CN103999972B - 一种金花石斛茶及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于食品技术领域，具体涉及一种金花石斛茶及其制备方法，所述的金花石斛茶由1-90重量份茶叶、1-50重量份石斛、0.01-10重量份金花菌组成。本发明通过金花菌发酵使茶味更加醇厚，石斛的功效成分能够与茶同步溶出，让人们在喝茶的同时使身体潜移默化的受到了滋养，而且颜色和口感介于红茶与黑茶之间，是一个创新品类，按照生产工艺划分，应该是第七茶-棕茶；具有良好的化学急性肝损伤的保护作用，是一项具有开发前景和开发价值的保健用茶。
Description
技术领域
本发明属于食品技术领域，具体涉及一种金花石斛茶及其制备方法。
背景技术
石斛为兰科植物，其味甘、平、入胃、肺、肾经，具有生津益胃，清热疏风，养阴强肾，益气除热，补肾积精，开胃健脾，通络散结，活血化瘀等功效。民间常用作茶叶代用品，多饮有利于清热、健胃、养阴。
茶叶是我国的传统饮品，自古以来就是人们常饮、常备的饮料，不仅具有生津止喝、醒脑明目、抗疲劳、清热、利尿的作用，还有降血脂、降胆固醇等多种功效。金花茶是一种古老的植物，极为罕见，分布极其狭窄，被誉为“植物界大熊猫”、“茶族皇后”。经过现代医学的权威部门及相关的科研机构的测定：金花茶属无毒级，富含的锗(Ge)、硒(Se)、锌(Zn)、钴(Co)、钼(Mo)、钒(V)等微量元素对人体有重要的保健作用。金花茶叶还含有多种氨基酸、茶多酚、皂甙类、黄酮类等多种人体所需的有益成分；体外抗菌试验表明，金花茶抑菌范围广，对白喉菌、痢疾杆菌、绿脓杆菌和伤寒杆菌有很好的抑制作用。另外，金花茶在动物试验中证明，它还有抑制恶性肿瘤的作用，而在降胆固醇降血脂的对比试验中，金花茶对血清总胆固醇和血清β-脂蛋白的降低率均优于现有西药“安妥明”，因此，金花茶的开发前景十分诱人。
发明内容
本发明的目的是利用发酵技术提供一种金花石斛茶及其制造方法。以在发挥石斛、茶叶、金花菌的多种保健功效，具有良好的化学急性肝损伤的保护作用。
本发明通过下述技术方案实现的。
一种金花石斛茶由1-90重量份茶叶、1-50重量份石斛、0.01-10重量份金花菌组成。
所述的茶叶为茶青或成品茶。
所述的石斛是天然石斛或人工种植石斛或石斛组织培养物。
所述石斛是石斛茎、石斛叶、石斛花的一种或几种。
所述的金花菌为从普洱茶或茯砖茶中分离纯化得到的冠突散囊菌、阿姆斯特丹散囊菌、间型散囊菌、谢瓦散囊菌、匍匐散囊菌、肋状散囊菌、蜡叶散囊菌、赤散囊菌中的一种或几种。
所述的金花菌由以下方法制备：
取普洱熟茶、茯砖茶、自然发花3-8天的茯茶各5-20重量份，消毒后用无菌研钵磨成浆状，加入到无菌蒸馏水或0.1％蛋白胨水中震荡1-60分钟，在有氧或厌氧条件下梯度稀释涂布平板，于10-70℃培养1-30天；从平板上挑选生长较好、黄色颗粒明显的单菌落分别接种于分离培养基斜面，于10-70℃培养1-30天，出现明显黄色颗粒的菌株即为筛选的金花菌，菌种可为菌曲或菌液形式；所述分离培养基为：茶叶1-300g/L、石斛1-300g/L、蔗糖1-300g/L、胰化蛋白胨1-100g/L、酵母提取物1-100g/L、NaCl0.1-200g/L、琼脂1-50g/L，pH3-8。
所述的金花石斛茶由以下方法制备：
步骤1：将石斛与茶叶按照重量比1∶(0.1-100)混匀后，在50-300℃条件下杀青1-90分钟后揉捻1-50分钟得揉捻叶，同时控制湿度为10-30％；
将步骤1得到的揉捻叶在密封条件下于121℃高压蒸汽下灭菌1-30分钟后，在无菌条件下按每100g灭菌茶叶的量接种0.1-5ml金花菌菌液，并且于温度20-50℃、湿度40-80％下培养发酵1-10天，取出发酵茶叶于60-120℃下烘至水分含量为3-7％，趁热放入桶中密封陈化1-90天得到金花石斛散茶；可进一步通过蒸压制成各种形状的金花石斛茶。
