CN102920830A - 一种高效提取龙眼核中多酚的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种高效提取龙眼核中多酚的方法,该方法包括以下步骤:(1)龙眼核去皮、粉碎;(2)乙醇溶液回流浸提、过滤;(3)乙酸乙酯萃取;(4)硅胶柱层析分离;(5)真空浓缩、干燥。本发明的龙眼核多酚提取方法中,龙眼核通过乙醇溶液回流浸提,过滤后,滤液用乙酸乙酯进行萃取,乙酸乙酯萃取部上硅胶柱层析,采用石油醚-氯仿梯度洗脱,有效地纯化了龙眼核多酚。本发明采用真空浓缩的方法对洗脱液进行浓缩,避免了常压浓缩条件下,高温对多酚活性的影响。本发明还采用微波真空干燥,不仅提高了干燥的速度,而且有效地保持了龙眼核多酚的品质和生物活性,最后得到的龙眼核粉末多酚含量达98%以上。
Description
技术领域
本发明涉及天然产物的提取方法,具体涉及一种高效提取龙眼核中多酚的方法。
背景技术
多酚是植物产生的次级代谢产物。根据其化学结构,多酚可分为黄酮和非黄酮两大类。
黄酮类化合物的基本结构特征是2-苯基苯并[α]-吡喃或黄烷核,包括两个苯环(A和B)通过杂环吡喃环相连(C)。根据中央三碳链的氧化程度、B-环连接位置以及三碳链是否构成环状等特点,黄酮类化合物可分为黄酮、黄酮醇、二氢黄酮、花色素、黄烷醇以及异黄酮等。
非黄酮类多酚化合物主要有酚酸,它可进一步分为苯甲酸衍生物,如没食子酸、原儿茶酸以及肉桂酸衍生物。
此外,多酚在植物组织中主要以糖苷或与有机酸连在一起或与高分子聚合物连在一起的形式存在。
天然活性多酚具有特殊生物活性,在医疗、食品、日用化学品等方面具有重要应用价值。近年来,研究发现多酚能预防一些慢性疾病,如心血管疾病、癌症、骨质疏松症、糖尿病、神经退行性疾病。这些作用归功于它的抗氧化活性、自由基清除能力、螯合金属离子性质以及抑制不同酶活性的能力。近来又发现多酚参与细胞信号转导途径并能与细胞受体相互作用。此外,植物性食品和药用植物中多酚类物质对不同微生物的抗菌活性也得到广泛的研究。此外,多酚还具有预防高血压、抗血栓、抗胃溃疡、抗病毒等生物活性及皮肤保健及美容等功能。
干燥龙眼核呈类球形,直径0.8-1.2cm,表皮红褐色,有光泽。一端有长椭圆形灰白色种脐,质坚硬。剖开后有两片子叶,灰褐色,质亦坚实。气微,味淡而微苦。有关龙眼核的研究报道不多,集中在龙眼核淀粉颗粒的性质、利用龙眼核水解液发酵生产单细胞蛋白、龙眼核棕色素的提取及稳定性。目前,龙眼核作为龙眼加工的副产物,没有得到很好的综合利用,大部分当作废弃物处理掉了,造成了资源的浪费。
发明内容
本发明的目的在于提供一种高效提取龙眼核中多酚的方法,该方法具有操作方便,提取效率高,生产成本低等优点;该方法对于扩大龙眼核的利用,提高其附加值有重要意义,不仅有利于龙眼核资源的充分利用,而且有利于促进龙眼种植业的发展。
本发明的目的通过下述技术方案实现:
一种高效提取龙眼核中多酚的方法,包括以下步骤:
(1)龙眼核去皮、粉碎
将龙眼核烘干,去皮;然后将龙眼核粉碎得到龙眼核粉;
(2)乙醇溶液回流浸提、过滤
往龙眼核粉中加入3-10倍于龙眼核粉质量的乙醇溶液,50-90℃下回流提取3-6h;将得到的浸提液过滤,收集滤液;
(3)乙酸乙酯萃取
滤液用乙酸乙酯进行萃取,收集乙酸乙酯部分;
(4)硅胶柱层析分离
乙酸乙酯萃取部上硅胶柱层析,多酚与硅胶吸附,非多酚成分被除去;然后采用石油醚-氯仿梯度洗脱,收集洗脱液;
(5)真空浓缩、干燥
