CN108977374A - 防治番茄灰霉病及叶霉病的复配菌剂组合物 - Google Patents

防治番茄灰霉病及叶霉病的复配菌剂组合物 Download PDF

Info

Publication number
CN108977374A
CN108977374A CN201810737996.2A CN201810737996A CN108977374A CN 108977374 A CN108977374 A CN 108977374A CN 201810737996 A CN201810737996 A CN 201810737996A CN 108977374 A CN108977374 A CN 108977374A
Authority
CN
China
Prior art keywords
tomato
mold
plants
bacillus
leaf
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201810737996.2A
Other languages
English (en)
Inventor
王傲雪
张淑梅
石玉莹
刘佳音
冉东升
张瑶
陈秀玲
王迎春
宫香余
康春生
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Northeast Agricultural University
Original Assignee
Northeast Agricultural University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Northeast Agricultural University filed Critical Northeast Agricultural University
Priority to CN201810737996.2A priority Critical patent/CN108977374A/zh
Publication of CN108977374A publication Critical patent/CN108977374A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

本发明公开了防治番茄灰霉病及叶霉病的复配菌剂组合物，属于番茄灰霉病及叶霉病的生防领域。本发明复配菌剂组合物由解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)Ba株菌剂和枯草芽胞杆菌(Bacillus sp)WXCDD105株菌剂组成；其中，将解淀粉芽胞杆菌Ba株和枯草芽胞杆菌WXCDD105株按照2：1的比例组成的菌剂组合物对灰霉病菌抑菌率最高；将二者按照1：4的配比得到的菌剂组合物对叶霉病菌的抑菌率最高，达到70.63％。本发明复配菌剂组合物对于番茄灰霉病和叶霉病均有显著的防治功效，防病效果显著优于单一菌株以及其它菌株的组合，能够应用于番茄灰霉病及叶霉病的生物防治。

