JP2019182777A - ジャワフトモモの水抽出物の加水分解物および該加水分解物を製造する方法ならびに該加水分解物の使用 - Google Patents
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Abstract
Description
第2の態様において、本発明は、ジャワフトモモの果実材料を水で抽出処理して水抽出物を得ることと、前記水抽出物をブロメラインで加水分解処理することと、を含む方法により製造されるジャワフトモモの水抽出物の加水分解物を提供する。
第3の態様において、本発明は、上記ジャワフトモモの水抽出物の加水分解物を含む組成物を提供する。
第4の態様において、本発明は、肌の美白のための手段を提供する。該手段は、対象への上記組成物の投与を含む。
第5の態様において、本発明は、肌の保湿性向上のための手段を提供する。該手段は、対象への上記組成物の投与を含む。
第6の態様において、本発明は、創傷治癒の改善のための手段を提供する。該手段は、対象への上記組成物の投与を含む。
第7の態様において、本発明は、酸化ストレスの軽減のための手段を提供する。該手段は、対象への上記組成物の投与を含む。
本発明の他の特徴および利点は、添付の図面を参照する以下の実施形態の詳細な説明において明白になるであろう。
また、以下の説明において、「〜を含む」とは、「〜を含むがそれには限らない」ことを意味する。
ここで用いられる全ての技術的及び学術的用語は、特に定義がない限り、本発明が属する分野において通常の知識を有する者が通常理解する意味で用いられる。
更に、当業者であれば、本明細書に記載されているものと類似または同等の多くの方法および材料が、本発明の実施において使用され得ることを理解するであろう。本発明は、明示された方法および材料に限定されない。
第一に、本発明は、上記組成物を対象に投与することを含む、肌の美白のための方法を提供する。有効量の組成物が、被験者の皮膚が有意に白くなるまで十分な時間投与され得る。上記組成物は有効量であっても被験者の皮膚に有害な副作用を引き起こさない。
台湾の屏東県枋寮郷にて収穫されたジャワフトモモの果実材料(果皮、果肉、種子を含む)3〜6gを粉砕し、得られた粉砕物と水とを重量比1:1.5で混合し、50℃で1時間加熱した。これにより、ジャワフトモモの水抽出物(water extract of Syzygium samarangense、以下略してWESSと称する)を得た。
本発明に係るBHWESSの主要成分を測定するために、実施例1で得られたBHWESSを蒸留脱イオン水に溶解して、BHWESS濃度が1mg/mLの試料を作製し、当該試料に対しHPLC(高速液体クロマトグラフィー)分析を行なった。
図1は実施例1で製造したBHWESSのHPLC溶出プロファイルである。図1に示されているように、0分から35分の滞留時間の間に4つの主なピーク(それぞれa、b、c、dの記号が付されている)が観測された。
本発明に係るBHWESSが抗酸化作用を有するかどうかを調べるために、実施例1で製造したBHWESSの第一鉄イオンキレート化能を分析した。さらに、BHWESSとの比較のために、中国特許出願公開102228207Aに記載されている方法に概ね従って(多少の変更を含む)、ジャワフトモモの水抽出物の動物由来プロテアーゼ加水分解物(animal protease hydrolysate of water extract of Syzygium samarangense、以下略してAPHWESSと称する)を製造し、これに本発明に係るBHWESSと同じ実験を行った。実験手順を説明する前に、APHWESSの製造方法を以下に示す。
実施例1で製造したBHWESSの適量を蒸留脱イオン水に溶解し、BHWESS濃度0.35%(w/w)のBHWESS試料を作製した。そして、BHWESS試料1mL、エタノール3.7mL、2 mM FeCl2・4H2O溶液0.1mLを30秒間混合した。得られた混合物を5 mMフェロジン0.2mLと均一に混合した後、無光環境且つ室温で10分間定温放置した。この混合物に対し、Colibri分光光度計(Titertek-Berthold社製)を用いて、562nmの吸光度(OD562)を測定した。また、対照試料として95%エタノール溶液1mLに対しても上記の実験手順を行った。さらに、中国特許出願公開102228207Aに記載されている方法に概ね従って製造された上述のAPHWESSの適量を蒸留脱イオン水に溶解して、APHWESS濃度0.35%(w/w)のAPHWESS試料を作製し、このAPHWESS試料に対してもBHWESS試料と同じ実験手順を行なって、APHWESSの第一鉄イオンキレート化能を分析した。
