TWI638818B - ２－（４－（２－（１－異丙基－３－甲基－１ｈ－１，２，４－三唑－５－基）－５，６－二氫苯并［ｆ］咪唑并［１，２－ｄ］［１，４］氧氮呯－９－基）－１ｈ－吡唑－１－基）－２－甲基丙醯胺之多晶型、製造方法及醫藥用途 - Google Patents

Abstract

本發明係關於(2-(4-(2-(1-異丙基-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5,6-二氫苯并[f]咪唑并[1,2-d][1,4]氧氮呯-9-基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基丙醯胺(GDC-0032，塔西利昔(taselisib))之結晶多晶型、其使用方法及製備方法。

Description

2-(4-(2-(1-異丙基-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5,6-二氫苯并[F]咪唑并[1,2-D][1,4]氧氮呯-9-基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基丙醯胺之多晶型、製造方法及醫藥用途 相關申請案之交叉參考

根據37 CFR §1.53(b)申請之本非臨時申請案根據35 USC §119(e)主張於2013年12月16日申請之美國臨時申請案第61/916,657號之權益，該案件係全文以引用方式併入。

本發明係關於名為2-(4-(2-(1-異丙基-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5,6-二氫苯并[f]咪唑并[1,2-d][1,4]氧氮呯-9-基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基丙醯胺之PI3K抑制劑化合物GDC-0032之多晶型。本發明亦係關於獲得GDC-0032之多晶型之製程及使用GDC-0032之多晶型之醫藥組合物在活體外、原位及活體內診斷或治療哺乳動物細胞或相關病況之方法。

磷酸肌醇3-激酶(PI3K)係在肌醇環之3-羥基殘基處使脂質磷酸化之脂質激酶(Whitman等人(1988)Nature,332：664)。藉由PI3-激酶生成 之3-磷酸化磷脂(PIP3)起招募具有脂質結合結構域(包括普列克(pleckstrin)同源(PH)區)之激酶(例如Akt及磷酸肌醇依賴性激酶-1(PDK1))之第二傳訊者之作用。Akt與膜PIP3之結合使Akt易位至質膜，使Akt與負責活化Akt之PDK1接觸。腫瘤抑制因子磷酸酶PTEN使PIP3去磷酸且因此起Akt活化之負調節劑作用。PI3-激酶Akt及PDK1在多個細胞過程(包括細胞週期調節、增殖、存活、細胞凋亡及運動性)之調節中重要且係諸如癌症、糖尿病及免疫發炎等疾病之分子機制中之重要組份(Vivanco等人(2002)Nature Rev.Cancer 2：489；Phillips等人(1998)Cancer 83：41)。

癌症中之主要PI3-激酶異型體係I類PI3-激酶p110 α(阿爾法)(US 5824492；US 5846824；US 6274327)。心血管及免疫發炎疾病中涉及其他異型體(Workman P(2004)Biochem Soc Trans 32：393-396；Patel等人(2004)Proceedings of the American Association of Cancer Research(Abstract LB-247)第95次年會，3月27-31日，Orlando,Florida,USA；Ahmadi K及Waterfield MD(2004)Encyclopedia of Biological Chemistry(Lennarz W J、Lane M D編輯)Elsevier/Academic Press)。PI3激酶/Akt/PTEN路徑係癌症藥物研發之有吸引力之目標，此乃因預期該等調節或抑制劑可抑制增殖，逆轉對細胞凋亡之壓抑並克服癌細胞對細胞毒性劑之抗性(Folkes等人(2008)J.Med.Chem.51：5522-5532；Yaguchi等人(2006)Jour.of the Nat.Cancer Inst.98(8)：545-556)。PI3K-PTEN-AKT信號傳導路徑在眾多種癌症中下調(Samuels Y、Wang Z、Bardellil A等人，High frequency of mutations of the PIK3CA gene in human cancers.(2004)Science；304(5670)：554；Carpten J、Faber AL、Horn C.「A transforming mutation in the pleckstrin homology domain of AKT1 in cancer」(2007)Nature；448：439-444)。

GDC-0032亦稱為塔西利昔(taselisib)、RG7604或IUPAC名稱：2-(4-(2-(1-異丙基-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5,6-二氫苯并[f]咪唑并[1,2-d][1,4]氧氮呯-9-基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基丙醯胺，其具有有效PI3K活性(Ndubaku等人(2013)Jour.Med.Chem.56(11)：4597-4610；WO 2013/182668；WO 2011/036280；US 8242104；US 8343955)且正在患有局部晚期或轉移實體瘤之患者中加以研究(Juric等人「GDC-0032,a beta isoform-sparing PI3K inhibitor：Results of a first-in-human phase Ia dose escalation study」，2013(4月07日)Abs LB-64 American Association for Cancer Research Annual Meeting)。

原料藥之多種具有不同固態性質之晶形可展現生物利用度、儲放壽命及處理期間特徵之差異。粉末X射線繞射係依據獨特繞射圖案鑑別不同晶相之有力工具。

醫藥工業經常遇到相同結晶化學實體具有多種多晶型之現象。多晶型通常係原料藥能以兩種或更多種晶相存在之特徵，該等晶相在晶格中具有不同分子排列及/或構形，從而使晶體具有不同物理化學性質。能可靠地製造所選多晶型之能力係決定藥品成功之關鍵因素。

全世界的管理機構皆需要適當努力來鑑別原料藥之多晶型並檢驗多晶型互變。由於通常無法預測多晶型之特徵及其物理化學性質之各別差異，必須證實相同產品之製造批次之間的一致性。適當理解多晶型情況及醫藥多晶型之性質將有助於製造一致性。

對原子級晶體結構及分子間相互作用之瞭解為確立絕對構形(鏡像異構物)、相鑑別、品質控制及製程研發控制及優化提供重要資訊。業內廣泛認為X射線繞射係用於醫藥固體之晶體結構分析及晶形鑑別之可靠工具。

由於結構測定之速度及準確性，原料藥單晶之可用性較佳。然而，並非總是能獲得具有適用於資料收集之大小之晶體。在彼等情形 中，可自藉由在環境條件下及/或在可變溫度或濕度下量測獲得之X射線粉末繞射資料解析晶體結構。

本發明係關於具有以下結構之名為2-(4-(2-(1-異丙基-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5,6-二氫苯并[f]咪唑并[1,2-d][1,4]氧氮呯-9-基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基丙醯胺之PI3K抑制劑I(塔西利昔、GDC-0032、RG7604，CAS註冊號1282512-48-4,Genentech公司)之多晶型：

及其立體異構物、幾何異構物、互變異構物及醫藥上可接受之鹽。

本發明之一態樣係塔西利昔多晶型之醫藥組合物。

本發明之一態樣係用塔西利昔多晶型治療哺乳動物之過度增殖病症之方法。

本發明之一態樣係製備塔西利昔之結晶多晶型之方法。

圖1顯示GDC-0032形式A-單甲醇合物溶劑合物之ORTEP圖式。原子表示為50%概率各向異性熱橢圓體。

圖2顯示GDC-0032形式A-單甲醇合物之XRPD。

圖3顯示GDC-0032形式B-非溶劑合物之ORTEP圖式。原子表示為50%概率各向異性熱橢圓體。

圖4顯示沿結晶a軸向下觀看之GDC-0032之堆積圖。

圖5顯示沿結晶b軸向下觀看之GDC-0032之堆積圖。

圖6顯示沿結晶c軸向下觀看之GDC-0032之堆積圖。

圖7顯示如沿結晶c軸向下觀看之GDC-0032中之氫鍵結。

圖8顯示GDC-0032中之明顯π-堆疊相互作用。

圖9顯示GDC-0032之計算X射線粉末圖。

圖10顯示GDC-0032形式B之XRPD資料。

圖11顯示GDC-0032形式B之熱資料。

圖12顯示GDC-0032形式B之FT-IR(傅立葉轉換紅外光譜)資料。

圖13顯示GDC-0032形式C-異戊醇之XRPD資料。

圖14顯示GDC-0032形式D-單水合物之XRPD資料。

圖15顯示GDC-0032形式E(頂部)及形式B(底部)之XRPD資料之重疊。

圖16顯示GDC-0032形式F(頂部)對形式B(底部)之XRPD資料之重疊。

圖17顯示GDC-0032形式G(中間)對形式K(頂部)及形式B(底部)之XRPD資料之重疊。

圖18顯示GDC-0032形式I(頂部)對形式G(中間)及形式B(底部)之XRPD資料之重疊。

圖19顯示GDC-0032模式J1(頂部)對形式B(底部)之XRPD資料之重疊。

圖20顯示GDC-0032模式J2(頂部)對形式B(底部)之XRPD資料之重疊。

圖21顯示GDC-0032模式K(頂部)對形式B(底部)之XRPD資料之重疊。

除非另外定義，否則本文所用之所有技術及科學術語皆具有與熟習本發明所屬領域技術者通常所瞭解相同之含義，且與下文一致： 定義

詞語「包含(comprise)」、「包含(comprising)」、「包括(include)」、「包括(including)」及「包括(includes)」在用於本說明書及申請專利範圍中時意欲指定存在所述特徵、整數、組份或步驟，但其不排除一或多個其他特徵、整數、組份、步驟或其群之存在或增加。

如本文所用術語「約」在涉及x射線粉末繞射圖案峰位置使用時係指峰之固有變異性，其端視(例如)所用設備之校準、用於產生多晶型之製程、結晶材料之年齡等而定，端視所用儀器而定。在此情形中，儀器之量測變異性為約+-.0.2度2-系塔(θ)。受益於本發明之熟習此項技術者可理解「約」在此情況中之使用。涉及其他所定義參數(例如水含量、C_max、t_max、AUC、特性溶出速率、溫度及時間)之術語「約」指示(例如)量測參數或達成參數中之固有變異性。受益於本發明之熟習此項技術者可理解如使用詞語約所意味之參數之變異性。

如本文所用「多晶型」係指呈相異水合物狀態之單一化合物存在不同結晶型，例如一些化合物及複合物之性質。因此，多晶型係共享相同分子式之相異固體，但每一多晶型可具有相異物理性質。因此，單一化合物可產生多種多晶型，其中每一形式具有不同且相異之物理性質，例如溶解度概況、熔點溫度、吸濕性、顆粒形狀、密度、流動性、壓實性及/或x射線繞射峰。每一多晶型之溶解度可變，因此，鑑別醫藥多晶型之存在對於提供具有可預測溶解度概況之藥物必不可少。可期望研究藥物之所有固態形式(包括所有多晶型)，且可期望測定每一多晶型之穩定性、溶解及流動性質。化合物之多晶型可在實驗室中藉由X射線繞射光譜及藉由諸如紅外光譜測定等其他方法來區分。關於多晶型及多晶型之醫藥應用之一般評論參見G.M.Wall,Pharm Manuf.3：33(1986)；J.K.Haleblian及W.McCrone,J.Pharm. Sci.,58：911(1969)；「Polymorphism in Pharmaceutical Solids,Second Edition(Drugs and the Pharmaceutical Sciences)」,Harry G.Brittain編輯(2011)CRC Press(2009)；及J.K.Haleblian,J.Pharm.Sci.,64,1269(1975)，其皆係以引用方式併入本文中。

縮寫字「XRPD」意指x射線粉末繞射，其係使用x射線輻射之繞射量測及測定結晶物質中之鍵角及距離之分析技術。XRPD資料之分析係基於關於用於收集資料之X射線繞射系統之已知反應的所量測粉末圖案之一般外觀。對於粉末圖案中可能存在之繞射峰，可使用其位置、形狀、寬度及相對強度分佈來表徵粉末樣品中固態秩序之類型。 可使用在儀器背景頂部上之任何廣泛擴散式散射(光暈)之位置、形狀及強度來表徵固態混亂之程度及類型。存於粉末樣品中之固態秩序及混亂之組合解釋提供樣品宏觀結構之定性量度。

