BR112015014973B1

BR112015014973B1 - composição farmacêutica para uso no tratamento de dor de cabeça, método para preparar a dita composição e uso terapêutico da mesma

Info

Publication number: BR112015014973B1
Application number: BR112015014973-1A
Authority: BR
Inventors: Xijun Yan; Naifeng Wu; Shunnan Zhang; Jianhui Yang; Yan Liu; Xingyun SHAO; Song Gao; Lina Dong; Xiaolin Bai; Yan Sun; Bo Xu; Yongfeng Zheng; Lijun FAN
Original assignee: Tasly Pharmaceutical Group Co., Ltd.
Priority date: 2012-12-21
Filing date: 2013-12-19
Publication date: 2021-01-19
Also published as: LT2937094T; CN103877244B; HRP20180783T1; JP6091651B2; CL2015001772A1; CN103877244A; US20150352168A1; NZ709699A; AP2015008599A0; PH12015501396B1; SG11201504791VA; PE20151148A1; CA2895335C; UA117361C2; NO2937094T3; PL2937094T3; JP2016503040A; MY172207A; BR112015014973A2; EA201591194A1

Abstract

COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA PARA TRATAR DOR DE CABEÇA, E MÉTODO DE PREPARAÇÃO DA MESMA Uma composição farmacêutica para tratar dor de cabeça, preparada a partir de onze ervas medicinais chinesas: Raiz de angélica chinesa, ligusticum chuanxiong, radix paeoniae lactiflorae, rizoma preparada de rehmannia, uncaria tomentosa, leatherleaf milletia, prunella vulgaris, semente de sicklesenna, concha de pérola, corydalis tuber, e asarum, e uma quantidade apropriada de materiais adjuvantes. Um método de preparação da composição farmacêutica, e suas utilizações na preparação de fármacos para tratar várias dores de cabeça, síndrome traumática craniana do nervo, tontura e vertigem, irritação e irritabilidade, insônia e devaneio.

Description

CAMPO DA INVENÇÃO

[001]A presente invenção refere-se ao campo da Medicina Chinesa Tradicional (TCM). Mais especificamente, a invenção refere-se à composição farmacêutica para tratar dor de cabeça, método preparativo e sua utilização.

FUNDAMENTOS DA INVENÇÃO

[002]Dor de cabeça é um sintoma comum na vida diária. Quase todo mundo vai ter dor de cabeça na vida. As causas de dor de cabeça são variadas. Até agora, há uma variedade de fármacos para tratar a dor de cabeça no exterior ou na China, a maioria dos quais, entretanto, se concentram em tratamento sintomático de interromper a dor (em muito poucos casos, dor de cabeça é tratada por cirurgia). Os resultados não são satisfatórios, porque os fármacos se concentram no tratamento sintomático ao invés de na raiz da causa. Como um resultado disto, a dor de cabeça ataca pacientes recorrentemente. Uso a longo prazo de agentes analgésicos pode causar resistência e dependência ao fármaco, de modo que o fármaco deste tipo não deve ser usado por muito tempo. No entanto, a dor de cabeça não pode ser curada radicalmente. Além disso, de acordo com as condições com diferentes causas, existem diferentes tipos de fármacos aplicados clinicamente, por exemplo, o agente anti-ansiedade, agente anti-depressivo, inibidor simpático, bloqueadores de canais de cálcio e agentes antiepiléticos, etc. Devido aos seus efeitos colaterais graves, administração a longo prazo reduzirá sua eficácia de modo que os pacientes terão de aumentar a dose de fármaco gradualmente. O resultado, entretanto, não é satisfatório. Quanto mais fármacos os pacientes tomam, mais severa a dor de cabeça será. Agora, a pílula de Zhengtian (Zhengtianwan) é um produto da Medicina Tradicional Chinesa (TCM) cuja fórmula compreende tanto TCM quanto fármaco químico. O TCM funciona por um mecanismo de ativação de sangue que remove a estase e a dor interrompida por fármaco químico. Na prática, seu efeito curativo não é definido para se obter o propósito de curar radicalmente. Agora, há uma variedade de TCMs para tratar a dor de cabeça. Mas a maioria terá efeito mais lentamente; e este inconveniente irá influenciar a qualidade de vida dos pacientes.

[003]A Patente Chinesa (No ZL 93100050.5) divulgou uma composição medicinal compreendendo 11 TCMs de Radix Angelicae Sinensis (Dang gui) e Rhizoma Chuanxiong (Chuan xiong), Radix Paeoniae alba (Bai shao), Radix Rehmanniae Preparata (Shu dihuang), Ramulus Uncariae cum Uncis (Gou teng), Caulis Spatholobi (Ji Xueteng), Spica Prunellae (Xia Kucao), Semen Cassiae (Jue mingzi), Concha Margaritifera Usta (Zhen zhumu), Rhizoma Corydalis (Yuan hu) e Asarum herb (Xi xin). São os frutos de prática clínica a longo prazo sob a orientação da Teoria Medicinal Chinesa, tendo os efeitos terapêuticos de tratar a dor de cabeça causada por danos internos. Clinicamente, pode ser aplicado para tratar várias doenças de dor de cabeça, tais como a dor de cabeça angioneurótica, enxaqueca, e alguns sintomas tipo tontura e dor de cabeça, etc. causado por hipertensão. De acordo com a proporção desta receita, o grânulo desta composição é produzido por Tasly Pharmaceutical Group Co. Ltd., com o nome de “Grânulo Yang Xue Qing Nao”. As funções e indicações aprovadas pelas autoridades são nutrir o sangue e acalmar o fígado, ativando o sangue e removendo a obstrução nos canais, usadas para diversos tipos de dor de cabeça induzidas por deficiência de sangue e hiperatividade de fígado, síndrome traumática de nervo craniano, tontura e vertigem, irritação e irritabilidade, insônia e devaneio. Na clínica, ele vem sendo usado para o tratamento de dor de cabeça causada por deficiência de sangue, estase do sangue, e deficiência de Yin e hiperatividade de Yang. Desde que chegou no mercado, o Grânulo Yang Xue Qing Nao ganhou grande popularidade entre os pacientes devido aos seus efeitos terapêuticos.

[004]Agora, tem-se relatado do ponto de vista literário que o Grânulo Yang Xue Qing Nao é usualmente preparado pelo seguinte método. Os 11 TCMs são extraídos com água, os quais são precipitados com etanol para se obter o extrato e, em seguida o extrato é misturado com excipientes para preparar em vários tipos de formulações farmacêuticas. Por exemplo, as Patentes Chinesas (No 03140844.3, 200410019825.4) divulgaram um processo que os 11 TCMs foram misturados em proporção, extraídos com água por 3 vezes, combinados para se obter um extrato depois da concentração apropriada, que foi adicionada com 2 vezes de etanol para deixá-lo ficar em repouso por 24 horas para precipitar e obter o sobrenadante. O sobrenadante foi concentrado a um extrato com densidade relativa de 1,3 a 1,4. A taxa de rendimento foi de 10%. O extrato supracitado foi misturado com sacarose e dextrina em uma proporção de 1:3:1 para fazer o grânulo.

