CN106793781A

CN106793781A - 用于防治植物中的真菌性病害和细菌性病害的组合物和方法

Info

Publication number: CN106793781A
Application number: CN201580041389.7A
Authority: CN
Inventors: J·基里斯特拉; J·S·纳姆纳斯; R·庞特森; U·沃申道夫-纽曼; C·沃特曼
Original assignee: Bayer CropScience LP
Current assignee: Bayer CropScience LP
Priority date: 2014-05-28
Filing date: 2015-05-28
Publication date: 2017-05-31
Anticipated expiration: 2035-05-28
Also published as: EP3148337A1; BR112016027807A2; US20150344905A1; EP3320776A1; US20170327840A1; BR112016027807B1; CN106793781B; US10221428B2; JP6670254B2; EP3148337B1; US9745597B2; WO2015184170A1; JP2017521369A

Abstract

本发明提供了一种杀真菌组合物，其包含协同有效量的枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的菌株和若干化合物之一。还提供了防治植物中的真菌性有害生物和/或细菌性有害生物的方法，所述方法包括将有效量的杀真菌组合物施用于植物、植物的部位和/或植物或植物部位生长的位置。

Description

用于防治植物中的真菌性病害和细菌性病害的组合物和方法

相关申请的交叉引用

本申请要求2014年5月28日提交的美国临时申请号62/004,064、2014年5月28日提交的美国临时申请号62/004,089和2015年5月4日提交的美国临时申请号62/156,814的优先权，所述临时申请的内容以引用的方式全文纳入本文。

技术领域

本发明涉及脂肽和若干化合物之一的协同结合物。本发明还提供使用协同组合物防治真菌性病害和细菌性病害的方法。

背景技术

杀真菌剂具有许多用途，包括用于作物保护；作为食品、饲料和化妆品的防腐剂；以及作为用于人类和兽医应用的治疗剂。作物产量降低、食源性疾病以及人类和动物的真菌性感染是发达国家和发展中国家共同的问题。

非核糖体肽(包括环状两亲性脂肽如表面活性素(surfactin)类、伊枯草菌素(iturin)类和芬枯草菌素(fengycin)类)由于其抗微生物特性而公知，并且已经用于作物保护领域。由于它们的作用方式，它们还在生物制药和其它生物技术应用中具有潜在用途。脂肽可通过多种土壤细菌的发酵获得，所述土壤细菌包括枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)和解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。脂肽通过破坏细胞膜而杀死真菌。因为这些化合物直接作用于膜脂而不是单位点蛋白靶标，所以预期对这些化合物的真菌抗性的发展潜力非常低。此外，脂肽对工人和消费者的危险低；事实上，用基于芽孢杆菌属(Bacillus)的产品处理的作物可以在处理当天收获。

由于其疏水性，当施用于植物、植物部位或土壤时，由枯草芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌产生的脂肽可能具有有限的生物利用度。增强这些脂肽的生物利用度的化合物可增加它们的抗真菌活性。如下文实施例28和29所示，分散于含水上清液中而不是保留在细胞沉淀中的能力增强可表明脂肽的生物利用度增加(参见图5和图6)。

需要具有增加的抗真菌活性的枯草芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌的产脂肽菌株的改进制剂。非常期望改进基于芽孢杆菌属的产品、尤其是不易产生真菌抗性的那些的功效。在本领域中持续需要对基于芽孢杆菌属的杀真菌制剂的这类改进。

发明内容

本发明涉及以协同有效量结合的枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的产脂肽菌株和若干化合物中的一种或更多种的增强制剂。本发明还提供了具有协同抗细菌活性的组合物。此外，提供了新的抗真菌组合物和使用这些组合物的方法。

在一些实施方案中，本发明提供了一种杀真菌组合物，其包含协同有效量的枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的产脂肽菌株；和式(I)的化合物：

其中

m为1和20之间的整数；

n为1和10之间的整数；

Z¹为CH₂、S、O和NH中的至少一个；以及

R¹为硫酸根、磺酸根、磷酸根或羧酸根；

或其几何异构体、光学异构体、对映异构体、非对映异构体、互变异构体，或农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。

在某些方面，枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的产脂肽菌株为枯草芽孢杆菌QST713、解淀粉芽孢杆菌菌株D747、枯草芽孢杆菌MBI600、解淀粉枯草芽孢杆菌变种(Bacillus subtilis var.amyloliquefaciens)FZB24或其具有相应菌株的所有鉴定特征的突变体。

在一个实施方案中，R¹为硫酸根。在另一个方面，Z¹为O。在某些方面，n为1和5之间的整数。在其他方面，m为8和16之间的整数。

在另一个实施方案中，所述化合物为具有下式的月桂基醚硫酸盐：

其中o为1和5之间的整数；

或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。

在一些方面，所述化合物为具有下式的3,6-二氧杂十八烷基硫酸盐(3,6-dioxaoctadecylsulfate)：

或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。

在其他方面，所述化合物为具有下式的3,6-二氧杂二十烷基硫酸盐(3,6-dioxaeicosylsulfate)：

或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。

在一些实施方案中，枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的产脂肽菌株和式(I)的化合物的重量比为约1000:1至约1:1000、约500:1至约1:500、约100:1至约1:100、约75:1至约1:75、约50:1至约1:50、约25:1至约1:25、约20:1至约1:20、约10:1至约1:10、约5:1至约1:5或约3:1至约1:3。

在另一方面，本发明提供了一种杀真菌组合物，其包含：协同有效量的枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的产脂肽菌株；和具有硫酸根、磺酸根、磷酸根或羧酸根官能团的聚亚烷基化合物，或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。

枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的产脂肽菌株可为枯草芽孢杆菌QST713、解淀粉芽孢杆菌菌株D747、枯草芽孢杆菌MBI600、解淀粉枯草芽孢杆菌变种FZB24或其具有相应菌株的所有鉴定特征的突变体。

在一个实施方案中，官能团为硫酸根。在另一个实施方案中，聚亚烷基化合物为C₂-C₂₀烷基硫酸盐或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。在某些方面，聚亚烷基化合物为月桂基硫酸盐、肉豆寇基硫酸盐、棕榈基硫酸盐、硬脂基硫酸盐或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。在一方面，聚亚烷基化合物为具有下式的月桂基醚硫酸盐：

其中o为1和5之间的整数；

或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。

在另一个实施方案中，所述化合物为具有下式的3,6-二氧杂十八烷基硫酸盐：

或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。

在另一方面，所述化合物为具有下式的3,6-二氧杂二十烷基硫酸盐：

或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。

在一些实施方案中，枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的产脂肽菌株和聚亚烷基化合物的重量比为约1000:1至约1:1000、约500:1至约1:500、约100:1至约1:100、约75:1至约1:75、约50:1至约1:50、约25:1至约1:25、约20:1至约1:20、约10:1至约1:10、约5:1至约1:5或约3:1至约1:3。

在另一方面，本发明涉及一种杀真菌组合物，其包含：协同有效量的枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的产脂肽菌株；和磺酸盐或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。

在一些方面，枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的产脂肽菌株为枯草芽孢杆菌QST713、解淀粉芽孢杆菌菌株D747、枯草芽孢杆菌MBI600、解淀粉枯草芽孢杆菌变种FZB24或其具有相应菌株的所有鉴定特征的突变体。

在其他方面，磺酸盐为脂族磺酸酯或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。在一方面，脂族磺酸酯具有C_1-20烷基或C_2-20烯基。在另一方面，磺酸盐为α烯烃磺酸盐或其Li⁺、Na⁺、K⁺或(C_1-8烷基)₄N⁺盐。

在某些实施方案中，α烯烃磺酸盐具有式(IV)：

其中

R¹为直链或支链C_1-20烷基或直链或支链C_2-20烯基；以及

M为H⁺、Li⁺、Na⁺、K⁺或(C_1-8烷基)₄N⁺。

在一些实施方案中，R¹为直链C_8-16烷基。在其他实施方案中，α烯烃磺酸盐为十四碳烯磺酸盐、十六碳烯磺酸盐或其Li⁺、Na⁺、K⁺或(C_1-8烷基)₄N⁺盐。

在一方面，磺酸盐为式(V)的化合物：

其中

R¹和R²独立地为直链或支链C_1-20烷基或直链或支链C_2-20烯基；以及

M为H⁺、Li⁺、Na⁺、K⁺或(C_1-8烷基)₄N⁺。

在一些实施方案中，R¹和R²独立地为直链或支链C₈烷基。在其他实施方案中，磺酸盐为磺基琥珀酸二辛酯；1,4-双(2-乙基己氧基)-1,4-二氧代丁烷-2-磺酸盐；或其Li⁺、Na⁺、K⁺或(C_1-8烷基)₄N⁺盐。

在某些方面，枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的产脂肽菌株和磺酸盐的重量比为约1000:1至约1:1000、约500:1至约1:500、约100:1至约1:100、约75:1至约1:75、约50:1至约1:50、约25:1至约1:25、约20:1至约1:20、约10:1至约1:10、约5:1至约1:5或约3:1至约1:3。

在另一方面，本发明提供一种杀真菌组合物，其包含：协同有效量的枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的产脂肽菌株；和式(VI)的化合物：

其中

R¹和R²各自独立地为H⁺、Li⁺、Na⁺、K⁺、(C_1-8烷基)₄N⁺、直链或支链C_1-20烷基、直链或支链C_2-20烯基或

q为1和10之间的整数；

Z¹为CH₂、S、O和NH中的至少一个；

R³为H、直链或支链C_1-20烷基；以及

M为H⁺、Li⁺、Na⁺、K⁺或(C_1-8烷基)₄N⁺；

条件是R¹和R²不同时为H⁺、Li⁺、Na⁺、K⁺或(C_1-8烷基)₄N⁺。

在一些实施方案中，枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的产脂肽菌株为枯草芽孢杆菌QST713、解淀粉芽孢杆菌菌株D747、枯草芽孢杆菌MBI600、解淀粉枯草芽孢杆菌变种FZB24或其具有相应菌株的所有鉴定特征的突变体。

在某些方面，R¹和/或R²为

在其他方面，Z¹为O。在其他方面，R³为支链C_1-20烷基。

在一个实施方案中，所述化合物为

其中当M¹和M²存在时，它们各自独立地为H⁺、Li⁺、Na⁺、K⁺或(C_1-8烷基)₄N⁺。

在其他实施方案中，枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的产脂肽菌株和式(VI)的化合物的重量比为约1000:1至约1:1000、约500:1至约1:500、约100:1至约1:100、约75:1至约1:75、约50:1至约1:50、约25:1至约1:25、约20:1至约1:20、约10:1至约1:10、约5:1至约1:5或约3:1至约1:3。

在另一个实施方案中，本发明提供了一种杀真菌组合物，其包含：协同有效量的枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的产脂肽菌株；和具有季胺和羧酸根的两性离子化合物，或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。

在其他方面，两性离子化合物具有式(VII)：

其中R¹为直链或支链C_1-20烷基或直链或支链C_2-20烯基；

或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。

在一个实施方案中，R¹为直链C_1-20烷基。在另一个实施方案中，所述化合物为

或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。

在某些方面，枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的产脂肽菌株和两性离子化合物的重量比为约1000:1至约1:1000、约500:1至约1:500、约100:1至约1:100、约75:1至约1:75、约50:1至约1:50、约25:1至约1:25、约20:1至约1:20、约10:1至约1:10、约5:1至约1:5或约3:1至约1:3。

在另一个实施方案中，本发明涉及一种杀真菌组合物，其包含：协同有效量的枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的产脂肽菌株；和式(VIII)的三硅氧烷

其中

R¹为直链或支链C_1-20烷基、直链或支链C_2-20烯基、

以及

x为1和12之间的整数；

或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。

在一个实施方案中，枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的产脂肽菌株为枯草芽孢杆菌QST713、解淀粉芽孢杆菌菌株D747、枯草芽孢杆菌MBI600、解淀粉枯草芽孢杆菌变种FZB24或其具有相应菌株的所有鉴定特征的突变体。

在一些方面，R¹为

在其他方面，x为8。在其他方面，R¹为

在一个实施方案中，x为8。

在某些实施方案中，枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的产脂肽菌株和式(VIII)的三硅氧烷的重量比为约1000:1至约1:1000、约500:1至约1:500、约100:1至约1:100、约75:1至约1:75、约50:1至约1:50、约25:1至约1:25、约20:1至约1:20、约10:1至约1:10、约5:1至约1:5或约3:1至约1:3。

在某些方面，突变体具有与相应菌株的序列同一性大于约90％的基因组序列。

在其他实施方案中，枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的菌株为发酵产物的一部分。在一些方面，发酵产物中脂肽的浓度为至少1mg/g、至少2mg/g、至少3mg/g、至少4mg/g、至少5mg/g、至少6mg/g、至少7mg/g、至少8mg/g、至少9mg/g、至少10mg/g、至少11mg/g、至少12mg/g、至少13mg/g、至少14mg/g或至少15mg/g。

在一些实施方案中，来自枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的产脂肽菌株的脂肽为伊枯草菌素型化合物、表面活性素型化合物、芬枯草菌素型化合物或其组合。在一方面，脂肽为伊枯草菌素型化合物、表面活性素型化合物和芬枯草菌素型化合物的组合。在另一方面，脂肽为伊枯草菌素型化合物和表面活性素型化合物的组合；伊枯草菌素型化合物和芬枯草菌素型化合物的组合；或表面活性素型化合物和芬枯草菌素型化合物的组合。在一些实施方案中，在枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的菌株的发酵产物中，上述脂肽的总浓度为至少1mg/g、至少2mg/g、至少3mg/g、至少4mg/g、至少5mg/g、至少6mg/g、至少7mg/g、至少8mg/g、至少9mg/g、至少10mg/g、至少11mg/g、至少12mg/g、至少13mg/g、至少14mg/g或至少15mg/g。

在一方面，脂肽为伊枯草菌素型化合物。伊枯草菌素型化合物可为芽孢菌霉素D、芽孢菌霉素F、芽孢菌霉素L、芽孢菌霉素LC(bacillopeptin)、抗霉枯草菌素、伊枯草菌素A、伊枯草菌素A_L或伊枯草菌素C。在另一方面，脂肽为芬枯草菌素型化合物。芬枯草菌素型化合物可为芬枯草菌素A、芬枯草菌素B、大侧柏素A(plipastatin A)、大侧柏素B或阿瓜斯他汀(agrastatin)。在另一方面，脂肽为表面活性素型化合物。表面活性素型化合物可为埃斯波素(esperin)、地衣素(lichenysin)、帕米拉素(pumilacidin)或表面活性素。

在一些实施方案中，杀真菌组合物为悬浮浓缩剂(SC)、油分散剂(OD)或水分散性颗粒剂(WG)。在一方面，杀真菌组合物包含枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的菌株的发酵产物。

在其他实施方案中，本发明提供了一种防治植物中的真菌性有害生物和/或细菌性有害生物的方法，所述方法包括将前述权利要求中任一项的有效量的杀真菌组合物施用于植物、植物的部位和/或植物或植物部位生长或待种植的位置。

在某些方面，真菌性有害生物为致病疫霉(Phytophthora infestans)和/或灰葡萄孢(Botrytis cinerea)和/或葡萄生轴霜霉(Plasmopara viticola)和/或凤仙花单囊壳(Sphaerotheca fuliginea)和/或苹果黑星病菌(Venturia inaequalis)和/或早疫病链格孢(Alternaria solani)和/或疣顶单胞锈菌(Uromyces appendiculatus)和/或豆薯层锈菌(Phakopsora pachyrhizi)。

在其他方面，细菌性有害生物为稻中的燕麦食酸菌(Acidovorax avenae)、荚壳伯克霍尔德氏菌(Burkholderia glumae)和/或野油菜黄单胞菌水稻致病变种(Xanthomonascampestris pv.oryzae)；柑橘中的韧皮部杆菌属种(Candidatus Liberibacter spec.)和/或地毯草黄单胞菌柑橘致病变种(Xanthomonas axonopodis pv.citri)和/或野油菜黄单胞菌辣椒斑点病致病变种(Xanthomonas campestris pv.vesicatoria)和/或苛养木杆菌(Xylella fastidiosa)；猕猴桃中的丁香假单胞菌猕猴桃致病变种(Pseudomonassyringae pv.actinidae)；桃中的野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris)和/或野油菜黄单胞菌桃李致病变种(Xanthomonas campestris pv.pruni)；大豆中的丁香假单胞菌大豆致病变种(Pseudomonas syringae pv.glycinea)和/或地毯草黄单胞菌大豆致病变种(Xanthomonas axonopodis pv.glycines)；谷物中的伯克霍尔德氏菌属种(Burkholderiaspec.)和/或半透明黄单胞菌(Xanthomonas transluscens)；番茄中的丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae)、丁香假单胞菌番茄致病变种(Pseudomonas syringaepv.tomato)和/或野油菜黄单胞菌；黄瓜中的丁香假单胞菌和/或丁香假单胞菌黄瓜致病变种(Pseudomonas syringae pv.lachrymans)；马铃薯中的黑腐欧文氏菌(Erwiniaatroseptica)、胡萝卜软腐欧文氏菌(Erwinia carotovora)和/或疮痂病链霉菌(Streptomyces scabies)。

在其他方面，植物为苹果、香蕉、柑橘、猕猴桃、甜瓜、桃、梨、菠萝、仁果、石榴、卷心菜、花椰菜、黄瓜、葫芦、番茄、马铃薯、小麦、稻和大豆。

在一些实施方案中，杀真菌组合物作为叶面处理剂施用。在其他实施方案中，杀真菌组合物作为土壤处理剂施用。

在某些方面，杀真菌组合物以悬浮浓缩剂(SC)、油分散剂(OD)或水分散性颗粒剂(WG)的形式施用。

本发明还提供一种治疗下列病害的方法：白粉病，锈病，叶斑枯病(leaf blotchdisease)，叶萎蔫病(leaf wilt disease)，根和茎病害，肉穗花序和圆锥花序病害，黑粉菌病害，果实腐烂病，种子和土壤传播的腐烂、发霉、萎蔫、腐坏和立枯病，癌性病害、菌瘿(gall)和扫帚病(witches’broom)，萎蔫病害，叶疱病或卷叶病，所述方法包括将本文所公开的杀真菌组合物施用至植物或植物部位。

在其他方面，本发明涉及一种制备本文所公开的杀真菌组合物的方法，其包括将枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的菌株与化合物混合；以及使混合物平衡至少4小时、8小时、12小时或24小时。

在一些方面，所述方法还包括在混合后或在混合期间，将枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的菌株和化合物加热至至少30℃、至少40℃、至少50℃、至少60℃、至少70℃或至少80℃。

在一个实施方案中，本发明提供了涂覆有本文所公开的杀真菌组合物的植物或植物部位。在另一个实施方案中，本发明涉及用本文所公开的杀真菌组合物处理的种子。

附图说明

图1描述了由于施用枯草芽孢杆菌QST713全发酵液(“QST713全发酵液”)、20(失水山梨糖醇单月桂酸酯)和加热至各种温度(℃)的QST713全发酵液和20的结合物而产生的经侵染的植物中灰葡萄孢的防治百分数。

图2A描述了施用于侵染致病疫霉(晚疫病)的番茄植株的20(失水山梨糖醇单月桂酸酯)在各种剂量下的杀真菌活性。图2B描述了施用于侵染灰葡萄孢(灰霉病(Grey Mould))的辣椒植株的20(失水山梨糖醇单月桂酸酯)在各种剂量下的杀真菌活性。图2A和2B中的每个菱形(◆)代表平行测定。

图3描述了其中将20(失水山梨糖醇单月桂酸酯)施用于侵染致病疫霉(晚疫病或TLB)的番茄植株的代表性实验以及在各种施用率下所得到的病害防治百分数。

图4描述了以几种施用率施用于侵染致病疫霉(番茄晚疫病)的番茄植株的正十二烷基-B-D-葡糖苷、正癸基-B-D-葡糖苷、正壬基-B-D-葡糖苷和辛基葡萄糖新戊二醇的杀真菌活性。

图5描述了单独的枯草芽孢杆菌QST713全发酵液(“WB”)和与MONAWET^TM MO-75E(二辛基磺基琥珀酸钠；“MO-75E”)；MULTIWET^TM MO-70R(二辛基磺基琥珀酸钠；“MO-70R”)；1004(α烯烃磺酸盐；)；或LRO(C₁₂/C₁₄-脂族醇二甘醇醚硫酸钠)混合的WB离心后剩余的上清液中伊枯草菌素类和表面活性素类的相对量。每个值根据样品中存在的WB的量进行了归一化。

图6描述了单独的(“没有佐剂”)或与若干表面活性剂之一混合的 ASO(枯草芽孢杆菌QST713发酵产物)离心后剩余的上清液中芬枯草菌素类(包括大侧柏素类和阿瓜斯他汀类)、表面活性素类和伊枯草菌素类的相对量。

具体实施方式

应理解，本文所列举的任何数值范围意图包括归入其中的所有子范围。例如，1至10的范围意图包括介于所列举的最小值1和所列举的最大值10之间的所有子范围，并包括所列举的最小值1和所列举的最大值10，也就是说，具有等于或大于1的最小值和等于或小于10的最大值。复数包括单数，反之亦然；例如，单数形式“一个(a，an)”和“所述(the)”包括复数指代物，除非清楚且明确地限于一个指代物。

本文使用的术语“真菌性病害”为由真菌或类真菌微生物(例如，卵菌)引起的病害。

本文使用的“粗提取物”泛指发酵液的有机提取物，包括但不限于乙酸乙酯提取物，其中提取物富含脂肽。本文还描述了用于获得脂肽的提取物的菌株和方法。

本文使用的“发酵液”泛指微生物发酵后所得到的培养基，并且尤其包括微生物及其组成部分、未使用的原料底物以及在发酵过程中由微生物产生的代谢物。

本文使用的“发酵产物”是指发酵液和/或发酵固体物。

本文使用的“发酵固体物”是指经浓缩和/或经干燥的发酵液。

本文使用的“脂肽”是指为发酵产物的一部分的脂肽和纯化到至少某种程度的脂肽，无论是化学合成的还是生物学上产生的。脂肽包括但不限于两亲性环状脂肽。

本文使用的商品名“ LRO”与术语“月桂基醚硫酸钠(sodiumlaureth sulfate)”和“月桂基醚硫酸钠(sodium lauryl ether sulfate)”(“SLES”)同义。

本发明提供了一种处理植物以防治真菌性病害的方法，其中所述方法包括向植物、植物的部位和/或植物的位置施用包含式(I)的化合物或其盐的组合物：

其中

m为1和18之间的整数；

n为1和10之间的整数；

Z¹为CH₂、S、O或NH；

以及R¹为硫酸根、磺酸根、磷酸根或羧酸根。

在一方面，R¹为硫酸根。在另一方面，Z¹为O。在其他方面，m为8和16之间的整数。式(I)的化合物可为具有下式的3,6-二氧杂二十烷基硫酸盐：

具有下式的3,6-二氧杂十八烷基硫酸盐：

具有下式的月桂基醚硫酸盐：

其中n为1和5之间的整数；或其盐。

在另一个实施方案中，本发明提供了一种处理植物以防治真菌性病害的方法，其中所述方法包括向植物、植物的部位和/或植物的位置施用包含式(II)的化合物的组合物：

其中

m为0和18之间的整数；

n为1和10之间的整数；

Z¹为CH₂、S、O或NH；以及

当M+存在时，它选自H⁺、Li⁺、Na⁺、K⁺和NH₄ ⁺。

在某些方面，Z¹为O。在其他方面，m为8和16之间的整数。

在一些实施方案中，本发明的组合物包含式(III)的化合物：

其中

R为烷基；

n为1至10的整数，并且意指(聚)亚乙基氧桥中的亚乙基氧基单元的数目；以及

M⁽⁺⁾为阳离子，优选H⁽⁺⁾或金属离子或铵离子。式III的化合物的非限制性列表示于下表1中，其中各化合物的R和n明确示于相应的化合物名称中。

表1：式(III)的化合物的非限制性实例

·甲基乙二醇醚硫酸盐，

·甲基二乙二醇醚硫酸盐，

·甲基三乙二醇醚硫酸盐，

·甲基四乙二醇醚硫酸盐，

·甲基五乙二醇醚硫酸盐，

·甲基六乙二醇醚硫酸盐，

·甲基七乙二醇醚硫酸盐，

·甲基八乙二醇醚硫酸盐，

·甲基九乙二醇醚硫酸盐，

·甲基十乙二醇醚硫酸盐，

·乙基乙二醇醚硫酸盐，

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其中在每种情况下可以使用任何盐及其混合物，包括具有M⁽⁺⁾＝碱金属阳离子作为抗衡离子的碱金属盐或具有M⁽⁺⁾＝NH₄ ⁺作为抗衡离子的铵盐，并且其中在一些方面优选它们的钠盐、钾盐或铵盐。

