CN105833284A - 紫杉醇-油酸小分子前药自组装纳米粒的构建 - Google Patents

紫杉醇-油酸小分子前药自组装纳米粒的构建 Download PDF

Info

Publication number
CN105833284A
CN105833284A CN201610206408.3A CN201610206408A CN105833284A CN 105833284 A CN105833284 A CN 105833284A CN 201610206408 A CN201610206408 A CN 201610206408A CN 105833284 A CN105833284 A CN 105833284A
Authority
CN
China
Prior art keywords
paclitaxel
oleic acid
small molecule
acid
prodrug
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201610206408.3A
Other languages
English (en)
Other versions
CN105833284B (zh
Inventor
孙进
罗聪
何仲贵
孙丙军
刘丹
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Shenyang Pharmaceutical University
Hangzhou Zhongmei Huadong Pharmaceutical Co Ltd
Original Assignee
Shenyang Pharmaceutical University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shenyang Pharmaceutical University filed Critical Shenyang Pharmaceutical University
Priority to CN201610206408.3A priority Critical patent/CN105833284B/zh
Publication of CN105833284A publication Critical patent/CN105833284A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN105833284B publication Critical patent/CN105833284B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/10—Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/337—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having four-membered rings, e.g. taxol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/141—Intimate drug-carrier mixtures characterised by the carrier, e.g. ordered mixtures, adsorbates, solid solutions, eutectica, co-dried, co-solubilised, co-kneaded, co-milled, co-ground products, co-precipitates, co-evaporates, co-extrudates, co-melts; Drug nanoparticles with adsorbed surface modifiers
    • A61K9/145—Intimate drug-carrier mixtures characterised by the carrier, e.g. ordered mixtures, adsorbates, solid solutions, eutectica, co-dried, co-solubilised, co-kneaded, co-milled, co-ground products, co-precipitates, co-evaporates, co-extrudates, co-melts; Drug nanoparticles with adsorbed surface modifiers with organic compounds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D305/00—Heterocyclic compounds containing four-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atoms
    • C07D305/14—Heterocyclic compounds containing four-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atoms condensed with carbocyclic rings or ring systems

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

本发明设计合成了一系列紫杉醇‑油酸小分子前药，通过使用对氧化还原环境敏感的化学连接臂，促进药物在肿瘤细胞内快速释放。在此基础上，制备了小分子前药自组装纳米药物传递系统。这些小分子前药纳米药物传递系统的优势在于：采用一步纳米沉淀的方法，制备工艺简单，易于产业化；粒径小且均匀（~100 nm），易于通过EPR效应富集于肿瘤部位；超高的载药量，有利于减小因辅料和生物材料而引发的不良反应；易于表面修饰，可通过PEG和主动靶向修饰以有效避免网状内皮系统摄取和提高肿瘤细胞对纳米粒的摄取；借助化学链接臂对肿瘤细胞氧化还原微环境的敏感性，实现紫杉醇在肿瘤部位的特异性释药，提高疗效并降低毒副作用。

