CN101292960A

CN101292960A - 含利培酮的缓释微球及其制备方法

Info

Publication number: CN101292960A
Application number: CNA2007101023176A
Authority: CN
Inventors: 梅兴国; 王襄平
Original assignee: Institute of Pharmacology and Toxicology of AMMS
Current assignee: Institute of Pharmacology and Toxicology of AMMS
Priority date: 2006-04-29
Filing date: 2007-04-27
Publication date: 2008-10-29
Anticipated expiration: 2027-04-27
Also published as: CN101292960B

Abstract

本发明涉及抗精神病药物利培酮(risperidone)的缓释微球及其制备方法。

Description

含利培酮的缓释微球及其制备方法

技术领域

背景技术

利培酮是一种具有独特性质的选择性单胺拮抗剂，它与5-HT2(5-羟色胺)受体和多巴胺D2受体有很高的亲和力。利培酮也能与α1-肾上腺素受体结合，并且以较低的亲和力与H1-组胺受体和α2-肾上腺素受体结合。利培酮不与胆碱能受体结合。利培酮是强有力的D2拮抗剂，可以改善精神分裂症的阳性症状，但它引起的运动功能抑制以及强直性昏厥都要比经典的抗精神病药少。对中枢系统的5-羟色胺和多巴胺拮抗作用的平衡可以减少发生锥体外系副作用的可能，并将其治疗作用扩展到精神分裂症的阴性症状和情感症状。

利培酮在体内部分代谢成9-羟基利培酮，后者与利培酮有相似的药理作用。该药的消除半衰期为3小时左右，9-羟基利培酮的消除半衰期为24小时。目前国内市场上的片剂、胶囊均需一天服用两次，不能解决精神病人需要长期服药而且依从性差的问题。因此，研究既能长期缓释利培酮制剂具有重要意义。其中，微球作为一种制剂新技术，具备了缓释或控释药物以及靶向给药等优点。制备微球所用的载体材料可分为天然、半合成和合成的高分子材料。近年来，合成高分子材料因其生物相容性良好，可生物降解吸收，在体内较稳定，降解期可调控等优点而受到广泛重视，是一种理想的微球制备材料。其中，可生物降解的合成高分子材料乳酸/羟基乙酸共聚物(polylactic-co-glycolic acid，PLGA)受到普遍的重视并得到广泛的应用。英国于2003年上市的利培酮长效注射液，采用LA/GA比例为75∶25的PLGA，缓释2周，价格将近90英镑，比较昂贵。而且通过实验发现，利培酮经⁶⁰Co照射灭菌后容易变色，然而，微球制剂不耐高温，目前的灭菌方法只有两种，一种是全过程实行无菌操作，另一种是⁶⁰Co照射。前者的成本很高，而且在国内尚很难实现。

所以本发明通过筛选了多种稳定剂，并筛选了⁶⁰Co照射的剂量，即达到了微球的灭菌效果，而且成功地解决了单纯的利培酮的PLGA微球经⁶⁰Co照射后容易变色的问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种以PLGA为基质材料，表面光滑圆整，颗粒规则无粘连，微球的平均粒径在30μm以下可控，载药量和包封率高，缓释期在4周以上，且利培酮经⁶⁰Co照射后稳定的利培酮缓释微球及其制备方法。