本文使用的术语“失水山梨糖醇”是指具有以下结构的化合物或化合物的取代基：

其中每个-OH基团可形成酯键或醚键。

本发明提供了一种处理植物以防治真菌性病害的方法，其中所述方法包括向植物、植物的部位和/或植物的位置施用包含式(I)的化合物或其立体异构体的组合物：

其中

o为0和10之间的整数；

p为0和2之间的整数；

q为0和10之间的整数；

X¹为酯键或糖苷键，其中-OH在R¹上；以及

R¹为戊糖、己糖或失水山梨糖醇取代基，其任选地被戊糖、己糖、失水山梨糖醇、C₁至C₁₈烷基或C₁至C₁₈烯基取代基取代。

在一些实施方案中，R¹任选地被一个且仅一个戊糖、己糖、失水山梨糖醇、C₁至C₁₈烷基或C₁至C₁₈烯基取代基取代。在其他实施方案中，o、p和q的总和为8和18之间的整数。

在某些方面，式(I)的化合物为失水山梨糖醇酯。在失水山梨糖醇酯上的烷基链可以是饱和的或不饱和的。在一方面，本发明的组合物包含：

其立体异构体或其组合。

在另一方面，失水山梨糖醇酯具有带有至少一个双键的烷基链。在式(I)的化合物中，o可以是7，p可以是1。在某些方面，本发明的组合物包含：

其立体异构体或其组合。

在其他实施方案中，在式(I)的化合物中，X¹为糖苷键。在某些方面，在式(I)的化合物中，R¹为己糖取代基或葡萄糖取代基。在其他方面，本发明的组合物包含式(II)的化合物：

其中r为6和20之间的整数。在一些实施方案中，式(II)的化合物选自：

在其他实施方案中，式(I)的化合物中的R¹被一个且仅一个戊糖、己糖或失水山梨糖醇取代基取代。所述化合物可含有二糖取代基。在某些方面，该二糖取代基为蔗糖取代基。本发明的组合物可包含

在一些实施方案中，本发明的化合物可与脂肽组合或与脂肽组合使用。例如，所述处理植物以防治真菌性病害的方法还可包括同时或依次地向植物、植物的部位和/或植物的位置施用脂肽。

脂肽可为产杀真菌脂肽发酵产物的一部分或提取物。在某些方面，产脂肽发酵产物为芽孢杆菌属种(Bacillus sp.)，例如，枯草芽孢杆菌QST713或其变体；解淀粉芽孢杆菌菌株D747；枯草芽孢杆菌MBI600；枯草芽孢杆菌Y1336；解淀粉芽孢杆菌菌株FZB42；或解淀粉枯草芽孢杆菌变种FZB24。

通常，当施用至种子时，产脂肽发酵产物以约1×10²至约1×10⁷cfu/种子的比率施用，这取决于种子的大小。在一些实施方案中，施用率为每个种子约1×10³至约1×10⁶cfu。

当作为土壤处理剂使用时，产脂肽发酵产物可以土壤表面浸液的形式施用、戳入(shanked-in)、注射和/或施用于犁沟或与灌溉水混合施用。用于浸液土壤处理的施用率——其可在种植时、在播种期间或播种后或在移植后以及在植物生长的任何阶段施用——通常为每英亩约4×10¹¹至约8×10¹²cfu。在一些实施方案中，施用率为每英亩约1×10¹²至约6×10¹²cfu。在一些实施方案中，施用率为每英亩约6×10¹²至约8×10¹²cfu。用于犁沟处理的施用率——在种植时施用——为每1000行英尺(row feet)约2.5×10¹⁰至约5×10¹¹cfu。在一些实施方案中，施用率为每1000行英尺约6×10¹⁰至约4×10¹¹cfu。在其他实施方案中，施用率为每1000行英尺约3.5×10¹¹cfu至每1000行英尺约5×10¹¹cfu。

其中

o为0和10之间的整数；

p为0和2之间的整数；

q为0和10之间的整数；

X¹为酯键或糖苷键，其中-OH在R¹上；以及

在某些实施方案中，本发明的方法包括向植物、植物的部位和/或植物的位置施用包含式(II)的化合物的组合物：

其中r为6和20之间的整数。

在其他实施方案中，组合物包含失水山梨糖醇酯，例如，失水山梨糖醇单月桂酸酯、失水山梨糖醇单棕榈酸酯、失水山梨糖醇倍半油酸酯、失水山梨糖醇单硬脂酸酯或其组合。在一些实施方案中，组合物包含20(失水山梨糖醇单月桂酸酯)和/或20(聚乙二醇失水山梨糖醇单月桂酸酯)。

在其他实施方案中，本发明提供了一种脂肽和式(I)的化合物或其立体异构体的协同杀真菌结合物，其中

o为0和10之间的整数；

p为0和2之间的整数；

q为0和10之间的整数；

X¹为酯键或糖苷键，其中-OH来自R¹；以及

本发明涉及一种协同组合物，其包含：a)脂肽；和b)式(I)的化合物：

其中

m为1和20之间的整数；

n为1和10之间的整数；

Z¹为CH₂、S、O或NH；以及

R¹为硫酸根、磺酸根、磷酸根或羧酸根；

或其几何异构体、光学异构体、对映异构体、非对映异构体、互变异构体，或农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。农业上可接受的盐包括但不限于锂盐、钠盐、钾盐和四烷基铵盐。

在一些实施方案中，R¹为硫酸根。在其他实施方案中，Z¹为O。在某些方面，n为1和5之间的整数。在其他方面，m为8和16之间的整数。

在一个实施方案中，所述化合物为具有下式的月桂基醚硫酸盐：

其中o为1和5之间的整数；或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。

或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。

在一些方面，所述化合物为具有下式的3,6-二氧杂二十烷基硫酸盐：

或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。在一方面，所述化合物为 LRO(C₁₂/C₁₄-脂肪醇二甘醇醚硫酸钠)。

在其他实施方案中，本发明涉及一种协同组合物，其包含：a)脂肽；和b)具有选自硫酸根、磺酸根、磷酸根和羧酸根的官能团的聚亚烷基化合物，或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。

在一些方面，官能团为硫酸根。在其他方面，聚亚烷基化合物为C₂-C₂₀烷基硫酸盐或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。在其他方面，聚亚烷基化合物为月桂基硫酸盐、肉豆寇基硫酸盐、棕榈基硫酸盐、硬脂基硫酸盐或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。在一些实施方案中，聚亚烷基化合物为月桂基硫酸盐。在一个实施方案中，月桂基硫酸盐为月桂基硫酸钠。在一些实施方案中，月桂基硫酸钠为K12P(月桂基硫酸钠)或 K12(月桂基硫酸钠)。

在一个实施方案中，聚亚烷基化合物为具有下式的月桂基醚硫酸盐：

或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。

在其他方面，所述化合物为具有下式的3,6-二氧杂二十烷基硫酸盐：

或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。在一个方面，所述化合物为 LRO(C₁₂/C₁₄-脂肪醇二甘醇醚硫酸钠)。

在另一个方面，本发明涉及一种协同组合物，其包含：a)脂肽；和b)磺酸盐或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。在一个实施方案中，磺酸盐为脂族磺酸酯或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。在另一个实施方案中，脂族磺酸酯具有C_1-20烷基或C_2-20烯基。

在某些方面，磺酸盐为α烯烃磺酸盐或其Li⁺、Na⁺、K⁺或(C_1-8烷基)₄N⁺盐。在一方面，α烯烃磺酸盐具有式(IV)：

其中

R¹为直链或支链C_1-20烷基或直链或支链C_2-20烯基；以及

M为H⁺、Li⁺、Na⁺、K⁺或(C_1-8烷基)₄N⁺。

在某些实施方案中，R¹为直链C_8-16烷基。在一方面，α烯烃磺酸盐为十四碳烯磺酸盐、十六碳烯磺酸盐或其Li⁺、Na⁺、K⁺或(C_1-8烷基)₄N⁺盐。在一个实施方案中，磺酸盐为1004(α烯烃磺酸盐)。

在另一个方面，磺酸盐为式(V)的化合物：

其中

M选自H⁺、Li⁺、Na⁺、K⁺和(C_1-8烷基)₄N⁺。

在一些实施方案中，R¹和R²独立地为直链或支链C₈烷基。在一方面，磺酸盐为磺基琥珀酸二辛酯；1,4-双(2-乙基己氧基)-1,4-二氧代丁烷-2-磺酸盐；或其Li⁺、Na⁺、K⁺或(C_1-8烷基)₄N⁺盐。在某些实施方案中，磺酸盐为MONAWET^TM MO-75E(二辛基磺基琥珀酸钠)；MULTIWET^TM MO-70R(二辛基磺基琥珀酸钠)；或 DOS-PG(2-乙基己基磺基琥珀酸钠)。

在其他实施方案中，本发明涉及一种协同组合物，其包含：a)脂肽；和b)磷酸酯化合物。

在一些实施方案中，磷酸酯为式(VI)的化合物：

其中

R¹和R²各自独立地为H⁺、Li⁺、Na⁺、K⁺、(C_1-8烷基)₄N⁺、直链或支链C_1-20烷基、直链或支链C_2-20烯基，或

q为1和10之间的整数；

Z¹为CH₂、S、O或NH；

R³为H、直链或支链C_1-20烷基；以及

M为H⁺、Li⁺、Na⁺、K⁺或(C_1-8烷基)₄N⁺；

在某些方面，R¹和/或R²为

在其他方面，Z¹为O。在其他方面，R³为支链C_1-20烷基。

在一个实施方案中，所述化合物为

其中当M¹和M²存在时，它们各自独立地为H⁺、Li⁺、Na⁺、K⁺或(C_1-8烷基)₄N⁺。在一方面，式(VI)的化合物为1306(烷基聚乙二醇醚磷酸单酯/二酯)、1306(烷基聚乙二醇醚磷酸单酯/二酯)或MULTITROPE^TM 1214(PEG-4癸基磷酸盐(PEG-4decyl phosphate)，α-氢-ω-羟基-聚(氧基-1,2-乙烷二基)单-C8-10-烷基醚磷酸盐(poly(oxy-1,2-ethanediyl)，α-hydro-ω-hydroxy-，mono-C8-10-alkylethers，phosphates))。

本发明还涉及一种协同组合物，其包含：a)脂肽；和b)具有季胺和羧酸根的两性离子化合物，或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。在一些方面，两性离子化合物具有式(VII)：

其中R¹为直链或支链C_1-20烷基或直链或支链C_2-20烯基；

或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。

或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。在某些方面，所述化合物为 CAB 818(椰油酰胺丙基甜菜碱(C8-C18))或 KB(C12-C14月桂基二甲基甜菜碱)。

在另一个实施方案中，本发明提供了一种协同组合物，其包含：a)脂肽；和b)三硅氧烷。三硅氧烷可为式(VIII)的化合物

其中

R¹为直链或支链C_1-20烷基、直链或支链C_2-20烯基，或

并且

x为1和12之间的整数；

或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。

在一些方面，R¹为

在一些实施方案中，式(VIII)的化合物为三硅氧烷乙氧基化物。在一个实施方案中，x为8。在另一个实施方案中，所述化合物为 L-77(聚环氧烷改性的七甲基三硅氧烷)。

在另一个实施方案中，R¹为

在一些实施方案中，式(VIII)的化合物为三硅氧烷烷氧基化物。在一个实施方案中，x为8。在另一个实施方案中，所述化合物为408(三硅氧烷烷氧基化物)、618(三硅氧烷烷氧基化物)或625(三硅氧烷烷氧基化物)。

在一些实施方案中，脂肽为产杀真菌脂肽发酵产物的一部分或提取物。产脂肽发酵产物可为芽孢杆菌属种。在一方面，芽孢杆菌属种为枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌。在另一方面，芽孢杆菌属种为枯草芽孢杆菌QST713或由其得到的杀真菌突变菌株。在一个实施方案中，杀真菌突变菌株具有与枯草芽孢杆菌QST713的序列同一性大于约90％的基因组序列。

在其他方面，芽孢杆菌属种为解淀粉芽孢杆菌菌株D747；枯草芽孢杆菌MBI600；枯草芽孢杆菌Y1336；解淀粉芽孢杆菌菌株FZB42；或解淀粉枯草芽孢杆菌变种FZB24。

在一些实施方案中，脂肽为伊枯草菌素型化合物、表面活性素型化合物、芬枯草菌素型化合物、杀镰孢菌素(fusaricidin)或其组合。在一方面，脂肽为伊枯草菌素型化合物。伊枯草菌素型化合物可为芽孢菌霉素D、芽孢菌霉素F、芽孢菌霉素L、芽孢菌霉素LC(bacillopeptin)、抗霉枯草菌素、伊枯草菌素A、伊枯草菌素A_L或伊枯草菌素C。

在另一个方面，脂肽为芬枯草菌素型化合物。芬枯草菌素型化合物可为芬枯草菌素A、芬枯草菌素B、大侧柏素A、大侧柏素B或阿瓜斯他汀。

在另一方面，脂肽为表面活性素型化合物。表面活性素型化合物可为埃斯波素、地衣素、帕米拉素或表面活性素。

在一些实施方案中，本发明涉及一种防治植物中的真菌性有害生物和/或细菌性有害生物的方法，所述方法包括将本文所述的有效量的协同组合物施用至植物、植物的部位和/或植物或植物部位生长的位置。

在一些方面，真菌性有害生物为致病疫霉和/或灰葡萄孢和/或葡萄生轴霜霉和/或凤仙花单囊壳和/或苹果黑星病菌和/或早疫病链格孢和/或疣顶单胞锈菌和/或豆薯层锈菌。

在其他方面，细菌性有害生物为稻中的燕麦食酸菌、荚壳伯克霍尔德氏菌和/或野油菜黄单胞菌水稻致病变种；柑橘中的韧皮部杆菌属种和/或地毯草黄单胞菌柑橘致病变种和/或野油菜黄单胞菌辣椒斑点病致病变种和/或苛养木杆菌；猕猴桃中的丁香假单胞菌猕猴桃致病变种；桃中的野油菜黄单胞菌和/或野油菜黄单胞菌桃李致病变种；大豆中的丁香假单胞菌大豆致病变种和/或地毯草黄单胞菌大豆致病变种；谷物中的伯克霍尔德氏菌属种和/或半透明黄单胞菌；番茄中的丁香假单胞菌、丁香假单胞菌番茄致病变种和/或野油菜黄单胞菌；黄瓜中的丁香假单胞菌和/或丁香假单胞菌黄瓜致病变种；马铃薯中的黑腐欧文氏菌、胡萝卜软腐欧文氏菌和/或疮痂病链霉菌。

在其他方面，植物选自苹果、香蕉、柑橘、猕猴桃、甜瓜、桃、梨、菠萝、仁果、石榴、卷心菜、花椰菜、黄瓜、葫芦、番茄、马铃薯、小麦、稻和大豆。

本发明还提供了一种处理植物以防治真菌性病害的方法，其中所述方法包括向植物、植物的部位和/或植物的位置施用包含式(I)的化合物或其盐的组合物：

其中

m为0和18之间的整数；

n为1和10之间的整数；

Z¹为CH₂、S、O或NH；

以及R¹为硫酸根、磺酸根、磷酸根或羧酸根。

在另一方面，本发明涉及一种处理植物以防治真菌性病害的方法，其中所述方法包括向植物、植物的部位和/或植物的位置施用包含式(II)的化合物的组合物：

其中

m为0和18之间的整数；

n为1和10之间的整数；

Z¹为CH₂、S、O或NH；以及

当M⁺存在时，它选自H⁺、Li⁺、Na⁺、K⁺和NH₄ ⁺。

在一些实施方案中，所述方法还包括同时或依次地向植物、植物的部位和/或植物的位置施用脂肽。

在一个实施方案中，脂肽为芽孢杆菌属种细菌的发酵产物的一部分或提取物，如本文所述的那些。在该实施方案的另一个实例中，在制备结合物之前，选择产脂肽细菌，如芽孢杆菌属种菌株或类芽孢杆菌属种(Paenibacillus species)菌株，使用该产脂肽细菌产生含有脂肽的发酵产物，并且使用此发酵产物或其提取物来制备所述结合物。在一个实施方案中，发酵产物包含以下脂肽中的一种或更多种：表面活性素型化合物、芬枯草菌素型化合物、伊枯草菌素型化合物和/或杀镰孢菌素。在一个更具体的实施方案中，发酵产物包含以下脂肽中的一种或更多种：表面活性素、大侧柏素、芬枯草菌素、伊枯草菌素和/或芽孢菌霉素。

在某些方面，本文所公开的方法用于防治真菌性病害，其中所述真菌性病害为由灰葡萄孢引起的灰霉病、由致病疫霉引起的晚疫病、由葡萄生轴霜霉引起的霜霉病、由凤仙花单囊壳引起的白粉病、由苹果黑星病菌引起的苹果黑星病、由疣顶单胞锈菌引起的豆锈病或由豆薯层锈菌引起的大豆锈病。

在某些方面，脂肽为芽孢杆菌属种细菌的发酵产物的一部分或提取物，如本文所述的那些。在该实施方案的另一个实例中，在制备结合物之前，选择产脂肽细菌，如芽孢杆菌属种菌株或类芽孢杆菌属种菌株，使用该产脂肽细菌产生含有脂肽的发酵产物，并且使用此发酵产物或其提取物来制备所述结合物。在一个实施方案中，发酵产物包含以下脂肽中的一种或更多种：表面活性素型化合物、芬枯草菌素型化合物、伊枯草菌素型化合物和/或杀镰孢菌素。在一个更具体的实施方案中，发酵产物包含以下脂肽中的一种或更多种：表面活性素、大侧柏素、芬枯草菌素、伊枯草菌素和/或芽孢菌霉素。

在其他方面，本发明的杀真菌组合物包含枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的产脂肽菌株。枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的菌株可为发酵产物的一部分。在一个实施方案中，来自枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的产脂肽菌株的脂肽为伊枯草菌素型化合物、表面活性素型化合物、芬枯草菌素型化合物或其组合。

可根据本发明处理的真菌性病害的病原体的非限制性实例包括：

由白粉病病原体引起的病害，所述病原体例如布氏白粉菌属种(Blumeriaspecies)，例如禾本科布氏白粉菌(Blumeria graminis)；叉丝单囊壳属种(Podosphaeraspecies)，例如白叉丝单囊壳(Podosphaera leucotricha)；单囊壳属种(Sphaerothecaspecies)，例如凤仙花单囊壳；钩丝壳属种(Uncinula species)，例如葡萄钩丝壳(Uncinula necator)；

由锈病病原体引起的病害，所述病原体例如胶锈菌属种(Gymnosporangiumspecies)，例如褐色胶锈菌(Gymnosporangium sabinae)；驼孢锈属种(Hemileiaspecies)，例如咖啡驼孢锈菌(Hemileia vastatrix)；层锈菌属种(Phakopsora species)，例如豆薯层锈菌(Phakopsora pachyrhizi)和山马蝗层锈菌(Phakopsora meibomiae)；柄锈菌属种(Puccinia species)，例如隐匿柄锈菌(Puccinia recondite)、小麦叶锈菌(P.triticina)、禾柄锈菌(P.graminis)或条形锈菌(P.striiformis)或大麦柄锈病(P.hordei)；单胞锈菌属种(Uromyces species)，例如疣顶单胞锈菌；

由卵菌纲(Oomycetes)的病原体引起的病害，所述病原体例如白锈属种(Albugospecies)，例如白锈菌(Algubo candida)；盘霜霉属种(Bremia species)，例如莴苣盘霜霉(Bremia lactucae)；霜霉属种(Peronospora species)，例如豌豆霜霉(Peronosporapisi)、寄生霜霉(P.parasitica)或十字花科霜霉(P.brassicae)；疫霉属种(Phytophthoraspecies)，例如致病疫霉；轴霜霉属种(Plasmopara species)，例如葡萄生轴霜霉；假霜霉属种(Pseudoperonospora species)，例如草假霜霉(Pseudoperonospora humuli)或古巴假霜霉(Pseudoperonospora cubensis)；腐霉属种(Pythium species)，例如终极腐霉(Pythium ultimum)；

由以下病原体引起的叶斑枯病和叶萎蔫病，例如：链格孢属种(Alternariaspecies)，例如早疫病链格孢；尾孢属种(Cercospora species)，例如菾菜生尾孢(Cercospora beticola)；枝孢属种(Cladiosporium species)，例如黄瓜枝孢(Cladiosporium cucumerinum)；旋孢腔菌属种(Cochliobolus species)，例如禾旋孢腔菌(Cochliobolus sativus)(分生孢子形式：德氏霉属(Drechslera)，同义词：长蠕孢属(Helminthosporium))、宫部旋孢腔菌(Cochliobolus miyabeanus)；炭疽菌属种(Colletotrichum species)，例如菜豆炭疽菌(Colletotrichum lindemuthanium)；锈斑病菌属种(Cycloconium species)，例如油橄榄孔雀斑病菌(Cycloconium oleaginum)；间座壳属种(Diaporthe species)，例如柑桔间座壳(Diaporthe citri)；痂囊腔菌属种(Elsinoe species)，例如柑桔痂囊腔菌(Elsinoe fawcettii)；盘长孢属种(Gloeosporiumspecies)，例如悦色盘长孢(Gloeosporium laeticolor)；小丛壳属种(Glomerellaspecies)，例如围小丛壳(Glomerella cingulata)；球座菌属种(Guignardia species)，例如葡萄球座菌(Guignardia bidwelli)；小球腔菌属种(Leptosphaeria species)，例如斑污小球腔菌(Leptosphaeria maculans)、颖枯壳小球腔菌(Leptosphaeria nodorum)；大毁壳属种(Magnaporthe species)，例如灰色大毁壳(Magnaporthe grisea)；微座孢属种(Microdochium species)，例如雪霉微座孢(Microdochium nivale)；球腔菌属种(Mycosphaerella species)，例如禾生球腔菌(Mycosphaerella graminicola)、落花生球腔菌(M.arachidicola)和斐济球腔菌(M.fijiensis)；暗球腔菌属种(Phaeosphaeriaspecies)，例如小麦颖枯病菌(Phaeosphaeria nodorum)；核腔菌属种(Pyrenophoraspecies)，例如圆核腔菌(Pyrenophora teres)、偃麦草核腔菌(Pyrenophora triticirepentis)；柱隔孢属种(Ramularia species)，例如辛加柱隔孢(Ramularia collo-cygni)、白斑柱隔孢(Ramularia areola)；喙孢属种(Rhynchosporium species)，例如黑麦喙孢(Rhynchosporium secalis)；壳针孢属种(Septoria species)，例如芹菜小壳针孢(Septoria apii)、番茄壳针孢(Septoria lycopersii)；核瑚菌属种(Typhula species)，例如肉孢核瑚菌(Typhula incarnata)；黑星菌属种(Venturia species)，例如苹果黑星病菌；