[005]Entretanto, devido à natureza diferente de cada TCM, a extração de ingredientes ativos usando métodos de extração todos em conjunto, usualmente, resultou na extração incompleta ou eleva o defeito de baixa taxa de rendimento. Por exemplo, os ingredientes principais de Radix Angelicae Sinensis (Dang gui) e Rhizoma Chuanxiong (Chuan xiong) são solúveis em etanol, então o etanol foi melhor. Na mesma maneira, Ramulus Uncariae cum Uncis contém uma variedade de alcalóides de indol, que é dominado por rincofilina e isorrincofilina e uma pequena quantidade de constituintes de flavona. Provou-se que sua decocção de água e extrato tem efeitos bioativos significativos de sedação, analgesia e anti-hipertensiva. Assim, a extração por água é mais adequada.

[006]Como mostrado nas Patentes Chinesas (200510073290.3 e 200510014828.3), os 11 TCMs foram divulgados, em que Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Radix Paeoniae alba e Rhizoma Corydalis foram submetidos ao refluxo com etanol para ter uma solução de refluxo, o resíduo foi misturado com os outros 6 TCMs (excluindo Ramulus Uncariae cum Uncis) incluindo Radix Rehmanniae Preparata, etc. e extraído com água por 3 vezes. Durante o processo da 3a decocção, Ramulus Uncariae cum Uncis foi adicionado, e a extração líquida foi combinada para se concentrar a vácuo. Etanol foi usado para precipitar e a solução obtida foi deixada em repouso. Depois de ser filtrado, o filtrado foi misturado com a solução de refluxo supracitada, e etanol foi recuperado sob pressão reduzida, concentrado e seco para se obter o extrato.

[007]Na prática, entretanto, a extração de Radix Paeoniae alba combinada com outros TCMs irá resultar no extrato final um pouco menos na capacidade de fusão. Adição posterior de Ramulus Uncariae cum Uncis no extrato pode gerar a flutuação do produto medicinal na superfície, assim como influenciar a extração. Não só isso, mas a operação é complicada com o risco de vapor perigoso. A extração de Semen Cassiae por água é propensa a causar problemas de tanque de extração de pasta ou drenagem difícil.

[008]Em vista dos problemas supracitados, após pesquisas experimentais repetidas, um novo método de preparação e uma composição medicinal feita por este novo método foram desenvolvidos.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

[009]O objetivo da presente invenção é fornecer uma composição farmacêutica para tratar dor de cabeça.

[010]Um outro objetivo da presente invenção é fornecer um método de preparação da dita composição.

[011]Um outro objetivo da presente invenção é fornecer um uso da dita composição na preparação de fármacos para tratar dor de cabeça, síndrome traumática de nervo craniano, tontura e vertigem, irritação e irritabilidade, insônia e devaneio.

[012]A composição da presente invenção compreende: 4 a 9 partes em peso de Radix Angelicae Sinensis, 4 a 9 partes em peso de Rhizoma Chuanxiong, 2 a 8 partes em peso de Radix Paeoniae alba, 2 a 8 partes em peso de Radix Rehmanniae Preparata, 10 a 15 partes em peso de Ramulus Uncariae cum Uncis, 10 a 15 partes em peso de Caulis Spatholobi, 10 a 15 partes em peso de Spica Prunellae, 10 a 15 partes em peso de Semen Cassiae, 10 a 15 partes em peso de Concha Margaritifera Usta, 4 a 9 partes em peso de Rhizoma Corydalis e 0,5 a 2 partes em peso de Herba Asari. A dita composição é preparada por um método como segue: a) Preparação de Extrato #1: Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Rhizoma Corydalis e Semen Cassiae são misturados, extraídos usando aquecimento sob refluxo com etanol, e filtrados para remover as impurezas; e o etanol é recuperado e concentrado para se obter o Extrato #1 para o uso posterior; b) Preparação de Extrato #2: Radix Paeoniae alba é extraído usando aquecimento sob refluxo com etanol, e filtrado; e o etanol é recuperado e concentrado para se obter o Extrato #2 para o uso posterior; c) Preparação de Extrato #3: Radix Rehmanniae Preparata, Ramulus Uncariae cum Uncis, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Concha Margaritifera Usta e Herba Asari são misturados, reduzidos à essência com água, filtrados, concentrados, em que o etanol é adicionado, deixado em repouso, e filtrados; e o etanol é recuperado e concentrado para se obter o Extrato #3 para o uso posterior; d) Preparação de formulações: os três extratos supracitados são adicionados com quantidade apropriada de excipientes, secos e granulados para se obter o produto final.

[013]Preferivelmente, a dita composição da presente invenção é preparada por um método como segue: a) Preparação de Extrato #1: Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Rhizoma Corydalis e Semen Cassiae são misturados, extraídos usando aquecimento sob refluxo com 3 a 6 vezes de etanol a 50 a 80% por 2 a 3 vezes, a primeira vez por 0,5 a 2,5 horas; a segunda e/ou terceira vez por 0,5 a 2 horas, e filtrados para remover as impurezas; e o etanol é recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,250 a 1,350 (70 a 80 °C) para se obter o Extrato #1 para o uso posterior; b) Preparação de Extrato #2: Radix Paeoniae alba é adicionado com 3 a 6 vezes de etanol a 50 a 80%, encharcado, extraído usando aquecimento sob refluxo por 2 a 3 vezes, a primeira vez por 0,5 a 2,5 horas, a segunda e/ou terceira vez por 0,5 a 2 horas, e filtrado; e o etanol é recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,10 a 1,35 (55 a 65 °C) para se obter o Extrato #2 para o uso posterior; c) Preparação de Extrato #3: Radix Rehmanniae Preparata, Ramulus Uncariae cum Uncis, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Concha Margaritifera Usta e Herba Asari são combinados, reduzidos à essência com 4 a 10 vezes de água por 2 a 3 vezes, a primeira vez por 0,5 a 3 horas, a segunda e/ou terceira vez por 1 a 3 horas, filtrados, concentrados até a densidade relativa estar entre 1,06 a 1,10 (75 a 85 °C), em que o etanol é adicionado para fazer um teor final de etanol de 60 a 85 %, deixado repousar por 12 a 24 horas, e filtrado; e o etanol é recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,270 a 1,350 (75 a 85 °C) para se obter o Extrato #3 para o uso posterior; d) Preparação de formulações: os três extratos supracitados são adicionados com quantidade apropriada de excipientes, secos, granulados para se obter o produto final.

