CN105695548A - 阿胶小分子肽的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种阿胶小分子肽的制备方法，采用阿胶为主要原料，通过原料预处理、酶解、过滤、脱色和干燥等技术制成阿胶小分子肽，其中酶解过程是经过多种蛋白酶进行多次酶解，将阿胶中的胶原蛋白酶解为易被人体消化吸收的小分子肽。本发明的有益效果为：本发明的阿胶小分子肽的制备方法是利用复合生物酶酶解技术，依次采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶和胃蛋白进行酶解，将阿胶中含有的大分子蛋白水解成阿胶小分子肽，得到的阿胶小分子肽分子量主要分布在100-1000D之间，多为二肽、三肽、四肽等小分子肽，属于小分子结构，极易被人体吸收和利用。

Description

阿胶小分子肽的制备方法
技术领域
本发明涉及一种制备方法，具体涉及一种阿胶小分子肽的制备方法。
背景技术
阿胶质硬而脆，断面光亮，碎片对光照视呈棕色半透明状。阿胶中含有大量胶原蛋白，高达80％以上，具有补血滋阴，润燥，止血功能，是上好的补血药。市场上阿胶主要有以口服的浆状药膏居多，高含量的胶原蛋白在人体中较难消化吸收，尤其对脾胃虚弱的病人，口服阿胶消化吸收少难以达到药效，还增加胃肠消化负担。
发明内容
为了解决现有技术存在的上述问题，本发明提供了一种阿胶小分子肽的制备方法。
本发明所采用的技术方案为：一种阿胶小分子肽的制备方法，包括以下步骤：
(1)原料预处理：将阿胶原料进行真空干燥至水分含量小于7％，然后粉碎成粒径为100-200微米的阿胶细粉；
(2)酶解：向所述阿胶细粉中加入所述阿胶细粉10-15倍重量的水，混合均匀后加热至92-98℃，保温10-20分钟，然后降温至45-55℃，调节pH至8.0-9.0，加入碱性蛋白酶进行第一次酶解，所述碱性蛋白酶的使用量为所述阿胶细粉重量的1％；然后保持温度为45-55℃，调节pH至7.0-7.6，加入中性蛋白酶进行第二次酶解，所述中性蛋白酶的使用量为所述阿胶细粉重量的1％；最后保持温度为45-55℃，调节pH至3.0-4.0，加入胃蛋白酶进行第三次酶解，所述胃蛋白酶的使用量为所述阿胶细粉重量的1％；升温至92-98℃灭酶10-15min，得到酶解液；
(3)过滤：将所述酶解液进行第一次过滤，得到滤过液；
(4)脱色：向所述滤过液中加入所述滤过液重量的1.5-2.5％的活性炭，进行脱色，再用硅藻土进行第二次过滤，得到小分子肽液；
(5)干燥：：将所述小分子肽液在55-65℃条件下真空浓缩至起始重量的20％，然后进行喷雾干燥或冷冻干燥，得到阿胶小分子肽干制品。
进一步地，步骤(1)中所述真空干燥的温度为50-60℃，所述真空干燥的时间为15-17小时。
进一步地，步骤(2)中所述调节pH为使用浓度为10％的NaOH溶液或使用浓度为10％的HC1溶液进行调节。
进一步地，步骤(2)中所述碱性蛋白酶为枯草杆菌碱性蛋白酶，所述碱性蛋白酶的活性为500000u/g，所述碱性蛋白酶的酶解温度为45-55℃，所述碱性蛋白酶的酶解时间为2.5-3.5小时。
进一步地，步骤(2)中所述中性蛋白酶的活性为1500000u/g，所述中性蛋白酶的酶解温度为45-55℃，所述中性蛋白酶的酶解时间为2.0-3.0小时。
进一步地，步骤(2)中所述胃蛋白酶的活性为500000u/g，所述胃蛋白酶的酶解温度为45-55℃，所述胃蛋白酶的酶解时间为1.5-2.5小时。
