基-8-(三唑-2-基)嘌呤-6-胺、VER-6623、VER-6947、VER-7835、viadenant和ZM-241,385。

本文中使用的术语“A2B腺苷抑制剂”表示能够抑制在人类中由ADORA2B基因编码的蛋白的活性的化合物诸如抗体。已知的A2B腺苷抑制剂包括N-[5-(1-环丙基-2,6-二氧代-3-丙基-7H-嘌呤-8-基)吡啶-2-基]-N-乙基吡啶-3-甲酰胺、3-乙基-1-丙基-8-[1-[[3-(三氟甲基)苯基]甲基]吡唑-4-基]-7H-嘌呤-2,6-二酮、MRS-1706、MRS-1754、N-[2-[[2-苯基-6-[4-(3-苯基丙基)哌嗪-1-羰基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基]氨基]乙基]乙酰胺、PSB-603、PSB-0788和PSB-1115。

本文中使用的术语“A3A腺苷抑制剂”表示能够抑制在人类中由ADORA3基因编码的蛋白的活性的化合物诸如抗体。已知的A3A腺苷抑制剂包括KF-26777、MRS-545、MRS-1191、MRS-1220、MRS-1334、MRS-1523、MRS-3777、MRE-3005-F20、MRE-3008-F20、PSB-11、OT-7999、VUF-5574和SSR161421。

本文中使用的术语“精氨酸酶抑制剂”表示能够抑制在人类中由ARG1或ARG2基因编码的蛋白的活性的化合物诸如抗体。已知的精氨酸酶抑制剂包括(2s)-(+)-氨基-5-碘乙酰氨基戊酸、NG-羟基-L-精氨酸、(2S)-(+)-氨基-6-碘乙酰氨基己酸和(R)-2-氨基-6-二羟硼基-2-(2-(哌啶-1-基)乙基)己酸。

本文中使用的术语“HDAC抑制剂”表示能够抑制蛋白的活性的化合物诸如抗体，所述蛋白是组蛋白脱乙酰基酶类酶的一个成员，例如，HDAC1、HDAC2、HDAC3、HDAC4、HDAC5、HDAC6、HDAC7、HDAC8、HDAC9、HDAC10、HDAC11、SIRT1、SIRT2、SIRT3、SIRT4、SIRT5、SIRT6和SIRT7。已知的HDAC抑制剂包括丙戊酸、SAHA和罗米地辛。

除非另有定义，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本发明所属领域的普通技术人员所通常理解的相同含义。本文描述了用于本公开内容中的方法和材料；还可以使用本领域已知的其它合适的方法和材料。所述材料、方法和实施例仅仅是示例性的，且无意成为限制性的。在本文中提及的所有出版物、专利申请、专利、序列、数据库条目和其它参考文献通过引用整体并入。在冲突的情况下，以本说明书（包括定义）为准。

在下面的描述中阐述了本发明的一个或多个实施方案的细节。从描述和从权利要求书中会明白本发明的其它特征、目的和优点。

附图简述

图1是使用氯化锌作为抗衡离子源制备的2-[3-[(3R)-3-[[2-氯-3-(三氟甲基)苯基]甲基-(2,2-二苯基乙基)氨基]丁氧基]苯基]乙酸(化合物1)的无定形锌盐的XRPD衍射图。

图2显示了使用氯化锌作为抗衡离子源制备的化合物1的无定形锌盐的PLM图像。

图3是使用氯化锌作为抗衡离子源制备的化合物1的无定形锌盐的TG/DTA热分析图。

图4显示了使用氯化锌作为抗衡离子源制备的化合物1的无定形锌盐的DSC热分析图(顶：第一热循环；底：第二热循环)。

图5是使用氯化锌作为抗衡离子源制备的化合物1的无定形锌盐的¹H-NMR谱(溶剂: CDCl₃)。

图6是作为抗衡离子源的化合物1的无定形锌盐的¹⁹F-NMR (溶剂: CDCl₃)谱。

图7是化合物1的游离形式的FTIR谱。

图8是化合物1的游离形式和化合物1的无定形锌盐的1:1 (w/w)混合物的FTIR谱。

图9是化合物1的无定形锌盐的FTIR谱。

图10是ZnO的FTIR谱。

图11是ZnCl₂的FTIR谱。

发明详述

为了鉴定具有改善的可加工性和稳定性的2-[3-[(3R)-3-[[2-氯-3-(三氟甲基)苯基]甲基-(2,2-二苯基乙基)氨基]丁氧基]苯基]乙酸(化合物1)（一种LXR激动剂）的盐，本发明的发明人利用超过65种不同的抗衡离子源及从超过15种溶剂或溶剂混合物制备的溶剂系统进行了广泛的盐筛选实验。

在常见抗衡离子源的初始筛选中，以表观晶型制备的盐仅为利用盐酸、DL-扁桃酸和萘磺酸制备的那些，盐酸盐为可再现及规模扩大的唯一盐。但是，发现盐酸盐连同若干强酸盐(即，H₂SO₄、HBr、对甲苯磺酸和甲磺酸盐)倾向于不稳定，例如，发现所述强酸盐容易经历与醇溶剂的明显酯化。对利用弱酸(例如，油酸、辛酸和乙酸)制备的盐的后续研究导致仅游离化合物的分离。

进一步，发明人发现，盐酸盐在真空及中温至高温(例如，超过50℃)下不稳定。在这些条件下，盐酸盐倾向于变色和/或损失盐酸。发明人也发现，将盐酸盐用水萃取会导致盐酸的损失，从而造成进一步处理困难。进一步发现，盐酸盐在游离醇基团存在下（例如，当在醇溶剂中或在具有游离醇基团的赋形剂(诸如山梨醇)的制剂中时）经历明显酯化，或在亲脂性酯(诸如亚油酸酯)存在下酯化。盐酸盐的这些不稳定性问题使其不太适用于加工成药物产品，因此进行盐筛选研究以找到更合适的盐形式。

进行后续盐筛选研究以鉴定有利于形成具有改善的物理性能和稳定性的盐的抗衡离子和溶剂系统。从这些盐筛选研究，包括利用超过65种不同抗衡离子源的实验，发现2:1 (化合物1:锌)盐出人意料地为少数形成为稳定固体的盐中的一种，其与利用大多数抗衡离子源形成的凝胶、树胶、油及半固体不同。作为可再现的可流动的固体，2:1 (化合物1:锌)盐更适用于规模扩大及药物产品的开发。

