CN103898092A - 一种快速磁珠法提取植物组织基因组dna的试剂盒及方法 - Google Patents
一种快速磁珠法提取植物组织基因组dna的试剂盒及方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN103898092A CN103898092A CN201410039630.XA CN201410039630A CN103898092A CN 103898092 A CN103898092 A CN 103898092A CN 201410039630 A CN201410039630 A CN 201410039630A CN 103898092 A CN103898092 A CN 103898092A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- liquid
- lysis
- magnetic bead
- chlor
- edta
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Images
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一种快速磁珠法提取植物组织基因组DNA的试剂盒及提取方法，包括LysisA液、LysisB液、LysisC液、磁珠悬液、结合液、wshing1液、wshing2液、洗脱液。利用本发明试剂盒提取植物组织基因组DNA回收率高、纯度高、片段完整、无PCR抑制物质。DNA提取从裂解、纯化到收集产物的全过程均可由仪器完成，自动化程度高，提取所使用的试剂高效安全，最大程度避免对人体的伤害。
Description
技术领域
本发明属于分子生物学领域，具体涉及一种利用磁珠法提取植物组织基因组DNA的试剂盒及其提取方法。
背景技术
核酸的分子生物学技术是进行病原微生物检测，转基因检测，物种鉴定，物种起源、多样性评估及其亲缘关系、系统进化等常用研究手段之一。纯化的DNA是用来进行PCR检测、基因测序的基础物质，尽管在不同样品（动物组织、微生物）中，DNA 是一个相对稳定的分子，但是对于植物组织来说， DNA 提取技术仍然是基于 DNA 扩增的检测技术的瓶颈，能否取得高质量的核酸DNA是后续分析技术成功与否的关键，提取方法的灵敏度、速度也将直接关系到后续试验的成败。对于一般的分析来说，好的制备技术应该是简便、安全、廉价，并且能保证DNA纯度和浓度。用于检测分析的DNA应具备一定的浓度、纯度、完整性。提取试剂和提取技术都可能对这些参数造成影响。
传统的核酸分离方法主要有化学法、抽提法、物理冷冻、煮沸法和和硅胶膜吸附，提取的步骤主要包含细胞裂解、有机溶剂萃取、沉淀，高速离心等过程，植物组织裂解步骤中，去污剂破坏细胞壁使蛋白-核酸复合物游离到溶液中，蛋白质和多糖结合CTAB或PVP从溶解DNA的液相中分离出来，SDS分离核蛋白和核酸，用酚和/或氯仿去除液相中有活性的核酸酶和PCR抑制因子，如亲脂类分子、多糖、蛋白质，用醇洗涤后即可得到核酸DNA。硅胶膜吸附也可用来协助DNA的提取和纯化，裂解后，DNA结合盐酸胍－氢氧化物离液剂中的硅胶颗粒而沉淀，沉淀用醇洗涤，最后，沉淀用低浓度盐溶液溶解。这些纯化方法的步骤繁杂、费时长、回收率低，且提取过程中使用酚、氯仿、异丙醇等有毒有害物质，影响人体健康。
磁珠分离纯化技术是近年来发展起来的新方法，是一种简单有效的核酸提纯方法，主要原理是在具有超顺磁性的磁核上均匀包被二氧化硅，二氧化硅连接能特异性吸附核酸的功能基团，在有特定盐如PEG8000等存在的样本裂解溶液中特异性地吸附目标核酸，随后通过分离磁珠达到分离提取核酸的目的。磁珠法克服了传统方法的缺点，具有简便、快捷、高效等特点，很容易实现自动化，因此，该方法已广泛应用于病毒、动物组织等的DNA和RNA的提取中，也出现了各种相应试剂盒。
植物细胞与动物细胞相比，除有细胞壁外，还含有大量的多糖、脂质、色素和酚类物质，利用现有的磁珠法提取DNA试剂盒对植物组织的基因组DNA进行提取，所得产物的回收率和纯度都比较低，不能满足进一步实验的需求。
发明内容
本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种快速磁珠法提取植物组织基因组DNA的试剂盒。
本发明的另一个目的是提供一种快速磁珠法提取植物组织基因组DNA的方法。