进一步地，步骤(3)中所述滤过液中所含蛋白的平均分子量在1000Da以下。
进一步地，步骤(3)中所述第一次过滤为使用孔径为30-70微米的砂布或滤纸进行过滤。
进一步地，步骤(4)中所述脱色为在65-75℃条件下边搅拌边脱色20-40分钟。
本发明中使用的中性蛋白酶是由枯草芽孢杆菌经发酵提取而得的，属于一种内切酶，可用于各种蛋白质的水解处理。
本发明制备的阿胶小分子肽可加入常规辅料，按照常规工艺，制成片剂、胶囊剂、散剂、丸剂、口服液体制剂等。
本发明所述的阿胶原料可以是阿胶块，也可以是尚未成块的阿胶原液。
本发明的有益效果为：本发明的阿胶小分子肽的制备方法是利用复合生物酶酶解技术，依次采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶和胃蛋白进行酶解，将阿胶中含有的大分子蛋白水解成阿胶小分子肽，得到的阿胶小分子肽分子量主要分布在100-1000D之间，多为二肽、三肽、四肽等小分子肽，属于小分子结构，极易被人体吸收和利用。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做进一步详细说明。
实施例1
一种阿胶小分子肽的制备方法，包括以下步骤：
(1)原料预处理：将阿胶原料进行真空干燥至水分含量为4.8％，然后粉碎成粒径为150微米的阿胶细粉；
(2)酶解：向阿胶细粉中加入阿胶细粉13倍重量的水，混合均匀后加热至95℃，保温15分钟，然后降温至50℃，调节pH至8.5，加入碱性蛋白酶进行第一次酶解，碱性蛋白酶的使用量为阿胶细粉重量的1％；然后保持温度为50℃，调节pH至7.3，加入中性蛋白酶进行第二次酶解，中性蛋白酶的使用量为阿胶细粉重量的1％；最后保持温度为50℃，调节pH至3.5，加入胃蛋白酶进行第三次酶解，胃蛋白酶的使用量为阿胶细粉重量的1％；升温至95℃灭酶12min，得到酶解液；
(3)过滤：将酶解液进行第一次过滤，得到滤过液；
(4)脱色：向滤过液中加入滤过液重量的2％的活性炭，进行脱色，再用硅藻土进行第二次过滤，得到小分子肽液；
(5)干燥：：将小分子肽液在60℃条件下真空浓缩至小分子肽液重量的20％，然后进行喷雾干燥，得到阿胶小分子肽干制品。
实施例2
一种阿胶小分子肽的制备方法，包括以下步骤：
(1)原料预处理：将阿胶原料在55℃条件下进行真空干燥16小时至水分含量为5％，然后粉碎成粒径为150微米的阿胶细粉。
(2)酶解：向阿胶细粉中加入阿胶细粉12倍重量的水，混合均匀后加热至96℃，保温16分钟，然后降温至48℃，使用浓度为10％的NaOH溶液调节pH至8.6，加入枯草杆菌碱性蛋白酶进行第一次酶解，碱性蛋白酶的使用量为阿胶细粉重量的1％，碱性蛋白酶的活性为500000u/g，碱性蛋白酶的酶解温度为48℃，碱性蛋白酶的酶解时间为3小时；然后升温至50℃，使用浓度为10％的HC1溶液(或其他酸性溶液)调节pH至7.1，加入中性蛋白酶进行第二次酶解，中性蛋白酶的使用量为阿胶细粉重量的1％，中性蛋白酶的活性为1500000u/g，中性蛋白酶的酶解温度为50℃，中性蛋白酶的酶解时间为2.5小时；最后保持温度为50℃，使用浓度为10％的HC1溶液调节pH至3.2，加入胃蛋白酶进行第三次酶解，胃蛋白酶的使用量为阿胶细粉重量的1％，胃蛋白酶的活性为500000u/g，胃蛋白酶的酶解温度为50℃，胃蛋白酶的酶解时间为2小时；升温至97℃灭酶13min，得到酶解液；
(3)过滤：将酶解液使用孔径为50微米的砂布或滤纸进行过滤进行第一次过滤，得到滤过液，滤过液的平均分子量在1000Da以下；
