CN102333776B - 2-吡啶-2-基-吡唑-3(2h)-酮的衍生物、其制备和治疗用途 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及式(I)化合物，其以碱或酸加成盐的形式：其中n等于0、1、2、3或4；m等于0、1或2；o等于0或1；X表示基团-CH2、-CH(R’)-、-NH(R’)-或选自O和S的杂原子，其中R’表示基团-(C1-C5)烷基、-(C1-C5)烷氧基、-CH2-芳基、-C(O)R5或-COOR5；R1表示氧代基、-COOR5、-W-OH或-W-NR5R6；R2表示H原子或选自以下的基团：(i)-(C1-C5)烷基，(ii)-(C1-C5)烷氧基，(iii)-COOR5，(iv)-NR5R6，(v)-C(O)-NR5R6，(vi)-SO2-NR3R4，(vii)任选被基团-(C1-C5)烷基取代的杂芳基，(viii)-W-芳基，(ix)-W-杂芳基，(x)-O-W-芳基，(xi)-O-W-杂芳基和(xii)-O-W-NR5R6；其中R3和R4，其可相同或不同，(i)彼此独立地表示H原子、基团-(C1-C5)烷基、-(C3-C6)环烷基、芳基、杂芳基、-CH2-杂芳基、-(C1-C5)烷基-NR5R6、-W-OH或-W-NR5R6；或(ii)与携带它们的氮原子一起形成任选被一个或多个选自以下的基团取代的杂环烷基：-(C1-C5)烷基和-CH2-芳基；W为基团-(C1-C5)亚烷基，任选被一个或多个羟基取代；R5和R6，其可相同或不同，彼此独立地表示氢原子或选自以下的基团：基团-(C1-C5)烷基和基团-(C3-C6)环烷基，还涉及所述化合物的制备方法和其治疗用途。

Description

2-吡啶-2-基-吡唑-3(2H)-酮的衍生物、其制备和治疗用途
本发明涉及新的取代的二氢吡唑啉酮衍生物，涉及它们的制备以及它们作为转录因子HIF的活化剂的治疗用途。
缺氧诱导因子(Hypoxia-inducible factor，HIF)(HIF1α)为在所有组织中组成性表达的转录因子。该蛋白由Gregg Semenza于1994年在研究EPO基因的调节序列的过程中发现。他鉴定了位于EPO启动子的非编码3’位的序列，其具有“缺氧应答元件(hypoxia response element)”(HRE)的名称且其为允许EPO转录激活的蛋白HIF1-α结合的位点。之后，HRE序列还位于超过70个其它基因上，如VEGF(血管内皮生长因子)或Glut1(葡萄糖载体1)。该转录复合物HIF-1最小为由蛋白HIF1-α或HIF2-α和另一转录因子ARNT(之前已知为HIF1-α)形成的杂二聚体。ARNT组成性且稳定地在细胞中表达，且转录复合物调节的主要部分与细胞中存在的HIF1-α的量相关，因此其为限制因子。
在常氧条件下，蛋白HIF1-α快速降解(半衰期为5分钟)。在HIF脯氨酰羟化酶(HIF-PHDs或EGLNs)分别羟化人型的脯氨酸402和563以及脯氨酸405和531上的HIF1-α或HIF2-α后发生该降解。该羟化使得Von HippellLindau蛋白(pVHL)与泛素连接酶结合，其导致HIF1-α或HIF2-α通过泛素蛋白酶体系统降解。当细胞或组织经受高缺氧/缺血时，HIF1-α或HIF2-α不再被泛素-蛋白酶体系统降解，然后可与HIF复合物的其它转录因子结合以转移至核中并活化它们的靶基因。
尽管高缺氧是蛋白HIF1-α和HIF2-α活化的主要原因，其它诱导剂(如胰岛素和生长因子)也可在它们的稳定中起作用，尤其通过在它们的丝氨酸641和643上的磷酸化起作用。
因此，建立涉及测量蛋白HIF1-α和/或HIF2-α的稳定的表型筛选以鉴别本发明的化合物。
根据本发明的化合物对应于下式(I)：
其中
n等于0、1、2、3或4；
m等于0、1或2；
o等于0或1；
X表示基团-CH2、-CH(R’)-、-N(R’)-或选自氧原子和硫原子的杂原子，且理解R’表示基团-(C1-C5)烷基、-(C1-C5)烷氧基、-CH2-芳基、-C(O)R5或-COOR5且R5如下定义；
R1表示氧代基、基团-COOR5、基团-W-OH或基团-W-NR5R6，且W、R5和R6如下定义；且
R2表示氢原子或选自以下的基团：(i)基团-(C1-C5)烷基，(ii)基团-(C1-C5)烷氧基，(iii)基团-COOR5，(iv)基团-NR5R6，(v)基团-C(O)-NR5R6，(vi)基团-SO2-NR3R4，(vii)任选被基团-(C1-C5)烷基取代的杂芳基，(viii)基团-W-芳基，(ix)基团-W-杂芳基，(x)基团-O-W-芳基，(xi)基团-O-W-杂芳基和(xii)基团-O-W-NR5R6，且W、R3、R4、R5和R6如下定义；
R3和R4，
(i)其可相同或不同，彼此独立地表示，氢原子、基团-(C1-C5)烷基、基团-(C3-C6)环烷基、芳基、杂芳基、基团-CH2-杂芳基、基团-(C1-C5)烷基-NR5R6、基团-W-OH或基团-W-NR5R6；或
(ii)与携带它们的氮原子一起形成任选被一个或多个选自以下的基团取代的杂环烷基：基团-(C1-C5)烷基和基团-CH2-芳基；
W为基团-(C1-C5)亚烷基，任选被一个或多个羟基取代；且
R5和R6，其可相同或不同，彼此独立地表示，氢原子或选自以下的基团：基团-(C1-C5)烷基和基团-(C3-C6)环烷基。
式(I)化合物可以以碱或盐的形式存在，在该情况下，式(I)化合物用酸或碱(特别是药学上可接受的酸或碱)成盐。它们称为加成盐，特别是酸或碱加成盐，其构成本发明的一部分。所述盐有利地用药学上可接受的酸制备，但是，用于例如纯化或分离式(I)化合物的其它酸的盐也构成本发明的一部分。可提及盐酸盐、三氟乙酸盐和钠盐。
式(I)化合物也可以以溶剂化物的形式存在，即与一个或多个溶剂分子结合或组合的形式。该溶剂合物也构成本发明的一部分。
当o等于0时，则该环仅包含氢原子。
式(I)化合物的多种互变异构形式也构成本发明的一部分：
Figure BDA0000086875870000031
而且，本发明的一个主题还为一种统一测试(uniform test)，其用于在用一种或多种测试化合物处理所述细胞后，通过β-半乳糖苷酶补充直接测量细胞，优选HEK细胞的核中HIF1-α蛋白的量，其由以下组成：
(a)优选在384-孔板中，将所述细胞接种在合适的培养基中，优选1％胎牛血清(缩写为FCS)；
(b)将在合适的溶剂中的测试化合物以合适的浓度添加至之前接种在所述培养基中的细胞中；优选该测试化合物在0.1％FCS中稀释；
(c)在培养箱在约37℃孵育如此制备的细胞，有利地孵育约6小时；
(d)用包含β-半乳糖苷酶的化学发光底物的溶胞缓冲液溶解细胞；
(e)在读数和测量发光之前，避光孵育，该发光是β-半乳糖苷酶活性的函数。
根据本发明的化合物按照以上定义的测试接受筛选测试。
在本发明的上下文中，除非在文中另有所述，否则适用以下定义：
-卤素原子：氟、氯、溴或碘原子；
-烷基：直链或支链的、饱和脂肪基团，其可包含1、2、3、4或5个碳原子(缩写为-(C1-C5)烷基)。可提及的实例包括，作为(i)基团-C1烷基，甲基，作为(ii)基团-C2烷基，乙基，作为(iii)基团-C3烷基，丙基或异丙基，作为(iv)基团-C4烷基，丁基、异丁基或叔丁基，作为(v)基团-C5烷基，戊基或异戊基；
-亚烷基：如上定义的直链或支链的饱和二价烷基，其可包含1、2、3、4或5个碳原子(缩写为-(C1-C5)亚烷基-)。可提及的实例包括亚甲基(或-CH2-)、亚乙基(或-CH2-CH2-)或亚丙基(-CH2-CH2-CH2-)基团；
-环烷基：环状烷基，其可包含3、4、5或6个碳原子，还缩写为-(C3-C6)环烷基。可提及的实例包括环丙基、环丁基、环戊基和环己基；
-烷氧基：基团-O-烷基，其中所述烷基如上定义。可提及的实例包括基团-O-(C1-C5)烷基或-(C1-C5)烷氧基，且特别是，作为(i)基团-O-C1烷基，基团-O甲基，作为(ii)基团-O-C2烷基，基团-O乙基，作为(iii)基团-O-C3烷基，基团-O丙基或-O异丙基，作为(iv)基团-O-C4烷基，基团-O丁基、-O异丁基或-O叔丁基，作为(v)基团-O-C5烷基，基团-O戊基或-O异戊基；
-烷氧基-烷基：式-亚烷基-O-烷基的基团，其中所述烷基和亚烷基(包含相同数量的碳原子或不包含相同数量的碳原子)如上定义。可提及的实例包括基团-(C1-C5)亚烷基-O-(C1-C5)烷基，且-(C1-C5)亚烷基-和-(C1-C5)烷基如上定义；
-卤代烷基：如上定义的烷基，被1、2、3、4或5个如上定义的卤素原子取代。可提及的实例包括基团-卤代(C1-C5)烷基，且(C1-C5)烷基如上定义，且特别为三氟甲基(缩写为-CF3)；
-芳基：含5或6个碳原子的环状芳香基团。可提及的芳基的实例为苯基；
-杂芳基：含2、3、4或5个碳原子且包含1至3个可选自氮原子、氧原子和硫原子的杂原子的环状芳香基团，当有两个杂原子时，它们彼此独立，且相同或不同，或当有3个杂原子时，它们彼此独立，且相同或不同。可提及吡啶基、吡咯基和呋喃基；
-杂环烷基：任选桥联的环状烷基，其包含5、6或7个碳原子且包含1、2或3个可选自氮原子、氧原子和硫原子的杂原子，当有两个杂原子时，它们彼此独立，且相同或不同，或当有3个杂原子时，它们彼此独立，且相同或不同。可特别提及哌啶基、哌嗪基、吡咯烷基、六亚甲基亚胺基(hexamethyleneimino)、吗啉基和1，1-二氧代四氢噻吩基；
-围绕式(I)化合物的吡啶的字母α、β、γ和δ用来识别各碳原子的位置。在本发明所述的化合物中，可提及对应式(I)的第一组化合物，其中：
n等于0、1、2、3或4，
和/或
m等于0、1或2，
和/或
o等于0或1，
和/或
X表示基团-CH2-、-CH(R’)-、-N(R’)-或选自氧原子和硫原子的杂原子，
和/或
R’表示基团-(C1-C5)烷基、基团-(C1-C5)烷氧基、基团-CH2-芳基、基团-C(O)R5或基团-COOR5；
和/或
R1表示氧代基、基团-COOR5、基团-W-OH或基团-W-NR5R6；
和/或
R2表示氢原子、基团-(C1-C5)烷基、基团-(C1-C5)烷氧基、基团-COOR5、基团-NR5R6、基团-C(O)-NR5R6或基团-SO2-NR3R4；
和/或
R3和R4
(i)彼此独立地表示，氢原子、基团-(C1-C5)烷基、基团-(C3-C6)环烷基、芳基、杂芳基、基团-CH2-杂芳基或基团-(C1-C5)烷基-NR5R6；或
(ii)与携带它们的氮原子一起形成任选被基团-(C1-C5)烷基或芳基取代的杂环烷基，
和/或
W表示基团-(C1-C5)亚烷基，任选被一个或多个羟基取代；
和/或
R5和R6彼此独立地表示，氢原子或基团-(C1-C5)烷基。
本发明化合物的第一小组由式(I)化合物(其中n等于0、1、2、3或4)构成。
本发明化合物的第二小组由式(I)化合物(其中m等于0、1或2)构成。
本发明化合物的第三小组由式(I)化合物(其中o等于0)构成。
本发明化合物的第四小组由式(I)化合物(其中R1表示氧代基、基团-CH2-芳基、基团-C(O)R5-或基团-COOR5，所述基团R1可连接至碳原子或杂原子)构成。有利地，所述芳基表示苯基。
本发明化合物的第五小组由式(I)化合物(其中R2表示(i)氢原子，(ii)基团-(C1-C5)烷基，(iii)基团-(C1-C5)烷氧基，(iv)基团-COOR5，(v)基团-NR5R6，(vi)基团-C(O)-NR5R6，(vii)被基团-(C1-C5)烷基取代的杂芳基，(viii)基团-O-W-芳基或(ix)基团-O-W-杂芳基)构成。
本发明化合物的第六小组由式(I)化合物(其中R2表示基团-SO2-NR3R4)构成。
本发明化合物的第七小组由式(I)化合物(其中R2为吡啶的β位的原子上的取代基)构成。
本发明化合物的第八小组由式(I)化合物(其中R2为吡啶的γ位的原子上的取代基)构成。
本发明化合物的第九小组由式(I)化合物(其中R3和R4彼此独立地表示，氢原子、基团-(C1-C5)烷基、基团-(C3-C6)环烷基、芳基、杂芳基、基团-CH2-杂芳基或基团-(C1-C5)烷基-NR5R6)构成。有利地，所述芳基表示苯基且所述杂芳基表示吡啶基或呋喃基。
本发明化合物的第十小组由式(I)化合物(其中R3和R4与携带它们的氮原子一起形成任选被一个或多个-(C1-C5)烷基和/或芳基取代的杂环烷基)构成。有利地，所述杂环烷基表示哌啶基、吡咯烷基或六亚甲基亚胺基且所述芳基表示苯基。
本发明化合物的第十一小组由式(I)化合物(其中R5表示基团-(C1-C5)烷基或基团-(C1-C5)环烷基)构成。
本发明化合物的第十二小组由式(I)化合物(其中R6表示氢原子或基团(C1-C5)烷基)构成。
以上定义的小组，单独或组合地，也构成本发明的一部分。
在本发明所述的化合物中，还可提及对应式(I)化合物的小组，其中：
●n等于1、2、3或4；
●m等于0、1或2；
●o等于0或1；
●X表示-CH2-基团、基团-CH(R’)-、基团-N(R’)-或选自氧原子和硫原子的杂原子；
●R’表示基团-(C1-C5)烷基、基团-(C1-C5)烷氧基、基团-CH2-芳基、基团-C(O)R5或基团-COOR5；
●R1表示氧代基、基团COOR5、基团-W-OH或基团-W-NR5R6；
●R2表示基团-SO2-NR3R4；
●R3和R4彼此独立地表示，氢原子、基团-(C1-C5)烷基、基团-(C3-C6)环烷基、芳基、杂芳基或基团-CH2-杂芳基，或R3和R4与携带它们的氮原子一起形成杂环烷基；且
●R5和R6表示基团-(C1-C5)烷基。
最后，在本发明所述的化合物中，可提及对应式(I)化合物的小组，其中：
●n等于1、2、3或4；
●m等于0、1或2；
●o等于0或1；
●X表示基团-CH2-、基团-CH(R’)-、基团-N(R’)-或选自氧原子和硫原子的杂原子；
●R’表示基团-(C1-C5)烷基、基团-(C1-C5)烷氧基、基团-CH2-芳基、基团-C(O)R5或基团-COOR5；
●R1表示氧代基；
●R2表示氢原子、基团-(C1-C5)烷基、基团-(C1-C5)烷氧基、基团-COOR5、基团-NR5R6或-C(O)-NR5R6；且
●R5和R6彼此独立地表示，氢原子、基团-(C1-C5)烷基或基团-(C1-C5)环烷基。
在本发明的主题的式(I)化合物中，尤其可提及以下化合物：
○2-[5-(哌啶-1-基磺酰基)吡啶-2-基]-1，2，4，5，6，7-六氢-3H-吲唑-3-酮；