術語「治療(treat)」及「治療(treatment)」係指治療性治療及預防性或防範性措施，其中目標係防止或減慢(減輕)不期望之生理變化或病症，例如癌症之生長、發展或擴散。出於本發明之目的，有益或期望臨床結果包括(但不限於)減輕症狀、降低疾病程度、穩定疾病狀態(即不惡化)、延遲或減慢疾病進展、改善或緩和疾病狀態及可檢測或不可檢測地緩解病情(部分或全部)。「治療」亦可意指與不接受治療之預期存活相比延長存活。彼等需要治療者包括彼等已患有病況或病症者以及彼等易患病況或病症者或彼等欲防範病況或病症者。

片語「治療有效量」意指本發明化合物(i)治療特定疾病、病況或病症，(ii)減弱、改善或消除特定疾病、病況或病症之一或多種症狀，或(iii)防範或延遲本文所述特定疾病、病況或病症之一或多種症狀發作之量。在癌症情形中，治療有效量之藥物可減少癌細胞數；減小腫瘤大小；抑制(即在一定程度上減慢且較佳終止)癌細胞浸潤至周圍器官中；抑制(即在一定程度上減慢且較佳終止)腫瘤轉移；在一 定程度上抑制腫瘤生長；及/或在一定程度上減輕與癌症相關之一或多種症狀。就藥物可防範現有癌細胞之生長及/或殺傷現有癌細胞而言，其可具有細胞生長抑制性及/或細胞毒性。對於癌症療法，可藉由(例如)評價疾病進展時間(TTP)及/或測定反應率(RR)來量測效能。

術語「癌症」及「癌性」係指或闡述哺乳動物中特徵通常在於細胞生長失調之生理病況。「腫瘤」包含一或多個癌細胞。癌症之實例包括(但不限於)癌瘤、淋巴瘤、母細胞瘤、肉瘤及白血病或淋巴樣惡性病。該等癌症之更具體實例包括鱗狀細胞癌(例如上皮鱗狀細胞癌)；肺癌，包括小細胞肺癌、非小細胞肺癌(「NSCLC」)、肺腺癌及肺鱗狀癌；腹膜癌；肝細胞癌；胃癌(gastric cancer或stomach cancer)，包括胃腸癌；胰臟癌、膠質母細胞瘤、子宮頸癌、卵巢癌、肝癌、膀胱癌、肝細胞瘤、乳癌、結腸癌、直腸癌、結腸直腸癌、子宮內膜癌或子宮癌、唾液腺癌、腎癌(kidney cancer或renal cancer)、前列腺癌、外陰癌、甲狀腺癌、肝癌、肛門癌、陰莖癌、以及頭頸癌。如本文所用胃癌(gastric cancer)包括胃癌(stomach cancer)，其可在胃中任一部分發展且可擴散遍及胃且擴散至其他器官；尤其係食管、肺、淋巴結及肝。

術語「造血惡性病」係指在造血期間生成之癌症或過度增殖病症，其涉及諸如以下等細胞：白血球、淋巴球、天然殺傷細胞、漿細胞及骨髓細胞，例如嗜中性球及單核球。造血惡性病包括非霍奇金氏淋巴瘤(non-Hodgkin's lymphoma)、彌漫性大造血淋巴瘤、濾泡性淋巴瘤、外套細胞淋巴瘤、慢性淋巴球性白血病、多發性骨髓瘤、急性骨髓性白血病及骨髓細胞白血病。淋巴球性白血病(或「淋巴胚細胞性」)包括急性淋巴胚細胞性白血病(ALL)及慢性淋巴球性白血病(CLL)。骨髓性白血病(亦係「骨髓」或「非淋巴球性」)包括急性骨髓性(或骨髓胚細胞性)白血病(AML)及慢性骨髓性白血病(CML)。

「化學治療劑」係不論作用機制如何可用於治療癌症之生物(大分子)或化學(小分子)化合物。化學治療劑包括(但不限於)5-FU、多西他賽(docetaxel)、埃雷布林(eribulin)、吉西他濱(gemcitabine)、GDC-0973、GDC-0623、太平洋紫杉醇、他莫昔芬(tamoxifen)、氟維司群(fulvestrant)、地塞米松(dexamethasone)、帕妥珠單抗(pertuzumab)、曲妥珠單抗艾坦辛(trastuzumab emtansine)、曲妥珠單抗及來曲唑(letrozole)。

術語「哺乳動物」包括(但不限於)人類、小鼠、大鼠、天竺鼠、猴、犬、貓、馬、牛、豬及綿羊。

所用術語「包裝插頁」係指通常包括於治療產品之商業包裝中之說明書，其含有關於適應症、用法、劑量、投與、禁忌症及/或關於使用該等治療產品之警告的資訊。

本文所用片語「醫藥上可接受之鹽」係指本發明化合物之醫藥上可接受之有機或無機鹽。實例性鹽包括(但不限於)硫酸鹽、檸檬酸鹽、乙酸鹽、草酸鹽、氯化物、溴化物、碘化物、硝酸鹽、硫酸氫鹽、磷酸鹽、酸式磷酸鹽、異菸酸鹽、乳酸鹽、柳酸鹽、酸式檸檬酸鹽、酒石酸鹽、油酸鹽、鞣酸鹽、泛酸鹽、酒石酸氫鹽、抗壞血酸鹽、琥珀酸鹽、馬來酸鹽、龍膽酸鹽、富馬酸鹽、葡萄糖酸鹽、葡糖醛酸鹽、糖二酸鹽、甲酸鹽、苯甲酸鹽、麩胺酸鹽、甲烷磺酸鹽「甲磺酸鹽」、乙烷磺酸鹽、苯磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽及雙羥萘酸鹽(即1,1’-亞甲基-雙-(2-羥基-3-萘酸鹽))。醫藥上可接受之鹽可涉及包括另一分子，例如乙酸根離子、琥珀酸根離子或其他相對離子。相對離子可為穩定母體化合物上之電荷的任一有機或無機部分。此外，醫藥上可接受之鹽可在其結構中具有一個以上帶電原子。醫藥上可接受之鹽具有多個帶電原子之實例可具有多個相對離子。因此，醫藥上可接受之鹽可具有一或多個帶電原子及/或一或多個相對離子。

若本發明化合物係鹼，則期望之醫藥上可接受之鹽可藉由業內可用之任何適宜方法製備，例如，用以下酸處理游離鹼：無機酸，例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、甲烷磺酸、磷酸及諸如此類；或有機酸，例如乙酸、馬來酸、琥珀酸、苦杏仁酸、富馬酸、丙二酸、丙酮酸、草酸、羥乙酸、柳酸、吡喃糖苷酸(例如葡糖醛酸或半乳糖醛酸)、α羥基酸(例如檸檬酸或酒石酸)、胺基酸(例如天冬胺酸或麩胺酸)、芳香族酸(例如苯甲酸或桂皮酸)、磺酸(例如對甲苯磺酸或乙烷磺酸)或諸如此類。

若本發明化合物係酸，則期望之醫藥上可接受之鹽可藉由任何適宜方法製備，例如，用諸如以下等無機或有機鹼處理游離酸：胺(一級、二級或三級)、鹼金屬氫氧化物或鹼土金屬氫氧化物或諸如此類。適宜鹽之說明性實例包括(但不限於)源自以下之有機鹽：胺基酸(例如甘胺酸及精胺酸)、氨、一級、二級及三級胺及環狀胺(例如六氫吡啶、嗎啉及六氫吡嗪)；及源自以下之無機鹽：鈉、鈣、鉀、鎂、錳、鐵、銅、鋅、鋁及鋰。

期望之醫藥上可接受之鹽可藉由業內可用之任何適宜方法製備，例如，用以下處理游離鹼：無機酸，例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、甲烷磺酸、磷酸及諸如此類；或有機酸，例如乙酸、馬來酸、琥珀酸、苦杏仁酸、富馬酸、丙二酸、丙酮酸、草酸、羥乙酸、柳酸、吡喃糖苷酸(例如葡糖醛酸或半乳糖醛酸)、α羥基酸(例如檸檬酸或酒石酸)、胺基酸(例如天冬胺酸或麩胺酸)、芳香族酸(例如苯甲酸或桂皮酸)、磺酸(例如對甲苯磺酸或乙烷磺酸)或諸如此類。通常視為適於自鹼性醫藥化合物形成醫藥上有用或可接受之鹽之酸論述於(例如)以下文獻中：P.Stahl等人，Camille G.(編輯)Handbook of Pharmaceutical Salts.Properties,Selection and Use.(2002)Zurich：Wiley-VCH；S.Berge等人，Journal of Pharmaceutical Sciences(1977) 66(1)1 19；P.Gould,International J.of Pharmaceutics(1986)33 201 217；Anderson等人，The Practice of Medicinal Chemistry(1996),Academic Press,New York；Remington’s Pharmaceutical Sciences，第18版，(1995)Mack Publishing Co.,Easton PA；及The Orange Book(Food & Drug Administration,Washington,D.C.，在其網站上)。該等揭示內容以引用方式併入本文中。

片語「醫藥上可接受之」指示物質或組合物必須在化學上及/或毒理學上與構成調配物之其他成份及/或用其治療之哺乳動物相容。

「溶劑合物」係指一或多種溶劑分子與本發明化合物之締合物或複合物。形成溶劑合物之溶劑之實例包括(但不限於)水、異丙醇、乙醇、甲醇、DMSO、乙酸乙酯、乙酸及乙醇胺。術語「水合物」係指其中溶劑分子係水之複合物。

術語「對掌性」係指與其鏡像配偶體具有不可重疊性質之分子，而術語「非對掌性」係指可與其鏡像配偶體重疊之分子。

術語「立體異構物」係指具有相同化學組成但原子或基團之空間排列不同之化合物。

「非鏡像異構物」係指具有兩個或更多個對掌性中心且其分子彼此不為鏡像之立體異構物。非鏡像異構物具有不同物理性質，例如熔點、沸點、光譜性質及反應性。非鏡像異構物混合物可在諸如電泳及層析等高解析度分析程序中分離。

「鏡像異構物」係指化合物之兩個彼此係不可重疊鏡像之立體異構物。

本文所用之立體化學定義及慣例通常遵循S.P.Parker編輯，McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms(1984)McGraw-Hill Book Company,New York；以及Eliel,E.及Wilen,S.,「Stereochemistry of Organic Compounds」,John Wiley & Sons公司，New York,1994。本發 明化合物可含有不對稱或對掌性中心，且因此以不同立體異構形式存在。本發明化合物之所有立體異構形式(包括但不限於非鏡像異構物、鏡像異構物及阻轉異構物，以及其混合物，例如外消旋混合物)皆形成本發明之一部分。多種有機化合物以光學活性形式存在，即其能旋轉平面偏振光之平面。在闡述光學活性化合物時，使用前綴D及L或R及S來表示分子圍繞其對掌性中心之絕對構形。採用前綴d及l或(+)及(-)來指定化合物旋轉平面偏振光之符號，其中(-)或l意指化合物係左旋。有(+)或d前綴之化合物係右旋。對於給定化學結構而言，該等立體異構物相同，只是其係彼此之鏡像。具體立體異構物亦可稱作鏡像異構物，且此等異構物之混合物通常稱為鏡像異構混合物。鏡像異構物之50：50混合物稱作外消旋混合物或外消旋物，其可在化學反應或過程中已無立體選擇性或立體特異性時出現。術語「外消旋混合物」及「外消旋物」係指兩種鏡像異構物質之全無光學活性之等莫耳混合物。

術語「互變異構物」或「互變異構形式」係指可經由低能量障壁相互轉化之具有不同能量之結構異構物。舉例而言，質子互變異構物(亦稱為質子移變互變異構物)包括經由質子遷移之互變，例如酮-烯醇及亞胺-烯胺異構化。價互變異構物包括藉由一些鍵結電子之重組互變。

