CN110801012A - 增强免疫力及抗疲劳的活性多糖复合营养素及制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种增强免疫力及抗疲劳的活性多糖复合营养素及其制备方法,按重量份计,其包括:香菇多糖10‑12份、海带多糖8‑10份、枸杞5‑8份、紫贻贝提取物10‑15份、有机硒蛋白粉10‑15份、核桃仁8‑10份、黑豆粉3‑5份、西洋参提取物2‑3份、五味子1‑2份、麦冬1‑2份、营养酵母1‑2份、L‑阿拉伯糖5‑10份,木糖醇5‑8份、胰酶0.2‑0.3份。其通过含有增强免疫力成分的组分合理复配使用,以达到提高机体免疫力、缓解疲劳的效果。
Description
技术领域
本发明涉及营养功能性食品与生物发酵领域。更具体地说,本发明涉及一种增强免疫力及抗疲劳的活性多糖复合营养素及制备方法。
背景技术
随着人们物质文化生活的改善和提高,人们对身体健康越来越重视,但是现在社会生活节奏越来越快,饮食不合理、睡眠不足、作息不正常已经成为常见现象。过度紧张,压力太大,现代人运动不足、长久的不良情绪等,都导致出于亚健康的人群日益增加,身体免疫力下降,易疲劳,导致容易生病,影响日常生活。
免疫力是指人体免疫系统抵御病原体感染的能力。免疫系统由胸腺、脾脏和淋巴组织等组成,其主要作用之一是机体防御功能,即保护机体不受损害,帮助机体消灭外来的细菌、病毒以及避免发生疾病。免疫力低下最直接的表现就是容易生病。因经常患病会加重机体的消耗,所以伴随有体质虚弱、营养不良、精神萎靡、疲乏无力、食欲降低、睡眠障碍等表现,长此以往会导致身体和智力发育不良,还易诱发重大疾病。
疲劳又称疲乏是主观上一种疲乏无力的不适,感觉疲劳不是特异症状,很多疾病都可引起疲劳,不同疾病引起不同程度的疲劳,持续过度疲劳既引发慢性咽喉炎、颈部或腋窝淋巴结肿痛、肌肉酸痛、多发性非关节炎性关节疼痛、头昏、头晕、头痛等病症,并最终导致免疫力下降;而免疫力下降之后,又使“疲劳综合症”更加突出和恶化,从而形成一个恶性循环。
目前,现有技术中提高免疫力、缓解疲劳,除调整日常生活习惯之外,可以补充微量元素、维生素等进行辅助,或者服用一些口服类药物。然而这些方法或药物取得的效果差,成分复杂,成本高,服用后往往还会出现耐药性等诸多副作用。
发明内容
为解决上述技术问题,本发明提供了一种增强免疫力及抗疲劳的活性多糖复合营养素及其制备方法,其采用反复急速升温、降温以及多阶段酶解、紫外辐射、脉冲磁场处理方式制备富含紫贻贝多糖和小分子肽等活性成分的紫贻贝提取物,同时采用黑曲霉菌种以及啤酒酵母作为发酵菌种,结合光照和磁场处理制备高皂苷含量的西洋参提取物,两者在通过与其他含有增强免疫力成分的组分合理复配使用,以达到提高机体免疫力、缓解疲劳的效果。
为了实现根据本发明的这些目的和其它优点,提供了一种增强免疫力及抗疲劳的活性多糖复合营养素,按重量份计,其包括:香菇多糖10-12份、海带多糖8-10份、枸杞5-8份、紫贻贝提取物10-15份、有机硒蛋白粉10-15份、核桃仁8-10份、黑豆粉3-5份、西洋参提取物2-3份、五味子1-2份、麦冬1-2份、营养酵母1-2份、L-阿拉伯糖5-10份,木糖醇5-8份、胰酶0.2-0.3份。
优选的,所述胰酶包括胰蛋白酶、胰淀粉酶和胰脂肪酶,且按重量份计,胰蛋白酶:胰淀粉酶:胰脂肪酶=1:1.5:2。
优选的,所述营养酵母为富硒酵母和/或富铬酵母。
优选的,所述紫贻贝提取物的制备方法包括如下步骤:
S11、将紫贻贝进行清洗、脱壳、采肉、去足丝;绞碎后冷冻干燥,再粉碎,以获得紫贻贝冻干粉;
S12、按重量份计,在反应釜中加入紫贻贝冻干粉20-25份、去离子水150-200份,获得酶解原料,再对所述酶解原料进行酶解处理;
所述酶解处理过程包括:
(4)酶解1:将所述酶解原料温度升至20-25℃,再对所述酶解原料进行降温处理,使其按照15℃/min的速率降至-45℃,降至-45℃后维持1min,再对所述酶解原料进行升温处理,使其按照10℃/min的速率升至20-25℃;升至20-25℃后,在所述酶解原料中加入其重量1%的碱性蛋白酶,调节酶解原料pH至7.0-9.0以及调节酶解原料温度至50-60℃,反应5-8h;
将经碱性蛋白酶处理的酶解原料温度调节至40-55℃,加入第一复合酶、壳聚糖、半胱氨酸以及亚硫酸钠后调节pH至6.0-6.5,同时对加入第一复合酶、壳聚糖、半胱氨酸以及亚硫酸钠后的酶解原料进行第一脉冲磁场处理和第一紫外辐射处理,处理时间为10-12h,以获得第一酶解体系;
按重量比计,酶解原料:第一复合酶:壳聚糖:半胱氨酸:亚硫酸钠=1:0.05:0.02:0.03:0.02,所述第一复合酶由磷脂酶、木瓜蛋白酶、风味酶组成,且按重量比计,磷脂酶:木瓜蛋白酶:风味酶=1:0.5:0.5;所述第一脉冲磁场处理为:采用磁场强度为2.5-3.5T的脉冲磁场对所述酶解原料进行20-30个脉冲处理;所述第一紫外辐射处理为:采用波长为180-280nm、功率为40W的紫外灯对酶解原料处理40-60min;
(5)酶解2:将所述第一酶解体系温度调整至20-25℃,再对所述第一酶解体系进行降温处理,使其按照10℃/min的速率降至-45℃,降至-45℃后维持0.5min,再对所述第一酶解第一酶解体系进行升温处理,使其按照10℃/min的速率升至20-25℃;升至20-25℃后,在所述第一酶解体系中加入其重量0.5%的酸性蛋白酶,调节第一酶解体系pH至4.0-6.0以及调节第一酶解体系温度至40-50℃,反应3-4h;
将经酸性蛋白酶处理的第一酶解体系温度调节至40-55℃,加入第二复合酶、壳聚糖、半胱氨酸以及亚硫酸钠后调节pH至6.0-6.5,同时对加入第二复合酶、壳聚糖、半胱氨酸以及亚硫酸钠后的第一酶解体系进行第二脉冲磁场处理和第二紫外辐射处理,处理时间为8-10h,以获得第二酶解体系;