本发明第一方面涉及一种缓释微球制剂，其包括利培酮，PLGA及稳定剂和/或附加剂。

本发明另一方面涉及制备缓释微球制剂的方法，它采用乳化-溶剂挥发法制备的，其特征在于将活性药物利培酮和可生物降解的药用高分子辅料以及附加剂溶于有机溶剂配制成有机相，所述有机溶剂选自：二氯甲烷、乙酸乙酯、乙醇、甲醇、苯甲醇、丙酮或二者混合液；另外配制连续水相，将非离子型乳化剂溶于水中，它们在水相中的重量百分数为0.1-12％，所述非离子型乳化剂选自聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纤维素钠、聚丙烯酸钠或聚甲基丙烯酸钠、明胶、西黄芪胶。单乳法制备微球的步骤是：高分子辅料和/或其它附加剂等加入到二氯甲烷或混合溶剂中，待完全溶解并匀化后加入到以每分钟400-5000转(rpm)搅拌的适宜浓度的连续相溶液中，形成乳液后，适当稀释连续相溶液，继续以较低的速度搅拌约4小时，挥发有机溶剂。然后，以4000-15000rpm离心、洗涤收集微球，进行真空干燥或冷冻干燥即得微球干粉。复乳法制备微球的步骤是：将高分子辅料加入到一种或一种以上的有机溶剂中，待完全溶解并匀化后作为油相，将药物溶解或混悬于水性溶液中作为内水相，将内水相加入到油相中后高速搅拌形成初乳，然后加入到以每分钟400-5000转搅拌的适宜浓度的连续相溶液(加盐)中，继续搅拌形成乳液后，将连续相溶液稀释至一定倍数，以较低的速度搅拌约4小时，挥发有机溶剂。然后，离心、洗涤收集微球，进行真空干燥或冷冻干燥即得微球干粉，经辐射灭菌。

本发明微球基质材料选用PLGA，其分子量为4.0×10³-6×10⁴，PLA∶PGA质量百分比为10∶90-90∶10，有机溶剂选自二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、乙醇、甲醇、苯甲醇或丙酮中的一种或者两者的混合后的溶剂。

本发明采用普通电磁搅拌器或者机械搅拌，其搅拌速度为400-5000rpm，外水相中无机盐的浓度可在0-10.0g/100ml，也可适当增加。

采用本发明方法所制各微球表面光滑圆整，颗粒规则无粘连(图1，图2)，平均粒径在30μm以下可控(图3)，载药量和包封率高，缓释期在4周以上，其体外释药曲线较为光滑平坦(图4)，

本发明所述的缓释微球制剂在生产时制备成注射用粉针剂，在使用前由医护人员将其混悬于注射用溶媒中(通常为含0.2％-1％羧甲基纤维素钠与0-0.2％吐温80的5％甘露醇溶液)后进行注射。

本发明的有益效果是：本发明所涉及的微球制备方法简便易行，成本较低。所制备的微球的粒径小，减少了对体内组织的刺激。通过选用适合的PLA∶PGA质量百分比的PLGA为基质材料，提高了利培酮的包封率，改善了此类微球的粒径分布，延长了微球在体外的释药时间；通过加入稳定剂，即达到了微球的灭菌效果，而且成功地解决了单纯的利培酮PLGA微球经⁶⁰Co照射后由白色变为黄色，而且药物降解的问题(图5)。而且附加剂的加入改善了微球内部的拓扑导结构，优化了药物从微球中的累积释放率。

本发明有别于国外利培酮长效注射液的地方是：采用的包裹材料PLGA中的单体比例不同；微球的成分由药物、PLGA和附加剂构成；所制备的微球的粒径在平均粒径在30μm以下可控，径距分布较窄；包封率高，可达90％左右；具有优良的缓释性能，突释很小，缓释期在4周以上。

附图说明

图1利培酮-PLGA缓释微球冻干粉剂

图2利培酮-PLGA缓释微球显微镜图(200×)

图3利培酮-PLGA缓释微球粒径分布图

图4三批利培酮-PLGA缓释微球体外释药曲线(实施例1的方法制备)

图5经60Co照射后微球含量的HPLC图谱(不加入稳定剂)

图6经60Co照射后微球含量的HPLC图谱(加入稳定剂后)

图7实施例1的含18mg利培酮的100mg微球微球在家兔体内的血药浓度曲线

图8含18mg利培酮的普通注射液在家兔体内的血药浓度曲线

具体实施方式

实施例1缓释30天的利培酮微球的制备

取PLGA 1.8g(分子量为20000，LA/GA 60∶40)及叔丁基对羟基茴香醚(BHA)溶于有机溶剂中制成油相。有机溶剂为二氯甲烷(DCM)或二氯甲烷和甲醇的混合液。将500mg利培酮样品溶于上述油相中，超声混合均匀。称取适量PVA于双蒸水中，水浴50℃使其充分溶解，调节使其浓度为5％作为水相。在水相分散介质溶液中加入无机盐。将上述油相注入150ml PVA溶液，1500rpm搅拌，5min后将水相PVA的浓度稀释为1.5％，室温下磁力搅拌3-5小时，即得利培酮微球混悬液。然后洗涤、离心、干燥。平均粒径10μm左右。