○6-甲基-2-[5-(哌啶-1-基磺酰基)吡啶-2-基]-1，2，4，5，6，7-六氢-3H-吲唑-3-酮；
○2-[5-(哌啶-1-基磺酰基)吡啶-2-基]-1，4，5，6，7，8-六氢环庚三烯并[c]吡唑-3(2H)-酮；
○N-乙基-6-(3-氧代-1，3，4，5，6，7-六氢-2H-吲唑-2-基)-N-苯基吡啶-3-磺酰胺；
○6-(5-苄基-3-氧代-1，3，4，5，6，7-六氢-2H-吡唑并[4，3-c]吡啶-2-基)-N-乙基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺；
○(±)2-(5-{[(3R，5S)-3，5-二甲基哌啶-1-基]磺酰基}吡啶-2-基)-1，2，4，5，6，7-六氢-3H-吲唑-3-酮；
○2-(4-甲氧基吡啶-2-基)-1，2，4，6-四氢-3H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-酮；
○2-(吡啶-2-基)-1，4，5，6-四氢环戊二烯并[c]吡唑-3(2H)-酮；
○(±)5-苄基-2-(5-{[(3R，5S)-3，5-二甲基哌啶-1-基]磺酰基}吡啶-2-基)-1，2，4，5，6，7-六氢-3H-吡唑并[4，3-c]吡啶-3-酮；
○(±)2-(5-{[(3R，5S)-3，5-二甲基哌啶-1-基]磺酰基}吡啶-2-基)-6-甲基-1，2，4，5，6，7-六氢-3H-吲唑-3-酮；
○6-(5-苄基-3-氧代-1，3，4，5，6，7-六氢-2H-吡唑并[4，3-c]吡啶-2-基)-N，N-二乙基吡啶-3-磺酰胺；
○N-乙基-6-(3-氧代-1，3，4，5，6，7，8，9-八氢-2H-环辛四烯并[c]吡唑-2-基)-N-苯基吡啶-3-磺酰胺；
○N-乙基-6-(3-氧代-4，6-二氢-1H-噻吩并[3，4-c]吡唑-2(3H)-基)-N-苯基吡啶-3-磺酰胺；
○6-(5-苄基-3-氧代-1，3，4，5，6，7-六氢-2H-吡唑并[4，3-c]吡啶-2-基)-N，N-二(丙烷-2-基)吡啶-3-磺酰胺；
○6-甲氧基-2-(吡啶-2-基)-1，4，5，6-四氢环戊二烯并[c]吡唑-3(2H)-酮；
○2-(吡啶-2-基)-1，4，6，7-四氢噻喃并[4，3-c]吡唑-3(2H)-酮；
○N-乙基-6-(3-氧代-1，4，6，7-四氢噻喃并[4，3-c]吡唑-2(3H)-基)-N-苯基吡啶-3-磺酰胺；
○N-乙基-6-(3-氧代-3，5，6，7-四氢噻喃并[3，2-c]吡唑-2(1H)-基)-N-苯基吡啶-3-磺酰胺；
○N，N-二乙基-6-(3-氧代-4，6-二氢-1H-噻吩并[3，4-c]吡唑-2(3H)-基)吡啶-3-磺酰胺；
○N，N-二甲基-6-(3-氧代-4，6-二氢-1H-噻吩并[3，4-c]吡唑-2(3H)-基)吡啶-3-磺酰胺；
○2-[5-(吡咯烷-1-基磺酰基)吡啶-2-基]-1，2，4，6-四氢-3H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-酮；
○N-环丙基-6-(3-氧代-4，6-二氢-1H-噻吩并[3，4-c]吡唑-2(3H)-基)吡啶-3-磺酰胺；
○6-(3-氧代-4，6-二氢-1H-噻吩并[3，4-c]吡唑-2(3H)-基)-N-(丙烷-2-基)吡啶-3-磺酰胺；
○N-叔丁基-6-(3-氧代-4，6-二氢-1H-噻吩并[3，4-c]吡唑-2(3H)-基)吡啶-3-磺酰胺；
○N-(呋喃-2-基甲基)-6-(3-氧代-4，6-二氢-1H-噻吩并[3，4-c]吡唑-2(3H)-基)吡啶-3-磺酰胺；
○N-环戊基-6-(3-氧代-4，6-二氢-1H-噻吩并[3，4-c]吡唑-2(3H)-基)吡啶-3-磺酰胺；
○N-甲基-6-(3-氧代-4，6-二氢-1H-噻吩并[3，4-c]吡唑-2(3H)-基)-N-(吡啶-2-基)吡啶-3-磺酰胺；
○2-(吡啶-2-基)-1，2，4，6-四氢-3H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-酮；
○2-[4-(二甲基氨基)吡啶-2-基]-1，2，4，6-四氢-3H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-酮；
○2-{5-[(4-苄基哌啶-1-基)磺酰基]吡啶-2-基}-1，2，4，6-四氢-3H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-酮；
○6-(3-氧代-4，6-二氢-1H-噻吩并[3，4-c]吡唑-2(3H)-基)-N-(吡啶-2-基)吡啶-3-磺酰胺；
○N-乙基-6-(3-氧代-1，4，6，7-四氢吡喃并[4，3-c]吡唑-2(3H)-基)-N-苯基吡啶-3-磺酰胺；
○2-(4-乙基吡啶-2-基)-2，6-二氢-4H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-醇钠；
○2-[5-(氮杂环庚烷-1-基磺酰基)吡啶-2-基]-1，2，4，6-四氢-3H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-酮；
○4-苄基-2-{5-[乙基(苯基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-5-氧代-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-醇钠；
○N-甲基-6-(3-氧代-4，6-二氢-1H-噻吩并[3，4-c]吡唑-2(3H)-基)-N-(吡啶-2-基甲基)吡啶-3-磺酰胺；
○2-{5-[乙基(苯基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-3-氧代-1，2，3，4，6，7-六氢-5H-吡唑并[4，3-c]吡啶-5-甲酸叔丁酯；
○6-(5-乙酰基-3-氧代-1，3，4，5，6，7-六氢-2H-吡唑并[4，3-c]吡啶-2-基)-N-乙基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺；
○6-(3-氧代-4，6-二氢-1H-噻吩并[3，4-c]吡唑-2(3H)-基)吡啶-3-甲酸叔丁酯；
○2-(4-甲基吡啶-2-基)-2，6-二氢-4H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-醇钠；
○2-{5-[叔丁基(甲基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-2，6-二氢-4H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-醇钠；
○2-{5-[叔丁基(乙基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-2，6-二氢-4H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-醇钠；
○2-(5-甲基吡啶-2-基)-2，6-二氢-4H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-醇钠；
○2-[5-(叔丁基氨基甲酰基)吡啶-2-基]-2，6-二氢-4H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-醇钠；
○2-(5-甲氧基吡啶-2-基)-2，6-二氢-4H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-醇钠；
○N-甲基-6-(3-氧代-4，6-二氢-1H-噻吩并[3，4-c]吡唑-2(3H)-基)-N-(吡啶-4-基)吡啶-3-磺酰胺；
○2-{5-[环戊基(乙基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-2，6-二氢-4H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-醇钠；
○2-[4-(吡啶-3-基甲氧基)吡啶-2-基]-2，6-二氢-4H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-醇钠；
○2-{5-[乙基(苯基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-3-氧代-1，2，3，4，6，7-六氢-5H-吡唑并[4，3-c]吡啶-5-甲酸甲酯；
○6-(3-氧代-4，6-二氢-1H-噻吩并[3，4-c]吡唑-2(3H)-基)吡啶-3-甲酸环戊基酯；
○6-(3-氧代-4，6-二氢-1H-噻吩并[3，4-c]吡唑-2(3H)-基)吡啶-3-甲酸2-甲基丙基酯；
○2-[4-(丙烷-2-基)吡啶-2-基]-1，2，4，6-四氢-3H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-酮；
○2-[5-(丙烷-2-基)吡啶-2-基]-2，6-二氢-4H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-醇钠；
○2-{5-[乙基(苯基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-3-氧代-2，3，4，6-四氢-1H-噻吩并[3，4-c]吡唑-4-甲酸甲酯；
○6-(3-氧代-4，6-二氢-1H-噻吩并[3，4-c]吡唑-2(3H)-基)吡啶-3-甲酸丙烷-2-基酯；
○2-{5-[乙基(苯基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-6-甲氧基-2，4，5，6-四氢环戊二烯并[c]吡唑-3-醇钠；
○N-乙基-6-(3-氧代-3，4，5，6-四氢环戊二烯并[c]吡唑-2(1H)-基)-N-苯基吡啶-3-磺酰胺；
○2-[4-(吡啶-3-基甲氧基)吡啶-2-基]-2，6-二氢-4H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-醇钠；
○6-(3-氧代-4，6-二氢-1H-噻吩并[3，4-c]吡唑-2(3H)-基)吡啶-3-甲酸2，2-二甲基丙基酯；
○2-[5-(5-叔丁基-1，2，4-
Figure BDA0000086875870000111
二唑-3-基)吡啶-2-基]-1，2，4，6-四氢-3H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-酮；
○N-环戊基-N-甲基-6-(3-氧代-4，6-二氢-1H-噻吩并[3，4-c]吡唑-2(3H)-基)-吡啶-3-磺酰胺；
○N-环戊基-N-乙基-6-(3-氧代-3，4，5，6-四氢环戊二烯并[c]吡唑-2(1H)-基)-吡啶-3-磺酰胺；
○N-环戊基-N-(2，3-二羟基丙基)-6-(3-氧代-4，6-二氢-1H-噻吩并[3，4-c]吡唑-2(3H)-基)吡啶-3-磺酰胺；
○6-[5-(甲基磺酰基)-3-氧代-1，3，4，5，6，7-六氢-2H-吡唑并[4，3-c]吡啶-2-基]吡啶-3-甲酸2，2-二甲基丙基酯；
○2-[5-(3-叔丁基-1，2，4-
Figure BDA0000086875870000112
二唑-5-基)吡啶-2-基]-1，2，4，6-四氢-3H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-酮。
在下文中，术语“保护基(PG)”是指以下基团：其在合成中首先可保护活性基团(例如醇或胺)。保护基的实例以及保护和脱保护的方法可参考“Protective Groups in Organic Synthesis”Greene等，3rd Edition(John Wiley &Sons，Inc.，New York)。
在下文中，术语“离去基团(LG)”是指可通过键异裂(breaking a heterolyticbond)和失去电子对容易地从分子中脱除的离核基团。因此，该基团可例如，容易地在取代反应中被另一亲核基团替换。该离去基团为例如，卤素或活化的羟基，例如甲磺酰基、甲苯磺酰基、三氟甲磺酰基(triflate)、乙酰基等基团。离去基团的实例及其制备的参考文献可参考“Advances in OrganicChemistry”，J.March，3rd Edition，Wiley Interscience，pp.310-316。
根据本发明，通式(I)化合物可按照以下方案1例示的方法制备。
方案1
Figure BDA0000086875870000121
通式(I)化合物的合成如下进行：起始于式(II)化合物，其中R1、X、n、m和o如上所述且z表示烷基，优选甲基或乙基，其在醇型的质子溶剂，优选甲醇中，在20至60℃的温度，与式(III)化合物(其中R2如上定义)缩合，以得到式(IV)中间体，其为式(IVa)或式(IVb)化合物的形式，或二者的混合物，且其在有机碱，优选甲醇钠的存在下，在质子溶剂如甲醇中，在20至50℃的温度环化。
所得化合物(I)任选用相应酸或碱转化为盐。
当其制备方法未描述时，式(II)化合物可市售获得或被文献公开，或可根据本领域技术人员已知的方法制备。
方案2a、2b和2c描述式(III)化合物的制备。
式(III)化合物获自式(V)化合物，其中LG和R2如上定义，通过添加水合肼，优选在质子溶剂如乙醇中，在60至80℃的温度进行(方案2a)。
方案2a
Figure BDA0000086875870000122
式(III)化合物也可以以两步从式(V)化合物获得。然后引入肼官能团，其通过在催化量的钯的存在下进行式(VI)的二苯甲酮腙和式(V)化合物之间的偶合反应，得到式(VII)中间体，其肼官能团通过以下游离：通过酸处理，如盐酸，优选以6至12N的浓度，在不混溶的溶剂如甲苯和水的二元混合物中，在100℃的温度进行(方案2b)。
方案2b
Figure BDA0000086875870000131
或者，式(III)化合物可从式(VIII)的氨基吡啶(其中R2如上定义)合成，通过0℃的硝酸和浓硫酸的混合物的作用，得到N-硝基胺(nitroamine)中间体，其在锌的存在下在10N氢氧化钠中还原(方案2c)。
方案2c
Figure BDA0000086875870000132