按重量比计,第一酶解体系:第二复合酶:壳聚糖:半胱氨酸:亚硫酸钠=1:0.03:0.02:0.02:0.02,所述第二复合酶由磷脂酶、木瓜蛋白酶、风味酶组成,且按重量比计,磷脂酶:木瓜蛋白酶:风味酶=1:1:0.8;所述第二脉冲磁场处理为:采用磁场强度为2.0-3.0T的脉冲磁场对所述第一酶解体系进行10-12个脉冲处理;所述第二紫外辐射处理为:采用波长为280-320nm、功率为40W的紫外灯对第一酶解体系处理30-40min;
(6)酶解3:将所述第二酶解体系温度调整40-55℃,再对所述第二酶解体系进行降温处理,使其按照5℃/min的速率降至-45℃,降至-45℃后维持0.5min,再对所述第二酶解体系进行升温处理,使其按照10℃/min的速率升至20-25℃;升至20-25℃后,在所述第二酶解体系中加入其重量0.2%的中性蛋白酶,调节第二酶解体系pH至6.0-7.0以及调节第二酶解体系温度至50-60℃,反应1-2h;
将经中性蛋白酶处理的第二酶解体系温度调节至40-55℃,加入第三复合酶、壳聚糖、半胱氨酸以及亚硫酸钠后调节pH至6.0-6.5,同时对加入第三复合酶、壳聚糖、半胱氨酸以及亚硫酸钠后的第二酶解体系进行第三脉冲磁场处理和第三紫外辐射处理,处理时间为8-10h,以获得第三酶解体系;
按重量比计,第二酶解液:第三复合酶:壳聚糖:半胱氨酸:亚硫酸钠=1:0.02:0.01:0.02:0.02,所述第三复合酶由磷脂酶、木瓜蛋白酶、风味酶组成,且按重量比计,磷脂酶:木瓜蛋白酶:风味酶=1:1.2:1.2;所述第三脉冲磁场处理为:采用磁场强度为1.8-2.0T的脉冲磁场对所述酶解原料进行5-8个脉冲处理;所述第三紫外辐射处理为:采用波长为320-400nm、功率为40W的紫外灯对第二酶解体系处理20-30min;
S13、待酶解完成后,对获得的第三酶解体系升温至90℃,维持10min,以完成灭酶活过程,获得紫贻贝粗提体系;
S14、在紫贻贝粗提体系中按其重量的3%加入活性炭,搅拌均匀,在55℃下保温60-90min后离心,去沉渣后得到紫贻贝提取物清液;所述紫贻贝提取物清液在过滤压力0.25-0.35MPa下经硅藻土过滤,以获得紫贻贝粗提液;再在所述紫贻贝粗提液中按其重量3%加入活性炭,静置45-60min,然后离心,去沉渣后获得紫贻贝精提液;
S15、将步骤S14中的紫贻贝精提液经过微滤陶瓷膜进行过滤,操作温度控制在55-65℃,以获得微滤膜透过液;再将微滤膜透过液经过卷式超滤膜进行过滤,操作温度控制在55-65℃,以获得超滤膜透过液;再将超滤膜截留液经过卷式高压反渗透膜进行浓缩,除去水分及部分残留无机盐和小分子杂质,控制操作温度在35-40℃,以得到紫贻贝提取物浓缩液;
S16、通过真空冷冻干燥方法对紫贻贝提取物浓缩液进行干燥,以获得紫贻贝提取物。
5、如权利要求2所述的活性多糖复合营养素,其特征在于,酶解1和/或酶解2和/或酶解3中,进行脉冲磁场处理和紫外辐射处理的同时进行超声处理,超声功率为100-200W,超声处理时间为10-15min。
优选的,所述西洋参提取物的制备方法包括:
S21、将黑曲霉菌种以及啤酒酵母分别接种于独立的马铃薯葡萄糖琼脂培养基上,再分别放入培养箱中,均于28-35℃条件下活化48-72h,以获得活化的黑曲霉菌种以及啤酒酵母;采用配制好的第一液体培养基培养活化的黑曲霉菌种,以获得液态黑曲霉种子液,以及采用配制好的第二液体培养基培养活化的啤酒酵母,以获得液态啤酒酵母种子液;再将所述液态黑曲霉种子液接种到发酵罐中的第一发酵培养基内进行扩大培养,扩大培养温度30-35℃,转速500-800rpm条件下搅拌,培养时间为1-2d,以获得黑曲霉孢子悬浮液;以及将所述液态啤酒酵母种子液接种到发酵罐中的第二发酵培养基内进行扩大培养,扩大培养温度30-40℃,转速400-600rpm条件下搅拌,培养时间为1-2d,以获得啤酒酵母悬浮液;
S22、按重量份计,在反应釜中加入经粉碎的西洋参40-50份、去离子水200-400份、黑曲霉孢子悬浮液20-30份、啤酒酵母悬浮液10-15份、第三发酵培养基20-25份,以获得发酵体系,并调节所述发酵体系的pH至6.8-7.0;
对所述发酵体系进行三阶段的发酵处理:
第一发酵阶段处理中,发酵温度为25-35℃,并在转速300-400rpm条件下对发酵体系进行搅拌,同时对发酵体系进行第一光照处理和第一磁场处理,处理时间为1-2d;所述第一光照处理为:采用光强为25-30μmol.m-2.s-1的红光以及光强为30-35μmol.m-2.s-1的蓝光照射发酵体系,照射处理时间为40-60min;所述第一磁场处理为:采用50Hz、磁场强度为0.4-0.8mT的交变磁场对发酵体系进行磁场处理,磁场处理时间为40-60min;
第二发酵阶段处理中,发酵温度为25-35℃,并在转速500-600rpm条件下对发酵体系进行搅拌,同时对发酵体系进行第二光照处理和第二磁场处理,处理时间为1-2d;所述第二光照处理为:采用光强为20-24μmol.m-2.s-1的红光以及光强为24-28μmol.m-2.s-1的蓝光照射发酵体系,照射处理时间为30-40min;所述第二磁场处理为;采用50Hz、磁场强度为0.35-0.65mT的交变磁场对发酵体系进行磁场处理,磁场处理时间为30-40min;
第三发酵阶段处理中,发酵温度为25-35℃,并在转速300-400rpm条件下对发酵体系进行搅拌,同时对发酵体系进行第三光照处理和第三磁场处理,处理时间为1-2d;所述第三光照处理为:采用光强为16-20μmol.m-2.s-1的红光以及光强为20-22μmol.m-2.s-1的蓝光照射发酵体系,照射处理时间为20-30min;所述第三磁场处理为:采用50Hz、磁场强度为0.25-0.55mT的交变磁场对发酵体系进行磁场处理,磁场处理时间为20-30min;
S23、将经步骤S12中发酵处理的发酵体系溶液置于微波加热器中,所述微波加热器的压强为0.1-0.3个大气压,微波功率为800-850W,加热40-45min;
以及S24、将经步骤S23处理得到的溶液进行加压浓缩,使其体积缩小至原来体积的10-20%降温至20-25℃后过滤分离得到水相和固相;固相用去离子水溶解,再经活性炭脱色、真空干燥以及粉碎过筛后得到西洋参提取物。
