BRPI0508814B1

BRPI0508814B1 - derivados de carbolina, bem como uso dos mesmos e composição farmacêutica

Info

Publication number: BRPI0508814B1
Application number: BRPI0508814-3A
Authority: BR
Inventors: Young-Choon Moon; Liangxian Cao; Nadarajan Tamilarasu; Hongyan Qi; Soongyu Choi; William Joseph Lennox; Donald Thomas Corson; Seongwoo Hwang
Original assignee: Ptc Therapeutics, Inc
Priority date: 2004-03-15
Filing date: 2005-03-15
Publication date: 2020-11-10
Also published as: BRPI0508814A; AU2005222632A1; BRPI0508814B8; US20070281962A2; PL1737461T3; KR20120073287A; WO2005089764A1; KR20070026456A; AU2005222632B2; EP1737461B1; NO338270B1; EA201200555A1; IL178079A0; PT1737461E; CN1980672A; CN102408425A; WO2005089764A9; HK1104961A1; UA92317C2; JP2007529534A

Abstract

DERIVADOS DE CARBOLINA ÚTEIS NA INIBIÇÃO DA ANGIOGÊNESE. De acordo com a presente invenção, foram identificados compostos que inibem a expressão de VEGF pós-transcripcionalmente, e são proporcionados métodos para sua aplicação. Em um aspecto da invenção, são proporcionados compostos úteis na inibição da produção de VEGF, na inibição da angiogênese, e/ou no tratamento do câncer, da retinopatia diabética ou da degeneração macular exudativa. Em outro aspecto da invenção, são proporcionados métodos para a inibição da produção de VEGF, a inibição da angiogênese, e/ou o tratamento do câncer, da retinopatia diabética ou da degeneração macular exudativa usando os compostos da invenção.

Description

REFERÊNCIA CRUZADA A PEDIDO RELACIONADO

[0001] Este pedido reivindica o benefício de e prioridade ao Requerimento Provisório dos Estados Unidos N° 60/552.725, arquivado em 15 de março de 2004, cujo pedido é incorporado a este relatório descrito por meio de referência.

Campo da Invenção

[0002] A presente invenção refere-se a métodos e compostos para inibir a angiogênese. Mais particularmente, a presente invenção se refere a métodos e compostos para inibir a angiogênese.

Antecedentes da Invenção

[0003] A angiogênese aberrante tem um papel crucial na patogênese de numerosas doenças, inclusive distúrbios malignos, isquêmicos, inflamatórios e imunes (Carmeliet, Nat. Med., 9(6):653-60 (2003), Ferrara, Semin. Oncol., 29(6Suppl 16): 10-4 (2002)). Destes distúrbios os mais conhecidos são câncer, degeneração macular exudativa e retinopatia diabética (DR), cujos dois últimos são a causa pirncipal de cegueira nos Estados Unidos (Witmer et al., Prog. Retin Eye Res.,22(1): 1-29 (2003), Clark et al., Nat. Rev. Drug Discovery, 2:448-459 (2003)). Durante a última década o entendimento da base molecular da angiogênese cresceu consideravelmente. Foram identificados numerosas citoquinas e fatores de crescimento que estimulam a angiogênese, tais como VEGF, FGF-2, PDGF, IGF-1, TGF, TNF-α, G-CSF (Ferrara et ai., Nat. Med., 5(12):1359-64 (1999), Kerbel et al., Nat. Rev. Cancer,2(10):727-39 (2002), Rofstad et ai., Cancer Res.,60(17):4932-8 (2000)). Entre estes fatores de crescimento, o Fator de Crescimento Endotelial Vascular (VEGF, em inglês, Vascular Endothelial Growth Factor)desempenha um papel central na angiogênese (Ferrara, Semin. Oncol., 29(6Suppl 16): 10-4 (2002)).

[0004] VEGF, também conhecido como VEGF-A, foi inicialmente identificado por sua capacidade para induzir a permeabilidade vascular e estimular a proliferação de células endoteliais vasculares (Leung et al., Science, 246:1306-1309 (1989), Plouet et ai., EMBO J., 8:3801- 3806 (1989), Connolly et al., J. Biol. Chem., 264:20017-20024 (1989)). VEGF é codificado por um único gene que dá origem a quatro isoformas por junção alternativa (Tischer et al., J. Biol. Chem., 266:11947-11954 (1991)). Todas as quatro isoformas partilham a mesma 5’-UTR incomumente longa e rica em GC, bem como uma 3’- UTR que inclui múltiplos determinantes de estabilidade de RNA. Os receptores VEGFR-2 (também conhecido como KDR ou Flk-1) e VEGFR-1 (previamente conhecido como Flt1) reconhecem a forma dimérica de VEGF (Ortega et al., Front. Biosci., 4:D141-52 (1999), Sato et al., Annals of New York Academy of Science, 902:201-207, (2000)). O receptor VEGFR-2 altamente específico é expressado em células endoteliais. A ligação de VEGF ao receptor VEGFR-2 ativa a atividade da tirosina quinase do receptor, levando a proliferação de células endoteliais, diferenciação e formação de vasos primitivos (Shalaby et al., Nature, 376:62-66, (1995)). VEGFR-1 inibe o crescimento de células endoteliais ou agindo como uma isca ou suprimindo caminhos de sinalização através de VEGFR-2 (Fong et al., Nature, 376:66-70 (1995)).

[0005] Mais de 30 anos atrás, foi proposto que a inibição da angiogênese tumoral poderia ser uma abordagem eficaz para o tratamento do câncer (Folkman, N. Engl. J. Med., 285(21):1182-6 (1971)). Foi demonstrado que VEGF e seu receptor têm um papel central na angiogênese tumoral, especialmente nos estágios iniciais do crescimento tumoral (Hanahan et al., Cell,86:353-364, 1996)). Na verdade, níveis aumentados de expressão de VEGF têm sido correlacionados com densidade microvaso em tecidos tumorais primários (Gasparini et al., J. Natl. Cancer Inst.,89:139-147 (1997)). Além disso, níveis aumentados do transcripto VEGF são encontrados em virtualmente todos os tumores sólidos comuns (Ferrara et al., Endocr. Rev., 18:4-25, 1997)). Em geral, os pacientes com tumor têm altos níveis de VEGF comparados com os níveis de VEGF em indivíduos sem tumor, e altos níveis de VEGF no soro/plasma estão associados com mau prognóstico (Dirix et al., Br. J. Cancer,76:238- 243 (1997)). Consistente com o papel do VEGF na angiogênese tumoral, células-tronco embrionárias VEGF nulas apresentaram uma capacidade dramaticamente reduzida para formar tumores em camundongos nu (Carmeliet et al., Nature,380:435-439 (1996)). A evidência direta para o envolvimento de VEGF na gênese tumoral foi demonstrada usando anticorpos específicos contra VEGF em xenoenxertos humanos implantados em camundongos nu (Kim et al., Nature,362:841-844 (1993), Hichlin et al., Drug Discovery Today, 6:517-528 (2001)). Nestes estudos, a inibição do crescimento tumoral se correlacionou positivamente com redução da formação de vasos nos tumores tratados com anticorpos. Experimentos subseqüentes usando os receptores solúveis comprovaram a importância da atividade de VEGF no crescimento tumoral (Lin et al., Cell Growth Differ.,9(1):49-58 (1998)), e demonstraram que a inativação de VEGF por tratamento com anticorpos específicos resultou diretamente em uma supressão quase completa de neovascularização associada com tumor (Borgstrom et al., Prostate,35:1-10 (1998), Yuan et al.. Proc. Natl. Acad. Sei. USA, 93:14765-14770 (1996)).

[0006] Na degeneração macular exudativa e na retinopatia diabética, experimentos pré-clínicos e testes clínicos demonstraram que a super produção de VEGF é crucial para a neovascularização aberrante retinal ou choroidal (revisado em Witmer et al., Prog. Retin Eye Res.,22(1): 1-29 (2003)). Foi obtida evidência de que os níveis de VEGF intra-ocular são fortemente correlacionados com a neovascularização retinal / coroidal ativa (CNV) em pacientes com doenças tais como retinopatia diabética e degeneração macular de forma úmida (Funatsu et al.., Am. J. Ophthalmol.,733(4):537-43 (2002), Lip et al., Ophthalmology,708(4):705-10 (2001)). Além disso, estudos usando camundongos transgênicos demonstraram que a superexpressão de VEGF em células epiteliais do pigmento retinal ou células fotorreceptoras resulta em neovasucularização coroidal ou retinal (Schwesinger et al., Am. J. Pathol.,758(3):1161-72 (2001), Ohno-Matsui et al., Am. J. Pathol., (2002)). Em estudos recentes anticorpos neutralizantes, receptor solúvel, antagonistas de receptores, ou siRNA se comprovaram eficazes na redução da formação de vasos sangüíneos mediada por VEGF em modelos animais e na clínica. (Eyetech Study Group, 22(2): 143-52 (2002), Krzystolik et al., Arch. Ophthalmol., 120(3):338-46 (2002), Shen et al., Lab Invest.,82(2):167-82 (2002), Honda et al., Gene Then,7(11):978- 85 (2000), Saishin et al., J. Cell Physiol.,795(2):241-8 (2003)).

[0007] A expressão de VEGF é regulada por uma série de fatores e agentes inclusive citoquinas, fatores de crescimento, hormônios esteróides e produtos químicos, e mutações que modulam a atividade de oncogenes tais como ras ou o gene supressor tumoral VHL (Maxwell et al., Nature,399:271-275 (1999), Rak et al., Cancer Res., 60:490-498 (2000)). Não obstante, a hipóxia é o sinal fisiológico mais significante para regular a expressão de VEGF. A hipóxia resulta em aumento da expressão de VEGF aumentando tanto o índice de transcrição quanto a estabilidade do transcripto VEGF (Ikeda et al., J. Biol. Chem. 270:19761-19766 (1995), Stein et al., Mol. Cell. Biol. 78:3112-3119 (1998), Levy et al., J. Biol. Chem. 277:2746-2753 (1996)). 0 fator indutível por hipóxia 1α (HIF-1a) é um fator de transcrição que aumenta a expressão genética de VEGF em células que estão sofrendo hipóxia ligando ao elemento de resposta à hipóxia (HRE) localizado no promotor de VEGF (Liu et al., Circ. Res., 77:638- 643 (1995), Semenza, Annu. Rev. Cell. Dev. Biol.,5:551-578 (1999)). A estabilidade do mRNA de VEGF também é grandemente reforçada em conseqüência da ligação de fatores a elementos na 3’-UTR (Goldberg et al., J. Biol. Cell. J. Biol. Chem., 277(16): 13635-40 (2002)). Além disso, a iniciação da translação do transcripto VEGF é unicamente regulada . Sob condições hipóxicas, a translação da maioria dos transcriptos celulares mediada por processo de iniciação de translação cap-dependente é muito prejudicada (Kraggerud et al., Anticancer Res., 75:683-686 (1995)). A iniciação da translação do mRNA de VEGF, no entanto, é única sob condições hipóxicas pelo fato de que é mediada através de um sítio de entrada de ribossoma interno (IRES) dentro da 5’UTR do VEGF (Stein et al., Mol. Cell. Biol. 78:3112-3119 (1998), Levy et al., J. Biol. Chem. 277:2746-2753 (1996), Huez et al., Mol. Cell. Biol., 78:6178-6190 (1998), Akiri et al., Oncogene,77:227-236 (1998)).

[0008] Há um grande volume de evidência experimental indicando que o crescimento tumoral pode ser inibido pela prevenção da neovascularização (Lin et al., Cell Growth Differ.,9(1):49-58 (1998), Zhu et al., Invest. New Drugs, 77:195-212 (1999)). Os vasos tumorais são geralmente imaturos e sofrem constantemente remodelação (Carmeliet, Nat. Med., 9(6):653-60 (2003), Carmeliet et al., Nature, 407:249-257 (2000)). A angiogênese ativa e aberrante é o resultado de uma disrupção no balanço normal de fatores pró-angiogênicos e antiangiogênicos, inclusive várias citoquinas, fatores de crescimento e hormônios esteróides. Apesar da complexidade da regulação da angiogênese tumoral, evidência acumulada indica que ter por alvo um único fator pró-angiogênico pode ser suficiente para inibir a angiogênese tumoral e suprimir o crescimento tumoral (Kim et al., Nature,362:841-844 (1993), Millauer et al., Nature, 367.576-579 (1994), Fong et al., Cancer Res.,59:99-106 (1999)). Entre muitos alvos de angiogênese, VEGF e seu receptor são mais atraentes (Carmeliet, Nat. Med., 9(6):653-60 (2003), Ortega et al., Front. Biosci., 4:D141-52 (1999)). Conforme mencionado acima, o tratamento com um anticorpo monoclonal tendo por alvo especificamente VEGF inibiu o crescimento de tumores em xenoenxertos humanos implantados em camundongos nude. Subseqüentemente, várias abordagens designadas a inativar a sinalização de VEGF foram testadas em modelos tumorais e se comprovaram altamente eficazes em uma ampla gama de linhagens de células tumorais inclusive carcinomas, sarcomas e gliomas (Ferrara et al., Endocr. Rev., 78:4-25, 1997), Kim et al., Nature,362:841-844 (1993), Millauer et al., Nature,367:576-579 (1994), Fong et al., Cancer Res.,59:99-106 (1999), Geng et al., Cancer Res.,67:2413-2419 (2001)). Além disso, a inibição de VEGF por anticorpo anti-VEGF não resultou em efeitos colaterais significativos em roedores ou primatas plenamente desenvolvidos (Ryan et al, Toxicol. Pathol.,27:78-86 (1999), Ferrara et al., Nat. Med., 4:336-340 (1998)). Considerados juntos, estes resultados indicam que VEGF é um alvo válido para o desenvolvimento de terapia tumoral. Na verdade, uma série de provas clínicas estão em andamento usando inibidores de VEGF (Matter, Drug Discovery Today, 6:1005-1024 (2001), Hichlin etal., Drug Discovery Today, 6:517-528 (2001)).