将洗脱液浓缩至固形物含量达60%(质量体积比),然后干燥,得到龙眼核多酚粉末。
步骤(1)所述的烘干,是在60℃下加热烘干或晒干,使龙眼核水分含量低于5%(质量体积比);
步骤(1)所述的龙眼核粉能过80目筛;
步骤(2)中优选加入3倍于龙眼核粉质量的乙醇溶液;
步骤(2)所述的乙醇溶液是体积比为80-95%的乙醇水溶液;
步骤(2)中优选在60℃下回流提取;
步骤(4)所述的硅胶粒度优选80~200目;
步骤(4)所述的石油醚-氯仿梯度洗脱,石油醚与氯仿的起始体积比为9:1,最终过渡到用氯仿洗脱;
步骤(4)所述的洗脱,洗脱速度为1mL/min,洗至洗脱液无色为止;
步骤(5)所述的浓缩是在真空度65-75kPa、温度55-60℃下加热浓缩;
步骤(5)所述的干燥是在微波真空干燥机中进行,微波功率800W、真空度0.06Mpa,干燥至龙眼核多酚粉末水分含量低于5%(质量体积比)。
本发明的原理是:龙眼核多酚通过乙酸乙酯萃取后,纯度得到了一定程度的提高,但仍然含有一些非多酚成分,需要进一步的纯化。硅胶(Silica gel;Silica)是一种高活性吸附材料,不溶于水和任何溶剂,无毒无味,化学性质稳定,除强碱、氢氟酸外不与任何物质发生反应。同时,硅胶还含有微孔结构。硅胶的化学组份和物理结构,决定了它具有许多其他同类材料难以取代的特点,诸如吸附性能高、热稳定性好、化学性质稳定、有较高的机械强度等,因此,选择硅胶柱层析,能有效地吸附龙眼核多酚成分,同时,龙眼核多酚的组成含有一些极性不同成分,需要用不同的极性溶剂对吸附有多酚的硅胶柱进行洗脱,石油醚-氯仿梯度浓度能够形成极性梯度,能够有效地从硅胶柱上将龙眼核多酚洗脱出来,通过该方法分离、纯化,使龙眼核多酚含量达到98%以上,另外,石油醚和氯仿是易挥发成分,在后续的浓缩过程中,能够有效地去除,不会对龙眼核多酚造成污染,由上述可知,本发明的方法是一种高效的提取龙眼核多酚的方法。
本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果:
(1)本发明的龙眼核多酚提取方法,采用60℃下回流浸提,在提取率不变的情况下,提取速度提高了40-60%。
(2)本发明的龙眼核多酚提取方法,采用3倍于龙眼核粉质量的80-95%的乙醇溶液在60℃下回流浸提,在提取率不变的情况下,减少乙醇用量40-300%。
(3)本发明的龙眼核多酚提取方法中,龙眼核通过乙醇溶液回流浸提,过滤后,滤液采用乙酸乙酯萃取,乙酸乙酯萃取部上硅胶柱层析,采用石油醚-氯仿梯度洗脱,有效地纯化了龙眼核多酚。
(4)本发明的龙眼核多酚提取方法中,采用真空浓缩的方法对洗脱液进行浓缩,避免了常压浓缩条件下,高温对多酚活性的影响。
(5)本发明的龙眼核多酚提取方法中,采用微波真空干燥,不仅提高了干燥的速度,而且有效地保持了龙眼核多酚的品质和生物活性。
(6)本发明方法制得的龙眼核多酚具有抗氧化活性、自由基清除能力、螯合金属离子性质以及抑制不同酶活性的能力,同时还具有预防高血压、抗血栓、抗胃溃疡、抗病毒、抗菌等生物活性及皮肤保健、美容等功能。龙眼核多酚可应用于保健品、食品和化妆品等行业,是一种具有良好市场潜力的多酚产品。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述,但本发明的实施方式不限于此。
实施例1
一种高效提取龙眼核中多酚的方法,包括以下步骤:
(1)龙眼核去皮
将龙眼核60℃烘干或晒干,控制水分含量低于5%(质量体积比),利用擦皮机去掉龙眼核皮。