Description

防治番茄灰霉病及叶霉病的复配菌剂组合物
技术领域
本发明涉及复配生防菌剂组合物，尤其涉及防治番茄灰霉病及叶霉病的复配生防菌剂组合物，属于番茄灰霉病及叶霉病的生物防治领域。
背景技术
中国是番茄生产大国，自2013年以来中国番茄的年产量均在5000万吨以上，并逐年增长。病害的发生常给番茄的生产造成严重的影响，其中番茄的灰霉病和叶霉病是两类主要的顽固性病害，给番茄的生产造成巨大的经济损失。目前，两种病害主要使用化学农药进行防治。近年来长期施用农药产生的危害受到极大的关注。相比而言，生物防治具有无残留无公害等优点，是取代化学农药的首选。因此应用有益微生物防治番茄灰霉病和叶霉病的前景十分广阔。
生物防治指利用微生物生防菌(biological control agents，BCAs)防治由细菌、真菌和线虫引起的作物病害。近年来，生物防治在对番茄灰霉病和叶霉病的应用方面已有很多报道，并且研究的内容正在不断的深入和扩大。
目前发现的用于防治番茄灰霉病的真菌主要是木霉菌和酵母菌(Zhang C F，ChenK S，Wang G L.Combination of the biocontrol yeast Cryptococcus laurentii withUV-C treatment for control of postharvest diseases of tomato fruit[J].BioControl，2013，58：269-281.Wang J Y，Wang G P，Zhang Y L，et al.Isolation andidentification of an endophytic fungus Pezicula sp.in Forsythia viridissimaand its secondary metabolites[J].World Journal of Microbiology andBiotechnology，2014，30(10)：2639-2644.You J Q，Zhang J，Wu M D，et al.Multiplecriteria-based screening of Trichoderma isolates for biological control ofBotrytis cinerea on tomato[J].Biological Control，2016，101：31-38.)。目前所涉及到防治番茄叶霉病的微生物以芽胞杆菌和放线菌居多(Kong H G，Chun O J，Choi K H，etal.Formulation of Bacillus amyloliquefaciens A-2and its efficacy to controltomato leaf mold disease caused by Fulvia fulva[J].Advanced Synthesis andCatalysis，2010，16(1)：837-845.Zhang X H，Tang R，Meng C Y.Primary report on theantibacterial material of strain AYM-18against tomato leaf mould[J].Journalof Southern Agriculture，2014，45(7)：1193-1196.)。吴勇等选育的低温生防菌枯草芽胞杆菌BS303对番茄叶霉病原菌、西瓜枯萎病等4株病菌都有显著的抑菌效果(吴勇，黄巧云，陈雯莉.低温生防菌枯草芽胞杆菌BS303的选育及其效果验证[J].华中农业大学学报，2017，36(3)：19-24.)。荣晓莹等筛选出的内生放线菌FQ-017对番茄叶霉病和灰霉病的防治效果明显(荣晓莹，詹刚明，张荣，等.植物内生放线菌FQ-017对番茄苗期灰霉和叶霉病的防治作用[J].西北农业学报，2008，17(4)：143-148.)。姚敏等筛选的内生放线菌BAR1-5对番茄叶霉病的防治效果达49.7％(姚敏，涂璇，黄丽丽，等.番茄叶霉病拮抗内生放线菌的筛选及其生防效果初报[J].西北农林科技大学学报：自然科学版，2007，35(10)：146-150.)。
虽然对包括番茄灰霉病和叶霉病等植物病害的生物防治研究已经取得了巨大进展，但是仍存在诸多共性问题：1)生防微生物资源及其丰富，但多数研究仅停留在实验室阶段，能用于生产的制剂或产品的种类和数量有限，生防菌资源的商品化率较低，难以满足生产需要；2)缺乏适应性强、防治效果稳定、抑菌范围广的优良菌株；3)菌株的生防机理尚不明确，室内试验和田间试验的防效差异大。因此有必要针对存在的问题实施相应的对策，更好地发挥生防微生物的作用效果。
国内外的研究表明，应用复合生防菌能更好的防治植物病害。此外，生防菌间相互作用还有促生长的效果。利用复合菌剂防治番茄灰霉病的报道多为细菌间的组合和细菌与真菌间的组合，而防治叶霉病的复合菌株至今未见报道。
目前，用于防治番茄灰霉病和叶霉病的多数菌株抑菌谱单一，仅对其中的一种病害有效，能够同时防治两种病害的菌株较少，目前尚未有同时防治番茄灰霉病和叶霉病的微生物菌剂上市应用。但是，两种病害在生产过程中经常同时发生，因此，研究兼防灰霉病和叶霉病的生防菌株具有重要意义。此外，利用单一菌株进行病害的防治常出现生防菌适应性较差、防效不稳定等现象。
发明内容
本发明的主要目的是提供一种能够同时防治番茄灰霉病和叶霉病的复合菌剂组合物，该复合菌剂组合物对于番茄灰霉病和叶霉病均具有显著的防治功效。
本发明的上述目的是通过以下技术方案来实现的：
一种能够同时防治番茄灰霉病和叶霉病的复合菌剂组合物，由解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)Ba株和枯草芽胞杆菌(Bacillus sp)WXCDD105株组成，其中，所述枯草芽胞杆菌(Bacillus sp)WXCDD105株的微生物保藏编号是CGMCC No.12496。
为了达到更好的防治效果，本发明发现将解淀粉芽胞杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)Ba株和枯草芽胞杆菌(Bacillus sp)WXCDD105株按照(1-2)：(1-4)的质量比例组成的菌剂组合物对于灰霉病和叶霉病均具有较好的防治功效。
其中，将解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)Ba株和枯草芽胞杆菌(Bacillus sp)WXCDD105株按照2：1的质量比例组成的菌剂组合物对灰霉病菌抑菌距离最大，达到10.70mm；抑菌率最高，为74.26％，显著高于其它处理组。