[0009] Embora vários fatores pró-angiogênicos estejam implicados na patologia da degeneração macular exudativa relacionada com a idade, o VEGF parece ser o mais crucial na patogênese e no desenvolvimento desta doença (Witmer et al., Prog. Retin Eye Res., 22(1): 1-29 (2003), Holash et al., Science, 284:1994-1998 (1999)). Dados de experimentos pré-clínicos e provas clínicas demonstraram que o bloqueio de VEGF somente é suficiente para aliviar ou estabilizar a progressão da doença (Eyetech Study Group, 22(2): 143- 52 (2002), Krzystolik et al., Arch. Ophthalmol.,120(3):338-46 (2002), Shen et al., Lab Invest.,82(2): 167-82 (2002), Honda et al., Gene Then, 7(11):978-85 (2000), Saishin et al., J. Cell Physiol.,795(2):241-8 (2003)). Por exemplo, a inibição da sinalização de VEGFR por um inibidor da tirosina quinase específico é suficiente para prevenir completamente a neovasucularização retinal em uma retinopatia murina de modelo de prematuridade (Ozaki H, Seo MS, Ozaki et al., Am. J. Pathol.,756(2):697-707 (2000)). Além disso, foi demonstrado recentemente que pequenos RNAs interferentes (siRNA) dirigidos contra VEGF murino inibiram significativamente a neovasucularização ocular depois de fotocoagulação a laser em um modelo de camundongo (Reich et al., Mol. Vis. 30;9:210-6 (2003)). Estes resultados indicam que a inibição seletiva da expressão de VEGF é obtenível e oferece validação desta abordagem para o tratamento de doenças neovasculares oculares tais como degeneração macular exudativa e retinopatia diabética.

[00010] Foram usadsa três abordagens para inibir a atividade de VEGF, inclusive (1) neutralização da atividade de VEGF usando um anticorpo específico, receptor de VEGF solúvel ou aptâmero oligos contra a interação VEGF/VEGFR (Kim et al., Nature,362:841-844 (1993), Lin et al., Cell Growth Differ.,9(1):49-58 (1998), Borgstrom et al., Prostate,35:1-10 (1998), Zhu etal., Invest. New Drugs, 77:195-212 (1999), Millauer et al., Nature, 367:576-579 (1994), Asano et al., Jpn. J. Cancer Res., 90(1):93-100 (1999), Brekken et al., Cancer Res., 60(18):5117-24 (2000)); (2) inibição da transdução de sinal mediada por VEGFR por inibidores de tirosina quinases de moléculas pequenas específicas (Fong et al., Cancer Res., 59:99-106 (1999), Wedge et al., Cancer Res., 60(4):970-5 (2000), Laird ef al., Cancer Res., 60(15) :4152-60 (2000)); e (3) inibição da expressão de VEGF/VEGFR usando anti-sentido, siRNA ou ribozima (Reich et al., Mol. Vis. 30,9:210-6 (2003), Parry et al., Nucleic Acids Res., 27:2569-2577 (1999), Ellis et al., Surgery, 120:871-878 (1996), Filleur et al., Cancer Res., 63(14):3919-22 (2003)). Embora todas estas abordagens apresentem importante inibição da angiogênese in vivo, todas elas possuem importantes limitações. Por exemplo, as proteínas terapêuticas (anticorpo e receptores solúveis) ou oligos (anti-sentido, siRNA e ribozima) são grandes moléculas com baixa permeabilidade que geralmente requerem administração parenteral e são de produção cara. Para tratamento da neovasucularização ocular crônica, múltiplas injeções podem ser impraticáveis devido a potenciais complicações tais como descolamento da retina e infecção relacionada com o procedimento. Além disso, os inibidores das tirosina quinases têm o potencial de limitada especificidade. O VEGF é constitutivamente expressado em um baixo nível nos olhos normais e outros tecidos e portanto pode ser nocivo suprimir completamente a função do VEGF por meio da administração de anticorpo ou inibidores da tirosina quinase sistemicamente, especialmente para pacientes com AMD e reação de degeneração (RD) muitos dos quais também são hipertensos (Giles et al., Cancer,97(8): 1920-8 (2003), Sugimoto et al., J. Biol. Chem., 278(15): 12605-8 (2003), Bergsland et al., American Society of Clinical Oncology 36th Annual Meeting, 20-23 May, 2000, New Orleans, LA, USA, Abstract 939), DeVore et al., American Society of Clinical Oncology 36th Annual Meeting, 20-23 May, 2000, New Orleans, LA, USA, Abstract 1896).

[00011] Portanto, permanece a necessidade de desenvolver, caracterizar e otimizar moléculas guias para o desenvolvimento de novos fármacos antiangiogênese. Por conseguinte, é um objetivo da presente invenção proporiconar os compostos referidos.

[00012] Todos os documentos referidos neste relatório descritivo são incorporados por meio de referência no presente requerimento como não obstante plenamente determinados neste relatório.

Sumário da Invenção

[00013] De acordo com a presente invenção, foram identificados compostos que inibem a expressão de VEGF pós- transcripcionalmente, e são proporcionados métodos para sua aplicação.

[00014] Em um aspecto da invenção, são proporcionados compostos de Fórmulas (I), (II) e (III), inclusive Fórmulas (l-a) a (l-l), os quais são úteis na inibição da produção de VEGF, na inibição da angiogênese, e/ou no tratamento do câncer, da retinopatia diabética ou da degeneração macular exudativa.

[00015] Em outro aspecto da invenção, são proporcionados métodos para a inibição da produção de VEGF, a inibição da angiogênese, e/ou o tratamento de câncer, retinopatia diabética, artrite reumatóide, psoríase, aterosclerose, inflamação crônica, outros distúrbios e doenças relacionados com inflamação crônica, obesidade, ou degeneração macular exudativa usando os compostos descritos neste relatório.

[00016] Em uma modalidade, a invenção se refere a métodos para inibir a produção de VEGF compreendendo a administração de uma quantidade inibidora da expressão de VEGF de no mínimo um composto da invenção a um indivíduo que necessite da mesma.

[00017] Em outra modalidade, são proporcionados métodos para inibir a angiogênese compreendendo a administração de uma quantidade antiangiogênica de no mínimo um composto da invenção a um indivíduo que necessite da mesma.

[00018] Em ainda outra modalidade, são proporcionados métodos para o tratamento de câncer, retinopatia diabética, artrite reumatóide, psoríase, aterosclerose, inflamação crônica, outros distúrbios e doenças relacionados com inflamação crônica, obesidade, ou degeneração macular exudativa compreendendo a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de no mínimo um composto da invenção a um indivíduo que necessite da mesma.

[00019] Estes e outros aspectos da invenção serão mais plenamente entendidos com referência às seguintes modalidades preferenciais e descrição detalhada.

Breve Descrição dos Desenhos

[00020] Figura 1. A Figura 1 ilustra a inibição da expressão de VEGF por um determinado composto da invenção.

[00021] Figura 2. A Figura 2 ilustra que a atividade da fosfodiesterase 5 (PDE-5) não é realizada por alguns compostos da invenção.

Descrição Detalhada da Invenção

[00022] A regulação para cima aberrante do fator de crescimento endotelial vascular (VEGF), um fator chave para a angiogênese, é um importante colaborador para a patogênese de estados de doença tais como câncer, retinopatia diabética, artrite reumatóide, psoríase, aterosclerose, inflamação crônica, outros distúrbios e doenças relacionados com inflamação crônica, obesidade, ou degeneração macular exudativa. De acordo com a presente invenção, foram identificados compostos que inibem a expressão de VEGF pós- transcripcionalmente, e proporcionados métodos para sua aplicação. Os compostos da invenção têm atividade nanomolar a sub-nanomolar para a inibição da expressão de VEGF.

A. Compostos da Invenção

[00023] Em um aspecto da invenção, são proporcionados compostos os quais são úteis na inibição da produção de VEGF, na inibição da angiogênese, e/ou no tratamento do câncer, da retinopatia diabética ou da degeneração macular exudativa. Em algumas modalidades, os compostos da invenção inibem especificamente a produção de VEGF, ao passo que em outras modalidades, os compostos da invenção inibem a expressão de VEGF bem como a de outros fatores de angiogênese tais como FGF-2. A este respeito, um inibidor pan-angiogênico pode ser preferencial em métodos de inibição do crescimento tumoral, ao passo que inibidores VEGF específicos podem ser preferenciais para o tratamento de distúrbios neovasculares oculares (Eyetech Study Group, 22(2): 143-52 (2002)).

[00024] Os compostos da invenção incluem de modo geral um ou mais centros quirais, e deste modo podem existir como misturas racêmicas (R/S) ou como composições enantiomericamente puras. Os compostos podem existir como (/?) ou (S) isômero (quando um centro quiral está presente) em composições enantiomericamente puras. Em uma modalidade preferencial, os compostos da invenção são os (S) isômeros e podem existir como composições enantiomericamente puras compreendendo somente o (S) isômero. Conforme uma pessoa versada na técnica reconhecerá, quando mais de um centro quiral está presente, os compostos da invenção podem existir como (/?,/?), (R,S), (S,R), (S,S), e etc. isômero. Os compostos preferenciais incluíram (S,S) e (S,R) isômeros.

[00025] Conforme usado neste relatório, “enantiomericamente puras” se refere a composições consistindo essencialmente em um único isômero, preferencialmente consistindo em 90%, 92%, 95%, 98%, 99%, ou 100% de um único isômero.

[00026] Os compostos preferenciais da presente invenção úteis na inibição da produção de VEGF incluem os da Fórmula (I) conforme mostrado abaixo.

[00027] em que,

[00028] X é hidrogênio; um grupo Ci a C6alquila, opcionalmente substituído por um ou mais halogênios; um grupo hidroxila; um halogênio; um grupo Ci a Cs alcóxi, opcionalmente substituído por um grupo Ce a Cw arila;

[00029] A é C ou N;

[00030] B é C ou N, com a condição de que no mínimo um de A ou B seja N, e que quando A for N, B seja C;

[00031] Ri é um grupo hidroxila; um grupo Ci a Cs alquila, opcionalmente substituído por um grupo alquiltio, um grupo heteroarila de 5 a 10 membros, um grupo Cs a Cw arila opcionalmente substituído por no mínimo um grupo selecionado de modo independente Ro; um grupo C2 a Cs alquienila; um grupo C2 a Cs alquinil ; um grupo heterociclo de 3 a 12 membros, em que 0 grupo heterociclo é opcionalmente substituído por no mínimo um grupo halogênio, oxo, amino, alquilamino, acetamino, tio, ou alquiltio selecionado de modo independente; um grupo heteroarila de 5 a 12 membros, em que 0 grupo heteroarila é opcionalmente substituído por no mínimo um grupo halogênio, oxo, amino, alquilamino, acetamino, tio, ou alquiltio selecionado de modo independente; ou um grupo Cs a Cw arila, opcionalmente substituído por no mínimo um grupo selecionado de modo independente Ro;

[00032] Ro é um halogênio; um grupo ciano; um nitro; uma sulfonila, em que a sulfonila é opcionalmente substituída por um grupo Ci a Ce alquila ou um heterociclo de 3 a 10 membros; um grupo amino, em que o grupo amino é opcionalmente substituído por um grupo Ci a Ce alquila, -C(O)-Rb, -C(O)O-Rb, uma sulfonila, uma alquilsulfonila, um grupo heterociclo de 3 a 10 membros opcionalmente substituído por um grupo -C(O)O-Rn; -C(O)-NH-Rbj um heterociclo de 5 a 6 membros; um grupo heteroarila de 5 a 6 membros; um grupo Ci a Ce alquila, em que o grupo alquila é opcionalmente substituído por no mínimo um grupo hidroxila, halogênio, amino, ou heterociclo de 3 a 12 membros selecionado de modo independente, em que o grupo amino e o grupo heterociclo são opcionalmente substituídos por no mínimo um selecionado de modo independente Ci a C4 grupo alquila, cujo grupo Ci a C4 alquila é opcionalmente substituído por no mínimo um grupo Ci a C4 alcóxi selecionado de modo independente, grupo amino, grupo alquilamino, ou grupo heterociclo de 5 a 10 membros; um grupo -C(O)- Rn; ou um grupo -ORa;

[00033] Ra é hidrogênio; C2 a C8 alquileno; um grupo -C(O)O-Rb ; um grupo -C(O)-NH-Rb; um grupo Ci a C8alquila, em que 0 grupo alquila é opcionalmente substituído por no mínimo um selecionado de modo independente selecionado de modo independente hidroxila, halogênio, Ci a C4 alcóxi, amino, alquilamino, acetamida, -C(O)-Rb, - C(O)O-Rb, C6a C10 arila, heterociclo de 3 a 12 membros, ou heteroarila de 5 a 12 membros, adicionalmente em que 0 alquilamino é opcionalmente substituído por um grupo hidroxila, a Ci a C4 alcóxi, ou um grupo heteroarila de 5 a 12 membros opcionalmente substituído por um grupo Ci a C4 alquila, adicionalmente em que a acetamida é opcionalmente substituída por um grupo Ci a C4 alcóxi, sulfonila, ou alquilsulfonila, adicionalmente em que 0 grupo heterociclo é opcionalmente substituído por um grupo Ci a C4 alquila opcionalmente substituída por um grupo hidroxila, -C(O)-Rn, -C(O)O-Rn, ou um grupo oxo;

[00034] Rb é hidroxila; um amino; um alquilamino, em que o alquilamino é opcionalmente substituído por um grupo hidroxila, um amino, um alquilamino, um Ci a C4 alcóxi, um heterociclo de 3 a 12 membros opcionalmente substituído por no mínimo um grupo selecionado de modo independente Ci a Ce alquila, oxo, -C(O)O-Rn, ou uma heteroarila de 5 a 12 membros opcionalmente substituído por um grupo Ci a C4 alquila; um grupo Ci a C4 alcóxi; um grupo C2 a Cs alquenila; um grupo C2 a Cs alquinila; um grupo CΘ a C10 arila, em que 0 grupo arila é opcionalmente substituída por no mínimo um halogênio selecionado de modo independente ou Ci a C4 alcóxi; um grupo heteroarila de 5 a 12 membros; grupo heterociclo de 3 a 12 membros, em que o heterociclo é opcionalmente substituído por no mínimo uma acetamida selecionado de modo independente, -C(O)O-Rn, heterociclo de 5 a 6 membros, ou Ci a C6 alquila opcionalmente substituída por um grupo hidroxila, Ci a C4 alcóxi, grupo amino, ou grupo alquilamino; ou um grupo Ci a C8 alquila, em que 0 grupo alquila é opcionalmente substituída por no mínimo um grupo selecionado de modo independente Ci a C4 alcóxi, Cs a C10 arila, amino, ou grupo heterociclo de 3 a 12 membros, em que os grupos amino e heterociclo são opcionalmente substituídos por no mínimo um grupo selecionado de modo independente Ci a Cs alquila, oxo, ou -C(O)O-Rn;

[00035] R2 é um hidrogênio; uma hidroxila; um grupo heteroarila de 5 a 10 membros; um grupo Ci a Cs alquila, em que 0 grupo alquila é opcionalmente substituído por um grupo hidroxila, um Ci a C4 alcóxi, um heterociclo de 3 a 10 membros, um grupo heteroarila de 5 a 10 membros, ou grupo C6a C10 arila; um grupo -C(O)-Rc ; um grupo - C(O)O-Rd grupo; um grupo -C(O)-N(RdRd) ; um grupo -C(S)-N(RdRd) ; um grupo -C(S)-O-Rθ ; um grupo -S(O2)-Rθ grupo; um grupo -C(NRe)- S-Re; ou um grupo -C(S)-S-Rf;