[014]Mais preferivelmente, a dita composição da presente invenção é preparada por um método como segue: a) Preparação de Extrato #1: Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Rhizoma Corydalis e Semen Cassiae são misturados, extraídos usando aquecimento sob refluxo por 2 vezes com 4 vezes de etanol a 70%, a primeira vez por 2 horas e a segunda vez por 1 hora, e filtrados para remover as impurezas; e o etanol é recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,300 a 1,310 (74 a 76 °C) para se obter o Extrato #1 para o uso posterior; b) Preparação de Extrato #2: Radix Paeoniae alba é adicionado com 4 vezes de etanol a 60%, encharcado, extraído usando aquecimento sob refluxo por 2 vezes, a primeira vez por 2 horas e a segunda vez por 1 hora, e filtrado; e o etanol é recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,23 a 1,33 (65 °C) para se obter o Extrato #2 para o uso posterior; c) Preparação de Extrato #3: Radix Rehmanniae Preparata, Ramulus Uncariae cum Uncis, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Concha Margaritifera Usta e Herba Asari são misturados, reduzidos à essência por 2 vezes com 5 vezes de água, a primeira vez por 2 horas e a segunda vez por 1 hora, filtrados, concentrados até a densidade relativa estar entre 1,06 a 1,10 (80 °C), em que o etanol é adicionado para fazer um teor final de etanol de 65 a 70%, deixado repousar por 12 a 24 horas, e filtrado; e o etanol é recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,320 a 1,325 (79 a 81 °C) para se obter o Extrato #3 para o uso posterior; d) Preparação de formulações: os três extratos supracitados são adicionados com quantidade apropriada de excipientes, secos, granulados para se obter o produto final.

[015]Em que, os ditos excipientes na etapa d) incluem um ou mais tipos de agente de enchimento e agente flavorizante.

[016]O dito agente de enchimento é selecionado de um ou mais tipos de celulose, amido, amido solúvel, açúcar em pó, dextrina, manitol, sacarose, lactose e celulose microcristalina, etc.

[017]O dito agente flavorizante é selecionado de um ou mais tipos de esteviosina, aspartame, glicerol, sacarina sódica, sorbitol, manitol, xilitol, alto teor de frutose e ciclamato de sódio.

[018]Preferivelmente, o dito agente de enchimento é selecionado de dextrina, amido, amido solúvel, sacarose, lactose e celulose microcristalina, e o dito agente flavorizante é selecionado de esteviosina e aspartame.

[019]O mais preferivelmente, o dito agente de enchimento é selecionado de dextrina e agente flavorizante é selecionado de esteviosina.

[020]Em uma forma de realização, a razão dos três extratos supracitados preparados por Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Radix Paeoniae alba, Radix Rehmanniae Preparata, Ramulus Uncariae cum Uncis, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Semen Cassiae, Concha Margaritifera Usta, Rhizoma Corydalis e Herba Asari aos excipientes é 40:60 a 65:35 por percentagem em peso.

[021]Em uma outra forma de realização, a razão dos três extratos supracitados preparados por Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Radix Paeoniae alba, Radix Rehmanniae Preparata, Ramulus Uncariae cum Uncis, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Semen Cassiae, Concha Margaritifera Usta, Rhizoma Corydalis e Herba Asari aos excipientes é 55:45 a 65:35 por percentagem em peso.

[022]Em que, razão supracitada é uma razão do extrato seco convertido dos três extratos supracitados aos excipientes.

[023]De acordo com a presente invenção, a dita composição farmacêutica pode ser preparada em qualquer uma das formulações orais farmaceuticamente aceitáveis, incluindo, mas não limitadas a, grânulos, tabletes e cápsulas, etc, preferivelmente os grânulos.

[024]De acordo com a presente invenção, a dita formulação pode ser preparada por qualquer um dos métodos farmaceuticamente aceitáveis, por exemplo, método de granulação com secagem por pulverização, método de granulação por pulverização em leito fluidizado, método de granulação umectante, método de granulação a seco e método de granulação por rotação.

[025]Preferivelmente, a dita formulação pode ser preparada pelo método de granulação por pulverização em leito fluidizado.

[026]De acordo com a presente invenção, o dito método de granulação por pulverização em leito fluidizado compreende as seguintes etapas: tomar uma parte de agente de enchimento, dissolvê-la com água purificada, adicionar agente flavorizante para dissolver por agitação satisfatória para se obter a suspensão; adicionar os três extratos bem preparados na suspensão gradual supracitada, agitar, ajustar a densidade da suspensão, filtrar em tempo real; colocar o resto do agente de enchimento em um granulador; realizar a granulação por pulverização ajustando os parâmetros de granulação; secar; granular com uma peneira; misturar totalmente e empacotar para ter o produto final.

[027]Em que, a quantidade adicional do dito agente flavorizante é responsável por 0 a 1% em peso do agente de enchimento total. A razão entre a parte do agente de enchimento primeiramente adicionada e o resto do agente de enchimento é 1:4 a 1,5:1 por percentagem em peso.

[028]De acordo com a presente invenção, a dita composição farmacêutica pode ser preparada em especificação de pacote apropriada, que depende das suas várias formas de dosagem, por exemplo, para os grânulos, a especificação pode ser selecionada de 3 g por sachê ou 4 g por sachê. De acordo com a presente invenção, método de extração da dita composição farmacêutica é obtido seguindo os experimentos de rastreio. 1. A razão pela qual extrair 11 TCMs respectivamente

[029]Os ingredientes principais de Radix Angelicae Sinensis incluem: ácido ferúlico, capaz de inibir a coagulação do sangue e a formação de trombos; vitamina B12 solúvel em água, ácido fólico, ácido folínico e ácido nicotínico, capazes de promover a geração de eritrócito e hemoglobina significantemente; e polissacarídeo de angélica, capaz de facilitar o crescimento de célula reticular WBC em camundongos e resistir à anemia.

[030]Os ingredientes principais de Rhizoma Chuanxiong incluem alcalóides como óleo volátil de odor especial, ácido ferúlico e óleo volátil, etc. O extrato alcoólico de Rhizoma Chuanxiong tem efeitos de dilatar a artéria coronária, aumentar fluxo sanguíneo coronariano, proteger o miocárdio contra isquemia, reduzir a pressão arterial significantemente, anticoagulação e anti-trombose, etc. Além disso, a tetrametilpirazina nele é capaz de sedação, dilatar o sistema vascular arterial, proteger o miocárdio contra isquemia, assim como reduzir a pressão arterial, anticoagulação e anti-trombose, etc. Os ingredientes bioativos principais são etanol solúvel tanto em Rhizoma Chuanxiong quanto em Radix Angelicae Sinensis, assim, a extração de etanol é usada.