在之前方案中，当起始化合物、中间体和反应物的制备方法未描述时，它们可市售获得或被文献公开，或可根据本领域技术人员已知方法制备。
根据其另一方面，本发明的主题还为式(IVa)和式(IVb)化合物。这些化合物可用作合成式(I)化合物的中间体。
实施例：
以下实施例例示根据本发明的具体化合物的制备。作为实施例提供的化合物的编号是指下文表中的那些编号，其阐明根据本发明的具体化合物的化学结构和物理性质。
使用以下缩写和半结构式：
Figure BDA0000086875870000141
Figure BDA0000086875870000151
质子核磁共振(1H NMR)谱，如下所述，在400MHz记录(在DMSO-d6中)，使用DMSO-d5的峰作为参照。化学位移δ表示为百万分率(ppm)。观察到的信号如下表示：s＝单峰；bs＝宽的单峰；d＝双重峰；dd＝两组双重峰；dt＝两组三重峰；t＝三重峰；m＝多重峰；H＝质子。
该质谱在以下LC/MS联用条件下获得：
方法1：柱：Jsphere33×2mm；4μM；
洗脱液：A＝H2O+0.05％TFA；B＝CH3CN+0.05％TFA。
T0：98％A；T1.0至T5.0分钟：95％B；
方法2：柱：Acquity BEH C18(50×2.1mm；1.7μM)；220nm
洗脱液：A＝H2O+0.05％TFA；B＝CH3CN+0.035％TFA。
T0：98％A；T1.6至T2.1分钟：100％B；T2.5至T3分钟：98％A。
流速1.0mL/分钟-T℃＝40℃，进样2μL
实施例1：2-吡啶-2-基-1，2，4，6-四氢-3H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-酮(表I的化合物1)
Figure BDA0000086875870000152
将7g(64.1mmol)2-肼基吡啶和10.3g(64.1mmol)4-氧代四氢噻吩-3-甲酸甲酯在130mL MeOH中的混合物在80℃加热12小时。然后在减压下浓缩该介质且将所得残余物通过色谱法在硅胶柱上纯化，用0至10％MeOH的DCM/MeOH梯度液洗脱。在减压下浓缩后，分离8.7g(34.5mmol)腙中间体，其为黄色粉末形式，然后在室温分批添加至0.8g(34.5mmol)钠在46mL无水MeOH中的溶液中。将反应介质在室温搅拌2小时，然后滤出形成的沉淀且连续用10mL MeOH和20mL戊烷洗涤。将所得残余物溶于20mL水且添加10mL乙酸。滤出所得沉淀，用10mL水洗涤，真空干燥且从EtOH重结晶。得到4.2g的2-吡啶-2-基-1，2，4，6-四氢-3H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-酮，其为发白的(whitish)粉末形式。
产率＝56％
m.p.(℃)＝152
M＝C10H9N3OS＝219；M+H＝220；方法2：Tr＝0.81分钟。
1H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：8.45(d，1H)；8.2(d，1H)；7.95(m，1H)；7.3(t，1H)；4.0(s，2H)；3.8(s，2H)。
实施例2：2-[4-(二甲基氨基)吡啶-2-基]-1，2，4，6-四氢-3H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-酮盐酸盐(表II的化合物56)
Figure BDA0000086875870000161
2.1.2-溴-N，N-二甲基吡啶-4-胺
在氩气氛在-5℃经2小时30分钟向12.6mL(125mmol)N，N-二甲基乙醇胺在160mL无水己烷中的溶液中添加100mL(250mmol)2.5M正丁基锂的己烷溶液，然后在0℃将反应介质搅拌30分钟，然后添加7.6g(62.5mmol)4-二甲基氨基吡啶。在0℃搅拌1小时后，将反应介质冷却至-78℃且在-78℃经2小时30分钟添加溶于250mL无水己烷的51.8g(156.2mmol)四溴化碳。使温度升高至0℃，然后持续搅拌1小时30分钟。
然后将该介质用水(400mL)水解，随后用Et2O(400mL)和DCM(2×400mL)萃取。合并的有机相用Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。得到6.4g的2-溴-N，N-二甲基吡啶-4-胺，其为棕色固体形式，其不用进一步纯化直接用于以下步骤。
产率＝51％
1H NMR，(CDCl3，400MHz，δ(ppm)：7.9(d，1H)；6.6(s，1H)；6.4(d，1H)；2.9(s，6H)。
2.2.2-[2-(二苯基亚甲基(methylidene))肼基]-N，N-二甲基吡啶-4-胺
在氩气下在室温向40mL无水甲苯中的3.3g(16.41mmol)2-溴-N，N-二甲基吡啶-4-胺、3.5g(18.05mmol)二苯甲酮腙、2.2g(23mmol)无水叔丁醇钠和40mL甲苯中的100mg(0.82mmol)苯硼酸的混合物，在氩气下脱气后，添加74mg(0.33mmol)乙酸钯和205mg(0.33mmol)racBINAP。然后将反应介质在80℃加热4小时。将反应介质溶于200mL EtOAc，连续用水(3×30mL)、饱和NaHCO3溶液(30mL)和盐水(30mL)洗涤，然后用Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。将所得残余物通过色谱法在硅胶柱上纯化，用0至10％MeOH的DCM/MeOH梯度液洗脱。在减压下浓缩后，得到4.5g的2-[2-(二苯基亚甲基)肼基]-N，N-二甲基吡啶-4-胺，其为红色固体形式。
产率＝87％。
2.3.2-肼基-N，N-二甲基吡啶-4-胺
将在300mL甲苯中的4.5g(14.22mmol)2-[2-(二苯基亚甲基)肼基]-N，N-二甲基吡啶-4-胺和80mL 37％盐酸水溶液的混合物在110℃加热4小时。冷却至室温后，将反应介质用甲苯(3×300mL)萃取。水相用200mL水稀释，在0℃通过添加12N氢氧化钠溶液中和，然后用DCM(3×150mL)萃取。合并有机相，用盐水(300mL)洗涤，然后用Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。得到1.87g的2-肼基-N，N-二甲基吡啶-4-胺，其为棕色固体形式，其不用进一步纯化直接用于以下步骤。
产率＝87％
1H NMR(ppm，d6-DMSO，400MHz)：7.6(d，1H)；6.9(s，1H)；6.1(dd，1H)；5.9(d，1H)；4(bs，2H)；2.9(s，6H)。
2.4.2-[4-(二甲基氨基)吡啶-2-基]-1，2，4，6-四氢-3H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-酮盐酸盐
根据实施例1所述的方法，起始于1.87g的2-肼基-N，N-二甲基吡啶-4-胺和1.97g的4-氧代四氢噻吩-3-甲酸甲酯，得到35mg的2-[4-(二甲基氨基)吡啶-2-基]-1，2，4，6-四氢-3H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-酮。通过将之前获得的35mg产物冻干并溶于1mL 0.1N HCl而制备该盐酸盐。
如此获得36mg 2-[4-(二甲基氨基)吡啶-2-基]-1，2，4，6-四氢-3H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-酮盐酸盐，其为白色冻干产物形式。
产率＝1％
m.p.(℃)＝182
M＝C12H14N4OS＝262；M+H＝263；方法2：Tr＝0.59分钟。
1H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：7.7(d，1H)；6.9(s，1H)；6.6(d，1H)；3.2(s，2H)；3.5(s，2H)；2.9(s，6H)。
实施例3：2-(4-甲氧基吡啶-2-基)-1，2，4，6-四氢-3H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-酮(表II的化合物55)
Figure BDA0000086875870000181
3.1.2-[2-(二苯基亚甲基)肼基]-4-甲氧基吡啶
根据实施例2.2所述的方法，起始于0.5g的2-氯-4-甲氧基吡啶和0.75g二苯甲酮腙，得到0.76g的2-[2-(二苯基亚甲基)肼基]-4-甲氧基吡啶，其为黄色固体形式，其不用进一步纯化直接用于以下步骤。
产率＝73％
1H NMR，CDCl3，400MHz，δ(ppm)：8.2(s，1H)；7.9(d，1H)；7.7-7.5(m，5H)；7.4-7.2(m，5H)；7.1(s，1H)；6.4(d，1H)；3.9(s，3H)。
3.2.2-肼基-4-甲氧基吡啶
根据实施例2.3所述的方法，起始于0.76g的2-[2-(二苯基亚甲基)肼基]-4-甲氧基吡啶，获得0.24g的2-肼基甲氧基吡啶，其为黄色冻干物的形式，其不用进一步纯化直接用于以下步骤。
产率＝69％
1H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：9.7(bs，1H)；7.7(d，1H)；6.5(d，1H)；6.4(s，1H)；4.8(bs，2H)；3.9(s，3H)。
3.3.2-(4-甲氧基吡啶-2-基)-1，2，4，6-四氢-3H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-酮
根据实施例1所述的方法，起始于243mg的2-肼基-4-甲氧基吡啶和280mg的4-氧代四氢噻吩-3-甲酸甲酯，得到82mg的2-(4-甲氧基吡啶-2-基)-1，2，4，6-四氢-3H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-酮，其为白色固体形式。
产率＝40％
m.p.(℃)＝254
M＝C11H11N3O2S＝249；M+H＝250；方法2：Tr＝0.8分钟。
1H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：8.1(d，1H)；8.05(d，1H)；6.05(d，1H)；3.8(s，3H)；3.7(s，2H)；3.6(s，2H)。
实施例4：N-甲基-6-(3-氧代-4，6-二氢-1H-噻吩并[3，4-c]吡唑-2(3H)-基)-N-吡啶-2-基吡啶-3-磺酰胺(表I的化合物21)
4.1.6-氯-N-甲基-N-吡啶-2-基吡啶-3-磺酰胺
在0℃向1.3g(11.8mmol)N-甲基吡啶-2-胺在25mL DCM中的溶液中添加3.3mL(23.6mmol)三乙胺，然后分批添加2.5g(11.8mmol)6-氯吡啶-3-磺酰氯(根据文献WO 98/40332制备)。在室温搅拌12小时后，将反应介质溶于100mL DCM，连续用100mL水和30mL盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。将所得残余物通过色谱法在硅胶柱上纯化，用4/1环己烷/EtOAc混合物洗脱。在减压下浓缩后，得到2.8g的6-氯-N-甲基-N-吡啶-2-基吡啶-3-磺酰胺，其为棕色固体形式。
产率＝84％
1H NMR，CDCl3，400MHz，δ(ppm)：8.5(s，1H)；8.25(d，1H)；7.8(dd，1H)；7.7(t，1H)；7.5(d，1H)；7.3(d，1H)；7.15(t，1H)；3.2(s，3H)。
4.2.6-肼基-N-甲基-N-吡啶-2-基吡啶-3-磺酰胺
将1.4g(4.9mmol)6-氯-N-甲基-N-吡啶-2-基吡啶-3-磺酰胺和0.96mL(19.7mmol)肼一水合物在8mL EtOH中的溶液在80℃加热12小时。冷却至室温后，滤出所得沉淀，用10mL EtOH洗涤，然后真空干燥。得到0.85g的6-肼基-N-甲基-N-吡啶-2-基吡啶-3-磺酰胺，其为淡黄色晶体。
产率＝62％。
1H NMR，CDCl3，400MHz，δ(ppm)：8.35(s，2H)；8.7(m，2H)；7.5(d，1H)；7.15(dd，1H)；6.7(d，1H)；6.4(bs，1H)；3.5-4.0(bs，2H)；3.3(s，3H)。
4.3.N-甲基-6-(3-氧代-4，6-二氢-1H-噻吩并[3，4-c]吡唑-2(3H)-基)-N-吡啶-2-基吡啶-3-磺酰胺
根据实施例1所述的方法，起始于476mg的6-肼基-N-甲基-N-吡啶-2-基吡啶-3-磺酰胺和273mg的4-氧代四氢噻吩-3-甲酸甲酯，得到416mg N-甲基-6-(3-氧代-4，6-二氢-1H-噻吩并[3，4-c]吡唑-2(3H)-基)-N-吡啶-2-基吡啶-3-磺酰胺，其为白色固体形式。
产率＝45％
m.p.(℃)＝226
M＝C16H15N5O3S2＝389；M+H＝390；方法2：Tr＝0.98分钟。
1H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：12.0(bs，1H)；8.6(s，1H)；8.5(bs，1H)；8.4(d，1H)；8.2(dd，1H)；7.55(d，1H)；7.3(t，1H)；4.0(s，2H)；3.8(s，2H)；3.3(s，3H)。
实施例5：N-乙基-6-(3-氧代-3，5，6，7-四氢噻喃并[3，2-c]吡唑-2(1H)-基)-N-苯基吡啶-3-磺酰胺(表I的化合物24)
Figure BDA0000086875870000201
5.1.3-氧代四氢-2H-噻喃-2-甲酸乙酯
在0℃和在氩气下向5g(219mmol)钠在13mL无水EtOH和88mL乙醚的溶液中滴加20.5g(87.5mmol)4-[(2-乙氧基-2-氧代乙基)硫基]丁酸乙酯。在室温搅拌18小时后，将反应混合物倒入AcOH(12mL)/冰(70g)的混合物中。然后在减压下浓缩该介质，且所得残余物溶于100mL乙醚，用盐水(2×50mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。将所得残余物通过硅胶色谱法纯化，用0至10％EtOAc的环己烷/EtOAc梯度液洗脱。得到5.64g的3-氧代四氢-2H-噻喃-2-甲酸乙酯，其为黄色油状物。
产率＝34％.