[00036] Rc é hidrogênio; um amino, em que o amino é opcionalmente substituído por no mínimo um grupo selecionado de modo independente Ci a Ce alquila ou Ce a Cw arila ; um grupo Cβ a C10 arila, em que a arila é opcionalmente substituída por no mínimo um halogênio selecionado de modo independente, haloalquila, hidroxila, Ci a C4 alcóxi, ou grupo Ci a C6 grupo; -C(O)-Rn; um heterociclo de 5 a 6 membros, em que o heterociclo é opcionalmente substituído por um grupo -C(O)-Rn ; um grupo heteroarila de 5 a 6 membros; um grupo tiazolamino; um grupo Ci a C8alquila, em que o grupo alquila é opcionalmente substituído por no mínimo um halogênio selecionado de modo independente, a Ci a C4 alcóxi, um fenilóxi, a Ce a Cw arila, - C(O)-Rn, -O-C(O)-Rn, hidroxila, ou grupo amino, opcionalmente substituído por um grupo -C(O)O-Rn;

[00037] Rd é de modo independente hidrogênio; um grupo C2 a Cs alquenil; um grupo C2 a Cs alquinila; um grupo Cs a Cw arila, em que o grupo arila é opcionalmente substituída por no mínimo um halogênio selecionado de modo independente, nitro, Ci a Cs alquila, -C(O)O-Re, ou -ORe; ou um grupo Ci a Cs alquila, em que o grupo alquila é opcionalmente substituído por no mínimo um grupo halogênio selecionado de modo independente, Ci a C4alquila, Ci a C4 alcóxi, fenilóxi, Cs a Cw arila, heteroarila de 5 a 6 membros, -C(O)-Rn, -O- C(O)-Rn, ou hidroxila, em que o grupo Cs a Cw arila é opcionalmente substituído por no mínimo um grupo halogênio ou haloalquila selecionado de modo independente;

[00038] Re é um hidrogênio; um grupo Ci a Cs alquila, em que o grupo alquila é opcionalmente substituído por no mínimo um grupo halogênio ou alcóxi selecionado de modo independente; ou um grupo Cs a Cw arila, em que o grupo arila é opcionalmente substituído por no mínimo um grupo halogênio ou alcóxi selecionado de modo independente;

[00039] Rf é um grupo Ci a Cealquila, opcionalmente substituído por no mínimo um grupo halogênio selecionado de modo independente, hidroxila, Ci a C4 alcóxi, ciano, Cea C10 arila, ou -C(O)- Rn, em que 0 grupo alcóxi pode ser opcionalmente substituído por no mínimo um grupo Ci a C4 alcóxi e 0 grupo arila pode ser opcionalmente substituído por no mínimo um grupo halogênio selecionado de modo independente, hidroxila, Ci a C4 alcóxi, ciano, ou Ci a Cealquila;

[00040] Rn é um grupo hidroxila, Ci a C4 alcóxi, amino, ou Ci a Ce alquila;

[00041] R3 é hidrogênio ou -C(O)-Rg;

[00042] Rg é um grupo hidroxila;; um grupo amino, em que 0 amino é opcionalmente substituído por um grupo Ce a C10 cicloalquil ou um grupo heteroarila de 5 a 10 membros; ou um grupo heterociclo de 5 a 10 membros, em que 0 grupo heterociclo é opcionalmente substituído por um grupo -C(O)-Rn; e

[00043] néO, 1,2, ou 3.

[00044] Conforme será evidente para uma pessoa versada na técnica, os compostos da Fórmula (I) compreendem no mínimo um estereocentro (por exemplo, no substituinte Ri), e podem existir como uma mistura racêmica ou como uma composição enantiomericamente pura. Em uma modalidade preferencial, os compostos da Fórmula (I) são 0 (S) isômero, em uma composição enantiomericamente pura.

[00045] Conforme usado neste relatório, 0 termo “alquila” se refere de modo geral a radicais hidrocarbil saturados de configuração reta, ramificada ou cíclica incluindo metila, etila, n-propila, isopropila, n- butila, isobutila, sec-butila, tert-butila, n-pentila, n-hexila, ciclohexila, n- heptila, octila, n-octila, e semelhantes. Em algumas modalidades, substituintes alquila podem ser incluídos grupo Ci a Cs, Ci a Ce, ou Ci a C4 alquilas. O grupo alquila pode ser opcionalmente substituído por um ou mais grupos halogeno ou alcóxi. Por exemplo, o grupo alquila pode ser um grupo haloalquila, dihaloalquila, ou trihaloalquila.

[00046] Conforme usado neste relatório, “alquenila” refere-se de modo geral a radicais alqueno lineares, ramificados ou cíclicos tendo uma ou mais ligações duplas carbono-carbono, tais como grupos C2 a Csθ C2 a Ce alquenila, inclusive 3-propenila.

[00047] Conforme usado neste relatório, “alquinila” se refere de modo geral a radicais alquino lineares, ramificados ou cíclicos tendo uma ou mais ligações triplas carbono-carbono, tais como grupos C2 a Csθ C2 a Ce alquinila, inclusive hex-3-ina.

[00048] Conforme usado neste relatório, “arila” se refere a uma estrutura de anéis aromáticos carbocíclicas. Incluído dentro do âmbito de grupos arila estão anéis aromáticos tendo a partir de cinco até vinte átomos de carbono. Estruturas de anéis aromáticos incluem compostos tendo uma ou mais estrutura de anéis, tais como compostos mono-, bi-, ou tricíclicos. Exemplos de grupos arila que incluem estrutura de anéis fenila, tolila, antracenila, fluorenila, indenila, azulenila, fenantrenila (isto é., fenantreno), e naptila (isto é., naptaleno). Em algumas modalidades, 0 grupo arila pode ser opcionalmente substituído.

[00049] Conforme usado neste relatório, “heteroarila” se refere a estruturas de anéis aromáticos cíclicas nas quais um ou mais átomos no anel, 0 um ou mais heteroátomos, é um elemento diferente de carbono. Heteroátomos são tipicamente átomos de O, S ou N. Incluíddos dentro do âmbito de heteroarila, e selecionáveis de modo independente, estão estruturas de anel heteroarila de O, N, e S. A estrutura de anel pode incluir compostos tendo uma ou mais estruturas de anéis, tais como compostos mono-, bi-, ou tricíclicos. Em algumas modalidades, os grupos heteroarilas podem ser selecionados entre grupos heteroarila que contêm um ou mais heteroátomos, dois ou mais heteroátomos, três ou mais heteroátomos, ou quatro ou mais heteroátomos. Estruturas de anel heteroarila podem ser selecionadas entre as que contêm cinco ou mais átomos, seis ou mais átomos, ou oito ou mais átomos. Exemplos de estruturas de anel heteroarila incluem: acridina, benzimidazol, benzoxazol, benzodioxol, benzofurano, diidro-cromen-4-onila, 1,3-diazina, 1,2-diazina, 1,2- diazol, 1,4-diazanaftaleno, furano, furazano, imidazol, indol, isoxazol, isoquinolina, isotiazol, isoindolila, oxazol, purina, piridazina, pirazol, piridina, pirazina, pirimidina, pirrol, quinolina, quinoxalina, tiazol, tiofeno, 1,3,5-triazina, 1,2,4-triazina, 1,2,3-triazina, tetrazol e quinazolina. Em algumas modalidades, a heteroarila pode ser opcionalmente substituído.

[00050] Conforme usado neste relatório, “heterociclo” se refere a estruturas de anéis cíclicas nas quais um ou mais átomos no anel, um ou mais heteroátomos, é um elemento diferente de carbono. Heteroátomos são tipicamente átomos de O, S ou N. Incluído dentro do âmbito de heterociclo, e selecionáveis de modo independente, estão estruturas de anel heterociclo de O, N, e S. A estrutura de anel pode incluir compostos tendo uma ou mais estruturas de anel, tais como compostos mono-, bi-, ou tricíclicos. Em algumas modalidades, os grupos heterociclo podem ser selecionados entre grupos heterociclo que contêm um ou mais heteroátomos, dois ou mais heteroátomos, três ou mais heteroátomos, ou quatro ou mais heteroátomos. Exemplo de grupos heterociclo incluem morfolinila, pirrolidinonila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila, hidantoinila, valerolactamila, oxiranila, oxetanila, tetraidrofuranila, tetraidropiranila, tetraidropiridinila, tetraidroprimidinila, tetraidrothiofenila ou tetraidrotiopiranila e semelhantes. Em algumas modalidades, o heterociclo pode ser opcionalmente substituído.

[00051] Conforme usado neste relatório, “alcanoíla” se refere de modo geral a um grupo com a estrutura -C(O)-R. Em algumas modalidades, R pode ser um hidrogênio, uma alquila, um grupo 4- morfolinila, ou um grupo tiazolamino.

[00052] Conforme usado neste relatório, “alcóxi” se refere de modo geral a um grupo com a estrutura -O-R. Em algumas modalidades, R pode ser um grupo alquila, tal como um grupo Ci a Cs alquila.

[00053] Para os fins desta invenção, substituintes halo podem ser selecionados de modo independente entre os halogênios tais como flúor, cloro, bromo, iodo, e astatina.

[00054] Em algumas modalidades preferenciais, X pode ser hidrogênio, metóxi, hidroxila, benzóxi, ou um halogênio, preferencialmente brometo ou cloreto. Em outras modalidades, X pode ser preferencialmente um Ci a C4 alquila ou um haloalquila.

[00055] Ri pode ser preferencialmente um grupo Ce a Cs arila, opcionalmente substituído por no mínimo um grupo Ro. Ro pode ser então preferencialmente metóxi, benzóxi, um Ci a Cs alquila, um grupo heteroarila de 5 a 6 membros (tal como furila ou imidazol), ciano, nitro, triflúor metila, ou um halogênio, mais preferencialmente metóxi, benzóxi, iso-butil ou um halogênio, e mais preferencialmente metóxi, iso-butila, brometo ou cloreto. Alternativamente, Ri pode ser uma heteroarila de 5 a 10 membros ou um heterociclo de 3 a 12 membros, tal como um grupo piridinila, um grupo tiofeno, um grupo furila, um grupo tetraidro furila, e um grupo tiazol, um grupo diidro-cromen-4-onil, um grupo 1 H-isoindolila, ou um grupo benzodioxol.

[00056] R2 pode ser preferencialmente um grupo -Chh-furila, um grupo pirimidila, ou um grupo -C(O)O-Rd. Rd pode ser preferencialmente então um Ci a Cs alquila, opcionalmente substituído por no mínimo um halogeno; ou a C5 a Cs arila, opcionalmente substituído por no mínimo um metila, metóxi, ou halogênio.

[00057] Substituintes de Ri preferenciais também incluem os seguintes, onde o * indica a ligação da fixação à molécula "scaffold" de carbolina.

[00058] Outros substituintes de Ri preferenciais incluem os seguintes, onde o * indica a ligação da fixação à molécula de andaime de de carbolina.

[00059] Substituintes de R2 preferenciais também incluem os seguintes, onde o * indica a ligação da fixação à molécula de andaime de de carbolina.

[00060] Outros substituintes de R2 preferenciais também incluem os seguintes, onde o * indica a ligação da fixação à molécula de andaime de carbolina.

[00061] Substituintes de R3 preferenciais também incluem os seguintes, onde o * indica a ligação da fixação à molécula de andaime de carbolina.

[00062] Uma classe preferencial de compostos dentro da Fórmula (I) inclui os compostos da Fórmula (l-a) conforme mostrado abaixo.

[00063] em que X, Ri e R2 são definidos conforme descrito com respeito à Fórmula (I) e as modalidades preferenciais descritas acima.

[00064] Outra classe preferencial de compostos dentro da Fórmula (I) inclui os compostos da Fórmula (l-b) conforme mostrado abaixo.

[00065] em que:

[00066] X é um halogênio;

[00067] R2 é conforme descrito acima com respeito à Fórmula (I);

[00068] R0 é conforme descrito acima com respeito à Fórmula (I);

[00069] m é 0, 1, 2, ou 3; e

[00070] n é 0, 1, 2, ou 3.

[00071] Outras classes preferenciais de compostos dentro da Fórmula (I) incluem os seguintes.

[00072] Deve ser entendido que os substituintes X e R1, Rc, Rd, e Re dos compostos de Fórmulas (I-c) to (I-i) são definidos como na Fórmula (I).

[00073] Em outras modalidades, compostos preferenciais presente invenção úteis na inibição da produção de VEGF incluem de Fórmulas (l-i) a (l-l), conforme mostrado abaixo. Nas modalidades de Fórmulas (l-j) através de (l-l), substituintes X, Ri, R2, R3, e etc. são definidos como na Fórmula (I), bem como nas Fórmulas (l-a) a (l-i).

[00074] Também incluídos dentro do âmbito da invenção estão sais, hidratos, solvatos, caltratos, polimorfos, racematos e estereoisômeros farmaceuticamente aceitáveis dos compostos descritos neste relatório.

[00075] Em outro aspecto da invenção, compostos preferenciais da presente invenção úteis na inibição da produção de VEGF incluem os da Fórmula (I-l) conforme mostrado abaixo.

[00076] em que,

[00077] X é hidrogênio; um grupo hidroxila; um halogênio; um grupo C1-C4 alquila; a C1 a C5 alcóxi, opcionalmente substituído por um grupo C6 a C8 arila;

[00078] Ri é um grupo hidroxila; um grupo Ci a Cs alquila, opcionalmente substituído por um grupo Ce a Cs arila, em que 0 grupo Ce a Cs arila é opcionalmente substituído por no mínimo um grupo Ro; um grupo heterociclo; um grupo heteroarila; e um grupo Ce a Cs arila, opcionalmente substituído por no mínimo um grupo Ro;

[00079] Ro é um halogênio; um grupo Ci a Cδ alquila, opcionalmente substituído por um ou mais grupos halogênio; um grupo ciano; um grupo nitro; um grupo amino; um grupo aminoalquila; um grupo acetamida; um grupo imidazol; ou ORa;

[00080] Ra é hidrogênio; um grupo Ci a Cδ alquila, opcionalmente substituído por um grupo heterociclo ou um grupo Cδ a Cs arila; ou um grupo -C(O)O-Rbj

[00081] Rb é C1 a C4 grupo alquila;

[00082] R2 é um hidrogênio; uma hidroxila; um grupo heteroarila; um grupo Ci a Cs grupo alquila, opcionalmente substituído por um grupo alcóxi, hidroxila, heteroarila, ou Cδ a Cs arila; um grupo -C(O)-Rc; um grupo -C(O)O-Rdj um grupo -C(O)NH-Rdi um grupo -C(S)NH-Rdl um grupo -S(O2)-Rθ; ou éster terc-butílico de ácido (IS)-isopropil-carbâmico;

[00083] Rc é hidrogênio; um grupo 4-morfolinil; um grupo tiazolamino; um grupo piperazinila, opcionalmente substituído por um grupo - C(O)CHs; um grupo Ci a Cδ alquila, opcionalmente substituído por um halogênio, um grupo alcóxi, ou hidroxila;

[00084] Rd é hidrogênio; um grupo benzila; um grupo Ci a Cs alquila, opcionalmente substituído por um halogênio ou um grupo alcóxi; um grupo Cδ a Cs arila, opcionalmente substituído por no mínimo um halogênio, Ci a Cs alquila, -C(O)ORe, ou ORej

[00085] Re é um hidrogênio; um grupo Ci a Cδ alquila, opcionalmente substituído por no mínimo um grupo halogênio ou alcóxi; ou um grupo Cδ a Cs arila; e

[00086] néO, 1,2, ou 3.