将解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)Ba株和枯草芽胞杆菌(Bacillus sp)WXCDD105株按照1：4的质量配比得到的菌剂组合物对叶霉病菌的抑菌距离最大，达到9.25mm；抑菌率最高，为70.63％，显著高于其它处理组。
本发明针对前期分离筛选的两株能够兼防番茄灰霉病和叶霉病的生防细菌WXCDD51、WXCDD105以及对于植物真菌具有广谱防治功效的生防细菌解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)Ba株以及枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)Bs wy-1，在测定四株生防细菌的广谱性的基础上构建复配菌株，研究其对番茄的促生作用和对番茄灰霉病和叶霉病的防治效果。
抑菌谱试验说明四株生防细菌均具有广谱抗病性，是构建复配菌株组合的良好材料。本试验发现，并不是所有组合都能增效，菌株数也不是越多越好。通过混配组合筛选试验结果发现，无论是针对番茄灰霉病，还是叶霉病，两株菌的混配组合Ba+Bs wy-1和Ba+WXCDD105抑菌效果均高于单一、其它两株、三株、四株的混配组合。
本发明将生防细菌WXCDD51株、WXCDD105株、解淀粉芽胞杆菌Ba株以及枯草芽胞杆菌Bs wy-1按照两两随机组合得到六种随机组合，即：105+51，105+Ba，105+Bs wy-1，Ba+51，Ba+Bs wy-1，51+Bs wy-1；将四种生防细菌按照三三随机组合得到四种随机组合，即：105+51+Ba，105+Bs wy-1+Ba，105+51+Bs wy-1，Ba+51+Bs wy-1；此外，将四种生防菌株全部组合在一起得到Ba+51+105+Bs wy-1这一组合。将11种菌剂组合和四种单独的生防菌剂分别测定其对番茄灰霉病和叶霉病的抑菌率，测定结果发现，无论是对番茄灰霉病，还是叶霉病，混配组合Ba+Bs wy-1的抑菌距离均最大，其次是组合Ba+WXCDD105。其中，Ba+Bs wy-1对灰霉病和叶霉病的抑菌率分别为44.52％、66.70％。Ba+WXCDD105对灰霉病和叶霉病的抑菌率分别为39.90％、58.75％。均高于清水对照和任何单一菌株处理组。其余混配组合与单一菌株比较接近。
鉴于混配组合Ba+WXCDD105和Ba+Bs wy-1对于番茄灰霉病和叶霉病的抑菌效果明显优于其它的组合以及单一的菌剂，本试验选择混配组合Ba+WXCDD105和Ba+Bs wy-1进行后续实验。
本发明进一步将Ba与WXCDD105分别按照1:1，1:2，2:1，1:3，3:1，1:4，4:1的质量比例进行复配组合物，分别测定其对灰霉病和叶霉病的抑菌率。根据测定结果可见，Ba与WXCDD105配比比例为2：1时，Ba+WXCDD105对灰霉病菌抑菌距离最大，达到10.70mm；抑菌率最高，为74.26％，将该组合命名为B-1。Ba与WXCDD105配比比例为1：4时，Ba+WXCDD105对叶霉病菌的抑菌距离最大，达到9.25mm；抑菌率最高，为70.63％。显著高于其它处理组，命名为F-1。
将Ba与Bs wy-1分别按照1:1，1:2，2:1，1:3，3:1，1:4，4:1的质量比例进行复配组合物，分别测定其对灰霉病和叶霉病的抑菌率，测定结果见表4。根据表4可见，Ba与Bs wy-1的质量比例为1：3时，Ba+Bs wy-1对灰霉病菌抑菌距离最大，达到10.89mm；抑菌率最高，为74.73％。将该组合命名为B-2。Ba与Bs wy-1的质量比例为3：1时对叶霉病菌的抑菌距离最大，达到7.80mm；抑菌率最高，为67.01％。显著高于其它处理组，将该组合命名为F-2。
上述的试验研究表明在人工培养基上混配组合Ba+WXCDD105和Ba+Bs wy-1比单一菌株和清水处理组抑菌作用更强，但是否对活体植株上的病害也具有相对较强的抑制作用，则需要进行离体和温室盆栽试验，本试验选择离体番茄果实接种灰霉病菌，离体番茄叶片接种叶霉病菌，从而更加直观的反映生防菌对两种病害的防治效果。
两种混配组合室内离体防治番茄灰霉病的防效试验结果发现，混配组合B-2和B-1对于侵染番茄灰霉病的离体果实防效分别为32.68％和29.18％，而单一菌株WXCDD105、Ba和Bs wy-1的离体防效为15.48％、25.19％和11.13％，说明两混配组合均能够有效防治番茄灰霉病，并且防效显著高于各单一菌株。
两种混配组合室内离体防治番茄叶霉病的室内离体防效试验结果为表6所示，混配组合F-2和F-1对于侵染番茄叶霉病的离体叶片防效为82.47％和80.51％，而单一菌株WXCDD105、Ba和Bs wy-1的离体防效为75.37％、79.47％和73.02％。说明两混配组合均能有效防治番茄叶霉病，并且防效显著高于各单一菌株。
鉴于生防菌的离体活性与或活体防效存在较大差异，仅凭离体防效的高低难以评价菌株组合的好坏，因此本发明又进行了温室盆栽试验。
根据番茄灰霉病的温室防效试验可见，化学农药40％嘧霉胺处理的发病率和病情指数最低，分别为16.97％和4.43，防病效果达到89.56％。菌株组合B-1的发病率和病情指数分别为38.93％和8.97，比清水对照减少了44.03％和78.85％，防病效果为78.83％。菌株组合B-2的发病率和病情指数分别为32.76％和10.03，比清水对照减少了52.90％和76.35％，防病效果为76.26％。两组合防效均强于各单菌株。
对于番茄灰霉病的治疗试验结果可见，化学农药40％嘧霉胺处理的发病率和病情指数分别为23.61％和16.82，治病效果为61.50％。菌株组合B-1的发病率和病情指数分别为38.60％和10.43，比清水对照减少了19.58％和76.12％，治病效果为76.10％。菌株组合B-2的发病率和病情指数分别为39.16％和12.19，比清水对照减少了18.41％和71.54％，治病效果为72.08％。且两组合的治病效果均强于各单菌株和化学农药。
对于番茄叶霉病的预防试验结果可见，化学农药10％多抗霉素处理的发病率和病情指数分别为26.84％和11.27，防病效果达到73.95％。菌株组合F-1的发病率和病情指数分别为25.83％和8.66，比清水对照减少了43.58％和80.00％，防病效果为78.94％。菌株组合F-2的发病率和病情指数分别为37.19％和9.53，比清水对照减少了18.76％和77.99％，防病效果为78.37％。均强于各单菌株和化学农药。
