CN113151067A - 一种乳酸菌发酵提取物的提取分离工艺 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种乳酸菌发酵提取物的提取分离工艺,包括以下步骤:发酵、提取、分离得到乳酸菌发酵提取物,其中,使用三段变温方式,调节温度和时间,有效提高乳酸菌提取物的提取率,使用三段变温方式,调节温度和时间,有效提高乳酸菌提取物的提取率,本发明的乳酸菌发酵提取物具有一定抗氧化效果、保湿效果可应用于抗氧化日化产品。
Description
技术领域
本发明涉及生物发酵技术领域,特别涉及一种乳酸菌发酵提取物的提取分离工艺。
背景技术
乳酸菌(lactic acid bacteria,LAB)是一类能利用可发酵碳水化合物产生大量乳酸的细菌的统称。这类细菌在自然界分布极为广泛,具有丰富的物种多样性,至少包含18个属,共200多种。除极少数外,其绝大部分都是人体内必不可少的、且具有重要生理功能的菌群,广泛存在于人体的肠道中。乳酸菌不仅是研究分类、生化、遗传、分子生物学和基因工程的理想材料,而且在工业、农牧业、食品和医药等与人类生活密切相关的重要领域具有极高的应用价值。
专利“一种富含酶解多肽的复合乳酸菌制剂的生产工艺”,申请号202010007448.1,通过酶解鸡血多肽,制得复合乳酸菌制剂;
专利“一种双歧杆菌乳酸菌混合发酵菌酶解法制备工艺及其运用”申请号201511007402.5,制备扩大菌种液和一级种子培养液得到一级菌种液,再将一级菌种液与种子培养基在种子罐混合培养得到种子罐菌种,再将所述的种子罐菌种与发酵罐培养基混合培养并通过诱导液进行发酵得到发酵液,当发酵完毕后,进行发酵液离心,得到湿菌泥,目前对乳酸菌发酵产物的提取大部分采用酶解或者分步进行,这样生产周期长,提取率低,且含有的抗氧化因子和保湿因子含量低等问题。
发明内容
鉴于此,本发明提出一种乳酸菌发酵提取物的提取分离工艺,解决上述问题。
本发明的技术方案是这样实现的:一种乳酸菌发酵提取物的提取分离工艺:包括以下步骤:
S1、发酵:将乳酸菌进行发酵培养,第一段发酵温度为20~25℃,发酵时间3~5h,第二段发酵温度为26~30℃,发酵时间8~10h,第三段发酵温度为10~15℃,发酵时间为2~6h,得到菌落数为1.0~3.0×108CFU/ml的种子液,所述发酵培养基均由葡萄糖、乙酸钠、蛋白胨、蒲桃提取物制得;
S2、提取:将种子液接种至上述发酵培养基中,种子液和发酵培养基的体积比为1:20~60,在30~35℃,转速为80~100rpm下调节pH6.0-8.0,再进行培养12~25h,得到乳酸菌发酵初液;
S3、分离:对乳酸菌发酵初液离心,离心转速为3000~3500rpm,离心10~30min,收集上清液,用0.22~0.28μm滤膜过滤,得到乳酸菌发酵提取物。
进一步的,所述乳酸菌为乳酸杆菌、嗜酸乳杆菌、罗伊氏乳杆菌中的一种。
进一步的,所述发酵步骤在摇床中进行,控制摇床的160~200rpm。
进一步的,所述发酵培养基配方:葡萄糖2~8g/L、乙酸钠8~10g/L、蛋白胨10~15g/L、蒲桃提取物3~5g/L制得。
进一步的,所述蒲桃提取物:将干燥粉碎的蒲桃新鲜叶用提取剂浸提10~24h,然后在20~60℃条件下在20~50KHz频率超声波下提取0.5~1h,制得蒲桃提取物;其中,所述蒲桃新鲜叶与提取剂的质量体积比为1g:5~15mL;所述提取剂为85~90wt%乙醇溶液。
与现有技术相比,本发明的有益效果是:
本发明的乳酸菌发酵提取物,通过改进发酵工艺,使用三段变温方式,调节温度和时间,有效提高乳酸菌提取物的提取率,控制种子液和发酵培养基之间的体积比,能使种子液在培养基中适宜生长,提供较高的营养进行发酵,同时,在发酵培养基中添加蒲桃提取物能有效促进发酵,利用蒲桃植物中的糖分,破坏其组织结构,提取率明显提高;另外,本发明的乳酸菌发酵提取物具有一定抗氧化效果、保湿效果可应用于抗氧化日化产品。
具体实施方式
为了更好理解本发明技术内容,下面提供具体实施例,对本发明做进一步的说明。
本发明实施例所用的实验方法如无特殊说明,均为常规方法。
本发明实施例所用的材料、试剂等,如无特殊说明,均可从商业途径得到。
实施例1
一种乳酸菌发酵提取物的提取分离工艺:包括以下步骤:
S1、发酵:将乳酸杆菌进行发酵培养,第一段发酵温度为20℃,发酵时间3h,第二段发酵温度为26℃,发酵时间8h,第三段发酵温度为10℃,发酵时间为2h,得到菌落数为1.0×108CFU/ml的种子液,所述发酵均在摇床中进行,控制摇床的160rpm,所述发酵培养基配方:葡萄糖2g/L、乙酸钠8g/L、蛋白胨10g/L、蒲桃提取物3g/L制得;所述蒲桃提取液:将干燥粉碎的蒲桃新鲜叶用提取剂浸提10h,然后在20℃条件下在20KHz频率超声波下提取0.5h,制得蒲桃提取物;蒲桃新鲜叶与提取剂的质量体积比为1g:5mL;所述提取剂为85wt%乙醇溶液;
S2、提取:将种子液接种至上述发酵培养基中,种子液和发酵培养基的体积比为1:20,在30℃,转速为80rpm下调节pH6.0,再进行培养12h,得到乳酸菌发酵初液;
S3、分离:对乳酸菌发酵初液离心,离心转速为3000rpm,离心10min,收集上清液,用0.22μm滤膜过滤,得到乳酸菌发酵提取物。
实施例2
一种乳酸菌发酵提取物的提取分离工艺:包括以下步骤:
S1、发酵:将乳酸杆菌进行发酵培养,第一段发酵温度为25℃,发酵时间5h,第二段发酵温度为30℃,发酵时间10h,第三段发酵温度为15℃,发酵时间为6h,得到菌落数为3.0×108CFU/ml的种子液,所述发酵均在摇床中进行,控制摇床的200rpm,所述发酵培养基配方:葡萄糖8g/L、乙酸钠10g/L、蛋白胨15g/L、蒲桃提取物5g/L制得;所述蒲桃提取液:将干燥粉碎的蒲桃新鲜叶用提取剂浸提24h,然后在60℃条件下在50KHz频率超声波下提取1h,制得蒲桃提取物;所述蒲桃新鲜叶与提取剂的质量体积比为1g:15mL;所述提取剂为90wt%乙醇溶液;
S2、提取:将种子液接种至上述发酵培养基中,种子液和发酵培养基的体积比为1:60,在35℃,转速为100rpm下调节pH8.0,再进行培养25h,得到乳酸菌发酵初液;
S3、分离:对乳酸菌发酵初液离心,离心转速为3500rpm,离心30min,收集上清液,用0.28μm滤膜过滤,得到乳酸菌发酵提取物。
实施例3
一种乳酸菌发酵提取物的提取分离工艺:包括以下步骤:
S1、发酵:将乳酸杆菌进行发酵培养,第一段发酵温度为23℃,发酵时间4h,第二段发酵温度为28℃,发酵时间9h,第三段发酵温度为13℃,发酵时间为4h,得到菌落数为2.0×108CFU/ml的种子液,所述发酵均在摇床中进行,控制摇床的180rpm,所述发酵培养基配方:葡萄糖6g/L、乙酸钠9g/L、蛋白胨13g/L、蒲桃提取物4g/L制得;所述蒲桃提取液:将干燥粉碎的蒲桃新鲜叶用提取剂浸提17h,然后在40℃条件下在40KHz频率超声波下提取0.8h,制得蒲桃提取物;其中,蒲桃新鲜叶与提取剂的质量体积比为1g:10mL;所述提取剂为88wt%乙醇溶液;
S2、提取:将种子液接种至上述发酵培养基中,种子液和发酵培养基的体积比为1:40,在33℃,转速为90rpm下调节pH7.0,再进行培养20h,得到乳酸菌发酵初液;
S3、分离:对乳酸菌发酵初液离心,离心转速为3300rpm,离心20min,收集上清液,用0.25μm滤膜过滤,得到乳酸菌发酵提取物。
实施例4
本实施例与实施例3的区别在于,所述发酵培养基配方:葡萄糖10g/L、乙酸钠5g/L、蛋白胨18g/L、蒲桃提取液2g/L。
实施例5
本实施例与实施例3的区别在于,所述摇床的速率为250rpm。
对比例1
本对比例与实施例3的区别在于,所述发酵步骤中发酵采用一段恒温发酵,发酵温度为28℃,发酵时间为20h。
对比例2
本对比例与实施例3的区别在于,所述提取步骤中种子液和发酵培养基的体积比为1:15。
对比例3
本对比例与实施例3的区别在于,所述发酵培养基中不含有蒲桃提取物。
一、提取率
将实施例1~5和对比例1~3所提取的乳酸菌发酵提取物测定提取率,采用高效液相色谱仪测定,
(1)色谱条件
色谱仪:Agilent1100高效液相色谱仪,UV213nm检测器;
色谱柱:Walts sunfireC18,4.6×250nm,5μm;
柱温:35℃;
流动相:甲醇:0.01%体积百分比浓度的盐酸溶液=5:95,比例为体积比;
流速:1.0mL/min;
进样量:20μL;
(2)样品测定
在相同的色谱分析条件下,取20μl步骤1)制备的试样溶液注入高效液相色谱仪分析,测定色谱峰面积或峰高,与标准曲线比较确定进样液中提取物质量,绘制色谱;
(3)结果计算
X=(M1×V)/(M×V1)*100%
X为乳酸菌发酵提取物的含量
M1为乳酸菌发酵提取物的质量,单位为g
M为乳酸菌的质量,单位g
V为样品溶液体积,单位μL