[00087] Em outra modalidade, são proporcionados compostos de Fórmulas (II) e (III).

[00088] Em que Ri e R2 são definidos conforme descrito acima com respeito à Fórmula (I).

[00089] Para os fins desta invenção, onde uma ou mais funcionalidades englobando X Ri, R2, Ro, Ra, Rb, Rc, Rd, e Rθ, são incorporadas em uma molécula de Fórmulas (I), (II), e (III), incluindo Fórmulas (l-a) a (l-k), cada uma das funcionalidades aparecendo em qualquer localização dentro do relatório descritivo podem ser selecionadas de modo independente, e conforme apropriado, substituídas de modo independente. Além disso, onde um substituinte mais genérico é estabelecido para qualquer posição nas moléculas da presente invenção, se entende que 0 substituinte genérico pode ser sinbstituído com substituintes mais específicos, e as moléculas resultantes estão dentro do âmbito das moléculas da presente invenção.

[00090] Os compostos preferenciais da invenção incluem os seguintes.

[00091] Em algumas modalidades, os compostos preferenciais incluem os com uma EC50 no teste VEGF ELISA descrito no Exemplo 2 de menos de cerca de 2 uM, mais preferencialmente entre cerca de 2 uM e cerca de 0,04 uM (200 nM a 40 nM); mais preferencialmente a partir de cerca de 0,04 uM até cerca de 0,008 uM até (40 nM até 8 nM); e mais preferencialmente menos de cerca de 0,008 uM (< 8 nM). Compostos particularmente preferenciais são os Compostos Nos: 2, 4, 5, 7, 8, 10, 11, 12, 17, 23, 25, 81, 102, 112, 140, 328, 329, 330, 331, 332, 355, 816, 817, 818, 823, 824, 825, 830, 831, 832, 837, 838, 841, 842, 843, e regioisômeros dos mesmos. Em uma modalidade, os compostos preferenciais da invenção formam uma mistura racêmica, e em outra modalidade os compostos da invenção são os isômeros (/?), (S), (R,R), (S,S), (R,S), (S,R), em uma composição enantiomericamente pura. Mais preferencialmente, os compostos da invenção são os isômeros (S), em uma composição enantiomericamente pura.

[00092] Os compostos acima são listados somente para proporcionar exemplos que podem ser usados nos métodos da invenção. Com base na presente descrição, 0 técnico versado reconhecerá outros compostos que se pretendem que sejam incluídos dentro do âmbito da invenção presentemente reivindicada que seriam úteis nos métodos mencionados neste relatório.

B. Preparação dos Compostos da Invenção

[00093] Os compostos da invenção podem ser produzidos em qualquer maneira conhecida na técnica. A título de exemplo, os compostos da invenção podem ser preparados de acordo com os seguintes esquemas gerais. Mais especificamente, o Esquema I pode ser usado para preparar os compostos da Fórmula I. O Esquema la pode ser usado quando em combinação com o Esquema I quando R2 é um grupo -CFk-furanila. Alternativamente, para síntese assimétrica quando R2 é hidrogênio ou hidroxila, pode ser usado 0 Esquema lb. Scheme I

“Scheme” = “Esquema” e “Formulas” = “Fórmulas” Scheme la

“Scheme” = “Esquema”, “Furaldeído” = “Furaldeído” e “rt” = “temperatura ambiente”.) Scheme lb

“Scheme” = “Esquema”

[00094] O Esquema II pode ser usado para preparar compostos da Fórmula l-h. Scheme II

“Scheme” = “Esquema”

[00095] Os Esquemas llla ou lllb podem ser usados para preparar compostos da Fórmula l-i. Scheme Illa

Ref: Chem. Pharm. Buli.1987, 4700. “Scheme” = “Esquema” Scheme lllb

Ref: Magid Abou-Gharbia et al, J. Med. Chem. 1987, 30, 1818. “Scheme” = “Esquema” e “reflux” = “refluxo”

[00096] Em uma modalidade preferencial, os compostos da invenção podem ser resolvidos para composições enantiomericamente puras usando qualquer método conhecido na técnica. A título de exemplo, os compostos da invenção podem ser resolvidos por cristalização direta de misturas de enantiômeros, por formação de sais de diastereômeros de enantiômeros, pela formação de diastereômeros e separação, ou por resolução enzimática.

[00097] Em uma modalidade preferencial, os compostos da invenção podem ser resolvidos através de cristalização usando, por exemplo, N-acetil-L-fenilalanina para obter o (S) isômero, ou N-acetil- D-fenilalanina para obter o (R) isômero, em uma maneira similar à ilustrada no Esquema IV. Scheme IV

“Scheme” = “Esquema”, “Acetyl” = “Acetil”, “salt” = “sal” e “Base Workup” = “Elaboração de Base”

[00098] Em algumas modalidades, métodos típicos do Esquema I para preparar compostos preferenciais da Fórmula I envolvem a formação de produtos / intermediários da reação de Pictet-Spengler de amina livre, conforme descrito abaixo no Procedimento I. Procedure-I

“Procedure-I” = “Procedimento I” e “Acid” = “Ácido”

[00099] Em uma modalidade, o Procedimento I pode envolver adição de um Aldeído desejado (II) a uma suspensão de HCI de triptamina 5-substituída. (I) em ácido sulfúrico a 0,1 N. A solução pode ser então agitada a cerca de 110°C a 120°C dentro de um vaso de reação fechado até a reação estar suficientemente completa, por exemplo, por cerca de 15 minutos até cerca de 20 horas. Depois do completamento da reação, a mistura da reação pode ser esfriada até a temperatura ambiente e o sal precipitado pode ser filtrado. O resíduo filtrado pode ser então lavado com éter, EtOAc ou uma mistura de DCM e DMF e seco para dar o produto (III) como sal ácido. Alternativamente, um Aldeído desejado (II) pode ser adicionado a uma suspensão de HCI de triptamina 5-substituída (I) em ácido acético e refluxado até a reação estar suficientemente completa, por exemplo, por cerca de 15 minutos até cerca de 20 horas. Depois do completamento da reação, a mistura da reação pode ser esfriada até a temperatura ambiente e o sal ácido pode ser filtrado. O resíduo filtrado pode ser então lavado com ácido acético seguido por DCM e seco para dar o produto (III) como sal ácido. A amina livre (III) pode ser obtida por extração com EtOAc e lavagem com hidróxido de amónio aquoso ou hidróxido de sódio aquoso a 1M.

[000100] A amina livre, ou seu sal, pode ser então usada para formar outros compostos preferenciais da Fórmula I, tais como análogos de carbamato (Fórmula 1-c, Procedimento II), análogos de amida, incluindo análogos de N-acetila (Fórmula l-c, Procedimento llla and Procedimento lllb), análogos de uréia e tiouréia (Fórmula l-e e l-f, Procedimento IV e Procedimento V respectivamente), análogos de sulfóxido (Fórmula 1-g, Procedimento VI), e análogos de pirimidina (Procedimento VII).

[000101] Mais particularmente, o Procedimento II pode ser usado para sintetizar análogos de carbamato de aminas livres (III), ou seus sais. Procedure-ll

“Procedure-ll” = “Procedimento II”

[000102] De acordo com o Procedimento II, diisopropiletilamina (DIEA) pode ser adicionado à amina livre (III), ou seu sal ácido em diclorometano (DCM), seguida por lenta adição de cloroformiato substituído. A mistura da reação pode ser agitada em temperatura ambiente por cerca de 1 a 20 horas. O solvente pode ser então evaporado e o produto bruto pode ser ou purificado por HPLC ou por cromatografia de coluna de sílica-gel.

[000103] O Procedimento llla pode ser usado para sintetizar análogos de amida de amina livre (III), ou seus sais. Procedure-Ilia

“Procedure-Ilia” = “Procedimento Illa”

[000104] De acordo com o Procedimento Illa, uma mistura pré- agitada por 15 min de um R2-ácido e diisopropil carbodiimida (DIC) pode ser adicionada à amina livre (III), ou seu sal ácido em DCM e DIEA. A mistura da reação pode ser agitada por cerca de 1 h. Os solventes podem ser então evaporados e o produto bruto purificado por HPLC.

[000105] Alternativamente, o Procedimento lllb pode ser usado para sintetizar análogos de N-acetil de aminas livres (III), ou seus sais. Procedure-lllb

“Procedure-lllb” = “Procedimento lllb”

[000106] De acordo com o Procedimento lllb, piridina pode ser adicionada à amina livre (III), ou seu sal ácido em DCM, seguida por anidrido acético. A mistura da reação pode ser agitada em temperatura ambiente por cerca de 8 a 20 horas. Os solventes podem ser então evaporados e o produto bruto foi purificado por HPLC.

[000107] O Procedimento IV pode ser usado para sintetizar análogos de uréia das aminas livres (III), ou seus sais. Procedure-IV

“Procedure-IV” = “Procedimento IV”.)

[000108] De acordo com o Procedimento IV, DIEA e R2-isocianato podem ser adicionados à amina livre (III), ou seu sal ácido em DCM. A mistura da reação pode ser refluxada por cerca de 1,5 h. Os solventes podem ser então evaporados e o produto bruto purificado por HPLC.

[000109] O Procedimento V pode ser usado para sintetizar análogos de tiouréia das aminas livres (III), ou seus sais. Procedure-V

“Procedure-V” - “Procedimento V”

[000110] De acordo com o Procedimento V, DIEA e R2-isotiocianato podem ser adicionados à amina livre (III), ou seu sal ácido em DCM. A mistura da reação pode ser refluxada por cerca de 12 h. Os solventes podem ser então evaporados e o produto bruto purificado por HPLC.

[000111] O Procedimento VI pode ser usado para sintetizar análogos de sulfonila de aminas livres (III), ou seus sais. Procedure-VI

“Procedure-VI” = “Procedimento VI”.)

[000112] De acordo com o Procedimento VI, DIEA e R2- sulfonilcloreto podem ser adicionados à amina livre (III), ou seu sal ácido em DCM. A mistura da reação pode ser gitada em temperatura ambiente por cerca de 12 horas. Os solventes podem ser então evaporados e 0 produto bruto purificado por HPLC.

[000113] O Procedimento VII pode ser usado para sintetizar análogos de pirimidina das aminas livres (III), ou seus sais. Procedure VII

“Procedure-VII” = “Procedimento VII”

[000114] De acordo com 0 Procedimento VII, trietilamina e 2- bromopirimidina em N,N-dimetilformamida (DMF) podem ser adicionados à amina livre (III), ou seu sal ácido em DCM. A mistura da reação pode ser aquecida até cerca de 120 °C por cerca de 12 h. Os solventes podem ser então evaporados e 0 produto bruto purificado por HPLC.

[000115] Estas e outras metodologias de reação podem ser úteis na preparação dos compostos da invenção, conforme reconhecido por uma pessoa versada na técnica. Várias modificações para os esquemas e procedimentos acima serão evidentes para uma pessoa versada na técnica, e a invenção não está limitada especificamente pelo método de preparação dos compostos da invenção.

C. Métodos da Invenção

[000116] Em outro aspecto da invenção, são proporcionados métodos para a inibição da produção de VEGF, a inibição da angiogênese, e/ou o tratamento de câncer, retinopatia diabética, artrite reumatóide, psoríase, aterosclerose, inflamação crônica, outros distúrbios e doenças relacionados a inflamação crônica, obesidade, ou degeneração macular exudativa usando os compostos descritos neste relatório.

[000117] Em uma modalidade, a invenção se refere a métodos para inibir a produção de VEGF compreendendo a administração de uma quantidade inibidora da expressão de VEGF de no mínimo um composto da invenção a um indivíduo que necessite da mesma.

[000118] Em outra modalidade, são proporcionados métodos para inibir a angiogênese compreendendo a administração de uma quantidade antiangiogênica de no mínimo um composto da invenção a um indivíduo que necessite da mesma.

[000119] Em ainda outra modalidade, são proporcionados métodos para tratar câncer, retinopatia diabética, artrite reumatóide, psoríase, aterosclerose, inflamação crônica, outros distúrbios e doenças relaciondos com inflamação crônica, obesidade, ou degeneração macular exudativa compreendendo a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de no mínimo um composto da invenção a um indivíduo que necessite da mesma.

[000120] Sem pretender ser limitado pela teoria, acredita-se que os métodos da presente invenção atuem através de uma combinação de mecanismos que modulam a atividade de VEGF. Em modalidades preferenciais, os métodos da invenção compreendem a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de no mínimo um composto da invenção, em que o composto é um (S) isômero.

[000121] De acordo com os métodos da invenção, o um ou mais compostos podem ser administrados ao indivíduo através de qualquer via de liberação de fármaco conhecida na técnica. Vias de administração típicas específicas incluem oral, ocular, retal, bucal, tópica, nasal, oftálmica, subcutânea, intramuscular, intravenosa (bolo e infusão), intracerebral, transdérmica, e pulmonar.

[000122] Os termos “quantidade inibidora de VEGF”, “quantidade antiangiogânica”, e “quantidade terapeuticamente eficaz”, conforme usado neste relatório, se referem a uma quantidade de um agente farmacêutico para tratar, melhorar, ou prevenir a doença ou condição identificada, ou para apresentar um efeito terapêutico ou inibitório detectável. O efeito pode ser detectado, por exemplo, pelos ensaios descritos nos exemplos que se seguem. A quantidade eficaz precisa para um indivíduo dependerá do peso corporal, do tamanho, e da saúde do indivíduo; da natureza e extensão da condição; e do terapêutico ou combinação de terapêuticos selecionados para administração. Quantidades terapeuticamente eficazes para uma dada situação podem ser determinados por experimentação de rotina que está dentro do conhecimento e do critério do clínico.