由以下病原体引起的根和茎病害，例如：伏革菌属种(Corticium species)，例如Corticium graminearum；镰孢属种(Fusarium species)，例如尖镰孢(Fusariumoxysporum)；顶囊壳菌属种(Gaeumannomyces species)，例如禾顶囊壳(Gaeumannomycesgraminis)；丝核菌属种(Rhizoctonia species)，例如立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)；由例如稻帚枝杆孢(Sarocladium oryzae)引起的帚枝杆孢属(Sarocladium)病害；由例如稻腐小核菌(Sclerotium oryzae)引起的小核菌属(Sclerotium)病害；塔普斯属种(Tapesia species)，例如塔普斯梭状芽孢杆菌(Tapesia acuformis)；根串珠霉属种(Thielaviopsis species)，例如根串珠霉(Thielaviopsis basicola)；

由以下病原体引起的肉穗花序和圆锥花序病害(包括玉米穗轴)，例如：链格孢属种(Alternaria species)，例如链格孢属种(Alternaria spp.)；曲霉属种(Aspergillusspecies)，例如黄曲霉(Aspergillus flavus)；枝孢属种(Cladosporium species)，例如芽枝状枝孢(Cladosporium cladosporioides)；麦角菌属种(Claviceps species)，例如麦角菌(Claviceps purpurea)；镰孢属种，例如黄色镰孢(Fusarium culmorum)；赤霉属种(Gibberella species)，例如玉蜀黍赤霉(Gibberella zeae)；小画线壳属种(Monographella species)，例如雪腐小画线壳(Monographella nivalis)；壳针孢属种，例如颖枯壳针孢(Septoria nodorum)；

由黑粉真菌引起的病害，所述黑粉真菌例如：轴黑粉菌属种(Sphacelothecaspecies)，例如丝孢堆黑粉菌(Sphacelotheca reiliana)；腥黑粉菌属种(Tilletiaspecies)，例如小麦网腥黑粉菌(Tilletia caries)、小麦矮腥黑粉菌(T.controversa)；条黑粉菌属种(Urocystis species)，例如隐条黑粉菌(Urocystis occulta)；黑粉菌属种(Ustilago species)，例如裸黑粉菌(Ustilago nuda)、小麦散黑粉菌(U.nuda tritici)；

由以下病原体引起的果实腐烂病，例如：曲霉属种，例如黄曲霉；葡萄孢属种(Botrytis species)，例如灰葡萄孢；青霉属种(Penicillium species)，例如扩展青霉(Penicillium expansum)和产紫青霉(P.purpurogenum)；核盘菌属种(Sclerotiniaspecies)，例如核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)；轮枝孢属种(Verticiliumspecies)，例如黑白轮枝孢(Verticilium alboatrum)；

由以下病原体引起的种子腐烂和土壤传播的腐烂、发霉、萎蔫、腐坏和立枯病，例如：链格孢属种，例如芸薹生链格孢(Alternaria brassicicola)；丝囊霉属种(Aphanomyces species)，例如根腐丝囊霉(Aphanomyces euteiches)；壳二孢属种(Ascochyta species)，例如兵豆壳二孢(Ascochyta lentis)；曲霉属种，例如黄曲霉；枝孢属种，例如草本枝孢(Cladosporium herbarum)；旋孢腔菌属种，例如禾旋孢腔菌(分生孢子形式：德氏霉属，平脐蠕孢属(Bipolaris)，同义词：长蠕孢属)；炭疽菌属种，例如毛核炭疽菌(Colletotrichum coccodes)；镰孢属种，例如黄色镰孢；赤霉属种，例如玉蜀黍赤霉；壳球孢属种(Macrophomina species)，例如菜豆生壳球孢(Macrophomina phaseolina)；小画线壳属种，例如雪腐小画线壳；青霉属种，例如扩展青霉；茎点霉属种(Phoma species)，例如黑胫茎点霉(Phoma lingam)；拟茎点霉属种(Phomopsis species)，例如大豆拟茎点霉(Phomopsis sojae)；疫霉属种，例如恶疫霉(Phytophthora cactorum)；核腔菌属种(Pyrenophora species)，例如麦类核腔菌(Pyrenophora graminea)；梨孢属种(Pyricularia species)，例如稻梨孢(Pyricularia oryzae)；腐霉属种，例如终极腐霉；丝核菌属种，例如立枯丝核菌；根霉属种(Rhizopus species)，例如米根霉(Rhizopusoryzae)；小核菌属种，例如齐整小核菌(Sclerotium rolfsii)；壳针孢属种，例如颖枯壳针孢；核瑚菌属种，例如肉孢核瑚菌；轮枝孢属种，例如大丽花轮枝孢(Verticilliumdahlia)；

由以下病原体引起的癌性病害、菌瘿和扫帚病，例如：丛赤壳属种(Nectriaspecies)，例如仁果干癌丛赤壳菌(Nectria galligena)；

由以下病原体引起的萎蔫病害，例如：链核盘菌属种(Monilinia species)，例如核果链核盘菌(Monilinia laxa)；

由以下病原体引起的叶疱病或卷叶病，例如：外担菌属种(Exobasidiumspecies)，例如坏损外担菌(Exobasidium vexans)；

外囊菌属种(Taphrina species)，例如畸形外囊菌(Taphrina deformans)；

由以下病害引起的木本植物的退化病害，例如：由例如根霉格孢菌(Phaemoniellaclamydospora)、鸡腿蘑丝孢菌(Phaeoacremonium aleophilum)和地中海孢孔菌(Fomitiporia mediterranea)引起的依科病(Esca)；由例如葡萄顶枯菌(Eutypa lata)引起的葡萄顶枯病(Eutypa dyeback)；由例如岛灵芝(Ganoderma boninense)引起的灵芝属(Ganoderma)病害；由例如木硬孔菌(Rigidoporus lignosus)引起的硬孔菌属(Rigidoporus)病害；

由以下病原体引起的花和种子的病害，例如：葡萄孢属种，例如灰葡萄孢；

由以下病原体引起的植物块茎的病害，例如：丝核菌属种，例如立枯丝核菌；长蠕孢菌属种(Helminthosporium species)，例如茄病长蠕孢(Helminthosporium solani)；

由以下病原体引起的根肿病，例如：根肿菌属种(Plasmodiophora species)，例如芸苔根肿菌(Plamodiophora brassicae)；

由以下细菌性病原体引起的病害，例如：黄单胞菌属种(Xanthomonas species)，例如野油菜黄单胞菌水稻致病变种；假单胞菌属种(Pseudomonas species)，例如丁香假单胞菌黄瓜致病变种；欧文氏菌属种(Erwinia species)，例如解淀粉欧文氏菌(Erwiniaamylovora)。

由以下病原体引起的叶、茎、荚和种子的真菌性病害，例如：链格孢属叶斑病(Alternaria leaf spot)(Alternaria spec.atrans tenuissima)，炭疽病(Anthracnose)(赤叶枯刺盘孢菌(Colletotrichum gloeosporoides dematium var.truncatum))，褐斑病(大豆壳针孢(Septoria glycines))，尾孢菌叶斑病和叶枯病(cercospora leaf spot andblight)(菊池尾孢(Cercospora kikuchii))，笄霉叶枯病(choanephora leaf blight)(漏斗笄霉(Choanephora infundibulifera trispora)(同义词))，疏毛核菌霉叶斑病(dactuliophora leaf spot)(大豆疏毛核菌霉(Dactuliophora glycines))，大豆霜霉病(东北霜霉(Peronospora manshurica))，内脐蠕孢枯萎病(drechslera blight)(Drechslera glycini)，蛙眼病叶斑病(frogeye leaf spot)(大豆尾孢(Cercosporasojina))，小光壳叶斑病(leptosphaerulina leaf spot)(三叶草小光壳(Leptosphaerulina trifolii))，叶点霉叶斑病(phyllostica leaf spot)(大豆生叶点霉(Phyllosticta sojaecola))，荚和茎枯萎病(大豆拟茎点霉(Phomopsis sojae))，白粉病(扩散叉丝壳(Microsphaera diffusa))，棘壳孢叶斑病(pyrenochaeta leaf spot)(Pyrenochaeta glycines)，气生丝核菌(rhizoctonia aerial)、叶枯病和立枯病(foliageand web blight)(立枯丝核菌(Rhizoctonia solani))，锈病(豆薯层锈菌(Phakopsorapachyrhizi)、山蚂蝗层锈菌(Phakopsora meibomiae))，黑星病(scab)(大豆痂圆孢(Sphaceloma glycines))，匍柄霉叶枯病(stemphylium leaf blight)(匍柄霉(Stemphylium botryosum))，靶斑病(target spot)(山扁豆生棒孢(Corynesporacassiicola))。

由以下病原体引起的根部和茎基部的真菌性病害，例如：黑色根腐病(野百合丽赤壳(Calonectria crotalariae))，木炭腐病(菜豆生壳球孢(Macrophomina phaseolina))，镰孢枯萎病或萎蔫病、根腐病及荚腐病和颈腐病(尖镰孢(Fusarium oxysporum)、直喙镰孢(Fusarium orthoceras)、半裸镰孢(Fusarium semitectum)、木贼镰孢(Fusariumequiseti))，mycoleptodiscus根腐病(Mycoleptodiscus terrestris)，新赤壳(neocosmospora)(侵菅新赤壳(Neocosmopspora vasinfecta))，荚和茎枯萎病(菜豆间座壳(Diaporthe phaseolorum))，茎溃疡(大豆北方茎溃疡病菌(Diaporthe phaseolorumvar.caulivora))，疫霉腐病(phytophthora rot)(大雄疫霉(Phytophthoramegasperma))，褐茎腐病(大豆茎褐腐病菌(Phialophora gregata))，腐霉病(pythiumrot)(瓜果腐霉(Pythium aphanidermatum)、畸雌腐霉(Pythium irregulare)、德巴利腐霉(Pythium debaryanum)、群结腐霉(Pythium myriotylum)、终极腐霉)，丝核菌根腐病、茎腐和立枯病(立枯丝核菌)，核盘菌茎腐病(sclerotinia stem decay)(核盘菌)，核盘菌白绢病(sclerotinia southern blight)(Sclerotinia rolfsii)，根串珠霉根腐病(thielaviopsis root rot)(根串珠霉)。

本发明的组合物可用于治疗性或保护性/预防性地防治植物病原性真菌。因此，本发明还涉及通过使用本发明的组合物——将其施用至种子、植物或植物部位、果实或植物生长于其中的土壤——防治植物病原性真菌的治疗性和保护性方法。

本发明的组合物用于各种真菌防治应用中。上述组合物可用于防治真菌性植物病原体、收获后的真菌性病原体、食品或饲料的真菌性病原体和人类真菌性病原体。

在一个实施方案中，上述组合物中的任何一种通过将所述组合物施用至植物、植物周围的区域或可食用栽培蘑菇、蘑菇菌柱(mushroom spawn)或蘑菇基肥(compost)而用于防治靶标病原体如镰孢属种、葡萄孢属种、轮枝孢属种、丝核菌属种、木霉属种(Trichoderma species)和腐霉属种。

在另一个实施方案中，本发明的组合物用于防治收获后的病原体如青霉属、地霉属(Geotrichum)、黑曲霉(Aspergillus niger)和炭疽菌属种。

在另一个实施方案中，本发明的组合物用于防治存在于食品或饲料中的真菌性病原体，如青霉属种、曲霉属种和镰孢属种。

本发明的结合物特别适用于防治细菌性有害生物。根据本发明，细菌性有害生物尤其包括引起植物或植物部位损害的细菌。

细菌尤其包括放线菌门(Actinobacteria)和变形菌门(Proteobacteria)，且选自伯克氏菌科(Burkholderiaceae)、黄单胞菌科(Xanthomonadaceae)、假单胞菌科(Pseudomonadaceae)、肠杆菌科(Enterobacteriaceae)、微杆菌科(Microbacteriaceae)和根瘤菌科(Rhizobiaceae)。

根据本发明，细菌性有害生物特别选自：

燕麦食酸菌(＝燕麦假单胞菌(Pseudomonas avenae)、燕麦假单胞菌燕麦亚种(Pseudomonas avenae subsp.avenae)、红纹假单胞菌(Pseudomonas rubrilineans))，包括例如，燕麦食酸菌燕麦亚种(Acidovorax avenae subsp.avenae)(＝燕麦假单胞菌燕麦亚种)、燕麦食酸菌卡特莱兰亚种(Acidovorax avenae subsp.cattleyae)(＝卡特莱兰假单胞菌(Pseudomonas cattleyae))、燕麦食酸菌西瓜亚种(Acidovorax avenaesubsp.citrulli)(＝类产碱假单胞菌西瓜亚种(Pseudomonas pseudoalcaligenessubsp.citrulli)、燕麦假单胞菌西瓜亚种(Pseudomonas avenae subsp.citrulli))；

伯克霍尔德氏菌属种，包括例如，须芒草伯克霍尔德氏菌(Burkholderiaandropogonis)(＝须芒草假单胞菌(Pseudomonas andropogonis)、伍氏假单胞菌(Pseudomonas woodsii))、石竹伯克霍尔德氏菌(Burkholderia caryophylli)(＝石竹假单胞菌(Pseudomonas caryophylli))、洋葱伯克霍尔德氏菌(Burkholderia cepacia)(＝洋葱假单胞菌(Pseudomonas cepacia))、唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(Burkholderiagladioli)(＝唐菖蒲假单胞菌(Pseudomonas gladioli))、Burkholderia gladiolipv.agaricicola(＝Pseudomnas gladioli pv.agaricicola)、唐菖蒲伯克霍尔德氏菌葱生致病变种(Burkholderia gladioli pv.alliicola)(＝唐菖蒲假单胞菌葱生致病变种(Pseusomonas gladioli pv.alliicola))、唐菖蒲伯克霍尔德氏菌唐菖蒲致病变种(Burkholderia gladioli pv.gladioli)(唐菖蒲假单胞菌、唐菖蒲假单胞菌唐菖蒲致病变种(Pseudomonas gladioli pv.gladioli))、荚壳伯克霍尔德氏菌(＝荚壳假单胞菌(Pseudomonas glumae))、植物伯克霍尔德氏菌(Burkholderia plantarii)(＝植物假单胞菌(Pseudomonas plantarii))、茄伯克霍尔德氏菌(Burkholderia solanacearum)(＝茄罗尔斯通氏菌(Ralstonia solanacearum))以及罗尔斯通氏菌属种(Ralstonia spp.)；

Liberibacter属种，包括韧皮部杆菌属种，包括例如，非洲韧皮部杆菌(Liberibacter africanus(Laf))、美洲韧皮部杆菌(Liberibacter americanus(Lam))、亚洲韧皮部杆菌(Liberibacter asiaticus(Las))、欧洲韧皮部杆菌(Liberibactereuropaeus(Leu))、Liberibacter psyllaurous、茄韧皮部杆菌(Liberibactersolanacearum(Lso))；

棒杆菌属(Corynebacterium)，包括例如，缠绕棒杆菌(Corynebacteriumfascians)、萎蔫棒杆菌萎蔫致病变种(Corynebacterium flaccumfacienspv.flaccumfaciens)、密执安棒杆菌(Corynebacterium michiganensis)、密执安棒杆菌小麦致病变种(Corynebacterium michiganense pv.tritici)、密执安棒杆菌尼布拉斯加致病变种(Corynebacterium michiganense pv.nebraskense)、腐烂棒杆菌(Corynebacterium sepedonicum)；

欧文氏菌属种，包括例如，解淀粉欧文氏菌、菠萝欧文氏菌(Erwinia ananas)、胡萝卜软腐欧文氏菌(＝胡萝卜果胶杆菌(Pectobacterium carotovorum))、胡萝卜软腐欧文氏菌黑腐亚种(Erwinia carotovora subsp.atroseptica)、胡萝卜软腐欧文氏菌胡萝卜软腐亚种(Erwinia carotovora subsp.carotovora)、菊欧文氏菌(Erwinia chrysanthemi)、菊欧文氏菌玉米致病变种(Erwinia chrysanthemi pv.zeae)、溶解欧文氏菌(Erwiniadissolvens)、草生欧文氏菌(Erwinia herbicola)、大黄欧文氏菌(Erwinia rhapontic)、斯氏欧文氏菌(Erwinia stewartii)、嗜管欧文氏菌(Erwinia tracheiphila)、嗜夏孢欧文氏菌(Erwinia uredovora)；

丁香假单胞菌，包括例如，丁香假单胞菌猕猴桃致病变种(Pseudomonas syringaepv.actinidiae(Psa))、丁香假单胞菌致黑致病变种(Pseudomonas syringaepv.atrofaciens)、丁香假单胞菌晕斑致病变种(Pseudomonas syringaepv.coronafaciens)、丁香假单胞菌大豆致病变种、丁香假单胞菌黄瓜致病变种、丁香假单胞菌斑生致病变种(Pseudomonas syringae pv.maculicola)、丁香假单胞菌疱疹致病变种(Pseudomonas syringae pv.papulans)、丁香假单胞菌条纹致病变种(Pseudomonassyringae pv.striafaciens)、丁香假单胞菌丁香致病变种(Pseudomonas syringaepv.syringae)、丁香假单胞菌番茄致病变种、丁香假单胞菌烟草致病变种(Pseudomonassyringae pv.tabaci)；

链霉菌属种(Streptomyces spp.)，包括例如，酸疮痂链霉菌(Streptomycesacidiscabies)、微白黄链霉菌(Streptomyces albidoflavus)、纯白链霉菌(Streptomycescandidus)(＝纯白放线菌(Actinomyces candidus))、Streptomyces caviscabies、山丘链霉菌(Streptomyces collinus)、Streptomyces europaeiscabiei、中间型链霉菌(Streptomyces intermedius)、甘薯链霉菌(Streptomyces ipomoeae)、Streptomycesluridiscabiei、Streptomyces niveiscabiei、Streptomyces puniciscabiei、Streptomyces retuculiscabiei、Streptomyces scabiei、疮痂病链霉菌(Streptomycesscabies)、西唐氏链霉菌(Streptomyces setonii)、Streptomyces steliiscabiei、Streptomyces turgidiscabies、威德摩尔链霉菌(Streptomyces wedmorensis)；

地毯草黄单胞菌(Xanthomonas axonopodis)，包括例如，地毯草黄单胞菌苜蓿致病变种(Xanthomonas axonopodis pv.alfalfae)(＝苜蓿黄单胞菌(Xanthomonasalfalfae))、地毯草黄单胞菌橙致病变种(Xanthomonas axonopodis pv.aurantifolii)(＝褐色黄单胞菌橙亚种(Xanthomonas fuscans subsp.aurantifolii))、地毯草黄单胞菌蒜致病变种(Xanthomonas axonopodis pv.allii)(＝野油菜黄单胞菌蒜致病变种(Xanthomonas campestris pv.allii))、地毯草黄单胞菌地毯草致病变种(Xanthomonasaxonopodis pv.axonopodis)、地毯草黄单胞菌羊蹄甲致病变种(Xanthomonas axonopodispv.bauhiniae)(＝野油菜黄单胞菌羊蹄甲致病变种(Xanthomonas campestrispv.bauhiniae))、地毯草黄单胞菌秋海棠致病变种(Xanthomonas axonopodispv.begoniae)(＝野油菜黄单胞菌秋海棠致病变种(Xanthomonas campestrispv.begoniae))、地毯草黄单胞菌甜蒌叶致病变种(Xanthomonas axonopodispv.betlicola)(＝野油菜黄单胞菌甜蒌叶致病变种(Xanthomonas campestrispv.betlicola))、地毯草黄单胞菌感应草致病变种(Xanthomonas axonopodispv.biophyti)(＝野油菜黄单胞菌感应草致病变种(Xanthomonas campestrispv.biophyti))、地毯草黄单胞菌木豆致病变种(Xanthomonas axonopodis pv.cajani)(＝野油菜黄单胞菌木豆致病变种(Xanthomonas campestris pv.cajani))、地毯草黄单胞菌木薯致病变种(Xanthomonas axonopodis pv.cassavae)(＝木薯黄单胞菌(Xanthomonascassavae)、野油菜黄单胞菌木薯致病变种(Xanthomonas campestris pv.cassavae))、地毯草黄单胞菌山扁豆致病变种(Xanthomonas axonopodis pv.cassiae)(＝野油菜黄单胞菌山扁豆致病变种(Xanthomonas campestris pv.cassiae))、地毯草黄单胞菌柑橘致病变种(＝柑橘黄单胞菌(Xanthomonas citri))、地毯草黄单胞菌柑蜜致病变种(Xanthomonasaxonopodis pv.citrumelo)(＝苜蓿黄单胞菌柑蜜亚种(Xanthomonas alfalfaesubsp.citrumelonis))、地毯草黄单胞菌蝶豆致病变种(Xanthomonas axonopodispv.clitoriae)(＝野油菜黄单胞菌蝶豆致病变种(Xanthomonas campestrispv.clitoriae))、地毯草黄单胞菌糁子致病变种(Xanthomonas axonopodispv.coracanae)(＝野油菜黄单胞菌糁子致病变种(Xanthomonas campestrispv.coracanae))、地毯草黄单胞菌瓜尔豆致病变种(Xanthomonas axonopodispv.cyamopsidis)(＝野油菜黄单胞菌瓜尔豆致病变种(Xanthomonas campestrispv.cyamopsidis))、地毯草黄单胞菌山马蝗致病变种(Xanthomonas axonopodispv.desmodii)(＝野油菜黄单胞菌山马蝗致病变种(Xanthomonas campestrispv.desmodii))、地毯草黄单胞菌恒河山马蝗致病变种(Xanthomonas axonopodispv.desmodiigangetici)(＝野油菜黄单胞菌恒河山马蝗致病变种(Xanthomonascampestris pv.desmodiigangetici))、地毯草黄单胞菌疏花山马蝗致病变种(Xanthomonas axonopodis pv.desmodiilaxiflori)(＝野油菜黄单胞菌疏花山马蝗致病变种(Xanthomonas campestris pv.desmodiilaxiflori))、地毯草黄单胞菌园叶山马蝗致病变种(Xanthomonas axonopodis pv.desmodiirotundifolii)(＝野油菜黄单胞菌园叶山马蝗致病变种(Xanthomonas campestris pv.desmodiirotundifolii))、地毯草黄单胞菌花叶万年青致病变种(Xanthomonas axonopodis pv.dieffenbachiae)(＝野油菜黄单胞菌万年青致病变种(Xanthomonas campestris pv.dieffenbachiae))、地毯草黄单胞菌印度刺桐致病变种(Xanthomonas axonopodis pv.erythrinae)(＝野油菜黄单胞菌印度刺桐致病变种(Xanthomonas campestris pv.erythrinae))、地毯草黄单胞菌簇生致病变种(Xanthomonas axonopodis pv.fascicularis)(＝野油菜黄单胞菌簇生致病变种(Xanthomonas campestris pv.fasciculari))、地毯草黄单胞菌大豆致病变种(＝野油菜黄单胞菌大豆致病变种(Xanthomonas campestris pv.glycines))、地毯草黄单胞菌红木致病变种(Xanthomonas axonopodis pv.khayae)(＝野油菜黄单胞菌红木致病变种(Xanthomonas campestris pv.khayae))、地毯草黄单胞菌胡枝子致病变种(Xanthomonasaxonopodis pv.lespedezae)(＝野油菜黄单胞菌胡枝子致病变种(Xanthomonascampestris pv.lespedezae))、地毯草黄单胞菌栀子致病变种(Xanthomonas axonopodispv.maculifoliigardeniae)(＝野油菜黄单胞菌栀子致病变种(Xanthomonas campestrispv.maculifoliigardeniae))、地毯草黄单胞菌锦葵致病变种(Xanthomonas axonopodispv.malvacearum)(＝柑橘黄单胞菌锦葵亚种(Xanthomonas citri subsp.malvacearum))、地毯草黄单胞菌木薯致病变种(Xanthomonas axonopodis pv.manihotis)(＝野油菜黄单胞菌木薯致病变种(Xanthomonas campestris pv.manihotis))、地毯草黄单胞菌栖角胡麻致病变种(Xanthomonas axonopodis pv.martyniicola)(＝野油菜黄单胞菌栖角胡麻致病变种(Xanthomonas campestris pv.martyniicola))、地毯草黄单胞菌梅氏致病变种(Xanthomonas axonopodis pv.melhusii)(＝野油菜黄单胞菌梅氏致病变种(Xanthomonascampestris pv.melhusii))、地毯草黄单胞菌中田氏黄麻致病变种(Xanthomonasaxonopodis pv.nakataecorchori)(＝野油菜黄单胞菌中田氏黄麻致病变种(Xanthomonascampestris pv.nakataecorchori))、地毯草黄单胞菌西番莲致病变种(Xanthomonasaxonopodis pv.passiflorae)(＝野油菜黄单胞菌西番莲致病变种(Xanthomonascampestris pv.passiflorae))、地毯草黄单胞菌印度麻致病变种(Xanthomonasaxonopodis pv.patelii)(＝野油菜黄单胞菌印度麻致病变种(Xanthomonas campestrispv.patelii))、地毯草黄单胞菌脂麻致病变种(Xanthomonas axonopodis pv.pedalii)(＝野油菜黄单胞菌脂麻致病变种(Xanthomonas campestris pv.pedalii))、地毯草黄单胞菌菜豆致病变种(Xanthomonas axonopodis pv.phaseoli)(＝野油菜黄单胞菌菜豆致病变种(Xanthomonas campestris pv.phaseoli)、菜豆黄单胞菌(Xanthomonas phaseoli))、地毯草黄单胞菌菜豆致病变种褐色变种(Xanthomonas axonopodis pv.phaseolivar.fuscans)(＝褐色黄单胞菌(Xanthomonas fuscans))、地毯草黄单胞菌叶下珠致病变种(Xanthomonas axonopodis pv.phyllanthi)(＝野油菜黄单胞菌叶下珠致病变种(Xanthomonas campestris pv.phyllanthi))、地毯草黄单胞菌栖酸浆致病变种(Xanthomonas axonopodis pv.physalidicola)(＝野油菜黄单胞菌栖酸浆致病变种(Xanthomonas campestris pv.physalidicola))、地毯草黄单胞菌栖猩猩木致病变种(Xanthomonas axonopodis pv.poinsettiicola)(＝野油菜黄单胞菌栖猩猩木致病变种(Xanthomonas campestris pv.poinsettiicola))、地毯草黄单胞菌安石榴致病变种(Xanthomonas axonopodis pv.punicae)(＝野油菜黄单胞菌安石榴致病变种(Xanthomonas campestris pv.punicae))、地毯草黄单胞菌鹿藿致病变种(Xanthomonasaxonopodis pv.rhynchosiae)(＝野油菜黄单胞菌鹿藿致病变种(Xanthomonascampestris pv.rhynchosiae))、地毯草黄单胞菌蓖麻致病变种(Xanthomonas axonopodispv.ricini)(＝野油菜黄单胞菌蓖麻致病变种(Xanthomonas campestris pv.ricini))、地毯草黄单胞菌田菁致病变种(Xanthomonas axonopodis pv.sesbaniae)(＝野油菜黄单胞菌田菁致病变种(Xanthomonas campestris pv.sesbaniae))、地毯草黄单胞菌罗望子致病变种(Xanthomonas axonopodis pv.tamarindi)(＝野油菜黄单胞菌罗望子致病变种(Xanthomonas campestris pv.tamarindi))、地毯草黄单胞菌维管束致病变种(Xanthomonas axonopodis pv.vasculorum)(＝野油菜黄单胞菌维管束致病变种(Xanthomonas campestris pv.vasculorum))、地毯草黄单胞菌辣椒斑点病致病变种(Xanthomonas axonopodis pv.vesicatoria)(＝野油菜黄单胞菌辣椒斑点病致病变种、辣椒斑点病黄单胞菌(Xanthomonas vesicatoria))、地毯草黄单胞菌绿豆致病变种(Xanthomonas axonopodis pv.vignaeradiatae)(＝野油菜黄单胞菌绿豆致病变种(Xanthomonas campestris pv.vignaeradiatae))、地毯草黄单胞菌栖豇豆致病变种(Xanthomonas axonopodis pv.vignicola)(＝野油菜黄单胞菌栖豇豆致病变种(Xanthomonas campestris pv.vignicola))、地毯草黄单胞菌葡萄蔓致病变种(Xanthomonas axonopodis pv.vitians)(＝野油菜黄单胞菌葡萄蔓致病变种(Xanthomonas campestris pv.vitians))；

