CN105409925A - 一种液基细胞保存液 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种病理检验，尤其是对人体的子宫颈粘液、痰液、尿液、胸腔液、气管粘液等细胞病理检验时使用的液基细胞保存液。其特征在于是由醇类、磷酸钠缓冲液、乙二胺四乙酸二钠、氯化钠0.08%-0.12%、氯化钾、甲醛、二硫苏糖醇、醋酸钙、醋酸镁等配制而成，不仅可以保持细胞结构的稳定性，减少细胞粘液的结块沉淀和细胞破裂丢失，还可使细胞易于染色，提高细胞制片的清晰度，便于病理检验工作的顺利进行，而且成本低廉，利于推广使用。

Description

一种液基细胞保存液
技术领域
本发明涉及一种病理检验，尤其是对人体的子宫颈粘液、痰液、尿液、胸腔液、气管粘液等细胞病理检验时使用的液基细胞保存液。
背景技术
现有细胞保存液，在固定细胞、保持细胞结构稳定的时间不长，室温下超过三天时间细胞易变质，而且都采用50%甲醇添加甲醛作为固定保鲜剂，易造成细胞成团结块，蛋白质粘液也易结块沉淀，不利于细胞的分散和观察。也都无法解决标本内有大量红细胞和粘液问题，因为这些成分会直接影响将细胞制到玻片后的细胞量，造成细胞量的丢失。再者一般的保存液缺少无机盐缓冲液，PH值不稳定，易造成某些成分的细胞破裂丢失，也造成细胞学染色的不稳定。
发明内容
本发明的目的，就是要提供一种即能够较好的保持细胞结构的稳定性，又能保持PH值稳定，细胞不易成团结块，便于病理检验的液基细胞保存液。
本发明的技术解决方案是这样的；一种液基细胞保存液，其特征在于是由以下组分按质量白分比组成的：醇类30%-40%、磷酸钠缓冲液60%-65%、乙二胺四乙酸二钠(EDTA)0.3%-0.32%、氯化钠0.08%-0.12%、氯化钾0.03%-0.05%、甲醛1%-3%、二硫苏糖醇0.1%-0.3%、醋酸钙0.34%-0.38%、醋酸镁0.65%-0.68%。技术方案中的醇类，是纯度99.5%的甲醇、乙醇、丙醇等。磷酸钠缓冲液是由磷酸二氢钠(Na2HPO4)和二水磷酸氢钠(NaH2PO4)储存液混合后加水稀释配制的。
经本发明配制的一种液基细胞保存液，其与两种现有技术的液基细胞保存液对比试验结果是；
1、标本存放三天后离心、涂片、固定、巴氏染色、封片后在镜下观察，结果如下：
现有技术(1)：上皮细胞多，胞膜不够清晰完整，染色偏绿，颈管细胞少量，底层细胞少量，炎细胞多，红细胞少量。可见上皮细胞不典型增生。
现有技术(2)：上皮细胞多，有少量细胞成团，胞浆胞核清晰完整，上皮细胞染色鲜艳，底层细胞核染色模糊，颈管细胞少量，底层细胞少量，炎细胞无，红细胞无。可见上皮细胞不典型增生。
本发明的液基细胞保存液：上皮细胞多，胞浆胞核清晰完整，染色鲜艳，细胞核染色清晰，颈管细胞少量，底层细胞少量，炎细胞较少，红细胞无。明显可见上皮细胞不典型增生。
2、标本存放7天后离心、涂片、固定、巴氏染色，封片后在镜下观察，结果如下：
现有技术(l)：上皮细胞偏少，胞浆不够清晰，胞膜有破裂现象，染色偏绿，颈管细胞极少，底层细胞极少，炎细胞多，红细胞少量。较难判断上皮细胞不典型增生。
现有技术(2)：上皮细胞多，细胞成团明显，胞浆清晰完整，上皮细胞染色偏深，有明显黑色成团，底层细胞核染色模糊，颈管细胞少量，底层细胞少量，炎细胞无，红细胞无。较难判断上皮细胞不典型增生。
本发明的液基细胞保存液：上皮细胞多，胞浆胞核清晰完整，染色鲜艳，细胞核染色清晰，颈管细胞少量，底层细胞少量，炎细胞较少，红细胞无。明显可见上皮细胞不典型增生。
使用本发明的液基细胞保存液的有益效果是，不仅可以保持细胞结构的稳定性。减少细胞粘液的结块沉淀和细胞破裂丢失，还可使细胞易染色，提高细胞制片的清晰度，便于病理检验工作的顺利进行，而且成本低廉，利于推广使用。
具体实施方案
实施例1
本发明所述的一种液基细胞保存液的配制方法为，按下表组分称量和量取；
磷酸二氢钠(Na2HPO4)42.3mLlmol
二水磷酸氢钠(NaH2PO4)57.7mLlmol
99.5%的乙醇420ml
乙二胺四乙酸二钠(EDTA)39
氯化钠lg
氯化钾0.4g
37%的甲醛54ml
二硫苏糖醇29
醋酸钙0.35g
醋酸镁0.64g
本发明历述的一种液基细胞保存液的配制步骤为；
1、配制磷酸钠缓冲液：用磷酸二氢钠(Na2HPO4)和二水磷酸氢钠(NaH2PO4)储存液混合，加水稀释至1000ml，量取618ml。
2、在乙醇中加入乙二胺四乙酸二钠(EDTA)，加热50-70℃充分溶解。
3、在磷酸钠缓冲液中加入含乙二胺四乙酸二钠EDTA的乙醇，得到混合液。
4、在混合液中加入氯化钠、氯化钾、甲醛、二硫苏糖醇、醋酸钙、醋酸镁，搅拌溶解。
5、将溶液充分溶解后用冰醋酸调整PH值到6.5，制成液基细胞保存液。
实施例2
本发明所述的一种液基细胞保存液的配制方法为，按下表组分称量和量取；
磷酸二氢钠(Na2HPO4)44.3mLlmol
二水磷酸氢钠(NaH2PO4)52.7mLlmol
100%的甲醇410ml
乙二胺四乙酸二钠(EDTA)2.8g
氯化钠lg
氯化钾0.4g
37%的甲醛52ml
二硫苏糖醇2.lg
醋酸钙0.35g
醋酸镁0.64g
本发明所述的一种液基细胞保存液的配制步骤为；
1、配制磷酸钠缓冲液：用磷酸二氢钠(Na2HPO4)和二水磷酸氢钠(NaH2PO4)储存液混合，加水稀释至1000ml。量取628ml。
2、在甲醇中加入乙二胺四乙酸二钠(EDTA)，加热50-70℃充分溶解。
3、在磷酸钠缓冲液中加入含乙二胺四乙酸二钠EDTA的甲醇，得到混合液。
4、在混合液中加入氯化钠、氯化钾、甲醛、二硫苏糖醇、醋酸钙、醋酸镁，搅拌溶解。
5、将溶液充分溶解后用冰醋酸调整PH值到6.5，制成液基细胞保存液。
实施例3
本发明所述的一种液基细胞保存液的配制方法为，按下表组分称量和量取；
磷酸二氢钠Na2HPO4)40mLlmol
二水磷酸氢钠(NaH2PO4)58mLlmol
99.5%的甲醇440ml
乙二胺四乙酸二钠(EDTA)3.2g
氯化钠lg
氯化钾0.4g
37%的甲醛50ml
二硫苏糖醇29
醋酸钙0.32g
醋酸镁0.62g
本发明所述的一种液基细胞保存液的配制步骤为；
1、配制磷酸钠缓冲液：用磷酸二氢钠(Na2HPO4)和二水磷酸氢钠(NaH2PO4)储存液混合，加水稀释至1000ml。量取600ml。
2、在甲醇中加入乙二胺四乙酸二钠(EDTA)，加热50-70℃充分溶解。
3、在磷酸钠缓冲液中加入含乙二胺四乙酸二钠EDTA的甲醇，得到混合液。
4、在混合液中加入氯化钠、氯化钾、甲醛、二硫苏糖醇、醋酸钙、醋酸镁，搅拌溶解。
5、将溶液充分溶解后用冰醋酸调整PH值到6.5，制成液基细胞保存液。
实施例4
本发明所述的一种液基细胞保存液的配制方法为，按下表组分称量和量取；
磷酸二氢钠Na2HPO4)46mLlmol
二水磷酸氢钠(NaH2PO4)55mLlmol
99.5%的乙醇420ml
乙二胺四乙酸二钠(EDTA)3.lg
氯化钠1.lg
氯化钾0.4g
37%的甲醛56ml
二硫苏糖醇2.lg
醋酸钙0.33g
醋酸镁0.62g
本发明所述的一种液基细胞保存液的配制步骤为；
1、配制磷酸钠缓冲液：用磷酸二氢钠(Na2HPO4)和二水磷酸氢钠(NaH2PO4)储存液混合，加水稀释至1000ml。量取600ml。
2、在甲醇中加入乙二胺四乙酸二钠(EDTA)，加热50-70℃充分溶解。
3、在磷酸钠缓冲液中加入含乙二胺四乙酸二钠EDTA的甲醇，得到混合液。
4、在混合液中加入氯化钠、氯化钾、甲醛、二硫苏糖醇、醋酸钙、醋酸镁，搅拌溶解。
5、将溶液充分溶解后用冰醋酸调整PH值到6.5，制成液基细胞保存液。