試料の試験結果において、OD562の値が低いほど、抗酸化作用が強いことが示される。
A=[1−(B/C)]×100 (I)
式中、
「A」は第一鉄イオンキレート化率(%)であり、
「B」はBHWESS、APHWESSそれぞれのOD562の値であり、
「C」は対照試料のOD562の値である。
すべての実験を3回繰り返した。実験データは平均値±標準偏差として表される。
図2は、BHWESS試料と、対照試料と、APHWESS試料との第一鉄イオンキレート化率を示す。図2に示されているように、BHWESS試料の第1鉄イオンキレート化率は、対照試料およびAPHWESS試料のそれよりも有意に高い。この結果によって、本願出願人は、本発明に係るジャワフトモモの水抽出物の加水分解物は、ジャワフトモモの水抽出物の動物由来プロテアーゼ加水分解物と比較しても、十分な抗酸化作用を発揮できると考える。
本実施例では、本発明に係るBHWESSのメラニン生成抑制効果をチロシナーゼ活性に基づいて評価した。さらに、比較のために、実施例1で製造したWESSに対しても、BHWESSと同じ実験を行なった。
0.1 M Na2HPO4溶液500mLとKH2PO4溶液500mLを混合し、得られたリン酸緩衝液のpHを水酸化ナトリウムを用いて6.8に調整した。適量のチロシン(Alfa Aesar社製、ロット番号:10174330)を適量のリン酸緩衝液に加えて2mMのチロシン溶液を調製した。
D=[1−(E/F)]×100 (II)
式中、
「D」はチロシナーゼ阻害活性率(%)であり、
「E」はBHWESS、WESS、対照試料それぞれのOD475の値であり、
「F」は対照試料のOD475の値である。
図3は、BHWESS試料、WESS試料および対照試料のチロシナーゼ活性阻害パーセントを示す。 図3に示すように、BHWESS試料のパーセントチロシナーゼ活性阻害は、WESS試料および対照試料のそれよりも有意に高い。この実験結果は、本発明に係るジャワフトモモの水抽出物の加水分解物が、ジャワフトモモの水抽出物と比較してより良好なチロシナーゼ阻害能力を有することを示す。したがって、本願出願人は、本発明に係るジャワフトモモの水分物の加水分解物は、チロシナーゼ活性を抑制することによりメラニン生成を抑制できるので、肌の美白効果を有すると考える。
本実施例では、本発明に係るBHWESSの創傷治癒改善効果を創傷治癒細胞遊走アッセイによって評価した。さらに、比較のために、実施例1で製造したWESSおよび実施例3で製造したAPHWESSに対しても、BHWESSと同じ評価を行なった。
(1)ヒト皮膚線維芽細胞株Detroit551
本実施例で使用したヒト皮膚線維芽細胞株Detroit551は、台湾の財団法人食品工業発展研究所(Food Industry Research and Development Institute)の生物資源保存研究センター(Bioresource Collection and Research Center)(台湾新竹市東区食品路331号)から購入した。
(A)BHWESSとWESSとの創傷治癒改善効果の比較
実験材料の(1)で得られたDetroit551細胞を、BHWESS群、WESS群、および対照群の3つの群に分けた。Detroit551細胞の各群を、2×105細胞/ウェルでMEM(10%FBSを充填)500μLを含む24ウェルプレート中で培養し、次いでインキュベーター(37℃、5%CO2)内で24時間培養した。
G=[1−(H/I)]×100 (III)
式中、
「G」は創傷治癒率(%)であり、
「H」は処置後12時間後の創傷領域の面積であり、
「I」は処置前の創傷領域の面積である。
(B)BHWESSとAPHWESSとの創傷治癒改善効果の比較
図4は、BHWESSまたはWESSで処置したDetroit551細胞および処置を受けなかった同細胞の創傷治癒率を示す。図4に示すように、WESS群と対照群の創傷治癒率に有意差は認められなかった。一方、BHWESS群の創傷治癒率は、対照群およびWESS群のそれよりも有意に高かった。
本発明に係るBHWESSのヒトの皮膚の保湿性に対する向上効果を調べるために、以下の実験を行った。
