CN107970278B - 莲雾水萃取物的水解产物及其制备方法与用途 - Google Patents

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Abstract

一种莲雾水萃取物的水解产物及其制备方法，该制备方法包含以下步骤：以水来萃取莲雾果实而得到一水萃取物；以及令该水萃取物进行一使用一菠萝酶的水解处理，借此而得到该莲雾水萃取物的水解产物。该莲雾水萃取物的水解产物可被用于促进皮肤美白、提升皮肤的保湿能力、促进伤口愈合以及抗氧化。

Description

莲雾水萃取物的水解产物及其制备方法与用途
技术领域
本发明是有关于一种莲雾水萃取物的水解产物(hydrolysate of water extractof Syzygium samarangense)及其制备方法。本发明也有关于使用该莲雾水萃取物的水解产物来促进皮肤美白、提升皮肤的保湿能力、促进伤口愈合以及抗氧化。
背景技术
皮肤是保护人类个体的最大屏障，它具有对抗水分散失、病原菌以及各种环境损害之功能。暴露于大量的紫外线(ultraviolet,UV)、游离辐射(ionizing radiation)、药物或异生物质(xenobiotics)会促使皮肤生成活性氧族(reactive oxygen species,ROS)以及自由基(free radicals)。当所累积的活性氧族以及自由基的数量超过细胞或组织本身的抗氧化能力时，便会形成氧化性压力(oxidative stress)。接着，活性氧族以及自由基会与细胞内的组合物(包括DNA、蛋白质以及脂质等)相反应，进而对皮肤产生非所欲的影响。已有报导指出，活性氧族以及自由基不只在黑色素生成(melanogenesis)的过程中扮演重要的角色，并且还会造成伤口愈合的延迟(delay of wound healing)(Kim Y.J.andYokozawa T.(2009),Biol.Pharm.Bull.,32:1155-1159；Kurahashi T.and Fujii J.(2009),J.Dev.Biol.,3:57-70)。
黑色素生成意指酪胺酸(tyrosine)在黑色素细胞(melanocytes)内经由酪胺酸酶(tyrosinase)的催化以及一系列的氧化还原反应而被转化为黑色素(melanin)的过程，它主要是由紫外线[特别是紫外线-B(UV-B)]的照射所导致。当皮肤受到紫外线的照射后，在角质细胞(keratinocyte)中所生成的活性氧族以及自由基会诱发肿瘤蛋白质53(tumorprotein 53,p53)的表现，进而促使前脑啡黑细胞促素皮促素基因(proopiomelanocortingene,POMC gene)的表现并且释放出POMC-衍生肽(POMC-derived peptides)[诸如α-促黑素细胞素(α-melanocyte stimulating hormone,α-MSH)以及促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)]，继而使得黑色素细胞内的酪胺酸酶基因被表现，最后导致大量的黑色素累积于皮肤上。
当皮肤受到损伤[诸如，烫伤(scald)、创伤(trauma)、外科手术(surgery)以及挫伤(contusion)等]而产生伤口(wound)时，在伤口处会产生发炎反应(inflammatoryresponse)，大量的活性氧族以及自由基会被释放，以协助免疫细胞对抗病原菌。然而，过多的活性氧族以及自由基会对伤口周围的组织造成伤害。在伤口愈合(wound healing)的过程中，纤维母细胞(fibroblast)会聚集至伤口处来进行增生并且释放生长因子(growthfactor)，进而导致血管生成(angiogenesis)、上皮形成(epithelialization)以及胶原蛋白重塑(collagen remolding)等。然而，过多的活性氧族以及自由基不只会抑制血管生成，并且会使涉及信号传递路径(signaling pathway)的酵素失活，进而阻碍伤口愈合。
近年来，人类对于皮肤美白(skin whitening)、保湿(moisturizing)、促进伤口愈合以及抗氧化的需求与日俱增，特别地，使用天然成分不会对皮肤产生非所欲的不利副作用，因而已成为现今医学美容市场的趋势。因此，医药界以及化妆品工业的研究人员尝试从传统中药(traditional Chinese medicines,TCM)或植物中来寻找安全并且具有美白、保湿、促进伤口愈合以及抗氧化之效用的活性组分(active components)以供广大的市场所需。
莲雾(拉丁学名：Syzygium samarangense；英文俗名：wax apple；汉语拼音：lianwu；中文别名：天桃)是桃金娘科(Myrtaceae)赤楠属(Syzygium)的多年生常绿乔木；单叶对生，外观呈椭圆形；花腋生，花冠为淡黄色；浆果呈倒圆锥状。产区分布于中国台湾、印度尼西亚、菲律宾以及马来西亚等。目前中国台湾较为常见的莲雾品种包括深红色种、淡红色种、黑珍珠、黑金刚以及黑钻石等。莲雾的主要利用部位为果实，在中国民俗医学上，莲雾被用于润肺、止咳、除痰、凉血以及收敛等。此外，莲雾还被认为具有解热、利尿以及宁心安神等功效。
目前已有研究是有关于莲雾萃取物在药学领域上的应用。例如，在辅仁大学食品营养学系的罗佩文所著硕士论文[名称：“中国台湾数种特有水果抗氧化活性及清除自由基能力之评估(Evaluation of the antioxidative and free radical-scavengingactivity of several Taiwan unique fruits)”]中，罗佩文将14种水果[也就是橙子、桶柑、柚子、白柚、金桔、草莓、火龙果、莲雾、柿子、芒果、木瓜、枣子、杨桃以及番石榴]的果实进行冷冻干燥并研磨成粉末，接着各取10g并分别以100mL的甲醇进行萃取历时6小时，继而以滤纸予以过滤，接而将所得到的滤液进行浓缩干燥，借此而分别得到该14种水果的甲醇萃取物。罗佩文将该14种水果的甲醇萃取物拿来进行抗氧化效力(antioxidationefficacy)的测试，而实验结果发现，该14种水果的甲醇萃取物分别在不同的测试中展现程度不等的活性。特别地，在α,α-二苯-β-苦味基肼基(DPPH)自由基清除能力[α,α-diphenyl-β-picryhydrazyl(DPPH)radical scavenging ability]的测试中，莲雾果实(包括果皮以及果肉)的甲醇萃取物被发现具有最差的DPPH自由基清除能力。而在超氧阴离子生成(superoxide anion generation)的抑制能力测试中，该莲雾果实的甲醇萃取物被发现不只无法抑制超氧阴离子生成，还会促进超氧阴离子生成。
