CN115960788A - 一种防治棉花黄萎病的专用菌剂 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种防治棉花黄萎病的专用菌剂，其有效组分包括组分A和组分B，所述组分A为链霉菌KN37，所述组分B为枯草芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌中的至少一种；组分A和组分B在菌剂中的质量配比为1～5:1。本发明提供的防治棉花黄萎病的专用菌剂在一定的配比范围内，在棉花黄萎病防治方面表现出协同增效的作用。
Description
技术领域
本发明属于农药复配技术领域，具体涉及一种防治棉花病害的专用菌剂。
背景技术
在我国，棉花黄萎病已是棉花生产上比较普遍发生的问题。进入90年代后，随着棉花枯萎病的危害得以控制，黄萎病的发生为害，已经慢性地、严重地影响着棉花的单位产量。尤其是棉花黄萎病在局部棉区发生后，对棉花生产更是存在着潜伏性的危害。当前，在农业生产上，黄萎病的防治以棉种消毒处理、培养壮苗、移栽田的科学施肥技术、抗旱排涝地膜覆盖、治虫除草技术等综合栽培技术为主。存在操作周期长、防治效果不理想等问题。
近几年来，国内针对棉花黄萎病综合防治的研究，主要集中在下列几个方面：(1)抗性资源开发，国内许多研究部门都开展了抗性亲本的开发应用，国家已对5000份棉花品种资源进行了抗黄萎病性的鉴定，提出了一批抗(耐)病的品种资源，然而，由于棉花抗黄萎性还没有达到像高抗枯萎病的标准，这就是需要进一步利用其他防治方法。(2)内生菌诱导棉花抗黄萎病，试验表明，内生菌对病原菌的致萎毒素是起到抑制产生作用，同样对病原菌的菌丝生长亦起着抑制作用，研究还发现，诱导剂在棉花生育前期对抗性还有一定的诱导作用。(3)生长调节剂化学控病研究，多项研究表明，缩节胺、枯萎立克、黄氟酸盐等生长调节剂均对棉花黄萎病表现出一定抗病促生的作用。
链霉菌(Streptomyces sp.)KN37诱导棉花提高对黄萎病的抗性，对黄萎病病原菌的菌丝生长起着抑制作用，对棉花有着良好的防病促生效果；枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)耐受能力强、繁殖速度快、分布范围广，是防治棉花黄萎病的重要生防菌；解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)在农业植物病害的生物防治研究中，对植物真菌病害病原具有广泛的拮抗作用，对病原细菌也有一定的抑制作用。
针对棉花黄萎病防治中存在的问题，本发明欲提供一种防治棉花黄萎病的专用菌剂，该菌剂主要活性成分为链霉菌KN37和枯草芽孢杆菌，该菌剂对棉花黄萎病的防治表现出显著的协同增效作用，且该菌剂也未出现在已知的文献中，本领域普通技术人员也难以知晓该菌剂用于增强作物抗逆性所产生的有益效果。
发明内容
本发明的目的是提供一种防治棉花黄萎病的专用菌剂，该菌剂在防治棉花黄萎病、提高棉花产量方面表现出协同增效的作用。
为达到上述目的，本发明采用的技术方案为一种防治棉花黄萎病的专用菌剂，其有效组分包括组分A和组分B，组分A为链霉菌KN37，组分B为枯草芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌中的至少一种。
进一步地，本发明提供的防治棉花黄萎病的专用菌剂中，组分A和组分B的质量配比为1～5:1；优选地，组分A和组分B的质量配比为2～4:1。进一步地，本发明提供的防治棉花黄萎病的专用菌剂中，组分B为枯草芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌的组合，枯草芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌在组分B中的质量配比为1:1。
另一方面，本发明提供了防治棉花黄萎病的专用菌剂在棉花黄萎病防治中的应用；具体地，施用方式包括作为底肥使用、灌根或包衣。