[031]Radix Paeoniae alba, principalmente, contém vários glicosídeos, tais como paeoniflorina, assim como, óleo volátil, taninos e açúcar. Os seus glicosídeos totais provaram-se ter efeitos de anti-inflamação, regulação imune, proteção do fígado, sedação e analgesia, etc. Dentre eles, a paeoniflorina é na concentração mais alta, que é facilmente extraída com etanol ou água quente devido a sua estrutura de éster. Como um resultado, o extrato por solução de etanol é mais estável.

[032]Os ingredientes principais de Rhizoma Corydalis são numerosos alcalóides, entre os quais a tetra-hidropalmatina, coridalina, corydalis L e deidrocoridalina provaram-se ter as funções biológicas mais fortes, capazes de significantemente sedar, hipnotizar, reduzir a resistência coronariana e aumentar o fluxo sanguíneo, etc. Todo o extrato etanólico de Rhizoma Corydalis, extrato de vinagre e extrato de água tem efeito de aliviar a dor, e o de etanol tem o melhor efeito entre os outros. No mesmo tempo, eles possuem certo efeito de sedação central. O seu alcaloide é principalmente composto de amina alcalina quaternária e amina alcalina terciária; a primeira é solúvel em água e extraída com água. Ambas, entretanto, podem ser extraídas com solução de etanol e a taxa de rendimento é alta.

[033]Semen Cassiae contém uma série de ingredientes de fisciona, crisofanol, emodina, rhein e Semen Cassiae lactona. Assim, a extração-por-etanol é razoável.

[034]Ramulus Uncariae cum Uncis, principalmente, contém vários tipos de alcalóides de indol, dominados por rincofilina e isorrincofilina, assim como, um pouco de flavonoide. Tanto a sua decocção de água quanto o extrato têm efeitos marcados de sedação, aliviar a dor e reduzir a pressão arterial. Portanto, extração-por-água é razoável.

[035]Para o resto nesta composição farmacêutica, Radix Rehmanniae Preparata, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Concha Margaritifera Usta e Herba Asari trabalham como fármacos adjuvantes e fármacos transportadores nesta fórmula. Os ingredientes químicos neles contidos incluem álcoois, aminoácidos, esteróis, antraquinonas, muitos tipos de açúcares e uma variedade de elementos traço essenciais tais como Fe. A decocção de água dos mesmos tem efeito de enriquecimento de sangue de aumentar a contagem de RBC, tendo hemoglobina aumentada, reduzindo o açúcar no sangue, reduzindo a pressão arterial e diminuindo os lipídios no sangue, etc. Como um resultado, de acordo com os requisitos da fórmula e qualidade de ingredientes bioativos, o método de precipitação de álcool-extração de água é usado para extrair os ingredientes bioativos.

[036]Com base na análise supracitada, o método extração-por-etanol é aplicado aos produtos medicinais de Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Radix Paeoniae alba, Rhizoma Corydalis e Semen Cassiae; o precipitação de álcool-extração de água para Radix Rehmanniae Preparata, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Concha Margaritifera Usta e Herba Asari. 2. Estudo de extração de Radix Paeoniae alba sozinho ou em combinação

[037]Radix Paeoniae alba é o principal fármaco na fórmula, cujo principal ingrediente bioativo, paeoniflorina, atua como um indicador de determinação. A taxa de rendimento, teor de paeoniflorina e dissolubilidade foram usados como os indicadores para o estudo de extração de Radix Paeoniae alba sozinho ou em combinação. Processos de produção foram concebidos respectivamente, em que o 1o processo incluiu as etapas de tomar Radix Paeoniae alba em dose prescrita, em que 5 vezes de etanol a 70% foram adicionados ao extrato refluxando duas vezes, 2 horas para cada vez; e o 2o processo incluiu as etapas de tomar Radix Paeoniae alba, Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Rhizoma Corydalis e Semen Cassiae em dose prescrita, em que 5 vezes de etanol a 70% foram adicionados ao extrato refluxando duas vezes, 2 horas para cada vez. Os extratos resultantes foram combinados respectivamente, quantidade apropriada dos extratos (aproximadamente igual a 0,03 g de produto medicinal bruto de Radix Paeoniae alba) foram sugados, etanol foi adicionado a um volume constante de 20 ml, e filtrado para se obter o líquido como a solução de amostra. O restante dos extratos foi seco para se investigar a sua taxa de rendimento, teor de paeoniflorina e dissolubilidade. Método para a determinação de paeoniflorina Aparelho e reagente

[038]Agilent 1100 HPLC foi equipado com bomba quaternária, DAD, amostrador automático, desgaseificador em tempo real e termostato de coluna. Paeoniflorina padrão (obtida a partir de China Pharmaceutical Biological Products Analysis Institute), metanol (cromatograficamente puro), água purificada, isopropanol, ácido cítrico (analiticamente puro) Condições cromatográficas: coluna Agilent Zorbax SB-C18 (250 mm x 4,6 mm, 5 μm) Fase móvel: solução de isopropanol-metanol-ácido cítrico a 5% (2:18:80) Taxa de fluxo: 1,0 ml/min; temperatura de coluna: 30 °C; comprimento de onda de detecção: 240 nm

[039]Preparação de solução de teste: como mencionado antes.

[040]Preparação de solução padrão: quantidade apropriada de paeoniflorina padrão foi tomada e pesada precisamente para preparar a solução padrão (com 1 ml de solução contendo 0,015 mg de soluto) adicionando metanol a 80%.

[041]Método de medição: 10 μl de soluções de teste e padrão foram respectivamente sugadas com precisão, injetadas na HPLC e medidas.