本发明的目的通过下述技术方案予以实现：
一种快速磁珠法提取植物组织基因组DNA的试剂盒，其特征在于：包括Lysis A液、Lysis B液、Lysis C液、磁珠悬液、结合液、wshing1液、wshing2液、洗脱液。
优选的，Lysis A液为1～2% CTAB， 0.1～0.2mol/L氯化钠，10～20mmol/L EDTA，80～ 120mmol/L Tris-HCL ，pH=7.5～ 8.5；Lysis B液为10～ 20%β-巯基乙醇；LysisC 液为10～30mg/mL蛋白酶K；磁珠悬浮液由磁珠和含有10～20mmol/L氯化钠及0.01～0.05% NaN3 的水溶液按1：30～50的重量比组成；结合液为5～10% PEG8000（聚乙二醇8000），2～4M GITC（异硫氰酸胍）；washing1液为0.5～1mol/L GITC，0.1～0.2mol/L氯化钠，5～10mmol/L EDTA，20～ 40mmol/L Tris-HCL ，0.2% trionx-100， pH=5.5～ 6.5；washing2液为5～10mmol/L EDTA，20～ 40mmol/L Tris-HCL ，0.1～0.2mol/L氯化钠， pH=5.5～ 6.5；洗脱液为0.5～1.5mmol/L EDTA，5～ 15mmol/L Tris-HCL，PH=7.5～8.5。
优选的，Lysis A液为1.6% CTAB， 0.12mol/L氯化钠，15mmol/L EDTA，80mmol/L Tris-HCL ，pH=7.8；Lysis B液为20%β-巯基乙醇；LysisC 液为20mg/mL蛋白酶K；磁珠悬浮液由磁珠和含有20mmol/L氯化钠及0.03% NaN3 的水溶液按1：35的重量比组成；结合液为10% PEG8000（聚乙二醇8000），3.5M GITC（异硫氰酸胍）；washing1液为0.5mol/L GITC，0.14mol/L氯化钠，8mmol/L EDTA，25mmol/L Tris-HCL ，0.2% trionx-100， pH=5.8；washing2液为8mmol/L EDTA，25mmol/L Tris-HCL ，0.14mol/L氯化钠， pH=5.8；洗脱液为0.1mmol/L EDTA，5mmol/L Tris-HCL，PH=8.2。
优选的，所述磁珠的直径为0.5～2μm。
本发明的一种技术方案为提供一种植物基因组DNA的提取方法，其特征在于：包括如下步骤：
1）将25～100mg预处理后的新鲜植物组织加入到权利要求1所述的Lysis溶液（Lysis A : Lysis B : Lysis C=150～200 : 2 : 5）207μl中，60～70℃温浴15～30min；
2）12000r离心10min，取上清液100μl，加入权利要求1或4所述的结合液100～150μl和权利要求1或3所述的5μl磁珠悬液，混合均匀；
3）将磁珠转移到washing1液中清洗；
4）将磁珠转移到washing2液中清洗；
5）清洗后的磁珠用洗脱液进行洗脱，得到纯化的DNA 。
优选的，步骤1）中，样品与Lysis液的质量体积比为25～100mg : 150～250μl。
优选的，步骤2）中，上清液与结合液的体积比为1 : 1～2。
优选的，步骤3）中，参与核酸提取的磁珠与washing1液的体积比为5～10 : 200~400 ，优选的，步骤4）中，参与核酸提取的磁珠与washing2液的体积比为5～10 : 400~600 。
优选的，步骤1）中，样品与Lysis液的质量体积比为30mg : 207μl；步骤2）中，上清液与结合液的体积比为1：1.5；步骤（3）中，参与核酸提取的磁珠与washing1液的体积比为5: 300 ；步骤4）中，参与核酸提取的磁珠与washing2液的体积比为5 : 500。
优选的，所述植物组织包括新鲜植物叶片、干植物叶片、大豆种子、小麦种子、玉米种子等。
本发明的有益效果在于：
1）利用本发明试剂盒提取的基因组DNA回收率高、纯度高、片段完整、无PCR抑制物质，使用本试剂提取30mg干燥大豆、小麦、玉米叶片组织，分别纯化得到了约8μg、15μg和7μg的高纯度基因组DNA，纯度A260/280＝1.7-1.9之间。
