CN109060798A

CN109060798A - 一种用于阴道内感染的诊断试剂

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Publication number: CN109060798A
Application number: CN201810967207.4A
Authority: CN
Inventors: 吴单; 杨维; 罗海浪; 徐丽君
Original assignee: Hangzhou Young Cell Biotechnology Co Ltd
Current assignee: Zhejiang Inotai Medical Devices Co., Ltd.
Priority date: 2018-08-23
Filing date: 2018-08-23
Publication date: 2018-12-21

Abstract

本发明公开了一种用于阴道内感染的诊断试剂，总试剂包括用于吸收阴道分泌物的吸收性材料和包含指示剂和离子平衡试剂的指示剂体系，所述的吸收性材料包括含有季铵盐的固体聚合物，所述的指示剂为含有可电离苯酚基团和带负电荷基团的pH指示剂。本发明为对阴道分泌物pH值进行即时检测的拭子，方便快速，便于自我诊断细菌性阴道病。

Description

一种用于阴道内感染的诊断试剂

技术领域

本发明涉及一种医用诊断试剂，尤其涉及一种用于阴道内感染的诊断试剂。

背景技术

正常健康的阴道组织由保护性阴道细菌菌群组成，例如阴道杆菌能分解阴道上皮细胞所含的糖元成乳酸以维持阴道pH值在3.8~4.5之间，来抑制其他细菌的生长繁殖。细菌性阴道炎（BV）是一种涉及阴道菌群失调的感染。病原菌消耗了糖原, 阻碍了阴道杆菌的酵解作用，阴道杆菌和其他正常菌群被致病性厌氧球菌替换，使pH值升高, 病原菌大量繁殖，从而引发细菌性阴道炎。

对细菌性阴道病（BV）的早期研究涉及比较已知患有BV的妇女的阴道液与已知没有患有该疾病的妇女的阴道液的pH（Gardner·Et·al，1995，Am·J·Obstet·Gynecol，69:962）。研究中的所有BV阳性女性被确定为阴道液pH大于4.5，其中91％的女性阴道液pH大于5.0。在测试中的正常（无疾病）女性中，92％被发现具有4.0至4.7的阴道pH值。该研究得出的结论是，阴道pH等于或大于5.0并结合其他临床标准指示BV的存在。

BV可以通过阴道分泌物的外部检查来诊断，美国专利4,532,216公开了季铵聚电解质盐在用于确定测试样品的离子强度或比重的测试装置，测试装置和方法中的用途以及制造该装置的方法。美国专利号6,099,801公开了一种用于检测含水流体中挥发性胺盐的测试装置，其用于诊断阴道分泌物中的细菌性阴道病。美国专利5,660,790和5,910,447公开了一种用于分析含水液体样品的pH的测试装置和方法。

BV也可以通过阴道内分泌物采样来诊断。美国专利号5,217,444公开了一种用于吸收阴道分泌物的卫生棉条，其特征在于所述卫生棉条包括两种不同pH值范围的pH指示剂材料，通过颜色变化来指示与所述材料接触的液体的酸度或碱度。所述pH指示剂材料被包裹在卫生棉条中以便被卫生棉条吸收的分泌物润湿，从而提供人体健康状况的指示。

美国专利号5,897,834公开了一种用于区分与阴道病或尿液和羊水有关的尿液和阴道分泌物的装置。该装置包括使用带负电基团的指示剂固定到含有季铵基团的固体聚合物基质上。此外，该装置包括气态胺释放剂和胺指示剂。公开了含有季铵基团的聚合物基材的使用具有锐化pH依赖性颜色转变的优点。但是，这些测试设备不适用于阴道内检查。

目前，在BV的诊断方面，临床上最为普遍采用的方法主要有以下几个方法：

1.涂片镜检：取分泌物做涂片可找到线索细胞，线索细胞是表面附着有大量的加特纳细菌的上皮细胞，特点是上皮细胞表面毛糙或有细小的颗粒，细菌为革兰氏染色阴性的球状杆菌。

2.胺实验：取一滴10%氢氧化钠溶液加入阴道分泌物中可闻到有“鱼腥”样氨释放出，这是因为分泌物中胺量较高，遇碱后可放出氨味来。

3.培养法：应先分离后再作培养可见直径为0.5毫米圆形、不透明、表面光滑的菌落。

4.生化法：取阴道分泌物作生化测定，正常女性乳酸盐量高，琥珀酸盐量低，而本病女性测定值正相反。

5.荧光抗体法：涂片后用荧光抗体染色镜检。

6.酶学方法：利用微生物独具的酶催化机理，结合发色底物形成的酶快速检测。

上述几种传统的检测方法，均需一定的检测工具或试剂，技术检测费用高，耗时长，操作步骤繁琐，对检测人员要求较高，有的方法甚至需要专业的技术人员，在实际中想要准确实施并不容易。另外，这些方法也存在一定的弊端，就是病人很难自我检测，监控自身阴道分泌物pH值是否在正常范围，是否可能患有某种阴道疾病。由于缺乏自我检测的手段，怕麻烦和羞于到医院检查，病人往往到了病情较为严重的时候，临床症状很明显才会到医院就诊。部分病人由于延误治疗，感染甚至上行至上生殖道，引起盆腔炎、输卵管炎、子宫内膜炎等严重妇科疾病。对于孕妇，阴道感染治疗的延误，其危害尤为严重。会增大死胎、流产、低重量初生儿等问题出现的几率。