GDC-0032之多晶型

本發明包括GDC-0032之多晶型以及用於產生GDC-0032之多晶型之製程、方法及試劑，該GDC-0032之多晶型顯示為式I(Roche RG7604,CAS註冊號1282512-48-4)：

且名為：2-(4-(2-(1-異丙基-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5,6-二氫苯并[f]咪唑并[1,2-d][1,4]氧氮呯-9-基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基丙醯胺(US 8242104；WO 2011/036280，其係以引用方式明確併入)。如本文所用GDC-0032包括其所有立體異構物、幾何異構物、互變異構物及醫藥上可接受之鹽。

GDC-0032形式B之三斜晶胞參數及計算體積為：a=9.7944(14)，b=10.4767(11)，c=12.5994(17)Å，α=96.145(10)，β=95.749(11)，β=115.072(9)°，V=1149.0(3)ų。GDC-0032形式B之晶體結構中之不對稱單元之式量為460.541amu．(式單位)^-1且Z=2，得出計算密度為1.33g cm^-3。空間群經測定為P-1(2號)。晶體資料及結晶資料收集參數之概述提供於實例13之表8中。

所獲得結構之品質為中等，如R值為0.060(6.0%)所指示。通常引用介於0.02至0.05範圍內之R值用於最可靠測定之結構(Glusker,Jenny Pickworth；Trueblood,Kenneth N.Crystal Structure Analysis：A Primer，第2版；Oxford University press：New York,(1985)，第87頁)。

GDC-0032之ORTEP圖式顯示於圖3中。在C6處構形無序，該碳部分佔據兩個不同位置(C6A為31.3%且C6B為68.7%)。在單晶結構之不對稱單元中觀察到之分子與式I分子結構一致。圖3中顯示之不對稱單元含有一個GDC-0032分子。

沿a、b及c結晶軸觀看之堆積圖分別顯示於圖4、5及6中。其中無 溶劑可及空隙。在圖7中觀看氫鍵結。氫鍵結以醯胺N108用作氫供體且以三嗪N25用作接受體形成頭-尾二聚體(編號方案來自圖3)。供體與接受體之距離為2.965(5)Å且供體-氫-接受體鍵角為153(3)°。在GDC-0032二聚體中在一個分子之苯環與另一個分子之咪唑環之間亦存在明顯分子間π-堆疊(派-堆疊)相互作用(圖8)。

圖9顯示自單晶資料生成之GDC-0032形式B之計算XRPD圖案。GDC-0032形式B之實驗XRPD圖案顯示於圖10中。來自單晶資料之計算粉末圖案及實驗圖案分別係在150℃及約295℃獲得。由於溫度差異，可能發生單位晶胞參數a、b、c及角度α、β、γ之各向異性膨脹或收縮，導致兩個圖中之反射相對於彼此移位。實驗圖案中之所有反射表示於計算圖案中，指示散裝材料(bulk material)可能係單相且其與單晶係相同相。

形式B多晶型位置參數及其估計之標準偏差(表1)、各向異性溫度因子係數(表2)、鍵距(表3)、鍵角(表4)、氫鍵及角度(表5)以及扭轉角(表6)顯示於下文中。

加星號的原子經各向同性精修

U_eq=(1/3)Σ_iΣ_j U_ija^* _ia^* _j a _i.a _j

各向異性溫度因子之形式係：exp[-2π h²a^*2U(1,1)+k²b^*2U(2,2)+1²c^*2U(3,3)+2hka^*b^*U(1,2)+2hla^*c^*U(1,3)+2klb^*c^*U(2,3)]，其中a^*、b^*及c^*係倒易晶格常數。

括號中之數字係以最低有效數位表示之標準不確定度。

括號中之數字係以最低有效數位表示之標準不確定度。

括號中之數字係以最低有效數位表示之標準不確定度。

括號中之數字係以最低有效數位表示之標準不確定度。

物理形式篩選導致表徵GDC-0032之不同晶相、多晶型、水合物及溶劑合物。GDC-0032之溶解度係在兩種不同溫度下在23種溶劑/溶劑混合物中測定(實例2)。表徵GDC-0032之多個多晶型，包括(但不限於)以下：

形式A，甲醇合物

在含有甲醇之實驗中觀察到形式A。首先藉由來自手工實驗之固體分析對其進行表徵。形式A係結晶材料，如自PLM及XRPD所測定(圖2)。在水中漿化形式A產生可能混合之水合物-甲醇合物。針對形式A收集之熱資料(TGA)指示截至125℃時6.5%之重量損失，此與1莫耳甲醇之損失一致(單甲醇合物之理論重量損失：6.5%)。DSC顯示在105-125℃之吸熱(max)，與TGA中之重量損失一致，之後顯示在257℃下吸熱，此歸因於熔體，如藉由高溫載台顯微術所確認。在氮或真空下使甲醇合物去溶劑化導致形成形式B(即使粒徑減小)。在50℃下在水存在下漿化形式A產生形式D單水合物。在室溫下之水漿液實驗 在乾燥後產生形式A與形式D之混合物。尚未明瞭潮濕材料係形式混合物抑或混合之水合物-甲醇合物溶劑合物。另外，部分去溶劑化形式A含有0.6莫耳甲醇。對自甲醇結晶之固體之單晶結構測定確認形式A係單甲醇合物。圖1顯示GDC-0032形式A-單甲醇合物溶劑合物之ORTEP圖式。

形式B，非溶劑合物

形式B係藉由使多種溶劑合物去溶劑化自多種溶劑衍生之非溶劑合物形式。形式B亦已鑑別為形式II。依據XRPD(圖10)且依據PLM(偏光顯微術)，形式B係結晶。圖11顯示，形式B之熱分析(TGA)指示在最高200℃下重量損失極少或無。在200℃與270℃之間觀察到較小重量損失(通常少於0.5%)，可能與晶體中包括結晶溶劑有關。DSC分析指示在257℃下存在歸因於熔體之單一吸熱事件。形式B之DVS資料顯示低動態吸濕性，其中在95% RH下增重低於0.3%。在解吸循環中觀察到極小滯後。在DVS實驗後，材料仍係形式B。在水中使用或不使用Tween 80漿化形式B不導致轉化為水合物。形式B在40℃及75% RH下進行加速穩定性測試後不變。圖12顯示形式B之FT-IR光譜。單晶結構測定確認，形式B未經溶劑化或水合。

基於包括以下之準則，選擇形式B多晶型用於研發：形成與擬態多晶型相反之多晶型之傾向、結晶度、熱分析資料(例如熔點)、吸濕性、物理穩定性、固態化學穩定性、溶解度、機械應力、粉末性質、大規模可製造性及調配態樣。

形式C，單異戊醇化物溶劑合物

形式C僅衍生自異戊醇且首先於5℃下形成。僅在結晶載體研究期間觀察到該形式C。依據XRPD(圖13)及PLM，其係結晶。關於未乾燥濕潤樣品之TGA資料顯示15%之總重量損失。將此重量損失分為兩個大概步驟：自環境溫度至105℃觀察到5.2%重量損失，且自105- 125℃(異戊醇之bp：130℃)觀察到另外9.8%重量損失。單溶劑合物之理論重量損失係16.1%且半溶劑合物之理論重量損失係8.7%。形式C之晶體結構係在Basel解析。形式D係單異戊醇化物。在真空及60℃下使形式C去溶劑化產生非溶劑化形式B。DSC資料指示在109℃之強急劇吸熱，之後係在257℃大概由於形式B之熔體所致之強吸熱。尚未得知在109℃之吸熱是否係溶劑合物之不一致熔體及/或並行轉化為形式B。使用形式B在純異戊醇中進行之漿液互變實驗指示，形式B在約20℃或更高之溫度下較佳。在15℃或更低溫度下有利於溶劑合物形式C。

形式D，單水合物

形式D係衍生自高水活性之水性溶劑之水合物。在純水、含有tween之水存在下，或藉由在環境溫度或60℃下在水存在下溫和研磨材料，未自形式B觀察到該形式D。依據XRPD(圖14)及PLM，形式D係結晶。熱資料(TGA)指示在最高100℃下3.7%之重量損失(單水合物理論值3.3%)。實施一系列等溫TGA試驗以降低潛在濕粒化問題之風險。在TGA中去水係在100℃下在15分鐘內完成，且在60℃下在40分鐘內完成。DSC資料指示在94℃下吸熱(開始)，對應於TGA中之重量損失。分別在137℃及150℃下觀察到可能形式B之明顯重疊熔體再結晶，之後在257℃下熔融。未進行表徵該等轉變之進一步工作。實施單晶結構測定，且確認形式D係單水合物。

形式E，單三氟乙醇化物

形式E衍生自含有2,2,2-三氟乙醇之溶劑系統且藉由XRPD測定為結晶。在圖15中形式E之XRPD資料與形式B重疊。形式E之熱資料指示在最高160℃之溫度下18.1%之重量損失(單三氟乙醇化物之理論重量損失：17.8%)。該重量損失係藉由TG-MS鑑別為2,2,2-三氟乙醇。DSC指示在122℃存在與去溶劑化有關之寬吸熱以及在257℃存在急劇 強吸熱。據假設但並未證實，在257℃之吸熱稀有魚形式B熔融所致。單晶結構解析確認，形式E係單三氟乙醇化物。

形式F，單乙腈溶劑合物

形式F衍生自乙腈及乙醇性乙腈。如藉由XRPD所示，形式F係結晶。在圖16中形式F之XRPD資料與形式B重疊。TGA指示在最高240℃之溫度下7.7%之重量損失(單乙腈溶劑合物之理論重量損失：8.2%)。該重量損失藉由TG-MS鑑別為乙醇及乙腈。DSC分析指示在124℃與TGA中之重量損失有關之寬吸熱，之後係在252℃之強吸熱。據假設但並未證實，在252℃之吸熱係由於形式B之熔融所致。單晶結構解析確認，形式F係單乙腈溶劑合物。細節將單獨報告。儘管基於單晶資料將形式F指定為單乙腈溶劑合物，但TG-MS資料指示，可能存在同形混合乙醇-乙腈溶劑合物。

形式G，單乙醇化物

形式G衍生自乙醇且藉由XRPD顯示為結晶且與形式E及形式K基本上同形(圖17)。熱資料(TGA)指示在最高160℃之溫度下9.6%之重量損失(單乙醇化物之理論重量損失：9.1%)。該重量損失藉由TG-MS鑑別為乙醇。DSC分析指示在117℃與乙醇損失有關之寬吸熱，之後係在256℃之強吸熱。在單獨實驗中，證實形式G在減壓下加熱後轉化為形式B。形式G係GDC-0032之單乙醇化物且與已確定晶體結構之三氟乙醇溶劑合物形式E同形。

形式H，單氯仿溶劑合物

形式H係GDC-0032之單氯仿溶劑合物。此形式僅係藉由單晶結構解析來鑑別。未收集到表徵資料。氯仿分子佔據結構中之通道。

形式I，單四氫呋喃溶劑合物

形式I衍生自四氫呋喃(THF)且藉由XRPD發現係結晶，且與形式E及形式G基本上同形(圖18)。熱資料(TGA)指示在最高180℃之溫度 下15.0%之重量損失(單THF溶劑合物之理論重量損失：13.5%)。該重量損失藉由TG-MS鑑別為THF。SDTA指示在約130℃與重量損失及形式轉化有關之可能的吸熱/放熱組合，之後係在252℃大概由於形式B之熔體所致之強吸熱(max)。形式I係四氫呋喃溶劑合物且與形式E及形式G基本上同形。

