CN110250160A - 液基细胞保存液 - Google Patents

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based cell
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cell preservative
solution
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CN201910470622.3A
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韦荣干
莫祥兰
卢青华
叶秋容
罗茹予
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    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N1/00—Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
    • A01N1/02—Preservation of living parts
    • A01N1/0205—Chemical aspects
    • A01N1/021—Preservation or perfusion media, liquids, solids or gases used in the preservation of cells, tissue, organs or bodily fluids

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Abstract

本发明提供一种液基细胞保存液，其特征在于，由以下组分组成：磷酸二氢钠4g，磷酸氢二钠6.5g，无水乙醇25‑30ml，蒸馏水70‑75ml，混合溶解后在室温下用容器密闭保存。本发明配方合理，技术效果显著，能够有效的解决传统巴式涂片的技术问题和现有的制片技术耗材成本高的问题，保证涂片细胞形态不退变失真，确保了细胞病理诊断质量。

Description

液基细胞保存液
技术领域
本发明涉及病理检验技术领域，具体涉及人体的子宫颈脱落细胞、痰液、胸腹水等细胞病理检验时使用的液基细胞保存液。
背景技术
传统巴氏涂片存在的问题：1、采集后样本在处理和转移的过程中细胞会大量丢失；2、涂片背景中常含有大量红细胞、白细胞、粘液及脱落坏死组织的杂质，涂片细胞重叠和退变严重等，造成假阴性和假阳性高，目前已逐渐被液基细胞学检查所取代。液基细胞学检查产生于20世纪90年代末，它不仅可以用于宫颈脱落细胞检查，还可用于痰液、胸腹水等。它克服了传统巴氏涂片的毛病，采集到的细胞几乎全部保存到保存液里，涂片细胞重叠少、无退变或退变轻微，背景干净清晰，液基细胞学检查的敏感性和特异性均优于传统巴氏涂片
目前临床应用的商品化液基细胞保存液及制片方法有多种，以美国FDA1996年批准的新柏氏（Cytye公司，Boxborough，MA，现称为Hologic公司）和1999年批准的Autocyte Prep（现称为SurePath，TripPath Imaging，Burlington，NC，现属于BD诊断公司）为代表。
在申请号为CN200910034575.4的专利申请中，介绍了一种液基细胞保存液，其主要成分为醇类、双蒸水、磷酸盐、灭菌剂和粘液分解剂组成，该液基细胞保存液的独特粘液分解剂能把样本中被粘液包裹的细胞成功分离出来，避免了阳性细胞堆积与丢失，但是这些会导致将粘液溶解试剂残留在细胞样本中，抑制后续的检测。
本配方将粘液溶解剂分开单独用于粘液标本处理，这样对粘液的溶解更为彻底，且对细胞的形态并不影响，我们常用的粘液溶解剂1%DL-1,4-二硫代苏糖醇（DTT）溶解标本离心后的沉淀物粘液。另外对标本血液多时也做单独处理，标本离心后用保存液9份加冰乙酸1份混合后处理沉淀物震荡10分钟。
液基细胞保存液是整个液基细胞制片技术流程的关键环节之一，而现在使用的商品化的液基细胞学耗材（含保存液）几乎无一例外的成本比较昂贵，影响了液基细胞学的普及及细胞病理学新技术的开展。
发明内容
为了解决上述问题，本发明提供了一种新型的液基细胞保存液，本发明配方合理，技术效果显著，能够有效的解决传统巴式涂片的技术问题和现有的制片技术耗材成本高的问题，保证涂片细胞形态不退变失真，确保了细胞病理诊断质量。
本发明的技术方案：
提供一种液基细胞保存液，由以下组分组成：磷酸二氢钠4g，磷酸氢二钠6.5g，无水乙醇25-30ml，蒸馏水70-75ml，在混合溶解后在室温的试剂管内保存。
进一步，液基细胞保存液的PH值为7.0-7.2。
还提供一种液基细胞保存液的制备方法，步骤如下：
a)将配方量的磷酸二氢钠、磷酸氢二钠溶解于蒸馏水中形成溶液a；
b)将步骤a)获得的溶液a搅拌均匀,得到溶液b；
c)向步骤b)获得的溶液b中加入配方量的无水乙醇，搅拌均匀,得到溶液c；
d)将步骤c)获得的溶液c搅拌均匀；
以上各步骤都是在常温下进行。
本发明的有益效果：
1、解决传统巴氏涂片技术上存在的缺陷。
2、解决商品化液基细胞学耗材价格昂贵的问题，降低细胞学检查成本。
3、保证涂片细胞形态不退变失真，不影响细胞学诊断。
4、保证涂片常规染色之外其他技术的顺利开展，如免疫细胞化学染色等。
具体实施方式
下面对本发明进一步说明。
实施例1：
提供一种液基细胞保存液，由以下组分组成：磷酸二氢钠4g，磷酸氢二钠6.5g，无水乙醇25ml，蒸馏水70ml，在混合溶解后在室温的试剂管内保存。
实施例2：
提供一种液基细胞保存液，由以下组分组成：磷酸二氢钠4g，磷酸氢二钠6.5g，无水乙醇30ml，蒸馏水75ml，在混合溶解后在室温的试剂管内保存。
其中，液基细胞保存液的PH值为7.0-7.2。
还提供一种液基细胞保存液的制备方法，步骤如下：
a)将配方量的磷酸二氢钠、磷酸氢二钠溶解于蒸馏水中形成溶液a；
b)将步骤a)获得的溶液a搅拌均匀,得到溶液b；
c)向步骤b)获得的溶液b中加入配方量的无水乙醇，搅拌均匀,得到溶液c；
d)将步骤c)获得的溶液c搅拌均匀；
以上各步骤都是在常温下进行。
需要指出的是，上述实施例仅为说明本发明的技术构思及特点，其目的在于让熟悉此项技术的人士能够了解本发明的内容并据以实施，并不能以此限制本发明的保护范围。凡根据本发明精神实质所作的等效变化或修饰，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (3)

1.液基细胞保存液，其特征在于，由以下组分组成：磷酸二氢钠4g，磷酸氢二钠6.5g，无水乙醇25-30ml，蒸馏水70-75ml，混合溶解后在室温下用容器密闭保存。
2.根据权利要求1所述的液基细胞保存液，其特征在于，所述液基细胞保存液的PH值为7.0-7.2。
3.一种如权利要求1所述的液基细胞保存液的制备方法，其特征在于，步骤如下：
a)将配方量的磷酸二氢钠、磷酸氢二钠溶解于蒸馏水中形成溶液a；
b)将步骤a)获得的溶液a搅拌均匀,得到溶液b；
c)向步骤b)获得的溶液b中加入配方量的无水乙醇，搅拌均匀,得到溶液c；
d)将步骤c)获得的溶液c搅拌均匀；
以上各步骤都是在室温下进行。
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