根据实际应用需要，本发明提供的防治植物病毒病的农用组合物按照本领域技术人员公知的方法，可调整制备成便于农业上施用的制剂剂型。本领域技术人员易于知晓，除含有有效成分外，制剂体系中还含有配制农药制剂所需的助剂。助剂可以选用表面活性剂、润湿剂、稳定剂、分散剂、增稠剂、pH调节剂、消泡剂、防冻剂、填料等中的一种或几种的混合。本发明的助剂可以均为已知物质，比如农药制剂中常用的各种助剂，根据不同情况可以有所变化，并无特别限定。
与现有技术相比，本发明的菌剂，至少具有下述优点或有益效果：
(1)所述菌剂可诱导棉花增强抗性，对多种真菌、细菌和病毒有免疫灭杀作用，同时，所述菌剂对多种植物病原菌具有一定程度的直接抑制作用。
(2)所述农用组合物在环境中易于降解，不会对环境造成污染，兼有药效和肥效双重生物调节功能的特点，可诱导激活植物免疫系统，提高植物抗病毒能力。
具体实施例
下面，结合实施例对本发明的技术方案进行说明，但是，本发明并不限于下述的实施例。
下述各实施例中实验方法和检测方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述药剂和材料，如无特殊说明，均可在市场上购买得到；所述指标数据，如无特殊说明，均为常规测量方法。本实施例所涉及的质量配比是指菌体(菌粉)的质量配比。在本技术领域，普通技术人员可采用常规技术，比如离心、冷冻干燥等，易于获取发酵后的菌体(菌粉)。
实施例1
本实施例提供了一种防治棉花黄萎病的专用菌剂对大丽轮枝菌防治效果的室内试验。
强致病力大丽轮枝菌Vd080，由石河子大学农学院棉花病害研究课题组提供；试验选用中抗黄萎病棉花品种新陆早74号；链霉菌KN37、枯草芽孢杆菌及解淀粉芽孢杆菌均来自石河子大学生物农药创新团队已建立的新疆特色微生物菌种群资源库；培养基为PDA固体培养基、察氏培养基、LB固体培养基及液体培养基、高氏1号固体培养基。
菌种的活化：链霉菌KN37在高氏1号固体培养基上进行活化，选择单菌落接到高氏1号液体培养基中，置于32℃、120rpm摇床培养72h，获得链霉菌KN37培养液，备用；将枯草芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌分别在LB固体培养基上进行活化，选择单菌落接到LB液体培养基中，置于37℃、150rpm摇床培养24h，分别获得枯草芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌的培养液，备用；大丽轮枝菌菌液制备：取直径为5mm的Vd080菌饼转接到察氏培养基中，于25℃、150rpm摇床培养7d获得Vd080孢子悬浮液，备用。
对峙培养测定枯草芽跑杆菌对大丽轮枝菌的影响。设置五组试验组：(1)在PDA平板中心接种已经活化的直径为5mm的Vd080菌饼，然后在距离培养基中心20mm处对称放置2个牛津杯，每杯内加入50μL链霉菌KN37的培养液；(2)在PDA平板中心接种已经活化的直径为5mm的Vd080菌饼，然后在距离培养基中心20mm处对称放置2个牛津杯，每杯内加入50μL枯草芽孢杆菌培养液；(3)在PDA平板中心接种已经活化的直径为5mm的Vd080菌饼，然后在距离培养基中心20mm处对称放置2个牛津杯，每杯内加入50μL解淀粉芽孢杆菌培养液；(4)在PDA平板中心接种已经活化的直径为5mm的Vd080菌饼，然后在距离培养基中心20mm处对称放置2个牛津杯，每杯内加入50μL链霉菌KN37：枯草芽孢杆菌：解淀粉芽孢杆菌＝6:1:1的培养液；(5)以单独接种Vd080作为空白对照。每个处理重复5次，25℃恒温培养观察抑菌情况，在第10天利用十字交叉法测定黄萎病菌菌落直径,利用下列公式计算抑制率(I):I＝[(5-D2)-(5-D1)]/(5-D1)x100％。式中，D1和D2分别为空白对照和处理菌落直径(mm)。结果如表1所示。
表1 防治棉花黄萎病的专用菌剂对大丽轮枝菌的联合作用
