CN102060833A - 从黑果枸杞果实中提取花色苷的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种从黑果枸杞果实中提取花色苷的方法，该方法包括以下步骤：(1)将黑果枸杞果实原料用pH值为1～4的乙醇溶液浸提取1～30小时后，过滤，得到浸提液；(2)将所述步骤(1)所得的浸提液进行真空浓缩后，得到固形物浓度≥40％的浓缩液；(3)将所述步骤(2)所得的浓缩液采用大孔树脂吸附后，用乙醇水溶液洗脱，当洗脱液颜色变深时开始收集，则得到纯化的黑果枸杞果实花色苷提取液；(4)将所述步骤(3)所得的黑果枸杞果实花色苷提取液进行真空浓缩后，得到固形物浓度≥60％的浓缩液；该浓缩液经冷冻干燥后，即得黑果枸杞果实花色苷。本发明工艺简单，所制备的花色苷杂质少，质量优良，稳定性好。
Description
技术领域
本发明涉及一种从天然植物中提取花色苷的方法，尤其涉及从黑果枸杞果实中提取花色苷的方法。
背景技术
众所周知，制作食品和饮料品等往往需要添加色素，从而取得赏心悦目的良好效果，但是，现有技术中大量使用的是化学合成色素，长期使用会对人体产生不良影响，危害人体健康。因此，寻找和制备天然色素引起了人们的普遍关注。花色苷是人们最熟悉的水溶性天然色素，在自然界中广泛分布，构成了植物王国中绝大多数品种的蓝色、红色、紫色和黄色等。现代营养学研究发现，天然花色苷类物质有较强的防止活性氧危害和抗氧化作用，可消除机体代谢过程中产生的过多自由基，具有延缓衰老、预防各种疾病等功能，在食品、化妆品、医药领域有着巨大的应用潜力。
现有关于花色苷的制备方法主要是根据原料中花色苷的分布部位选择合适的试剂进行萃取。由于花色苷在高温下不稳定，所以其提取中的核心技术是花色苷的稳定性、溶剂选择、纯化方法以及干燥方式等问题，目的在于最大限度地保持花色苷的稳定性，提高花色苷的得率和纯度。
黑果枸杞为茄科枸杞属多年生灌木植物，具棘刺，味甘、性平，清心热，用于治疗心热病、心脏病、月经不调、停经等病症。黑果枸杞藏药称“旁玛”，因果实成熟后呈紫黑色，由此得名(见《四部医典》、《晶珠本草》等藏医药经典著作)，经测定色素为花色苷，甙元为红色的花色苷元，颜色鲜艳，呈紫红色。据研究黑果枸杞的果实色素含量高达387.9/100g(鲜果)，在不同pH值、不同加热时间、不同温度条件下，色素着色力强，稳定性好，而且加工工艺简单。对黑果枸杞果实中所含的蛋白氨基酸、游离氨基酸、无机元素、维生素C、B1、B2以及果肉中的总糖、总酸的分析测定表明：黑果枸杞果实中的总糖含量为6.9％，总酸含量为0.735％；含有人体必需的18种氨基酸，其中以天门冬氨基酸、谷氨酸.丙氨酸和脯氨酸的含量较高，而且多数呈游离状态，其中游离氨基酸约占氨基酸总量的50％，有利于人体直接吸收。同时果实所含的微量元素也很丰富，除常量元素Na、K、Mg、Ca、Fe之外，还含有一定量的微量元素Mn、Sr、Se、Zn、Cr、Cu等。由于微量元素对多种酶的活性和核酸、蛋白质的合成，机体免疫和细胞增殖等具有直接或间接的作用，可用于防癌治癌。综上所述黑果枸杞花色苷类色素具有较高的开发利用价值。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种杂质含量低、花色苷含量高的从黑果枸杞果实中提取花色苷的方法。
