CH677448A5 - - Google Patents

Download PDF

Info

Publication number
CH677448A5
CH677448A5 CH4131/88A CH413188A CH677448A5 CH 677448 A5 CH677448 A5 CH 677448A5 CH 4131/88 A CH4131/88 A CH 4131/88A CH 413188 A CH413188 A CH 413188A CH 677448 A5 CH677448 A5 CH 677448A5
Authority
CH
Switzerland
Prior art keywords
formula
use according
dermatitis
medicament
compounds
Prior art date
Application number
CH4131/88A
Other languages
English (en)
Inventor
Maximilian Dr Grassberger
Josef Gottfried Dr Meingassner
Anton Dr Stuetz
Peter Dr Stuetz
Original Assignee
Sandoz Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=25599336&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=CH677448(A5) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Priority claimed from AT0295287A external-priority patent/AT400808B/de
Application filed by Sandoz Ag filed Critical Sandoz Ag
Publication of CH677448A5 publication Critical patent/CH677448A5/de

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/436—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a six-membered ring having oxygen as a ring hetero atom, e.g. rapamycin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/407—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with other heterocyclic ring systems, e.g. ketorolac, physostigmine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)

Description

5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
CH 677 448 A5
Beschreibung
Die Erfindung betrifft die Verwendung von Verbindungen der Formel
ï
1
ch3°
0
r'
3
i
3
och3 och3
worin
Ri für eine gegebenenfalls geschützte Hydroxygruppe,
Ffe für Wasserstoff oder eine gegebenenfalls geschützte Hydroxygruppe,
R3 für Methyl, Ethyl, Propyl oder Allyl,
n für 1 oder 2 und das Symbol einer Linie und einer gestrichelten Linie für eine Einfach- oder Doppelbindung stehen,
in freier Form oder in Salzform,
zur Herstellung eines Arzneimittels zur topischen Behandlung von entzündlichen und hyperproliferativen Hauterkrankungen, bzw. kutanen Manifestationen immunologisch bedingter Erkrankungen, z.B. von: Psoriasis, atopischer Dermatitis, Kontakt-Dermatitis und anderen ekzematösen Dermatitiden, se-borrhoeischer Dermatitis, Liehen planus, Pemphigus, bullösem Pemphigoid, Epidermolysis bullosa, Urticaria, Angioödemen, Vasculitiden, Erythemen, kutanen Eosinophilien, Lupus erythematodes sowie von Alopecia areata.
Die Verbindungen der Formel I, deren Herstellung sowie ihre immunosuppressive und antimikrobielle Wirkung sind z.B. in Fujisawa EP 184162 beschrieben.
Es wurde nun gefunden, dass die Verbindungen der Formel I weitere interessante pharmakologische Eigenschaften besitzen und daher für weitere Verwendungen als Heilmittel geeignet sind.
Es ist bekannt und in der Literatur wiederholt berichtet, dass Cyclosporin A (SandimmunR), ein hochwirksames immunosuppressives Mittel, bei topischer Applikation gegen Psoriasis praktisch keine Whv kung zeigt (z.B. Lancet [1987] 806; J. Invest. Dermatol. 90. [1988] 251). Bei Kontaktallergien von Tieren ist Cyclosporin A nur bei Mäusen und Meerschweinchen nach topischer Applikation von mindestens 0,1%igen Bereitungen wirksam, nicht aber am Schwein, bei dem Cyclosporin in Bereitungen bis zu 5% ohne Wirkung ist
Überraschenderweise wurde nun gefunden, dass die Verbindungen der Formel I ausgezeichnete topische Aktivität besitzen. So üben sie bei Schweinen bei topischer Anwendung eine ausgezeichnete Wirkung gegen eine DNFB-Kontaktalleraie aus. In Mäusen mit einer Oxazolon-Allergie ergibt sich im Vergleich mit Cyclosporin A eine mindestens 25fache Überlegenheit. Zusätzlich zeigen die Verbindungen der Formel i bei topischer Applikation auch in Tiermodelien von Dermatitis durch Irritantien einen entzündungshemmenden Effekt. Dies deutet auf eine allgemeine antiinflammatorische Wirkung bei epikutaner Anwendung hin. In Einklang damit stehen Ergebnisse von in vitro Untersuchungen: Die Hemmung der TPA-induzierten PGE2-Freisetzung aus Makrophagen, sowie die Hemmung des FMLP- bzw» Calciumio-nophor A23 187-stimulierten «oxidative burst» von humanen neutrophilen polymorphkernigen Leukozyten. Weiters zeigen die Verbindungen der Formel I überraschend auch eine Hemmung der Proliferation von Humankeratinozyten in Zellkulturen.