实施例2缓释45天的利培酮微球的制备

取PLGA 1.8g(分子量为25000，LA/GA 90∶10)及BHA溶于有机溶剂中制成油相。有机溶剂为二氯甲烷(DCM)或二氯甲烷和甲醇的混合液。将500mg利培酮样品溶于上述油相中，超声混合均匀。称取适量PVA于双蒸水中，水浴50℃使其充分溶解，调节使其浓度为5％作为水相并在水相分散介质溶液中加入无机盐。将上述油相注入150ml PVA溶液，1500rpm搅拌，5min后将水相PVA的浓度稀释为1.5％，室温下磁力搅拌3-5小时，即得利培酮微球混悬液。然后洗涤、离心、干燥。平均粒径15μm左右。

实施例3 单乳法制备利培酮微球

取PLGA 1.8g(分子量为20000，LA/GA 60∶40)溶于有机溶剂中制成油相。有机溶剂为乙酸乙酯(DCM)或乙酸乙酯和甲醇的混合液。将500mg利培酮样品溶于上述油相中，超声混合均匀。称取适量PVA于双蒸水中，水浴50℃使其充分溶解，调节使其浓度为5％作为水相，并在水相分散介质溶液中加入无机盐。将上述油相注入150ml PVA溶液，1500rpm搅拌，5min后将水相PVA的浓度稀释为1.5％，室温下磁力搅拌3-5小时，即得利培酮微球混悬液。然后洗涤、离心、干燥后加入少量的甲硫氨酸溶液，冻干。

实施例4 未加附加剂的微球的制备

取PLGA(LA/GA 50∶50)溶于有机溶剂中制成油相。有机溶剂为乙酸乙酯(DCM)或乙酸乙酯和甲醇的混合液。将利培酮样品溶于上述油相中，超声混合均匀。称取适量PVA于双蒸水中，水浴50℃使其充分溶解，调节使其浓度为5％作为水相，并在水相分散介质溶液中加入无机盐。将上述油相注入150ml PVA溶液，1500rpm搅拌，5min后将水相PVA的浓度稀释为1.5％，室温下磁力搅拌3-5小时，即得利培酮微球混悬液。然后洗涤、离心、干燥。

实施例5 复乳法制备利培酮微球(水/油/水)

取PLGA1.8g溶于有机溶剂中制成油相。将利培酮溶于0.1N的盐酸溶液中作为内水相，将此溶液加入油相中，高速匀浆搅拌后作为初乳。称取适量PVA于双蒸水中，水浴50℃使其充分溶解，调节使其浓度为5％作为水相，并在水相分散介质溶液中加入无机盐。将上述初乳注入150ml PVA溶液，1500rpm搅拌，5mi n后将水相PVA的浓度稀释为1.5％，室温下磁力搅拌3-5小时，即得利培酮微球混悬液。然后洗涤、离心、干燥。

实施例6 复乳法制备利培酮微球(固/油/水)

取PLGA1.8g溶于有机溶剂中制成油相。将利培酮500mg混悬于2ml明胶溶液中，高速搅拌后作为内水相，将此溶液加入油相中，高速匀浆搅拌后作为初乳。称取适量PVA于双蒸水中，水浴50℃使其充分溶解，调节使其浓度为5％作为水相，并在水相分散介质溶液中加入无机盐。将上述初乳注入150ml PVA溶液，1500rpm搅拌，5min后将水相PVA的浓度稀释为1.5％，室温下磁力搅拌3-5小时，即得利培酮微球混悬液。然后洗涤、离心、干燥。