发明内容

本发明是为了解决上述不足，提供了一种用于阴道内感染的诊断试剂，对阴道分泌物pH值进行即时检测的拭子，便于自我诊断细菌性阴道病。

本发明的上述目的通过以下的技术方案来实现：一种用于阴道内感染的诊断试剂，总试剂包括用于吸收阴道分泌物的吸收性材料和包含指示剂和离子平衡试剂的指示剂体系，所述的吸收性材料包括含有季铵盐的固体聚合物，所述的指示剂为含有可电离苯酚基团和带负电荷基团的pH指示剂。指示剂体系与吸收材料相关联，使得由吸收材料吸收的阴道分泌物进一步接触指示组合物，从而可以获得相应颜色变化的可靠的pH指示。这种类型的指示剂可以固定在含有季铵盐的固体聚合物基质中，具有两个有用的结果：（1）当用含水液体样品润湿时，指示剂将保持固定在基质中，即指示剂将抵抗基质或基质邻近区域的渗出；（2）指示剂的转变点，加入指示剂体系的季铵盐会与指示剂作用，而使得发生可见颜色变化的pH值降低，即通过调整聚合物中季铵盐的浓度与指示剂的比例，可以锐化指示剂的变色点，使得指示剂颜色的转变发生在更窄的pH范围内。因此，也可以根据个人的需要，通过调整比例对选定的pH值范围进行优化，使转变点向所需目标范围接近，从而选择更优范围来用于特定用途。

进一步地，总试剂还包括增塑剂和润湿剂，所述的聚合物按照重量比不超过总试剂的50％；同样的，增塑剂其重量不超过35％；润湿剂其重量不超过40％；离子平衡试剂其重量不超过6％；指示剂其重量不超过2％。更优选的方案为聚合物的重量比为30％至50％；增塑剂的重量比为20％至35％；润湿剂的重量比为20％至40％；离子平衡试剂的重量比为1％至6％，指示剂的重量比为0.1％至2％，其中所述百分数为基于上述试剂组合的总试剂的重量等于100％。

进一步地，所述的指示剂为硝嗪黄，百里酚蓝，溴百里酚蓝，二甲苯酚蓝，溴二甲苯酚蓝，酚红，间甲酚紫，氯酚红，溴甲酚紫，茜素红，中性红和/或甲酚红。选用具有负官能团的指示剂。

进一步地，所述的聚合物为纤维素，羧甲基纤维素钠，乙基纤维素，硝化纤维素和/或乙酸纤维素。

进一步地，所述的润湿剂为三甘醇、乙二醇、山梨糖醇或2-乙氧基乙醇。

进一步地，所述的增塑剂为邻苯二甲酸二辛酯、蓖麻油、二乙酰化甘油单酯、邻苯二甲酸二乙酯、甘油、单和双乙酰化单甘油酯、聚乙二醇、邻苯二甲酸二丁酯、丙二醇、甘油三乙酸酯、柠檬酸三乙酯、（2-丁氧基乙基）己二酸酯或双-（2-乙基己基）癸二酸酯。

进一步地，所述的离子平衡试剂为三-十二烷基甲基氯化铵、二（长链烷基）二甲基氯化铵、N-甲基-N、N-双（长链烷酰氧乙基）-N-（2-羟乙基）甲基硫酸铵、乙烯基苄基二甲基椰油酰氯铵、三辛酰甲基氯化铵或十六烷基三甲基氯化铵。

进一步地，所述的总试剂加入一溶剂内，所述溶剂为丙酮、苯甲酸苄酯、丁醇、四氯化碳、玉米油、乙酸乙酯、甘油、己二醇异丙醇、甲醇、二氯甲烷、甲基异丁基酮、碳酸亚丙酯、丙二醇、挥发性醚、四氢呋喃或水。

所述指示剂体系与溶剂之间的体积比为约150：1至约150：30。

本发明与现有技术相比的优点是：1.准确率高，针对细菌性阴道病的临床检测准确率高低主要反映在结果判读上，克服了传统方法中主观影响较大的缺陷。本发明拭子含有指示剂成分，可根据颜色变化直观的判断结果，简单高效，通过拭子的颜色有或无判断阳性或阴性，不受以电脑分泌物其他成分的干扰；2.使用简单、方便，使用者不用去医院检查，可以自己随时测定阴道分泌物的pH值，如发现pH之后不在正常范围，可以马上就医，利于对病情的早期诊断和治疗；3.解决了现有检测方法依赖专业设备、技术要求高、操作难度大、费用高、结果难以判读不足的缺陷，应用前景广阔。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明进一步详述。