2）本发明的DNA提取方法仅需4个步骤，分别是裂解、沉淀、清洗、洗脱，从裂解、纯化到收集产物的全过程均可由仪器完成，自动化程度高，实验过程中完全无需人工干预和检测，且提取所使用的试剂高效安全，最大程度的避免对人体的伤害。
附图说明
图l：不同方法提取大豆、小麦及玉米基因组DNA的PCR检测结果图；
其中：1-4：大豆；5-8：小麦；9-12：玉米。1、5、9本发明试剂盒3； 2、6、10索莱宝植物DNA提取试剂盒； 3、7、11金麦格植物DNA提取试剂盒； 4、8、12天根植物DNA提取试剂盒； M：Marker I 100，200，300，400，500，600
图2：本发明试剂盒3提取大豆、小麦、玉米结果图；
其中：1、2：大豆，3、4：小麦，5、6玉米，M：markerλDNA/Hind III 125，564，2027，2322，4361，6557，9416，23130
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的说明，但并不局限于此。
实施例1
一种快速磁珠法提取植物组织基因组DNA的试剂盒1，包括Lysis A液、Lysis B液、Lysis C液、磁珠悬液、结合液、wshing1液、wshing2液、洗脱液。
其中，Lysis A液为1% CTAB， 0.1mol/L氯化钠，10mmol/L EDTA，80mmol/L Tris-HCL ，pH=7.5；Lysis B液为10%β-巯基乙醇；LysisC 液为10mg/mL蛋白酶K；磁珠悬浮液由磁珠和含有10mmol/L氯化钠及0.01% NaN3 的水溶液按1：30的重量比组成；结合液为5% PEG8000（聚乙二醇8000），2M GITC（异硫氰酸胍）；washing1液为0.5mol/L GITC，0.1mol/L氯化钠，5mmol/L EDTA，20mmol/L Tris-HCL ，0.2% trionx-100， pH=5.5；washing2液为5mmol/L EDTA，20mmol/L Tris-HCL ，0.1mol/L氯化钠， pH=5.5；洗脱液为0.5mmol/L EDTA， 5mmol/L Tris-HCL，PH=7.5。
一种快速磁珠法提取植物组织基因组DNA的试剂盒2，包括Lysis A液、Lysis B液、Lysis C液、磁珠悬液、结合液、wshing1液、wshing2液、洗脱液。其中，Lysis A液为2% CTAB， 0.2mol/L氯化钠，20mmol/L EDTA，120mmol/L Tris-HCL ，pH= 8.5；Lysis B液 20%β-巯基乙醇；LysisC液为30mg/mL蛋白酶K；磁珠悬浮液由磁珠和含有20mmol/L氯化钠及0.05% NaN3 的水溶液按1： 50的重量比组成；结合液为10% PEG8000（聚乙二醇8000），4M GITC（异硫氰酸胍）；washing1液为1mol/L GITC，0.2mol/L氯化钠，10mmol/L EDTA， 40mmol/L Tris-HCL ，0.2% trionx-100， pH=5.5～ 6.5；washing2液为5～10mmol/L EDTA，20～ 40mmol/L Tris-HCL ，0.1～0.2mol/L氯化钠， pH=5.5～ 6.5；洗脱液为0.5～1.5mmol/L EDTA，5～ 15mmol/L Tris-HCL，PH=7.5～8.5。
一种快速磁珠法提取植物组织基因组DNA的试剂盒3，包括Lysis A液、Lysis B液、Lysis C液、磁珠悬液、结合液、wshing1液、wshing2液、洗脱液。经过正交试验测试优选的其各成分的组成为，Lysis A液为1.6% CTAB， 0.12mol/L氯化钠，15mmol/L EDTA，80mmol/L Tris-HCL ，pH=7.8；Lysis B液为20%β-巯基乙醇；LysisC 液为20mg/mL蛋白酶K；磁珠悬浮液由磁珠和含有20mmol/L氯化钠及0.03% NaN3 的水溶液按1：35的重量比组成；结合液为10% PEG8000（聚乙二醇8000），3.5M GITC（异硫氰酸胍）；washing1液为0.5mol/L GITC，0.14mol/L氯化钠，8mmol/L EDTA，25mmol/L Tris-HCL ，0.2% trionx-100， pH=5.8；washing2液为8mmol/L EDTA，25mmol/L Tris-HCL ，0.14mol/L氯化钠， pH=5.8；洗脱液为0.1mmol/L EDTA，5mmol/L Tris-HCL，PH=8.2。
