CN105821106A - 海参小分子肽的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种海参小分子肽的制备方法，采用海参为主要原料，通过原料预处理、酶解、过滤、脱色和干燥等技术制成海参小分子肽，其中酶解过程是经过多种蛋白酶进行多次酶解，将海参中的胶原蛋白酶解为易被人体消化吸收的小分子肽。本发明的有益效果为：本发明的海参小分子肽的制备方法是利用复合生物酶酶解技术，依次采用碱性蛋白酶、胰蛋白酶和胃蛋白进行酶解，将海参中含有的大分子蛋白水解成海参小分子肽，得到的海参小分子肽分子量主要分布在100‑1000D之间，多为二肽、三肽、四肽等小分子肽，属于小分子结构，极易被人体吸收和利用。

Description

海参小分子肽的制备方法
技术领域
本发明涉及一种制备方法，具体涉及一种海参小分子肽的制备方法。
背景技术
海参是世界八大珍品之一，同人参、燕窝、鱼翅齐名。海参不仅是珍贵的食品，也是名贵的药材。据《本草纲目拾遗》中记载：海参，味甘咸，补肾，益精髓，摄小便，壮阳疗痿，其性温补，足敌人参，故名海参。海参具有提高记忆力、延缓性腺衰老，防止动脉硬化以及抗肿瘤等作用。随着海参价值知识的普及，海参逐渐进入百姓餐桌。海参体内有含量很高的胶原蛋白，这种蛋白可以与传统中药的阿胶、龟板胶、鳖甲胶、鹿胶在营养成分上相媲美，其功能是生血养血，使肌肤保持光滑及富有弹性，延缓机体衰老。但海参体内含有的胶原蛋白不易被人体消化吸收，人体必须在某些特定的酶作用下才能分解利用这类蛋白质，而人体内的酶是有限的。
发明内容
为了解决现有技术存在的上述问题，本发明提供了一种海参小分子肽的制备方法。海参小分子肽运用生物酶解技术精制而成，既完整保留了海参特有的营养成份，又将大分子蛋白质转变为更易吸收、功能更强的小分子活性肽，比传统海参制品吸收更全面。
本发明所采用的技术方案为：一种海参小分子肽的制备方法，包括以下步骤：
(1)原料预处理：将海参原料进行真空干燥至水分含量小于7％，然后粉碎成粒径为100-200微米的海参细粉；
(2)酶解：向所述海参细粉中加入所述海参细粉10-15倍重量的水，混合均匀后加热至92-98℃，保温10-20分钟，然后降温至45-55℃，调节pH至8.0-9.0，加入碱性蛋白酶进行第一次酶解，所述碱性蛋白酶的使用量为所述海参细粉重量的1.0-1.5％；然后保持温度为45-55℃，调节pH至7.8-8.5，加入胰蛋白酶进行第二次酶解，所述胰蛋白酶的使用量为所述海参细粉重量的0.8-1.2％；最后保持温度为45-55℃，调节pH至3.0-4.0，加入胃蛋白酶进行第三次酶解，所述胃蛋白酶的使用量为所述海参细粉重量的0.8-1.2％；升温至92-98℃灭酶10-15min，得到酶解液；
(3)过滤：将所述酶解液进行第一次过滤，得到滤过液；
(4)脱色：向所述滤过液中加入所述滤过液重量的1.5-2.5％的活性炭，进行脱色，再用硅藻土进行第二次过滤，得到小分子肽液；
(5)干燥：：将所述小分子肽液在55-65℃条件下真空浓缩至起始重量的20％，然后进行喷雾干燥或冷冻干燥，得到海参小分子肽干制品。
进一步地，步骤(1)中所述真空干燥的温度为50-60℃，所述真空干燥的时间为15-17小时。
进一步地，步骤(2)中所述调节pH为使用浓度为10％的NaOH溶液或使用浓度为10％的HC1溶液进行调节。
进一步地，步骤(2)中所述碱性蛋白酶为枯草杆菌碱性蛋白酶，所述碱性蛋白酶的活性为500000u/g，所述碱性蛋白酶的酶解温度为45-55℃，所述碱性蛋白酶的酶解时间为2.5-3.5小时。
进一步地，步骤(2)中所述胰蛋白酶的活性为2500000u/g，所述胰蛋白酶的酶解温度为45-55℃，所述胰蛋白酶的酶解时间为2.0-3.0小时。