V1为进样体积,单位μL
测定结果如下:
组别 | 提取率(%) |
实施例1 | 82.1 |
实施例2 | 83.9 |
实施例3 | 87.7 |
实施例4 | 79.1 |
实施例5 | 80.3 |
对比例1 | 68.4 |
对比例2 | 63.1 |
对比例3 | 60.5 |
由上述表格结果可知,本发明的实施例1~5和对比例1比较,采取三段式变温发酵,更能提高乳酸菌提取物的提取率,与对比例2比较,控制种子液和发酵培养基之间的体积比,能使种子液在培养基中适宜生长,提供较高的营养进行发酵,和对比例3比较,说明蒲桃提取物能有效促进发酵,利用蒲桃植物中的糖分,破坏其组织结构,提高提取率;实施例1~3和实施例4比较,调整发酵培养基配方,科学配比,在此配比下达到最佳的提取效率;实施例1~3和实施例5比较,发酵过程中摇床的速率对发酵进程起到一定的影响。
二、抗氧化活性和保湿效果评价
将上述实施例1~5和对比例1~3中的乳酸菌发酵提取物,做DPPH清除实验和测定添加在面膜中使用后皮肤含水量实验,评价抗氧化活性和保湿效果。
取4mgDPPH溶解于100ml的95%乙醇;
1ml样品与1ml的95%乙醇和2ml DPPH乙醇溶液混合(T)
1ml样品与3ml的95%乙醇混合(T0)
2ml DPPH乙醇溶液与2ml的95%乙醇混合(C)
4ml的95%乙醇(C0)
混合后25℃避光30min后检测
清除率(%)=(1-(T-T0)/(C-C0))×100%
每个样品测量三次取平均值
测量结果如下:
组别 | DPPH清除率% |
实施例1 | 50.3 |
实施例2 | 52.1 |
实施例3 | 56.9 |
实施例4 | 49.6 |
实施例5 | 48.7 |
对比例1 | 32.6 |
对比例2 | 33.7 |
对比例3 | 31.5 |
由上表可知,实施例1~5和对比例1~3比较,DPPH的清除率随着提取率的变化,说明提取率对清除率也有一定的影响,同时,本发明的乳酸菌发酵提取物具有一定抗氧化效果可应用于抗氧化日化产品。
三、保湿效果评价试验
将乳酸菌发酵提取物加入面膜液中,选取18~36岁年龄段人群,随机分为8组,每组20人,清洁脸部后敷面膜20min,擦干剩余的面膜液等三分钟,再经皮肤测试仪测定皮肤含水量,标定为100%,10小时后再次测量皮肤含水量,结果如下表:
由上表可以看出,本发明的乳酸菌发酵提取物加入到面膜中,实施例1~5皮肤含水量在80.1~87.6%之间,与对比例1~3比较,能有效减缓皮肤水分丢失,起到保湿效果。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (5)
1.一种乳酸菌发酵提取物的提取分离工艺,其特征在于:包括以下步骤:
S1、发酵:将乳酸菌进行发酵培养,第一段发酵温度为20~25℃,发酵时间3~5h,第二段发酵温度为26~30℃,发酵时间8~10h,第三段发酵温度为10~15℃,发酵时间为2~6h,得到菌落数为1.0~3.0×108CFU/ml的种子液,所述发酵培养基均由葡萄糖、乙酸钠、蛋白胨、蒲桃提取物制得;
S2、提取:将种子液接种至上述发酵培养基中,种子液和发酵培养基的体积比为1:20~60,在30~35℃,转速为80~100rpm下调节pH6.0-8.0,再进行培养12~25h,得到乳酸菌发酵初液;
S3、分离:对乳酸菌发酵初液离心,离心转速为3000~3500rpm,离心10~30min,收集上清液,用0.22~0.28μm滤膜过滤,得到乳酸菌发酵提取物。
2.如权利要求1所述的一种乳酸菌发酵提取物的提取分离工艺,其特征在于:所述乳酸菌为乳酸杆菌、嗜酸乳杆菌、罗伊氏乳杆菌中的一种。
3.如权利要求1所述的一种乳酸菌发酵提取物的提取分离工艺,其特征在于:所述发酵步骤在摇床中进行,控制摇床的160~200rpm。
4.如权利要求1所述的一种乳酸菌发酵提取物的提取分离工艺,其特征在于:所述发酵培养基配方:葡萄糖2~8g/L、乙酸钠8~10g/L、蛋白胨10~15g/L、蒲桃提取液3~5g/L制得。
5.如权利要求1所述的一种乳酸菌发酵提取物的提取分离工艺,其特征在于:所述蒲桃提取物:将干燥粉碎的蒲桃新鲜叶用提取剂浸提10~24h,然后在20~60℃条件下在20~50KHz频率超声波下提取0.5~1h,制得蒲桃提取物;其中,所述蒲桃新鲜叶与提取剂的质量体积比为1g:5~15mL;所述提取剂为85~90wt%乙醇溶液。