实施例1

一种用于阴道内感染的诊断试剂，按照重量比包含36.2％的乙酸纤维素；26.88％的邻苯二甲酸二丁酯（DBP）；33.45％的2-乙氧基乙醇的量；2.90％的甲基三辛基氯化铵（CTAC）；0.56％的硝嗪黄；其中百分数是基于上述试剂组合的总试剂总重量的重量百分数，并且组合物的总重量等于100％（详见表1）。

制备用于鉴定与细菌性阴道病相关的阴道分泌物的拭子的方法包括以下步骤：

步骤1：向20ml丙酮中加入300.0mg醋酸纤维素，223.5mg邻苯二甲酸二丁酯，282.0mg2-乙氧基乙醇，20.0mg CTAC，溶于300μl 水中的4.5mg茜素红。

步骤2：搅拌混合物以完成溶解。

步骤3：取棉签浸入聚合物溶液以得到所需产物。

步骤4：干燥过夜。

成分	用量	含量（％）	用途
				乙酸纤维素	300.0mg	36.22	预聚物
邻苯二甲酸二丁酯（DBP）	223.5mg	26.88	增塑剂
				2-乙氧基乙醇	282.0mg	33.45	润湿剂
十六烷基三甲基氯化铵（CTAC）	20.0mg	2.90	离子平衡剂
				茜素红	4.5mg	0.55	指示剂
丙酮	20ml		溶剂

表1

使用方法，包括以下步骤：1、提供浸有本发明的诊断试剂的无毒棉签；2、将棉签插入阴道内；3、让棉签接触阴道分泌物；4、从阴道移出棉签；5、目视棉签的颜色变化来判断是否可能有细菌性阴道病。棉签在与细菌性阴道病相关的阴道分泌物接触时在1-15秒内改变颜色。

本技术方案的成分选取和重量比的选择均可以按照权利要求中所述的范围进行自由配比，不在此一一举例。

以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书及实施例内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。

Claims

1.一种用于阴道内感染的诊断试剂，其特征在于：总试剂包括用于吸收阴道分泌物的吸收性材料和包含指示剂和离子平衡试剂的指示剂体系，所述的吸收性材料包括含有季铵盐的固体聚合物，所述的指示剂为含有可电离苯酚基团和带负电荷基团的pH指示剂。

2.根据权利要求1所述的一种用于阴道内感染的诊断试剂，其特征在于：总试剂还包括增塑剂和润湿剂，所述的聚合物按照重量比不超过总试剂的50％；同样的，增塑剂其重量不超过35％；润湿剂其重量不超过40％；离子平衡试剂其重量不超过6％；指示剂其重量不超过2％。

3.根据权利要求2所述的一种用于阴道内感染的诊断试剂，其特征在于：所述的指示剂为硝嗪黄，百里酚蓝，溴百里酚蓝，二甲苯酚蓝，溴二甲苯酚蓝，酚红，间甲酚紫，氯酚红，溴甲酚紫，茜素红，中性红和/或甲酚红。

4.根据权利要求1所述的一种用于阴道内感染的诊断试剂，其特征在于：所述的聚合物为纤维素，羧甲基纤维素钠，乙基纤维素，硝化纤维素和/或乙酸纤维素。

5.根据权利要求2所述的一种用于阴道内感染的诊断试剂，其特征在于：所述的润湿剂为三甘醇、乙二醇、山梨糖醇或2-乙氧基乙醇。

6.根据权利要求2所述的一种用于阴道内感染的诊断试剂，其特征在于：所述的增塑剂为邻苯二甲酸二辛酯、蓖麻油、二乙酰化甘油单酯、邻苯二甲酸二乙酯、甘油、单和双乙酰化单甘油酯、聚乙二醇、邻苯二甲酸二丁酯、丙二醇、甘油三乙酸酯、柠檬酸三乙酯、（2-丁氧基乙基）己二酸酯或双-（2-乙基己基）癸二酸酯。

7.根据权利要求1所述的一种用于阴道内感染的诊断试剂，其特征在于：所述的离子平衡试剂为三-十二烷基甲基氯化铵、二（长链烷基）二甲基氯化铵、N-甲基-N、N-双（长链烷酰氧乙基）-N-（2-羟乙基）甲基硫酸铵、乙烯基苄基二甲基椰油酰氯铵、三辛酰甲基氯化铵和/或十六烷基三甲基氯化铵。

8.根据权利要求1所述的一种用于阴道内感染的诊断试剂，其特征在于：所述的总试剂加入一溶剂内，所述溶剂为丙酮、苯甲酸苄酯、丁醇、四氯化碳、玉米油、乙酸乙酯、甘油、己二醇异丙醇、甲醇、二氯甲烷、甲基异丁基酮、碳酸亚丙酯、丙二醇、挥发性醚、四氢呋喃或水。

9.根据权利要求1所述的一种用于阴道内感染的诊断试剂，其特征在于：所述指示剂体系与溶剂之间的体积比为约150：1至约150：30。