进一步地，步骤(2)中所述胃蛋白酶的活性为500000u/g，所述胃蛋白酶的酶解温度为45-55℃，所述胃蛋白酶的酶解时间为1.5-2.5小时。
进一步地，步骤(3)中所述滤过液中所含蛋白的平均分子量在1000Da以下。
进一步地，步骤(3)中所述第一次过滤为使用孔径为30-70微米的砂布或滤纸进行过滤。
进一步地，步骤(4)中所述脱色为在65-75℃条件下边搅拌边脱色20-40分钟。
本发明中使用的胰蛋白酶为蛋白酶的一种，是从牛、羊、猪的胰脏提取的一种丝氨酸蛋白水解酶。在脊椎动物中，作为消化酶而起作用。作为胰液的成分而分泌，受肠激酶，或胰蛋白酶的限制分解成为活化胰蛋白酶，是肽链内切酶，它能把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基侧切断。它不仅起消化酶的作用，而且还能限制分解糜蛋白酶原、羧肽酶原、磷脂酶原等其它酶的前体，起活化作用。是特异性最强的蛋白酶。
本发明制备的海参小分子肽可加入常规辅料，按照常规工艺，制成片剂、胶囊剂、散剂、丸剂、口服液体制剂等。
本发明所述的海参原料可以是鲜海参，也可以是海参干制品，均需先将海参的内脏去除。
本发明的有益效果为：本发明的海参小分子肽的制备方法是利用复合生物酶酶解技术，依次采用碱性蛋白酶、胰蛋白酶和胃蛋白进行酶解，将海参中含有的大分子蛋白水解成海参小分子肽，得到的海参小分子肽分子量主要分布在100-1000D之间，多为二肽、三肽、四肽等小分子肽，属于小分子结构，纯度较高，滋补效果较好。极易被人体吸收和利用。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做进一步详细说明。
实施例1
一种海参小分子肽的制备方法，包括以下步骤：
(1)原料预处理：将海参原料进行真空干燥至水分含量为4.8％，然后粉碎成粒径为150微米的海参细粉。
(2)酶解：向海参细粉中加入海参细粉13倍重量的水，混合均匀后加热至95℃，保温15分钟，然后降温至50℃，调节pH至8.5，加入碱性蛋白酶进行第一次酶解，碱性蛋白酶的使用量为海参细粉重量的1.2％；然后保持温度为50℃，调节pH至7.3，加入胰蛋白酶进行第二次酶解，胰蛋白酶的使用量为海参细粉重量的1％；最后保持温度为50℃，调节pH至3.5，加入胃蛋白酶进行第三次酶解，胃蛋白酶的使用量为海参细粉重量的1％；升温至95℃灭酶12min，得到酶解液；
(3)过滤：将酶解液进行第一次过滤，得到滤过液；
(4)脱色：向滤过液中加入滤过液重量的2％的活性炭，进行脱色，再用硅藻土进行第二次过滤，得到小分子肽液；
(5)干燥：：将小分子肽液在60℃条件下真空浓缩至小分子肽液重量的20％，然后进行喷雾干燥，得到海参小分子肽干制品。
实施例2
一种海参小分子肽的制备方法，包括以下步骤：
(1)原料预处理：将海参原料在55℃条件下进行真空干燥16小时至水分含量为5％，然后粉碎成粒径为150微米的海参细粉。
(2)酶解：向海参细粉中加入海参细粉12倍重量的水，混合均匀后加热至96℃，保温16分钟，然后降温至48℃，使用浓度为10％的NaOH溶液调节pH至8.6，加入枯草杆菌碱性蛋白酶进行第一次酶解，碱性蛋白酶的使用量为海参细粉重量的1.5％，碱性蛋白酶的活性为500000u/g，碱性蛋白酶的酶解温度为48℃，碱性蛋白酶的酶解时间为3小时；然后升温至50℃，使用浓度为10％的HC1溶液调节pH至7.1，加入胰蛋白酶进行第二次酶解，胰蛋白酶的使用量为海参细粉重量的0.8％，胰蛋白酶的活性为2500000u/g，胰蛋白酶的酶解温度为50℃，胰蛋白酶的酶解时间为2.5小时；最后保持温度为50℃，使用浓度为10％的HC1溶液调节pH至3.2，加入胃蛋白酶进行第三次酶解，胃蛋白酶的使用量为海参细粉重量的1.2％，胃蛋白酶的活性为500000u/g，胃蛋白酶的酶解温度为50℃，胃蛋白酶的酶解时间为2小时；升温至97℃灭酶13min，得到酶解液；