为解决上述问题，本发明所述的一种从黑果枸杞果实中提取花色苷的方法，包括以下步骤：
(1)将黑果枸杞果实原料用其质量的8～12倍、体积浓度为10％～100％的乙醇溶液浸提取1～30小时后，过滤，得到浸提液；所述乙醇溶液是指用质量浓度为2％的酸溶液调节至pH值为1～4的溶液；
(2)将所述步骤(1)所得的浸提液在真空度为0.07Mpa、温度为30～50℃进行真空浓缩后，得到固形物浓度≥40％的浓缩液；
(3)将所述步骤(2)所得的浓缩液采用大孔树脂吸附后，用400～800ml、质量浓度为60％～80％的乙醇水溶液洗脱，当洗脱液颜色变深时开始收集，则得到纯化的黑果枸杞果实花色苷提取液；
(4)将所述步骤(3)所得的黑果枸杞果实花色苷提取液在真空度为0.07Mpa、温度为30～50℃进行真空浓缩后，得到固形物浓度≥60％的浓缩液；该浓缩液经冷冻干燥后，即得黑果枸杞果实花色苷。
所述步骤(1)中的乙醇溶液的加入量为黑果枸杞果实原料质量的10倍，其体积浓度为50～95％。
所述步骤(1)中的酸溶液是指盐酸溶液、醋酸溶液或硫酸溶液中的任意一种。
所述步骤(3)中的大孔树脂为苯乙烯类树脂。
所述步骤(4)中的冷冻干燥的条件是指真空度为10～30Pa，温度为-25～-30℃，干燥时间为20～24小时。
本发明与现有技术相比具有以下优点：
1、由于本发明采用天然原料，即柴达木盆地野生状态下黑果枸杞果实作为原料，因此，成本低廉。
2、由于本发明采用醇提、真空浓缩的方式制备花色苷，因此，所获得的花色苷含量高，其杂质少，质量优良。
3、由于本发明在制备过程中只使用水和乙醇，不使用其它有机溶剂及有毒溶剂，因此，不但工艺简单，质量稳定，而且产品无污染，有机溶剂及重金属残留低。
4、本发明制备的黑果枸杞花色苷主要为牵牛花色素(Petunidin)，本发明的实施为规模化开发黑果枸杞资源提供了可靠的保证。
具体实施方式
实施例1一种从黑果枸杞果实中提取花色苷的方法，包括以下步骤：
(1)向100g黑果枸杞果实原料中加入800g、体积浓度为10％的乙醇溶液，浸提取1次，提取时间为1小时后，经80目的滤网过滤，得到浸提液。
其中乙醇溶液是指用质量浓度为2％的盐酸溶液调节至pH值为1的溶液。
(2)将步骤(1)所得的浸提液在真空度为0.07Mpa、温度为30～50℃进行真空浓缩后，得到固形物浓度≥40％的浓缩液。
(3)将步骤(2)所得的浓缩液采用大孔树脂吸附后，用800ml、质量浓度为60％的乙醇水溶液洗脱，当洗脱液颜色变深时开始收集，水洗至流出液无色，则得到纯化的黑果枸杞果实花色苷提取液；
其中大孔树脂为苯乙烯类树脂中的HPD100型大孔树脂。
(4)将步骤(3)所得的黑果枸杞果实花色苷提取液在真空度为0.07Mpa、温度为30～50℃进行真空浓缩后，得到固形物浓度≥60％的浓缩液；该浓缩液在真空度为10Pa，温度为-25℃的条件下进行冷冻干燥24小时后，即得4.8g黑果枸杞果实花色苷粉末，其纯度为16.2％。
实施例2一种从黑果枸杞果实中提取花色苷的方法，包括以下步骤：
(1)向100g黑果枸杞果实原料中加入1200g、体积浓度为100％的乙醇溶液，浸提取3次，提取时间为30小时后，经100目的滤网过滤，得到浸提液。
其中乙醇溶液是指用质量浓度为2％的醋酸溶液调节至pH值为3的溶液。