1H NMR，CDCl3，400MHz，δ(ppm)：12.3(s，1H)；4.3(q，2H)；2.80(m，2H)；2.4(t，2H)；2.15(m，2H)；1.4(t，3H)。
5.2.N-乙基-6-(3-氧代-3，5，6，7-四氢噻喃并[3，2-c]吡唑-2(1H)-基)-N-苯基吡啶-3-磺酰胺
将1g(5.31mmol)3-氧代四氢-2H-噻喃-2-甲酸乙酯和1.55g的6-肼基-N-甲基-N-吡啶-2-基吡啶-3-磺酰胺在10mL MeOH中的混合物在80℃加热15小时。冷却至室温后，滤出所得沉淀且用5mL MeOH洗涤，然后从EtOH重结晶。得到395mg的N-乙基-6-(3-氧代-3，5，6，7-四氢噻喃并[3，2-c]吡唑-2(1H)-基)-N-苯基吡啶-3-磺酰胺，其为白色粉末形式。
产率＝16％
m.p.(℃)＝198
M＝C19H20N4O3S2＝416；M+H＝417；方法2：Tr＝1.12分钟
1H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：11.9(bs，1H)；8.6(bs，1H)；8.5(s，1H)；8.1(d，1H)；7.4(m，3H)；7.1(d，2H)；3.6(q，2H)；3.0(t，2H)；2.6(t，2H)；2.0(q，2.0)；1.0(t，3H)。
实施例6：2-[5-[乙基(苯基)氨基磺酰基]吡啶-2-基]-3-氧代-1，2，3，4，6，7-六氢-5H-吡唑并[4，3-c]吡啶-5-甲酸叔丁酯(表I的化合物28)
Figure BDA0000086875870000211
6.1.1-叔丁基-3-甲基-4-氧代哌啶1，3-二甲酸酯
向10g(51.6mmol)4-氧代哌啶-3-甲酸甲酯和7.3mL(51.6mmol)三乙胺在100mL DCM中的混合物添加11.3g(51.6mmol)焦碳酸二叔丁酯。在室温2小时后，将该介质溶于300mL DCM，用200mL水洗涤，用Na2SO4干燥，然后过滤且在减压下浓缩。得到13g的1-叔丁基-3-甲基-4-氧代哌啶1，3-二羧酸酯，其为白色固体形式，其不用进一步纯化直接用于以下步骤。
6.2.2-[5-[乙基(苯基)氨基磺酰基]吡啶-2-基]-3-氧代-1，2，3，4，6，7-六氢-5H-吡唑并[4，3-c]吡啶-5-甲酸叔丁酯
根据实施例1所述的方法，起始于1.7g的6-肼基-N-甲基-N-吡啶-2-基吡啶-3-磺酰胺和1.5g的1-叔丁基-3-甲基-4-氧代哌啶1，3-二羧酸酯，得到190mg的2-[5-[乙基(苯基)氨基磺酰基]吡啶-2-基]-3-氧代-1，2，3，4，6，7-六氢-5H-吡唑并[4，3-c]吡啶-5-甲酸叔丁酯，其为白色固体形式。
产率＝16％
m.p.(℃)＝192
M＝C24H29N5O5S＝499；M+H＝500；方法2：Tr＝1.23分钟
1H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：12.1(bs，1H)；8.6(bs，1H)；8.5(s，1H)；8.1(dd，1H)；7.4(m，3H)；7.1(d，2H)；4.1(s，2H)；3.6(m，4H)；2.7(m，2H)；1.4(s，9H)；1.0(t，3H)。
实施例7：N-乙基-6-(3-氧代-1，4，6，7-四氢吡喃并[4，3-c]吡唑-2(3H)-基)-N-苯基吡啶-3-磺酰胺(表I的化合物25)
Figure BDA0000086875870000221
7.1.4-氧代四氢-2H-吡喃-3-甲酸丙酯
该化合物根据JACS Vol.119，No.18，pp.4285-4291所述的方法制备。
7.2.N-乙基-6-(3-氧代-1，4，6，7-四氢吡喃并[4，3-c]吡唑-2(3H)-基)-N-苯基吡啶-3-磺酰胺
根据实施例1所述的方法，起始于0.47g的6-肼基-N-甲基-N-吡啶-2-基吡啶-3-磺酰胺和0.3g的4-氧代四氢-2H-吡喃-3-甲酸丙酯，得到370mg的N-乙基-6-(3-氧代-1，4，6，7-四氢吡喃并[4，3-c]吡唑-2(3H)-基)-N-苯基吡啶-3-磺酰胺，其为白色粉末形式。
产率＝57％
m.p.(℃)＝164
M＝C19H20N4O4S＝400；M+H＝401；方法2：Tr＝1.0分钟。
1H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：12.0(bs，1H)；8.6(d，1H)；8.4(s，1H)；8.0(d，1H)；7.4(m，3H)；7.1(m，2H)；4.3(s，2H)；3.85(t，2H)；3.6(q，2H)；2.6(t，2H)；1.0(t，3H)。
实施例8：4-苄基-2-{5-[乙基(苯基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-5-氧代-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-醇钠(表I的化合物35)
Figure BDA0000086875870000231
根据实施例1所述的方法，起始于0.8g的6-肼基-N-甲基-N-吡啶-2-基吡啶-3-磺酰胺和0.76g的1-苄基-3，6-二氧代哌啶-2-甲酸乙酯(其根据Tetrahedron，Vol.40，No.13p.2505得到)，获得220mg预期化合物，其为白色固体形式，其溶于6mL水/CH3CN混合物(5/1)和1当量的1N NaOH中，然后冷冻干燥。如此得到225mg的4-苄基-2-{5-[乙基(苯基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-5-氧代-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-醇钠，其为白色冻干物形式。
产率＝12％
m.p.(℃)＞250
M＝C26H25N5O4S＝503；M+H＝504；方法2：Tr＝1.16分钟。
1H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：8.7(d，1H)；8.4(s，1H)；7.8(d，1H)；7.5-7.1(m，10H)；4.7(s，2H)；4.2(s，2H)；3.6(q，2H)；3.1(s，2H)；1.0(t，3H)。
实施例9：2-(4-乙基吡啶-2-基)-2，6-二氢-4H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-醇钠(表II的化合物57)
Figure BDA0000086875870000241
9.1.4-乙基-2-肼基吡啶
在0至10℃的温度向在0℃的5g(40.9mmol)4-乙基吡啶-2-胺在10mL浓H2SO4中的溶液中添加8mL H2SO4/HNO3混合物(1/1)，且在0℃持续搅拌1小时。然后将反应介质倒在100g冰上，且滤出所得白色沉淀并连续用10mL水、10mL Et2O和10mL戊烷洗涤。在0℃将所得固体溶于100mL的10N NaOH中，添加7.76g(187mmol)锌粉，然后将反应介质在0℃搅拌3小时。然后将反应介质通过硅藻土过滤，且滤液用EtOAc(3×200mL)萃取。合并有机相，用Na2SO4干燥，过滤然后在减压下浓缩。得到4.3g的4-乙基-2-肼基吡啶，其为红色油状物形式，其不用进一步纯化直接用于以下步骤。
产率＝77％
1H NMR，CDCl3，400MHz，δ(ppm)：7.9(d，1H)；7.2(bs，1H)；6.5(s，1H)；6.4(d，1H)；4.1(s，2H)；2.5(q，2H)；1.1(t，3H)。
9.2.2-(4-乙基吡啶-2-基)-2，6-二氢-4H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-醇钠
根据实施例8所述的方法，起始于0.88g的4-乙基-2-肼基吡啶和1.0g的4-氧代四氢噻吩-3-甲酸甲酯，得到225mg的2-(4-乙基吡啶-2-基)-2，6-二氢-4H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-醇钠，其为白色冻干物形式。
产率＝15％
m.p.(℃)＞260℃
M＝C12H13N3OS＝247；M+H＝248；方法2：Tr＝1.05分钟。
1H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：8.2(s，1H)；8.1(d，1H)；6.7(d，1H)；3.7(s，2H)；3.5(s，2H)；2.5(q，2H)；1.1(t，3H)。
实施例10：2-{5-[叔丁基(甲基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-2，6-二氢-4H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-醇钠(表I的化合物36)
Figure BDA0000086875870000251
10.1.N-叔丁基-6-氯吡啶-3-磺酰胺
根据实施例4.1所述的方法，起始于2g(9.43mmol)6-氯吡啶-3-磺酰氯和0.99mL(9.43mmol)叔丁基胺，得到1.91g的N-叔丁基-6-氯吡啶-3-磺酰胺，其为白色固体形式。
产率＝82％
1H NMR，CDCl3，400MHz，δ(ppm)：8.8(d，1H)；8(dd，1H)；7.4(d，1H)；4.5(bs，1H)；1.2(s，9H)。
10.2.N-叔丁基-6-氯-N-甲基吡啶-3-磺酰胺
将0.97g(3.9mmol)N-叔丁基-6-氯吡啶-3-磺酰胺，2.43mL(39mmol)碘甲烷和5.4g(39mmol)K2CO3在40mL丙酮中的混合物回流12小时。该反应介质在室温过滤，且滤液在减压下浓缩。将所得残余物在硅胶上纯化，用0至20％EtOAc的环己烷/EtOAc梯度液洗脱，得到0.66g的N-叔丁基-6-氯-N-甲基吡啶-3-磺酰胺，其为黄色固体形式。
产率＝65％
1H NMR，CDCl3，400MHz，δ(ppm)：8.8(d，1H)；8(dd，1H)；7.4(d，1H)；3(s.3H)；1.4(s，9H)。
10.3.N-叔丁基-6-肼基-N-甲基吡啶-3-磺酰胺
根据实施例4.2所述的方法，起始于0.66g(2.53mmol)N-叔丁基-6-氯-N-甲基吡啶-3-磺酰胺和0.46mL肼一水合物，得到0.55g的N-叔丁基-6-肼基-N-甲基吡啶-3-磺酰胺，其为白色固体形式，其不用进一步纯化直接用于以下步骤。
产率＝84％
1H NMR，CDCl3，400MHz，δ(ppm)：8.8(d，1H)；8(dd，1H)；7(d，1H)；6.6(bs，1H)；4.1(bs，2H)；3.1(s，3H)；1.5(s，9H)。
10.4.2-{5-[叔丁基(甲基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-2，6-二氢-4H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-醇钠
根据实施例8所述的方法，起始于0.55g的N-叔丁基-6-肼基-N-甲基吡啶-3-磺酰胺和0.34g的4-氧代四氢噻吩-3-甲酸甲酯，得到0.34g的2-{5-[叔丁基(甲基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-2，6-二氢-4H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-醇钠，其为白色冻干物形式。
产率＝67％
m.p.(℃)＝130
M＝C15H20N4O3S2＝368；M+H＝369；方法2：Tr＝1.09分钟。
1H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：8.6(m，2H)；8.0(s，1H)；3.75(s，2H)；3.6(s，2H)；2.9(s，3H)；1.3(s，9H)。
实施例11：2-[5-(叔丁基氨基甲酰基)吡啶-2-基]-2，6-二氢-4H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-醇钠(表I的化合物33)
Figure BDA0000086875870000261
11.1.6-(3-氧代-4，6-二氢-1H-噻吩并[3，4-c]吡唑-2(3H)-基)吡啶-3-甲酸
根据实施例1所述的方法，起始于1.75g的6-肼基吡啶-3-甲酸和1.8g的4-氧代四氢噻吩-3-甲酸甲酯，得到2.5g的6-(3-氧代-4，6-二氢-1H-噻吩并[3，4-c]吡唑-2(3H)-基)吡啶-3-甲酸，其为黄色固体形式。
产率＝94％
1H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：12.5(bs，1H)；9.0(s，1H)；8.4(d，1H)；8.3(bs，1H)；4.1(s，2H)；3.8(s，2H)。
11.2.2-[5-(叔丁基氨基甲酰基)吡啶-2-基]-2，6-二氢-4H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-醇钠
向冷却至0℃的200mg(0.84mmol)6-(3-氧代-4，6-二氢-1H-噻吩并[3，4-c]吡唑-2(3H)-基)吡啶-3-甲酸，90μl(0.84mmol)叔丁基胺和0.46mL的DIEA在3mL CH3CN中的混合物中添加365mg的TBTU。然后将该反应介质缓慢温热至室温，且持续搅拌12小时。该反应介质在减压下浓缩，且将所得残余物溶于20mL水，并用DCM(3×20mL)萃取，用Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，并通过硅胶纯化，用0至10％MeOH的DCM/MeOH梯度液洗脱。得到66mg预期化合物，将其溶于2mL水/CH3CN混合物(5∶1)和1当量的1N NaOH中，然后冷冻干燥。得到66mg的2-[5-(叔丁基氨基甲酰基)吡啶-2-基]-2，6-二氢-4H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-醇钠，其为白色冻干物形式。