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---|---|
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Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN113755365A (zh) * | 2021-08-11 | 2021-12-07 | 天津科技大学 | 一种乳酸菌抽提物的制备方法及应用 |
CN117752565A (zh) * | 2023-12-18 | 2024-03-26 | 广州她她生物科技有限公司 | 一种祛痘精华及其制备方法 |
Citations (30)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2006219460A (ja) * | 2005-02-14 | 2006-08-24 | Ryukyu Bio Resource Kaihatsu:Kk | 抗ヘルペスウイルス組成物及び抗ヘルペスウイルス作用を有する発酵モモタマナ抽出物の製造方法 |
CN102108370A (zh) * | 2010-12-02 | 2011-06-29 | 中国农业大学 | 利用乳酸菌生产γ-氨基丁酸的半连续发酵方法 |
JP2012214393A (ja) * | 2011-03-31 | 2012-11-08 | Naris Cosmetics Co Ltd | 抗酸化剤、及び抗酸化化粧料 |
JP2012224551A (ja) * | 2011-04-15 | 2012-11-15 | Morishita Jintan Co Ltd | ビフィズス菌または乳酸菌の生存維持用組成物 |
CN103865966A (zh) * | 2014-04-09 | 2014-06-18 | 青岛博之源生物技术有限公司 | 一种微生物分步固态发酵制备茶多糖的方法 |
JP2015151388A (ja) * | 2014-02-18 | 2015-08-24 | 共栄化学工業株式会社 | 化粧料 |
JP2015157773A (ja) * | 2014-02-21 | 2015-09-03 | 株式会社ナリス化粧品 | 化粧料 |
CN105434256A (zh) * | 2015-12-18 | 2016-03-30 | 山东福瑞达生物工程有限公司 | 一种天然乳液、制备方法及其应用 |
JP2016136913A (ja) * | 2015-01-29 | 2016-08-04 | 株式会社大日製薬 | 植物発酵液末の製造方法、植物発酵粉末の製造方法および植物発酵液末 |
KR20160092564A (ko) * | 2015-01-27 | 2016-08-05 | 인코스(주) | 효모,유산균 2단 발효 용해물을 함유하는 항산화, 주름개선, 보습 효과를 갖는 화장료 조성물 |
KR20160092569A (ko) * | 2015-01-27 | 2016-08-05 | 인코스(주) | 효모, 유산균 2단 발효 추출물을 함유하는 항산화, 주름개선, 보습 효과를 갖는 화장료 조성물 |
KR101770140B1 (ko) * | 2017-07-19 | 2017-08-23 | (주)지에프씨 | 락토바실러스 퍼멘튬 hk 균주 및 이를 이용하여 제조된 하라케케 발효 추출물 |
CN107496282A (zh) * | 2017-08-04 | 2017-12-22 | 湖北省农业科学院果树茶叶研究所 | 一种含有egcg的茶面膜及其制作方法 |
KR20180057753A (ko) * | 2016-11-21 | 2018-05-31 | (주)에코맘의 산골이유식 농업회사법인 | 구아바잎 발효대사체 제조방법 및 아토피 피부염 증상 개선용 구아바잎 발효대사체 조성물 |
EP3552616A1 (en) * | 2018-04-09 | 2019-10-16 | MHBT Co., Ltd. | Hydrolysate of water extract of syzygium samarangense, and preparation process and use thereof |