表1数据显示，本发明提供的防治棉花黄萎病的专用菌剂对棉花黄萎病的致病菌大丽轮枝菌表现出显著的抑制作用，抑制率最大为40.17％，最小为24.67％，均大于20％。
实施例2
本实施例提供了一种防治棉花黄萎病的专用菌剂对棉花黄萎病防治效果的田间试验。
供试棉花品种为“新陆早74号”，试验地点在新疆石河子，统一正常土肥水管理。将链霉菌KN37、枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌按表2所述的比例复配为混合处理药剂，以链霉菌KN37、枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌单剂为对照处理药剂。
每组处理设置一个试验小区，每个试验小区面积30m2。于2021年7月2日棉花黄萎病发病初期进行灌根施药，施药后7天调查防治效果。每小区采用5点取样，每点调查2m2，重复3次，以株为单位调查总株数、各级病株数，计算病情指数和防治效果，其数据记录结果见表2。
本试验采用Colby法计算菌剂的理论防效E0，当E-E0>0时，说明混配组合物产生增效作用；当E-E0<0时，说明混配组合物产生拮抗作用；当E-E0值等于0时，说明混配组合物产生相加作用，公式中的E表示各处理的实测防效％。
根据防效对E0进行换算，E0的计算公式为：
其中，X为链霉菌KN37用量为x g/hm2的防治效果，Y为枯草芽孢杆菌用量为y g/hm2的防治效果，Z为解淀粉芽孢杆菌用量为zg/hm2的防治效果。在采用Colby法计算中，E为本申请混配菌剂用量为(x+y+z)g/hm2的防治效果。
黄萎病调查方法参照《棉花黄萎病抗性鉴定技术规程》。其中病情指数和防治效果(％)计算方式如下：
表2，防治棉花黄萎病的专用菌剂对棉花黄萎病的联合作用
注：B表示枯草芽孢杆菌:解淀粉芽孢杆菌质量配比为1:1的组合物。
根据Colby法，表2数据显示，本发明提供的防治棉花黄萎病的专用菌剂对棉花黄萎病表现出协同增效的作用，E-E0最大为18.92％，最小为13.79％，均大于10％。
如上所述，即可较好地实现本发明，上述的实施例仅仅是对本发明的优选实施方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方案做出的各种改变和改进，均应落入本发明确定的保护范围内。
Claims (8)
1.一种防治棉花黄萎病的专用菌剂，其特征在于，有效组分由组分A和组分B构成，所述组分A为链霉菌KN37，所述组分B为枯草芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌中的至少一种。
2.根据权利要求1所述的专用菌剂，其特征在于，所述组分B为枯草芽孢杆菌，所述组分A和所述组分B在所述菌剂中的质量配比为1～5:1。
3.根据权利要求2所述的专用菌剂，其特征在于，所述组分B为枯草芽孢杆菌，所述组分A和所述组分B在所述菌剂中的质量配比为2～4:1。
4.根据权利要求1所述的专用菌剂，其特征在于，所述组分B为解淀粉芽孢杆菌，所述组分A和所述组分B在所述菌剂中的质量配比为1～5:1。
5.根据权利要求4所述的专用菌剂，其特征在于，所述组分B为解淀粉芽孢杆菌，所述组分A和所述组分B在所述菌剂中的质量配比为2～4:1。
6.根据权利要求1所述的专用菌剂，其特征在于，所述组分B为枯草芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌，所述枯草芽孢杆菌和所述解淀粉芽孢杆菌在所述组分B中的质量配比为1:1。
7.根据权利要求6所述的专用菌剂，其特征在于，所述组分A和所述组分B在所述菌剂中的质量配比为1.5～3.5:1。
8.根据权利要求7所述的专用菌剂，其特征在于，所述组分A和所述组分B在所述菌剂中的质量配比为2～3:1。
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