CN111004829A - 一种黑木耳活性肽的制备方法 - Google Patents
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Abstract
一种黑木耳活性肽的制备方法，它属于黑木耳小分子肽制备方法领域。本发明将黑木耳进行前处理后，进行三步酶解法，称量黑曲霉的纤维素酶和真菌淀粉酶进行酶的活化，活化后的酶加入发酵罐中，进行酶解反应后，灭酶倒入干净的发酵罐中，再称量食用菌水解酶、消化酶、大豆多肽水解酶、植物蛋白水解酶进行酶的活化，活化后的酶加入的发酵罐中，进行酶解反应后，倒入干净的发酵罐中，再称量木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶进行酶的活化，活化后的酶加入发酵罐中，进行酶解反应后，得到黑木耳酶解液，进行减压蒸馏，得到的浓缩液进行喷雾干燥，以一定的料液比溶于磁化水中，得到黑木耳活性肽液。本发明为澄清淡黄色液体。
Description
技术领域
本发明属于黑木耳小分子肽制备方法领域；具体涉及一种黑木耳活性肽的制备方法。
背景技术
黑木耳是我国传统的真菌类保健食品。100g黑木耳含蛋白质10.6g、糖类60.8g、脂肪1.1g、VB180mg。此外，它还含有人体必需的8种氨基酸和维生素，特别是维生素B2的含量超过米、面、蔬菜和肉类，被誉为“素中之荤”。据《本草纲目》记载，木耳有润肠、清肺、补血、镇静、止痛之功效。医学临床鉴定，黑木耳中的多糖类有抗肿瘤、抗癌的功效。据美国明尼苏达大学医学院的研究发现，黑木耳内含有一种类核酸物质，可以降低血中的胆固醇和甘油三酯水平，对冠心病、动脉硬化患者颇有益处。黑木耳中的多糖有抗癌作用，可以作为肿瘤病人的食疗。为延伸黑木耳产业链，增加黑木耳产品附加值，黑木耳小分子肽，成为新的研究热点。
发明内容
本发明目的是提供了一种利于人体吸收的一种黑木耳活性肽的制备方法。
本发明通过以下技术方案实现：
一种黑木耳活性肽的制备方法，包括如下步骤：
步骤1、原材料前处理：选取新鲜的木耳，洗去杂质和灰尘，清洗后的黑木耳真空干燥后，进行冻干、粉碎、过筛，得到黑木耳粉，待用；
步骤2、酶解前处理：称量步骤1制得的黑木耳粉20kg，置于2t的发酵罐中，然后加入1t磁化水,调节pH为8.2，在加热搅拌条件下，使料液混合均匀，保持一定温度的条件下，待用；
步骤3、第一步酶解：称量一定质量的黑曲霉的纤维素酶和真菌淀粉酶进行酶的活化，活化后的酶加入步骤2的发酵罐中，关闭放料口，进行酶解反应后，倒入干净的发酵罐中，待用；
步骤4、第二步酶解：称量一定质量的食用菌水解酶、消化酶、大豆多肽水解酶、植物蛋白水解酶进行酶的活化，活化后的酶加入步骤3的发酵罐中，关闭放料口，进行酶解反应后，倒入干净的发酵罐中，待用；
步骤5、第三步酶解：称量一定质量的木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶进行酶的活化，活化后的酶加入步骤4的发酵罐中，关闭放料口，进行酶解反应后，得到黑木耳酶解液，待用；
步骤6、制备黑木耳活性肽粉：将步骤5制得的黑木耳酶解液进行减压蒸馏，得到的浓缩液进行喷雾干燥，得到黑木耳活性肽粉；
步骤7、制备黑木耳活性肽液：将步骤6制得的黑木耳活性肽粉以一定的料液比溶于磁化强度为3～4T的磁化水中，得到黑木耳活性肽液。
本发明所述的一种黑木耳活性肽的制备方法，步骤1中新鲜的黑木耳为采用磁化水喷施生长出的黑木耳，磁化水的磁化强度为3～4T，黑木耳为菌包采摘下来的第二茬黑木耳。