对于番茄叶霉病的治疗试验结果可见，在番茄叶霉病的治疗试验中，化学农药10％多抗霉素处理的发病率和病情指数最低，分别为28.22％和12.96，治病效果为71.54％。菌株组合F-1的发病率和病情指数分别为30.35％和9.48，比清水对照减少了37.03％和79.22％，治病效果为79.09％。菌株组合F-2的发病率和病情指数分别为30.21％和9.31，比清水对照减少了37.32％和79.59％，治病效果为79.56％。且两组合的治病效果均强于各单菌株和化学农药。
试验结果证明，将解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)Ba株和枯草芽胞杆菌(Bacillus sp)WXCDD105株组成的菌剂复配组合物对于番茄灰霉病和叶霉病均有显著的预防或治疗功效，防病效果显著优于强于单一菌株以及其它菌株的组合。
附图说明
图1不同菌剂的处理组合对番茄灰霉病的抑制结果。
图2不同菌剂的处理组合对番茄叶霉病的抑制结果。
具体实施方式
以下结合具体实施例来进一步描述本发明，本发明的优点和特点将会随着描述而更为清楚。但这些实施例仅是范例性的，并不对本发明的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本发明的精神和范围下可以对本发明的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本发明的保护范围内。
生物材料来源
(1)生防细菌WXCDD51株：为产氮假单孢菌(Pseudomonas azotoformans)，其微生物保藏编号是CGMCC No.12760.
(2)生防细菌WXCDD105株：为枯草芽胞杆菌(Bacillus sp)枯草亚种，其微生物保藏编号是CGMCC No.12496.
(3)生防细菌解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)Ba株：解淀粉芽胞杆菌Ba株购自中国农业微生物菌种保藏管理中心，其保藏编号是ACCC10147。
(4)生防细菌枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)Bs wy-1：枯草芽胞杆菌Bs wy-1株购自中国农业微生物菌种保藏管理中心，其保藏编号是ACCC 10655。
预备实施例1生防细菌产氮假单孢菌WXCDD51菌剂的制备
按照产氮假单孢菌菌剂的常规制备方法制备得到WXCDD51菌剂。
预备实施例2生防细菌枯草芽胞杆菌(Bacillus sp)WXCDD105株菌剂的制备
按照枯草芽胞杆菌菌剂的常规制备方法制备得到WXCDD105菌剂。
预备实施例3生防细菌解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)Ba株菌剂的制备
按照中国农业微生物菌种保藏管理中心所给出的培养基配方和发酵方法制备得到Ba株菌剂。
预备实施例4生防细菌枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)Bs wy-1菌剂的制备
按照中国农业微生物菌种保藏管理中心所给出的培养基配方和发酵方法制备得到Bs wy-1株菌剂。
实施例1复合菌剂组合物的制备
将解淀粉芽胞杆菌Ba株菌剂和枯草芽胞杆菌WXCDD105株菌剂按照2：1的质量比例混合在一起，加入适量的载体，混合均匀即得。
实施例2复合菌剂组合物的制备
将解淀粉芽胞杆菌Ba株菌剂和枯草芽胞杆菌WXCDD105株菌剂按照1：4的质量比例混合在一起，加入适量的载体，混合均匀即得。
实施例3复合菌剂组合物的制备
将解淀粉芽胞杆菌Ba株菌剂和枯草芽胞杆菌WXCDD105株菌剂按照1：1的质量比例混合在一起，加入适量的载体，混合均匀即得。
试验例1四株生防细菌的抑菌谱测定试验
一、四株生防细菌的活化及平板培养
供试菌株：生防细菌WXCDD51、WXCDD105、解淀粉芽胞杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)Ba和枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)Bs wy-1均；
培养基：LB培养基。
试剂：酵母粉、蛋白胨、NaCl、琼脂粉、75％和95％酒精。
活化方法：取-80℃甘油保存的四株生防细菌，37℃温浴约2min，直至结冰完全溶解后，吸取菌液50μL，在倒好的LB培养基上涂布，30℃恒温培养24-48h。采用平板划线法挑单菌落转接于LB培养基上，30℃恒温培养24h。4℃保藏。
二、四株生防细菌的抑菌谱的测定
四株生防细菌的抑菌谱的测定如表1所示。
WXCDD51发酵菌液对轮枝镰刀菌抑菌率最低为33.14％，对黄瓜褐斑病抑菌率最高为93.74％。对草莓灰霉病的抑制率为85.63％，对刺五加根腐病、葵花菌核病、链格孢、番茄斑枯病，抑菌率在65.79％-70.63％之间；对其他病害抑菌率在50％左右。
WXCDD105发酵菌液对草莓灰霉病、黄瓜褐斑病、玉米茎基腐病、刺五加根腐病、链格孢和番茄斑枯病的抑制率均在90％以上；对其余病害的抑菌率在70％-90％之间。
Ba发酵菌液对草莓灰霉病、黄瓜褐斑病、刺五加根腐病和链格孢的抑制率均在90％以上；其次是对玉米茎基腐病、葵花菌核病、水稻立枯病、番茄斑枯病、黄瓜炭疽病、玉米大斑病、轮枝镰刀菌、尖孢镰刀菌、西瓜枯萎病、番茄枯萎病和黄瓜枯萎病的抑菌率达到80％以上，只有对甜瓜枯萎病抑菌率较低，其为72.28％。
Bs wy-1发酵菌液对草莓灰霉病、黄瓜褐斑病、玉米茎基腐病、链格孢和轮枝镰刀菌的抑制率均在90％以上；其次是对刺五加根腐病、葵花菌核病、番茄斑枯病、玉米大斑病、番茄枯萎病、甜瓜枯萎病和黄瓜枯萎病，抑菌率在80％以上，对水稻立枯病、黄瓜炭疽病、尖孢镰刀菌和西瓜枯萎病抑菌率较低，为64.57％-76.38％。
表1四株生防细菌的抑菌谱
注：表中小写英文字母意为在0.05水平上差异显著。下同。
Note:little letters behind the data of the same column indicatesignificant difference at 0.05level.The same as below.
试验例2防治番茄灰霉病及叶霉病的最佳复配菌剂组合物的筛选试验1最佳复配生防菌株组合的筛选