Claims (5)

1.一种液基细胞保存液，其特征在于是由以下组分按质量白分比组成的：醇类30%-40%、磷酸钠缓冲液60%-65%、乙二胺四乙酸二钠(EDTA)0.3%-0.32%、氯化钠0.08%-0.12%、氯化钾0.03%-0.05%、甲醛1%-3%、二硫苏糖醇0.1%-0.3%、醋酸钙0.34%-0.38%、醋酸镁0.65%-0.68%。
2.根据权利要求l所述的一种液基细胞保存液，其特征在于是由以下组分按质量百分比组成的；醇类35%、磷酸钠缓冲液62%、乙二胺四乙酸二钠(EDTA)0.31%、氯化钠0.1%、氯化钾0.04%、甲醛2%、二硫苏糖醇0.2%、醋酸钙0.36%、醋酸镁0.67%。
3.根据权利要求1和2所述的一种液基细胞保存液，其特征在于醇类是质量浓度为99.5%-100%的甲醇、乙醇中的任意一种，甲醛质量浓度为37%。
4.根据权利要求1所述的一种液基细胞保存液，其特征在于磷酸钠缓冲液是由磷酸二氢钠(Na2HPO4)和二水磷酸氢钠(NaH2PO4)储存液混合后稀释配制的。
5.根据权利要求2所述的一种液基细胞保存液，其特征在于磷酸钠缓冲液是由57.7mLlmol磷酸二氢钠(Na2HPO4)和42.3mLlmol二水磷酸氢钠(NaH2PO4)储存液混合后稀释配制的。
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