分别利用上述3种试剂盒提取大豆基因组DNA，包括如下步骤：
1. 取30mg粉碎的大豆干燥叶片，加入到207μl lysis液（Lysis A : Lysis B : Lysis C=150: 2 : 5，使用前混匀）中，65℃孵化30min。
2. 常温12000rpm，离心10min，观察样品沉淀完全，吸取上清液备用。
3. 转移100μl上清液，加入到与NP968核酸仪配套的96深孔板的第一、七列孔内，再向第一、七列孔内中加入150μl 结合液和5μl磁珠悬液；第二、八列孔中加入300μl washing1液；第三、九列孔中加入500μl washing2液，第六、十二列孔加100 μl洗脱液；第四、五、十、十一列孔空置，不加任何试剂。
4. 将加好的深孔板及搅拌套装入核酸提取仪，运行程序，程序步骤如下：
5. 吸取第六、十二列孔洗脱液转移至PCR管中，即提取的基因组DNA，置于冰箱中备用。
6. 运用微量分光光度仪（Eppendorf BioPhotometer plus ）测定DNA的浓度和纯度，以其它3种常规商品试剂盒的提取结果作为对照，测定20组提取结果，求平均值X。结果如表1所示。
| 试剂盒 | 浓度（μg/ml） | OD260/280 |
| 本发明试剂盒1 | 92 | 1.81 |
| 本发明试剂盒2 | 87 | 1.85 |
| 本发明试剂盒3 | 108 | 1.96 |
| 索莱宝植物DNA提取试剂盒 | 78 | 1.73 |
| 金麦格植物DNA提取试剂盒 | 74 | 1.65 |
| 天根植物DNA提取试剂盒 | 65 | 1.62 |
表1
从以上结果可以看出，本发明的三个试剂盒均相对于现有技术的试剂盒有着更好的DNA提取效率，并且本发明的试剂盒3相对于试剂盒1和2提取效果更佳。
实施例2
采用实施例1的试剂盒3和 提取小麦的基因组DNA，包括如下步骤：
1. 取30mg粉碎过的小麦叶片，加入到207μl lysis液Lysis A : Lysis B : Lysis C=150: 2 : 5，使用前混匀）中，65℃孵化30min。
2. 常温12000rpm，离心10min，观察样品沉淀完全，吸取上清液备用。
3. 转移100μl上清液，加入到与NP968核酸仪配套的96深孔板的第一、七列孔内，再向第一、七列孔内中加入150μl 结合液和5μl磁珠悬液；第二、八列孔中加入300μl washing1液；第三、九列孔中加入500μl washing2液，第六、十二列孔加100 μl洗脱液；第四、五、十、十一列孔空置，不加任何试剂。
4. 将加好的深孔板及搅拌套装入核酸提取仪，运行程序，程序步骤如下：
5. 吸取第六、十二列孔洗脱液转移至PCR管中，即提取的基因组DNA，置于冰箱中备用。
6. 运用微量分光光度仪（Eppendorf BioPhotometer plus ）测定DNA的浓度和纯度，以其它3种常规商品试剂盒的提取结果作为对照，测定20组提取结果，求平均值X。结果如表2所示。
| 试剂盒 | 浓度（μg/ml） | OD260/280 |
| 本发明试剂盒 | 150 | 1.97 |
| 索莱宝植物DNA提取试剂盒 | 118 | 1.58 |
| 金麦格植物DNA提取试剂盒 | 93 | 1.67 |
| 天根植物DNA提取试剂盒 | 96 | 1.69 |
表2
实施例3
采用实施例1的试剂盒3和市面上有的商品试剂盒提取玉米的基因组DNA，包括如下步骤：
1. 取30mg粉碎过的小麦叶片，加入到207μl lysis液Lysis A : Lysis B : Lysis C=150: 2 : 5，使用前混匀）中，65℃孵化30min。
2. 常温12000rpm，离心10min，观察样品沉淀完全，吸取上清液备用。
3. 转移100μl上清液，加入到与NP968核酸仪配套的96深孔板的第一、七列孔内，再向第一、七列孔内中加入150μl 结合液和5μl磁珠悬液；第二、八列孔中加入300μl washing1液；第三、九列孔中加入500μl washing2液，第六、十二列孔加100 μl洗脱液；第四、五、十、十一列孔空置，不加任何试剂。
4. 将加好的深孔板及搅拌套装入核酸提取仪，运行程序，程序步骤如下：
