TWI635873B - 蓮霧水萃取物的水解產物及其製備方法與用途 - Google Patents

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Abstract

本發明揭示一種蓮霧水萃取物的水解產物暨其製備方法。本發明亦揭示該蓮霧水萃取物的水解產物可被用於促進皮膚美白、提升皮膚的保濕能力、促進傷口癒合以及抗氧化。

Description

蓮霧水萃取物的水解產物及其製備方法與用途
本發明是有關於一種蓮霧水萃取物的水解產物(hydrolysate of water extract ofSyzygium samarangense )暨其製備方法。本發明亦有關於使用該蓮霧水萃取物的水解產物來促進皮膚美白、提升皮膚的保濕能力、促進傷口癒合以及抗氧化。
皮膚是保護人類個體的最大屏障，它具有對抗水分散失、病原菌以及各種環境損害之功能。暴露於大量的紫外線(ultraviolet, UV)、游離輻射(ionizing radiation)、藥物或異生物質(xenobiotics)會促使皮膚生成活性氧族(reactive oxygen species, ROS)以及自由基(free radicals)。當所累積的活性氧族以及自由基的數量超過細胞或組織本身的抗氧化能力時，便會形成氧化性壓力(oxidative stress)。接著，活性氧族以及自由基會與細胞內的組成物(包括DNA、蛋白質以及脂質等)相反應，進而對皮膚產生非所欲的影響。已有報導指出，活性氧族以及自由基不僅在黑色素生成(melanogenesis)的過程中扮演重要的角色，並且還會造成傷口癒合的延遲(delay of wound healing)(Kim Y.J. and Yokozawa T. (2009),Biol. Pharm. Bull ., 32:1155-1159；Kurahashi T. and Fujii J.(2009),J. Dev. Biol. , 3:57-70)。
黑色素生成意指酪胺酸(tyrosine)在黑色素細胞(melanocytes)內經由酪胺酸酶(tyrosinase)的催化以及一系列的氧化還原反應而被轉化為黑色素(melanin)的過程，它主要是由紫外線[特別是紫外線-B (UV-B)]的照射所導致。當皮膚受到紫外線的照射後，在角質細胞(keratinocyte)中所生成的活性氧族以及自由基會誘發腫瘤蛋白質53 (tumor protein 53, p53)的表現，進而促使前腦啡黑細胞促素皮促素基因(proopiomelanocortin gene, POMC gene)的表現並且釋放出POMC-衍生的胜肽(POMC-derived peptides)[諸如α-促黑素細胞素(α-melanocyte stimulating hormone, α-MSH)以及促腎上腺皮質激素(adrenocorticotropic hormone, ACTH)]，繼而使得黑色素細胞內的酪胺酸酶基因被表現，最後導致大量的黑色素累積於皮膚上。
當皮膚受到損傷[諸如，燙傷(scald)、創傷(trauma)、外科手術(surgery)以及挫傷(contusion)等]而產生傷口(wound)時，在傷口處會產生發炎反應(inflammatory response)，大量的活性氧族以及自由基會被釋放，以協助免疫細胞對抗病原菌。然而，過多的活性氧族以及自由基會對傷口周圍的組織造成傷害。在傷口癒合(wound healing)的過程中，纖維母細胞(fibroblast)會聚集至傷口處來進行增生並且釋放生長因子(growth factor)，進而導致血管生成(angiogenesis)、上皮形成(epithelialization)以及膠原蛋白重塑(collagen remolding)等。然而，過多的活性氧族以及自由基不僅會抑制血管生成，並且會使涉及信號傳遞路徑(signaling pathway)的酵素失活，進而阻礙傷口癒合。
近年來，人類對於皮膚美白(skin whitening)、保濕(moisturizing)、促進傷口癒合以及抗氧化的需求與日俱增，特別地，使用天然成分不會對皮膚產生非所欲的不利副作用，因而已成為現今醫學美容市場的趨勢。因此，醫藥界以及化妝品工業的研究人員嘗試從傳統中藥(traditional Chinese medicines, TCM)或植物中來尋找安全並且具有美白、保濕、促進傷口癒合以及抗氧化之效用的活性組分(active components)以供廣大的市場所需。
蓮霧(拉丁學名：Syzygium samarangense ；英文俗名：wax apple；漢語拼音：lian wu；中文別名：天桃)是桃金孃科(Myrtaceae )赤楠屬(Syzygium )的多年生常綠喬木；單葉對生，外觀呈橢圓形；花腋生，花冠為淡黃色；漿果呈倒圓錐狀。產區分佈於台灣、印尼、菲律賓以及馬來西亞等。目前台灣較為常見的蓮霧品種包括深紅色種、淡紅色種、黑珍珠、黑金剛以及黑鑽石等。蓮霧的主要利用部位為果實，在中國民俗醫學上，蓮霧被用於潤肺、止咳、除痰、涼血以及收斂等。此外，蓮霧還被認為具有解熱、利尿以及寧心安神等功效。
目前已有研究是有關於蓮霧萃取物在藥學領域上的應用。例如，在輔仁大學食品營養學系的羅珮文所著碩士論文[名稱：“台灣數種特有水果抗氧化活性及清除自由基能力之評估(Evaluation of the antioxidative and free radical-scavenging activity of several Taiwan unique fruits)”]中，羅珮文將14種水果[亦即柳丁、桶柑、柚子、白柚、金桔、草莓、火龍果、蓮霧、柿子、芒果、木瓜、棗子、楊桃以及芭樂]的果實進行冷凍乾燥並研磨成粉末，接著各取10 g並分別以100 mL的甲醇進行萃取歷時6小時，繼而以濾紙予以過濾，接而將所得到的濾液進行濃縮乾燥，藉此而分別得到該14種水果的甲醇萃取物。羅珮文將該14種水果的甲醇萃取物拿來進行抗氧化效力(antioxidation efficacy)的測試，而實驗結果發現，該14種水果的甲醇萃取物分別在不同的測試中展現程度不等的活性。特別地，在α,α-二苯-β-苦味基肼基(DPPH)自由基清除能力[α,α-diphenyl-β-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging ability]的測試中，蓮霧果實(包括果皮以及果肉)的甲醇萃取物被發現具有最差的DPPH自由基清除能力。而在超氧陰離子生成(superoxide anion generation)的抑制能力測試中，該蓮霧果實的甲醇萃取物被發現不僅無法抑制超氧陰離子生成，還會促進超氧陰離子生成。
在嘉南藥理科技大學化粧品科技研究所的陳宜貞所著碩士論文[名稱：“蓮霧花萃取液於抗氧化之應用(Application of extracts from wax apple flowers on antioxidantion)”]中，陳宜貞將50 g的蓮霧花的乾燥粉末分別以500 mL的80%甲醇以及500 mL的水進行萃取歷時1小時，繼而以濾紙予以過濾，接而將所得到的濾液進行濃縮以及冷凍乾燥，藉此而分別得到蓮霧花的一甲醇萃取物以及一水萃取物。陳宜貞將該2種萃取物拿來進行抗氧化效力以及酪胺酸酶抑制能力的測試。在大部分的抗氧化效力[包括超氧陰離子清除能力(superoxide anion scavenging ability)、脂質過氧化抑制活性(lipid peroxidation inhibition activity)以及亞鐵離子螯合能力(ferrous ion chelating ability)]的測試中，該水萃取物的抗氧化效用被發現是優於該甲醇萃取物所具者。然而，該甲醇萃取物的酪胺酸酶抑制能力被發現是顯著地優於該水萃取物所具者。
TW I465258揭示一種具皮膚美白暨抗老化性之蓮霧花乙醇萃取物及其製造方法，該製造方法主要包括將蓮霧花乾燥粉末以95%乙醇進行萃取，繼而予以過濾，接而將所得到的濾液進行濃縮，藉此而得到該蓮霧花乙醇萃取物。該蓮霧花乙醇萃取物經由實驗而被證實具有抗氧化、抑制酪胺酸酶以及促進膠原蛋白生成的效用。
CN 102228207 A揭示一種蓮霧的加工方法及其產物，該方法包括將蓮霧與水予以混合，繼而利用鹽酸將所得到的混合物的pH值調整至3.5，然後使用胃蛋白酶(pepsin)來進行酵素水解反應。接著，利用NaOH將所得到的胃蛋白酶水解產物的pH值調整至7.5，然後使用胰蛋白酶(trypsin)來進行酵素水解反應。之後，將所得到的胰蛋白酶水解產物進行離心，收集上澄液並予以過濾，繼而將所得到的濾液予以濃縮，藉此而得到一加工產物。該加工產物經由實驗而被證實具有治療肺燥咳嗽、痔瘡出血、消化不良以及腸炎痢疾的效用。