模式J

模式J材料衍生自自丙酮(模式J1)、自丙酮-水(模式J2)及自THF(模式J3)冷卻蒸發。依據XRPD，模式J材料係結晶(圖19及20)。模式J2及模式J3同形。由於粉末圖案中之無序及相信該等材料代表部分去溶劑化結構，已為該等材料指定模式。另外，尚未明瞭形式I與模式J3之間之關係。模式J1之熱資料(TGA)指示在最高240℃之溫度下6.8%之重量損失(半丙酮溶劑合物之理論重量損失：5.9%，單丙酮溶劑合物之重量損失：11.2%)，且大部分重量損失出現在120℃以下。該重量損失藉由TG-MS鑑別為丙酮。模式J2之TGA指示在最高140℃之溫度下4.7%之重量損失(半丙酮溶劑合物之理論重量損失：5.9%，單丙酮溶劑合物之重量損失：11.2%)，且大部分重量損失出現在100℃以下。該重量損失藉由TG-MS鑑別為丙酮。SDTA指示兩種模式在252℃之強吸熱(max)。模式J2之SDTA中之基線過於嘈雜而無法得出關於潛在形式轉化之結論。模式J3係自水性THF分離。未收集到表徵資料。可能存在含有THF之模式J之同形溶劑合物(混合溶劑合物)。模式J材料可由部分丙酮溶劑合物及潛在部分THF溶劑合物組成。

模式K

模式K係自2,2,2-三氟乙醇分離。依據XRPD，該材料係結晶，但結晶度似乎低於其他形式(圖21)。可能存在少量形式E。另外，可能存在非晶形或缺陷相。因此，尚未將此材料指定為某形式。TGA資料指示在最高240℃之溫度下19.8%之重量損失，且大部分重量損失出現 在140℃之前。大部分材料藉由TG-MS鑑別為主要係2,2,2-三氟乙醇(單三氟乙醇化物之理論重量損失：17.8%)。SDTA資料指示在約125℃存在與重量損失有關之寬吸熱且在252℃存在大概係由於形式B之熔體所致之強吸熱(max)。該材料似乎由單三氟乙醇溶劑合物組成。

模式L

模式L材料係自異丙醇分離。XRPD資料指示，此材料與形式E、形式G及形式I基本上同形。

模式M

模式M材料係自1,2-二氯乙烷(DCE)-硝基甲烷漿液及甲基乙基酮-庚烷蒸發以及使用2-甲基四氫呋喃(2-MeTHF)-庚烷之冷卻實驗分離。在粉末圖案之間略有差異，但尚未得知該等差異是否代表資料之品質或該等差異是否代表固體結構之間之差異。另一衍生自1-丙醇-DCE之材料具有與硝基甲烷-DCE衍生之材料類似之粉末圖案。藉由TGA及DSC分析來自1,2-二氯乙烷-硝基甲烷之模式M材料。TGA指示截至132℃發生之10.7%之重量損失。未鑑別溶劑性質(半二氯乙烷溶劑合物之理論值：9.7%，硝基甲烷溶劑合物之理論值：11.7%)。DSC顯示在115℃與TGA中之重量損失有關之寬吸熱及在257℃可能與形式B之熔體有關之強吸熱。亦藉由DSC分析自1-丙醇製備之材料。DSC資料指示在93℃存在寬吸熱，之後在254℃存在強吸熱。寬吸熱可能與重量損失有關，但未收集TGA資料。使用DCE及2-Me-THF實施單獨實驗。DCE漿液之DSC資料指示在75℃之極寬吸熱(開始)且在85℃及104℃具有兩個可能最大值，之後係在256℃之強吸熱。來自2-MeTHF之DSC資料指示在254℃之強吸熱。在基線可能存在弱轉變，但由於樣本大小極小所致之不確定性，尚未標記出潛在轉變。DCE之寬吸熱可能與重量損失有關，但未對任一樣品實施TGA分析。模式M材料可代表一系列易於去溶劑化之溶劑合物。

模式N

在自乙醇-α,α,α-三氟甲苯(BTF)及1,2-二甲氧基乙烷-庚烷蒸發之自動化篩選中觀察到模式N材料。依據XRPD，該等材料係結晶。二甲氧基乙烷資料可能代表形式B粉末圖案。對乙醇-BTF漿液實施熱分析。TGA指示在最高200℃下之極小重量損失。DSC分析指示在258℃下之單一吸熱。尚未明瞭熱資料代表來自與乙醇-BTF蒸發實驗之粉末資料相同之材料之資料。

X射線單晶及粉末繞射分析

用市售分析軟體對X射線粉末繞射(XRPD)圖案實施分析。XRPD可用於對不同晶相、多晶型、水合物或溶劑合物藉由其獨特繞射圖案進行指紋分析。沿橫坐標(水平軸)繪製所謂的2θ值，即入射束與繞射束之間之一系列角度。縱坐標(垂直軸)記錄藉由檢測器暫存之散射X射線之強度。峰組用作結晶物質內之結晶單位晶胞之獨特指紋。結晶單位晶胞係最小原子級3D片段，其在整個晶體中之三個尺寸中週期性重複。所有結晶物質皆係藉由其結晶單位晶胞(且因此峰位置)來區分。藉由比較所量測峰位置與數據庫中保存之峰位置，可獨特地鑑別結晶物質。對於純物質，所有峰的位置一般係界定構成結晶單位晶胞之基本平行六面體之三個參數a、b、c及三個角度阿爾法、貝他、伽瑪(α、β、γ)之函數。

醫藥組合物及調配物

可根據標準醫藥實踐來調配GDC-0032(式I)之多晶型用於治療性治療(包括預防性治療)包括人類在內之哺乳動物之過度增殖病症之治療組合。本發明提供醫藥組合物，其包含GDC-0032與一或多種醫藥上可接受之載劑、助流劑、稀釋劑或賦形劑之組合。

適宜載劑、稀釋劑、助流劑及賦形劑為熟習此項技術者所熟知，且包括諸如以下等材料：碳水化合物、蠟、水溶性及/或水可溶 脹聚合物、親水或疏水材料、明膠、油、溶劑、水及諸如此類。

調配物可使用習用溶解及混合程序來製備。通常將本發明化合物調配成醫藥劑型以提供易控制之藥物劑量並使患者順應所指定方案。

可端視用於投與藥物之方法以多種方式包裝所施用之醫藥組合物(或調配物)。通常，分配用物件包括其中保存有呈適當形式之醫藥調配物之容器。適宜容器為熟習此項技術者所熟知且包括諸如以下等材料：瓶(塑膠瓶及玻璃瓶)、藥囊、安瓶、塑膠袋、金屬圓筒及諸如此類。容器亦可包括防擾配件以防止不慎接觸到包裝中之內容物。另外，容器於其上置有闡述容器內容物之標記。該標記亦可包括適當警告。

GDC-0032之多晶型之醫藥調配物可經製備與醫藥上可接受之稀釋劑、載劑、賦形劑、助流劑或穩定劑一起用於多種投與途徑及類型(Remington's Pharmaceutical Sciences(1995)第18版，Mack Publ.Co.,Easton,PA)，其呈凍乾調配物、研磨粉末或水溶液形式。可藉由在環境溫度及適宜pH及期望純度下與生理上可接受之載劑(即在所用劑量及濃度下對接受者無毒之載劑)混合來實施調配。調配pH主要取決於具體應用及化合物濃度，但可介於約3至約8範圍內。

醫藥調配物較佳無菌。具體而言，欲用於活體內投與之調配物必須無菌。該滅菌係藉由經無菌濾膜過濾容易地完成。

醫藥調配物通常可作為固體組合物、錠劑、丸劑、膠囊、凍乾調配物或作為水溶液來儲存。

本發明醫藥調配物將以符合良好醫學實踐之方式(即數量、濃度、排程表、過程、媒劑及投與途徑)給藥及投與。在此情況下所考慮之因素包括所治療之具體病症、個別患者之臨床狀況、病因、藥劑之遞送位點、投與方法、投與排程及開業醫師已知之其他因素。

可接受之稀釋劑、載劑、賦形劑及穩定劑在所用劑量及濃度下對接受者無毒，且包括緩衝劑，例如磷酸鹽、檸檬酸鹽及其他有機酸；抗氧化劑，包括抗壞血酸及甲硫胺酸；防腐劑(例如十八烷基二甲基苄基氯化銨；氯化六羥季銨；氯化苄烷銨(benzalkonium chloride)、氯化本索寧(benzethonium chloride)；苯酚、丁醇、乙醇或苄醇；對羥基苯甲酸烷基酯，例如對羥基苯甲酸甲酯或對羥基苯甲酸丙酯；兒茶酚；間苯二酚；環己醇；3-戊醇；及間甲酚)；低分子量(少於約10個殘基)多肽；蛋白質，例如血清白蛋白、明膠或免疫球蛋白；親水聚合物，例如聚乙烯吡咯啶酮；胺基酸，例如甘胺酸、麩醯胺酸、天冬醯胺、組胺酸、精胺酸或離胺酸；單糖、二糖及其他碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖或糊精；鼇合劑，例如EDTA；糖，例如乳糖、蔗糖、甘露糖醇、海藻糖或山梨糖醇；鹽形成相對離子，例如鈉；金屬錯合物(例如Zn-蛋白質錯合物)；及/或非離子型表面活性劑，例如TWEEN ^TM(包括Tween 80)、PLURONICS ^TM或聚乙二醇(PEG)(包括PEG400)。亦可將活性醫藥成份分別裝入藉由(例如)凝聚技術或界面聚合製備之微膠囊中，例如羥甲基纖維素或明膠微膠囊及聚(甲基丙烯酸甲酯)微膠囊，該等微膠囊呈膠體藥物遞送系統(例如脂質體、白蛋白微球體、微乳液、奈米顆粒及奈米膠囊)形式或呈粗乳液形式。該等技術揭示於Remington's Pharmaceutical Sciences第18版(1995)Mack Publ.公司，Easton,PA中。藥物調配物之其他實例可參見Liberman,H.A.及Lachman,L.編輯，Pharmaceutical Dosage Forms,Marcel Decker，第3卷，第2版，New York,NY。

醫藥上可接受之助流劑可選自二氧化矽、纖維素粉末、微晶纖維素、金屬硬脂酸鹽、鋁矽酸鈉、苯甲酸鈉、碳酸鈣、矽酸鈣、玉米澱粉、碳酸鎂、無石棉滑石、stearowet C、澱粉、澱粉1500、月桂基硫酸鎂、氧化鎂及其組合。

醫藥調配物包括彼等適合於本文所詳述之投與途徑者。調配物可便捷地以單位劑型來呈遞且可藉由製藥業內熟知之任何方法來製備。技術及調配物一般可參見Remington's Pharmaceutical Sciences第18版(1995)Mack Publishing公司，Easton,PA。該等方法包括使活性成份與構成一或多種附屬成份之載劑結合之步驟。一般而言，調配物係藉由使活性成份與液體載劑或精細固體載劑或二者均勻且充分結合，然後(若需要)使產物成形來製備。

醫藥組合物可呈無菌可注射製劑形式，例如無菌可注射之水性或油性懸浮液。此懸浮液可根據已知技術使用彼等上文已提及之適宜分散劑或潤濕劑及懸浮劑來調配。無菌可注射製劑可為無毒非經腸可接受稀釋劑或溶劑中之溶液或懸浮液(例如1,3-丁二醇溶液)或可自凍乾粉劑製備。可用之可接受媒劑及溶劑尤其係水、林格氏溶液(Ringer's solution)及等滲氯化鈉溶液。另外，傳統上可採用無菌不揮發油作為溶劑或懸浮介質。出於此目的，可採用任何溫和不揮發油，包括合成甘油單酯或甘油二酯。另外，諸如油酸等脂肪酸亦可用於製備可注射劑。