5. 吸取第六、十二列孔洗脱液转移至PCR管中，即提取的基因组DNA，置于冰箱中备用。
6. 运用微量分光光度仪（Eppendorf BioPhotometer plus ）测定DNA的浓度和纯度，以其它3种常规商品试剂盒的提取结果作为对照，测定20组提取结果，求平均值X。结果如表3所示。
| 试剂盒 | 浓度（μg/ml） | OD260/280 |
| 本发明试剂盒 | 215 | 1.94 |
| 索莱宝植物DNA提取试剂盒 | 138 | 1.68 |
| 金麦格植物DNA提取试剂盒 | 141 | 1.54 |
| 天根植物DNA提取试剂盒 | 124 | 1.79 |
表3
以上实验结果表明，本发明的DNA提取试剂盒与其他3种常规的商品试剂盒相比，所提取的植物基因组DNA回收率高、纯度高、片段完整、无PCR抑制物质。
以上实施例仅为介绍本发明的优选案例，对于本领域技术人员来说，在不背离本发明精神的范围内所进行的任何显而易见的变化和改进，都应被视为本发明的一部分。
Claims (10)
1.一种快速磁珠法提取植物组织基因组DNA的试剂盒，其特征在于：包括Lysis A液、Lysis B液、Lysis C液、磁珠悬液、结合液、wshing1液、wshing2液、洗脱液。
2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：其中，Lysis A液为1～2% CTAB， 0.1～0.2mol/L氯化钠，10～20mmol/L EDTA，80～ 120mmol/L Tris-HCL ，pH=7.5～ 8.5；Lysis B液为10～ 20%β-巯基乙醇；LysisC 液为10～30mg/mL蛋白酶K；磁珠悬浮液由磁珠和含有10～20mmol/L氯化钠及0.01～0.05% NaN3 的水溶液按1：30～50的重量比组成；结合液为5～10% PEG8000（聚乙二醇8000），2～4M GITC（异硫氰酸胍）；washing1液为0.5～1mol/L GITC，0.1～0.2mol/L氯化钠，5～10mmol/L EDTA，20～ 40mmol/L Tris-HCL ，0.2% trionx-100， pH=5.5～ 6.5；washing2液为5～10mmol/L EDTA，20～ 40mmol/L Tris-HCL ，0.1～0.2mol/L氯化钠， pH=5.5～ 6.5；洗脱液为0.5～1.5mmol/L EDTA，5～ 15mmol/L Tris-HCL，PH=7.5～8.5。
3.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于：其中，Lysis A液为1.6% CTAB， 0.12mol/L氯化钠，15mmol/L EDTA，80mmol/L Tris-HCL ，pH=7.8；Lysis B液为20%β-巯基乙醇；LysisC 液为20mg/mL蛋白酶K；磁珠悬浮液由磁珠和含有20mmol/L氯化钠及0.03% NaN3 的水溶液按1：35的重量比组成；结合液为10% PEG8000（聚乙二醇8000），3.5M GITC（异硫氰酸胍）；washing1液为0.5mol/L GITC，0.14mol/L氯化钠，8mmol/L EDTA，25mmol/L Tris-HCL ，0.2% trionx-100， pH=5.8；washing2液为8mmol/L EDTA，25mmol/L Tris-HCL ，0.14mol/L氯化钠， pH=5.8；洗脱液为0.1mmol/L EDTA，5mmol/L Tris-HCL，PH=8.2。
4.如权利要求l-3任一项所述的试剂盒，其特征在于：所述磁珠的直径为0.5～2μm。
5.一种利用权利要求1-4任一项所述的试剂盒快速提取植物组织基因组DNA的方法，其特征在于：包括如下步骤：
1）将25～100mg预处理后的新鲜植物组织加入到Lysis溶液（Lysis A : Lysis B : Lysis C=150～200 : 2 : 5）中，60～70℃温浴15～30min；
2）12000r离心10min，取上清液100μl，加入结合液100～150μl和5μl磁珠悬液，混合均匀；
3）将磁珠转移到washing1液中清洗；
4）将磁珠转移到washing2液中清洗；
5）清洗后的磁珠用洗脱液进行洗脱，得到纯化的DNA 。