本发明所述的一种黑木耳活性肽的制备方法，步骤1中通过超声波清洗机洗去杂质和灰尘，超声功率为500W，清洗后的黑木耳放入60℃真空烘干箱中干燥30min，再移入-60℃真空冻干机中冻干至无水程度，将冻干的黑木耳放到高速粉碎机中，在50000r/min转速下粉碎10min，过400目筛，得到黑木耳粉。
本发明所述的一种黑木耳活性肽的制备方法，步骤2中加入碳酸氢钠或碳酸钠调节溶液pH值，磁化水的磁化强度为3～4T，控制溶液温度为60℃，搅拌速度为100r/min。
本发明所述的一种黑木耳活性肽的制备方法，步骤3中黑曲霉的纤维素酶和真菌淀粉酶的质量比为3:1，所述的黑曲霉的纤维素酶的酶活力为50万u/g，真菌淀粉酶的酶活力为30万u/g，所述的黑曲霉的纤维素酶和真菌淀粉酶的总量占黑木耳粉重量的0.5wt％，将所述的黑曲霉的纤维素酶和真菌淀粉酶加入到3000ml烧杯中，加入经过磁化强度为3～4T的60℃磁化水2000ml，搅拌条件下再加入50g葡萄糖，持续搅拌30min，完成酶的活化；酶解反应条件为调节搅拌速度为150r/min，温度为60℃，反应10h，将反应液通过134℃高温灭酶后，倒入干净的2t的发酵罐中。
本发明所述的一种黑木耳活性肽的制备方法，步骤4中食用菌水解酶、消化酶、大豆多肽水解酶、植物蛋白水解酶的质量比为1:1:1:1，所述的食用菌水解酶、消化酶、大豆多肽水解酶、植物蛋白水解酶的总量占黑木耳粉重量的0.8wt％，将所述的食用菌水解酶、消化酶、大豆多肽水解酶、植物蛋白水解酶加入到3000ml烧杯中，加入经过磁化强度为3～4T的60℃磁化水2000ml，搅拌条件下再加入50g蛋白胨，持续搅拌30min，完成酶的活化；酶解反应条件为调节搅拌速度为150r/min，温度为60℃，反应10h，将反应液通过134℃高温灭酶后，倒入干净的2t的发酵罐中。
本发明所述的一种黑木耳活性肽的制备方法，步骤5中木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶的质量比为1:2:3:2，所述的木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶的总量占黑木耳粉重量的0.8wt％，将所述的木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶加入到3000ml烧杯中，加入经过磁化强度为3～4T的60℃磁化水2000ml，搅拌条件下再加入50g蛋白胨，持续搅拌30min，完成酶的活化；酶解反应条件为调节搅拌速度为150r/min，温度为60℃，反应10h，将反应液通过134℃高温灭酶后，得到黑木耳酶解液。
本发明所述的一种黑木耳活性肽的制备方法，步骤6中的减压蒸馏为木耳发酵液转入蒸馏釜中进行蒸馏，在75℃下浓缩至原体积的1/4，得到浓缩液。
本发明所述的一种黑木耳活性肽的制备方法，步骤7中黑木耳活性肽粉和磁化水的料液比为1g:20～50ml。
本发明所述的一种黑木耳活性肽的制备方法制备的黑木耳活性肽，所述的黑木耳活性肽为粉末态或溶液态。
本发明所述的一种黑木耳活性肽的制备方法，制备过程中用磁化水将原来缔合链状的水的大分子，断裂成单个小分子，水分子偶极距发生偏转，水中溶解盐类的正负离子被单个水分子包围，使水中的钙、镁等结垢物的针状结晶改变为粒状结晶体，相互粘附与聚积特性受到了破坏，进一步激活水分子和矿物质。水经磁化处理后，水分子呈现有序排列状态，这种有序排列的水，本身形成一种较弱的磁场，在这种磁场的作用下，酶的构形会发生一定的变化，这种构形变化使酶的活性中心显得比原状态更为突出时，使酶的催化活性增强。