本试验将生防细菌WXCDD51株(以下简称“51”)、WXCDD105株(以下简称“105”)、解淀粉芽胞杆菌Ba株(以下简称“Ba”)以及枯草芽胞杆菌Bs wy-1(以下简称“Bs wy-1”)按照两两随机组合(质量比例1:1)得到六种随机组合，即：105+51，105+Ba，105+Bs wy-1，Ba+51，Ba+Bs wy-1，51+Bs wy-1；将四种生防细菌按照三三随机组合(质量比例1:1:1)得到四种随机组合，即：105+51+Ba，105+Bs wy-1+Ba，105+51+Bs wy-1，Ba+51+Bs wy-1；此外，将四种生防菌株按照质量比例1:1:1:1的配比组合得到Ba+51+105+Bs wy-1这一组合。
将11种菌剂组合和四种单独的生防菌剂分别测定其对番茄灰霉病和叶霉病的抑菌率，测定结果见表2.
根据表2可见，无论是对番茄灰霉病，还是叶霉病，混配组合Ba+Bs wy-1的抑菌距离均最大，其次是组合Ba+WXCDD105。表2中两组合的抑菌率也较高，Ba+Bs wy-1对灰霉病和叶霉病的抑菌率分别为44.52％、66.70％。Ba+WXCDD105对灰霉病和叶霉病的抑菌率分别为39.90％、58.75％。均高于清水对照和任何单一菌株处理组。其余混配组合与单一菌株比较接近。
鉴于混配组合Ba+WXCDD105和Ba+Bs wy-1对于番茄灰霉病和叶霉病的抑菌效果明显优于其它的组合以及单一的菌剂，本试验选择混配组合Ba+WXCDD105和Ba+Bs wy-1进行后续实验。
表2单菌株和复合菌株对番茄灰霉病和叶霉病的抑制作用
2最佳复配比例的筛选
将Ba与WXCDD105分别按照1:1，1:2，2:1，1:3，3:1，1:4，4:1的质量比例进行复配组合物，分别测定其对灰霉病和叶霉病的抑菌率。测定结果见表3。
根据表3可见，Ba与WXCDD105配比比例为2：1时，Ba+WXCDD105对灰霉病菌抑菌距离最大，达到10.70mm；抑菌率最高，为74.26％，将该组合命名为B-1。Ba与WXCDD105配比比例为1：4时，Ba+WXCDD105对叶霉病菌的抑菌距离最大，达到9.25mm；抑菌率最高，为70.63％。显著高于其它处理组。命名为F-1。
表3 Ba+WXCDD105不同混配比例的筛选
将Ba与Bs wy-1分别按照1:1，1:2，2:1，1:3，3:1，1:4，4:1的质量比例进行复配组合物，分别测定其对灰霉病和叶霉病的抑菌率，测定结果见表4。
根据表4可见，Ba与Bs wy-1的质量比例为1：3时，Ba+Bs wy-1对灰霉病菌抑菌距离最大，达到10.89mm；抑菌率最高，为74.73％。将该组合命名为B-2。Ba与Bs wy-1的质量比例为3：1时对叶霉病菌的抑菌距离最大，达到7.80mm；抑菌率最高，为67.01％。显著高于其它处理组，将该组合命名为F-2。
表4 Ba+Bs wy-1不同混配比例的筛选
试验例3最佳复配生防菌株对番茄灰霉病及叶霉病的室内离体防效试验
试验例2的研究表明在人工培养基上混配组合Ba+WXCDD105和Ba+Bs wy-1比单一菌株和清水处理组抑菌作用更强，但是否对活体植株上的病害也具有相对较强的抑制作用，则需要进行离体和温室盆栽试验，本试验选择离体番茄果实接种灰霉病菌，离体番茄叶片接种叶霉病菌，从而更加直观的反映生防菌对两种病害的防治效果。
两种混配组合室内离体防治番茄灰霉病的防效试验结果为表5所示，混配组合B-2和B-1对于侵染番茄灰霉病的离体果实防效分别为32.68％和29.18％，而单一菌株WXCDD105、Ba和Bs wy-1的离体防效为15.48％、25.19％和11.13％，说明两混配组合均能够有效防治番茄灰霉病，并且防效显著高于各单一菌株。
表5单菌株和复合菌株对番茄灰霉病室内离体果实防效
两种混配组合室内离体防治番茄叶霉病的室内离体防效试验结果为表6所示，混配组合F-2和F-1对于侵染番茄叶霉病的离体叶片防效为82.47％和80.51％，而单一菌株WXCDD105、Ba和Bs wy-1的离体防效为75.37％、79.47％和73.02％。说明两混配组合均能有效防治番茄叶霉病，并且防效显著高于各单一菌株。
表6单菌株和复合菌株对番茄叶霉病室内离体叶片防效
试验例4最佳复配生防菌株对番茄灰霉病和叶霉病的温室防效试验
对于番茄灰霉病的温室防效试验如表7所示，在番茄灰霉病的预防试验中，化学农药40％嘧霉胺处理的发病率和病情指数最低，分别为16.97％和4.43，防病效果达到89.56％。菌株组合B-1的发病率和病情指数分别为38.93％和8.97，比清水对照减少了44.03％和78.85％，防病效果为78.83％。菌株组合B-2的发病率和病情指数分别为32.76％和10.03，比清水对照减少了52.90％和76.35％，防病效果为76.26％。两组合防效均强于各单菌株。
表7单一和复合菌株对番茄灰霉病的防病效果
对于番茄灰霉病的治疗试验结果为表8所示，在番茄灰霉病的治疗试验中，化学农药40％嘧霉胺处理的发病率和病情指数分别为23.61％和16.82，治病效果为61.50％。菌株组合B-1的发病率和病情指数分别为38.60％和10.43，比清水对照减少了19.58％和76.12％，治病效果为76.10％。菌株组合B-2的发病率和病情指数分别为39.16％和12.19，比清水对照减少了18.41％和71.54％，治病效果为72.08％。且两组合的治病效果均强于各单菌株和化学农药。
表8单一和复合菌株对番茄灰霉病的治病效果
对于番茄叶霉病的预防试验结果为表9所示，在番茄叶霉病的预防试验中，化学农药10％多抗霉素处理的发病率和病情指数分别为26.84％和11.27，防病效果达到73.95％。菌株组合F-1的发病率和病情指数分别为25.83％和8.66，比清水对照减少了43.58％和80.00％，防病效果为78.94％。菌株组合F-2的发病率和病情指数分别为37.19％和9.53，比清水对照减少了18.76％和77.99％，防病效果为78.37％。均强于各单菌株和化学农药。
表9单一和复合菌株对番茄叶霉病的防病效果
对于番茄叶霉病的治疗试验结果为表10所示，在番茄叶霉病的治疗试验中，化学农药10％多抗霉素处理的发病率和病情指数最低，分别为28.22％和12.96，治病效果为71.54％。菌株组合F-1的发病率和病情指数分别为30.35％和9.48，比清水对照减少了37.03％和79.22％，治病效果为79.09％。菌株组合F-2的发病率和病情指数分别为30.21％和9.31，比清水对照减少了37.32％和79.59％，治病效果为79.56％。且两组合的治病效果均强于各单菌株和化学农药。
表10单菌株和复合菌株对番茄叶霉病的治病效果