实施例7 实施例1的微球及普通含利培酮注射液在家兔体内的血药浓度比较

取6只重量在2.0kg～3.5kg的新西兰大耳白兔，其中3只经肌肉注射含18mg利培酮注射液1.2mL，分别于1h，1.5h，2h，3h，5h，6h，8h，9h，10h，12h，16h，24h耳缘静脉取血样1.5mL；另3只新西兰大耳白兔同样肌肉注射含18mg的100mg微球(该微球可按实施例1方法制备)的1.2ml含0.5％CMC水溶液的混悬液，分别于第4h，10h，1d，2d，3d，5d，7d，14d，21d，28d，35d及40d耳缘静脉取血样1.5mL。所有采集的血样均于8,000rpm离心10min后取上清液-70℃冻存，然后采用本领域已知方法测上述所有血样中利培酮的血药浓度，结果见图7和图8。由图7和图8可看到，本发明的微球显示出良好的缓释作用。

Claims

1.一种缓释微球制剂，其包括利培酮，PLGA及稳定剂。

2.权利要求1的缓释制剂，其中利培酮为利培酮，羟基利培酮或它们的药用酸或盐的形式，PLGA分子量为4.0×10³-6×10⁴道尔顿，LA∶GA的质量百分比为10∶90-90∶10。

3.权利要求1或2的缓释制剂，其中PLGA分子量为20000道尔顿，LA/GA为60∶40。

4.权利要求1或2的缓释制剂，其中PLGA分子量为25000道尔顿，LA/GA为90∶10。

5.缓释微球的制备方法，其包括：将药物利培酮、PLGA和/或其它附加剂等加入到一种或一种以上的有机溶剂中，待完全溶解并匀化后加入到以每分钟400-5000转搅拌的适宜浓度的连续相溶液(加盐)中，继续搅拌形成乳液后，将连续相溶液稀释至一定倍数，以较低的速度搅拌约4小时，挥发有机溶剂；然后，以4000-15000rpm离心、洗涤收集微球，进行真空干燥或冷冻干燥即得微球干粉，经辐射灭菌；或

将高分子辅料PLGA加入到一种或一种以上的有机溶剂中，待完全溶解并匀化后作为油相，将药物利培酮溶解或混悬于水性溶液中作为内水相，将内水相加入到油相中后高速搅拌形成初乳，加入到以每分钟400-5000转搅拌的适宜浓度的连续相溶液(加盐)中，继续搅拌形成乳液后，将连续相溶液稀释至一定倍数，以较低的速度搅拌约4小时，挥发有机溶剂；然后，离心、洗涤收集微球，进行真空干燥或冷冻干燥即得微球干粉，经辐射灭菌。

6.根据权利要求5的方法，其中所述的活性药物利培酮包括利培酮、羟基-利培酮、或其药用的酸和盐的形式。

7.根据权利要求6的方法，其特征为微球基质成分中PLA∶PGA质量百分比为10∶90-90∶10，并且其分子量为4.0×10³-6×10⁴。

8.根据权利要求6的方法，所加的附加剂包括助溶剂、稳定剂、防腐剂，包括：叔丁基对羟基茴香醚(BHA)，二丁甲苯酚(BHT)，培酸丙酯(PG)，生育酚，肉豆蔻酸异丙酯，亚硫酸钠，亚硫酸氢钠，焦亚硫酸钠，硫代硫酸钠，硫脲，半膀氨酸，蛋氨酸，硫代乙酸，硫代甘油，所述有机溶剂选自：二氯甲烷、乙酸乙酯、乙醇、甲醇、苯甲醇、丙酮；或者是二者的混合液，水相分散介质是将非离子型乳化剂溶于水中，它们在水相中的重量百分数为0.1-12％，所述的非离子型乳化剂选自聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纤维素钠、聚丙烯酸钠或聚甲基丙烯酸钠、明胶、西黄芪胶。

9.根据权利要求5的方法，其特征为匀化方式包括涡旋混合、超声和高速匀浆、每次匀化时间为5s-3min，搅拌方式包括机械搅拌和磁力搅拌，每次搅拌混合时间30s-8min左右。

10.根据权利要求5的方法，连续相中的无机盐选自无水碳酸钠、氯化钠、糖类，水相中无机盐的浓度可在0-10.0g/100ml，也可适当增加。

11.根据权利要求5的方法，辐射灭菌的方式包括⁶⁰Co照射或¹³⁷Cs照射，灭菌剂量为25×10⁴-250×10⁴拉德。