优选的,所述步骤S22中,每天对接种到第一发酵培养基中的液态黑曲霉种子液进行超声处理,且超声处理频率为20-40Khz,处理时间为30min。
还提供一种增强免疫力及抗疲劳的活性多糖复合营养素的制备方法,其包括:
S100、称取上述重量份的枸杞、核桃仁、五味子、麦冬,粉碎备用;称取权利要求1中所述重量份的香菇多糖、海带多糖、紫贻贝提取物、有机硒蛋白粉、黑豆粉、西洋参提取物进行混合,以获得混合物,并在所述混合物中边搅拌边加入去离子水溶解,搅拌转速500-800rpm;且搅拌的同时加入营养酵母、L-阿拉伯糖、木糖醇以及粉碎的枸杞、核桃仁、五味子、麦冬,得到原料混合体系;
S200、将原料混合体系浓缩至60℃时相对密度为1.20±1.22的浓缩体系,再对浓缩体系进行减压干燥,即获得所述增强免疫力及抗疲劳的活性多糖复合营养素。
本发明至少包括以下有益效果:
其采用反复急速升温、降温以及多阶段酶解、紫外辐射、脉冲磁场处理方式破坏紫贻贝细胞膜结构使其细胞内部的紫贻贝多糖、小分子肽等活性成分充分析出,有利于人体吸收;采用黑曲霉菌种以及啤酒酵母作为发酵菌种,充分破坏其细胞壁结构,使其内容物可充分析出,同时结合光照和磁场处理促进黑曲霉菌种以及啤酒酵母的生长,进一步提高西洋参提取物中的皂苷含量,两者在通过与其他含有增强免疫力成分的组分合理复配使用,以达到提高机体免疫力、缓解疲劳的效果。
本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现,部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。
具体实施方式
下面结合实例对本发明做进一步的详细说明,以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
应当理解,本文所使用的诸如“具有”、“包含”以及“包括”术语并不配出一个或多个其它元件或其组合的存在或添加。
需要说明的是,下述实施方案中所述试验方法,如无特殊说明,均为常规方法,所述试剂和材料,如无特殊说明,均可从商业途径获得。
<实施例1>
按重量份计,本实施例中的增强免疫力及抗疲劳的活性多糖复合营养素包括:香菇多糖10份、海带多糖8份、枸杞5份、紫贻贝提取物10份、有机硒蛋白粉10份、核桃仁9份、黑豆粉4份、西洋参提取物2份、五味子1份、麦冬1份、营养酵母1份、L-阿拉伯糖6份,木糖醇5份、胰酶0.2份。其中,所述营养酵母包括富硒酵母和/或富铬酵母;所述胰酶包括胰酶含胰蛋白酶、胰淀粉酶和胰脂肪酶,且按重量份计,胰蛋白酶:胰淀粉酶:胰脂肪酶=1:1.5:2。
紫贻贝(MytilusedulisLinnaeus)俗称海虹,属软体动物门,广泛分布于我国辽宁、山东、浙江等省沿海。紫贻贝资源丰富,肉味鲜美,营养价值高,素有“海洋鸡蛋”之称,并且紫贻贝多糖具有抗凝血、抗肿瘤、免疫功能调节等生物活性。因此,本实施例中提供了一种紫贻贝提取物的制备方法,其包括如下步骤:
S11、将紫贻贝进行清洗、脱壳、采肉、去足丝;绞碎后冷冻干燥,再粉碎,以获得紫贻贝冻干粉;
S12、按重量份计,在反应釜中加入紫贻贝冻干粉20-25份(优选22份)、去离子水150-200份(优选180份),获得酶解原料,再对所述酶解原料进行酶解处理;
所述酶解处理过程包括:
(7)酶解1:将所述酶解原料温度升至20-25℃,再对所述酶解原料进行降温处理,使其按照15℃/min的速率降至-45℃,降至-45℃后维持1min,再对所述酶解原料进行升温处理,使其按照10℃/min的速率升至20-25℃;升至20-25℃后,在所述酶解原料中加入其重量1%的碱性蛋白酶,调节酶解原料pH至7.0-9.0(优选8.0)以及调节酶解原料温度至50-60℃(优选55℃),反应5-8h(优选6h);
将经碱性蛋白酶处理的酶解原料温度调节至40-55℃(优选50℃),加入第一复合酶、壳聚糖、半胱氨酸以及亚硫酸钠后调节pH至6.0-6.5,同时对加入第一复合酶、壳聚糖、半胱氨酸以及亚硫酸钠后的酶解原料进行第一脉冲磁场处理和第一紫外辐射处理,处理时间为10-12h(优选11h),以获得第一酶解体系;
按重量比计,酶解原料:第一复合酶:壳聚糖:半胱氨酸:亚硫酸钠=1:0.05:0.02:0.03:0.02,所述第一复合酶由磷脂酶、木瓜蛋白酶、风味酶组成,且按重量比计,磷脂酶:木瓜蛋白酶:风味酶=1:0.5:0.5;所述第一脉冲磁场处理为:采用磁场强度为2.5-3.5T(优选为3.0T)的脉冲磁场对所述酶解原料进行20-30个(优选25个)脉冲处理;所述第一紫外辐射处理为:采用波长为180-280nm、功率为40W的紫外灯对酶解原料处理40-60min(优选50min);
(8)酶解2:将所述第一酶解体系温度调整至20-25℃,再对所述第一酶解体系进行降温处理,使其按照10℃/min的速率降至-45℃,降至-45℃后维持0.5min,再对所述第一酶解第一酶解体系进行升温处理,使其按照10℃/min的速率升至20-25℃;升至20-25℃后,在所述第一酶解体系中加入其重量0.5%的酸性蛋白酶,调节第一酶解体系pH至4.0-6.0(优选8.0)以及调节第一酶解体系温度至40-50℃(优选45℃),反应3-4h(优选3.5h);
将经酸性蛋白酶处理的第一酶解体系温度调节至40-55℃(优选50℃),加入第二复合酶、壳聚糖、半胱氨酸以及亚硫酸钠后调节pH至6.0-6.5,同时对加入第二复合酶、壳聚糖、半胱氨酸以及亚硫酸钠后的第一酶解体系进行第二脉冲磁场处理和第二紫外辐射处理,处理时间为8-10h(优选9h),以获得第二酶解体系;
按重量比计,第一酶解体系:第二复合酶:壳聚糖:半胱氨酸:亚硫酸钠=1:0.03:0.02:0.02:0.02,所述第二复合酶由磷脂酶、木瓜蛋白酶、风味酶组成,且按重量比计,磷脂酶:木瓜蛋白酶:风味酶=1:1:0.8;所述第二脉冲磁场处理为:采用磁场强度为2.0-3.0T(优选2.5T)的脉冲磁场对所述第一酶解体系进行10-12个(优选11个)脉冲处理;所述第二紫外辐射处理为:采用波长为280-320nm、功率为40W的紫外灯对第一酶解体系处理30-40min(优选35min);