本发明所述的一种黑木耳活性肽的制备方法，由于黑木耳富含的纤维素，是将蛋白质、糖及其他营养物质捆绑在一起的关键物质，要想获得更多的营养物质和更充分的酶解，只有除去纤维素的束缚，所以在进行蛋白酶酶解之前，第一步酶解先进行纤维素酶的酶解有助于蛋白酶解，起到增效蛋白酶酶解的作用，先通过纤维素酶酶解黑木耳本身的纤维素，有助于释放蛋白质、糖及其他营养物质，并且可以将不溶性纤维素酶解为功能性多糖，为发酵液中进一步增加可溶性营养成分。第一步酶解中另外添加的淀粉酶，也是进一步酶解不溶性淀粉，使不溶性糖转化为可溶性多糖。
本发明所述的一种黑木耳活性肽的制备方法，第二步酶解用食用菌水解酶、消化酶、大豆多肽水解酶、植物蛋白水解酶，第二步酶解中选用了针对食用菌酶解使用的食用菌水解酶，有助于进一步对黑木耳特殊的物质进行酶解；另外通过消化酶、大豆多肽水解酶和植物蛋白水解酶的作用，使黑木耳蛋白质大分子酶解为多肽；同时酶解掉黑木耳所含有的脂肪成分。
本发明所述的一种黑木耳活性肽的制备方法，第三步酶解采用复合酶，其中含有木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶，有助于黑木耳多肽在多位点、多片段上进行更充分的酶解，使黑木耳多肽最大程度上酶解为小分子活性肽。
本发明所述的一种黑木耳活性肽的制备方法，生成的所述的黑木耳活性肽不需消化，直接、快速、主动、完全、优先吸收；人体对小分子肽的吸收，不增加胃肠负担，不需增加耗能；小分子肽具有载体作用，可将其它营养物质，特别是钙等对人体有益的微量元素，吸附、粘粘、装载、转运，提高吸收利用率；小分子肽比游离氨基酸更容易吸收，机体组织利用小分子肽的速度比氨基酸快；以肽的形式直接吸收，避免氨基酸的吸收竞争，减少高渗影响。
本发明所述的一种黑木耳活性肽的制备方法，通过发酵技术，利用复合酶对黑木耳大分子蛋白质进行靶向酶解，剪切蛋白质链，使其生成由2-10个氨基酸残基分子组成的具有生物活性的低聚肽，2-20个氨基酸残基分子组成的具有生物活性的功能肽，同时释放出其生物活性，从而提升了木耳原始生物活性成分可利用的量化水平，实现了营养物质的优化重组对人体有清涤胃肠和消化纤维素的作用。较传统食用木耳的方法吸收利用率提高10倍以上。改变了木耳传统的食用方法，从吃大分子量的蛋白质变成喝小分子量木耳肽，活性功效成分吸收率从5％-8％提高到85％以上。并且食用方便、快捷、安全。每天食用1瓶100毫升的黑木耳活性肽液相当于食用干木耳2公斤。
本发明所述的一种黑木耳活性肽的制备方法制备的黑木耳活性肽，为澄清淡黄色液体或粉末，具有一定粘稠度；活性肽含量为30.32g/100g，其中分子量100-200占10.33％，分子量200-300占18.56％，分子量300-400占5.44％，分子量500-600占7.16％，分子量700-800占15.51％，分子量900-1000占18.55％，分子量1000-1500占20.47％，分子量1500-2000占3.98％。
本发明所述的一种黑木耳活性肽的制备方法制备的黑木耳活性肽，具有以下功能，(1)调节体内的水分、电解质平衡；(2)为免疫系统制造对抗细菌和感染的抗体，提高免疫功能；(3)促进伤口愈合；(4)在体内制造酵素，有助于将食物转化为能量；(5)修复细胞，改善细胞代谢，防止细胞变性，能起到防癌的作用；(6)促进蛋白质、酶、酵素的合成与调控；(7)沟通细胞间、器官间信息的重要化学信使；(8)预防心脑血管疾病；(9)调节内分泌与神经系统；(10)改善消化系统、治疗慢性胃肠道疾病；(11)改善糖尿病、风湿、类风湿等疾病；(12)抗病毒感染、抗衰老，消除体内多余的自由基；(13)促进造血功能，治疗贫血，防止血小板聚集提高血红细胞的载养能力。
