CN101575326A - 从老鹰茶中提取茶多酚的方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及从老鹰茶中提取茶多酚的方法。该方法工艺流程如下：老鹰茶→烘干粉碎，过60目筛→80％乙醇回流提取→调pH2，高速离心→上清液处理→聚酰胺吸附→洗脱→浓缩→冷冻真空干燥→茶多酚纯品。用80％乙醇对老鹰茶茶多酚进行粗提，提取率相对热水提取高；粗提液调pH值至2，经高速离心，使色素、咖啡因和大分子物质得到预分离；用去离子水调节上清液浓度，使得上样液中乙醇含量较低，易于后续80％乙醇对茶多酚的洗脱；聚酰胺对茶多酚有较强吸附，且成本低，易再生；80％乙醇作为主要洗脱剂，洗脱率可达97.2％，且安全无污染，回收方便。该工艺过程简单、茶多酚提取率高，且纯品中表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)含量高于普通绿茶，生产成本低，能耗少。

Description

从老鹰茶中提取茶多酚的方法

技术领域

本发明涉及从老鹰茶中提取茶多酚的方法。

背景技术

老鹰茶亦称“白茶”，是我国南方少数民族长期饮用的一种植物代用茶，在安徽皖南山区(宁国)资源丰富，民间饮用历史悠久。老鹰茶是以樟科木姜子属植物豹皮樟(Litseacoreana Levl.Var.Lanuginose)的嫩梢和叶片为原料，以简便的工艺(蒸汽杀青或沸水烫漂杀青后晒干或烤干)制成的饮品，具有解毒消肿、明目益思、解表防暑等功效，且无毒副作用，为药食同源植物。茶多酚不仅是一种新型的天然抗氧化剂，还具有明显的抗衰老、消除人体过剩的自由基，去脂减肥等药理功能，在食品加工、医药、日用化工等领域具有重要的应用。茶多酚的提取与应用研究受到国内外广泛关注。中国专利授权公告号CN101099523公开了一种从老鹰茶中提取茶多酚的方法，工艺的基本流程为：老鹰茶→热水提取→粗滤→离心→大孔树脂吸附→洗脱→纳滤→回收溶剂→冷冻干燥。该工艺过程虽简单，但热水粗提，茶多酚得率不高(低于20％)；且粗滤及纳滤过程所用到的滤膜成本较高，不易回收。

发明内容

为了解决热水粗提老鹰茶茶多酚得率不高、粗滤和纳滤过程耗用成本较高的难题，本发明提供一种采用80％乙醇回流煮提并结合聚酰胺层析法从老鹰茶中提取茶多酚的方法。

本发明从老鹰茶中提取茶多酚的具体操作方法如下：

(1)、老鹰茶粉末制备：

将老鹰茶烘干，粉碎，过60目筛得到老鹰茶粉末；

(2)、老鹰茶茶多酚回流粗提：

在老鹰茶粉末中加入提取溶剂80％乙醇，温度100℃，回流三次提取，并抽滤；料液比分别为1∶20，1∶10，1∶10，提取时间分别为30min，20min，10min；混合三次滤液即为粗提液；

(3)、离心处理：

调节粗提液的pH值至2，12000r/min、10min条件离心得到上清液；

(4)、上清液处理：

用去离子水将上清液浓度调到2mg/mL，用稀盐酸将pH调至2，得到上样液；

(5)、聚酰胺树脂吸附：

1)聚酰胺预处理：称取10～20g聚酰胺置于150～200ml的95％乙醇中，温度温度100℃，回流煮沸0.5h，抽滤，重复三次，得到预处理聚酰胺；

2)聚酰胺树脂制备：将预处理聚酰胺用去离子水清洗三次，抽滤，称取适量抽干的聚酰胺，加适量去离子水抽真空处理4h，得到聚酰胺树脂；

3)聚酰胺树脂吸附：

将聚酰胺树脂装入Φ16.0mm×60.0cm的层析柱中，柱高与直径比为22，用去离子水洗涤0.5h，加入上样液1.5柱体积，待溶液流至树脂床表面，静置1h，使吸附达到平衡，得到吸附有茶多酚的聚酰胺树脂柱；