野油菜黄单胞菌香蕉致病变种(Xanthomonas campestris pv.musacearum)、野油菜黄单胞菌桃李致病变种(＝Xanthomonas arboricola pv.pruni)、草莓黄单胞菌(Xanthomonas fragariae)；

半透明黄单胞菌(Xanthomonas translucens)(＝野油菜黄单胞菌大麦致病变种(Xanthomonas campestris pv.hordei))，包括例如，半透明黄单胞菌燕麦草致病变种(Xanthomonas translucens pv.arrhenatheri)(＝野油菜黄单胞菌燕麦草致病变种(Xanthomonas campestris pv.arrhenatheri))、半透明黄单胞菌谷物致病变种(Xanthomonas translucens pv.cerealis)(＝野油菜黄单胞菌谷物致病变种(Xanthomonas campestris pv.cerealis))、半透明黄单胞菌禾谷致病变种(Xanthomonastranslucens pv.graminis)(＝野油菜黄单胞菌禾谷致病变种(Xanthomonas campestrispv.graminis))、半透明黄单胞菌梯牧草属致病变种(Xanthomonas translucenspv.phlei)(＝野油菜黄单胞菌梯牧草属致病变种(Xanthomonas campestris pv.phlei))、半透明黄单胞菌梯牧草致病变种(Xanthomonas translucens pv.phleipratensis)(＝野油菜黄单胞菌梯牧草致病变种(Xanthomonas campestris pv.phleipratensis))、半透明黄单胞菌早熟禾致病变种(Xanthomonas translucens pv.poae)(＝野油菜黄单胞菌早熟禾致病变种(Xanthomonas campestris pv.poae))、半透明黄单胞菌黑麦致病变种(Xanthomonas translucens pv.secalis)(＝野油菜黄单胞菌黑麦致病变种(Xanthomonascampestris pv.secalis))、半透明黄单胞菌半透明致病变种(Xanthomonas translucenspv.translucens)(＝野油菜黄单胞菌半透明致病变种(Xanthomonas campestrispv.translucens))、半透明黄单胞菌波形致病变种(Xanthomonas translucenspv.undulosa)(＝野油菜黄单胞菌波形致病变种(Xanthomonas campestrispv.undulosa))；

水稻黄单胞菌(Xanthomonas oryzae)、水稻黄单胞菌水稻致病变种(Xanthomonasoryzae pv.oryzae)(＝野油菜黄单胞菌水稻致病变种)、水稻黄单胞菌栖稻致病变种(Xanthomonas oryzae pv.oryzicola)(＝野油菜黄单胞菌栖稻致病变种(Xanthomonascampestris pv.oryzicola))；

黄单胞菌科的苛养木杆菌。

优选地，细菌性有害生物选自：

燕麦食酸菌燕麦亚种(＝燕麦假单胞菌燕麦亚种)、燕麦食酸菌西瓜亚种(＝类产碱假单胞菌西瓜亚种、燕麦假单胞菌西瓜亚种)、荚壳伯克霍尔德氏菌(＝荚壳假单胞菌)、茄伯克霍尔德氏菌(＝茄罗尔斯通氏菌)、密执安棒杆菌尼布拉斯加致病变种、解淀粉欧文氏菌、胡萝卜软腐欧文氏菌(＝胡萝卜果胶杆菌)、胡萝卜软腐欧文氏菌黑腐亚种、胡萝卜软腐欧文氏菌胡萝卜软腐亚种、菊欧文氏菌、菊欧文氏菌玉米致病变种、草生欧文氏菌、斯氏欧文氏菌、嗜夏孢欧文氏菌、Liberibacter属种、如上所述的韧皮部杆菌属种、丁香假单胞菌、丁香假单胞菌猕猴桃致病变种(Psa)、丁香假单胞菌大豆致病变种、丁香假单胞菌黄瓜致病变种、丁香假单胞菌疱疹致病变种、丁香假单胞菌丁香致病变种、丁香假单胞菌番茄致病变种、丁香假单胞菌烟草致病变种、罗尔斯通氏菌属种、疮痂病链霉菌、地毯草黄单胞菌柑橘致病变种、地毯草黄单胞菌大豆致病变种(＝野油菜黄单胞菌大豆致病变种)、地毯草黄单胞菌安石榴致病变种(＝野油菜黄单胞菌安石榴致病变种)、地毯草黄单胞菌辣椒斑点病致病变种(＝野油菜黄单胞菌辣椒斑点病致病变种、辣椒斑点病黄单胞菌)、野油菜黄单胞菌、野油菜黄单胞菌香蕉致病变种、野油菜黄单胞菌桃李致病变种(＝Xanthomonasarboricola pv.pruni)、草莓黄单胞菌、半透明黄单胞菌半透明致病变种(＝野油菜黄单胞菌半透明致病变种)、水稻黄单胞菌水稻致病变种(＝野油菜黄单胞菌水稻致病变种)、苛养木杆菌。

在本发明的一个更优选的方面，细菌性有害生物选自：

如上所定义的燕麦食酸菌(＝燕麦假单胞菌、燕麦假单胞菌燕麦亚种、红纹假单胞菌)、如上所定义的伯克霍尔德氏菌属种、荚壳伯克霍尔德氏菌、如上所定义的棒杆菌属、如上所定义的欧文氏菌属种、解淀粉欧文氏菌、胡萝卜软腐欧文氏菌(＝胡萝卜果胶杆菌)、胡萝卜软腐欧文氏菌黑腐亚种、胡萝卜软腐欧文氏菌胡萝卜软腐亚种、菊欧文氏菌、菊欧文氏菌玉米致病变种、草生欧文氏菌、斯氏欧文氏菌、嗜夏孢欧文氏菌、Liberibacter属种、如上所定义的韧皮部杆菌属种、如上所定义的丁香假单胞菌、丁香假单胞菌猕猴桃致病变种、丁香假单胞菌大豆致病变种、丁香假单胞菌番茄致病变种、丁香假单胞菌黄瓜致病变种、罗尔斯通氏菌属种、链霉菌属种、疮痂病链霉菌、黄单胞菌属种、如上所定义的地毯草黄单胞菌、地毯草黄单胞菌柑橘致病变种、地毯草黄单胞菌大豆致病变种、野油菜黄单胞菌、野油菜黄单胞菌香蕉致病变种、野油菜黄单胞菌桃李致病变种(＝Xanthomonas arboricola pv.pruni)、草莓黄单胞菌、半透明黄单胞菌(＝野油菜黄单胞菌大麦致病变种)、水稻黄单胞菌水稻致病变种(＝野油菜黄单胞菌水稻致病变种)和如上所定义的苛养木杆菌。

甚至更优选选自：

燕麦食酸菌、伯克霍尔德氏菌属种、荚壳伯克霍尔德氏菌、棒杆菌属、欧文氏菌属种、Liberibacter属种、韧皮部杆菌属种、丁香假单胞菌、丁香假单胞菌猕猴桃致病变种、丁香假单胞菌大豆致病变种、丁香假单胞菌番茄致病变种、丁香假单胞菌黄瓜致病变种、罗尔斯通氏菌属种、链霉菌属种、黄单胞菌属种、地毯草黄单胞菌、地毯草黄单胞菌柑橘致病变种、地毯草黄单胞菌大豆致病变种、野油菜黄单胞菌、野油菜黄单胞菌香蕉致病变种、野油菜黄单胞菌桃李致病变种、草莓黄单胞菌、半透明黄单胞菌、水稻黄单胞菌水稻致病变种(＝野油菜黄单胞菌水稻致病变种)和苛养木杆菌。

在本发明的一个甚至更优选的方面，细菌性有害生物选自：

燕麦食酸菌、伯克霍尔德氏菌属种、荚壳伯克霍尔德氏菌、棒杆菌属、解淀粉欧文氏菌、胡萝卜软腐欧文氏菌、胡萝卜软腐欧文氏菌黑腐亚种、胡萝卜软腐欧文氏菌胡萝卜软腐亚种、菊欧文氏菌、菊欧文氏菌玉米致病变种、草生欧文氏菌、斯氏欧文氏菌、嗜夏孢欧文氏菌、Liberibacter属种、韧皮部杆菌属种、丁香假单胞菌、丁香假单胞菌猕猴桃致病变种、丁香假单胞菌大豆致病变种、丁香假单胞菌黄瓜致病变种、丁香假单胞菌番茄致病变种、罗尔斯通氏菌属种、疮痂病链霉菌、地毯草黄单胞菌、地毯草黄单胞菌柑橘致病变种、地毯草黄单胞菌大豆致病变种、野油菜黄单胞菌、野油菜黄单胞菌香蕉致病变种、野油菜黄单胞菌桃李致病变种、草莓黄单胞菌、半透明黄单胞菌、水稻黄单胞菌水稻致病变种(＝野油菜黄单胞菌水稻致病变种)和苛养木杆菌。

最优选的选择包括：

荚壳伯克霍尔德氏菌、Liberibacter属种、韧皮部杆菌属种、地毯草黄单胞菌柑橘致病变种、丁香假单胞菌、丁香假单胞菌猕猴桃致病变种、丁香假单胞菌大豆致病变种、丁香假单胞菌黄瓜致病变种、丁香假单胞菌番茄致病变种、罗尔斯通氏菌属种、疮痂病链霉菌、地毯草黄单胞菌大豆致病变种、野油菜黄单胞菌桃李致病变种、野油菜黄单胞菌、水稻黄单胞菌水稻致病变种(＝野油菜黄单胞菌水稻致病变种)和苛养木杆菌。

在一个实施方案中，本发明提供了一种组合物，其包含脂肽和式(I)的化合物或其盐的协同杀真菌结合物：

其中

m为0和18之间的整数；

n为1和10之间的整数；

Z¹为CH₂、S、O或NH；以及

R¹为硫酸根、磺酸根、磷酸根或羧酸根。

在一些实施例中，R¹为硫酸根，在其他实施例中，Z¹为O。在其他实施例中，n为1和5之间的整数，而在其他实施例中，m为8和16之间的整数。

在另一个实施方案中，本发明提供了一种组合物，其包含脂肽和式(II)的化合物的协同杀真菌结合物：

其中

m为0和18之间的整数；

n为1和10之间的整数；

Z¹为CH₂、S、O或NH；以及

当M⁺存在时，它选自H⁺、Li⁺、Na⁺、K⁺和NH₄ ⁺。

在某些方面，Z¹为O。在其他方面，m为8和16之间的整数。

在另一个实施方案中，本发明提供了一种组合物，其包含脂肽和式(III)的化合物的协同杀真菌结合物：

其中

R为烷基；

n为1至10的整数，并意指(聚)亚乙基氧桥中的亚乙基氧基单元的数目；以及

M⁽⁺⁾为阳离子，优选H⁽⁺⁾或金属离子或铵离子。

在某些方面，本发明提供一种组合物，其包含脂肽和式(I)的化合物或其立体异构体的协同杀真菌结合物：

其中

o为0和10之间的整数；

p为0和2之间的整数；

q为0和10之间的整数；

X¹为酯键或糖苷键，其中-OH来自R¹；以及

所述化合物和脂肽(或者，脂肽组分(例如，产脂肽发酵液、含有脂肽的粗提取物；纯化的或半纯化的脂肽提取物；或一种或更多种化学合成的或衍生的纯脂肽))的重量比在约1000:1至约1:1000的范围内，优选在约500:1至约1:500的范围内，更优选在约100:1至约1:100的范围内。其他优选的比率在约20:1和约1:20之间，在约10:1和约1:10之间，在约5:1和约1:5之间以及在约3:1和约1:3之间。

约100:1的比率意指约100重量份的化合物(例如，失水山梨糖醇酯或烷基葡糖苷)和约1重量份的脂肽或脂肽组分如枯草芽孢杆菌QST713发酵产物进行结合(作为单一制剂、结合制剂或通过单独施用于植物而在植物上形成结合物)。

在一个实施方案中，本发明的化合物与包含一种以上的化合物(其选自一种以上的下列化合物组：表面活性素型化合物、伊枯草菌素型化合物、芬枯草菌素型化合物和/或杀镰孢菌素)的纯脂肽的重量比在约1000:1至约1:1000的范围内，优选在约500:1至约1:500的范围内，更优选在约100:1至约1:100的范围内，在约50:1至约1:50的范围内或在约25:1至约1:25的范围内。在一些实施方案中，所述化合物和脂肽或脂肽组分的上述结合物中的任何一种的重量比为约100:1至约1:100；在其他实施方案中，其为约10:1至约1:10；在其他实施方案中，其为约5:1至约1:5；在其他实施方案中，其为约3:1至约1:3；在其他实施方案中，其为约1:1。

在另一个实施方案中，本发明的一种或更多种化合物与产脂肽发酵液(例如，枯草芽孢杆菌QST713发酵液)的重量比在约500:1至约1:500的范围内，更优选在约100:1至约1:100的范围内，在约50:1至约1:50的范围内或在约25:1至约1:25的范围内。在一方面，本发明的一种或更多种化合物与产脂肽发酵液的重量比在24:1至3:1的范围内，如实施例2所示，其中3000ppm的20(失水山梨糖醇单月桂酸酯)和20(聚乙二醇失水山梨糖醇单月桂酸酯)的混合物与1000ppm和125ppm之间的含有(1.67％)干燥的枯草芽孢杆菌QST713的 ASO发酵液结合。

在一些实施方案中，a)所述化合物和b)脂肽(或者，脂肽组分(例如，产脂肽发酵液、含有脂肽的粗提取物；纯化的或半纯化的脂肽提取物；或一种或更多种化学合成的或衍生的纯脂肽))的重量比为约1:5至约1:120。在某些方面，该重量比为约1:5、约1:10、约1:15、约1:19、约1:20、约1:24、约1:25、约1:30、约1:50、约1:60、约1:75或约1:120。

以协同重量比使用或施用所述化合物(例如，失水山梨糖醇酯或烷基葡糖苷)和脂肽或脂肽组分。技术人员应理解，这些比率是指结合制剂内的比率，以及当两种组分作为单一制剂施用至待处理植物时，本文所述的化合物(例如，失水山梨糖醇酯或烷基葡糖苷)和脂肽或脂肽组分的计算的比率。由于所述化合物(例如，失水山梨糖醇酯或烷基葡糖苷)和脂肽或脂肽组分分别在单一制剂中的体积和量是技术人员已知的，因此技术人员可通过简单的数学计算该比率。

所述比率可基于如下进行计算：在将本发明的结合物的所述组分施用于植物或植物部位的时间点时的化合物(例如，失水山梨糖醇酯或烷基葡糖苷)的量，以及在将本发明的结合物的所述组分施用于植物或植物部位的时间点时或之前不久(如48h、24h、12h、6h、2h、1h)的脂肽或脂肽组分的量。可将所述化合物(例如，失水山梨糖醇酯或烷基葡糖苷)和脂肽或脂肽组分同时或在不同时间施用于植物或植物部位，只要在一次或多次施用后两种组分存在于植物上或植物内即可。

在一些方面，将所述化合物(例如，失水山梨糖醇酯或烷基葡糖苷)和脂肽或脂肽组分在结合或混合在一起后加热约1hr、2hr或3hr。可将混合物或结合物加热至约40℃、约50℃、约60℃、约70℃、约80℃、约90℃或约100℃。

在其它方面，将所述化合物(例如，失水山梨糖醇酯或烷基葡糖苷)和脂肽或脂肽组分在混合和/或加热后平衡至少12小时、至少24小时或至少48小时。

在一个实施方案中，协同杀真菌结合物包含脂肽和农业上可接受的去污剂。去污剂可以是本领域已知的用于农业制剂的任何去污剂，其目的是例如使制剂粘附到靶标植物的表面。应理解，优选的去污剂是完全可生物降解的和环境友好的。

在另一个实施方案中，协同杀真菌结合物包含脂肽和农业上可接受的非离子两亲物或表面活性剂。存在许多常用于生物情况的非离子两亲物或表面活性剂，例如，聚氧乙烯失水山梨糖醇脂肪酸醚(例如，以商品名销售)和失水山梨糖醇脂肪酸醚(例如，以商品名销售)。

特别有用的一组表面活性剂是基于失水山梨糖醇的非离子表面活性剂。这些表面活性剂通过山梨糖醇脱水得到1,4-失水山梨糖醇，然后使其与一当量或多当量的脂肪酸反应而制备。脂肪酸取代的部分可以进一步与环氧乙烷反应以得到第二组表面活性剂。脂肪酸取代的失水山梨糖醇表面活性剂通过使1,4-失水山梨糖醇与脂肪酸(如月桂酸、棕榈酸、硬脂酸、油酸或类似的长链脂肪酸)反应以得到1,4-失水山梨糖醇单酯、1,4-失水山梨糖醇倍半酯或1,4-失水山梨糖醇三酯而制备。这些表面活性剂的通用名称包括，例如，失水山梨糖醇单月桂酸酯、失水山梨糖醇单棕榈酸酯、失水山梨糖醇单硬脂酸酯、失水山梨糖醇单油酸酯、失水山梨糖醇倍半油酸酯和失水山梨糖醇三油酸酯。这些表面活性剂可以名称或商购获得，通常具有区分各种单酯、二酯和三酯取代的失水山梨糖醇的字母或数字标号。

和表面活性剂是亲水性的且通常可溶于或可分散于油中。它们还可溶于大多数有机溶剂中。在水中，它们通常是不可溶的但是可分散的。通常，这些表面活性剂的亲水-亲脂平衡(HLB)值在1.8和8.6之间。这类表面活性剂可通过本领域已知的方式容易地制备或可商购获得。

相关的一组表面活性剂包括聚氧乙烯失水山梨糖醇单酯和聚氧乙烯失水山梨糖醇三酯。这些材料通过将环氧乙烷加入到1,4-失水山梨糖醇单酯或三酯中而制备。加入聚氧乙烯将亲脂性的失水山梨糖醇单酯或三酯表面活性剂转化成亲水性的表面活性剂，其通常可溶于或可分散于水中并可以不同程度溶于有机液体中。

这些材料——可以商标商购获得——用于制备水包油乳剂和分散剂，或用于溶解油。表面活性剂可与相关的失水山梨糖醇单酯或三酯表面活性剂结合以促进乳液稳定性。表面活性剂可从许多制造商商购获得。

可单独使用或与和表面活性剂结合使用的第三组非离子表面活性剂是通过环氧乙烷与长链脂肪酸的反应制得的聚氧乙烯脂肪酸。该类型的最常用的表面活性剂以名称销售并为硬脂酸的聚氧乙烯衍生物。与表面活性剂一样，表面活性剂是亲水性的且可溶于或可分散于水中。表面活性剂可与表面活性剂或与或表面活性剂混合物混合以用于形成乳剂。表面活性剂可通过本领域已知的方法制备或可商购获得。

第四组基于聚氧乙烯的非离子表面活性剂是衍生自月桂醇、乙酰基醇、硬脂醇和油醇的聚氧乙烯脂肪酸醚。这些材料如上通过将环氧乙烷加入到脂肪醇中而制备。这些表面活性剂的商品名为表面活性剂可为亲水性的或亲脂性的，这取决于表面活性剂中的聚氧乙烯部分的大小。虽然制备这些化合物可从现有技术获得，但它们也可容易地从商业来源获得。

可在本发明的实施中使用的其他非离子表面活性剂包括聚氧乙烯、多元醇脂肪酸酯、聚氧乙烯醚、聚氧丙烯脂肪醚、含有聚氧乙烯的蜂蜡衍生物、聚氧乙烯羊毛脂衍生物、聚氧乙烯脂肪酸甘油酯以及甘油脂肪酸酯或长链脂肪酸的其他聚氧乙烯酸醇或醚衍生物。