Description

紫杉醇-油酸小分子前药自组装纳米粒的构建
技术领域
本发明属于药物制剂新辅料和新剂型领域，包括多个紫杉醇-油酸前药的合成及系列紫杉醇-油酸小分子前药自组装纳米粒的构建，以及其在药物传递中的应用。
背景技术
紫杉醇(Paclitaxel,PTX)作为一线抗癌药已经被广泛应用于临床中。由于紫杉醇的水溶性很差，市售的溶液剂(泰素)是用聚氧乙烯蓖麻油和乙醇作为增溶剂和助溶剂将其溶解而应用于临床。正因如此，泰素会引起很严重的辅料相关的毒副作用，极大地限制了其在临床的应用。近年来，基于纳米技术的新型药物传递系统备受关注，有很多纳米药物传递系统被构建起来用于紫杉醇的递药。其中，有一些已经被应用于临床实践中，包括紫杉醇脂质体、紫杉醇白蛋白纳米粒、紫杉醇纳米胶束以及紫杉醇-聚合物前药等。尽管纳米技术极大地改善了紫杉醇的成药性，但这些新型纳米制剂也存在一些缺陷，包括：载体相关的毒性、载药量低(一般不足10％)、稳定性差、药物在储存过程中易泄漏、结晶等。因此，如何设计一种高效低毒的药物传递系统用于紫杉醇的传递仍然是研究的热点。
前体药物也被广泛研究用来克服紫杉醇的成药性差问题。其中，关于紫杉醇的不饱和脂肪酸前药的研究取得了很大的进展。例如：紫杉醇-二十二碳六烯酸前药(PTX-DHA)已经进入了临床III期研究。然而，最新的临床结果显示，与现存的化疗药物相比，PTX-DHA的疗效并没有展现出优势。分析PTX-DHA的结构，我们发现紫杉醇和二十二碳六烯酸是通过酯键相连的，这可能会导致紫杉醇很难从前药上断裂下来，进而导致其疗效不佳。
发明内容
针对这一问题，我们设计了一系列紫杉醇-油酸前药，紫杉醇和油酸是通过一系列氧化还原敏感的化学连接臂连接在一起，这些氧化还原敏感的化学连接臂在肿瘤细胞内的高氧化还原环境中能快速断裂，释放出药物。令人惊喜的是，我们发现这些小分子疏水性前药能自组装形成均匀的前药纳米粒。在这些小分子前药纳米系统中，由于前药自身既作为载体材料又作为被包载的药物，其载药量非常高，超过了50％。如此高的载药量在所有紫杉醇纳米制剂中极为罕见。在此基础上，比较了氧化还原敏感的化学连接臂对紫杉醇释放速率及其对抗肿瘤效果的影响。
基于此，本发明设计构建了一系列氧化还原敏感的紫杉醇-油酸小分子前药纳米粒，并对其进行了PEG修饰，赋予其在血液中的长循环特性，将其应用于抗肿瘤研究。
本发明的目的是设计和合成一系列氧化还原敏感的紫杉醇-油酸小分子前药，制备前药自组装纳米药物传递系统，并比较不同化学连接臂(酯键和氧化还原敏感键)对药物释放速率和抗肿瘤效果的影响。
本发明通过以下技术方案实现上述目的：
本发明所述的紫杉醇-油酸小分子前药包括(a)酯键相连的紫杉醇-油酸前药、(b)单硫醚键相连的紫杉醇-油酸前药、(c)间隔二硫醚键相连的紫杉醇-油酸前药和(d)二硫键相连的紫杉醇-油酸前药，其结构如下：
本发明提供的系列紫杉醇-油酸小分子前药合成方法，包括如下步骤：
(1)酯键相连的紫杉醇-油酸前药的合成：油酸在DCC和DMAP的催化下，与紫杉醇在N2保护下反应，分离纯化即得；
(2)氧化还原双敏感的单硫醚键相连的紫杉醇-油酸前药的合成：油酸在对甲苯磺酸催化下，与乙二醇反应，得油酸-乙二醇酯，油酸-乙二醇酯在HOBt和EDCI的催化下，与2,2’-硫代二乙酸酐反应，得(2-氧代-2-(2-((Z)-油酰氧基)乙氧基)乙硫基)乙酸，(2-氧代-2-(2-((Z)-油酰氧基)乙氧基)乙硫基)乙酸在HOBt和EDCI的催化下，与紫杉醇反应，分离纯化即得，反应全程都在N2保护下进行，乙二醇也可以用乙二胺替代；
(3)氧化还原双敏感的间隔二硫醚键相连的紫杉醇-油酸前药的合成：油酸在对甲苯磺酸催化下，与乙二醇反应，得油酸-乙二醇酯，油酸-乙二醇酯在HOBt和EDCI的催化下，与1,2-亚乙基二硫代二乙酸酐反应，得(2-(2-氧代-2-(2-((Z)-油酰氧基)乙氧基)乙硫基)乙硫基)乙酸，(2-(2-氧代-2-(2-((Z)-油酰氧基)乙氧基)乙硫基)乙硫基)乙酸在HOBt和EDCI的催化下，与紫杉醇反应，分离纯化即得，反应全程都在N2保护下进行，乙二醇也可以用乙二胺替代；
(4)还原敏感的二硫键相连的紫杉醇-油酸前药的合成：油酸在对甲苯磺酸催化下，与乙二醇反应，得油酸-乙二醇酯，油酸-乙二醇酯在HOBt、EDCI和DMAP的催化下，与2,2'-二硫代二乙酸酐反应，得(2-氧代-2-(2-((Z)-油酰氧基)乙氧基)乙二硫基)乙酸，(2-氧代-2-(2-((Z)-油酰氧基)乙氧基)乙二硫基)乙酸在HOBt和EDCI的催化下，与紫杉醇反应，分离纯化即得，反应全程都在N2保护下进行，乙二醇也可以用乙二胺替代。
本发明提供的小分子前药自组装纳米粒的制备方法如下：
将一定量的小分子前药溶解到适量的乙醇中，搅拌下，将该乙醇溶液缓缓滴加到水中，前药自发形成均匀的纳米粒。
所述的小分子前药纳米粒可以为非PEG化的小分子前药纳米粒、PEG修饰的小分子前药纳米粒、包载疏水性荧光物质或药物的小分子前药纳米粒和主动靶向的小分子前药纳米粒。
(1)非PEG化的小分子前药自组装纳米粒的制备方法：将一定量的前药溶解到适量的乙醇中，搅拌下，将该乙醇溶液缓缓滴加到水中，前药自发形成均匀的纳米粒。
(2)PEG修饰的小分子前药自组装纳米粒的制备方法：将一定量的TPGS2k和前药溶解到适量的乙醇中，搅拌下，将该乙醇溶液缓缓滴加到水中，前药自发形成均匀的纳米粒。
(3)包载疏水性荧光物质或药物的小分子前药自组装纳米粒的制备方法：将一定量的TPGS2k、香豆素-6或DiR以及前药溶解到适量的乙醇中，搅拌下，将该乙醇溶液缓缓滴加到水中，前药自发形成均匀的纳米粒。
(4)主动靶向的小分子前药自组装纳米粒的制备方法：将一定量的TPGS2k、DSPE-PEG-AA以及前药溶解到适量的乙醇中，搅拌下，将该乙醇溶液缓缓滴加到水中，前药自发形成均匀的纳米粒。
本发明的脂肪酸-紫杉醇小分子前药首次被发现可以自组装形成均匀的纳米体系。该纳米药物传递系统的优势在于：(1)采用一步纳米沉淀的方法，制备工艺简单，易于产业化；(2)粒径小且均一(～100nm)，有利于纳米粒通过EPR效应富集于肿瘤部位；(3)超高的载药量，有利于减小因辅料和生物材料而引发的不良反应；(4)易于表面修饰，可通过PEG和主动靶向修饰以有效避免网状内皮系统摄取和提高肿瘤细胞对纳米粒的摄取；(5)通过链接臂对肿瘤部位细胞内环境的敏感性，实现紫杉醇在肿瘤细胞内的特异性释药，提高疗效的同时降低毒副作用。
本发明具有以下有益效果：1.设计合成了一系列新的紫杉醇-油酸小分子前药，合成方法简单易行；2.通过设计和对比不同化学连接臂，能有效促进紫杉醇在肿瘤细胞内从前药中快速被水解释放出来；3.制备了均匀的小分子前药自组装纳米粒，制备方法简单易行，稳定性好，载药量高；4.PEG修饰的小分子前药自组装纳米粒能有效延长药物在血液中的循环时间；5.所制备的小分子前药自组装纳米粒具有良好的抗肿瘤效果。
附图说明
图1为本发明实施例1的酯键相连的紫杉醇-油酸前药(PTX-OA)的1HNMR谱图。
图2为本发明实施例2的单硫醚键相连的紫杉醇-油酸前药(PTX-S-OA)的1HNMR谱图。
图3为本发明实施例3的间隔二硫醚键相连的紫杉醇-油酸前药(PTX-2S-OA)的1HNMR谱图。
图4为本发明实施例4的二硫键相连的紫杉醇-油酸前药(PTX-S-S-OA)的1HNMR谱图。
图5为本发明实施例6的PEG修饰的小分子前药自组装纳米粒的透射电子显微镜图。
图6为本发明实施例9的PEG修饰的小分子前药自组装纳米粒的粒径-存储时间图。
图7为本发明实施例10的PEG修饰的小分子前药自组装纳米粒的体外释放试验图。
图8为本发明实施例11的PEG修饰的小分子前药自组装纳米粒的细胞毒性图。
图9为本发明实施例12的PEG修饰的小分子前药自组装纳米粒的细胞摄取图。
图10为本发明实施例13的小分子前药自组装纳米粒的血药浓度-时间曲线图。
图11为本发明实施例14的PEG化的小分子前药自组装纳米粒的组织分布图。