本发明所述的一种黑木耳活性肽的制备方法制备的黑木耳活性肽，黑木耳活性肽进入人体后，可作为抗原，不需要T细胞的辅助就能直接刺激B细胞产生抗体。但黑木耳活性肽进入人体后，可诱导和促进T细胞分化、成熟；刺激B细胞产生并分泌免疫球蛋白(抗体)参与人体免疫反应；提高自然杀伤细胞(NK)活力，在无抗体参与的情况下，杀伤肿瘤细胞，发挥广谱抗肿瘤、抗感染作用，参与免疫调节；刺激K细胞杀伤不易被吞噬的病原体，如寄生虫、恶性肿瘤细胞等；刺激N细胞的杀伤能力；刺激吞噬细胞的吞噬能力，主要提高其吞噬消化功能、分泌功能，参与免疫应答、免疫调节过程，并抗感染、抗肿瘤；增强红细胞免疫功能；提高白细胞介素-2(1L-2)的产生水平和受体表达水平；增强外周单核细胞Y-干扰素的产生；增强血清中SOD活性；可显著增加淋巴细胞功能；能有效防止辐射核放化疗及空气、水、食物、环境污染中毒豆白细胞的减少；能有效抑制肿瘤细胞的生长；可防止恶性肿瘤放化疗引起的CD4+降低。总之，酶法多肽是可食免疫剂，可全面增强人体免疫功能和免疫调节，是一种现代新型免疫剂，是现代免疫的珍品。
具体实施方式
具体实施方式一：
一种黑木耳活性肽的制备方法，包括如下步骤：
步骤1、原材料前处理：选取新鲜的木耳，洗去杂质和灰尘，清洗后的黑木耳真空干燥后，进行冻干、粉碎、过筛，得到黑木耳粉，待用；
步骤2、酶解前处理：称量步骤1制得的黑木耳粉20kg，置于2t的发酵罐中，然后加入1t磁化水,调节pH为8.2，在加热搅拌条件下，使料液混合均匀，保持一定温度的条件下，待用；
步骤3、第一步酶解：称量一定质量的黑曲霉的纤维素酶和真菌淀粉酶进行酶的活化，活化后的酶加入步骤2的发酵罐中，关闭放料口，进行酶解反应后，倒入干净的发酵罐中，待用；
步骤4、第二步酶解：称量一定质量的食用菌水解酶、消化酶、大豆多肽水解酶、植物蛋白水解酶进行酶的活化，活化后的酶加入步骤3的发酵罐中，关闭放料口，进行酶解反应后，倒入干净的发酵罐中，待用；
步骤5、第三步酶解：称量一定质量的木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶进行酶的活化，活化后的酶加入步骤4的发酵罐中，关闭放料口，进行酶解反应后，得到黑木耳酶解液，待用；
步骤6、制备黑木耳活性肽粉：将步骤5制得的黑木耳酶解液进行减压蒸馏，得到的浓缩液进行喷雾干燥，得到黑木耳活性肽粉；
步骤7、制备黑木耳活性肽液：将步骤6制得的黑木耳活性肽粉以一定的料液比溶于磁化强度为3～4T的磁化水中，得到黑木耳活性肽液。
本实施方式所述的一种黑木耳活性肽的制备方法，步骤1中新鲜的黑木耳为采用磁化水喷施生长出的黑木耳，磁化水的磁化强度为3～4T，黑木耳为菌包采摘下来的第二茬黑木耳。
本实施方式所述的一种黑木耳活性肽的制备方法，步骤1中通过超声波清洗机洗去杂质和灰尘，超声功率为500W，清洗后的黑木耳放入60℃真空烘干箱中干燥30min，再移入-60℃真空冻干机中冻干至无水程度，将冻干的黑木耳放到高速粉碎机中，在50000r/min转速下粉碎10min，过400目筛，得到黑木耳粉。
本实施方式所述的一种黑木耳活性肽的制备方法，步骤2中加入碳酸氢钠调节溶液pH值，磁化水的磁化强度为3～4T，控制溶液温度为60℃，搅拌速度为100r/min。
本实施方式所述的一种黑木耳活性肽的制备方法，步骤3中黑曲霉的纤维素酶和真菌淀粉酶的质量比为3:1，所述的黑曲霉的纤维素酶的酶活力为50万u/g，真菌淀粉酶的酶活力为30万u/g，所述的黑曲霉的纤维素酶和真菌淀粉酶的总量占黑木耳粉重量的0.5wt％，将所述的黑曲霉的纤维素酶和真菌淀粉酶加入到3000ml烧杯中，加入经过磁化强度为3～4T的60℃磁化水2000ml，搅拌条件下再加入50g葡萄糖，持续搅拌30min，完成酶的活化；酶解反应条件为调节搅拌速度为150r/min，温度为60℃，反应10h，将反应液通过134℃高温灭酶后，倒入干净的2t的发酵罐中。