6.如权利要求5所述的提取方法，其特征在于：步骤1）中，样品与Lysis液的质量体积比为25～100mg : 150～250μl。
7.如权利要求5所述的提取方法，其特征在于：步骤2）中，上清液与结合液的体积比为1 : 1～2。
8.如权利要求5所述的提取方法，其特征在于：步骤3）中，参与核酸提取的磁珠与washing1液的体积比为5～10 : 200~400 ，优选的，步骤4）中，参与核酸提取的磁珠与washing2液的体积比为5～10 : 400~600 。
9.如权利要求5所述的提取方法，其特征在于：步骤1）中，样品与Lysis液的质量体积比为30mg : 207μl；步骤2）中，上清液与结合液的体积比为1：1.5；步骤（3）中，参与核酸提取的磁珠与washing1液的体积比为5: 300 ；步骤4）中，参与核酸提取的磁珠与washing2液的体积比为5 : 500。
10.如权利要求5所述的提取方法，其特征在于：所述植物组织包括新鲜植物叶片、干植物叶片、大豆种子、小麦种子、玉米种子等。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410039630.XA CN103898092B (zh) | 2014-01-27 | 2014-01-27 | 一种快速磁珠法提取植物组织基因组dna的试剂盒及方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410039630.XA CN103898092B (zh) | 2014-01-27 | 2014-01-27 | 一种快速磁珠法提取植物组织基因组dna的试剂盒及方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN103898092A true CN103898092A (zh) | 2014-07-02 |
| CN103898092B CN103898092B (zh) | 2016-08-10 |
Family
ID=50989663
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201410039630.XA Active CN103898092B (zh) | 2014-01-27 | 2014-01-27 | 一种快速磁珠法提取植物组织基因组dna的试剂盒及方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN103898092B (zh) |
Cited By (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105385682A (zh) * | 2015-12-29 | 2016-03-09 | 杭州谷坤生物技术有限公司 | 快速提取人粪便细菌dna的简易方法 |
| CN106893721A (zh) * | 2017-02-16 | 2017-06-27 | 广东氪生物技术有限公司 | 一种用于核酸纯化或片段筛选的试剂盒及其使用方法 |
| CN107815450A (zh) * | 2016-09-13 | 2018-03-20 | 深圳华大基因股份有限公司 | 用于核酸纯化的缓冲液、核酸纯化试剂盒及其应用 |
| CN104404030B (zh) * | 2014-11-04 | 2018-04-13 | 福建农林大学 | 一种快速提取植物基因组dna的试剂盒及方法 |
| CN109306349A (zh) * | 2017-07-26 | 2019-02-05 | 天津迦美惠众科技有限公司 | 一种基于纳米磁珠的生物样品核酸提取纯化方法 |
| CN109576264A (zh) * | 2019-01-04 | 2019-04-05 | 仲恺农业工程学院 | 基于磁珠法从柑橘叶片中脉提取总dna的试剂盒及其提取方法 |
| CN110129314A (zh) * | 2019-04-24 | 2019-08-16 | 合肥欧创基因生物科技有限公司 | 一种氨基酸缓冲液及血浆游离dna提取试剂盒 |
| CN110511977A (zh) * | 2019-09-05 | 2019-11-29 | 武汉华大基因技术服务有限公司 | 基因组dna的提取方法、测序方法及试剂盒 |