2-[3-[(3R)-3-[[2-氯-3-(三氟甲基)苯基]甲基-(2,2-二苯基乙基)氨基]丁氧 基]苯基]乙酸

2-[3-[(3R)-3-[[2-氯-3-(三氟甲基)苯基]甲基-(2,2-二苯基乙基)氨基]丁氧基]苯基]乙酸(化合物1)是具有以下结构的LXRβ激动剂：

化合物1

已经证实化合物1介导的LXR信号传递途径的活化会诱导ApoE的表达，其凭借其调节肿瘤发生的关键特征的能力作为肿瘤抑制剂起作用。化合物1对LXRβ同种型具有更高特异性。这些特征包括抑制癌细胞侵入(在体外约45%)、抑制内皮募集(在体外约50%)以及减少循环(约40%)和肿瘤(>60%)中的MDSC。在体外研究中，与对照细胞相比，化合物1诱导的ApoE基因表达是在癌细胞中的3倍及在人外周血单核细胞(hPBMC)中的至多40倍。用于ApoE诱导的化合物1的EC₅₀在癌细胞中为385 nM及在hPBMC中为271 nM。

在黑素瘤(携带不同遗传背景)、胶质母细胞瘤、TNBC、卵巢癌和肺癌的同基因和人异种移植物小鼠肿瘤模型中，化合物1使原发肿瘤生长抑制48-95%。肿瘤生长抑制的程度随着模型变化。在TNBC转移的小鼠模型中，化合物1使癌细胞的转移性传播抑制约9倍。此外，与抗-PD-1抗体组合的化合物1的抗肿瘤活性使原本对抗-PD-1抗体没有应答的同基因小鼠黑素瘤模型中的肿瘤生长抑制>80%。此外，当小鼠接受化合物1和抗-CTLA-4抗体的组合疗法时，与单独任一疗法相比，相同的同基因小鼠黑素瘤模型中的肿瘤生长的抑制是优秀的。类似地，在同基因小鼠黑素瘤模型中，与单独任一治疗相比，化合物1表现出与达卡巴嗪组合的优秀抗肿瘤效力(>80%)。在肿瘤生长研究中，口服地（PO）施用的在25-40 mg/kg/天范围内的最低有效剂量会导致在10,000-50,000 ng-h/mL范围内的暴露。

在安全性药理学评估中，化合物1在体外hERG测定中产生人体ether-à-go-go相关基因(hERG)通道电导的显著增加，但是没有抑制。在狗中不存在对定性心电图（ECG）参数(PR或QTc间期或QRS持续时间)的化合物1相关效应，但是在给药后间期第1天存在平均心率的剂量相关减少，在150 (阶梯式下降至100) mg/kg/天剂量以后，其在雌性中显著不同。此变化在恢复期期间未观察到且不认为是不利的。此外，在大鼠中的神经行为功能观察池(FOB)或呼吸评价期间未注意到不良效应。考虑到化合物1在重复剂量毒性研究中所测试的最高剂量时的有利安全性谱，认为心血管、呼吸或中枢神经系统(CNS)系统效应的潜力是低的。

在口服PK研究中，化合物1在CD-1小鼠中被良好吸收，其中计算的绝对口服生物利用度(%F)经常>100%，这指示母体化合物的可能肠肝再循环。达到最大血浆浓度的时间(T_max)对于雄性及雌性是相似的且在2至8小时范围内。在小鼠中的平均表观口服半衰期(t½)是在6.5至8小时范围内。存在显著的食物效应，表明当向进食状态的小鼠施用时，化合物1血浆浓度高了>2倍。在Sprague-Dawley大鼠中，合并的平均%F (在2-[3-[(3R)-3-[[2-氯-3-(三氟甲基)苯基]甲基-(2,2-二苯基乙基)氨基]丁氧基]苯基]乙酸的30 mg/kg口服剂量以后)是中等的(约31%)，且T_max对于雄性及雌性是相似的，范围为4至8小时。化合物1在雌性大鼠中与雄性相比以更低速率清除，这导致化合物1在雌性中在所测试的所有剂量水平下的更高全身暴露。在雌性大鼠中的平均表观口服t½为6.5小时(在雄性中不可计算)。在提供化合物1的口服剂量的雄性比格狗中，T_max范围为4至8小时。平均%F是中等的(18-30%，取决于剂量和制剂)且平均表观口服t½是在5至6.7小时范围内。在食蟹猴中，平均%F是低至中等的(6-19%，取决于剂量和制剂)。在口服剂量后，猴具有4小时的平均T_max。平均口服t½范围为5.5-8小时。

化合物1经受I相及II相代谢，其包括氧化、脱烷基化、葡糖醛酸化和它们的组合。在体外，化合物1主要通过细胞色素P450 (CYP)同种型CYP3A4代谢，但它也是CYP2E1、CYP2C9、CYP2C19及可能CYP2J2的底物。虽然化合物1在体外不是任何人类CYP450的强抑制剂，但它是CYP2C8的中等抑制剂(7.5 μM 50%抑制浓度[IC50])及2B6的弱抑制剂(15 μMIC50)。化合物1在体外非常弱地抑制1A1、2A6、2C9、2C19、2D6、2E1和3A4，但是在体外使用睾酮作为底物证实了CYP3A时间依赖性抑制(TDI)。在冷冻保存的肝细胞(2个供体)的原代培养物中证实了化合物1对CYP3A的诱导且化合物1诱导CYP2B6的潜力不可排除(在1/3供体中的1个浓度被诱导> 2倍)。化合物1不诱导CYP1A2。在流出转运蛋白中，化合物1在体外不会抑制P-糖蛋白(P-gp)，但是抑制乳腺癌抗性蛋白(BCRP)运输(在5 μM为55%)。化合物1是在体外摄取转运蛋白有机阴离子转运多肽(OATP) 1B1的强效抑制剂(0.099 μM IC50)。化合物1也似乎为OATP1B3的中等抑制剂(3.7 μM IC50)。化合物1在体外仅弱抑制OAT1、OAT3和OCT2，在50 μM具有小于50%的抑制。

基于动物毒理学研究，在临床场合中利用化合物1的潜在风险包括血清胆固醇和TG的升高、嗜中性粒细胞减少症/白细胞减少症、恶心和/或呕吐、肝酶的升高、白内障的发展或恶化、心脏节律紊乱和/或降低的心脏功能、