本实施方式所述的一种黑木耳活性肽的制备方法，步骤4中食用菌水解酶、消化酶、大豆多肽水解酶、植物蛋白水解酶的质量比为1:1:1:1，所述的食用菌水解酶、消化酶、大豆多肽水解酶、植物蛋白水解酶的总量占黑木耳粉重量的0.8wt％，将所述的食用菌水解酶、消化酶、大豆多肽水解酶、植物蛋白水解酶加入到3000ml烧杯中，加入经过磁化强度为3～4T的60℃磁化水2000ml，搅拌条件下再加入50g蛋白胨，持续搅拌30min，完成酶的活化；酶解反应条件为调节搅拌速度为150r/min，温度为60℃，反应10h，将反应液通过134℃高温灭酶后，倒入干净的2t的发酵罐中。
本实施方式所述的一种黑木耳活性肽的制备方法，步骤5中木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶的质量比为1:2:3:2，所述的木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶的总量占黑木耳粉重量的0.8wt％，将所述的木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶加入到3000ml烧杯中，加入经过磁化强度为3～4T的60℃磁化水2000ml，搅拌条件下再加入50g蛋白胨，持续搅拌30min，完成酶的活化；酶解反应条件为调节搅拌速度为150r/min，温度为60℃，反应10h，将反应液通过134℃高温灭酶后，得到黑木耳酶解液。
本实施方式所述的一种黑木耳活性肽的制备方法，步骤6中的减压蒸馏为木耳发酵液转入蒸馏釜中进行蒸馏，在75℃下浓缩至原体积的1/4，得到浓缩液。
本实施方式所述的一种黑木耳活性肽的制备方法，步骤7中黑木耳活性肽粉和磁化水的料液比为1g:20ml。
本实施方式所述的一种黑木耳活性肽的制备方法制备的黑木耳活性肽，所述的黑木耳活性肽为溶液态或固体态。
本实施方式所述的一种黑木耳活性肽的制备方法制备的黑木耳活性肽，为澄清淡黄色液体，具有一定粘稠度；活性肽含量为30.32g/100g，其中分子量100-200占10.33％，分子量200-300占18.56％，分子量300-400占5.44％，分子量500-600占7.16％，分子量700-800占15.51％，分子量900-1000占18.55％，分子量1000-1500占20.47％，分子量1500-2000占3.98％。
具体实施方式二：
一种黑木耳活性肽的制备方法，包括如下步骤：
步骤1、原材料前处理：选取新鲜的木耳，洗去杂质和灰尘，清洗后的黑木耳真空干燥后，进行冻干、粉碎、过筛，得到黑木耳粉，待用；
步骤2、酶解前处理：称量步骤1制得的黑木耳粉20kg，置于2t的发酵罐中，然后加入1t磁化水,调节pH为8.2，在加热搅拌条件下，使料液混合均匀，保持一定温度的条件下，待用；
步骤3、第一步酶解：称量一定质量的黑曲霉的纤维素酶和真菌淀粉酶进行酶的活化，活化后的酶加入步骤2的发酵罐中，关闭放料口，进行酶解反应后，倒入干净的发酵罐中，待用；
步骤4、第二步酶解：称量一定质量的食用菌水解酶、消化酶、大豆多肽水解酶、植物蛋白水解酶进行酶的活化，活化后的酶加入步骤3的发酵罐中，关闭放料口，进行酶解反应后，倒入干净的发酵罐中，待用；
步骤5、第三步酶解：称量一定质量的木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶进行酶的活化，活化后的酶加入步骤4的发酵罐中，关闭放料口，进行酶解反应后，得到黑木耳酶解液，待用；