所述的茶叶经进行3-7小时的通透式萎凋，使茶叶呈现萎蔫状态至湿度为20-30％。
所述的茶叶经高温蒸汽蒸1-20分钟同时控制湿度为20-30％。
所述的石斛如为石斛花需于晴天早晨6：00-9：00点，用剪刀把石斛的花序柄基部剪断，将整个花序取下去除变色花蕾、杂物，再将花朵摘下，然后将石斛花朵平摊放置在通风透气的干燥环境内下阴干至含水量为20-30％。
本发明通过金花菌发酵使茶味更加醇厚，石斛的功效成分能够与茶同步溶出，让人们在喝茶的同时使身体潜移默化的受到了滋养，而且颜色和口感介于红茶与黑茶之间，是一个创新品类，按照生产工艺划分，应该是第七茶-棕茶；且具有良好的化学急性肝损伤的保护作用。
实施例
实施例1
一种金花石斛茶，由40g天然石斛的石斛茎、50g茶叶、0.01g金花菌组成。
金花菌的制备方法：
取普洱熟茶、茯砖茶、自然发花3-8天的茯茶各5g，消毒后用无菌研钵磨成浆状，加入到无菌蒸馏水中震荡1分钟，在有氧条件下梯度稀释涂布平板，于10℃培养30天；从平板上挑选生长较好、黄色颗粒明显的冠突散囊菌菌落接种于分离培养基斜面，于10℃培养30天，出现明显黄色颗粒的菌株即为筛选的金花菌，菌种可为菌曲形式；所述分离培养基为：茶叶1-g/L、石斛300g/L、蔗糖1g/L、胰化蛋白胨1g/L、酵母提取物100g/L、NaCl0.1g/L、琼脂50g/L，pH3。
金花石斛茶的制备方法
步骤1：将40g天然石斛的石斛茎与成品茶茶叶50g混匀后，在50℃条件下杀青90分钟后揉捻50分钟得揉捻叶，同时控制湿度为10％；
步骤2：将步骤1得到的揉捻叶在密封条件下于121℃高压蒸汽下灭菌1分钟后，在无菌条件下按每100g灭菌茶叶的量接种0.1ml金花菌菌液，并且于温度20℃、湿度40％下培养发酵10天，取出发酵茶叶于60℃下烘至水分含量为3％，趁热放入桶中密封陈化90天得到金花石斛散茶。
实施例2
一种金花石斛茶，由10g人工种植石斛的石斛叶、10g茶叶、10g金花菌组成。
金花菌的制备方法：
取普洱熟茶、茯砖茶、自然发花3-8天的茯茶各20g，消毒后用无菌研钵磨成浆状，加入到0.1％蛋白胨水中震荡60分钟，在厌氧条件下梯度稀释涂布平板，于70℃培养1天；从平板上挑选生长较好、黄色颗粒明显的阿姆斯特丹散囊菌菌落、间型散囊菌菌落分别接种于分离培养基斜面，于70℃培养1天，出现明显黄色颗粒的菌株即为筛选的金花菌，菌种可为菌液形式；所述分离培养基为：茶叶300g/L、石斛1g/L、蔗糖300g/L、胰化蛋白胨100g/L、酵母提取物1g/L、NaCl200g/L、琼脂50g/L，pH8。
金花石斛茶的制备方法
步骤1：茶叶的前处理：鲜茶叶于30℃、相对湿度20％条件下对鲜茶叶进行3小时的通透式萎凋；
步骤2：将10g人工种植石斛的石斛叶与步骤1所得的10g茶叶混匀后，在300℃条件下杀青1分钟后揉捻1分钟得揉捻叶，同时控制湿度为30％；
步骤3：将步骤2得到的揉捻叶在密封条件下于121℃高压蒸汽下灭菌30分钟后，在无菌条件下按每100g灭菌茶叶的量接种5ml金花菌菌液，并且于温度50℃、湿度80％下培养发酵1天，取出发酵茶叶于120℃下烘至水分含量为3％，趁热放入桶中密封陈化90天得到金花石斛散茶。
实施例3
一种金花石斛茶，由20g石斛花、80g茶叶、1g金花菌组成。
金花菌的制备方法：
取普洱熟茶8g、茯砖茶10g、自然发花3-8天的茯茶8g，消毒后用无菌研钵磨成浆状，加入到无菌蒸馏水中震荡10分钟，在有氧条件下梯度稀释涂布平板，于20℃培养3天；从平板上挑选生长较好、黄色颗粒明显的谢瓦散囊菌菌落接种于分离培养基斜面，于20℃培养5天，出现明显黄色颗粒的菌株即为筛选的金花菌，菌种可为菌曲形式；所述分离培养基为：茶叶100g/L、石斛10g/L、蔗糖15g/L、胰化蛋白胨10g/L、酵母提取物10g/L、NaCl1g/L、琼脂5g/L，pH4。