(2)粉碎
利用植物粉碎机将去皮龙眼核进行粉碎,控制龙眼核粉的粒度过80目筛。
(3)乙醇溶液回流浸提
龙眼核粉加3倍于龙眼核粉质量的80%(体积比)的乙醇溶液,在60℃条件下,回流提取3h。
(4)过滤
利用真空抽滤装置对浸提液进行过滤,收集滤液。
(5)乙酸乙酯萃取
滤液用乙酸乙酯进行萃取,收集乙酸乙酯部分。
(6)硅胶柱层析分离
乙酸乙酯萃取部上80目硅胶柱层析,多酚与硅胶吸附,非多酚成分被除去;采用石油醚-氯仿梯度洗脱,收集洗脱液。
所述的石油醚-氯仿梯度洗脱,石油醚与氯仿的起始体积比为9:1,最终过渡到用氯仿洗脱;
(7)真空浓缩
洗脱液在真空度为65kPa、浓缩温度55℃条件下进行浓缩至固形物含量达60%(质量体积比)。
(8)微波真空干燥
将浓缩后的浆状液体置于托盘中,放入微波真空干燥机中,设定微波功率800W、真空度0.06Mpa,干燥至龙眼核多酚粉末水分含量低于5%(质量体积比),收集,即得龙眼核多酚粉末,利用酒石酸亚铁比色法测得龙眼核多酚粉末中多酚含量达98%。
实施例2
一种高效提取龙眼核中多酚的方法,包括以下步骤:
(1)龙眼核去皮
将龙眼核60℃烘干或晒干,控制水分含量低于5%(质量体积比),利用摩擦的方法去掉龙眼核皮。
(2)粉碎
利用植物粉碎机将去皮龙眼核进行粉碎,控制龙眼核粉的粒度过80目筛。
(3)乙醇溶液回流浸提
龙眼核粉加5倍于龙眼核粉质量的85%(体积比)的乙醇溶液,在60℃条件下,回流提取4h。
(4)过滤
利用真空抽滤装置对浸提液进行过滤,收集滤液。
(5)乙酸乙酯萃取
滤液用乙酸乙酯进行萃取,收集乙酸乙酯部分。
(6)硅胶柱层析分离
乙酸乙酯萃取部上80目硅胶柱层析,多酚与硅胶吸附,非多酚成分被除去;采用石油醚-氯仿梯度洗脱,收集洗脱液。
所述的石油醚-氯仿梯度洗脱,石油醚与氯仿的起始体积比为9:1,最终过渡到用氯仿洗脱;
(7)真空浓缩
洗脱液在真空度为70kPa、浓缩温度55℃条件下进行浓缩至固形物含量达60%(质量体积比)。
(8)微波真空干燥
将浓缩后的浆状液体置于托盘中,放入微波真空干燥机中,设定微波功率800W、真空度0.06Mpa,干燥至龙眼核多酚粉末水分含量低于5%(质量体积比),收集,即得龙眼核多酚粉末,利用酒石酸亚铁比色法测得龙眼核多酚粉末中多酚含量达98.3%。
实施例3
一种高效提取龙眼核中多酚的方法,包括以下步骤:
(1)龙眼核去皮
将龙眼核60℃烘干或晒干,控制水分含量低于5%(质量体积比),利用摩擦的方法去掉龙眼核皮。
(2)粉碎
利用植物粉碎机将去皮龙眼核进行粉碎,控制龙眼核粉的粒度过80目筛。
(3)乙醇溶液回流浸提
龙眼核粉加8倍于龙眼核粉质量的95%(体积比)的乙醇溶液,在60℃条件下,回流提取6h。
(4)过滤
利用真空抽滤装置对浸提液进行过滤,收集滤液。
(5)乙酸乙酯萃取
滤液用乙酸乙酯进行萃取,收集乙酸乙酯部分。
(6)硅胶柱层析分离
乙酸乙酯萃取部上80目硅胶柱层析,多酚与硅胶吸附,非多酚成分被除去;采用石油醚-氯仿梯度洗脱,收集洗脱液。
所述的石油醚-氯仿梯度洗脱,石油醚与氯仿的起始体积比为9:1,最终过渡到用氯仿洗脱;
(7)真空浓缩
洗脱液在真空度为75kPa、浓缩温度60℃条件下进行浓缩至固形物含量达60%(质量体积比)。
(8)微波真空干燥
将浓缩后的浆状液体置于托盘中,放入微波真空干燥机中,设定微波功率800W、真空度0.06Mpa,干燥至龙眼核多酚粉末水分含量低于5%(质量体积比),收集,即得龙眼核多酚粉末,利用酒石酸亚铁比色法测得龙眼核多酚粉末中多酚含量达98.4%。
