CN103385915A - 一种抗氧化功能的化香果提取物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种抗氧化功能的化香果提取物及制备方法。使用自然干燥后的化香果为原料,经过原料粉碎,加纯水提取得粗提液;粗提液低温沉降分离,清液再经过大孔树脂吸附分离得到提纯液;粗提液和提纯液分别浓缩、干燥等步骤可以得到不同多酚含量的抗氧化功能的化香果提取物,以满足不同的要求。本发明制备的化香果提取物具有良好的水溶性和极佳的抗氧化活性,制备方法简单易行,易于实现产业化,从而为化香果的开发利用奠定了基础。
Description
技术领域
本发明涉及一种植物活性物质的提取,特别涉及一种从化香果提取天然抗氧化活性物质化香果提取物和制备方法。
背景技术
化香果是胡桃科植物化香树(Platycarya strobilacea Sieb. et Zucc.)的干燥果序,化香树在华东、华中、华南、西南等地区有广阔分布。化香果味辛,性温,具有清热解毒、活血化瘀、清肿排脓、通窍止痛的神奇功效,民间用其汤剂治疗鼻炎、鼻窦炎,效果甚佳,目前市场上已有以化香果为主药的复方制剂用于治疗急、慢性鼻窦炎、鼻炎,取得较好疗效。
已有报道表明化香果中含有丰富的多酚类化合物,其主要成分为鞣花单宁,而植物多酚具有多种生物活性,如抗氧化、抑菌、抗病毒、抗肿瘤和抗癌变、抗心脑血管疾病、护肝益肾等药用活性,广泛应用于制药、食品、制革以及化妆品等行业。由于用于治疗鼻炎的的化香果用量有限,大部分的化香果原料没有被利用起来,因此利用化香果这一可再生生物质资源制备高附加值的天然抗氧化活性物质,对化香果的开发利用具有重要意义。
发明内容
本发明的目的在于提供一种具有抗氧化功能的化香果提取物和制备方法。
本发明的化香果提取物,经如下步骤得到:
1)原料预处理:将新鲜的化香树果序原料去除杂物、霉变物,再晾干,用植物粉碎机粉碎得化香果物料备用,粉碎机的筛孔直径为2~4 mm;
2)提取:以水为溶剂,将粉碎好的化香果物料浸入水中,加温提取过滤多次,合并滤液得粗提取液;
3)提纯:将粗提取液冷却沉降分离,上清液经大孔树脂吸附分离,得到提取物提纯液;
4) 干燥:步骤2)和步骤3)的提取液经真空浓缩和干燥,即得粉状抗氧化功能的化香果提取物。
本发明中,所述提取条件是常规提取,提取料液比为1g:(5~20) mL,其中化香果物料以质量计算,水溶液以体积计算。提取温度为50~100℃,提取时间60~150 min,提取次数2~4次。
进一步地,所述提纯过程中,将提取液(提取液可以先真空浓缩至固含量质量百分比4~10%)降温至1~7℃下静置24~48 h,分离出清液,沉淀物弃去;将上述的清液采用D101或AB-8大孔吸附树脂吸附,上柱液流速为1.2~2.5 BV/h,吸附后用纯净水洗柱,再用体积浓度为60~80%的乙醇水溶液,以1.2~2.5 BV/h的流速洗脱,收集洗脱液;洗脱液常压蒸馏蒸出乙醇,得提取物提纯溶液。
上述真空浓缩条件为真空度-(0.09~0.1)MPa,加热温度55~65℃;所述干燥为真空冷冻干燥方法。
本发明的主要优点在于:本发明制备的化香果提取物与市售的常用合成抗氧化剂相比,具有更强的抗氧化、清除自由基的生物活性功能;本发明以水为提取溶剂,制备方法简单易行,成本低,易于实现产业化,为化香果的开发利用奠定基础。
附图说明
图1为化香果提取物制备流程。
图2为化香果提取物对DPPH·自由基的清除作用。
具体实施方式
以下结合附图和实施例以及试验数据对本发明做进一步说明。
实施例1:
1. 原料预处理:将新鲜的化香树果序原料去除杂物、霉变物,再晾干,用植物粉碎机粉碎得化香果物料备用;粉碎机的筛孔直径为2 mm;
2. 将经净化、风干和粉碎的化香果物料100 g和浸提水2000 mL置于烧杯内,于水浴加热,控制温度在80℃,提取时间为60 min,提取2次,过滤去渣,合并滤液,得粗提取液3840 mL;
3. 将提取液在真空度-0.095MPa,温度55℃下真空浓缩,再经过真空冷冻干燥,获得化香果粗提取物32.7 g。
实施例2:
1. 将按实施例1方法预处理的化香果150g和浸提水2250 mL置于水浴中进行提取。控制温度在70℃,提取时间为30 min。提取2次,过滤去渣,合并滤液,得到提取液4230 mL;
2. 提取液浓缩,冷至室温,放入5℃冰箱中静置24h后分出清液1250 mL;
3. 将清液以1.7 BV/h的流速加至已经过预处理的D101型大孔吸附树脂分离柱,而后用2.0BV/h的纯净水洗柱,再用70%的乙醇水溶液以2.2BV/h的流速洗脱,得洗脱液;洗脱液常压蒸馏蒸出乙醇,得提取物提纯溶液;