本実施例では、実施例1で製造したBHWESSおよびWESSと、実施例3で製造したAPHWESSとを使用した。表1に示すレシピを用いて、4種類のエッセンス(BHWESSエッセンス、WESSエッセンス、APHWESSエッセンス、対照エッセンス)をそれぞれ調製した。
台湾屏東県にある允頂企業社(Yeun Diing Enterprise CO., LTD.)および台湾雲林県にある頂宏生物科技社(M.H. Biotechnology Co., Ltd.)の社員から募られた対象者を、表2に記載の除外基準に従ってスクリーニングした。その結果、10人の適格被験者(25歳〜40歳の男性4人および女性6人)が、下記の試験に参加した。
J=[(L-K)/K]×100 (IV)
式中、
「J」は指定された各時点(7日目、14日目、21日目、28日目)における角質層の含水量の向上率(%)であり、
「K」は0日目の角質層の含水量であり、
「L」は指定された各時点における角質層の含水量である。
頂宏生物科技社(M.H. Biotechnology Co., Ltd.)の社員から募られた対象者を、表2に記載の除外基準に従ってスクリーニングした。その結果、9人の適格被験者(25歳〜40歳の男性6人および女性3人)が、下記の試験に参加した。
(1)角質層の含水量の測定結果
図6は、異なる時点におけるBHWESS、WESSおよび対照エリアのそれぞれにおける角質層の含水量の向上率を示す。図6に示すように、試験エッセンスの塗布開始後14日目、21日目、28日目において、BHWESSエリアの角質層の含水量の向上率は、WESSエリアおよび対照エリアのそれよりも有意に高い。さらに、BHWESSエリアの角質層の含水率は時間の経過と共に著しく増加したが、WESSエリアの含水率の向上は非常に遅かった。
試験期間中、すべての被験者において有害な皮膚反応は観察されなかった(データは示されない)。
Claims (19)
- ジャワフトモモの果実材料を水で抽出処理して水抽出物を得ることと、
前記水抽出物をブロメラインで加水分解処理することと、
を含む、ジャワフトモモの水抽出物の加水分解物を製造する方法。 - 前記ジャワフトモモの果実材料の水に対する重量比が1:0.5から1:5の範囲にある、請求項1に記載の方法。
- 前記水抽出物のブロメラインに対する重量比が150:1から600:1の範囲にある、請求項1または2に記載の方法。
- 前記加水分解処理の後に固液分離処理を行って前記加水分解処理により発生した固形分を除去することを更に含む、請求項1〜3のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ジャワフトモモの果実材料はジャワフトモモの果肉を含む、請求項1〜4のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ジャワフトモモの果実材料はジャワフトモモの果皮とジャワフトモモの種子を更に含む、請求項5に記載の方法。
- ジャワフトモモの果実材料を水で抽出処理して水抽出物を得ることと、
前記水抽出物をブロメラインで加水分解処理することと、を含む方法により製造される、ジャワフトモモの水抽出物の加水分解物。 - 前記ジャワフトモモの果実材料の水に対する重量比が1:0.5から1:5の範囲にある、請求項7に記載の加水分解物。
- 前記水抽出物のブロメラインに対する重量比が150:1から600:1の範囲にある、請求項7または8に記載の加水分解物。
- 前記方法は、前記加水分解処理の後に固液分離処理を行って前記加水分解処理により発生した固形分を除去することを更に含む、請求項7〜9のいずれか一項に記載の加水分解物。
- 前記ジャワフトモモの果実材料はジャワフトモモの果肉を含む、請求項7〜10のいずれか一項に記載の加水分解物。
- 前記ジャワフトモモの果実材料はジャワフトモモの果皮とジャワフトモモの種子を更に含む、請求項11に記載の加水分解物。
- 請求項7〜12のいずれか一項に記載の加水分解物を含む組成物。
- 肌の美白のために用いられる請求項13に記載の組成物。
- 肌の保湿性の向上のために用いられる請求項13に記載の組成物。
- 創傷治癒の改善のために用いられる請求項13に記載の組成物。
- 酸化ストレスの軽減のために用いられる請求項13に記載の組成物。
- 局所投与剤形に形成された、請求項13〜17のいずれか一項に記載の組成物。
- 経口投与剤形に形成された、請求項13〜17のいずれか一項に記載の組成物。
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