[042]Os resultados foram mostrados abaixo. Tabela 1 - Estudo de extração de Radix Paeoniae alba sozinho ou em combinação

[043]Como mostrado nos resultados, em termos do teor de paeoniflorina, o extrato preparado extraindo Radix Paeoniae alba sozinho foi levemente mais elevado do que em combinação (3,18%). Em termos da taxa de rendimento, a primeira foi menor do que a última. Em termos da dissolubilidade, a primeira foi muito melhor do que a segunda. Em comparação com o último, o primeiro processo teve vantagens de tempo de aquecimento da concentração mais curto, menor perda de paeoniflorina, taxa de transferência aumentada, e teor elevado em produto. Assim, considerando vários fatores de forma abrangente, o processo extraindo Radix Paeoniae alba sozinho foi razoável. 3. Estudo de extração de Ramulus Uncariae cum Uncis em formas diferentes

[044]Teor de rincofilina e taxa de rendimento foram usados como indicadores para o estudo de extração de Ramulus Uncariae cum Uncis em formas diferentes (onde Ramulus Uncariae cum Uncis é reduzido à essência mais cedo ou mais tarde). Uma mistura de Radix Rehmanniae Preparata, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Concha Margaritifera Usta, Ramulus Uncariae cum Uncis e Herba Asari foi tomada em dose prescrita. Os processos de produção foram concebidos respectivamente. O 1o processo foi o qual a mistura supracitada foi adicionada com 6 vezes de água, extraída por 3 vezes para se obter o extrato, a primeira vez por 2 horas, a segunda e a terceira vez por 1 hora. O 2o processo foi o qual Radix Rehmanniae Preparata, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae e Concha Margaritifera Usta foram adicionados com 6 vezes de água, extraídos por 2 horas, filtrados, e os resíduos resultantes foram misturados com Ramulus Uncariae cum Uncis, extraídos duas vezes com 6 vezes de água, cada uma por 1 hora para se obter o extrato. Teor de rincofilina e taxa de rendimento de extratos anteriormente obtidos foram medidos respectivamente. Método para a determinação de rincofilina Aparelho e reagente

[045]Agilent 1100 HPLC foi equipado com bomba quaternária, DAD, amostrador automático, desgaseificador em tempo real e termostato de coluna. Padrão rincofilina, metanol (cromatograficamente puro), água purificada, trietilamina, ácido acético glacial (analiticamente puro) Condições cromatográficas: coluna Agilent Zorbax SB-C18 (250 mm x 4,6 mm, 5 μm) Fase móvel: solução de metanol-trietilamina 10 mmol (48:52), ajustada ao pH = 5,0 com ácido acético Taxa de fluxo: 1,0 ml/min; temperatura de coluna: 30 °C; comprimento de onda de detecção: 254 nm

[046]Preparação de solução padrão: quantidade apropriada de rincofilina padrão foi tomada e pesada precisamente para preparar a solução padrão (com 1 ml de solução contendo 10 μg de soluto) adicionando metanol.

[047]Preparação de solução de teste: quantidade apropriada (aproximadamente igual a 2 g de produto medicinal bruto de Ramulus Uncariae cum Uncis) de extrato de água combinado foi sugada, alcalinizada adicionando 5 ml de água amoniacal, extraída com clorofórmio por 3 vezes e combinada, evaporada à secura com banho de água. Os resíduos foram dissolvidos adicionando metanol ao volume de 20 ml, filtrados para se obter a solução de teste.

[048]Método de medição: soluções de teste e padrão 10 μl foram respectivamente sugadas com precisão, injetadas na HPLC e medidas.

[049]Os resultados foram mostrados abaixo. Tabela 2 - Estudo de extração de Ramulus Uncariae cum Uncis em formas diferentes

[050]Como mostrado nos resultados, em termos do teor de rincofilina, o extrato preparado pelo 1o processo foi quase o mesmo que o do 2o processo. Em termos da taxa de rendimento, o extrato preparado pelo 1o processo foi levemente mais elevado do que o do 2o processo, mas a diferença foi leve. A operação, inconveniente trazida pelo 2o processo deve ser considerada, por exemplo, o produto medicinal possivelmente flutuava na superfície, que pode influenciar a extração e causar um potencial risco de segurança. Devido ao seu processo simplificado, de fácil operação e maior segurança, o 1o processo foi razoável.

[051]Como mostrado na investigação farmacológica, confirmou-se que a dita composição farmacêutica tem efeitos de melhoramento da microcirculação cerebral da pia-máter, aumentando o fluxo sanguíneo cerebral, relaxando o vasospasmo e interrompendo a dor. Como mostrado em experimento farmacodinâmico, em comparação com o preparado por métodos conhecidos na técnica anterior, a composição farmacêutica tem um excelente efeito de tratamento de dor de cabeça. Formas de Realização

Exemplo 1

[052] Os seguintes materiais medicinais foram tomados: 253,5 g de Radix Angelicae Sinensis, 253,5 g de Rhizoma Chuanxiong, 202,7 g de Radix Paeoniae alba, 202,7 g de Radix Rehmanniae Preparata, 506,8 g de Ramulus Uncariae cum Uncis, 506,8 g de Caulis Spatholobi, 506,8 g de Spica Prunellae, 506,8 g de Semen Cassiae, 506,8 g de Concha Margaritifera Usta, 253,5 g de Rhizoma Corydalis e 50,5 g de Herba Asari.

[053]Preparação de Extrato #1: Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Rhizoma Corydalis e Semen Cassiae foram misturados, extraídos usando aquecimento sob refluxo por 2 vezes com 4 vezes de etanol a 70%, a primeira vez por 2 horas e a segunda vez por 1 hora, e filtrados para remover as impurezas; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,300 a 1,310 (74 a 76 °C) para se obter 253 g de Extrato #1 para o uso posterior.

[054]Preparação de Extrato #2: Radix Paeoniae alba foi adicionado com 4 vezes de etanol a 60 %, encharcado, extraído usando aquecimento sob refluxo por 2 vezes, a primeira vez por 2 horas e a segunda vez por 1 hora, e filtrado; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,23 a 1,33 (65 °C) para se obter 42 g de Extrato #2 para o uso posterior.

[055]Preparação de Extrato #3: Radix Rehmanniae Preparata, Ramulus Uncariae cum Uncis, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Concha Margaritifera Usta e Herba Asari foram misturados, reduzidos à essência por 2 vezes com 5 vezes de água, a primeira vez por 2 horas e a segunda vez por 1 hora, filtrados, concentrados até a densidade relativa estar entre 1,06 a 1,10 (80 °C), em que o etanol foi adicionado para fazer um teor final de etanol de 65 a 70%, deixado repousar por 12 a 24 horas, e filtrado; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,320 a 1,325 (79 a 81 °C) para se obter 305 g de Extrato #3 para o uso posterior.

[056]300 g de dextrina foram dissolvidos com água purificada, em que 3,0 g de esteviosina foram adicionados para dissolver por agitação satisfatória para se obter a suspensão. 600 g de três extratos bem preparados foram adicionados na suspensão e agitados gradualmente. A densidade de suspensão resultante foi ajustada entre 1,12 a 1,23 (42 a 45 °C), e a suspensão foi filtrada em tempo real com peneira de malha 60 a 100.

[057]250,0 g restantes da dextrina foram colocados no granulador. Uma série de parâmetros foi ajustada, por exemplo, frequência de pá da hélice, temperatura do ar de entrada, frequência da alimentação líquida e pressão por pulverização, para fazer os materiais em estado bem fluidizado no leito fluidizado. Os materiais foram granulados por pulverização em uma temperatura de 30 a 60 °C, e secos. A temperatura foi ainda aumentada entre 80 a 90 °C para secar completamente.

