KR20140013791A - 진세노사이드 Ｒｈ2 및 진세노사이드 Ｒｇ3를 함유하는 기능성 화장료 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 인삼, 홍삼 및 산삼배양근으로부터 분리된 저분자 진세노사이드 Rh2 및 진세노사이드 Rg3를 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로서, 보다 구체적으로는 진세노사이드 Rh2 및 진세노사이드 Rg3를 2:8 ~ 4:6의 혼합비(w/w)로 포함하고, 진세노사이드 Rh2 및 진세노사이드 Rg3의 혼합물 총중량에 대해 고형분으로서 1~5중량%의 양으로 포함되었을 때, 아토피 피부염, 여드름 생성완화, 피부미백 및 주름개선 효과 등의 우수한 효과를 나타내는 화장료 조성물을 제공하는 것이다. 본 발명에 따른 화장료 조성물은 진세노사이드 Rh2 및 진세노사이드 Rg3를 단독으로 적용하였을 때보다 탁월한 피부 주름 개선 및 피부미백활성, 여드름 생성 완화와 아토피 피부염에 효과를 보인다.
또한, 본 발명의 화장제 조성물은 천연물질로서 식용 가능하므로 이를 유효성분으로 포함하는 본 발명의 조성물은 장기간 사용에도 안전한 이점이 있으며, 독성 및 부작용도 없다.

Description

진세노사이드 Ｒｈ2 및 진세노사이드 Ｒｇ3를 함유하는 기능성 화장료 조성물{Functional cosmetic composition comprising ginsenosides Rh2 and Rg3}

본 발명은 저분자 진세노사이드 Rh2 및 진세노사이드 Rg3를 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로서, 아토피 피부염, 여드름 생성완화, 피부미백 및 주름개선 효과 등 다양한 기능성을 갖는 화장료 조성물에 관한 것이다.

사람의 피부색을 결정하는 데는 여러 가지 요인들이 관여하는데, 그 중에서도 멜라닌 색소를 만드는 멜라노사이트(melanocyte)의 활동성이 가장 중요한 요인으로 인체 내의 멜라노사이트에서 타이로시나제 등의 여러 효소가 작용하여 생성되는 멜라닌이라는 흑색 색소이다. 이 멜라닌 색소의 형성에는 유전적 요인, 호르몬 분비, 스트레스 등과 관련된 생리적 요인 및 자외선 조사 등과 같은 환경적 요인 등이 영향을 미친다.

신체 피부의 멜라닌 세포에서 생성되는 멜라닌 색소는 검은 색소와 단백질의 복합체 형태를 갖는 페놀계 고분자 물질로서, 태양으로부터 조사되는 자외선을 차단하여 진피 이하의 피부기관을 보호해주는 동시에 피부 생체 내에 생겨난 자유 라디칼 등을 잡아주는 등 피부 내 단백질과 유전자들을 보호해주는 유용한 역할을 담당한다. 이와 같이 피부 내, 외부의 스트레스적 자극에 의해 생겨난 멜라닌은 스트레스가 사라져도 피부 각질화를 통해서 외부로 배출되기 전까지는 없어지지 않는 안정한 물질이다. 그러나 멜라닌이 필요 이상으로 많이 생기게 되면 기미, 주근깨 및 점 등과 같은 과색소 침착증을 유발하여 미용상으로 좋지 않은 결과를 가져오게 된다.

하지만, 종전부터 사용되어진 아스코르빈산, 코지산, 알부틴, 하이드로퀴논, 글루타치온 또는 이들의 유도체, 또는 타이로시나제 저해활성을 가진 물질들을 화장료나 의약품에 배합하여 사용하여 왔으나, 이들의 불충분한 미백효과, 피부에 대한 안전성 문제, 화장료에 배합 시 나타나는 제형 및 안정성의 문제 등으로 인해 그 사용이 제한되고 있다.

또한, 이러한 피부의 미백활성 이외에 피부의 가장 중요한 기능은, 외부로부터의 다양한 자극(화학물질, 대기오염물질, 건조한 환경, 자외선 등의 물리 및 화학적 자극인자)에 대한 방어와 피부를 통한 체내 수분의 과도한 발산을 막는 보호기능이며, 이러한 보호기능은 각질형성세포로 구성된 각질층이 정상적으로 형성되어 있을 때만 그 기능을 유지할 수 있다. 표피 중에서도 가장 바깥에 존재하는 각질층(Stratum corneum, horney layer)은 각질형성세포로부터 형성되며, 분화가 완결된 각질 세포와 그를 둘러싼 지질층으로 구성되어 있다(J.Invest. Dermatol. 1983; 80: 44-49). 각질세포는 표피 최하층에서 지속적으로 증식(proliferation)하는 기저세포(basal cell)가 단계적으로 형태 및 기능상의 변화를 거치며, 피부 표면까지 상승한 특징적인 세포이며, 일정 기간이 경과하면 오래된 각질세포는 피부에서 탈락되고 새로운 각질세포가 그 기능을 대신하게 되는데, 이러한 반복적인 일련의 변화 과정을 「표피 세포의 분화」 또는 「각화(keratinization)」라고 부른다. 각화과정 중에 각질형성세포는 천연보습인자(Natural Moisturizing Factor; NMF)와 세포간 지방질(세라마이드, 콜레스테롤, 지방산)을 생성하면서 각질층을 형성하여, 각질층이 견고함과 유연성을 가지게 하여 피부장벽(skinbarrier)으로서의 기능을 보유하게 한다. 그러나, 이러한 각질층은 과도한 세안이나, 목욕 등의 생활 습관적 요인, 건조한 대기, 오염물질 등의 환경적인 요인 및 아토피성 피부나 노인성 피부 같은 내인성 질환 등으로 인해 쉽게 그 기능이 손실될 수 있으며, 실제적으로 현대에 들어서 더욱 늘어난 여러 요인들로 인해 최근에는 건조피부증상 및 이로 인한 제반 장해를 호소하는 사람들이 점점 증가하고 있는 추세이다. 따라서, 적절한 피부수분을 유지하기 위하여 외부로부터 수분을 공급하거나, 체내로부터의 수분 손실을 방지하기 위한 연구가 많이 진행되어 왔으며, 실제로 수분보유능력이 있는 여러 종류의 보습제(moisturizer)가 개발되어 주로 화장품 영역에서 많이 사용되고 있다.