雖然已有上述的文獻報導，本領域的相關研究人員仍致力於從蓮霧中開發出具有更佳生物活性的組分。在先前研究中，申請人發現蓮霧果實的水萃取物具有微弱的抑制酪胺酸酶活性、提升皮膚的保濕能力以及促進傷口癒合的效用(未發表的數據)。經進一步研究，申請人意外地發現，當使用鳳梨酶(bromelain)來對蓮霧果實的水萃取物進行水解處理，其在抑制酪胺酸酶活性、提升皮膚的保濕能力以及促進傷口癒合上的效用會被顯著地提升。因此，蓮霧水萃取物的水解產物被預期可供作為一種護膚產品或醫藥品。
發明概要
於是，在第一個方面，本發明提供一種蓮霧水萃取物的水解產物，它是藉由一包含下列步驟之方法而被製得： 以水來萃取蓮霧果實而得到一水萃取物；以及 令該水萃取物進行一使用一鳳梨酶的水解處理，藉此而得到該蓮霧水萃取物的水解產物。
在第二個方面，本發明提供一種用以製備一蓮霧水萃取物的水解產物的方法，其包含下列步驟： 以水來萃取蓮霧果實而得到一水萃取物；以及 令該水萃取物進行一使用一鳳梨酶的水解處理，藉此而得到該蓮霧水萃取物的水解產物。
在第三個方面，本發明提供一種組成物，其包含有一如上所述的蓮霧水萃取物的水解產物。
在第四個方面，本發明提供一如上所述的蓮霧水萃取物的水解產物供應用於製備一用來美白皮膚之醫藥品或化妝品的用途。
在第五個方面，本發明提供一種用於美白皮膚的方法，其包括對一需要促進皮膚美白的個體投予(administering)一如上所述的蓮霧水萃取物的水解產物。
在第六個方面，本發明提供一如上所述的蓮霧水萃取物的水解產物供應用於製備一用來提升皮膚的保濕能力之醫藥品或化妝品的用途。
在第七個方面，本發明提供一種用於提升皮膚的保濕能力的方法，其包括對一需要提升皮膚的保濕能力的個體投予一如上所述的蓮霧水萃取物的水解產物。
在第八個方面，本發明提供一如上所述的蓮霧水萃取物的水解產物供應用於製備一用來促進傷口癒合之醫藥品或化妝品的用途。
在第九個方面，本發明提供一種用於促進傷口癒合的方法，其包括對一具有一傷口的個體投予一如上所述的蓮霧水萃取物的水解產物。
在第十個方面，本發明提供一如上所述的蓮霧水萃取物的水解產物供應用於製備一用來抗氧化之醫藥品或化妝品的用途。
在第十一個方面，本發明提供一種用於抗氧化的方法，其包括對一具有氧化性壓力的個體投予一如上所述的蓮霧水萃取物的水解產物。
本發明的上述以及其它目的、特徵與優點，在參照以下的詳細說明與較佳實施例和隨文檢附的圖式後，將變得明顯。
發明的詳細說明
為了這本說明書之目的，將被清楚地瞭解的是：文字“包含有(comprising)”意指“包含但不限於”，以及文字“包括(comprises)”具有一對應的意義。
要被瞭解的是：若有任何一件前案刊物在此被引述，該前案刊物不構成一個下述承認：在台灣或任何其他國家之中，該前案刊物形成本技藝中的常見一般知識之一部分。
除非另外有所定義，在本文中所使用的所有技術性與科學術語具有熟悉本發明所屬技藝的人士所共同瞭解的意義。一熟悉本技藝者會認知到許多與那些被描述於本文中者相似或等效的方法和材料，它們可被用於實施本發明。當然，本發明決不受到所描述的方法和材料之限制。
為了從植物中獲得具有護膚效用的天然活性組分(natural active components)，申請人嘗試以各種不同的方法來對蓮霧果實進行處理，並且進一步將所得到的產物拿來進行活體外試驗(in vitro test)與人體試驗而發現到：當使用鳳梨酶(bromelain)來對蓮霧果實的水萃取物(water extract ofSyzygium samarangense fruit)進行水解處理，其在螯合亞鐵離子、抑制酪胺酸酶活性、提升皮膚的保濕能力以及促進傷口癒合上的效用會被顯著地提升。
因此，本發明提供一種蓮霧水萃取物的水解產物，它是藉由一包含下列步驟之方法而被製得： 以水來萃取蓮霧果實而得到一水萃取物；以及 令該水萃取物進行一使用一鳳梨酶的水解處理，藉此而得到該蓮霧水萃取物的水解產物。
本發明亦提供一種用以製備一蓮霧水萃取物的水解產物的方法，其包含下列步驟： 以水來萃取蓮霧果實而得到一水萃取物；以及 令該水萃取物進行一使用一鳳梨酶的水解處理，藉此而得到該蓮霧水萃取物的水解產物。
依據本發明，術語“蓮霧果實(Syzygium samarangense fruit)”意指包含有蓮霧的果肉(pulp)(亦即可食用的部分)之果實。較佳地，該果實進一步包含有蓮霧的果皮(peel)以及種籽(seed)。
依據本發明，該蓮霧果實可來自於不同的品種(cultivar)。較佳地，該蓮霧的品種可選自於下列所構成之群組：黑珍珠(Black Pearl)、深紅色種(Dark Red)、淡紅色種(Light Red)、粉紅色種(Pink)[又被稱為南洋種(Nanyang)]、黑鑽石(Black Diamond)、黑金剛(Black King Kong)，以及它們的組合。在本發明的一個較佳具體例中，該蓮霧的品種是黑珍珠。
依據本發明，該蓮霧果實可具有不同的果實成熟度(fruit maturity)。較佳地，該蓮霧果實是幼果(young fruit)。更佳地，該蓮霧果實是開花後1個月的幼果。
依據本發明，水萃取的方法可以採用熟習此項技藝者所詳知且慣用的技術來進行。在此方面，可以參照，例如，嘉南藥理科技大學化粧品科技研究所的陳宜貞所著碩士論文(同上述)。
可瞭解到的是，有關萃取方法的操作條件會進一步隨著所使用的蓮霧果實的處理方式以及水與蓮霧果實的用量比例等因素而被變動，以便達致最佳的萃取效果。而這些操作條件的選擇是熟習此項技藝者能例行性地自行決定的。
依據本發明，該蓮霧果實的水萃取可以使用新鮮的蓮霧果實來進行，或者可使用預先經過一選自於由下列所構成之群組中的加工處理的蓮霧果實來進行：乾燥處理、研磨處理、切碎處理、粉碎處理，以及它們的組合。
依據本發明，該蓮霧果實與水的重量比是介於1：0.5至1：5之間。在本發明的一個較佳具體例中，該蓮霧果實與水的重量比是1：1.5。
依據本發明，該蓮霧果實的水萃取是在一範圍落在35℃至65℃內的溫度下被進行。在本發明的一個較佳具體例中，該水萃取是在50℃下被進行。
依據本發明，使用鳳梨酶的水解處理可以採用熟習此項技藝者所詳知且慣用的技術來進行。
可瞭解到的是，有關水解處理的操作條件會進一步隨著該水萃取物與鳳梨酶的用量比例等因素而被變動，以便達致最佳的萃取效果。而這些操作條件的選擇是熟習此項技藝者能例行性地自行決定的。
依據本發明，該水萃取物與該鳳梨酶的重量比是介於150：1至600：1之間。在本發明的一個較佳具體例中，該水萃取物與該鳳梨酶的重量比是200：1。
依據本發明，該水解處理是在一範圍落在30至60℃內的溫度下作用歷時3至6小時而被進行。在本發明的一個較佳具體例中，該水解處理是在45℃溫度下作用歷時4小時而被進行。
依據本發明，該水萃取物在進行水解處理後可進一步進行一固液分離處理，俾以移除固體部分。該固液分離處理可以採用熟習此項技藝者所詳知且慣用的技術來進行，這包括，但不限於：過濾(filtration)、離心(centrifugation)以及傾析(decantation)。在本發明的一個較佳具體例中，該固液分離處理依序包括離心以及過濾。
依據本發明的該蓮霧水萃取物的水解產物經由活體外試驗而被證實可以有效地抑制酪胺酸酶活性。據此，依據本發明的該蓮霧水萃取物的水解產物被預期具有促進皮膚美白的效用，因而可供應用於製備一用來美白皮膚之醫藥品的用途。
如本文中所用的，術語“美白(whitening)”與“膚色淡化(skin color lightening)”、“漂白(bleaching)”、“淨白”、“增白(brightening)”、“退黑”、“驅黑”、“淡化黑色素(lightening the melanin)”、“抑制黑色素生成(inhibition of melanogenesis)”以及“抑制黑色素合成(inhibition of melanin synthesis)”可被交換地使用。
依據本發明，該醫藥品可利用熟習此技藝者所詳知的技術而被製造成一適合於口服地(orally)或局部地(topically)投藥的劑型，這包括，但不限於：無菌的粉末(sterile powder)、錠劑(tablet)、片劑(troche)、丸劑(pill)、膠囊(capsule)、外部製劑(external preparation)以及類似之物。