在嘉南药理科技大学化妆品科技研究所的陈宜贞所著硕士论文[名称：“莲雾花萃取液于抗氧化之应用(Application of extracts from wax apple flowers onantioxidantion)”]中，陈宜贞将50g的莲雾花的干燥粉末分别以500mL的80％甲醇以及500mL的水进行萃取历时1小时，继而以滤纸予以过滤，接而将所得到的滤液进行浓缩以及冷冻干燥，借此而分别得到莲雾花的一甲醇萃取物以及一水萃取物。陈宜贞将该2种萃取物拿来进行抗氧化效力以及酪胺酸酶抑制能力的测试。在大部分的抗氧化效力[包括超氧阴离子清除能力(superoxide anion scavenging ability)、脂质过氧化抑制能力(lipidperoxidation inhibition activity)以及亚铁离子螯合能力(ferrous ion chelatingability)]的测试中，该水萃取物的抗氧化效用被发现是优于该甲醇萃取物所具者。然而，该甲醇萃取物的酪胺酸酶抑制能力被发现是显著地优于该水萃取物所具者。
TW I465258揭示一种具皮肤美白暨抗老化性之莲雾花乙醇萃取物及其制造方法，该制造方法主要包括将莲雾花干燥粉末以95％乙醇进行萃取，继而予以过滤，接而将所得到的滤液进行浓缩，借此而得到该莲雾花乙醇萃取物。该莲雾花乙醇萃取物经由实验而被证实具有抗氧化、抑制酪胺酸酶以及促进胶原蛋白生成的效用。
虽然已有上述的文献报导，本领域的相关研究人员仍致力于从莲雾中开发出具有更佳生物活性的组分。在先前研究中，申请人发现莲雾果实的水萃取物具有微弱的抑制酪胺酸酶活性、提升皮肤的保湿能力以及促进伤口愈合的效用(未发表的数据)。经进一步研究，申请人意外地发现，当使用菠萝酶(bromelain)来对莲雾果实的水萃取物进行水解处理，其在抑制酪胺酸酶活性、提升皮肤的保湿能力以及促进伤口愈合上的效用会被显著地提升。因此，莲雾水萃取物的水解产物被预期可供作为一种护肤产品或医药品。
发明内容
于是，在第一个方面，本发明提供一种莲雾水萃取物的水解产物，它是通过一包含下列步骤之方法而被制得：
以水来萃取莲雾果实而得到一水萃取物；以及
令该水萃取物进行一使用一菠萝酶的水解处理，借此而得到该莲雾水萃取物的水解产物。
在第二个方面，本发明提供一种用以制备一莲雾水萃取物的水解产物的方法，其包含下列步骤：
以水来萃取莲雾果实而得到一水萃取物；以及
令该水萃取物进行一使用一菠萝酶的水解处理，借此而得到该莲雾水萃取物的水解产物。
在第三个方面，本发明提供一种组合物，其包含有一如上所述的莲雾水萃取物的水解产物。
在第四个方面，本发明提供一如上所述的莲雾水萃取物的水解产物供应用于制备一用来美白皮肤之医药品或化妆品的用途。
在第五个方面，本发明提供一种用于美白皮肤的方法，其包括对一需要促进皮肤美白的个体投予(administering)一如上所述的莲雾水萃取物的水解产物。
在第六个方面，本发明提供一如上所述的莲雾水萃取物的水解产物供应用于制备一用来提升皮肤的保湿能力之医药品或化妆品的用途。
在第七个方面，本发明提供一种用于提升皮肤的保湿能力的方法，其包括对一需要提升皮肤的保湿能力的个体投予一如上所述的莲雾水萃取物的水解产物。
在第八个方面，本发明提供一如上所述的莲雾水萃取物的水解产物供应用于制备一用来促进伤口愈合之医药品或化妆品的用途。
在第九个方面，本发明提供一种用于促进伤口愈合的方法，其包括对一具有一伤口的个体投予一如上所述的莲雾水萃取物的水解产物。
在第十个方面，本发明提供一如上所述的莲雾水萃取物的水解产物供应用于制备一用来抗氧化之医药品或化妆品的用途。
在第十一个方面，本发明提供一种用于抗氧化的方法，其包括对一具有氧化性压力的个体投予一如上所述的莲雾水萃取物的水解产物。
附图说明
下面结合附图及实施例来对本发明进行详细说明，所以本发明在上述以及其他目的与特征，可借由参照下文的描述、随文检附的权利要求书和伴随的图式而变得更为明显，附图中：
图1显示将依据本发明的实施例1所制得的莲雾水萃取物的菠萝酶水解产物拿来进行HPLC所得到的洗提图形，其中波峰a至d表示在第0至35分钟的滞留期间所出现的4个主要成份；
图2显示本发明的莲雾水萃取物的菠萝酶水解产物的亚铁离子螯合能力之分析结果，其中“###”表示：当与对照组作比较，p＜0.001；
图3显示本发明的莲雾水萃取物的菠萝酶水解产物与莲雾水萃取物在抑制酪胺酸酶活性上的效用比较，其中“###”表示：当与对照组作比较，p＜0.001；以及“***”表示：当与水萃取物组作比较，p＜0.001；
图4显示本发明的莲雾水萃取物的菠萝酶水解产物与莲雾水萃取物在促进伤口愈合上的效用比较，其中“##”表示：当与对照组作比较，p＜0.01；以及“**”表示：当与水萃取物组作比较，p＜0.01；以及
图5显示水解产物精华液、水萃取物精华液以及对照精华液在提升角质层含水量上的效用比较，其中“###”表示：当与对照区作比较，p＜0.001；以及“**”与“***”分别表示：当与水萃取物区作比较，p＜0.01与p＜0.001。
具体实施方式
为了从植物中获得具有护肤效用的天然活性组分(natural activecomponents)，申请人尝试以各种不同的方法来对莲雾果实进行处理，并且进一步将所得到的产物拿来进行活体外试验(in vitro test)与人体试验而发现到：当使用菠萝酶(bromelain)来对莲雾果实的水萃取物(water extract of Syzygium samarangensefruit)进行水解处理，其在螯合亚铁离子、抑制酪胺酸酶活性、提升皮肤的保湿能力以及促进伤口愈合上的效用会被显著地提升。
因此，本发明提供一种莲雾水萃取物的水解产物，它是通过一包含下列步骤的方法而被制得：
以水来萃取莲雾果实而得到一水萃取物；以及
令该水萃取物进行一使用一菠萝酶的水解处理，借此而得到该莲雾水萃取物的水解产物。
本发明也提供一种用以制备一莲雾水萃取物的水解产物的方法，其包含下列步骤：
以水来萃取莲雾果实而得到一水萃取物；以及
令该水萃取物进行一使用一菠萝酶的水解处理，借此而得到该莲雾水萃取物的水解产物。
依据本发明，术语“莲雾果实(Syzygium samarangense fruit)”意指包含有莲雾的果肉(pulp)(也就是可食用的部分)之果实。较佳地，该果实进一步包含有莲雾的果皮(peel)以及种籽(seed)。
依据本发明，该莲雾果实可来自于不同的品种(cultivar)。较佳地，该莲雾的品种可选自于下列所构成之群组：黑珍珠(Black Pearl)、深红色种(Dark Red)、淡红色种(Light Red)、粉红色种(Pink)[又被称为南洋种(Nanyang)]、黑钻石(Black Diamond)、黑金刚(Black King Kong)，以及它们的组合。在本发明的一个较佳具体例中，该莲雾的品种是黑珍珠。
