CN103583508A - 一种液基细胞处理保存液的制备方法及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种液基细胞处理保存液的制备方法及其应用,其特征在于按如下步骤进行制备:将枸橼酸钠和氯化钠混合,在其中加入纯水至枸橼酸钠、氯化钠完全溶解后,再加入甲醛和冰醋酸,混合均匀后再加入乙醇,摇匀后加纯水定量,混合均匀即得处理保存液;存放有本发明液基细胞处理保存液的存放瓶,与样本刷及样本保存管组装成液基细胞处理试剂盒,样本刷可拆卸的安装在样本保存管的瓶盖内。本发明的液基细胞处理保存液能够处理宫颈、胸腹水、痰液、尿液、脓肿等不同样本,同时具备裂解红细胞、炎症细胞和消除黏液的功能,可以去除血液、脓液、黏液及微生物杂质等影响检验结果的干扰因素。
Description
技术领域
本发明涉及一种能够适用于对宫颈、胸腹水、痰液、尿液、脓肿的脱落细胞或组织的处理和保存的液基细胞处理保存液及其应用。
背景技术
液基细胞制片检查系统处理技术诞生于1991年美国等国家,率先应用于妇科细胞学检查,国内从2001年开始作液基细胞学筛查宫颈癌的研究,使该项技术得到迅速发展,被称之为一场细胞学制片技术的革命。在该技术运用中,传统的细胞学检查方法巴氏涂片法(即宫颈刮片)制成的涂片,细胞大量重叠,并且涂片存在着大量的红细胞、白细胞、粘液及脱落坏死组织等,病理医生在判读时非常困难,会出现15%-40%的假阴性率。
液基细胞处理保存液技术是当今科技含量较高的宫颈癌筛查制片方法,该技术克服了传统巴氏手工涂片细胞太厚、细胞堆积、结构模糊、染色不佳等传统技术原因的限制。细胞采集后投入细胞处理保存液中,使肿瘤和非肿瘤细胞保持细胞采集时的原始细胞形态,并通过制片使细胞均匀涂布在载玻片上制成薄层细胞涂片。染色后细胞结构在显徵镜下清晰易辨,同时把血液、粘液和炎症细胞减少到最底程度,从而易发现和确认异常细胞。提高异常细胞的检出率,大大提高宫颈癌筛查方法的特异性和诊断的准确率。
但是,现存液基细胞处理保存液对细胞或组织的保存时间短,长期保持会使细胞或组织样本产生霉变,需现取样现处理;此外现存液基细胞处理保存液对细胞或组织中的血液、脓液、黏液及微生物杂质无处理能力,影响测试结果。
发明内容
本发明是为避免上述现有技术所存在的不足之处,提供一种液基细胞处理保存液的制备方法及其应用,以期可以在沿用已有细胞学制片技术的方便性的基础上,还能达到延长细胞或组织的保存时间,使被处理细胞或组织保持采集时的原始形态,便于制成薄层细胞或组织涂片的效果。
本发明解决技术问题采用如下技术方案
本发明液基细胞处理保存液的制备方法,其特点在于:所述液基细胞处理保存液是按如下步骤进行制备:将4g枸橼酸钠和0.85g氯化钠混合,在其中加入纯水至枸橼酸钠、氯化钠完全溶解后,再加入甲醛2ml和冰醋酸1ml,混合均匀后再加入体积浓度为95%的乙醇50ml,摇匀后加纯水至总量为100ml,混合均匀即得处理保存液。
本发明液基细胞处理保存液的应用,其特点在于:存放有所述液基细胞处理保存液的存放瓶,与样本刷及样本保存管组装成液基细胞处理试剂盒;所述样本刷可拆卸的安装在样本保存管的瓶盖内;使用时,将液基细胞处理保存液加入到样本保存管中,然后用样本刷取得待处理样品并加入到所述样品保存管中。
与已有技术相比,本发明有益效果体现在:
1、本发明的液基细胞处理保存液能够处理宫颈、胸腹水、痰液、尿液、脓肿等不同样本,同时具备裂解红细胞、炎症细胞和消除黏液的功能,可以去除血液、脓液、黏液及微生物杂质等影响检验结果的干扰因素;
2、本发明的液基细胞处理保存液含有固定细胞成分,能快速对样品中的白细胞、脱落上皮细胞等有检验价值的细胞进行固定保存,防止有效细胞发生自溶,经该液基细胞处理保存液固定保存的细胞,细胞形态完好,能保持样品采集时细胞的原始形态,不会发生膨胀、固缩等形态变化,保证检验对有效细胞的数量和质量要求;经该液基细胞处理保存液处理后,细胞形态能够稳定保存6个月以上。