副泪腺腺癌和/或全身性水肿。

纳武单抗

纳武单抗是具有免疫检验点抑制性活性和抗肿瘤活性的针对阴性免疫调节性人细胞表面受体程序性死亡-1 (PD-1)的全人免疫球蛋白(Ig) G4单克隆抗体。纳武单抗通过在某些癌细胞上过表达的其配体程序性细胞死亡配体1 (PD-L1)及主要在抗原呈递细胞上表达的程序性细胞死亡配体2 (PD-L2)结合且阻断PD-1 (一种Ig超家族跨膜蛋白)的活化。这导致T细胞的活化及细胞介导的针对肿瘤细胞或病原体的免疫应答。活化的PD-1负调节T-细胞活化并在从宿主免疫的肿瘤逃避中起关键作用。纳武单抗剂量将为在各28天周期的第1天及第15天历时60分钟作为静脉内输注施用的240 mg。

在化合物1和纳武单抗之间存在重迭毒性的可能。具体而言，已在化合物1单一药剂疗法上见到4级嗜中性粒细胞减少症的DLT，并且利用纳武单抗治疗可观察到骨髓抑制。化合物1的药理学效应包括固醇生物合成的调节。因此，已在利用化合物1治疗的对象中观察到高脂血症，这也在利用纳武单抗治疗的对象中报告。已在利用化合物1的临床前毒性研究中观察到肝功能异常，并已利用纳武单抗治疗观察到免疫介导的肝炎。

伊匹木单抗

伊匹木单抗是结合细胞毒性的T-淋巴细胞相关蛋白4 (CTLA-4)的重组人IgG1κ单克隆抗体。CTLA-4是T-细胞活性的负调节剂。通过结合CTLA-4，伊匹木单抗阻断CTLA-4与其配体CD80/CD86的相互作用。已经证实CTLA-4的阻断会增强T-细胞活化和增殖，包括肿瘤浸润性T-效应细胞的活化和增殖。CTLA-4信号传递的抑制也可降低T-调节性细胞功能，这可有助于T细胞应答性(包括抗肿瘤免疫应答)的总体增加。

在某些实施方案中，伊匹木单抗剂量是在各28天周期的第1天作为静脉内输注施用的3 mg/kg，最多4剂。

在化合物1和伊匹木单抗之间存在重迭毒性的可能。已在利用化合物1的临床前毒性研究中观察到肝功能异常；已利用伊匹木单抗治疗观察到免疫介导的肝炎。

多西他赛

多西他赛是属于紫杉烷家族的抗肿瘤剂。它通过自从紫杉植物的可再生针叶生物质提取的前体开始的半合成制备。多西他赛的化学名称为(2R,3S)-N-羧基-3-苯基异丝氨酸, N-叔丁基酯, 与5b-20-环氧-1,2a,4,7b, 10b, 13a-六羟基紫杉-11-烯-9-酮4-乙酸酯2- 苯甲酸酯的13-酯, 三水合物。

在某些实施方案中，在各28天周期的第1天、第8天及第15天作为静脉内输注施用多西他赛。在某些实施方案中，多西他赛剂量为35 mg/m²。在某些实施方案中，28 mg/m²为多西他赛剂量。

在化合物1和多西他赛之间存在重迭毒性的可能。具体而言，已在化合物1单一药剂疗法上见到4级嗜中性粒细胞减少症的DLT，并可利用多西他赛治疗可观察到骨髓抑制。已在利用化合物1的临床前毒性研究中观察到肝功能异常；已利用多西他赛治疗观察到肝毒性。

派姆单抗

派姆单抗是阻断程序性死亡受体-1 (PD 1)的抗体。派姆单抗是具有149 kDa的近似分子量的人源化单克隆IgG4κ抗体。在重组中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中生产派姆单抗。

在某些实施方案中，在已完成所有程序和评估后在各21天周期的第1天且在施用其它药物之前，使用30分钟静脉内输注以200 mg的剂量施用派姆单抗，且在下一种药物的施用之间间隔30分钟。

卡铂

卡铂（USP）的化学名称是铂, 二胺[1,1-环丁烷二羧酸根(2-)-O,O′]-，(SP-4-2)。卡铂（USP）是一种结晶性粉末。它在水中在大约14 mg/mL的浓度可溶，且1%溶液的pH为5至7。它基本上不溶于乙醇、丙酮和二甲基乙酰胺。卡铂主要产生链间DNA交联而非DNA-蛋白交联。此效应明显为细胞周期非特异性的。卡铂诱导相等数目的药物-DNA交联，从而造成等效病变及生物效应。

在某些实施方案中，通过使用数学公式确定卡铂注射的初始剂量，该公式是基于对象的预先存在的肾功能或肾功能及所需血小板最低点(因为肾排泄是消除卡铂的主要途径)。与基于身体表面积的经验剂量计算相比，定量施用公式的应用允许补偿原本可能导致用药不足(在具有超过平均肾功能的对象中)或用药过量(在具有肾功能损伤的对象中)的预治疗肾功能中的对象变化。

基于对象的肾小球滤过率(GFR，mL/min)及在浓度相对于时间曲线下的卡铂注射靶面积(AUC，mg/mL•min)，用于计算剂量的简单公式已由Calvert提出。在这些研究中，通过Cr-EDTA清除来测量GFR。用于卡铂定剂量的Calvert公式如下：

总剂量(mg) = (靶AUC)×(GFR + 25)

应当指出，利用此公式，以mg、而非mg/m²为单位计算卡铂的总剂量。使用单一药剂卡铂的4 mg/mL•min至6 mg/mL•min的靶AUC似乎在先前治疗的对象中提供最适当的剂量范围。此研究也表明在向先前治疗的对象施用的单一药剂卡铂的AUC与发生毒性的可能性之间的趋势。

培美曲塞

培美曲塞(用于注射)是一种叶酸盐类似物代谢抑制剂。药用物质培美曲塞二钠七水合物具有化学名称L-谷氨酸, N-[4-[2-(2-氨基-4,7-二氢-4-氧代-1H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-基)乙基]苯甲酰基]-, 二钠盐, 七水合物，具有C₂₀H₁₉N₅Na₂O₆•7H₂O的分子式和597.49 g/mol的分子量。

培美曲塞通过破坏细胞复制必需的叶酸盐依赖性代谢过程来发挥其抗肿瘤活性。体外研究已经证实，培美曲塞通过抑制对于胸苷和嘌呤核苷酸的从头生物合成而言至关重要的胸苷酸合酶(TS)、二氢叶酸还原酶(DHFR)和甘氨酰胺核糖核苷酸甲酰基转移酶(GARFT)而表现为多靶标抗叶酸剂。具有延长的细胞内半衰期的培美曲塞的聚谷氨酸盐化代谢物导致在恶性细胞中延长的培美曲塞药物作用。