| CN111607590A (zh) * | 2020-06-08 | 2020-09-01 | 申翌生物科技(杭州)有限公司 | 适用于全血、血清或血浆的磁珠法核酸提取方法及试剂盒 |
| CN112266949A (zh) * | 2020-10-20 | 2021-01-26 | 生物岛实验室 | 基于pcr反应的多核苷酸扩增方法 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101792757A (zh) * | 2010-03-30 | 2010-08-04 | 上海鼎国生物技术有限公司 | 一种用磁珠分离基因组dna试剂盒及其应用 |
| CN101935645A (zh) * | 2010-09-13 | 2011-01-05 | 原平皓(天津)生物技术有限公司 | 一种从组织细胞中提取dna的试剂盒及其方法 |
| CN102618532A (zh) * | 2012-05-02 | 2012-08-01 | 易春 | 基于磁珠法从植物叶片中提取基因组dna的试剂盒及其提取方法 |
-
2014
- 2014-01-27 CN CN201410039630.XA patent/CN103898092B/zh active Active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101792757A (zh) * | 2010-03-30 | 2010-08-04 | 上海鼎国生物技术有限公司 | 一种用磁珠分离基因组dna试剂盒及其应用 |
| CN101935645A (zh) * | 2010-09-13 | 2011-01-05 | 原平皓(天津)生物技术有限公司 | 一种从组织细胞中提取dna的试剂盒及其方法 |
| CN102618532A (zh) * | 2012-05-02 | 2012-08-01 | 易春 | 基于磁珠法从植物叶片中提取基因组dna的试剂盒及其提取方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 张丽 等: "核酸提取方法的研究进展", 《中国动物检疫》, vol. 28, no. 12, 31 December 2011 (2011-12-31), pages 75 - 78 * |
| 陈丽丽 等: "玉米基因组DNA 提取及浓度测定方法评价", 《生物技术通报》, 31 December 2011 (2011-12-31), pages 70 - 74 * |
Cited By (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104404030B (zh) * | 2014-11-04 | 2018-04-13 | 福建农林大学 | 一种快速提取植物基因组dna的试剂盒及方法 |
| CN105385682A (zh) * | 2015-12-29 | 2016-03-09 | 杭州谷坤生物技术有限公司 | 快速提取人粪便细菌dna的简易方法 |
| CN107815450B (zh) * | 2016-09-13 | 2021-04-27 | 深圳华大基因股份有限公司 | 用于核酸纯化的缓冲液、核酸纯化试剂盒及其应用 |
| CN107815450A (zh) * | 2016-09-13 | 2018-03-20 | 深圳华大基因股份有限公司 | 用于核酸纯化的缓冲液、核酸纯化试剂盒及其应用 |
| CN106893721A (zh) * | 2017-02-16 | 2017-06-27 | 广东氪生物技术有限公司 | 一种用于核酸纯化或片段筛选的试剂盒及其使用方法 |
| CN109306349A (zh) * | 2017-07-26 | 2019-02-05 | 天津迦美惠众科技有限公司 | 一种基于纳米磁珠的生物样品核酸提取纯化方法 |
| CN109576264A (zh) * | 2019-01-04 | 2019-04-05 | 仲恺农业工程学院 | 基于磁珠法从柑橘叶片中脉提取总dna的试剂盒及其提取方法 |
| CN109576264B (zh) * | 2019-01-04 | 2021-11-30 | 仲恺农业工程学院 | 基于磁珠法从柑橘叶片中脉提取总dna的试剂盒及其提取方法 |