그러나, 생활환경 중에 인간에 대한 위해 요인이 점점 증가하고, 노령인구가 급격히 늘어나면서, 각질층의 생성-탈락속도(turnover rate)가 늦어지고, 각질형성세포의 지질합성능력이 저하되거나, 표피에서 정상적인 세포의 분열, 성숙 및 분화가 원활하지 않음으로써, 각질층의 보습인자와 지질의 양이 감소되어 정상적인 각질층의 기능을 유지하지 못하는 상태, 즉 피부장벽기능이 와해된 상태의 피부를 갖고 있는 인간들이 점점 증가하는 추세에 있다.

이러한 비정상적인 표피세포의 분열, 분화로 인해 피부는 피부건조증, 아토피 및 건선 등의 다양한 피부 질환을 유발하게 되며, 이러한 제 질환들은 자체로 수분 보유 기능만을 갖는 통상적인 보습제 만으로는 그 증상을 약간 완화시킬 수는 있으나, 근본적인 치유를 기대하기는 어려운 실정이다.

이러한 보습작용과 함께 피부외용에 있어서 종래부터 문제가 되어지고 있는 여드름은 '모낭-피지선 단위 조직'에서 발생하는 피부 질환의 하나로서, 인체의 안면, 특히 볼과 이마에 주로 발생하는 모낭염(毛囊炎)을 말한다. 일반적으로, 여드름은 모공의 협소화나 협착 또는 폐색에 의해 피지선에서 만들어지는 피지가 원할히 배출되지 못하고 '모공-피지선 단위 조직'내에 갇히기 때문에 생겨나게 된다. 여드름의 원인은 다양하지만, 호르몬 이상에 의한 피지의 과다 생성, 모공의 막힘 및, 균의 감염에 의한 경우로 대별(大別)될 수 있다.

구체적으로는, 사춘기에 분비되기 시작하는 '안드로겐'이라는 남성호르몬은 피지선에 작용하여 피지의 생성을 촉진시키는 원인이 되며, 그 외에도 피부의 각질층 비후화를 초래하여 원활한 피부 신진 대사를 저해함으로써 피부에 다량의 때가 생성되게 하고 이로 인하여 모공이 막히게 되어 여드름이 유발된다. 안드로겐은 남성호르몬이지만 부신에서도 분비가 되므로 여자에게서도 여드름이 생성된다. 이 외에도 피지가 과다 분비되어 여드름을 유발하게 되는 원인으로서는 프로피오네박테리움 아크네 (Propionebacterium acne) 등과 같은 미생물의 감염, 증식을 들 수 있으며, 상기한 미생물 등은 막힌 모공 내의 혐기적 환경 하에서 모공 내의 피지를 유리지방산으로 분해하고, 이에 따라 유리지방산이 피부에 심한 지극을 주어 염증을 일으키게 되고 그 결과 발적과 농을 형성하게 된다. 또한, 진드기와 같은 모낭충(Demodex follicularum)도 피지를 먹이로 하여 살며, 주로 코나 T 존(zone) 부위의 모공 둘레에 기생하여 여드름을 유발하고, 모낭충으로 인하여 유발되는 여드름은 주위 피부에까지 염증을 확산시키므로 피부가 붉게 변할 수도 있다.

이러한 여드름의 치료법은, 먼저 피지 분비를 줄여 준 다음, 모낭과 각질이 단단해 지지 않게 연화시키며, 모낭 내의 세균을 줄여주고, 여드름이 염증으로 발전하는 것을 차단하는 방법으로 이루어지고 있다. 여드름 치료에 사용되는 대표적인 물질로는, 피지 형성 억제를 위한 항남성 호르몬, 항염증 작용을 나타내는 코르티코스테로이드 및 비스테로이드계 소염제, 여드름 균의 증식 억제를 위한 항생물질인 테트라사이클린이나 에리스로마이신 등을 들 수 있다(미국특허 제4,469,684호; 제5,045,533호). 또한, 비타민 A 또는 그 유도체를 함유하는 연고제도 널리 사용되고 있다. 그리고, 트레티노인(tretinoin: retinoic acid)은 면포의 형성을 억제하며 이미 나와 있는 면포의 수를 줄여 주는 것으로 알려져 있고, 주로 각질을 박리시켜 모낭이 파괴되지 않도록 함으로써 염증으로 발전하는 것을 차단함과 아울러, 막혀있는 모공을 열어줌으로써 모낭 내에서의 세균의 증식을 억제하므로, 면포성 여드름의 치료에 효과적이며 보통 0.01-0.05중량% 함량의 크림이나 젤 형태로 사용된다.

그러나, 여드름 치료에 사용되는 상기한 종래의 물질들은 여드름 균의 증식 억제·치료 효과 외에 심한 부작용을 수반할 수 있다. 항남성 호르몬의 경우에는 여드름 발생에 영향을 주는 남성 호르몬인 안드로겐의 감소에는 효과가 있으나 그 치료 대상은 여성에만 국한될 수 밖에 없으며, 스테로이드계 소염 진통제의 경우 에는 그 부작용이 전신으로 나타나게 되는 경우가 있고, 항생제의 사용은 피부에 상재하는 유용 미생물도 동시에 제거할 뿐 아니라 소화 장애, 광독성 피부염, 2차 감염, 질염, 항문 주위 소양증 등과 같은 다양한 부작용이 일어날 수 있으며, 비타민 A 또는 그 유도체와 같은 물질들은 일반적으로 효과는 좋으나 입술이나 구강점막 등이 건조해지고 손바닥의 각질이 벗겨지거나 전신 가려움증 등과 같은 부작용이 나타날 수 있으며, 특히 임신했을 때 과다하게 복용하면 기형 발생의 우려가 있으므로 임신 전 및 임신 중에는 복용해서는 안 되고, 대사에 의한 체외 배출 시간이 장기간이어서 복용이 끝난 후에도 1개월 정도 주의를 요하는 등의 문제점이 있다.

따라서 상기의 문제점을 해결하기 위해서는 천연물을 이용한 천연 피부미용제를 이용하여야 하는데 그 중 인삼(Panax Ginseng C.A. Mayer)은 한의학뿐만 아니라 민간요법으로 널리 알려져 사용되어온 대표적인 약용식물로서 오가피(Araliaceae)과에 속하는 다년생 초본류이다. 인삼은 전분 등의 탄수화물이 60~70%로 높은 구성비를 나타내며 triterpenoid saponins을 비롯한 polyacetylenes, phenolic compounds, polysaccharides, peptidoglycans등의 성분을 함유하고 있다. 또한 그 외에 단백질과 펩티드(Protein, Peptides), 알칼로이드 성분(Alkaloids), 정유성분과 식물스테롤(Essential oil, Phytosterol), 아미노산, 핵산, 비타민, 리그난 성분, 미네랄(Minerals)등이 함유되어 있다.