依据本发明，该莲雾果实可具有不同的果实成熟度(fruit maturity)。较佳地，该莲雾果实是幼果(young fruit)。更佳地，该莲雾果实是开花后1个月的幼果。
依据本发明，水萃取的方法可以采用熟习此项技艺者所详知且惯用的技术来进行。在此方面，可以参照，例如，嘉南药理科技大学化妆品科技研究所的陈宜贞所著硕士论文(同上述)。
可了解到的是，有关萃取方法的操作条件会进一步随着所使用的莲雾果实的处理方式以及水与莲雾果实的用量比例等因素而被变动，以便达致最佳的萃取效果。而这些操作条件的选择是熟习此项技艺者能例行性地自行决定的。
依据本发明，该莲雾果实的水萃取可以使用新鲜的莲雾果实来进行，或者可使用预先经过一选自于由下列所构成之群组中的加工处理的莲雾果实来进行：干燥处理、研磨处理、切碎处理、粉碎处理，以及它们的组合。
依据本发明，该莲雾果实与水的重量比是介于1：0.5至1：5之间。在本发明的一个较佳具体例中，该莲雾果实与水的重量比是1：1.25。
依据本发明，该莲雾果实的水萃取是在一范围落在35℃至65℃内的温度下被进行。在本发明的一个较佳具体例中，该水萃取是在50℃下被进行。
依据本发明，使用菠萝酶的水解处理可以采用熟习此项技艺者所详知且惯用的技术来进行。
可了解到的是，有关水解处理的操作条件会进一步随着该水萃取物与菠萝酶的用量比例等因素而被变动，以便达致最佳的萃取效果。而这些操作条件的选择是熟习此项技艺者能例行性地自行决定的。
依据本发明，该菠萝酶与该水萃取物的重量比是介于1：50至1：300之间。在本发明的一个较佳具体例中，该菠萝酶与该水萃取物的重量比是1：180。
依据本发明，该水解处理是在一范围落在30至60℃内的温度下作用历时3至6小时而被进行。在本发明的一个较佳具体例中，该水解处理是在45℃温度下作用历时4小时而被进行。
依据本发明，该水萃取物在进行水解处理后可进一步进行一固液分离处理，俾以移除固体部分。该固液分离处理可以采用熟习此项技艺者所详知且惯用的技术来进行，这包括，但不限于：过滤(filtration)、离心(centrifugation)以及倾析(decantation)。在本发明的一个较佳具体例中，该固液分离处理依序包括离心以及过滤。
依据本发明的该莲雾水萃取物的水解产物经由活体外试验而被证实可以有效地抑制酪胺酸酶活性。据此，依据本发明的该莲雾水萃取物的水解产物被预期具有促进皮肤美白的效用，因而可供应用于制备一用来美白皮肤之医药品的用途。
如本文中所用的，术语“美白(whitening)”与“肤色淡化(skin colorlightening)”、“漂白(bleaching)”、“净白”、“增白(brightening)”、“退黑”、“驱黑”、“淡化黑色素(lightening the melanin)”、“抑制黑色素生成(inhibition of melanogenesis)”以及“抑制黑色素合成(inhibition of melanin synthesis)”可被交换地使用。
依据本发明，该医药品可利用熟习此技艺者所详知的技术而被制造成一适合于口服地(orally)或局部地(topically)投药的剂型，这包括，但不限于：无菌的粉末(sterilepowder)、锭剂(tablet)、片剂(troche)、丸剂(pill)、胶囊(capsule)、外部制剂(externalpreparation)以及类似物。
依据本发明，该医药品可进一步包含有一被广泛地使用于药物制造技术之药学上可接受的载剂(pharmaceutically acceptable carrier)。例如，该药学上可接受的载剂可包含一或多种选自于下列的试剂：溶剂(solvent)、缓冲液(buffer)、乳化剂(emulsifier)、悬浮剂(suspending agent)、分解剂(decomposer)、崩解剂(disintegrating agent)、分散剂(dispersing agent)、黏结剂(binding agent)、赋形剂(excipient)、安定剂(stabilizing agent)、螯合剂(chelating agent)、稀释剂(diluent)、胶凝剂(gellingagent)、防腐剂(preservative)、润湿剂(wetting agent)、润滑剂(lubricant)、吸收延迟剂(absorption delaying agent)、脂质体(liposome)以及类似物。有关这些试剂的选用与数量是落在普通技术人员的专业素养与例行技术范畴内。
依据本发明，该医药品可利用熟习此技艺者所详知的技术而被制造成一适合于口服投药(oral administration)的剂型(dosage form)，这包括，但不限于：无菌的粉末、锭剂(tablet)、片剂(troche)、口含锭(lozenge)、丸剂(pellet)、胶囊(capsule)、分散性粉末(dispersible powder)或细颗粒(granule)、溶液、悬浮液(suspension)、乳剂(emulsion)、糖浆(syrup)、酏剂(elixir)、浓浆(slurry)以及类似物。
依据本发明，该医药品也可利用熟习此技艺者所详知的技术而被制造成一适合于局部地施用于皮肤上的外部制剂(external preparation)，这包括，但不限于：乳剂(emulsion)、凝胶(gel)、软膏(ointment)、乳霜(cream)、贴片(patch)、擦剂(liniment)、粉末(powder)、气溶胶(aerosol)、喷雾(spray)、乳液(lotion)、乳浆(serum)、糊剂(paste)、泡沫(foam)、滴剂(drop)、悬浮液(suspension)、油膏(salve)以及绷带(bandage)。
依据本发明，该外部制剂是通过将该医药品与一为熟习此项技艺者所详知的基底(base)相混合而被制备。
依据本发明，该基底可包含有一或多种选自于下列的添加剂(additives)：水、醇(alcohols)、甘醇(glycol)、碳氢化合物(hydrocarbons)[诸如石油胶(petroleum jelly)以及白凡士林(white petrolatum)]、蜡(wax)[诸如石蜡(paraffin)以及黄蜡(yellowwax)]、保存剂(preserving agents)、抗氧化剂(antioxidants)、界面活性剂(surfactants)、吸收增强剂(absorption enhancers)、安定剂(stabilizing agents)、胶凝剂(gelling agents)[诸如
Figure GDA0002622152850000091
974P(
Figure GDA0002622152850000092