(6)、洗脱：

将吸附有上样液的聚酰胺树脂柱在常温下，依次用去离子水100ml和80％乙醇800ml-900ml分别洗脱，洗脱液流速为6ml/min，待流出液经酒石酸亚铁比色法检测为无颜色反应时，停止洗脱，去离子水中含有的少量咖啡因，弃去，收集80％乙醇洗脱部分即为洗脱液；

(7)、浓缩洗脱液：

用旋转蒸发仪对洗脱液进行浓缩，水浴锅温度70-80℃，得到的浓缩液含茶多酚为90％以上。

上述步骤(5)中聚酰胺树脂吸附为静态吸附，具体操作为取5g干聚酰胺树脂置于5 00ml三角烧瓶中，向其中加入125ml上样液，25℃，100r/min，吸附1h，抽滤，得到干聚酰胺和吸附液，弃去吸附液，干聚酰胺用于下一步骤的静态洗脱。

上述步骤(6)中洗脱为静态洗脱，具体操作为先向装有上述干聚酰胺的三角烧瓶中加125ml去离子水，25℃，100r/min，对聚酰胺进行震荡洗涤，抽滤，弃去水洗部分，重复操作两次，得到抽干聚酰胺；然后向其中加入80％乙醇125ml，25℃，100r/min，解吸4h，抽滤，收集滤液，抽干聚酰胺按上述同样操作，解吸3～4次，待滤液经酒石酸亚铁比色法(GB/T8313-2002)检测为无颜色反应时，停止洗脱，收集滤液即为洗脱液。

本发明运用80％乙醇对老鹰茶茶多酚进行回流煮提，茶多酚粗提率达25％以上，茶多酚得率显著高于热水提取；聚酰胺对茶多酚具有良好的吸附效果，吸附率可达到80％以上，且成本较低，再生容易；80％乙醇作为洗脱剂对茶多酚具有较好的洗脱效果，洗脱率可达到97.2％，且回收方便，对环境无污染；利用本发明制得的茶多酚提取率达到15％以上，纯度达到85％以上，且表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)含量超过60％。

附图说明

图1为本发明工艺流程图。

具体实施方式

实施例1：

参见图1，从老鹰茶中提取茶多酚的操作步骤如下：

1、老鹰茶粉末制备

原料为宁国老鹰茶。感官指标：色香味正常，无霉变；理化指标：茶多酚含量≥16％，水分≤8％；卫生指标：农药残留≤10mg/kg，重金属≤20mg/kg。将宁国老鹰茶60℃烘至恒重，粉碎机粉碎，过60目筛得到老鹰茶粉末。

2、老鹰茶茶多酚回流粗提

称取10g老鹰茶粉末，加80％乙醇200ml，100℃回流煮提30min，抽滤，向滤渣中加入80％乙醇100ml，100℃回流煮提20min，抽滤，再向滤渣中加入80％乙醇100ml，100℃回流煮提10min，抽滤，滤渣弃去，收集合并三次滤液即为粗提液。茶多酚粗提率为31.46％。

3、离心及上清液处理

用稀盐酸将粗提液pH值调至2，在12000r/min条件下离心10min，得到澄清的上清液。该上清液中茶多酚得率为93.6％；用去离子水将上清液浓度稀释到2mg/ml，并用稀盐酸调pH值至2，得到上样液。

4、聚酰胺树脂动态吸附

1)聚酰胺预处理：称取20g聚酰胺置于200ml的95％优质乙醇中100℃回流煮沸0.5h，减压抽滤，所得聚酰胺按上述同样操作，重复进行三次得到预处理聚酰胺；

2)聚酰胺树脂制备：将预处理聚酰胺用去离子水清洗三次，抽滤，称取17g抽干的聚酰胺，加200ml去离子水进行抽真空处理4h，得到聚酰胺树脂；

3)聚酰胺树脂动态吸附：将聚酰胺树脂装入Φ16.0mm×60.0cm的层析柱中，柱高与直径比为22，用去离子水洗涤0.5h，加入上样液1.5BV(BV代表柱体积)，待溶液流至树脂床表面后，静置1h，使吸附达到平衡，得到吸附有茶多酚的聚酰胺树脂柱。