대개 인삼의 생리활성은 사포닌, 다당체 및 펩타이드류에 의한 것으로 ginsenoside를 중심으로 많은 연구가 이루어지기 시작하여 중추신경계 조절, 기억력, 학습효능개선 및 항스트레스 작용을 하며 면역기능 조절작용, 암세포 증식 및 전이 억제 작용, 항산화 작용, 항당뇨 작용, 간기능 개선, 방사선 방어 작용, 혈전형성 억제 등의 다양한 약리작용이 과학적으로 입증됨에 따라 동양 한방 뿐 아니라 현대의학에서도 의약품 및 기능성 보조식품으로 그 수요가 증가하고 있다.

인삼의 주요 유효성분은 사포닌 진세노사이드류(ginsenosides)로 알려져 있으며, 수삼, 백삼 및 홍삼에 공통적으로 함유되어 있는 약효성분은 18종, 수삼과 백삼에만 함유되어 있는 약효 성분으로는 4종으로 알려져 있으며, 홍삼에만 함유되어 있는 약효성분은 8종으로 Rs1, Rs2, Rg3, Rh2, N-R4, Rg2, Rh1 및 Rh4 이다.

진세노사이드에 대한 피부와 관련된 효능으로는 자외선에 의한 피부세포 사멸 감소 및 자외선에 의한 각질 세포 보호(J. Invest. Dermatol. 121:607-613, 2003), 경구 투여를 통한 주름생성 예방(J. Ginseng Res. 31:86-92, 2007), 과각질화 방지(Korean J. Dermatol. 28(4):434-440, 1990), 피부 탄력성 및 수화성 증가(Fitoterapia 57(1):15-28, 1986), Fitoterapia 57(4):217-222, 1986), 콜라겐 분해 억제(Mol. Cells. 9(5):476-483, 1999), 미백효과(Journal of the society of cosmetic of korea. 27(2)45-56, 2001)등이 연구 발표 되었다.

특히 인삼의 피부에 관련된 효능으로는 피부섬유아세포(skin fibroblast)에서 콜라겐(collagen)과 피브로넥틱(fibronectin)과 같은 세포간질(Extracellular matrix)의 주요 성분의 합성을 증가시키고, 자연적 또는 광노화에 의한 피부의 간질 성분의 분해에 영향을 주는 AP-1과 TGF-β1의 발현을 조절(J. Soc. Cosmet. Scientists Korea. 30(2):2521-2525, 2004)하며, 또한 진세노사이드(ginsenoside) Rg3를 다량 포함하는 흑삼 추출물을 함유한 화장제가 피부의 주름을 개선하는 효과가 있음(Journal of the Korea Academia-Industrial cooperation Society, 11(9):3325-3329, 2010)이 발표되었다. 또한 진세노사이드(ginsenoside) Rg3가 피부 개선 효과가 있음을 확인하여 단일 진세노사이드(ginsenoside) Rg3를 함유하는 화장료 조성물이 특허 출원(제2003-65882호)되었다.

진세노사이드 Rh2는 자외선 노출에 의한 피부세포 자멸사(apoptosis)부터 피부 보호 및 표피세포의 증식효과(Journal of cellular biochemistry, 112(1):330-340, 2011)가 있음이 발표되었고, 진세노사이드(ginsenoside) Rh2가 다량 함유된 홍삼 추출물의 항염증 작용을 통해 아토피 피부염에 효과가 있음(International immunopharmacology, 11(2):280-285, 2011)이 발표된 바 있다. 또한 단일 진세노사이드 Rh2를 유효성분으로 포함하는 피부 외관 개선용 화장료 조성물이 특허 출원(제2009-0050911호)된 바가 있다.

한편, 진세노사이드 Rg3 및 Rh2가 너무 적게 함유되어 있을 때는 아토피 피부염, 여드름 생성완화, 피부미백 및 주름개선 등의 효과를 기대할 수 없으며, 많이 함유되어 있을 때는 화장료 조성물 가격이 상승되어 경제성이 낮아지는 문제점이 있다.

따라서, 진세노사이드 Rg3 및 Rh2를 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물의 최적 효과를 얻기 위하여 Rg3 및 Rh2의 최적 사용량에 대한 연구가 필요한 실정이다.

따라서 본 발명의 목적은 인삼, 홍삼 및 산삼배양근으로부터 얻어지는 저분자 진세노사이드 Rh2 및 진세노사이드 Rg3를 2:8 ~ 4:6의 혼합비(w/w)로 포함하고, 진세노사이드 Rh2 및 진세노사이드 Rg3의 혼합물은 화장료 조성물 총중량에 대해 고형분으로서 1~5중량%의 양으로 포함하는 아토피 피부염, 여드름 생성완화, 피부미백 및 주름개선 등의 우수한 효과를 나타내는 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 유효성분으로서 진세노사이드 Rh2 및 진세노사이드 Rg3를 2:8 ~ 4:6의 혼합비(w/w)로 포함하고, 진세노사이드 Rh2 및 진세노사이드 Rg3의 혼합물은 화장료 조성물 총중량에 대해 고형분으로서 1~5중량%의 양으로 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 화장료 조성물은 아토피 피부염 완화용으로 사용되는 것일 수 있다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 화장료 조성물은 여드름 생성 완화용으로 사용되는 것일 수 있다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 화장료 조성물은 피부 미백용으로 사용되는 것일 수 있다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 화장료 조성물은 주름 개선용으로 사용되는 것일 수 있다.

또한, 본 발명의 화장료 조성물은 유연화장수, 영양화장수, 마사지크림 또는 팩의 제형으로 제조될 수 있다.

본 발명에 따른 진세노사이드 Rh2 및 진세노사이드 Rg3를 2:8 ~ 4:6의 혼합비(w/w)로 포함하고, 진세노사이드 Rh2 및 진세노사이드 Rg3의 혼합물은 화장료 조성물 총중량에 대해 고형분으로서 1~5중량%의 양으로 포함하는 화장료 조성물은 진세노사이드 Rh2 및 진세노사이드 Rg3를 단독으로 적용하였을 경우보다 탁월한 피부 주름 개선 및 피부미백활성, 여드름 생성 완화와 아토피 피부염에 효과를 보인다.

또한, 본 발명의 화장제 조성물은 천연물질로서 식용 가능하므로 이를 유효성분으로 포함하는 본 발명의 조성물은 장기간 사용에도 안전한 이점이 있으며, 독성 및 부작용도 없다.