依據本發明，該醫藥品可進一步包含有一被廣泛地使用於藥物製造技術之藥學上可接受的載劑(pharmaceutically acceptable carrier)。例如，該藥學上可接受的載劑可包含一或多種選自於下列的試劑：溶劑(solvent)、緩衝液(buffer)、乳化劑(emulsifier)、懸浮劑(suspending agent)、分解劑(decomposer)、崩解劑(disintegrating agent)、分散劑(dispersing agent)、黏結劑(binding agent)、賦形劑(excipient)、安定劑(stabilizing agent)、螯合劑(chelating agent)、稀釋劑(diluent)、膠凝劑(gelling agent)、防腐劑(preservative)、潤濕劑(wetting agent)、潤滑劑(lubricant)、吸收延遲劑(absorption delaying agent)、脂質體(liposome)以及類似之物。有關這些試劑的選用與數量是落在熟習此項技術之人士的專業素養與例行技術範疇內。
依據本發明，該醫藥品可利用熟習此技藝者所詳知的技術而被製造成一適合於口服投藥(oral administration)的劑型(dosage form)，這包括，但不限於：無菌的粉末、錠劑(tablet)、片劑(troche)、口含錠(lozenge)、丸劑(pellet)、膠囊(capsule)、分散性粉末(dispersible powder)或細顆粒(granule)、溶液、懸浮液(suspension)、乳劑(emulsion)、糖漿(syrup)、酏劑(elixir)、濃漿(slurry)以及類似之物。
依據本發明，該醫藥品亦可利用熟習此技藝者所詳知的技術而被製造成一適合於局部地施用於皮膚上的外部製劑(external preparation)，這包括，但不限於：乳劑(emulsion)、凝膠(gel)、軟膏(ointment)、乳霜(cream)、貼片(patch)、擦劑(liniment)、粉末(powder)、氣溶膠(aerosol)、噴霧(spray)、乳液(lotion)、乳漿(serum)、糊劑(paste)、泡沫(foam)、滴劑(drop)、懸浮液(suspension)、油膏(salve)以及繃帶(bandage)。
依據本發明，該外部製劑是藉由將該醫藥品與一為熟習此項技藝者所詳知的基底(base)相混合而被製備。
依據本發明，該基底可包含有一或多種選自於下列的添加劑(additives)：水、醇(alcohols)、甘醇(glycol)、碳氫化合物(hydrocarbons)[諸如石油膠(petroleum jelly)以及白凡士林(white petrolatum)]、蠟(wax)[諸如石蠟(paraffin)以及黃蠟(yellow wax)]、保存劑(preserving agents)、抗氧化劑(antioxidants)、界面活性劑(surfactants)、吸收增強劑(absorption enhancers)、安定劑(stabilizing agents)、膠凝劑(gelling agents)[諸如卡波普® 974P (carbopol® 974P)、微結晶纖維素(microcrystalline cellulose)以及羧基甲基纖維素(carboxymethylcellulose)]、活性劑(active agents)、保濕劑(humectants)、氣味吸收劑(odor absorbers)、香料(fragrances)、pH調整劑(pH adjusting agents)、螯合劑(chelating agents)、乳化劑(emulsifiers)、閉塞劑(occlusive agents)、軟化劑(emollients)、增稠劑(thickeners)、助溶劑(solubilizing agents)、滲透增強劑(penetration enhancers)、抗刺激劑(anti-irritants)、著色劑(colorants)以及推進劑(propellants)等。有關這些添加劑的選用與數量是落在熟習此項技術之人士的專業素養與例行技術範疇內。
本發明亦提供一種用於美白皮膚的方法，其包括對一需要促進皮膚美白的個體投予本發明的蓮霧水萃取物的水解產物。較佳地，該方法包括對該個體的皮膚施用一有效量的該蓮霧水萃取物的水解產物，並且歷時一足夠的時間直到皮膚的黑色素被顯著地淡化。
如本文中所用的，術語“投予(administering)”與“投藥”以及“施用(application)”可被交換地使用。
如此處所用的，術語“有效量(effective amount)”意指當本發明的蓮霧水萃取物的水解產物被投予一需要促進皮膚美白的個體時，一足以提供所欲達致之美白功效並且不會對皮膚產生非所欲的不利副作用的安全用量。
如此處所用的，術語“有效量”與“有效劑量(effective dose)”、“美白有效量(whitening effective amount)”以及“美白有效劑量(whitening effective dose)”可被交換地使用。
依據本發明，該蓮霧水萃取物的水解產物的有效量與施用頻率(frequency of application)會視下列因素而變化：要被淡化黑色素的皮膚區域之初始病況(initial condition)以及所欲達致之最終的美白效果。一般而言，當依據本發明的蓮霧水萃取物的水解產物被局部地施用於皮膚上時，每次施用的有效量通常是1至10 mg/平方公分的皮膚面積，每天大約1至3次。而當依據本發明的蓮霧水萃取物的水解產物是被口服地投藥時，每次投藥的有效量通常是0.05至5 mg/Kg體重，每天大約1至3次。
另外，依據本發明的蓮霧水萃取物的水解產物經由人體試驗而被證實能夠有效地提升皮膚的角質層(stratum corneum)的含水量(water content)。據此，依據本發明的蓮霧水萃取物的水解產物被預期具有提升皮膚的保濕能力的效用，因而可供應用於製備一用來提升皮膚的保濕能力之醫藥品的用途。
依據本發明，該醫藥品的投藥途徑、劑型以及可供使用之藥學上可接受的載劑是如上面所述者。
本發明亦提供一種用於提升皮膚的保濕能力的方法，其包括對一需要提升皮膚的保濕能力的個體投予本發明的蓮霧水萃取物的水解產物。較佳地，該方法包括對該個體的皮膚施用一有效量的該蓮霧水萃取物的水解產物，並且歷時一足夠的時間直到皮膚的保濕能力被顯著地提升。
如此處所用的，術語“有效量(effective amount)”意指當本發明的蓮霧水萃取物的水解產物被投予一需要提升皮膚的保濕能力的個體時，一足以提供所欲達致之保濕功效並且不會對皮膚產生非所欲的不利副作用的安全用量。
如此處所用的，術語“有效量”與“有效劑量(effective dose)”、“保濕有效量(moisture-retaining effective amount)”以及“保濕有效劑量(moisture-retaining effective dose)”可被交換地使用。
依據本發明，該蓮霧水萃取物的水解產物的有效量與施用頻率會視下列因素而變化：要被提升保濕能力的皮膚區域之初始病況以及所欲達致之最終的保濕效果。一般而言，當依據本發明的蓮霧水萃取物的水解產物被局部地施用於皮膚上時，每次施用的有效量通常是1至10 mg/平方公分的皮膚面積，每天大約1至3次。而當依據本發明的蓮霧水萃取物的水解產物是被口服地投藥時，每次投藥的有效量通常是0.05至5 mg/Kg體重，每天大約1至3次。
另外，依據本發明的該蓮霧水萃取物的水解產物經由活體外試驗而被證實可以有效地促進纖維母細胞-媒介的傷口閉合(fibroblast-mediated wound closure)。據此，依據本發明的該蓮霧水萃取物的水解產物被預期具有促進傷口癒合的效用，因而可供應用於製備一用來促進傷口癒合之醫藥品的用途。
依據本發明，該醫藥品的投藥途徑、劑型以及可供使用之藥學上可接受的載劑是如上面所述者。
本發明亦提供一種用於促進傷口癒合的方法，其包括對一具有一傷口的個體投予本發明的蓮霧水萃取物的水解產物。較佳地，該方法包括對該個體的傷口施用一有效量的該蓮霧水萃取物的水解產物，並且歷時一足夠的時間直到傷口區域的面積被顯著地減少。
如此處所用的，術語“有效量(effective amount)”意指當本發明的蓮霧水萃取物的水解產物被投予一具有一傷口的個體時，一足以提供所欲達致之促進傷口癒合的功效並且不會對傷口產生非所欲的不利副作用的安全用量。
如此處所用的，術語“有效量”與“有效劑量(effective dose)”、“傷口癒合有效量(wound healing effective amount)”以及“傷口癒合有效劑量(wound healing effective dose)”可被交換地使用。