醫藥組合物之投與

本發明醫藥組合物可藉由對於所治療病況適宜之任何途徑來投與。適宜途徑包括經口、非經腸(包括皮下、肌內、靜脈內、動脈內、吸入、真皮內、鞘內、硬膜外及輸注技術)、經皮、經直腸、經鼻、局部(包括經頰及舌下)、經陰道、腹膜內、肺內及鼻內。局部投與亦可涉及使用經皮投與，例如經皮貼劑或離子電滲裝置。藥物調配物論述於Remington's Pharmaceutical Sciences，第18版，(1995)Mack Publishing Co.,Easton,PA中。藥物調配物之其他實例可參見Liberman,H.A.及Lachman,L.編輯，Pharmaceutical Dosage Forms,Marcel Decker，第3卷，第2版，New York,NY。對於局部免疫抑制 治療，化合物可藉由病灶內投與來投與，包括在移植前灌注或以其他方式使移植物與抑制劑接觸。應瞭解，較佳途徑可隨(例如)接受者之情況而變。倘若化合物係經口投與，則可用醫藥上可接受之載劑、助流劑或賦形劑將其調配為丸劑、膠囊、錠劑等。倘若化合物係非經腸投與，則其可用醫藥上可接受之非經腸媒劑或稀釋劑調配，且呈可注射單位劑型，如下文所詳述。

治療人類患者之劑量可介於約1mg至約100mg GDC-0032之多晶型、例如約3mg至約20mg該化合物範圍內。可端視具體化合物之藥物動力學(PK)及藥效學(PD)性質(包括吸收、分佈、代謝及排泄)，每天一次(QD)、每天兩次(BID)或以更高頻率投與劑量。另外，毒性因素可影響劑量及投與方案。在經口投與時，丸劑、膠囊或錠劑可在指定時間段中每天兩次、每天一次或以較低頻率(例如每週一次或每兩週或三週一次)攝取。該方案可重複多個治療循環。

治療方法

GDC-0032之多晶型之不同之處可在於其活體內生物利用度性質。因此，本文所揭示之多晶型可用於製備具有不同特徵之藥物用於治療諸如癌症等過度增殖病症。此將容許生成具有顯著不同之吸附程度且Cmax值為約0.0ng/ml至5.0μg/ml之GDC-0032製劑。此導致製備由經歷治療之個體極小吸收至顯著吸收之GDC-0032組合物。本發明之一個實施例係藉由選擇適用於治療患者之多晶型或多晶型混合物來調節GDC-0032之治療作用。舉例而言，最具生物利用性之GDC-0032之多晶型可選自本文所揭示之彼等，此乃因其對於經歷治療之個體可更安全。

本發明方法可用於用GDC-0032之多晶型治療哺乳動物(例如，人類)之諸如癌症等過度增殖病症。舉例而言，該等方法可用於診斷、監測及治療哺乳動物(例如，人類)之多發性骨髓瘤、淋巴瘤、白血 病、前列腺癌、乳癌、肝細胞癌、肺癌、胰臟癌及/或結腸直腸癌。

本發明方法可用於用GDC-0032之多晶型抑制異常細胞生長。

(1)GDC-0032之多晶型與(2)化學治療劑之治療組合可用於治療疾病、病況及/或病症，包括(但不限於)彼等特徵為活化PI3激酶路徑者。因此，本發明之另一態樣包括可藉由抑制脂質激酶(包括PI3)來治療疾病或病況之方法。在一個實施例中，治療實體腫瘤或造血惡性病之方法包含將治療組合作為組合調配物或交替投與哺乳動物，其中該治療組合包含治療有效量之GDC-0032及治療有效量之一或多種選自以下之化學治療劑：5-FU、多西他賽、埃雷布林、吉西他濱、GDC-0973、GDC-0623、太平洋紫杉醇、他莫昔芬、氟維司群、地塞米松、帕妥珠單抗、曲妥珠單抗艾坦辛、曲妥珠單抗及來曲唑。可採用(1)GDC-0032之多晶型與(2)化學治療劑之治療組合來治療過度增殖疾病或病症，包括造血惡性病、腫瘤、癌症及贅瘤組織以及癌前及非贅瘤或非惡性過度增殖病症。在一個實施例中，人類患者係經治療組合及醫藥上可接受之載劑、佐劑或媒劑治療，其中該治療組合之GDC-0032或其代謝物係以可檢測地抑制PI3激酶活性之量存在。

造血惡性病包括非霍奇金氏淋巴瘤、彌漫性大造血淋巴瘤、濾泡性淋巴瘤、外套細胞淋巴瘤、慢性淋巴球性白血病、多發性骨髓瘤、AML及MCL。

本發明之另一態樣提供用於治療患有本文所述疾病或病況之哺乳動物(例如人類)之該疾病或病況之醫藥組合物或治療組合。亦提供醫藥組合物在製備用於治療患有本文所述疾病及病況之溫血動物(例如哺乳動物，例如人類)之該病症之藥劑中之用途。

本發明之另一態樣提供如本文所述醫藥組合物用於治療選自以下之過度增殖病症：多發性骨髓瘤、淋巴瘤、白血病、前列腺癌、乳癌、肝細胞癌、肺癌、胰臟癌及結腸直腸癌。

本發明之另一態樣提供如本文所述醫藥組合物用於治療選自以下之過度增殖病症之用途：多發性骨髓瘤、淋巴瘤、白血病、前列腺癌、乳癌、肝細胞癌、肺癌、胰臟癌及結腸直腸癌。

本發明之另一態樣提供如本文所述結晶多晶型作為治療活性物質之用途。

本發明之另一態樣提供如本文所述結晶多晶型用於治療選自以下之過度增殖病症：多發性骨髓瘤、淋巴瘤、白血病、前列腺癌、乳癌、肝細胞癌、肺癌、胰臟癌及結腸直腸癌。

本發明之另一態樣提供如本文所述結晶多晶型用於製造用於治療選自以下之過度增殖病症之藥劑：多發性骨髓瘤、淋巴瘤、白血病、前列腺癌、乳癌、肝細胞癌、肺癌、胰臟癌及結腸直腸癌。

本發明之另一態樣提供如本文所述結晶多晶型在治療選自以下之過度增殖病症中之用途：多發性骨髓瘤、淋巴瘤、白血病、前列腺癌、乳癌、肝細胞癌、肺癌、胰臟癌及結腸直腸癌。

本發明之另一態樣提供如上文所述之發明。

組合療法

GDC-0032之多晶型可與某些化學治療劑組合用於治療過度增殖病症，包括實體腫瘤或造血惡性病以及癌前及非贅瘤或非惡性過度增殖病症。在某些實施例中，將GDC-0032之多晶型與化學治療劑在單一調配物中以用於同時投與組合之單一錠劑、丸劑、膠囊或溶液形式組合。在其他實施例中，GDC-0032之多晶型及化學治療劑係根據劑量方案或療程在單獨調配物中以用於依序投與GDC-0032之多晶型及選自以下之化學治療劑之單獨錠劑、丸劑、膠囊或溶液形式投與：5-FU、多西他賽、埃雷布林、吉西他濱、GDC-0973、GDC-0623、太平洋紫杉醇、他莫昔芬、氟維司群、地塞米松、帕妥珠單抗、曲妥珠單抗艾坦辛、曲妥珠單抗及來曲唑。化學治療劑具有抗過度增殖性質或 可用於治療過度增殖病症。GDC-0032之多晶型與化學治療劑之組合可具有協同性質。醫藥組合調配物或投藥方案中之化學治療劑較佳具有與GDC-0032之多晶型互補之活性，且使得其不會對彼此造成不利影響。治療組合中之該等化合物可以有效用於既定目的之量投與。在一個實施例中，本發明醫藥調配物包含GDC-0032及例如本文所述之化學治療劑。在另一實施例中，治療組合係藉由投藥方案來投與，其中治療有效量之GDC-0032之多晶型係以每天兩次至每三週一次(q3wk)之範圍投與，且治療有效量之化學治療劑係以每天兩次至每三週一次之範圍單獨交替投與。

本發明治療組合包括GDC-0032之多晶型及選自以下之化學治療劑：5-FU、多西他賽、埃雷布林、吉西他濱、GDC-0973、GDC-0623、太平洋紫杉醇、他莫昔芬、氟維司群、地塞米松、帕妥珠單抗、曲妥珠單抗艾坦辛、曲妥珠單抗及來曲唑，其係單獨、同時或依序用於治療過度增殖病症。

組合療法可以同時或依序方案來投與。在依序投與時，該組合可以兩次或更多次投與來投與。組合投與包括使用單獨調配物或單一醫藥調配物共同投與，及以任一順序連續投與，其中兩種(或所有)活性劑較佳在一段時間內同時發揮其生物活性。

上述共投與藥劑中任一者之適宜劑量係彼等目前使用者且可因新鑑別藥劑與其他化學治療劑或治療之組合作用(協同作用)而降低，例如增加治療指數或減輕毒性或其他副作用或後果。

在抗癌療法之具體實施例中，治療組合可與作為輔助療法之手術療法及放射療法組合。本發明之組合療法包括投與GDC-0032之多晶型及一或多種其他癌症治療方法或模式。GDC-0032之多晶型及化學治療劑之量及投與之相對時間安排將經選擇以達成期望組合治療效應。

製品

在本發明之另一實施例中，提供含有可用於治療上述疾病及病症之GDC-0032之多晶型之製品或「套組」。在一個實施例中，套組包含含有GDC-0032之多晶型之容器。套組可進一步包含在容器上或與容器相結合之標記或包裝插頁。所用術語「包裝插頁」係指通常包括於治療產品之商業包裝中之說明書，其含有關於適應症、用法、劑量、投與、禁忌症及/或關於使用該等治療產品之警告之資訊。適宜容器包括(例如)瓶、小瓶、注射器、泡罩等。容器可自多種材料(例如玻璃或塑膠)形成。容器可容納有效治療病況之GDC-0032或其調配物，且可具有無菌入口埠(例如，容器可為靜脈內溶液袋或具有可藉由皮下注射針刺穿之塞子之小瓶)。組合物中之至少一種活性劑係GDC-0032之多晶型。標記或包裝插頁指示，組合物用於治療所選病況，例如癌症。在一個實施例中，標記或包裝插頁指示，可使用包含式I化合物之組合物來治療因異常細胞生長所致之病症。標記或包裝插頁亦可指示，組合物可用於治療其他病症。或者或另外，製品可進一步包含第二容器，該第二容器包含醫藥上可接受之緩衝劑，例如注射用抑菌水(BWFI)、磷酸鹽緩衝鹽水、林格氏溶液及右旋糖溶液。其可進一步包括自商業及使用者角度期望之其他材料，包括其他緩衝劑、稀釋劑、過濾器、針及注射器。

套組可進一步包含投與GDC-0032之多晶型及(若存在)第二醫藥調配物之說明書。舉例而言，若套組包含含有GDC-0032之第一組合物及第二醫藥調配物，則套組可進一步包含將第一及第二醫藥組合物同時、依序或單獨投與有需要之患者之說明書。

在另一實施例中，套組適合於遞送GDC-0032之多晶型之固體經口形式，例如錠劑或膠囊。此一套組較佳包括多個單位劑量。該等套組可包括按其既定應用之順序定向之劑量之卡片。此一套組之實例係 「泡罩包裝」。泡罩包裝為包裝工業所熟知且廣泛用於包裝醫藥單位劑型。若期望，可提供呈(例如)數字、字母或其他標記形式或具有日程插頁之記憶輔助器，其標明治療排程表中可投與劑量之日期。

根據一個實施例，套組可包含(a)其中含有GDC-0032之多晶型之第一容器；及視情況(b)其中含有第二醫藥調配物之第二容器，其中第二醫藥調配物包含具有抗過度增殖活性之第二化合物。或者或另外，套組可進一步包含第三容器，該第三容器包含醫藥上可接受之緩衝劑，例如注射用抑菌水(BWFI)、磷酸鹽緩衝鹽水、林格氏溶液及右旋糖溶液。其可進一步包括自商業及使用者角度期望之其他材料，包括其他緩衝劑、稀釋劑、過濾器、針及注射器。