在一些方面，式(I)的化合物为烷基糖苷，在其它方面，其为烷基葡糖苷。可用于本发明的烷基葡糖苷的实例为癸基葡糖苷、辛基葡糖苷、十二烷基葡糖苷及其组合。

在其它方面，式(I)的化合物为失水山梨糖醇酯。失水山梨糖醇酯的非限制性实例包括失水山梨糖醇单月桂酸酯、聚氧乙烯失水山梨糖醇单油酸酯、失水山梨糖醇单棕榈酸酯、失水山梨糖醇倍半油酸酯、失水山梨糖醇三油酸酯、失水山梨糖醇单硬脂酸酯和失水山梨糖醇三硬脂酸酯。

在另一方面，本发明涉及一种协同组合物，其包含a)脂肽；和b)合成胶乳。在一方面，合成胶乳为(合成胶乳)。在另一方面，本发明提供了一种协同组合物，其包含a)脂肽；和b)季胺。在一个实施方案中，季胺为椰油酰胺丙基甜菜碱。

在一些实施方案中，本发明提供了一种协同组合物，其包含a)脂肽；和b)烷基多糖苷。在一方面，烷基多糖苷为C_8-10烷基多糖苷。在一个实施方案中，烷基多糖苷为 PG8107G(C_8-10烷基多糖苷)。

在某些实施方案中，本发明提供一种协同组合物，其包含a)脂肽；和b)菜籽油甲酯；蓖麻油；石蜡矿物油；乙氧基化和/或丙氧基化的醇；或七甲基三硅氧烷改性的聚环氧烷。

在一些方面，本发明涉及一种组合物，其包含脂肽和阴离子表面活性剂的协同杀真菌结合物。在某些方面，阴离子表面活性剂为聚亚烷基化合物。聚亚烷基化合物可选自1306、 LRO、 L-77、20和/或20、1214、 PE-L64(乙氧基化/丙氧基化的醇)、(石蜡矿物油)、(菜籽油甲酯)及其组合。

在其他方面，本发明提供了一种组合物，其包含脂肽和两性离子表面活性剂的协同杀真菌结合物，两性离子表面活性剂选自椰油酰胺丙基甜菜碱(C8-C18)、C12-C14月桂基二甲基甜菜碱和椰油基甜菜碱(coco betaine)。

在其他实施方案中，本发明涉及一种处理植物以防治真菌性病害和/或细菌性病害的方法，其中所述方法包括向植物、植物的部位和/或植物的位置施用包含阴离子表面活性剂或其盐的组合物。在某些方面，阴离子表面活性剂为聚亚烷基化合物。聚亚烷基化合物可选自1306、 LRO、 PE-L64、 L-77、20和/或20、1214、及其组合。

还提供了一种处理植物以防治真菌性病害和/或细菌性病害的方法，其中所述方法包括向植物、植物的部位和/或植物的位置施用包含两性离子表面活性剂的组合物。两性离子表面活性剂可为具有季铵的甜菜碱。在一些实施方案中，甜菜碱选自椰油酰胺丙基甜菜碱(C8-C18)、C12-C14月桂基二甲基甜菜碱和椰油基甜菜碱。

在其他实施方案中，阴离子表面活性剂为式(I)的化合物或其盐：

其中

m为0和18之间的整数；

n为1和10之间的整数；

Z¹为CH₂、S、O或NH；

以及R¹为硫酸根、磺酸根、磷酸根或羧酸根。

在一方面，R¹为硫酸根。在另一方面，Z¹为O。在一个实施方案中，n为1和5之间的整数。在另一个实施方案中，m为8和16之间的整数。在一些方面，组合物包含选自以下的化合物：月桂基醚硫酸钠(SLES)、3,6-二氧杂二十烷基硫酸盐、3,6-二氧杂十八烷基硫酸盐、其盐及其组合。

在某些方面，上述组合物的脂肽组分包括以下的一种或更多种：伊枯草菌素、芽孢菌霉素、抗霉枯草菌素、埃斯波素、地衣素、帕米拉素、表面活性素、芬枯草菌素A、芬枯草菌素B、大侧柏素A、大侧柏素B和/或阿瓜斯他汀。在前述实施方案的一个实例中，脂肽组分包括以下的一种或更多种：伊枯草菌素、表面活性素、芬枯草菌素和/或大侧柏素。在前述实施方案的另一个实例中，表面活性素排除在组合物之外。

脂肽包括但不限于可由各种细菌(包括芽孢杆菌属种、类芽孢杆菌属种和链霉菌属种)获得的两亲性环肽。

两亲性环状脂肽由六至十个与β-氨基脂肪酸或β-羟基脂肪酸连接的α-氨基酸构成，包括但不限于芬枯草菌素型化合物、伊枯草菌素型化合物、表面活性素型化合物和杀镰孢菌素。伊枯草菌素型化合物由七个氨基酸构成并与β-氨基脂肪酸连接。脂肪酸链的长度可在C14至C17之间变化。这些化合物可由芽孢杆菌属的各个种(包括枯草芽孢杆菌(subtilis)和解淀粉芽孢杆菌(amyloliquefaciens))获得。伊枯草菌素类及其变体记载于Ongena等人，“Bacillus Lipopeptides：Versatile Weapons for Plant DiseaseBiocontrol，”Trends in Microbiology，16(3)：115-125，(2007)中。本发明的伊枯草菌素型化合物包括以下化合物中的一种或更多种：芽孢菌霉素D、芽孢菌霉素F、芽孢菌霉素L、芽孢菌霉素LC(也称为bacillopeptin)、抗霉枯草菌素、伊枯草菌素A、伊枯草菌素A_L和伊枯草菌素C(后三种化合物在本文中统称为伊枯草菌素类)。

芬枯草菌素型化合物由十个与β-羟基脂肪酸连接的氨基酸构成，所述β-羟基脂肪酸具有长度在C14至C18之间变化的链。这些化合物可由芽孢杆菌属的各个种(包括枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌(cereus)和苏云金芽孢杆菌(thuringiensis))获得和由链霉菌属种获得。芬枯草菌素型化合物记载于Ongena，同上文。适合于本文所述的组合物的芬枯草菌素型化合物包括Kimura等人，“SNA 60-367-New Peptide EnzymeInhibitors Against Aromatase，”Journal of Antibiotics，50(6)：529-531，(1997)中所记载的芬枯草菌素A、芬枯草菌素B、大侧柏素A、大侧柏素B、得自链霉菌属种的大侧柏素类，以及如美国专利号6,291,426中所记载的阿瓜斯他汀类(所列的后四种在本文中统称为大侧柏素类)。

表面活性素型化合物由七个与β-羟基脂肪酸连接的氨基酸构成，所述β-羟基脂肪酸具有长度在C13至C16之间变化的链。这些化合物可由芽孢杆菌属的各个种(包括枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌(coagulans)、短小芽孢杆菌(pumilus)和地衣芽孢杆菌(licheniformis))获得。表面活性素族的化合物记载于Ongena，同上文。本发明的表面活性素型化合物包括以下化合物中的一种或更多种：埃斯波素、地衣素、帕米拉素和表面活性素。

杀镰孢菌素类由六个与15-胍基-3-羟基十五烷酸连接的氨基酸构成。杀镰孢菌素类可由类芽孢杆菌属种(包括多粘菌属(polymyxa))获得。杀镰孢菌素族的化合物记载于Choi，S-K等人，“Identification and Functional Analysis of the FusaricidinBiosynthetic Gene of Paenibacillus polymyxa E681,”Biochemical and Biophysical Research Communications，365：89-95，(2008)中。本发明的杀镰孢菌素类包括以下化合物中的一种或更多种：杀镰孢菌素A-D和杀镰孢菌素LI-F03、LI-F04、LI-F05、LI-F06、LI-F07和LI-F08。

某些细菌产生一种以上的脂肽，且已知各种脂肽的结合物具有协同杀真菌活性。组合物的脂肽组分可包含来自以下脂肽类别中的至少两种的脂肽的结合物：表面活性素型化合物、伊枯草菌素型化合物和芬枯草菌素型化合物。结合物可包含以下化合物中的两种或更多种：伊枯草菌素A、大侧柏素A和B、芬枯草菌素A和B和表面活性素。结合物可包含以下化合物中的一种或更多种：伊枯草菌素A、大侧柏素A和B、芬枯草菌素A和B、表面活性素和阿瓜斯他汀。

在某些方面，本发明的化合物可与酯肽(depsipeptide)结合或与酯肽一起施用。本文使用的“酯肽”是其中一个以上的酰胺键被酯键替代的肽。在某些实施方案中，酯肽是环状酯肽。可根据本发明使用的酯肽的非限制性实例包括杀镰孢菌素A-D和杀镰孢菌素LI-F03、LI-F04、LI-F05、LI-F06、LI-F07和LI-F08。

本发明的脂肽和酯肽通过一种以上的细菌(包括但不限于上述的那些)产生或是化学合成的。培养细菌的方法是本领域公知的。常规的大规模微生物培养方法包括深层发酵、固态发酵或液体表面培养。对于芽孢杆菌属，在发酵即将结束时，由于营养素耗尽，细胞开始从生长期向孢子形成期过渡，以使发酵的最终产物主要为孢子、代谢物和残余发酵培养基。孢子形成是许多芽孢杆菌(Bacilli)的自然生命周期的一部分，并通常由细胞对营养限制的响应而启动。对于本发明，对发酵进行配置以获得高水平的脂肽和促进孢子形成。

由发酵(即，发酵液)所得到的培养基中的细菌细胞、孢子和代谢物可直接使用或通过常规工业方法浓缩(以制备发酵固体物)，所述常规工业方法包括但不限于离心、切向流过滤、深层过滤和蒸发。洗涤浓缩的发酵固体物，例如，通过渗滤法洗涤，以除去残留的发酵液和代谢物。

发酵液或发酵固体可在添加或不添加载体的情况下使用常规干燥工艺或方法干燥，所述常规干燥工艺或方法包括但不限于喷雾干燥、冷冻干燥、盘式干燥、流化床干燥、滚筒干燥或蒸发。所得的干燥的发酵固体可进一步进行处理，包括但不限于通过碾磨或制粒进行处理，以达到特定的粒度或物理形式。为适合于所需的使用方法，还可在干燥后加入载体。

细菌产生的脂肽可从细菌细胞中分离或从其他细菌组分中进一步纯化并相互分离。术语“无细胞制品”是指通过本领域技术人员公知的方式从其中去除了或基本上去除了细胞的发酵液。发酵液的无细胞制品可通过本领域已知的任何方式(包括但不限于对发酵液进行萃取、离心和/或过滤)获得。本领域技术人员将理解，所谓的无细胞制品可以不是不含细胞而是大体上无细胞或基本上无细胞，这取决于去除细胞所使用的技术(例如，离心的速度)。可将所得的无细胞制品干燥和/或与有助于其特定应用的组分一起配制。上述用于发酵液的浓缩方法和干燥技术也适用于无细胞制品。

在通过对发酵液进行离心而制备无细胞制品之后，代谢物可通过尺寸排阻过滤——包括但不限于包括LH-20、G10和G15以及G25的树脂——进行纯化，所述树脂基于截留分子量将代谢物分组到不同的级分，包括但不限于低于约2000道尔顿、低于约1500道尔顿、低于约1000道尔顿等的分子量，因为脂肽介于800道尔顿和1600道尔顿之间。

本发明的脂肽可由枯草芽孢杆菌的产脂肽发酵产物获得或存在于其中。在一些实施方案中，枯草芽孢杆菌QST713或枯草芽孢杆菌QST713的发酵产物用作组合物的产脂肽组分。枯草芽孢杆菌QST713、其突变体、其上清液及其脂肽代谢物和它们用于防治植物病原体和昆虫的方法充分记载于美国专利号6,060,051；6,103,228；6,291,426；6,417,163和6,638,910中。在这些专利中，所述菌株称为AQ713，其与QST713同义。枯草芽孢杆菌菌株QST713已根据国际承认的用于专利程序的微生物保藏的布达佩斯条约的规定于1997年5月7日以登录号B-21661保藏于NRRL。NRRL是美国农业研究菌种保藏中心(AgriculturalResearch Service Culture Collection)的简称，其为在国际承认的用于专利程序的微生物保藏的布达佩斯条约下用于保藏微生物菌株的国际权威保藏机构，地址为美国伊利诺伊州，皮奥里亚市，北部大学街1815号，美国农业部农业研究服务局，国家农业应用研究中心，邮编61604(National Center for Agricultural Utilization Research，AgriculturalResearch service，U.S.Department of Agriculture，1815North university Street，Peroira，Illinois 61604 USA)。本说明书中对于QST713的任何提及是指枯草芽孢杆菌QST713。也适合于本发明的枯草芽孢杆菌QST713的特定变体(例如，以登录号NRRL B-50421和NRRL B-50455保藏的枯草芽孢杆菌AQ30002和AQ30004)记载于美国专利公开号2012/0231951中。

在本说明书中对于QST713的任何提及是指如存在于产品中的、以NRRL登录号B-21661保藏的，或于生物反应器中在模拟产品的生产的条件下制备的枯草芽孢杆菌QST713(也称为AQ713)。

除非另有明确说明，否则本文中所述的微生物和特定菌株都从自然界中分离(即分离的)并在人工条件下(如在摇瓶培养物中)生长，或通过放大的制造方法(如在生物反应器中)生长，以使生物活性代谢物的生产最大化。

在本发明的某些方面，提供了枯草芽孢杆菌QST713的突变菌株。术语“突变体”是指衍生自枯草芽孢杆菌QST713的遗传变体。在一个实施方案中，突变体具有枯草芽孢杆菌QST713的一个以上或所有鉴定(功能)特征。在一个具体的实例中，突变体或其发酵产物至少与亲本枯草芽孢杆菌QST713一样防治(作为鉴定功能特征)真菌、卵菌和/或细菌。这类突变体可为具有与枯草芽孢杆菌QST713的序列同一性大于约85％、大于约90％、大于约95％、大于约98％或大于约99％的基因组序列的遗传变体。突变体可通过用化学品或辐射处理枯草芽孢杆菌QST713细胞或通过从枯草芽孢杆菌QST713细胞群中选择自发性突变体(如具有噬菌体抗性或抗生素抗性的突变体)或通过本领域技术人员熟知的其他方式获得。

突变菌株可为具有枯草芽孢杆菌QST713的一个以上或所有鉴定特征、特别是与枯草芽孢杆菌QST713的杀真菌活性相当或比其更好的杀真菌活性的任何突变菌株。

在于1998年提交美国专利申请号09/074,870(其对应于上述专利)时，基于经典的、生理学、生物化学及形态学方法，将所述菌株命名为枯草芽孢杆菌。自那以后，芽孢杆菌属种的分类学不断演化，特别是鉴于遗传学和测序技术的进步，使得物种的命名主要是基于DNA序列，而非1998年所使用的方法。在比对来自解淀粉芽孢杆菌FZB42、枯草芽孢杆菌168和QST713的蛋白序列后，存在于解淀粉芽孢杆菌FZB42中的约95％的蛋白与存在于QST713中的蛋白具有85％以上的同一性；而在枯草芽孢杆菌168中，只有35％的蛋白与QST713中的蛋白具有85％以上的同一性。然而，即使是较大程度地依赖遗传学，在反映过去15年对芽孢杆菌属分类学的演化理解的相关科学文献和法规文件中仍然存在分类模糊性。例如，基于枯草芽孢杆菌菌株FZB24(其和FZB42一样与QST713密切相关)的农药产品在U.S.EPA的文件中被归类为解淀粉枯草芽孢杆菌变种。由于命名法中的这些复杂性，该特定的芽孢杆菌属种根据文献被不同地命名为枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌及解淀粉枯草芽孢杆菌变种。因此，我们保留QST713的枯草芽孢杆菌命名，而非将其改变成如目前仅基于序列比较和推断的分类学所预期的解淀粉芽孢杆菌。

枯草芽孢杆菌菌株QST713的合适制剂可从Bayer CropScience LP，NorthCarolina，U.S.A以商品名 ASO、SERENADE和MAX商购获得。

产品(U.S.EPA注册号69592-12)包含专利枯草芽孢杆菌菌株(菌株QST713)以及许多协同作用以破坏病害病原体并提供优良的抗微生物活性的不同脂肽。产品用于保护植物(如蔬菜、水果、坚果和蔓生作物)对抗病害(如火疫病、灰霉病(Botrytis)、酸腐病(Sour Rot)、锈病、菌核病(Sclerotinia)、白粉病、细菌性斑点和白霉病(White Mold))。产品可以液体制剂或干制剂的形式获得，其可作为叶面和/或土壤处理剂施用。产品(包括 ASO、 MAX和SERENADE)的U.S.EPA主标签(Master Label)的副本可通过美国国家农药信息检索系统(National Pesticide Information Retrieval System)的US EPA/OPP农药产品标签系统(Pesticide Product Label System(PPLS))公开获得。

ASO(水性悬浮液-有机)含有1.34％的干燥QST713作为活性成分以及98.66％的其他成分。将 ASO配制成含有最少1×10⁹cfu/g的QST713，而QST713的最大量已被测定为3.3×10¹⁰cfu/g。 ASO的替代商品名包括 BIOFUNGICIDE、SERENADE和 GARDENDISEASE。对于其他信息，参见日期为2010年1月4日的 ASO的U.S.EPA主标签以及SERENADE的U.S.EPA主标签，其各自以引用的方式全文纳入本文。

MAX含有14.6％的干燥QST713作为活性成分以及85.4％的其他成分。将 MAX配制成含有最少7.3×10⁹cfu/g的QST713，而QST713的最大量已被测定为7.9×10¹⁰cfu/g。对于其他的信息，参见 MAX的U.S.EPA主标签，其以引用的方式全文纳入本文。

能够产生脂肽的其他芽孢杆菌属菌株可用作本发明的脂肽来源。例如，解淀粉芽孢杆菌菌株D747(可以从Etec Crop Solutions，NZ获得以及也可以DOUBLENICKEL55^TM从Certis，US获得)；枯草芽孢杆菌MBI600(可以从BeckerUnderwood获得，US EPA注册号71840-8)；枯草芽孢杆菌Y1336(可以 WP从Bion-Tech，Taiwan获得，在台湾注册为生物杀真菌剂，注册号为4764、5454、5096和5277)；解淀粉芽孢杆菌，特别是菌株FZB42(可以从ABiTEP，DE获得)；解淀粉枯草芽孢杆菌变种FZB24(可从Novozymes Biologicals Inc.(Salem，Virginia)或Syngenta Crop Protection，LLC(Greensboro，North Carolina)以杀真菌剂或 ECO(EPA注册号70127-5)获得)；以及枯草芽孢杆菌EA-CB0015和解淀粉芽孢杆菌EA-CB0959(记载于国际公开号WO/2014/178032中)都是能够产生脂肽的芽孢杆菌属菌株并可用作本发明的脂肽来源。

美国专利公开号2011/0230345中还记载了由美国农业研究菌种保藏中心指定登录号为NRRL B-50349的FZB24的突变体。解淀粉芽孢杆菌FZB42可从ABiTEP GMBH，Germany以植物强化产品获得；FZB42还记载于欧洲专利公开号EP2179652以及Chen等人的“Comparative Analysis of the Complete Genome Sequence of the PlantGrowth-Promoting Bacterium Bacillus amyloliquefaciens FZB42,”NatureBiotechnology，第25卷，第9期(2007年9月)中。FZB42的突变体记载于国际公开号WO2012/130221中，包括解淀粉芽孢杆菌ABI01，其由DSMZ-德国微生物和细胞培养物保藏中心(German Collection of Microorganisms and Cell Cultures)指定登录号为DSM 10-1092。

如上所述，发酵液或发酵液的提取物可用作本发明的协同杀真菌结合物的产脂肽组分。通常，由芽孢杆菌属细菌的发酵液获得脂肽，并且分析发酵液中脂肽的存在是本领域技术人员公知的，以使适合于本发明的其它菌株能容易被技术人员识别。产生各种脂肽的芽孢杆菌属菌株记载于Ongena，Trends in Microbiology(2007)，第16卷，第3期中。其它文章记载了产脂肽芽孢杆菌属菌株和从该类菌株的发酵液中提取脂肽的方法：参见，例如，Alvarez等人，Journal of Applied Microbiology(2011)112：159–174；Ongena等人，Applied Microbiology。

在某些实施方案中，协同杀真菌结合物包含脂肽和C₈-C₂₀-烷基聚乙二醇醚硫酸盐如C₁₂/C₁₄-脂肪醇二甘醇醚硫酸钠(商品名 LRO，Clariant GmbH)。在某些方面，协同杀真菌结合物包含脂肽和C₈-C₂₀-烷基聚乙二醇醚硫酸盐、C₁₀-C₁₈-烷基聚乙二醇醚硫酸盐、其盐，例如碱金属盐如钠盐或钾盐，和/或铵盐，以及碱土金属盐如镁盐。在一些实施方案中，烷基聚乙二醇醚硫酸盐具有2至5个存在于所述聚乙二醇部分中的环氧乙烷单元。在一个实施方案中，烷基聚乙二醇醚硫酸盐为C₁₂/C₁₄-脂肪醇二甘醇醚硫酸钠(商品名 LRO，Clariant GmbH)。

约100:1的比率意指约100重量份的化合物(例如，烷基醚硫酸盐)和约1重量份的脂肽或脂肽组分(如枯草芽孢杆菌QST713发酵产物)进行结合(作为单一制剂、结合制剂或通过单独施用于植物而在植物上形成结合物)。

在另一个实施方案中，本发明的一种或更多种化合物与产脂肽发酵液(例如，枯草芽孢杆菌QST713发酵液)的重量比在约500:1至约1:500的范围内，更优选在约100:1至约1:100的范围内，在约50:1至约1:50的范围内或在约25:1至约1:25的范围内。在一方面，本发明的一种或更多种化合物与产脂肽发酵液的重量比在24:1至3:1的范围内，如实施例2所示，其中3000ppm的 LRO(C₁₂/C₁₄-脂肪醇二甘醇醚硫酸钠)与1000ppm和125ppm之间的含有(1.67％)干燥枯草芽孢杆菌QST713的 ASO发酵液结合。

以协同重量比使用或施用所述化合物(例如，烷基醚硫酸盐)和脂肽或脂肽组分。技术人员应理解，这些比率是指结合制剂内的比率，以及当两种组分作为单一制剂施用于待处理的植物时，本文所述的化合物(例如，烷基醚硫酸盐)和脂肽或脂肽组分的计算的比率。由于所述化合物(例如，烷基醚硫酸盐)和脂肽或脂肽组分分别在单一制剂中的体积和量是技术人员已知的，因此技术人员可通过简单的数学计算该比率。

所述比率可基于如下进行计算：在将本发明的结合物的所述组分施用于植物或植物部位的时间点时的所述化合物(例如，烷基醚硫酸盐)的量，以及在将本发明的结合物的所述组分施用于植物或植物部位的时间点时或之前不久(例如，48h、24h、12h、6h、2h、1h)的脂肽或脂肽组分的量。可将所述化合物(例如，烷基醚硫酸盐)和脂肽或脂肽组分同时或在不同时间施用于植物或植物部位，只要在一次或多次施用后两种组分都存在于植物上或植物内即可。

在一些方面，将所述化合物(例如，烷基醚硫酸盐)和脂肽或脂肽组分在结合或混合在一起后加热约1hr、2hr或3hr。可将混合物或结合物加热至约40℃、约50℃、约60℃、约70℃、约80℃、约90℃或约100℃。

在一个实施方案中，协同杀真菌结合物包含脂肽和农业上可接受的去污剂。去污剂可以是本领域已知的用于农业制剂的任何去污剂，其目的是例如使制剂附着到靶标植物的表面。应理解，优选的去污剂是完全可生物降解的和环境友好的。

本发明的组合物可包含载体，其为加入到包含产脂肽发酵产物、脂肽的无细胞制品或纯化的、半纯化的或粗制的脂肽提取物的组合物中以改进回收率、功效或物理特性和/或有助于包装和给药的惰性制剂成分。此类载体可单独或结合加入。