步骤6、制备黑木耳活性肽粉：将步骤5制得的黑木耳酶解液进行减压蒸馏，得到的浓缩液进行喷雾干燥，得到黑木耳活性肽粉；
步骤7、制备黑木耳活性肽液：将步骤6制得的黑木耳活性肽粉以一定的料液比溶于磁化强度为3～4T的磁化水中，得到黑木耳活性肽液。
本实施方式所述的的一种黑木耳活性肽的制备方法，通过发酵技术，利用复合酶对黑木耳大分子蛋白质进行靶向酶解，剪切蛋白质链，使其生成由2-10个氨基酸残基分子组成的具有生物活性的低聚肽，2-20个氨基酸残基分子组成的具有生物活性的功能肽，同时释放出其生物活性，从而提升了木耳原始生物活性成分可利用的量化水平，实现了营养物质的优化重组对人体有清涤胃肠和消化纤维素的作用。较传统食用木耳的方法吸收利用率提高10倍以上。改变了木耳传统的食用方法，从吃大分子量的蛋白质变成喝小分子量木耳肽，活性功效成分吸收率从5％-8％提高到85％以上。并且食用方便、快捷、安全。每天食用1瓶100毫升的黑木耳活性肽液相当于食用干木耳2公斤。
具体实施方式三：
根据具体实施方式二所述的一种黑木耳活性肽的制备方法，步骤1中新鲜的黑木耳为采用磁化水喷施生长出的黑木耳，磁化水的磁化强度为3～4T，黑木耳为菌包采摘下来的第二茬黑木耳。
具体实施方式四：
根据具体实施方式二所述的一种黑木耳活性肽的制备方法，步骤1中通过超声波清洗机洗去杂质和灰尘，超声功率为500W，清洗后的黑木耳放入60℃真空烘干箱中干燥30min，再移入-60℃真空冻干机中冻干至无水程度，将冻干的黑木耳放到高速粉碎机中，在50000r/min转速下粉碎10min，过400目筛，得到黑木耳粉。
具体实施方式五：
根据具体实施方式二所述的一种黑木耳活性肽的制备方法，步骤2中加入碳酸氢钠或碳酸钠调节溶液pH值，磁化水的磁化强度为3～4T，控制溶液温度为60℃，搅拌速度为100r/min。
具体实施方式六：
根据具体实施方式二所述的一种黑木耳活性肽的制备方法，步骤3中黑曲霉的纤维素酶和真菌淀粉酶的质量比为3:1，所述的黑曲霉的纤维素酶的酶活力为50万u/g，真菌淀粉酶的酶活力为30万u/g，所述的黑曲霉的纤维素酶和真菌淀粉酶的总量占黑木耳粉重量的0.5wt％，将所述的黑曲霉的纤维素酶和真菌淀粉酶加入到3000ml烧杯中，加入经过磁化强度为3～4T的60℃磁化水2000ml，搅拌条件下再加入50g葡萄糖，持续搅拌30min，完成酶的活化；酶解反应条件为调节搅拌速度为150r/min，温度为60℃，反应10h，将反应液通过134℃高温灭酶后，倒入干净的2t的发酵罐中。
具体实施方式七：
根据具体实施方式二所述的一种黑木耳活性肽的制备方法，步骤4中食用菌水解酶、消化酶、大豆多肽水解酶、植物蛋白水解酶的质量比为1:1:1:1，所述的食用菌水解酶、消化酶、大豆多肽水解酶、植物蛋白水解酶的总量占黑木耳粉重量的0.8wt％，将所述的食用菌水解酶、消化酶、大豆多肽水解酶、植物蛋白水解酶加入到3000ml烧杯中，加入经过磁化强度为3～4T的60℃磁化水2000ml，搅拌条件下再加入50g蛋白胨，持续搅拌30min，完成酶的活化；酶解反应条件为调节搅拌速度为150r/min，温度为60℃，反应10h，将反应液通过134℃高温灭酶后，倒入干净的2t的发酵罐中。
具体实施方式八：