依據本發明，該蓮霧水萃取物的水解產物的有效量與施用頻率會視下列因素而變化：傷口區域之初始病況以及所欲達致之最終的傷口癒合效果。一般而言，當依據本發明的蓮霧水萃取物的水解產物被局部地施用於皮膚上時，每次施用的有效量通常是1至10 mg/平方公分的皮膚面積，每天大約1至3次。而當依據本發明的蓮霧水萃取物的水解產物是被口服地投藥時，每次投藥的有效量通常是0.05至5 mg/Kg體重，每天大約1至3次。
另外，依據本發明的蓮霧水萃取物的水解產物經由活體外試驗而被證實具有優越的亞鐵離子螯合能力。據此，依據本發明的該蓮霧水萃取物的水解產物被預期具有抗氧化的效用，因而可供應用於製備一用來抗氧化之醫藥品的用途。
依據本發明，該醫藥品的投藥途徑、劑型以及可供使用之藥學上可接受的載劑是如上面所述者。
本發明亦提供一種用於抗氧化的方法，其包括對一具有氧化性壓力的個體投予本發明的蓮霧水萃取物的水解產物。較佳地，該方法包括對該個體施用一有效量的該蓮霧水萃取物的水解產物，並且歷時一足夠的時間直到氧化性壓力被顯著地改善。
如此處所用的，術語“有效量(effective amount)”意指當本發明的蓮霧水萃取物的水解產物被投予一需要抗氧化的個體時，一足以提供所欲達致之抗氧化的功效並且不會產生非所欲的不利副作用的安全用量。
如此處所用的，術語“有效量”與“有效劑量(effective dose)”、“抗氧化有效量(antioxidant effective amount)”以及“抗氧化有效劑量(antioxidant effective dose)”可被交換地使用。
依據本發明，該蓮霧水萃取物的水解產物的有效量與施用頻率會視下列因素而變化：氧化性壓力之初始病況以及所欲達致之最終的抗氧化效果。一般而言，當依據本發明的蓮霧水萃取物的水解產物被局部地施用於皮膚上時，每次施用的有效量通常是1至10 mg/平方公分的皮膚面積，每天大約1至3次。而當依據本發明的蓮霧水萃取物的水解產物是被口服地投藥時，每次投藥的有效量通常是0.05至5 mg/Kg體重，每天大約1至3次。
基於依據本發明的蓮霧水萃取物的水解產物的抗氧化效用，依據本發明的蓮霧水萃取物的水解產物被預期具有預防和/或延緩皮膚老化的效用，因而可供應用於製備一用來抗皮膚老化之醫藥品的用途。
如本文中所用的，術語“延緩(retarding)”意指治療(treating)、減少(reducing)、減輕(alleviating)、改善(ameliorating)、緩解(relieving)或控制(controlling)一疾病(disease)或障礙(disorder)的一或多個臨床徵兆(clinical sign)，以及降低(lowering)、停止(stopping)或逆轉(reversing)一正在被治療中的病況(condition)或症狀(symptom)之嚴重性的進展(progression of severity)。
如本文中所用的，術語“皮膚老化(skin aging)”意欲涵蓋自然發生的內在皮膚老化(intrinsic skin aging)，以及由環境因素(特別是紫外線的照射)所引起的外在皮膚老化(extrinsic skin aging)。皮膚老化的症狀包括，但不限於：毛細血管擴張(telangiectasia)、表皮變薄、皮膚萎縮(skin atrophy)、膠原纖維(collagen fiber)與彈性纖維(elastic fiber)的減少、彈性組織變性(elastosis)、皮膚彈性(skin elasticity)變差、皮膚質地(skin texture)變粗糙、乾燥(dryness)、皺紋產生(wrinkle formation)以及色素改變(pigmentary change)[例如，雀斑(lentigines)、斑點(freckles)、色素過少(hypopigmentation)或色素過多(hyperpigmentation)]等。
依據本發明，該醫藥品的投藥途徑、劑型以及可供使用之藥學上可接受的載劑是如上面所述者。
本發明亦提供一種用於抗皮膚老化的方法，其包括對一需要預防和/或延緩皮膚老化的個體投予以本發明的蓮霧水萃取物的水解產物。較佳地，該方法包括對該個體的皮膚施用一有效量的該蓮霧水萃取物的水解產物，並且歷時一足夠的時間直到皮膚老化的症狀被顯著地改善。
如此處所用的，術語“有效量(effective amount)”意指當本發明的蓮霧水萃取物的水解產物被投予一需要預防和/或延緩皮膚老化的個體時，一足以提供所欲達致之抗皮膚老化的功效並且不會對皮膚產生非所欲的不利副作用的安全用量。
如此處所用的，術語“有效量”與“有效劑量(effective dose)”、“抗老化有效量(anti-aging effective amount)”以及“抗老化有效劑量(anti-aging effective dose)”可被交換地使用。
依據本發明，該蓮霧水萃取物的水解產物的有效量與施用頻率會視下列因素而變化：想要預防和/或延緩老化的皮膚區域之初始病況以及所欲達致之最終的抗皮膚老化效果。一般而言，當依據本發明的蓮霧水萃取物的水解產物被局部地施用於皮膚上時，每次施用的有效量通常是1至10 mg/平方公分的皮膚面積，每天大約1至3次。而當依據本發明的蓮霧水萃取物的水解產物是被口服地投藥時，每次投藥的有效量通常是0.05至5 mg/Kg體重，每天大約1至3次。
特別地，依據本發明的蓮霧水萃取物的水解產物亦被預期可供應用於製備一用來促進皮膚美白、提升皮膚的保濕能力、預防和/或延緩皮膚老化、促進傷口癒合以及抗氧化之化妝品的用途。
依據本發明，該化妝品可進一步包含有一被廣泛地使用於化妝品製造技術之化妝品上可接受的佐劑(cosmetically acceptable adjuvant)。例如，該化妝品上可接受的佐劑可包含有一或多種選自於下列的試劑：溶劑(solvent)、膠凝劑、活性劑、防腐劑(preservative)、抗氧化劑、遮蔽劑(screening agent)、螯合劑、介面活性劑、染色試劑(coloring agent)、增稠劑(thickening agent)、填料(filler)、香料以及氣味吸收劑。有關這些試劑的選用與數量是落在熟習此項技術之人士的專業素養與例行技術範疇內。
依據本發明，該化妝品可利用熟習此技藝者所詳知的技術而被製造成一適合於護膚(skincare)或化妝(makeup)的形式，這包括，但不限於：水性溶液(aqueous solution)、水-醇溶液(aqueous-alcohol solution)或油性溶液(oily solution)、呈水包油型(oil-in-water type)、油包水型(water-in-oil type)或複合型之乳劑、凝膠、軟膏、乳霜、面膜(mask)、貼片、貼布(pack)、擦劑、粉末、氣溶膠、噴霧、乳液、乳漿、糊劑、泡沫、分散液、滴劑、慕斯(mousse)、防曬油(sunblock)、化妝水(tonic water)、粉底(foundation)、眼影(eyeshadow)、卸妝產品(makeup remover products)、肥皂(soap)以及其他身體清潔產品(body cleansing products)等。
在本發明的一個較佳具體例中，該化妝品被製造成一水-醇溶液。
依據本發明，該化妝品亦可與一或多種選自於下列之已知活性的外用劑(external use agents)一起合併使用：美白劑(whitening agents)[諸如維生素A酸(tretinoin)、兒茶素(catechin)、麴酸、熊果苷以及維生素C]、保濕劑、抗發炎劑(anti-inflammatory agents)、殺菌劑(bactericides)、紫外線吸收劑(ultraviolet absorbers)、植物萃取物(plant extracts)[諸如蘆薈萃取物(aloe extract)]、皮膚營養劑(skin nutrients)、麻醉劑(anesthetics)、抗痘劑(anti-acne agent)、止癢劑(antipruritic)、止痛劑(analgesic)、止汗劑(antiperspirant)、抗皮膚炎劑(antidermatitis agents)、抗過角化劑(antihyperkeratolytic agents)、抗乾皮膚劑(anti-dry skin agents)、抗老化劑(antiaging agents)、抗皺劑(antiwrinkle agents)、抗皮脂溢出劑(antiseborrheic agents)、傷口治療劑(wound-healing agents)、皮質類固醇(corticosteroids)以及激素(hormones)。有關這些外用劑的選用與數量是落在熟習此項技術之人士的專業素養與例行技術範疇內。