(4)脱色：向滤过液中加入滤过液重量的2％的活性炭，在70℃条件下边搅拌边进行脱色30分钟，再用硅藻土进行第二次过滤，得到小分子肽液；
(5)干燥：将小分子肽液在63℃条件下真空浓缩至小分子肽液重量的20％，然后进行喷雾干燥或冷冻干燥，得到阿胶小分子肽干制品。
实施例3
一种阿胶小分子肽的制备方法，包括以下步骤：
(1)原料预处理：将阿胶原料在50℃条件下进行真空干燥17小时至水分含量为5％，然后粉碎成粒径为200微米的阿胶细粉。
(2)酶解：向阿胶细粉中加入阿胶细粉10倍重量的水，混合均匀后加热至98℃，保温10分钟，然后降温至55℃，使用浓度为10％的NaOH溶液调节pH至9.0，加入枯草杆菌碱性蛋白酶进行第一次酶解，碱性蛋白酶的使用量为阿胶细粉重量的1％，碱性蛋白酶的活性为500000u/g，碱性蛋白酶的酶解温度为55℃，碱性蛋白酶的酶解时间为2.5小时；然后保持温度为55℃，使用浓度为10％的HC1溶液调节pH至7.0，加入中性蛋白酶进行第二次酶解，中性蛋白酶的使用量为阿胶细粉重量的1％，中性蛋白酶的活性为1500000u/g，中性蛋白酶的酶解温度为55℃，中性蛋白酶的酶解时间为2.0小时；最后保持温度为55℃，使用浓度为10％的HC1溶液调节pH至4.0，加入胃蛋白酶进行第三次酶解，胃蛋白酶的使用量为阿胶细粉重量的1％，胃蛋白酶的活性为500000u/g，胃蛋白酶的酶解温度为55℃，胃蛋白酶的酶解时间为1.5小时；升温至92℃灭酶10，得到酶解液；
(3)过滤：将酶解液使用孔径为30微米的砂布或滤纸进行过滤进行第一次过滤，得到滤过液，滤过液的平均分子量在1000Da以下；
(4)脱色：向滤过液中加入滤过液重量的1.5％的活性炭，在75℃条件下边搅拌边进行脱色40分钟，再用硅藻土进行第二次过滤，得到小分子肽液；
(5)干燥：将小分子肽液在65℃条件下真空浓缩至小分子肽液重量的20％，然后进行喷雾干燥或冷冻干燥，得到阿胶小分子肽干制品。
实施例4
一种阿胶小分子肽的制备方法，包括以下步骤：
(1)原料预处理：将阿胶原料在60℃条件下进行真空干燥15小时至水分含量为7％，然后粉碎成粒径为100微米的阿胶细粉。
(2)酶解：向阿胶细粉中加入阿胶细粉15倍重量的水，混合均匀后加热至92℃，保温20分钟，然后降温至45℃，使用浓度为10％的NaOH溶液调节pH至8.0，保持pH不变和温度不变的条件下加入枯草杆菌碱性蛋白酶进行第一次酶解，碱性蛋白酶的使用量为阿胶细粉重量的1％，碱性蛋白酶的活性为500000u/g，碱性蛋白酶的酶解温度为45℃，碱性蛋白酶的酶解时间为3.5小时；然后保持温度为45℃，使用浓度为10％的HC1溶液调节pH至7.6，保持pH不变和温度不变的条件下加入中性蛋白酶进行第二次酶解，中性蛋白酶的使用量为阿胶细粉重量的1％，中性蛋白酶的活性为1500000u/g，中性蛋白酶的酶解温度为45℃，中性蛋白酶的酶解时间为3.0小时；最后保持温度为45℃，使用浓度为10％的HC1溶液调节pH至4.0，保持pH不变和温度不变的条件下加入胃蛋白酶进行第三次酶解，胃蛋白酶的使用量为阿胶细粉重量的1％，胃蛋白酶的活性为500000u/g，胃蛋白酶的酶解温度为45℃，胃蛋白酶的酶解时间为2.5小时；升温至98℃灭酶15min，得到酶解液；
(3)过滤：将酶解液使用孔径为70微米的砂布或滤纸进行过滤进行第一次过滤，得到滤过液，滤过液的平均分子量在1000Da以下；