도 1은 진세노사이드 Rh2와 Rg3의 농도별 세포증식효과를 그래프로 나타낸 것이다.
도 2는 진세노사이드 Rh2와 Rg3의 농도별 엘라스타아제 활성 저해능 측정을 통해 분석한 결과를 나타낸 것이다.
도 3은 진세노사이드 Rh2와 Rg3의 농도별 멜라닌 합성 저해능 측정을 통해 분석한 결과를 나타낸 것이다.

본 발명은 인삼, 홍삼 및 산삼배양근으로부터 수득한 저분자 진세노사이드 Rh2 및 진세노사이드 Rg3를 2:8 ~ 4:6의 혼합비(w/w)로 포함하고, 진세노사이드 Rh2 및 진세노사이드 Rg3의 혼합물은 화장료 조성물 총중량에 대해 고형분으로서 1~5중량%의 양으로 포함하는 화장료 조성물이 피부 주름 개선 및 피부미백활성, 여드름 생성 완화와 아토피 피부염에 효과가 있다는 사실을 확인함으로써, 진세노사이드 Rh2 및 진세노사이드 Rg3를 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물을 제공함에 그 특징이 있다.

최근 많은 여성들 뿐만 아니라 남성의 경우에도 미용에 대한 관심이 급증하면서 피부미백, 여드름, 아토피 피부염 및 주름 개선을 위한 다양한 기능성 화장품들이 출시되고 있다. 그러나 시중에 판매되고 있는 대부분의 기능성 화장품의 경우, 합성 화합물을 사용한 제품들이 대부분인데 합성화합물이 첨가된 화장품은 피부에 따라 민감한 피부반응을 유발시킬 수 있어, 다양한 피부 부작용을 초래하는 문제점이 있다.

이에 본 발명자들은 천연물 유래 피부에 유용한 기능성 효과를 갖는 물질을 연구하고 있던 중, 인삼, 홍삼 및 산삼배양근 유래 저분자 진세노사이드 Rh2 및 진세노사이드 Rg3에 피부 주름 개선 및 피부미백활성, 여드름 생성 완화와 아토피 피부염에 효과가 있다는 사실을 확인함으로써 인삼, 홍삼 및 산삼배양근 유래 저분자 진세노사이드 Rh2 및 진세노사이드 Rg3를 화장료 용도로 사용할 수 있음을 확인하였다.

따라서 본 발명은 인삼, 홍삼 및 산삼배양근 유래 저분자 진세노사이드 Rh2 및 진세노사이드 Rg3를 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물을 제공할 수 있는데, 유효성분으로서 진세노사이드 Rh2 및 진세노사이드 Rg3를 2:8 ~ 4:6의 혼합비(w/w)로 포함하고, 진세노사이드 Rh2 및 진세노사이드 Rg3의 혼합물 총중량에 대해 고형분으로서 1~5중량%의 양으로 함유할 수 있다.

본 발명에서 진세노사이드 Rh2 및 진세노사이드 Rg3가 고형분으로 사용되어 지는 이유는 액상 등 다른 제형에 비해 보다 정확한 양을 투입할 수 있기 때문이고, 진세노사이드 Rh2 및 진세노사이드 Rg3의 혼합물은 화장료 조성물 총중량에 대해 진세노사이드 Rh2 및 진세노사이드 Rg3를 2:8의 혼합비(w/w) 이하일 경우에는 기능성 화장료로서 효과가 나타나지 않으며, 진세노사이드 Rh2 및 진세노사이드 Rg3를 4:6의 혼합비(w/w) 이상일 경우에는 화장료 조성물 가격이 상승되어 경제성이 낮아지는 문제점이 있다. 일반적으로 진세노사이드 Rh2는 진세노사이드 Rg3보다 얻어지는 수율이 적기 때문에 기능성 화장료로서의 효능과 경제성을 고려하였을 때 진세노사이드 Rh2 및 진세노사이드 Rg3의 혼합비를 2:8 ~ 4:6으로 하는 것이 바람직하다.

또한, 진세노사이드 Rh2 및 진세노사이드 Rg3의 혼합물 총중량에 대해 고형분으로서 1중량% 이하일 경우에는 기능성 화장료로서 효과가 나타나지 않으며, 5중량% 이상의 경우에는 항균 작용을 하여 본 발명의 연구에 사용된 세포 등에 독성으로 작용할 수 있으며 화장료 조성물 가격이 상승되어 경제성이 낮아지는 문제점이 있다.

본 발명자들은 본 발명의 진세노사이드 Rh2와 Rg3를 처리 농도 별로 섬유아세포 증식 활성을 측정하였는데, 섬유아세포는 피부 진피 윗부분에 주로 많이 분포하며, 콜라겐, 엘라스틴, 글리코스아미노글리칸과 같은 구조물질을 합성하며 글리코스아미노글리칸은 진피층에 수분을 공급해 주는 가장 기본적인 물질로, 섬유아세포 증식 활성이 활발한 경우 주름 개선 효과를 나타낸다. 본 발명의 일실시예에 따르면, 진세노사이드 Rh2와 Rg3를 1 중량% 이상 5 중량% 이하 처리하였을 때 섬유아세포 증식 활성 효과가 급격이 증가하는 것으로 나타났다(도 1 참조).

또한, 본 발명자들은 본 발명의 진세노사이드 Rh2와 Rg3의 혼합 농도별 콜라겐 합성량을 측정하였는데, 콜라겐은 피부, 혈관, 뼈, 치아, 근육 등 모든 결합조직의 주된 단백질로서, 피부엔 콜라겐이 많으면 수분 조절이 되고, 피부에 탄력이 생겨 주름 개선에 효과적이다. 본 발명의 일실시예에 따르면, 진세노사이드 Rh2와 Rg3를 각각 처리하였을 경우 약 22.02% 및 42.12%의 콜라겐 합성 촉진 효과를 나타내었으며, 그 중 본 발명의 Rh2와 Rg3를 혼합하여 사용하였을 경우 1 중량% 이상 5 중량% 이하의 농도에서 약 67.92%의 높은 콜라겐 합성 촉진 효과가 있는 것으로 나타났다(표 1 참조).

본 발명자들은 본 발명의 진세노사이드 Rh2와 Rg3를 혼합하여 농도별로 엘라스타제 저해 효과를 측정하였는데, 엘라스타제는 탄력섬유 분해효소로, 탄력을 저하시키고 주름을 생성시킨다고 알려져 있다. 본 발명의 일실시예에 따르면, 진세노사이드 Rh2와 Rg3를 단독으로 처리 시보다 진세노사이드 Rh2와 Rg3를 혼합하여 1 중량% 이상 5 중량% 이하의 농도 처리하였을 때 엘라스타제 저해 효과가 높아졌다(도 2 참조).