Claims (8)

1.一种防治番茄灰霉病和叶霉病的复合菌剂组合物，其特征在于，由解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)Ba株菌剂和枯草芽胞杆菌(Bacillus sp)WXCDD105株菌剂组成。
2.按照权利要求1所述的复合菌剂组合物，其特征在于，所述枯草芽胞杆菌(Bacillussp)WXCDD105株的微生物保藏编号是CGMCC No.12496。
3.按照权利要求1所述的复合菌剂组合物，其特征在于，所述复合菌剂组合物中含有载体。
4.按照权利要求1所述的复合菌剂组合物，其特征在于，解淀粉芽胞杆菌Ba株菌剂和枯草芽胞杆菌(Bacillus sp)WXCDD105株菌剂的质量配比比例为(1-2)：(1-4)。
5.按照权利要求4所述的复合菌剂组合物，其特征在于，解淀粉芽胞杆菌Ba株菌剂和枯草芽胞杆菌(Bacillus sp)WXCDD105株菌剂的质量配比比例为2：1。
6.按照权利要求4所述的复合菌剂组合物，其特征在于，解淀粉芽胞杆菌Ba株菌剂和枯草芽胞杆菌(Bacillus sp)WXCDD105株菌剂的质量配比比例为1：4。
7.权利要求1所述的复合菌剂组合物在预防或治疗番茄灰霉病中的用途。
8.权利要求1所述的复合菌剂组合物在预防或治疗番茄叶霉病中的用途。
CN201810737996.2A 2018-07-06 2018-07-06 防治番茄灰霉病及叶霉病的复配菌剂组合物 Pending CN108977374A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810737996.2A CN108977374A (zh) 2018-07-06 2018-07-06 防治番茄灰霉病及叶霉病的复配菌剂组合物