[058]Os grânulos resultantes foram classificados, peneirados e totalmente misturados para produzir os grânulos. O pacote foi um sachê de filme compósito de plástico-alumínio com especificação de 4 g por sachê.

Exemplo 2

[059]Os seguintes materiais medicinais foram tomados: 338 g de Radix Angelicae Sinensis, 338 g de Rhizoma Chuanxiong, 270,3 g de Radix Paeoniae alba, 270,3 g de Radix Rehmanniae Preparata, 675,7 g de Ramulus Uncariae cum Uncis, 675,7 g de Caulis Spatholobi, 675,7 g de Spica Prunellae, 675,7 g de Semen Cassiae, 675,7 g de Concha Margaritifera Usta, 338 g de Rhizoma Corydalis e 67,3 g de Herba Asari.

[060]Preparação de Extrato #1: Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Rhizoma Corydalis e Semen Cassiae foram misturados, extraídos usando aquecimento sob refluxo por 2 vezes com 4 vezes de etanol a 70%, a primeira vez por 2 horas e a segunda vez por 1 hora, e filtrados para remover as impurezas; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,300 a 1,310 (74 a 76 °C) para se obter 335 g de Extrato #1 para o uso posterior.

[061]Preparação de Extrato #2: Radix Paeoniae alba foi adicionado com 4 vezes de etanol a 60%, encharcado, extraído usando aquecimento sob refluxo por 2 vezes, a primeira vez por 2 horas e a segunda vez por 1 hora, e filtrado; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,23 a 1,33 (65 °C) para se obter 55 g de Extrato #2 para o uso posterior.

[062]Preparação de Extrato #3: Radix Rehmanniae Preparata, Ramulus Uncariae cum Uncis, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Concha Margaritifera Usta e Herba Asari foram misturados, reduzidos à essência por 2 vezes com 5 vezes de água, a primeira vez por 2 horas e a segunda vez por 1 hora, filtrados, concentrados até a densidade relativa estar entre 1,06 a 1,10 (80 °C), em que o etanol foi adicionado para fazer um teor final de etanol de 65 a 72%, deixado repousar por 12 a 24 horas, e filtrado; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,320 a 1,325 (79 a 81 °C) para se obter 420 g de Extrato #3 para o uso posterior.

[063]83 g de sacarose foram dissolvidos com água purificada por agitação satisfatória para se obter a suspensão. 810 g de três extratos bem preparados foram adicionados na suspensão e agitados gradualmente. A densidade de suspensão resultante foi ajustada entre 1,12 a 1,23 (42 a 45 °C), e a suspensão foi filtrada em tempo real com peneira de malha 60 a 100.

[064]320 g restantes da sacarose foram colocados no granulador. Uma série de parâmetros foi ajustada, por exemplo, frequência de pá da hélice, temperatura do ar de entrada, frequência de alimentação líquida e pressão por pulverização, para fazer os materiais em estado bem fluidizado no leito fluidizado. Os materiais foram granulados por pulverização em uma temperatura de 30 a 60 °C, e secos. A temperatura foi ainda aumentada entre 70 a 90 °C para secar completamente.

[065]Os grânulos resultantes foram classificados, peneirados e totalmente misturados para produzir os grânulos. O pacote foi um sachê de filme compósito de plástico-alumínio com especificação de 3 g por sachê.

Exemplo 3

[066]Os seguintes materiais medicinais foram tomados: 150 g de Radix Angelicae Sinensis, 150 g de Rhizoma Chuanxiong, 225 g de Radix Paeoniae alba, 225 g de Radix Rehmanniae Preparata, 551 g de Ramulus Uncariae cum Uncis, 551 g de Caulis Spatholobi, 551 g de Spica Prunellae, 551 g de Semen Cassiae, 551 g de Concha Margaritifera Usta, 225 g de Rhizoma Corydalis e 19 g de Herba Asari.

[067]Preparação de Extrato #1: Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Rhizoma Corydalis e Semen Cassiae foram misturados, extraídos usando aquecimento sob refluxo por 2 vezes com 5 vezes de etanol a 70%, a primeira vez por 2,5 horas e a segunda vez por 1 hora, e filtrados para remover as impurezas; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,250 a 1,310 (70 a 74 °C) para se obter 210 g de Extrato #1 para o uso posterior.

[068]Preparação de Extrato #2: Radix Paeoniae alba foi adicionado com 4 vezes de etanol a 80%, encharcado, extraído usando aquecimento sob refluxo por 2 vezes, a primeira vez por 2 horas e a segunda vez por 1 hora, e filtrado; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,15 a 1,25 (65 °C) para se obter 50 g de Extrato #2 para o uso posterior.

[069]Preparação de Extrato #3: Radix Rehmanniae Preparata, Ramulus Uncariae cum Uncis, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Concha Margaritifera Usta e Herba Asari foram misturados, reduzidos à essência por 2 vezes com 5 vezes de água, a primeira vez por 2 horas e a segunda vez por 1 hora, filtrados, concentrados até a densidade relativa estar entre 1,06 a 1,10 (80 °C), em que o etanol foi adicionado para fazer um teor final de etanol de 60 a 65%, deixado repousar por 12 a 24 horas, e filtrado; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,27 a 1,320 (75 a 80 °C) para se obter 545 g de Extrato #3 para o uso posterior.

[070]231 g de dextrina foram dissolvidos com água purificada, em que 3,0 g de esteviosina foram adicionados para dissolver por agitação satisfatória para se obter a suspensão. 805 g de três extratos bem preparados foram adicionados na suspensão e agitados gradualmente. A densidade de suspensão resultante foi ajustada entre 1,12 a 1,23 (42 a 50 °C), e a suspensão foi filtrada em tempo real com peneira de malha 60 a 100.

[071] 151 g restantes da dextrina foram colocados no granulador. Uma série de parâmetros foi ajustada, por exemplo, frequência de pá da hélice, temperatura do ar de entrada, frequência de alimentação líquida e pressão por pulverização, para fazer os materiais em estado bem fluidizado no leito fluidizado. Os materiais foram granulados por pulverização em uma temperatura de 30 a 60 °C, e secos. A temperatura foi ainda aumentada entre 70 a 90 °C para secar completamente.

[072]Os grânulos resultantes foram classificados, peneirados e totalmente misturados para produzir os grânulos. O pacote foi um sachê de filme compósito de plástico-alumínio com especificação de 4 g por sachê.