金花石斛茶的制备方法：
步骤1：取茶青经高温蒸汽蒸20分钟同时控制湿度为20％；
步骤2：将石斛花于晴天早晨6：00-9：00点，用剪刀把石斛的花序柄基部剪断，将整个花序取下去除变色花蕾、杂物，再将花朵摘下，然后将石斛花朵平摊放置在通风透气的干燥环境内下阴干至含水量为20-30％。
步骤3：将步骤2所得20g石斛花与步骤1处理过的80g茶叶混匀后，在100℃条件下杀青30分钟后揉捻25分钟得揉捻叶，同时控制湿度为15％；
步骤4：将步骤3所得在密封条件下于121℃高压蒸汽下灭菌10分钟后，在无菌条件下按每100g灭菌茶叶的量接种0.5ml金花菌菌液，并且于温度25-30℃、湿度40-50％下培养发酵4天，取出发酵茶叶于60-65℃下烘至水分含量为3-4％，趁热放入桶中密封陈化20天得到金花石斛散茶。
实施例4
一种金花石斛茶，由20g石斛组织培养物、30g茶叶、1g金花菌组成。
金花菌的制备方法：
取普洱熟茶5g、茯砖茶18g、自然发花3-8天的茯茶20g，消毒后用无菌研钵磨成浆状，加入到0.1％蛋白胨水中震荡50分钟，在厌氧条件下梯度稀释涂布平板，于60℃培养20天；从平板上挑选生长较好、黄色颗粒明显的蜡叶散囊菌菌落、肋状散囊菌菌落分别接种于分离培养基斜面，于30-35℃培养29天，出现明显黄色颗粒的菌株即为筛选的金花菌，菌种可为菌曲形式；所述分离培养基为：茶叶150g/L、石斛200g/L、蔗糖10g/L、胰化蛋白胨90g/L、酵母提取物30g/L、NaCl20g/L、琼脂15g/L，pH3-4.5。
金花石斛茶制备方法
步骤1：茶叶的前处理：鲜茶叶于25℃、相对湿度27％条件下对鲜茶叶进行7小时的通透式萎凋，使鲜茶叶呈现萎蔫状态；
步骤2：将20g石斛组织培养物与步骤1所得的30g茶叶混匀后，在200-300℃条件下杀青70-80分钟后揉捻20-35分钟揉捻叶，同时控制湿度为25-30％；
步骤3：将步骤1得到的揉捻叶在密封条件下于121℃高压蒸汽下灭菌10分钟后，在无菌条件下按每100g灭菌茶叶的量接种3ml金花菌菌液，并且于温度45-50℃、湿度70-80％下培养发酵2天，取出发酵茶叶于100-120℃下烘至水分含量为6-7％，趁热放入桶中密封陈化80-90天得到金花石斛散茶。
实施例5
一种金花石斛茶，由90g石斛组织培养物、10g茶叶、8g金花菌组成。
金花菌的制备方法：
取普洱熟茶、茯砖茶、自然发花4-7天的茯茶各10g，消毒后用无菌研钵磨成浆状，加入到无菌蒸馏水中震荡1-60分钟，在厌氧条件下梯度稀释涂布平板，于50-60℃培养10-15天；从平板上挑选生长较好、黄色颗粒明显的赤散囊菌菌落接种于分离培养基斜面，于20-30℃培养20天，出现明显黄色颗粒的菌株即为筛选的金花菌，菌种可为菌曲形式；所述分离培养基为：茶叶150g/L、石斛200g/L、蔗糖10g/L、胰化蛋白胨70g/L、酵母提取物30g/L、NaCl0.5g/L、琼脂28g/L，pH6。
金花石斛茶的制备方法
步骤1：将90g石斛组织培养物与10g茶叶混匀后，在250℃条件下杀青60分钟后揉捻40分钟，再使用高温蒸汽蒸25分钟得揉捻叶，同时控制湿度为18％；
步骤2：将步骤1得到的揉捻叶在密封条件下于121℃高压蒸汽下灭菌20分钟后，在无菌条件下按每100g灭菌茶叶的量接种3ml金花菌菌液，并且于温度25℃、湿度45-55％下培养发酵5天，取出发酵茶叶于80-100℃下烘至水分含量为4-6％，趁热放入桶中密封陈化30天得到金花石斛散茶。
试验例：对小鼠化学急性肝损伤的保护作用实验
试验药物：取实施例1-5所得金花石斛茶及石斛各5g，加入100m沸水浸泡30分钟后作为试验药物。
实验小鼠分组：将实验动物小鼠分为组，每组12只小鼠，采用灌胃法，每天以50ml/kg给药量给小鼠灌胃不同药物；