(9)酶解3:将所述第二酶解体系温度调整40-55℃(优选50℃),再对所述第二酶解体系进行降温处理,使其按照5℃/min的速率降至-45℃,降至-45℃后维持0.5min,再对所述第二酶解体系进行升温处理,使其按照10℃/min的速率升至20-25℃;升至20-25℃后,在所述第二酶解体系中加入其重量0.2%的中性蛋白酶,调节第二酶解体系pH至6.0-7.0(优选6.5)以及调节第二酶解体系温度至50-60℃(优选55℃),反应1-2h(优选1.5h);
将经中性蛋白酶处理的第二酶解体系温度调节至40-55℃(优选50℃),加入第三复合酶、壳聚糖、半胱氨酸以及亚硫酸钠后调节pH至6.0-6.5,同时对加入第三复合酶、壳聚糖、半胱氨酸以及亚硫酸钠后的第二酶解体系进行第三脉冲磁场处理和第三紫外辐射处理,处理时间为8-10h(优选9),以获得第三酶解体系;
按重量比计,第二酶解液:第三复合酶:壳聚糖:半胱氨酸:亚硫酸钠=1:0.02:0.01:0.02:0.02,所述第三复合酶由磷脂酶、木瓜蛋白酶、风味酶组成,且按重量比计,磷脂酶:木瓜蛋白酶:风味酶=1:1.2:1.2;所述第三脉冲磁场处理为:采用磁场强度为1.8-2.0T(优选1.9T)的脉冲磁场对所述酶解原料进行5-8个(优选6个)脉冲处理;所述第三紫外辐射处理为:采用波长为320-400nm、功率为40W的紫外灯对第二酶解体系处理20-30min(优选25min);
上述步骤中,通过急速降温至-45℃使得细胞膜内部产生冰晶,以刺穿细胞膜结构,再急速升温至20-25℃融化冰晶,如此反复可使得细胞膜结构在短时间内急速受到温度冲击而产生结构上的破坏,促使其内容物析出,各种蛋白酶、风味酶进一步对析出的大分子蛋白质进行水解,以形成容易被机体吸收的小分子肽和氨基酸,此外壳聚糖、半胱氨酸以及亚硫酸钠均可以改变细胞膜透性,磷脂酶可通过水解蛋白质影响细胞膜结构,紫外辐射可对细胞膜进行氧化,脉冲磁场也可影响细胞膜结构,使得细胞膜上形成穿孔,上述各种因素均能改变紫贻贝细胞膜的透性,促使其内部的紫贻贝多糖和蛋白质等析出,使其更容易被人体吸收利用,以此增加机体免疫力,缓解疲劳;
S13、待酶解完成后,对获得的第三酶解体系升温至90℃,维持10min,以完成灭酶活过程,获得紫贻贝粗提体系;
S14、在紫贻贝粗提体系中按其重量的3%加入活性炭,搅拌均匀,在55℃下保温60-90min(优选80min)后离心,去沉渣后得到紫贻贝提取物清液;所述紫贻贝提取物清液在过滤压力0.25-0.35MPa下经硅藻土过滤,以获得紫贻贝粗提液;再在所述紫贻贝粗提液中按其重量3%加入活性炭,静置45-60min,然后离心,去沉渣后获得紫贻贝精提液;
S15、将步骤S14中的紫贻贝精提液经过微滤陶瓷膜进行过滤,操作温度控制在55-65℃,以获得微滤膜透过液;再将微滤膜透过液经过卷式超滤膜进行过滤,操作温度控制在55-65℃,以获得超滤膜透过液;再将超滤膜截留液经过卷式高压反渗透膜进行浓缩,除去水分及部分残留无机盐和小分子杂质,控制操作温度在35-40℃,以得到紫贻贝提取物浓缩液;
S16、通过真空冷冻干燥方法对紫贻贝提取物浓缩液进行干燥,以获得紫贻贝提取物。
优选的,酶解1和/或酶解2和/或酶解3中,进行脉冲磁场处理和紫外辐射处理的同时进行超声处理,超声功率为100-200W(优选为150W),超声处理时间为10-15min,以此通过结合超声处理方式进一步提高活性成本的得率。
西洋参中的皂苷可以有效增强中枢神经,达到静心凝神、消除疲劳、增强记忆力等作用,可适用于失眠、烦躁、记忆力衰退及老年痴呆等症状。由此,本实施例提供了一种西洋参发酵粉的制备方法,其包括如下步骤:
S21、将黑曲霉菌种以及啤酒酵母分别接种于独立的马铃薯葡萄糖琼脂培养基上,再分别放入培养箱中,均于28-35℃(优选32℃)条件下活化48-72h(优选60h),以获得活化的黑曲霉菌种以及啤酒酵母;采用配制好的第一液体培养基培养活化的黑曲霉菌种,以获得液态黑曲霉种子液,以及采用配制好的第二液体培养基培养活化的啤酒酵母,以获得液态啤酒酵母种子液;再将所述液态黑曲霉种子液接种到发酵罐中的第一发酵培养基内进行扩大培养,扩大培养温度30-35℃(优选32℃),转速500-800rpm条件下搅拌,培养时间为1-2d,以获得黑曲霉孢子悬浮液;以及将所述液态啤酒酵母种子液接种到发酵罐中的第二发酵培养基内进行扩大培养,扩大培养温度30-40℃(优选35℃),转速400-600rpm条件下搅拌,培养时间为1-2d,以获得啤酒酵母悬浮液;优选的,为提高培养效率,上述扩大培养过程中,每天对接种有液态黑曲霉种子液的第一发酵培养基进行超声处理,且超声处理频率为20-40Khz,处理时间为30min;
其中,所述步骤S11中,按重量比计,第一液体培养基包括:茶多酚1%、蔗糖1.5%、葡萄糖2.5%、麦芽提取物5%、CoCl.6H2O0.1%、CuSO4.5H2O0.05%、FeNaEDTA2%、H3BO30.25%、Na2MoO4.2H2O0.15%、ZnSO4.7H2O0.1%、MgSO40.1%、KNO30.1%、MnSO4.H2O0.2%、去离子水86.95%;
所述步骤S11中,按重量比计,第二液体培养基包括:麦芽汁35%、葡萄糖10%、蛋白胨15%、ZnSO4.7H2O0.1%、CH3COONa0.15%、MgSO40.1%、K2HPO4·3H2O0.1%、MnSO4.H2O0.2%、去离子水44.35%;
按重量比计,所述第一发酵培养基包括:番茄汁10%、可溶性淀粉2%、蔗糖2%、葡萄糖2%、玉米粉2.5%、FeSO4.7H2O0.1%、MgSO40.05%、KNO30.05%、CuCl2.2H2O0.1%、(NH4)6Mo7O24.7H2O0.15%、MnSO4.H2O0.1%、去离子水80.95%;
按重量比计,所述第二发酵培养基包括:豆芽汁15%、蛋白胨10%、玉米粉8%、葡萄糖10%、NaCl0.5%、MgSO40.05%、K2HPO4·3H2O0.15%、MnSO4.H2O0.2%、去离子水56.1%;