图12为本发明实施例15的PEG化的小分子前药自组装纳米粒的在体抗肿瘤实验肿瘤体积变化图。
图13为本发明实施例15的PEG化的小分子前药自组装纳米粒的在体抗肿瘤实验裸鼠体重变化图。
具体实施方式
下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将发明限制在所述的实施例范围之中。
实施例1：酯键相连的紫杉醇-油酸前药(PTX-OA)的合成
油酸(OA)溶于少量二氯甲烷中，在DCC和DMAP的催化作用下，在N2保护下，冰浴2-4h，然后与紫杉醇在25℃N2保护下反应24-48h，经分离纯化得到白色粉末前药。采用核磁共振测定1H-NMR氢谱来确定实施例1中前药的结构，选用的溶剂为CDCl3，结果如图1，波谱解析结果如下：
1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.13(t,2H),7.74(d,2H),7.61(m,1H),7.59(m,3H),7.42(d,4H),7.40(m,3H),6.87(d,1H,J＝9.2Hz,-NH-),6.29(t,2H,10-H,13-H),5.95(dd,1H,J＝3.2Hz,J＝6.0Hz,3'-H),5.69(d,1H,J＝7.2Hz,2-H),5.50(d,1H,J＝3.2Hz,2'-H),5.34(m,2H,-CH＝CH-),4.98(d,1H,J＝8.0Hz,5-H),4.45(t,1H,7-H),4.31(d,1H,J＝8.4Hz,20α-H),4.21(d,1H,J＝8.4Hz,20β-H),3.83(d,1H,J＝6.8Hz,3-H),2.52-2.64(m,1H,6α-H),2.46(s,3H,4-COCH 3 ),2.39(m,2H,14α-H,14β-H),2.35(t,2H,J＝7.5Hz,-CH2CO-),2.23(s,3H,10-COCH 3 ),2.00(s,4H,-CH 2 CH＝CHCH 2 -),1.95(s,3H,18-H),1.89(t,1H,6β-H),1.68(s,3H,19-H),1.58(t,2H,-CH 2 CH 2 CO-),1.23(t,23H,17-H),1.13(s,3H,16-H),0.88(t,3H,J＝6.4Hz,-CH3)。
实施例2：氧化还原双敏感的单硫醚键相连的紫杉醇-油酸前药(PTX-S-OA)的合成
将乙二醇置于50mL三颈瓶中，向茄形瓶中加入适量对甲苯磺酸，N2保护，加热到100-120℃，将用适量甲苯溶解的油酸溶液缓慢滴注到反应瓶中，反应2-4h。反应结束后，静置分层，用甲苯萃取至乙二醇层TLC无产物点，合并甲苯层，然后用饱和NaHCO3溶液洗至中性，无水硫酸钠干燥，过滤，蒸干，经分离纯化得(Z)-油酸-2-羟乙基酯。将适量的2,2'-硫代二乙酸酐和少量的三乙胺置于25mL茄形瓶中，加入10-15mLCH2Cl2，加入HOBt和EDCI，N2保护条件降温到0℃下，缓慢滴加溶解在CH2Cl2的(Z)-油酸-2-羟乙基酯，搅拌0.5-1h，室温过夜反应。反应结束后，蒸干，稀盐酸酸化，CH2Cl2萃取至水层TLC无产物点，饱和NaCl溶液洗CH2Cl2层三次，无水硫酸钠干燥，过滤，蒸干，经分离纯化得(2-氧代-2-(2-((Z)-油酰氧基)乙氧基)乙硫基)乙酸。将(2-氧代-2-(2-((Z)-油酰氧基)乙氧基)乙硫基)乙酸、EDCI、HOBt和紫杉醇置于10mL茄形瓶中，加入3-5mL CH2Cl2，N2保护条件降温到0℃下，搅拌0.5-1h，室温过夜反应。反应结束后，饱和NaCl溶液洗CH2Cl2层三次，无水硫酸钠干燥，过滤，蒸干，经分离纯化得白色固体。
采用核磁共振测定1H-NMR氢谱来确定实施例2中前药的结构，选用的溶剂为CDCl3，结果如图2，波谱解析结果如下：
1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.15(t,2H,J＝8.5Hz),7.77(q,2H,J＝7.3Hz),7.62(m,1H),7.52(m,3H),7.42(d,4H),7.40(s,1H),7.37(d,2H),6.30(s,1H,10-H),6.26(s,1H,13-H),6.06(dd,1H,J＝3.2Hz,J＝6.4Hz,3'-H),5.70(d,1H,J＝7.1Hz,2-H),5.50(d,1H,J＝3.1Hz,2'-H),5.33-5.34(m,2H,-CH＝CH-),4.79(d,1H,J＝2.4Hz,5-H),4.43(q,1H,7-H),4.30(d,1H,J＝6.0Hz,20α-H),4.26-4.29(m,4H,-OCH 2 CH 2 O-),4.25(d,1H,J＝10.8Hz,20β-H),3.83(d,1H,J＝7Hz,3-H),3.17-3.53(m,4H,-CH2-S-CH2-),2.51-2.60(m,1H,6α-H),2.48(s,3H,4-COCH 3 ),2.33(m,2H,14α-H,14β-H),2.28(t,2H,J＝7.5Hz,-CH2CO-),2.23(s,3H,10-COCH 3 ),2.01(s,H4,J＝7.5Hz,-CH 2 CH＝CHCH 2 -,CH3CN),1.95(d,3H,18-H),1.89(t,1H,6β-H),1.69(s,3H,19-H),1.62(dd,2H,J＝7.2Hz,J＝8.4Hz,-CH 2 CH 2CO-),1.26(t,25H,17-H),1.14(s,3H,16-H),0.88(t,3H,J＝6.7Hz,-CH3)。
实施例3：氧化还原双敏感的间隔二硫醚键相连的紫杉醇-油酸前药(PTX-2S-OA)的合成
将乙二醇置于50mL三颈瓶中，向茄形瓶中加入适量对甲苯磺酸，N2保护，加热到100-120℃，将用适量甲苯溶解的油酸溶液缓慢滴注到反应瓶中，反应2-4h。反应结束后，静置分层，用甲苯萃取至乙二醇层TLC无产物点，合并甲苯层，然后用饱和NaHCO3溶液洗至中性，无水硫酸钠干燥，过滤，蒸干，经分离纯化得(Z)-油酸-2-羟乙基酯。将适量的1,2-亚乙基二硫代二乙酸酐和少量的三乙胺置于25mL茄形瓶中，加入10-15mL CH2Cl2，加入HOBt和EDCI，N2保护条件降温到0℃下，缓慢滴加溶解在CH2Cl2的(Z)-油酸-2-羟乙基酯，搅拌0.5-1h，室温过夜反应。反应结束后，蒸干，稀盐酸酸化，CH2Cl2萃取至水层TLC无产物点，饱和NaCl溶液洗CH2Cl2层三次，无水硫酸钠干燥，过滤，蒸干，经分离纯化得(2-(2-氧代-2-(2-((Z)-油酰氧基)乙氧基)乙硫基)乙硫基)乙酸。将(2-(2-氧代-2-(2-((Z)-油酰氧基)乙氧基)乙硫基)乙硫基)乙酸、EDCI、HOBt和紫杉醇置于10mL茄形瓶中，加入3-5mL CH2Cl2，N2保护条件降温到0℃下，搅拌0.5-1h，室温过夜反应。反应结束后，饱和NaCl溶液洗CH2Cl2层三次，无水硫酸钠干燥，过滤，蒸干，经分离纯化得白色固体。
采用核磁共振测定1H-NMR氢谱来确定实施例3中前药的结构，选用的溶剂为CDCl3，结果如图3，波谱解析结果如下：