(3)过滤：将酶解液使用孔径为50微米的砂布或滤纸进行过滤进行第一次过滤，得到滤过液，滤过液的平均分子量在1000Da以下；
(4)脱色：向滤过液中加入滤过液重量的2％的活性炭，在70℃条件下边搅拌边进行脱色30分钟，再用硅藻土进行第二次过滤，得到小分子肽液；
(5)干燥：将小分子肽液在63℃条件下真空浓缩至小分子肽液重量的20％，然后进行喷雾干燥或冷冻干燥，得到海参小分子肽干制品。
实施例3
一种海参小分子肽的制备方法，包括以下步骤：
(1)原料预处理：将海参原料在50℃条件下进行真空干燥17小时至水分含量为5％，然后粉碎成粒径为200微米的海参细粉。
(2)酶解：向海参细粉中加入海参细粉10倍重量的水，混合均匀后加热至98℃，保温10分钟，然后降温至55℃，使用浓度为10％的NaOH溶液调节pH至9.0，加入枯草杆菌碱性蛋白酶进行第一次酶解，碱性蛋白酶的使用量为海参细粉重量的1％，碱性蛋白酶的活性为500000u/g，碱性蛋白酶的酶解温度为55℃，碱性蛋白酶的酶解时间为2.5小时；然后保持温度为55℃，使用浓度为10％的HC1溶液(或其他酸性溶液)调节pH至7.8，加入胰蛋白酶进行第二次酶解，胰蛋白酶的使用量为海参细粉重量的1.2％，胰蛋白酶的活性为2500000u/g，胰蛋白酶的酶解温度为55℃，胰蛋白酶的酶解时间为2.0小时；最后保持温度为55℃，使用浓度为10％的HC1溶液调节pH至4.0，加入胃蛋白酶进行第三次酶解，胃蛋白酶的使用量为海参细粉重量的0.8％，胃蛋白酶的活性为500000u/g，胃蛋白酶的酶解温度为55℃，胃蛋白酶的酶解时间为1.5小时；升温至92℃灭酶10，得到酶解液；
(3)过滤：将酶解液使用孔径为30微米的砂布或滤纸进行过滤进行第一次过滤，得到滤过液，滤过液的平均分子量在1000Da以下；
(4)脱色：向滤过液中加入滤过液重量的1.5％的活性炭，在75℃条件下边搅拌边进行脱色40分钟，再用硅藻土进行第二次过滤，得到小分子肽液；
(5)干燥：将小分子肽液在65℃条件下真空浓缩至小分子肽液重量的20％，然后进行喷雾干燥或冷冻干燥，得到海参小分子肽干制品。
实施例4
一种海参小分子肽的制备方法，包括以下步骤：
(1)原料预处理：将海参原料在60℃条件下进行真空干燥15小时至水分含量为7％，然后粉碎成粒径为100微米的海参细粉。
(2)酶解：向海参细粉中加入海参细粉15倍重量的水，混合均匀后加热至92℃，保温20分钟，然后降温至45℃，使用浓度为10％的NaOH溶液调节pH至8.0，加入枯草杆菌碱性蛋白酶进行第一次酶解，碱性蛋白酶的使用量为海参细粉重量的1％，碱性蛋白酶的活性为500000u/g，碱性蛋白酶的酶解温度为45℃，碱性蛋白酶的酶解时间为3.5小时；然后保持温度为45℃，使用浓度为10％的NaOH溶液调节pH至8.5，加入胰蛋白酶进行第二次酶解，胰蛋白酶的使用量为海参细粉重量的1％，胰蛋白酶的活性为2500000u/g，胰蛋白酶的酶解温度为45℃，胰蛋白酶的酶解时间为3.0小时；最后保持温度为45℃，使用浓度为10％的HC1溶液调节pH至4.0，加入胃蛋白酶进行第三次酶解，胃蛋白酶的使用量为海参细粉重量的1％，胃蛋白酶的活性为500000u/g，胃蛋白酶的酶解温度为45℃，胃蛋白酶的酶解时间为2.5小时；升温至98℃灭酶15min，得到酶解液；