JP2019182777A (ja) * | 2018-04-09 | 2019-10-24 | 頂宏生物科技股▲分▼有限公司 | ジャワフトモモの水抽出物の加水分解物および該加水分解物を製造する方法ならびに該加水分解物の使用 |
WO2020125742A1 (zh) * | 2018-12-21 | 2020-06-25 | 江南大学 | 一种混合真菌分段式固态发酵制备功能性油脂的方法 |
CN111329897A (zh) * | 2020-04-13 | 2020-06-26 | 广西壮族自治区兽医研究所 | 一种混合益生菌发酵桃金娘产黄酮的方法 |
CN111436618A (zh) * | 2020-03-09 | 2020-07-24 | 南宁荣港生物科技有限公司 | 百香果多肽组合物及其制备方法 |
CN111642622A (zh) * | 2019-12-30 | 2020-09-11 | 广州立达尔生物科技股份有限公司 | 一种发酵复合菌和桃金娘发酵提取物的制备及应用 |
KR102156898B1 (ko) * | 2020-05-06 | 2020-09-16 | 정해덕 | 유산균발효 혼합물을 함유하는 피부 미백, 피부 보습, 항산화, 항염, 피부장벽 강화 및 피부흡수 기능을 개선한 섭취 가능한 화장료 조성물 |
KR102194315B1 (ko) * | 2020-06-24 | 2020-12-23 | 주식회사 아미코스메틱 | 락토바실러스 람노서스 균주를 접종하여 발효시킨 병풀 발효 추출물을 포함하는 항산화용 또는 피부 마이크로바이옴 균형 유지용 화장료 조성물 |
TWM606380U (zh) * | 2020-07-31 | 2021-01-11 | 生合生物科技股份有限公司 | 具有植物乳桿菌lp28以及鼠李糖乳桿菌lrh113之包埋結構的保健品 |
CN112574923A (zh) * | 2020-12-30 | 2021-03-30 | 杭州娃哈哈科技有限公司 | 一株高产胞外多糖的嗜热链球菌及其应用 |
CN113398021A (zh) * | 2021-05-31 | 2021-09-17 | 绽妍生物科技有限公司 | 一种高活性的乳酸菌发酵提取液的制备方法 |
KR20210114893A (ko) * | 2020-03-11 | 2021-09-24 | 엄상희 | 복숭아 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 및 의약외품 조성물 |
JP2021147361A (ja) * | 2020-03-19 | 2021-09-27 | インターナショナルフーズ株式会社 | 植物発酵エキスの新規な薬理用途 |
US20220218593A1 (en) * | 2018-10-11 | 2022-07-14 | Carboexpert Inc. | Skin whitening, anti-bacterial or anti-atopic composition, containing syzygium formosum extract as active ingredient |
CN114869839A (zh) * | 2022-06-06 | 2022-08-09 | 绽妍生物科技有限公司 | 一种基于乳酸菌发酵产物eps的多层微囊化的温和复合酸修复凝胶及其制备方法、用途 |
CN115120695A (zh) * | 2022-08-31 | 2022-09-30 | 健码制药(广东)有限公司 | 一种甘草益生菌复合制剂clpp-9及其在预防或治疗非酒精性脂肪性肝病的应用 |
-
2021
- 2021-03-31 CN CN202110352051.0A patent/CN113151067B/zh active Active
Patent Citations (30)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2006219460A (ja) * | 2005-02-14 | 2006-08-24 | Ryukyu Bio Resource Kaihatsu:Kk | 抗ヘルペスウイルス組成物及び抗ヘルペスウイルス作用を有する発酵モモタマナ抽出物の製造方法 |
