CN107258765A - 痰脱落细胞保存液及其制备方法 - Google Patents

Abstract

一种能够有效改进痰液标本留取方法及制片方法的痰脱落细胞保存液及其制备方法。该痰脱落细胞保存液主要由细胞保护剂聚乙二醇‑400、黏液分解剂二硫代苏糖醇、细胞稳定剂乙醇等一些成分构成。使用该痰脱落细胞保存液能够做到痰液即吐即存的效果，从而规范痰液留取方法，延长痰液采集时间和放置时间，防止痰中细胞发生自溶及变性；同时该保存液处理后的痰液，可以采用液基薄层细胞进行制片，提高细胞的采集量及制片的效果，从而有效地提高痰脱落细胞检查的阳性率。使用该技术后，可使痰脱落细胞学检查更加简便易行、更加安全经济、更易于推广使用，可成为早期诊断及筛查肺癌的主要方法之一，从而有效提高肺癌的早期诊断率和治愈率，造福于人类。

Description

痰脱落细胞保存液及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种痰液脱落细胞的保存处理方法，主要应用于肺癌患者痰脱落细胞学检查的痰液处理。

背景技术

近年来随着吸烟人群的增多以及大气环境污染的加剧，肺癌在世界范围内的发病率和病死率都在急剧上升，现已经成为全球死亡率最高、发病率最高的恶性肿瘤。临床研究表明，原位癌治愈率接近100％，I期肺癌患者的5年生存率达60％～90％，而IIIb和IV患者的5年生存率仅5％～20％。提示早期诊断是改善肺癌预后的关键。然而，由于缺乏理想的早期诊断方法，肺癌的早期诊断率仅14％左右。因此，如何提高肺癌早期诊断水平已成为肺癌防治工作者的严肃而紧迫的任务。痰脱落细胞学检查是对肺癌高危人群进行筛查及发现早期肺癌、尤其是隐性肺癌的较为有效的方法。该检查方法无创，操作简单，可系统的、动态的观察上皮细胞从不典型增生到癌前病变直至浸润癌的连续渐变过程。在现有的痰脱落细胞学检查中，由于阳性率不高，故国内对该法明显重视不够。而阳性率不高的原因主要与痰液标本的采集及处理手段有关。现有痰液标本使用普通的干燥塑料瓶采集，采集的痰液要求在30分钟至1小时内及时送检，但由于送检流程复杂、病理科室工作太忙及病人未按时送检等原因，使送检的标本不能在1小时内制片，这样就会造成痰标本中的检测细胞发生变性自溶。同时由于制片时痰液中有黏液存在，检测细胞会发生重叠，使制片的背景杂乱，直接影响阅片，从而降低痰脱落细胞学检查的阳性率。另外，现有的痰脱落细胞学检查在制片时只挑起痰液中的某一部分进行检查，这种制片方法，也会造成有效细胞的遗漏，也会降低阳性率。本发明可有效改进痰液标本的留取方法及制片方法，解决上述造成阳性率不高的因素，从而提高痰液脱落细胞检查的阳性率，进而提高肺癌早期的诊断率。