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810737996.2A CN108977374A (zh) 2018-07-06 2018-07-06 防治番茄灰霉病及叶霉病的复配菌剂组合物

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN108977374A true CN108977374A (zh) 2018-12-11

Family

ID=64537174

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201810737996.2A Pending CN108977374A (zh) 2018-07-06 2018-07-06 防治番茄灰霉病及叶霉病的复配菌剂组合物

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN108977374A (zh)

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109673671A (zh) * 2019-01-22 2019-04-26 河北省农林科学院植物保护研究所 一种防治马铃薯黄萎病的微生物种子处理剂及制备方法
CN109699682A (zh) * 2019-03-07 2019-05-03 东北农业大学 一种番茄生防种衣剂及其应用
CN112574906A (zh) * 2020-11-27 2021-03-30 黄河三角洲京博化工研究院有限公司 一种防治棚室番茄重茬常见病害的菌株及其复合微生物菌剂
CN114410518A (zh) * 2022-01-07 2022-04-29 春华秋实科技集团有限公司 一种含有链霉菌的复合微生物菌剂及其应用
CN115011530A (zh) * 2022-07-21 2022-09-06 东北农业大学 一种用于番茄的多功能复合贝莱斯芽胞杆菌菌剂及其制备方法及其应用
CN116179397A (zh) * 2022-07-21 2023-05-30 东北农业大学 一株防治番茄灰霉病的贝莱斯芽孢杆菌及其应用

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103865843A (zh) * 2014-02-13 2014-06-18 河北省科学院生物研究所 一种微生物复合菌及其在防治蔬菜真菌病害中的应用
CN104560837A (zh) * 2015-02-02 2015-04-29 青岛蔚蓝生物集团有限公司 一种解淀粉芽孢杆菌及其应用
EP2991492A1 (en) * 2013-05-03 2016-03-09 Universidad Eafit Production process for biomass and fengycin metabolites of bacillus species and compositions thereof for biological pest control
CN105838656A (zh) * 2016-06-15 2016-08-10 东北农业大学 防治番茄灰霉病和叶霉病的广谱抗病促生抗逆芽胞杆菌及其应用
CN106793781A (zh) * 2014-05-28 2017-05-31 拜耳作物科学有限合伙公司 用于防治植物中的真菌性病害和细菌性病害的组合物和方法

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2991492A1 (en) * 2013-05-03 2016-03-09 Universidad Eafit Production process for biomass and fengycin metabolites of bacillus species and compositions thereof for biological pest control
CN103865843A (zh) * 2014-02-13 2014-06-18 河北省科学院生物研究所 一种微生物复合菌及其在防治蔬菜真菌病害中的应用
CN106793781A (zh) * 2014-05-28 2017-05-31 拜耳作物科学有限合伙公司 用于防治植物中的真菌性病害和细菌性病害的组合物和方法
CN104560837A (zh) * 2015-02-02 2015-04-29 青岛蔚蓝生物集团有限公司 一种解淀粉芽孢杆菌及其应用
CN105838656A (zh) * 2016-06-15 2016-08-10 东北农业大学 防治番茄灰霉病和叶霉病的广谱抗病促生抗逆芽胞杆菌及其应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CATERINA ROTOLO等: "USE OF BIOCONTROL AGENTS AND BOTANICALS IN INTEGRATED MANAGEMENT OF BOTRYTIS CINEREA IN TABLE-GRAPE VINEYARDS", 《PEST MANAGEMENT SCIENCE》 *
王晓辉等: "一株抗灰霉病解淀粉芽孢杆菌的筛选鉴定及抑菌蛋白的分离", 《吉林农业科学》 *