본 발명자들은 본 발명의 진세노사이드 Rh2와 Rg3를 처리 농도 별로 멜라닌 생성 저해율을 측정 하였는데, 멜라닌은 일정량 이상의 자외선을 흡수하여 유해한 자외선이 인체 내로 침투하는 것을 차단하여 인체를 보호하는 역할을 하기도 하나 흑갈색 색소로서 멜라닌이 피부에 많으면 피부가 검게 된다. 본 발명의 일실시예에 따르면, 진세노사이드 Rh2와 Rg3를 0.1 중량%에서 5 중량%로 처리하였을 때 멜라닌 생성 저해율이 높아졌다.

본 발명자들은 또한 Rh2와 Rg3의 혼합물이 피부미백 활성이 존재하는지 확인하기 위해 티로시나아제 저해능을 측정하였는데, 진세노사이드 Rh2와 Rg3를 단독으로 사용했을 때 보다 함께 사용하였을 때 더 높은 티로시나아제 억제 효과를 나타냈다(표 2 참조).

진세노사이드 Rh2와 Rg3가 여드름 생성을 억제할 수 있는 지 알아보기 위해 여드름균과 화농균에 대한 항균력을을 측정한 결과, 진세노사이드 Rh2와 Rg3를 함께 고농도를 처리하였을 때 높은 항균활성이 나타났다(표 3 참조).

나아가 본 발명자들은 본 발명의 진세노사이드 Rh2와 Rg3에 여드름 개선 및 아토피 피부염 개선 효과가 있는지를 알아보기 위하여 여드름을 보유하고 있는 사람 및 아토피 피부염이 있는 사람들을 대상으로 관능평가를 실시한 결과, 진세노사이드 Rh2와 Rg3의 혼합 농도가 1중량% 이상에서 높은 치료 효과를 나타냈다(표 4 내지 표 5 참조).

따라서 이러한 결과를 토대로 본 발명자들은 본 발명에서 수득한 진세노사이드 Rh2 및 진세노사이드 Rg3를 아토피 피부염 완화, 여드름 생성 완화, 피부 미백 및 주름 개선 효과를 위한 기능성 화장료의 제조에 사용할 수 있다는 사실을 알 수 있었다.

그러므로 본 발명은 진세노사이드 Rh2 및 진세노사이드 Rg3를 유효성분으로 포함하는 기능성 화장료 조성물을 제공할 수 있다.

본 발명의 조성물이 화장료 조성물로 제조되는 경우, 본 발명의 조성물은 상술한 인삼, 홍삼 및 산삼배양근으로부터 분리된 저분자 진세노사이드 Rh2 및 진세노사이드 Rg3 뿐만 아니라, 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

또한, 본 발명은 본 발명의 화장료 조성물을 인간의 피부에 도포하는 것을 특징으로 하는 화장방법을 제공한다.

본 발명의 화장 방법은 본 발명의 화장료 조성물을 인간의 피부에 도포하는 모든 화장 방법을 일컫는다. 즉, 화장료 조성물을 피부에 도포하는 당업계에 공지된 모든 방법이 본 발명의 화장 방법에 속한다.

본 발명의 화장료 조성물은 단독 또는 중복 도포하여 사용하거나, 본 발명 이외의 다른 화장료 조성물과 중복 도포하여 사용할 수 있다. 또한 본 발명에 따른 피부 주름 개선 효과가 우수한 화장료 조성물은 통상적인 사용방법에 따라 사용될 수 있으며, 사용자의 피부 상태 또는 취향에 따라 그 사용횟수를 달리할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물이 비누, 계면활성제 함유 클렌징 또는 계면활성제 비함유 클렌징 제형일 경우, 피부에 도포한 후 닦아내거나 떼거나 물로 씻어낼 수도 있다. 구체적인 예로서, 상기 비누는 액상비누, 가루비누, 고형비누 및 오일비누이며, 상기 계면활성제 함유 클린징 제형은 클렌징폼, 클렌징 워터, 클렌징 수건 및 클렌징 팩이며, 상기 계면활성제 비함유 클렌징 제형은 클렌징크림, 클렌징 로션, 클렌징 워터 및 클렌징 겔이며, 이에 한정되는 것은 아니다.

이하 본 발명을 실시예에 의하여 더욱 상세하게 설명한다. 이들 실시예는 단지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 국한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.

< 실시예 1>

인삼, 홍삼 및 산삼배양근 유래 Rh2 및 Rg3 제조

인삼, 홍삼 및 산삼배양근을 정제수로 세척한 후 건조하고 작은 조각으로 파쇄한 후, 건조 중량 10배의 에탄올을 용매로 사용하여 추출 후 수득한 추출물에서 인삼조사포닌을 분리하였다. 조사포닌 10g을 50% 초산 35ml에 용해시키고 2시간 동안 70℃에서 교반하면서 가열한 후 반응 혼합물을 상온까지 식혔다. 반응액을 증류수로 300ml로 희석하고 n-부탄올 150ml로 3회 추출하였다. 추출액을 합하여 포화 소디움바이카보네이트 용액으로 2회 세척한 다음 n-부탄올층을 감압 농축시켰다. 반응 혼합물을 실리카겔 칼럼크로마토그라피(클로로포름:에탄올:물=100:30:10, 하층)으로 분리하여 진세노사이드 Rh2 및 Rg3를 얻었으며, 얻어진 진세노사이드 Rh2 및 Rg3를 3:7의 비율로 함유하여 사용하였다.

< 실시예 2>

주름 개선 효과 측정

<2-1> 섬유아세포 증식 효과 측정

본 발명의 발명자들은 Rh2 및 Rg3에 주름 개선 효과가 있는 지를 알아보기 위해, 인간의 피부 섬유아세포인 CCD986sk를 이용하여 측정하였다. 섬유아세포 CCD986sk를 96웰 마이크로 플레이트의 각 well에 5x10³ cell의 농도가 되도록 섬유아세포를 분주하고 우태아 혈청(FBS)이 함유된 DMEM배지에 24시간 동안 37도에서 배양시켰다. 상기 실시예 1의 방법으로 얻어진 진세노사이드 Rh2와 Rg3의 농도가 각각 0.1%, 0.5%, 1%, 2%, 5%, 10% 로 만든 진세노사이드 혼합물을 섬유아세포 배양 배지에 100 ㎕ 첨가한 후 CO₂ 인큐베이터에서 37도의 조건으로 72시간 배양한 후, 0.2% MTT용액을 각 well에 50 씩 첨가하여 4시간동안 정치하였다. 이후 상층액을 제거하고 150 의 DMSO(dimethyl sulfoxide)를 첨가한 후 10분간 진탕하여 포르마잔(formazan)을 녹였다. 이후 DMSO에서 녹은 포르마잔(formazan)을 마이크로 플레이트 판독기(Microplate reader)를 이용하여 570nm에서 흡광도를 측정하였고,이를 대조군의 흡광도와 비교하여 섬유아세포 증식효과를 나타내었다.