发明内容

为了克服现有痰脱落细胞学检查阳性率不高这一问题，本发明提供一种痰脱落细胞保存液，该保存液能够做到痰液即吐即存的效果，从而规范痰液留取方法，延长痰液采集时间和放置时间，防止痰中细胞发生自溶及变性；同时该保存液处理后的痰液，可以采用液基薄层细胞进行制片，提高细胞的采集量及制片的效果，从而有效地提高痰脱落细胞检查的阳性率。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：痰脱落细胞保存液通过化学的方法对送检的痰标本进行前期处理，这样可以防止痰液中的细胞变性自溶，从而延长痰液采集的时间和送检时间，提高一次痰液采集量；进行过痰脱落细胞保存液处理后的痰液可采用先进的液基细胞学制片技术进行制片，使制片质量和痰检阳性率显著提高。该痰脱落细胞保存液主要由细胞保护剂聚乙二醇-400、黏液分解剂二硫代苏糖醇、细胞稳定剂乙醇等一些成分构成。痰脱落细胞保存液能有效地解决传统直接涂片法中存在的许多弊端，如细胞丢失严重，黏液丝较多，制片质量不佳，细胞常相互重叠，或被炎性细胞、血细胞覆盖而难以识别，以及涂片会因固定不及时，致使细胞干燥、退变而影响诊断等。痰脱落细胞保存液使用改革了痰脱落细胞检查的标本采集和处理方法，可使黏液丝溶解，涂片背景较干净，红细胞大多破坏消失，炎性细胞明显减少，异常细胞清楚可见，不易漏诊。显微镜下观察具有良好的细胞学形态，细胞无扭曲、无损坏，细胞分布均匀，细胞图像清晰，层次分明，核膜、核仁及染色质等细微结构清晰可见，三维立体感好，不仅单个细胞维持着良好的形态，腺癌、小细胞癌等细胞间的黏合也保持着完整性，可观察到成群丛集的倾向，有利于筛选检查。由于制片质量好，从而缩短了阅片时间，提高工作效率，有效提升了细胞病理学的诊断价值。

痰脱落细胞保存液中的黏液分解剂二硫代苏糖醇具有很低的氧化-还原活性，基本不影响标本中的细胞形态，并且能够显著提高细胞涂片的质量。保存液中的聚乙二醇-400覆盖细胞表面，有助于保护细胞，保存其形态。50％乙醇主要作用是用于固定痰液中脱落细胞的形态，使细胞膜不至于破裂，防止细胞崩解，由于细胞固定及时，细胞形态保存完好，剩余标本可反复多次制作涂片，有利于进行脱落细胞学诊断。

经痰脱落细胞保存液处理后的痰液无需使用高速搅拌器即能简单地溶解黏液，从而极大地缩短了痰标本的处理时间，并且使细胞形态保存完好。由于本发明主要是以化学方法来溶解黏液，因此对细胞群集的破坏较小，更易于查找癌细胞，在判别组织类型时也是很有利的。使用痰脱落细胞保存液采集的痰标本量大，基本全部制片，制出的涂片细胞多，不易漏诊，

本发明的有益效果是，痰脱落细胞保存液的使用，可改革痰脱落细胞学检查痰标本采集的方法和制片的方法，大大提高痰异常细胞的诊断率。使用该技术后，可使痰脱落细胞学检查更加简便易行、更加安全经济、更易于推广使用。可成为早期诊断及筛查肺癌的主要方法之一，从而有效提高肺癌的早期诊断率和治愈率，造福于人类。

附图说明

无

具体实施方式

痰脱落细胞保存液的配制方法：先配制A液：A液由2％聚乙二醇-400和50％乙醇按一定比例配制而成；再配制B液：B液由1，4-二硫代苏糖醇，氯化钠，磷酸氢二钠，磷酸二氢钠，蒸馏水按一定的比例配制而成。然后将A液和B液等分混合，即配制成痰脱落细胞保存液。需要进行痰脱落细胞学检查时，用盛有痰脱落细胞保存液的容器，直接收集病人的痰液，当痰量采集足够时送检。

Claims (3)

1.一种痰脱落细胞保存液及其制备方法，其特征是：该痰脱落细胞保存液主要由细胞保护剂聚乙二醇-400、黏液分解剂二硫代苏糖醇、细胞稳定剂乙醇及氯化钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、蒸馏水成分构成。

2.根据权利要求1所述的痰脱落细胞保存液，其特征是：这种痰细胞保存液能直接用于病人采集痰液标本，延长标本采集的时间和送检的时间以及提高痰液标本的采集量。

3.根据权利要求1脱落，其特征是可以完好的保存痰液中检测细胞的形态，防止细胞变性和自溶，同时能完好保存细胞中的抗原成分，便于各种肿瘤标志物的检测。