产率＝25％
m.p.(℃)＞260℃
M＝C15H17N4O2S＝317；M+H＝318；方法2：Tr＝0.94分钟。
1H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：8.7(s，1H)；8.5(d，1H)；8.1(d，1H)；7.6(s，1H)；3.75(s，1H)；3.6(s，2H)；1.4(s，9H)。
实施例12：6-(3-氧代-4，6-二氢-1H-噻吩并[3，4-c]吡唑-2(3H)-基)吡啶-3-甲酸叔丁酯(表I的化合物30)
Figure BDA0000086875870000271
12.1.6-氯吡啶-3-甲酸叔丁酯
向1g(6.35mmol)6-氯吡啶-3-甲酸在10mL回流甲苯中的悬浮液中滴加7.6mL(31.75mmol)1，1-二-叔丁氧基-N，N-二甲基甲胺，且然后将反应介质回流30分钟。冷却至室温后，将反应介质溶于200mL的EtOAc，连续用水(2×100mL)、饱和NaHCO3溶液(100mL)和盐水(100mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。得到1.16g的6-氯吡啶-3-甲酸叔丁酯，其为黄色油状物形式，其不用进一步纯化直接用于以下步骤。
产率＝86％
1H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：8.8(s，1H)；8.2(d，1H)；7.3(d，1H)；1.5(s，9H)。
12.2.6-肼基吡啶-3-甲酸叔丁酯
根据实施例4.2所述的方法，起始于1.16g的6-氯吡啶-3-甲酸叔丁酯和1mL水合肼，得到900mg固体形式的6-肼基吡啶-3-甲酸叔丁酯，其不用进一步纯化直接用于以下步骤。
产率＝79％
1H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：8.7(s，1H)；8.0(d，1H)；6.6(d，1H)；6.3(bs，1H)；3.2(bs，2H)；1.5(s，9H)。
12.3.6-(3-氧代-4，6-二氢-1H-噻吩并[3，4-c]吡唑-2(3H)-基)吡啶-3-甲酸叔丁酯
根据实施例1所述的方法，起始于0.75g的6-肼基吡啶-3-甲酸叔丁酯和0.58g 4-氧代四氢噻吩-3-甲酸甲酯，得到0.7g的6-(3-氧代-4，6-二氢-1H-噻吩并[3，4-c]吡唑-2(3H)-基)吡啶-3-甲酸叔丁酯，其为白色固体形式。
产率＝61％
m.p.(℃)＞250℃
M＝C15H17N3O3S＝319；M+H＝320；方法2：Tr＝1.27分钟
1H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：8.9(s，1H)；8.4(d，1H)；8.2(d，1H)；4.0(s，2H)；3.7(s，2H)，3.4(bs，1H)；1.6(s，9H)。
实施例13：2-[5-(丙烷-2-基)吡啶-2-基]-2，6-二氢-4H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-醇钠(表I的化合物44)
Figure BDA0000086875870000291
13.1.5-(丙-1-烯-2-基)吡啶-2-胺
将2g(11.56mmol)5-溴吡啶-2-胺、2.39mL(13.87mmol)4，4，5，5-四甲基-2-(丙-1-烯-2-基)-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷和3.83g(27.74mmol)K2CO3在30mL DME和10mL水中的混合物在氩气下搅拌5分钟，然后添加1g(2.1mmol)二(三-叔丁基膦)合钯。将反应介质在80℃加热3小时。冷却至室温后，将反应介质溶于40mL水且用EtOAc(3×30mL)萃取。有机相用0.5N HCl溶液(3×30mL)洗涤。水相用1N氢氧化钠溶液中和，然后用EtOAc(2×50mL)萃取。合并的有机相用Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。得到1.10g的5-(丙-1-烯-2-基)吡啶-2-胺，其为黄色固体形式，其不用进一步纯化直接用于以下步骤。
产率＝71％
1H NMR，CDCl3，400MHz，δ(ppm)：8.0(s，1H)；7.6(d，1H)；6.5(d，1H)；5.3(s，1H)；5.0(s，1H)；4.5(bs，2H)；2.1(s，3H)。
13.2.5-(丙烷-2-基)吡啶-2-胺
在Parr烧瓶中，将在40mL的MeOH中的1.1g(8.2mmol)5-(丙-1-烯-2-基)吡啶-2-胺和0.11g的10％Pd/C的混合物在7巴氢化24小时。然后通过Whatman GF/F纸过滤反应混合物，且在减压下浓缩。得到1.07g的5-(丙烷-2-基)吡啶-2-胺，其为黄色油状物形式，其不用进一步纯化直接用于以下步骤。
产率＝96％。
1H NMR，CDCl3，400MHz，δ(ppm)：8.0(s，1H)；7.4(dd，1H)；6.5(d，1H)；4.4(bs，2H)；2.8(m，1H)；1.2(s，6H)。
13.3.2-肼基-5-(丙烷-2-基)吡啶
根据实施例9.1所述的方法，起始于1.07g的5-(丙烷-2-基)吡啶-2-胺，得到0.52g的2-肼基-5-(丙烷-2-基)吡啶，其为棕色油状物形式。
产率＝44％。
13.4.2-[5-(丙烷-2-基)吡啶-2-基]-2，6-二氢-4H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-醇钠
根据实施例8所述的方法，起始于520mg的2-肼基-5-(丙烷-2-基)吡啶和251mg的4-氧代四氢噻吩-3-甲酸甲酯，得到102mg的2-[5-(丙烷-2-基)吡啶-2-基]-2，6-二氢-4H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-醇钠，其为冻干物形式。
产率＝11％
m.p.(℃)＞260℃
M＝C13H15N3OS＝261；M+H＝262；方法2：Tr＝1.26分钟
1H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：8.4(d，1H)；8.1(s，1H)；7.6(dd，1H)；3.7(s，2H)；3.6(s，2H)；2.9(qt，1H)；1.2(s，6H)。
实施例14：2-[4-(吡啶-3-基甲氧基)吡啶-2-基]-2，6-二氢-4H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-醇钠(表II的化合物60)
Figure BDA0000086875870000301
14.1.2-氯-4-(吡啶-3-基甲氧基)吡啶
将2g(15.4mmol)2-氯吡啶-4-醇、3.82g(15.1mmol)3-(溴甲基)吡啶氢溴化物、3g(75.6mmol)氢氧化钠和1.39g(4.3mmol)四丁基溴化铵在90mL甲苯中的混合物回流12小时。冷却至室温后，将反应介质溶于300mL EtOAc中，连续用水(2×100mL)、饱和NaHCO3溶液(100mL)和盐水(100mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，在减压下浓缩，然后通过硅胶色谱法纯化，用98/2的DCM/MeOH混合物洗脱。得到2.5g的2-氯-4-(吡啶-3-基甲氧基)吡啶，其为黄色油状物形式。
产率＝73％
1H NMR，CDCl3，400MHz，δ(ppm)：8.7(s，1H)；8.6(d，1H)；8.25(d，1H)；7.8(d，1H)；7.4(dd，1H)；7.0(s，1H)；6.8(d，1H)；5.1(s，2H)。
14.2.2-肼基-4-(吡啶-3-基甲氧基)吡啶
将0.5g(2.27mmol)2-氯-4-(吡啶-3-基甲氧基)吡啶和2mL(40.5mmol)水合肼的混合物在80℃加热12小时。然后将反应介质溶于30mL水中，并用EtOAc(3×30mL)萃取。合并有机相，用盐水(20mL)洗涤，然后用Na2SO4干燥，过滤，在减压下浓缩且通过硅胶纯化，用95/5的DCM/MeOH混合物洗脱。得到197mg的2-肼基-4-(吡啶-3-基甲氧基)吡啶，其为黄色油状物形式。
产率＝37％
1H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：8.7(s，1H)；8.5(d，1H)；7.9(d，1H)；7.8(d，1H)；7.4(dd，1H)；7.3(s，1H)；5.2(s，2H)；4.1(s，2H)。
14.3.2-[4-(吡啶-3-基甲氧基)吡啶-2-基]-2，6-二氢-4H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-醇钠
根据实施例8所述的方法，起始于197mg的2-肼基-4-(吡啶-3-基甲氧基)吡啶和146mg的4-氧代四氢噻吩-3-甲酸甲酯，得到225mg的2-(4-乙基吡啶-2-基)-2，6-二氢-4H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-醇钠，其为白色冻干物形式。
产率＝48％
m.p.(℃)＞260℃
M＝C16H14N4O2S＝326；M+H＝327；方法2：Tr＝0.71分钟。
1H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：8.8(s，1H)；8.6(d，1H)；8.2(s，1H)；8.1(d，1H)；8.0(d，1H)；7.5(t，1H)；6.5(d，1H)；5.2(s，2H)；3.75(s，2H)；3.5(s，2H)。
实施例15A：2-[5-(3-叔丁基-1，2，4-
Figure BDA0000086875870000311
二唑-5-基)吡啶-2-基]-1，2，4，6-四氢-3H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-酮(表I的化合物50A)
Figure BDA0000086875870000321
15A.1.5-(3-叔丁基-1，2，4-
Figure BDA0000086875870000322
二唑-5-基)-2-氯吡啶
在Dean-stark装置中，向3.8g(21.5mmol)6-氯吡啶-3-甲酰氯在100mL甲苯中的溶液分批添加2.5g(21.5mmol)N-羟基-2，2-二甲基丙脒(propanimidamide)，且反应介质在室温搅拌2小时，然后加热2小时。冷却至室温后，将该介质在减压下浓缩且通过硅胶色谱法纯化，用0至10％EtOAc的环己烷/EtOAc梯度液洗脱。得到4.1g的5-(3-叔丁基-1，2，4-二唑-5-基)-2-氯吡啶，其为白色固体形式。
产率＝81％
1H NMR，CDCl3，400MHz，δ(ppm)：9.2(s，1H)；8.4(dd，1H)；7.5(d，1H)；7.8(d，1H)；1.4(s，9H)。
15A.2.5-(3-叔丁基-1，2，4-
Figure BDA0000086875870000324
二唑-5-基)-2-肼基吡啶
根据实施例4.2所述的方法，起始于2g的5-(3-叔丁基-1，2，4-
Figure BDA0000086875870000325
二唑-5-基)-2-氯吡啶和3.9mL水合肼，得到固体形式的1.9g的5-(3-叔丁基-1，2，4-
Figure BDA0000086875870000326
二唑-5-基)-2-肼基吡啶，其不用进一步纯化直接用于以下步骤。
产率＝97％
1H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：8.7(s，1H)；8.1(d，1H)；6.9(d，1H)；6.5(bs，1H)；3.5(bs，2H)；1.3(s，9H)。
15A.3.2-[5-(3-叔丁基-1，2，4-
Figure BDA0000086875870000327
二唑-5-基)吡啶-2-基]-1，2，4，6-四氢-3H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-酮
根据实施例1所述的方法，起始于0.6g的5-(3-叔丁基-1，2，4-二唑-5-基)-2-肼基吡啶和0.41g的4-氧代四氢噻吩-3-甲酸甲酯，得到0.32g的2-[5-(3-叔丁基-1，2，4-
Figure BDA0000086875870000329
二唑-5-基)吡啶-2-基]-1，2，4，6-四氢-3H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-酮，其为白色固体形式。
产率＝38％
m.p.(℃)＝240℃
M＝C16H17N5O2S＝343；M+H＝344；方法2：Tr＝1.34分钟。
1H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：12.3(bs，1H)；9.1(s，1H)；8.6(d，1H)；8.4(d，1H)；4.0(s，2H)；3.8(s，2H)；1；4(s，9H)。
实施例15B：2-[5-(5-叔丁基-1，2，4-
Figure BDA0000086875870000331
二唑-3-基)吡啶-2-基]-1，2，4，6-四氢-3H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-酮(表I的化合物50B)
Figure BDA0000086875870000332
