CN105779559A - 一种液基细胞处理液 - Google Patents

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刘春红
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    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
    • G01N33/5091—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing the pathological state of an organism

Abstract

本发明提供一种液基细胞处理液，属于生物技术领域。所述液基细胞处理液，包括以下组分：磷酸盐缓冲液、甲醇、乙醇、氯化钠或氯化钾、复合氨基酸、乙二胺四乙酸二钠、抑菌剂和水。本发明具有的优点和积极效果是：本发明可适用于各种脱落细胞的保存和处理，价格低廉，常温下保存时间长；在保持细胞形态完好的同时很好地解决了粘液干扰，细胞聚集，红细胞干扰等诸多问题，使其更好地应用于临床诊断试验。

Description

一种液基细胞处理液
技术领域
本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种液基细胞处理液。
背景技术
目前，宫颈癌、肺癌、肾癌等癌症的发病率呈逐年上升趋势，这些疾病的的诊断成为一个研究热点，脱落细胞诊察方法是早期筛查上述癌症的主要方法之一。脱落细胞诊察方法中，传统的巴氏涂片过程中涉及到的取材、涂片、细胞分离等诸多因素都会严重降低细胞的阳性率。细胞工程专家推出了一种制片新技术——液基薄层细胞学技术(TCT)，TCT通过技术处理掉非诊断杂质，制成可以清晰的可供观察的薄层细胞片，使阅片者更易观察，显著提高了诊断的准确性。
液基薄层细胞学技术(TCT)改变了以往巴氏涂片的操作方法，TCT中，标本取出后立即放入液基细胞处理液中，避免了常规巴氏涂片过程中遗留在取材器上的细胞随取材器一起被抛弃和细胞过度干燥的现象。经液基细胞处理液处理的细胞随机取样制成均匀的薄层涂片，在薄片中不正常细胞容易被观察，并且湿固定的细胞核结构清晰，易于鉴别，可以检测出较多的低级别病变和一些更严重的病变，是目前国际上比较推行的新技术。采用液基薄层细胞学技术(TCT)，异常细胞的诊断率和低度鳞状上皮细胞病变的检出率均有大大的提高，具有传统涂片无法比拟的优点。
TCT技术中最为关键的试剂是用于保存处理细胞样本的“液基细胞处理液”。目前国内常用的是美国新柏氏(ThinprerTCT)生产的液基细胞液(PreserveCytSolution)，这种液基细胞液为与该公司的机器Thinprepre-2000配套的专用试剂，价格昂贵，无法广泛普及。而市场上销售的国内同类产品，由于研发思路不同，技术原理也不尽相同，所以在产品质量和制片质量等方面参差不齐，使得临床上经常出现漏诊的情况。
发明内容
本发明要解决的问题是现有的进口液基细胞处理液价格昂贵、无法普及，国内的液基细胞处理液产品质量参差不齐，不利于临床的推广使用。
为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：提供一种液基细胞处理液，所述液基细胞处理液，包括以下组分：磷酸盐缓冲液、甲醇、乙醇、氯化钠或氯化钾、复合氨基酸、乙二胺四乙酸二钠、抑菌剂和水。