(2)将步骤(1)所得的浸提液在真空度为0.07Mpa、温度为30～50℃进行真空浓缩后，得到固形物浓度≥40％的浓缩液。
(3)将步骤(2)所得的浓缩液采用大孔树脂吸附后，用600ml、质量浓度为80％的乙醇水溶液洗脱，当洗脱液颜色变深时开始收集，水洗至流出液无色，则得到纯化的黑果枸杞果实花色苷提取液；
其中大孔树脂为苯乙烯类树脂中的NKA-II型大孔树脂。
(4)将步骤(3)所得的黑果枸杞果实花色苷提取液在真空度为0.07Mpa、温度为30～50℃进行真空浓缩后，得到固形物浓度≥60％的浓缩液；该浓缩液在真空度为30Pa，温度为-30℃的条件下进行冷冻干燥20小时后，即得2.7g黑果枸杞果实花色苷粉末，其纯度为11.2％。
实施例3一种从黑果枸杞果实中提取花色苷的方法，包括以下步骤：
(1)向100g黑果枸杞果实原料中加入1000g、体积浓度为50％的乙醇溶液，浸提取3次，提取时间为24小时后，经100目的滤网过滤，得到浸提液。
其中乙醇溶液是指用质量浓度为2％的硫酸溶液调节至pH值为3的溶液。
(2)将步骤(1)所得的浸提液在真空度为0.07Mpa、温度为30～50℃进行真空浓缩后，得到固形物浓度≥40％的浓缩液。
(3)将步骤(2)所得的浓缩液采用大孔树脂吸附后，用600ml、质量浓度为70％的乙醇水溶液洗脱，当洗脱液颜色变深时开始收集，水洗至流出液无色，则得到纯化的黑果枸杞果实花色苷提取液；
其中大孔树脂为苯乙烯类树脂中的D101型大孔树脂。
(4)将步骤(3)所得的黑果枸杞果实花色苷提取液在真空度为0.07Mpa、温度为30～50℃进行真空浓缩后，得到固形物浓度≥60％的浓缩液；该浓缩液在真空度为30Pa，温度为-28℃的条件下进行冷冻干燥22小时后，即得5.7g黑果枸杞果实花色苷粉末，其纯度为18.6％。
实施例4一种从黑果枸杞果实中提取花色苷的方法，包括以下步骤：
(1)向100g黑果枸杞果实原料中加入1000g、体积浓度为95％的乙醇溶液，浸提取2次，提取时间为20小时后，经100目的滤网过滤，得到浸提液。
其中乙醇溶液是指用质量浓度为2％的硫酸溶液调节至pH值为2的溶液。
(2)将步骤(1)所得的浸提液在真空度为0.07Mpa、温度为30～50℃进行真空浓缩后，得到固形物浓度≥40％的浓缩液。
(3)将步骤(2)所得的浓缩液采用大孔树脂吸附后，用400ml、质量浓度为70％的乙醇水溶液洗脱，当洗脱液颜色变深时开始收集，水洗至流出液无色，则得到纯化的黑果枸杞果实花色苷提取液；
其中大孔树脂为苯乙烯类树脂中的AB-8型大孔树脂。
(4)将步骤(3)所得的黑果枸杞果实花色苷提取液在真空度为0.07Mpa、温度为30～50℃进行真空浓缩后，得到固形物浓度≥60％的浓缩液；该浓缩液在真空度为15Pa，温度为-27℃的条件下进行冷冻干燥23小时后，即得2.4g黑果枸杞果实花色苷粉末，其纯度为10.7％。
实施例5一种从黑果枸杞果实中提取花色苷的方法，包括以下步骤：
(1)向100g黑果枸杞果实原料中加入1000g、体积浓度为75％的乙醇溶液，浸提取1次，提取时间为24小时后，经120目的滤网过滤，得到浸提液。
其中乙醇溶液是指用质量浓度为2％的硫酸溶液调节至pH值为3的溶液。
(2)将步骤(1)所得的浸提液在真空度为0.07Mpa、温度为30～50℃进行真空浓缩后，得到固形物浓度≥40％的浓缩液。