倘若套組包含GDC-0032之多晶型及第二治療劑(即化學治療劑)，則套組可包含含有單獨組合物之容器，例如分開之瓶或分開之箔袋；然而，單獨組合物亦可含於單一未分開容器內。通常，套組包含投與單獨組份之說明書。在單獨組份較佳以不同劑型(例如經口及非經腸)投與時，以不同劑量間隔投與時，或在開方醫師期望逐步增加組合中之個別組份時，該套組形式尤其有利。

實例 實例1 GDC-0032之分離及物理化學特徵

GDC-0032係根據US 8242104及「PROCESS FOR MAKING BENZOXAZEPIN COMPOUNDS」、2013年3月13日申請之US Ser.61/779619來製備，其各自以引用方式併入。將1.15kg、2.50莫耳粗製2-(4-(2-(1-異丙基-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5,6-二氫苯并[f]咪唑并[1,2-d][1,4]氧氮呯-9-基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基丙醯胺(GDC-0032，式I)於MeOH(6L,5vol)中之漿液裝填至50L玻璃反應器中。將額外MeOH(24L,21vol)添加之混合物中，然後將其加熱至65℃。獲得均勻混合物。經由添加埠將Si-硫醇(Silicycle公司，0.23kg,20% wt)添加 至溶液中且將混合物攪拌3小時。然後經由Aurora過濾器(夾套溫度=60℃)將其熱過濾，精緻過濾並直接轉移至具有減壓之第二50L反應器中。然後將溶液加熱回到65℃內部溫度(IT)。使均勻溶液冷卻至54℃並在向反應器施加減壓之情況下添加於MeOH(50mL)中之GDC-0032晶種(12g,1% wt)。然後使混合物經16小時冷卻至20℃。然後經由Aurora過濾器過濾固體並在80℃下乾燥72小時以獲得921g、80%產率之呈甲醇合物溶劑合物(依據XRPD，形式A)之GDC-0032並將其轉移至預稱重之裝填點袋(charge-point bag)中。

固體在分離器中在IPAc(8L,7vol)中漿化並轉移至乾淨10L反應器中。混合物在60℃(IT)攪拌1h。然後固體經由Aurora系統過濾並在80℃(夾套)乾燥96h。移除GDC-0032樣品並藉由GC(IPAc=1%)分析。為嘗試更有效之乾燥，將API轉移至分離器中之兩個玻璃托盤並用乾燥袋密封，之後在設定為100℃之真空烘箱中乾燥16h。GC(IPC：Q12690V2)顯示仍存在1%溶劑。該製程提供760g(由LC，68%校正產率，68% wt，99.9%純度)白色固體(依據XRPD，形式B)。

將粗製GDC-0032(340.7g)裝填至2L HDPE瓶中並用0.8L異戊醇(IAA)漿化。將漿液轉移至20L反應器中並用6.7L圓底燒瓶(總計22vol)稀釋。加熱白色漿液直至觀察到溶液(內部溫度上升至118℃，然後冷卻至109℃)。將溶液精緻過濾(polish filtered)(0.2μM過濾器)。燒瓶配備有頂置攪拌器，並將濾液在異戊醇(344mL,21vol)中漿化。使混合物升溫至95℃(內部)直至固體溶解。裝填木炭(10wt%,0.16g)及silicycle硫醇(10wt%,0.16g)於異戊醇(1vol,16mL)中之漿液並將混合物在90-95℃攪拌1h，然後過濾(經Celite®墊)。使透明琥珀色溶液冷卻至73℃(加晶種溫度範圍=70±5℃)並添加GDC-0032晶種(10wt%,0.16g)。關閉加熱包之溫度並使混合物攪拌(200rpm)過夜冷卻至室溫。在17hr後，過濾白色固體，以緩慢重力過濾開始，然後施加真 空。將固體抽吸乾燥並混合20min直至獲得自由流動之粉末。在烘箱乾燥前之粗重量=16g。將固體在100℃烘箱乾燥24h，然後採樣用於測試。繼續在100℃再乾燥24hr。1H NMR(DMSO d6)δ 8.38(t),8.01(s),7.87(s),7.44,7.46(d),7.36(s),7.18(br s),6.81(br s),5.82(m),3.99(s),2.50(s),2.26(s),1.75(s),1.48,1.46(d)。

GDC-0032 API係白色至灰白色固體。如由其XRPD圖案之尖峰所確認，其係結晶，且熔點為258℃。迄今已鑑別出GDC-0032游離鹼之若干種物理形式，包括無水形式(形式B)、水合物及若干種溶劑合物。形式B之熔點範圍為256℃至258℃。迄今已在API製程中一致產生形式B。在高濕度中暴露至少6個月時，形式B不展現任何形式變化。另外，自API之持續穩定性研究未觀察到物理形式轉化。因此，確定形式B係用於進一步研發之最適宜結晶型。將在API合成及穩定期間監測結晶型之再現性及穩定性。GDC-0032不吸濕，在動態吸濕實驗中在95% RH增重少於0.2%。GDC-0032係弱鹼，pKa值為3.19且log P為2.5，如由電位滴定所測定。

實例2 溶解度評價

在不同緩衝劑及調配媒劑中概述隨pH而變之GDC-0032 API之溶解度特徵

實例3 GDC-0032調配及製錠

藉由碾壓法(He等人(2007)Jour.of Pharm.Sci.,96(5)：1342-1355) 用包括乳糖、微晶纖維素(AVICEL® PH 01,FMC BioPolymer,50μM顆粒)、交聯羧甲纖維素鈉(Ac-Di-Sol®,FMC BioPolymer)及硬脂酸鎂之賦形劑將純化2-(4-(2-(1-異丙基-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5,6-二氫苯并[f]咪唑并[1,2-d][1,4]氧氮呯-9-基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基丙醯胺I(GDC-0032)以錠劑形式乾式粒化調配。

^a GDC-0032之量係根據API之效力來調節。

^b 微晶纖維素之量係基於GDC-0032之實際量來調節。

實例4 GDC-0032之結晶

GDC-0032之溶解度係在23種溶劑/溶劑混合物中在兩種不同溫度下測定：無水乙醇、甲醇、異丙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙酸異丙酯、四氫呋喃、2-丁酮、甲醇/水(50/50)、2,2,2-三氟乙醇(TFE)、2-丁酮、TFE/乙酸乙酯(50/50)、TFE/丙酮(50/50)、TFE/水(50/50)、乙腈、乙腈/水(50/50)、丙酮/水(50/50)、第三丁基甲基醚、正庚烷、乙醇/乙酸乙酯(50/50)、乙醇/丙酮(50/50)、甲醇/水(90/10)、乙醇/乙腈(50/50)。除了乙酸乙酯、乙酸異丙酯、四氫呋喃、第三丁基甲基醚及正庚烷， GDC-0032在所有該等溶劑/溶劑混合物中皆可溶。

對於每一實驗，在40mL小瓶中稱量約5-10mg材料。在2,2,2-三氟乙醇(TFE)之情形中，由於GDC-0032在此溶劑中之高溶解度，使用約40mg。在每一小瓶中，以50μL之步驟將溶劑添加至固體直至溶解或直至達到0.2mg/mL之最小濃度。在兩個溫度(室溫(RT)及較高溫度(T_max=50或70℃，經選擇使得溶劑之沸點高於T_max))下目測評價溶解。藉由HPLC量測懸浮液之溶解度。

實例5 結晶篩選

實施高通量結晶篩選。在65℃下將GDC-0032溶解於N,N-二甲基甲醯胺中。將DMF溶液分配至4個96孔板中。蒸發溶劑並用16種不同純溶劑及80種溶劑混合物替代。溶劑混合物係藉由添加水、乙醇、1,2-二氯乙烷或庚烷之梯度來生成。典型比率為800：0、640：160、480：320、320：480、160：640、0：800。使一個板在氮及室溫下蒸發(蒸發)。將作為反溶劑之環戊基甲基醚添加至第二板之孔中(沈澱)。將兩個板加熱至65℃並使一個板經12小時冷卻至10℃(冷卻板)且將第二板在65℃下維持1週(漿液在65℃板)。傾析溶劑並藉由偏光顯微術(PLM)分析所得固體。藉由X射線粉末繞射(XRPD)分析依據PLM表現為結晶之固體。然後藉由拉曼光譜法(Raman spectroscopy)分析具有不同粉末圖案之材料。

單晶：獲得形式A、形式B、形式C、形式E及形式K之單晶結構解析。

GDC-0032在有機溶劑中之熱循環：在8mL小瓶中稱量約60mg起始材料。在TFE/乙酸乙酯(50/50)、甲醇、乙醇及丙酮中製備4種漿液。使漿液在60℃與20℃之間或在50℃與20℃之間熱循環。冷卻及加熱速率為10℃/hr且在每一溫度下之保持時間為30min。將該循環重複約5次。在熱循環結束時，觀察到不足固體並蒸發溶劑。藉由XRPD及 數位成像量測固體。

加晶種實驗：使用10% w/w及20% w/w晶種之實驗係以8mL規模使用60mg起始材料來實施。在TFE/乙酸乙酯(50/50)及甲醇中製備兩種漿液並將其加熱至60℃。在1小時平衡時間後，在60℃下過濾漿液。隨後在60℃下將晶種添加至濾液並使混合物以5℃/h之冷卻速率冷卻至5℃且在該溫度下老化10小時。分離並乾燥固體且蒸發母液。藉由XRPD及數位成像分析所有固體。

使用熱過濾之冷卻-蒸發實驗：在50℃下在乙醇及丙酮中製備兩種漿液，且在1小時平衡時間後，在相同溫度下過濾漿液。隨後使飽和溶液以5℃/h之冷卻速率冷卻至5℃並在此溫度下老化過夜。在老化後未觀察到固體並蒸發溶劑。藉由XRPD及數位成像分析所獲得之固體。

GDC-0032在高溫下在甲醇中之溶解度：量測GDC-0032在45℃及55℃下在甲醇中之溶解度。用約15mg起始材料及500mL甲醇製備兩種漿液。隨後將漿液置於兩個各自為45℃及55℃之烘箱中。在24小時之平衡後，目測檢驗兩種漿液。在兩種情形中，溶解皆不完全。自母液分離固體且以濕式及乾式兩種方式採集以供XRPD及數位成像。蒸發母液且亦藉由XRPD及數位成像分析固體。

在6種溶劑中實施在加晶種之情形下GDC-0032在有機溶劑中之熱循環，其中飽和溶液係在60℃(對於丙酮，所施加最高溫度為50℃)下製備。在數小時平衡時間後，在Tmax下過濾漿液。在過濾後，將數mg起始材料添加至每一飽和溶液，然後以5℃/h之冷卻速率自Tmax熱循環至20℃並以10℃/h之加熱速率回到Tmax，且在Tmax及20℃下之保持時間為15min。對該等實驗不施加攪拌。將該等循環重複13次至17次。在實驗中施加熱循環後，將溶液在5℃下老化3天。在實驗結束時認為，沈澱固體不足以進行分析且決定緩慢蒸發溶劑。藉由 XRPD、數位成像、Malvern粒徑分析儀及顯微術分析所得固體。

在加晶種之情況下使用3種溶劑及3種反溶劑實施至GDC-0032溶液中之蒸汽擴散。對於該等實驗，在室溫下在3種溶劑中製備3種飽和溶液。在數小時平衡時間後，在室溫下在8mL小瓶中過濾漿液。將數mg起始材料添加至該等飽和溶液(晶種)中。然後將具有晶種之8mL小瓶置於含有3mL反溶劑之40mL小瓶中。將溶液在反溶劑蒸汽中暴露兩週。在實驗結束時認為，沈澱固體不足以進行分析且決定緩慢蒸發溶劑。藉由XRPD及數位成像分析所獲得固體。

形式A之製備：將2mL甲醇添加至189mg GDC-0032中。將懸浮液加熱至65℃並保持30分鐘，然後使其冷卻至3℃並攪拌過夜。經由過濾收集固體且在仍經溶劑潤濕時分離。