本發明亦提供一種組成物，其包含有一如上所述的蓮霧水萃取物的水解產物。
依據本發明，該組成物的投藥途徑與劑型或施用形式以及可供使用之載劑或佐劑是如上面所述者。
較佳實施例之詳細說明
本發明將就下面的實施例來做進一步說明，但應瞭解的是，該等實施例僅是供例示說明用，而不應被解釋為本發明的實施上的限制。實施例 實施例 1. 製備蓮霧水萃取物 (water extract ofSyzygium samarangense ) 的鳳梨酶水解產物 (bromelain hydrolysate)
首先，將採集自屏東縣枋寮鄉的蓮霧果實(Syzygium samarangense fruit)(包括果皮、果肉以及種籽)(3-6 g)粉碎，繼而將果實粉碎物與水以一為1：1.5的重量比進行混合並於50℃下加熱歷時1小時，藉此而得到蓮霧水萃取物。接著，將該蓮霧水萃取物與1600 IU/g的鳳梨酶(bromelain)(購自於青旺生技，貨號為1600GD)以一為200：1的重量比進行混合，繼而置於45℃下進行酵素水解反應歷時4小時。之後，將所得到的反應混合物進行離心並收取上澄液，接著依序以孔徑為5、1以及0.5 μm的過濾器(購自於德璽實業，型號分別為PureMax、SCB2000-001以及SP2000-00A)來進行過濾。之後，將所得到的濾液進行冷凍乾燥，藉此而得到一呈凍乾粉末(lyophilized powder)之蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物。
另外，為供下面的比較實驗之用，該蓮霧水萃取物亦被拿來進行如上所述的離心、過濾以及冷凍乾燥，藉此而得到呈凍乾粉末之蓮霧水萃取物。實施例 2. 蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物的高效能液相層析 (high performance liquid chromatography, HPLC) 分析
為瞭解本發明的蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物的主要成分分佈，依據上面實施例1所得到的蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物被溶於二次水中以配製成一具有一濃度為1 mg/mL的待測樣品，繼而將之拿來進行高效能液相層析(HPLC)分析。
本實驗所使用的HPLC分析儀器為HP Agilent 1100系列液相層析系統(HP Agilent 1100 series liquid chromatography system)，而有關HPLC分析的各項操作參數與條件被顯示於下面的表1中。 表1. HPLC分析的操作參數與條件
圖1顯示將依據上面實施例1所製得的蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物拿來進行HPLC分析所得到的洗提圖形(elution profile)。從圖1可見，本發明的蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物在第0至35分鐘的滯留期間出現有4個主要的洗提波峰(分別被標示為波峰a、b、c以及d)。實施例 3. 蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物在抗氧化效力 (antioxidation efficacy) 上的效用評估
在本實施例中，為了瞭解本發明的蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物是否具有抗氧化效力，申請人將之拿來進行亞鐵離子螯合能力(ferrous ion chelating ability)之分析。另外，為供比較，申請人參照CN 102228207 A當中所述方法來製備一種蓮霧水萃取物(water extract ofSyzygium samarangense )的動物性蛋白酶水解產物(animal protease hydrolysate)並將之拿來進行相同的實驗。 實驗材料： 1. 蓮霧水萃取物的動物性蛋白酶水解產物的製備：
有關蓮霧水萃取物的動物性蛋白酶水解產物的製備是參照CN 102228207 A當中所述方法來進行，並稍作修改。簡言之，將蓮霧果實(20 g)粉碎，繼而將果實粉碎物與水以一為1：1.5的重量比進行混合並於95℃下加熱歷時15分鐘，藉此而得到蓮霧水萃取物。在冷卻至50℃後，利用4.5%檸檬酸(citric acid)將所得到的蓮霧水萃取物的pH值調整至3.68，繼而將該蓮霧水萃取物與2500 IU/mg的胃蛋白酶(購自於Sigma，貨號為P7012)以一為50000：1的重量比進行混合，繼而置於50℃下進行酵素水解反應歷時2小時。接而利用4 g/mL氫氧化鉀將所得到的胃蛋白酶水解產物的pH值調整至7.65並於95℃下加熱歷時15分鐘，繼而將該胃蛋白酶水解產物與2000 IU/mg的胰蛋白酶(購自於Himedia，貨號為RM618)以一為27000：1的重量比進行混合，繼而置於50℃下進行酵素水解反應歷時3小時，然後利用4.5%檸檬酸將所得到的胰蛋白酶水解產物的pH值調整至6.28。然後進行離心並收取上澄液，接著依序以孔徑為5、1以及0.5 μm的過濾器來進行過濾。之後，將所得到的濾液進行冷凍乾燥，藉此而得到一呈凍乾粉末之蓮霧水萃取物的動物性蛋白酶水解產物。 實驗方法：
首先，將適量之在上面實施例1中所得到的蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物加入至二次水中，而得到具有一蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物濃度為0.35% (w/w)的待測樣品(亦即鳳梨酶水解產物組)。接著，對鳳梨酶水解產物組的待測樣品取1 mL，然後予以加入3.7 mL乙醇以及0.1 mL的2 mM FeCl2 ．4H2 O溶液，繼而予以混合歷時30秒。之後，予以加入0.2 mL的5 mM菲洛嗪(ferrozine)並混合均勻，繼而置於室溫下進行避光作用歷時10分鐘，然後於562 nm的波長下以一分光光度計(型號為Colibri，廠牌為Titertek-Berthold)來量測吸光值(OD562 )。另外，1 mL的95%乙醇被用來作為對照組的待測樣品，並與鳳梨酶水解產物組的待測樣品進行相同的實驗。
有關蓮霧水萃取物的動物性蛋白酶水解產物的亞鐵離子的螯合率(亦即動物性蛋白酶水解產物組)大體上是參照上面針對蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物所描述的操作程序來進行分析，不同之處在於：以依據上面“實驗材料”的第1項所得到之經冷凍乾燥處理的蓮霧水萃取物的動物性蛋白酶水解產物來代替蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物。
亞鐵離子的螯合率(%)是藉由將所測得的吸光值(OD562 )代入下列公式(I)而被計算出：A ＝ [1-(B/C)] × 100 (I) 其中：A＝亞鐵離子的螯合率(%) B＝各組所測得的OD562 吸光值 C＝對照組所測得的OD562 吸光值
各組實驗被重複進行3次。所得到的實驗數據是以平均值±標準偏差(Standard Deviation, S.D.)來表示。 結果：
圖2顯示各組的亞鐵離子的螯合率。由圖2可見，鳳梨酶水解產物組的亞鐵離子的螯合率是明顯地高於對照組以及動物性蛋白酶水解產物組所具者。這個實驗結果顯示：與蓮霧水萃取物的動物性蛋白酶水解產物相較之下，本發明的蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物具有較佳的亞鐵離子螯合能力。申請人據此而認為：本發明的蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物能夠展現良好的抗氧化效用。實施例 4. 蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物在抑制黑色素生成 (melanogenesis) 上的效用評估
在本實施例中，申請人藉由測定酪胺酸酶活性(tyrosinase activity)來評估本發明的蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物在抑制黑色素生成上的效用。此外，為供比對，在上面實施例1中所得到的蓮霧水萃取物被拿來進行相同的實驗。 實驗方法：
首先，將500 mL的0.1M Na2 HPO4 溶液與500 mL的KH2 PO4 溶液混合，繼而利用NaOH將所得到的磷酸鹽溶液的pH值調整至6.8。接著，將適量的酪胺酸(tyrosine)(Alfa Aesar, Lot: 10174330)配於該磷酸鹽溶液中，而得到2 mM的酪胺酸溶液備用。
之後，將適量之在上面實施例1中所得到的蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物以及蓮霧水萃取物分別加入至該磷酸鹽溶液中，而得到具有一蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物濃度為10 mg/mL的待測樣品(亦即鳳梨酶水解產物組)，以及具有一蓮霧水萃取物濃度為10 mg/mL的待測樣品(亦即水萃取物組)。接著，對各組的待測樣品取21.6 μL，然後予以加入250 μL的酪胺酸酶(Sigma, Lot: SLBJ5647V)(115.42 U/mL，配於該磷酸鹽溶液中)以及540 μL的酪胺酸溶液。在充分混合之後，將所形成的混合物置於37℃下進行避光作用歷時30分鐘，然後於475 nm的波長下以分光光度計來量測吸光值(OD475 )。另外，290 μL的磷酸鹽溶液被用來作為對照組待測樣品，並與各組的待測樣品進行相同的實驗。
酪胺酸酶活性的抑制率(%)是藉由將所測得的吸光值(OD475 )代入下列公式(II)而被計算出：D ＝ [1-(E/F)] × 100 (II) 其中：D＝酪胺酸酶活性的抑制率(%) E＝各組所測得的OD475 吸光值 F＝對照組所測得的OD475 吸光值
各組實驗被重複進行2次。所得到的實驗數據是以平均值±標準偏差來表示。所有的數據是藉由史徒登氏t- 試驗試驗來作分析，俾以評估各組之間的差異性。若所得到的統計分析結果是p ＜0.05，表示有統計學顯著性。 結果：
圖3顯示各組的酪胺酸酶活性的抑制率。由圖3可見，鳳梨酶水解產物組的酪胺酸酶活性的抑制率是明顯地高於對照組以及水萃取物組所具者。這個實驗結果顯示：與蓮霧水萃取物相較之下，本發明的蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物具有較佳的酪胺酸酶抑制能力。申請人據此而認為：本發明的蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物可藉由抑制酪胺酸酶活性來抑制黑色素生成，進而達到皮膚美白(skin whitening)的效用。實施例 5. 蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物在促進傷口癒合 (wound healing) 上的效用評估
在本實施例中，申請人利用傷口癒合的細胞移動分析(wound-healing cell migration assay)來評估本發明的蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物在促進傷口癒合上的效用。此外，為供比對，在上面實施例1中所得到的蓮霧水萃取物以及在上面實施例3中所得到的蓮霧水萃取物的動物性蛋白酶水解產物分別被拿來進行相同的實驗。 實驗材料： 1. 人類皮膚纖維母細胞細胞株 (human skin fibroblast cell line) Detroit 551 的來源與培養：
在本實施例中所使用的人類皮膚纖維母細胞細胞株Detroit 551是購自於台灣的食品工業發展研究所(Food Industry Research and Development Institute, FIRDI)的生物資源保存及研究中心(Biosource Collection and Research Center, BCRC)。
Detroit 551細胞被培養於含有最低基本培養基(minimum essential medium, MEM)(Sigma, M2279)[添加有10%胎牛血清(fetal bovine serum, FBS)、10%盤尼西林-鏈黴素(penicillin-streptomycin)(Sigma, 15140122)]的培養皿(petri dish)中，接著在培養條件被設定為37℃與5% CO2 的培養箱中進行培養。之後，大約每隔2天更換新鮮的培養基。當細胞密度達到約80-90%匯聚(confluence)時，移除培養基並以磷酸鹽緩衝生理鹽水(phosphate buffered saline, PBS)來洗滌細胞共計2次，接著加入胰蛋白酶-EDTA (trypsin-EDTA)以使細胞自培養皿的底部脫離。之後，加入新鮮的培養基來中和胰蛋白酶的活性並以量吸管(pipette)反覆地吸沖培養基以充分打散細胞，然後將所形成的細胞懸浮液分配到新的培養皿中，並在培養條件被設定為37℃與5% CO2 的培養箱中進行培養。 實驗方法： A. 蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物與蓮霧水萃取物在促進傷口癒合上的效用比較：
首先，將依據上面“實驗材料”的第1項「人類皮膚纖維母細胞細胞株Detroit 551的來源與培養」來進行繼代培養的Detroit 551細胞分成3組，其中包括1個鳳梨酶水解產物組、1個水萃取物組以及1個對照組。將各組細胞分別以一為2×105 細胞/井的數量培養於含有500 µL的MEM (添加有10%胎牛血清)的24-井培養盤中，並在培養箱(37℃、5% CO2 )中進行培養歷時24小時。
接著，將各組的細胞培養物分別更換以新鮮的培養基，繼而使用200 μL的塑膠量吸管尖管(plastic pipette tip)沿著各井直徑來刮除Detroit 551細胞，以沿著該培養盤的直徑產生一無細胞貼附且寬度約為500 μm的傷口區域(wound area)，接著以PBS來洗滌各井共計2次。在更換以新鮮的MEM (添加有5%胎牛血清)之後，將適量之在上面實施例1中所得到的蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物以及蓮霧水萃取物分別添加至鳳梨酶水解產物組以及水萃取物組中，而使得鳳梨酶水解產物組具有一最終濃度為0.03% (w/w)的蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物，以及使得水萃取物組具有一最終濃度為0.03% (w/w)的蓮霧水萃取物。至於對照組則不作任何處理。
之後，將各組細胞培養物在培養箱(37℃，5% CO2 )中進行培養歷時12小時。在進行培養之前以及在開始培養之後的第12小時，使用一倒立顯微鏡(型號為TE300，廠牌為Nikon)並在一為40倍的放大倍數下來對各組的傷口區域進行觀察，並且使用一數位相機(型號為F90，廠牌為Nikon)來進行拍照，繼而藉由使用軟體Image J來對所拍得的照片進行分析而計算出該傷口區域的面積。傷口癒合百分比(wound healing percentage)(%)是藉由將所計算出的傷口區域的面積代入下列公式(III)而被計算出：G ＝ [1-(H/I)] × 100 (III) 其中：G＝傷口癒合百分比(%) H＝在開始培養之後的第12小時所測得的傷口區域的面積 I＝在進行培養之前所測得的傷口區域的面積
各組實驗被重複進行2次。所得到的實驗數據是以平均值±標準偏差來表示。所有的數據是藉由史徒登氏t- 試驗試驗來作分析，俾以評估各組之間的差異性。若所得到的統計分析結果是p ＜0.05，表示有統計學顯著性。B. 蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物與蓮霧水萃取物的動物性蛋白酶水解產物在促進傷口癒合上的效用比較：
首先，在24-井培養盤的各井中沿著直徑放置寬度為500 μm的細胞阻隔器(SPLScarÔ Block 201902)(購自於創世紀生技公司)。接著，依據上面“實驗材料”的第1項「人類皮膚纖維母細胞細胞株Detroit 551的來源與培養」來進行繼代培養的Detroit 551細胞分成3組，其中包括1個鳳梨酶水解產物組、1個動物性蛋白酶水解產物組以及1個對照組。將各組細胞分別以一為5×104 細胞/井的數量培養於含有500 µL的MEM (添加有10%胎牛血清)的該24-井培養盤中，並在培養箱(37℃、5% CO2 )中進行培養歷時24小時。
接著，將該細胞阻隔器移除，以得到一無細胞貼附且寬度約為500 μm的傷口區域，繼而以PBS來洗滌各井共計2次。在更換以新鮮的MEM (添加有5%胎牛血清)之後，將適量之在上面實施例1中所得到的蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物以及在上面實施例3中所得到的蓮霧水萃取物的動物性蛋白酶水解產物分別添加至鳳梨酶水解產物組以及動物性蛋白酶水解產物組中，而使得鳳梨酶水解產物組具有一最終濃度為0.025% (w/w)的蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物，以及使得動物性蛋白酶水解產物組具有一最終濃度為0.025% (w/w)的蓮霧水萃取物的動物性蛋白酶水解產物。至於對照組則不作任何處理。
之後，將各組細胞培養物在培養箱(37℃，5% CO2 )中進行培養歷時12小時。在進行培養之前以及在開始培養之後的第12小時，使用一倒立顯微鏡(型號為IX73，廠牌為Olympus)並在一為40倍的放大倍數下來對各組的傷口區域進行觀察，並且使用一數位相機(型號為DP80，廠牌為Olympus)來進行拍照，繼而藉由使用軟體Image J來對所拍得的照片進行分析而計算出該傷口區域的面積。有關傷口癒合百分比(%)是藉由將所計算出的傷口區域的面積代入上面公式(III)而被計算出。
各組實驗被重複進行3次。所得到的實驗數據是以平均值±標準偏差來表示。所有的數據是藉由史徒登氏t- 試驗試驗來作分析，俾以評估各組之間的差異性。若所得到的統計分析結果是p ＜0.05，表示有統計學顯著性。 結果：
圖4顯示本發明的蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物與蓮霧水萃取物的傷口癒合百分比。由圖4可見，水萃取物組的傷口癒合百分比與對照組相較之下沒有明顯的差異存在，而鳳梨酶水解產物組的傷口癒合百分比是顯著地高於對照組以及水萃取物組所具者。
圖5顯示本發明的蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物與蓮霧水萃取物的動物性蛋白酶水解產物的傷口癒合百分比。由圖5可見，動物性蛋白酶水解產物組的傷口癒合百分比與對照組相較之下沒有明顯的差異存在，而鳳梨酶水解產物組的傷口癒合百分比是顯著地高於對照組以及動物性蛋白酶水解產物組所具者。
這些實驗結果顯示：本發明的蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物能夠有效地促進纖維母細胞-媒介的傷口閉合(fibroblast-mediated wound closure)。申請人據此而認為：本發明的蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物可藉由促進纖維母細胞-媒介的傷口閉合來達到促進傷口癒合的效用。實施例 6. 蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物在 提升皮膚的 保濕能力 (moisture-retaining capacity) 上的效用評估 實驗材料： 1. 製備精華液：
為評估本發明的蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物對於人類皮膚的保濕效用以及安全性，申請人將上面實施例1中所得到的蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物配製成可施用於人類的皮膚上的精華液(下面簡稱為鳳梨酶水解產物精華液)。另外，為供比較，一含有在上面實施例1中所得到的蓮霧水萃取物的精華液(下面簡稱為水萃取物精華液)與一含有在上面實施例3中所得到的蓮霧水萃取物的動物性蛋白酶水解產物的精華液(下面簡稱為動物性蛋白酶水解產物精華液)以及一不含有蓮霧水萃取物或其鳳梨酶水解產物以及動物性蛋白酶水解產物的精華液(下面簡稱為對照精華液)被製備。有關這4種精華液的組成與配方被顯示在下面的表2中，其中，所使用的丁二醇(butylene glycol)以及羥乙基纖維素(hydroxyethyl cellulose)皆是購自於第一化工(First Chemical Co., Ltd.)，而Dermosoft OMP是購自於嘉誠化學(HonorChem Co., Ltd)。 表2. 精華液的配方
有關鳳梨酶水解產物精華液、水萃取物精華液以及動物性蛋白酶水解產物精華液的製備是依照下面步驟來進行：將丁二醇與羥乙基纖維素添加至去離子水中，並於75℃下進行攪拌以充分溶解。在冷卻至40至45℃後，依序加入蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物或蓮霧水萃取物或蓮霧水萃取物的動物性蛋白酶水解產物以及Dermosoft OMP並進行攪拌。之後，利用NaOH將所得到的混合物的pH值調整至6至7，藉此而得到鳳梨酶水解產物精華液、水萃取物精華液以及動物性蛋白酶水解產物精華液。另外，對照精華液大體上是依照上述步驟而被製得，不同之處在於：沒有添加蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物或蓮霧水萃取物或蓮霧水萃取物的動物性蛋白酶水解產物。 實驗方法： A、 蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物與蓮霧水萃取物在 提升皮膚的 保濕能力上的效用比較 ：
參與本試驗的實驗對象是來自於允頂企業有限公司(Yeun Diing Enterprise Co, Ltd.)以及頂宏生物科技股份有限公司(M.H. Biotechnology Co, Ltd.)的員工，在以下面表3中所示之排除標準(exclusion criteria)予以篩選後，本試驗共計有10位年齡介於25歲至40歲的受試者參加，其中包括4位男性與6位女性。 表3. 用以篩選實驗個體的排除標準
首先，在各個受試者的右臂皮膚上區分出3個分別供塗抹上面“實驗材料”的第1項「製備精華液」所配製出之鳳梨酶水解產物精華液、水萃取物精華液以及對照精華液的施用區(下稱鳳梨酶水解產物區、水萃取物區以及對照區)，每區寬度大約為4指幅(fingerbreadth)，每次施用0.5 mL的精華液，每天2次，試驗期間總共歷時28天。
在施用精華液之前(亦即第0天)以及在施用精華液之後的第7、14、21以及28天之時，藉由使用一電容計(capacitance meter)(Corneometer® CM 285, Courage & Khazaka)來對各區皮膚進行角質層含水量(water content of stratum corneum)的測定。
角質層含水量的增加百分比(%)是藉由將所測得的角質層含水量代入下列公式(IV)而被計算出：J ＝ (L-K)/K × 100 (IV) 其中：J＝角質層含水量的增加百分比(%) K＝在第0天之時所測得的角質層含水量 L＝在施用精華液之後的第7、14、21以及28天之時所測得的角質層含水量
所得到的實驗數據是以平均值±標準偏差來表示。所有的數據是藉由史徒登氏t- 試驗試驗來作分析，俾以評估各組之間的差異性。若所得到的統計分析結果是p ＜0.05，表示有統計學顯著性。
另外，有關安全性的評估是依照下面步驟來進行：在施用精華液之前(亦即第0天)，將少量的精華液塗抹於各個受試者的上臂內側的皮膚作為測試，接著詢問並觀察受試者是否有出現任何皮膚刺激性反應(skin irritation reaction)[包括搔癢(itching)、刺激(irritation)以及紅斑(erythema)]。在施用精華液之後的第7、14、21以及28天之時，詢問並觀察受試者的各個施用區的皮膚是否有出現任何皮膚刺激性反應。B、 蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物與蓮霧水萃取物的動物性蛋白酶水解產物在 提升皮膚的 保濕能力上的效用比較 ：
參與本試驗的實驗對象是來自於頂宏生物科技股份有限公司的員工，在以上面表3中所示之排除標準予以篩選後，本試驗共計有9位年齡介於25歲至40歲的受試者參加，其中包括6位男性與3位女性。
有關精華液的施用與安全性的評估大體上是參照上面第A項當中所述的步驟來進行，不同之處在於：在各個受試者的右臂皮膚上區分出3個分別供塗抹上面“實驗材料”的第1項「製備精華液」所配製出之鳳梨酶水解產物精華液、動物性蛋白酶水解產物精華液以及對照精華液的施用區(下稱鳳梨酶水解產物區、動物性蛋白酶水解產物區以及對照區)。