(3)将步骤(2)所得的浓缩液采用大孔树脂吸附后，用600ml、质量浓度为70％的乙醇水溶液洗脱，当洗脱液颜色变深时开始收集，水洗至流出液无色，则得到纯化的黑果枸杞果实花色苷提取液；
其中大孔树脂为苯乙烯类树脂中的X-5型大孔树脂。
(4)将步骤(3)所得的黑果枸杞果实花色苷提取液在真空度为0.07Mpa、温度为30～50℃进行真空浓缩后，得到固形物浓度≥60％的浓缩液；该浓缩液在真空度为25Pa，温度为-25℃的条件下进行冷冻干燥21小时后，即得6.2g黑果枸杞果实花色苷粉末，其纯度为19.8％。
实施例6一种从黑果枸杞果实中提取花色苷的方法，包括以下步骤：
(1)向100g黑果枸杞果实原料中加入900g、体积浓度为85％的乙醇溶液，浸提取1次，提取时间为24小时后，经120目的滤网过滤，得到浸提液。
其中乙醇溶液是指用质量浓度为2％的硫酸溶液调节至pH值为4的溶液。
(2)将步骤(1)所得的浸提液在真空度为0.07Mpa、温度为30～50℃进行真空浓缩后，得到固形物浓度≥40％的浓缩液。
(3)将步骤(2)所得的浓缩液采用大孔树脂吸附后，用500ml、质量浓度为75％的乙醇水溶液洗脱，当洗脱液颜色变深时开始收集，水洗至流出液无色，则得到纯化的黑果枸杞果实花色苷提取液；
其中大孔树脂为苯乙烯类树脂中的X-5型大孔树脂。
(4)将步骤(3)所得的黑果枸杞果实花色苷提取液在真空度为0.07Mpa、温度为30～50℃进行真空浓缩后，得到固形物浓度≥60％的浓缩液；该浓缩液在真空度为25Pa，温度为-25℃的条件下进行冷冻干燥21小时后，即得5.8g黑果枸杞果实花色苷粉末，其纯度为17.9％。
Claims (5)
1.一种从黑果枸杞果实中提取花色苷的方法，包括以下步骤：
(1)将黑果枸杞果实原料用其质量的8～12倍、体积浓度为10％～100％的乙醇溶液浸提取1～30小时后，过滤，得到浸提液；所述乙醇溶液是指用质量浓度为2％的酸溶液调节至pH值为1～4的溶液；
(2)将所述步骤(1)所得的浸提液在真空度为0.07Mpa、温度为30～50℃进行真空浓缩后，得到固形物浓度≥40％的浓缩液；
(3)将所述步骤(2)所得的浓缩液采用大孔树脂吸附后，用400～800ml、质量浓度为60％～80％的乙醇水溶液洗脱，当洗脱液颜色变深时开始收集，则得到纯化的黑果枸杞果实花色苷提取液；
(4)将所述步骤(3)所得的黑果枸杞果实花色苷提取液在真空度为0.07Mpa、温度为30～50℃进行真空浓缩后，得到固形物浓度≥60％的浓缩液；该浓缩液经冷冻干燥后，即得黑果枸杞果实花色苷。
2.如权利要求1所述的从黑果枸杞果实中提取花色苷的方法，其特征在于：所述步骤(1)中的乙醇溶液的加入量为黑果枸杞果实原料质量的10倍，其体积浓度为50～95％。
3.如权利要求1所述的从黑果枸杞果实中提取花色苷的方法，其特征在于：所述步骤(1)中的酸溶液是指盐酸溶液、醋酸溶液或硫酸溶液中的任意一种。
4.如权利要求1所述的从黑果枸杞果实中提取花色苷的方法，其特征在于：所述步骤(3)中的大孔树脂为苯乙烯类树脂。
5.如权利要求1所述的从黑果枸杞果实中提取花色苷的方法，其特征在于：所述步骤(4)中的冷冻干燥的条件是指真空度为10～30Pa，温度为-25～-30℃，干燥时间为20～24小时。
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