5、动态洗脱

将吸附有茶多酚的聚酰胺树脂柱在常温下，依次用100ml去离子水和80％乙醇(约800ml)分别洗脱，洗脱液流速为6ml/min，待流出液经酒石酸亚铁比色法(GB/T8313-2002)检测为无颜色反应时，停止洗脱，去离子水中含少量咖啡因，弃去，收集80％乙醇洗脱部分即为洗脱液。80％乙醇作为洗脱剂，洗脱率达到97.2％。洗脱率(％)＝洗脱液中茶多酚的质量(mg)/上样液中茶多酚质量(mg)×100％。

6、回收溶剂

用旋转蒸发仪对洗脱液进行浓缩，水浴锅温度70-80℃，得到的浓缩液含茶多酚为95.5％。

7、冷冻真空干燥

将浓缩液经冷冻干燥得茶多酚。其工艺条件为：预冻-35℃～-4 0℃，在升温干燥过程中-40℃～-15℃升温干燥15～20h，在10～15℃再干燥8～10h，真空度＞0.1mmHg。

8、包装

将冷冻干燥所得的茶多酚经混合、过筛、品简合格后，按包装要求包装得茶多酚成品。所得产品呈淡黄色，茶多酚纯度为92.8％，表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)含量为61.07％，茶多酚提取率为18.06％。

实施例2：

1、老鹰茶粉末制备

与实施例1中步骤1操作相同。

2、老鹰茶茶多酚回流粗提

称取5g老鹰茶粉末，加80％乙醇100ml，100℃回流煮提30min，抽滤，向滤渣中再加入80％乙醇50ml，100℃回流煮提20min，抽滤，再向滤渣中加入80％乙醇50ml，100℃回流煮提10min，抽滤，滤渣弃去，收集合并三次滤液即为粗提液。茶多酚粗提率为28.83％。

3、离心及上清液处理

用稀盐酸将粗提液pH值调至2，在12000r/min条件下离心10min，得到澄清的上清液。该上清液中茶多酚得率为92.8％；用去离子水将上清液浓度稀释到2mg/ml，并用稀盐酸调pH值至2，得到上样液。

4、聚酰胺树脂静态吸附：

1)聚酰胺预处理：称取10g聚酰胺置于150ml的95％优质乙醇中100℃回流煮沸0.5h，减压抽滤，重复进行三次得到预处理聚酰胺；

得到预处理聚酰胺；

2)聚酰胺树脂制备：将预处理聚酰胺用去离子水清洗三次，抽滤，得到干聚酰胺树脂；

3)聚酰胺树脂静态吸附：称取5g干聚酰胺树脂置于500ml三角烧瓶中，向其中加入125ml上样液，盖上密封膜，25℃，100r/min，吸附1h，抽滤，得到干聚酰胺和吸附液，对吸附液中的茶多酚含量进行测定，得到吸附率为82.80％，弃去吸附液，干聚酰胺用于下一步骤的静态洗脱。吸附率(％)＝[上样液中茶多酚质量(mg)-吸附液中茶多酚质量(mg)]/上样液中茶多酚质量(mg)×100％；

5、静态洗脱

先向装有干聚酰胺的三角烧瓶中加125ml去离子水，盖上密封膜，25℃，100r/min，对聚酰胺进行震荡洗涤，抽滤，弃去水洗部分，重复操作两次，得到抽干聚酰胺；然后向其中加入80％乙醇125ml，盖上密封膜，25℃，100r/min，解吸4h，抽滤，滤液收集，抽干聚酰胺按上述同样操作，解吸3～4次，待滤液经酒石酸亚铁比色法(GB/T8313-2002)检测为无颜色反应时，停止洗脱，收集滤液即为洗脱液。洗脱率达到95.4％。洗脱率(％)＝洗脱液中茶多酚的质量(mg)/上样液中茶多酚质量(mg)×100％。