形式A之製備：將含有585.4mg化合物(批號978822，形式B)及10mL甲醇之懸浮液在封閉玻璃小瓶中在環境溫度下攪動6天。藉由離心使產物沈積並用吸量管移除母液。在濕段分析晶體。

形式B單晶之製備：GDC-0032之適於單晶結構測定之晶體係藉由將GDC-0032溶解於乙酸乙酯中，之後使用戊烷進行蒸汽擴散。

形式C之製備：將GDC-0032(103.8mg)在90℃下部分溶解於熱異戊醇(5mL)中。使懸浮液緩慢冷卻至5℃並在5℃下漿化2天。藉由過濾收集固體並在密封X射線持片器中在經溶劑潤濕時分析。

形式C之製備：在封閉玻璃小瓶中使4.98g化合物(批號BS1302SA01，形式B)在95℃下溶解於166.7g異戊醇中。在攪拌的同時，藉由將小瓶浸沒至水/冰浴中快速冷卻透明溶液。將所得懸浮液在5℃下攪動9天。藉由過濾分離晶體並在環境條件下乾燥4天。

形式D之製備：將GDC-0032(98.7mg)在正丁醇水溶液(1：1v：v,1mL)中漿化3天。在密封容器中經由過濾器藉由微量離心收集固體。在樣品仍經溶劑潤濕時收集其XRPD分析。

形式D之製備：在封閉玻璃小瓶中將388.7mg化合物(批號978822，形式B)在75℃下溶解於7.4mL正丙醇/水混合物(10%-v/v水)中。在8h內將透明溶液線性冷卻至22℃。在選取用於單晶X射線分析之晶體後，攪動剩餘懸浮液，之後藉由過濾分離晶體並在40℃/400毫巴下乾燥16h。

形式E之製備：在封閉玻璃小瓶中將521.1mg化合物(批號978822，形式B)在75℃下溶解於1.5mL三氟乙醇中。在受控冷卻後將透明溶液儲存於10℃下。在8天後獲得單晶。在選取用於單晶X射線分析之晶體後，在環境溫度下攪動剩餘懸浮液過夜，之後打開小瓶以容許溶劑在環境條件下完全蒸發。晶體不經進一步處理即加以分析。

形式E之製備：將GDC-0032(59.6mg)於2,2,2-三氟乙醇(1mL)及乙酸乙酯(1mL)中之漿液加熱至60℃並在該溫度下保持1小時。趁熱過濾漿液，添加GDC-0032形式B(6mg)且使懸浮液以5℃/小時之速率冷卻至5℃並在該溫度保持10小時。收集固體並藉由XRPD分析。

形式F之製備：在60℃下藉由在60℃下在乙腈(7mL)中漿化GDC-0032形式B(30mg)來製備GDC-0032於乙腈中之飽和溶液。在數小時平衡時間後，在T_max下過濾漿液。在過濾後，將數mg GDC-0032添加至每一飽和溶液，然後以5℃/h之冷卻速率自T_max熱循環至20℃並以10℃/h之加熱速率回到T_max，且在T_max及20℃二者下之保持時間為15min。對該等實驗不施加攪拌。循環13次。在實驗中施加熱循環後，將溶液在5℃下老化3天。在實驗結束時認為，沈澱固體不足以進行分析且決定緩慢蒸發溶劑。藉由XRPD、數位成像、Malvern粒徑分析儀及顯微術分析所獲得固體。

形式F之製備：將含有400.2mg化合物(批號978822，形式B)及7.2mL乙腈之懸浮液在封閉玻璃小瓶中在環境溫度下攪動24天。藉由離心沈積產物並用吸量管移除母液。將晶體在50℃/5毫巴下乾燥2天。

形式G之製備：將GDC-0032形式B(11.9mg)溶解於無水乙醇(5.5mL)中並在真空及室溫下蒸發。

形式H之製備：將GDC-0032(20.5mg)在室溫下溶解於氯仿(600μL)中。使溶液靜置6個月同時緩慢蒸發溶液，以獲得適於結構分析之晶體。

形式H之製備：將含有385.8mg化合物(批號978822，形式B)及6.9mL氯仿之懸浮液在封閉玻璃小瓶中在環境溫度下攪動24天。藉由離心使產物沈積並用吸量管分離母液。使母液在環境條件下完全蒸發。晶體不經進一步處理即加以分析。

形式J之製備：將含有457.6mg化合物(批號978822，形式B)及8.2mL二噁烷之懸浮液在封閉玻璃小瓶中在環境溫度下攪動24天。藉由離心使產物沈積並用吸量管移除母液。將晶體在50℃/5毫巴下乾燥15分鐘。

形式K之製備：在封閉玻璃小瓶中將302.7mg化合物(批號978822，形式B)在環境溫度下溶解於5.4mL乙酸中。向透明溶液中添加4.2mL正庚烷。將所得懸浮液在環境溫度下攪動過夜。藉由離心使產物沈積並用吸量管移除母液。藉由離心使產物沈積並用吸量管移除母液。在濕段分析晶體。

形式L之製備：在封閉玻璃小瓶中將199.7mg化合物(批號978822，形式B)在90℃下溶解於12.0mL異丙醇中。在8h內將透明溶液線性冷卻至22℃。在選取用於單晶X射線分析之晶體後，將剩餘懸浮液在環境溫度下攪動過夜。晶體不經進一步處理即加以分析。

形式M之製備：將含有470.5mg化合物(批號978822，形式B)及8.5mL二氯甲烷之懸浮液在封閉玻璃小瓶中在5℃下攪動15天。藉由離心使產物沈積並用吸量管移除母液。將晶體在環境條件下乾燥過夜。

形式N之製備：將含有389.5mg化合物(批號978822，形式B)及7.0mL硝基乙烷之懸浮液在封閉玻璃小瓶中在環境溫度下攪動24天。藉由離心使產物沈積並用吸量管移除母液。將晶體在50℃/5毫巴下乾燥2天。

形式O之製備：將含有480.7mg化合物(批號978822，形式B)及8.7mL四氯化碳之懸浮液在封閉玻璃小瓶中在60℃下攪動14天。藉由離心使產物沈積並用吸量管移除母液。將晶體在50℃/5毫巴下乾燥17h。

形式P之製備：將含有469.8mg化合物(批號978822，形式B)及8.5mL丙腈之懸浮液在封閉玻璃小瓶中在60℃下攪動14天。藉由離心使產物沈積並用吸量管移除母液。將晶體在50℃/5毫巴下乾燥17h。

形式Q之製備：將含有488.6mg化合物(批號978822，形式B)及8.8mL 2-甲氧基乙醇/水85/15(v/v)之懸浮液在封閉玻璃小瓶中在環境溫度下攪動24天。藉由離心使產物沈積並用吸量管移除母液。將晶體在50℃/5毫巴下乾燥15分鐘。

形式R之製備：將含有389.5mg化合物(批號978822，形式B)及7.0mL硝基乙烷之懸浮液在封閉玻璃小瓶中在環境溫度下攪動24天。 藉由離心使產物沈積並用吸量管移除母液。將晶體在50℃/5毫巴下乾燥2天。

形式S之製備：將含有387.2mg化合物(批號978822，形式B)及7.0mL 1,2-二氯乙烷之懸浮液在封閉玻璃小瓶中在環境溫度下攪動24天。藉由離心使產物沈積並用吸量管移除母液。在環境條件下乾燥晶體。

形式T之製備：將含有397.5mg化合物(批號978822，形式B)及7.2mL正丙醇之懸浮液在封閉玻璃小瓶中在5℃下攪動6週。藉由離心使產物沈積並用吸量管移除母液。將晶體在正丙醇存在下在40℃/400 毫巴下乾燥5h。

形式U之製備：在封閉玻璃小瓶中將235.6mg化合物(批號978822，形式B)在85℃下溶解於9.4mL異丁醇中。在8h內將透明溶液線性冷卻至40℃。在選取用於單晶X射線分析之晶體後，將剩餘懸浮液在環境溫度下儲存4天。使溶劑在在環境條件下完全蒸發並將晶體在50℃/5毫巴下乾燥27h。

形式V之製備：將含有498.1mg化合物(批號978822，形式B)及9.0mL 2-甲基四氫呋喃之懸浮液在封閉玻璃小瓶中在20℃下攪動6週。藉由離心過濾採集晶體並在濕態下分析。

形式W真多晶型之製備：將含有330mg化合物(批號978822，形式B)及6.0mL二噁烷/水1/1(v/v)之懸浮液在封閉玻璃小瓶中在20至25℃下攪動5週。藉由離心過濾分離晶體並在70℃/5毫巴下乾燥2天。

形式X水合物之製備：將含有498.9mg化合物(批號978822，形式B)及10mL甲醇之懸浮液在封閉玻璃小瓶中在環境溫度下攪動4天。藉由離心使產物沈積並用吸量管移除母液。將晶體在50℃/5毫巴下乾燥2天。

形式Y：X半水合物之製備：將含有498.9mg化合物(批號978822，形式B)及10mL甲醇之懸浮液在封閉玻璃小瓶中在環境溫度下攪動4天。藉由離心使產物沈積並用吸量管移除母液。將晶體在50℃/5毫巴下乾燥2天，然後在環境溫度下在水性LiCl懸浮液(11%-RH)上方儲存20天。在分析期間將周圍濕度保持在11%-RH。

形式Z之製備：將含有488.1mg化合物(批號978822，形式B)及8.8mL二異丙基酮之懸浮液在封閉玻璃小瓶中在5℃下攪動15天。藉由離心使產物沈積並用吸量管移除母液。在環境條件下乾燥晶體。

形式AA二噁烷半溶劑合物之製備：將含有426.0mg化合物(批號978822，形式B)及7.7mL二噁烷/水1/1(v/v)之懸浮液在封閉玻璃小瓶 中在環境溫度下攪動5週。藉由離心使產物沈積並用吸量管移除母液。將晶體在環境溫度/500毫巴下乾燥30分鐘。

形式AB真多晶型之製備：在封閉玻璃小瓶中將4.98g化合物(批號BS1302SA01，形式B)在95℃下溶解於166.7g異戊醇中。在攪拌的同時，藉由將小瓶浸沒至水/冰浴中快速冷卻透明溶液。將所得懸浮液在5℃下攪動9天。藉由過濾分離晶體並在50℃/5毫巴下乾燥2天。

形式AC之製備：在封閉玻璃小瓶中將200.8mg化合物(批號978822，形式B)在75℃下溶解於7.7mL四氫呋喃中。在10h內將透明溶液線性冷卻至20℃。在選取用於單晶X射線分析之晶體後，將剩餘懸浮液在環境溫度下攪動過夜。晶體不經進一步處理即加以分析。

實例6 XRPD分析方法

^a Otwinowski Z.及Minor,W.Methods Enzymol.,(1997),276,307。

實例7 粉末X射線繞射(PXRD)

樣品之粉末X射線繞射圖案係使用Rigaku MiniFlex II®粉末X射線繞射儀獲得。輻射源係在30kV電壓及15mA電流下操作。將每一樣品置於用載玻片變平以呈現良好表面紋理之鋁樣品架之腔中並插入樣品架中。所有樣品皆係以介於2°與40°之間之2θ角度範圍以2°/min之掃描速率及0.02°之步長來量測。

XRPD分析係使用PANalytical X’Pert Pro®繞射儀來實施。Cu Kα (阿爾法)輻射(1.54057Å)之入射束係使用Optix長細焦源產生。使用橢圓漸變多層鏡來使該來源之Cu Kα(阿爾法)X射線聚焦穿過樣品到達檢測器上。將管電壓及安培數分別設定為45kV及40mA。掃描範圍為1.01至39.98° 2θ，使用0.017°/分鐘之步長，掃描速率為3.3°/分鐘，總收集時間為718秒。分析矽標準品以檢驗儀器比對。XRPD圖案由尖峰組成，指示樣品為結晶。代表性光譜顯示於圖2、10、13-21中。