CN102108370A (zh) * | 2010-12-02 | 2011-06-29 | 中国农业大学 | 利用乳酸菌生产γ-氨基丁酸的半连续发酵方法 |
JP2012214393A (ja) * | 2011-03-31 | 2012-11-08 | Naris Cosmetics Co Ltd | 抗酸化剤、及び抗酸化化粧料 |
JP2012224551A (ja) * | 2011-04-15 | 2012-11-15 | Morishita Jintan Co Ltd | ビフィズス菌または乳酸菌の生存維持用組成物 |
JP2015151388A (ja) * | 2014-02-18 | 2015-08-24 | 共栄化学工業株式会社 | 化粧料 |
JP2015157773A (ja) * | 2014-02-21 | 2015-09-03 | 株式会社ナリス化粧品 | 化粧料 |
CN103865966A (zh) * | 2014-04-09 | 2014-06-18 | 青岛博之源生物技术有限公司 | 一种微生物分步固态发酵制备茶多糖的方法 |
KR20160092564A (ko) * | 2015-01-27 | 2016-08-05 | 인코스(주) | 효모,유산균 2단 발효 용해물을 함유하는 항산화, 주름개선, 보습 효과를 갖는 화장료 조성물 |
KR20160092569A (ko) * | 2015-01-27 | 2016-08-05 | 인코스(주) | 효모, 유산균 2단 발효 추출물을 함유하는 항산화, 주름개선, 보습 효과를 갖는 화장료 조성물 |
JP2016136913A (ja) * | 2015-01-29 | 2016-08-04 | 株式会社大日製薬 | 植物発酵液末の製造方法、植物発酵粉末の製造方法および植物発酵液末 |
CN105434256A (zh) * | 2015-12-18 | 2016-03-30 | 山东福瑞达生物工程有限公司 | 一种天然乳液、制备方法及其应用 |
KR20180057753A (ko) * | 2016-11-21 | 2018-05-31 | (주)에코맘의 산골이유식 농업회사법인 | 구아바잎 발효대사체 제조방법 및 아토피 피부염 증상 개선용 구아바잎 발효대사체 조성물 |
KR101770140B1 (ko) * | 2017-07-19 | 2017-08-23 | (주)지에프씨 | 락토바실러스 퍼멘튬 hk 균주 및 이를 이용하여 제조된 하라케케 발효 추출물 |
CN107496282A (zh) * | 2017-08-04 | 2017-12-22 | 湖北省农业科学院果树茶叶研究所 | 一种含有egcg的茶面膜及其制作方法 |
EP3552616A1 (en) * | 2018-04-09 | 2019-10-16 | MHBT Co., Ltd. | Hydrolysate of water extract of syzygium samarangense, and preparation process and use thereof |
JP2019182777A (ja) * | 2018-04-09 | 2019-10-24 | 頂宏生物科技股▲分▼有限公司 | ジャワフトモモの水抽出物の加水分解物および該加水分解物を製造する方法ならびに該加水分解物の使用 |
US20220218593A1 (en) * | 2018-10-11 | 2022-07-14 | Carboexpert Inc. | Skin whitening, anti-bacterial or anti-atopic composition, containing syzygium formosum extract as active ingredient |
WO2020125742A1 (zh) * | 2018-12-21 | 2020-06-25 | 江南大学 | 一种混合真菌分段式固态发酵制备功能性油脂的方法 |
CN111642622A (zh) * | 2019-12-30 | 2020-09-11 | 广州立达尔生物科技股份有限公司 | 一种发酵复合菌和桃金娘发酵提取物的制备及应用 |
CN111436618A (zh) * | 2020-03-09 | 2020-07-24 | 南宁荣港生物科技有限公司 | 百香果多肽组合物及其制备方法 |