根据具体实施方式二所述的一种黑木耳活性肽的制备方法，步骤5中木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶的质量比为1:2:3:2，所述的木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶的总量占黑木耳粉重量的0.8wt％，将所述的木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶加入到3000ml烧杯中，加入经过磁化强度为3～4T的60℃磁化水2000ml，搅拌条件下再加入50g蛋白胨，持续搅拌30min，完成酶的活化；酶解反应条件为调节搅拌速度为150r/min，温度为60℃，反应10h，将反应液通过134℃高温灭酶后，得到黑木耳酶解液。
具体实施方式九：
根据具体实施方式二所述的一种黑木耳活性肽的制备方法，步骤6中的减压蒸馏为木耳发酵液转入蒸馏釜中进行蒸馏，在75℃下浓缩至原体积的1/4，得到浓缩液。
具体实施方式十：
根据具体实施方式二所述的一种黑木耳活性肽的制备方法，步骤7中黑木耳活性肽粉和磁化水的料液比为1g:20～50ml。
具体实施方式十一：
根据具体实施方式二所述的一种黑木耳活性肽的制备方法制备的黑木耳活性肽，所述的黑木耳活性肽为粉末态或溶液态。
本实施方式所述的一种黑木耳活性肽的制备方法制备的黑木耳活性肽，为澄清淡黄色液体，具有一定粘稠度；活性肽含量为30.32g/100g，其中分子量100-200占10.33％，分子量200-300占18.56％，分子量300-400占5.44％，分子量500-600占7.16％，分子量700-800占15.51％，分子量900-1000占18.55％，分子量1000-1500占20.47％，分子量1500-2000占3.98％。
本实施方式所述的一种黑木耳活性肽的制备方法制备的黑木耳活性肽，具有以下功能，(1)调节体内的水分、电解质平衡；(2)为免疫系统制造对抗细菌和感染的抗体，提高免疫功能；(3)促进伤口愈合；(4)在体内制造酵素，有助于将食物转化为能量；(5)修复细胞，改善细胞代谢，防止细胞变性，能起到防癌的作用；(6)促进蛋白质、酶、酵素的合成与调控；(7)沟通细胞间、器官间信息的重要化学信使；(8)预防心脑血管疾病；(9)调节内分泌与神经系统；(10)改善消化系统、治疗慢性胃肠道疾病；(11)改善糖尿病、风湿、类风湿等疾病；(12)抗病毒感染、抗衰老，消除体内多余的自由基；(13)促进造血功能，治疗贫血，防止血小板聚集提高血红细胞的载养能力。
Claims (9)
1.一种黑木耳活性肽的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：
步骤1、原材料前处理：选取新鲜的木耳，洗去杂质和灰尘，清洗后的黑木耳真空干燥后，进行冻干、粉碎、过筛，得到黑木耳粉，待用；
步骤2、酶解前处理：称量步骤1制得的黑木耳粉20kg，置于2t的发酵罐中，然后加入1t磁化水,调节pH为8.2，在加热搅拌条件下，使料液混合均匀，保持一定温度的条件下，待用；
步骤3、第一步酶解：称量一定质量的黑曲霉的纤维素酶和真菌淀粉酶进行酶的活化，活化后的酶加入步骤2的发酵罐中，关闭放料口，进行酶解反应后，倒入干净的发酵罐中，待用；
步骤4、第二步酶解：称量一定质量的食用菌水解酶、消化酶、大豆多肽水解酶、植物蛋白水解酶进行酶的活化，活化后的酶加入步骤3的发酵罐中，关闭放料口，进行酶解反应后，倒入干净的发酵罐中，待用；
步骤5、第三步酶解：称量一定质量的木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶进行酶的活化，活化后的酶加入步骤4的发酵罐中，关闭放料口，进行酶解反应后，得到黑木耳酶解液，待用；
步骤6、制备黑木耳活性肽粉：将步骤5制得的黑木耳酶解液进行减压蒸馏，得到的浓缩液进行喷雾干燥，得到黑木耳活性肽粉；