Die Verbindungen der Formel I in freier Form oder in pharmakologisch verträglicher Salzform sind da2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
CH 677 448 AS
her für die Therapie von entzündlichen und hyperproliferativen Hauterkrankungen, bzw. kutanen Manifestationen immunologisch bedingter Erkrankungen, z.B. von: Psoriasis, atopischer Dermatitis, Kon-takt-Dermatitis und anderen ekzematösen Dermatitiden, seborrhoeischer Dermatitis, Liehen planus, Pemphigus, bullösem Pemphigoid, Epidermolysis bullosa, Urticaria, Angioödemen, Vasculitiden, Erythemen, kutanen Eosinophilien, Lupus erythematodes sowie von Alopecia areata bei topischer Applikation geeignet.
Diese Wirkungen sind aus folgenden Tests ersichtlich:
1. Prüfung der Wirksamkeit nach topischer Applikation an Modellen der allergisch bedingten Kontaktder-matitis (DTH-Reaktion):
1.1. Oxazolon-Allergie/Maus:
Zur Sensibilisierung werden Mäusen 10 (tl einer Oxazoionlösung (2%ig) auf die venterale Bauchhaut aufgetragen. 8 Tage danach erfolgt eine Zweitexposition mit 10 |il einer 2%igen Oxazoionlösung, die auf die periphere Innenfläche der rechten Ohrmuschel aufgetragen werden. 20 Minuten und 2 Stunden nach dem Auslösen der Ghalienge-Reaktion durch die Zweitexposition wird die Testlösung auf die Stelle der Zweitexposition aufgebracht. Die Beurteilung der Entzündungshemmung durch die Testsubstanz erfolgt im Vergleich zu einer unbehandelten Gruppe, die nur mit dem Lösungsmittel der Testsubstanz behandelt wird. 24 Stunden nach der Zweitexposition werden die Tiere getötet und die abgesetzten Ohrmuscheln gewogen. Die Differenz aus beiden Ohrmuschel-Gewichten wird zur Auswertung verwendet, indem die einzelnen Differenzen der Testgruppen und der Lösungsmittelkontrolle statistisch (Einfache Varianzanalyse mit nachfolgendem Dunnet-Test bei Normalverteilung, andernfalls mit dem Kruskal-Wallis' H-Test und Wilcoxon-Mann-Whitney's U-Test) verglichen werden. Die Wirkung der Testsubstanz wird aufgrund der Mittelwerte in % angegeben.
In der Tabelle 1 sind die Versuchergebnisse in diesem Modell für Verbindungen der Formel I und Cyclosporin A angegeben. Als Lösungsmittel im Test wird Ethanol verwendet.
Tabelle 1
Substanz
% Wirkstoffkonzentratiôn
% Hemmung
A
0,13
65
0,01
65
0,005
52
0,002
38
0,0005
35
B
0,005
60
F
0,01
53
G
0,01
32
Cyclosporin A
0,4
71
0,13
56
0,04
28
0,01
15
1.2 DNFB-Allergie/Schwein:
Die Verwendung von Dinitrofluorbenzol fDNFBi oder Dinitrochlorbenzol (DNCB1 zur Induktion einer Kontaktallergie ist ein klassisches experimentelles Verfahren, das auch beim Menschen angewendet wird (P.S. Friedmann, C. Moss in Maibach, Lowe, edit., Models in Dermatoloav. Vol. 2, 275-281, Karger — Basel). Wegen der Ähnlichkeit von Schweine- und Humanhaut wurde ein entsprechendes Modell zur topischen Prüfung von Substanzen auch am Schwein aufgebaut. Am 1. und 3. Versuchstag werden jeweils 100 jil einer 10%igen DNFB-Bereitung auf die Innenfläche des rechten bzw. linken Oberschenkels aufgebracht. Am 14. Versuchstag werden jedem Schwein rechts und links am Rücken kreisförmige Stellen mit einem Durchmesser von 5 cm (8 pro Schwein) markiert und darauf jeweils 150 (il einer 0.5%igen DNFB-Bereitung aufgetragen. Die Prüfung der Testsubstanzen erfolgt entweder in Form ga-ienischer Bereitungen oder als Lösungen. Die Substanzträger werden als Placebo-KontroIIen in jedem Versuch mitgeführt.
Die Behandlung erfolgt durch viermaliges schonungsvolles Auftragen der Testbereitungen (erstmals 30 Minuten, dann 6-24 und 32 Stunden nach der Auslösung der Challenge-Reaktion). Vor jeder Behandlung werden die Testareale nach Rötung, Schwellung und Konsistenz beurteilt. Die Färbung der Testfel3
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
CH677 448 A5
der wird anschliessend mit einem Refiektometer quantitativ bestimmt, wobei die Teststellen wiederholt vermessen werden. Aus den Messdaten Helligkeit (L*) und Sättigung (C*) wird der «Erythemindex» für Jede Messung nach folgender Formel errechnet: 100 - L* x C*. Der mittlere Erythemindex dient der Wirksamkeitsbestimmung nach der Formel:
A Placebo - Â Testbereitung
% Hemmung (24,32,48,56 Std.) = 100 ~ ,
A. Placebo
A : Differenz zum Ausgangswert.
Die klinische Befundung der Teststellen ergibt deutliche Unterschiede zwischen den Stellen, die mit Placebo bzw. Wirkstoff behandelt werden. Während placebobehandelte Stellen diffus kirschrote, beetartig erhabene, indurierte Areale bildeten, sind mit Verbindung A in 5%iger Bereitung (Lösung in 15% Dimethylacetamid, 42.5% Ethanol und 42.5% Propylenglykol) behandelte Teststellen kaum von der umgebenden normalen Haut zu unterscheiden. Sie weisen nur eine leichte fleckenförmige Rötung auf.
Die unterschiedliche Färbung kann mit dem Refraktometer deutlich gezeigt werden. Dexamethason in gleicher Konzentration und Bereitung zeigte in diesem Modell nur eine schwache Wirkung, für Cyclosporin A kann keine Wirkung nachgewiesen werden.
2. Prüfung der Wirksamkeit nach topischer Applikation am Modell der irritansbedingten Dermatitis von Mäusen:
2.1. TPA-induzierte Dermatitis:
Die Irritation der Haut von Versuchstieren mit 12-0-Tetradecanoylphorbol-13-acetat (TPA) ist eine Methode, Testsubstanzen nach lokaler Anwendung auf ihre antiinflammatorische Wirkung zu testen (siehe Maibach, Lowe, edit, Models in Dermatoloav Vol. 3, 86-92, Karger-Basel [1987]). NMRI-Mäu-sen werden 10 nl einer TPA-Lösung auf die innere und äussere Seite der rechten Ohrmuschel aufgetragen (2x10 nl/Maus = 2x0.5 jxg TPA/Maus). Die Behandlung erfolgt 30 Minuten nach der Irritation, indem 2x10 nl der Testlösung wie beschrieben auf die irritierte Ohrmuschelfläche aufgebracht werden. Die Auswertung der Testgruppe erfolgt im Vergleich mit einer Gruppe, deren rechte Ohrmuscheln nur mit der Irritationslösung und dem Lösungsmittel der Substanz behandelt wurden. 6 Stunden nach dem Auftragen des Irritans werden die Tiere getötet, die Ohrmuscheln abgesetzt und gewogen. Die Differenz aus beiden Ohrmuschel-Gewichten wird zur Auswertung verwendet, indem die einzelnen Differenzwerte der Testgruppen mit den einzelnen Differenzen der Kontrollgruppe statistisch (wie bei 1.1.) verglichen werden. Die Wirkung der Testsubstanzen wird aufgrund der Mittelwerte in % angegeben.
Die Ergebnisse im Vergleich zu Indomethacin sind in Tabelle 2 wiedergegeben. Als Lösungsmittel wurde eine Mischung aus Dimethylacetamid, Aceton und Ethanol (2/4/4) verwendet.
Tabelle 2
Substanz
% Wirkstoffkonzentration
% Hemmung
A
3,6
56
1,2
52
Indomethacin
3,6
31
1,2
26
2.2 Crotonöl-induzierte Dermatitis:
Crotonöl wird wie TPA häufig zur Induktion einer Irritans-Dermatitis verwendet, an der Testsubstanzen auf ihre antiinflammatorische Wirkung getestet werden (siehe Maibach, Lowe edit., Models in Dermatoloav. Vol. 3,86-92, Karger-Basel [1987]). NMRI-Mäusen werden 15 nl 0.23% Crotonöl (in einem Gemisch aus Dimethylacetamid, Aceton und Ethanol = 2/4/4) auf die Innenfläche der rechten Ohrmuschel aufgetragen. Die Behandlung erfolgt gleichzeitig mit der Irritation, indem die Substanz in der Irritanslö-sung gelöst wird. Die Auswertung der Testgruppe erfolgt im Vergleich mit einer Gruppe, deren rechte Ohrmuschel nur mit der Irritanslösung behandelt wurde. 6 Stunden nach dem Auftragen des Irritans werden die Tiere getötet, die Ohrmuscheln abgesetzt und gewogen. Die Differenz aus beiden Ohrmuschel-Gewichten wird zur Auswertung verwendet, indem die einzelnen Differenzwerte der Testgruppen mit den einzelnen Differenzen der Kontrollgruppe statistisch (wie bei 1.1) verglichen werden. Die Wirkung der Testsubstanzen wird aufgrund der Mittelwerte in % angegeben.
4
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
CH677448 A5
Die Ergebnisse mit Verbindung A im Vergleich zu Indomethacin sind in Tabelle 3 wiedergegeben:
Tabelle 3
Substanz
% Wirkstoffkonzentration
% Hemmung
A
3,6
85
1,2
64
0,4
52
Indomethacin
3,6
96
1,2
63
0,4
11
3. Inhibierung des «oxidative burst» in humanen neutrophilen polymorphkernigen Leukozyten (Inhibierung der FMLP- bzw. A23187-stimulierten Chemilumineszenz):