974P)、微结晶纤维素(microcrystalline cellulose)以及羧基甲基纤维素(carboxymethylcellulose)]、活性剂(active agents)、保湿剂(humectants)、气味吸收剂(odor absorbers)、香料(fragrances)、pH调整剂(pH adjusting agents)、螯合剂(chelating agents)、乳化剂(emulsifiers)、闭塞剂(occlusive agents)、软化剂(emollients)、增稠剂(thickeners)、助溶剂(solubilizing agents)、渗透增强剂(penetration enhancers)、抗刺激剂(anti-irritants)、着色剂(colorants)以及推进剂(propellants)等。有关这些添加剂的选用与数量是落在普通技术人员的专业素养与例行技术范畴内。
本发明也提供一种用于美白皮肤的方法，其包括对一需要促进皮肤美白的个体投予本发明的莲雾水萃取物的水解产物。较佳地，该方法包括对该个体的皮肤施用一有效量的该莲雾水萃取物的水解产物，并且历时一足够的时间直到皮肤的黑色素被显著地淡化。
如本文中所用的，术语“投予(administering)”与“投药”以及“施用(application)”可被交换地使用。
如此处所用的，术语“有效量(effective amount)”意指当本发明的莲雾水萃取物的水解产物被投予一需要促进皮肤美白的个体时，一足以提供所欲达致之美白功效并且不会对皮肤产生非所欲的不利副作用的安全用量。
如此处所用的，术语“有效量”与“有效剂量(effective dose)”、“美白有效量(whitening effective amount)”以及“美白有效剂量(whitening effective dose)”可被交换地使用。
依据本发明，该莲雾水萃取物的水解产物的有效量与施用频率(frequency ofapplication)会视下列因素而变化：要被淡化黑色素的皮肤区域之初始病况(initialcondition)以及所欲达致之最终的美白效果。一般而言，当依据本发明的莲雾水萃取物的水解产物被局部地施用于皮肤上时，每次施用的有效量通常是1至10mg/平方厘米的皮肤面积，每天大约1至3次。而当依据本发明的莲雾水萃取物的水解产物是被口服地投药时，每次投药的有效量通常是0.05至5mg/Kg体重，每天大约1至3次。
另外，依据本发明的莲雾水萃取物的水解产物经由人体试验而被证实能够有效地提升皮肤的角质层(stratum corneum)的含水量(water content)。据此，依据本发明的莲雾水萃取物的水解产物被预期具有提升皮肤的保湿能力的效用，因而可供应用于制备一用来提升皮肤的保湿能力之医药品的用途。
依据本发明，该医药品的投药途径、剂型以及可供使用之药学上可接受的载剂是如上面所述者。
本发明也提供一种用于提升皮肤的保湿能力的方法，其包括对一需要提升皮肤的保湿能力的个体投予本发明的莲雾水萃取物的水解产物。较佳地，该方法包括对该个体的皮肤施用一有效量的该莲雾水萃取物的水解产物，并且历时一足够的时间直到皮肤的保湿能力被显著地提升。
如此处所用的，术语“有效量(effective amount)”意指当本发明的莲雾水萃取物的水解产物被投予一需要提升皮肤的保湿能力的个体时，一足以提供所欲达致之保湿功效并且不会对皮肤产生非所欲的不利副作用的安全用量。
如此处所用的，术语“有效量”与“有效剂量(effective dose)”、“保湿有效量(moisture-retaining effective amount)”以及“保湿有效剂量(moisture-retainingeffective dose)”可被交换地使用。
依据本发明，该莲雾水萃取物的水解产物的有效量与施用频率会视下列因素而变化：要被提升保湿能力的皮肤区域之初始病况以及所欲达致之最终的保湿效果。一般而言，当依据本发明的莲雾水萃取物的水解产物被局部地施用于皮肤上时，每次施用的有效量通常是1至10mg/平方厘米的皮肤面积，每天大约1至3次。而当依据本发明的莲雾水萃取物的水解产物是被口服地投药时，每次投药的有效量通常是0.05至5mg/Kg体重，每天大约1至3次。
另外，依据本发明的该莲雾水萃取物的水解产物经由活体外试验而被证实可以有效地促进纤维母细胞-媒介的伤口闭合(fibroblast-mediated wound closure)。据此，依据本发明的该莲雾水萃取物的水解产物被预期具有促进伤口愈合的效用，因而可供应用于制备一用来促进伤口愈合之医药品的用途。
依据本发明，该医药品的投药途径、剂型以及可供使用之药学上可接受的载剂是如上面所述者。
本发明也提供一种用于促进伤口愈合的方法，其包括对一具有一伤口的个体投予本发明的莲雾水萃取物的水解产物。较佳地，该方法包括对该个体的伤口施用一有效量的该莲雾水萃取物的水解产物，并且历时一足够的时间直到伤口区域的面积被显著地减少。
如此处所用的，术语“有效量(effective amount)”意指当本发明的莲雾水萃取物的水解产物被投予一具有一伤口的个体时，一足以提供所欲达致之促进伤口愈合的功效并且不会对伤口产生非所欲的不利副作用的安全用量。
如此处所用的，术语“有效量”与“有效剂量(effective dose)”、“伤口愈合有效量(wound healing effective amount)”以及“伤口愈合有效剂量(wound healingeffective dose)”可被交换地使用。
依据本发明，该莲雾水萃取物的水解产物的有效量与施用频率会视下列因素而变化：伤口区域之初始病况以及所欲达致之最终的伤口愈合效果。一般而言，当依据本发明的莲雾水萃取物的水解产物被局部地施用于皮肤上时，每次施用的有效量通常是1至10mg/平方厘米的皮肤面积，每天大约1至3次。而当依据本发明的莲雾水萃取物的水解产物是被口服地投药时，每次投药的有效量通常是0.05至5mg/Kg体重，每天大约1至3次。
另外，依据本发明的莲雾水萃取物的水解产物经由活体外试验而被证实具有优越的亚铁离子螯合能力。据此，依据本发明的该莲雾水萃取物的水解产物被预期具有抗氧化的效用，因而可供应用于制备一用来抗氧化之医药品的用途。
依据本发明，该医药品的投药途径、剂型以及可供使用之药学上可接受的载剂是如上面所述者。
本发明也提供一种用于抗氧化的方法，其包括对一具有氧化性压力的个体投予本发明的莲雾水萃取物的水解产物。较佳地，该方法包括对该个体施用一有效量的该莲雾水萃取物的水解产物，并且历时一足够的时间直到氧化性压力被显著地改善。
如此处所用的，术语“有效量(effective amount)”意指当本发明的莲雾水萃取物的水解产物被投予一需要抗氧化的个体时，一足以提供所欲达致之抗氧化的功效并且不会产生非所欲的不利副作用的安全用量。