1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ：8.14(d,2H,J＝7.2Hz),7.74(d,2H,J＝8.5Hz),7.61(t,1H,J＝7.4Hz),7.51(q,3H),7.35-7.43(m,7H),7.08(d,1H,J＝9.2Hz,-NH-),6.30(s,1H,10-H),6.26(d,1H,J＝8.6Hz,13-H),6.02(dd,1H,J＝3.0Hz,J＝6.4Hz,3'-H),5.68(d,1H,J＝7.0Hz,2-H),5.56(d,1H,J＝3.1Hz,2'-H),5.32-5.36(m,2H,-CH＝CH-),4.99(d,1H,J＝8.0Hz,5-H),4.45(dd,1H,J＝6.5Hz,J＝4.2Hz,7-H),4.31(d,1H,J＝8.4Hz,20α-H),4.23-4.25(s,4H,-OCH 2 CH2O-),4.22(d,1H,J＝8.4Hz,20β-H),3.83(d,1H,J＝7.0Hz,3-H),3.33(s,2H,-COCH2-S-CH2CH2-S-CH 2 CO-),3.16(d,2H,J＝1.7Hz,-COCH 2 -S-CH2CH2-S-CH2CO-),2.79(d,4H,J＝4.6Hz,-S-CH 2 CH2-S-),2.52-2.60(m,1H,6α-H),2.46(s,3H,4-COCH 3 ),2.38(q,1H,14α-H),2.31(t,2H,J＝7.3Hz,-CH 2 CO-),2.23(s,3H,10-COCH 3 ),2.00(m,4H,-CH 2 CH＝CHCH 2 -),1.94(s,3H,18-H),1.89(t,1H,6β-H),1.94(s,6H,19-H),1.60(t,4H,-CH 2 CH2CO-),1.24-1.29(m,25H,17-H),1.14(s,3H,16-H),0.88(t,3H,J＝6.8Hz,-CH3)。
实施例4：还原敏感的二硫键键相连的紫杉醇-油酸前药(PTX-S-S-OA)的合成
将乙二醇置于50mL三颈瓶中，向茄形瓶中加入适量对甲苯磺酸，N2保护，加热到100-120℃，将用适量甲苯溶解的油酸溶液缓慢滴注到反应瓶中，反应2-4h。反应结束后，静置分层，用甲苯萃取至乙二醇层TLC无产物点，合并甲苯层，然后用饱和NaHCO3溶液洗至中性，无水硫酸钠干燥，过滤，蒸干，经分离纯化得(Z)-油酸-2-羟乙基酯。将适量的2,2'-二硫代二乙酸酐置于25mL茄形瓶中，加入10-15mL CH2Cl2，加入HOBt、EDCI和DMAP作为催化剂，N2保护条件降温到0℃下，缓慢滴加用CH2Cl2溶解的(Z)-油酸-2-羟乙基酯，搅拌0.5-1h，室温过夜反应。反应结束后，蒸干，稀盐酸酸化，CH2Cl2萃取，饱和NaCl溶液洗CH2Cl2层三次，无水硫酸钠干燥，过滤，蒸干，经分离纯化得(2-氧代-2-(2-((Z)-油酰氧基)乙氧基)乙二硫基)乙酸。将(2-氧代-2-(2-((Z)-油酰氧基)乙氧基)乙二硫基)乙酸、EDCI、HOBt和紫杉醇置于10mL茄形瓶中，加入3-5mL CH2Cl2，N2保护条件降温到0℃下，搅拌0.5-1h，室温过夜反应。反应结束后，饱和NaCl溶液洗CH2Cl2层三次，无水硫酸钠干燥，过滤，蒸干，经分离纯化得白色固体。
采用核磁共振测定1H-NMR氢谱来确定实施例4中前药的结构，选用的溶剂为CDCl3，结果如图4，波谱解析结果如下：
1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ：8.14(d,2H,J＝7.2Hz),7.76(d,2H,J＝8.8Hz),7.62(m,1H),7.52(m,3H),7.33-7.43(m,7H),6.99(s,1H,-NH-),6.30(s,1H,10-H),6.25(m,1H,13-H),6.02(d,1H,J＝8.4Hz,3'-H),5.69(d,1H,J＝7.2Hz,2-H),5.52(s,1H,2'-H),5.34(s,2H,-CH＝CH-),4.96(d,1H,J＝9.6Hz,5-H),4.44(q,1H,7-H),4.31(d,1H,J＝8.8Hz,20α-H),4.27(d,4H,J＝6.4Hz,-OCH 2CH2O-),4.22(d,1H,J＝9.2Hz,20β-H),3.82(d,1H,J＝7.6Hz,3-H),3.65(s,2H,-S-SCH 2 CO-PTX),3.49(s,2H,-COCH 2-S-S-CH 2CO-PTX),2.56(m,1H,6α-H),2.45(s,3H,4-COCH 3 ),2.30(t,2H,J＝6.4Hz,-CH 2CO-),2.17(s,3H,10-COCH 3 ),2.01(d,4H,-CH 2CH＝CHCH 2 -),1.94(s,3H,18-H),1.69(s,3H,19-H),1.55(s,26H,-CH 2 CH 2 CO-,H2O),1.26(d,23H,17-H),1.14(s,3H,16-H),0.88(s,3H,-CH3)。
实施例5：非PEG化的小分子前药自组装纳米粒的制备
精密称取前药8mg，用1mL乙醇将其溶解，搅拌下，将该乙醇溶液缓缓滴加到4mL去离子水中，自发形成均匀的纳米粒(PTX-OA纳米粒,PTX-S-OA纳米粒,PTX-2S-OA纳米粒,PTX-S-S-OA纳米粒)。
实施例6：PEG修饰的小分子前药自组装纳米粒的制备
精密称取TPGS2k 1.4mg和前药8mg，用1mL乙醇将其溶解，搅拌下，将该乙醇溶液缓缓滴加到4mL去离子水中，自发形成均匀的纳米粒(PTX-OA/TPGS2k纳米粒,PTX-S-OA/TPGS2k纳米粒,PTX-2S-OA/TPGS2k纳米粒,PTX-S-S-OA/TPGS2k纳米粒)。
通过透射电子显微镜测定实施例6中制备的小分子前药自组装纳米粒的粒径和形态，结果如图5，透射电镜图表明载药纳米粒为均一的球形，粒径在100nm左右。
实施例7：包载香豆素-6或DiR的小分子前药自组装纳米粒的制备
精密称取TPGS2k 1.4mg、香豆素-6 0.8μg或DiR 0.8mg和前药8mg，用1mL乙醇将其溶解，搅拌下，将该乙醇溶液缓缓滴加到4mL去离子水中，自发形成均匀的纳米粒。
实施例8：主动靶向的小分子前药自组装纳米粒的制备
精密称取TPGS2k 0.7mg、DSPE-PEG-AA 0.7mg和前药8mg，用1mL乙醇将其溶解，搅拌下，将该乙醇溶液缓缓滴加到4mL去离子水中，自发形成均匀的纳米粒。
实施例9：PEG修饰的小分子前药自组装纳米粒的胶体稳定性试验
将实施例6中制备的PEG修饰的小分子前药自组装纳米粒PTX-OA/TPGS2k纳米粒,PTX-S-OA/TPGS2k纳米粒,PTX-2S-OA/TPGS2k纳米粒,和PTX-S-S-OA/TPGS2k纳米粒(2.0mg/mL)在4℃条件下储存3个月。在此期间，通过动态光散射测定其粒径变化。结果如图6所示，PEG修饰的小分子前药自组装纳米粒在三个月内粒径无明显变化，显示出良好的长期储存稳定性。
实施例10：PEG修饰的小分子前药自组装纳米粒的体外释放试验
以含乙醇的pH 7.4磷酸盐缓冲液为释放介质，考察PEG修饰的小分子前药自组装纳米粒的体外释放情况。将实施例6中制备的PEG修饰的小分子前药自组装纳米粒(紫杉醇含量为200mg)加入到30mL释放介质中，在37℃条件下，于设定的时间点取样，通过高效液相色谱测定紫杉醇浓度。向释放介质中加入一定浓度的双氧水(H2O2)或二硫苏糖醇(DTT)，以分别考察纳米粒在氧化条件和还原条件下的释放情况。
结果如图7所示，酯键相连的紫杉醇-油酸前药(PTX-OA)具有极高的稳定性，无论是否存在H2O2和DTT，PTX-OA/TPGS2k纳米粒几乎不发生水解，PTX很难从前药上释放出来。相比之下，PTX-S-OA，PTX-2S-OA和PTX-S-S-OA具有一定程度的氧化或还原敏感性。当释放介质中含有一定浓度的DTT时，PTX-S-S-OA/TPGS2k纳米粒在2小时内释放了超过90％的PTX，PTX-S-OA/TPGS2k纳米粒在48小时内释放了50％的PTX，PTX-2S-OA/TPGS2k纳米粒在48小时之内只释放了26％的PTX。各前药还原敏感性：PTX-S-S-OA>PTX-S-OA>PTX-2S-OA>PTX-OA。同时，PTX-S-OA，PTX-2S-OA还具有一定程度的氧化敏感性。当释放介质中含有一定浓度的H2O2时，PTX-S-OA在6小时内释放了超过90％的PTX，PTX-2S-OA/TPGS2k纳米粒在12小时释放出46％的PTX。实验结果表明本发明设计的系列紫杉醇-油酸小分子前药具有氧化还原敏感释药的特性，能对肿瘤部位特异的氧化还原环境作出响应，实现肿瘤部位特异性释药，有望提高紫杉醇的抗肿瘤效果并降低对机体的毒副作用。