在某些实施方案中，培美曲塞剂量是在各21天周期的第1天的500 mg/m²，最多4个周期。在某些实施方案中，必须指示利用培美曲塞治疗的对象服用叶酸和维生素B12作为减少治疗相关的血液学和GI毒性的预防措施。在某些实施方案中，也可以给对象开皮质类固醇处方以每天施用2次持续3天，这开始于利用培美曲塞的每次治疗前一天。

在化合物1、培美曲塞和卡铂之间存在重迭毒性的可能。具体而言，已在化合物1单一药剂疗法上见到4级嗜中性粒细胞减少症的DLT且利用培美曲塞与化合物1和卡铂的联合治疗可观察到骨髓抑制。

不良事件

不良事件（AE）是在施用药物产品的对象或临床研究对象中的任何不利医疗事件，且其不一定必须与该治疗具有因果关系。因此，AE可以是与研究产品的使用暂时相关联的任何不利的和非预期的征兆(包括异常实验室发现)、症状或疾病，无论是否与所述研究产品相关。

不认为死亡和进行性疾病（PD）是AE。认为死亡是一种或多种主要AE的结果，且认为PD是潜在疾病的恶化。认为预先存在的病症(在AE收集期开始之前存在)是并发医学病症且非AE。但是，这样的并发病症的恶化或并发症，该恶化或并发症是AE。

在以下情况下认为AE或疑似不良反应是严重的：它导致死亡；是危及生命的，即，对象处于随着反应发生而死于该反应的立即风险中，但是不包括假设可能造成死亡的反应已经以更严重形式发生；需要对象住院或延长现有住院；导致持续的或显著的残疾/无能力；为先天性异常/出生缺陷；或为重要医疗事件。

治疗方法

本文中所述方法可以用于治疗癌症。

治疗癌症可以导致肿瘤的大小或体积的减小。例如，在治疗后，肿瘤大小相对于其在治疗之前的大小减小5%或更大(例如，10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或更大)。通过任何可再现的测量方法，可以测量肿瘤的大小。肿瘤的大小可以测量为肿瘤的直径或通过任何可再现的测量方法进行测量。

治疗癌症可进一步导致肿瘤数目的减少。例如，在治疗后，肿瘤数目相对于在治疗之前的数目减少5%或更大(例如，10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或更大)。通过任何可再现的测量方法可以测量肿瘤数目。通过计数肉眼可见或在指定放大率(例如，2x、3x、4x、5x、10x或50x)下的肿瘤，可以测量肿瘤数目。

治疗癌症可以导致远离原发肿瘤部位的其它组织或器官中的转移性小结节的数目的减少。例如，在治疗后，转移性小结节的数目相对于治疗之前的数目减少5%或更大(例如，10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或更大)。通过任何可再现的测量方法可以测量转移性小结节的数目。通过计数肉眼可见或在指定放大率(例如，2x、10x或50x)下的转移性小结节，可以测量转移性小结节的数目。

治疗癌症可以导致根据本发明治疗的对象群体与未经治疗的对象群体相比的平均存活时间的增加。例如，平均存活时间增加超过30天(超过60天、90天或120天)。通过任何可再现的方法可以测量群体的平均存活时间的增加。例如，通过对群体计算在开始利用本发明的化合物治疗后的平均存活长度，可以测量群体的平均存活时间的增加。例如，通过对群体计算在完成第一轮本发明化合物治疗后的平均存活长度，也可以测量群体的平均存活时间的增加。

治疗癌症也可以导致被治疗的对象群体与未经治疗的群体相比死亡率的下降。例如，死亡率下降超过2%(例如，超过5%、10%或25%)。通过任何可再现的方法可以测量经治疗的对象群体的死亡率的下降，例如，通过对群体计算在开始利用本发明化合物治疗后每单位时间的疾病相关死亡的平均数目。例如，通过对群体计算在完成第一轮本发明化合物治疗后每单位时间的疾病相关死亡的平均数目，也可以测量群体的死亡率的下降。

治疗癌症也可以导致经治疗的对象群体与未经治疗群体相比增加的平均无进展存活时间。例如，平均无进展存活时间增加超过30天(超过60天、90天或120天)。通过任何可再现的方法可以测量群体的平均无进展存活时间的增加。例如，通过对群体计算在开始利用本发明化合物治疗后的平均无进展存活长度，可以测量群体的平均无进展存活时间的增加。例如，通过对群体计算在完成第一轮本发明化合物治疗后的平均无进展存活长度，也可以测量群体的平均无进展存活时间的增加。

组合物

在本发明范围内是含有合适的载体和上述治疗剂中的一种或多种的组合物。

如上所述，本发明的药物组合物另外包括药学上可接受的赋形剂，如本文中使用的，其包括适合于特定预期剂型的任何或全部溶剂、稀释剂或其它液体媒介物、分散或混悬助剂、表面活性剂、等渗剂、增稠剂或乳化剂、防腐剂、固体粘合剂和润滑剂。Remington’sPharmaceutical Sciences, 第十六版, E. W. Martin (Mack Publishing Co., Easton,Pa., 1980)公开了用于配制药物组合物的各种赋形剂及用于其制备的已知技术。除了任何常规赋形剂与本发明的化合物不相容（诸如通过产生任何不希望的生物学效应或另外以有害方式与药物组合物的任意其它组分相互作用）以外，在本发明范围内预见到它的应用。

呈上述形式中的任一种的上述组合物可以用于治疗癌症或本文描述的任意其它疾病或病症。有效量表示给被治疗的对象提供治疗效果所需的活性化合物/药剂的量。如本领域技术人员所知晓的，有效剂量将随所治疗的疾病的类型、施用途径、赋形剂用法以及与其它治疗性处理共同使用的可能性而变化。

可以胃肠外地、口服地、鼻地、直肠地、局部地或含服地施用本发明的药物组合物。本文中使用的术语“胃肠外”表示皮下、皮内、静脉内、肌肉内、关节内、动脉内、滑膜内、胸骨内、鞘内、病灶内或颅内注射、以及任意合适的输注技术。

无菌的可注射组合物可以是在无毒的胃肠外可接受的稀释剂或溶剂中的溶液或混悬液。

用于口服施用的组合物可以是任何口服可接受的剂型，包括胶囊剂、片剂、乳剂和水性悬浮液、分散体和溶液。当口服施用水性悬浮液或乳剂时，可以将活性成分悬浮或溶解在与乳化剂或助悬剂组合的油相中。如果需要的话，可以添加某些甜味剂、调味剂或着色剂。