3、本发明的液基细胞处理保存液添加了冰醋酸和枸橼酸钠,并与体积浓度为95%的乙醇、甲醛、氯化钠、纯水有效组合,大大地降低了液基薄层细胞的制片成本。
4、本发明液基细胞处理保存液中的裂解成分能对红细胞进行裂解,去除红细胞对检验结果造成的干扰;同时试剂中的固定成分能保存固定白细胞、脱落上皮细胞等有价值的细胞;并使包裹在黏液中的有效细胞充分分离出来,防止有价值细胞的丢失。
5、本发明液基细胞处理保存液使细胞或组织样本易于着色,便于观察。
6、本发明制备方法简单,无三废污染产生;使用中不产生需特殊处理的医疗垃圾。
7、本发明液基细胞处理保存液在使用中其配件即样本保存管设计为样本刷、样本保存管一体结构,使用中可避免样本被污染,并便于完整长期保存样本,为疾病诊疗过程及时提供参考。
8、本发明液基细胞处理保存液能够杀灭样本中含有的微生物杂质,具有抑菌作用,可确保样本保存期间不霉变,不影响制片观察结果。
9、本发明液基细胞处理保存液组装成试剂盒,在临床使用中便于操作,从样本处理到制片观察全过程中无须使用到试剂盒以外的试剂或组件,为临床提供及时便利的POCT(POCT意为床旁即时检测)服务。
具体实施方式
本实施例液基细胞处理保存液是按如下步骤进行制备:将枸橼酸钠4g和氯化钠0.85g混合,在其中加入纯水至枸橼酸钠、氯化钠完全溶解后,再加入甲醛2ml和冰醋酸1ml,混合均匀后再加入95%乙醇50ml,摇匀后加纯水至总量为100ml,混合均匀即得处理保存液。经测定其PH值为5-8之间。
受试方法:本实施例所制备的液基细胞处理保存液
对照方法:巴氏涂片法
实验方案:临床采集宫颈分泌物样本10份,随机分成两组,每组5份,分别在两种制片方法制片,显微镜下观察细胞形态、状况;同时将样本保存6个月再次观察。
实验结果:采用液基细胞处理保存液进行制片组细胞形态完好,能保持样品采集时细胞的原始形态,未发生膨胀、固缩等形态变化;6个月后仍保持完好。而对照组采用巴氏涂片法结果显示,细胞大量重叠,并且涂片存在着大量的红细胞、白细胞、粘液及脱落坏死组织等,病理医生在判读时非常困难;6个月后样本已霉变,无法制片观察。
结果判定:采用液基细胞处理保存液制片明显好于对照组,两者有显著性差异。
具体实施中,本发明所采用的具体质量与体积关系可等比例增加,如下表所示。
组别 | 乙醇 | 甲醛 | 枸橼酸钠 | 氯化钠 | 冰醋酸 | 纯水 |
1 | 50ml | 2ml | 4g | 0.85g | 1ml | 定容至100ml |
2 | 100ml | 4ml | 8g | 1.7g | 2ml | 定容至200ml |
3 | 150ml | 6ml | 12g | 2.55g | 3ml | 定容至300ml |
4 | 200ml | 8ml | 16g | 3.4g | 4ml | 定容至400ml |
5 | 250ml | 10ml | 20g | 4.25g | 5ml | 定容至500ml |
Claims (2)
1.一种液基细胞处理保存液的制备方法,其特征在于按如下步骤进行制备:将4g枸橼酸钠和0.85g氯化钠混合,在其中加入纯水至枸橼酸钠、氯化钠完全溶解后,再加入甲醛2ml和冰醋酸1ml,混合均匀后再加入体积浓度为95%的乙醇50ml,摇匀后加纯水至总量为100ml,混合均匀即得处理保存液。
2.一种权利要求1所述液基细胞处理保存液的应用,其特征在于:存放有所述液基细胞处理保存液的存放瓶,与样本刷及样本保存管组装成液基细胞处理试剂盒;所述样本刷可拆卸的安装在样本保存管的瓶盖内;使用时,将液基细胞处理保存液加入到样本保存管中,然后用样本刷取得待处理样品并加入到所述样品保存管中。
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