(4)脱色：向滤过液中加入滤过液重量的2.5％的活性炭，在65℃条件下边搅拌边进行脱色20分钟，再用硅藻土进行第二次过滤，得到小分子肽液；
(5)干燥：将小分子肽液在55℃条件下真空浓缩至小分子肽液重量的20％，然后进行喷雾干燥或冷冻干燥，得到阿胶小分子肽干制品。
本发明不局限于上述最佳实施方式，任何人在本发明的启示下都可得出其他各种形式的产品，但不论在其形状或结构上作任何变化，凡是具有与本申请相同或相近似的技术方案，均落在本发明的保护范围之内。

Claims (9)

1.一种阿胶小分子肽的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)原料预处理：将阿胶原料进行真空干燥至水分含量小于7％，然后粉碎成粒径为100-200微米的阿胶细粉；
(2)酶解：向所述阿胶细粉中加入所述阿胶细粉10-15倍重量的水，混合均匀后加热至92-98℃，保温10-20分钟，然后降温至45-55℃，调节pH至8.0-9.0，加入碱性蛋白酶进行第一次酶解，所述碱性蛋白酶的使用量为所述阿胶细粉重量的1％；然后保持温度为45-55℃，调节pH至7.0-7.6，加入中性蛋白酶进行第二次酶解，所述中性蛋白酶的使用量为所述阿胶细粉重量的1％；最后保持温度为45-55℃，调节pH至3.0-4.0，加入胃蛋白酶进行第三次酶解，所述胃蛋白酶的使用量为所述阿胶细粉重量的1％；升温至92-98℃灭酶10-15min，得到酶解液；
(3)过滤：将所述酶解液进行第一次过滤，得到滤过液；
(4)脱色：向所述滤过液中加入所述滤过液重量的1.5-2.5％的活性炭，进行脱色，再用硅藻土进行第二次过滤，得到小分子肽液；
(5)干燥：将所述小分子肽液在55-65℃条件下真空浓缩至起始重量的20％，然后进行喷雾干燥或冷冻干燥，得到阿胶小分子肽干制品。
2.根据权利要求1所述的阿胶小分子肽的制备方法，其特征在于：步骤(1)中所述真空干燥的温度为50-60℃，所述真空干燥的时间为15-17小时。
3.根据权利要求1所述的阿胶小分子肽的制备方法，其特征在于：步骤(2)中所述调节pH为使用浓度为10％的NaOH溶液或使用浓度为10％的HC1溶液进行调节。
4.根据权利要求1所述的阿胶小分子肽的制备方法，其特征在于：步骤(2)中所述碱性蛋白酶为枯草杆菌碱性蛋白酶，所述碱性蛋白酶的活性为500000u/g，所述碱性蛋白酶的酶解温度为45-55℃，所述碱性蛋白酶的酶解时间为2.5-3.5小时。
5.根据权利要求1所述的阿胶小分子肽的制备方法，其特征在于：步骤(2)中所述中性蛋白酶的活性为1500000u/g，所述中性蛋白酶的酶解温度为45-55℃，所述中性蛋白酶的酶解时间为2.0-3.0小时。
6.根据权利要求1所述的阿胶小分子肽的制备方法，其特征在于：步骤(2)中所述胃蛋白酶的活性为500000u/g，所述胃蛋白酶的酶解温度为45-55℃，所述胃蛋白酶的酶解时间为1.5-2.5小时。
7.根据权利要求1所述的阿胶小分子肽的制备方法，其特征在于：步骤(3)中所述滤过液中所含蛋白的平均分子量在1000Da以下。
8.根据权利要求1所述的阿胶小分子肽的制备方法，其特征在于：步骤(3)中所述第一次过滤为使用孔径为30-70微米的砂布或滤纸进行过滤。
9.根据权利要求1所述的阿胶小分子肽的制备方法，其特征在于：步骤(4)中所述脱色为在65-75℃条件下边搅拌边脱色20-40分钟。
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