S22、按重量份计,在反应釜中加入经粉碎的西洋参40-50份(优选45份)、去离子水200-400份(优选300份)、黑曲霉孢子悬浮液20-30份(优选25份)、啤酒酵母悬浮液10-15份(优选2份)、第三发酵培养基20-25份(优选22份),以获得发酵体系,并调节所述发酵体系的pH至6.8-7.0;其中,按重量比计,所述第三发酵培养基包括:麦芽糊精3%、豆粕粉4.5%、木糖5%、酵母膏1%、La(NO3)3.6H2O0.05%、纤维素酶0.15%、无水乙醇3%、果胶酶0.15%、MgSO40.05%、K2HPO4·3H2O0.1%、NH4NO30.15%、MnSO4.H2O0.1%、去离子水82.75%;
对所述发酵体系进行三阶段的发酵处理:
第一发酵阶段处理中,发酵温度为25-35℃(优选32℃),并在转速300-400rpm条件下对发酵体系进行搅拌,同时对发酵体系进行第一光照处理和第一磁场处理,处理时间为1-2d;所述第一光照处理为:采用光强为25-30μmol.m-2.s-1(优选28μmol.m-2.s-1)的红光以及光强为30-35μmol.m-2.s-1(优选32μmol.m-2.s-1)的蓝光照射发酵体系,照射处理时间为40-60min(优选50min);所述第一磁场处理为:采用50Hz、磁场强度为0.4-0.8mT(优选0.6mT)的交变磁场对发酵体系进行磁场处理,磁场处理时间为40-60min(优选50min);
第二发酵阶段处理中,发酵温度为25-35℃(优选32℃),并在转速500-600rpm条件下对发酵体系进行搅拌,同时对发酵体系进行第二光照处理和第二磁场处理,处理时间为1-2d;所述第二光照处理为:采用光强为20-24μmol.m-2.s-1(优选22μmol.m-2.s-1)的红光以及光强为24-28μmol.m-2.s-1(优选25μmol.m-2.s-1)的蓝光照射发酵体系,照射处理时间为30-40min(优选35min);所述第二磁场处理为;采用50Hz、磁场强度为0.35-0.65mT(优选0.5mT)的交变磁场对发酵体系进行磁场处理,磁场处理时间为30-40min(优选35min);
第三发酵阶段处理中,发酵温度为25-35℃(优选32℃),并在转速300-400rpm条件下对发酵体系进行搅拌,同时对发酵体系进行第三光照处理和第三磁场处理,处理时间为1-2d;所述第三光照处理为:采用光强为16-20μmol.m-2.s-1(优选18μmol.m-2.s-1)的红光以及光强为20-22μmol.m-2.s-1(优选21μmol.m-2.s-1)的蓝光照射发酵体系,照射处理时间为20-30min(优选25min);所述第三磁场处理为:采用50Hz、磁场强度为0.25-0.55mT(优选0.4mT)的交变磁场对发酵体系进行磁场处理,磁场处理时间为20-30min(优选25min);
黑曲霉菌种和啤酒酵母均可通过产生纤维素酶来破坏细胞壁结构。因此本步骤中采用黑曲霉菌种和啤酒酵母作为发酵菌种,分别用特定的培养基活化、扩大培养后在对西洋参原料进行三阶段发酵。进一步的,三阶段发酵处理中,红光以及蓝光也能通过调节细胞质膜的通透性来促进其同化作用,并提高酶活,交变磁场则通过细胞膜上钙离子的释放来促进黑曲霉和啤酒酵母的生长,进一步提高纤维素酶的产量和活力。同时,为避免红光、蓝光以及交变磁场长期在恒定数值而对黑曲霉和啤酒酵母的生长产生不良影响,每一发酵阶段红光、蓝光的光强、交变磁场的强度均逐步递减,由此保证黑曲霉和啤酒酵母始终处于较强的生长活力中,以此持续高效产生高活力纤维素酶,进一步提高西洋参提取物中活性成分(如皂苷等)的含量;
S23、将经步骤S22中发酵处理的发酵体系溶液置于微波加热器中,所述微波加热器的压强为0.1-0.3个大气压,微波功率为800-850W,加热40-45min;
以及S24、将经步骤S23处理得到的溶液进行加压浓缩,使其体积缩小至原来体积的10-20%降温至常温后过滤分离得到水相和固相;固相用去离子水溶解,再经活性炭脱色、真空干燥以及粉碎过筛后得到西洋参发酵粉。
<实施例2>
本实施例与实施例1的不同之处仅在于,按重量份计,本实施例中的增强免疫力及抗疲劳的活性多糖复合营养素由以下组分组成:香菇多糖12份、海带多糖10份、枸杞8份、紫贻贝提取物15份、有机硒蛋白粉12份、核桃仁10份、黑豆粉5份、西洋参提取物3份、五味子2份、麦冬2份、营养酵母2份、L-阿拉伯糖10份,木糖醇8份、胰酶0.25份、水42份。
<实施例3>
本实施例与实施例1的不同之处仅在于,按重量份计,本实施例中的增强免疫力及抗疲劳的活性多糖复合营养素有以下组分组成:香菇多糖11份、海带多糖9份、枸杞7份、紫贻贝提取物12份、有机硒蛋白粉13份、核桃仁9份、黑豆粉4份、西洋参提取物2.5份、五味子1.5份、麦冬1.5份、营养酵母1.5份、L-阿拉伯糖7份,木糖醇6份、胰酶0.3份、水45份。
<紫贻贝提取物检测>
先以紫贻贝干粉作为原料,将原料先用碱液调节pH值至8.0-10.0得混合液;再将混合液温度升至45℃搅拌预热,按原料质量的3%加入蛋白酶进行酶解,酶解温度为45℃,酶解时间2小时;将所得酶解产物经灭酶处理,得酶解液;将酶解液置于高压罐中,在120℃下先加压到0.3Mpa,并保持15min;采用超滤膜截留上述高压罐中的酶解液;对经超滤后的酶解液进行干燥,以获得作为对比例1的紫贻贝提取物。再将其与通过本发明实施例1-3中的制备方法获得的紫贻贝提取物进行检测,获得如表1所示的紫贻贝提取物多肽分子量大小及分布范围;以及表2所示的游离氨基酸的种类和含量,以及表3所示的多糖含量和蛋白含量。
表1紫贻贝提取物多肽分子量大小及分布范围
从表1中可以看出,本发明的紫贻贝提取物制备方法中,可通过各种蛋白酶以及风味酶等多种酶类的协同作用,进一步可将大分子蛋白质分解为更容易被胃肠吸收的小分子多肽和氨基酸,由此提高机体免疫力,缓解疲劳。其中,本发明制备获得的紫贻贝提取物中,蛋白肽平均分子量约为800Da,其中1000Da以下的多肽占82%,500Da以下的多肽占44%,由此可便于人体胃肠快速、高效吸收,使其充分发挥其功效。
表2紫贻贝提取物游离氨基酸的种类和含量
从表2中可以看出,与对比例1相比,本发明制备的紫贻贝提取物中,通过各种蛋白酶以及风味酶等多种酶类的充分水解,其能检出18种氨基酸,且每种的含量均有显著增加。
表3紫贻贝提取物多糖含量和蛋白含量
多糖(%) | 蛋白(%) | |
对比例1 | 45.11±2.13 | 4.15±0.91 |
实施例1 | 80.11±1.01 | 7.59±0.19 |
实施例2 | 81.65±2.33 | 7.28±1.12 |
实施例3 | 81.47±2.14 | 7.07±0.93 |
从表3中可以看出,本发明的紫贻贝提取物制备方法中,通过充分酶解,与对比例1相比,其多糖和蛋白含量均有显著提高,而多糖和蛋白质、氨基酸等均是用于提高免疫力,缓解身体疲劳的活性成分。
<西洋参发酵粉检测>
先以西洋参为原料,经粉碎后备用;采用纤维素酶对西洋参进行酶解,获得西洋参酶解液,然后对西洋参酶解液进行灭活处理,过筛备用;以西洋参酶解液、碳源、氮源和水配制发酵培养基,然后接种米曲霉菌培养液,在40-50℃下发酵2-3天,得到酵素液;对所得的酵素液进行过滤,所得上清液浓缩,获得作为对比例2的西洋参提取物。再将其与通过实施例1-3中的方法制备获得的西洋参提取物进行检测,以获得人参皂苷总皂苷含以及不同类型人参皂苷(Rg1、Rg2、Rg3、Rb1、Rh1、Rh2、Re、Rf)含量,其结果如表4所示。
表4人参皂苷总皂苷量以及不同类型人参皂苷含量
从表1中可以看出,通过本发明方法制备的西洋参提取物中,皂苷总量约为对比例2的2.3倍,且其中Rg1、Rg2、Rg3、Rb1、Rh1、Rh2、Re、Rf这几种人参皂苷的含量相对对比例1而言也由及其显著的增长,由此说明本发明中将黑曲霉菌种和啤酒酵母作为发酵菌种,同时结合特殊的三阶段发酵工艺,可极大提高纤维素酶的产量和活力,进一步提高西洋参提取物中活性成分(如皂苷等)的含量。
<实施例4>
本实施例还提供了一种增强免疫力及抗疲劳的活性多糖复合营养素的制备方法,其包括:
S100、称取如实施例1-3之一中所述重量份的枸杞、核桃仁、五味子、麦冬,粉碎备用;称取如实施例1-3之一中所述重量份的香菇多糖、海带多糖、紫贻贝提取物、有机硒蛋白粉、黑豆粉、西洋参提取物进行混合,以获得混合物,并在所述混合物中边搅拌边加入去离子水溶解,搅拌转速500-800rpm(优选650rpm);且搅拌的同时加入营养酵母、L-阿拉伯糖、木糖醇、胰酶以及粉碎的枸杞、核桃仁、五味子、麦冬,得到原料混合体系;
S200、将原料混合体系浓缩至60℃时相对密度为1.20±1.22的浓缩体系,再对浓缩体系进行减压干燥,即获得所述增强免疫力及抗疲劳的活性多糖复合营养素。
<提高免疫力功效评价试验>
实验选取6周龄雌性小鼠,按体重分为4组。本发明中的多糖复合营养素(以下均为“多糖复合营养素”)的人体推荐剂量为0.4g/d·kg,小鼠的等效剂量相当于人体推荐剂量的10倍。分别以人体推荐剂量5倍、10倍和30倍作为低、中、高剂量组。采取灌胃法,每日灌胃一次,对照组灌蒸馏水。各组小鼠连续给予多糖复合营养素30天后,测定各项指标。
给药第30天,称体重。处死小鼠,取脾脏和胸腺,称重,并计算脏器系数,脾(胸腺)比值=脾(胸腺)重量/体重量;同时测量足趾肿胀差值,其结果如表5所示。
表5多糖复合营养素对小鼠胸腺、脾脏质量的影响
由表5可见,经口给予本发明的多糖复合营养素30天后,小鼠不同剂量的受试物30天后,与空白对照组相比,各剂量组胸腺、脾脏/体重比值均无显著差异(p>0.05),说明本发明的多糖复合营养素服用不会对脾脏和胸腺产生不良刺激,脾脏和胸腺可正常发挥其生理功能。同时,服用本发明的多糖复合营养素后,低、中、高剂量组的足趾肿胀差值与空白对照组相比有明显差异(p<0.05),说明多糖复合营养素能够显著提高机体的细胞免疫能力。
进一步的,给药第30天,每只鼠腹腔内注射1ml20%(V/V)鸡红细胞悬液,取腹腔液滴片后37℃温育30min,固定,染色后显微镜计数巨噬细胞,计算吞噬指数和吞噬率。吞噬指数=被吞噬的鸡红细胞总数/计数的吞噬细胞数;吞噬率=吞噬鸡红细胞的吞噬细胞数/计数的吞噬细胞数×100%,其结果如表6所示。
表6多糖复合营养素对小鼠吞噬细胞吞噬功能的影响
通过小鼠腹腔注射鸡红细胞的吞噬细胞总数,可判断巨噬细胞的吞噬功能。由表6可见,经口给予小鼠不同剂量的多糖复合营养素30天后,低、中、高剂量组吞噬率均显著高于空白对照组(P<0.05)。
<缓解体力疲劳功效评价试验>
选取7周龄的小鼠200只,体重在17-19g之间,随机分为4组,实验组每日通过灌胃的形式每日服用0.5mL的多糖复合营养素,空白对照组用相同体积的蒸馏水代替。连续喂养20天后,第21天进行各指标的测定。
(1)肌糖原含量的测定:断头处死小鼠后立即取肝脏用蒽酮比色法测定肝糖原含量。肌糖原含量的测定:取双后肢肌肉用蒽酮比色法测定肌糖原含量。检测结果如表7所示。
(2)血糖的测定:取尾部血测定每只小鼠安静时及在(30±2)℃下,25cm深水中负重(体重3%)有用60min后的血糖含量。检测结果如表8所示。
(3)小鼠运动耐力实验:将小鼠放入(30±2)℃,水深30cm清水中,记录动物入水至力竭而沉入水中并持续8s不能浮出水面的小鼠游泳耐力时间。检测结果如表9所示。
表7多糖复合营养素对肝糖原、肌糖原含量的影响
如表7所示,小鼠在服用多糖复合营养素20天后,实验组的肌糖原含量和肝糖原含量相比于空白对照组有明显的增加,证明本发明中的多糖复合营养素具有增加肌体糖原储备、提高免疫力、抗疲劳的功效。
表8多糖复合营养素对小鼠血糖含量的影响
由表8可看出,四组小鼠在运动前的血糖含量没有显著性差异,负重游泳1h后,实验组相对于对照组血糖下降的含量明显减少。负重游泳1h后,实验组的血糖水平均高于空白对照组,实验证明本发明多糖复合营养素具有在剧烈运动时维持血糖水平、抗疲劳的功效。