Polymorphkernige Leukozyten (PMNL) werden wie beschrieben aus peripherem Blut des Menschen präpariert (Schaude, M., W. Mlineritsch, B. Mandak, Mvcoses 31(5), 259-267 [1988]). Die Herstellung der Testsubstanzstammlösungen (500 mg/l) erfolgt am Versuchstag in 5% DMSO/RPMI 1640. Für die Bestimmung der Chemilumineszenz mittels Biolumat LB 9505 wird der Lumineszenz-Indikator 7-Dimethyl-aminonaphthalin-1,2-dicarbonsäurehydrazid (DMNH) verwendet. Bei der Bestimmung der Chemilumineszenz von PMNL Zellen besteht das Reaktionsgemisch aus 200 pl PMNL-Suspension (5x106 Zellen/ml). 100 nl der jeweiligen Testsubstanz-Verdünnung oder dem Lösungsmittel als Kontrolle und 25 nl der DMNH-Lösung (2,5x10-6 M). Die CL-Reaktion wird entweder durch Zugabe des Peptids N-Formyl-L-Methionyl-L-Leucyl-L-Phenylalanin (FMPL), 4x10-6 M) oder durch den Calziumionophor A 23187 (4x 10-6 M) gestartet. Der Verlauf der CL-Reaktion bei 37° wird über einenZeitraum von 20 Minuten in Intervallen von 20 Sekunden gemessen. 3 Parameter werden zur Beurteilung der Ergebnisse herangezogen: Peakintensität des abgestrahlten Lichtes, Zeit bis zum Peak und die Fläche unter der Reaktionsverlaufskurve. Als minimale Hemmkonzentration wird jene niedrigste Wirkstoffkonzentration bezeichnet, bei der eine deutliche Hemmung aller 3 Parameter beobachtet werden kann (Tabelle 4):
Tabelle 4
Substanz
MHKftiM)
MHK (UM)
(FMLP)
(A 23187)
A
0,005
0,05
B
0,01
0,01
C
0,5
5
D
<0,5
0,5
E
<0,5
0,05
4. Inhibierung der Makrophagen-Aktivierung (Inhibierung der TPA-induzierten Freisetzung von PG-E2):
Peritoneale Exsudatzellen von NMRI-Mäusen, die 3 Tage vorher mit 1,5 ml Thioglykolat i.p. vorbehandelt wurden, werden in peritonealen lavage gezüchtet, mit defizientem PBS gewaschen und in DMEM-Medium, das mit 10% FCS supplîmentîert ist, resuspendiert. 1x106 Zellen werden in jede der Vertiefungen einer 24-Kulturenplatte gegeben, und die Zellen werden 4 Stunden bei 37°C und 5% CO2 zur Adhärenz belassen. Dann werden die Zellen zweimal mit defizientem PBS gewaschen. Die erhaltene, >95% reine Makrophagenpopulation wird mit TPA (20 nl/1 Stunde) in DMEM-Medium ohne FCS stimuliert. Die konditionierten Medien werden zentrifugiert und der PGEa-Freisetzung durch die Testsubstanzen wird als prozentuelle Inhibition im Vergleich zu den Kontrollen berechnet.
Die Ergebnisse sind in Tabelle 5 zusammengefasst:
5
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
CH 677 448 A5
Tabelle 5
Substanz
Inhibition bei 1 |iM
A
30%
B
60%
C
60%
5. Inhibition der Proliferation von Human-Keratinozyten:
Kulturen von Human-Keratinozyten werden durch Trypsinierung von humanen Vorhäuten Neugeborener erhalten oder als EpiPack von Clonetics Corp. (San Diego) bezogen. Die Keratinozytenkulturen werden in einem supplementierten Keratinozytenmedium (KGM) in Kulturflaschen gezüchtet. Die Passagen 3-5 von 80-90% konfluenten Keratinozyten werden in KGM in einer Konzentration von 1x105 Zel-len/ml resuspendiert, und entweder je 0,1 ml dieser Zellsuspension werden in eine 96-Näpfchen-Mikroti-terplatte oder je 1 ml dieser Zellsuspension in eine 24-Näpfchenplatte in Gegenwart der Testsubstanz gegeben. Die Zellen werden 48 Stunden bei 37°C und 5% CO2 gezüchtet. Während der letzten 16 Stunden wird 3H-Thymidin inkorporiert (Mikrotiterplatte, 1 p.Ci/Näpfchen), die Zellen werden hinsichtlich Morphologie kontrolliert, dreimal mit eiskalter defizienter PBS und zweimal mit Trichloressigsäure gewaschen, in 100 nl 0,1 N NaOH, die 1% SDS enthält, solubilisiert und die Radioaktivität gemessen. Alternativ werden Zellen der 24-Näpfchen-Kulturplatte trypsinisiert (Trypsin/EDTA), auf Viabilität kontrolliert durch Trypanblauexklusion, und dreifache Aliquote werden in einem Zell-Counter gemessen.
Ergebnis: Verbindung A zeigt im Konzentrationsbereich von 0,5 bis 5 |xM dosisabhängig eine Reduktion der Prolifération (Tabelle 6):
Tabelle 6
Substanz A
% Inhibition im Vergleich zur Kontrolle
Lösungsmittel
0
0,5 nM
57
1 pM
74
5 (iM
94
Die Substanzbezeichnungen haben folgende Bedeutung:
A: FK 506 = 17-Ally]-1,14-dihydroxy-12-[2-(4-hydroxy-3-methoxycyclohexyl)-1-methylvinyl]-23,25-dimethoxy-13,19,21,27-tetramethyl-11,28-dioxa-4-azatricyclo[22.3.1.0^,9]-octacos-18-en-2,3,l 0,16-tetraon (offenbart auf Seite 32 in EP 184162)
(Ri, R2 = OH; R3 = Allyi; n = 2; Einfachbindung)