Exemplo 4

[073]Os seguintes materiais medicinais foram tomados: 250 g de Radix Angelicae Sinensis, 250 g de Rhizoma Chuanxiong, 250 g de Radix Paeoniae alba, 250 g de Radix Rehmanniae Preparata, 740 g de Ramulus Uncariae cum Uncis, 740 g de Caulis Spatholobi, 740 g de Spica Prunellae, 740 g de Semen Cassiae, 740 g de Concha Margaritifera Usta, 250 g de Rhizoma Corydalis e 50 g de Herba Asari.

[074]Preparação de Extrato #1: Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Rhizoma Corydalis e Semen Cassiae foram misturados, extraídos usando aquecimento sob refluxo por 2 vezes com 4 vezes de etanol a 80%, a primeira vez por 2,5 horas e a segunda vez por 1 hora, e filtrados para remover as impurezas; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,300 a 1,350 (75 a 80 °C) para se obter 300 g de Extrato #1 para o uso posterior.

[075]Preparação de Extrato #2: Radix Paeoniae alba foi adicionado com 6 vezes de etanol a 60%, encharcado, extraído usando aquecimento sob refluxo por 3 vezes, a primeira vez por 3 horas e a segunda vez por 1 hora e a terceira vez por 0,5 hora, e filtrado; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,20 a 1,35 (60 °C) para se obter 60 g de Extrato #2 para o uso posterior.

[076]Preparação de Extrato #3: Radix Rehmanniae Preparata, Ramulus Uncariae cum Uncis, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Concha Margaritifera Usta e Herba Asari foram misturados, reduzidos à essência por 2 vezes com 8 vezes de água, a primeira vez por 3 horas e a segunda vez por 2 horas, filtrados, concentrados até a densidade relativa estar entre 1,06 a 1,10 (80 °C), em que o etanol foi adicionado para fazer um teor final de etanol de 80 a 85%, deixado repousar por 12 a 24 horas, e filtrado; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,30 a 1,350 (80 a 85 °C) para se obter 425 g de Extrato #3 para o uso posterior.

[077]80 g de amido solúvel foram dissolvidos com água purificada, em que 3 g de esteviosina foram adicionados para dissolver por agitação satisfatória para se obter a suspensão. 785 g de três extratos bem preparados foram adicionados na suspensão e agitados gradualmente. A densidade de suspensão resultante foi ajustada entre 1,12 a 1,23 (42 a 50 °C), e a suspensão foi filtrada em tempo real com peneira de malha 60 a 100.

[078]330 g restantes do amido solúvel foram colocados no granulador. Uma série de parâmetros foi ajustada, por exemplo, frequência de pá da hélice, temperatura do ar de entrada, frequência de alimentação líquida e pressão por pulverização, para fazer os materiais em estado bem fluidizado no leito fluidizado. Os materiais foram granulados por pulverização em uma temperatura de 30 a 60 °C, e secos. A temperatura foi ainda aumentada entre 70 a 90 °C para secar completamente.

[079]Os grânulos resultantes foram classificados, peneirados e totalmente misturados para produzir os grânulos. O pacote foi um sachê de filme compósito de plástico-alumínio com especificação de 3 g por sachê.

Exemplo 5

[080]Os seguintes materiais medicinais foram tomados: 338 g de Radix Angelicae Sinensis, 338 g de Rhizoma Chuanxiong, 75 g de Radix Paeoniae alba, 75 g de Radix Rehmanniae Preparata, 510 g de Ramulus Uncariae cum Uncis, 510 g de Caulis Spatholobi, 510 g de Spica Prunellae, 510 g de Semen Cassiae, 510 g de Concha Margaritifera Usta, 337 g de Rhizoma Corydalis e 37 g de Herba Asari.

[081]Preparação de Extrato #1: Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Rhizoma Corydalis e Semen Cassiae foram misturados, extraídos usando aquecimento sob refluxo por 2 vezes com 4 vezes de etanol a 50%, a primeira vez por 2 horas e a segunda vez por 2 horas, e filtrados para remover as impurezas; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,300 a 1,350 (73 a 78 °C) para se obter 330 g de Extrato #1 para o uso posterior.

[082]Preparação de Extrato #2: Radix Paeoniae alba foi adicionado com 5 vezes de etanol a 70%, encharcado, extraído usando aquecimento sob refluxo por 2 vezes, a primeira vez por 1 hora e a segunda vez por 1 hora, e filtrado; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,23 a 1,35 (65 °C) para se obter 15 g de Extrato #2 para o uso posterior.

[083]Preparação de Extrato #3: Radix Rehmanniae Preparata, Ramulus Uncariae cum Uncis, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Concha Margaritifera Usta e Herba Asari foram misturados, reduzidos à essência por 2 vezes com 10 vezes de água, a primeira vez por 2 horas e a segunda vez por 2 horas, filtrados, concentrados até a densidade relativa estar entre 1,06 a 1,10 (80 °C), em que o etanol foi adicionado para fazer um teor final de etanol de 63 a 70%, deixado repousar por 12 a 24 horas, e filtrado; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,290 a 1,330 (78 a 83 °C) para se obter 253 g de Extrato #3 para o uso posterior.

[084]320 g de dextrina foram dissolvidos com água purificada, em que 3 g de esteviosina foram adicionados para dissolver por agitação satisfatória para se obter a suspensão. 598 g de três extratos bem preparados foram adicionados na suspensão e agitados gradualmente. A densidade de suspensão resultante foi ajustada entre 1,12 a 1,23 (42 a 50 °C), e a suspensão foi filtrada em tempo real com peneira de malha 60 a 100.

[085]240 g restantes da dextrina foram colocados no granulador. Uma série de parâmetros foi ajustada, por exemplo, frequência de pá da hélice, temperatura do ar de entrada, frequência de alimentação líquida e pressão por pulverização, para fazer os materiais em estado bem fluidizado no leito fluidizado. Os materiais foram granulados por pulverização em uma temperatura de 30 a 60 °C, e secos. A temperatura foi ainda aumentada entre 70 a 90 °C para secar completamente.

[086]Os grânulos resultantes foram classificados, peneirados e totalmente misturados para produzir os grânulos. O pacote foi um sachê de filme compósito de plástico-alumínio com especificação de 4 g por sachê.

Exemplo 6

[087]Os seguintes materiais medicinais foram tomados: 300 g de Radix Angelicae Sinensis, 300 g de Rhizoma Chuanxiong, 400 g de Radix Paeoniae alba, 400 g de Radix Rehmanniae Preparata, 650 g de Ramulus Uncariae cum Uncis, 650 g de Caulis Spatholobi, 650 g de Spica Prunellae, 650 g de Semen Cassiae, 650 g de Concha Margaritifera Usta, 300 g de Rhizoma Corydalis e 50 g de Herba Asari.