实施例11：PEG修饰的小分子前药自组装纳米粒的细胞毒性
采用MTT法考察PEG修饰的小分子前药自组装纳米粒对人鳞状上皮癌细胞(KB-3-1)，人大细胞肺癌细胞(H460)和人卵巢癌细胞(OVCAR-8)的细胞毒性。将状态良好的细胞消化，用培养液稀释至5000cells/mL细胞密度，吹匀后于96孔板中每孔加入细胞悬液100μL，置培养箱中孵育24h使其贴壁。待细胞贴壁后加泰素或实施例6中制备的PTX-S-OA/TPGS2k纳米粒,PTX-2S-OA/TPGS2k纳米粒，PTX-S-S-OA/TPGS2k纳米粒和PTX-OA/TPGS2k纳米粒。本实验中药物溶液与纳米粒制剂的配制和稀释均用1640培养液，并用0.22μm滤膜无菌过滤。受试溶液每孔加入100μL，每个浓度3个平行孔。对照组，即不加待测药液，单一补加100μL培养液，置培养箱中和细胞共同孵育。于加药后48和72h，将96孔板取出，每孔加入5mg/mL MTT溶液20μL，置培养箱中孵育4h后甩板，将96孔板倒扣于滤纸上充分吸干残留液体后，每孔加入200μL DMSO于振荡器上振荡10min以溶解蓝紫色结晶物。设定A1孔(只含有200μL DMSO)为调零孔。使用酶标仪在570nm处测定各孔调零后的吸光度值。
MTT结果如图8所示，与泰素相比，小分子前药自组装纳米粒的体外细胞毒性均存在一定程度的降低。不同小分子前药自组装纳米粒毒性大小为PTX-S-S-OA/TPGS2k纳米粒>PTX-S-OA/TPGS2k纳米粒>PTX-2S-OA/TPGS2k纳米粒>PTX-OA/TPGS2k纳米粒。PTX-OA/TPGS2k纳米粒几乎没有细胞毒性。实验结果表明，前药的细胞毒性与PTX从前药中的释药的难易程度相关，连接臂对肿瘤部位氧化还原环境的敏感程度越高，紫杉醇越容易从前药中释放出来，细胞毒性就越大。本发明设计的系列紫杉醇-油酸小分子前药能对肿瘤部位特异的氧化还原环境作出响应，实现肿瘤部位特异性释药，提高紫杉醇的抗肿瘤效果并降低对机体的毒副作用。
实施例12：PEG修饰的小分子前药自组装纳米粒的细胞摄取
采用流式细胞仪测定PEG修饰的小分子前药自组装纳米粒在鳞状上皮癌细胞(KB-3-1)摄取情况。将KB-3-1细胞以5000 cells/mL的密度接种到12孔板上，置培养箱中孵育24h使其贴壁。待细胞贴壁后加香豆素-6溶液或实施例7中制备的香豆素-6-PTX-S-OA/TPGS2k纳米粒,香豆素-6-PTX-2S-OA/TPGS2k纳米粒，香豆素-6-PTX-S-S-OA/TPGS2k纳米粒和香豆素-6-PTX-OA/TPGS2k纳米粒)。本实验中药物溶液与纳米粒制剂的配制和稀释均用1640培养液，并用0.22μm的滤膜无菌过滤，香豆素-6的浓度为200ng/mL。在37℃孵化0.5h或2h后，将细胞清洗，收集并分散在PBS中，用流式细胞仪考察细胞对香豆素-6的摄取情况。
结果如图9所示，香豆素-6溶液和香豆素-6标记的纳米粒的细胞摄取都具有时间依赖性，随着孵化时间的延长，细胞摄取量明显增加。同时，相对于香豆素-6溶液，香豆素-6标记的纳米粒具有更高的荧光强度，说明纳米粒能显著增加细胞对药物的摄取。此外，不同纳米粒之间也存在摄取差异：PTX-S-S-OA/TPGS2k纳米粒>PTX-S-OA/TPGS2k纳米粒>PTX-2S-OA/TPGS2k纳米粒>PTX-OA/TPGS2k纳米粒。PTX-S-S-OA/TPGS2k纳米粒的体外释药速率最快，同时又具有最高的细胞摄取，表明从纳米粒中水解释放出的PTX会影响细胞的状态，增加细胞对纳米粒的吸收。
实施例13：小分子前药自组装纳米粒的药代动力学研究
取54只健康、雄性大鼠，体重200-250g，随机分为9组，给药前禁食12h，自由饮水。分别静脉注射紫杉醇溶液剂(泰素),实施例5中制备的非PEG化的小分子前药自组装纳米粒(PTX-2S-OA纳米粒，PTX-S-OA纳米粒，PTX-S-S-OA纳米粒，PTX-OA纳米粒)和实施例6中制备的PEG修饰的小分子前药自组装纳米粒(PTX-2S-OA/TPGS2k纳米粒,PTX-OA/TPGS2k纳米粒,PTX-S-S-OA/TPGS2k纳米粒,PTX-S-OA/TPGS2k纳米粒)。紫杉醇的剂量为5mg/kg。于规定的时间点眼眶取血，分离获得血浆。通过液相色谱-质谱联用仪测定血浆中的药物浓度。
结果如图10，非PEG化的小分子前药自组装纳米粒体循环时间非常短，生物利用度非常低。可能是因为非PEG化的小分子前药自组装纳米粒稳定性差，且表面疏水，易被网状内皮系统吞噬。相比之下，PEG化的小分子前药自组装纳米粒循环时间明显延长，生物利用度明显提高。其中，由于PTX-OA前药的高度稳定性，PTX-OA/TPGS2k纳米粒的生物利用度最高。不同PEG化的小分子前药自组装纳米粒生物利用度的大小为：PTX-OA/TPGS2k纳米粒>PTX-2S-OA/TPGS2k纳米粒>PTX-S-OA/TPGS2k纳米粒>PTX-S-S-OA/TPGS2k纳米粒。实验结果表明，PEG化的小分子前药自组装纳米粒能显著延长紫杉醇在血液中的循环时间。
实施例14：小分子前药自组装纳米粒的组织分布实验
将人口腔上皮癌细胞悬液(KB-3-1)接种于裸鼠，当肿瘤体积达到500mm3时，尾静脉注射给药：DiR溶液和实施例7中制备的DiR-PTX-OA/TPGS2k纳米粒,DiR-PTX-S-OA/TPGS2k纳米粒，DiR-PTX-2S-OA/TPGS2k纳米粒和DiR-PTX-S-S-OA/TPGS2k纳米粒。DiR的给药剂量为1mg/kg。4小时或24小时后，将裸鼠处死，分离出主要器官(心，肝，脾，肺，肾)和肿瘤，用活体成像仪进行分析。
结果如图11所示，与DiR溶液组相比，PEG化的小分子前药自组装纳米粒组在肿瘤组织的荧光强度显著增加。同时，DiR溶液组中荧光主要分布在肺部，在肿瘤组织中几乎没有分布。相比之下，PEG化的小分子前药自组装纳米粒主要分布在肝脏和肿瘤组织。说明PEG化的小分子前药自组装纳米粒能增加药物在肿瘤部位的积蓄，减少药物在非肿瘤部位的分布，在提高药效的同时降低紫杉醇对机体的毒副作用。
实施例15：PEG化的小分子前药自组装纳米粒的在体抗肿瘤实验
将人鳞状上皮癌细胞悬液(KB-3-1,1x106cells/100μL)接种于雌性裸鼠腹侧皮下。待肿瘤体积生长至100-120mm3，将荷瘤小鼠随机分为六组，每组五只:空白对照组(PBS),泰素组,PTX-OA/TPGS2k纳米粒组,PTX-2S-OA/TPGS2k纳米粒组，PTX-S-OA/TPGS2k纳米粒组和PTX-S-S-OA/TPGS2k纳米粒组。给药所用的纳米粒为实施例6中制备的PEG修饰的小分子前药自组装纳米粒。每隔1d给药1次，连续给药5次，按紫杉醇计算，给药剂量为8mg/kg。给药后，每天观察小鼠的存活状态，称体重，测量肿瘤体积。最后一次给药后一天将裸鼠处死，获取器官和肿瘤，进行进一步分析评价。
结果如图12所示，在空白对照组和PTX-OA/TPGS2k纳米粒组中，肿瘤体积迅速增长，在第10天达到1100-1300mm3。相比之下，PTX-2S-OA/TPGS2k纳米粒和泰素能延缓肿瘤生长，而PTX-S-OA/TPGS2k纳米粒和PTX-S-S-OA/TPGS2k纳米粒组则能明显抑制肿瘤生长。给药10天以后，PTX-S-OA/TPGS2k纳米粒组的肿瘤体积仅为150mm3左右，而PTX-S-S-OA/TPGS2k纳米粒的肿瘤几乎全部看不见了。抗肿瘤效果与体外释放结果和细胞毒性结果保持一致，连接臂对肿瘤部位氧化还原条件的敏感程度越高，紫杉醇越容易实现肿瘤部位特异性释药，相应的抗肿瘤效果越好。
如图13所示，各组裸鼠体重没有明显变化。结果说明这些PEG化的小分子前药自组装纳米粒在具有明显的抗肿瘤效果的同时，没有对机体造成显著的非特异性毒性，是安全有效的抗癌药物传递系统。