B: Dihydro-FK 506 = 1,14-Dihydroxy-12-[2-(4-hydroxy-3-methoxycyclohexyl)-1-methylvinyl]-23,25-dimethoxy-13,19,21,27-tetramethyl-17-propyl-11,28-dioxa-4-azatricyclo[22.3.1.04,9]octacos-18» en-2,3,10,16-tetraon (offenbart auf Seite 98 als Beispiel 21 in EP 184162)
(R1, R2 == OH; R3 = n-Propyl; n = 2; Einfachbindung)
C: dehydratiertes FK 506 = 17-Allyl-1-hydroxy-12-[2-(4-hydroxy-3-methoxycyclohexyl)-1-methylvinyl]-23,25-dimethoxy-13,19,21,27-tetramethyl-11,28-dioxa-4-azatricyclo[22.3.1.04,9]-octacos-14,18-dien-2,3,10,16-tetraon (offenbart auf Seite 95 als Teil von Beispiel 17 in EP 184162) (Ri = OH; R2 = H; R3 = Allyi; n = 2; Doppelbindung)
D: Diacetyl-FK 506 = 14-Acetoxy-12-[2-(4-acetoxy-3-methoxycyclohexyl)-1 -methylvinyl]-17-alIyl-1 -hydroxy-23,25-dimethoxy-13,19,21,27-tetramethyl-11,28-dioxa-4-azatricyclo[22.3.1.04,9]-octacos-18-en-2,3,10,16-tetraon (offenbart auf Seite 89 als Teil von Beispiel 6 in EP 184162) (R1, R2 = Acetoxy; R3 = Allyi; n = 2; Einfachbindung)
É: Monoacetyl-FK 506 = 12-[2-(4-Acetoxy-3-methoxycyclohexyl)-1 -methylvinyl]-17-allyl-1,14-dihydroxy-23,25-dimethoxy-13l19,21,27-tetramethyl-11,28-dioxa-4-azatricyclo[22.3.1.04,9]-octacos-18-en-2,3,10,16-tetraon (offenbart auf Seite 88 als Beispiel 5 in EP 184162)
(Ri = Acetoxy; R2 = Hydroxy; R3 = Allyi; n = 2; Einfachbindung).
Die Verbindung A (FK 506) ist ein aus der Natur isoliertes Produkt. Sie besitzt eine bestimmte steri-sche Konfiguration. Obwohl sie in EP 184 162 mit ausführlichen Charakterisierungsdaten offenbart ist, gibt jedoch die für FK 506 auf Seite 32 in EP 184 162 angegebene Formel keine Information über die stereochemische Konfiguration an. Weiter ist in EP 184 162 überhaupt keine Information über die genaue
6
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
CH 677 448 A5
Konfiguration von irgendwelcher spezifisch offenbarter Verbindung enthalten. Da mehrere Asymmetriezentren vorhanden sind, umfasst daher die Formel auf Seite 32 viele potentielle Verbindungen, allerdings entspricht nur eine dem FK 506. Die genaue Konfiguration von FK 506 wurde später veröffentlicht, z.B. in H. Tanaka et al., J. Am. Ghem. Soc. 109 (1987) 5031-5033, T. Kino et al., J. Antibiotics 40 (1987) 1249-1255 und T. Taga et al., Acta Crvst. C43 (1987) 751-753, und entspricht folgender Formel:
Daraus geht hervor, dass die Verbindungen B, C, D und E ebenfalls eine der obigen Formel la entsprechende Konfiguration besitzen, da in EF 184 162 ihre Herstellung ausgehend von FK 506 durchgeführt wird, unter Verwendung von Reaktionsschritten, die die Konfiguration nicht verändern.
Eine Ausführung der Erfindung ist die Verwendung von Verbindungen der Formel I in freier Form oder in Form von pharmazeutisch verträglichen Salzen zur Herstellung eines Arzneimittels zur topischen Behandlung von entzündlichen und hyperproliferativen Hauterkrankungen, bzw. kutanen Manifestationen immunologisch bedingter Erkrankungen, z.B. von: Psoriasis, atopischer Dermatitis, Kon-takt-Dermatitis und anderen ekzematösen Dermatitiden, seborrhoeischer Dermatitis, Liehen planus, Pemphigus, bullösem Pemphigoid, Epidermolysis bullosa, Urticaria, Angioödemen, Vaskulitiden, Erythemen, kutanen Eosinophilien, Lupus erythematodes sowie von Alopecia areata.
Bevorzugt sind die Verbindungen der Formel I, in denen R>, R2 und n die oben für Formel I angegebene Bedeutung besitzen, R3 Propyl oder Allyi bedeuten und das Symbol einer Linie und gestrichelten Linie für eine Einfachbindung steht; besonders bevorzugt ist die Verbindung A.
Die zu verabreichende Dosis hängt von der verwendeten Verbindung, der Verabreichungsart sowie der Behandlungsart ab. Man erhält bei grösseren Säugetieren zufriedenstellende Ergebnisse bei mehrmals täglicher lokaler Verabreichung einer 1-3%igen Wirkstoffkonzentration, z.B. 2 bis 5 mal täglich. Beispiele von geeigneten galenischen Formen sind Lotionen, Gele oder Cremen.
Pharmazeutische Zusammensetzungen für die topische Verwendung enthalten eine Verbindung der Formel I in freier Form oder in Form eines pharmazeutisch verträglichen Salzes, zusammen mit pharmazeutisch verträglichen Träger- oder Verdünnungsmitteln.