表9多糖复合营养素对小鼠持续游泳时间(min)的影响
由表9可见,小鼠在服用本发明的多糖复合营养素后,从入水到力竭的时间明显增加,结果表明多糖复合营养素具有明显的抗疲劳、增强体力的效果。
需要说明的是,上述实施例1至4中的技术特征可进行任意组合,且组合而成的技术方案均属于本发明的保护范围。
综上所述,本发明采用反复急速升温、降温以及多阶段酶解、紫外辐射、脉冲磁场处理方式破坏紫贻贝细胞膜结构使其细胞内部的紫贻贝多糖、小分子肽等活性成分充分析出,有利于人体吸收;采用黑曲霉菌种以及啤酒酵母作为发酵菌种,充分破坏其细胞壁结构,使其内容物可充分析出,同时结合光照和磁场处理促进黑曲霉菌种以及啤酒酵母的生长,进一步提高西洋参提取物中的皂苷含量,两者在通过与其他含有增强免疫力成分的组分合理复配使用,以达到提高机体免疫力、缓解疲劳的效果。
这里说明的设备数量和处理规模是用来简化本发明的说明的。对本发明的应用、修改和变化对本领域的技术人员来说是显而易见的。
尽管本发明的实施方案已公开如上,但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用,它完全可以被适用于各种适合本发明的领域,对于熟悉本领域的人员而言,可容易地实现另外的修改,因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下,本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的实例。
Claims (8)
1.增强免疫力及抗疲劳的活性多糖复合营养素,其特征在于,按重量份计,其包括:香菇多糖10-12份、海带多糖8-10份、枸杞5-8份、紫贻贝提取物10-15份、有机硒蛋白粉10-15份、核桃仁8-10份、黑豆粉3-5份、西洋参提取物2-3份、五味子1-2份、麦冬1-2份、营养酵母1-2份、L-阿拉伯糖5-10份,木糖醇5-8份、胰酶0.2-0.3份。
2.如权利要求1所述的活性多糖复合营养素,其特征在于,所述胰酶包括胰蛋白酶、胰淀粉酶和胰脂肪酶,且按重量份计,胰蛋白酶:胰淀粉酶:胰脂肪酶=1:1.5:2。
3.如权利要求1所述的活性多糖复合营养素,其特征在于,所述营养酵母为富硒酵母和/或富铬酵母。
4.如权利要求1所述的活性多糖复合营养素,其特征在于,所述紫贻贝提取物的制备方法包括如下步骤:
S11、将紫贻贝进行清洗、脱壳、采肉、去足丝;绞碎后冷冻干燥,再粉碎,以获得紫贻贝冻干粉;
S12、按重量份计,在反应釜中加入紫贻贝冻干粉20-25份、去离子水150-200份,获得酶解原料,再对所述酶解原料进行酶解处理;
所述酶解处理过程包括:
(1)酶解1:将所述酶解原料温度升至20-25℃,再对所述酶解原料进行降温处理,使其按照15℃/min的速率降至-45℃,降至-45℃后维持1min,再对所述酶解原料进行升温处理,使其按照10℃/min的速率升至20-25℃;升至20-25℃后,在所述酶解原料中加入其重量1%的碱性蛋白酶,调节酶解原料pH至7.0-9.0以及调节酶解原料温度至50-60℃,反应5-8h;
将经碱性蛋白酶处理的酶解原料温度调节至40-55℃,加入第一复合酶、壳聚糖、半胱氨酸以及亚硫酸钠后调节pH至6.0-6.5,同时对加入第一复合酶、壳聚糖、半胱氨酸以及亚硫酸钠后的酶解原料进行第一脉冲磁场处理和第一紫外辐射处理,处理时间为10-12h,以获得第一酶解体系;
按重量比计,酶解原料:第一复合酶:壳聚糖:半胱氨酸:亚硫酸钠=1:0.05:0.02:0.03:0.02,所述第一复合酶由磷脂酶、木瓜蛋白酶、风味酶组成,且按重量比计,磷脂酶:木瓜蛋白酶:风味酶=1:0.5:0.5;所述第一脉冲磁场处理为:采用磁场强度为2.5-3.5T的脉冲磁场对所述酶解原料进行20-30个脉冲处理;所述第一紫外辐射处理为:采用波长为180-280nm、功率为40W的紫外灯对酶解原料处理40-60min;
(2)酶解2:将所述第一酶解体系温度调整至20-25℃,再对所述第一酶解体系进行降温处理,使其按照10℃/min的速率降至-45℃,降至-45℃后维持0.5min,再对所述第一酶解第一酶解体系进行升温处理,使其按照10℃/min的速率升至20-25℃;升至20-25℃后,在所述第一酶解体系中加入其重量0.5%的酸性蛋白酶,调节第一酶解体系pH至4.0-6.0以及调节第一酶解体系温度至40-50℃,反应3-4h;
将经酸性蛋白酶处理的第一酶解体系温度调节至40-55℃,加入第二复合酶、壳聚糖、半胱氨酸以及亚硫酸钠后调节pH至6.0-6.5,同时对加入第二复合酶、壳聚糖、半胱氨酸以及亚硫酸钠后的第一酶解体系进行第二脉冲磁场处理和第二紫外辐射处理,处理时间为8-10h,以获得第二酶解体系;
按重量比计,第一酶解体系:第二复合酶:壳聚糖:半胱氨酸:亚硫酸钠=1:0.03:0.02:0.02:0.02,所述第二复合酶由磷脂酶、木瓜蛋白酶、风味酶组成,且按重量比计,磷脂酶:木瓜蛋白酶:风味酶=1:1:0.8;所述第二脉冲磁场处理为:采用磁场强度为2.0-3.0T的脉冲磁场对所述第一酶解体系进行10-12个脉冲处理;所述第二紫外辐射处理为:采用波长为280-320nm、功率为40W的紫外灯对第一酶解体系处理30-40min;
(3)酶解3:将所述第二酶解体系温度调整40-55℃,再对所述第二酶解体系进行降温处理,使其按照5℃/min的速率降至-45℃,降至-45℃后维持0.5min,再对所述第二酶解体系进行升温处理,使其按照10℃/min的速率升至20-25℃;升至20-25℃后,在所述第二酶解体系中加入其重量0.2%的中性蛋白酶,调节第二酶解体系pH至6.0-7.0以及调节第二酶解体系温度至50-60℃,反应1-2h;
将经中性蛋白酶处理的第二酶解体系温度调节至40-55℃,加入第三复合酶、壳聚糖、半胱氨酸以及亚硫酸钠后调节pH至6.0-6.5,同时对加入第三复合酶、壳聚糖、半胱氨酸以及亚硫酸钠后的第二酶解体系进行第三脉冲磁场处理和第三紫外辐射处理,处理时间为8-10h,以获得第三酶解体系;