세포증식효과(%)=(실험군의 흡광도-대조군의 흡광도)/대조군의 흡광도*100

그 결과, 진세노사이드 Rh2와 Rg3를 1%의 농도로 단독으로 처리 시 각각 104.4%, 109.9%의 섬유아세포 증식효과를 나타내었으나, 두 가지 성분을 혼합하여 농도별로 처리 시 그 효과가 더욱 더 증가되는 경향을 보였으며 특히, 1% 이상 5% 이하의 농도에서 그 효과가 급격히 증가되는 경향을 보였고, 10%의 농도로 처리 시 다시 섬유아세포 증식효과가 감소하는 것으로 나타나, 진세노사이드 Rg2와 Rh2를 1% 이상 5% 혼합 처리 시, 그 효과가 특이적으로 증가하는 것을 확인할 수 있었다(도 1 참조).

<2-2> 콜라겐 합성량 측정

상기 실시예 1의 방법으로 얻어진 진세노사이드 Rh2와 Rg3의 농도가 각각 0.1%, 0.5%, 1%, 2%, 5%, 10% 로 만든 진세노사이드 혼합물을 PBS 완충용액에 녹인 후, 섬유아세포 증식효과 측정에서 기술한 조건에서 배양된 CCD986sk 세포주의 배지를 혈청이 첨가되지 않은 DMEM 배지로 교체한 다음 최종농도가 0-50 μg/ml 되도록 CCD986sk 세포배양 플레이트에 첨가하고 24시간, 48시간 동안 배양하였다. 배양한 후 각각의 세포배양액을 채취하고 콜라겐 단백질 측정 키트 (Takara Shuzo Co., Ltd, Japan)를 사용하여 채취한 배양액에 존재하는 프로콜라겐 타입 I C-펩타이드의 양을 측정함으로서 콜라겐 생성 증가효과를 조사하였다.

1차 콜라겐 항체를 96 well 마이크로 플레이트에 도포시킨 후 각각의 채취된 CCD986sk 세포배양액을 넣고 37℃에서 3시간 동안 반응시키고, 세포배양액을 제거한 후 PBS 완충용액을 사용하여 3회 세척하였다. 각 웰에 발색시약을 첨가한 후 상온에서 15분간 반응시킨 후 1N 황산용액을 가해 반응을 중지시키고, ELISA reader를 이용하여 450nm 에서 흡광 값을 측정하였다. 표준용액으로부터 얻어진 표준곡선에 상기의 방법으로 얻어진 흡광 값을 대입하여 각 시료가 첨가된 CCD986sk 세포배양액에서의 콜라겐 생성량을 산출하였다. 콜라겐 생성 합성율은 아래의 계산식으로부터 얻어졌다.

콜라겐 합성 합성율 (%)=[(Ax100)/B]-100

(A:시료를 첨가한 배양액의 콜라겐 생성량, B:시료가 첨가되지 않은 배양액의 콜라겐 생성량)

진세노사이드 Rh2와 Rg3의 혼합 농도별 콜라겐 합성량을 측정한 결과, 진세노사이드 Rh2와 Rg3를 각각 처리하였을 경우 약 22.02% 및 42.12%의 콜라겐 합성 촉진 효과를 나타내었으며, 그 중 본 발명의 Rh2와 Rg3를 혼합하여 사용하였을 경우 1%이상 5% 이하의 농도에서 약 67.92%의 높은 콜라겐 합성 촉진 효과를 보이는 것을 알 수 있었다. 또한, 10%이상의 농도에서 고농도로 처리하였을 경우에도 효과가 감소하는 것을 확인하여, 본 발명의 Rh2와 Rg3를 혼합하여 사용할 경우 단일 진세노사이드로 처리하는 것보다 시너지 효과가 우수하지만 10%이상 처리 시에는 오히려 효과가 감소하는 것을 알 수 있었다(표 1 참조).

<2-3> 엘라스타아제 활성 저해능

1% 이상 농도를 함유한 진세노사이드 Rg3와 Rh2 추출액에 의한 엘라스타아제 활성 저해 효과를 돼지췌장 엘라스타아제(porcine pancreas elastase , Sigma Co., Ltd 미국)와 기질인 N-succinyl-(L-Ala)3-ρ-nitroanilide (Sigma Co., Ltd 미국)를 사용한 효소반응으로 조사하였다. 진세노사이드 Rh2, Rg3 용액을 0.5 ml 씩 시험관에 넣고 100mM Tris-HCl 완충용액 (pH 8.0)에 녹인 돼지췌장 엘라스타아제(1U/ml) 용액 0.5 ml을 가한 후 DMSO에 녹여 준비된 3.2μM N-succinyl-(L-Ala)3-ρ-nitroanilide를 0.1 ml 씩 첨가하여 잘 섞은 후 실온에서 20분간 반응시켰다. 엘라스티아제 활성은 기질로부터 생성되는 ρ-nitroanilide의 생성량을 분광광도계를 이용하여 410nm에서 측정하였으며, 엘라스타아제 활성 저해능은 시료용액의 첨가구와 무첨가군의 흡광도 감소율로 나타난다.

그 결과, 진세노사이드 Rh2와 Rg3를 단독으로 처리 시 각각 약 38%, 66%의 엘라스타제 저해 효과를 보였다. 또한 진세노사이드 Rh2와 Rg3를 혼합하여 농도별로 처리하였을 경우 0.5%의 농도에서 77.3% 의 효과를 보이며, 0.5% 이상의 농도에서도 약 77~78%로 그 효과가 매우 높아지는 것을 확인할 수 있다. 하지만 10%이상의 고농도로 처리하였을 경우에는 다른 실험에서와 마찬가지로 활성이 감소하는 경향을 보이는 것을 확인하였다. 따라서 진세노사이드 Rh2와 Rg3를 혼합하여 처리 시 1~5% 이상의 농도에서 가장 효과적인 엘라스타제 저해 활성을 나타낸다고 볼 수 있다(도 2 참조).