[000123] Para qualquer composto, a quantidade terapeuticamente eficaz pode ser estimada inicialmente ou em ensaios de cultura celular, por exemplo, de células neoplásicas, ou em modelos animais, geralmente ratos, camundongos, coelhos, cães, ou porcos. O modelo animal também pode ser usado para determinar a faixa de concentração apropriada e a via de administração. As informações referidas podem ser então usadas para determinar doses e vias úteis para administração em seres humanos. A eficácia terapêutica / profilática e a toxicidade podem ser determinadas por procedimentos farmacêuticos de rotina em culturas celulares ou animais experimentais, por exemplo, ED50 (a dose terapeuticamente eficaz em 50% da população) e LD50 (a dose letal para 50% da população). A proporção das doses entre os efeitos terapêuticos e tóxicos é 0 índice terapêutico, e pode ser expressa como a proporção, ED50/LD50. As composições farmacêuticas que apresentam grandes índices terapêuticos são preferenciais. Os dados obtidos a partir dos ensaios de culturas celulares e estudos animais podem ser usados para formular uma faixa de dosagem para aplicação humana. A dosagem contida em semelhantes composições preferencialmente está dentro de um alcance de concentrações circulantes que inclui uma ED50 com pouca ou nenhuma toxicidade. A dosagem pode variar dentro deste alcance dependendo da forma de dosagem empregada, da sensibilidade do paciente, e da via de administração.

[000124] Mais especificamente, as relações entre concentração e efeito biológico observadas com respeito ao um ou mais compostos da presente invenção indicam uma concentração plasmática alvo inicial variando a partir de aproximadamente 0.1 pg/mL até aproximadamente 100 pg/mL, preferencialmente a partir de aproximadamente 5 pg/mL até aproximadamente 50 pg/mL, mais preferencialmente a partir de aproximadamente 5 pg/mL até aproximadamente 10 pg/mL. Para obter as concentrações plasmáticas referidas, os compostos da invenção podem ser administrados em doses que variam a partir de 0,1 pg até 100,000 mg, dependendo da via de administração. É proporcionada orientação com respeito a dosagens e métodos de liberação particulares na literatura e está disponível de modo geral para os profissionais na técnica. Em geral a dose estará dentro do alcance de cerca de 1 mg/dia até cerca de 10 g/dia, ou cerca de 0,1 g até cerca de 3 g/dia, ou cerca de 0,3 g até cerca de 3 g/dia, ou cerca de 0,5g até cerca de 2 g/dia, em doses únicas, divididas, ou contínuas para um paciente pesando entre cerca de 40 até cerca de 100 kg (cuja dose pode ser ajustada para pacientes acima ou abaixo desta faixa de peso, particularmente crianças abaixo de 40 kg).

[000125] A dosagem exata será determinada pelo clínico, à luz de fatores relacionados com o indivíduo que necessita de tratamento. A dosagem e a administração são ajustadas para proporcionarem níveis suficientes do um ou mais agentes ativos ou para manter o efeito desejado. Os fatores que podem ser levados em conta incluem a gravidade do estado da doença, a saúde geral do indivíduo, a idade, o peso, e o sexo do indivíduo, a dieta, a hora e a freqüência de administração, a combinação ou combinações de fármacos, as reações de sensibilidade, e a tolerância / resposta à terapia. Composições farmacêuticas de longa ação podem ser administradas a cada 3 a 4 dias, toda semana, ou uma vez a cada duas semanas dependendo da meia-vida e do índice de "clearance"da formulação em particular.

D. Metabólitos dos Compostos da Invenção

[000126] Também dentro do âmbito da presente invenção estão os dois produtos metabólicos in vivo dos compostos descritos neste relatório. Os produtos referidos podem resultar, por exemplo, da oxidação, redução, hidrólise, amidação, esterificação e semelhantes do composto administrado, essencialmente devido a processos enzimáticos. Por conseguinte, a invenção inclui compostos produzidos por meio de um processo compreendendo por um composto desta invenção em contato com um tecido de mamífero ou um mamífero por um período de tempo suficiente para produzir um produto metabólico do mesmo. Os produtos referidos tipicamente são identificados preparando um composto da invenção radiorrotulado (por exemplo, C14 ou H3), administrando o mesmo em uma dose detectável (por exemplo, mais de cerca de 0,5 mg/kg) a um mamífero tal como rato, camundongo, porco-da-índia, macaco, ou a um homem, permitindo tempo suficiente para ocorrer o metabolismo (tipicamente cerca de 30 segundos até 30 horas), e isolando seus produtos de conversão a partir da urina, do sangue ou de outras amostras biológicas. Estes produtos são facilmente isolados uma vez que estão etiquetados (outros são isolados pela aplicação de anticorpos capazes de ligar epitopes sobreviventes no metabólito). As estruturas dos metabolites são determinadas no modo convencional, por exemplo, por análise por MS ou RMN. Em geral, a análise dos metabólitos pode ser feita do mesmo modo que estudos do metabolismo de fármacos convencionais de conhecimento geral das pessoas versadas na técnica. Os produtos da conversão, contanto que eles não sejam encontrados de outro modo in vivo, são úteis em testes diagnósticos para a dosagem terapêutica dos compostos da invenção mesmo se eles não possuírem atividade biológica por si só.

E. Composições Farmacêuticas da Invenção

[000127] Apesar de ser possível para os compostos da presente invenção serem administrados puros, pode ser preferencial formular os compostos como composições farmacêuticas. Deste modo, em ainda outro aspecto da invenção, são proporcionadas composições farmacêuticas úteis nos métodos da invenção. As composições farmacêuticas da invenção podem ser formuladas com excipientes farmaceuticamente aceitáveis tais como veículos, solventes, estabilizantes, adjuvantes, diluentes, e etc., dependendo do modo de administração e da forma de dosagem em particular. As composições farmacêuticas deve ser formuladas de modo geral para obter um pH fisiologicamente compatível, e pode variar a partir de um pH de cerca de 3 até um pH de cerca de 11, preferencialmente cerca de pH 3 a cerca de pH 7, dependendo da formulação e da via de administração. Em modalidades alternativas, pode ser preferencial que o pH seja ajustado para uma faixa a partir de cerca de pH 5,0 até cerca de pH 8,0.

[000128] Mais particularmente, as composições farmacêuticas da invenção compreendem uma quantidade terapeuticamente ou profilaticamente eficaz de no mínimo um composto da presente invenção, junto com um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis. Opcionalmente, as composições farmacêuticas da invenção podem compreender uma combinação de compostos da presente invenção, ou podem incluir um segundo ingrediente ativo útil no tratamento do câncer, retinopatia diabética, ou degeneração macular exudativa.

[000129] As formulações da presente invenção, por exemplo, para administração parenteral ou oral, são mais tipicamente sólidas, soluções líquidas, emulsões ou suspensões, ao passo que formulações inaláveis para administração pulmonar são geralmente líquidos ou pós, com formulações de pós sendo geralmente preferenciais. Uma composição farmacêutica preferencial da invenção também pode ser formulada como um sólido liofilizado que é reconstituído com um solvente fisiologicamente compatível antes da administração. Composições farmacêuticas alternativas da invenção podem ser formuladas como xaropes, cremes, unguentos, comprimidos, e semelhantes.

[000130] O termo “excipiente farmaceuticamente aceitável” se refere a um excipiente para administração a um agente farmacêutico, tal como os compostos da presente invenção. O termo se refere a qualquer excipiente farmacêutico que pode ser administrado sem indevida toxicidade. Excipientes farmaceuticamente aceitáveis são determinados em parte pela composição em particular que está sendo administrada, bem como pelo método em particular usado para administra a composição. Por conseguinte, existe uma ampla variedade de formulações adequadas de composições farmacêuticas da presente invenção (veja, por exemplo, Remington’s Pharmaceutical Sciences).

[000131] Excipientes adequados podem ser moléculas de veículos que incluem macromoléculas grandes lentamente metabolizadas tais como proteínas, polissacarídeos, ácidos polilácticos, ácidos poliglicólicos, aminoácidos poliméricos, copolímeros de aminoácidos, e partículas de vírus inativos. Outros excipientes tíipicos incluem antioxidantes tais como ácido ascórbico; agentes quelantes tais como EDTA; carboidratos tais como dextrina, hidroxialquilcelulose, hidroxialquilmetilcelulose, ácido esteárico; líquidos tais como óleos, água, solução salina, glicerol e etanol; agentes umectantes ou emulsificantes; substâncias de tamponamento do pH; e semelhantes. Lipossomas também estão incluídos dentro da definição de excipientes farmaceuticamente aceitáveis.

[000132] As composições farmacêuticas da invenção podem ser formuladas em qualquer forma adequada para o método de administração pretendido. Quando pretendidas para aplicação oral, por exemplo, comprimidos, trociscos, losangos, suspensões aquosas ou oleosas, soluções não-aquosas, pós ou grânulos dispersiveis (incluindo partículas micronizadas ou nanopartículas), emulsões, cápsulas duras ou moles, xaropes ou elixires podem ser preparadas. As composições pretendidas para aplicação oral podem ser preparadas de acordo com qualquer método conhecido na técnica para a fabricação de composições farmacêuticas, e as composições referidas podem conter um ou mais agentes inclusive agentes adoçantes, agentes aromatizantes, agentes corantes e agentes conservantes, de modo a proporcionar uma preparação palatável.

[000133] Excipientes farmaceuticamente aceitáveis particularmente adequados para aplicação em combinação com comprimidos incluem, por exemplo, diluentes inertes, tais como celuloses, carbonato de cálcio ou de sódio, lactose, fosfato de cálcio ou de sódio; agentes desintegrantes, tais como sódio croscarmelose, povidona reticulada, amido de milho, ou ácido algínico; agentes de ligação, tais como povidona, amido, gelatina ou acácia; e agentes lubrificantes, tais como estearato de magnésio, ácido esteárico ou talco. Os comprimidos podem ser não-revestidos ou podem ser revestidos por meio de técnicas conhecidas inclusive microencapsulação para retardar a desintegração e a adsorção no trato gastrointestinal e deste modo proporcionar uma ação sustentada durante um período mais longo. Por exemplo, pode ser empregado um material para retardo do tempo tal como monoestearato de glicerila ou diestearato de glicerila sozinho ou com uma cera.

[000134] As formulações para aplicação oral também podem ser apresentadas como cápsulas de gelatina dura onde o ingrediente ativo é misturado com um diluente sólido inerte, por exemplo, celuloses, lactose, fosfato de cálcio ou caulim, ou como cápsulas de gelatina mole em que o ingrediente ativo é misturado com meio não aquoso ou de óleo, tal como glicerina, propileno glicol, polietileno glicol, óleo de amendoim, parafina líquida ou azeite de oliva.

[000135] Em outra modalidade, as composições farmacêuticas da invenção podem ser formuladas como suspensões compreendendo um composto da presente invenção em mistura com no mínimo um excipiente farmaceuticamente aceitável adequado para a fabricação de uma suspensão. Em ainda outra modalidade, as composições farmacêuticas da invenção podem ser formuladas como pós e grânulos dispersíveis adequados para preparação de uma suspensão por meio da adição de excipientes adequados.

[000136] Excipientes adequados para aplicação em conexão com suspensões incluem agentes de suspensão, tais como carboximetilcelulose de sódio, metilcelulose, hidroxipropil metilceluose, alginato de sódio, polivinilpirrolidona, goma tragacanto, goma acacia, agentes dispersantes ou umectantes tais como urn fosfatideo que ocorre naturalmente (por exemplo, lecitina), um produto da condensação de um óxido de alquileno com um ácido graxo (por exemplo, estearato de polioxietileno), um produto da condensação de um óxido de etileno com um álcool alifático de cadeia longa (por exemplo, heptadecaetileneoxicetanol), um produto da condensação de um óxido de etileno com um éster parcial derivado de um ácido graxo e um anidrido de hexitol (por exemplo, monooleato de sorbitano de polioxietileno); e agente espessantes, tais como carbômero, cera de abelhas, parafina dura ou álcool cetílico. As suspensões também podem conter um ou mais conservantes tais como ácido acético, metil e/ou n-propil p-hidróxi-benzoato; um ou mais agentes corantes; um ou mais agentes aromatizantes; e um ou mais agentes adoçantes tais como sacarose ou sacarina.

[000137] As composições farmacêuticas da invenção também podem estar sob a forma de emulsões de óleo-em-água. A fase oleosa pode ser um óleo vegetal, tal como azeite de oliva ou óleo de araquis, um óleo mineral, tal como parafina líquida, ou uma mistura destes. Agentes emulsificantes adequados incluem gomas que ocorrem naturalmente, tais como goma acacia e goma tragacanto; fosfatídeos que ocorrem naturalmente, tais lecitina de soja, ésteres ou ésteres parciais derivados de ácidos graxos; anidridos de hexitol, tais como monooleato de sorbitano; e produtos da condensação destes ésteres parciais com óxido de etileno, tais como monooleato de sorbitano de polioxietileno. A emulsão também pode conter agentes adoçantes e aromatizantes. Xaropes e elixires podem ser formulados com agentes adoçantes, tais como glicerol, sorbitol ou sacarose. As formulações referidas também podem conter um demulcente, um conservante, um aromatizante ou um agente corante.

[000138] Adicionalmente, as composições farmacêuticas da invenção podem estar sob a forma de uma preparação injetável estéril, tal como uma emulsão aquosa injetável estéril ou suspensão oleaginosa injetável estéril. Esta emulsão ou suspensão pode ser formulada de acordo com a técnica conhecida usando os agentes dispersantes ou umectantes e agentes de suspensão adequados os quais foram mencionados acima. A preparação injetável estéril também pode ser uma solução ou suspensão injetável estéril em um diluente ou solvente não-tóxico aceitável por via parenteral, tal como uma solução em 1,2-propano-diol. A preparação injetável estéril também pode ser preparada como um pó liofilizado. Entre os veículos e solventes aceitáveis que podem ser empregados estão água, solução de Ringer, e solução isotônica de cloreto de sódio. Além disso, óleos fixos podem ser empregados como um solvente ou meio de suspensão. Para este fim pode ser empregado qualquer óleo fixo suaves inclusive mono- ou diglicerídeos sintéticos. Além disso, ácidos graxos tais como ácido oléico podem ser usados igualmente na preparação de injetáveis.

[000139] De modo geral, os compostos da presente invenção úteis nos métodos da presente invenção são substancialmente insolúveis em água e são parcamente solúveis na maioria dos solventes próticos farmaceuticamente aceitáveis e em óleos vegetais. No entanto, os compostos são geralmente solúveis em ácidos graxos de cadeia média (por exemplo, ácidos caprílicos e cápricos) ou triglicerídeos e têm alta solubilidade em ésteres de propileno glicol de ácidos graxos de cadeia média. Também contemplados na invenção estão compostos os quais foram modificados por substituições ou adições de porções químicas ou bioquímicas as quais os tornam mais adequados para liberação (por exemplo, aumentam a solubilidade, a bioatividade, a palatabilidade, reduzem as reações adversas, e etc.), por exemplo, por esterificação, glicosilação, PEGuilação, e etc.