按重量比计,第二酶解液:第三复合酶:壳聚糖:半胱氨酸:亚硫酸钠=1:0.02:0.01:0.02:0.02,所述第三复合酶由磷脂酶、木瓜蛋白酶、风味酶组成,且按重量比计,磷脂酶:木瓜蛋白酶:风味酶=1:1.2:1.2;所述第三脉冲磁场处理为:采用磁场强度为1.8-2.0T的脉冲磁场对所述酶解原料进行5-8个脉冲处理;所述第三紫外辐射处理为:采用波长为320-400nm、功率为40W的紫外灯对第二酶解体系处理20-30min;
S13、待酶解完成后,对获得的第三酶解体系升温至90℃,维持10min,以完成灭酶活过程,获得紫贻贝粗提体系;
S14、在紫贻贝粗提体系中按其重量的3%加入活性炭,搅拌均匀,在55℃下保温60-90min后离心,去沉渣后得到紫贻贝提取物清液;所述紫贻贝提取物清液在过滤压力0.25-0.35MPa下经硅藻土过滤,以获得紫贻贝粗提液;再在所述紫贻贝粗提液中按其重量3%加入活性炭,静置45-60min,然后离心,去沉渣后获得紫贻贝精提液;
S15、将步骤S14中的紫贻贝精提液经过微滤陶瓷膜进行过滤,操作温度控制在55-65℃,以获得微滤膜透过液;再将微滤膜透过液经过卷式超滤膜进行过滤,操作温度控制在55-65℃,以获得超滤膜透过液;再将超滤膜截留液经过卷式高压反渗透膜进行浓缩,除去水分及部分残留无机盐和小分子杂质,控制操作温度在35-40℃,以得到紫贻贝提取物浓缩液;
S16、通过真空冷冻干燥方法对紫贻贝提取物浓缩液进行干燥,以获得紫贻贝提取物。
5.如权利要求2所述的活性多糖复合营养素,其特征在于,酶解1和/或酶解2和/或酶解3中,进行脉冲磁场处理和紫外辐射处理的同时进行超声处理,超声功率为100-200W,超声处理时间为10-15min。
6.如权利要求1所述的活性多糖复合营养素,其特征在于,所述西洋参提取物的制备方法包括:
S21、将黑曲霉菌种以及啤酒酵母分别接种于独立的马铃薯葡萄糖琼脂培养基上,再分别放入培养箱中,均于28-35℃条件下活化48-72h,以获得活化的黑曲霉菌种以及啤酒酵母;采用配制好的第一液体培养基培养活化的黑曲霉菌种,以获得液态黑曲霉种子液,以及采用配制好的第二液体培养基培养活化的啤酒酵母,以获得液态啤酒酵母种子液;再将所述液态黑曲霉种子液接种到发酵罐中的第一发酵培养基内进行扩大培养,扩大培养温度30-35℃,转速500-800rpm条件下搅拌,培养时间为1-2d,以获得黑曲霉孢子悬浮液;以及将所述液态啤酒酵母种子液接种到发酵罐中的第二发酵培养基内进行扩大培养,扩大培养温度30-40℃,转速400-600rpm条件下搅拌,培养时间为1-2d,以获得啤酒酵母悬浮液;
S22、按重量份计,在反应釜中加入经粉碎的西洋参40-50份、去离子水200-400份、黑曲霉孢子悬浮液20-30份、啤酒酵母悬浮液10-15份、第三发酵培养基20-25份,以获得发酵体系,并调节所述发酵体系的pH至6.8-7.0;
对所述发酵体系进行三阶段的发酵处理:
第一发酵阶段处理中,发酵温度为25-35℃,并在转速300-400rpm条件下对发酵体系进行搅拌,同时对发酵体系进行第一光照处理和第一磁场处理,处理时间为1-2d;所述第一光照处理为:采用光强为25-30μmol.m-2.s-1的红光以及光强为30-35μmol.m-2.s-1的蓝光照射发酵体系,照射处理时间为40-60min;所述第一磁场处理为:采用50Hz、磁场强度为0.4-0.8mT的交变磁场对发酵体系进行磁场处理,磁场处理时间为40-60min;
第二发酵阶段处理中,发酵温度为25-35℃,并在转速500-600rpm条件下对发酵体系进行搅拌,同时对发酵体系进行第二光照处理和第二磁场处理,处理时间为1-2d;所述第二光照处理为:采用光强为20-24μmol.m-2.s-1的红光以及光强为24-28μmol.m-2.s-1的蓝光照射发酵体系,照射处理时间为30-40min;所述第二磁场处理为;采用50Hz、磁场强度为0.35-0.65mT的交变磁场对发酵体系进行磁场处理,磁场处理时间为30-40min;
第三发酵阶段处理中,发酵温度为25-35℃,并在转速300-400rpm条件下对发酵体系进行搅拌,同时对发酵体系进行第三光照处理和第三磁场处理,处理时间为1-2d;所述第三光照处理为:采用光强为16-20μmol.m-2.s-1的红光以及光强为20-22μmol.m-2.s-1的蓝光照射发酵体系,照射处理时间为20-30min;所述第三磁场处理为:采用50Hz、磁场强度为0.25-0.55mT的交变磁场对发酵体系进行磁场处理,磁场处理时间为20-30min;
S23、将经步骤S12中发酵处理的发酵体系溶液置于微波加热器中,所述微波加热器的压强为0.1-0.3个大气压,微波功率为800-850W,加热40-45min;
以及S24、将经步骤S23处理得到的溶液进行加压浓缩,使其体积缩小至原来体积的10-20%降温至20-25℃后过滤分离得到水相和固相;固相用去离子水溶解,再经活性炭脱色、真空干燥以及粉碎过筛后得到西洋参提取物。
7.如权利要求6所述的活性多糖复合营养素,其特征在于,所述步骤S22中,每天对接种到第一发酵培养基中的液态黑曲霉种子液进行超声处理,且超声处理频率为20-40Khz,处理时间为30min。
8.一种增强免疫力及抗疲劳的活性多糖复合营养素的制备方法,其特征在于,包括:
S100、称取如权利要求1中所述重量份的枸杞、核桃仁、五味子、麦冬,粉碎备用;称取权利要求1中所述重量份的香菇多糖、海带多糖、紫贻贝提取物、有机硒蛋白粉、黑豆粉、西洋参提取物进行混合,以获得混合物,并在所述混合物中边搅拌边加入去离子水溶解,搅拌转速500-800rpm;且搅拌的同时加入营养酵母、L-阿拉伯糖、木糖醇以及粉碎的枸杞、核桃仁、五味子、麦冬,得到原料混合体系;
S200、将原料混合体系浓缩至60℃时相对密度为1.20±1.22的浓缩体系,再对浓缩体系进行减压干燥,即获得所述增强免疫力及抗疲劳的活性多糖复合营养素。
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