15B.15-(5-叔丁基-1，2，4-
Figure BDA0000086875870000333
二唑-3-基)-2-氯吡啶
将1.5g(8.74mmol)6-氯-N’-羟基吡啶-3-甲脒(carboximidamide)和1.13mL(9.18mmol)三甲基乙酰氯在15mL甲苯中的混合物在室温搅拌1小时，然后回流4小时。过滤该介质。将形成的不溶物质溶于15mL AcOH，然后在60℃加热5小时。冷却至室温后，将该介质在减压下浓缩，然后通过硅胶色谱法纯化，用环己烷/EtOAc混合物(9/1)洗脱。得到0.39g的5-(5-叔丁基-1，2，4-
Figure BDA0000086875870000334
二唑-3-基)-2-氯吡啶，其为白色固体形式。
产率＝21％。
15.B2 2-[5-(5-叔丁基-1，2，4-
Figure BDA0000086875870000335
二唑-3-基)吡啶-2-基]-1，2，4，6-四氢-3H-噻吩并[3，4-c]吡唑-3-酮(表I的化合物50B)
该化合物根据方法15.A2-15.A3获得，起始于5-(5-叔丁基-1，2，4-
Figure BDA0000086875870000336
二唑-3-基)-2-氯吡啶和4-氧代四氢噻吩-3-甲酸甲酯，其为白色固体形式。
m.p.(℃)＝240℃
M＝C16H17N5O2S＝343；M+H＝344；方法2：Tr＝1.39分钟。
1H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：12.3(bs，1H)；9.1(s，1H)；8.5(d，1H)；8.4(d，1H)；4.1(s，2H)；3.8(s，2H)；1.5(s，9H)。
实施例16：N-环戊基-N-(2，3-二羟基丙基)-6-(3-氧代-4，6-二氢-1H-噻吩并[3，4-c]吡唑-2(3H)-基)吡啶-3-磺酰胺(表I的化合物53)
Figure BDA0000086875870000341
16.1.6-氯-N-环戊基吡啶-3-磺酰胺
根据方法4.1，起始于5g的6-氯吡啶-3-磺酰氯和2g环戊基胺，得到5.1g的6-氯-N-环戊基吡啶-3-磺酰胺，其为黄色固体形式。
产率＝83％
1H NMR，CDCl3，400MHz，δ(ppm)：8.9(s，1H)；8.0(d，1H)；7.4(d，1H)；4.5(d，1H)；3.6(q，1H)；1.8-1.2(m，8H)。
16.26-氯-N-环戊基-N-(丙-2-烯-1-基)吡啶-3-磺酰胺
根据方法10.2，起始于1g的6-氯-N-环戊基吡啶-3-磺酰胺和0.42mL烯丙基溴，得到1.2g的6-氯-N-苯基-N-(丙-2-烯-1-基)吡啶-3-磺酰胺，其为橙色油状物。
产率＝94％
1H NMR，CDCl3，400MHz，δ(ppm)：8.9(s，1H)；8.0(d，1H)；7.4(d，1H)；5.7(dd，1H)；5.2(dd，1H)；5.1(d，1H)；4.2(m，1H)；3.7(d，2H)；1.8-1.2(m，8H)。
16.3.6-氯-N-环戊基-N-(2，3-二羟基丙基)吡啶-3-磺酰胺
在室温向1.1g(3.7mmol)6-氯-N-环戊基-N-(丙-2-烯-1-基)吡啶-3-磺酰胺在15mL tBuOH和水的混合物(1/1)中的溶液中添加tBuOH中的1.2g(10.3mmol)NMO和0.52mL(0.04mmol)2.5％OsO4。持续搅拌12小时。然后将介质用200mL水稀释，且用Et2O(2×100mL)萃取，用Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。得到0.92g的6-氯-N-环戊基-N-(2，3-二羟基丙基)吡啶-3-磺酰胺，其为棕色固体形式，其不用进一步纯化直接用于以下步骤。
产率＝75％。
1H NMR，CDCl3，400MHz，δ(ppm)：8.8(s，1H)；8.1(d，1H)；7.5(d，1H)；4.3(m，1H)；4.0(m，1H)；3.6(dd，2H)；3.2(dd，2H)；1.8-1.4(m，10H)。
16.4.6-氯-N-环戊基-N-[(2，2-二甲基-1，3-二氧杂环戊烷-4-基)甲基]吡啶-3-磺酰胺
将0.83g(2.48mmol)6-氯-N-环戊基-N-(2，3-二羟基丙基)吡啶-3-磺酰胺、0.67mL(5.45mmol)2，2-二甲氧基丙烷和47mg pTsOH在5mL DMF中的混合物在室温搅拌3小时。将该介质溶于100mL EtOAc，用50mL饱和NaHCO3溶液和50mL水洗涤，然后用Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。得到0.92g的6-氯-N-环戊基-N-[(2，2-二甲基-1，3-二氧杂环戊烷-4-基)甲基]吡啶-3-磺酰胺，其为棕色油状物形式，其不用进一步纯化直接用于以下步骤。
产率＝98％.
1H NMR，CDCl3，400MHz，δ(ppm)：8.8(s，1H)；8.0(d，1H)；7.3(d，1H)；4.3(m，1H)；4.0(m，2H)；3.7(m，1H)，3.3(dd，1H)；3.1(dd，1H)；1.8-1.3(m，8H)；1.3(s，3H)；1.2(s，3H)。
16.5.N-环戊基-N-[(2，2-二甲基-1，3-二氧杂环戊烷-4-基)甲基]-6-肼基吡啶-3-磺酰胺
根据方法4.2，起始于0.92g的6-氯-N-环戊基-N-[(2，2-二甲基-1，3-二氧杂环戊烷-4-基)甲基]吡啶-3-磺酰胺和0.24mL水合肼，得到0.85g的N-环戊基-N-[(2，2-二甲基-1，3-二氧杂环戊烷-4-基)甲基]-6-肼基吡啶-3-磺酰胺，其为黄色油状物形式。
产率＝99％。
16.6.N-环戊基-N-[(2，2-二甲基-1，3-二氧杂环戊烷-4-基)甲基]-6-(3-氧代-4，6-二氢-1H-噻吩并[3，4-c]吡唑-2(3H)-基)吡啶-3-磺酰胺
根据方法1，起始于0.4g的N-环戊基-N-[(2，2-二甲基-1，3-二氧杂环戊烷-4-基)甲基]-6-肼基吡啶-3-磺酰胺和0.173g的4-氧代四氢噻吩-3-甲酸甲酯，得到470mg的N-环戊基-N-[(2，2-二甲基-1，3-二氧杂环戊烷-4-基)甲基]-6-(3-氧代-4，6-二氢-1H-噻吩并[3，4-c]吡唑-2(3H)-基)吡啶-3-磺酰胺，其为棕色固体形式。
产率＝97％。
16.7.N-环戊基-N-(2，3-二羟基丙基)-6-(3-氧代-4，6-二氢-1H-噻吩并[3，4-c]吡唑-2(3H)-基)吡啶-3-磺酰胺
将470mg(0.54mmol)6N-环戊基-N-[(2，2-二甲基-1，3-二氧杂环戊烷-4-基)甲基]-6-(3-氧代-4，6-二氢-1H-噻吩并[3，4-c]吡唑-2(3H)-基)吡啶-3-磺酰胺在1mL AcOH中的溶液在80℃加热4小时。将该介质在减压下浓缩，然后通过反相色谱法在C18柱上纯化，用0至100％CH3CN的10-3N HCl/CH3CN梯度液洗脱。得到48mg的N-环戊基-N-(2，3-二羟基丙基)-6-(3-氧代-4，6-二氢-1H-噻吩并[3，4-c]吡唑-2(3H)-基)吡啶-3-磺酰胺，其为白色固体形式。
产率＝30％
m.p.(℃)＝190
M＝C18H24N4O5S2＝440；M+H＝441；方法2：Tr＝0.89分钟。
1H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：12.1(bs，1H)；8.7(s，1H)；8.3(bs，1H)；8.2(d，1H)；4.7(s，1H)；4.5(t，1H)；4.1(m，1H)；3.9(s，2H)；3.6(m，3H)；3.4-3.2(m，3H)；2.8(dd，1H)；1.7-1.2(m，8H)。
实施例17：6-[5-(甲基磺酰基)-3-氧代-1，3，4，5，6，7-六氢-2H-吡唑并[4，3-c]吡啶-2-基]吡啶-3-甲酸2，2-二甲基丙基酯(表I的化合物54)
Figure BDA0000086875870000361
17.1.1-(甲基磺酰基)-4-氧代哌啶-3-甲酸甲酯
在室温向1g(6.36mmol)4-氧代哌啶-3-甲酸甲酯盐酸盐和2.2mL Et3N在12mL DCM中的混合物中滴加0.5mL甲磺酰氯。将反应介质搅拌1小时，然后溶于50mL EtOAc中，用20mL水和20mL盐水洗涤，然后用Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。得到0.35g的1-(甲基磺酰基)-4-氧代哌啶-3-甲酸甲酯。
产率＝23％。
17.2.6-氯吡啶-3-甲酸2，2-二甲基丙基酯
在室温在氩气下向10g(56.8mmol)6-氯吡啶-3-甲酰氯在100mL无水甲苯中的溶液添加15g(170.4mmol)2，2-二甲基丙醇。然后将反应介质在80℃加热6小时。冷却至室温后，浓缩介质且所得残余物溶于800mL EtOAc中，连续用水(2×200mL)、饱和NaHHCO3溶液(2×200mL)和盐水(100mL)洗涤，用Na2SO4干燥，然后在减压下浓缩，通过色谱法在硅胶柱上纯化，用0至5％EtOAc的环己烷/EtOAc梯度液洗脱。得到11.9g的6-氯吡啶-3-甲酸2，2-二甲基丙基酯，为白色粉末形式。
产率＝92％。
1H NMR，CDC13，400MHz，δ(ppm)：7.5(m，5H)；4.2(m，5H)；3.0(dd，2H；1.0(t，6H)。
17.3.6-肼基吡啶-3-甲酸2，2-二甲基丙基酯
根据实施例4.2所述的方法，起始于11.9g(52.26mmol)6-氯吡啶-3-甲酸2，2-二甲基丙基酯，得到4.3g的6-肼基吡啶-3-甲酸2，2-二甲基丙基酯，其为白色粉末形式。
产率＝37％
1H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：8.7(s，1H)；8.15(d，1H)；6.9(d，1H)；4.0(s，2H)；3.5(bs，1H)；1.0(s，9H)。
17.4.6-[5-(甲基磺酰基)-3-氧代-1，3，4，5，6，7-六氢-2H-吡唑并[4，3-c]吡啶-2-基]吡啶-3-甲酸2，2-二甲基丙基酯
根据方法1，起始于0.21g的1-(甲基磺酰基)-4-氧代哌啶-3-甲酸甲酯和0.2g的6-肼基吡啶-3-甲酸2，2-二甲基丙基酯，得到10mg的6-[5-(甲基磺酰基)-3-氧代-1，3，4，5，6，7-六氢-2H-吡唑并[4，3-c]吡啶-2-基]吡啶-3-甲酸2，2-二甲基丙基酯。
产率＝3％
m.p.(℃)＝230
M＝C18H24N4O5S＝408；M+H＝409；方法2：Tr＝1.11分钟。
1H NMR，d6-DMSO，400MHz，δ(ppm)：12.2(bs，1H)；9.0(s，1H)；8.6(bs，1H)；8.5(d，1H)；4.1(s，2H)；4.0(s，2H)；3.5(t，2H)；3.0(s，3H)；2.8(t，2H)；1.0(s，9H)。
下表例示了根据本发明的化合物的一些实施例的化学结构和物理性质。
表I例示了根据本发明的式(I)化合物，其中R2在β位。这些化合物在下文称为式(I’)化合物。
表II例示了根据本发明的式(I)化合物，其中R2在γ位。这些化合物在下文称为式(I”)化合物。
以下表I和II例示了根据本发明的化合物的一些实施例的化学结构和物理性质。
在这些表中：
-在“盐”栏中，“-”表示游离碱形式的化合物，而“CF3COOH”、“HCl”和“Na”分别表示三氟乙酸盐形式、盐酸盐形式和钠盐形式的化合物；
-在其它栏中，“-”意指所考虑的取代基不存在于分子上；
-Me、Et、n-Pr、i-Pr、n-Bu和i-Bu分别表示甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基和异丁基；
-Ph和Bn分别表示苯基和苄基；
-“m.p.”栏表明所考虑的化合物的熔点，以℃计；
-通过质谱鉴定的峰MH+，和在上文使用且详述的高效液相色谱分析方法，分别在“LC/MS”栏和“方法”栏中指出。
Figure BDA0000086875870000391
Figure BDA0000086875870000411
Figure BDA0000086875870000431
Figure BDA0000086875870000451
Figure BDA0000086875870000461
Figure BDA0000086875870000471
Figure BDA0000086875870000491
Figure BDA0000086875870000501
Figure BDA0000086875870000511
Figure BDA0000086875870000521
根据本发明的化合物经受药理试验以测定它们的性质，且特别是：
-直接测量蛋白HIF1-α的稳定的体外测试，该蛋白HIF1-α为在细胞中组成性表达但在正常氧条件下被泛素/蛋白酶体系统降解的转录因子；
-用于在He3pB细胞中测量VEGF和EPO的分泌的功能试验，VEGF和EPO为肝细胞中HIF1-α活化的两个标记。
所述两种测试如下所述。
1.在HEKEA细胞中测量HIF1-α的稳定
1.1目的
HIF为参与细胞适应缺氧的转录因子。该转录因子最小为由两种蛋白，ARNT和HIF1-α形成的杂二聚体。ARNT在细胞中组成性且稳定地表达，且转录复合物调节的主要部分通过蛋白HIF1-α的稳定进行。实际上，在常氧条件下(20％，约等于环境的氧值)，该蛋白尤其在两种脯氨酸(人蛋白的脯氨酸402和564)上经HIF脯氨酰-羟化酶羟基化，导致von Hippell Lindau(VHL)蛋白的结合。然后，VHL与HIF1-α的结合通过泛素/蛋白酶体系统导致HIF1-α的降解。在缺氧下(在细胞测试中O2＜5％)，HIF脯氨酰-羟化酶被抑制，其反映为细胞中HIF1-α蛋白的量的增加。该蛋白然后可与ARNT结合以转移至核中并活化其靶基因。