根据所描述的发明用于局部施用的药物组合物可以配制成溶液、软膏剂、乳膏剂、混悬液、洗剂、粉剂、糊剂、凝胶、喷雾剂、气雾剂或油。可替换地，局部制剂可以呈浸渍有活性成分的贴剂或敷料的形式，其可以任选地包含一种或多种赋形剂或稀释剂。在某些优选的实施方案中，局部制剂包含将增强活性剂穿过皮肤或其它受影响区域的吸收或穿透的材料。

联合治疗

在本文所述的方法的某些实施方案中，所述药物组合物可以进一步包括具有抗增殖活性的额外化合物。

还应当理解，可以配制本发明的化合物和药物组合物并用在联合治疗中，也就是说，可以在一种或多种其它期望的治疗剂或医学操作(例如，外科手术和/或放射疗法)之前或之后、一起配制或并行地施用所述化合物和药物组合物。在联合方案中采用的治疗(疗法或程序)的特定组合将考虑期望的疗法和/或程序与要达到的期望治疗效果的相容性。还应当理解，采用的疗法可以对相同障碍达到预期效应，或者它们可以实现不同的效应(例如，任何不良作用的控制)。

实施例

实施例1. 方法

X-射线粉末衍射(XRPD)

方法1

在PANalytical X’pert pro上进行XRPD分析，在3与35°2θ之间扫描样品。将材料轻轻研磨以释放任何附聚物并装载至多孔板上，其具有Mylar聚合物膜以支持样品。然后将该多孔板放置在衍射仪中并使用Cu K辐射(α1λ= 1.54060 A；α2 = 1.54443 A；β=1.39225A；α1: α2比 = 0.5)(以穿透模式运行(步长0.0130°2θ)，使用40 kV/40 mA发生器设置)分析。

方法2

使用配备Cu Kα辐射源(λ=1.54°A)、9-位置样品架和LYNXEYE超速检测器的BrukerD8 Advance获得X-射线粉末衍射图样。将样品放置在0背景硅板架上。

偏振光显微镜检查(PLM)

方法1

使用配备Motic照相机和图像捕获软件(Motic Images Plus 3.0)的OlympusBX53偏振显微镜，测定双折射的存在。使用10×或20×物镜记录所有图像。

方法2

使用配备PAXcam 3数字显微镜照相机的Olympus BX53偏振光学显微镜分析样品。

热重量/示差热分析(TG/DTA)

方法1

将大约5 mg材料称量进开口铝锅中并装载进同时热重量/示差热分析仪(TG/DTA)中并保持在室温。然后将样品在氮气净化下以10℃/min的速率自20℃加热至300℃，在该时间期间记录样品重量的变化以及任何示差热事件(DTA)。

方法2

使用TA Instruments TGA Q500收集TGA数据。通常，将样品(约10 mg)放置在开口预称皮重的铝样品锅中并使用60 mL/min的氮气净化以10℃/min的速率在25-300℃扫描。

示差扫描量热法(DSC)

方法1

将大约5 mg材料称量进铝DSC锅中并用铝盖密封。然后将样品锅装载进配备RC90冷却器的TA Instruments Discovery DSC 2500示差扫描量热仪中。一旦获得稳定的热流应答，在氮气净化下通过使用下列温度程序和监测的所产生的热流应答，将样品和参照加热/冷却。

程序1

•以10℃/分钟加热20℃至260℃，在260℃保持3分钟；

•以10℃/分钟冷却260℃至20℃，在20℃保持3分钟；

•以10℃/分钟加热20℃至260℃，在260℃保持3分钟；

•以10℃/分钟冷却260℃至20℃，在20℃保持3分钟。

程序2

•以10℃/分钟加热20℃至270℃，在270℃保持3分钟；

•以10℃/分钟冷却270℃至20℃，在20℃保持3分钟；

•以10℃/分钟加热20℃至270℃，在270℃保持3分钟；

•以10℃/分钟冷却270℃至20℃，在20℃保持3分钟。

方法2

使用TA Instruments Q10 DSC收集DSC数据。通常，将样品(2至8 mg)放置在未密封但是覆盖气密阿洛丁化的铝样品锅中，并在50 mL/min的氮气净化下以10℃/min的速率自30至300℃扫描。

¹ H核磁共振光谱法( ¹ H-NMR)

方法1

在Bruker AV500 (频率: 500 MHz)上进行¹H-NMR谱实验。在CDCl₃中进行实验并制备各样品为约10 mM浓度。

方法2

通过将化合物溶解在含有0.05%(v/v)四甲基硅烷(TMS)的氘代二甲亚砜中来制备样品。在环境温度在Bruker Avance 300 MHz NMR上利用TopSpin软件收集谱。对于质子NMR，扫描数目为16。

¹⁹ F核磁共振光谱法( ¹⁹ F-NMR)

在Bruker AV500 (频率: 470 MHz)上进行¹⁹F-NMR谱实验。

在CDCl₃中进行实验并制备各样品为约10 mM浓度。

高效液相色谱法-紫外检测(HPLC-UV)

HPLC方法使用C18柱和乙腈/水/三氟乙酸梯度。

动态蒸汽吸附(DVS)

使用Aquadyne DVS-2重量分析水吸收分析仪分析样品。调整相对湿度在2-95%之间并连续监测和记录样品重量。

Karl Fisher(KF)

通过Karl Fischer滴定，使用Mettler Toledo DL39 Coulometric KF滴定计测定样品中的表观水含量。使用HYDRANAL-Coulomat AD作为滴定剂。将约20 mg固体用于滴定。分析参数示在下表1中：

表1

KF参数	值
		速度[%]	40
混合时间[秒]	10
		自动开始	否
空白[µg]	0
		漂移[µg/min]	5
计算	Ug
		待机	是
最初漂移[µg/min]	<10
		最初电势[mV]	100

傅立叶变换红外谱法(FTIR)

在具有衰减全反射(ATR)的Thermo Scientific, NICOLET™IS™10 FTIR谱仪上进行FTIR分析。将足够材料放置在谱仪的板的中心并获得谱。

实施例2.盐筛选

研究1

进行第一研究以鉴定2-[3-[(3R)-3-[[2-氯-3-(三氟甲基)苯基]-甲基-(2,2-二苯基甲基)氨基]丁氧基]苯基]乙酸的盐。选择26种抗衡离子源用于2-[3-[(3R)-3-[[2-氯-3-(三氟甲基)苯基]-甲基-(2,2-二苯基甲基)氨基]丁氧基]苯基]乙酸的盐筛选。下表2中列出了抗衡离子源：