Rigaku Rapid II影像板繞射儀配備有MicroMax002+高強度銅x射線源。

實例8 差示掃描量熱法(DSC)

使用TA Instruments差式掃描量熱計(Q100型)具有機械冷卻器及標準品小室(構形與樣品盤相同)來量測粉末樣品之熱學性質。將每一樣品加載至具有含有0至1個針孔之無褶皺蓋之封閉鋁盤中並將其置於差示掃描量熱法(DSC)小室中。用以約50cm³/min流動之氮吹掃該小室。使小室與樣品在20℃下平衡。然後將小室以10.00℃/min加熱至250-350℃同時監測空參照盤與樣品盤之間之熱流差異。

實例9 熱重分析(TGA)

藉由TGA測定隨溫度而變之重量變化。在TGA儀器(TA Instruments，Q500型)中加熱期間檢測樣品重量，獲得重量對溫度曲線。將0.1-2毫克樣品置於位於樣品架上之DSC盤中。將樣品架在TGA中自25℃加熱至300℃以10℃ min^-1之加熱速率。使用乾N₂氣體吹掃。藉由以10℃/min將樣品加熱至期望溫度，然後將樣品在該溫度下保持至少200分鐘來實施等溫實驗。

實例10 FT-IR

在ThermoFisher Scientific FT-IR：Nicolet 6700上記錄FTIR光譜。

實例11 動態蒸氣吸附(DVS)

在TA Instruments Q5000SA蒸汽吸附分析儀上收集自動化蒸汽吸附資料。使用NaCl及PVP作為校準標準品。在分析之前不乾燥樣品。在25℃下在5至95% RH範圍中以10% RH增量在氮吹掃下收集吸附及解吸資料。將樣品在相應RH下保持1小時，之後移至下一RH範圍。樣品初始水分含量之資料未經校正。

實例12 HPLC分析方法

HPLC分析係使用配備有UV及MS檢測器之Agilent 1200SL HPLC系統遵循下文呈現之條件來實施：

HPLC設備：LC-MS

製造商：Agilent

HPLC：HP1100

UV檢測器：HP DAD

MS檢測器：HP1100 API-ES MSD VL型

管柱：Waters Sunfire® C18(100×4.6mm；3.5μm).

管柱溫度：35℃

流動相：梯度模式

流動相A 10mM乙酸銨

流動相B：100%乙腈

流速：1.0mL/min

UV檢測器：DAD

範圍：200-400nm

波長：220nm

帶寬：4nm

時間：0-10min

MS檢測器：MSD

掃描：陽性

質量範圍：70-1000

裂解電壓：70

時間：0-10min

自動採樣器：溫度：10℃

注射模式：迴路

注射體積：5μl

洗針：2/3；ACN/H₂O(v/v)

稀釋溶劑：甲醇

化合物完整性表示為峰面積百分比，其係自層析圖中每一峰之面積(除了「注射峰」以外)及總峰面積來計算。採用所關注化合物之峰面積百分比來指示樣品中該組份之純度。

實例13 形式B多晶型之資料收集

將GDC-0032(C₂₄H₂₈N₈O₂)之尺寸約為0.20×0.11×0.08mm之無色針狀物以隨機取向安置在纖維上。在配備有共焦光學之Rigaku Rapid II®上用Cu K_α輻射(1.54184Å)實施初步檢查及資料收集。在LINUX PC上使用SHELX97®實施精修(Sheldrick,G.M.Acta Cryst.,(2008),A64,112)。用於資料收集之小室常數係自最小二乘精修使用18706個反射在4<q<70°範圍內之設定角度獲得。來自DENZO/SCALEPACK之精修馬賽克性係0.56°，指示中等晶體品質(Z. Otwonowski及W.Minor,Methods Enzymol(1997)276：307)。空間群係藉由程式XPREP[1]來測定。無系統消光；空間群經測定為P-1(2號)。在150(1)K溫度下收集資料。收集資料至140.65°之最大2q。

資料簡化：將框架與DENZO-SMN整合(Sheldrick,G.M.Acta Cryst.,2008,A64,112)。收集總計18706個反射，其中4029個係獨特的。對資料應用勞侖茲(Lorentz)及偏振校正。Cu K_a輻射之線性吸收係數為7.25/mm。應用使用SCALEPACK之經驗吸收校正。透射係數在0.90至0.94範圍內。對等效反射之強度求平均值。基於強度求平均值之偏離因子係4.2%。三斜晶胞參數及計算體積係：a=9.7944(14)，b=10.4767(11)，c=12.5994(17)Å，α=96.145(10)，β=95.749(11)，β=115.072(9)°，V=1149.0(3)ų。對於Z=2且F.W.=460.54，計算密度為1.331g/cm³。

結構解析及精修：藉由直接方法使用SIR2004解析結構(M.C.Burla等人，J.Appl.Crystalogr.,(2005)38：381)。其餘原子定位於後續差值傅立葉合成(difference Fourier syntheses)中。氫原子包括於精修中但受限於懸在其所鍵結之原子上。在全矩陣最小二乘法中精修結構，其中將函數最小化。

精修係在LINUX PC上使用SHELX-97實施。

Σw(|Fo|²-|Fc|²)²

加權w定義為1/[s²(Fo²)+(0.0810P)²+0.5152P]，其中P=(Fo²+2Fc²)/3。

散射因子取自「International Tables for Crystallography」(「International Tables for Crystallography」，C卷，Kluwer Academic Publishers,Utrecht,The Netherlands,(1992)，表4.2.6.8及6.1.1.4.)。在精修中使用4029個反射。然而，在R1計算中僅使用3257個F_o ²>2σ(F_o ²)之反射。精修之最終循環包括330個可變參數並以以下未加權及 加權偏離因子收斂(最大參數移位係其估計標準偏差之<0.01)： R=Σ|F _o -F _c |/ΣF _o =0.060

擬合優度參數為1.061。最終差值傅立葉中之最高峰之高度為0.41e/A³。最小負峰之高度為-0.33e/A³。

計算X射線粉末繞射(XRPD)模式：使用Mercury 2.3(Mercury CSD2.3(Build RC4),ICDD,2009)以及來自單晶資料之原子坐標、空間群及單位晶胞參數生成Cu輻射之計算XRPD圖案。由於單晶資料係在低溫(150K)下收集，預計在計算與實驗粉末繞射圖案之間出現一定移位。通常此移位隨2θ(系塔)而變，但由於晶體之熱收縮未知，此移位可能並非如此。

ORTEP及堆積圖：在PLATON(Spek,A.L.PLATON.Molecular Graphics Program.Utrecht University,Utrecht,The Netherlands,(2008)；Spek,A.L,J.Appl.Crystalogr.(2003),36：7)軟體包內使用ORTEP III(Johnson,C.K.ORTEPIII,Report ORNL-6895,Oak Ridge National Laboratory,TN,U.S.A.(1996)。用於Windows V1.05之OPTEP-3,Farrugia,L.J.,J.Appl.Crystalogr.(1997),30：565)程式製備。原子表示為50%概率各向異性熱橢圓體。堆積圖係使用Mercury可視化軟體來製備。氫鍵結表示為虛線。

X射線粉末繞射(XRPD)：XRPD圖案係在Aptuit之分部SSCI使用PANalytical X'Pert Pro繞射儀來收集。試樣係使用利用Optix長細焦源產生之Cu輻射來分析。使用橢圓漸變多層鏡來使該來源之Cu K α X射線聚焦穿過試樣到達檢測器上。將試樣夾在3微米厚之膜之間，在透射幾何中分析，並旋轉以優化取向統計學。使用射線阻擋件及短抗散射件來使空氣散射生成之背景最小化。使用邵勒縫隙(Soller slit)用 於入射束與繞射束以最小化軸向發散。繞射圖案係使用定位於距試樣240mm之掃描位置敏感性檢測器(X'Celerator)來收集。繞射圖案之資料採集參數顯示於資料部分中之圖案影像上方。在分析前，分析矽試樣(NIST標準參照材料640c)以驗證矽111峰之位置。

雖然已出於清楚理解之目的藉助說明及實例相當詳細地闡述上述發明，但說明及實例不應視為限制本發明之範圍。因此，可認為所有適宜修改及等效內容皆在下文申請專利範圍界定之本發明範圍內。本文所引用之所有專利及科學文獻之揭示內容皆係全文以引用方式明確併入。

Claims (14)

1. 一種(2-(4-(2-(1-異丙基-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5,6-二氫苯并[f]咪唑并[1,2-d][1,4]氧氮呯-9-基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基丙醯胺之指定為形式A多晶型之結晶單甲醇合物多晶型，其展現具有特徵峰以2θ度表示在10.1、11.2、14.0、18.3、20.2及22.0之X射線粉末繞射圖案。
2. 一種(2-(4-(2-(1-異丙基-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5,6-二氫苯并[f]咪唑并[1,2-d][1,4]氧氮呯-9-基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基丙醯胺之指定為形式C多晶型之結晶異戊醇多晶型，其展現具有特徵峰以2θ度表示在6.2、14.1、17.2、18.3、21.9及26.7之X射線粉末繞射圖案。
3. 一種(2-(4-(2-(1-異丙基-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5,6-二氫苯并[f]咪唑并[1,2-d][1,4]氧氮呯-9-基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基丙醯胺之指定為形式D多晶型之結晶單水合物多晶型，其展現具有特徵峰以2θ度表示在12.2、17.5、17.7、18.3、20.1、21.3、22.8及26.0之X射線粉末繞射圖案。
4. 一種醫藥組合物，其包含治療有效量之如請求項2之多晶型及醫藥上可接受之載劑、助流劑、稀釋劑或賦形劑。
5. 如請求項4之醫藥組合物，其呈錠劑形式。
6. 如請求項4之醫藥組合物，其中該治療有效量為1mg至100mg。
7. 一種如請求項4之醫藥組合物之用途，其用於製造用於治療哺乳動物之過度增殖病症之藥劑，其中該過度增殖病症選自多發性骨髓瘤、淋巴瘤、白血病、前列腺癌、乳癌、肝細胞癌、肺癌、胰臟癌及結腸直腸癌。
8. 如請求項7之用途，其中該治療有效量為1mg至100mg。
9. 如請求項7或8之用途，其中該藥劑用於與選自以下之化學治療劑一起投與：5-FU、多西他賽(docetaxel)、埃雷布林(eribulin)、吉西他濱(gemcitabine)、GDC-0973、GDC-0623、太平洋紫杉醇(paclitaxel)、他莫昔芬(tamoxifen)、氟維司群(fulves-trant)、地塞米松(dexamethasone)、帕妥珠單抗(pertuzumab)、曲妥珠單抗(trastuzumab)艾坦辛(emtansine)、曲妥珠單抗及來曲唑(letrozole)。
10. 如請求項4之醫藥組合物，其用於治療選自以下之過度增殖病症：多發性骨髓瘤、淋巴瘤、白血病、前列腺癌、乳癌、肝細胞癌、肺癌、胰臟癌及結腸直腸癌。
11. 一種如請求項1至3中任一項之多晶型之用途，其用作治療活性物質。
12. 如請求項1至3中任一項之多晶型，其用於治療選自以下之過度增殖病症：多發性骨髓瘤、淋巴瘤、白血病、前列腺癌、乳癌、肝細胞癌、肺癌、胰臟癌及結腸直腸癌。
13. 一種如請求項1至3中任一項之多晶型之用途，其用於製造用於治療選自以下之過度增殖病症之藥劑：多發性骨髓瘤、淋巴瘤、白血病、前列腺癌、乳癌、肝細胞癌、肺癌、胰臟癌及結腸直腸癌。
14. 如請求項1至3中任一項之多晶型，其用於製造用於治療選自以下之過度增殖病症之藥劑：多發性骨髓瘤、淋巴瘤、白血病、前列腺癌、乳癌、肝細胞癌、肺癌、胰臟癌及結腸直腸癌。