由于HIF活化的基因参与细胞对缺氧和组织对缺血的适应性反应，因此该目的在于鉴别和表征在细胞中使HIF1-α稳定的化合物，以放大或模拟其有益作用。
存在许多测试，其描述了通过报道基因系统(HRE-荧光素酶)或通过测量HIF-诱导的蛋白(例如VEGF或EPO)间接测量HIF的活性。而且，允许直接测量细胞中HIF1-α蛋白的量的唯一测试为使用抗体的测试，例如包括消耗细胞和时间的细胞提取相(总溶解产物或核萃取物)的蛋白印迹，因此限制化合物筛选能力。因此该目的在于开发一种灵敏的筛选测试，适合于384-孔板，用于直接测量细胞核中HIF1-α蛋白的量。该测试在HEK细胞(来自肾腺癌的人上皮细胞)中建立。
1.2测试原理
该测试为基于酶互补原理的细胞测试，本文使用的酶为β-半乳糖苷酶。HEKEA细胞为稳定表达(且在核中受限制)突变体β-半乳糖苷酶(Ω片段，也已知为EA)的HEK细胞(DiscoverX销售的系列)。该构造仅当包含Prolabel互补片段的蛋白迁移至核中时使其可获得β-半乳糖苷酶活性。
在该情况下，包含Prolabel片段的感兴趣蛋白为HIF1-α或在两个脯氨酸402和564被丙氨酸替代的突变的HIF1-α，其C-端通过分子生物学(Clontech销售的DiscoverX载体)与小互补肽片段(Prolabel或ED，约4kDa)融合。然后将编码嵌合蛋白HIF1-α_Prolabel的载体转染至HEKEA细胞以得到稳定的克隆(HEKEA_HIF1-αPLBL)。
将细胞进行缺氧处理或用潜在HIF活化剂的化合物处理后获得的C-端Prolabel-“标记的”HIF1-α蛋白的量通过向细胞中添加含β-半乳糖苷酶的化学发光底物的溶胞缓冲液测量。
β-半乳糖苷酶活性的测量与Prolabel的量成比例，从而与迁移至细胞核中的HIF1-α的量成比例。
在内部平行地进行实验以证实单独的Prolabel片段在细胞中不稳定，从而不允许测量任何活性。
1.3实验方案
1.3.1实验计划
1)在D0接种细胞
2)在常氧下粘附24小时
3)在D+1制备和添加产物(Biomek 2000和FX)
4)在常氧培养6小时
5)对板读数(通过发光)
1.3.2接种细胞
用Multidrop在白色不透明底的384-孔板(Greiner ref 3704)中于30μl培养基(1％FCS)中以10000细胞/孔(细胞板)接种细胞。
1.3.3处理
●稀释板(DL板)的制备
测试产物以3×10-2M在100％DMSO中制备，然后在含有0.1％FCS(10μl在990μl的MEM中)的培养基中稀释至3×10-4M。然后手动将其放置在称为稀释板(dl)的圆底96-孔板的第12列(各个化合物各200μl)。然后用Biomek 2000制备3×10-4M至10-9M的完整DL板(程序：连续10点的范围)。对于参照和对照，将含有0.1％FCS的100μl的DMEM加入至第1列，将100μl的去铁胺10-3M加入至第2列的孔ABCD，以及将100μl的去铁胺5×10-3M加入至第2列的孔EFGH。
●细胞板中的DL板分布
用Biomek FX 96从DL板移取3.3μL，一式两份放入水平的(第1至24列)各384-孔细胞板(HEKEA_HIF1αPLBL细胞板)中。
然后在培养箱中在37℃(环境O2，6％CO2)将细胞放置6小时。
1.3.4β-半乳糖苷酶活性的测量
所用的试剂盒为Prolabel的化学发光试剂盒(Ref 93-0001 DiscoverX)。
在37℃培养6小时后，加入15μl含有β-半乳糖苷酶底物(19体积的Path hunter细胞(Path hunter cell)测定缓冲液+5体积的Emarald II溶液+1体积的Galacton star)的溶胞缓冲液溶解细胞，通过直接将其加入至板中的30μl培养基中。将板在避光环境培养60分钟，然后用Top Count仪读取发光。然后用合适的拟合软件计算化合物的EC50值，其在下表III中给出。
化合物对HIF的激活活性通过产生50％最大响应的该化合物的分子浓度给出。
表III
  化合物号   EC50(M)
  1   8.8E-06
  7   6.0E-06
  9   1.4E-06
  13   5.2E-06
  15   1.6E-05
  16   8.6E-06
  17   1.0E-05
  18   4.4E-06
  19   5.5E-06
  20   3.4E-06
  21   8.7E-06
  23   1.2E-05
  24   3.E-06
  25   3.3E-06
  26   1.5E-06
  27   9.5E-06
  28   1.6E-06
  29   2.5E-06
  30   6.5E-07
  32   1.3E-06
  33   9.4E-06
  34   1.0E-05
  35   2.5E-06
  36   1.2E-06
  37   2.2E-06
  38   3.8E-06
  60   2.1E-05
  61   1.9E-06
  62   3.9E-06
1.4多样的
1.4.1.HEKEA_HIF1αPLBL细胞的保持
所述细胞在完全培养基(whole medium)(如下)中，在烧瓶T225中在37℃在CO2培养箱中培养。
1.4.2.HEKEA_HIF1αPLBL细胞的培养基
Figure BDA0000086875870000571
2.Hep3B肝细胞分泌VEGF和EPO的测量
2.1.目的
HIF是一种参与细胞适应缺氧的转录因子。由于被HIF激活的基因参与了细胞对缺氧和组织对缺血的适应性反应，本目的在于鉴定和表征在细胞中使HIF1α稳定的化合物，以放大或模拟其有益效果。HIF1α在分析EPO基因启动子后鉴定，其使得该蛋白成为HIF1α激活的第一标记之一。此外，VEGF还在文献中识别为HIF激活的主要标记之一。因此选择测量这两种蛋白用于表征Hep3B细胞中的HIF激活剂的化合物。
因此，本目的在于开发一种适用于96-孔板的灵敏的筛选测试，用于直接测量Hep3B细胞(来源于人肝癌的细胞)上清液中对可能的HIF激活剂响应的VEGF和EPO的量。
2.2.测试原理
所述测试为用于测量Hep3B细胞上清液中VEGF和EPO的ELISA测试，所述细胞经缺氧处理或经去铁胺处理作为对照或经可能的HIF激活剂处理。所述测试适用于96-孔板，使之具有更大的化合物筛选能力。
2.3.实验方案
2.3.1实验计划
1)在D0接种细胞
2)在常氧下粘附6小时
3)制备和加入产物(Biomek 2000和FX)
4)在常氧下培养18小时
5)在D+1在上清液中测定EPO和VEGF
2.3.2接种细胞
在黑色、不透明底的96-孔板(参考Costar 3916)中以30000细胞/孔，在100μl培养基(10％FCS)中以Multidrop次代培养细胞。
2.3.3处理细胞
●稀释板(DL板)的制备
测试产物以10-2M在100％DMSO中制备，然后在含有0.1％FCS(6μl在194μl的MEM中)的培养基中稀释至3×104M。将200μl各个化合物放置在96-孔板的第12列。用Biomek 2000制备3×10-4M至3×10-8M的稀释范围(程序：连续9点的范围)。分别加入100μl的MEM 0.1％FCS和去铁胺5×10-3M至第3列的孔A，B，C，D和孔E，F，G，H作为对照。
●细胞板中的DL板分布
将在前一天接种在96-孔板的细胞培养基更换为90μl含有0.1％FCS的培养基，并用FX 96从96-孔DL板中分配10μl至细胞板中。
将如此处理的细胞板在培养箱中在37℃(环境O2，6％CO2)放置18小时。
2.3.4EPO和VEGF的测定
在96-孔板中用可能的HIF激活剂处理的Hep3B细胞的上清液(80μl)用多通道移液管回收，用于通过ELISA根据制造商的使用说明书(Kit EPOMesoscale(refK15122B-2))同时测定VEGF和EPO。然后用合适的拟合软件计算化合物对EPO和VEGF的EC50值，其在下表IV中给出。
2.4.多样的
Hep3B细胞的培养基：
Figure BDA0000086875870000581
3.结果
化合物对HIF的激活活性通过产生50％最大响应的该化合物的分子浓度给出于表IV中。
表IV
  化合物号   EC50EPO(M)   EC50VEGF(M)
  1   2.9E-06   3E-06
  9   7.0E-07   6.6E-07
  13   9.0E-07   1.0E-06
  15   2.8E-06   3.0E-06
  16   3.5E-06   3.0E-06
  17   2.9E-06   2.9E-06
  18   5.0E-07   4.0E-07
  19   2.4E-06   2.4E-06
  20   1.0E-06   9.0E-07
  21   1.4E-06   2.4E-06
  24   5E-07   5E-07
  25   2.4E-06   2.5E-06
  26   1E-06   1.3E-06
  28   1E-06   1E-06
  29   2.5E-06   2.6E-06
  30   1.5E-06   1.8E-06
  32   2.6E-06   3.2E-06
  35   1.7E-06   1.1E-06
  36   1.6E-06   2E-06
  59   2.6E-06   3.1E-06
  61   2.2E-06   2.8E-06
根据本发明的化合物因此可用于制备药物，特别是作为HIF转录因子的活化剂的药物。
因此，根据其另一方面，本发明的一个主题为包含式(I)化合物或该式(I)化合物与药学上可接受的酸形成的加成盐的药物。
本发明还涉及药物组合物，其包含根据本发明的式(I)化合物，或该化合物的药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的赋形剂。
发现这些药物具有治疗用途，尤其用于在人和动物中治疗/预防，特别是心血管疾病、下肢缺血、心功能不全、源于缺血的冠心病(例如心绞痛或心肌梗塞)、动脉硬化、源于缺血的中风、肺动脉高血压和部分或总体血管闭塞引起的任何病理。
这些药物还具有以下治疗用途：治疗/预防青光眼、肾病或神经变性起源或其它起源的脑疾病、和贫血，或作为促进结瘢的药物或缩短手术后恢复期的药物或治疗四肢无力症状的药物，或用于在大型外科干预如颅骨或胸外科手术，或心脏、颈动脉或主动脉手术后自体输血所需的情况下获得血液的药物。
这些化合物尤其在治疗/预防贫血中具有治疗用途。
这些化合物也可用于在人和动物中在大型外科干预如颅骨或胸外科手术或心脏、颈动脉或主动脉手术后自体输血所需的情况下获得血液的目的。
这些化合物潜在地可在人和动物中作为促进结瘢的药物或缩短手术后恢复期的药物。
这些化合物潜在地可在人和动物中用于治疗四肢无力症状，其归类于(ranging up to)特别在老年人中出现的恶病质。
这些化合物潜在地可在人和动物中用于治疗青光眼、肾病或神经变性起源或其它起源的脑疾病。
最后，本发明所述的化合物潜在地可在人和动物中用于治疗源于缺血的心脏或外周疾病，其通过在自体和异种的方法中的再生医学(regenerativemedicine)，使用非胚胎干细胞或成肌细胞用于治疗目的，无论在给药前处理这些细胞或在局部给药这些细胞的同时处理细胞。
而且，本发明所述的化合物可单独使用，或如果必要的话，与一种或多种用于治疗高血压、心功能不全、糖尿病和贫血的其它活性化合物组合使用。
例如，可提及根据本发明的化合物与一种或多种化合物的组合，该一种或多种化合物选自转化酶抑制剂，血管紧张素II受体拮抗剂，β-阻断剂，盐皮质激素受体拮抗剂，利尿剂，钙拮抗剂，抑制素和洋地黄苷衍生物。
根据另一方面，本发明涉及药物组合物，其包括作为有效成分的本发明化合物。这些药物组合物包含有效量的至少一种本发明化合物，或所述化合物的药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的赋形剂。
根据药物形式和所需的给药方式，从本领域技术人员已知的常用赋形剂中选择所述赋形剂。
在用于口服、舌下、皮下、肌内、静脉注射、局部(topical)、局部(local)、气管内、鼻内、经皮或直肠给药的本发明的药物组合物中，上述式(I)的有效成分，或其盐，可以以单位给药形式，以与标准药学赋形剂的混合物，给予人或动物用于预防或治疗上述病症或疾病。
给药的合适单位形式包括口服剂型，例如片剂、软或硬凝胶胶囊、粉剂、颗粒剂和口服溶液或悬浮液，舌下、含服、气管内、眼内、鼻内和吸入给药形式，局部、经皮、皮下、肌内或静脉注射给药形式，直肠给药形式和埋植剂。对于局部应用，本发明化合物可以以霜剂、凝胶剂、软膏剂或洗剂使用。
通过实例的方式，以片剂形式的本发明化合物的单位给药形式可包括以下成分：
Figure BDA0000086875870000611
可以存在特殊情况，其中更高或更低剂量是合适的；该剂量不偏离本发明的范围。根据通常实践，合适各患者的剂量通过医生根据给药方式和所述患者的体重和反应而确定。
根据另一方面，本发明还涉及用于治疗上述病理的方法，其包括向患者给药有效量的本发明化合物，或其药学上可接受的盐。

Claims (17)

1.式(I)化合物：
其中
n等于1、2、3或4；
m等于0或1；
o等于0或1；
X表示-CH2、-N(R’)-或选自氧原子和硫原子的杂原子，且R’表示-CH2-苯基、-C(O)R5或-COOR5且R5如下定义；
R1表示氧代基；且
R2表示氢原子或选自以下的基团：(i)-(C1-C5)烷基，(ii)-(C1-C5)烷氧基，(iii)-COOR5，(iv)-NR5R6，(v)-C(O)-NR5R6，(vi)-SO2-NR3R4，且R3、R4、R5和R6如下定义；且
R3和R4，
(i)其可相同或不同，彼此独立地表示，氢原子、-(C1-C5)烷基、-(C3-C6)环烷基、苯基、吡啶基、-CH2-呋喃基；或
(ii)与携带它们的氮原子一起形成吡咯烷基或六亚甲基亚胺基；
R5和R6，其可相同或不同，彼此独立地表示，氢原子或-(C1-C5)烷基；