实施例4
一种高效提取龙眼核中多酚的方法,步骤(6)中以粒度为100目的硅胶取代实施例3步骤(6)中以粒度为80目的硅胶,其他同实施例3,最终得到龙眼核多酚粉末,利用酒石酸亚铁比色法测得龙眼核多酚粉末中多酚含量达98.4%。
实施例5
一种高效提取龙眼核中多酚的方法,步骤(6)中以粒度为120目的硅胶取代实施例3步骤(6)中以粒度为80目的硅胶,其他同实施例3,最终得到龙眼核多酚粉末,利用酒石酸亚铁比色法测得龙眼核多酚粉末中多酚含量达98.5%。
实施例6
一种高效提取龙眼核中多酚的方法,步骤(6)中以粒度为180目的硅胶取代实施例3步骤(6)中以粒度为80目的硅胶,其他同实施例3,最终得到龙眼核多酚粉末,利用酒石酸亚铁比色法测得龙眼核多酚粉末中多酚含量达98.5%。
上述实施例为本发明较佳的实施方式,但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制,其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化,均应为等效的置换方式,都包含在本发明的保护范围之内。
Claims (7)
1.一种高效提取龙眼核中多酚的方法,其特征在于包括以下步骤:
(1)龙眼核去皮、粉碎
将龙眼核烘干,去皮;然后将龙眼核粉碎得到龙眼核粉;
(2)乙醇溶液回流浸提、过滤
往龙眼核粉中加入3-10倍于龙眼核粉质量的乙醇溶液,50-90℃下回流提取3-6h;将得到的浸提液过滤,收集滤液;
(3)乙酸乙酯萃取
滤液用乙酸乙酯进行萃取,收集乙酸乙酯部分;
(4)硅胶柱层析分离
乙酸乙酯萃取部上硅胶柱层析,多酚与硅胶吸附,非多酚成分被除去;然后采用石油醚-氯仿梯度洗脱,收集洗脱液;
(5)真空浓缩、干燥
将洗脱液浓缩至固形物含量达60%,然后干燥,得到龙眼核多酚粉末;
步骤(4)所述的石油醚-氯仿梯度洗脱,石油醚与氯仿的起始体积比为9:1,最终过渡到用氯仿洗脱;
步骤(5)所述的浓缩是在真空度65-75kPa、温度55-60℃下加热浓缩。
2.根据权利要求1所述的高效提取龙眼核中多酚的方法,其特征在于:步骤(2)中,加入3倍于龙眼核粉质量的乙醇溶液。
3.根据权利要求1所述的高效提取龙眼核中多酚的方法,其特征在于:步骤(2)所述的乙醇溶液是体积比为80-95%的乙醇水溶液。
4.根据权利要求1所述的高效提取龙眼核中多酚的方法,其特征在于:步骤(2)中,在60℃下回流提取。
5.根据权利要求1所述的高效提取龙眼核中多酚的方法,其特征在于:步骤(4)所述的硅胶粒度为80~200目。
6.根据权利要求1所述的高效提取龙眼核中多酚的方法,其特征在于:步骤(4)所述的洗脱,洗脱速度为1mL/min,洗至洗脱液无色为止。
7.根据权利要求1所述的高效提取龙眼核中多酚的方法,其特征在于:步骤(5)所述的干燥是在微波真空干燥机中进行,微波功率800W、真空度0.06Mpa,干燥至龙眼核多酚粉末水分含量低于5%。
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C12 | Rejection of a patent application after its publication | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20130213 |