< 실시예 3>

피부미백 활성 측정

<3-1> 멜라닌 생성 억제 활성

본 발명의 진세노사이드 Rh2와 Rg3의 혼합물이 피부미백에 활성이 존재하는지 확인하기 위해 멜라닌 생성 억제(Melanin synthesis inhibition activity)활성실험을 하였다. 실험 쥐 유래 멜라닌세포(melanocyte)인 Clone-M3세포는 멜라닌을 생성한다. 멜라닌은 표피 기저층에 존재하는 멜라닌세포(melanocyte) 내의 소기관인 멜라닌소체(melanosome)에서 생합성되며 이는 가시광선 영역대의 흡광도를 측정함으로써 생성량을 비교할 수 있다. CloneM-3세포 접종 후 3일간 시료를 처리하고 배지를 제거한 다음 세포를 PBS로 세척하고, 각 웰당 1㎖의 1N NaOH를 첨가한 후 교반하여 세포막을 융해함으로써 멜라닌성분을 녹여 나오게 하여, 가시광선 영역 대 중 가장 파장이 짧은 푸른색 가시광선 영역인, 400㎚에서 흡광도를 측정함으로써 생성량을 비교하였다.

멜라닌세포(melanocyte)인 Clon-M3 세포를 이용하여 시료 투여 시 멜라닌 생합성과 세포 생존율에 미치는 영향을 관찰하기 위하여 진세노사이드를 농도별로 처리하고 24 시간이 지난 후, 멜라닌 생성 저해율을 측정 하였다.

그 결과, 0.1%에서 5% 로 갈수록 저해율이 높아지는 것을 확인할 수 있었으며, 최종적으로 약 42%에 달하는 저해율을 보였다. 하지만 10% 이상의 농도에서는 오히려 그 효과가 감소하였으며, 효과가 1%의 농도로 처리하였을 경우와 크게 다르지 않다는 것을 알 수 있었다.

<3-2> 티로시나아제 저해능 측정

본 발명의 진세노사이드 Rh2와 Rg3의 혼합물에 피부미백 활성이 존재하는지 확인하기 위해 티로시나아제 저해능을 측정하였으며, 티로시나아제(Tyrosinase)억제효과는 dopachrome방법을 이용하여 측정하였다. 150㎕의 mushroom tyrosinase, 225㎕의 2.5mM L-tyrosine, 225㎕의 0.4M hepesbuffer(pH 6.8), 그리고 300㎕의 에탄올용액 혹은 시료 (1㎎/㎖)용액을 섞은 후 배양 전과 15분간 배양 후 각각의 흡광도를 475㎚에서 측정하여 억제되는 정도를 살펴보았다. 티로시나아제의 억제 정도는 다음과 같이 계산하였다.

티로시나아제 억제(%)=(D-C)-(B-A)/(D-C)×100

(여기서, A와 B는 각각 시료가 첨가된 용액의 배양 전과 배양 후의 흡광도이며, C와 D는 각각 시료를 넣지 않은 용액 (기준 용액)의 배양 전과 배양 후의 흡광도이다. 이들 티로시나아제 억제효과는 100으로 나타날 때 완전한 억제를 의미하며, 0일 때 전혀 억제를 하지 못하는 것을 의미한다.)

티로시나아제의 억제 정도를 계산한 결과, 최종적으로 약 30%의 저해율을 나타내는 것을 확인할 수 있었으며, 또한, 도 3의 결과와 마찬가지로 단일 진세노사이드 처리보다 진세노사이드 Rh2와 Rg3를 복합적으로 사용하여 농도를 증가시킬 경우 더욱 높은 티로시나아제의 억제 결과를 얻을 수 있었다. 하지만 10% 이상의 농도에서는 오히려 그 효과가 감소하는 경향을 보였다(표 2 참조).

< 실시예 4>

여드름생성 억제 효과 측정

<4-1> 여드름 유발균인 프로피오네박테리움 아크네 ( Propionebacterium acne )와 화농균인 스태필로코크스 아아레우스 ( Staphylococcus aureus )의 항균력 측정

본 발명의 진세노사이드 Rh2와 Rg3가 여드름 생성을 억제할 수 있는 지 알아보기 위해 여드름균과 화농균에 대한 항균력을 측정하였다. 여드름균과 화농균을 브레인 하트 인퓨전(brain heart infusion, BHI) 배지 상에서 18시간 동안 배양한 후, 96 웰 플레이트(well plate)에서 단계적으로 희석한 시료를 첨가한 배지에 여드름 유발균인 프로피오네박테리움 아크네 (Propionebacterium acne)와 화농균인 스태필로코크스 아아레우스 (Staphylococcus aureus)를 각각 별개로 5%(10ul) 농도로 접종하였다. 접종 후, 37℃에서 24시간 배양하였고, 균주의 현미경 관찰을 통해 균체수를 측정하여 항균력을 측정하였다.

그 결과, 진세노사이드 Rh2와 Rg3의 농도가 고농도로 될수록 여드름 유발균인 프로피오네박테리움 아크네 (Propionebacterium acne)와 화농균인 스태필로코크스 아아레우스 (Staphylococcus aureus)의 농도가 감소하는 것을 확인할 수 있었다. 이러한 균들의 뛰어난 항균력은 사포닌 특유의 항균력이 높기 때문에 나타나는 효과로 보이지만, 단일 진세노사이드 처리 농도와 함께 Rh2와 Rg3를 혼합하여 사용할 경우의 1%농도를 비교해보면 혼합하여 사용할 경우 단일 진세노사이드를 처리할 때보다 더욱 높은 항균활성을 나타내는 것을 알 수 있었다(표 3 참조).

<4-2> 여드름 개선과 피지분지 감소 및 자극 유무 측정

여드름을 보유하고 있는 15명에게 상기 제조된 화장료 조성물을 한 달간 사용하게 하였다. 여드름 개선 척도는 1점에서 5점까지로 하고, 1점은 ‘아니다’, 3점은 ‘보통이다’, 5점은‘매우 그렇다’로 표기하도록 하였다. 실험 결과는 하기의 표 4에 12명의 평균점수로 표기하였다. 여드름 소멸 시기는 소멸이 판독된 일수를 기준으로 하였으며, 여드름 재발은 유무로 1개월 뒤의 결과를 기준으로 하였다. 피지 분비감소는 1점에서 5점까지로 하고, 1점은 ‘아니다’, 3점은 ‘보통이다’, 5점은 ‘매우 그렇다’로 표기하도록 하였다. 실험 결과는 하기 표 4에 15명의 평균점수로 표기하였다. 피부자극의 유무는 (자극반응을 보인 명수)/(총 시험자수)로 보았다.

그 결과, 진세노사이드를 사용하여 여드름 개선용 화장품을 개발할 경우 여드름 개선에 효과가 있는 것을 확인할 수 있었으며 또한, 피지분비에 대해 일부 감소가 있는 것을 확인 하였고, 피부 자극에 대해서는 매우 높은 농도에서만 일부에서 자극이 나타나는 것을 알 수 있었다.