(3)过滤：将酶解液使用孔径为70微米的砂布或滤纸进行过滤进行第一次过滤，得到滤过液，滤过液的平均分子量在1000Da以下；
(4)脱色：向滤过液中加入滤过液重量的2.5％的活性炭，在65℃条件下边搅拌边进行脱色20分钟，再用硅藻土进行第二次过滤，得到小分子肽液；
(5)干燥：将小分子肽液在55℃条件下真空浓缩至小分子肽液重量的20％，然后进行喷雾干燥或冷冻干燥，得到海参小分子肽干制品。
本发明不局限于上述最佳实施方式，任何人在本发明的启示下都可得出其他各种形式的产品，但不论在其形状或结构上作任何变化，凡是具有与本申请相同或相近似的技术方案，均落在本发明的保护范围之内。

Claims (9)

1.一种海参小分子肽的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)原料预处理：将海参原料进行真空干燥至水分含量小于7％，然后粉碎成粒径为100-200微米的海参细粉；
(2)酶解：向所述海参细粉中加入所述海参细粉10-15倍重量的水，混合均匀后加热至92-98℃，保温10-20分钟，然后降温至45-55℃，调节pH至8.0-9.0，加入碱性蛋白酶进行第一次酶解，所述碱性蛋白酶的使用量为所述海参细粉重量的1.0-1.5％；然后保持温度为45-55℃，调节pH至7.8-8.5，加入胰蛋白酶进行第二次酶解，所述胰蛋白酶的使用量为所述海参细粉重量的0.8-1.2％；最后保持温度为45-55℃，调节pH至3.0-4.0，加入胃蛋白酶进行第三次酶解，所述胃蛋白酶的使用量为所述海参细粉重量的0.8-1.2％；升温至92-98℃灭酶10-15min，得到酶解液；
(3)过滤：将所述酶解液进行第一次过滤，得到滤过液；
(4)脱色：向所述滤过液中加入所述滤过液重量的1.5-2.5％的活性炭，进行脱色，再用硅藻土进行第二次过滤，得到小分子肽液；
(5)干燥：将所述小分子肽液在55-65℃条件下真空浓缩至起始重量的20％，然后进行喷雾干燥或冷冻干燥，得到海参小分子肽干制品。
2.根据权利要求1所述的海参小分子肽的制备方法，其特征在于：步骤(1)中所述真空干燥的温度为50-60℃，所述真空干燥的时间为15-17小时。
3.根据权利要求1所述的海参小分子肽的制备方法，其特征在于：步骤(2)中所述调节pH为使用浓度为10％的NaOH溶液或使用浓度为10％的HC1溶液进行调节。
4.根据权利要求1所述的海参小分子肽的制备方法，其特征在于：步骤(2)中所述碱性蛋白酶为枯草杆菌碱性蛋白酶，所述碱性蛋白酶的活性为500000u/g，所述碱性蛋白酶的酶解温度为45-55℃，所述碱性蛋白酶的酶解时间为2.5-3.5小时。
5.根据权利要求1所述的海参小分子肽的制备方法，其特征在于：步骤(2)中所述胰蛋白酶的活性为2500000u/g，所述胰蛋白酶的酶解温度为45-55℃，所述胰蛋白酶的酶解时间为2.0-3.0小时。
6.根据权利要求1所述的海参小分子肽的制备方法，其特征在于：步骤(2)中所述胃蛋白酶的活性为500000u/g，所述胃蛋白酶的酶解温度为45-55℃，所述胃蛋白酶的酶解时间为1.5-2.5小时。
7.根据权利要求1所述的海参小分子肽的制备方法，其特征在于：步骤(3)中所述滤过液中所含蛋白的平均分子量在1000Da以下。
8.根据权利要求1所述的海参小分子肽的制备方法，其特征在于：步骤(3)中所述第一次过滤为使用孔径为30-70微米的砂布或滤纸进行过滤。
9.根据权利要求1所述的海参小分子肽的制备方法，其特征在于：步骤(4)中所述脱色为在65-75℃条件下边搅拌边脱色20-40分钟。
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