如此处所用的，术语“有效量”与“有效剂量(effective dose)”、“抗氧化有效量(antioxidant effective amount)”以及“抗氧化有效剂量(antioxidant effectivedose)”可被交换地使用。
依据本发明，该莲雾水萃取物的水解产物的有效量与施用频率会视下列因素而变化：氧化性压力之初始病况以及所欲达致之最终的抗氧化效果。一般而言，当依据本发明的莲雾水萃取物的水解产物被局部地施用于皮肤上时，每次施用的有效量通常是1至10mg/平方厘米的皮肤面积，每天大约1至3次。而当依据本发明的莲雾水萃取物的水解产物是被口服地投药时，每次投药的有效量通常是0.05至5mg/Kg体重，每天大约1至3次。
基于依据本发明的莲雾水萃取物的水解产物的抗氧化效用，依据本发明的莲雾水萃取物的水解产物被预期具有预防和/或延缓皮肤老化的效用，因而可供应用于制备一用来抗皮肤老化之医药品的用途。
如本文中所用的，术语“延缓(retarding)”意指治疗(treating)、减少(reducing)、减轻(alleviating)、改善(ameliorating)、缓解(relieving)或控制(controlling)一疾病(disease)或障碍(disorder)的一或多个临床征兆(clinicalsign)，以及降低(lowering)、停止(stopping)或逆转(reversing)一正在被治疗中的病况(condition)或症状(symptom)之严重性的进展(progression of severity)。
如本文中所用的，术语“皮肤老化(skin aging)”意欲涵盖自然发生的内在皮肤老化(intrinsic skin aging)，以及由环境因素(特别是紫外线的照射)所引起的外在皮肤老化(extrinsic skin aging)。皮肤老化的症状包括，但不限于：毛细血管扩张(telangiectasia)、表皮变薄、皮肤萎缩(skin atrophy)、胶原纤维(collagen fiber)与弹性纤维(elastic fiber)的减少、弹性组织变性(elastosis)、皮肤弹性(skin elasticity)变差、皮肤质地(skin texture)变粗糙、干燥(dryness)、皱纹产生(wrinkle formation)以及色素改变(pigmentary change)[例如，雀斑(lentigines)、斑点(freckles)、色素过少(hypopigmentation)或色素过多(hyperpigmentation)]等。
依据本发明，该医药品的投药途径、剂型以及可供使用之药学上可接受的载剂是如上面所述者。
本发明也提供一种用于抗皮肤老化的方法，其包括对一需要预防和/或延缓皮肤老化的个体投予以本发明的莲雾水萃取物的水解产物。较佳地，该方法包括对该个体的皮肤施用一有效量的该莲雾水萃取物的水解产物，并且历时一足够的时间直到皮肤老化的症状被显著地改善。
如此处所用的，术语“有效量(effective amount)”意指当本发明的莲雾水萃取物的水解产物被投予一需要预防和/或延缓皮肤老化的个体时，一足以提供所欲达致之抗皮肤老化的功效并且不会对皮肤产生非所欲的不利副作用的安全用量。
如此处所用的，术语“有效量”与“有效剂量(effective dose)”、“抗老化有效量(anti-aging effective amount)”以及“抗老化有效剂量(anti-aging effective dose)”可被交换地使用。
依据本发明，该莲雾水萃取物的水解产物的有效量与施用频率会视下列因素而变化：想要预防和/或延缓老化的皮肤区域之初始病况以及所欲达致之最终的抗皮肤老化效果。一般而言，当依据本发明的莲雾水萃取物的水解产物被局部地施用于皮肤上时，每次施用的有效量通常是1至10mg/平方厘米的皮肤面积，每天大约1至3次。而当依据本发明的莲雾水萃取物的水解产物是被口服地投药时，每次投药的有效量通常是0.05至5mg/Kg体重，每天大约1至3次。
特别地，依据本发明的莲雾水萃取物的水解产物也被预期可供应用于制备一用来促进皮肤美白、提升皮肤的保湿能力、预防和/或延缓皮肤老化、促进伤口愈合以及抗氧化之化妆品的用途。
依据本发明，该化妆品可进一步包含有一被广泛地使用于化妆品制造技术之化妆品上可接受的佐剂(cosmetically acceptable adjuvant)。例如，该化妆品上可接受的佐剂可包含有一或多种选自于下列的试剂：溶剂(solvent)、胶凝剂、活性剂、防腐剂(preservative)、抗氧化剂、遮蔽剂(screening agent)、螯合剂、界面活性剂、染色试剂(coloring agent)、增稠剂(thickening agent)、填料(filler)、香料以及气味吸收剂。有关这些试剂的选用与数量是落在普通技术人员的专业素养与例行技术范畴内。
依据本发明，该化妆品可利用熟习此技艺者所详知的技术而被制造成一适合于护肤(skincare)或化妆(makeup)的形式，这包括，但不限于：水性溶液(aqueous solution)、水-醇溶液(aqueous-alcohol solution)或油性溶液(oily solution)、呈水包油型(oil-in-water type)、油包水型(water-in-oil type)或复合型之乳剂、凝胶、软膏、乳霜、面膜(mask)、贴片、贴布(pack)、擦剂、粉末、气溶胶、喷雾、乳液、乳浆、糊剂、泡沫、分散液、滴剂、慕斯(mousse)、防晒油(sunblock)、化妆水(tonic water)、粉底(foundation)、眼影(eyeshadow)、卸妆产品(makeup remover products)、肥皂(soap)以及其他身体清洁产品(body cleansing products)等。
在本发明的一个较佳具体例中，该化妆品被制造成一水-醇溶液。
依据本发明，该化妆品也可与一或多种选自于下列之已知活性的外用剂(external use agents)一起合并使用：美白剂(whitening agents)[诸如维生素A酸(tretinoin)、儿茶素(catechin)、曲酸、熊果苷以及维生素C]、保湿剂、抗发炎剂(anti-inflammatory agents)、杀菌剂(bactericides)、紫外线吸收剂(ultravioletabsorbers)、植物萃取物(plant extracts)[诸如芦荟萃取物(aloe extract)]、皮肤营养剂(skin nutrients)、麻醉剂(anesthetics)、抗痘剂(anti-acne agent)、止痒剂(antipruritic)、止痛剂(analgesic)、抗皮肤炎剂(antidermatitis agents)、抗过角化剂(antihyperkeratolytic agents)、抗干皮肤剂(anti-dry skin agents)、抗汗剂(antipsoriatic agents)、抗老化剂(antiaging agents)、抗皱剂(antiwrinkle agents)、抗皮脂溢出剂(antiseborrheic agents)、伤口治疗剂(wound-healing agents)、皮质类固醇(corticosteroids)以及激素(hormones)。有关这些外用剂的选用与数量是落在普通技术人员的专业素养与例行技术范畴内。