여드름 개선에 대해 평균 4점 이상, 피지분비 감소에 대해 평균 3점 이상을 획득하여, 여드름 개선에 대해 우수한 효과가 있음을 알 수 있다. 또한 가장 적합한 농도로는 진세노사이드 Rh2와 Rg3의 혼합 농도가 약 1% 이상의 경우 여드름 개선에 효과가 뛰어나다는 것을 확인 하였지만 고농도의 10%로 함유하였을 경우 효과는 있지만 피부 자극이 생기는 것을 알 수 있었다(표 4 참조).

< 실시예 5>

아토피 피부염 개선 효과 측정

진세노사이드 Rg3와 Rh2의 아토피 피부염 개선효과를 확인하기 위하여 아토피 피부염이 있는 성인 남녀 전체 25명 중 10명은 진세노사이드 Rg3와 Rh2의 혼합 농도를 1%로 하여 도포하였고, 나머지 10명 중 5명은 진세노사이드 Rg3 1%를 도포하였으며, 나머지 5명은 진세노사이드 Rh2의 농도를 1%로 하여 도포하였다. 나머지 5명은 물을 대조군으로 하여 도포하였다. 1일 2회 1 ml씩 또는 1g씩 화장솜에 적셔 환부에 도포하는 방법으로 10일간 시험하였다. 10일간 도포 후 개선 효과는 매우 효과, 약간 효과, 효과 없음, 악화의 4단계로 수치화하였다.

그 결과, 진세노사이드 Rh2와 Rg3를 1%로 혼합하여 사용할 경우 약 80%가 효과가 있다고 답하였으며, 그에 반해 단일 진세노사이드 처리한 실험군의 경우 약 20~40% 정도로 약간 효과의 개선 효과를 나타내었으며 아토피 피부염에 유의적인 효과가 있음을 확인하였다. 상대적으로 물을 사용한 대조군 처리에서는 대부분이 효과가 없는 것으로 나타났다(표 5 참조).

< 실시예 6>

화장품 제형의 제조

<6-1> 유연화장수( skin )

본 발명의 진세노사이드 Rh2와 Rg3를 1%로 함유한 유연화장수(skin)를 아래의 성분비로 통상적인 방법으로 제조하였다.

<6-2> 영양화장수( lotion )

본 발명의 진세노사이드 Rh2와 Rg3를 1%로 함유한 영양화장수(lotion)를 아래의 성분비로 통상적인 방법으로 제조하였다.

<6-3> 영양크림

본 발명의 진세노사이드 Rh2와 Rg3를 1%로 함유한 영양크림을 아래의 성분비로 통상적인 방법으로 제조하였다.

<6-4> 팩

본 발명의 진세노사이드 Rh2와 Rg3를 1%로 함유한팩을 아래의 성분비로 통상적인 방법으로 제조하였다.

< 실시예 7>

제형의 안정성 시험

본 발명의 화장료 조성물의 제형 안정성 시험을 위해 상기 실시예 6에서 제형한 화장료 조성물을 불투명 초자 용기에 담아 45℃로 일정하게 유지되는 항온조에서 12주 동안 보관하고, 또한 불투명 초자 용기에 담아 4℃로 일정하게 유지하고 완전히 차광된 냉장고 내에서 12주 동안 보관한 후 변색 정도를 측정하였다. 제품의 변색 정도는 다음 6등급 (0 : 변화 없음, 1: 극히 조금 분리(변색), 2: 조금 분리(변색), 3: 조금 심하게 분리(변색), 4: 심하게 분리(변색), 5: 극히 심하게 분리(변색)) 으로 분류하여 평가하였다.

그 결과, 제조예의 화장료 조성물은 변색 및 분리현상이 일어나지 않아 본 발명에 의한 진세노사이드 Rg3와 Rh2를 1%이상의 농도로 함유하는 화장제의 제형의 안정성에는 이상이 없음을 알 수 있었다(표 6 참조).

< 실시예 8>

피부 안정성 시험

본 발명의 조성물에 대한 피부 안전성을 실험하기 위하여 상기 실시예6 에서 제형한 화장료 조성물을 대상으로 아래와 같은 안전성 시험을 수행하였다.

<8-1> 피부 일차 자극성 시험

등 쪽 피부의 털을 제거한 수컷 백색종 토끼의 피부에 상기 화장료 제조물을 1일 1회, 주 5회, 두께 2㎎/㎠ 이상이 되도록 도포했다. 도포는 2주간 수행하였으며, 털의 제거는 매주 최종 도포일에 수행하였다. 판정은 적용 후 24, 48, 72 시간에 일차 자극성 평정법으로 홍반 및 부종을 지표로 하여 수행하였다.

그 결과, 모든 실험 군에서 홍반 및 부종이 나타나지 않아 음성으로 판정되었다.

<8-2> 피부 누적 자극성 시험

등 쪽 피부의 털을 제거한 수컷 백색종 토끼의 피부에 상기 화장료 제조물을 1일 1회, 주 5회, 두께 2㎎/㎠ 이상이 되도록 도포했다. 도포는 2주간 수행하였으며, 털의 제거는 매주 최종 도포일에 수행하였다. 판정은, 각 도포일 및 최종 도포일의 다음날에 일차 자극성 평정법으로 홍반 및 부종을 지표로 해서 수행하였다.

그 결과, 모든 시험 군에서 제조물의 반복 도포에 의한 피부 자극성 반응은 관찰되지 않아 음성으로 판정되었다.

이제까지 본 발명에 대하여 그 바람직한 실시예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 특허청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.

Claims (6)

1. 유효성분으로서 진세노사이드 Rh2 및 진세노사이드 Rg3를 2:8 ~ 4:6의 혼합비(w/w)로 포함하고, 진세노사이드 Rh2 및 진세노사이드 Rg3의 혼합물은 화장료 조성물 총중량에 대해 고형분으로서 1~5중량%의 양으로 포함하는 화장료 조성물.
2. 제1항에 있어서,
   상기 화장료 조성물은 아토피 피부염 완화용으로 사용되는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
3. 제1항에 있어서,
   상기 화장료 조성물은 여드름 생성 완화용으로 사용되는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
4. 제1항에 있어서,
   상기 화장료 조성물은 피부 미백용으로 사용되는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
5. 제1항에 있어서,
   상기 화장료 조성물은 주름 개선용으로 사용되는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
6. 제1항 또는 제5항에 있어서, 상기 조성물은 유연화장수, 영양화장수, 마사지크림 또는 팩의 제형으로 제조됨을 특징으로 하는 화장료 조성물.

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