表2: 用于研究1中的盐筛选实验的所选抗衡离子源的列表

抗衡离子源	编号
		盐酸(HCl)	1
硫酸(H<sub>2</sub>SO<sub>4</sub>)	2
		苯磺酸(C<sub>6</sub>H<sub>5</sub>O<sub>3</sub>SH)	3
磷酸(H<sub>3</sub>PO<sub>4</sub>)	4
		氢氧化钠(NaOH)	5
氢氧化钾(KOH)	6
		氢氧化钙(Ca(OH)<sub>2</sub>)	7
马来酸	8
		富马酸	9
L-精氨酸	10
		L-组氨酸	11
L-苹果酸	12
		二乙醇胺	13
水杨酸	14
		苯甲酸	15
DL-扁桃酸	16
		乙二胺	17
琥珀酸	18
		L-酒石酸	19
L-天冬氨酸	20
		L-赖氨酸	21
L-抗坏血酸	22
		柠檬酸	23
萘-2-磺酸	24
		1,2-乙烷-二磺酸	25
氢碘酸	26

在所研究的抗衡离子源中，仅三种(盐酸盐、DL-扁桃酸和萘磺酸)提供结晶盐，且所述三种结晶盐的再现及规模扩大仅针对于盐酸盐而言是成功的。

后续研究揭示，发现盐酸盐以及从强酸(例如，H₂SO₄、HBr、对甲苯磺酸和甲磺酸)制备的其它盐是不稳定的。具体地，这些盐与制剂的赋形剂和/或组分反应。该发现导致研究转入使用弱酸(例如，油酸、辛酸和乙酸)作为抗衡离子源，它们都不与2-[3-[(3R)-3-[[2-氯-3-(三氟甲基)苯基]-甲基-(2,2-二苯基甲基)氨基]丁氧基]苯基]乙酸形成盐。

研究2

进行第二研究以鉴定提供改善的可加工性和稳定性的盐。在该研究中所研究的34种抗衡离子源和12种溶剂条件概述在下表3和4中：

表3: 用于研究2中的盐筛选实验的所选抗衡离子源的列表

表4: 用于研究2中的盐筛选实验的所选溶剂条件的列表

溶剂和溶剂混合物
	异丙醇(IPA)
四氢呋喃(THF)
	二氯甲烷(DCM)
乙酸乙酯(EtOAc)
	庚烷(Hep)
叔丁基甲基醚(TBME)
	水(H<sub>2</sub>O)
1,4-二氧杂环己烷
	丙酮
THF:H<sub>2</sub>O (9:1)
	丙酮:H<sub>2</sub>O (9:1)
IPA:H<sub>2</sub>O (95:5)

使用无定形化合物1在12种溶剂/溶剂混合物中初始溶解度评估。在大多数样品中观察到溶解。通过冷却、反溶剂添加、成熟、液体辅助研磨、纯研磨和蒸发的盐筛选都进行了研究。使所分离的胶经受热/冷成熟循环(室温/50℃)、声处理、在真空下长期储存、在40℃/75%RH长期储存、与反溶剂一起的研磨以及与水一起的液体辅助研磨(LAG)。从广泛盐筛选，获得8种命中物。从氯化锌、萘-2-磺酸、1,5-萘二磺酸和乙烷磺酸中鉴定出具有高玻璃化转变温度(Tg)的无定形命中物。从乙烷磺酸鉴定出一种结晶命中物。从氢氧化钙、氢氧化镁和氢氧化铝分离差结晶性物。

因为对分离的命中物进行有限表征，在最有前途的抗衡离子：氢氧化钙、氢氧化铝、乙烷磺酸和萘-2-磺酸上进行聚焦筛选。选择氢氧化钙和氢氧化铝以评估经由抗衡离子交换分离的初始命中物是否为单一金属盐或混合金属盐。从额外筛选分离的固体与初始命中物一致。从额外筛选，这些样品可能为单一金属盐。因为这些命中物不是混合盐，使用氢氧化镁和氢氧化钙进行有限混合金属筛选。这些尝试是不成功的。选择乙烷磺酸和萘-2-磺酸用于进一步筛选。但是，初始命中物在进一步筛选尝试中没有再现。分离无定形固体，但是，Tg低于游离化合物(32℃)和HCl盐(约70至75℃)的Tg。

使用下列程序分离锌盐：

在室温将化合物1 (约250 mg)溶解在THF (5体积)中。将溶液分配至HPLC小瓶(75μl，约15 mg在溶液中)中。将溶液在50℃保持5分钟，记录观察结果。将样品用1.0当量的钠处理，然后用所选当量的抗衡离子(0.5当量的氯化锌)处理。将样品在50℃保持10分钟，然后以0.1℃/min冷却至5℃。将所得溶液保持在5℃过夜，然后在-20℃储存。在5天后，样品仍呈溶液并允许其在环境条件下蒸发。在蒸发后获得胶并用10体积的庚烷处理，接着声处理处理2小时。将所收集的固体通过XRPD分析并发现是无定形的。

从该研究分离的盐都不建议用于开发，这是由于长的复杂分离程序和化合物1形成胶的倾向。但是，几种盐(例如，锌和铝)产生了令人鼓舞的结果，即合适的盐可能是可行的并促使进一步研究。

研究3

进行第三盐筛选研究。以100 mg规模使用具有大于8的近似pK _a的碱或具有低于4的pK _a的可接受的强酸尝试盐形成反应。

在第一组盐筛选实验中，研究下表5中所示的抗衡离子源。

表5：用于研究3中的第一组盐筛选实验的所选抗衡离子源的列表

抗衡离子源	分子量(g/mol)	pKa<sub>1</sub>
			乙烷-1,2-二磺酸	190.20	-2.1
萘-1,5,二磺酸	332.26	-3.4
			乙磺酸	110.13	-1.6
硝酸	63.02	-1.3
			萘-2-磺酸	208.24	0.17
氢氧化锌	99.38	14
			胆碱	121.18	>11.0
苄星	240.35	10.0
			苯乙苄胺(Benthamine)	211.30	9.4
乙醇胺	61.80	9.6
			二乙醇胺	105.14	9.5
L-精氨酸	174.20	9.0