本发明也提供一种组合物，其包含有一如上所述的莲雾水萃取物的水解产物。
依据本发明，该组合物的投药途径与剂型或施用形式以及可供使用之载剂或佐剂是如上面所述者。
<实施例>
实施例1.制备莲雾水萃取物(water extract of Syzygium samarangense)的菠萝酶水解产物(bromelain hydrolysate)
首先，将采集自屏东县枋寮乡的莲雾果实(Syzygium samarangense fruit)(包括果皮、果肉以及种籽)(3-6g)粉碎，继而将果实粉碎物与水以一为1：1.25的重量比进行混合并于50℃下加热历时1小时，借此而得到莲雾水萃取物。接着，将1600U/mL的菠萝酶(bromelain)(购自于青旺生技，货号为1600GD)与该莲雾水萃取物以一为1：180的重量比进行混合，继而置于45℃下进行酵素水解反应历时4小时。之后，将所得到的反应混合物进行离心并收取上澄液，接着依序以孔径为5、1以及0.5μm的过滤器(购自于德玺实业，型号分别为PureMax、SCB2000-001以及SP2000-00A)来进行过滤。之后，将所得到的滤液进行冷冻干燥，借此而得到一呈冻干粉末(lyophilized powder)之莲雾水萃取物的菠萝酶水解产物。
另外，为供下面的比较实验之用，该莲雾水萃取物也被拿来进行如上所述的离心、过滤以及冷冻干燥，借此而得到呈冻干粉末之莲雾水萃取物。
实施例2.莲雾水萃取物的菠萝酶水解产物的高效能液相层析(high performanceliquid chromatography,HPLC)分析
为了解本发明的莲雾水萃取物的菠萝酶水解产物的主要成分分布，依据上面实施例1所得到的莲雾水萃取物的菠萝酶水解产物被溶于二次水中以配制成一具有一浓度为1mg/mL的待测样品，继而将之拿来进行高效能液相层析(HPLC)分析。
本实验所使用的HPLC分析仪器为HP Agilent 1100系列液相层析系统(HPAgilent 1100 series liquid chromatography system)，而有关HPLC分析的各项操作参数与条件被显示于下面的表1中。
表1.HPLC分析的操作參數與條件
Figure GDA0002622152850000171
图1显示将依据上面实施例1所制得的莲雾水萃取物的菠萝酶水解产物拿来进行HPLC分析所得到的洗提图形(elution profile)。从图1可见，本发明的莲雾水萃取物的菠萝酶水解产物在第0至35分钟的滞留期间出现有4个主要的洗提波峰(分别被标示为波峰a、b、c以及d)。
实施例3.莲雾水萃取物的菠萝酶水解产物在抗氧化效力(antioxidationefficacy)上的效用评估
在本实施例中，为了了解本发明的莲雾水萃取物的菠萝酶水解产物是否具有抗氧化效力，申请人将之拿来进行亚铁离子螯合能力(ferrous ion chelating ability)之分析。
实验方法：
首先，将适量之在上面实施例1中所得到的莲雾水萃取物的菠萝酶水解产物加入至二次水中，而得到具有一莲雾水萃取物的菠萝酶水解产物浓度为900μg/mL的待测样品(也就是实验组)。接着，对实验组的待测样品取100μL，然后予以加入3.7mL乙醇以及0.1mL的2mM FeCl2·4H2O溶液，继而予以混合历时30秒。之后，予以加入0.2mL的5mM菲洛嗪(ferrozine)并混合均匀，继而置于室温下进行避光作用历时10分钟，然后于562nm的波长下以一分光光度计(型号为V-550，厂牌为JASCO)来量测吸光值(OD562)。另外，1mL的90％乙醇被用来作为对照组的待测样品，并与实验组的待测样品进行相同的实验。
亚铁离子的螯合率(％)是通过将所测得的吸光值(OD562)代入下列公式(I)而被计算出：
A＝[1-(B/C)]×100 (I)
其中：A＝亚铁离子的螯合率(％)
B＝各组所测得的OD562吸光值
C＝对照组所测得的OD562吸光值
各组实验被重复进行2次。所得到的实验数据是以平均值±标准偏差(StandardDeviation,S.D.)来表示。所有的数据是通过史徒登氏t-试验(Student’s t-test)试验来作分析，俾以评估各组之间的差异性。若所得到的统计分析结果是p＜0.05，表示有统计学显著性(statistical significance)。
结果：
图2显示各组的亚铁离子的螯合率。由图2可见，实验组的亚铁离子的螯合率是明显地高于对照组所具者。这个实验结果显示：本发明的莲雾水萃取物的菠萝酶水解产物具有优越的亚铁离子螯合能力。申请人据此而认为：本发明的莲雾水萃取物的菠萝酶水解产物能够展现良好的抗氧化效用。
实施例4.莲雾水萃取物的菠萝酶水解产物在抑制黑色素生成(melanogenesis)上的效用评估
在本实施例中，申请人通过测定酪胺酸酶活性(tyrosinase activity)来评估本发明的莲雾水萃取物的菠萝酶水解产物在抑制黑色素生成上的效用。此外，为供比对，在上面实施例1中所得到的莲雾水萃取物被拿来进行相同的实验。
实验方法：
首先，将500mL的0.1M Na2HPO4溶液与500mL的KH2PO4溶液混合，继而利用NaOH将所得到的磷酸盐溶液的pH值调整至6.8。接着，将适量的酪胺酸(tyrosine)(Alfa Aesar,Lot:10174330)配于该磷酸盐溶液中，而得到2mM的酪胺酸溶液备用。
之后，将适量之在上面实施例1中所得到的莲雾水萃取物的菠萝酶水解产物以及莲雾水萃取物分别加入至该磷酸盐溶液中，而得到具有一莲雾水萃取物的菠萝酶水解产物浓度为10mg/mL的待测样品(也就是水解产物组)，以及具有一莲雾水萃取物浓度为10mg/mL的待测样品(也就是水萃取物组)。接着，对各组的待测样品取21.6μL，然后予以加入250μL的酪胺酸酶(Sigma,Lot:SLBJ5647V)(115.42U/mL，配于该磷酸盐溶液中)以及540μL的酪胺酸溶液。在充分混合后，将所形成的混合物置于37℃下进行避光作用历时30分钟，然后于475nm的波长下以分光光度计来量测吸光值(OD475)。另外，290μL的磷酸盐溶液被用来作为对照组待测样品，并与各组的待测样品进行相同的实验。
酪胺酸酶活性的抑制率(％)是通过将所测得的吸光值(OD475)代入下列公式(II)而被计算出：