6、回收溶剂

用旋转蒸发仪对洗脱液进行浓缩，水浴锅温度70-80℃，得到的浓缩液含茶多酚为94.08％。

7、冷冻真空干燥及包装过程与实施例1操作相同，所得产品呈淡黄色，茶多酚纯度为88.78％，表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)含量为60.05％，茶多酚提取率为17.04％。

Claims (3)

1、从老鹰茶中提取茶多酚的方法，其特征在于包括以下操作步骤：

(1)、老鹰茶粉末制备：

将老鹰茶烘干，粉碎，过60目筛得到老鹰茶粉末；

(2)、老鹰茶茶多酚回流粗提：

在老鹰茶粉末中加入提取溶剂80％乙醇，温度100℃，回流三次提取，并抽滤；料液比分别为1∶20，1∶10，1∶10，提取时间分别为30min，20min，10min；混合三次滤液即为粗提液；

(3)、离心处理：

调节粗提液的pH值至2，12000r/min、10min条件离心得到上清液；

(4)、上清液处理：

用去离子水将上清液浓度调到2mg/mL，用稀盐酸将pH调至2，得到上样液；

(5)、聚酰胺树脂吸附：

1)聚酰胺预处理：称取10～20g聚酰胺置于150～200ml的95％乙醇中，温度温度100℃，回流煮沸0.5h，抽滤，重复三次，得到预处理聚酰胺；

2)聚酰胺树脂制备：将预处理聚酰胺用去离子水清洗三次，抽滤，称取适量抽干的聚酰胺，加适量去离子水抽真空处理4h，得到聚酰胺树脂；

3)聚酰胺树脂吸附：

将聚酰胺树脂装入Φ16.0mm×60.0cm的层析柱中，柱高与直径比为22，用去离子水洗涤0.5h，加入上样液1.5柱体积，待溶液流至树脂床表面，静置1h，使吸附达到平衡，得到吸附有茶多酚的聚酰胺树脂柱；

(6)、洗脱：

将吸附有上样液的聚酰胺树脂柱在常温下，依次用去离子水100ml和80％乙醇800ml-900ml分别洗脱，洗脱液流速为6ml/min，待流出液经酒石酸亚铁比色法检测为无颜色反应时，停止洗脱，去离子水中含有的少量咖啡因，弃去，收集80％乙醇洗脱部分即为洗脱液；

(7)、浓缩洗脱液：

用旋转蒸发仪对洗脱液进行浓缩，水浴锅温度70-80℃，得到的浓缩液含茶多酚为90％以上。

2、根据权利要求1所述的从老鹰茶中提取茶多酚的方法，其特征在于：所述步骤(5)中聚酰胺树脂吸附为静态吸附，具体操作为取5g干聚酰胺树脂置于500ml三角烧瓶中，向其中加入125ml上样液，25℃，100r/min，吸附1h，抽滤，得到干聚酰胺和吸附液，弃去吸附液，干聚酰胺用于下一步骤的静态洗脱。

3、根据权利要求1所述的从老鹰茶中提取茶多酚的方法，其特征在于：所述步骤(6)中洗脱为静态洗脱，具体操作为先向装有上述干聚酰胺的三角烧瓶中加125ml去离子水，25℃，100r/min，对聚酰胺进行震荡洗涤，抽滤，弃去水洗部分，重复操作两次，得到抽干聚酰胺；然后向其中加入80％乙醇125ml，25℃，100r/min，解吸4h，抽滤，收集滤液，抽干聚酰胺按上述同样操作，解吸3～4次，待滤液经酒石酸亚铁比色法(GB/T8313-2002)检测为无颜色反应时，停止洗脱，收集滤液即为洗脱液。