本发明的组合物可用于各种目的，包括作物的保护和收获后的水果、蔬菜和植物的保护；作为化妆品、加工食品、动物饲料或木材的防腐剂；和用于药物和兽医应用。根据具体的应用，将组合物与适合的载体一起配制以有助于其应用或给药。载体可为抗结块剂、抗氧化剂、填充剂(bulking agent)和/或保护剂。有用的载体的实例包括多糖(淀粉、麦芽糊精、甲基纤维素、蛋白(包括但不限于乳清蛋白、肽、树胶))、糖(乳糖、海藻糖、蔗糖)、脂质(卵磷脂、植物油、矿物油)、盐(氯化钠、碳酸钙、柠檬酸钠)、硅酸盐(粘土、无定形二氧化硅、气相/沉淀二氧化硅、硅酸盐)、蜡、油、醇和表面活性剂。

本发明的组合物还包含制剂惰性成分或其它制剂成分，包含但不限于多糖，包括但不限于淀粉、麦芽糊精和甲基纤维素；蛋白，包括但不限于乳清蛋白、肽和树胶；糖，包括但不限于乳糖、海藻糖和蔗糖；脂质，包括但不限于卵磷脂、植物油和矿物油；盐，包括但不限于氯化钠、碳酸钙和柠檬酸钠；以及硅酸盐，包括但不限于粘土、无定形二氧化硅、气相/沉淀二氧化硅和硅酸盐。本发明的组合物还可包含载体，包括但不限于水或矿物质或有机材料。组合物可用于种子处理或作为根部浸剂，载体为促进组合物附着到种子或根部的粘结剂或粘着剂。组合物可用作种子处理剂，制剂成分为着色剂。在其他组合物中，制剂还可包含防腐剂。

本发明的组合物还可包含加入到含有细胞、无细胞制品或代谢物的组合物中以改进功效、稳定性和可用性和/或促进加工、包装和最终应用的制剂惰性物。这类制剂惰性物和成分可包括载体、稳定剂、营养素或物理特性改进剂，其可单独或结合加入。载体可包括液体物质，包括但不限于水、油和其他溶剂；以及固体物质，包括但不限于矿物质、聚合物或生物衍生的或通过化学合成的聚合物络合物。载体为促进组合物附着到植物部位(包括但不限于种子或根部)的粘结剂或粘合剂。参见，例如，Taylor等人，“Concepts andTechnologies of Selected Seed Treatments,”Annu.Rev.Phytopathol.，28：321-339(1990)。稳定剂包括但不限于抗结块剂、抗氧化剂、干燥剂、保护剂或防腐剂。营养素可为碳源、氮源和磷源，包括但不限于糖、多糖、油、蛋白、氨基酸、脂肪酸和磷酸盐。物理特性改进剂可为填充剂、润湿剂、增稠剂、pH调节剂、流变改进剂、分散剂、佐剂、表面活性剂、抗冻剂或着色剂。

本文所述的组合物还可包含至少一种助剂，包括但不限于增量剂、溶剂、自发性促进剂、载体、乳化剂、分散剂、防冻剂、增稠剂和佐剂。那些组合物可称为制剂。

典型制剂的实例包括水溶性液剂(SL)、乳化浓缩剂(EC)、水乳剂(EW)、悬浮浓缩剂(SC、SE、FS、OD)、水分散性颗粒剂(WG)、颗粒剂(GR)和胶囊浓缩剂(CS)；这些和其他可行的制剂类型例如由CropLife International和《农药手册》、《联合国粮农组织和世界卫生组织农药说明书发展与使用手册》、《联合国粮农组织植物生产与保护文献-173》(由联合国粮农组织/世界卫生组织关于农药手册的联合会议制订，2004，ISBN:9251048576)中描述。除了本发明的一种以上的活性化合物以外，制剂还可包含活性农业化学化合物。

制剂或施用形式可包含助剂，包括但不限于增量剂、溶剂、自发性促进剂、载体、乳化剂、分散剂、防冻剂、杀生物剂、增稠剂，和/或其他助剂，例如，包括但不限于佐剂。在本发明的上下文中，佐剂是增强制剂的生物学作用而其本身不具有生物学作用的组分。佐剂的实例为促进保持、扩散、附着到叶子表面或渗透的试剂。

这些制剂以已知的方式制备，例如通过将活性化合物与助剂混合，所述助剂包括但不限于，例如，增量剂、溶剂和/或固体载体和/或其他助剂，包括但不限于表面活性剂。制剂在合适的设备中制备，或在施用之前或施用过程中制备。

适合用作助剂的是适合于将特定特性(包括但不限于特定物理、技术和/或生物学特性)赋予活性化合物的制剂或由这些制剂制备的施用形式(包括但不限于，例如，可用的作物保护剂，包括但不限于喷雾液剂或拌种剂)的物质。

还可存在稳定剂，包括但不限于低温稳定剂、防腐剂、抗氧化剂、光稳定剂或改进化学和/或物理稳定性的其他试剂。还可存在发泡剂或消泡剂。

此外，制剂和源自其的施用形式还可包含以下物质作为另外的助剂：粘着剂，包括但不限于羧甲基纤维素；粉末、颗粒或胶乳形式的天然和合成聚合物，包括但不限于阿拉伯树胶、聚乙烯醇、聚乙酸乙烯酯；以及天然磷脂，包括但不限于脑磷脂和卵磷脂；和合成磷脂。

其他可行的助剂包括矿物油和植物油。这类添加剂的实例包括香料、保护胶体、粘结剂、粘合剂、增稠剂、触变物质、渗透剂、保持促进剂、稳定剂、螯合剂(sequestrant)、络合剂、保湿剂和铺展剂。一般而言，活性化合物可与常用于制剂目的的任何固体或液体添加剂结合。

合适的保持促进剂包括例如所有那些降低动力学表面张力的物质，包括但不限于磺基琥珀酸二辛酯，或提高粘弹性的物质，包括但不限于羟丙基瓜尔胶聚合物。

在本发明的上下文中，合适的渗透剂包括所有那些通常用于增强活性农业化学化合物向植物内渗透的物质。本发明的上下文中的渗透剂如下定义：其能够从(通常为水性的)施用液体和/或从喷雾涂层穿过植物的角质层并由此增加活性化合物在角质层中的迁移。可使用文献中记载的方法测定此特性(Baur等人，1997，Pesticide Science，51，131-152)。实例包括：例如，醇烷氧基化物，包括但不限于椰子脂肪乙氧基化物(10)或异十三烷基乙氧基化物(12)；脂肪酸酯，包括但不限于菜籽油甲酯或大豆油甲酯；脂肪胺烷氧基化物，包括但不限于牛油胺乙氧基化物(15)；或铵盐和/或鏻盐，包括但不限于硫酸铵或磷酸氢二铵。

本发明通过以下附加实施例进一步说明，所述实施例不应理解为限制性的。本领域技术人员应理解，可基于本公开内容对公开的具体实施方案进行许多改变，并且仍然能获得相似或类似的结果，而不背离本发明的精神和范围。

实施例

实施例1.用于两种化合物的结合物的功效的公式

本发明的活性化合物结合物的增加的杀真菌活性可从以下实施例中显而易见地得出。尽管单个活性化合物表现出弱的杀真菌活性，但是所述结合物具有超过活性的简单加和的活性。

当活性化合物结合物的杀真菌活性超过活性化合物单独施用时的活性的总和时，总是存在杀真菌剂的协同效应。给定的两种活性化合物的结合物的预期活性可如下计算(参见Colby，S.R.，“Calculating Synergistic and Antagonistic Responses ofHerbicide Combinations，”Weeds，1967，15，20-22)：

如果

X为以m ppm(或g/ha)的施用率施用活性化合物A时的功效，

Y为以n ppm(或g/ha)的施用率施用活性化合物B时的功效，

E为分别以m和n ppm(或g/ha)的施用率施用活性化合物A和B时的功效，

那么

功效的程度以％表示。0％意指相当于对照的功效，而100％的功效意指未观察到病害。

如果实际的杀真菌活性高于计算值，则所述结合物的活性具有超加和性，即存在协同效应。在这种情况下，实际观察到的功效一定大于由上述公式计算的预期功效(E)值。

证实协同效应的另一种方式是Tammes法(参见“Isoboles，A GraphicRepresentation of Synergism in Pesticides,”Neth.J.Plant Path.，1964，70，73-80)。

鉴定与抗微生物剂的协同相互作用的另一种方法记载于Scribner等人(1982，Antimicrobial Agents and Chemotherapy 21(6)：939-943)以及Goodman&Gilman(1980，The Pharmacological Basis of Therapeutics，第六版，第1097-1098页)中，并且称为棋盘式测定(checkerboard assay)。该测定包括将单独和结合的抗微生物剂连续稀释两倍，然后对其接种待测试的一种或多种微生物。孵育后，测定单独使用和结合使用的各抗微生物剂的最小抑菌浓度(MIC)。MIC是抑制微生物生长的最低浓度。然后使用MIC值来计算部分抑菌浓度(fractional inhibitory concentration)(即，FIC_a和FIC_b)，部分抑菌浓度指数(FICI)是FIC_a和FIC_b的总和，如下式所示：

计算的FICI小于1.0表明协同相互作用，而FICI小于或等于0.5则高度暗示协同作用。参见F.C.Odds，“Synergy,Antagonism,and What the Chequerboard Puts BetweenThem,”J.Antimicrob.Chemother.2003 52(1)，1。

实施例2.单独的以及与枯草芽孢杆菌QST713结合的烷基醚硫酸盐的抗植物病原体的功效

本研究考察了在有和没有 LRO(C₁₂/C₁₄-脂肪醇二甘醇醚硫酸钠)的情况下，商品 ASO(枯草芽孢杆菌QST713发酵产物)抗各种植物病原体的功效。 ASO的施用率是指包含于产品 ASO中的枯草芽孢杆菌QST713的量(1.67％)。

将 ASO在水中稀释至浓度为1000ppm、500ppm、250ppm和125ppm，并在有或没有以3000ppm的浓度施用的 LRO的情况下施用于植物。随后，用各种植物病原体接种植物，并用以下八种植物病原体生物测定对病害防治百分数进行评估：(1)番茄晚疫病，致病疫霉(“晚疫病”)；(2)葡萄霜霉病，葡萄生轴霜霉(“霜霉病”)；(3)黄瓜白粉病，凤仙花单囊壳(“白粉病”)；(4)苹果黑星病，苹果黑星病菌(“黑星病”)；(5)番茄早疫病(early blight)，早疫病链格孢(“早疫病”)；(6)食荚菜豆的褐锈病(brownrust)，疣顶单胞锈菌(“豆锈病”)；(7)亚洲大豆锈病，豆薯层锈菌(“大豆锈病”)；和(8)食荚菜豆的葡萄孢属灰霉病，灰葡萄孢(“灰霉病”)。

结果

八种植物病原体测定的结果示于表2至6中。

表2.对用 LRO、 ASO或 ASO+ LRO处理的植物观察到的病害防治百分数

表3.对晚疫病的观察到的功效与计算的功效的比较

*实测值＝观察到的活性

**计算值＝使用Colby公式计算的活性

表4.对霜霉病的观察到的功效和计算的功效的比较

*实测值＝观察到的活性

**计算值＝使用Colby公式计算的活性

表5.对黑星病的观察到的功效和计算的功效的比较

*实测值＝观察到的活性

**计算值＝使用Colby公式计算的活性

表6.对灰霉病的观察到的功效和计算的功效的比较

*实测值＝观察到的活性

**计算值＝使用Colby公式计算的活性

结论

与单独施用 ASO相比，将 LRO和ASO两者都施用于植物通常增强了对植物病原体的防治。当施用于感染晚疫病、霜霉病、黑星病和灰霉病的植物时， LRO和 ASO的结合物产生了协同效应。

实施例3.在侵染早疫病链格孢的番茄的田间试验中，与 LRO一起配制的枯草芽孢杆菌QST713的功效

通过在基于大豆的培养基中培养菌株来制备枯草芽孢杆菌QST713的全发酵液培养物(WB)。然后将WB与3％的 LRO(C₁₂/C₁₄脂肪醇二甘醇醚硫酸钠)或5％的 LRO(C₁₂/C₁₄-脂肪醇二甘醇醚硫酸钠)混合，并在使用前，使其平衡至少24小时。比较例包括：商品 ASO(枯草芽孢杆菌QST713)和化学杀真菌剂 TOP(嘧菌酯(azoxystrobin)和苯醚甲环唑(difenoconazole))以及 M 45 80WP(代森锰锌(mancozeb))。

用人工接种了早疫病链格孢的孢子悬浮液的番茄植株进行田间试验。接种后，从生长阶段BBCH 72开始每6-10天处理番茄植株，如表8所述。表7中所示的病害防治百分数为在整个处理过程中对评估的植株的中叶上的疾病严重性的4次评估的平均值，其中最后一次评估在最后一次施用后8天进行。

表7.在接种有早疫病链格孢的番茄植株中的平均病害防治

表8.用于处理的施用时间表

施用代码	施用日期	生长阶段
			A	12月26日	72
B	1月5日	79
			C	1月13日	79
D	1月19日	79
			E	1月26日	79

与商品 ASO(枯草芽孢杆菌QST713)相比，与LRO(C₁₂/C₁₄-脂肪醇二甘醇醚硫酸钠)混合并平衡的枯草芽孢杆菌QST713WB通常显示出在更低的施用率下的优异的病害防治。

实施例4.在侵染苹果黑星病菌的苹果树的田间试验中，与 LRO一起配制的枯草芽孢杆菌QST713的功效

用自然侵染了黑星病的致病剂(causal agent)——苹果黑星病菌——的苹果树进行田间试验。在4月23日至6月30日之间在BBCH62至BBCH77的生长阶段以5至11天的间隔以2m cph进行施用体积为1000L/ha的10次处理，如表10所述。表9中所示的病害防治百分数为在最后施用11天后进行的最后一次评估的结果，其通过目测病害症状进行。0％意指相当于未经处理的对照的功效，而100％的功效意指未观察到病害。

表9.在侵染苹果黑星病菌的苹果树中的平均病害防治

*实测值＝实测的活性

**计算值＝使用Colby公式计算的活性

表10.用于处理的施用时间表

表9中的结果清楚地显示了 ASO和 LRO(C₁₂/C₁₄-脂肪醇二甘醇醚硫酸钠)的结合物的观察到的活性大于所计算的活性，即存在协同效应。

实施例5.在侵染疣顶单胞锈菌的菜豆植株的田间试验中，与 LRO一起配制的枯草芽孢杆菌QST713的功效

用人工接种了疣顶单胞锈菌的干豆进行两次田间试验。在7月1日至7月22日之间在BBCH29至BBCH63的生长阶段以5至6天的间隔进行5次处理和2次接种，如表12所述。表11中所示的病害防治百分数为最后施用20天后进行的最后一次评估的结果，其通过目测病害症状进行。0％意指相当于未经处理的对照的功效，而100％的功效意指未观察到病害。

表11.在侵染疣顶单胞锈菌的菜豆植株中的平均病害防治

*实测值＝实测的活性

**计算值＝使用Colby公式计算的活性

表12.用于田间试验的接种和施用时间表

施用代码	施用日期	生长阶段
			A	7月1日	29
接种	7月2日	29
			B	7月7日	51
接种	7月7日	51
			C	7月12日	59
D	7月17日	61
			E	7月22日	63

表11中的结果清楚地显示了 ASO和 LRO(C₁₂/C₁₄-脂肪醇二甘醇醚硫酸钠)的结合物的观察到的活性大于所计算的活性，即存在协同效应。

实施例6.与不同佐剂结合的枯草芽孢杆菌QST713的抗植物病原体的功效

本研究考察了在有和没有表13中所列的几种不同的佐剂/表面活性剂之一的情况下，商品 ASO(枯草芽孢杆菌QST713发酵产物)抵抗各种植物病原体的功效。当与 ASO(枯草芽孢杆菌QST713发酵产物)结合施用时，这些佐剂/表面活性剂显示出抵抗各种植物病原体的协同效应，而其它佐剂/表面活性剂则没有。

表13.佐剂列表

实施例7.对疫霉属的体内预防性测试(番茄)

将 ASO(枯草芽孢杆菌QST713发酵产物)和佐剂LRO(C₁₂/C₁₄-脂肪醇二甘醇醚硫酸钠)在水中稀释到所需浓度并单独以及结合地施用于幼小的番茄植株。在喷雾涂层干燥后，用致病疫霉的水性孢子悬浮液接种植株。随后，将植株放置在约20℃且相对大气湿度为100％的培养箱中。接种3天后，对测试进行评估。0％意指相当于未经处理的对照的功效，而100％的功效意指未观察到病害。下表(表14)清楚地显示了 ASO(枯草芽孢杆菌QST713发酵产物)与 LRO(C₁₂/C₁₄-脂肪醇二甘醇醚硫酸钠)结合的所观察到的活性大于所计算的活性，即存在协同效应。

表14.对疫霉属的体内预防性测试(番茄)

*实测值＝实测的活性

**计算值＝使用Colby公式计算的活性

实施例8.对轴霜霉属的体内预防性测试(葡萄藤)

将 ASO(枯草芽孢杆菌QST713发酵产物)和佐剂LRO(C₁₂/C₁₄-脂肪醇二甘醇醚硫酸钠)、20+20(失水山梨糖醇单月桂酸酯；失水山梨糖醇单十二烷酸酯)或(合成胶乳)在水中稀释到所需浓度并单独以及结合地施用于幼小的葡萄植株。在喷雾涂层干燥后，用葡萄生轴霜霉的水性孢子悬浮液接种植株并使其在约20℃且相对大气湿度为100％的培养箱中保持1天。随后，将植株在约21℃且相对大气湿度约为90％的温室中放置4天。然后，对植株进行喷雾，并将其在培养箱中放置1天。

接种6天后，对测试进行评估。0％意指相当于未经处理的对照的功效，而100％的功效意指未观察到病害。下表(表15)清楚地显示了 ASO(枯草芽孢杆菌QST713发酵产物)与 LRO(C₁₂/C₁₄-脂肪醇二甘醇醚硫酸钠)、20+20(失水山梨糖醇单月桂酸酯；失水山梨糖醇单十二烷酸酯)或(合成胶乳)结合的所观察到的活性大于所计算的活性，即存在协同效应。

表15.对轴霜霉属的体内预防性测试(葡萄藤)

*实测值＝实测的活性

**计算值＝使用Colby公式计算的活性

实施例9.对单囊壳属的体内预防性测试(黄瓜)

将 ASO(枯草芽孢杆菌QST713发酵产物)和佐剂 L-77(聚环氧烷改性的七甲基三硅氧烷)、(合成胶乳)、(石蜡矿物油)、SC-TankMix(菜籽油甲酯；乙氧基化蓖麻油)或(菜籽油甲酯)在水中稀释到所需浓度，并单独以及结合地施用于幼小的黄瓜植株。在喷雾涂层干燥后，用凤仙花单囊壳的水性孢子悬浮液接种植株。随后，将植株放置在约23℃且相对大气湿度约为70％的温室中。接种7天后，对测试进行评估。0％意指相当于未经处理的对照的功效，而100％的功效意指未观察到病害。下表(表16)清楚地显示了 ASO(枯草芽孢杆菌QST713发酵产物)与 L-77(聚环氧烷改性的七甲基三硅氧烷)、(合成胶乳)、(石蜡矿物油)、SC-TankMix(菜籽油甲酯；乙氧基化的蓖麻油)或(菜籽油甲酯)结合的所观察到的活性大于所计算的活性，即存在协同效应。

表16.对单囊壳属的体内预防性测试(黄瓜)

*实测值＝实测的活性

**计算值＝使用Colby公式计算的活性

实施例10.对黑星菌属的体内预防性测试(苹果)

将 ASO(枯草芽孢杆菌QST713发酵产物)和佐剂L-77(聚环氧烷改性的七甲基三硅氧烷)、20+20(失水山梨糖醇单月桂酸酯；失水山梨糖醇单十二烷酸酯)、(石蜡矿物油)或(菜籽油甲酯)在水中稀释到所需浓度，并单独以及结合地施用于幼小的苹果树植株。在喷雾涂层干燥后，用苹果黑星病的致病剂(苹果黑星病菌)的水性分生孢子悬浮液接种植株，然后将其在约20℃且相对大气湿度为100％的培养箱中保持1天。随后，将植株放置在约21℃且相对大气湿度约为90％的温室中。接种10天后，对测试进行评估。0％意指相当于未经处理的对照的功效，而100％的功效意指未观察到病害。下表(表17)清楚地显示了ASO(枯草芽孢杆菌QST713发酵产物)与 L-77(聚环氧烷改性的七甲基三硅氧烷)、20+20(失水山梨糖醇单月桂酸酯；失水山梨糖醇单十二烷酸酯)、(石蜡矿物油)或(菜籽油甲酯)结合的所观察到的活性大于所计算的活性，即存在协同效应。

表17.对黑星菌属的体内预防性测试(苹果)

*实测值＝实测的活性

**计算值＝使用Colby公式计算的活性

实施例11.对链格孢属的体内预防性测试(番茄)

将 ASO(枯草芽孢杆菌QST713发酵产物)和佐剂DOS-PG(2-乙基己基磺基琥珀酸钠)、 L-77(聚环氧烷改性的七甲基三硅氧烷)、 LRO(C₁₂/C₁₄-脂肪醇二甘醇醚硫酸钠)、 PE-L64(乙氧基化/丙氧基化的醇)、(石蜡矿物油)或SC-TankMix(菜籽油甲酯；乙氧基化的蓖麻油)在水中稀释到所需浓度，并单独以及结合地施用于幼小的番茄植株。在喷雾涂层干燥后，用早疫病链格孢的水性孢子悬浮液接种植株。随后，将植株放置在约20℃且相对大气湿度为100％的培养箱中。接种3天后，对测试进行评估。0％意指相当于未经处理的对照的功效，而100％的功效意指未观察到病害。下表(表18)清楚地显示了 ASO与 DOS-PG(2-乙基己基磺基琥珀酸钠)、 L-77(聚环氧烷改性的七甲基三硅氧烷)、 LRO(C₁₂/C₁₄-脂肪醇二甘醇醚硫酸钠)、 PE-L64(乙氧基化/丙氧基化的醇)、(石蜡矿物油)或SC-TankMix(菜籽油甲酯；乙氧基化的蓖麻油)结合的所观察到的活性大于所计算的活性，即存在协同效应。

表18.对链格孢属的体内预防性测试(番茄)

*实测值＝实测的活性

**计算值＝使用Colby公式计算的活性

实施例12.对层锈菌属的体内预防性测试(大豆)

将 ASO(枯草芽孢杆菌QST713发酵产物)和佐剂DOS-PG(2-乙基己基磺基琥珀酸钠)、 L-77(聚环氧烷改性的七甲基三硅氧烷)、 PE-L64(乙氧基化/丙氧基化的醇)或(石蜡矿物油)在水中稀释到所需浓度，并单独以及结合地施用于幼小的大豆植株。在喷雾涂层干燥后，用大豆锈病的致病剂(豆薯层锈菌)的水性孢子悬浮液接种植株，并将其在约24℃且相对大气湿度为95％的培养箱中避光放置24h。将植株保持在约24℃且相对大气湿度约为80％且昼/夜间隔为12h的培养箱中。接种7天后，对测试进行评估。0％意指相当于未经处理的对照的功效，而100％的功效意指未观察到病害。下表(表19)清楚地显示了 ASO(枯草芽孢杆菌QST713发酵产物)

与 DOS-PG(2-乙基己基磺基琥珀酸钠)、 L-77(聚环氧烷改性的七甲基三硅氧烷)、 PE-L64(乙氧基化/丙氧基化的醇)或(石蜡矿物油)结合的所观察到的活性大于所计算的活性，即存在协同效应。

表19.对层锈菌属的体内预防性测试(大豆)