其以碱的形式或酸加成盐的形式。
2.根据权利要求1的式(I)化合物，其特征在于
n等于1、2、3或4；
m等于0或1；
o等于0或1；
X表示-CH2-、-N(R’)-或选自氧原子和硫原子的杂原子；
R’表示-CH2-苯基、-C(O)R5或-COOR5；
R1表示氧代基；
R2表示-SO2-NR3R4；
R3和R4
(i)彼此独立地表示，氢原子、-(C1-C5)烷基、-(C3-C6)环烷基、苯基、吡啶基或-CH2-呋喃基，或
(ii)与携带它们的氮原子一起形成吡咯烷基或六亚甲基亚胺基；且
R5和R6表示-(C1-C5)烷基。
3.根据权利要求1的式(I)化合物，其特征在于
n等于1、2、3或4；
m等于0或1；
o等于0或1；
X表示-CH2-、-N(R’)-或选自氧原子和硫原子的杂原子；
R’表示-CH2-苯基、-C(O)R5或-COOR5；
R1表示氧代基；
R2表示氢原子、-(C1-C5)烷基、-(C1-C5)烷氧基、-COOR5、-NR5R6或-C(O)-NR5R6；且
R5和R6彼此独立地表示，氢原子或-(C1-C5)烷基。
4.根据权利要求1至3任一项的式(I)化合物，其特征在于R2为吡啶的β位的原子上的取代基。
5.根据权利要求1的式(I)化合物，其特征在于其为：
2-(4-甲氧基吡啶-2-基)-1,2,4,6-四氢-3H-噻吩并[3,4-c]吡唑-3-酮；
2-(吡啶-2-基)-1,4,5,6-四氢环戊二烯并[c]吡唑-3(2H)-酮；
N-乙基-6-(3-氧代-4,6-二氢-1H-噻吩并[3,4-c]吡唑-2(3H)-基)-N-苯基吡啶-3-磺酰胺；
N-乙基-6-(3-氧代-1,4,6,7-四氢噻喃并[4,3-c]吡唑-2(3H)-基)-N-苯基吡啶-3-磺酰胺；
N-乙基-6-(3-氧代-3,5,6,7-四氢噻喃并[3,2-c]吡唑-2(1H)-基)-N-苯基吡啶-3-磺酰胺；
N,N-二乙基-6-(3-氧代-4,6-二氢-1H-噻吩并[3,4-c]吡唑-2(3H)-基)吡啶-3-磺酰胺；
2-[5-(吡咯烷-1-基磺酰基)吡啶-2-基]-1,2,4,6-四氢-3H-噻吩并[3,4-c]吡唑-3-酮；
N-环丙基-6-(3-氧代-4,6-二氢-1H-噻吩并[3,4-c]吡唑-2(3H)-基)吡啶-3-磺酰胺；
6-(3-氧代-4,6-二氢-1H-噻吩并[3,4-c]吡唑-2(3H)-基)-N-(丙烷-2-基)吡啶-3-磺酰胺；
N-叔丁基-6-(3-氧代-4,6-二氢-1H-噻吩并[3,4-c]吡唑-2(3H)-基)吡啶-3-磺酰胺；
N-(呋喃-2-基甲基)-6-(3-氧代-4,6-二氢-1H-噻吩并[3,4-c]吡唑-2(3H)-基)-吡啶-3-磺酰胺；
N-环戊基-6-(3-氧代-4,6-二氢-1H-噻吩并[3,4-c]吡唑-2(3H)-基)吡啶-3-磺酰胺；
N-甲基-6-(3-氧代-4,6-二氢-1H-噻吩并[3,4-c]吡唑-2(3H)-基)-N-(吡啶-2-基)吡啶-3-磺酰胺；
2-(吡啶-2-基)-1,2,4,6-四氢-3H-噻吩并[3,4-c]吡唑-3-酮；
2-[4-(二甲基氨基)吡啶-2-基]-1,2,4,6-四氢-3H-噻吩并[3,4-c]吡唑-3-酮；
6-(3-氧代-4,6-二氢-1H-噻吩并[3,4-c]吡唑-2(3H)-基)-N-(吡啶-2-基)吡啶-3-磺酰胺；
N-乙基-6-(3-氧代-1,4,6,7-四氢吡喃并[4,3-c]吡唑-2(3H)-基)-N-苯基吡啶-3-磺酰胺；
2-(4-乙基吡啶-2-基)-2,6-二氢-4H-噻吩并[3,4-c]吡唑-3-醇钠；
2-[5-(氮杂环庚烷-1-基磺酰基)吡啶-2-基]-1,2,4,6-四氢-3H-噻吩并[3,4-c]吡唑-3-酮；
4-苄基-2-{5-[乙基(苯基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-5-氧代-4,5,6,7-四氢-2H-吡唑并[4,3-b]吡啶-3-醇钠；
N-甲基-6-(3-氧代-4,6-二氢-1H-噻吩并[3,4-c]吡唑-2(3H)-基)-N-(吡啶-2-基甲基)吡啶-3-磺酰胺；
2-{5-[乙基(苯基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-3-氧代-1,2,3,4,6,7-六氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-甲酸叔丁酯；
6-(5-乙酰基-3-氧代-1,3,4,5,6,7-六氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-2-基)-N-乙基-N-苯基吡啶-3-磺酰胺；
6-(3-氧代-4,6-二氢-1H-噻吩并[3,4-c]吡唑-2(3H)-基)吡啶-3-甲酸叔丁酯；
2-(4-甲基吡啶-2-基)-2,6-二氢-4H-噻吩并[3,4-c]吡唑-3-醇钠；
2-{5-[叔丁基(甲基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-2,6-二氢-4H-噻吩并[3,4-c]吡唑-3-醇钠；
2-{5-[叔丁基(乙基)氨基磺酰基]吡啶-2-基}-2,6-二氢-4H-噻吩并[3,4-c]吡唑-3-醇钠；
2-[5-(叔丁基氨基甲酰基)吡啶-2-基]-2,6-二氢-4H-噻吩并[3,4-c]吡唑-3-醇钠；
2-(5-甲氧基吡啶-2-基)-2,6-二氢-4H-噻吩并[3,4-c]吡唑-3-醇钠。
6.制备权利要求1的式(I)化合物的方法，其特征在于式(IV)化合物与有机碱反应，其中式(IV)化合物为式(IVa)或式(IVb)化合物的形式或这两种形式：
Figure FDA0000458987230000041
其中X、R1、R2、n、m和o如权利要求1定义，且z表示(C1-C5)烷基。
7.式(IVa)和式(IVb)化合物
Figure FDA0000458987230000042
其中X、R1、R2、n、m和o如权利要求1定义且X不为-CH2，且z表示(C1-C5)烷基。
8.药物，其特征在于其包含权利要求1至5中任一项的式(I)化合物，或式(I)化合物与药学上可接受的酸形成的加成盐。
9.药物组合物，其特征在于其包含权利要求1至5中任一项的式(I)化合物，或该化合物的药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的赋形剂。
10.权利要求1至5中任一项的式(I)化合物在制备用于治疗/预防心血管疾病的药物中的用途。
11.权利要求1至5中任一项的式(I)化合物在制备用于治疗/预防心功能不全、动脉硬化、肺动脉高血压和部分或总体血管闭塞引起的任何病状的药物中的用途。
12.权利要求11的用途，其中所述药物用于治疗/预防下肢缺血、源于缺血的冠心病或源于缺血的中风。
13.权利要求1至5中任一项的式(I)化合物在制备用于治疗/预防心绞痛或心肌梗塞的药物中的用途。
14.权利要求1至5中任一项的式(I)化合物在制备用于治疗/预防青光眼、肾病或神经变性起源的脑病，或贫血的药物，或促进结瘢的药物，或缩短手术后恢复期的药物，或治疗四肢无力症状的药物，或用于在大型外科干预后自体输血所需的情况下获得血液目的的药物中的用途。
15.权利要求1至5中任一项的式(I)化合物在制备用于在颅骨或胸外科手术、或心脏、颈动脉或主动脉手术后自体输血所需的情况下获得血液目的的药物中的用途。
16.权利要求1至5中任一项的式(I)化合物在制备用于通过使用干细胞的再生医学治疗/预防源于缺血的心脏或外周疾病的药物中的用途。
17.权利要求1至5中任一项的式(I)化合物和用于治疗高血压、心功能不全、糖尿病和贫血的一种或多种活性化合物的组合。
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Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2511917T3 (es) 2008-12-29 2014-10-23 Sanofi Derivados de 2-piridin-2-il-pirazol-3(2H)-ona, su preparación y su aplicación en terapéutica
EP2361912A1 (en) * 2010-02-18 2011-08-31 GenKyoTex SA Pyrazolo piperidine derivatives as NADPH oxidase inhibitors
EP2361911A1 (en) * 2010-02-18 2011-08-31 GenKyoTex SA Pyrazolo piperidine derivatives as NADPH oxidase inhibitors
KR20140138208A (ko) * 2012-03-30 2014-12-03 다이이찌 산쿄 가부시키가이샤 4-알카노일아미노-3-피라졸론 유도체
CN102731384B (zh) * 2012-07-10 2016-04-06 南开大学 一种6-甲基烟酸叔丁酯的合成方法
PE20151860A1 (es) 2013-03-29 2015-12-16 Takeda Pharmaceutical Derivados de 6-(5-hidroxi-1h-pirazol-1-il)nicotinamida y su uso como inhidores de la phd
CN105061316B (zh) * 2015-07-17 2017-12-22 苏州大学 稠环类化合物、制备方法和用途
CN113072562B (zh) * 2021-04-06 2022-01-14 山东大学 一种GSK-3β抑制剂及其制备方法与应用

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1842332A (zh) * 2003-06-30 2006-10-04 Hif生物公司 化合物、组合物及方法

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3917469A1 (de) * 1989-05-30 1990-12-06 Bayer Ag Heterocyclylpyridine
DE4023488A1 (de) 1990-07-24 1992-01-30 Bayer Ag 1-(pyri(mi)dyl-(2)) -5-hydroxy-pyrazol-mikrobizide
US5750088A (en) * 1993-03-30 1998-05-12 The Dupont Merck Pharmaceutical Company Stable hydrazones linked to a peptide moiety as reagents for the preparation of radiopharmaceuticals
GB9704762D0 (en) 1997-03-07 1997-04-23 Zeneca Ltd Chemical process
KR20060110741A (ko) * 2003-06-30 2006-10-25 히프 바이오 인크 화합물, 조성물 및 방법
DE102005019712A1 (de) 2005-04-28 2006-11-09 Bayer Healthcare Ag Dipyridyl-dihydropyrazolone und ihre Verwendung
TW200808793A (en) * 2006-03-07 2008-02-16 Smithkline Beecham Corp Prolyl hydroxylase inhibitors
CA2666603C (en) * 2006-10-16 2013-08-06 Pfizer Products Inc. Therapeutic pyrazolyl thienopyridines and uses thereof for treating tgf.beta. mediated conditions
DE102006050516A1 (de) 2006-10-26 2008-04-30 Bayer Healthcare Ag Substituierte Dihydropyrazolone und ihre Verwendung
AU2008253311A1 (en) * 2007-05-18 2008-11-27 Bayer Schering Pharma Aktiengesellshaft Inhibitors of hypoxia inducible factor (HIF) useful for treating hyper-proliferative disorders and diseases associated with angiogenesis
ES2511917T3 (es) 2008-12-29 2014-10-23 Sanofi Derivados de 2-piridin-2-il-pirazol-3(2H)-ona, su preparación y su aplicación en terapéutica
DK2382205T3 (da) 2008-12-29 2014-07-28 Sanofi Sa 2-pyridin-2-yl-pyrazol-3(2h)-on-derivater, fremstilling deraf og terapeutisk anvendelse deraf som hif-aktivatorer

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1842332A (zh) * 2003-06-30 2006-10-04 Hif生物公司 化合物、组合物及方法

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