D＝[1-(E/F)]×100 (II)
其中：D＝酪胺酸酶活性的抑制率(％)
E＝各组所测得的OD475吸光值
F＝对照组所测得的OD475吸光值
各组实验被重复进行2次。所得到的实验数据是以平均值±标准偏差来表示。所有的数据是通过史徒登氏t-试验试验来作分析，俾以评估各组之间的差异性。若所得到的统计分析结果是p＜0.05，表示有统计学显著性。
结果：
图3显示各组的酪胺酸酶活性的抑制率。由图3可见，水解产物组的酪胺酸酶活性的抑制率是明显地高于对照组以及水萃取物组所具者。这个实验结果显示：与莲雾水萃取物相较之下，本发明的莲雾水萃取物的菠萝酶水解产物具有较佳的酪胺酸酶抑制能力。申请人据此而认为：本发明的莲雾水萃取物的菠萝酶水解产物可通过抑制酪胺酸酶活性来抑制黑色素生成，进而达到皮肤美白(skin whitening)的效用。
实施例5.莲雾水萃取物的菠萝酶水解产物在促进伤口愈合(wound healing)上的效用评估
在本实施例中，申请人利用伤口愈合的细胞移动分析(wound-healing cellmigration assay)来评估本发明的莲雾水萃取物的菠萝酶水解产物在促进伤口愈合上的效用。此外，为供比对，在上面实施例1中所得到的莲雾水萃取物被拿来进行相同的实验。
实验材料：
1.人类皮肤纤维母细胞细胞株(human skin fibroblast cell line)Detroit551的来源与培养：
在本实施例中所使用的人类皮肤纤维母细胞细胞株Detroit551是购自于中国台湾的食品工业发展研究所(Food Industry Research and Development Institute,FIRDI)的生物资源保存及研究中心(Biosource Collection and Research Center,BCRC)。
Detroit 551细胞被培养于含有最低基本培养基(minimum essential medium,MEM)(Sigma,M2279)[添加有10％胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)、10％盘尼西林-链霉素(penicillin-streptomycin)(Sigma,15140122)]的培养皿(petri dish)中，接着在培养条件被设定为37℃与5％CO2的培养箱中进行培养。之后，大约每隔2天更换新鲜的培养基。当细胞密度达到约80-90％汇聚(confluence)时，移除培养基并以磷酸盐缓冲生理盐水(phosphate buffered saline,PBS)来洗涤细胞共计2次，接着加入胰蛋白酶-EDTA(trypsin-EDTA)以使细胞自培养皿的底部脱离。之后，加入新鲜的培养基来中和胰蛋白酶的活性并以量吸管(pipette)反复地吸冲培养基以充分打散细胞，然后将所形成的细胞悬浮液分配到新的培养皿中，并在培养条件被设定为37℃与5％CO2的培养箱中进行培养。
实验方法：
首先，将依据上面“实验材料”的第1项「人类皮肤纤维母细胞细胞株Detroit 551的来源与培养」来进行继代培养的Detroit 551细胞分成3组，其中包括1个水解产物组、1个水萃取物组以及1个对照组。将各组细胞分别以一为2×105细胞/井的数量培养于含有500μL的MEM(添加有10％胎牛血清)的24-井培养盘中，并在培养箱(37℃、5％CO2)中进行培养历时24小时。
接着，将各组的细胞培养物分别更换以新鲜的培养基，继而使用200μL的塑料量吸管尖管(plastic pipette tip)沿着各井直径来刮除Detroit 551细胞，以沿着该培养盘的直径产生一无细胞贴附且宽度约为500μm的伤口区域(wound area)，接着以PBS来洗涤各井共计2次。在更换以新鲜的MEM(添加有5％胎牛血清)后，将适量之在上面实施例1中所得到的莲雾水萃取物的菠萝酶水解产物以及莲雾水萃取物分别添加至水解产物组以及水萃取物组中，而使得水解产物组具有一最终浓度为0.03％(w/w)的莲雾水萃取物的菠萝酶水解产物，以及使得水萃取物组具有一最终浓度为0.03％(w/w)的莲雾水萃取物。至于对照组则不作任何处理。
之后，将各组细胞培养物在培养箱(37℃，5％CO2)中进行培养历时12小时。在进行培养前以及在开始培养后的第12小时，使用一倒立显微镜(型号为为TE300，厂牌为Nikon)并在一为40倍的放大倍数下来对各组的伤口区域进行观察，并且使用一数字相机(型号为F90，厂牌为Nikon)来进行拍照，继而通过使用软件Image J来对所拍得的照片进行分析而计算出该伤口区域的面积。伤口愈合百分比(wound healing percentage)(％)是通过将所计算出的伤口区域的面积代入下列公式(III)而被计算出：
G＝[1-(H/I)]×100 (III)
其中：G＝伤口愈合百分比(％)
H＝在开始培养后的第12小时所测得的伤口区域的面积
I＝在进行培养前所测得的伤口区域的面积
各组实验被重复进行2次。所得到的实验数据是以平均值±标准偏差来表示。所有的数据是通过史徒登氏t-试验试验来作分析，俾以评估各组之间的差异性。若所得到的统计分析结果是p＜0.05，表示有统计学显著性。
结果：
图4显示各组的伤口愈合百分比。由图4可见，水萃取物组的伤口愈合百分比与对照组相较之下没有明显的差异存在，而水解产物组的伤口愈合百分比是显著地高于对照组以及水萃取物组。这个实验结果显示：本发明的莲雾水萃取物的菠萝酶水解产物能够有效地促进纤维母细胞-媒介的伤口闭合(fibroblast-mediated wound closure)。申请人据此而认为：本发明的莲雾水萃取物的菠萝酶水解产物可通过促进纤维母细胞-媒介的伤口闭合来达到促进伤口愈合的效用。
实施例6.莲雾水萃取物的菠萝酶水解产物在提升皮肤的保湿能力(moisture-retaining capacity)上的效用评估
实验方法：
A.制备精华液：
为评估本发明的莲雾水萃取物的菠萝酶水解产物对于人类皮肤的保湿效用以及安全性，申请人将上面实施例1中所得到的莲雾水萃取物的菠萝酶水解产物配制成可施用于人类的皮肤上的精华液(下面简称为水解产物精华液)。另外，为供比较，一含有在上面实施例1中所得到的莲雾水萃取物的精华液(下面简称为水萃取物精华液)以及一不含有莲雾水萃取物或其菠萝酶水解产物的精华液(下面简称为对照精华液)被制备。有关这3种精华液的组成与配方被显示在下面的表2中，其中，所使用的丁二醇(butylene glycol)以及羟乙基纤维素(hydroxyethyl cellulose)皆是购自于第一化工(First Chemical Co.,Ltd.)，而Dermosoft OMP是购自于嘉诚化学(HonorChem Co.,Ltd)。
表2.精华液的配方