| CN110129314A (zh) * | 2019-04-24 | 2019-08-16 | 合肥欧创基因生物科技有限公司 | 一种氨基酸缓冲液及血浆游离dna提取试剂盒 |
| CN110511977A (zh) * | 2019-09-05 | 2019-11-29 | 武汉华大基因技术服务有限公司 | 基因组dna的提取方法、测序方法及试剂盒 |
| CN111607590A (zh) * | 2020-06-08 | 2020-09-01 | 申翌生物科技(杭州)有限公司 | 适用于全血、血清或血浆的磁珠法核酸提取方法及试剂盒 |
| CN111607590B (zh) * | 2020-06-08 | 2021-07-06 | 申翌生物科技(杭州)有限公司 | 适用于全血、血清或血浆的磁珠法核酸提取方法及试剂盒 |
| CN112266949A (zh) * | 2020-10-20 | 2021-01-26 | 生物岛实验室 | 基于pcr反应的多核苷酸扩增方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN103898092B (zh) | 2016-08-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103898092A (zh) | 一种快速磁珠法提取植物组织基因组dna的试剂盒及方法 | |
| EP2304028B1 (en) | Methods and kits for extraction of dna | |
| Pikor et al. | DNA extraction from paraffin embedded material for genetic and epigenetic analyses | |
| CN102604935B (zh) | 一种安全快速从血液中提取基因组dna的方法 | |
| CN102257158B (zh) | 用于dna提取的方法和试剂盒 | |
| CN113151397B (zh) | 一种基于磁珠法提取病毒样本的核酸提取试剂盒 | |
| CN104178480B (zh) | 利用dna吸附柱快速提取植物dna的试剂盒及方法 | |
| CN105420226A (zh) | 一种基于磁珠法的动物组织dna提取试剂盒及其应用 | |
| CN104805073A (zh) | 一种用于病毒基因组核酸提取试剂盒及其方法 | |
| CN101712953B (zh) | 用于评价动物肠道微生物群落多样性的dna提取方法 | |
| CN104630208A (zh) | 提取基因组dna的试剂盒和提取方法 | |
| CN102660537A (zh) | 一种从鸡血中提取大量高纯度dna的方法 | |
| CN104404030B (zh) | 一种快速提取植物基因组dna的试剂盒及方法 | |
| CN106754890A (zh) | 一种病毒rna的提取试剂盒和提取方法 | |
| CN102031252B (zh) | 一种快速提取土壤总dna的方法 | |
| CN105385682A (zh) | 快速提取人粪便细菌dna的简易方法 | |
| CN102732508A (zh) | 一种花生基因组dna的提取方法 | |
| US20170029808A1 (en) | Method for recovering short-chain nucleic acids | |
| CN111718928A (zh) | 一种黄精叶绿体dna提取优化方法 | |
| CN106754895B (zh) | 提取原油总脱氧核糖核酸的方法及试剂盒 | |
| CN106801103B (zh) | 一种无乳链球菌的检测引物组、检测试剂盒和多重pcr检测方法 | |
| CN105985948A (zh) | 一种高效安全提取动物肌肉组织dna的方法 | |
| CN101864489A (zh) | 一种富集转基因产品中外源dna的方法 | |
| CN107267498A (zh) | 一种通用型从微量植物材料中提取dna的试剂盒及方法 | |
| CN104975001A (zh) | 一种无损伤提取脉红螺基因组dna的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant |