ES2401335T3 - Derivados de carbolina útiles en la inhibición de la angiogénesis - Google Patents

Abstract

Un compuesto de Formula (IV), o una sal farmacéuticamente aceptable, racemato o estereoisómero del mismo; en la que, X es hidrógeno; un alquilo C1 a C6, opcionalmente sustituido con uno o más halógenos; un grupo hidroxilo; un halógeno; o un alcoxi C1 a C5, opcionalmente sustituido con un grupo arilo C6 a C10; Ro es un halógeno; un ciano; un nitro; un sulfonilo, en el que el sulfonilo está opcionalmente sustituido con un alquilo C1 a C6 o un heterociclo de 3 a 10 miembros; un grupo amino, en el que el grupo amino está opcionalmente sustituido con un alquilo C1 a C6, -C(O)-Rb, -C(O)O-Rb, un sulfonilo, un alquilsulfonilo, un grupo heterociclo de 3 a 10 miembros opcionalmente sustituido con un -C(O)O-Rn; -C(O)-NH-Rb; un heterociclo de 5 a 6 miembros; un heteroarilo de 5 a 6 miembros; un grupo alquilo C1 a C6, en el que el grupo alquilo está opcionalmente sustituido con al menos un grupo hidroxilo, halógeno, amino, o heterociclo de 3 a 12 miembros seleccionado independientemente, en el que el grupo amino y el grupo heterociclo están opcionalmente sustituidos con al menos un grupo alquilo C1 a C4 seleccionado independientemente, cuyo grupo alquilo C1 a C4 está opcionalmente sustituido con al menos un grupo alcoxi C1 a C4, grupo amino, grupo alquilamino, o grupo heterociclo de 5 a 10 miembros seleccionado independientemente; un grupo -C(O)-Rn; o un grupo -ORa; Ra es hidrógeno; alquileno C2 a C8; un grupo -C(O)O-Rb; un -C(O)-NH-Rb; un alquilo C1 a C8, en el que el grupo alquilo está opcionalmente sustituido con al menos un grupo hidroxilo, halógeno, alcoxi C1 a C4, amino, alquilamino, acetamida, -C(O)-Rb, -C(O)O-Rb, arilo C6 a C10, heterociclo de 3 a 12 miembros, o heteroarilo de 5 a 12 miembros seleccionado independientemente, en el que además el alquilamino está opcionalmente sustituido con un hidroxilo, un alcoxi C1 a C4, o un heteroarilo de 5 a 12 miembros opcionalmente sustituido con un alquilo C1 a C4, en el que además la acetamida está opcionalmente sustituida con un alcoxi C1 a C4, sulfonilo, o alquilsulfonilo, en el que además el grupo heterociclo está opcionalmente sustituido con un alquilo C1 a C4 opcionalmente sustituido con un grupo hidroxilo, -C(O)-Rn, -C(O)O-Rn, o un grupo oxo; Rb es hidroxilo; un amino; un alquilamino, en el que el alquilamino está opcionalmente sustituido con un hidroxilo, un amino, un alquilamino, un alcoxi C1 a C4, un heterociclo de 3 a 12 miembros opcionalmente sustituido con al menos un alquilo C1 a C6, oxo, -C(O)O-Rn, o un heteroarilo de 5 a 12 miembros opcionalmente sustituido con un alquilo C1 a C6, seleccionado independientemente; un alcoxi C1 a C4; un alquenilo C2 a C8; un alquinilo C2 a C8; un arilo C6 a C10, en el que el arilo está opcionalmente sustituido con al menos un halógeno o alcoxi C1 a C4 seleccionado independientemente; un heteroarilo de 5 a 12 miembros; grupo heterociclo de 3 a 12 miembros, en el que el heterociclo está opcionalmente sustituido con al menos un grupo acetamida, -C(O)O-Rn, heterociclo de 5 a 6 miembros, o alquilo C1 a C6 opcionalmente sustituido con a hidroxilo, alcoxi C1 a C4, grupo amino, o alquilamino, seleccionado independientemente; o un alquilo C1 a C8, en el que el alquilo está opcionalmente sustituido con al menos un grupo alcoxi C1 a C4, arilo C6 a C10, amino, o heterociclo de 3 a 12 miembros seleccionado independientemente, en el que los grupos amino y heterociclo están opcionalmente sustituidos con al menos un grupo alquilo C1 a C6, oxo, o -C(O)O-Rn seleccionado independientemente; Rd es fenilo sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre halógeno, nitro, alquilo C1 a C6, -C(O)O-Re, y -ORe; Re es un hidrógeno; un grupo alquilo C1 a C6, en el que el grupo alquilo está opcionalmente sustituido con al menos un grupo halógeno o alcoxi seleccionado independientemente; o un grupo arilo C6 a C10, en el que el grupo arilo está opcionalmente sustituido con al menos un grupo halógeno o alcoxi seleccionado independientemente; y Rn es un grupo hidroxilo, alcoxi C1 a C4, amino, o alquilo C1 a C6.

Description

Derivados de carbolina útiles en la inhibición de la angiogénesis

Campo de la invención

La presente invención se refiere a compuestos para la inhibición de la angiogénesis.

Antecedentes de la invención

La angiogénesis aberrante desempeña un papel crítico en la patogénesis de numerosas enfermedades, incluyendo enfermedades malignas, isquémicas, inflamatorias e inmunes (Carmeliet, Nat. Med., 9(6):653-60 (2003), Ferrara, Semin. Oncol, 29(6 Suppl 16):10-4 (2002)). Las más conocidas de estas enfermedades son cáncer, degeneración macular exudativa y retinopatía diabética (DR), siendo las dos últimas la causa principal de ceguera en los Estados Unidos de América (Witmer y col., Prog. Retin Eye Res., 22(1): 1-29 (2003), Clark y col, Nat. Rev. Drug Discovery, 2:448-459 (2003)). Durante la última década nuestra comprensión de las bases moleculares de la angiogénesis ha aumentado considerablemente. Se han identificado numerosas citoquinas y factores de crecimiento que estimulan la angiogénesis, tales como VEGF, FGF-2, PDGF, IGF-1, TGF, TNF-, G-CSF (Ferrara y col., Nat. Med., 5(12):135964 (1999), Kerbel y col, Nat. Rev. Cancer, 2(10):727-39 (2002), Rofstad y col, Cancer Res., 60(17):4932-8 (2000)). Entre estos factores de crecimiento, el Factor de Crecimiento Endotelial Vascular (VEGF) desempeña un papel fundamental en la angiogénesis (Ferrara, Semin. Oncol, 29(6 Suppl 16):10-4 (2002)).

VEGF, también conocido como VEGF-A, se identificó inicialmente por su capacidad de inducir permeabilidad vascular y de estimular la proliferación de células endoteliales vasculares (Leung y col, Science, 246:1306-1309 (1989), Plouet y col, EMBO J., 8:3801-3806 (1989), Connolly y col, J. Biol. Chem., 264:20017-20024 (1989)). VEGF se codifica por un único gen que da lugar a cuatro isoformas por empalme alternativo (Tischer y col, J. Biol. Chem., 266:11947-11954 (1991)). Las cuatro isoformas comparten una misma 5'-UTR inusualmente larga y rica en GC, así como una 3'-UTR que incluye múltiples determinantes de estabilidad de ARN. Los receptores VEGFR-2 (también conocidos como KDR o Flk-1) y VEGFR-1 (previamente conocidos como Flt1) reconocen la forma dimérica de VEGF (Ortega y col, Front. Biosci., 4:D141-52 (1999), Sato y col, Annals of New York Academy of Science, 902:201-207, (2000)). El receptor VEGFR-2 altamente específico se expresa en células endoteliales. La unión de VEGF al receptor VEGFR-2 activa la actividad de tirosina quinasa del receptor, conduciendo a la proliferación, diferenciación y formación de vasos primitivos de las células endoteliales (Shalaby y col, Nature, 376:62-66, (1995)). VEGFR-1 inhibe el crecimiento celular endotelial al actuar como señuelo o bien al suprimir las rutas de señalización a través de VEGFR-2 (Fong y col., Nature, 376:66-70 (1995)).

Hace más de 30 años, se propuso que la inhibición de la angiogénesis tumoral podría ser un enfoque eficaz para el tratamiento del cáncer (Folkman, N. Engl. J. Med, 285(21):1182-6 (1971)). Se ha demostrado que VEGF y su receptor desempeñan un papel fundamental en la angiogénesis tumoral, especialmente en los estadios iniciales del crecimiento tumoral (Hanahan y col., Cell, 86:353-364, 1996)). De hecho, se ha correlacionado el aumento de los niveles de la expresión de VEGF con la densidad microvascular en tejidos tumorales primarios (Gasparini y col, J. Natl. Cancer Inst., 89:139-147 (1997)). Además, se ha descubierto un aumento de los niveles de transcripción de VEGF en prácticamente todos los tumores sólidos comunes (Ferrara y col., Endocr. Rev., 18:4-25, 1997)). En general, los pacientes con tumores tienen mayores niveles de VEGF en comparación con los individuos sin tumores, y los niveles de VEGF elevados en suero/plasma se asocian con una mala prognosis (Dirix y col, Br. J. Cancer, 76:238-243 (1997)). De forma consecuente con el papel de VEGF en la angiogénesis tumoral, las células madre embrionarias sin VEGF mostraron una reducción drástica en la capacidad de formación de tumores en ratones desnudos (Carmeliet y col., Nature, 380:435-439 (1996)). La prueba directa de la relación de VEGF en la génesis tumoral se demostró con el uso de anticuerpos específicos frente a VEGF en xenoinjertos humanos implantados en ratones desnudos (Kim y col, Nature, 362:841-844 (1993), Hichlrn y col, Drug Discovery Today, 6:517-528 (2001)). En estos estudios, la inhibición del crecimiento tumoral correlacionó de forma positiva con el descenso en la formación de vasos en los tumores tratados con anticuerpos. Los experimentos posteriores que usan receptores solubles confirmaron la importancia de la actividad de VEGF en el crecimiento tumoral (Lin y col., Cell Growth Differ., 9(1):49-58 (1998)), y demostraron que la inactivación de VEGF mediante el tratamiento con anticuerpos específicos resultó directamente en una supresión casi completa de la neovascularización asociada a tumores (Borgstrom y col, Prostate, 35:1-10 (1998), Yuan y col. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 93:14765-14770 (1996)).

En la degeneración macular exudativa y en la retinopatía diabética, los experimentos preclínicos y los ensayos clínicos han demostrado que la sobreproducción de VEGF es fundamental para la neovascularización retinal o coroidal aberrante (revisado en Witmer y col, Prog. Retin Eye Res., 22(1):1-29 (2003)). Se han obtenido evidencias de que los niveles de VEGF intraoculares están claramente correlacionados con la neovascularización retinal/coroidal activa (CNV) en pacientes con enfermedades tales como retinopatía diabética y degeneración macular de forma húmeda (Funatsu y col., Am. J. Oftalmol., 133(4):537-43 (2002), Lip y col., Oftalmology, 108(4):705-10 (2001)). Además, los estudios que usan ratones transgénicos han demostrado que la sobreexpresión de VEGF en células del epitelio pigmentario retinal o en células fotoreceptoras resulta en neovascularización coroidal

o retinal (Schwesinger y col, Am. J. Pathol, 158(3):1161-72 (2001), Ohno-Matsui y col, Am. J. Pathol., 160(2):711-9 (2002)). En estudios recientes, la neutralización con anticuerpos, receptor soluble, antagonistas del receptor, o siARN ha probado ser eficaz en la reducción de la formación de vasos sanguíneos mediada por VEGF en modelos animales y en la clínica (Eyetech Study Group, 22(2):143-52 (2002), Krzystolik y col, Arch. Oftalmol., 120(3):338-46 (2002), Shen y col Lab Invest., 82(2):167-82 (2002), Honda y col, Gene Ther., 7(11):978-85 (2000), Saishin y col, J. Cell Physiol, 195(2):241-8 (2003)).

La expresión de VEGF se regula mediante un determinado número de factores y agentes que incluyen citoquinas, factores de crecimiento, hormonas esteroides y compuestos químicos, y mutaciones que modula la actividad de oncogenes tales como ras o el gen supresor de tumores VHL (Maxwell y col, Nature, 399:271-275 (1999), Rak y col, Cancer Res., 60:490-498 (2000)). Sin embargo, la hipoxia es la señal fisiológica más importante para la regulación de la expresión de VEGF. La hipoxia da como resultado un aumento de la expresión de VEGF por aumento tanto de la velocidad de transcripción como de la estabilidad de transcripción de VEGF (Ikeda y col, J. Biol Chem. 270:1976119766 (1995), Stein y col, Mol Cell Biol. 18 :3112-3119 (1998), Levy y col, J. Biol Chem. 271:2746-2753 (1996)). El factor 1 inducido por hipoxia (HIF-1 ) es un factor de transcripción que aumenta la expresión génica de VEGF en células que experimentan hipoxia mediante la unión del elemento de respuesta a hipoxia (HRE) localizado en el promotor de VEGF (Liu y col, Circ. Res., 77:638-643 (1995), Semenza, Armu. Rev. Cell Dev. Biol, 5:551-578 (1999)). La estabilidad del ARNm de VEGF también aumenta mucho como consecuencia de la unión de factores a elementos de la 3'-UTR (Goldberg y col, J. Biol. Cell J. Biol Chem., 277(16):13635-40 (2002)). Además, el inicio de la traducción de la transcripción de VEGF se regula de forma única. En condiciones de hipoxia, la traducción de la mayoría de las transcripciones celulares mediadas por procesos de iniciación de traducción dependientes de cap se reduce mucho (Kraggerud y col, Anticancer Res., 15:683-686 (1995)). El inicio de la traducción del ARNm de VEGF, sin embargo, es único en condiciones de hipoxia, en las que está mediado a través de un sitio interno de entrada al ribosoma (IRES) dentro de la 5'UTR de VEGF (Stein y col, Mol. Cell. Biol 18:3112-3119 (1998), Levy y col, J. Biol Chem. 271:2746-2753 (1996), Huez y col, Mol Cell. Biol, 18:6178-6190 (1998), Akiri y col, Oncogene, 17:227-236 (1998)).

Hay un extenso cuerpo de evidencia experimental que indica que el crecimiento tumoral se puede inhibir mediante la prevención de la neovascularización (Lin y col, Cell Growth Differ., 9(1):49-58 (1998), Zhu y col, Invest. New Drugs, 17:195-212 (1999)). Los vasos tumorales son generalmente inmaduros y experimentan una remodelación constante (Carmeliet, Nat. Med., 9(6):653-60 (2003), Carmeliet y col, Nature, 407:249-257 (2000)). La angiogénesis activa y aberrante es el resultado de una alteración del equilibrio normal de factores proangiogénicos y antiangiogénicos, que incluyen diversas citoquinas, factores de crecimiento y hormonas esteroides. A pesar de la complejidad de la regulación de la angiogénesis tumoral, las evidencias acumuladas indican que fijar como diana un único factor proangiogénico podría ser suficiente para inhibir la angiogénesis tumoral y suprimir el crecimiento tumoral (Kim y col, Nature, 362:841-844 (1993), Millauer y col, Nature, 367:576-579 (1994), Fong y col, Cancer Res., 59:99-106 (1999)). Entre las numerosos dianas de la angiogénesis, VEGF y su receptor son las más atractivas (Carmeliet, Nat. Med., 9(6):653-60 (2003), Ortega y col., Front. Biosci., 4:D141-52 (1999)). Como se ha indicado anteriormente, el tratamiento con un anticuerpo monoclonal dirigido específicamente a VEGF inhibió el crecimiento de tumores en xenoinjertos humanos implantados en ratones desnudos. Posteriormente, se han ensayado diversos enfoques diseñados para inactivar la señalización de VEGF en modelos tumorales y han demostrado que son altamente eficaces en una gran variedad de líneas celulares tumorales que incluyen carcinomas, sarcomas y gliomas (Ferrara y col, Endocr. Rev., 18:4-25, (1997), Kim y col., Nature, 362:841-844 (1993), Millauer y col, Nature, 367:576-579 (1994), Fong y col, Cancer Res., 59:99-106 (1999), Geng y col, Cancer Res., 61:2413-2419 (2001)). Además, la inhibición de VEGF mediante anticuerpos anti-VEGF no condujo a efectos secundarios importantes en roedores o primates completamente desarrollados (Ryan y col, Toxicol. Pathol, 27:78-86 (1999), Ferrara y col, Nat. Med., 4:336340 (1998)). Tomados en conjunto, estos resultados indican que VEGF es una diana válida para el desarrollo de una terapia tumoral. De hecho, se encuentran en desarrollo un determinado número de ensayos clínicos que usan inhibidores de VEGF (Matter, Drug Discovery Today, 6:1005-1024 (2001), Hichlin y col, Drug Discovery Today, 6:517-528 (2001)).

Aunque la patología de la degeneración macular exudativa relacionada con la edad involucra varios factores proangiogénicos, VEGF parece ser el más importante en la patogénesis y en el desarrollo de esta enfermedad (Witmer y col, Prog. Retin Eye Res., 22(1):1-29 (2003), Holash y col, Science, 284:1994-1998 (1999)). Los datos de los experimentos preclínicos y de los ensayos clínicos han demostrado que solo el bloqueo de VEGF es suficiente para aliviar o estabilizar el progreso de la enfermedad (Eyetech Study Group, 22(2):143-52 (2002), Krzystolik y col, Arch. Oftalmol, 120(3):338-46 (2002), Shen y col, Lab Invest., 82(2):167-82 (2002), Honda y col, Gene Ther., 7(11):978-85 (2000), Saishin y col, J. Cell Physiol, 195(2):241-8 (2003)). Por ejemplo, la inhibición de la señalización de VEGFR mediante un inhibidor específico de tirosina quinasa es suficiente para prevenir completamente la neovascularización retinal en un modelo murino de retinopatía de prematuridad (Ozaki H, Seo MS, Ozaki y col, Am.

J. Pathol, 156(2):697-707 (2000)). Además, se ha demostrado recientemente que los ARN de pequeña interferencia (siARN) dirigidos frente a VEGF murina inhibieron significativamente la neovascularización ocular después de fotocoagulación por láser en un modelo de razón (Reich y col, Mol Vis. 30;9:210-6 (2003)). Estos resultados indican que se puede conseguir la inhibición selectiva que la expresión de VEGF y ofrecen la validación de este enfoque para el tratamiento de enfermedades neovasculares oculares tales como degeneración macular exudativa y retinopatía diabética.

Se han usado tres enfoques para inhibir la actividad de VEGF, incluyendo (1) neutralización de la actividad de VEGF mediante el uso de un anticuerpo específico, un receptor soluble de VEGF u oligonucleótidos aptámeros frente a la interacción VEGF/VEGFR (Kim y col, Nature, 362:841-844 (1993), Lin y col, Cell Growth Differ., 9(1):49-58 (1998), Borgstrom y col, Prostate, 35:1-10 (1998), Zhu y col, Invest. New Drugs, 17:195-212 (1999), Millauer y col, Nature, 367:576-579 (1994), Asano y col, Jpn. J. Cancer Res., 90(1):93-100 (1999), Brekken y col, Cancer Res., 60(18):5117-24 (2000)); (2) inhibición de la transducción de señal mediada por VEGFR mediante inhibidores específicos de tirosina quinasa de molécula pequeña (Fong y col, Cancer Res., 59:99-106 (1999), Wedge y col, Cancer Res., 60(4):970-5 (2000) Laird y col, Cancer Res., 60(15):4152-60 (2000)); y (3) inhibición de la expresión de VEGF/VEGFR mediante el uso de antisentido, siARN o ribozima (Reich y col, Mol Vis. 30;9:210-6 (2003), Parry y col, Nucleic Acids Res., 27:2569-2577 (1999), Ellis y col, Surgery, 120:871-878 (1996), Filleur y col, Cancer Res., 63(14):3919-22 (2003)). Mientras que todos estos enfoques muestran una inhibición importante de la angiogénesis in vivo, todos ellos poseen limitaciones importantes. Por ejemplo, las proteínas terapéuticas (anticuerpos y receptores solubles) y los oligonucleótidos (antisentido, siARN y ribozima) son moléculas grandes con una mala permeabilidad que normalmente requieren administración parenteral y su producción es costosa. Para el tratamiento de neovascularización ocular crónica, las inyecciones múltiples pueden ser poco prácticas debido a complicaciones potenciales tales como desprendimiento de retina e infecciones relacionadas con el procedimiento. Además, los inhibidores de tirosina quinasa tienen una capacidad de especificidad limitada. VEGF se expresa constitutivamente a un nivel bajo en los ojos y otros tejidos normales y por lo tanto puede ser perjudicial suprimir completamente la función de VEGF mediante la administración sistémica de anticuerpos o inhibidores de tirosina quinasa, especialmente en pacientes con AMD y RD, muchos de los cuales también son hipertensos (Giles y col, Cancer, 97(8):1920-8 (2003), Sugimoto y col, J. Biol. Chem., 278(15):12605-8 (2003), Bergsland y col, American Society of Clinical Oncology 36th Annual Meeting, 20-23 de mayo de 2000, Nueva Orleans, LA, USA, Abstract 939), DeVore y col, American Society of Clinical Oncology 36th Annual Meeting, 20-23 de mayo de 2000, Nueva Orleans, LA, USA, Abstract 1896).

Por lo tanto, sigue existiendo una necesidad para desarrollar, caracterizar y optimizar moléculas ventajosas para el desarrollo de nuevos fármacos antiangiogénesis. Por consiguiente, es un objetivo de la presente invención proporcionar tales compuestos.

Se conocen tetrahidro- -carbolinas para diversas indicaciones en los documentos de Patente EP-A-0549916, WO 97/37658 A, US 2003/040527 A, WO 03/033496, WO 03/099821 A, y en Ishida y col. Bioorg. Med. Chem. Lett. 9:3319-3324 (1999).

Compendio de la invención

De acuerdo con la presente invención, se han identificado compuestos que inhiben la expresión de VEGF posttranscripcionalmente.

En un aspecto de la presente invención, se proporcionan compuestos de fórmula (IV) que son útiles para la inhibición de la producción de VEGF, para la inhibición de la angiogénesis, y/o para el tratamiento de cáncer, retinopatía diabética o degeneración macular exudativa.

En otro aspecto de la presente divulgación, se proporcionan métodos para la inhibición de la producción de VEGF, para la inhibición de la angiogénesis, y/o para el tratamiento de cáncer, retinopatía diabética, artritis reumatoide, psoriasis, aterosclerosis, inflamación crónica, otras enfermedades y trastornos crónicos relacionados con la inflamación, obesidad, o degeneración macular exudativa usando los compuestos descritos en la presente memoria.

En una realización, la presente divulgación se refiere a métodos para la inhibición de la producción de VEGF que comprenden la administración de una cantidad inhibitoria de la expresión de VEGF de al menos un compuesto de la presente invención a un sujeto con necesidad del mismo.

En otra realización de la presente divulgación, se proporcionan métodos para la inhibición de la angiogénesis y que comprenden la administración de una cantidad antiangiogénica de al menos un compuesto de la presente invención a un sujeto con necesidad del mismo.

En otra realización más de la presente divulgación, se proporcionan métodos para el tratamiento de cáncer, retinopatía diabética, artritis reumatoide, psoriasis, aterosclerosis, inflamación crónica, otras enfermedades y trastornos crónicos relacionados con la inflamación, obesidad, o degeneración macular exudativa que comprenden la administración de una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos un compuesto de la presente invención a un sujeto con necesidad del mismo.

Estos y otros aspectos de la presente invención se comprenderán con mayor claridad por referencia a las realizaciones preferentes y a la descripción detallada que siguen a continuación.

Breve descripción de las figuras

Figura 1. La Figura 1 ilustra la inhibición de la expresión de VEGF mediante cierto compuesto de la presente invención.

Figura 2. La Figura 2 ilustra que la actividad de fosfodiesterasa 5 (PDE-5) no se ve afectada por ciertos compuestos de la presente invención.

Descripción detallada de la invención

La regulación positiva aberrante del Factor de Crecimiento Endotelial Vascular (VEGF), un factor clave para la angiogénesis, contribuye de manera importante a la patogénesis de patologías tales como cáncer, retinopatía diabética, artritis reumatoide, psoriasis, aterosclerosis, inflamación crónica, otras enfermedades y trastornos crónicos relacionados con la inflamación, obesidad, o degeneración macular exudativa. De acuerdo con la presente invención, se han identificado compuestos que inhiben la expresión de VEGF post-transcripcionalmente, y se proporcionan métodos para su uso. Los compuestos de la presente invención presentan una actividad de orden nanomolar a sub-nanomolar para la inhibición de la expresión de VEGF.

A. Compuestos de la invención

En un aspecto de la presente invención, se proporcionan compuestos que son útiles para la inhibición de la producción de VEGF, para la inhibición de la angiogénesis, y/o para el tratamiento de cáncer, retinopatía diabética o degeneración macular exudativa. En ciertas realizaciones, los compuestos de la presente invención inhiben específicamente la producción de VEGF, mientras que en otras realizaciones, los compuestos de la presente invención inhiben la expresión de VEGF así como la de otros factores de la angiogénesis tales como FGF-2. A este respecto, un inhibidor pan-angiogénico puede ser preferente para los métodos de inhibición de crecimiento tumoral, mientras que los inhibidores específicos de VEGF pueden ser preferentes para el tratamiento de trastornos neovasculares oculares (Eyetech Study Group, 22(2):143-52 (2002)).

Los compuestos de la presente invención incluyen generalmente uno o más centros quirales, y como tales pueden existir en forma de mezclas racémicas (R/S) o en forma de composiciones enantioméricamente puras. Los compuestos pueden existir en forma de los isómeros (R) o (S) (cuando esté presente un centro quiral) en composiciones enantioméricamente puras. En una realización preferente, los compuestos de la presente invención son los isómeros (S) y pueden existir en forma de composiciones enantioméricamente puras que comprenden solamente el isómero (S). Como podrá reconocer un experto en la materia, cuando está presente en más de un centro quiral, los compuestos de la presente invención pueden existir en forma del isómero (R,R), (R,S), (S,R), (S,S), etc. Los compuestos preferentes incluyen los isómeros (S,S) y (S,R).

Como se usa en la presente memoria, "enantioméricamente puro" se refiere a composiciones que consisten básicamente en un isómero único, preferentemente que consisten en 90%, 92%, 95%, 98%, 99%, o 100% de un isómero único.

Los compuestos preferentes de la presente invención útiles en la inhibición de la producción de VEGF incluyen los de fórmula (IV) como se definen en las reivindicaciones anexas.

Como será evidente para un experto en la materia, los compuestos de Fórmula (IV) comprenden al menos un estereocentro, y pueden existir en forma de una mezcla racémica o en forma de una composición enantioméricamente pura. En una realización preferente, los compuestos de Fórmula (IV) son el isómero (S), en una composición enantioméricamente pura.

Como se usa en la presente memoria, el término "alquilo" se refiere generalmente a radicales hidrocarbilo saturado de configuración lineal, ramificada o cíclica que incluyen metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, secbutilo, terc-butilo, n-pentilo, n-hexilo, ciclohexilo, n-heptilo, octilo, n-octilo, y similares. En algunas realizaciones, los sustituyentes alquilo pueden incluir grupos alquilo C1 a C8, C1 a C6, o C1 a C4. El grupo alquilo puede estar opcionalmente sustituido con uno o más grupos halógeno o alcoxi. Por ejemplo, el grupo alquilo puede ser un haloalquilo, dihaloalquilo, o trihaloalquilo.

Como se usa en la presente memoria, "alquenilo" se refiere generalmente a radicales alqueno lineal, ramificado o cíclico que tienen uno o más dobles enlaces carbono-carbono, tales como grupos alquenilo C2 a C8 y C2 a C6, incluyendo 3-propenilo.

Como se usa en la presente memoria, "alquinilo" se refiere generalmente a radicales alquino lineal, ramificado o cíclico que tienen uno o más triples enlaces carbono-carbono, tales como grupos alquenilo C2 a C8 y C2 a C6, incluyendo hex-3-ino.

Como se usa en la presente memoria, "arilo" se refiere a una estructura anular aromática carbocíclica. Se incluyen en el ámbito de los grupos arilo los anillos aromáticos que tienen de cinco a veinte átomos de carbono. Las estructuras con anillos arilo incluyen compuestos que tienen una o más estructuras anulares, tales como los compuestos mono, bi o tricíclicos. Los ejemplos de grupos arilo incluyen estructuras anulares de fenilo, tolilo, antracenilo, fluorenilo, indenilo, azulenilo, fenantrenilo (es decir, fenantreno), y naftilo (es decir, naftaleno). En ciertas realizaciones, el grupo arilo puede estar opcionalmente sustituido.

Como se usa en la presente memoria, "heteroarilo" se refiere a una estructura anular aromática cíclica en la que uno

o más átomos en el anillo, el heteroátomo o heteroátomos, son un elemento distinto del carbono. Los heteroátomos son típicamente átomos de O, S o N. Se incluyen dentro del ámbito de heteroarilo, e independientemente seleccionables, estructuras anulares heteroarilo con O, N, y S. La estructura anular puede incluir compuestos que tienen una o más estructuras anulares, tales como compuestos mono, bi o tricíclicos. En algunas realizaciones, los grupos heteroarilo se pueden seleccionar entre grupos heteroarilo que contienen uno o más heteroátomos, dos o más heteroátomos, tres o más heteroátomos, o cuatro o más heteroátomos. Las estructuras anulares heteroarilo se pueden seleccionar entre las que contienen cinco o más átomos, seis o más átomos, u ocho o más átomos. Los ejemplos de estructuras anulares heteroarilo incluyen: acridina, benzoimidazol, benzoxazol, benzodioxol, benzofurano, dihidro-cromen-4-onilo, 1,3-diazina, 1,2-diazina, 1,2-diazol, 1,4-diazanaftaleno, furano, furazano, imidazol, indol, isoxazol, isoquinolina, isotiazol, isoindolilo, oxazol, purina, piridazina, pirazol, piridina, pirazina, pirimidina, pirrol, quinolina, quinoxalina, tiazol, tiofeno, 1,3,5-triazina, 1,2,4-triazina, 1,2,3-triazina, tetrazol y quinazolina. En ciertas realizaciones, el heteroarilo puede estar opcionalmente sustituido.

Como se usa en la presente memoria, "heterociclo" se refiere a estructuras anulares cíclicas en las que uno o más átomos en el anillo, el heteroátomo o heteroátomos, son un elemento distinto del carbono. Los heteroátomos son típicamente átomos de O, S o N. Se incluyen dentro del ámbito de heterociclo, e independientemente seleccionables, estructuras anulares heterociclo con O, N, y S. La estructura anular puede incluir compuestos que tienen una o más estructuras anulares, tales como compuestos mono, bi o tricíclicos. En algunas realizaciones, los grupos heterociclo se pueden seleccionar entre grupos heterociclo que contienen uno o más heteroátomos, dos o más heteroátomos, tres o más heteroátomos, o cuatro o más heteroátomos. Los ejemplos de grupos heterociclo incluyen morfolinilo, pirrolidinonilo, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, hidantoinilo, valerolactamaílo, oxiranilo, oxetanilo, tetrahidrofuranoílo, tetrahidropiranilo, tetrahidropiridinilo, tetrahidropirimidinilo, tetrahidrotiofenilo o tetrahidrotiopiranilo y similares. En ciertas realizaciones, el heterociclo puede estar opcionalmente sustituido.

Como se usa en la presente memoria, "alcanoílo" se refiere generalmente a un grupo con la estructura -C(O)-R. En ciertas realizaciones, R puede ser un hidrógeno, un alquilo, un grupo 4-morfolinilo, o un grupo tiazolamino.

Como se usa en la presente memoria, "alcoxi" se refiere generalmente a un grupo con la estructura -O-R. En ciertas realizaciones, R puede ser un grupo alquilo, tal como un grupo alquilo C1 a C5.

Para los fines de la presente invención, los sustituyentes halo se pueden seleccionar independientemente entre los halógenos tales como flúor, cloro, bromo, yodo, y astato.

En ciertas realizaciones preferentes, X puede ser hidrógeno, metoxi, hidroxilo, benzoxi, o un halógeno, preferentemente bromuro o cloruro. En otras realizaciones, X puede ser preferentemente un alquilo o un haloalquilo C1 a C4.

Los compuestos preferentes de la presente invención se definen en las reivindicaciones 4 y 5. Compuestos adicionales de la presente divulgación incluyen los siguientes:

En ciertas realizaciones, los compuestos preferentes incluyen los que tienen un valor de CE50 en el ensayo ELISA de VEGF descrito en el Ejemplo 2 de menos de aproximadamente 2 uM, más preferentemente entre aproximadamente 2 uM y aproximadamente 0,04 uM (200 nM a 40 nM); más preferentemente de aproximadamente 0,04 uM a 5 aproximadamente 0,008 uM (40 nM a 8 nM); y más preferentemente menos de aproximadamente 0,008 uM (< 8 nM). Los compuestos particularmente preferentes son los Compuestos de número: 2, 4, 5, 7, 8, 10, 11, 12, 17, 23, 25, 81, 102, 112, 140, 328, 329, 330, 331, 332, 355, 816, 817, 818, 823, 824, 825, 830, 831, 832, 837, 838, 841, 842, 843, y los regioisómeros de los mismos. En una realización, los compuestos preferentes de la presente invención forman una mezcla racémica, y en otra realización los compuestos de la presente invención son el isómero

10 (R), (S), (R,R), (S,S), (R,S), (S,R), en una composición enantioméricamente pura. Más preferentemente, los compuestos de la presente invención son los isómeros (S), en una composición enantioméricamente pura.

Los compuestos anteriores se enumeran solamente para proporcionar ejemplos que se pueden usar en los métodos de la presente divulgación.

B. Preparación de los Compuestos de la Invención

15 Los compuestos de la presente invención se pueden producir de cualquier manera conocida en la técnica. A modo de ejemplo, los compuestos de la presente invención se pueden preparar de acuerdo con los siguientes esquemas generales. De forma más específica, se puede usar el Esquema I para preparar los compuestos de Fórmula I. El Esquema la se puede usar junto con el Esquema I cuando R2 es un grupo -CH2-furanilo. De forma alternativa, se puede usar el Esquema lb para síntesis asimétrica cuando R2 es hidrógeno o hidroxilo.

El Esquema II se puede usar para preparar los compuestos de Fórmula I-h. Los Esquemas IlIa o Illb se pueden usar para preparar los compuestos de Fórmula I-i.

Ref: Chem. Pharm. Bull. 1987,4700.

5 Ref: Magid Abou-Gharbia y col, J. Med. Chem. 1987, 30, 1818.

En una realización preferente, los compuestos de la presente invención se pueden resolver en composiciones enantioméricamente puras usando cualquier método conocido en la técnica. A modo de ejemplo, los compuestos de la presente invención se pueden resolver por cristalización directa de mezclas enantioméricas, mediante la formación de una sal diastereómera de enantiómeros, mediante la formación de diastereómeros y separación, o

10 mediante resolución enzimática.

En una realización preferente, los compuestos de la presente invención se pueden resolver a través de cristalización usando, por ejemplo, N-acetil-L-fenilalanina para obtener el isómero (S), o N-acetil-D-fenilalanina para obtener el isómero (R), de una forma similar a la que se ilustra en el Esquema IV.

En ciertas realizaciones, los métodos ejemplares del Esquema I para la preparación de compuestos preferentes de Fórmula I involucran la formación de productos/intermedios de amina libre por reacción de Pictet-Spengler, como se describe a continuación en el Procedimiento I.

triptamina 5-sustituida.HCl (I) en ácido sulfúrico 0,1 N. A continuación la solución se puede agitar a aproximadamente 110 °C - 120 °C en un recipiente de reacción cerrado hasta que la reacción haya progresado lo suficiente para completarse, por ejemplo, durante de aproximadamente 15 minutos a aproximadamente 20 horas. Después de que se haya completado la reacción, la mezcla de reacción se puede enfriar a temperatura ambiente y se puede filtrar la sal precipitada. A continuación, el residuo filtrado se puede lavar con éter, EtOAc o una mezcla de DCM y DMF y secar para obtener el producto (III) en forma de sal de ácido. De forma alternativa, se puede añadir un Aldehído deseado (II) a una suspensión de triptamina 5-sustituida.HCl (I) en ácido acético y calentar a reflujo hasta que la reacción haya progresado lo suficiente para completarse, por ejemplo, durante de aproximadamente 15 minutos a aproximadamente 20 horas. Después de que se haya completado la reacción, la mezcla de reacción se puede enfriar a temperatura ambiente y se puede filtrar la sal de ácido. A continuación, el residuo filtrado se puede lavar con ácido acético seguido de DCM y secar para obtener el producto (III) en forma de sal de ácido. La amina libre (III) se puede obtener por extracción con EtOAc y lavado con hidróxido de amonio acuoso o hidróxido sódico ac. 1 M.

La amina libre, o su sal, se puede usar a continuación para formar otros compuestos preferentes de Fórmula I, tales como análogos de carbamato (Fórmula I-c, Procedimiento II), análogos de amida, incluyendo análogos de N-acetilo (Fórmula I-c, Procedimiento IIIa y Procedimiento IIIb), análogos de urea y tiourea (Fórmula I-e y I-f, Procedimiento IV y Procedimiento V, respectivamente), análogos de sulfóxido (Fórmula I-g, Procedimiento VI), y análogos de pirimidina (Procedimiento VII).

Más particularmente, se puede usar el Procedimiento II para sintetizar análogos de carbamato de las aminas libres (III), o de sus sales.

De acuerdo con el Procedimiento II, se puede añadir diisopropiletilamina (DIEA) a la amina libre (III), o a su sal de ácido en diclorometano (DCM), seguido de la adición lenta de cloroformiato sustituido. La mezcla de reacción se puede agitar a temperatura ambiente durante aproximadamente 1 a 20 horas. A continuación el disolvente se puede evaporar y el producto en bruto se puede purificar por HPLC o bien por cromatografía en columna sobre gel de sílice.

El Procedimiento IIIa se puede usar para sintetizar análogos de amida de la amina libre (III), o de sus sales.

De acuerdo con el Procedimiento IIIa, se puede añadir una mezcla agitada previamente durante 15 min de un R2ácido y diisopropil carbodiimida (DIC) a la amina libre (III), o a su sal de ácido en DCM y DIEA. La mezcla de reacción se puede agitar durante aproximadamente 1 h. A continuación los disolventes se pueden evaporar y purificar el producto en bruto por HPLC.

De forma alternativa, se puede usar el Procedimiento IIIb para sintetizar análogos de N-acetilo de las aminas libres (III), o de sus sales.

De acuerdo con el Procedimiento IIIb, se puede añadir piridina a la amina libre (III), o a su sal de ácido en DCM,

10 seguido de anhídrido acético. La mezcla de reacción se puede agitar a temperatura ambiente durante aproximadamente 8 a 20 horas. A continuación se pueden evaporar los disolventes y purificar el producto en bruto por HPLC.

El Procedimiento IV se puede usar para sintetizar análogos de urea de las aminas libres (III), o de sus sales.

15 De acuerdo con el Procedimiento IV, se pueden añadir DIEA y Rd-isocianato a la amina libre (III), o a su sal de ácido en DCM. La mezcla de reacción se puede calentar a reflujo durante aproximadamente 1,5 h. A continuación se pueden evaporar los disolventes y purificar el producto en bruto por HPLC.

El Procedimiento V se puede usar para sintetizar análogos de tiourea de las aminas libres (III), o de sus sales.

De acuerdo con el Procedimiento V, se pueden añadir DIEA y Rd-isotiocianato a la amina libre (IE), o a su sal de ácido en DCM. La mezcla de reacción se puede calentar a reflujo durante aproximadamente 12 h. A continuación se pueden evaporar los disolventes y purificar el producto en bruto por HPLC.

El Procedimiento VI se puede usar para sintetizar análogos de sulfonilo de las aminas libres (III), o de sus sales.

De acuerdo con el Procedimiento VI, se pueden añadir DIEA y cloruro de Rd-sulfonilo a la amina libre (III), o a su sal de ácido en DCM. La mezcla de reacción se puede agitar a temperatura ambiente durante aproximadamente 12 h. A continuación se pueden evaporar los disolventes y purificar el producto en bruto por HPLC.

10 El Procedimiento VII se puede usar para sintetizar análogos de pirimidina de las aminas libres (III), o de sus sales.

De acuerdo con el Procedimiento VII, se pueden añadir trietilamina y 2-bromopirimidina en N,N-dimetilformamida (DMF) a la amina libre (IE), o a su sal de ácido en DCM. La mezcla de reacción se puede calentar a aproximadamente 120 °C durante aproximadamente 12 h. A continuación se pueden evaporar los disolventes y

15 purificar el producto en bruto por HPLC.

Estas y otras metodologías de reacción pueden ser útiles en la preparación de los compuestos de la presente invención, como podrá reconocer un experto en la materia. Diversas modificaciones de los esquemas y procedimientos anteriores serán evidentes para un experto en la materia, y la presente invención no está limitada específicamente por el método de preparación de los compuestos de la presente invención.

20 C. Métodos de la Presente Divulgación

En otro aspecto de la presente divulgación, se proporcionan métodos para la inhibición de la producción de VEGF, para inhibición de la angiogénesis, y/o para el tratamiento de cáncer, retinopatía diabética, artritis reumatoide, psoriasis, aterosclerosis, inflamación crónica, otras enfermedades y trastornos crónicos relacionados con la inflamación, obesidad, o degeneración macular exudativa usando los compuestos descritos en la presente memoria.

25 En una realización, la presente divulgación se refiere a métodos para inhibición de la producción de VEGF que comprenden la administración de una cantidad inhibitoria de la expresión de VEGF de al menos un compuesto de la presente invención a un sujeto con necesidad del mismo.

En otra realización, se proporcionan métodos para la inhibición de la angiogénesis que comprenden la administración de una cantidad antiangiogénica de al menos un compuesto de la presente invención a un sujeto con necesidad del mismo.

En otra realización más, se proporcionan métodos para el tratamiento de cáncer, retinopatía diabética, artritis reumatoide, psoriasis, aterosclerosis, inflamación crónica, otras enfermedades y trastornos crónicos relacionados con la inflamación, obesidad, o degeneración macular exudativa que comprenden la administración de una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos un compuesto de la presente invención a un sujeto con necesidad del mismo.

Sin la intención de quedar limitado por teoría alguna, se cree que los métodos de la presente divulgación actúan a través de una combinación de mecanismos que modulan la actividad de VEGF. En realizaciones preferentes, los métodos de la presente divulgación comprenden la administración de una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos un compuesto de la presente invención, en los que el compuesto es un isómero (S).

De acuerdo con los métodos de la presente divulgación, el compuesto o compuestos se pueden administrar al sujeto a través cualquier vía de suministro de fármacos conocida en la técnica. Las vías de administración ejemplares específicas incluyen oral, ocular, rectal, bucal, tópica, nasal, oftálmica, subcutánea, intramuscular, intravenosa (bolo e infusión), intracerebral, transdérmica, y pulmonar.

Los términos "cantidad inhibitoria de VEGF", "cantidad antiangiogénica", y "cantidad terapéuticamente eficaz", como se usan en la presente memoria, se refieren a una cantidad de un agente farmacéutico para tratar, mejorar o prevenir la enfermedad o afección identificada, o para exhibir un efecto terapéutico o inhibitorio detectable. El efecto se puede detectar, por ejemplo, mediante los ensayos desvelados en los siguientes ejemplos. La cantidad eficaz precisa para un sujeto dependerá del peso corporal, talla y estado de salud del sujeto; la naturaleza y alcance de la afección; y el agente terapéutico o la combinación de agentes terapéuticos seleccionada para la administración. Se puede determinar la cantidad terapéuticamente eficaz para una situación determinada mediante la experimentación de rutina que está dentro de la destreza y el criterio del clínico.

Para cualquier compuesto, la cantidad terapéuticamente eficaz se puede estimar inicialmente en ensayos de cultivo celular, por ejemplo, de células neoplásicas, o bien en modelos animales, normalmente ratas, ratones, conejos, perros, o cerdos. El modelo animal también se puede usar para determinar el intervalo de concentración apropiada y la vía de administración. A continuación se puede usar tal información para determinar la dosis y las vías de administración útiles en seres humanos. La eficacia terapéutica/profiláctica y la toxicidad se pueden determinar mediante procedimientos farmacéuticos estándar en cultivos celulares o animales experimentales, por ejemplo, DE50 (dosis terapéuticamente eficaz para el 50% de la población) y DL50 (dosis letal para el 50% de la población). La relación de dosis entre los efectos terapéutico y tóxico es el índice terapéutico, y se puede expresar como la relación DE50/DL50. Son preferentes las composiciones farmacéuticas que exhiben altos índices terapéuticos. Los datos obtenidos a partir de ensayos de cultivos celulares y de estudios animales se pueden usar para la formulación de un intervalo de dosificación para uso humano. La dosificación contenida en tales composiciones está preferentemente dentro de un intervalo de concentraciones en circulación que incluye un valor de DE50 con poca o ninguna toxicidad. La dosificación puede variar dentro de este intervalo dependiendo de la forma de dosificación empleada, de la sensibilidad del paciente y de la vía de administración.

Más específicamente, las relaciones concentración-efecto biológico observadas con respecto al compuesto o compuestos de la presente invención indican una concentración objetivo inicial en plasma que varía de aproximadamente 0,1 g/ml a aproximadamente 100 g/ml, preferentemente de aproximadamente 5 g/ml a aproximadamente 50 g/ml, más preferentemente de aproximadamente 5 g/ml a aproximadamente 10 g/ml. Para conseguir tales concentraciones en plasma, los compuestos de la presente invención se pueden administrar en dosis que varían de 0,1 g a 100.000 mg, dependiendo de la vía de administración. La orientación hacia dosificaciones particulares y métodos de suministro se proporciona en la bibliografía y está generalmente disponible para los practicantes en la técnica. En general la dosis estará dentro del intervalo de aproximadamente 1 mg/día a aproximadamente 10 g/día, o de aproximadamente 0,1 g a aproximadamente 3 g/día, o de aproximadamente 0,3 g a aproximadamente 3 g/día, o de aproximadamente 0,5 g a aproximadamente 2 g/día, en dosis individuales, divididas,

o continuas para un peso de paciente entre aproximadamente 40 y aproximadamente 100 kg (cuya dosis se puede ajustar para pacientes por encima o por debajo de este intervalo de peso, particularmente para niños por debajo de 40 kg).

La dosis exacta se determinará por el practicante, a la luz de factores relacionados con el sujeto que requiere el tratamiento. La dosificación y la administración se ajustan para proporcionar niveles suficientes del agente o agentes activos o para mantener el efecto deseado. Los factores que se toman en consideración incluyen la gravedad de la patología, el estado general de salud del sujeto, edad, peso, y género del sujeto, dieta, período y frecuencia de la administración, combinación o combinaciones de fármacos, sensibilidad de reacción, y tolerancia/respuesta a la terapia. Las composiciones farmacéuticas de acción prolongada se pueden administrar cada 3 a 4 días, cada semana, o una vez cada dos semanas dependiendo de la vida media y de la velocidad de aclaramiento de la formulación particular.

D. Metabolitos de los Compuestos de la Intención

La presente memoria descriptiva también desvela productos metabólicos in vivo de los compuestos descritos en la presente memoria. Tales productos pueden resultar por ejemplo de la oxidación, reducción, hidrólisis, amidación, esterificación y similares del compuesto administrado, principalmente debido a procesos enzimáticos. Por lo tanto, la presente memoria descriptiva también desvela compuestos producidos mediante un proceso que comprende poner en contacto un compuesto de la presente invención con un tejido o un mamífero durante un período de tiempo suficiente para proporcionar un producto metabólico del mismo. Tales productos se identifican típicamente mediante la preparación de un compuesto radiomarcado (por ejemplo 14C o 3H) de la presente invención, su administración en una dosis detectable (por ejemplo, mayor de aproximadamente 0,5 mg/kg) a un mamífero tal como una rata, ratón, cobaya, mono, o a un hombre, dejar tiempo suficiente para que actúe el metabolismo (típicamente de aproximadamente 30 segundos a 30 horas), y aislar sus productos de conversión a partir de orina, sangre u otras muestras biológicas. Estos productos se aíslan fácilmente dado que están marcados (otros se aíslan mediante el uso de anticuerpos capaces de unirse a epítopos que sobreviven en los metabolitos). Las estructuras de los metabolitos se determinan de modo convencional, por ejemplo, mediante análisis por MS o RMN. En general, el análisis de metabolitos se puede hacer de la misma manera que los estudios de metabolismo de fármacos convencionales bien conocidos por los expertos en la materia. Los productos de conversión, que de otra manera no se encontrarían in vivo, son útiles en ensayos de diagnóstico para la dosificación terapéutica de los compuestos de la presente invención incluso aunque no poseyeran ninguna actividad biológica por sí mismos.

E. Composiciones Farmacéuticas de la Invención

Mientras que es posible que los compuestos de la presente invención se administren en forma pura, puede ser preferible formular los compuestos en forma de composiciones farmacéuticas. Como tal, en otro aspecto más de la presente invención, se proporcionan composiciones farmacéuticas útiles en los métodos de la presente invención. Las composiciones farmacéuticas de la presente invención se pueden formular con excipientes farmacéuticamente aceptables tales como vehículos, disolventes, estabilizantes, ayudantes, diluyentes, etc., dependiendo de la vía de administración y de la forma de dosificación particulares. Las composiciones farmacéuticas se deberían formular generalmente para conseguir un pH fisiológicamente compatible, y pueden variar de un pH de aproximadamente 3 a un pH de aproximadamente 11, preferentemente de aproximadamente pH 3 a aproximadamente pH 7, dependiendo de la formulación y de la vía de administración. En realizaciones alternativas, puede ser preferente que el pH se ajuste a un intervalo de aproximadamente pH 5,0 a aproximadamente pH 8,0.

Más particularmente, las composiciones farmacéuticas de la presente invención comprenden una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz de al menos un compuesto de la presente invención, junto con uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables. Opcionalmente, las composiciones farmacéuticas de la presente invención pueden comprender una combinación de compuestos de la presente invención, o pueden incluir un segundo ingrediente activo útil en el tratamiento de cáncer, retinopatía diabética, o degeneración macular exudativa.

Las formulaciones de la presente invención, por ejemplo, para administración parenteral u oral, son lo más típicamente sólidos, soluciones líquidas, emulsiones o suspensiones, mientras que las formulaciones inhalables para administración pulmonar son generalmente líquidos o polvos, siendo las formulaciones en polvo generalmente preferentes. Una composición farmacéutica preferente de la presente invención también se puede formular en forma de un sólido liofilizado que se reconstituye con un disolvente fisiológicamente compatible antes de su administración. Se pueden formular composiciones farmacéuticas alternativas de la presente invención en forma de jarabes, cremas, pomadas, comprimidos, y similares.

El término "excipiente farmacéuticamente aceptable" se refiere a un excipiente para la administración de un agente farmacéutico, tal como los compuestos de la presente invención. El término se refiere a cualquier excipiente farmacéutico que se puede administrar sin toxicidad excesiva. Los excipientes farmacéuticamente aceptables se determinan en parte mediante la composición particular que se va a administrar, así como mediante el método particular usado para administrar la composición. Por consiguiente, existe una gran diversidad de formulaciones adecuadas de las composiciones farmacéuticas de la presente invención (véase, por ejemplo, Remington's Pharmaceutical Sciences).

Los excipientes adecuados pueden ser moléculas de vehículo que incluyen grandes macromoléculas que se metabolizan lentamente tales como proteínas, polisacáridos, ácidos polilácticos, ácidos poliglicólicos, aminoácidos poliméricos, copolímeros de aminoácido, y partículas de virus inactivas. Otros excipientes ejemplares incluyen antioxidantes tales como ácido ascórbico; agentes quelantes tales como EDTA; hidratos de carbono tales como dextrina, hidroxialquilcelulosa, hidroxialquilmetilcelulosa, ácido esteárico; líquidos tales como aceites, agua, solución salina, glicerol y etanol; agentes humectantes o emulsionantes; sustancias tamponadoras de pH; y similares. Los liposomas también se incluyen dentro de la definición de excipiente farmacéuticamente aceptable.

Las composiciones farmacéuticas de la presente invención se pueden formular de cualquier forma adecuada para el método destinado de administración. Cuando se destinan a uso oral se pueden preparar, por ejemplo, comprimidos, trociscos, pastillas para chupar, suspensiones acuosas o de aceite, soluciones no acuosas, polvos o gránulos dispersables (incluyendo partículas micronizadas o nanopartículas), emulsiones, cápsulas duras o blandas, jarabes o elixires. Las composiciones destinadas a uso oral se pueden preparar de acuerdo con cualquier método conocido en la técnica de la manufactura de composiciones farmacéuticas, y tales composiciones pueden contener uno o más agentes que incluyen agentes edulcorantes, agentes aromatizantes, agentes colorantes y agentes conservantes, para proporcionar una preparación sabrosa.

Los excipientes farmacéuticamente aceptables particularmente adecuados para su uso junto con comprimidos incluyen, por ejemplo, diluyentes inertes, tales como celulosas, carbonato sódico o de calcio, lactosa, fosfato sódico

o de calcio; agentes disgregantes, tales como croscarmelosa sódica, povidona reticulada, almidón de maíz, o ácido algínico; agentes aglutinantes, tales como povidona, almidón, gelatina o goma arábiga; y agentes lubricantes, tales como estearato de magnesio, ácido esteárico o talco. Los comprimidos pueden estar sin revestir o pueden estar revestidos mediante técnicas conocidas que incluyen la microencapsulación para retrasar la desintegración y la absorción en el tracto gastrointestinal y proporcionar de esta manera una acción sostenida durante un período más prolongado. Por ejemplo, se puede emplear un material de retraso temporal tal como monoestearato de glicerilo o diestearato de glicerilo solo o con una cera.

Las formulaciones para uso oral también se pueden presentar en forma de cápsulas de gelatina dura en las que el ingrediente activo se mezcla con un diluyente sólido inerte, por ejemplo celulosas, lactosa, fosfato de calcio o caolín,

o en forma de cápsulas de gelatina blanda en las que el ingrediente activo se mezcla con un medio no acuoso o de aceite, tal como glicerina, propilenglicol, polietilenglicol, aceite de cacahuete, parafina líquida o aceite de oliva.

En otra realización, las composiciones farmacéuticas de la presente invención se pueden formular en forma de suspensiones que comprenden un compuesto de la presente invención en una mezcla con al menos un excipiente farmacéuticamente aceptable adecuado para la manufactura de una suspensión. En otra realización más, las composiciones farmacéuticas de la presente invención se pueden formular en forma de polvos y gránulos dispersables adecuados para la preparación de una suspensión mediante la adición de los excipientes adecuados.

Los excipientes adecuados para uso junto con suspensiones incluyen agentes de suspensión, tales como carboximetilcelulosa sódica, metilcelulosa, hidroxipropil metilcelulosa, alginato sódico, polivinilpirrolidona, goma de tragacanto, goma arábiga, agentes dispersantes o humectantes tales como una fosfatida de origen natural (por ejemplo, lecitina), un producto de condensación de un óxido de alquileno con un ácido graso (por ejemplo, estearato de polioxietileno), un producto de condensación de óxido de etileno con un alcohol alifático de cadena larga (por ejemplo, heptadecaetilenoxicetanol), un producto de condensación de óxido de etileno con un éster parcial derivado de un ácido graso y un anhídrido de hexitol (por ejemplo, monooleato de polioxietileno sorbitán); y agentes espesantes, tales como carbómero, cera de abeja, parafina dura o alcohol cetílico. Las suspensiones también pueden contener uno o más conservantes tales como ácido acético, p-hidroxi-benzoato de metilo y/o de n-propilo; uno o más agentes colorantes; uno o más agentes aromatizantes; y uno o más agentes edulcorantes tales como sacarosa o sacarina.

Las composiciones farmacéuticas de la presente invención también pueden estar en forma de emulsiones de aceite en agua. La fase aceitosa puede ser un aceite vegetal, tal como aceite de oliva o aceite de cacahuete, un aceite mineral, tal como parafina líquida, o una mezcla de estos. Los agentes emulsionantes adecuados incluyen gomas de origen natural, tales como goma arábiga o goma de tragacanto; fosfatidas de origen natural, tales como lecitina de soja, ésteres o ésteres parciales derivados de ácidos grasos; anhídridos de hexitol, tales como monooleato de sorbitán; y productos de condensación de estos ésteres parciales con óxido de etileno, tales como monooleato de polioxietileno sorbitán. La emulsión también puede contener agentes edulcorantes y aromatizantes. Los jarabes y elixires se pueden formular con agentes edulcorantes, tales como glicerol, sorbitol o sacarosa. Tales formulaciones también pueden contener un agente demulcente, un agente conservante, un agente aromatizante o un agente colorante.

Además, las composiciones farmacéuticas de la presente invención pueden estar en forma de una preparación inyectable estéril, tal como una emulsión acuosa o una suspensión oleaginosa inyectable estéril. Esta emulsión o suspensión se puede formular de acuerdo con la técnica conocida que usa los agentes dispersantes o humectantes y los agentes de suspensión que se han mencionado anteriormente. La preparación inyectable estéril también puede ser una solución o suspensión inyectable estéril en un diluyente o disolvente no tóxico parenteralmente aceptable, tal como una solución en 1,2-propano-diol. La preparación inyectable estéril también se puede preparar en forma de un polvo liofilizado. Entre los vehículos y disolventes aceptables que se pueden emplear se encuentran agua, solución de Ringer, y solución isotónica de cloruro sódico. Además, se pueden emplear aceites no volátiles estériles como disolvente o medio de suspensión. Para este fin se puede emplear cualquier aceite no volátil insípido incluyendo mono o diglicéridos sintéticos. Además, asimismo se pueden usar ácidos grasos tales como ácido oleico en la preparación de inyectables.

Generalmente, los compuestos de la presente invención útiles en los métodos de la presente invención son básicamente insolubles en agua y son solubles con moderación en la mayoría de los disolventes próticos farmacéuticamente aceptables y en aceites vegetales. Sin embargo, los compuestos son generalmente solubles en ácidos grasos de cadena media (por ejemplo, los ácidos caprílico y cáprico) o en triglicéridos y tienen una elevada solubilidad en ésteres de propilenglicol de ácidos grasos de cadena media. También se contemplan en la presente invención compuestos que se han modificado mediante sustituciones o adiciones de restos químicos o bioquímicos que los hacen más adecuados para el suministro (por ejemplo, aumento de solubilidad, bioactividad, palatabilidad, disminución de las reacciones adversas, etc.), por ejemplo mediante esterificación, glicosilación, PEGilación, etc.

En una realización preferente, los compuestos de la presente invención se pueden formular para la administración oral en una formulación basada en lípidos adecuada para la baja solubilidad de los compuestos. Las formulaciones basadas en lípidos pueden mejorar generalmente la biodisponibilidad oral de tales compuestos. Como tal, una composición farmacéutica preferente de la presente invención comprende una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz de un compuesto de la presente invención, junto con al menos un excipiente farmacéuticamente aceptable seleccionado entre el grupo que consiste en: ácidos grasos de cadena media o ésteres de propilenglicol de los mismos (por ejemplo, ésteres de propilenglicol de ácidos grasos comestibles tales como los ácidos grasos caprílico y cáprico) y tensioactivos farmacéuticamente aceptables tales como aceite de ricino hidrogenado polioxil 40.

En una realización preferente alternativa, se pueden añadir ciclodextrinas como potenciadores de la solubilidad acuosa. Las ciclodextrinas preferentes incluyen derivados de hidroxipropilo, hidroxietilo, glucosilo, maltosilo y maltotriosilo de -y -ciclodextrina. Un potenciador de la solubilidad de ciclodextrina particularmente preferente es hidroxipropil--ciclodextrina (HPBC), que se puede añadir a cualquiera de las composiciones descritas anteriormente para mejorar de forma adicional las características de solubilidad acuosa de los compuestos de la presente invención. En una realización, la composición comprende de 0,1% a 20% de hidroxipropil--ciclodextrina, más preferentemente de 1% a 15% de hidroxipropil--ciclodextrina, e incluso más preferentemente de 2,5% a 10% de hidroxipropil--ciclodextrina. La cantidad de potenciador de la solubilidad empleado dependerá de la cantidad de compuesto de la presente invención en la composición.

I. Terapia de Combinación

También es posible combinar cualquier compuesto de la presente invención con uno o más de otros ingredientes activos útiles en el tratamiento del cáncer, incluyendo compuestos, en una forma de dosificación unitaria, o en formas de dosificación separadas destinadas a la administración simultánea o secuencial a un paciente con necesidad del tratamiento. Cuando se administra de forma secuencial, la combinación se puede administrar en dos o más administraciones. En una realización alternativa, es posible administrar uno o más compuestos de la presente invención y uno o más ingredientes activos adicionales por vías diferentes.

Los expertos en la materia reconocerán que se pueden administrar una diversidad de ingredientes activos en combinación con los compuestos de la presente invención que pueden actuar para aumentar o potenciar sinérgicamente la inhibición de VEGF y/o la actividad de antiangiogénesis de los compuestos de la presente invención.

De acuerdo con los métodos de la presente invención, la combinación de ingredientes activos puede ser: (1) coformulada y administrada o suministrada de forma simultánea en una formulación combinada; (2) suministrada mediante alternación o en paralelo en forma de formulaciones separadas; o (3) mediante cualquier otro régimen de terapia de combinación conocido la técnica. Cuando se suministra en una terapia de alternación, los métodos de la presente invención pueden comprender la administración o el suministro de ingredientes activos de forma secuencial, por ejemplo, en solución, emulsión, suspensión, comprimidos, píldoras o cápsulas separadas, o mediante inyecciones diferentes en jeringas separadas. En general, durante la terapia de alternación, se administra una dosificación eficaz de cada ingrediente activo de forma secuencial, es decir, de forma seriada, mientras que en la terapia simultánea, se administran juntas las dosificaciones eficaces de dos o más ingredientes activos. También se pueden usar diversas secuencias de terapia de combinación intermitente.

Para ayudar a la comprensión de la presente invención, se incluyen los siguientes Ejemplos. Los experimentos con respecto a la presente invención no deberían, por supuesto, interpretarse como específicamente limitantes de la presente invención y se considera que las variaciones de la presente invención, conocidas ahora o desarrolladas posteriormente, tales que estarían dentro del ámbito de un experto en la materia, están dentro del ámbito de la presente invención como se describe en la presente memoria y se reivindica posteriormente en la presente memoria.

Ejemplos

La presente invención se describe con mayor detalle con referencia a los siguientes ejemplos no limitantes, que se ofrecen para ilustrar de manera más completa la presente invención, pero no se pretende que limiten el ámbito de la misma. Los ejemplos ilustran la preparación de ciertos compuestos de la presente invención, y el ensayo de estos compuestos in vitro y/o in vivo. Los expertos en la materia comprenderán que las técnicas descritas en estos ejemplos representan técnicas descritas por los inventores para funcionar bien en la práctica de la presente invención, y como tal constituyen modos preferentes de la práctica de la misma. Los ejemplos que no están comprendidos en las reivindicaciones anexas se entiende que son ejemplos de referencia.

Ejemplo 1: Preparación de Compuestos de la Invención

Usando los esquemas y los procedimientos descritos anteriormente en la Sección B, se pueden preparar ciertos compuestos de la presente invención como se muestra a continuación. Otros compuestos preferentes de la presente invención, tales como los que se muestran posteriormente en la Tabla 5, se pueden preparar de forma similar.

Ejemplo 1A - Compuestos de Fórmula I. Esquema I

Ciertos compuestos de Fórmula I se pueden preparar de acuerdo con el Esquema I usando los productos/intermedios de amina libre, o sus sales, preparados de acuerdo con el Procedimiento I. A modo de ejemplo, ciertas aminas libres (III), o sus sales, se preparan usando el Procedimiento I. La Tabla 4 ilustra ciertas aminas libres (III) o sus sales, Intermedios 1-11.

Tabla 4

Intermedio

R -de la Amina Libre (III) R1 - de la Amina Libre (III)

1

CI 4-OMe

2

CI 2,3-difluoro

3

CI 4-Cl

4

CI 4-CN

5

CI 4-F

6

CI 4-iPr

7

Br 4-Cl

8

Br 4-Me

9

Br 4-iPr

10

Br 3-Cl

11

Br 4-OMe

12

CI 4-(2-morfolina-4-il-etoxi)

10 Intermedio 1:

Este intermedio se prepara usando el Procedimiento I con 5-clorotriptamina.HCl (5,8 g, 25 mmol), p-anisaldehído (6,13 ml, 50 mmol) y ácido sulfúrico 0,1 N (60 ml) para obtener el compuesto del título en forma de una sal de ácido (6,1 g, 59%). ES-MS: 313 (M+H)+. De forma alternativa, este intermedio se prepara usando el Procedimiento IB con 5-clorotriptamina.HCl (20 g, 86,5 mmol), p-anisaldehído (15,9 ml, 130 mmol) y ácido acético (250 ml) para obtener el

15 compuesto del título en forma de una sal de ácido (25,8 g, 79%). ES-MS: 313 (M+H)+.

Intermedio 2:

Este intermedio se prepara usando el Procedimiento I con 5-clorotriptamina.HCl (116 mg, 0,5 mmol), 2,3-difluoro benzaldehído (109 l, 1 mmol) y ácido sulfúrico 0,1 N (2 ml) para obtener el compuesto del título en forma de una sal de ácido (158 mg, 75%). ES-MS: 319 (M+H)+

20 Intermedio 3:

Este intermedio se prepara usando el Procedimiento I con 5-clorotriptamina.HCl (462 mg, 2 mmol), 4-cloro benzaldehído (562 mg, 4 mmol) y ácido sulfúrico 0,1 N (8 ml) para obtener el compuesto del título en forma de una sal de ácido (825 mg, 99%). ES-MS: 317 (M+H)+

Intermedio 4:

Este intermedio se prepara usando el Procedimiento I con 5-clorotriptamina.HCl (462 mg, 2 mmol), 4-ciano benzaldehído (525 mg, 4 mmol) y ácido sulfúrico 0,1 N (8 ml) para obtener el compuesto del título en forma de una sal de ácido (810 mg, 100%). ES-MS: 308 (M+H)+

Intermedio 5:

Este intermedio se prepara usando el Procedimiento I con 5-clorotriptamina.HCl (374 mg, 1,5 mmol), 4-fluoro benzaldehído (322 l, 3 mmol) y ácido sulfúrico 0,1 N (4 ml) para obtener el compuesto del título en forma de una sal de ácido (250 mg, 42%). ES-MS: 301 (M+H)+

Intermedio 6:

Este intermedio se prepara usando el Procedimiento I con 5-clorotriptamina.HCl (1,15 g, 5 mmol), 4-isopropil benzaldehído (1,516 ml, 10 mmol) y ácido sulfúrico 0,1 N (12 ml) para obtener el compuesto del título en forma de una sal de ácido (628 mg, 30%). ES-MS: 325 (M+H)+

Intermedio 7:

Este intermedio se prepara usando el Procedimiento I con 5-bromotriptamina.HCI (551 mg, 2 mmol), 4-cloro benzaldehído (562 mg, 4 mmol) y ácido sulfúrico 0,1 N (8 ml) para obtener el compuesto del título en forma de una sal de ácido (330 mg, 36%). ES-MS: 363 (M+H)+

Intermedio 8:

Este intermedio se prepara usando el Procedimiento I con 5-bromotriptamina.HCl (551 mg, 2 mmol), p-tolualdehído (471 l, 4 mmol) y ácido sulfúrico 0,1 N (8 ml) para obtener el compuesto del título en forma de una sal de hidrógeno sulfato (257 mg, 29%). ES-MS: 341 (M+H)+. De forma alternativa, este intermedio se prepara usando el Procedimiento IB con 5-bromotriptamina.HCl (10 g , 36,3 mmol), p-tolualdehído (6,41 ml, 54,5 mmol) y ácido acético (120 ml) para obtener el compuesto del título en forma de una sal de acetato (14,5 g, 100%). ES-MS: 341 (M+H)+

Intermedio 9 (Compuesto 112):

Este producto/intermedio se prepara usando el Procedimiento I con 5-bromotriptamina.HCl (551 mg, 2 mmol), 4isopropil benzaldehído (606 l, 4 mmol) y ácido sulfúrico 0,1 N (8 ml) para obtener el compuesto del título en forma de una sal de hidrógeno sulfato (329 mg, 35%). ES-MS: 369 (M+H)+. De forma alternativa, este intermedio se prepara usando el Procedimiento IB con 5-bromotriptamina.HCl (10 g , 36,3 mmol), 4-isopropil benzaldehído (8,24 ml, 54,5 mmol) y ácido acético (120 ml) para obtener el compuesto del título en forma de una sal de acetato (13 g, 77%). ES-MS: 369 (M+H)+

Intermedio 10:

Este intermedio prepara usando el Procedimiento I con 5-bromotriptamina.HCl (551 mg, 2 mmol), 3-cloro benzaldehído (453 l, 4 mmol) y ácido sulfúrico 0,1 N (8 ml) para obtener el compuesto del título en forma de una sal de ácido (662 mg, 72%). ES-MS: 361 (M+H)+

Intermedio 11:

Este intermedio se prepara usando el Procedimiento I con 5-bromotriptamina.HCl (551 mg, 2 mmol), p-anisaldehído (491 l, 4 mmol) y ácido sulfúrico 0,1 N (8 ml) para obtener el compuesto del título en forma de una sal de ácido (611 mg, 67%). ES-MS: 357 (M+H)+ Intermedio 12:

El intermedio de reacción 4-(2-morfolin-4-il-etoxi)-benzaldehído se prepara por combinación de 4hidroxibenzaldehído (1,2 g, 10,0 mmol), hidrocloruro de 4-(2-cloroetil)-morfolina (2,0 g, 11,0 mmol), carbonato potásico (4,1 g, 30,0 mmol) y yoduro potásico (170 mg, 1 mmol) en 100 ml de acetona y calentamiento a reflujo con agitación. Después de que se haya consumido todo el 4-hidroxibenzaldehído (48 horas por LC/MS), los sólidos se filtran y el disolvente se retira al vacío. El rendimiento es 4,1 g.

A continuación se prepara el Intermedio 12 de acuerdo con el Procedimiento IB. De esta manera, se combina hidrocloruro de 5-clorotriptamina (231 mg, 1,0 mmol) con 4-(2-morfolin-4-il-etoxi)-benzaldehído (565 mg, ~1,2 mmol) en 3 ml de ácido acético glacial. La suspensión se calienta a aproximadamente 120 °C durante 10 minutos con refrigeración constante y una potencia máxima de 300 W usando un sistema de microondas CEM Explorer. Se añade acetonitrilo (2 ml) a la mezcla refrigerada reacción, y el sólido se filtra y se lava con 1 ml de acetonitrilo para producir la sal de ácido acético del Intermedio 12 (6-cloro-1-[4-(2-morfolin-4-il-etoxi)-fenil]-2,3,4,9-tetrahidro-1Hcarbolina) (179 mg, 34%).

A continuación se pueden usar los Intermedios 1-12 para preparar los compuestos de la presente invención de acuerdo con los Procedimientos II a VII como se muestra a continuación.

Compuesto 2:

Este producto se prepara mediante el Procedimiento II usando el Intermedio 1 (3 g, 9,6 mmol), cloroformiato de etilo (1,37 ml, 14,4 mmol) y DIEA (2,5 ml, 14,4 mmol) en diclorometano (70 ml) para obtener el compuesto del título en forma de un polvo de color blanco (1,56 g, 42%). ES-MS: 385 (M+H)+.

Compuesto 4:

Este producto se prepara mediante el Procedimiento II usando el Intermedio 7 (72 mg, 0,2 mmol), cloroformiato de etilo (29 l, 0,3 mmol) y DIEA (52 l, 0,3 mmol) en diclorometano (2 ml) para obtener el compuesto del título en forma de un polvo de color blanco (37 mg, 43%). ES-MS: 435 (M+H)+.

Compuesto 5:

Este producto se prepara mediante el Procedimiento II usando el Intermedio 2 (50 mg, 0,16 mmol), cloroformiato de etilo (23 l, 0,24 mmol) y DIEA (42 l, 0,24 mmol) en diclorometano (2 ml) para obtener el compuesto del título en forma de un polvo de color blanco (25 mg, 41%). ES-MS: 391 (M+H)+.

Compuesto 7:

Este producto se prepara mediante el Procedimiento II usando el Intermedio 9 (74 mg, 0,2 mmol), cloroformiato de etilo (29 l, 0,3 mmol) y DIEA (52 l, 0,3 mmol) en diclorometano (2 ml) para obtener el compuesto del título en forma de un polvo de color blanco (34 mg, 38%). ES-MS: 441 (M+H)+.

Compuesto 8:

Este producto se prepara mediante el Procedimiento II usando el Intermedio 8 (72 mg, 0,2 mmol), cloroformiato de etilo (29 l, 0,3 mmol) y DIEA (52 l, 0,3 mmol) en diclorometano (2 ml) para obtener el compuesto del título en forma de un polvo de color blanco (39 mg, 47%). ES-MS: 413 (M+H)+.

Compuesto 10:

Este producto se prepara mediante el Procedimiento II usando el acetato del Intermedio 1 (10,5 g, 28,2 mmol), cloroformiato de 4-clorofenilo (4,74 ml, 33,8 mmol) y DIEA (9,8 ml, 56,4 mmol) en diclorometano (300 ml) para obtener el compuesto del título en forma de un polvo de color blanco (10,2 g, 78%). ES-MS: 467 (M+H)+.

Compuesto 11:

Este producto se prepara mediante el Procedimiento II usando el Intermedio 3 (63 mg, 0,2 mmol), cloroformiato de etilo (29 l, 0,3 mmol) y DIEA (52 l, 0,3 mmol) en diclorometano (2 ml) para obtener el compuesto del título en forma de un polvo de color blanco (31 mg, 40%). ES-MS: 389 (M+H)+.

Compuesto 12:

Este producto se prepara mediante el Procedimiento II usando el Intermedio 4 (31 mg, 0,1 mmol), cloroformiato de 2 cloroetilo (16 l, 0,15 mmol) y DIEA (26 l, 0,15 mmol) en diclorometano (2 ml) para obtener el compuesto del título en forma de un polvo de color blanco (22 mg, 53%). ES-MS: 414 (M+H)+.

Compuesto 17:

Este producto se prepara mediante el Procedimiento II usando el Intermedio 1 (47 mg, 0,15 mmol), cloroformiato de 4-metilfenilo (33 l, 0,23 mmol) y DIEA (39 l, 0,23 mmol) en diclorometano (2 ml) para obtener el compuesto del título en forma de un polvo de color blanco (34 mg, 51%). ES-MS: 447 (M+H)+.

Compuesto 23:

Este producto se prepara mediante el Procedimiento II usando el Intermedio 5 (30 mg, 0,1 mmol), cloroformiato de etilo (14 l, 0,15 mmol) y DIEA (26 l, 0,15 mmol) en diclorometano (2 ml) para obtener el compuesto del título en forma de un polvo de color blanco (21 mg, 56%). ES-MS: 373 (M+H)+.

Compuesto 25:

Este producto se prepara mediante el Procedimiento VII usando el Intermedio 9 (74 mg, 0,2 mmol), 2bromopirimidina (48 mg, 0,3 mmol) y trietilamina (42 l, 0,3 mmol) en DMF (2 ml) para obtener el compuesto del título (42 mg, 47%). ES-MS: 447 (M+H)+.

Compuesto 102:

Este producto se prepara mediante el Procedimiento IIIb usando el Intermedio 9 (74 mg, 0,2 mmol), anhídrido acético (47 l, 0,5 mmol) y piridina (41 l, 0,5 mmol) en diclorometano (2 ml) para obtener el compuesto del título en forma de un polvo de color blanco (31 mg, 38%). ES-MS: 411 (M+H)+.

Compuesto 140:

Este producto se prepara mediante el Procedimiento IV usando el Intermedio 10 (72 mg, 0,2 mmol), isocianato de ciclohexilo (26 l, 0,2 mmol) y DIEA (37 l, 0,21 mmol) en diclorometano (2 ml) para obtener el compuesto del título en forma de un polvo de color blanco (51 mg, 53%). ES-MS: 486 (M+H)+.

Compuesto 166:

Este producto se prepara mediante el Procedimiento IIIa usando su intermedio de amina libre (141 mg, 0,5 mmol), Boc-L-Alanina (105 mg, 0,6 mmol), DIC (94 l, 0,6 mmol), DIEA (105 l, 0,6 mmol) y diclorometano (4 ml) para obtener el compuesto del título (105 mg, 46%). ES-MS: 420 (M+H)+.

Compuesto 225:

Este producto se prepara mediante el Procedimiento VI usando su intermedio de amina libre (78 mg, 0,2 mmol), cloruro de metil sulfonilo (16 l, 0,2 mmol) y DIEA (37 l, 0,21 mmol) y diclorometano (2 ml) para obtener el compuesto del título (32 mg, 34%). ES-MS: 461 (M+H)+.

Compuesto 242:

Este producto se prepara mediante el Procedimiento V usando su intermedio de amina libre (59 mg, 0,2 mmol), isotiocianato de ciclohexilo (29 l, 0,2 mmol), DIEA (35 l, 0,2 mmol) y diclorometano (4 ml) para obtener el compuesto del título (52 mg, 60%). ES-MS: 438 (M+H)+.

Compuesto 279:

Este producto se prepara por generación del Intermedio 12 (6-cloro-1-[4-(2-morfolin-4-il-etoxi)-fenil]-2,3,4,9tetrahidro-1H--carbolina) usando el Procedimiento I. A continuación se usa el Intermedio 12 para generar el Compuesto 279 (éster de etilo del ácido 6-cloro-1-[4-(2-morfolin-4-il-etoxi)-feniI)-1,3,4,9-tetrahidro--carbolina-2carboxílico) usando el Procedimiento II.

De acuerdo con el Procedimiento II, se disuelven el Intermedio 12 (82 mg, 0,20 mmol), cloroformiato de etilo (24 mg, 21 l, 0,22 mmol), y diisopropiletilamina (175 l, 1,00 mmol) en cloruro de metileno (2 ml) y se agitan a temperatura ambiente durante 15 minutos para formar el Compuesto 279. El disolvente se retira en una corriente de nitrógeno. La mezcla en bruto se purifica por HPLC preparativa de fase inversa en una columna C-18 usando un gradiente de acetonitrilo en agua tamponada con ácido trifluoroacético al 0,2% (TFA). La sal de TFA del Compuesto 279 (3,7 mg, 3%) se aísla en forma de un sólido de color amarillo. Se puede aplicar el mismo procedimiento para otras reacciones de formación de carbamato de acuerdo con el Procedimiento II.

Compuesto 320:

Este producto/intermedio se prepara usando el Procedimiento I con 5-benciloxi triptamina.HCl (100 mg, 0,33 mmol), piridina-3-carboxaldehído (62 l, 0,66 mmol) y ácido sulfúrico 0,1 N (2 ml) para obtener el compuesto del título en forma de una sal de dihidrógeno sulfato (64 mg, 55%). ES-MS: 356 (M+H)+

Compuesto 329:

Este producto se prepara mediante el Procedimiento VII usando el Intermedio 11 (71 mg, 0,2 mmol), 2bromopirimidina (48 mg, 0,3 mmol) y trietilamina (42 l, 0,3 mmol) en DMF (2 ml) para obtener el compuesto del título (41 mg, 49%). ES-MS: 434 (M+H)+.

Compuesto 330:

Este producto se prepara mediante el Procedimiento II usando el Intermedio 6 (65 mg, 0,2 mmol), cloroformiato de 2 fluoroetilo (38 l, 0,3 mmol) y DIEA (70 l, 0,4 mmol) en diclorometano (2 ml) para obtener el compuesto del título en forma de un polvo de color blanco (34 mg, 41%). ES-MS: 415 (M+H)+.

Compuesto 332:

Este producto se prepara mediante el Procedimiento II usando el Intermedio 7 (36 mg, 0,1 mmol), cloroformiato de 4 metoxifenilo (22 l, 0,15 mmol) y DIEA (26 l, 0,15 mmol) en diclorometano (2 ml) para obtener el compuesto del título en forma de un polvo de color blanco (41 mg, 81%). ES-MS: 511(M+H)+.

Ejemplo 1B - Ciertos Materiales de Partida, Esquema la

El Esquema la se puede usar junto con el Esquema I (véase anteriormente) para generar materiales de partida cuando R2 es un grupo -CH2-furanilo, como se muestra a continuación.

Se añade 2-furaldehído (0,05 ml, 1,1 eq.) a una solución de 5-clorotriptamina (114 mg, 0,586 mmol) en 2 ml de MeOH. La mezcla de reacción se agita a temperatura ambiente durante aproximadamente 1 hora. Se añade lentamente NaBH4 (110 mg, 5 eq.). La mezcla de reacción se agita a temperatura ambiente durante aproximadamente 30 min. Se evapora el MeOH y el residuo se reparte entre agua y cloruro de metileno. La fase orgánica se separa y se seca sobre K2CO3. La fase orgánica recogida se concentra para obtener 134,9 mg de un aceite viscoso (84%).

Ejemplo 1C - Compuestos de Fórmula I, Esquema lb

De forma alternativa, ciertos compuestos de Fórmula I se pueden preparar de acuerdo con el Esquema lb como se muestra a continuación.

Una suspensión del material de reacción A (8,05 g, 35,9 mmol) y CH3COONH4 (4,15 g, 1,5 eq.) en 60 ml de CH3NO2 se calienta a reflujo en un baño de aceite a aproximadamente 110 °C. Después de aproximadamente 30 minutos, la mezcla de reacción se enfría con un baño de hielo. El sólido precipitado se filtra y se lava con agua (3 x 100 ml), seguido de hexano (2 x 50 ml) para obtener el producto de indol B en bruto. El sólido recogido se seca al vacío a aproximadamente 40 °C durante aproximadamente 30 min para obtener 6,97 g de un sólido de color marrón (73%).

Una solución del producto de indol B (12,32 g, 46,1 mmol) en THF (130 ml) se trata a continuación con una solución de borohidruro de tetrabutilamonio (11,9 g, 1 eq.) en 75 ml de THF lentamente durante aproximadamente 60 minutos a aproximadamente -5 °C. La reacción se agita a temperatura ambiente durante aproximadamente 1 hora y se diluye con diclorometano (200 ml). La fase orgánica se lava con agua dos veces y con salmuera. Las fases orgánicas combinadas se secan y se evaporan al vacío. El residuo se purifica sobre gel de sílice para obtener 10,28 g de C sólido (83%).

A continuación se añaden cloruro de amonio (9,9 ml de solución acuosa (100 mg/ml), 2 eq.) y Zn (725 mg, 1,2 eq.) a una solución del producto de indol C (2,49 g, 9,24 mmol) en 161 ml de THF. La mezcla de reacción se agita a temperatura ambiente durante aproximadamente 10 min y a continuación se añade Zn (725 mg, 1,2 eq.). Después de aproximadamente 30 min, se añade una cantidad adicional de Zn (967 mg, 1,6 eq.) y se agita durante aproximadamente 2 horas, seguido de la adición de más Zn (845 mg, 1,4 eq.). Después de agitar a temperatura ambiente durante aproximadamente 15 min, se retira el Zn por filtración y el residuo se concentra y se disuelve en THF. La solución resultante se trata a continuación con p-clorobenzaldehído (0,7 eq.) y se agita a temperatura ambiente durante aproximadamente 15 horas. La mezcla de reacción se concentra al vacío y se purifica sobre gel de sílice para obtener 953,5 mg del producto de nitrona D deseado.

A continuación se añade (+)-DIP-Cl (6,93 ml, 2 eq., 85,8 mg/ml en CH2Cl2) a una solución del producto de nitrona D (350 mg, 0,93 mmol) en 60 ml de diclorometano. La mezcla de reacción se agita a aproximadamente -78 °C durante aproximadamente 10 días y se inactiva con una mezcla de NaHCO3 al 10% (7 ml) y 10 ml de agua. La fase acuosa se extrae con diclorometano tres veces. Las fases orgánicas combinadas se concentran y se purifican sobre gel de sílice para obtener el producto de hidroxilamina E deseado (ee > 98%).

A continuación se añaden agua (11,5 ml), NH4CI (2,5 ml, 5 eq.) y Zn (908 mg, 15 eq.) a una solución del producto de hidroxilamina E (0,927 mmol) en THF (28 ml). La mezcla de reacción se agita a temperatura ambiente durante 10 aproximadamente 1 día. A continuación se añaden cantidades adicionales de THF (10 ml), NH4CI (5 ml, 10 eq.) y Zn (1,8 g, 30 eq.) y se agita durante aproximadamente otras 21 horas. De nuevo, se añaden THF (10 ml), NH4Cl (5 ml, 10 eq.) y Zn (1,8 g, 30 eq.) y se agita durante aproximadamente otras 20 horas. A continuación la mezcla de reacción se filtra a través de celita y se lava con MC. La fase de diclorometano recogida se lava con agua y salmuera. La fase orgánica se seca y se concentra para obtener un complejo de boro de beta-carbolina. Este

15 producto se disuelve en 20 ml de THF. Esta solución se carga en resina de intercambio catiónico preenvasada (preacondicionada con MeOH y THF) y se lava con THF. La solución de THF combinada se concentra para obtener 390 mg de amina libre. A continuación se lava el sólido con éter y hexano consecutivamente para proporcionar 130 mg del Compuesto F enantioméricamente puro.

Ejemplo 1D - Compuestos de Fórmula I, Esquema II

20 Los Compuestos de Fórmula I-h se pueden preparar de acuerdo con el Esquema II como se muestra a continuación.

Se añade p-anisaldehído (2,16 g, 15,9 mmol, 1,93 ml) a una suspensión del 5-bromotriptófano A (3 g, 10,6 mmol) en 100 ml de ácido acético a temperatura ambiente. A continuación la mezcla de reacción se calienta a reflujo a

25 aproximadamente 125 °C en un baño de aceite de silicona y se mantiene a esa temperatura durante aproximadamente 3 horas y 20 minutos. La solución resultante se concentra al vacío. El residuo se tritura con diclorometano, éter dietílico y hexano para proporcionar un sólido pulverulento de color marrón. Se recogen las sales de acético del producto intermedio B y se lavan con hexano tres veces.

El producto intermedio B (70 mg, 0,174 mmol) se suspende en 2 ml de diclorometano, y se añaden a la suspensión

30 trietilamina (52,8 mg, 0,522 mmol), 5-metil-2-aminotiazol (37,6 mg, 0,26 mmol) y PyBOP (135,8 mg, 0,26 mmol). La mezcla de reacción se agita a temperatura ambiente durante aproximadamente 6 horas y se inactiva con una solución saturada de NaHCO3. La fase acuosa se extrae con diclorometano. Las fases orgánicas combinadas se secan sobre K2CO3 y se concentran. La purificación sobre gel de sílice con 40% de acetato de etilo en hexano proporciona 8,1 mg de la amida C deseada. LCMS [MH+] 498, Rt = 2,54.

35 Ejemplo 1E - Compuestos de Fórmula I, Esquema III

Los Compuestos de Fórmula I-i se pueden preparar de acuerdo con el Esquema III como se muestra a continuación.

(1,2 g, 76%). LC/MS RT = 2,33 min. M/Z+ 323, 100%.

A continuación se disuelve el producto/intermedio de -carbolina B (200 mg, 0,62 mmol) en 5 ml de THF seco y se

10 enfría a aproximadamente 0 °C. Se añade una solución de hidruro de litio y aluminio (LAH) (1,2 ml, 1,0 M en éter, 1,2 mmol) a la mezcla refrigerada de reacción en atmósfera de nitrógeno. Después de completarse la adición (aproximadamente 10 minutos), la reacción se deja calentar a temperatura ambiente durante aproximadamente 4 horas. La mezcla de reacción se enfría de nuevo a 0 °C, y se añade una solución saturada de sulfato sódico (750 y la mezcla se agita durante aproximadamente 5 minutos a 0 °C. A continuación la mezcla de reacción se filtra y se

15 lava con THF (100 ml). El disolvente se retira al vacío , y el producto en bruto se purifica por HPLC preparativa. El producto C ([1-(3-metoxi-fenil)-2,3,4,9-tetrahidro-1H--carbolin-3-il]-metanol) se aísla en forma de un sólido de color blanco (106 mg, 55%). LC/MS RT = 2,25 min. M/Z+ 309, 100%.

Ejemplo 1F - Resolución Química de los Compuestos de la Invención

Opcionalmente, los compuestos de la presente invención se pueden resolver químicamente en las composiciones 20 enantioméricamente puras, preferentemente en las composiciones del isómero (S) enantioméricamente puro como se muestra a continuación.

La amina racémica A (18,21 g, 58,2 mmol) se mezcla con N-acetil-L-fenilalanina (12,05 g, 58,2 mmol) en EtOH (1,28 l) y se calienta a reflujo para conseguir una solución transparente. A continuación se deja enfriar la solución a

25 temperatura ambiente. Después de reposo durante una noche, el sólido precipitado se filtra y se lava con EtOH (200 ml) para obtener la sal B (16,4 g). La sal B se recoge en EtOAc (500 ml) y se lava con NaOH 1 N acuoso (300 ml x 2) o NH4OH (200 ml x 2), se seca y se evapora para obtener el isómero S de la amina libre C (7,4 g). El isómero R se prepara mediante un procedimiento similar usando N-acetil-D-fenilalanina.

Ejemplo 1G - Compuestos Ejemplares Adicionales de la Invención

30 A modo de ejemplo adicional no limitante, los siguientes Compuestos (Tabla 5) se pueden preparar mediante una metodología similar a la que se ha descrito anteriormente, como podrá reconocer un experto en la materia.

Tabla 5

Compuesto

RMN Espectro de Masas (LCMS) Tiempo de Retención (min)

367

(CDCl3, 400 MHz), 8,16 (s, 1H), 7,48 (s, 1H), 7,22 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,19 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,13 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,94 (s, 1H), 6,80 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 3,92-3,91 (m, 1H), 3,86 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 3,77 (s, 3H), 3,463,39 (m, 1H), 3,11-3,09 (m, 1H), 2,91-2,83 (m, 3H) 402,8 4,37

368

(CDCl3, 400 MHz), 8,29 (s, 1H), 7,47-7,09 (m, 10H), 6,98 (s, 1H), 6,77 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 3,93 (dd, J = 13,6 Hz y 4,8 Hz, 1H), 3,82-3,80 (m, 2H), 3,77 (s, 3H), 3,38-3,30 (m, 1H), 2,692,65 (m, 1H), 2,53-2,45 (m, 1H) 430,9 4,79

369

(CDCl3, 400 MHz), 8,21 (s, 1H), 7,46 (s, 1H), 7,22 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,17 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,12 (dd, J = 8,4 Hz y 2,0 Hz, 1H), 6,92 (s, 1H),6,77(d, J = 8,4 Hz, 2H), 3,94 (dd, J = 13,2 Hz y 4,4 Hz, 1H), 3,76 (s, 3H), 3,65 (s, 3H), 3,43-3,35 (m, 1H), 2,87-2,62 (m, 6H) 427,0 4,06

370

(CDCl3, 400 MHz), 8,23, 8,12 (s, 1H), 7,48, 7,42 (d, J = 1,6 Hz, 1,2 Hz, 1H), 7,22-7,10 (m, 4H), 6,94, 6,88 (s, 1H), 6,79 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 5,48-5,45 (m, 1H), 3,96-3,80 (m, 1H), 3,77 (s, 3H), 3,47-3,36 (m, 1H), 3,082,77 (m, 2H), 2,14, 2,09 (s, 3H), 1,48, 1,41 (d, J = 6,8 Hz, 6,4 Hz, 3H) 427,0 3,99

371

(CDCl3, 400 MHz), 7,87 (s, 1H), 7,51 (s, 1H), 7,47 (dd, J = 6,8 Hz y 1,6 Hz, 1H), 7,30-7,15 (m, 6H), 6,98 (a, 1H), 6,76 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 3,80 (s, 3H), 3,77-3,74 (m, 1H), 3,49-3,39 (m, 1H), 2,93-2,82 (m, 2H) 469,0 5,27

Compuesto

RMN Espectro de Masas (LCMS) Tiempo de Retención (min)

372

(CDCl3, 400 MHz), 8,07 (dd, J = 7,6 Hz y 1,2 Hz, 1H), 7,74 (s, 1H), 7,457,32 (m, 4H), 7,18 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,12 (dd, J = 8,8 Hz y 2,0 Hz, 1H), 7,07 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 6,76 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 6,35 (s, 1H), 3,97 (dd, J = 14,8 Hz y 5,2 Hz, 1H), 3,77 (s, 3H), 3,49-3,41 (m, 1H), 2,67 (dd, J = 15,6 Hz y 3,2 Hz, 1H), 2,57-2,53 (m, 1H) 486,9 4,96

373

(CDCl3, 400 MHz), 7,95 (s, 1H), 7,48 (s, 1H), 7,30 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,23 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,16 (dd, J = 8,8 Hz y 1,6 Hz, 1H), 7,05 (a, 3H), 6,86 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 3,80 (s, 3H), 3,61 (dd, J = 13,6 Hz y 5,2 Hz, 1H), 3,52-3,44 (m, 1H), 2,91-2,88 (m, 1H), 2,78 (dd, J =15,2 Hz y 3,2 Hz, 1H) 470,8 5,01

374

(CDCl3, 400 MHz), 8,09 (s, 1H), 7,45 (s, 1H), 7,21-7,17 (m, 4H), 7,12 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,98 (s, 1H), 6,91 (d, J = 4 Hz, 1H), 6,80 (s, 1H), 6,79 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 3,99 (s, 2H), 3,96 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 3,77 (s, 3H), 3,43-3,38 (m, 1H), 2,77-2,63 (m, 2H) 436,9 4,66

375

(CDCl3, 400 MHz), 8,19, 8,16 (s, 1H), 7,48, 8,42 (s, 1H), 7,24-7,09 (m, 6H), 6,94 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 6,85 (t, J = 8,2 Hz, 2H), 6,77 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,72 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 5,094,98 (m, 1H), 4,39-4,17 (m, 1H), 3,77, 3,75 (s, 3H). 3,41-3,28 (m, 1H), 3,02-2,65 (m, 2H), 1,61-1,59 (m, 3H) 461 4,92

Compuesto

RMN Espectro de Masas (LCMS) Tiempo de Retención (min)

376

(CDCl3, 400 MHz), 8,39 (s, 1H), 7,48 (s, 1H), 7,23 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,19 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,13 (dd, J = 8,8 Hz y 1,6 Hz, 1H), 6,89 (s, 1H), 6,77 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 4,17 (c, J = 12,8 Hz, 2H), 3,88 (d, J = 10 Hz, 1H), 3,75 (s, 3H), 3,41 (s, 3H), 3,38-3,34 (m, 1H), 2,95-2,81 (m, 2H) 385 3,79

389

(CD3OD, 400 MHz), 7,48-7,46 (m, 4H), 7,35 (a, 1H), 7,23 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,07 (dd, J = 8,8 Hz y 2,0 Hz, 1H), 6,46 (a, 1H), 4,35-4,14 (m, 5H), 3,52-3,47 (m, 2H), 3,22-3,19 (m, 7H), 2,98-2,93 (m, 3H), 2,89 (s, 6H), 2,672,63 (m, 5H), 2,06-1,96 (m, 2H), 1,31 (t, J = 7,2 Hz, 3H) 538,3 4,29

393

(DMSO, 400 MHz), 11,00 (s, 1H), 8,47 (s, 2H), 7,67 (s, 1H), 7,26 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,19 (dd, J = 8,8 Hz y 2,0 Hz, 1H), 6,26 (a, 1H), 4,25 (a, 1H) 4,11 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 3,223,17 (m, 1H), 2,86-2,81 (m, 1H), 2,77-2,66 (m, 1H), 2,50 (a, 3H), 1,21 (t, J = 6,8 Hz, 3H) 447,1 6,55

394

(CD3OD, 400 MHz), 8,43-8,41 (m, 4H), 7,63 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 7,22 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,19 (dd, J = 8,4 Hz y 1,6 Hz, 1H), 7,04 (s, 1H), 6,67 (t, J = 4,8 Hz, 1H), 5,01 (dd, J = 14,0 Hz y 3,6 Hz, 1H), 3,29-3,26 (m, 1H), 3,21 (s, 6H), 2,91-2,86 (m, 2H) 450,1 5,48

410

(DMSO, 400 MHz), 11,15, 11,05 (a, 1H), 7,53 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 7,29 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,20-7,18 (m, 6H), 7,06 (dd, J = 8,8 Hz y 2 Hz, 1H), 6,93 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 6,45-6,37 (m, 1H), 4,30 (a, 1H), 3,72 (s, 3H), 3,18 (a, 1H), 2,82 (a, 2H) 451,3 3,99

Compuesto

RMN Espectro de Masas (LCMS) Tiempo de Retención (min)

Sal de HCl 416

(CD3OD, 400 MHz), 10,98 (a, 1H), 7,49 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,34-7,30 (m, 5H), 7,25-7,21 (m, 1H), 7,13 (dd, J = 8,8 Hz y 2,0 Hz, 1H), 4,81-4,79 (m, 1H), 3,82-3,76 (m, 1H), 3,54-3,49 (m, 1H), 3,11-3,07 (m, 2H), 2,91-2,87 (m, 2H), 2,59-2,55 (m, 1H), 2,24-2,20 (m, 1H) 311,1 4,39

420

(CD3OD, 400 MHz), 7,61 (s, 1H), 7,46 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,38 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,19 (s, 2H), 6,47 (s, 1H), 4,32-4,19 (m, 5H), 3,62 (t, J = 3,9 Hz, 2H), 3,42 (s, 1H), 3,19-3,10 (m, 3H), 2,29-2,76 (m, 2H), 1,30 (s, 3H) 486,6 3,45

425

(CD3OD, 400 MHz), 7,63 (s, 1H), 7,49 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,42 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,19 (s, 2H), 6,49 (a, 1H), 4,34-4,19 (m, 4H), 3,60 (a, 4H), 3,29-3,17 (m, 6H), 2,89-2,75 (m, 2H), 1,36 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,30 (a, 3H) 539,2 3,11

431

(CDCl3, 400 MHz), 8,56 (a, 1H), 8,40 (a, 2H), 7,68 (s, 1H), 7,28 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,14 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,00 (d, J = 9,2 Hz, 2H), 6,80 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 6,48-6,38 (m, 1H), 4,554,52 (m, 1H), 3,81-3,74 (m, 4H), 3,24 (s, 6H), 3,00-2,91 (m, 1H), 2,88-2,84 (m, 1H) 522,2 5,05

435

(DMSO, 400 MHz), 11,00 (s, 1H), 8,14 (s, 2H), 7,64 (s, 1H), 7,23 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,18 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,14 (s, 1H), 4,23 (a, 1H), 4,11-4,08 (m, 2H), 3,14-3,10 (m, 1H), 3,08 (s, 6H), 2,81-2,77 (m, 1H), 2,70-2,66 (m, 1H), 1,21 (t, J = 6,8 Hz, 3H) 444,3 3,95

Compuesto

RMN Espectro de Masas (LCMS) Tiempo de Retención (min)

438

(CD3OD, 400 MHz), 7,79 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,63 (s, 1H), 7,37 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,20 (s, 2H), 6,51 (a, 1H), 4,32-4,22 (m, 3H), 3,54 (s, 3H), 3,36 (s, 2H), 3,30 (s, 2H), 3,21-3,11 (m, 1H), 2,90-2,77 (m, 2H), 1,32 (s, 3H) 500,1 4,35

439

(CDCl3, 400 MHz), 7,98, 7,81 (s, 1H), 7,42 (s, 1H), 7,21 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,11 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 5,405,23 (m, 3H), 4,55-4,35 (m, 1H), 4,20-4,11 (m, 2H), 3,24- 3,13 (m, 1H), 2,79-2,63 (m, 2H), 2,22 (d, J = 6,8 Hz, 2H), 2,08 (a, 2H), 1,89-1,81 (m, 2H), 1,30 (a, 3H), 0,97 (a, 3H) 361,2 5,95

441

(CD3OD, 400 MHz), 7,47 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 7,43 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 7,37 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,24 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,06 (dd, J = 8,4 Hz y 1,6 Hz, 1H), 6,49 (a, 1H), 4,35-4,21 (m, 3H), 3,83 (s, 4H), 3,19-3,10 (m, 1H), 2,90-2,79 (m, 2H), 1,57 (a, 6H), 1,32 (s, 3H) 482,1 5,11

442

(CDCl3, 400 MHz), 8,48-8,09 (m, 1H), 7,44-7,42 (m, 1H), 7,24 (t, J = 9 Hz, 1H), 7,11-7,09 (m, 1H), 5,59-5,40 (m, 1H), 4,54-4,34 (m, 1H), 4,21-4,18 (m, 2H), 3,23-3,13 (m, 1H), 2,87-2,81 (m, 2H), 2,76-2,63 (m, 1H), 2,17 (s, 3H), 2,12-1,90 (m, 2H), 1,42-1,24 (m, 6H) 367,1 2,92

443

(CD3OD, 400 MHz), 8,62 (d, J = 4,4 Hz, 2H), 8,59 (s, 2H), 7,84 (s, 1H), 7,43-7,39 (m, 2H), 7,24 (s, 1H), 6,88 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 5,24-5,20 (m, 1H), 3,47-3,44 (m, 1H), 3,16 (s, 3H), 3,113,05 (m, 2H) 436,2 5,25

Compuesto

RMN Espectro de Masas (LCMS) Tiempo de Retención (min)

(CDCl3, 400 MHz), 8,12 (s, 1H), 7,45 (s, 1H), 7,26 (d, J = 8 Hz, 2H), 7,18 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,14-7,12

447

(m, 4H), 6,97 (s, 1H), 6,78 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 3,89 (dd, J = 14 Hz y 1,2 Hz, 1H), 3,80-3,78 (m, 5H), 3,41-3,33 (m, 1H), 2,73 (dd, J = 15,2 Hz y 3,2 Hz, 1H), 2,64-2,60 (m, 1H) 464,9 5,11

(CD3OD, 400 MHz), 7,78 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,47 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 7,37 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,24 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,06 (dd, J = 8,8 Hz y

453

1,6 Hz, 1H), 6,49 (a, 1H), 4,31-4,05 (m, 8H), 3,20-3,11 (m, 1H), 3,00-2,77 (m, 4H), 1,94-1,90 (m, 2H), 1,54-1,45 (m, 2H), 1,31 (a, 3H), 1,25 (t, J = 7,2 Hz, 3H) 553,1 6,13

(CD3OD, 400 MHz), 7,80 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,48 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 7,38 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,25 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,07 (dd, J = 8,4 Hz y

461

1,6 Hz, 1H), 6,49 (a, 1H), 4,31-4,21 (m, 4H), 4,06 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 3,74 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 3,51 (d, J = 5,2 Hz, 2H), 3,21-3,11 (m, 1H), 2,90-2,79 (m, 2H), 2,26 (s, 1H), 1,39 (s, 3H), 1,32 (s, 6H) 454,3 5,98

(CDCl3, 400 MHz), 8,29 (a, 1H), 7,64 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,61 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 7,50-7,45 (m, 5H), 7,39 (d, J = 7,6 Hz. 1H), 7,33 (d, J = 7,6

464

Hz, 2H), 7,19 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,14 (dd, J = 8,4 Hz y 1,6 Hz, 1H), 7,08 (s, 1H), 6,84 (d, J = 8 Hz, 2H), 3,87 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,45-3,40 (m, 1H), 2,96-2,94 (m, 1H), 2,80-2,76 (m, 1H) 493,0 5,71

(CD3OD, 400 MHz), 7,63 (s, 1H), 7,48 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,42 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,20 (s, 2H), 6,49 (a,

466

1H), 4,33-4,22 (a, 3H), 3,89 (t, J = 5,2 Hz, 2H), 3,50 (a, 4H), 3,21-3,11 (m, 2H), 2,91-2,78 (m, 2H), 1,31 (s, 3H) 555,2 3,14

Compuesto

RMN Espectro de Masas (LCMS) Tiempo de Retención (min)

469

(CD3OD, 400 MHz), 7,47 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,39 (s, 4H), 7,23 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,06 (dd, J = 8,4 Hz y 2,0 Hz, 1H), 6,49 (a, 1H), 4,35-4,21 (m, 3H), 3,75 (a, 2H), 3,53 (t, J = 5,4 Hz, 2H), 3,44 (a, 2H), 3,26-3,30 (m, 4H), 3,22-3,13 (m, 1H), 2,89-2,78 (m, 2H), 2,60 (t, J = 5,4 Hz, 4H), 2,46 (a, 2H), 1,32 (s, 3H) 525,2 5,07

472

(CDCl3, 400 MHz), 7,80, 7,75 (s 1H), 7,43, 7,41 (s, 1H), 7,21 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,10 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 5,43, 5,27 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 4,514,30 (m, 1H), 4,21-4,10 (m, 2H), 3,18 (c, J = 12,8 Hz, 1H), 2,82-2,76 (m, 1H), 2,64-2,61 (m, 1H), 1,82-1,76 (m, 2H), 1,55-1,53 (m, 1H), 1,29-1,24 (m, 3H), 1,08 (a, 3H), 0,98 (d, J = 6,8 Hz, 3H) 335,3 5,52

473

(CD3OD, 400 MHz), 7,47 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,39 (s, 4H), 7,23 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,05 (dd, J = 8,4 Hz y 2,0 Hz, 1H), 6,49 (a, 1H), 4,32-4,20 (m, 3H), 3,76 (a, 2H), 3,46 (a, 2H), 3,213,13 (m, 1H), 2,90-2,78 (m, 2H), 2,54 (a, 2H), 2,49-2,43 (m, 4H), 1,32 (a, 3H), 1,10 (t, J = 7,2 Hz, 3H) 495,3 4,68

474

(CD3OD, 400 MHz), 7,61 (s, 1H), 7,44 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,35 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,20-7,16 (m, 2H), 6,45 (a, 1H), 4,28-4,14 (m, 3H), 4,11 (s, 2H), 3,47 (s, 4H), 3,26 (s, 4H), 3,193,12 (m, 1H), 2,91 (s, 3H), 2,88-2,79 (m, 2H), 1,30 (s, 3H) 511,2 4,99

Sal de HCl 477

(CD3OD, 400 MHz) 7,48 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 7,34 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,12 (dd, J = 8,8 Hz y 2,0 Hz, 1H), 4,68 (s, 1H), 3,77-3,72 (m, 1H), 3,473,44 (m, 1H), 3,10-3,03 (m, 2H), 2,65-2,61 (m, 1H), 1,25 (d, J = 7,2 Hz, 3H), 0,96 (d, J = 7,2 Hz, 3H) 249,1 3,67

Compuesto

RMN Espectro de Masas (LCMS) Tiempo de Retención (min)

478

(CD3OD, 400 MHz), 7,63 (s, 1H), 7,48 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,42 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,20 (s, 2H), 6,49 (a, 1H), 4,32-4,21 (m, 3H), 3,50 (a, 4H), 3,21-3,15 (m, 3H), 2,92 (s, 3H), 2,902,73 (m, 2H), 1,32 (s, 3H) 525,1 3,25

480

(CD3OD, 400 MHz), 7,78 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,63 (s, 1H), 7,37 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,20 (s, 2H), 6,49 (a, 1H), 4,31-4,22 (m, 3H), 3,19-3,11 (m, 1H), 2,90 (s, 3H), 2,86-2,77 (m, 2H), 1,32 (s, 3H) 456,1 4,26

481

(CD3OD, 400 MHz), 7,48 (d, J = 2 Hz, 1H), 7,41-7,36 (m, 4H), 7,23 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,06 (dd, J = 8,8 Hz y 2,0 Hz, 1H), 6,49 (a, 1H), 4,35-4,21 (m, 3H), 3,64 (a, 2H), 3,45 (a, 2H), 3,20-3,11 (m, 1H), 2,92-2,78 (m, 2H), 2,68 (a, 2H), 2,55 (a, 2H), 1,92-1,80 (m, 4H), 1,66-1,62 (m, 1H), 1,32-1,22 (m, 8H) 549,3 5,29

483

(CD3OD, 400 MHz), 7,63 (s, 1H), 7,41 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,37 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,19 (s, 2H), 6,49 (a, 1H), 4,35-4,22 (m, 3H), 3,22- 3,13 (m, 1H), 3,08 (s, 3H), 2,98 (s, 3H), 2,89-2,77 (m, 2H), 1,32(s, 3H) 470,1 4,46

484

(CD3OD, 400 MHz), 7,63 (s, 1H), 7,48 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 7,40 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,20 (s, 2H), 6,49 (a, 1H), 4,35-4,22 (m, 4H), 3,82-3,50 (m, 6H), 3,45 (a, 1H), 3,21-3,11 (m, 1H), 3,00-2,78 (m, 5H), 2,25-2,15 (m, 2H), 1,32 (s, 3H) 539,2 3,02

Compuesto

RMN Espectro de Masas (LCMS) Tiempo de Retención (min)

485

(CDCl3, 400 MHz), 8,06, 7,98 (s, 1H), 7,50, 7,49 (s,1H), 7,22 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 7,21 (d, J = 6,4 Hz, 2H), 7,15 (dd, J = 8,8 Hz y 1,6 Hz, 1H), 6,81 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 6,77 (s, 1H), 3,91 (s, 3H), 3,77 (s, 3H), 3,72 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 3,51-3,43 (m, 1H), 3,022,96 (m, 1H), 2,86- 2,81 (m, 1H) 398,9 4,18

486

(CDCl3, 400 MHz), 7,77, 7,70 (s, 1H), 7,42, 7,39 (s, 1H), 7,20 (dd, J = 8,4 Hz y 1,6 Hz, 1H), 7,09 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 5,52-5,36 (m, 1H), 4,44-4,17 (m, 3H), 3,28-3,20 (m, 1H), 2,88-2,77 (m, 1H), 2,60 (d, J = 15,2 Hz, 1H), 2,05-1,88 (m, 1H), 1,58-1,54 (m, 1H), 1,30-1,26 (m, 3H), 1,04 (d, J = 2 Hz, 9H) 349,1 6,03

488

(CD3OD, 400 MHz), 7,85 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,64 (s,1H), 7,41 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,20 (s, 2H), 6,52 (a, 1H), 4,33-4,22 (a, 3H), 4,07 (a, 2H), 3,77 (t, J = 5,6 Hz, 4H), 3,65 (a, 2H), 3,39 (t, J = 5,6 Hz, 2H), 3,21-3,11 (m, 3H), 2,91-2,78 (m, 2H), 1,32 (s, 3H) 555,2 3,34

490

(CD3OD, 400 MHz), 7,81 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,63 (s, 1H), 7,37 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,20 (s, 2H), 6,51 (a, 1H), 4,32-4,22 (m, 3H), 3,69 (t, J = 5,8 Hz, 2H), 3,48 (t, J = 5,6 Hz, 2H), 3,213,11 (m, 1H), 2,90-2,77 (m, 2H), 1,32 (s, 3H) 486,1 3,80

492

(CD3OD, 400 MHz), 7,47 (s, 1H), 7,41-7,38 (m, 4H), 7,23 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,06 (dd, J = 8,8 Hz y 1,6 Hz, 1H), 6,49 (a, 1H), 4,35-4,21 (m, 3H), 3,73-3,62 (m, 6H), 3,44 (a, 2H), 3,19-3,10 (m, 1H), 2,91-2,78 (m, 2H), 1,32 (a, 3H) 468 5,52

Compuesto

RMN Espectro de Masas (LCMS) Tiempo de Retención (min)

494

(DMSO, 400 MHz), 11,19 (a, 1H), 8,49 (a, 1H), 7,81 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,51 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 7,30 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,29 (d, J = 14,0 Hz, 1H), 7,07 (dd, J = 8,4 Hz y 1,6 Hz, 1H), 6,39 (a, 1H), 4,21-4,16 (m, 3H), 3,93 (t, J = 6,4 Hz, 1H), 3,74 (c, J = 6,8 Hz, 1H), 3,59 (c, J = 6,8 Hz, 1H), 3,28 (s, 2H), 3,08-3,01 (m, 1H), 2,812,70 (m, 2H), 1,91-1,79 (m, 3H), 1,59-1,52 (m, 1H), 1,21 (s, 3H) 482,2 5,74

496

(CD3OD, 400 MHz), 11,05 (s, 1H), 8,09 (s, 2H), 7,64 (s, 1H), 7,32 (a, 1H), 7,24 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,17 (dd, J = 8,8 Hz y 2,0 Hz, 1H), 6,24 (s, 1H), 4,22 (a, 1H), 4,12-4,09 (m, 2H), 3,15-3,09 (m, 1H), 2,83-2,65 (m, 5H), 1,21 (t, J = 6,8 Hz, 3H) 430,2 3,65

Sal de HCl 497

(CD3OD, 400 MHz), 7,49 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 7,34 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,13 (dd, J = 8,8 Hz y 2,0 Hz, 1H), 3,77-3,72 (m, 1H), 3,52-3,45 (m, 1H), 3,15-3,01 (m, 2H), 2,80- 2,74 (m, 2H), 2,60-2,52 (m, 1H), 2,27-2,20 (m, 4H) 281,0 3,84

498

(CDCl3, 400 MHz), 8,35 (a, 1H), 7,51 (s, 1H), 7,32-7,26 (m, 4H), 7,20 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,13 (dd, J = 8,8 Hz y 2,4 Hz, 1H), 6,39 (a, 1H), 4,254,21 (m, 2H), 3,80 (a, 2H), 3,47 (a, 2H), 3,16-3,10 (m, 1H), 2,96-2,88 (m, 3H), 2,79-2,75 (m, 1H), 2,54-2,36 (m, 6H), 1,32 (s, 3H) 481,4 4,81

499

(DMSO, 400 MHz), 10,86 (s, 1H), 8,17 (s, 1H), 8,03 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,81 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,65 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,50 (a, 2H), 7,26 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,02 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,24 (s, 1H), 4,35 (a, 1H), 4,09-4,05 (m, 2H), 3,61-3,49 (m, 1H), 2,782,65 (m, 2H), 1,45(t, J = 6,8 Hz, 3H) 423,3 5,15

Compuesto

RMN Espectro de Masas (LCMS) Tiempo de Retención (min)

503

(CD3OD, 400 MHz), 8,33 (s, 2H), 7,67 (s, 1H), 7,23 (s, 2H), 7,05 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 6,91 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 6,54-6,38 (m, 1H), 4,52 (a, 1H), 3,78 (s, 3H), 3,36-3,34 (m, 1H), 2,99 (s, 3H), 2,92-2,88 (m, 2H) 508,2 5,72

504

(CDCl3, 400 MHz), 7,88-7,77 (m, 1H), 7,43 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,23 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,11 (d, J = 8,8 Hz 1H), 5,70-7,68 (m, 2H), 5,19-4,97 (m, 1H), 4,60-4,38 (m, 1H), 4,19-4,07 (m, 2H), 2,82-2,80 (m, 1H), 2,68-2,64 (m, 1H), 2,29-1,84 (m, 6H), 1,55-1,46 (m, 1H), 1,36-1,24 (m, 3H) 359,1 5,65

505

(CD3OD, 400 MHz), 7,84 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,63 (s, 1H), 7,38 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,20 (s, 2H), 6,49 (a, 1H), 4,31-4,22 (m, 3H), 3,19-3,11 (m, 1H), 2,89-2,77 (m, 2H), 1,32 (s, 3H) 442,0 4,06

506

(CD3OD, 400 MHz), 8,44 (s, 2H), 7,67 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,28 (dd, J = 8,8 Hz y 2,0 Hz, 1H), 6,52 (s, 1H), 4,58-4,55 (m, 1H), 4,43-4,40 (m, 2H), 3,41-3,31 (m, 1H), 3,15 (s, 3H), 3,03-3,01 (m, 2H), 1,32 (a, 3H) 386,3 5,32

508

(CDCl3, 400 MHz), 7,66 (d, J = 24,8 Hz, 1H), 7,39-6,89 (m, 8H), 5,44-5,02 (m, 1H), 4,49-4,10 (m, 3H), 3,23-2,94 (m, 2H), 2,83-2,74 (m, 1H), 2,64-2,58 (m, 1H), 2,26-1,98 (m, 2H), 1,47-1,26 (m, 6H) 397,1 5,97

Compuesto

RMN Espectro de Masas (LCMS) Tiempo de Retención (min)

509

(CD3OD, 400 MHz), 7,80 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,47 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 7,38 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,24 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,07 (dd, J = 8,0 Hz y 1,6 Hz, 1H), 6,49 (a, 1H), 4,35-4,21 (m, 3H), 3,69 (t, J = 4,6 Hz, 4H), 3,53 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 3,19-3,10 (m, 1H), 2,90-2,78 (m, 2H), 2,59 (t, J = 6,6 Hz, 4H), 2,53 (s, 2H), 1,32 (s, 3H) 511,4 5,05

510

(CDCl3, 400 MHz), 8,09, 7,83 (s, 1H), 7,42 (s, 1H), 7,21 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,09 (dd, J = 8,4 Hz y 1,2 Hz, 1H), 5,33-5,21 (m, 1H), 4,50-4,34 (m, 1H), 4,21-4,10 (m, 2H), 3,19-3,17 (m, 1H), 2,77-2,74 (m, 1H), 2,67-2,61 (m, 1H), 1,81 (s, 2H), 1,52 (s, 2H), 1,291,23 (m, 3H), 0,96 (s, 3H) 321,4 5,19

511

(CDCl3, 400 MHz), 7,73-7,52 (m, 1H), 7,47 (s, 1H), 7,42-7,18 (m, 6H), 7,09 (dd, J = 8,8 Hz y 2,0 Hz, 1H), 5,41-5,26 (m, 1H), 4,56-4,32 (m, 1H), 4,23-4,10 (m, 2H), 3,21 (a, 1H), 2,852,72 (m, 3H), 2,65 (d, J = 14,2 Hz, 1H), 2,23-2,10 (m, 2H), 1,38 (a, 3H) 383,1 5,75

512

(CD3OD, 400 MHz), 7,80 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,47 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 7,37 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,24 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,06 (dd, J = 8,8 Hz y 2,0 Hz, 1H), 6,50 (a, 1H), 4,32-4,21 (m, 3H), 3,47 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 3,38-3,34 (m, 4H), 3,19-3,10 (m, 1H), 2,89-2,78 (m, 2H), 2,39 (t, J = 8,4 Hz, 2H), 2,09- 2,00 (m, 2H), 1,86-1,80 (m, 2H), 1,32 (a, 3H) 523,1 5,69

513

(CDCl3, 400 MHz), 7,81 (s, 1H), 7,51 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 7,29 (dd, J = 12,0 Hz y 2,8 Hz, 1H), 7,21 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,13 (dd, J = 8,4 Hz y 2,0 Hz, 1H), 7,12-7,08 (m, 1H), 7,07 (s, 1H), 6,50 (a, 1H), 4,49-4,21 (m, 3H), 3,17-3,09 (m, 1H), 2,91-2,85 (m, 1H), 2,77-2,73 (m, 1H), 1,39 (s, 3H) 361,1 5,12

Compuesto

RMN Espectro de Masas (LCMS) Tiempo de Retención (min)

514

(CD3OD, 400 MHz), 7,47 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,46-7,37 (m, 4H), 7,23 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,06 (dd, J = 8,8 Hz y 2,0 Hz, 1H), 6,49 (a, 1H), 4,35-4,21 (m, 3H), 3,77-3,69 (m, 2H), 3,55-3,45 (m, 2H), 3,20-3,11 (m, 1H), 2,902,78 (m, 3H), 2,67-2,55 (m, 3H), 2,39-2,31 (m, 3H), 2,01-1,95 (m, 1H), 1,82-1,79 (m, 1H), 1,32 (s, 3H) 495,3 4,57

515

(CDCl3, 400 MHz), 7,92, 7,82 (s, 1H), 7,42 (s, 1H), 7,22 (dd, J = 8,4 Hz y 1,2 Hz, 1H), 7,10 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 5,31, 5,19 (s, 1H), 4,52, 4,32 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 4,20-4,12 (m, 2H), 3,19-3,12 (m, 1H), 2,81-2,62 (m, 2H), 1,81 (d, J = 6,8 Hz, 2H), 1,48-22 (m, 12H), 0,88 (s, 3H) 363,5 6,34

516

(CD3OD, 400 MHz), 7,63 (s, 1H), 7,50 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,40 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,20 (s, 2H), 6,49 (a, 1H), 4,30-4,20 (m, 3H), 3,89 (s, 2H), 3,45 (a, 2H), 3,20-3,10 (m, 1H), 3,033,01 (m, 9H), 2,91-2,80 (m, 2H), 1,32 (s, 3H) 527,1 3,16

517

(CD3OD, 400 MHz), 8,27 (s, 2H), 7,52 (d, J = 2 Hz, 1H), 7,27 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,17 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,10 (dd, J = 8,8 Hz y 2,4 Hz, 1H), 7,05 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 6,95 (d, J = 9,2 Hz, 2H), 6,92 (s, 1H), 6,58-6,38 (m, 1H), 4,52 (a, 1H), 3,80 (s, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,31-3,30 (m, 1H), 2,95 (s, 3H), 2,92-2,88 (m, 1H) 464,2 5,86

518

(CD3OD, 400 MHz), 8,49, 8,29 (d, J = 4,4 Hz, 2,8 Hz, 1H), 7,82, 7,70 (t, J = 2,0 Hz, 1H), 7,46 (s, 1H), 7,38-7,23 (m, 5H), 7,15 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,07 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,98 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 6,46 (a, 1H), 4,35-4,21 (m, 3H), 3,88 (t, J = 7,0 Hz, 1H), 3,71-3,67 (m, 1H), 3,20-3,11 (m, 3H), 3,01-2,80 (m, 4H), 1,32 (s, 3H) 517,6 5,03

Compuesto

RMN Espectro de Masas (LCMS) Tiempo de Retención (min)

520

(DMSO, 400 MHz), 11,15 (s, 1H), 7,51 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,42 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,35 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,30 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,16 (s, 1H), 7,06 (dd, J = 8,4 Hz y 2,0HZ, 1H), 6,36 (a, 1H), 4,18-4,10 (m, 3H), 3,093,00 (m, 1H), 2,91-2,64 (m, 8H), 1,21 (t, J = 6,6 Hz, 3H) 426,2 4,29

521

(CD3OD, 400 MHz), 7,81 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,47 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 7,39 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,24 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,07 (dd, J = 8,4 Hz y 2,0 Hz, 1H), 6,50 (a, 1H), 4,35-4,29 (m, 3H), 3,70-3,60 (m, 1H), 3,51-3,47 (m, 2H), 3,37-3,29 (m, 1H), 3,19-3,11 (m, 2H), 2,92 (s, 3H), 2,88-2,78 (m, 2H), 2,51-2,41 (m, 1H), 2,29-2,20 (m, 1H), 2,17-2,00 (m, 2H), 1,89-1,78 (m, 2H), 1,32 (s, 3H) 509,4 4,99

523

(CDCl3,400 MHz), 7,91, 7,72 (s, 1H), 7,50-7,43 (s, 1H), 7,22-7,06 (m, 6H), 5,28-5,19 (m, 1H), 4,64-4,45 (m, 1H), 4,20 (a, 2H), 3,27-3,10 (m, 2H), 2,91-2,72 (m, 2H), 2,70-2,66 (m, 1H), 2,49-2,28 (m, 2H), 1,38-1,24 (m, 9H), 1,01, 0,96 (d, J = 6,8 Hz, 3H) 439,0 6,11

524

(DMSO, 400 MHz), 11,10 (s, 1H), 8,42 (s, 1H), 7,75 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,67 (s, 1H), 7,51 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 7,43 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,35 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,29 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,06 (dd, J = 8,8 Hz y 2,4 Hz, 1H), 6,39 (a, 1H), 4,13-4,09 (m, 3H), 3,103,04 (m, 1H), 2,81-2,72 (m, 5H), 1,21 (s, 3H) 412,1 4,13

525

(CD3OD, 400 MHz), 7,53-7,46 (m, 4H), 7,29 (a, 1H), 7,25 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,08 (dd, J = 8,8 Hz y 2,0 Hz, 1H), 6,49 (a, 1H), 4,34-4,23 (m, 3H), 3,53-3,42 (m, 2H), 3,18-3,12 (m, 5H), 2,91-2,74 (m, 3H), 1,32 (t, J = 7,2 Hz, 6H) 495,3 3,46

Compuesto

RMN Espectro de Masas (LCMS) Tiempo de Retención (min)

526

(CD3OD, 400 MHz), 7,63 (s, 1H), 7,51 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,41 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,19 (d, J = 1,2 Hz, 2H), 6,46 (a, 1H), 4,31 (s, 2H), 4,23-4,20 (m, 3H), 3,62-3,50 (m, 4H), 3,19-3,11 (m, 1H), 2,92 (s, 6H), 2,87-2,81 (m, 2H), 2,76 (s, 3H), 1,31 (s, 3H) 513,2 4,43

527

(CD3OD, 400 MHz), 7,47 (d, J = 2 Hz, 1H), 7,46-7,37 (m, 4H), 7,24 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,07 (d, J = 8,8 Hz y 2,0 Hz, 1H), 6,49 (a, 1H), 4,75 (a, 1H), 4,35-4,21 (m, 3H), 3,85 (a, 1H), 3,64 (a, 2H), 3,45-3,37 (m, 1H), 3,193,12 (m, 4H), 2,91-2,80 (m, 3H), 2,28-2,00 (m, 6H), 2,12-2,05 (m, 2H), 1,61 (a, 2H), 1,32 (s, 3H) 535,3 4,94

528

(CDCl3, 400 MHz), 7,89-7,69 (m, 1H), 7,43 (a, 1H), 7,33-7,30 (m, 2H), 7,20-7,06 (m, 4H), 5,29-5,19 (m, 1H), 4,64-4,45 (m, 1H), 4,20 (a, 2H), 3,273,10 (m, 2H), 2,91-2,72 (m, 2H), 2,70-2,66 (m, 1H), 2,50 (a, 2H), 2,29 (a, 1H), 1,32-1,31 (m, 12H), 1,02, 0,90 (d, J = 6,8 Hz, 3H) 453,0 6,30

529

(CD3OD, 400 MHz), 7,52-7,45 (m, 4H), 7,31 (a, 1H), 7,25 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,08 (dd, J = 8,4 Hz y 2,0 Hz, 1H), 6,48 (a, 1H), 4,34-4,23 (m, 3H), 3,45 (a, 3H), 3,23-3,13 (m, 4H), 2,922,80 (m, 5H), 1,32 (s, 3H) 481,3 3,43

531

(CD3OD, 400 MHz) 7,48 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 7,43 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,40 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,24 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,07 (dd, J = 8,4 Hz y 2,0 Hz, 1H), 6,50 (a, 1H), 4,35-4,29 (m, 3H), 3,90 (a, 1H), 3,52-3,47 (m, 3H), 3,20-3,16 (m, 2H), 3,01 (t, J = 12,0 Hz, 2H), 2,91-2,79 (m, 3H), 2,20 (a, 1H), 2,00-1,97 (m, 3H), 1,82-1,71 (m, 6H), 1,56-1,48 (m, 1H), 1,32 (a, 3H) 549,6 5,21

Compuesto

RMN Espectro de Masas (LCMS) Tiempo de Retención (min)

(DMSO, 400 MHz), 11,39 (s, 1H),

9,80 (a, 1H), 9,40 (a, 1H), 7,52 (d, J

= 1,6 Hz, 1H), 7,48 (s, 1H), 7,37-

7,31 (m, 4H), 7,25-7,19 (m, 1H), 7,00

(dd, J = 8,8 Hz y 2 Hz, 1H), 4,76 (d, J

325,3 4,75

= 5,6 Hz, 1H), 3,61-3,53 (m, 1H),

3,25-3,20 (m, 1H), 2,94-2,92 (m, 2H),

Sal de HCl

2,13-1,97 (m, 1H), 1,35,1,24 (d, J =

532

6,8 Hz, 3H)

(CD3OD, 400 MHz), 8,99 (s, 1H), 7,80 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,71 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 7,57 (s, 1H), 7,47 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 7,39 (d, J = 8,0 Hz, 2H),

533

7,24 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,07 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,51 (a, 1H), 4,32 (t, J = 4,8 Hz, 3H), 4,23-4,21 (m, 2H), 3,43 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 3,20-3,11 (m, 1H), 2,91-2,78 (m, 2H), 2,23-2,17 (m, 2H), 1,32 (a, 3H) 506,2 4,96

(CD3OD, 400 MHz), 7,79 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,48 (s, 1H), 7,38 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,25 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,07 (dd, J = 8,4 Hz y 2,0 Hz, 1H),

534

6,51 (a, 1H), 4,35-4,21 (m, 3H), 3,67 (t, J = 4,6 Hz, 4H), 3,41 (c, J = 4,8 Hz, 2H), 3,20-3,11 (m, 1H), 2,91-2,79 (m, 2H), 2,62 (s, 1H), 2,46-2,42 (m, 5H), 1,83-1,79 (m, 2H), 1,32 (s, 3H) 525,2 4,76

(CD3OD, 400 MHz), 7,62 (s, 1H), 7,49 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,39 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,19 (s, 2H), 6,48 (s,

535

1H), 4,27-4,18 (m, 5H), 3,87 (t, J = 4,6 Hz, 4H), 3,47 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 3,34-3,30 (m, 2H), 3,16-3,12 (m, 5H), 2,89-2,75 (m, 2H), 1,30 (s, 3H) 541,2 3,51

(CD3OD, 400 MHz), 7,60 (s, 1H), 7,51 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,40 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,21-7,16 (m, 2H), 6,46

541

(a, 1H), 4,41 (s, 2H), 4,28-4,19 (m, 3H), 3,79-3,74 (m, 4H), 3,51-3,49 (m, 4H), 3,19-3,11 (m, 1H), 2,95 (s, 3H), 2,88-2,75 (m, 2H), 2,30 (s, 2H), 1,30 (s, 3H) 525,2 4,42

Compuesto

RMN Espectro de Masas (LCMS) Tiempo de Retención (min)

542

(CD3OD, 400 MHz), 7,84 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,47 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,37 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,24 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,06 (dd, J = 8,4 Hz y 2,0 Hz, 1H), 6,49 (a, 1H), 4,35-4,16 (m, 3H), 3,21-3,10 (m, 1H), 2,90-2,71 (m, 2H), 1,32 (a, 3H) 398,1 3,95

547

(CDCl3, 400 MHz), 7,92-7,77 (m, 1H), 7,42-7,39 (m, 8H), 7,26-7,21 (m, 1H), 7,10 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 5,164,97 (m, 1H), 4,56-4,36 (m, 1H), 4,19-4,11 (m, 2H), 3,27-3,19 (m, 1H), 2,78-2,63 (m, 2H), 1,90 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 1,74 (a, 1H), 1,49-1,26 (m, 4H), 1,10-0,91 (m, 6H) 335,2 5,45

552

(CD3OD, 400 MHz), 7,82 (s, 1H), 7,80 (s, 1H), 7,55-7,48 (m, 3H), 7,23 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,07 (dd, J = 8,4 Hz y 2,0 Hz, 1H), 6,49 (a, 1H), 4,334,21 (m, 3H), 4,05 (a, 2H), 3,5-3,73 (m, 4H), 3,61 (a, 2H), 3,37 (t, J = 5,8 Hz, 2H), 3,25-3,17 (m, 3H), 2,92-2,80 (m, 2H), 1,32 (s, 3H) 511,3 3,56

553

(CDCl3, 400 MHz), 8,01, 7,91 (s, 1H), 7,43 (s, 1H), 7,23 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,11 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,71 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,63 (s, 1H), 6,57 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 5,92 (s, 2H), 5,185,07 (m, 1H), 4,63-4,41 (m, 1H), 4,30-4,11 (m, 2H), 3,36-3,31 (m, 1H), 2,91-2,83 (m, 2H), 2,70-2,61 (m, 1H), 2,38-2,15 (m, 2H), 1,38-1,30 (m, 3H), 1,09-1,01 (m, 3H) 440,9 5,75

556

(CD3OD, 400 MHz), 7,76 (s, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,52-7,43 (m, 2H), 7,23 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,06 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,47 (a, 1H), 4,30-4,21 (m, 3H), 3,52 (s, 4H), 3,33 (s, 3H), 3,263,18 (m, 1H), 2,91-2,80 (m, 2H), 1,32 (s, 3H) 456,1 4,21

Compuesto

RMN Espectro de Masas (LCMS) Tiempo de Retención (min)

558

(CD3OD, 400 MHz), 7,48 (s, 1H), 7,46 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,40 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 7,24 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,07 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,49 (a, 1H), 4,35-4,21 (m, 3H), 3,64-3,61 (m, 2H), 3,20-3,11 (m, 3H), 3,01 (s, 3H), 2,93 (s, 5H), 2,89-2,78 (m, 3H), 2,12-2,05 (m, 2H), 1,32 (s, 3H) 497,2 4,69

559

(CDCl3, 400 MHz), 8,17, 8,00 (s, 1H), 7,50 (s, 1H), 7,23-7,13 (m, 4H), 6,97, 6,92 (s, 1H), 6,80 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 4,43, 4,34 (t, J = 7,0 Hz, 1H), 4,04-3,98 (m, 1H), 3,77 (s, 3H), 3,47-3,41 (m, 1H), 3,25-2,81 (m, 2H), 2,23-2,06 (m, 2H), 1,02 (t, J = 6,2 Hz, 3H) 460,8 4,96

560

(DMSO, 300 MHz), 7,63 (s, 1H), 7,49 (d, J = 6,3 Hz, 2H), 7,42 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 7,20 (s, 2H), 6,49 (s, 1H), 4,32-4,21 (m, 3H), 3,85 (a, 4H), 3,39-3,30 (m, 3H), 3,26-3,15 (m, 5H), 2,92-2,73 (m, 9H), 2,26- 2,20 (m, 2H), 1,31 (s, 3H) 596,3 4,45

561

(CD3OD, 400 MHz), 7,52 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,47 (s, 1H), 7,39-7,36 (m, 2H), 7,24 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,06 (dd, J = 8,4 Hz y 1,6 Hz, 1H), 6,49 (a, 1H), 4,45-4,23 (m, 4H), 3,84-3,45 (m, 4H), 3,20-3,12 (m, 1H), 2,91-2,78 (m, 2H), 2,25-2,10 (m, 1H), 1,98-1,89 (m, 4H), 1,32 (s, 3H) 509,2 5,18

562

(CD3OD, 400 MHz), 7,52-7,45 (m, 4H), 7,32 (a, 1H), 7,25 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,08 (dd, J = 8,4 Hz y 1,6 Hz, 1H), 6,49 (a, 1H), 4,34-4,23 (m, 4H), 3,69 (s, 3H), 3,31-3,30 (m, 8H), 3,213,12 (m, 3H), 2,91-2,74 (m, 2H), 1,32 (s, 3H) 525,3 3,52

Compuesto

RMN Espectro de Masas (LCMS) Tiempo de Retención (min)

563

(CD3OD, 400 MHz), 7,51-7,48 (m, 3H), 7,40 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,24 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,07 (dd, J = 8,4 Hz y 1,2 Hz, 1H), 6,49 (a, 1H), 4,35-4,21 (m, 3H), 3,89 (a, 2H), 3,45 (a, 2H), 3,19-3,10 (m, 1H), 3,05-3,01 (m, 9H), 2,91-2,78 (m, 2H), 1,32 (a, 3H) 483,1 4,96

565

(CD3OD, 400 MHz), 7,47 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 7,35 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,12 (dd, J = 8,4 Hz y J = 2,0 Hz, 1H), 4,87 (s, 1H), 3,75-3,72 (m, 1H), 3,50-3,47 (m, 1H), 3,09-3,03 (m, 2H), 2,22 (dd, J = 15,6 Hz y J = 2,4 Hz, 1H), 1,84 (dd, J = 15,6 Hz y 8,4 Hz, 1H), 1,17 (s, 9H) 276,9 4,00

567

(CD3OD, 400 MHz), 7,48 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 7,41-7,32 (m, 3H), 7,23 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,07 (dd, J = 8,4 Hz y 2,0 Hz, 1H), 6,46 (a, 1H), 4,32-4,17 (m, 3H), 3,80 (s, 2H), 3,67 (t, J = 5,0 Hz, 2H), 3,39 (s, 3H), 3,30-15 (m, 6H), 2,88-2,83 (m, 6H), 1,32 (s, 3H) 511,4 4,71

Sal de HCl 568

(DMSO, 400 MHz), 611,39 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 9,75 (s, 1H), 9,34 (s, 1H), 7,53 (s, 1H), 7,36 (dd, J = 8,4 Hz y 4,0 Hz, 1H), 7,10 (dd, J = 8,8 Hz y 2,0 Hz, 1H), 4,82-4,71 (m, 1H), 3,623,56 (m, 1H), 3,14 (a, 1H), 3,00-2,83 (m, 2H), 2,35-2,23 (m, 1H), 2,18-1,82 (m, 4H), 1,34(c, J = 6,4 Hz, 3H) 295,0 4,14

Ejemplo 2: Ensayo para evaluar el efecto sobre la expresión de VEGF endógeno inducido por hipoxia.

La capacidad de los compuestos de la presente invención para modular la expresión de VEGF endógeno inducido por hipoxia se puede analizar como se muestra a continuación. Los niveles de proteína VEGF se pueden monitorizar

5 mediante un ensayo ELISA (R&D Systems). En resumen, se pueden cultivar células HeLa durante 24-48 horas en condiciones de hipoxia (1% de O2, 5% de CO2, equilibrado con nitrógeno) en presencia o ausencia de un compuesto de la presente invención. El medio acondicionado se puede ensayar a continuación por ELISA, y calcular la concentración de VEGF a partir de la curva estándar ELISA de cada ensayo.

Se puede llevar a cabo un análisis de respuesta a dosis usando el ensayo ELISA y las condiciones descritas

10 anteriormente. Las condiciones para el ELISA de respuesta a dosis son análogas a las descritas anteriormente. Se puede analizar, por ejemplo, una serie de siete concentraciones diferentes. En paralelo, se puede llevar a cabo un ensayo de citotoxicidad de respuesta a dosis usando Cell Titer Glo (Promega) en las mismas condiciones que el ELISA para asegurar que la inhibición de la expresión de VEGF no se debe a la citotoxicidad. Se pueden representar las curvas de respuesta a dosis usando el porcentaje de inhibición frente a la concentración del Compuesto, y se

15 pueden generar para cada Compuesto los valores de CE50 y CC50 con la inhibición máxima ajustada como 100% y la inhibición mínima como 0%. Los compuestos preferentes de la presente invención tendrán un valor de CE50 inferior a 50, preferentemente inferior a 10, más preferentemente inferior a 2, incluso más preferentemente inferior a la 0,5, e incluso más preferentemente inferior a 0,01.

La Figura 1 muestra la capacidad de un Compuesto típico de la presente invención, el Compuesto Nº 7, para inhibir la producción de VEGF endógeno en células tumorales en condiciones de hipoxia. El valor de CE 50 de ELISA es de 0,0025 M, mientras que su CC50 (50% de citotoxicidad) es superior a 0,2 M. En la Tabla 5 se proporcionan los valores de CE50 para una serie de compuestos preferentes de la presente invención.

Tabla 5

Compuesto

LCMS [M+H] Tiempo de Retención LCMS (min) ELISA CE50 M

1

391,20 3,67 ****

2

385,28 4,01 *****

3

479,18 4,35 *****

4

435,23 4,28 *****

5

391,28 4,05 *****

6

425,28 4,07 *****

7

443,28 4,61 *****

# 8

415,26 4,25 *****

9

431,25 4,07 *****

# 10

467,15 4,51 *****

11

389,24 4,24 *****

12

414,31 3,94 *****

13

411,24 4,89 *****

14

397,22 4,57 *****

15

457,3 4,24 *****

16

435,19 4,47 *****

17

447,14 4,44 *****

18

431,14 4,55 *****

19

437,26 4,54 *****

20

389,24 4,22 *****

21

391,28 4,04 *****

22

425,28 4,11 *****

23

373,23 4,04 *****

24

411,24 4,8 *****

25

449,23 4,03 *****

26

437,15 4,52 *****

27

399,25 4,11 *****

28

399,19 4,2 *****

Compuesto

LCMS [M+H] Tiempo de Retención LCMS (min) ELISA CE50 M

29

435,09 4,14 *****

30

413,22 4,42 *****

31

423,17 4,32 *****

32

467,25 4,26 *****

33

457,15 4,29 *****

34

383,19 4,42 *****

35

425,28 4,14 *****

36

383,2 4,37 *****

37

423,3 4,24 *****

38

355,24 4,07 *****

39

391,28 4,12 *****

40

403,15 4,45 *****

41

449,11 4,59 *****

42

383,19 4,44 *****

43

371,31 3,89 *****

44

479,18 4,35 *****

45

394,16 4,09 *****

46

421,19 4,22 ****

47

449,07 4,54 ****

48

403,32 4,2 ****

49

403,15 4,51 ****

50

405,18 3,81 ****

51

373,23 4,11 ****

52

355,3 4,07 ****

53

375,26 3,92 ****

54

435,23 4,3 ****

55

425,27 4,26 ****

56

414,14 4,19 ****

57

399,19 4,2 ****

58

469,22 4,32 ****

59

444,12 4,12 ****

60

433,17 4,27 ****

61

419,28 4,04 ****

Compuesto

LCMS [M+H] Tiempo de Retención LCMS (min) ELISA CE50 M

62

409,14 4,22 ****

63

435,09 4,16 ****

64

435,12 4,27 ****

65

387,2 3,95 ****

66

414,17 4,24 ****

67

429,3 4,47 ****

68

359,19 3,89 ****

69

449,08 4,55 ****

70

375,25 4,19 ****

71

394,16 4,12 ****

72

403,15 4,49 ****

73

381,09 3,59 ****

# 74

400,15 4,05 ****

75

387,22 4,29 ****

76

449,26 4,3 ****

77

391,28 4,19 ****

78

435,12 4,24 ****

79

437,19 4,49 ****

80

437,2 3,84 ****

81

375,03 3,57 ****

82

391,28 4,05 ****

83

425,28 4,16 ****

84

359,22 3,95 ****

85

437,15 4,44 ****

86

399,19 4,22 ****

87

403,15 4,44 ****

88

399,19 4,17 ****

89

434,07 4,04 ****

90

387,23 4,26 ****

91

369,27 4,17 ****

92

377,29 4,04 ****

93

435,23 4,29 ****

94

369,17 4,24 ****

Compuesto

LCMS [M+H] Tiempo de Retención LCMS (min) ELISA CE50 M

95

449,06 4,51 ****

96

341,27 3,89 ****

97

387,19 4,2 ****

98

405,18 3,79 ****

99

469,22 4,29 ****

100

461,32 4,61 ****

101

369,17 4,26 ****

102

413,28 4,02 ****

103

407,1 4,05 ****

104

375,27 4,11 ****

105

387,21 4,19 ****

106

373,18 4,04 ****

107

385,28 4,02 ****

108

359,16 3,92 ****

109

369,34 4,16 ****

110

374,24 3,07 ****

111

386,19 3,89 ****

112

369,27 2,63 ****

113

399,13 4,01 ****

114

389,3 4,05 ****

115

435,13 4,14 ****

116

407,16 4,09 ****

117

419,28 4,05 ****

118

366,29 3,79 ****

119

521,19 4,16 ****

120

380,31 3,92 ****

121

403,32 4,27 ****

122

383,31 4,37 ****

123

319,2 2,19 ****

124

351,14 2,53 ***

125

409,3 4,14 ***

126

423,3 3,95 ***

127

371,31 3,9 ***

Compuesto

LCMS [M+H] Tiempo de Retención LCMS (min) ELISA CE50 M

128

371,31 3,62 ***

129

449,13 3,81 ***

130

401,23 3,56 ***

131

385,22 3,74 ***

132

363,06 2,31 ***

133

385,15 3,86 ***

134

377,3 4,04 ***

135

397,15 2,42 ***

136

443,33 4,11 ***

137

361,07 2,53 ***

138

345,07 3,15 ***

139

400,27 4,01 ***

140

488,23 4,36 ***

141

425,21 4,37 ***

142

462,15 4,11 ***

143

369,23 3,74 ***

144

415,33 3,84 ***

145

361,3 4,39 ***

146

400,21 3,81 ***

147

438,21 3,97 ***

148

469,01 4,42 ***

149

425,25 4,24 ***

150

504,2 4,68 ***

151

397,01 2,44 ***

152

369,21 3,59 ***

153

372,21 2,36 ***

154

377,29 3,97 ***

155

363,11 2,32 ***

156

341,21 2,46 ***

157

407,14 1,78 ***

158

428,11 3,85 ***

159

351,13 2,47 ***

160

450,15 3,95 ***

Compuesto

LCMS [M+H] Tiempo de Retención LCMS (min) ELISA CE50 M

161

363,05 2,32 ***

162

325,26 2,66 ***

163

319,2 2,24 ***

164

462,19 3,87 ***

165

371,31 3,65 ***

166

354,28 (-Boc) 3,95 ***

167

432,16 3,87 ***

168

351,08 2,4 ***

169

385,35 4,09 ***

170

351,07 2,51 ***

171

363,09 2,68 **

172

384,21 3,52 **

173

319,2 2,24 **

174

N/A 2,38 **

175

443,33 4,09 **

176

417,30 2,77 **

177

398,17 3,67 **

178

363,11 2,31 **

179

450,14 3,89 **

180

421,19 2,65 **

181

363,15 2,46 **

182

419,14 4,14 **

183

389,29 4,14 **

184

431,27 4,1 **

185

328,02 2,41 **

186

462,19 3,81 **

187

443,28 3,99 **

188

446,19 3,81 **

189

405,19 3,8 **

190

317,16 2,7 **

191

369,23 3,89 **

192

495,28 4,89 **

193

297,2 2,53 **

Compuesto

LCMS [M+H] Tiempo de Retención LCMS (min) ELISA CE50 M

194

319,21 2,19 **

195

494,25 2,79 **

196

419,22 4,09 **

197

317,16 2,41 **

198

317,08 2,53 **

199

448,24 3,95 **

200

363,09 2,45 **

201

365,09 2,36 **

202

464,2 4,32 **

203

301,18 2,27 **

204

429,23 3,57 **

205

301,15 2,27 **

206

476,3 4,33 **

207

395,17 2,55 **

208

367,36 2,72 **

209

353,33 3,97 **

210

313,21 2,33 **

211

415,26 4,07 **

212

389,2 2,88 **

213

407,1 2,46 **

214

357,07 2,48 **

215

319,23 2,24 **

216

283,1 2,41 **

217

418,17 3,62 **

218

435,23 3,77 **

220

308,23 2,37 **

221

460,29 4,05 **

222

365,11 2,52 **

223

441,02 2,6 **

224

341,27 2,6 **

225

467,25 4,18 **

226

369,34 4,01 **

227

327,16 2,26 **

Compuesto

LCMS [M+H] Tiempo de Retención LCMS (min) ELISA CE50 M

228

369,34 2,64 **

229

373,29 4,04 *

230

401,23 3,2 *

231

313,12 2,43 *

232

433,25 2,73 *

233

430,38 (-Boc) 4,34 *

234

351,17 2,4 *

235

351,25 3,79 *

236

379,35 2,74 *

237

439,11 4,41 *

238

479,24 3,77 *

239

328,16 2,35 *

240

307,27 3,87 *

241

523,19 3,7 *

242

438,27 4,14 *

243

323,20 3,49 *

244

512 2,27 *

245

485 2,62 *

246

498 2,54 *

247

471 2,36 *

248

283,23 2,24 *

249

339,17 3,07 *

250

355,30 3,57 *

251

297,26 2,26 *

252

341,21 2,44 *

253

301,27 2,29 *

254

301,25 2,27 *

255

281,31 2,2 *

256

345,2 2,26 *

257

335,21 2,34 *

258

459,27 3,72 *

259

479,24 3,52 *

260

287,26 2,36 *

Compuesto

LCMS [M+H] Tiempo de Retención LCMS (min) ELISA CE50 M

261

287,26 2,56 *

262

380,24 3,92 *

263

503,50 3,20 *

264

369,36 2,52 *

265

355,26 2,54 *

266

355,26 2,42 *

267

370,22 3,61 *

268

355,26 2,42 *

269

355,27 2,37 *

270

370,23 3,19 *

271

369,34 2,62 *

272

374,31 2,90 *

273

492,25 2,76 *

274

451,30 3,17 *

275

374,31 2,61 *

276

374,31 2,72 *

277

349,28 1,5 *

278

457,28 4,11 *

279

*****

280

407,10 3,92 *

281

508,15 4,74 *

282

507,08 4,42 *

283

422,32 3,86 *

284

373,29 4,01 *

285

385,24 2,25 •

286

297,2 2,52 *

287

289,22 2,48 *

288

461,26 2,57 *

289

380,29 3,82 *

290

396,27 3,60 *

291

299,17 2,43 *

292

385,18 2,6 *

293

413,22 3,8 *

Compuesto

LCMS [M+H] Tiempo de Retención LCMS (min) ELISA CE50 M

294

340,25 2,27 *

295

404,34 3,84 *

296

299,17 2,23 *

297

326,24 2,4 *

298

235,13 2,18 *

299

351,16 2,62 *

300

401 2,57 *

301

313,21 2,35 *

302

398,28 3,74 *

303

355,22 2,58 *

304

440,32 4,09 *

305

341,08 2,48 *

306

364,3 3,65 *

307

350,32 3,35 *

308

432,27 3,92 *

309

474,26 3,02 ****

310

289,03 2,35 *

311

345,19 2,58 *

312

420,28 4,12 *

313

279,28 2,18 *

314

293,24 2,20 *

315

297,26 2,17 *

316

472,26 3,85 *

317

428,25 3,95 *

318

309 2,25 *

319

284,09 2,1 *

320

356,21 2,37 *

321

279,2 2,1 *

322

279,2 1,76 *

323

309,23 1,82 *

324

280,19 1,76 *

325

279,2 1,76 *

326

263,17 1,93 *

Compuesto

LCMS [M+H] Tiempo de Retención LCMS (min) ELISA CE50 M

327

343,18 2,33 *

328

~ 0,005 4,16 *

329

0,0036 4,26 *

330

0,0047 4,24 *

331

~ 0,010 2,94 *

# 332

~ 0,010 4 *

333

410,27 3,64 **

334

426,24 3,39 *

335

466,23 4,64 ***

336

438,31 4,31 **

337

454,24 4,63 ***

338

474,32 4,33 **

339

412,3 3,83 *

340

446,33 4,49 *

341

447,26 4,25 ***

342

371,31 3,88 ***

343

371,31 3,61 *

344

459,31 4,91 ****

345

383,35 4,44 ****

346

587 4,04 ****

347

451,16 3,93 *****

348

479,28 4,13 *****

349

481,21 3,74 ****

350

462,17 3,66 *****

351

471,17 3,93 ****

352

403,29 3,98 ****

353

497,16 3,94 *****

354

525,2 4,19 *****

355

511,21 3,81 *****

356

490,3 3,93 **

357

534,23 3,93 ***

358

433,2 3,45 ***

359

511,25 3,64 ***

Compuesto

LCMS [M+H] Tiempo de Retención LCMS (min) ELISA CE50 M

360

516 3,82 ****

361

474,26 3,02 ****

362

427 4,2 *****

363

412,4 1,80 *

364

484,3 2,49 *****

365

457,3 4,06 ***

366

553,3 4,42 *

367

402,8 4,37 ****

368

430,9 4,79 **

369

427,0 4,06 **

370

427,0 3,99 *****

371

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372

486,9 4,96 *

373

470,8 5,01 ***

374

436,9 4,66 ***

375

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376

385 3,79 **

377

*

378

*

379

*

380

*

381

*

382

*

383

417,2 4,93 *****

384

403,22 4,65 *****

385

509,51 2,57 ****

386

465,26 2,52 *****

387

465,26 2,52 *****

388

495,4 3,94 *****

389

538,3 4,29 *****

390

480,5 3,23 *****

391

562,55 3,63 *****

392

443,4 3,88 *****

Compuesto

LCMS [M+H] Tiempo de Retención LCMS (min) ELISA CE50 M

393

447,1 6,55 *****

394

450,1 5,48 *****

395

481,32 3,51 *****

396

411,3 3,99 *****

397

535,3 4,29 *****

398

481,3 4,23 *****

399

429,3 3,81 *****

400

493,3 4,43 *****

401

451,3 3,99 *****

402

494,4 3,71 *****

403

479,3 4,23 *****

404

473,6 3,78 *****

405

551,17 4,58 *****

406

425,4 4,13 *****

407

457,4 4,04 *****

408

425,4 4,09 *****

409

477,4 4,18 *****

410

451,3 3,99 *****

411

443,4 3,86 *****

412

473,4 4,23 *****

413

459,3 4,16 *****

414

439,4 4,31 *****

415

637,64 2,82 *****

416

311,1 4,39 *****

417

562,47 4,15 *****

418

511,3 4,13 *****

419

491,4 3,98 *****

420

486,6 3,45 *****

421

553,30 4,05 *****

422

359,29 4,17 *****

423

447,4 3,56 *****

424

594,2 [M-H] 4,58 *****

425

539,2 3,11 *****

Compuesto

LCMS [M+H] Tiempo de Retención LCMS (min) ELISA CE50 M

426

535,27 4,29 *****

427

554,3 4,45 *****

428

563,55 4,64 *****

429

564,42 2,77 *****

430

431,3 3,41 *****

431

522,2 5,05 *****

432

489,4 4,14 *****

433

578,44 2,82 *****

434

467,18 4,11 *****

435

444,3 3,95 *****

436

477,4 3,93 *****

437

543,4 3,92 *****

438

500,1 4,35 *****

439

361,2 5,95 *****

440

536,43 3,95 *****

441

482,1 5,11 ****

442

367,1 2,92 ****

443

436,2 5,25 ****

444

455,28 3,73 ****

445

478 3,67 ****

446

383,3 4,10 ****

447

464,9 5,11 ****

448

501,27 3,65 ****

449

482,24 2,62 ****

450

587 4,04 ****

451

644,3 [M-H] 4,80 ****

452

439,3 3,56 ****

453

553,1 6,13 ****

454

579,3 2,75 ****

455

583 3,84 ****

456

474,3 2,44 ****

457

455 3,4 ****

458

456,3 2,51 ****

Compuesto

LCMS [M+H] Tiempo de Retención LCMS (min) ELISA CE50 M

459

470,3 2,61 ****

460

509,30 4,16 ****

461

454,3 5,98 ****

462

580,56 2,85 ****

463

495,44 4,13 ****

464

493,0 5,71 ****

465

507,4 3,98 ****

466

555,2 3,14 ****

467

524,2 4,02 ****

468

582,2 2,81 ****

469

525,2 5,07 ****

470

554,3 3,90 ****

471

620,18 3,85 ****

472

335,3 5,52 ****

473

495,3 4,68 ***

474

511,2 4,99 ***

475

483 3,87 ***

476

400 3,45 ***

477

249,1 3,67 ***

478

525,1 3,25 ***

479

538,3 2,76 ***

480

456,1 4,26 ***

481

549,3 5,29 ***

482

522,3 3,95 ***

483

470,1 4,46 ***

484

539,2 3,02 ***

485

398,9 4,18 ***

486

349,1 6,03 ***

487

505 3,66 ***

488

555,2 3,34 ***

489

538,3 4,15 ***

490

486,1 3,80 ***

491

537,31 2,64 ***

Compuesto

LCMS [M+H] Tiempo de Retención LCMS (min) ELISA CE50 M

492

468 5,52 ***

493

504,3 2,68 ***

494

482,2 5,74 ***

495

403,3 4,16 ***

496

430,2 3,65 ***

497

281,0 3,84 ***

498

481,4 4,81 ***

499

423,3 5,15 ***

500

506,29 3,85 ***

501

534,3 2,68 ***

502

518,3 2,76 ***

503

508,2 5,72 ***

504

359,1 5,65 ***

505

442,0 4,06 ***

506

386,3 5,32 ***

507

450 3,19 ***

508

397,1 5,97 ***

509

511,4 5,05 ***

510

321,4 5,19 ***

511

383,1 5,75 ***

512

523,1 5,69 ***

513

361,1 5,12 ***

514

495,3 4,67 ***

515

363,5 6,34 **

516

527,1 3,16 **

517

464,2 5,86 **

518

517,6 5,03 **

519

527,2 3,88 **

520

426,2 4,29 **

521

509,4 4,99 **

522

383,3 4,10 **

523

439,0 6,11 **

524

412,1 4,13 **

Compuesto

LCMS [M+H] Tiempo de Retención LCMS (min) ELISA CE50 M

525

4,95,3 3,46 **

526

513,2 4,43 **

527

535,3 4,94 **

528

453,0 6,30 **

529

481,3 3,43 **

530

466,28 3,21 **

531

549,6 5,21 **

532

325,3 4,75 **

533

506,2 4,96 **

534

525,2 4,76 **

535

541,2 3,51 **

536

482,29 3,29 **

537

476,3 2,51 **

538

516,37 3,49 **

539

337,3 [M-H] 2,14 **

540

428,28 3,43 **

541

525,2 4,42 **

542

398,1 3,95 **

543

466,34 3,29 **

544

723,58 3,92 *****

545

466,31 3,28 **

546

426,3 2,26 **

547

335,2 5,45 **

548

516,37 3,46 **

549

414 2,89 **

550

496 4,58 **

551

544,5 2,78 **

552

511,3 3,56 **

553

440,9 5,75 **

554

482,32 3,41 **

555

372 2,89 **

556

456,1 4,21 **

557

538,4 3,71 **

Compuesto

LCMS [M+H] Tiempo de Retención LCMS (min) ELISA CE50 M

558

497,2 4,69 **

559

460,8 4,96 **

560

596,3 4,45 *

561

509,2 5,18 *

562

525,3 3,52 *

563

483,1 4,96 *

564

432 2,18 *

565

276,9 4,00 *

566

384,4 1,73 *

567

511,4 4,71 *

568

295,0 4,14 *

569

480,21 3,50 *****

570

549,22 4,59 *****

571

497,13 3,50 **

572

525,29 4,14 *****

573

341,34 2,14 ****

574

427,37 2,23 *

575

437,33 3,16 **

576

575,43 3,71 ***

577

453,28 3,34 ***

578

610,45 3,94 ***

579

481,32 3,51 *****

580

495,29 3,64 *****

581

465,43 3,64 *

582

516,34 3,31 *

583

512,26 3,39 ***

584

466,37 3,34 ***

585

516,33 3,46 ***

586

387,27 2,13 *****

587

467,29 3,66 ***

588

455,26 3,69 ***

589

471,3 3,83 ***

590

495,31 3,64 ****

Compuesto

LCMS [M+H] Tiempo de Retención LCMS (min) ELISA CE50 M

591

541,35 3,73 *****

592

523,42 3,58 *****

593

541,38 3,69 ****

594

505,38 3,83 ***

595

431,21 4,01 ****

596

431,24 3,99 *****

597

445,24 4,19 *****

598

459,24 4,36 *****

599

513,17 4,19 ****

600

479,23 3,99 *****

601

504,21 3,79 ****

602

493,2 4,18 ****

603

513,16 4,19 ****

604

446,18 2,86 *

605

503,23 3,84 *****

606

461,19 3,46 ***

607

442,25 3,46 ***

608

489,2 3,72 ***

609

433,27 3,98 **

610

****

611

**

612

491,23 3,56 ***

613

513,14 4,18 ****

614

463 3,88 **

615

381 3,48 ***

616

540 4,17 **

617

621,57 4,13 ****

618

493,6 2,63 *****

619

521,6 2,80 *****

620

445,5 3,23 ****

621

459,5 3,40 *****

622

459,5 3,38 *****

623

473,5 3,57 *****

Compuesto

LCMS [M+H] Tiempo de Retención LCMS (min) ELISA CE50 M

624

479,5 3,28 ****

625

507,6 3,53 *****

626

493,6 3,48 ****

627

511,6 3,53 *****

628

527,4 3,62 ***

629

527,5 3,72 *****

630

573,5 3,75 *****

631

507,6 3,65 *****

632

538,6 3,53 ****

633

443,5 3,32 *****

634

457,6 3,30 *****

635

523,6 3,47 ****

636

463,6 3,12 *****

637

621,62 2,77 *****

638

580,56 2,80 *****

639

496,54 3,28 *****

640

552,64 2,48 ****

641

445,55 4,13 *****

642

381,49 3,97 *****

643

397,47 3,95 *****

644

395,45 3,78 *****

645

521,15 4,17 *****

646

531,11 4,58 ****

647

505,18 4,7 *****

648

437,19 4,15 ****

649

477,21 4,1 *****

650

487,18 4,3 ****

651

548,3 2,53 ****

652

419,23 4,15 ****

653

449,24 4,12 ****

654

433,26 4,3 *****

655

453,19 4,33 ****

656

444,17 4,02 *****

Compuesto

LCMS [M+H] Tiempo de Retención LCMS (min) ELISA CE50 M

657

464,22 4,08 *****

658

461,6 4,30 *****

659

489,7 4,78 *****

660

543,7 4,92 *****

661

459,5 3,63 *****

662

471,5 3,87 *****

663

491,6 3,63 *****

664

507,6 3,80 *****

665

485,6 3,85 ****

666

485,6 3,83 *****

667

486,6 3,95 *****

668

503,6 3,58 *****

669

521,6 3,88 *****

670

521,6 4,02 *****

671

501,6 4,13 *****

672

501,6 4,10 *****

673

539,6 4,02

674

555,6 4,13 ****

675

555,6 4,22 ****

676

535,6 4,05 ****

677

535,6 4,15 ****

678

551,6 3,98 ***

679

487,6 3,93 ****

680

599,5 4,27 *****

681

566,6 4,02 ****

682

496,5 2,13 **

683

486,5 2,03 ***

684

484,6 2,67 ***

685

514,6 2,15 ***

686

512,6 2,12 ****

687

510,6 2,13 ***

688

525,6 1,85 ***

689

494,5 3,12 ***

Compuesto

LCMS [M+H] Tiempo de Retención LCMS (min) ELISA CE50 M

690

524,6 2,32 ***

691

514,6 2,23 ***

692

512,6 2,35 ***

693

542,6 2,35 ****

694

540,6 2,27 ****

695

538,6 2,35 ****

696

553,6 2,07 ***

697

522,6 3,95 *****

698

578,5 2,43 ****

699

568,5 2,35 ****

700

566,6 2,45 ****

701

596,6 2,47 ****

702

594,6 2,43 ****

703

592,6 2,48 ****

704

607,6 2,20 ***

705

575,5 2,47 ****

706

576,5 3,58 *****

707

477,51 2,77 *****

708

491,53 2,73 *****

709

503,55 2,68 *****

710

495,45 4,42 *****

711

475,51 4,62 *****

712

513,50 4,42 *****

713

529,46 4,62 ****

714

509,51 4,43 *****

715

482,46 4,28 *****

716

457,47 4,05 ****

717

459,59 4,33 *****

718

491,5 4,10 *****

719

527,5 4,47 *****

720

489,5 4,75 *****

721

517,5 4,26 *****

722

519,5 3,84 *****

Compuesto

LCMS [M+H] Tiempo de Retención LCMS (min) ELISA CE50 M

723

555,4 4,09 (no polar) *****

724

541,54 2,90 *****

725

478,47 3,58 *****

726

516,5 2,67 **

727

526,5 2,78 ****

728

544,5 2,80 ***

729

542,5 2,72 *****

730

540,5 2,83 ****

731

555,6 2,43 ***

732

580,6 2,40 ***

733

523,5 2,78 *****

734

524,5 3,40 *****

735

552,5 2,98 *****

736

562,5 3,15 *****

737

580,6 3,17 ****

738

578,5 3,02 *****

739

576,6 3,17 *****

740

591,6 2,75 ***

741

616,5 2,62 ***

742

559,5 3,13 *****

743

560,5 3,83 *****

744

514,6 2,80 *****

745

524,6 2,92 *****

746

512,5 2,93 *****

747

542,6 2,93 *****

748

540,5 2,85 *****

749

538,6 2,93 *****

750

553,6 2,55 *****

751

521,5 2,92 ****

752

522,5 3,87 *****

753

542,6 2,98 ****

754

552,6 *****

755

540,6 3,17 ****

Compuesto

LCMS [M+H] Tiempo de Retención LCMS (min) ELISA CE50 M

756

570,6 3,17 ****

757

568,6 3,07 *****

758

566,6 3,17 ***

759

581,6 2,76 ***

760

549,6 3,13 *****

761

550,5 4,17 *****

762

544,5 2,68 ****

763

554,5 2,77 *****

764

542,6 2,78 ****

765

572,5 2,75 ****

766

570,6 2,70 *****

767

568,6 2,82 ****

768

583,6 2,47 ****

769

608,6 2,38 ***

770

551,5 2,73 *****

771

552,5 3,65 *****

772

580,5 3,03 *****

773

590,6 3,12 *****

774

578,5 3,12 ****

775

608,6 3,05 *****

776

606,5 3,05 *****

777

604,6 3,12 *****

778

619,6 2,77 *****

779

644,5 2,63 ***

780

587,5 3,10 *****

781

588,5 4,05 *****

782

596,5 3,10 *****

783

606,5 3,18 *****

784

594,5 3,27 *****

785

624,5 3,22 *****

786

622,5 3,12 *****

787

620,5 3,20 *****

788

635,6 2,85 ****

Compuesto

LCMS [M+H] Tiempo de Retención LCMS (min) ELISA CE50 M

789

660,5 2,68 ***

790

603,5 3,22 *****

791

604,5 4,25 *****

792

480,50 2,98 *****

793

494,50 2,97 ****

794

494,50 2,97 ***

795

496,48 2,97 ****

796

563,50 2,41 ****

797

522,48 2,50 *****

798

538,48 2,92 *****

799

535,49 2,35 ***

800

503,40 2,52 ****

801

504,43 3,42 *****

802

504,42 3,37 *****

803

579,48 2,42 ****

804

538,48 2,43 *****

805

584,50 2,52 *****

806

554,40 2,47 *****

807

540,47 2,50 *****

808

551,48 2,33 ****

809

516,45 2,47 *****

810

520,40 3,21 *****

811

520,40 3,12 *****

812

466,4 3,27 *****

813

466,4 3,18 *****

814

465,4 2,38 *****

815

465,4 3,45 *****

# 816

497,4 2,70 *****

# 817

511,4 2,62 *****

# 818

491,4 2,43 ****

819

494,4 3,53 *****

820

494,4 3,47 ****

821

493,4 2,55 ****

Compuesto

LCMS [M+H] Tiempo de Retención LCMS (min) ELISA CE50 M

822

493,4 3,73 *****

# 823

525,4 2,95 *****

# 824

539,4 2,83 *****

# 825

519,4 2,58 *

826

496,4 3,07 ***

827

496,4 2,98 ****

828

495,4 2,32 ***

829

495,4 3,28 ***

# 830

527,4 2,53 *****

# 831

541,4 2,50 *****

# 832

521,4 2,35

833

532,4 3,50 ***

834

532,4 3,42 ****

835

531,4 2,57 ***

836

531,4 3,67 ****

# 837

563,4 2,93 *****

# 838

577,4 2,82 *****

839

548,3 3,63 ****

840

548,3 3,58 ****

# 841

579,3 3,08 *****

# 842

593,3 2,95 *****

# 843

573,4 2,75 *****

844

451,91 3,58 ***

845

648,48 4,45 ***

846

526,45 2,57 ***

847

568,37 3,40 ****

848

585,30 3,57 *****

849

604,37 3,52 ****

850

540,39 2,60 ***

851

495,06 4,37 *****

852

539,08 4,17 *****

853

549,09 4,38 *****

854

523,17 4,73 *****

Compuesto

LCMS [M+H] Tiempo de Retención LCMS (min) ELISA CE50 M

855

455,19 4,15 ****

856

495,18 4,10 *****

857

505,16 4,30 *****

858

566,3 2,57 *****

859

437,22 4,15 *****

860

467,2 4,13 *****

861

451,12 4,10 ****

862

471,17 4,32 *****

863

514,55 4,38 *****

864

462,28 4,00 ****

865

482,13 4,08 ****

866

447,37 4,04 *****

867

577,43 2,85 ****

868

477,14 4,37 *****

869

504,53 3,62 *****

870

493,55 2,80 *****

871

489,54 2,72 *****

872

493,55 2,80 *****

873

503,54 2,73 *****

874

479,2 2,74 *****

875

425,52 4,27 *****

876

492,52 3,57 *****

877

489,54 2,72 *****

878

508,55 3,82 *****

879

507,55 2,90 *****

880

459,49 4,24 *****

881

471,45 4,22 *****

882

542,51 3,87 *****

883

494,50 3,67 *****

884

544,27 2,79 *****

885

490,54 3,54 *****

886

494,57 3,68 *****

887

521,62 2,93 *****

Compuesto

LCMS [M+H] Tiempo de Retención LCMS (min) ELISA CE50 M

888

558,54 3,70 *****

889

545,55 2,93 *****

890

490,49 3,48 *****

891

528,49 3,69 *****

892

546,50 3,75 *****

893

461,49 4,36 *****

894

580,47 2,72 *****

895

491,51 2,77 *****

896

576,49 4,00 *****

897

504,51 3,52 *****

898

457,53 4,25 *****

899

481,37 4,17 *****

900

541,55 3,00 *****

901

575,54 2,98 *****

902

471,49 4,12 *****

903

621,39 2,72 *****

904

596,54 2,85 *****

905

542,54 3,78 *****

906

489,53 4,82 *****

907

514,47 3,54 *****

908

582,43 2,79 *****

909

514,21 2,75 *****

910

539,45 3,97 *****

911

527,54 2,88 *****

912

530,53 2,67 *****

913

626,6 2,88 *****

914

514,55 2,60 *****

915

509,56 4,63 *****

916

626,40 2,82 *****

917

561,46 2,95 *****

918

642,56 2,85 *****

919

543,45 4,82 *****

920

557,57 2,87 *****

Compuesto

LCMS [M+H] Tiempo de Retención LCMS (min) ELISA CE50 M

921

527,39 4,52 *****

922

561,53 2,85 *****

923

612,51 2,92 *****

924

498,20 2,71 *****

925

596,54 2,88 *****

926

5,62 3,85 *****

927

540,65 4,25 *****

928

510,52 3,10 *****

929

506,46 2,95 *****

930

500,48 2,83 *****

931

467,39 4,17 *****

932

548,49 3,17 *****

933

596,37 2,79 *****

934

561,53 2,95 *****

935

496,54 3,37 *****

936

582,6 2,83 *****

937

555,61 2,55 *****

938

582,53 2,85 *****

939

560,63 2,68 *****

940

541,43 2,45 *****

941

562,55 3,63 *****

942

623,35 2,73 ****

943

499 2,72 ****

944

525,56 4,36 ****

945

509,43 4,73 ****

946

566,53 2,77 ****

947

510 2,44 ****

948

482,47 2,88 ****

949

524,55 3,22 ****

950

506,46 2,87 ****

951

544,53 3,27 ****

952

530,53 3,12 ****

953

552,46 2,90 ****

Compuesto

LCMS [M+H] Tiempo de Retención LCMS (min) ELISA CE50 M

954

403 4,11 ****

955

397 3,9 ****

956

484,55 2,42 ****

957

495,52 2,62 ****

958

542,36 3,84 ****

959

496,24 2,81 ****

960

639,57 2,70 ****

961

593,52 2,64 ****

962

516,59 2,65 ****

963

593,61 2,72 ****

964

598,55 2,83 ****

965

544,53 3,15 ****

966

564,45 3,32 ****

967

491,57 4,00 ****

968

512,51 2,73 ****

969

492,46 2,90 ****

970

609,54 2,72 ****

971

468,46 2,78 ****

972

496,47 3,02 ****

973

578,47 3,80 ****

974

528,34 3,79 ***

975

431,5 3,10 ***

976

564,46 3,23 ***

977

568,53 2,85 ***

978

578,45 3,30 ***

979

470,55 2,45 ***

980

527,61 2,50 ***

981

560,51 3,12 ***

982

425,60 3,78 ***

983

375,37 2,27 ***

984

5,06,19 3,97 **

985

407,31 1,82 *

986

531,56 2,17 *

Compuesto

LCMS [M+H] Tiempo de Retención LCMS (min) ELISA CE50 M

987

497,1 4,4 *****

988

605,62 2,52 *****

989

564,61 2,55 *****

990

610,62 2,67 *****

991

580,58 2,60 ***

992

566,61 2,60 ***

993

577,61 2,45 *****

994

545,54 2,57 *****

995

546,57 3,53 *****

996

578,46 3,71 *****

# Isómero (S) preparado y ensayado.

En la que:

1 estrella, > 1 uM (1000 nM)

2 estrellas, 0,2 a 1 uM (200 nM a 1000 nM)

3 estrellas, 0,04 uM a 0,2 uM (40 nM a 200 nM)

4 estrellas, 0,008 uM a 0,04 uM (8 nM a 40 nM)

5 estrellas, < 0,008 uM (< 8 nM)

Ejemplo 3: Los Compuestos de la invención inhiben la expresión de VEGF y el crecimiento tumoral en un modelo PD de crecimiento tumoral in vivo.

Los compuestos de la presente invención también muestran actividad en el siguiente modelo farmacodinámico que evalúa los niveles intratumorales de VEGF. En resumen, se pueden implantar subcutáneamente células HT1080 (una línea celular de fibrosarcoma humano) en ratones desnudos. Después de siete días, se pueden administrar los Compuestos a los ratones oralmente con un rango de dosificación de, por ejemplo, 200 mg/kg/día, durante siete días. A continuación se extirpan los tumores de los ratones y se homogeneizan en tampón Tris-HCl que contiene inhibidores de proteinasa. Moulder y col, Cancer Res. 61(24):8887-95 (2001). Los niveles intratumorales de VEGF se miden posteriormente usando un kit ELISA de VEGF humano (R&D System). Las concentraciones de proteínas de los homogenatos se miden con un kit de ensayo de Proteínas de Bio-Rad y los niveles intratumorales de VEGF se normalizan a las concentraciones de proteína.

Los compuestos preferentes de la presente invención, cuando se usan durante una semana en un tumor de 100 mm3, generalmente podrán inhibir el crecimiento tumoral en al menos 50%, en comparación con los grupos de control tratados con vehículo (datos no mostrados).

Ejemplo 4: Los Compuestos de la invención no tienen efecto sobre la actividad de PDE5.

Los compuestos de la presente invención se ensayan para evaluar su efecto en la actividad de la fosfodiesterasa 5 (PDE5). El efecto en la actividad de PDE5 se determina usando el kit de Ensayo de Polarización de Florescencia de Alta Eficacia (HEFP) de Molecular Devices. El ensayo HEFP mide la actividad de PDE-5 mediante el uso de derivados de cGMP marcados con fluoresceína como sustrato. Cuando se hidrolizan por la PDE-5, los derivados de cGMP marcados con fluoresceína se pueden unir al reactivo de unión. El complejo sustrato de cGMP:reactivo de unión da como resultado un estado fluorescente altamente polarizado.

La Figura 2 muestra los resultados de los compuestos de la presente invención en la actividad de PDE-5. Después de combinar PDE5 recombinante (CalBioChem) y el sustrato de cGMP, la mezcla se incuba a temperatura ambiente durante 45 minutos en presencia o ausencia de los Compuestos o de un control positivo (Tadalafilo). La reacción se para tras la adición del reactivo de unión. La polarización de fluorescencia se determina en un Viewlux usando un ajuste recomendado por el fabricante. Como es evidente a partir de la Figura 2, los compuestos de la presente invención no inhiben la actividad de PDE-5 en comparación con el control positivo.

Todas las publicaciones y las solicitudes de patentes citadas en la presente memoria se incorporan como referencia en el mismo grado que si se indicara específicamente e individualmente que cada publicación o solicitud de patente individual se incorpora como referencia.

Aunque se han descrito ciertas realizaciones en detalle anteriormente, los expertos habituales en la materia comprenderán claramente que son posibles numerosas modificaciones en las realizaciones sin desviarse de las enseñanzas de las mismas. Se pretende que todas tales modificaciones queden incluidas dentro de las reivindicaciones de la presente invención.

Claims (9)

1. REIVINDICACIONES

   1. Un compuesto de Formula (IV),

   o una sal farmacéuticamente aceptable, racemato o estereoisómero del mismo;

   5 en la que,

   X es hidrógeno; un alquilo C1 a C6, opcionalmente sustituido con uno o más halógenos; un grupo hidroxilo; un halógeno; o un alcoxi C1 a C5, opcionalmente sustituido con un grupo arilo C6 a C10;

   Ro es un halógeno; un ciano; un nitro; un sulfonilo, en el que el sulfonilo está opcionalmente sustituido con un alquilo C1 a C6 o un heterociclo de 3 a 10 miembros; un grupo amino, en el que el grupo amino está opcionalmente 10 sustituido con un alquilo C1 a C6, -C(O)-Rb, -C(O)O-Rb, un sulfonilo, un alquilsulfonilo, un grupo heterociclo de 3 a 10 miembros opcionalmente sustituido con un -C(O)O-Rn; -C(O)-NH-Rb; un heterociclo de 5 a 6 miembros; un heteroarilo de 5 a 6 miembros; un grupo alquilo C1 a C6, en el que el grupo alquilo está opcionalmente sustituido con al menos un grupo hidroxilo, halógeno, amino, o heterociclo de 3 a 12 miembros seleccionado independientemente, en el que el grupo amino y el grupo heterociclo están opcionalmente sustituidos con al menos un grupo alquilo C1 a

   15 C4 seleccionado independientemente, cuyo grupo alquilo C1 a C4 está opcionalmente sustituido con al menos un grupo alcoxi C1 a C4, grupo amino, grupo alquilamino, o grupo heterociclo de 5 a 10 miembros seleccionado independientemente; un grupo -C(O)-Rn; o un grupo -ORa;

   Ra es hidrógeno; alquileno C2 a C8; un grupo -C(O)O-Rb; un -C(O)-NH-Rb; un alquilo C1 a C8, en el que el grupo alquilo está opcionalmente sustituido con al menos un grupo hidroxilo, halógeno, alcoxi C1 a C4, amino, alquilamino, 20 acetamida, -C(O)-Rb, -C(O)O-Rb, arilo C6 a C10, heterociclo de 3 a 12 miembros, o heteroarilo de 5 a 12 miembros seleccionado independientemente, en el que además el alquilamino está opcionalmente sustituido con un hidroxilo, un alcoxi C1 a C4, o un heteroarilo de 5 a 12 miembros opcionalmente sustituido con un alquilo C1 a C4, en el que además la acetamida está opcionalmente sustituida con un alcoxi C1 a C4, sulfonilo, o alquilsulfonilo, en el que además el grupo heterociclo está opcionalmente sustituido con un alquilo C1 a C4 opcionalmente sustituido con un

   25 grupo hidroxilo, -C(O)-Rn, -C(O)O-Rn, o un grupo oxo;

   Rb es hidroxilo; un amino; un alquilamino, en el que el alquilamino está opcionalmente sustituido con un hidroxilo, un amino, un alquilamino, un alcoxi C1 a C4, un heterociclo de 3 a 12 miembros opcionalmente sustituido con al menos un alquilo C1 a C6, oxo, -C(O)O-Rn, o un heteroarilo de 5 a 12 miembros opcionalmente sustituido con un alquilo C1 a C6, seleccionado independientemente; un alcoxi C1 a C4; un alquenilo C2 a C8; un alquinilo C2 a C8; un arilo C6 a C10, 30 en el que el arilo está opcionalmente sustituido con al menos un halógeno o alcoxi C1 a C4 seleccionado independientemente; un heteroarilo de 5 a 12 miembros; grupo heterociclo de 3 a 12 miembros, en el que el heterociclo está opcionalmente sustituido con al menos un grupo acetamida, -C(O)O-Rn, heterociclo de 5 a 6 miembros, o alquilo C1 a C6 opcionalmente sustituido con a hidroxilo, alcoxi C1 a C4, grupo amino, o alquilamino, seleccionado independientemente; o un alquilo C1 a C8, en el que el alquilo está opcionalmente sustituido con al

   35 menos un grupo alcoxi C1 a C4, arilo C6 a C10, amino, o heterociclo de 3 a 12 miembros seleccionado independientemente, en el que los grupos amino y heterociclo están opcionalmente sustituidos con al menos un grupo alquilo C1 a C6, oxo, o -C(O)O-Rn seleccionado independientemente;

   Rd es fenilo sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre halógeno, nitro, alquilo C1 a C6, -C(O)O-Re, y -ORe;

   40 Re es un hidrógeno; un grupo alquilo C1 a C6, en el que el grupo alquilo está opcionalmente sustituido con al menos un grupo halógeno o alcoxi seleccionado independientemente; o un grupo arilo C6 a C10, en el que el grupo arilo está opcionalmente sustituido con al menos un grupo halógeno o alcoxi seleccionado independientemente; y

   Rn es un grupo hidroxilo, alcoxi C1 a C4, amino, o alquilo C1 a C6.
2. 2. El compuesto de la reivindicación 1, en el que

   45 X es hidrógeno; un grupo hidroxi; un halógeno; un alquilo C1-C4; un alcoxi C1 a C5, opcionalmente sustituido con un grupo arilo C6 a C8;

   Ro es un halógeno; un alquilo C1 a C6, opcionalmente sustituido con uno o más grupos halógeno; un grupo ciano; un grupo nitro; un grupo amino; un grupo aminoalquilo; un grupo acetamida; un grupo imidazol; u ORa;

   Ra es hidrógeno; un alquilo C1 a C6, opcionalmente sustituido con un grupo heterociclo o un grupo arilo C6 a C8; o un -C(O)O-Rb;

   5 Rb es un grupo alquilo C1 a C4;

   Rd es fenilo sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre halógeno, alquilo C1 a C5, -C(O)ORe, y ORe;

   Re es un hidrógeno; un grupo alquilo C1 a C6, opcionalmente sustituido con al menos un grupo halógeno o alcoxi; o un grupo arilo C6 a C8.

   10 3. El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 o 2, en el que dicho compuesto tiene un carbono quiral en el punto de unión del fenilo sustituido con Ro y dicho compuesto es un isómero (S) en dicho carbono quiral.
3. 4. El compuesto de la reivindicación 1, en el que dicho compuesto se selecciona entre el grupo que consiste en
4. 5. Un compuesto, en el que dicho compuesto se selecciona entre el grupo que consiste en

   o una sal farmacéuticamente aceptable, racemato o estereoisómero del mismo.
5. 6. El compuesto de la reivindicación 4 o 5, en el que el compuesto tiene un átomo de carbono quiral en el punto de unión del anillo de fenilo directamente unido al núcleo tricíclico y el compuesto es un enantiómero (S) en el carbono quiral.
6. 7. El compuesto de la reivindicación 6, en el que el compuesto es
7. 8. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7 o

   una sal farmacéuticamente aceptable, racemato o estereoisómero del mismo y un excipiente farmacéuticamente 5 aceptable.

8. 9.

   El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7 para su uso en el tratamiento de cáncer, retinopatía diabética, artritis reumatoide, psoriasis, aterosclerosis, obesidad, inflamación crónica, o degeneración macular exudativa.

9. 10.

   El uso de un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7 en la preparación de un medicamento

   10 para el tratamiento de cáncer, retinopatía diabética, artritis reumatoide, psoriasis, aterosclerosis, obesidad, inflamación crónica, o degeneración macular exudativa.