KR20210114893A (ko) * | 2020-03-11 | 2021-09-24 | 엄상희 | 복숭아 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 및 의약외품 조성물 |
JP2021147361A (ja) * | 2020-03-19 | 2021-09-27 | インターナショナルフーズ株式会社 | 植物発酵エキスの新規な薬理用途 |
CN111329897A (zh) * | 2020-04-13 | 2020-06-26 | 广西壮族自治区兽医研究所 | 一种混合益生菌发酵桃金娘产黄酮的方法 |
KR102156898B1 (ko) * | 2020-05-06 | 2020-09-16 | 정해덕 | 유산균발효 혼합물을 함유하는 피부 미백, 피부 보습, 항산화, 항염, 피부장벽 강화 및 피부흡수 기능을 개선한 섭취 가능한 화장료 조성물 |
KR102194315B1 (ko) * | 2020-06-24 | 2020-12-23 | 주식회사 아미코스메틱 | 락토바실러스 람노서스 균주를 접종하여 발효시킨 병풀 발효 추출물을 포함하는 항산화용 또는 피부 마이크로바이옴 균형 유지용 화장료 조성물 |
TWM606380U (zh) * | 2020-07-31 | 2021-01-11 | 生合生物科技股份有限公司 | 具有植物乳桿菌lp28以及鼠李糖乳桿菌lrh113之包埋結構的保健品 |
CN112574923A (zh) * | 2020-12-30 | 2021-03-30 | 杭州娃哈哈科技有限公司 | 一株高产胞外多糖的嗜热链球菌及其应用 |
CN113398021A (zh) * | 2021-05-31 | 2021-09-17 | 绽妍生物科技有限公司 | 一种高活性的乳酸菌发酵提取液的制备方法 |
CN114869839A (zh) * | 2022-06-06 | 2022-08-09 | 绽妍生物科技有限公司 | 一种基于乳酸菌发酵产物eps的多层微囊化的温和复合酸修复凝胶及其制备方法、用途 |
CN115120695A (zh) * | 2022-08-31 | 2022-09-30 | 健码制药(广东)有限公司 | 一种甘草益生菌复合制剂clpp-9及其在预防或治疗非酒精性脂肪性肝病的应用 |
Non-Patent Citations (7)
Title |
---|
S MOHANTY等: "Bioactivity of Syzygium jambos methanolic extracts: Antibacterial activity and toxicity", 《PHARMACOGNOSY RES》 * |
姜国哲等: "红景天和轮叶党参混合提取物戊糖乳杆菌发酵条件及抗氧化作用分析", 《食品科学》 * |
尹乐斌等: "乳酸菌发酵豆清液制备多肽及其体外抗氧化活性研究", 《食品与发酵工业》 * |
张声源等: "蒲桃枝叶化学成分预试及其总酚、总黄酮含量测定", 《中国民族民间医药》 * |
毛慧君等: "发酵法从西番莲果渣中制备膳食纤维的研究", 《食品科学》 * |
苏艳凤等: "副干酪乳杆菌的发酵条件优化及其发酵液功效评价", 《日用化学工业》 * |
陈艳等: "黄精多糖的闪式提取及对乳酸菌发酵特性的影响", 《食品工业》 * |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN113755365A (zh) * | 2021-08-11 | 2021-12-07 | 天津科技大学 | 一种乳酸菌抽提物的制备方法及应用 |
CN113755365B (zh) * | 2021-08-11 | 2024-02-27 | 天津科技大学 | 一种乳酸菌抽提物的制备方法及应用 |
CN117752565A (zh) * | 2023-12-18 | 2024-03-26 | 广州她她生物科技有限公司 | 一种祛痘精华及其制备方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN113151067B (zh) | 2023-03-24 |
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