[000140] Em uma modalidade preferencial, os compostos da presente invenção podem ser formulados para administração oral em uma formulação adequada à base de lipídeos para compostos de baixa solubilidade. As formulações à base de lipídeos podem reforçar de modo geral a biodisponibilidade oral dos compostos referidos. Como tal, uma composição farmacêutica preferencial da invenção compreende uma quantidade terapeuticamente ou profilaticamente eficaz de um composto da presente invenção, junto com no mínimo um excipiente farmaceuticamente aceitável selecionado entre o grupo consistindo em: ácidos graxos de cadeia média ou ésteres de propileno glicol dos mesmos (por exemplo, ésteres de propileno glicol de ácidos graxos comestíveis tais como ácidos graxos caprílicos e cápricos) e tensoativos farmaceuticamente aceitáveis tais como óleo de rícino hidrogenado polioxil 40.

[000141] Em uma modalidade preferencial alternativa, ciclodextrinas podem ser adicionadas como reforçadores da solubilidade aquosa. Ciclodextrinas preferenciais incluem hidroxipropila, hidroxietila, glucosila, maltosil e maltotriosil derivados de a-, β-, e y-ciclodextrina. Um reforçador da solubilidade de ciclodextrina particularmente preferencial é hidroxipropil-β-ciclodextrina (HPBC), o qual pode ser adicionado a qualquer uma das composições descritas acima para aumentar mais as características de solubilidade aquosa dos compostos da presente invenção. Em uma modalidade, a composição compreende 0,1% a 20% de hidroxipropil-β-ciclodextrina, mais preferencialmente 1% a 15% de hidroxipropil-β-ciclodextrina, e ainda mais preferencialmente a partir de 2,5% até 10% de hidroxipropil-β- ciclodextrina. A quantidade de reforçador da solubilidade empregado dependerá da quantidade do composto da presente invenção na composição.

I. Combinação de Terapias

[000142] Também é possível combinar qualquer composto da presente invenção com um ou mais ingredientes ativos diferentes úteis no tratamento do câncer, inclusive compostos, em uma forma de dosagem unitária, ou em formas de dosagens separadas pretendidos para administração simultânea ou seqüencial a um paciente que necessite de tratamento. Quando administrada seqüencialmente, a combinação pode ser administrada em duas ou mais administrações. Em uma modalidade alternativa, é possível administrar um ou mais compostos da presente invenção e um ou mais ingredientes ativos adicionais por vias diferentes.

[000143] O técnico versado reconhecerá que pode ser administrada uma variedade de ingredientes ativos em combinação com os compostos da presente invenção que podem agir para aumentar ou reforçar sinergicamente a atividade inibitória de VEGF e/ou antiangiogênese dos compostos da invenção.

[000144] De acordo com os métodos da invenção, a combinação de ingredientes ativos pode ser: (1) co-formulada e administrada ou liberada simultaneamente em uma formulação combinada; (2) liberada por alternação ou em paralelo como formulações separadas; ou (3) por qualquer outro regime de combinação de terapias conhecido na técnica. Quando liberados em terapia de alternação, os métodos da invenção podem compreender a administração ou liberação dos ingredientes ativos seqüencialmente, por exemplo, em solução, emulsão, suspensão, comprimidos, pílulas ou cápsulas separados, ou por diferentes injeções em seringas separadas. Em geral, durante terapia de alternação, uma dosagem eficaz de cada ingrediente ativo é administrada seqüencialmente, isto é, serialmente, ao passo que em terapia simultânea, dosagens eficazes de dois ou mais ingredientes ativos são administradas juntas. Também podem ser usadas várias seqüências de combinações de terapias intermitentes.

[000145] Para auxiliar no entendimento da presente invenção, os Exemplos seguintes são incluídos. Os experimentos relativos a esta invenção, logicamente, não devem ser considerados como especificamente limitantes para a invenção e as referidas variações da invenção, atualmente conhecidas ou desenvolvidas posteriormente, as quais estariam dentro do campo de ação de uma pessoa versada na técnica são consideradas como estando dentro do âmbito da invenção conforme descrito neste relatório descritivo e reivindicado nas partes que se seguem.

Exemplos

[000146] A presente invenção é descrita em mais detalhes com referência aos exemplos não limitantes seguintes, os quais são oferecidos para ilustrar mais plenamente a invenção, mas não devem ser considerados como limitantes do âmbito da mesma. Os exemplos ilustram a preparação de alguns compostos da invenção, e a experimentação destes compostos in vitroe/ou in vivo. Os versados na técnica entenderão que as técnicas descritas nestes exemplos representam técnicas descritas pelos inventores para funcionarem bem na prática da invenção, e como tais constituem modos preferenciais para a prática da mesma. No entanto, deve ser reconhecido que os versados na técnica devem, à luz da presente descrição, reconhecer que podem ser feitas muitas alterações nos métodos específicos que são descritos e ainda obter um resultado igual ou semelhantes sem se afastar do espírito e do âmbito da invenção.

Exemplo 1: Preparação de Compostos da Invenção

[000147] Usando os esquemas e procedimentos descritos acima na Seção B, pode-se preparar alguns compostos da invenção como se segue. Outros compostos preferenciais da invenção, tais como os compostos na Tabela 5 abaixo, podem ser preparados de modo semelhante.

Exemplo 1A - Compostos da Fórmula I, Esquema I

[000148] Alguns compostos da Fórmula I podem ser preparados de acordo com o Esquema I usando produtos / intermediários de aminas livres, ou seus sais preparados de acordo com o Procedimento I. A título de exemplo, algumas aminas livres (III), ou seus sais são preparados usando o Procedimento I. A Tabela 4 ilustra algumas aminas livres (III) ou seus sais, Intermediários 1-11. Tabela 4

lntermediário-1:

[000149] Este intermediário é preparado usando o Procedimento I com 5-clorotriptamina. HCI (5,8 g, 25 mmoles), p-anisaldeído (6,13 ml_, 50 mmoles) e ácido sulfúrico a 0,1N (60 ml_) para dar o composto do título como um sal de ácido (6,1 g, 59%). ES-MS: 313 (M+H)+ Alternativamente, este intermediário é preparado usando o Procedimento 1B com 5-clorotriptamina.HCI (20 g, 86,5 mmoles), p- anisaldeído (15,9 ml_, 130 mmoles) e ácido acético (250 ml_) para dar o composto do título como um sal de ácido (25,8 g, 79%). ES-MS: 313 (M+H)+.

lntermediário-2:

[000150] Este intermediário é preparado usando o Procedimento I com 5-clorotriptamina. HCI (116 mg, 0,5 mmol), 2,3-difluoro benzaldeído (109 pL, 1 mmol) e ácido sulfúrico a 0,1 N (2 mL) para dar o composto do título como um sal de ácido (158 mg, 75%). ES-MS: 319 (M+H)+

lntermediário-3:

[000151] Este intermediário é preparado usando o Procedimento I com 5-clorotriptamina. HCI (462 mg, 2 mmoles), 4-cloro benzaldeído (562 mg, 4 mmoles) e ácido sulfúrico a 0,1N (8 mL) para dar o composto do título como um sal de ácido (825 mg, 99%). ES-MS: 317 (M+H)+

lntermediário-4:

[000152] Este intermediário é preparado usando o Procedimento I 5- clorotriptamina. HCI (462 mg, 2 mmoles), 4-ciano benzaldeído (525 mg, 4 mmoles) e ácido sulfúrico a 0,1N (8 mL) para dar o composto do título como um sal de ácido (810 mg, 100%). ES-MS: 308 (M+H)+

lntermediário-5:

[000153] Este intermediário é preparado usando o Procedimento I 5- clorotriptamina. HCI (374 mg, 1,5 mmol), 4-flúor benzaldeído (322 pL, 3 mmol) e ácido sulfúrico a 0,1 N (4 mL) para dar o composto do título como um sal de ácido (250 mg, 42%). ES-MS: 301 (M+H)+

lntermediário-6:

[000154] Este intermediário é preparado usando o Procedimento I 5- clorotriptamina. HCI (1,15 g, 5 mmoles), 4-isopropil benzaldeído (1.516 ml_, 10 mmoles) e ácido sulfúrico a 0,1N (12 ml_) para dar o composto do título como urn sal de ácido (628 mg, 30%). ES-MS: 325 (M+H)+

lntermediário-7:

[000155] Este intermediário é preparado usando o Procedimento I com 5-bromotriptamina. HCl (551 mg, 2 mmoles), 4-cloro benzaldeído (562 mg, 4 mmoles) e ácido sulfúrico a 0,1N (8 ml_) para dar o composto do título como um sal de ácido (330 mg, 36%). ES-MS: 363 (M+H)+

lntermediário-8:

[000156] Este intermediário é preparado usando o Procedimento I com 5-bromotriptamina. HCl (551 mg, 2 mmoles), p-tolualdeído (471 pL, 4 mmoles) e ácido sulfúrico a 0,1 N (8 mL) para dar o composto do título como sal de sulfato de hidrogênio (257 mg, 29%). ES-MS: 341 (M+H)+. Alternativamente, este intermediário é preparado usando o Procedimento 1B com 5-bromotriptamina.HCl (10 g, 36,3 mmoles), p- tolualdeído (6,41 mL, 54,5 mmoles) e ácido acético (120 mL) para dar o composto do título como sal de acetato (14,5 g, 100%). ES-MS: 341 (M+H)+

lntermediário-9 (Composto 112):

[000157] Este produto / intermediário é preparado usando o Procedimento I com 5-bromotriptamina. HCl (551 mg, 2 mmoles), 4- isopropil benzaldeído (606 piL, 4 mmoles) e ácido sulfúrico a 0,1N (8 mL) para dar o composto do título como sal de sulfato de hidrogênio (329 mg, 35%). ES-MS: 369 (M+H)+. Alternativamente, este intermediário é preparado usando o Procedimento 1B com 5- bromotriptamina.HCI (10 g, 36,3 mmoles), 4-isopropil benzaldeído (8,24 mL, 54,5 mmoles) e ácido acético (120 mL) para dar o composto do título como sal de acetato (13 g, 77%). ES-MS: 369 (M+H)+

lntermediário-10:

[000158] Este intermediário é preparado usando o Procedimento I com 5-bromotriptamina. HCI (551 mg, 2 mmoles), 3-cloro benzaldeido (453 pxL, 4 mmoles) e ácido sulfúrico a 0,1N (8 ml_) para dar o composto do título como urn sal de ácido (662 mg, 72%). ES-MS: 361 (M+H)+

lntermediário-11:

[000159] Este intermediário é preparado usando o Procedimento-I com 5-bromotriptamina. HCI (551 mg, 2 mmoles), p-anisaldeído (491 pL, 4 mmoles) e ácido sulfúrico a 0,1 N (8 ml_) para dar o composto do título como um sal de ácido (611 mg, 67%). ES-MS: 357 (M+H)+

lntermediário-12:

[000160] O intermediário da reação de 4-(2-morfolin-4-il-etóxi)- benzaldeído é preparado combinando 4-hidroxibenzaldeído (1,2 g, 10,0 mmoles), cloridrato de 4-(2-cloroetil)-morfolina (2,0 g, 11,0 mmoles), carbonato de potássio (4,1 g, 30,0 mmoles), e iodeto de potássio (170 mg, 1 mmol) em 100 ml de acetona e aquecendo até o refluxo com agitação. Depois de todo o 4-hidroxibenzaldeído ser consumido (48 horas por LC/MS), os sólidos são filtrados e o solvente é removido a vácuo. O rendimento é de 4,1 g.

[000161] Em seguida o Intermediário 12 é preparado de acordo com o Procedimento IB. Deste modo, cloridrato de 5-clorotriptamina (231 mg, 1,0 mmol) é combinado com 4-(2-Morfolin-4-il-etóxi)-benzaldeído (565 mg, ~1,2 mmoles) em 3 ml_ de ácido acético glacial. A suspensão é aquecida até cerca de 120°C por 10 minutos com constante esfriamento e uma potência máxima de 300 W usando o sistema de microondas CEM Explorer. Acetonitrila (2 ml_) é adicionada à mistura da reação esfriada, e o sólido é filtrado e lavado com 1 ml_ de acetonitrila para produzir o sal de ácido acético do Intermediário 12 (6- Cloro-1-[4-(2-morfolin-4-il-et0xi)-fenil]-2,3,4,9-tetraidro-1H-β-carbolina) (179 mg, 34%).

[000162] Os Intermediários 1-12 podem ser então usados para preparas os compostos da invenção de acordo com os Procedimentos II a VII como se segue.

Composto 2:

[000163] Este produto é preparado por meio do Procedimento II usando o Intermediário 1 (3 g, 9,6 mmoles), cloroformiato de etila (1,37 mL, 14,4 mmoles) e DIEA (2,5 mL, 14,4 mmoles) em diclorometano (70 mL) para dar o composto do título como pó branco (1,56 g, 42%). ES-MS: 385 (M+H)+.

Composto 4:

[000164] Este produto é preparado por meio do Procedimento II usando o Intermediário 7 (72 mg, 0,2 mmoles), cloroformiato de etila (29 pL, 0,3 mmol) e DIEA (52 pL, 0,3 mmol) em diclorometano (2 mL) para dar o composto do título como pó branco (37 mg, 43%). ES-MS: 435 (M+H)+.

Composto 5:

[000165] Este produto é preparado por meio do Procedimento II usando o Intermediário 2 (50 mg, 0,16 mmol), cloroformiato de etila (23 pL, 0,24 mmoles) e DIEA (42 pL, 0,24 mmoles) em diclorometano (2 mL) para dar o composto do título como pó branco (25 mg, 41%). ES- MS: 391 (M+H)+.

Composto 7:

[000166] Este produto é preparado por meio do Procedimento II usando o Intermediário 9 (74 mg, 0,2 mmoles), cloroformiato de etila (29 pL, 0,3 mmol) e DIEA (52 pL, 0,3 mmol) em diclorometano (2 mL) para dar o composto do título como pó branco (34 mg, 38%). ES-MS: 441 (M+H)+.

Composto 8:

[000167] Este produto é preparado por meio do Procedimento II usando o Intermediário 8 (72 mg, 0,2 mmoles), cloroformiato de etila (29 pL, 0,3 mmol) e DIEA (52 pL, 0,3 mmol) em diclorometano (2 mL) para dar o composto do título como pó branco (39 mg, 47%). ES-MS: 413 (M+H)+.

Composto 10:

[000168] Este produto é preparado por meio do Procedimento II usando o acetato do Intermediário 1 (10,5 g, 28,2 mmoles), cloroformiato de 4-clorofenila (4,74 mL, 33,8 mmoles) e DIEA (9,8 mL, 56,4 mmoles) em diclorometano (300 mL) para dar o composto do título como pó branco (10,2 g, 78%). ES-MS: 467 (M+H)+.