Cited By (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109673671A (zh) * 2019-01-22 2019-04-26 河北省农林科学院植物保护研究所 一种防治马铃薯黄萎病的微生物种子处理剂及制备方法
CN109699682A (zh) * 2019-03-07 2019-05-03 东北农业大学 一种番茄生防种衣剂及其应用
CN109699682B (zh) * 2019-03-07 2021-02-26 东北农业大学 一种番茄生防种衣剂及其应用
CN112574906A (zh) * 2020-11-27 2021-03-30 黄河三角洲京博化工研究院有限公司 一种防治棚室番茄重茬常见病害的菌株及其复合微生物菌剂
CN112574906B (zh) * 2020-11-27 2022-06-14 黄河三角洲京博化工研究院有限公司 一种防治棚室番茄重茬常见病害的菌株及其复合微生物菌剂
CN114410518A (zh) * 2022-01-07 2022-04-29 春华秋实科技集团有限公司 一种含有链霉菌的复合微生物菌剂及其应用
CN115011530A (zh) * 2022-07-21 2022-09-06 东北农业大学 一种用于番茄的多功能复合贝莱斯芽胞杆菌菌剂及其制备方法及其应用
CN116179397A (zh) * 2022-07-21 2023-05-30 东北农业大学 一株防治番茄灰霉病的贝莱斯芽孢杆菌及其应用
CN116179397B (zh) * 2022-07-21 2024-04-09 东北农业大学 一株防治番茄灰霉病的贝莱斯芽孢杆菌及其应用

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN108977374A (zh) 防治番茄灰霉病及叶霉病的复配菌剂组合物
CN103484384B (zh) 一种防控蔬菜真菌病害的深绿木霉制剂及其制备方法
KR101279044B1 (ko) 판토이아 디스퍼사 ｗｃｕ35 균주, 이를 함유하는 식물병 방제용 조성물 및 식물병 방제방법
Chandel et al. Biological control of Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici on tomato by Brevibacillus brevis
KR101279027B1 (ko) 바실러스 아밀로리퀴피시언스 ｌｍ11 균주, 이를 함유하는 식물병 방제용 조성물 및 식물병 방제방법
US20220400685A1 (en) Camellia sinensis endophyte penicillium ehrlichii and application thereof
CN104164394A (zh) 一株拮抗植物病原菌的菌株及其应用
CN104560837A (zh) 一种解淀粉芽孢杆菌及其应用
CN104017749B (zh) 一种内生枯草芽孢杆菌正突变株、制备方法和制备的生防菌剂及其防治石榴干腐病的应用
CN104651260A (zh) 一种短短芽孢杆菌bbc-3及其应用与菌剂制备
CN105567568A (zh) 一种防控茄果类蔬菜病毒病的微生物菌剂及其制备方法
CN108192838A (zh) 一种具有降解无机磷和防病双重作用的解淀粉芽孢杆菌
Ali et al. Evaluating the efficacy of Trichoderma isolates and Bacillus subtilis as biological control agents against Rhizoctonia solani
CN103952328A (zh) 一种枯草芽孢杆菌菌株a33、菌剂及制备方法和应用
CN106942276A (zh) 枯草芽孢杆菌bab‑1防治瓜类白粉病的应用
Sahar et al. Chemical and biological management of Fusarium oxysporum f. sp melongenae
JP2016202107A (ja) 抗菌作用および植物生長促進作用に優れた新規微生物
CN108991019A (zh) 防治番茄灰霉病及叶霉病的生防菌剂组合物
KR20170136081A (ko) 바실러스 아밀로리퀴피시언스 im1 균주, 이를 함유하는 식물병 방제용 및 생육촉진 조성물
CN105039168A (zh) 一株橘绿木霉及其用途
KR100851399B1 (ko) 고추 작물을 위한 길항 미생물 트라이코델마 하르지아눔을이용한 미생물 제제
CN103320368A (zh) 一种菌根辅助细菌芽孢杆菌及其在促进杨树生长中的应用
CN102719363A (zh) 加拿大一枝黄花内生真菌的抗菌发酵液的制备方法
KR20130016917A (ko) 세라시아 네마토디필라 ｗｃｕ338 균주, 이를 함유하는 식물병 방제용 조성물 및 식물병 방제방법
CN102648713B (zh) 一种利用真菌激活蛋白提高木霉菌剂生物防病活性的技术

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20181211