Claims (1)

  1. Patentansprüche
    1. Verwendung von Verbindungen der Formel hc ck3o
    Ia ch och3 och3
    7
    5
    10
    15
    20
    25
    30
    35
    40
    45
    50
    55
    60
    65
    CH 677 448 A5
    R'
    ,1
    CH3O
    O
    R
    3
    I
    CH
    3
    OCH3 OCH3
    worin ff für eine gegebenenfalls geschützte Hydroxygruppe,
    R2 für Wasserstoff oder eine gegebenenfalls geschützte Hydroxygruppe,
    R3 für Methyl, Ethyl, Propyl oder Allyi,
    n für 1 oder 2 und das Symbol einer Linie und gestrichelten Linie für eine Einfach- oder Doppelbindung stehen,
    in freier Form oder in Salzform,
    zur Herstellung eines Arzneimittels zur topischen Behandlung von entzündlichen und hyperproliferativen Hauterkrankungen, bzw. kutanen Manifestationen immunologisch bedingter Erkrankungen, z.B. von: Psoriasis, atopischer Dermatitis, Kontakt-Dermatitis und anderen ekzematösen Dermatitiden, se-borrhoeischer Dermatitis, Liehen planus, Pemphigus, bullösem Pemphigoid, Epidermolysis bullosa, Urticaria, Angioödemen, Vasculitiden, Erythemen, kutanen Eosinophilien, Lupus erythematodes sowie von Alopecia areata.
    2. Verwendung nach Anspruch 1 der in Anspruch 1 definierten Verbindungen der Formel I, in denen R1, R2 und n die in Anspruch 1 angegebene Bedeutung besitzen, R3 Propyl oder Allyi bedeutet und das Symbol einer Linie und gestrichelten Linie für eine Einfachbindung steht.
    3. Verwendung nach Anspruch 1 der in Anspruch 1 definierten Verbindung der Formel I, die das 17-AI-lyl-1,14-dihydroxy-12-[2-(4-hydroxy-3-methoxycyclohexyl)-1-methylvinyl]-23,25-dimethoxy-13,19,21,27-tetramethyI-11,28-dioxa-4-azatricyclo[22.3.1.04,9]octacos-18-en-2,3,10,16-tetraon darstellt.
    4. Venwendung nach Anspruch 1 der in Anspruch 1 definierten Verbindung der Formel 1, die Formel Ia
    8
    5
    10
    15
    20
    25
    30
    35
    40
    45
    50
    55
    60
    65
    CH 677 448 A5
    aufweist.
    5. Verwendung nach Anspruch 1 der in den Ansprüchen 1 bis 4 definierten Verbindungen zur Herstellung eines Arzneimittels zur topischen Behandlung von Psoriasis.
    6. Verwendung nach einem der Ansprüche 1 bis 5, dadurch gekennzeichnet, dass das Arzneimittel in Form einer Lotion, eines Gels oder einer Creme vorliegt.
    7. Verwendung nach einem der Ansprüche 1 bis 5, dadurch gekennzeichnet, dass das Arzneimittel in einer 1-3%igen Wirkstoffkonzentration vorliegt.
    g
CH4131/88A 1987-11-09 1988-11-07 CH677448A5 (de)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
AT0295287A AT400808B (de) 1987-11-09 1987-11-09 Verwendung von tricyclischen verbindungen zur herstellung von topischen arzneimitteln
DE3742805 1987-12-17