Composto 11:

[000169] Este produto é preparado por meio do Procedimento II usando o Intermediário 3 (63 mg, 0,2 mmoles), cloroformiato de etila (29 pL, 0,3 mmol) e DIEA (52 pL, 0,3 mmol) em diclorometano (2 mL) para dar o composto do título como pó branco (31 mg, 40%). ES-MS: 389 (M+H)+.

Composto 12:

[000170] Este produto é preparado por meio do Procedimento II usando o Intermediário 4 (31 mg, 0,1 mmol), cloroformiato de 2- cloroetila (16 pL, 0,15 mmol) e DIEA (26 pL, 0,15 mmol) em diclorometano (2 mL) para dar o composto do título como pó branco (22 mg, 53%). ES-MS: 414 (M+H)+.

Composto 17:

[000171] Este produto é preparado por meio do Procedimento II usando o Intermediário 1 (47 mg, 0,15 mmol), cloroformiato de 4- metilfenila (33 pL, 0,23 mmol) e DIEA (39 pL, 0,23 mmol) em diclorometano (2 mL) para dar o composto do título como pó branco (34 mg, 51%). ES-MS: 447 (M+H)+.

Composto 23:

[000172] Este produto é preparado por meio do Procedimento II usando o Intermediário 5 (30 mg, 0,1 mmol), cloroformiato de etila (14 pL, 0,15 mmol) e DIEA (26 pL, 0,15 mmol) em diclorometano (2 mL) para dar o composto do título como pó branco (21 mg, 56%). ES-MS: 373 (M+H)+.

Composto 25:

[000173] Este produto é preparado por meio do Procedimento VII usando o Intermediário 9 (74 mg, 0,2 mmoles), 2-bromopirimidina (48 mg, 0,3 mmol) e trietilamina (42 pL, 0,3 mmol) em DMF (2 mL) para dar o composto do título (42 mg, 47%). ES-MS: 447 (M+H)+.

Composto 102:

[000174] Este produto é preparado por meio do Procedimento lllb usando o Intermediário 9 (74 mg, 0,2 mmoles), anidrido acético (47 pL, 0,5 mmol) e piridina (41 pL, 0,5 mmol) em diclorometano (2 mL) para dar o composto do título como pó branco (31 mg, 38%). ES-MS: 411 (M+H)+.

Composto 140:

[000175] Este produto é preparado por meio do Procedimento IV usando o Intermediário 10 (72 mg, 0,2 mmoles), isocianato de ciclohexila (26 pL, 0,2 mmoles) e DIEA (37 pL, 0.21 mmol) em diclorometano (2 mL) para dar o composto do título como pó branco (51 mg, 53%). ES-MS: 486 (M+H)+.

Composto 166:

[000176] Este produto é preparado por meio do Procedimento llla usando seu intermediário de amina livre (141 mg, 0,5 mmol), Boc-L- Alanina (105 mg, 0,6 mmol), DIC (94 pL, 0,6 mmol), DIEA (105 pL, 0,6 mmol) e diclorometano (4 mL) para dar o composto do título (105 mg, 46%). ES-MS: 420 (M+H)+.

Composto 225:

[000177] Este produto é preparado por meio do Procedimento VI usando seu intermediário de amina livre (78 mg, 0,2 mmoles), sulfonilcloreto de metila (16 pL, 0,2 mmoles) e DIEA (37 pL, 0,21 mmol) e diclorometano (2 mL) para dar o composto do título (32 mg, 34%). ES-MS: 461 (M+H)+.

Composto 242:

[000178] Este produto é preparado por meio do Procedimento V usando seu intermediário de amina livre (59 mg, 0,2 mmoles), isotiocianato de ciclohexila (29 piL, 0,2 mmoles), DIEA (35 pL, 0,2 mmoles) e diclorometano (4 ml_) para dar o composto do título (52 mg, 60%). ES-MS: 438 (M+H)+.

Composto 279:

[000179] Este produto é preparado produzindo o Intermediário 12 (6- Cloro-1-[4-(2-morfolin-4-il-et0xi)-fenil]-2,3,4,9-tetraidro-1H-β-carbolina) usando o Procedimento I. O Intermediário 12 é em seguida usado para produzir o Composto 279 (Éster etílico de ácido 6-cloro-1-[4-(2- morfolin-4-il-etóxi)-fenil]-1,3,4,9-tetraidro-b-carbolina-2-carboxílico) usando o Procedimento II.

[000180] De acordo com o Procedimento II, o Intermediário 12 (82 mg, 0,20 mmol), cloroformiato de etila (24 mg, 21 piL, 0,22 mmoles), e diisopropiletilamina (175 pL, 1,00 mmol) são dissolvidos em cloreto de metileno (2 ml_) e agitados em temperatura ambiente por 15 minutos para formar o Composto 279. O solvente é removido sob uma corrente de nitrogênio. A mistura bruta é purificada por HPLC de fase reversa do preparativo sobre uma coluna de C-18 usando um gradiente de acetonitrila em água tamponada com ácido trifluoroacético a 0,2% (TFA). O sal de TFA do Composto 279 (3,7 mg, 3%) é isolado como um sólido amarelo. O mesmo procedimento pode ser aplicado para outras reações de formação de carbamato de acordo com o Procedimento II.

Composto 320:

[000181] Este produto / intermediário é preparado usando o Procedimento I com cloridrato de 5-benzilóxi .HCI (100 mg, 0,33 mmol), piridina-3-carboxaldeído (62 piL, 0,66 mmol) e ácido sulfúrico a 0,1 N (2 mL) para dar o composto do título como sal de sulfato de dihidrogênio (64 mg, 55%). ES-MS: 356 (M+H)+

Composto 329:

[000182] Este produto é preparado por meio do Procedimento VII usando o Intermediário 11 (71 mg, 0,2 mmoles), 2-bromopirimidina (48 mg, 0,3 mmol) e trietilamina (42 pL, 0,3 mmol) em DMF (2 mL) para dar o composto do título (41 mg, 49%). ES-MS: 434 (M+H)+.

Composto 330:

[000183] Este produto é preparado por meio do Procedimento II usando o Intermediário 6 (65 mg, 0,2 mmoles), cloroformiato de 2- fluoroetila (38 pL, 0,3 mmol) e DIEA (70 pL, 0,4 mmoles) em diclorometano (2 mL) para dar o composto do título como pó branco (34 mg, 41%). ES-MS: 415 (M+H)+.

Composto 332:

[000184] Este produto é preparado por meio do Procedimento II usando o Intermediário 7 (36 mg, 0,1 mmol), cloroformiato de 4- metoxifenila (22 pL, 0,15 mmol) e DIEA (26 pL, 0,15 mmol) em diclorometano (2 mL) para dar o composto do título como pó branco (41 mg, 81%). ES-MS: 511 (M+H)+.

Exemplo 1B - Algumas Matérias-Primas. Esquema la

[000185] O Esquema la pode ser usado quando em combinação com o Esquema I (acima) para produzir matérias-primas quando R2 é um grupo -CH2-furanila, como se segue.

“Furaldehyde” = “Furaldeído” e “rt” = “temperatura ambiente”

[000186] 2-Furaldeído (0,05 mL, 1,1 eq) é adicionado a uma solução de 5-clorotriptamina (114 mg, 0,586 mmol) em 2 mL de MeOH. A mistura da reação é agitada em temperatura ambiente por cerca de 1 hora. NaBH4 (110 mg, 5 eq) é adicionado lentamente. A mistura da reação é agitada em temperatura ambiente por cerca de 30 min. MeOH é evaporado e o resíduo é particionado entre água e cloreto de metileno. A camada orgânica é separada e seca sobre K2CO3. A camada orgânica coletada é concentrada para dar 134,9 mg de óleo viscoso (84%).

Exemplo 1C - Compostos da Fórmula I, Esquema lb

[000187] Alternativamente, alguns compostos da Fórmula I podem ser preparados de acordo com 0 Esquema lb como se segue.

“after filtration” = “depois da filtração”

[000188] Uma suspensão do material de mmoles) e CH3COONH4 (4,15g, 1,5 eq) em 60 mL de CH3NO2 é refluxada em banho de óleo a cerca de 110°C. Depois de cerca de 30 minutos, a mistura da reação é esfriada com banho de gelo. O sólido precipitado é filtrado e lavado com água (3 X 100 mL), seguida por hexano (2X50 mL) para dar 0 produto de indol bruto B. O sólido coletado é seco a vácuo a cerca de 40°C por cerca de 30 min para dar 6,97 g de sólido marrom (73%).

“rt” = “temperatura ambiente”

[000189] Uma solução do produto de indol B (12,32 g, 46,1 mmoles) em THF (130 mL) é em seguida tratada com uma solução de boridreto de tetrabutilamônio (11,9 g, 1 eq) em 75 ml_ de THF lentamente por cerca de 60 minutos a cerca de -5°C. A reação é agitada em temperatura ambiente por cerca de 1 hora e diluída com diclorometano (200 ml_). A camada orgânica é lavada com água duas vezes e salmoura. As camadas orgânicas combinadas são secas e evaporadas a vácuo. O resíduo é purificado sobre sílica-gel para dar 10,28 g de C sólido (83%).

“rt” = “temperatura ambiente”

[000190] Cloreto de amónio (9,9 ml_ de solução aquosa (100 mg/mL), 2 eq) e Zn (725 mg, 1,2 eq) são em seguida adicionados a uma solução do produto de indol C (2,49g, 9,24 mmoles) em 161 ml_ de THF. A mistura da reação é agitada em temperatura ambiente por cerca de 10 min e Zn (725 mg, 1,2 eq) é em seguida adicionado. Depois de cerca de 30 min, Zn adicional (967 mg, 1,6 eq) é adicionado e agitado por cerca de duas horas, seguido pela adição de Zn adicional (845 mg, 1,4 eq). Depois de agitar em temperatura ambiente por cerca de 15 min, Zn é filtrado e o resíduo é concentrado e dissolvido em THF. A solução resultante é em seguida tratada com p- clorobenzaldeído (0,7 eq) e agitada em temperatura ambiente por cerca de 15 horas. A mistura da reação é concentrada a vácuo e purificada sobre sílica-gel para dar 953,5 mg do produto de nitrona desejado D.

[000191] (+)-DIP-CI (6,93 mL, 2 eq, 85,8 mg / mL em CH2CI2) é em seguida adicionado a uma solução do produto de nitrona D (350 mg, 0,93 mmol) em 60 mL de diclorometano. A mistura da reação é agitada a cerca de -78°C por cerca de 10 dias e extinta com uma mistura de 10% de NaHCO3 (7 mL) e 10 mL de água. A camada aquosa é extraída com diclorometano três vezes. As camadas orgânicas combinadas são concentradsa e purificadas sobre sílica-gel para dar 0 produto de hidroxilamina desejado E (>98 % ee).

[000192] Água (11,5 mL), NH4CI (2,5 mL, 5 eq) e Zn (908 mg, 15 eq) são em seguida adicionados a uma solução do produto de hidroxilamina E (0,927 mmol) em THF (28 mL). A mistura da reação é agitada em temperatura ambiente por cerca de 1 dia. THF adicional (10 mL), NH4CI (5 mL, 10 eq) e Zn (1,8 g, 30 eq) são em seguida adicionados e agitados por cerca de outras 21 horas. Novamente, THF (10 mL), NH4CI (5 mL, 10 eq) e Zn (1,8 g, 30 eq) são adicionados e agitados por cerca de outras 20 horas. A mistura da reação é em seguida filtrada através de celite e lavada com MC. A camada de diclorometano coletada é lavada com água e salmoura. A camada orgânica é seca e concentrada para dar um complexo de boro de beta- carbolina. Este produto é dissolvido em 20 mL de THF. Esta solução é carregada em resina de permuta catiônica pré-embalada (pré- condicionada com MeOH e THF) e lavada com THF. A solução de THF combinada é concentrada para dar 390 mg de amina livre. O sólido é então lavado com éter e hexano consecutivamente para produzir 130 mg do composto enantiomericamente puro F.

Exemplo 1D - Compostos da Fórmula I, Esquema II

[000193] Os compostos da Fórmula l-h podem ser preparados de acordo com o Esquema II como se segue.

[000194] p-Anisaldeído (2,16 g, 15,9 mmoles, 1,93 mL) é adicionado a uma suspensão de 5-Bromotriptofano A (3 g, 10,6 mmoles) em 100 mL de Ácido acético em temperatura ambiente. A mistura da reação é em seguida aquecida até o refluxo a cerca de 125°C em banho de óleo de silício e mantida nesta temperatura por cerca de 3 horas e 20 minutos. A solução resultante é concentrada a vácuo. O resíduo é triturado com diclorometano, éter dietílico e hexano para produzir um sólido marrom pulverulento. Os sais acéticos do produto intermediário B são coletados e lavados com hexano três vezes.

[000195] O produto intermediário B é suspendido (70 mg, 0,174 mmoles) em 2 mL de diclorometano, e trietilamina (52,8 mg, 0,522 mmoles), 5-metil-2-aminotiazol (37,6 mg, 0,26 mmol) e PyBOP (135,8 mg, 0,26 mmol) é adicionado à suspensão. A mistura da reação é agitada em temperatura ambiente por cerca de 6 hora e extinta com solução saturada de NaHCOs. A camada aquosa é extraída com diclorometano. As camadas orgânicas combinadas são secas sobre K2CO3 e concentradas. Purificação sobre sílica-gel com 40% de acetato de etila em hexano produz 8,1 mg da amida desejada C. LCMS [MH+] 498, Rt = 2,54.

Exemplo 1E - Compostos da Fórmula I, Esquema III

[000196] Os compostos da Fórmula l-i podem ser preparados de acordo com o Esquema III como se segue.

[000197] Triptofano A (1,0 g, 5,0 mmoles) e 3-metoxibenzaldeído (670 pL, 5,5 mmoles) são suspendidos / dissolvidos em acetonitrila (100 ml_) e ácido sulfúrico concentrado (100 pL) é adicionado. A reação é aquecida até o refluxo até todo o aldeído ser consumido (de um dia para o outro). O solvente foi removido a vácuo e o resíduo foi dissolvido em 5 ml_ de etanol. O produto foi precipitado com éter, filtrado, e lavado com 10 mL de éter. O produto / intermediário B de β- carbolina desejado (Ácido 1-(3-metóxi-fenil)-2,3,4,9-tetraidro-1H-D- carbolina-3-carboxílico) é isolado como um sólido bege (1,2 g, 76%). LC/MS RT = 2,33 min. M/Z+ 323, 100%.