步骤7、制备黑木耳活性肽液：将步骤6制得的黑木耳活性肽粉以一定的料液比溶于磁化强度为3～4T的磁化水中，得到黑木耳活性肽液。
2.根据权利要求1所述的一种黑木耳活性肽的制备方法，其特征在于：步骤1中新鲜的黑木耳为采用磁化水喷施生长出的黑木耳，磁化水的磁化强度为3～4T，黑木耳为菌包采摘下来的第二茬黑木耳。
3.根据权利要求1所述的一种黑木耳活性肽的制备方法，其特征在于：步骤1中通过超声波清洗机洗去杂质和灰尘，超声功率为500W，清洗后的黑木耳放入60℃真空烘干箱中干燥30min，再移入-60℃真空冻干机中冻干至无水程度，将冻干的黑木耳放到高速粉碎机中，在50000r/min转速下粉碎10min，过400目筛，得到黑木耳粉。
4.根据权利要求1所述的一种黑木耳活性肽的制备方法，其特征在于：步骤2中加入碳酸氢钠或碳酸钠调节溶液pH值，磁化水的磁化强度为3～4T，控制溶液温度为60℃，搅拌速度为100r/min。
5.根据权利要求1所述的一种黑木耳活性肽的制备方法，其特征在于：步骤3中黑曲霉的纤维素酶和真菌淀粉酶的质量比为3:1，所述的黑曲霉的纤维素酶的酶活力为50万u/g，真菌淀粉酶的酶活力为30万u/g，所述的黑曲霉的纤维素酶和真菌淀粉酶的总量占黑木耳粉重量的0.5wt％，将所述的黑曲霉的纤维素酶和真菌淀粉酶加入到3000ml烧杯中，加入经过磁化强度为3～4T的60℃磁化水2000ml，搅拌条件下再加入50g葡萄糖，持续搅拌30min，完成酶的活化；酶解反应条件为调节搅拌速度为150r/min，温度为60℃，反应10h，将反应液通过134℃高温灭酶后，倒入干净的2t的发酵罐中。
6.根据权利要求1所述的一种黑木耳活性肽的制备方法，其特征在于：步骤4中食用菌水解酶、消化酶、大豆多肽水解酶、植物蛋白水解酶的质量比为1:1:1:1，所述的食用菌水解酶、消化酶、大豆多肽水解酶、植物蛋白水解酶的总量占黑木耳粉重量的0.8wt％，将所述的食用菌水解酶、消化酶、大豆多肽水解酶、植物蛋白水解酶加入到3000ml烧杯中，加入经过磁化强度为3～4T的60℃磁化水2000ml，搅拌条件下再加入50g蛋白胨，持续搅拌30min，完成酶的活化；酶解反应条件为调节搅拌速度为150r/min，温度为60℃，反应10h，将反应液通过134℃高温灭酶后，倒入干净的2t的发酵罐中。
7.根据权利要求1所述的一种黑木耳活性肽的制备方法，其特征在于：步骤5中木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶的质量比为1:2:3:2，所述的木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶的总量占黑木耳粉重量的0.8wt％，将所述的木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶加入到3000ml烧杯中，加入经过磁化强度为3～4T的60℃磁化水2000ml，搅拌条件下再加入50g蛋白胨，持续搅拌30min，完成酶的活化；酶解反应条件为调节搅拌速度为150r/min，温度为60℃，反应10h，将反应液通过134℃高温灭酶后，得到黑木耳酶解液。
8.根据权利要求1所述的一种黑木耳活性肽的制备方法，其特征在于：步骤6中的减压蒸馏为木耳发酵液转入蒸馏釜中进行蒸馏，在75℃下浓缩至原体积的1/4，得到浓缩液。
9.根据权利要求1所述的一种黑木耳活性肽的制备方法，其特征在于：步骤7中黑木耳活性肽粉和磁化水的料液比为1g:20～50ml。
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