正常组：1-8天，全部使用生理盐水，末次灌药之后禁食8h，摘眼球取血；
模型组：1-7天，生理盐水，第8天灌药0.1％CCl4，禁食8h摘眼球取血；
治疗组：1-7天试验药物，第8天灌药0.1％CCl4，末次给药后禁食8h，摘眼球取血；
实验小鼠处理：除去已死亡的小鼠，对存活的小鼠取血后，室温静置沉降。3小时后，离心(3000rpm)，吸上清转移到新的1.5ml离心管中，用HITACH全自动生化分析仪测定数据；
切片和染色：取实验小鼠肝脏右叶，放入体积分数为10％甲醛溶液中固定，石蜡包埋，切片和HE染色，在普通光镜观察肝脏损伤情况。
实验结果：
1、模型组与正常组比较，说明四氯化碳对肝脏各种指标均有较大影响，特别对ALT，AST的指标影响巨大，说明肝脏损害程度特别大；
2、治疗组与模型组、正常组比较，说明本发明组合物对化学肝损伤有明显的保护作用，特别对ALT和AST指标恢复程度明显，而且就这两种指标而言，籽瓜原汁对CCl4造成的肝脏损伤的保护效力强于传统的联苯双酯，对比数据见表1；
3、实验小鼠肝脏右叶切片H&E染色结果也同时表明本发明组合物有助于降低肝脏损伤程度，保护肝脏。
表1各实验小组小鼠CCl4处理后ALT，AST，CHO和TG变化的平均值
注：与模型组比较***P＜0.001，**P＜0.01，*P＜0.05；与石斛组比较#P＜0.05。
结论：上述试验表明，本发明组合物对小鼠化学急性肝损伤具有很好保护作用；检测上述试验药物中的石斛多糖有效成分，本发明茶叶组比石斛组多糖含量高2-3倍，这也证明了本发明茶叶具有更好的药理作用的物质基础；因此，本发明制备方法得到的茶叶是一项具有开发前景和开发价值的保健用茶。
Claims (4)
1.一种金花石斛茶，其特征在于由1-90重量份茶叶、1-50重量份石斛、0.01-10重量份金花菌制成；所述的金花石斛茶由以下方法制备：
步骤1：将石斛与茶叶按照重量比混匀后，在50-300℃条件下杀青1-90分钟后揉捻1-50分钟得揉捻叶，同时控制湿度为10-30％；
步骤2：将步骤1得到的揉捻叶在密封条件下于121℃高压蒸汽下灭菌1-30分钟后，在无菌条件下接种金花菌菌液，并且于温度20-50℃、湿度40-80％下培养发酵1-10天，取出发酵茶叶于60-120℃下烘至水分含量为3-7％，趁热放入桶中密封陈化1-90天得到金花石斛散茶；进一步通过蒸压制成各种形状的金花石斛茶；其中，所述茶叶为成品茶，需首先经高温蒸汽蒸1-20分钟同时控制湿度为20-30％；
金花菌由以下方法制备：取普洱熟茶、茯砖茶、自然发花3-8天的茯茶各5-20重量份，消毒后用无菌研钵磨成浆状，加入到无菌蒸馏水或0.1％蛋白胨水中震荡1-60分钟，在有氧或厌氧条件下梯度稀释涂布平板，于10-70℃培养1-30天；从平板上挑选生长较好、黄色颗粒明显的单菌落分别接种于分离培养基斜面，于10-70℃培养1-30天，出现明显黄色颗粒的菌株即为筛选的金花菌，菌种为菌曲或菌液形式；分离培养基为：茶叶1-300g/L、石斛1-300g/L、蔗糖1-300g/L、胰化蛋白胨1-100g/L、酵母提取物1-100g/L、NaCl0.1-200g/L、琼脂1-50g/L，pH3-8。
2.根据权利要求1所述的金花石斛茶，其特征在于所述的石斛是天然石斛或人工种植石斛或石斛组织培养物。
3.根据权利要求1所述的金花石斛茶，其特征在于所述石斛是石斛茎、石斛叶、石斛花的一种或几种。
4.根据权利要求1所述的金花石斛茶，其特征在于，所述的石斛为石斛花时，需于晴天早晨6：00-9：00点，用剪刀把石斛的花序柄基部剪断，将整个花序取下去除变色花蕾、杂物，再将花朵摘下，然后将石斛花朵平摊放置在通风透气的干燥环境下阴干至含水量为20-30％。
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