Claims (11)

1.紫杉醇-油酸小分子前药，其特征在于，紫杉醇和油酸直接通过酯键相连，或通过肿瘤环境敏感键相连，包括(a)酯键、(b)氧化还原双敏感的单硫醚键、(c)氧化还原双敏感的间隔二硫醚键以及(d)还原敏感的二硫键，其结构式为：
2.根据权利要求1所述的紫杉醇-油酸小分子前药，其特征在于，所述的紫杉醇可以为紫衫烷类化合物。
3.根据权利要求1所述的紫杉醇-油酸小分子前药，其特征在于，油酸可以用硬脂酸、反式油酸、亚油酸、α-亚麻酸、γ-亚麻酸、二十二碳六烯酸、花生四烯酸替换。
4.根据权利要求1所述的紫杉醇-油酸小分子前药，其特征在于，所述的肿瘤环境敏感键为pH敏感键或还原环境敏感键，所述的pH敏感键为腙键、碳酸酯键，所述的还原环境敏感键为单硫醚键、二硫醚键、二硫键或金属蛋白酶敏感键。
5.如权利要求1所述的紫杉醇-油酸小分子前药的合成方法，其特征在于，采用如下步骤制备：
(1)酯键相连的紫杉醇-油酸前药的合成：油酸在DCC和DMAP的催化下，与紫杉醇在N2保护下反应，分离纯化即得；
(2)氧化还原双敏感的单硫醚键相连的紫杉醇-油酸前药的合成：油酸在对甲苯磺酸催化下，与乙二醇反应，得油酸-乙二醇酯，油酸-乙二醇酯在HOBt和EDCI的催化下，与2,2’-硫代二乙酸酐反应，得(2-氧代-2-(2-((Z)-油酰氧基)乙氧基)乙硫基)乙酸，(2-氧代-2-(2-((Z)-油酰氧基)乙氧基)乙硫基)乙酸在HOBt和EDCI的催化下，与紫杉醇反应，分离纯化即得，反应全程都在N2保护下进行；
(3)氧化还原双敏感的间隔二硫醚键相连的紫杉醇-油酸前药的合成：油酸在对甲苯磺酸催化下，与乙二醇反应，得油酸-乙二醇酯，油酸-乙二醇酯在HOBt和EDCI的催化下，与1,2-亚乙基二硫代二乙酸酐反应，得(2-(2-氧代-2-(2-((Z)-油酰氧基)乙氧基)乙硫基)乙硫基)乙酸，(2-(2-氧代-2-(2-((Z)-油酰氧基)乙氧基)乙硫基)乙硫基)乙酸在HOBt和EDCI的催化下，与紫杉醇反应，分离纯化即得，反应全程都在N2保护下进行；
(4)还原敏感的二硫键相连的紫杉醇-油酸前药的合成：油酸在对甲苯磺酸催化下，与乙二醇反应，得油酸-乙二醇酯，油酸-乙二醇酯在HOBt、EDCI和DMAP的催化下，与2,2'-二硫代二乙酸酐反应，得(2-氧代-2-(2-((Z)-油酰氧基)乙氧基)乙二硫基)乙酸，(2-氧代-2-(2-((Z)-油酰氧基)乙氧基)乙二硫基)乙酸在HOBt和EDCI的催化下，与紫杉醇反应，分离纯化即得，反应全程都在N2保护下进行。
6.紫杉醇-油酸小分子前药自组装纳米粒，其特征在于，所述的紫杉醇-油酸小分子前药在水中自组装形成前药纳米粒，其制备过程如下：
将一定量的紫杉醇-油酸小分子前药溶解到适量的乙醇中，搅拌下，将该乙醇溶液缓缓滴加到水中，前药自发形成均匀的纳米粒。
7.根据权利要求6所述的小分子前药自组装纳米粒，其特征在于，所述的紫杉醇-油酸小分子前药纳米粒为非PEG化的小分子前药纳米粒、PEG修饰的小分子前药纳米粒、包载或药物的小分子前药纳米粒和主动靶向的小分子前药纳米粒。
8.根据权利要求7所述的小分子前药自组装纳米粒，其特征在于，所述的PEG为TPGS2k、DSPE-PEG和PEG-PE，所述的疏水性荧光物质为香豆素-6、罗丹明、DiR、DiI、Cy-5和Cy-7。
9.权利要求1-5任何一项所述的紫杉醇-油酸小分子前药或权利要求6-8任何一项所述的小分子前药自组装纳米粒在药物传递系统中的应用。
10.权利要求1-5任何一项所述的紫杉醇-油酸小分子前药或权利要求6-8任何一项所述的小分子前药自组装纳米粒在制备抗肿瘤药物中的应用。
11.权利要求1-5任何一项所述的紫杉醇-油酸小分子前药或权利要求6-8任何一项所述的小分子前药自组装纳米粒在注射给药、口服给药或局部给药药物中的应用。
CN201610206408.3A 2016-03-31 2016-03-31 紫杉醇-油酸小分子前药自组装纳米粒的构建 Active CN105833284B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610206408.3A CN105833284B (zh) 2016-03-31 2016-03-31 紫杉醇-油酸小分子前药自组装纳米粒的构建