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CH677448A5 true CH677448A5 (de) 1991-05-31

Family

ID=25599336

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CH4131/88A CH677448A5 (de) 1987-11-09 1988-11-07

Country Status (13)

Country Link
US (1) US20050059694A1 (de)
EP (2) EP0596541B1 (de)
JP (1) JP2604834B2 (de)
KR (1) KR0133916B1 (de)
AU (1) AU619772B2 (de)
CH (1) CH677448A5 (de)
CY (1) CY1730A (de)
DK (1) DK175235B1 (de)
GB (1) GB2212061B (de)
HK (1) HK8694A (de)
NL (1) NL195077C (de)
PH (1) PH26083A (de)
SE (2) SE503236C2 (de)

Families Citing this family (39)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4894366A (en) 1984-12-03 1990-01-16 Fujisawa Pharmaceutical Company, Ltd. Tricyclo compounds, a process for their production and a pharmaceutical composition containing the same
US5519049A (en) * 1989-06-06 1996-05-21 Fisons Plc Macrolides for the treatment of reversible obstructive airways diseases
IE64214B1 (en) * 1989-06-06 1995-07-26 Fujisawa Pharmaceutical Co Macrolides for the treatment of reversible obstructive airways diseases
EP0406791B1 (de) * 1989-07-05 1995-02-01 Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. Wässriges flüssiges Mittel zur äusserlichen Anwendung
KR0159766B1 (ko) * 1989-10-16 1998-12-01 후지사와 토모키치로 양모제 조성물
US5215995A (en) * 1989-10-16 1993-06-01 Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. Hair revitalizing agent
US5208228A (en) * 1989-11-13 1993-05-04 Merck & Co., Inc. Aminomacrolides and derivatives having immunosuppressive activity
GB8925797D0 (en) * 1989-11-15 1990-01-04 Fisons Plc Compositions
US5064835A (en) * 1990-03-01 1991-11-12 Merck & Co., Inc. Hydroxymacrolide derivatives having immunosuppressive activity
KR0177158B1 (ko) * 1990-03-01 1999-03-20 후지사와 도모기찌로 면역억제 활성을 갖는 트리사이클릭 화합물 함유 용액 제제
JPH05504956A (ja) * 1990-03-12 1993-07-29 藤沢薬品工業株式会社 トリシクロ化合物
EP0455427A1 (de) * 1990-04-30 1991-11-06 Merck & Co. Inc. Deoxyaycrolid-Derivate mit immunsuppressiver Wirkung
US5342935A (en) * 1990-06-25 1994-08-30 Merck & Co., Inc. Antagonists of immunosuppressive macrolides
US5190950A (en) * 1990-06-25 1993-03-02 Merck & Co., Inc. Antagonists of immunosuppressive macrolides
ES2099112T3 (es) * 1990-09-04 1997-05-16 Fujisawa Pharmaceutical Co Pomadas que contienen un compuesto triciclico.
GB2248184A (en) * 1990-09-28 1992-04-01 Fujisawa Pharmaceutical Co New use of macrolide compounds for active oxygen-mediated diseases
US5143918A (en) * 1990-10-11 1992-09-01 Merck & Co., Inc. Halomacrolides and derivatives having immunosuppressive activity
US5348966A (en) * 1990-10-24 1994-09-20 Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. Method for treating pyoderma and Sezary's syndrome using FK 506 and related compounds
PH31204A (en) * 1990-11-02 1998-05-05 Fujisawa Pharmaceutical Co Pharmaceutical composition.
US5147877A (en) * 1991-04-18 1992-09-15 Merck & Co. Inc. Semi-synthetic immunosuppressive macrolides
US5250678A (en) 1991-05-13 1993-10-05 Merck & Co., Inc. O-aryl, O-alkyl, O-alkenyl and O-alkynylmacrolides having immunosuppressive activity
US5162334A (en) * 1991-05-13 1992-11-10 Merck & Co., Inc. Amino O-alkyl, O-alkenyl and O-alkynlmacrolides having immunosuppressive activity
US5565560A (en) * 1991-05-13 1996-10-15 Merck & Co., Inc. O-Aryl,O-alkyl,O-alkenyl and O-alkynylmacrolides having immunosuppressive activity
US5189042A (en) * 1991-08-22 1993-02-23 Merck & Co. Inc. Fluoromacrolides having immunosuppressive activity
US5208241A (en) * 1991-09-09 1993-05-04 Merck & Co., Inc. N-heteroaryl, n-alkylheteroaryl, n-alkenylheteroaryl and n-alkynylheteroarylmacrolides having immunosuppressive activity
ZA926812B (en) 1991-09-09 1993-04-28 Merck & Co Inc O-heteroaryl,o-alkylheteroaryl,o-alkenylheteroaryl and o-alkynylheteroaryl macrolides having immunosupressive activity
US5286730A (en) * 1991-09-17 1994-02-15 American Home Products Corporation Method of treating immunoinflammatory disease
US5286731A (en) * 1991-09-17 1994-02-15 American Home Products Corporation Method of treating immunoinflammatory bowel disease
GB9218597D0 (en) * 1992-08-25 1992-10-14 Fisons Plc Novel method of treatment
MY110603A (en) * 1993-05-27 1998-08-29 Novartis Ag Tetrahydropyran derivatives
JPH06345646A (ja) * 1993-06-08 1994-12-20 Fujisawa Pharmaceut Co Ltd ローション剤
US5693648A (en) * 1994-09-30 1997-12-02 Merck & Co., Inc. O-aryl, O-alkyl, O-alkenyl and O-alkynyl-macrolides having immunosuppressive activity
KR100434682B1 (ko) 1994-10-26 2004-08-18 노바티스 아게 약학조성물
GB9826656D0 (en) 1998-12-03 1999-01-27 Novartis Ag Organic compounds
WO2004069247A1 (en) * 2003-02-06 2004-08-19 Cipla Ltd Topical immunotherapy and compositions for use therein
US7186518B2 (en) * 2003-11-21 2007-03-06 Dade Behring Inc. Method and composition useful for determining FK 506
WO2010041684A1 (ja) 2008-10-08 2010-04-15 高田製薬株式会社 タクロリムス外用剤
EP2308468A1 (de) * 2009-10-08 2011-04-13 Novaliq GmbH Neuartige pharmazeutische Zusammensetzung mit einem Makrolid-Immunosuppressivum
CN106074367A (zh) * 2016-07-20 2016-11-09 中山大学中山眼科中心 含fk506类化合物/fkbp蛋白二聚体的药物组合物及其制备方法

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4139563A (en) * 1977-07-01 1979-02-13 Merrell Toraude Et Compagnie α-ACETYLENIC DERIVATIVES OF AMINES
DE2964567D1 (en) * 1978-12-21 1983-02-24 Lepetit Spa New 3h-naphtho(1,2-d)imidazoles, processes for preparing them, compounds for use as antiinflammatory and antimicrobial agents and compositions for that use containing them
US4411893A (en) * 1981-08-14 1983-10-25 Minnesota Mining And Manufacturing Company Topical medicament preparations
US4556654A (en) * 1983-06-28 1985-12-03 Warner-Lambert Company Antimicrobial substituted anthra[1,9-cd]pyrazol-6(2H)-ones
US4894366A (en) * 1984-12-03 1990-01-16 Fujisawa Pharmaceutical Company, Ltd. Tricyclo compounds, a process for their production and a pharmaceutical composition containing the same
CA1272953A (en) * 1984-10-08 1990-08-21 Yuji Makino Pharmaceutical composition for external use containing active-type vitamin d.sub.3