*实测值＝实测的活性

**计算值＝使用Colby公式计算的活性

实施例13.对单胞锈菌属的体内预防性测试(菜豆)

将 ASO(枯草芽孢杆菌QST713发酵产物)和佐剂DOS-PG(2-乙基己基磺基琥珀酸钠)、 L-77(聚环氧烷改性的七甲基三硅氧烷)、 PE-L64(乙氧基化/丙氧基化的醇)、(合成胶乳)、(石蜡矿物油)或(菜籽油甲酯)在水中稀释到所需浓度，并单独以及结合地施用于幼小的菜豆植株。在喷雾涂层干燥后，用豆锈病的致病剂(疣顶单胞锈菌)的水性孢子悬浮液接种植株，然后将其在约20℃且相对大气湿度为100％的培养箱中保持1天。随后，将植株放置在约21℃且相对大气湿度约为90％的温室中。接种10天后，对测试进行评估。0％意指相当于未经处理的对照的功效，而100％的功效意指未观察到病害。下表(表20)清楚地显示了 ASO(枯草芽孢杆菌QST713发酵产物)与 DOS-PG(2-乙基己基磺基琥珀酸钠)、 L-77(聚环氧烷改性的七甲基三硅氧烷)、 PE-L64(乙氧基化/丙氧基化的醇)、(合成胶乳)、(石蜡矿物油)或(菜籽油甲酯)结合的所观察到的活性大于所计算的活性，即存在协同效应。

表20.对单胞锈菌属的体内预防性测试(菜豆)

*实测值＝实测的活性

**计算值＝使用Colby公式计算的活性

实施例14.对葡萄孢属的体内预防性测试(菜豆)

将 ASO(枯草芽孢杆菌QST713发酵产物)和佐剂PG8107G(C_8-10烷基多糖苷)、 LRO(C₁₂/C₁₄-脂肪醇二甘醇醚硫酸钠)、SC-TankMix(菜籽油甲酯；乙氧基化的蓖麻油)或(菜籽油甲酯)在水中稀释到所需浓度，并单独以及结合地施用于幼小的菜豆植株。在喷雾涂层干燥后，将2小片覆盖有灰葡萄孢的生长物的琼脂放到每片叶子上。将经接种的植株放置在14℃且相对大气湿度为100％的暗室中。接种3天后，对叶子上病变的大小进行评估。0％意指相当于未经处理的对照的功效，而100％的功效意指未观察到病害。下表(表21)清楚地显示了 ASO(枯草芽孢杆菌QST713发酵产物)与 PG8107G(C_8-10烷基多糖苷)、 LRO(C₁₂/C₁₄-脂肪醇二甘醇醚硫酸钠)、SC-TankMix(菜籽油甲酯；乙氧基化的蓖麻油)或(菜籽油甲酯)结合的所观察到的活性大于所计算的活性，即存在协同效应。

表21.对葡萄孢属的体内预防性测试(菜豆)

*实测值＝实测的活性

**计算值＝使用Colby公式计算的活性

实施例15.筛选以鉴定增加 ASO中的枯草芽孢杆菌QST713发酵产物的抗真菌活性的其他表面活性剂

如表22所示，选择了其他表面活性剂并鉴定了它们对于 ASO(枯草芽孢杆菌QST713发酵产物)的抗真菌活性的增强作用。当这些佐剂/表面活性剂与 ASO(枯草芽孢杆菌QST713发酵产物)结合施用时，它们显示出抵抗各种植物病原体的协同效应，而其他佐剂/表面活性剂则没有。

表22.所选的用于生物筛选的表面活性剂

实施例16.对单囊壳属的体内预防性测试(黄瓜)

在水中以所需浓度制备单独的 ASO(枯草芽孢杆菌QST713发酵产物)溶液、单独的1306(烷基聚乙二醇醚磷酸单酯/二酯)溶液以及已混合然后平衡至少24小时的结合物的溶液，并将它们施用于幼小的黄瓜植株。喷雾涂层干燥后，用凤仙花单囊壳的水性孢子悬浮液接种植株。随后，将植株放置在约23℃且相对大气湿度约为70％的温室中。接种7天后，对测试进行评估。0％意指相当于未经处理的对照的功效，而100％的功效意指未观察到病害。下表(表23)清楚地显示了具有1306(烷基聚乙二醇醚磷酸单酯/二酯)的 ASO(枯草芽孢杆菌QST713发酵产物)溶液的所观察到的活性大于所计算的活性，即存在协同效应。

表23.对单囊壳属的体内预防性测试(黄瓜)

*实测值＝实测的活性

**计算值＝使用Colby公式计算的活性

就部分抑菌浓度指数或CI对这些制剂的剂量响应曲线的解释得到1306(烷基聚乙二醇醚磷酸单酯/二酯)和 ASO(枯草芽孢杆菌QST713发酵产物)结合物关于单囊壳属功效的估计CI值为0.8。

将用于CI计算的临界功效水平选为50％。CI值<1意味着协同作用，如例如H.Patel等人，Biophysical Journal，第106卷，2014年5月，2115-2125中所讨论的。

实施例17.对黑星菌属的体内预防性测试(苹果)

在水中以所需浓度制备单独的 ASO(枯草芽孢杆菌QST713发酵产物)溶液、单独的表面活化剂溶液以及已混合然后平衡至少24小时的结合物的溶液，并将它们施用于幼小的苹果树植株。喷雾涂层干燥后，用苹果黑星病的致病剂(苹果黑星病菌)的水性分生孢子悬浮液接种植株，然后将其在约20℃且相对大气湿度为100％的培养箱中保持1天。随后，将植株放置在约21℃且相对大气湿度约为90％的温室中。接种10天后，对测试进行评估。0％意指相当于未经处理的对照的功效，而100％的功效意指未观察到病害。下表(表24)清楚地显示了具有 DOS/PG(2-乙基己基磺基琥珀酸钠)、 LRO(C₁₂/C₁₄-脂肪醇二甘醇醚硫酸钠)、1306(烷基聚乙二醇醚磷酸单酯/二酯)、 K12P(十二烷基硫酸钠；硫酸单十二烷基酯钠盐)、 CAB818(椰油酰胺丙基甜菜碱(C8-C18))或 KB(C12-C14月桂基二甲基甜菜碱)的 ASO(枯草芽孢杆菌QST713发酵产物)溶液的所观察到的活性大于所计算的活性，即存在协同效应。

表24.对黑星菌属的体内预防性测试(苹果)

*实测值＝实测的活性

**计算值＝使用Colby公式计算的活性

就部分抑菌浓度指数或CI对这些制剂的剂量响应曲线的解释得到表25所示的关于黑星菌属功效的估计CI值。

表25.对 ASO(枯草芽孢杆菌QST713发酵产物)佐剂结合物的估计CI值

^a数据仅允许粗略估计这些结合物的CI值。

实施例18.对链格孢属的体内预防性测试(番茄)

在水中以所需浓度制备单独的 ASO(枯草芽孢杆菌QST713发酵产物)溶液、单独的表面活化剂溶液以及已混合然后平衡至少24小时的结合物的溶液，并将它们施用于幼小的番茄植株。喷雾涂层干燥后，用早疫病链格孢的水性孢子悬浮液接种植株。随后，将植株放置在约20℃且相对大气湿度为100％的培养箱中。接种3天后，对测试进行评估。0％意指相当于未经处理的对照的功效，而100％的功效意指未观察到病害。下表(表26)清楚地显示了具有 LRO(C₁₂/C₁₄-脂肪醇二甘醇醚硫酸钠)、1306(烷基聚乙二醇醚磷酸单酯/二酯)或 K12P(十二烷基硫酸钠；硫酸单十二烷基酯钠盐)的 ASO(枯草芽孢杆菌QST713发酵产物)溶液的所观察到的活性大于所计算的活性，即存在协同效应。

表26.对链格孢属的体内预防性测试(番茄)

*实测值＝实测的活性

**计算值＝使用Colby公式计算的活性

就部分抑菌浓度指数或CI对这些制剂的剂量响应曲线的解释得到表27所示的关于链格孢属功效的估计CI值。

表27.对 ASO(枯草芽孢杆菌QST713发酵产物)佐剂结合物的估计CI值

实施例19.对葡萄孢属的体内预防性测试(菜豆)

将 ASO(枯草芽孢杆菌QST713发酵产物)和佐剂在水中稀释到所需浓度并单独以及结合地施用于幼小的菜豆植株。喷雾涂层干燥后，将两小片覆盖有灰葡萄孢的生长物的琼脂放到每片叶子上。将接种的植株放置在14℃且相对大气湿度为100％的暗室中。接种3天后，对叶子上病变的大小进行评估。0％意指相当于未经处理的对照的功效，而100％的功效意指未观察到病害。下表(表28)清楚地显示了 ASO(枯草芽孢杆菌QST713发酵产物)与 LRO(C₁₂/C₁₄-脂肪醇二甘醇醚硫酸钠)、

1306(烷基聚乙二醇醚磷酸单酯/二酯)、K12P(十二烷基硫酸钠；硫酸单十二烷基酯钠盐)、 CAB818(椰油酰胺丙基甜菜碱(C8-C18))或 KB(C12-C14月桂基二甲基甜菜碱)的所观察到的活性大于所计算的活性，即存在协同效应。

表28.对葡萄孢属的体内预防性测试(菜豆)

*实测值＝实测的活性

**计算值＝使用Colby公式计算的活性

就部分抑菌浓度指数或CI对这些制剂的剂量响应曲线的解释得到表29所示的关于葡萄孢属功效的估计CI值。

表29.对 ASO(枯草芽孢杆菌QST713发酵产物)佐剂结合物的估计CI值

实施例20.鉴定增加 ASO中的枯草芽孢杆菌QST713发酵产物的抗真菌活性的其他表面活性剂

在单独的筛选实验中，评估了几种其他表面活性剂对枯草芽孢杆菌QST713全发酵液的抗真菌活性的影响。在所测试的表面活性剂中有几种二辛基磺基琥珀酸钠的制剂，包括MONAWET^TM MO-75E(本文中也称为“MO75E”)和MULTIWET^TM MO-70R(本文中也称为“MO70R”)，以及称为1004(本文中也称为“TERWET”)的α烯烃磺酸盐的制剂。

通过在基于大豆的培养基中培养菌株来制备枯草芽孢杆菌QST713全发酵液(WB)。然后将WB与15％的MONAWET^TM MO-75E(二辛基磺基琥珀酸钠)；MULTIWET^TM MO-70R(二辛基磺基琥珀酸钠)；1004(α烯烃磺酸盐)；或 LRO(C₁₂/C₁₄-脂肪醇二甘醇醚硫酸钠)混合并平衡至少24小时。在该实验中还包括没有任何表面活性剂的WB阴性对照和具有增加的抗真菌活性的枯草芽孢杆菌QST713的替代制剂阳性对照。

将每种处理剂以表30所示的比率施用于植物。随后，用灰葡萄孢的孢子悬浮液接种植物。几天后，当在未经处理的对照植物中病害明显时，评估植物的病害防治百分数。表30所示的结果是三次独立测量的平均值。将WB和表面活性剂的每种混合物制成两份(命名为“#1”和“#2”)，并且独立地评估两份混合物。

WB与MONAWET^TM MO-75E(二辛基磺基琥珀酸钠)；MULTIWET^TM MO-70R(二辛基磺基琥珀酸钠)；或1004(α烯烃磺酸盐)的混合物具有增加的抗真菌活性，该抗真菌活性类似于WB与 LRO(C₁₂/C₁₄-脂肪醇二甘醇醚硫酸钠)的混合物以及阳性对照的所观察到的抗真菌活性。这些数据表明，将WB与二辛基磺基琥珀酸钠或α烯烃磺酸盐混合并平衡产生的协同效应类似于将WB与 LRO混合并平衡的所观察到的协同效应。

表30.枯草芽孢杆菌QST713全发酵液与各种表面活性剂混合施用于侵染灰葡萄孢的植物时所观察到的平均病害防治

实施例21.失水山梨糖醇酯与枯草芽孢杆菌QST713结合的抗植物病原体的功效

本研究考察了在有和没有20(失水山梨糖醇单月桂酸酯)和20(聚乙二醇失水山梨糖醇单月桂酸酯)的混合物的情况下，商品 ASO(枯草芽孢杆菌QST713发酵产物)抵抗各种植物病原体的功效。所述混合物含有62.5重量％的20和37.5重量％的20。 ASO的施用率是指产品 ASO中包含的枯草芽孢杆菌QST713的量(1.67％)。

将 ASO在水中稀释至浓度为1000ppm、500ppm、250ppm和125ppm，并在有或没有浓度为3000ppm的20和20的混合物(“20+20”)的情况下施用于植物。随后，用各种植物病原体接种植物，并用以下八种植物病原体生物测定对病害防治百分数进行评估：(1)番茄晚疫病，致病疫霉(“晚疫病”)；(2)葡萄霜霉病，葡萄生轴霜霉(“霜霉病”)；(3)黄瓜白粉病，凤仙花单囊壳(“白粉病”)；(4)苹果黑星病，苹果黑星病菌(“黑星病”)；(5)番茄早疫病，早疫病链格孢(“早疫病”)；(6)食荚菜豆的褐锈病，疣顶单胞锈菌(“豆锈病”)；(7)亚洲大豆锈病，豆薯层锈菌(“大豆锈病”)；和(8)食荚菜豆的葡萄孢属灰霉病，灰葡萄孢(“灰霉病”)。

结果

八种植物病原体测定的结果示于表31至34中。

表31.对用20+20、 ASO或ASO+20+20处理的植物所观察到的

病害防治百分数

表32.对霜霉病的观察到的功效和计算的功效的比较

*实测值＝观察到的活性

**计算值＝使用Colby公式计算的活性

表33.对白粉病的观察到的功效和计算的功效的比较

*实测值＝观察到的活性

**计算值＝使用Colby公式计算的活性

表34.对黑星病的观察到的功效和计算的功效的比较

*实测值＝观察到的活性

**计算值＝使用Colby公式计算的活性

结论

与单独施用 ASO相比，将 ASO与20和20的混合物施用于植物增强了若干病原体的防治。当施用于感染霜霉病、白粉病和黑星病的植物时，所述结合物产生了协同效应。

实施例22.20与枯草芽孢杆菌QST713全发酵液组合的抗灰葡萄孢的功效

为了获得枯草芽孢杆菌QST713的全发酵培养液，在含有Luria Broth(LB)的种子瓶中接种枯草芽孢杆菌QST713，并使其在30℃下生长过夜。第二天，将取自各种子瓶的等分试样接种到1L摇瓶中的200mL基于大豆的培养基中，并使其生长直到孢子形成。简言之，将摇瓶培养物保持在30℃和32℃之间的温度下，振动器设定为200至220rpm。孵育约3天后，当细胞生长及代谢物产生停止时，收集培养液。

将20(失水山梨糖醇单月桂酸酯)单独或与枯草芽孢杆菌QST713全发酵液(“QST713全发酵液”)结合施用于侵染灰葡萄孢的植物，并测定病害防治百分数。20和QST713全发酵液均以0.5重量％施用。

将20和QST713全发酵液的结合物加热至40℃、50℃、60℃、70℃或80℃并保持一小时，并在施用于植物前使其冷却至室温。图1中所示的结果表明加热活化对于最佳的灰葡萄孢防治是必需的。与单独施用的20和QST713全发酵处理剂相比，在60℃、70℃或80℃下的加热活化就使用具有协同效应的这些结合物所获得的防治百分数而言产生了最高的功效。

实施例23.20抗番茄晚疫病和辣椒灰霉病的杀真菌活性

进行一系列实验以测试20在不同施用率下抵抗番茄晚疫病(致病疫霉)和辣椒灰霉病(灰葡萄孢)的杀真菌活性。将20以0.0625重量％和2.0重量％之间的比率施用于侵染致病疫霉的番茄植株。随着施用率的增加观察到连续更好的防治，并在1.0和2.0重量％处观察到最高的防治水平(参见图2A和图3，其示出了一个代表性实验的结果)。类似地，将20以0.0625重量％和1.0重量％之间的比率施用于侵染灰葡萄孢的辣椒植株，并且观察到植物病原体的防治随着施用的比率增加而增加(参见图2B)。

实施例24.其他非离子两亲物抗番茄晚疫病的活性

在观察了20的杀真菌活性后，还就类似活性考察了其他非离子两亲性化合物。将烷基葡糖苷、正十二烷基-B-D-葡糖苷、正癸基-B-D-葡糖苷和正壬基-B-D-葡糖苷以及相关化合物辛基葡萄糖新戊二醇各自以0.25重量％、0.50重量％和1.00重量％施用于经侵染的番茄植株。在各施用率下，观察所有四种化合物的杀真菌活性(参见图4)。具有C₁₀-和C₁₂-烷基链的化合物比具有更短的C₉-和C₈-烷基链的那些化合物具有更高的抗番茄晚疫病活性。

在其他的实验中，测定了20(失水山梨糖醇单月桂酸酯)、90(失水山梨糖醇油酸酯)、85(失水山梨糖醇三油酸酯)、蔗糖单癸酸酯、正十二烷基-B-D-葡糖苷、正癸基-B-D-葡糖苷和正壬基-B-D-葡糖苷以1.0重量％(于50％乙醇中)施用于侵染致病疫霉的番茄植株时的杀真菌活性。结果示于表35中。

表35.将失水山梨糖醇酯或烷基葡糖苷施用于经侵染的番茄植株而产生的对番茄晚疫病(致病疫霉)的防治

实施例25.野油菜黄单胞菌辣椒斑点病致病变种的体外防治

如上所述在基于大豆的培养基中制备枯草芽孢杆菌QST713的全发酵培养液。通过离心从全发酵培养液中去除枯草芽孢杆菌细胞。将单独的佐剂、单独的无细胞全发酵液和95％的无细胞全发酵液与5％的佐剂的混合物各自在水中稀释至各种终浓度，并施用至含有野油菜黄单胞菌辣椒斑点病致病变种的细菌悬浮液的96孔板。几个小时后，测量每个孔中的OD₆₀₀，并将其与初始OD₆₀₀进行比较以确定与未经处理的孔中的细菌悬浮液的细菌生长相比的相对细菌生长。测定每种处理剂的功效。0％意指细菌生长相当于或好于未经处理的对照的功效，而100％的功效意指未观察到细菌生长。

下表(表36)清楚地显示了枯草芽孢杆菌QST713无细胞全发酵液与 LRO(C₁₂/C₁₄-脂肪醇二甘醇醚硫酸钠)或1306(烷基聚乙二醇醚磷酸单酯/二酯)的所观察到的抗细菌活性大于所计算的活性，即存在协同效应。

表36.野油菜黄单胞菌辣椒斑点病致病变种的体外防治

*实测值＝实测的活性

**计算值＝使用Colby公式计算的活性

不希望囿于任何理论，使用这些组合物观察到的协同抗细菌活性未必与所述化合物和由枯草芽孢杆菌QST713产生的脂肽的相互作用有关。

实施例26.丁香假单胞菌番茄致病变种的体外防治

在基于大豆的培养基中制备枯草芽孢杆菌QST713的全发酵培养液。通过离心从全发酵培养液中去除枯草芽孢杆菌细胞。将单独的佐剂、单独的无细胞全发酵液和95％的无细胞全发酵液与5％的佐剂的混合物各自在水中稀释至各种终浓度，并施用至含有丁香假单胞菌番茄致病变种的细菌悬浮液的96孔板。几个小时后，测量每个孔中的OD₆₀₀，并将其与初始OD₆₀₀进行比较以测定与未经处理的孔中的细菌悬浮液的细菌生长相比的相对细菌生长。测定每种处理剂的功效。0％意指细菌生长相当于或好于未经处理的对照的功效，而100％的功效意指未观察到细菌生长。

下表(表37)清楚地显示了枯草芽孢杆菌QST713无细胞全发酵液与 LRO(C₁₂/C₁₄-脂肪醇二甘醇醚硫酸钠)或1306(烷基聚乙二醇醚磷酸单酯/二酯)的所观察到的抗细菌活性大于所计算的活性，即存在协同效应。

表37.丁香假单胞菌番茄致病变种的体外防治

*实测值＝实测的活性

**计算值＝使用Colby公式计算的活性

实施例27.胡萝卜软腐欧文氏菌的体外防治

在基于大豆的培养基中制备枯草芽孢杆菌QST713的全发酵培养液。通过离心从全发酵培养液中去除枯草芽孢杆菌细胞。将单独的佐剂、单独的无细胞全发酵液和95％的无细胞全发酵液与5％的佐剂的混合物各自在水中稀释至各种终浓度，并施用至含有胡萝卜软腐欧文氏菌的细菌悬浮液的96孔板。几个小时后，测量每个孔中的OD₆₀₀，并将其与初始OD₆₀₀进行比较以测定与未经处理的孔中的细菌悬浮液的细菌生长相比的相对细菌生长。测定每种处理剂的功效。0％意指细菌生长相当于或好于未经处理的对照的功效，而100％的功效意指未观察到细菌生长。

下表(表38)清楚地显示了枯草芽孢杆菌QST713无细胞全发酵液与 LRO(C₁₂/C₁₄-脂肪醇二甘醇醚硫酸钠)、MULTIWET^TM MO-70R(二辛基磺基琥珀酸钠)或1306(烷基聚乙二醇醚磷酸单酯/二酯)的所观察到的抗细菌活性大于所计算的活性，即存在协同效应。

表38.胡萝卜软腐欧文氏菌的体外防治

*实测值＝实测的活性

**计算值＝使用Colby公式计算的活性

实施例28.对与表面活性剂混合并平衡的全发酵液的上清液中的枯草芽孢杆菌QST713脂肽的定量

如实施例20所述，制备枯草芽孢杆菌QST713全发酵液(WB)与MONAWET^TM MO-75E(二辛基磺基琥珀酸钠)；MULTIWET^TM MO-70R(二辛基磺基琥珀酸钠)；1004(α烯烃磺酸盐)；或 LRO(C₁₂/C₁₄-脂肪醇二甘醇醚硫酸钠)的混合物。对于每种表面活性剂，制备具有5％(0.05)、10％(0.10)和15％(0.15)表面活性剂的单独混合物，除了 LRO，其仅有5％(0.05)的混合物。

在WB-表面活性剂混合物中和在没有表面活性剂的WB中测定上清液中伊枯草菌素类和表面活性素类的相对浓度。通过离心各样品分离沉淀部分和上清液部分。用乙腈提取样品以分离亲脂性物质，并且用分析型HPLC色谱法测定上清液中的伊枯草菌素类和表面活性素类的相对量。伊枯草菌素类和表面活性素类各自的总值通过存在于相关提取样品中的WB的量归一化。结果示于图5中，其中脂肽浓度记录为根据WB的量归一化的上清液中伊枯草菌素类和表面活性素类的总百分数。

如图5所示，在没有加入表面活性剂的WB的上清液中仅存在总计约20％的伊枯草菌素类和表面活性素类。相比之下，在含有与MONAWET^TM MO-75E(二辛基磺基琥珀酸钠)；MULTIWET^TM MO-70R(二辛基磺基琥珀酸钠)；1004(α烯烃磺酸盐)；或 LRO(C₁₂/C₁₄-脂肪醇二甘醇醚硫酸钠)混合并平衡的WB的样品中存在总计约85％至约100％的伊枯草菌素类和表面活性素类。不希望囿于任何理论，所述数据表明将表面活性剂加入WB中，然后平衡，使得具有抗真菌活性的脂肽从沉淀部分移动到上清液部分，其中它们可具有增加的生物利用度和增强的抗植物病原体活性。

实施例29.对与表面活性剂混合并平衡的 ASO的上清液中的枯草芽孢杆菌QST713脂肽的定量

将 ASO(枯草芽孢杆菌QST713发酵产物)与选自表39的佐剂和水混合以产生由85％的 ASO、3.5％的佐剂和11.5％的水组成的均一制剂。将所述制剂在54℃下平衡3h，然后在室温下储存。