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610206408.3A CN105833284B (zh) 2016-03-31 2016-03-31 紫杉醇-油酸小分子前药自组装纳米粒的构建

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN105833284A true CN105833284A (zh) 2016-08-10
CN105833284B CN105833284B (zh) 2019-04-02

Family

ID=56596689

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610206408.3A Active CN105833284B (zh) 2016-03-31 2016-03-31 紫杉醇-油酸小分子前药自组装纳米粒的构建

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN105833284B (zh)

Cited By (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108245683A (zh) * 2018-01-26 2018-07-06 华中科技大学 一种具有p-糖蛋白抑制功能的抗肿瘤前药及制备方法
CN108440740A (zh) * 2018-02-14 2018-08-24 苏州大学 一种可逆自修复环氧树脂及其制备与回收重塑方法
CN108478794A (zh) * 2018-03-29 2018-09-04 沈阳药科大学 光敏剂-化疗药“光化一体”小分子前药及其自组装纳米粒的构建
CN108478803A (zh) * 2018-04-08 2018-09-04 沈阳药科大学 氧化还原超敏感二硫键桥连前药自组装纳米粒的构建
CN109350748A (zh) * 2018-10-24 2019-02-19 沈阳药科大学 氧化还原双敏感键桥连小分子前药及其自组装纳米粒
CN110101872A (zh) * 2019-06-13 2019-08-09 成都大学 一种还原敏感性纳米胶束及其制备方法及应用
WO2019165583A1 (zh) * 2018-02-27 2019-09-06 苏州大学张家港工业技术研究院 一种可逆自修复环氧树脂及其制备与回收重塑方法
CN111484501A (zh) * 2020-04-22 2020-08-04 沈阳药科大学 羟基喜树碱亚油酸酯小分子前药及其自组装纳米粒的构建
CN111662251A (zh) * 2019-03-05 2020-09-15 国家纳米科学中心 一种紫杉醇前药及其制备方法和应用
CN112089845A (zh) * 2019-06-17 2020-12-18 沈阳药科大学 紫杉烷类药物-阿霉素前药自组装纳米粒及其应用
CN112494458A (zh) * 2020-12-15 2021-03-16 沈阳药科大学 类甘油三酯前药静注自组装纳米粒的构建
CN112604002A (zh) * 2020-07-12 2021-04-06 苏州裕泰医药科技有限公司 二硫键桥连的多西他赛-脂肪酸前药及其自组装纳米粒
CN112999152A (zh) * 2021-02-26 2021-06-22 遵义医科大学附属医院 一种基于gebp11修饰的靶向聚合物胶束及其制备方法与应用
CN113018267A (zh) * 2021-03-22 2021-06-25 沈阳药科大学 不饱和脂肪酸-光敏剂共组装纳米粒及其构建方法和应用
CN113262203A (zh) * 2021-06-02 2021-08-17 郑州大学 一种抗阿尔茨海默症的自组装纳米药物脂质体的制备方法及其应用
CN113713117A (zh) * 2021-09-10 2021-11-30 山东大学 一种白蛋白结合型肿瘤环境响应型抗肿瘤前体药物及其制备方法和应用
CN114129735A (zh) * 2020-09-03 2022-03-04 苏州裕泰医药科技有限公司 卡巴他赛-脂肪酸偶联物及其纳米制剂
CN114605357A (zh) * 2020-12-04 2022-06-10 杭州中美华东制药有限公司 一种紫杉醇-油酸小分子的分离纯化方法
CN115252800A (zh) * 2021-04-29 2022-11-01 苏州裕泰医药科技有限公司 淋巴介导转运的紫杉醇类甘油三酯前药及脂质制剂
CN115624631A (zh) * 2021-12-14 2023-01-20 盐城工学院 一种蟾毒灵前药自组装纳米粒及其制备方法与应用
CN116514743A (zh) * 2022-01-20 2023-08-01 沈阳药科大学 紫杉醇-脂肪酸前药及自微乳制剂及其制备方法和应用

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20040230183A1 (en) * 2003-02-18 2004-11-18 Wisam Breegi Drug delivery device and syringe for filling the same
CN1629150A (zh) * 2004-10-26 2005-06-22 中国科学院长春应用化学研究所 可生物降解聚合物的紫杉醇前药及其合成方法
CN1931156A (zh) * 2005-09-14 2007-03-21 中国科学院上海药物研究所 紫杉醇类物质固体脂质纳米粒及其制备方法
US8314077B2 (en) * 1996-05-22 2012-11-20 Luitpold Pharmaceuticals, Inc. Fatty acid-pharmaceutical agent conjugates
CN103861116A (zh) * 2014-03-06 2014-06-18 沈阳药大制剂新技术有限公司 一种抗肿瘤药物的前体药物及其制备和应用

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8314077B2 (en) * 1996-05-22 2012-11-20 Luitpold Pharmaceuticals, Inc. Fatty acid-pharmaceutical agent conjugates
US20040230183A1 (en) * 2003-02-18 2004-11-18 Wisam Breegi Drug delivery device and syringe for filling the same
CN1629150A (zh) * 2004-10-26 2005-06-22 中国科学院长春应用化学研究所 可生物降解聚合物的紫杉醇前药及其合成方法
CN1931156A (zh) * 2005-09-14 2007-03-21 中国科学院上海药物研究所 紫杉醇类物质固体脂质纳米粒及其制备方法
CN103861116A (zh) * 2014-03-06 2014-06-18 沈阳药大制剂新技术有限公司 一种抗肿瘤药物的前体药物及其制备和应用

Non-Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
B.B. LUNDBERG等: "A lipophilic paclitaxel derivative incorporated in a lipid emulsion for parenteral administration", 《JOURNAL OF CONTROLLED RELEASE》 *
DEBORA G. RODRIGUES等: "Improvement of paclitaxel therapeutic index by derivatization and association to a cholesterol-rich microemulsion: in vitro and in vivo studies", 《CANCER CHEMOTHER PHARMACOL》 *
JING LI等: "Redox-sensitive micelles self-assembled from amphiphilic hyaluronic acid deoxycholic acid conjugates for targeted intracellular delivery of paclitaxel", 《BIOMATERIALS》 *
KANWALDEEP K. GILL等: "Mixed micelles of PEG2000-DSPE and vitamin-E TPGS for concurrent delivery of paclitaxel and parthenolide: Enhanced chemosenstization and antitumor efficacy against non-small cell lung cancer (NSCLC) cell lines", 《EUROPEAN JOURNAL OF PHARMACEUTICAL SCIENCES》 *
XI-YU KE等: "The therapeutic efficacy of conjugated linoleic acid-Paclitaxel on glioma in the rat", 《BIOMATERIALS》 *
单玲玲等: "紫杉醇前药的合成及其对肿瘤细胞活性抑制的研究", 《宿州学院学报》 *
郑虎: "《药物化学》", 30 May 2008 *