优选地，所述磷酸盐缓冲液为磷酸氢二钠溶液和磷酸二氢钠溶液的混合物。
优选地，所述抑菌剂为A·SAP抑菌剂。
进一步地，每100ml所述液基细胞处理液，包括以下组分：
进一步地，每100ml所述液基细胞处理液，包括以下组分：
优选地，所述复合氨基酸为L-丙氨酸、L-异亮氨酸、L-苏氨酸中任意两种的混合物或三种的混合物。
本发明提供的液基细胞处理液中：
磷酸盐缓冲液：磷酸氢二钠与磷酸二氢钠溶于一部分纯化水中，在液基细胞处理液中起到缓冲液的作用，可调节液基细胞处理液的pH值，可有效维持细胞形态。
甲醇、乙醇：具有细胞固定的作用。本发明经过多次试验，得出合适的甲醇和乙醇的在液基细胞液中的比例，使细胞液极性合适，能快速将脱落细胞进行固定保存，维持细胞初始状态，防止细胞的萎缩和肿胀破裂，确保诊断的准确性。
复合氨基酸：L-丙氨酸、L-异亮氨酸与L-苏氨酸中相互配合，更好地保护细胞，维持细胞形态。
氯化钠或氯化钾：具有调节渗透压和溶解红细胞的作用，在进一步有效维持细胞形态的同时去除红细胞的干扰。
乙二胺四乙酸二钠：为金属螯合剂，具有防止粘液干扰、细胞聚集的作用。
A·SAP抑菌剂：为天然抑菌剂，具有防止标本染菌，延长保存时间的作用。
本发明具有的优点和积极效果是：本发明可适用于各种脱落细胞的保存和处理，价格低廉，常温下保存时间长；在保持细胞形态完好的同时很好地解决了粘液干扰，细胞聚集，红细胞干扰等诸多问题，使其更好地应用于临床诊断试验。
本发明提供的液基细胞处理液，组分中含有使得细胞固定、调节溶液pH值、调节渗透压等作用的各种组分，使保存于本发明液基细胞处理液中脱落细胞的形态得到良好的固定和保持，避免了细胞的萎缩和肿胀破裂等形态变化，便于临床诊断。
本发明提供的液基细胞处理液，组分中还含有防止粘液干扰、防止细胞聚集和溶解红细胞的组分，使保存的细胞制片背景清晰，减少漏诊率。
附图说明
图1是经本发明中实施例1得到的液基细胞处理液保存后的宫颈细胞的染色图片。
图2是经本发明中实施例2得到的液基细胞处理液保存后的宫颈细胞的染色图片。
图3是经本发明中实施例3得到的液基细胞处理液保存后的宫颈细胞的染色图片。
图4是经本发明中实施例4得到的液基细胞处理液保存后的宫颈细胞的染色图片。
图5是经本发明中实施例5得到的液基细胞处理液保存后的宫颈细胞的染色图片。
图6是经本发明中实施例6得到的液基细胞处理液保存后的宫颈细胞的染色图片。
具体实施方式
为了更好的理解本发明，下面结合具体实施例对本发明进行进一步的描述。
实施例1
一种液基细胞处理液，每100ml包含以下组分：磷酸氢二钠0.06g、磷酸二氢钠0.01g，甲醇10ml，乙醇2ml，氯化钠0.1g，L-丙氨酸0.01g，L-异亮氨酸0.01g，乙二胺四乙酸二钠0.3g，A·SAP抑菌剂0.01ml，余量为纯化水。
图1是经本实施例的液基细胞处理液保存的宫颈细胞染色后的图片，图中细胞完整、饱满、分散性好，染色效果好，易于临床诊断分析。
实施例2
一种液基细胞处理液，每100ml包含以下组分：磷酸氢二钠0.15g、磷酸二氢钠0.02g，甲醇20ml，乙醇5ml，氯化钾0.3g，L-苏氨酸0.03g，L-异亮氨酸0.03g，乙二胺四乙酸二钠0.5g，A·SAP抑菌剂0.05ml，余量为纯化水。
图2是经本实施例的液基细胞处理液保存的宫颈细胞染色后的图片，图中细胞保存完整，分散均匀，染色效果好，易于临床诊断分析。
实施例3