简而言之，将2-[3-[(3R)-3-[[2-氯-3-(三氟甲基)苯基]甲基-(2,2-二苯基甲基)氨基]-丁氧基]苯基]乙酸悬浮/溶解在六种不同的溶剂系统--异丙醇、丙酮、环己酮、甲基乙基酮、乙酸乙酯和THF中。然后加入作为溶液(在可能的情况下)的对应抗衡离子源(1.0当量)，或经由纯添加。将溶液在两个特定温度(例如，25与40℃)之间进行温度循环。针对沉淀/结晶，监测所有实验。在结晶/沉淀不明显的小瓶中，进行冷却至亚环境温度或使用合适反溶剂的迭代反溶剂添加，利用或不利用冷却至亚环境温度(例如，5℃)。在冷却和/或添加反溶剂后结晶/沉淀不明显的小瓶中，通过蒸发移除溶剂。通过过滤分离任何固体并通过XRPD分析。主要获得油或胶。

利用下表6中所示的抗衡离子源进行第二盐筛选。

表6：用于研究3中的第二组盐筛选实验的所选抗衡离子源的列表

抗衡离子源	分子量(g/mol)	pKa<sub>1</sub>
			乙二磺酸钠	234.16	-2.1
硫氰酸	59.09	-1.3
			二辛基磺基丁二酸	422.16	-0.8
萘磺酸钠	230.22	0.2
			二氯乙酸	128.94	1.3
羟乙基磺酸钠	148.11	1.7
			扑酸	388.38	2.5
马尿酸	179.18	3.6
			L-赖氨酸	146.19	9.2
组氨酸	155.15	9.2
			1-(2-羟基乙基)-吡咯烷	115.18	9.4

利用表5的抗衡离子源制备盐的程序如下。2-[3-[(3R)-3-[[2-氯-3-(三氟甲基)苯基]甲基-(2,2-二苯基甲基)氨基]丁氧基]-苯基]乙酸按照已知程序从其盐酸盐产生(Collins等人. J. Med. Chem., 2002, 45:1963-1966)。将100 mg游离物质转移进20 mL小瓶中。将乙酸乙酯(1 mL)添加至每个小瓶，接着添加1.0当量的每种抗衡离子源。将样品在环境温度和40℃之间以4小时周期进行温度循环并搅拌24小时。将庚烷作为反溶剂添加至任何澄清溶液中并将样品放置在冰箱中24小时。将如此获得的所有固体通过XRPD分析，并将仍为澄清溶液的所有样品不加盖并让其蒸发。这些抗衡离子源产生被鉴定为抗衡离子源的固体或粘性胶状固体。

使用水性沉淀方案进行另一个盐筛选。该盐筛选使用复分解程序，其中制备化合物1的1:1钠盐，并添加1.0、0.5或0.3当量的作为其氯化物或硫酸盐的所选金属抗衡离子。可替换地，使游离化合物1与作为其乙酸盐或硫酸盐的所选金属抗衡离子反应。这些水性沉淀产生来自锌、铝和铋的自由流动白色固体。

研究了下表7中所示的抗衡离子。

表7：用于研究3中的第三组盐筛选实验的所选抗衡离子源的列表

抗衡离子源
	氯化锌
氯化铋
	乙酸锌
硫酸铝

使用下列程序经由复分解制备锌盐。

将化合物1 (200 mg)溶解在甲醇(2 mL)中以形成混合物。然后将1M NaOH溶液(336µL, 1.0当量)添加至混合物中以形成化合物1的1:1钠盐。将氯化锌(22.5 mg, 0.5当量)溶解在水(1 mL)中，并将所得溶液添加至混合物中，以后白色固体从溶液沉淀出来。将额外的水(1 mL)添加至混合物中并将反应容器用石蜡膜密封，以后将混合物在环境温度和40℃之间以4小时周期在搅拌下进行温度循环24小时。经由旋转蒸发从混合物移除甲醇并添加水(10 mL)以降低溶解度。将得到的沉淀物经由布氏(Buchner)过滤(Whatman 1级滤纸，Ø= 55 mm)分离并用水(100 mL)洗涤以移除任何剩余的氯化钠。将固体在滤纸上干燥，产生白色粉末(152.9 mg, 72%)。

将经由上述盐复分解程序获得的物质按照实例1中所述方法通过ICP、XRPD (图1)、PLM (图2)、TG/DTA (图3)、DSC (图4)、¹H-NMR (图5)和¹⁹F-NMR (图6)表征。物质的表征产生下列信息：

•通过ICP分析，该物质含有5.27重量%锌。化学计量盐为9.9重量%，因此存在约0.51当量锌(预期0.5当量)。

•通过ICP分析，该物质含有0.19重量%钠。化学计量盐为3.7重量%，因此该物质的约5%为1:1钠盐，且该物质的约95%为2:1锌盐。

•通过XRPD分析，该物质是无定形的。

•通过PLM分析，该物质显示一些双折射，具有不规则形态。

•在TG迹线中存在因分解的最小质量损失。

•通过DSC，存在吸热事件，在第一热循环中开始温度为51℃，且存在对应于玻璃化转变的陡峭事件，在第二热循环中的中点温度为52℃。

•¹H-NMR谱与化合物1一致。

•¹⁹F-NMR显示一个主峰。

•如通过HPLC分析所测定的，无定形物的纯度显示在下表8中。

表8：从氯化锌制备的化合物1的锌盐的纯度和稳定性

时间(天)	纯度
		0	99.3%
7 (储存在40℃/75%RH)	99.5%
		7 (储存在80℃)	96.2%

如在表8中所示，通过上述方法制备的锌盐在40℃/75%RH和在80℃储存1周后是稳定的。

也使用乙酸锌作为抗衡离子源来制备锌盐。简而言之，将化合物1 (78 mg)溶解在甲醇(1.5 mL)中，并将乙酸锌溶解在甲醇/水(9:1; 1.5 mL)中，此后将如此获得的两种溶液组合以形成混合物。白色固体立即形成并从溶液沉淀出。然后将样品在环境温度和40℃之间循环约5小时，此后少量白色固体仍未溶解。然后经由旋转蒸发移除溶剂，并将甲醇(5mL)添加至固体。重复循环及溶剂蒸发步骤，然后将甲醇/水(9:1; 5 mL)添加至样品，并再一次重复循环及溶剂蒸发步骤。随后将样品冷冻冻干过夜以移除水，此后获得白色固体。

使用下列程序经由复分解制备铝盐。将化合物1 (200 mg)溶解在甲醇(2 mL)中。通过添加1M NaOH储备溶液(336µL, 1.0当量)制备钠盐。经由旋转蒸发移除甲醇。添加硫酸铝和水(2 mL)，并将样品在环境温度与40℃之间以4小时周期进行温度循环24小时。经由离心分离固体。添加水(3 mL)并将浆液在环境温度搅拌18小时。将固体使用布氏漏斗(Whatman 1级滤纸，Ø= 42.5 mm)过滤并用水(100 mL)洗涤，然后在滤纸上干燥10分钟。将固体在真空下在环境温度干燥约2小时，产生白色粉末(128.7 mg, 61%)。