Figure GDA0002622152850000231
有关水解产物精华液与水萃取物精华液的制备是依照下面步骤来进行：将丁二醇与羟乙基纤维素添加至去离子水中，并于75℃下进行搅拌以充分溶解。在冷却至40至45℃后，依序加入莲雾水萃取物的菠萝酶水解产物或莲雾水萃取物以及Dermosoft OMP并进行搅拌。之后，利用NaOH将所得到的混合物的pH值调整至6至7，借此而得到水解产物精华液与水萃取物精华液。另外，对照精华液大体上是依照上述步骤而被制得，不同处在于：没有添加莲雾水萃取物的菠萝酶水解产物或莲雾水萃取物。
B.实验个体的筛选：
参与本试验的实验对象是来自于允顶企业有限公司(Yeun Diing EnterpriseCo,Ltd.)以及顶宏生物科技股份有限公司(M.H.Biotechnology Co,Ltd.)的员工，在以下面表3中所示之排除标准(exclusion criteria)予以筛选后，本试验共计有10位年龄介于25岁至40岁的受试者参加，其中包括4位男性与6位女性。
表3.用以筛选实验个体的排除标准
Figure GDA0002622152850000241
C.精华液的施用：
首先，在各个受试者的右臂皮肤上区分出3个分别供涂抹上面A项所配制出之水解产物精华液、水萃取物精华液以及对照精华液的施用区(下称水解产物区、水萃取物区以及对照区)，每区宽度大约为4指幅(fingerbreadth)，每次施用0.5mL的精华液，每天2次，试验期间总共历时28天。
D.角质层含水量(water content of stratum corneum)的测定
在施用精华液前(也就是第0天)以及在施用精华液后的第7、14、21以及28天之时，通过使用一电容计(capacitance meter)(
Figure GDA0002622152850000242
CM 285,Courage&Khazaka)来对各区皮肤进行角质层含水量的测定。
角质层含水量的增加百分比(％)是通过将所测得的角质层含水量代入下列公式(IV)而被计算出：
J＝(L-K)/K×100 (IV)
其中：J＝角质层含水量的增加百分比(％)
K＝在第0天之时所测得的角质层含水量
L＝在施用精华液后的第7、14、21以及28天之时所测得的角质层含水量
所得到的实验数据是以平均值±标准偏差来表示。所有的数据是通过史徒登氏t-试验试验来作分析，俾以评估各组之间的差异性。若所得到的统计分析结果是p＜0.05，表示有统计学显著性。
E.安全性的评估：
在施用精华液前(也就是第0天)，将少量的精华液涂抹于各个受试者的上臂内侧的皮肤作为测试，接着询问并观察受试者是否有出现任何皮肤刺激性反应(skinirritation reaction)[包括搔痒(itching)、刺激(irritation)以及红斑(erythema)]。在施用精华液后的第7、14、21以及28天之时，询问并观察受试者的各个施用区的皮肤是否有出现任何皮肤刺激性反应。
结果：
A.角质层含水量的测定：
图5显示各区皮肤在不同的时间点所测得的角质层含水量的增加百分比。从图5可见，与对照区以及水萃取物区相较之下，水解产物区所测得的角质层含水量皆有显著的增加，并且会随着时间而更趋于明显。相反地，水萃取物区所测得的角质层含水量会随着时间而呈现缓慢增加的情形。这个实验结果显示：本发明的莲雾水萃取物的菠萝酶水解产物能够更有效地提升皮肤的保湿能力(moisture-retaining capacity)。
B.安全性的评估：
在整个试验的过程中，所有的受试者皆无产生任何皮肤刺激性反应(数据未显示)。
综合以上的实验结果可知：依据本发明的莲雾水萃取物的菠萝酶水解产物具有抗氧化能力，并且能够抑制黑色素生成、提升皮肤的保湿能力以及促进伤口愈合。因此，申请人认为：依据本发明的莲雾水萃取物的菠萝酶水解产物具有发展成为护肤产品的高潜力。
于本说明书中被引述之所有专利和文献以其整体被并入本案作为参考数据。若有所冲突时，本案详细说明(包含界定在内)将占上风。
虽然本发明已参考上述特定的具体例被描述，明显地在不背离本发明之范围和精神下可作出很多的修改和变化。因此意欲的是，本发明只受如随文检附之申请专利范围所示者的限制。

Claims (16)

1.一种莲雾水萃取物的水解产物，其特征在于：该莲雾水萃取物的水解产物是通过一包含下列步骤的方法而被制得：
以水来萃取莲雾果实而得到一水萃取物；以及
令该水萃取物进行一使用一菠萝酶的水解处理，借此而得到用来美白皮肤、提升皮肤的保湿能力、促进伤口愈合和/或抗氧化的该莲雾水萃取物的水解产物。
2.根据权利要求1所述的莲雾水萃取物的水解产物，其特征在于：该莲雾果实与水的重量比是介于1：0.5至1：5之间。
3.根据权利要求1所述的莲雾水萃取物的水解产物，其特征在于：该菠萝酶与该水萃取物的重量比是介于1：50至1：300之间。
4.根据权利要求1所述的莲雾水萃取物的水解产物，其特征在于：在该方法中，该水萃取物在进行水解处理后可进一步进行一固液分离处理，俾以移除固体部分。
5.一种组合物，其特征在于：该组合物包含有一如权利要求1至4中任一项所述的莲雾水萃取物的水解产物。
6.根据权利要求5所述的组合物，其特征在于：该组合物进一步包含有一药学上可接受的载剂或一化妆品上可接受的佐剂。
7.一种如权利要求1至4中任一项所述的莲雾水萃取物的水解产物供应用于制备一用来美白皮肤之医药品或化妆品的用途。
8.一种如权利要求1至4中任一项所述的莲雾水萃取物的水解产物供应用于制备一用来提升皮肤的保湿能力之医药品或化妆品的用途。
9.一种如权利要求1至4中任一项所述的莲雾水萃取物的水解产物供应用于制备一用来促进伤口愈合之医药品或化妆品的用途。
10.一种如权利要求1至4中任一项所述的莲雾水萃取物的水解产物供应用于制备一用来抗氧化之医药品或化妆品的用途。
11.根据权利要求7至10中任一项所述的用途，其特征在于：该医药品是呈一供局部投药的剂型或口服投药的剂型。
12.根据权利要求7至10中任一项所述的用途，其特征在于：该化妆品是呈一供局部施用的形式。
13.一种用以制备一莲雾水萃取物的水解产物的方法，其特征在于：该方法包含下列步骤：
以水来萃取莲雾果实而得到一水萃取物；以及
令该水萃取物进行一使用一菠萝酶的水解处理，借此而得到用来美白皮肤、提升皮肤的保湿能力、促进伤口愈合和/或抗氧化的该莲雾水萃取物的水解产物。
14.根据权利要求13所述的方法，其特征在于：该莲雾果实与水的重量比是介于1：0.5至1：5之间。
15.根据权利要求13所述的方法，其特征在于：该菠萝酶与该水萃取物的重量比是介于1：50至1：300之间。
16.根据权利要求13所述的方法，其特征在于：该水萃取物在进行水解处理后可进一步进行一固液分离处理，俾以移除固体部分。
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