一种液基细胞处理液，每100ml包含以下组分：磷酸氢二钠0.18g、磷酸二氢钠0.02g，甲醇30ml，乙醇10ml，氯化钾0.4g，L-丙氨酸0.04g，L-苏氨酸0.04g，乙二胺四乙酸二钠0.08g，A·SAP抑菌剂0.05ml，余量为纯化水。
图3是经本实施例的液基细胞处理液保存的宫颈细胞染色后的图片，图中细胞形态维持良好、分散性好，染色均匀，易于临床诊断分析。
实施例4
一种液基细胞处理液，每100ml包括以下组分：磷酸氢二钠0.162g，磷酸二氢钠0.02g，甲醇25ml，乙醇10ml，氯化钾0.483g，L-丙氨酸0.04g，L-异亮氨酸0.04g，乙二胺四乙酸二钠0.7g，A·SAP抑菌剂0.1ml，余量为纯化水。
图4是经本实施例的液基细胞处理液保存的宫颈细胞染色后的图片，图中细胞完整、饱满、易于分散，染色效果好，易于临床诊断分析。
实施例5
一种液基细胞处理液，每100ml包括以下组分：磷酸氢二钠0.2g，磷酸二氢钠0.03g，甲醇40ml，乙醇15ml，氯化钠0.5g，L-丙氨酸0.04g，L-异亮氨酸0.04g，L-苏氨酸0.02g，乙二胺四乙酸二钠1g，A·SAP抑菌剂0.2ml，余量为纯化水。
图5是经本实施例的液基细胞处理液保存的宫颈细胞染色后的图片，图中细胞形态保存良好，分散性好，避免了红细胞的干扰，易于染色，易于临床诊断分析。
实施例6
一种液基细胞处理液，每100ml包括以下组分：磷酸氢二钠0.3g，磷酸二氢钠0.05g，甲醇50ml，乙醇20ml，氯化钾1g，L-丙氨酸0.08g，L-异亮氨酸0.05g，L-苏氨酸0.07g，乙二胺四乙酸二钠1.5g，A·SAP抑菌剂0.3ml，余量为纯化水。
图6是经本实施例的液基细胞处理液保存的宫颈细胞染色后的图片，图中细胞完整、饱满、分散性好，染色效果好，易于临床诊断分析。
制备本发明提供的液基细胞处理液时，分为以下步骤：(1)将磷酸氢二钠和磷酸二氢钠溶于部分纯化水中，配制成磷酸盐缓冲液，也可直接购买市售的用于液基细胞处理液的磷酸盐缓冲液；(2)在得到的磷酸盐缓冲液中依次加入氯化钾，乙二胺四乙酸二钠、复合氨基氨酸，搅拌均匀后；(3)在步骤(2)得到的混合溶液中加入甲醇、乙醇和剩余的纯化水，之后混合均匀，即得。
以上对本发明的实施例进行了详细说明，但所述内容仅为本发明的较佳实施例，不能被认为用于限定本发明的实施范围。凡依本发明范围所作的均等变化与改进等，均应仍归属于本专利涵盖范围之内。

Claims (7)

1.一种液基细胞处理液，其特征在于：包括以下组分：磷酸盐缓冲液、甲醇、乙醇、氯化钠或氯化钾、复合氨基酸、乙二胺四乙酸二钠、抑菌剂和水。
2.根据权利要求1所述的液基细胞处理液，其特征在于：所述磷酸盐缓冲液为磷酸氢二钠溶液和磷酸二氢钠溶液的混合物。
3.根据权利要求1所述的液基细胞处理液，其特征在于：所述抑菌剂为A·SAP抑菌剂。
4.根据权利要求1-3任一所述的液基细胞处理液，其特征在于：每100ml所述液基细胞处理液，包括以下组分：
5.根据权利要求4所述的液基细胞处理液，其特征在于：每100ml所述液基细胞处理液，包括以下组分：
6.根据权利要求1-3或5任一所述的液基细胞处理液，其特征在于：所述复合氨基酸为L-丙氨酸、L-异亮氨酸、L-苏氨酸中任意两种的混合物或三种的混合物。
7.根据权利要求4所述的液基细胞处理液，其特征在于：所述复合氨基酸为L-丙氨酸、L-异亮氨酸、L-苏氨酸中任意两种的混合物或三种的混合物。
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