表39.所选的用于脂肽溶解的表面活性剂

为了定量脂肽在单独的以及与各表面活性剂混合的 ASO(枯草芽孢杆菌QST713发酵产物)的上清液中的溶解性，测量每个样品的脂肽的总量和离心后上清液中脂肽的量。用乙腈溶液提取脂肽，并用液相色谱-质谱(LC-MS)测定伊枯草菌素类、表面活性素类和阿瓜斯他汀类的量。上清液中脂肽的相对量测定为通过将离心后上清液中脂肽的量除以脂肽的总量而计算得到的百分数。

结果以累积柱状图(stacked bar graph)的形式示于图6中。通过表面活性剂完全溶解脂肽使累积柱升至300％。当与枯草芽孢杆菌QST713发酵产物混合时，先前已证实具有协同抗真菌活性的几种表面活性剂(例如， LRO(C₁₂/C₁₄-脂肪醇二甘醇醚硫酸钠)； K12P(十二烷基硫酸钠；硫酸单十二烷基酯钠盐)；和1306(烷基聚乙二醇醚磷酸单酯/二酯))对脂肽的溶解性显示出最大的影响。

实施例30.解淀粉欧文氏菌的体内防治

将苹果花置于糖溶液中并用火疫病(解淀粉欧文氏菌)细菌悬浮液接种。然后将表40中所示的处理剂以在水中稀释的所示浓度喷洒到所述花上。包括硫酸链霉素作为阳性对照。将所述花在23-25℃和100％的相对湿度下孵育。6-7天后，测定具有菌脓(bacterialooze)的花的数量，并计算每种处理剂的功效。通过与用水处理的对照花相比经侵染的花的减少来测定功效。对于每种处理剂，进行至少四次测试，并记录病害防治平均值。

表40.解淀粉欧文氏菌的体内防治

枯草芽孢杆菌QST713WB与5％SLES的结合物显示出对苹果花上的解淀粉欧文氏菌具有比 ASO(枯草芽孢杆菌QST713发酵产物)或5％SLES处理剂显著更好的防治，这表明所述结合物具有协同抗细菌效果。

如本文所使用的，商品名“ LRO”与术语“月桂基醚硫酸钠(sodiumlaureth sulfate)”和“月桂基醚硫酸钠(sodium lauryl ether sulfate)”(“SLES”)同义。

实施例31.丁香假单胞菌番茄致病变种的体内防治

在基于大豆的培养基中制备枯草芽孢杆菌QST713的全发酵培养液。将单独的5％的佐剂( LRO(C₁₂/C₁₄-脂肪醇二甘醇醚硫酸钠))、单独的95％的全发酵液和95％的全发酵液与5％的佐剂的混合物各自在去离子(“DI”)水中稀释到表41中所示的终浓度。在施用前，使混合物平衡至少四个小时。将处理剂施用于番茄植株并使其干燥。第二天，用丁香假单胞菌番茄致病变种的细菌悬浮液接种植株。在未经处理的对照中细菌性病害明显后，评估植株的病害防治功效。每个功效值代表三次测量的平均值。0％意指相当于未经处理的对照的功效，而100％的功效意指未观察到病害。

95％的全发酵液与5％的佐剂的混合物在所测试的每个比率下始终产生最好的病害防治(参见表41)。在0.25％的施用率下，所述混合物显示出超加和性效应，这表明具有协同杀细菌效果。

表41.丁香假单胞菌番茄致病变种的体内防治

实施例32.平衡对佐剂和 ASO的混合物的影响

本实验的目的是测试平衡24小时对佐剂和 ASO(枯草芽孢杆菌QST713发酵产物)的混合物的影响，并更好地理解混合物中的组分随时间的相互作用。使用均化器将95％的 ASO(枯草芽孢杆菌QST713发酵产物)与5％的 LRO(C₁₂/C₁₄-脂肪醇二甘醇醚硫酸钠)混合。将混合物在去离子水中稀释，然后尽快施用于植物(“T＝0”处理剂)或使其平衡24小时之后在去离子水中稀释并施用于植物(“T＝24”处理剂)。通过将95％的 ASO(枯草芽孢杆菌QST713发酵产物)和5％的 LRO(C₁₂/C₁₄-脂肪醇二甘醇醚硫酸钠)分别加入去离子水中，然后立即将混合物施用于植物来制备第三种处理剂(“桶混(Tank Mix)”处理剂)。第三种处理剂的制备类似于种植者通常使用的佐剂和抗真菌剂的桶混物的制备。

比较例包括：单独的95％的 ASO(枯草芽孢杆菌QST713发酵产物)和单独的5％的 LRO(C₁₂/C₁₄-脂肪醇二甘醇醚硫酸钠)作为对照处理剂。将每种处理剂在去离子水中稀释至表42中所示的浓度。将处理剂施用于植物并使其干燥。第二天，用灰葡萄孢的悬浮液接种植物。在未经处理的对照中病害明显之后，评估植物的病害防治功效。每个功效值代表三次测量的平均值。0％意指相当于未经处理的对照的功效，而100％的功效意指未观察到病害。

结果示于表42中。T＝24处理剂在每个所测试的施用率下显示出最高水平的功效。与混合、稀释并立即施用于植物相比，将浓缩的 ASO(枯草芽孢杆菌QST713发酵产物)和 LRO(C₁₂/C₁₄-脂肪醇二甘醇醚硫酸钠)混合在一起并平衡24小时之后在去离子水中稀释并施用于植物具有明显的益处。不希望囿于任何理论，平衡时间可使脂肽有效溶解以产生更具活性的抗真菌混合物。

表42.平衡佐剂和 ASO的混合物对灰葡萄孢的体内防治的影响

实施例33.芽孢杆菌属产品对灰葡萄孢属的体内预防性测试(辣椒)

将几种可商购获得的配制为可湿性粉剂(WP)的芽孢杆菌属产品与 LRO(C₁₂/C₁₄-脂肪醇二甘醇醚硫酸钠)混合。芽孢杆菌属产品包括 MAX(枯草芽孢杆菌QST713)、DOUBLE NICKEL55^TM(解淀粉芽孢杆菌菌株D747)、(枯草芽孢杆菌MBI600)和(解淀粉枯草芽孢杆菌变种FZB24)。

通过将20％的芽孢杆菌属产品(WP)与5％的 LRO(C₁₂/C₁₄-脂肪醇二甘醇醚硫酸钠)混合并将所述混合物在去离子水中稀释来制备处理剂。对照处理剂包括在去离子水中的不含 LRO(C₁₂/C₁₄-脂肪醇二甘醇醚硫酸钠)的20％的芽孢杆菌属产品(WP)和在去离子水中的5％的 LRO(C₁₂/C₁₄-脂肪醇二甘醇醚硫酸钠)。

将每种处理剂在去离子水中进一步稀释至表43中所示的浓度。表中所示的浓度代表将5％的 LRO、20％的芽孢杆菌属产品(WP)或20％的芽孢杆菌属产品(WP)+5％的 LRO稀释到所示百分数(v/v)。将处理剂施用于辣椒植株并使其干燥。第二天，用灰葡萄孢的悬浮液接种辣椒植株。在未经处理的对照中病害明显后，评估植株的病害防治功效。每个功效值代表三次测量的平均值。0％意指相当于未经处理的对照的功效，而100％的功效意指未观察到病害。

表43中所示的实验数据代表三次测量的平均值。这些结果清楚地显示了各芽孢杆菌属产品与 LRO(C₁₂/C₁₄-脂肪醇二甘醇醚硫酸钠)混合的所观察到的活性大于所计算的活性，即存在协同效应。

表43.葡萄孢属的体内预防性测试(辣椒)

*实测值＝实测的活性

**计算值＝使用Colby公式计算的活性

除非另有说明，本文中的所有技术术语和科学术语的含义与本发明所属领域的普通技术人员通常所理解的含义相同。所引用的所有出版物、专利或专利公开为了所有目的都以引用的方式全文纳入本文。

应理解，所公开的发明不限于所述的具体方法、方案和物质，因为它们可以变化。还应理解，本文中所使用的术语仅是为了描述具体实施方案，而非意图限制本发明的范围，本发明的范围仅由所附的权利要求书来限定。

本领域技术人员应认识到，或者仅使用常规实验即能够确定本文中所述的本发明的具体实施方案的许多等同方案。此类等同方案意图包括于以下的权利要求书中。

Claims

1.一种杀真菌组合物，其包含协同有效量的：

a)枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)和解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)的产脂肽菌株；和

b)式(I)的化合物：

其中

m为1和20之间的整数；

n为1和10之间的整数；

Z¹为CH₂、S、O和NH中的至少一个；以及

R¹为硫酸根、磺酸根、磷酸根或羧酸根；

2.权利要求1的杀真菌组合物，其中枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的产脂肽菌株为枯草芽孢杆菌QST 713、解淀粉芽孢杆菌菌株D747、枯草芽孢杆菌MBI600、解淀粉枯草芽孢杆菌变种(Bacillus subtilis var.amyloliquefaciens)FZB24或其具有相应菌株的所有鉴定特征的突变体。

3.权利要求1或2的杀真菌组合物，其中R¹为硫酸根。

4.前述权利要求中任一项的杀真菌组合物，其中Z¹为O。

5.前述权利要求中任一项的杀真菌组合物，其中n为1和5之间的整数。

6.前述权利要求中任一项的杀真菌组合物，其中m为8和16之间的整数。

7.权利要求1的杀真菌组合物，其中所述化合物为具有下式的月桂基醚硫酸盐：

其中o为1和5之间的整数；

或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。

8.权利要求7的杀真菌组合物，其中所述化合物为具有下式的3,6-二氧杂十八烷基硫酸盐：

或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。

9.权利要求1的杀真菌组合物，其中所述化合物为具有下式的3,6-二氧杂二十烷基硫酸盐：

或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。

10.前述权利要求中任一项的杀真菌组合物，其中枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的产脂肽菌株和式(I)的化合物的重量比为约1000:1至约1:1000、约500:1至约1:500、约100:1至约1:100、约75:1至约1:75、约50:1至约1:50、约25:1至约1:25、约20:1至约1:20、约10:1至约1:10、约5:1至约1:5或约3:1至约1:3。

11.一种杀真菌组合物，其包含协同有效量的：

a)枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的产脂肽菌株；和

b)具有硫酸根、磺酸根、磷酸根或羧酸根官能团的聚亚烷基化合物；或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。

12.权利要求11的杀真菌组合物，其中枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的产脂肽菌株为枯草芽孢杆菌QST 713、解淀粉芽孢杆菌菌株D747、枯草芽孢杆菌MBI600、解淀粉枯草芽孢杆菌变种FZB24或其具有相应菌株的所有鉴定特征的突变体。

13.权利要求11或12的杀真菌组合物，其中所述官能团为硫酸根。

14.权利要求11或12的杀真菌组合物，其中所述聚亚烷基化合物为C₂-C₂₀烷基硫酸盐或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。

15.权利要求14的杀真菌组合物，其中所述聚亚烷基化合物为月桂基硫酸盐、肉豆寇基硫酸盐、棕榈基硫酸盐、硬脂基硫酸盐或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。

16.权利要求11或12的杀真菌组合物，其中所述聚亚烷基化合物为具有下式的月桂基醚硫酸盐：

其中o为1和5之间的整数；

或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。

17.权利要求16的杀真菌组合物，其中所述化合物为具有下式的3,6-二氧杂十八烷基硫酸盐：

或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。

18.权利要求11或12的杀真菌组合物，其中所述化合物为具有下式的3,6-二氧杂二十烷基硫酸盐：

或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。

19.权利要求11至18中任一项的杀真菌组合物，其中枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的产脂肽菌株和聚亚烷基化合物的重量比为约1000:1至约1:1000、约500:1至约1:500、约100:1至约1:100、约75:1至约1:75、约50:1至约1:50、约25:1至约1:25、约20:1至约1:20、约10:1至约1:10、约5:1至约1:5或约3:1至约1:3。

20.一种杀真菌组合物，其包含协同有效量的：

a)枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的产脂肽菌株；和

b)磺酸盐或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。

21.权利要求20的杀真菌组合物，其中枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的产脂肽菌株为枯草芽孢杆菌QST 713、解淀粉芽孢杆菌菌株D747、枯草芽孢杆菌MBI600、解淀粉枯草芽孢杆菌变种FZB24或其具有相应菌株的所有鉴定特征的突变体。

22.权利要求20或21的杀真菌组合物，其中所述磺酸盐为脂族磺酸酯或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。

23.权利要求20或21的杀真菌组合物，其中所述脂族磺酸酯具有C_1-20烷基或C_2-20烯基。

24.权利要求20或21的杀真菌组合物，其中所述磺酸盐为α烯烃磺酸盐或其Li⁺、Na⁺、K⁺或(C_1-8烷基)₄N⁺盐。

25.权利要求24的杀真菌组合物，其中所述α烯烃磺酸盐具有式(IV)：

其中

R¹为直链或支链C_1-20烷基或直链或支链C_2-20烯基；以及

M为H⁺、Li⁺、Na⁺、K⁺或(C_1-8烷基)₄N⁺。

26.权利要求25的杀真菌组合物，其中R¹为直链C_8-16烷基。

27.权利要求26的杀真菌组合物，其中所述α烯烃磺酸盐为十四碳烯磺酸盐、十六碳烯磺酸盐或其Li⁺、Na⁺、K⁺或(C_1-8烷基)₄N⁺盐。

28.权利要求20或21的杀真菌组合物，其中所述磺酸盐为式(V)的化合物：

其中

M为H⁺、Li⁺、Na⁺、K⁺或(C_1-8烷基)₄N⁺。

29.权利要求28的杀真菌组合物，其中R¹和R²独立地为直链或支链C₈烷基。

30.权利要求29的杀真菌组合物，其中所述磺酸盐为磺基琥珀酸二辛酯；1,4-双(2-乙基己氧基)-1,4-二氧代丁烷-2-磺酸盐；或其Li⁺、Na⁺、K⁺或(C_1-8烷基)₄N⁺盐。

31.权利要求20至30中任一项的杀真菌组合物，其中枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的产脂肽菌株和磺酸盐的重量比为约1000:1至约1:1000、约500:1至约1:500、约100:1至约1:100、约75:1至约1:75、约50:1至约1:50、约25:1至约1:25、约20:1至约1:20、约10:1至约1:10、约5:1至约1:5或约3:1至约1:3。

32.一种杀真菌组合物，其包含协同有效量的：

a)枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的产脂肽菌株；和

b)式(VI)的化合物：

其中

q为1和10之间的整数；

Z¹为CH₂、S、O和NH中的至少一个；

R³为H、直链或支链C_1-20烷基；以及

M为H⁺、Li⁺、Na⁺、K⁺或(C_1-8烷基)₄N⁺；

33.权利要求32的杀真菌组合物，其中枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的产脂肽菌株为枯草芽孢杆菌QST 713、解淀粉芽孢杆菌菌株D747、枯草芽孢杆菌MBI600、解淀粉枯草芽孢杆菌变种FZB24或其具有相应菌株的所有鉴定特征的突变体。

34.权利要求32或33的杀真菌组合物，其中R¹和/或R²为

35.权利要求34的杀真菌组合物，其中Z¹为O。

36.权利要求34或35的杀真菌组合物，其中R³为支链C_1-20烷基。

37.权利要求36的杀真菌组合物，其中所述化合物为

38.权利要求32至37中任一项的杀真菌组合物，其中枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的产脂肽菌株和式(VI)的化合物的重量比为约1000:1至约1:1000、约500:1至约1:500、约100:1至约1:100、约75:1至约1:75、约50:1至约1:50、约25:1至约1:25、约20:1至约1:20、约10:1至约1:10、约5:1至约1:5或约3:1至约1:3。

39.一种杀真菌组合物，其包含协同有效量的：

a)枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的产脂肽菌株；和

b)具有季胺和羧酸根的两性离子化合物；或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。

40.权利要求39的杀真菌组合物，其中枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的产脂肽菌株为枯草芽孢杆菌QST 713、解淀粉芽孢杆菌菌株D747、枯草芽孢杆菌MBI600、解淀粉枯草芽孢杆菌变种FZB24或其具有相应菌株的所有鉴定特征的突变体。

41.权利要求39或40的杀真菌组合物，其中所述两性离子化合物具有式(VII)：

其中R¹为直链或支链C_1-20烷基或直链或支链C_2-20烯基；

或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。

42.权利要求41的杀真菌组合物，其中R¹为直链C_1-20烷基。

43.权利要求42的杀真菌组合物，其中所述化合物为

或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。

44.权利要求39至43中任一项的杀真菌组合物，其中枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的产脂肽菌株和两性离子化合物的重量比为约1000:1至约1:1000、约500:1至约1:500、约100:1至约1:100、约75:1至约1:75、约50:1至约1:50、约25:1至约1:25、约20:1至约1:20、约10:1至约1:10、约5:1至约1:5或约3:1至约1:3。

45.一种杀真菌组合物，其包含协同有效量的：

a)枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的产脂肽菌株；和

b)式(VIII)的三硅氧烷

其中

R¹为直链或支链C_1-20烷基、直链或支链C_2-20烯基、

并且

x为1和12之间的整数；

或其农业上可接受的盐、金属络合物或准金属络合物。

46.权利要求45的杀真菌组合物，其中枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的产脂肽菌株为枯草芽孢杆菌QST 713、解淀粉芽孢杆菌菌株D747、枯草芽孢杆菌MBI600、解淀粉枯草芽孢杆菌变种FZB24或其具有相应菌株的所有鉴定特征的突变体。

47.权利要求45或46的杀真菌组合物，其中R¹为

48.权利要求47的杀真菌组合物，其中x为8。

49.权利要求45或46的杀真菌组合物，其中R¹为

50.权利要求49的杀真菌组合物，其中x为8。

51.权利要求45至50中任一项的杀真菌组合物，其中枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的产脂肽菌株和式(VIII)的三硅氧烷的重量比为约1000:1至约1:1000、约500:1至约1:500、约100:1至约1:100、约75:1至约1:75、约50:1至约1:50、约25:1至约1:25、约20:1至约1:20、约10:1至约1:10、约5:1至约1:5或约3:1至约1:3。

52.前述权利要求中任一项的杀真菌组合物，其中枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的菌株为发酵产物的一部分。

53.权利要求52的杀真菌组合物，其中所述发酵产物中的脂肽的浓度为至少1mg/g、至少2mg/g、至少3mg/g、至少4mg/g、至少5mg/g、至少6mg/g、至少7mg/g、至少8mg/g、至少9mg/g、至少10mg/g、至少11mg/g、至少12mg/g、至少13mg/g、至少14mg/g或至少15mg/g。

54.前述权利要求中任一项的杀真菌组合物，其中所述突变体具有与相应菌株的序列同一性大于约90％的基因组序列。

55.前述权利要求中任一项的杀真菌组合物，其中来自枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的产脂肽菌株的脂肽为伊枯草菌素型化合物、表面活性素型化合物、芬枯草菌素型化合物或其组合。

56.权利要求55的杀真菌组合物，其中所述脂肽为伊枯草菌素型化合物。

57.权利要求56的杀真菌组合物，其中所述伊枯草菌素型化合物为芽孢菌霉素D、芽孢菌霉素F、芽孢菌霉素L、芽孢菌霉素LC(bacillopeptin)、抗霉枯草菌素、伊枯草菌素A、伊枯草菌素A_L或伊枯草菌素C。

58.权利要求55的杀真菌组合物，其中所述脂肽为芬枯草菌素型化合物。

59.权利要求58的杀真菌组合物，其中所述芬枯草菌素型化合物为芬枯草菌素A、芬枯草菌素B、大侧柏素A、大侧柏素B或阿瓜斯他汀。

60.权利要求55的杀真菌组合物，其中所述脂肽为表面活性素型化合物。

61.权利要求60的杀真菌组合物，其中所述表面活性素型化合物为埃斯波素、地衣素、帕米拉素或表面活性素。

62.一种防治植物中的真菌性有害生物和/或细菌性有害生物的方法，所述方法包括将前述权利要求中任一项的有效量的杀真菌组合物施用于植物、植物的部位和/或植物或植物部位生长或待种植的位置。

63.权利要求62的方法，其中所述真菌性有害生物为致病疫霉(Phytophthorainfestans)和/或灰葡萄孢(Botrytis cinerea)和/或葡萄生轴霜霉(Plasmoparaviticola)和/或凤仙花单囊壳(Sphaerotheca fuliginea)和/或苹果黑星病菌(Venturiainaequalis)和/或早疫病链格孢(Alternaria solani)和/或疣顶单胞锈菌(Uromycesappendiculatus)和/或豆薯层锈菌(Phakopsora pachyrhizi)。

64.权利要求62的方法，其中所述细菌性有害生物为稻中的燕麦食酸菌(Acidovoraxavenae)、荚壳伯克霍尔德氏菌(Burkholderia glumae)和/或野油菜黄单胞菌水稻致病变种(Xanthomonas campestris pv.oryzae)；柑橘中的韧皮部杆菌属种(CandidatusLiberibacter spec.)和/或地毯草黄单胞菌柑橘致病变种(Xanthomonas axonopodispv.citri)和/或野油菜黄单胞菌辣椒斑点病致病变种(Xanthomonas campestrispv.vesicatoria)和/或苛养木杆菌(Xylella fastidiosa)；猕猴桃中的丁香假单胞菌猕猴桃致病变种(Pseudomonas syringae pv.actinidae)；桃中的野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris)和/或野油菜黄单胞菌桃李致病变种(Xanthomonascampestris pv.pruni)；大豆中的丁香假单胞菌大豆致病变种(Pseudomonas syringaepv.glycinea)和/或地毯草黄单胞菌大豆致病变种(Xanthomonas axonopodispv.glycines)；谷物中的伯克霍尔德氏菌属种(Burkholderia spec.)和/或半透明黄单胞菌(Xanthomonas transluscens)；番茄中的丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae)、丁香假单胞菌番茄致病变种(Pseudomonas syringae pv.tomato)和/或野油菜黄单胞菌；黄瓜中的丁香假单胞菌和/或丁香假单胞菌黄瓜致病变种(Pseudomonas syringaepv.lachrymans)；马铃薯中的黑腐欧文氏菌(Erwinia atroseptica)、胡萝卜软腐欧文氏菌(Erwinia carotovora)和/或疮痂病链霉菌(Streptomyces scabies)。

65.权利要求62至64中任一项的方法，其中所述植物为苹果、香蕉、柑橘、猕猴桃、甜瓜、桃、梨、菠萝、仁果、石榴、卷心菜、花椰菜、黄瓜、葫芦、番茄、马铃薯、小麦、稻或大豆。

66.权利要求62至65中任一项的方法，其中所述杀真菌组合物作为叶面处理剂施用。

67.权利要求62至65中任一项的方法，其中所述杀真菌组合物作为土壤处理剂施用。

68.权利要求62至65中任一项的方法，其中所述杀真菌组合物以悬浮浓缩剂(SC)、油分散剂(OD)或水分散性颗粒剂(WG)的形式施用。

69.一种治疗白粉病，锈病，叶斑枯病，叶萎蔫病，根和茎病害，肉穗花序和圆锥花序病害，黑粉菌病害，果实腐烂病，种子和土壤传播的腐烂、发霉、萎蔫、腐坏和立枯病，癌性病害、菌瘿和扫帚病，萎蔫病害，叶疱病或卷叶病的方法，所述方法包括向植物或植物部位施加权利要求1至61中任一项的杀真菌组合物。

70.一种制备权利要求1至61的杀真菌组合物的方法，其包括

a)将枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的菌株与所述化合物混合；以及

b)使混合物平衡至少4小时、8小时、12小时或24小时。

71.权利要求70的方法，其还包括在混合后或在混合期间，将枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌的菌株和所述化合物加热至至少30℃、至少40℃、至少50℃、至少60℃、至少70℃或至少80℃。

72.涂覆有权利要求1至61中任一项的杀真菌组合物的植物或植物部位。

73.用权利要求1至61中任一项的杀真菌组合物处理的种子。