实施例3. FTIR分析

研究

制备含化合物1的游离化合物和锌盐在CHCl₃中的储备溶液。在容量瓶中，将化合物1的游离形式(50 mg)用CHCl₃稀释至10 mL。也在单独的容量瓶中，将化合物1的锌盐(50mg)用CHCl₃稀释至10 mL。根据在实施例1中所述的FTIR方法，采集化合物1的游离形式(参见图7)和化合物1的锌盐形式(参见图9)的FTIR谱。然后采集具有递增浓度的化合物1的锌盐的样品的FTIR谱，诸如：

●化合物1的游离形式:锌盐的1:1 (w/w)混合物(游离形式储备溶液(500µL)与锌盐储备溶液(500µL)的混合物) (参见图8)；

●化合物1的游离形式:锌盐的1:4 (w/w)混合物(游离形式储备溶液(200µL)与锌盐储备溶液(800µL)的混合物)；

●化合物1的游离形式:锌盐的1:9 (w/w)混合物(游离形式储备溶液(100µL)与锌盐储备溶液(900µL)的混合物)；

●和化合物1的游离形式:锌盐的5:95 (w/w)混合物(游离形式储备溶液(50µL)与锌盐储备溶液(950µL)的混合物)。

将该谱彼此对比以及与ZnO (图10)和ZnCl₂ (图11)的FTIR谱对比。

化合物1的游离形式表现出在约1710 cm^-1处的独特特征峰(参见图7)，其在锌盐谱中不存在(参见图9)。观察到在1710 cm^-1处的峰随着游离形式的百分比减少而收缩。此外，在游离化合物中观察到具有低强度的在约1590 cm^-1处的宽峰，但是随着锌盐浓度增加，其强度增加。

通过在1710 cm^-1处的IR峰的消失证实锌盐，据推测是由于羧酸酯羰基与锌的配位。此外，锌盐不含有在ZnO (特征在于在605 cm^-1处开始至< 500 cm^-1的独特的大的宽带)或ZnCl₂ (特征在于在3386 cm^-1处的独特的宽峰)的IR谱中发现的峰，从而进一步证实锌盐不简单地为游离化合物和无机锌的混合物。

其它实施方案

在本申请中引用的所有文献和类似材料(包括、但不限于专利、专利申请、文章、书籍、论文及网页，不管这样的文献和类似材料的格式如何)明确地通过引用整体并入。在一篇或多篇并入的文献和类似材料与本申请（包括但不限于定义的术语、术语用法、描述的技术等）不同或矛盾的情况下，以本申请为准。

尽管已经结合各种实施方案和实施例描述了方法，但是无意将所述方法限于这样的实施方案或实施例。相反，如本领域技术人员会明白的，本公开内容涵盖各种替代、修改和等效物。

尽管已参考特定示例性实施方案特别显示和描述了所述方法，但是应当理解，可以在不背离本公开内容的精神和范围的情况下作出形式和细节的各种变化。因此，意欲要求保护在本公开内容的范围和精神内的所有实施方案及其等效物。本公开内容的方法、系统和测定的权利要求、描述和简图不应解读为限于所描述的要素顺序，除非陈述为该效果。本申请要求2019年12月13日提交的美国临时序列号62/947,968的权益，其整体并入本文。

Claims

1.2-[3-[(3R)-3-[[2-氯-3-(三氟甲基)苯基]甲基-(2,2-二苯基乙基)氨基]丁氧基]苯基]乙酸(化合物1)的锌盐。

2.权利要求1的锌盐，其中所述锌盐是2:1 (化合物1:锌)盐。

3.权利要求1或2的锌盐，其中所述锌盐是无定形的。

4.权利要求1-3中的任一项的锌盐，其具有如通过热重量分析所测量的小于1%的因分解的质量损失。

5.化合物1的铝盐。

6.权利要求5的铝盐，其中所述铝盐是3:1 (化合物1:铝)盐。

7.权利要求5或6的铝盐，其中所述铝盐是无定形的。

8.权利要求5-7中的任一项的铝盐，其具有如通过热重量分析所测量的小于1%的因分解的质量损失。

9.一种药物组合物，其包含权利要求1-8中的任一项的锌或铝盐和药学上可接受的赋形剂。

10.权利要求9的药物组合物，其中所述药物组合物包含小于1.5重量%的钠。

11.权利要求10的药物组合物，其中所述药物组合物基本上不含有化合物1的1:1钠盐。

12.权利要求9-11中的任一项的药物组合物，其中所述药物组合物是在单位剂型中。

13.一种治疗癌症的方法，所述方法包括施用有效量的权利要求1-8中的任一项的锌或铝盐或权利要求9-12中的任一项的药物组合物。

14.权利要求13的方法，其中所述癌症是乳腺癌、结肠癌、肾细胞癌、肺癌、肝细胞癌、胃癌、卵巢癌、胰腺癌、食管癌、前列腺癌、肉瘤、膀胱癌、头颈癌、胶质母细胞瘤、弥漫性大B细胞性淋巴瘤、白血病或黑素瘤。

15.权利要求14的方法，其中所述癌症是转移性癌症。

16.权利要求15的方法，其中所述有效量包含有效地抑制所述癌症的转移性定植的量。

17.生产化合物1的锌盐的方法，所述方法包括：在足以产生化合物1的锌盐的条件下，组合化合物1或其盐和锌盐。

18.权利要求17的方法，其中化合物1的锌盐是2:1 (化合物1:锌)盐。

19.权利要求17或18的方法，其中化合物1或其盐是1:1 (化合物1:钠)盐。

20.权利要求17-19中的任一项的方法，其中所述锌盐是氯化锌。

21.权利要求17-19中的任一项的方法，其中所述锌盐是乙酸锌。

22.权利要求17-21中的任一项的方法，其中所述方法包括将化合物1或其盐和锌盐溶解在溶剂中以形成混合物。

23.权利要求22的方法，其中所述方法进一步包括使混合物的温度在环境温度和40℃之间循环。

24.权利要求23的方法，其中以4-小时周期进行所述循环。

25.权利要求24的方法，其中进行所述循环24小时。

26.权利要求3的锌盐，其中所述锌盐具有如通过傅立叶变换红外谱法(FTIR)所测量的在约1590±10 cm^-1处相对于游离酸增加强度的峰及在约1710±10 cm^-1处相对于游离酸降低强度的峰。