而有關各區皮膚的角質層含水量是在施用精華液之前(亦即第0天)以及在施用精華液之後的第14天之時，藉由使用一電容計而被測定，繼而將所測得的角質層含水量代入上面公式(IV)來計算出角質層含水量的增加百分比(%)。 結果： A、 角質層含水量的測定 ：
圖6顯示各區皮膚在施用鳳梨酶水解產物精華液、水萃取物精華液以及對照精華液後於不同的時間點所測得的角質層含水量的增加百分比。從圖6可見，與對照區以及水萃取物區相較之下，鳳梨酶水解產物區所測得的角質層含水量皆有顯著的增加，並且會隨著時間而更趨於明顯。相反地，水萃取物區所測得的角質層含水量會隨著時間而呈現緩慢增加的情形。
圖7顯示各區皮膚在施用鳳梨酶水解產物精華液、動物性蛋白酶水解產物精華液以及對照精華液之後的第14天之時所測得的角質層含水量的增加百分比。從圖7可見，鳳梨酶水解產物區所測得的角質層含水量是高於對照區以及動物性蛋白酶水解產物區。
這些實驗結果顯示：本發明的蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物能夠更有效地提升皮膚的保濕能力(moisture-retaining capacity)。B、 安全性的評估 ：
在整個試驗的過程中，所有的受試者皆無產生任何皮膚刺激性反應(數據未顯示)。
綜合以上的實驗結果可知：依據本發明的蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物具有抗氧化能力，並且能夠抑制黑色素生成、提升皮膚的保濕能力以及促進傷口癒合。因此，申請人認為：依據本發明的蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物具有發展成為護膚產品的高潛力。
於本說明書中被引述之所有專利和文獻以其整體被併入本案作為參考資料。若有所衝突時，本案詳細說明(包含界定在內)將佔上風。
雖然本發明已參考上述特定的具體例被描述，明顯地在不背離本發明之範圍和精神之下可作出很多的修改和變化。因此意欲的是，本發明僅受如隨文檢附之申請專利範圍所示者之限制。
本發明之其他的特徵及功效，將於參照圖式的實施方式中清楚地呈現，其中： 圖1顯示將依據本發明的實施例1所製得的蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物拿來進行HPLC所得到的洗提圖形，其中波峰a至d表示在第0至35分鐘的滯留期間所出現的4個主要成份； 圖2顯示本發明的蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物與蓮霧水萃取物的動物性蛋白酶水解產物在亞鐵離子螯合能力上的比較； 圖3顯示本發明的蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物與蓮霧水萃取物在抑制酪胺酸酶活性上的效用比較，其中“###”表示：當與對照組作比較，p ＜0.001；以及“***”表示：當與水萃取物組作比較，p ＜0.001； 圖4顯示本發明的蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物與蓮霧水萃取物在促進傷口癒合上的效用比較，其中“##”表示：當與對照組作比較，p ＜0.01；以及“**”表示：當與水萃取物組作比較，p ＜0.01； 圖5顯示本發明的蓮霧水萃取物的鳳梨酶水解產物與蓮霧水萃取物的動物性蛋白酶水解產物在促進傷口癒合上的效用比較，其中“###”表示：當與對照組作比較，p ＜0.001；以及“***”表示：當與動物性蛋白酶水解產物組比較，p ＜0.001； 圖6顯示鳳梨酶水解產物精華液、水萃取物精華液以及對照精華液在提升角質層含水量上的效用比較，其中“###”表示：當與對照區作比較，p ＜0.001；以及“**”與“***”分別表示：當與水萃取物區作比較，p ＜0.01與p ＜0.001；以及 圖7顯示鳳梨酶水解產物精華液、動物性蛋白酶水解產物精華液以及對照精華液在提升角質層含水量上的效用比較。

Claims (17)

  1. 一種蓮霧水萃取物的水解產物，它是藉由一包含下列步驟之方法而被製得：以水來萃取蓮霧果實而得到一水萃取物；以及令該水萃取物進行一使用一鳳梨酶的水解處理，藉此而得到該蓮霧水萃取物的水解產物。
  2. 如請求項1的蓮霧水萃取物的水解產物，其中該蓮霧果實與水的重量比是介於1：0.5至1：5之間。
  3. 如請求項1的蓮霧水萃取物的水解產物，其中該水萃取物與該鳳梨酶的重量比是介於150：1至600：1之間。
  4. 如請求項1的蓮霧水萃取物的水解產物，其中在該方法中，該水萃取物在進行水解處理後可進一步進行一固液分離處理，俾以移除固體部分。
  5. 一種組成物，其包含有一如請求項1至4中任一項的蓮霧水萃取物的水解產物。
  6. 如請求項5的組成物，其進一步包含有一藥學上可接受的載劑或一化妝品上可接受的佐劑。
  7. 一種如請求項1至4中任一項的蓮霧水萃取物的水解產物供應用於製備一用來美白皮膚之醫藥品的用途。
  8. 一種如請求項1至4中任一項的蓮霧水萃取物的水解產物供應用於製備一用來提升皮膚的保濕能力之醫藥品的用途。
  9. 一種如請求項1至4中任一項的蓮霧水萃取物的水解產物供應用於製備一用來促進傷口癒合之醫藥品的用途。
  10. 一種如請求項1至4中任一項的蓮霧水萃取物的水解產物供應用於製備一用來抗氧化之醫藥品的用途。
  11. 如請求項7至10中任一項的用途，其中該醫藥品是呈一供局部投藥的劑型或口服投藥的劑型。
  12. 一種如請求項1至4中任一項的蓮霧水萃取物的水解產物作為化妝品之用途。
  13. 如請求項12的用途，其中該化妝品是呈一供局部施用的形式。
  14. 一種用以製備一蓮霧水萃取物的水解產物的方法，其包含下列步驟：以水來萃取蓮霧果實而得到一水萃取物；以及令該水萃取物進行一使用一鳳梨酶的水解處理，藉此而得到該蓮霧水萃取物的水解產物。
  15. 如請求項14的方法，其中該蓮霧果實與水的重量比是介於1：0.5至1：5之間。
  16. 如請求項14的方法，其中該水萃取物與該鳳梨酶的重量比是介於150：1至600：1之間。
  17. 如請求項14的方法，其中該水萃取物在進行水解處理後可進一步進行一固液分離處理，俾以移除固體部分。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110946200A (zh) * 2019-12-26 2020-04-03 广州市志泰生物科技有限公司 一种咖啡樱桃保湿美肌饮料及其制备方法
CN112545938A (zh) * 2020-12-15 2021-03-26 上海应用技术大学 一种苹果花提取物的制备方法和应用

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102228207A (zh) * 2011-06-23 2011-11-02 韩金光 莲雾的加工方法及莲雾提取物

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TWI465258B (zh) 2011-09-29 2014-12-21 Univ Chia Nan Pharm & Sciency 具多效性之蓮霧花乙醇萃取物及其製造方法
CN103371401A (zh) * 2012-04-14 2013-10-30 于杰 莲雾清汁饮料的加工工艺
CN103349324A (zh) * 2013-07-12 2013-10-16 潘剑峰 一种莲雾果汁饮料及其生产方法
CN107970278B (zh) * 2016-10-21 2021-04-02 顶宏生物科技股份有限公司 莲雾水萃取物的水解产物及其制备方法与用途

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102228207A (zh) * 2011-06-23 2011-11-02 韩金光 莲雾的加工方法及莲雾提取物

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
邓博一 等，海南百香、莲雾、青枣营养成分的比较分析，食品工业科技2013年第12期 *
邓博一 等，海南百香、莲雾、青枣营养成分的比较分析，食品工业科技2013年第12期。
黄亚东、李燕梅，生物活性多肽在医学美容中的应用，第十届东南亚地区医学美容学术大会论文汇编 (2006) *
黄亚东、李燕梅，生物活性多肽在医学美容中的应用，第十届东南亚地区医学美容学术大会论文汇编 (2006)。

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