[000198] O produto / intermediário B de β-carbolina (200 mg, 0,62 mmoles) é em seguida dissolvido em 5 mL de THF seco e esfriado até cerca de 0°C. Solução de hidreto de alumínio de lítio (LAH) (1,2 mL, 1,0 M em éter, 1,2 mmoles) é adicionado à mistura da reação esfriada sob nitrogênio. Depois da adição estar completa (cerca de 10 minutos), a reação é deixada para aquecer até a temperatura ambiente por cerca de 4 horas. A mistura da reação é em seguida esfriada de volta até 0°C, e solução saturada de sulfato de sódio (750 pL) é adicionada e a mistura é agitada por cerca de 5 minutos a 0°C. A mistura da reação é em seguida filtrada e lavada com THF (100 mL). O solvente é removido a vácuo, e o produto bruto é purificado por HPLC do preparativo. O produto C ([1-(3-Metóxi-fenil)-2,3,4,9-tetraidro- 1H-b-carbolin-3-il]-metanol) é isolaco como um sólido branco (106 mg, 55%). LC/MS RT = 2,25 min. M/Z+ 309, 100%.

Exemplo 1F - Resolução Química dos Compostos da Invenção

[000199] Os compostos da invenção opcionalmente podem ser resolvidos quimicamente para composições enantiomericamente puras, preferencialmente composições enantiomericamente puras de (S) isômeros como se segue.

“Acetyl” = “Acetil”, “salt” = “sal”, “salt removal by extraction with 1N NaOH/ NH4OH” = “remoção de sal por extração com 1N de NaOHZ NH4OH” e “S-isomer” = “S-isômero”

[000200] A amina racêmica A (18,21 g, 58,2 mmoles) é misturada com N-acetil-L-fenilalanina (12,05 g, 58,2 mmoles) em EtOH (1,28 L) e refluxada para obter uma solução clara. A solução é em seguida deixada para esfriar em temperatura ambiente. Depois de descansar de um dia para o outro, 0 sólido precipitado é filtrado e lavado com EtOH (200 mL) para dar 0 sal B (16,4 g). O sal B é absorvido em EtOAc (500 mL) e lavado com 1N de NaOH aquoso (300 mL x 2) ou NH4OH (200 mL x 2), seco e evaporado para dar 0 S-isômero da amina livre C (7.4 g). O R-isômero é preparado por meio de procedimento semelhante usando N-acetil-D-fenilalanina.

Exemplo 1G - Compostos Típicos Adicionais da Invenção

[000201] A título de exemplo não limitante adicional, os compostos seguintes (Tabela 5) podem ser preparados por metodologia similar à descrita acima, conforme será reconhecido por uma pessoa versada na técnica. Tabela 5

Exemplo 2: Ensaio para Avaliar o Efeito sobre a Expressão de VEGF Endógeno Indutível por Hipóxia.

[000202] A capacidade dos compostos da invenção para modular a expressão de VEGF endógeno indutível por hipóxia pode ser analisada como se segue. Os níveis de proteína VEGF podem ser monitorados por um ensaio ELISA (R&D Systems). Em resumo, células HeLa podem ser cultivadas por 24 a 48 horas sob condições hipóxicas (1% de O2, 5% de CO2, balanceado com nitrogênio) na presença ou ausência de um composto da invenção. Os meios condicionados podem ser então testados por ELISA, e a concentração de VEGF calculada a partir da curva ELISA padrão de cada ensaio.

[000203] Uma análise da dose-resposta pode ser realizada usando 0 ensaio ELISA e as condições descritas acima. As condições para 0 ELISA de dose-resposta são análogas às descritas acima. Pode ser analisada uma série de, por exemplo, sete diferentes concentrações. Em paralelo, pode ser realizado um ensaio de dose-resposta de citotoxicidade usando Cell Titer Glo (Promega) sob as mesmas condições que 0 ELISA para assegurar que a inibição da expressão de VEGF não foi devida à citotoxicidade. Curvas de dose-resposta podem ser traçadas usando a percentagem de inibição versus a concentração do composto, e podem ser gerados valores de EC50 e de CC50 para cada composto com a inibição máxima determinada como 100% e a inibição mínima como 0%. Os compostos preferenciais da invenção terão uma EC50 de menos de 50, preferencialmente menos de 10, mais preferencialmente menos de 2, ainda mais preferencialmente menos de 0,5, e ainda mais preferencialmente menos de 0,01.

[000204] A Figura 1 mostra a capacidade de um um composto típico da invenção, Composto No. 7, para inibir a produção endógena de VEGF em células tumorais sob condições hipóxicas. A EC50 do ELISA é de 0,0025 pM, ao passo que sua CC50 (50% de citotoxicidade) é maior do que 0,2 pM. A EC50 para uma série de compostos preferenciais da invenção é proporcionado na Tabela 5. Tabela 5

# (S) Isômero preparado e testado. Em que: 1 asterisco, > 1 uM (1000 nM) 2 asteriscos, 0,2 a 1 uM (200 nM a 1000 nM) 3 asteriscos, 0,04 uM a 0,2 uM (40 nM a 200 nM) 4 asteriscos, 0,008 uM a 0,04 uM (8 nM a 40 nM) 5 asteriscos, < 0,008 uM (< 8 nM)

Exemplo 3: Os Compostos da Invenção Inibem a Expressão de VEGF e o Crescimento Tumoral em um Modelo Farmacodinâmico de Crescimento de Tumor In Vivo.

[000205] Os compostos da invenção também apresentam atividade no seguinte modelo farmacodinâmico que avaliam os níveis de VEGF intratumorais. Em resumo, células HT1080 (uma linhagem celular de fibrossarcoma humano) podem ser implantadas por via subcutânea em camundongos nus. Depois de sete dias, podem ser administrados aos camundongos compostos por via oral em uma faixa de dosagem desejada, por exemplo, 200 mg/kg/dia, durante sete dias. Os tumores podem ser então excisados dos camundongos e homogeneizados em tampão Tris-HCI contendo inibidores de proteinase. Moulder et al., Cancer Res. 61(24):8887-95 (2001). Os níveis de VEGF intratumorais são em seguida medidos usando um kit de VEGF ELISA humano (R&D System). As concentrações protéicas dos homogenados são medidas com um kit de ensaio Bio-Rad Protein e os níveis de VEGF intratumorais são normalizados para as concentrações de proteínas.

[000206] Os compostos preferenciais da invenção, quando usados por uma semana sobre um tumor de 100 mm3, geralmente inibirão o crescimento tumoral por no mínimo 50%, comparados com os grupos controle tratados com veículo (dados não apresentados).

Exemplo 4: Os Compostos da Invenção Não Afetam a Atividade de PDE5.

[000207] Os compostos da invenção são testados para avaliar seu efeito sobre a atividade da fosfodiesterase 5 (PDE5). O efeito sobre a atividade da PDE5 é determinado usando o kit de ensaio de polarização por fluorescência de alta eficiência (High-Efficiency Fluorescence Polarization Assay, HEFP) da Molecular Devices. O ensaio HEFP mede a atividade de PDE-5 usando derivados de cGMP etiquetados com fluoresceína como um substrato. Quando hidrolisados por PDE-5, os derivados de cGMP etiquetados com fluoresceína são capazes de ligar a um reagente de ligação. O complexo de substrato de cGMP : reagente de ligação resulta em um estado fluorescente altamente polarizados.

[000208] A Figura 2 mostra os resultados dos compostos da invenção sobre a atividade de PDE-5. Depois de combinar PDE5 recombinante (CalBioChem) e o substrato de cGMP, a mistura é incubada em temperatura ambiente por 45 minutos na presença ou ausência de compostos ou um controle positivo (Tadalafil). A reação é interrompida na adição do reagente de ligação. A polarização por fluorescência é determinada em um Viewlux usando uma situação recomendado pelo fabricante. Conforme é evidente a partir da Figura 2, os compostos da invenção não inibem a atividade de PDE-5 em comparação com o controle positivo.

[000209] Todas as publicações e pedidos de patentes citados neste relatório são incorporados por meio de referência na mesma extensão como se cada publicação ou requerimento de patente individual fosse especificamente e individualmente indicado para ser incorporado por meio de referência.

[000210] Embora determinadas modalidades tenham sido descritas em detalhes acima, as pessoas versadas na técnica entenderão claramente que são possíveis muitas modificações nas modalidades sem se afastar dos ensinamentos das mesmas. Pretende-se que todas as modificações referidas sejam englobadas dentro das reivindicações da invenção.

Claims

1. Composto, caracterizado pelo fato de que apresenta a fórmula (IV):

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: X é hidrogênio, Ci a Ce alquila opcionalmente substituída por um ou mais halogênio; um grupo hidroxila; halogênio; ou Ci a Cs alcóxi, opcionalmente substituído por um grupo Ce a C10 arila; Ro é halogênio; ciano; nitro; sulfonila, em que a sulfonila é opcionalmente substituída por uma Ci a Ce alquila ou um heterociclo de 3 a 10 membros; um grupo amino, em que o grupo amino é opcionalmente substituído por Ci a Ce alquila, -C(O)-Rb, - C(O)O-Rb, alquilsulfonila, um grupo heterociclo de 3 a 10 membros opcionalmente substituído por um -C(O)-O-Rn; -C(O)-NH-Rbj um heterociclo de 5 a 6 membros; uma heteroarila de 5 a 6 membros; um grupo Ci a Ce alquila, onde o grupo alquila é opcionalmente substituído por pelo menos um independentemente selecionado de hidroxila, halogênio, amino ou grupo heterociclo com 3 a 12 membros, em que o grupo amino e o grupo heterociclo são opcionalmente substituídos por pelo menos um independentemente selecionado de grupo Ci a C4 alquila, onde grupo Ci a C4 alquila é opcionalmente substituído por pelo menos um independentemente selecionado de grupo Ci a C4 alcóxi, grupo amino, grupo alquilamino, ou grupo heterociclo de 5 a 10 membros, grupo -C(O)- Rn; ou um grupo -0Ra; Ra é hidrogênio, C2 a C8 alquileno; um grupo - C(O)O-Rb; -C(O)-NH-Rb; Ci a C8alquila, em que o grupo alquila é opcionalmente substituído por pelo menos um independentemente selecionado de hidroxila, halogênio, Ci a C4 alcóxi, amino, alquilamino, acetamida, -C(O)-Rb, -C(O)O-Rb, Ce a C10 arila, heterociclo de 3 a 12 membros, ou um grupo heteroarila de 5 a 12 membros, em que adicionalmente 0 alquilamino é opcionalmente substituído por hidroxila, Ci a C4 alcóxi, ou uma heteroarila de 5 a 12 membros opcionalmente substituída por Ci a C4 alquila, em que adicionalmente a acetamida é opcionalmente substituída por Ci a C4 alcóxi, sulfonila ou alquilsulfonila, em que adicionalmente 0 grupo heterociclo é opcionalmente substituído por Ci a C4 alquila opcionalmente substituída por um grupo hidroxila, -C(O)-Rn, - C(O)O-Rn ou um grupo oxo; Rb é hidroxila; amino, alquilamino, em que 0 alquilamino é opcionalmente substituído por hidroxila, amino, alquilamino, Ci a C4 alcóxi; um heterociclo de 3 a 12 membros opcionalmente substituído por pelo menos um independentemente selecionado de Ci a C8alquila, oxo, -C(O)O-Rn, ou uma heteroarila de 5 a 12 membros opcionalmente substituída por Ci a C4 alquila; Ci a C4 alcóxi, C2 a C8 alquenila; C2 a C8 alquinila, C8a C10 arila, em que a arila é opcionalmente substituída por pelo menos um independentemente selecionado de halogênio ou Ci a C4 alcóxi; heteroarila de 5 a 12 membros, grupo heterociclo de 3 a 12 membros, em que 0 heterociclo é opcionalmente substituído por pelo menos um independentemente selecionado de acetamida, - C(O)O-Rn, heterociclo de 5 a 6 membros ou Ci a Ce alquila opcionalmente substituída por hidroxila, Ci a C4 alcóxi, grupo amino, ou grupo alquilamino, ou Ci a C8alquila, em que a aquila é opcionalmente substituída por pelo menos um independentemente selecionado de Ci a C4 alcóxi, Ce a C10 arila, amino, ou grupo heterociclo de 3 a 12 membros, em que os grupos amino e heterociclo são opcionalmente substituídos por pelo menos um independentemente selecionado de Ci a Ce alquila, oxo ou grupo - C(O)O-Rn; Rd é fenila substituída por um ou mais substituintes independentemente selecionados de halogênio, nitro, Ci a Ce alquila, -C(O)O-Re e -ORe; Re é hidrogênio, um grupo Ci a Ce alquila, em que 0 grupo alquila é opcionalmente substituído por pelo menos um independentemente selecionado de halogênio ou grupo alcóxi; ou um grupo Cβ a C10 arila, em que 0 grupo arila é opcionalmente substituído por pelo menos um independentemente selecionado de halogênio ou grupo alcóxi; e Rn é hidroxila; Ci a C4 alcóxi; amino ou Ci a Cβ alquila.

2. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que: X é hidrogênio, um grupo hidróxi, halogênio, Ci a C4 alquila, Ci a C5 alcóxi, opcionalmente substituído por um grupo Cβ a Cs arila; Ro é halogênio, Ci a Ce alquila, opcionalmente substituída por um ou mais grupos halogênios, um grupo ciano, um grupo nitro, um grupo amino, um grupo aminoalquila, um grupo acetamida, um grupo imidazol, ou ORa; Ra é hidrogênio, Ci a Ce alquila, opcionalmente substituída por um grupo heterociclo ou um grupo Ce a Cs arila, ou -C(O)O-Rb; Rb é um grupo Ci a C4 alquila; Rd é fenila substituída por um ou mais substituintes independentemente selecionados de halogênio, Ci a Cs alquila, - C(O)ORe e ORe; Re é hidrogênio, um grupo Ci a Ce alquila, opcionalmente substituído por pelo menos um halogênio ou um grupo alcóxi, ou um grupo Ce a Cs arila.

3. Composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que o referido composto apresenta um carbono quiral no ponto de ligação da fenila substituída por Ro e o referido composto é um isômero (S) neste carbono quiral.

4. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o referido composto é selecionado a partir do grupo consistindo em:

5. Composto, caracterizado pelo fato de ser selecionado do grupo que consiste em:

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

6. Composto de acordo com a reivindicação 4 ou 5, caracterizado pelo fato de que apresenta um átomo de carbono quiral no ponto de ligação do anel fenila diretamente ligado ao núcleo tricíclico e o composto é um enantiômero (S) no carbono quiral.

7. Composto de acordo com a reivindicação 6, caracterizado pelo fato de que o composto é:

8. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 7, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

9. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizado pelo fato de que é para o tratamento de câncer, retinopatia diabética, artrite reumatoide, psoríase, aterosclerose, obesidade, inflamação crônica ou degeneração macular exsudativa.

10.Uso de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizado pelo fato de ser para preparação de um medicamento para o tratamento de câncer, retinopatia diabética, artrite reumatoide, psoríase, aterosclerose, obesidade, inflamação crônica ou degeneração macular exsudativa.