Cited By (32)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108245683B (zh) * 2018-01-26 2020-02-14 华中科技大学 一种具有p-糖蛋白抑制功能的抗肿瘤前药及制备方法
CN108245683A (zh) * 2018-01-26 2018-07-06 华中科技大学 一种具有p-糖蛋白抑制功能的抗肿瘤前药及制备方法
CN108440740A (zh) * 2018-02-14 2018-08-24 苏州大学 一种可逆自修复环氧树脂及其制备与回收重塑方法
CN108440740B (zh) * 2018-02-14 2020-05-05 苏州大学 一种可逆自修复环氧树脂及其制备与回收重塑方法
US11193000B2 (en) 2018-02-27 2021-12-07 Soochow University Reversible self-repairing epoxy resin and preparation and recovery remoulding method therefor
WO2019165583A1 (zh) * 2018-02-27 2019-09-06 苏州大学张家港工业技术研究院 一种可逆自修复环氧树脂及其制备与回收重塑方法
CN108478794A (zh) * 2018-03-29 2018-09-04 沈阳药科大学 光敏剂-化疗药“光化一体”小分子前药及其自组装纳米粒的构建
CN108478803A (zh) * 2018-04-08 2018-09-04 沈阳药科大学 氧化还原超敏感二硫键桥连前药自组装纳米粒的构建
CN109350748A (zh) * 2018-10-24 2019-02-19 沈阳药科大学 氧化还原双敏感键桥连小分子前药及其自组装纳米粒
CN111662251A (zh) * 2019-03-05 2020-09-15 国家纳米科学中心 一种紫杉醇前药及其制备方法和应用
CN110101872A (zh) * 2019-06-13 2019-08-09 成都大学 一种还原敏感性纳米胶束及其制备方法及应用
CN110101872B (zh) * 2019-06-13 2022-12-27 成都大学 一种还原敏感性纳米胶束及其制备方法及应用
CN112089845B (zh) * 2019-06-17 2022-11-18 沈阳药科大学 紫杉烷类药物-阿霉素前药自组装纳米粒及其应用
CN112089845A (zh) * 2019-06-17 2020-12-18 沈阳药科大学 紫杉烷类药物-阿霉素前药自组装纳米粒及其应用
CN111484501A (zh) * 2020-04-22 2020-08-04 沈阳药科大学 羟基喜树碱亚油酸酯小分子前药及其自组装纳米粒的构建
CN112604002A (zh) * 2020-07-12 2021-04-06 苏州裕泰医药科技有限公司 二硫键桥连的多西他赛-脂肪酸前药及其自组装纳米粒
CN114129735A (zh) * 2020-09-03 2022-03-04 苏州裕泰医药科技有限公司 卡巴他赛-脂肪酸偶联物及其纳米制剂
CN114605357B (zh) * 2020-12-04 2024-07-30 杭州中美华东制药有限公司 一种紫杉醇-油酸小分子的分离纯化方法
CN114605357A (zh) * 2020-12-04 2022-06-10 杭州中美华东制药有限公司 一种紫杉醇-油酸小分子的分离纯化方法
CN112494458A (zh) * 2020-12-15 2021-03-16 沈阳药科大学 类甘油三酯前药静注自组装纳米粒的构建
CN112494458B (zh) * 2020-12-15 2022-11-25 沈阳药科大学 类甘油三酯前药静注自组装纳米粒的构建
CN112999152A (zh) * 2021-02-26 2021-06-22 遵义医科大学附属医院 一种基于gebp11修饰的靶向聚合物胶束及其制备方法与应用
CN112999152B (zh) * 2021-02-26 2023-04-07 遵义医科大学附属医院 一种基于gebp11修饰的靶向聚合物胶束及其制备方法与应用
CN113018267B (zh) * 2021-03-22 2022-07-01 沈阳药科大学 不饱和脂肪酸-光敏剂共组装纳米粒及其构建方法和应用
CN113018267A (zh) * 2021-03-22 2021-06-25 沈阳药科大学 不饱和脂肪酸-光敏剂共组装纳米粒及其构建方法和应用
CN115252800A (zh) * 2021-04-29 2022-11-01 苏州裕泰医药科技有限公司 淋巴介导转运的紫杉醇类甘油三酯前药及脂质制剂
CN113262203B (zh) * 2021-06-02 2022-11-11 郑州大学 一种抗阿尔茨海默症的自组装纳米药物脂质体的制备方法及其应用
CN113262203A (zh) * 2021-06-02 2021-08-17 郑州大学 一种抗阿尔茨海默症的自组装纳米药物脂质体的制备方法及其应用
CN113713117A (zh) * 2021-09-10 2021-11-30 山东大学 一种白蛋白结合型肿瘤环境响应型抗肿瘤前体药物及其制备方法和应用
CN113713117B (zh) * 2021-09-10 2024-01-19 山东大学 一种白蛋白结合型肿瘤环境响应型抗肿瘤前体药物及其制备方法和应用
CN115624631A (zh) * 2021-12-14 2023-01-20 盐城工学院 一种蟾毒灵前药自组装纳米粒及其制备方法与应用
CN116514743A (zh) * 2022-01-20 2023-08-01 沈阳药科大学 紫杉醇-脂肪酸前药及自微乳制剂及其制备方法和应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN105833284B (zh) 2019-04-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN105833284A (zh) 紫杉醇-油酸小分子前药自组装纳米粒的构建
CN109350748B (zh) 氧化还原双敏感键桥连小分子前药及其自组装纳米粒
CN108478803A (zh) 氧化还原超敏感二硫键桥连前药自组装纳米粒的构建
CN111494640B (zh) 氧化还原双敏感三硫键桥连二聚体前药及其自组装纳米粒
CN112494458B (zh) 类甘油三酯前药静注自组装纳米粒的构建
CN111484501A (zh) 羟基喜树碱亚油酸酯小分子前药及其自组装纳米粒的构建
CN112604002A (zh) 二硫键桥连的多西他赛-脂肪酸前药及其自组装纳米粒
CN112089845B (zh) 紫杉烷类药物-阿霉素前药自组装纳米粒及其应用
CN110408047B (zh) 纳米配位聚合物及其制备方法和应用
CN107936058B (zh) 多西紫杉醇衍生物及其制备方法和应用
CN109821024A (zh) Ros产生剂和氧化响应抗肿瘤前药共载胶束及其应用
CN111116521B (zh) 茄尼醇修饰的紫杉醇前药及其制备方法和应用
CN113264906B (zh) 多西他赛二聚体小分子前药及其自组装纳米粒的构建
CN106581693A (zh) 一种具有抗癌活性的熊果酸偶联物作为药物载体或者分子探针载体的应用
Grinberg et al. Characterization and activity of sonochemically-prepared BSA microspheres containing Taxol–an anticancer drug
CN108670954A (zh) 一种共载化疗药物的甘草次酸前药胶束及其制备方法
CN108309938A (zh) 主动定制白蛋白冕的药物传递载体及其在药学中的应用
Wang et al. Minor change in the length of carbon chain has a great influence on the antitumor effect of paclitaxel-fatty alcohol prodrug nanoassemblies: Small roles, big impacts
CN102727905B (zh) 一种金纳米-紫杉醇结合物及其制备方法和应用
CN108836937A (zh) 顺铂纳米药物制剂、制备方法和应用
CN114796513A (zh) 二硒键桥连多西他赛二聚体前药及其自组装纳米粒
CN111592605A (zh) 透明质酸-胱胺-油酸聚合物及在药物传递中的应用
Gao et al. Hydrotropic polymer-based paclitaxel-loaded self-assembled nanoparticles: preparation and biological evaluation
CN113135875B (zh) 光敏剂驱动的二聚体前药共组装纳米粒及其制备方法和应用
CN109125263A (zh) 亚油酸-环糊精分子的合成及其形成的聚集体作为药物递送系统的应用

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
TR01 Transfer of patent right
TR01 Transfer of patent right

Effective date of registration: 20190619

Address after: 110016 No. 103, cultural road, Shenhe District, Shenyang, Liaoning

Co-patentee after: Zhongmei Huadong Pharmaceutical Co., Ltd., Hangzhou

Patentee after: Shenyang Pharmaceutical University

Address before: 110016 No. 103, cultural road, Shenhe District, Shenyang, Liaoning

Patentee before: Shenyang Pharmaceutical University