Also Published As

Publication number Publication date
HK8694A (en) 1994-02-04
GB2212061B (en) 1991-08-28
SE9402558D0 (sv) 1994-07-22
GB2212061A (en) 1989-07-19
US20050059694A1 (en) 2005-03-17
SE519137C2 (sv) 2003-01-21
EP0315978A3 (en) 1990-06-13
SE8804036D0 (sv) 1988-11-08
JP2604834B2 (ja) 1997-04-30
CY1730A (en) 1994-05-06
EP0315978B1 (de) 1994-10-26
EP0315978A2 (de) 1989-05-17
DK175235B1 (da) 2004-07-19
DK620388D0 (da) 1988-11-07
AU619772B2 (en) 1992-02-06
NL195077C (nl) 2003-07-23
PH26083A (en) 1992-02-06
SE8804036L (sv) 1989-05-10
NL8802734A (nl) 1989-06-01
SE503236C2 (sv) 1996-04-22
AU2490288A (en) 1989-05-11
GB8826066D0 (en) 1988-12-14
KR890007736A (ko) 1989-07-05
DK620388A (da) 1989-05-10
EP0596541A1 (de) 1994-05-11
KR0133916B1 (ko) 1998-04-22
EP0596541B1 (de) 2000-03-15
JPH01157913A (ja) 1989-06-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CH677448A5 (de)
DE60018881T2 (de) Extrakte von mutterkraut (tanacetum parthenium) gegen entzündliche erkrankungen
DE69520041T2 (de) Arzneimittel auf der basis von einer synergistischen mischung von metronidazol und clinamicin
DE3247062C2 (de)
DE69027057T2 (de) Retinal, dessen Derivate und deren therapeutische Verwendung
US5639758A (en) Topical application of spiperone or derivatives thereof for treatment of pathological conditions associated with immune responses
DE60212683T2 (de) Pharmazeutische und kosmetische zusammensetzungen mit oxy-gruppen-tragenden aromatischen aldehyden
DE2615140A1 (de) Vehiculumsystem
DE69804130T2 (de) Verwendung eines gemischs aus einem diol und einer alpha-hydroxysäure zur behandlung hyperkeratotischer hauterkrankungen
DE60026491T2 (de) Melagatran zur behandlung von entzündungen
DE69502223T2 (de) Neue Verwendung von 1Alpha-fluor-25-hydroxy-16-en-23-yn-cholecalciferol
EP1035831B1 (de) Verwendung von kohlensäure zur stabilisierung oder erhöhung der epidermalen ceramidsyntheserate
Black et al. Toxicity of pyrithiones
DE68910275T2 (de) Arzneimittel und Methode zur Steigerung der mikrozirkulätorischen Durchfluss-Rate sowie des Volumens in den Kapillargefässen der Haut.
EP0316780B1 (de) Verwendung von Ethisterone zur topischen Behandlung von Akne oder androgenetischer Alopezie
DE3844904C2 (de) Neue Verwendung von 11,28-Dioxa-4-azatricyclo-[22.3.1.0·4·,·9·]octacos-18-en-Derivaten
AT407957B (de) Neue verwendung von 11,28-dioxa-4-azatricyclo- (22.3.1.04,9)octacos-18-en-derivaten und sie enthaltende pharmazeutische zubereitungen
DE3838035C2 (de) Neue Verwendung von 11,28-dioxa-4-azatricyclo[22.3.1.O·4··,··9·]octacos-18-en-Derivaten
US5366971A (en) Use of 11,28-dioxa-4-azatricyclo[22.3.1.04,9 ]octacos-18-ene derivatives and pharmaceutical compositions containing them
DE2557431A1 (de) Topische antimikrobielle praeparate
EP0294538B1 (de) Verwendung von Nigerizin zur Herstellung eines Mittels zur Behandlung von Virus-Erkrankungen
DE10164553A1 (de) Verwendung von Verfahren zur Induktion oder Inhibierung der Oxidation von Sebumlipiden nach Applikation von Testsubstanzen zum Screening hautspezifischer photosensibilisierender, phototoxischer und/oder photoprotektiver Wirkungen von dermatologischen, pharmazeutischen und kosmetischen Wirkstoffen bzw. Zubereitungen
AT400808B (de) Verwendung von tricyclischen verbindungen zur herstellung von topischen arzneimitteln
EP0789576B1 (de) Extrakt von crataegus und seine verwendung
Eibach et al. Dextran 40 Behandlung des akuten akustischen Traumas

Legal Events

Date Code Title Description
PFA Name/firm changed

Owner name: SANDOZ AG TRANSFER- NOVARTIS AG

NV New agent

Representative=s name: A. BRAUN BRAUN, HERITIER, ESCHMANN AG

PUE Assignment

Owner name: FUJISAWA PHARMACEUTICAL CO., LTD.

Free format text: NOVARTIS AG#SCHWARZWALDALLEE 215#4058 BASEL (CH) -TRANSFER TO- FUJISAWA PHARMACEUTICAL CO., LTD.#4-7, DOSHOMACHI 3-CHOME#CHUO-KU, OSAKA-SHI, OSAKA-FU (JP)

PFA Name/firm changed

Owner name: ASTELLAS PHARMA INC.

Free format text: YAMANOUCHI PHARMACEUTICAL CO., LTD.#3-11, NIHONBASHI-HONCHO 2-CHOME, CHUO-KU#TOKYO (JP) -TRANSFER TO- ASTELLAS PHARMA INC.#3-11, NIHONBASHI-HONCHO 2-CHOME, CHUO-KU#TOKYO 103-8411 (JP)

PUE Assignment

Owner name: YAMANOUCHI PHARMACEUTICAL CO., LTD.

Free format text: FUJISAWA PHARMACEUTICAL CO., LTD.#4-7, DOSHOMACHI 3-CHOME#CHUO-KU, OSAKA-SHI, OSAKA-FU (JP) -TRANSFER TO- YAMANOUCHI PHARMACEUTICAL CO., LTD.#3-11, NIHONBASHI-HONCHO 2-CHOME, CHUO-KU#TOKYO (JP)

PFA Name/firm changed

Owner name: ASTELLAS PHARMA INC.

Free format text: ASTELLAS PHARMA INC.#3-11, NIHONBASHI-HONCHO 2-CHOME, CHUO-KU#TOKYO 103-8411 (JP) -TRANSFER TO- ASTELLAS PHARMA INC.#3-11, NIHONBASHI-HONCHO 2-CHOME, CHUO-KU#TOKYO 103-8411 (JP)

PL Patent ceased