4. 将提取物提纯溶液在真空度-0.1MPa,加热温度60℃下真空浓缩,再经过真空冷冻干燥,获得化香果纯化提取物36.3 g。
下面结合实验数据对本发明化香果提取物的抗氧化活性作进一步说明。
验证实验1:化香果提取物的抗氧化物质含量的测定
以Folin酚还原法分别对实施例1和实施例2中的化香果两种提取物进行抗氧化物质天然多酚含量测定(以没食子酸作为含量衡量标准),结果显示粗提取物和纯化提取物的含量分别为67.1%、80.1 %(干基计)。
验证实验2:化香果提取物对DPPH·自由基的清除能力测定
以二苯基-苦基-肼基自由基(DPPH·,美国Sigma公司)为标准物,用分光光度法测定试样对DPPH·的清除效率。DPPH·在有机溶剂中是一种稳定的自由基,其乙醇溶液呈紫色,在可见光区最大吸收峰波长为517 nm。当DPPH·溶液中加入自由基清除剂时,溶液颜色变浅,吸光度值变小。吸光度变小的程度与自由基被清除的程度呈线性关系。因此可用自由基的清除情况来评价清除剂的抗氧化能力。通过测定系列浓度的产物溶液对DPPH·自由基清除率,绘制DPPH·自由基清除率对系列质量浓度的产物溶液的曲线,由曲线读取或用方程计算出DPPH·自由基清除率为50%时的抗氧化剂的质量浓度IC50。
检验结果表明,化香果提取物对DPPH·自由基的清除率作用于其质量浓度成正相关关系,化香果提取物质量浓度越高,其自由基清除率越高,如图2所示,化香果纯化提取物的清除活性高于粗提取物,并且都远高于常用的抗氧化剂BHA(丁基羟基茴香醚)。纯化提取物的IC50为4.52 mg/L,粗提取物的IC50为7.48 mg/L,而BHA的IC50为36.91 mg/L,表明化香果提取物对DPPH·自由基的抑制能力大大强于BHA,具有极强的抗氧化活性。
验证实验3:化香果提取物对Fe3+ 还原抗氧化能力测定
采用Fe3+还原抗氧化能力FRAP—紫外分光光度法检测。该方法是基于氧化还原反应的比色法。在较低的pH值条件下Fe3+–三吡啶三吖嗪(TPTZ)可被样品中还原物质还原为Fe2+形式,呈现出蓝色,在波长593 nm处具有最大光吸收,并且其吸光度的变化与还原物质的含量呈比例关系,根据吸光度大小计算样品抗氧化活性的强弱。结果表明在相同试验条件下化香果纯化提取物和粗提取物的FRAP值分别为3.47 mmol/L和3.05 mmol/L ,均大于BHA的2.20 mmol/L,证实化香果提取物的抗氧化能力强于BHA。
Claims (8)
1.一种抗氧化功能的化香果提取物,其特征在于其经如下步骤得到:
1)原料预处理:将新鲜的化香树果序原料去除杂物、霉变物,再晾干,用植物粉碎机粉碎得化香果物料备用;
2)提取:以水为溶剂,将粉碎好的化香果物料浸入水中,加温提取过滤多次,合并滤液得粗提取液;
3)提纯:将粗提取液冷却沉降分离,上清液经大孔树脂吸附分离,得到提取物提纯液;
4) 干燥:步骤2)和步骤3)的提取液经真空浓缩和干燥,即得粉状抗氧化功能的化香果提取物。
2.根据权利要求1所述的一种抗氧化功能的化香果提取物,其特征在于:步骤1)中粉碎机的筛孔直径为2~4 mm。
3.根据权利要求1所述的一种抗氧化功能的化香果提取物,其特征在于:步骤2)所述浸提条件是常规提取,浸提料液比为1g:(5~20) mL,其中化香果物料以质量计算,水溶液以体积计算;提取温度为50~100℃,提取时间60~150 min,提取次数2~4次。
4.根据权利要求1所述的一种抗氧化功能的化香果提取物,其特征在于:步骤3)所述提纯中冷却沉降分离步骤为:将提取液降温至1~7℃下静置24~48 h,分离出清液,沉淀物弃去;所述的提取液可以先真空浓缩至固含量质量百分比4%~10%。
5.根据权利要求1所述的一种抗氧化功能的化香果提取物,其特征在于:步骤3)所述提纯中大孔树脂吸附分离步骤为:将权利要求4中的清液,采用大孔吸附树脂吸附,上柱液流速为1.2~2.5 BV/h,吸附后用纯净水洗柱,再用体积浓度为60~80%的乙醇水溶液,以1.2~2.5 BV/h的流速洗脱,收集洗脱液;洗脱液常压蒸馏蒸出乙醇,得提取物提纯溶液。
6.根据权利要求1所述的一种抗氧化功能的化香果提取物,其特征在于:步骤3)和步骤4)所述真空浓缩条件为真空度-(0.09~0.1)MPa,加热温度55~65℃。
7.根据权利要求1所述的一种抗氧化功能的化香果提取物,其特征在于:步骤4)所述干燥为真空冷冻干燥方法。
8.根据权利要求5所述的制备抗氧化功能的化香果提取物的方法,其特征在于:所述的大孔吸附树脂是指D101或AB-8树脂。
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