[088]Preparação de Extrato #1: Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Rhizoma Corydalis e Semen Cassiae foram misturados, extraídos usando aquecimento sob refluxo por 3 vezes com 3 vezes de etanol a 60%, a primeira vez por 2 horas, a segunda vez por 1 hora e a terceira vez por 0,5 hora, e filtrados para remover as impurezas; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,29 a 1,340 (73 a 78 °C) para se obter 315 g de Extrato #1 para o uso posterior.

[089]Preparação de Extrato #2: Radix Paeoniae alba foi adicionado com 4 vezes de etanol a 80%, encharcado, extraído usando aquecimento sob refluxo por 3 vezes, a primeira vez por 2 horas, a segunda vez por 1 hora e a terceira vez por 1 hora, e filtrado; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,18 a 1,33 (65 °C) para se obter 90 g de Extrato #2 para o uso posterior.

[090]Preparação de Extrato #3: Radix Rehmanniae Preparata, Ramulus Uncariae cum Uncis, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Concha Margaritifera Usta e Herba Asari foram misturados, reduzidos à essência por 2 vezes com 7 vezes de água, a primeira vez por 2 horas e a segunda vez por 1 hora, filtrados, concentrados até a densidade relativa estar entre 1,06 a 1,10 (80 °C), em que o etanol foi adicionado para fazer um teor final de etanol de 70 a 75%, deixado repousar por 12 a 24 horas, e filtrado; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,310 a 1,330 (77 a 82 °C) para se obter 375 g de Extrato #3 para o uso posterior.

[091]84 g de dextrina foram dissolvidos com água purificada, em que 3 g de esteviosina foram adicionados para dissolver por agitação satisfatória para se obter a suspensão. 780 g de três extratos bem preparados foram adicionados na suspensão e agitados gradualmente. A densidade de suspensão resultante foi ajustada entre 1,12 a 1,23 (42 a 50 °C), e a suspensão foi filtrada em tempo real com peneira de malha 60 a 100.

[092]336 g restantes da dextrina foram colocados no granulador. Uma série de parâmetros foi ajustada, por exemplo, frequência de pá da hélice, temperatura do ar de entrada, frequência de alimentação líquida e pressão por pulverização, para fazer os materiais em estado bem fluidizado no leito fluidizado. Os materiais foram granulados por pulverização em uma temperatura de 30 a 60 °C, e secos. A temperatura foi ainda aumentada entre 70 a 90 °C para secar completamente.

[093]Os grânulos resultantes foram classificados, peneirados e totalmente misturados para produzir os grânulos. O pacote foi um sachê de filme compósito de plástico-alumínio com especificação de 3 g por sachê.

Exemplo 7

[094]Os seguintes materiais medicinais foram tomados: 338 g de Radix Angelicae Sinensis, 338 g de Rhizoma Chuanxiong, 300 g de Radix Paeoniae alba, 300 g de Radix Rehmanniae Preparata, 413 g de Ramulus Uncariae cum Uncis, 413 g de Caulis Spatholobi, 413 g de Spica Prunellae, 413 g de Semen Cassiae, 413 g de Concha Margaritifera Usta, 337 g de Rhizoma Corydalis e 75 g de Herba Asari.

[095]Preparação de Extrato #1: Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Rhizoma Corydalis e Semen Cassiae foram misturados, extraídos usando aquecimento sob refluxo por 2 vezes com 6 vezes de etanol a 70%, a primeira vez por 2 horas e a segunda vez por 0,5 hora, e filtrados para remover as impurezas; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,260 a 1,310 (74 a 76 °C) para se obter 300 g de Extrato #1 para o uso posterior.

[096]Preparação de Extrato #2: Radix Paeoniae alba foi adicionado com 6 vezes de etanol a 60%, encharcado, extraído usando aquecimento sob refluxo por 2 vezes, a primeira vez por 2 horas e a segunda vez por 2 horas, e filtrado; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,21 a 1,34 (55 °C) para se obter 70 g de Extrato #2 para o uso posterior.

[097]Preparação de Extrato #3: Radix Rehmanniae Preparata, Ramulus Uncariae cum Uncis, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Concha Margaritifera Usta e Herba Asari foram misturados, reduzidos à essência por 2 vezes com 6 vezes de água, a primeira vez por 2 horas e a segunda vez por 1 hora, filtrados, concentrados até a densidade relativa estar entre 1,06 a 1,10 (80 °C), em que o etanol foi adicionado para fazer um teor final de etanol de 65 a 75%, deixado repousar por 12 a 24 horas, e filtrado; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,300 a 1,300 (79 a 81 °C) para se obter 424 g de Extrato #3 para o uso posterior.

[098]40 g de dextrina foram dissolvidos com água purificada, em que 3 g de esteviosina foram adicionados para dissolver por agitação satisfatória para se obter a suspensão. 794 g de três extratos bem preparados foram adicionados na suspensão e agitados gradualmente. A densidade de suspensão resultante foi ajustada entre 1,12 a 1,23 (42 a 50 °C), e a suspensão foi filtrada em tempo real com peneira de malha 60 a 100.

[099] 163 g restantes da dextrina foram colocados no granulador. Uma série de parâmetros foi ajustada, por exemplo, frequência de pá da hélice, temperatura do ar de entrada, frequência de alimentação líquida e pressão por pulverização, para fazer os materiais em estado bem fluidizado no leito fluidizado. Os materiais foram granulados por pulverização em uma temperatura de 30 a 60 °C, e secos. A temperatura foi ainda aumentada entre 70 a 90 °C para secar completamente.

[0100]Os grânulos resultantes foram classificados, peneirados e totalmente misturados para produzir os grânulos. O pacote foi um sachê de filme compósito de plástico-alumínio com especificação de 4 g por sachê.

Exemplo 8

[0101]Os seguintes materiais medicinais foram tomados: 450 g de Radix Angelicae Sinensis, 450 g de Rhizoma Chuanxiong, 350 g de Radix Paeoniae alba, 350 g de Radix Rehmanniae Preparata, 570 g de Ramulus Uncariae cum Uncis, 570 g de Caulis Spatholobi, 570 g de Spica Prunellae, 570 g de Semen Cassiae, 570 g de Concha Margaritifera Usta, 450 g de Rhizoma Corydalis e 100 g de Herba Asari.

[0102]Preparação de Extrato #1: Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Rhizoma Corydalis e Semen Cassiae foram misturados, extraídos usando aquecimento sob refluxo por 2 vezes com 6 vezes de etanol a 80%, a primeira vez por 1 hora e a segunda vez por 1 hora, e filtrados para remover as impurezas; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,29 a 1,340 (73 a 78 °C) para se obter 390 g de Extrato #1 para o uso posterior.

[0103]Preparação de Extrato #2: Radix Paeoniae alba foi adicionado com 3 vezes de etanol a 60%, encharcado, extraído usando aquecimento sob refluxo por 2 vezes, a primeira vez por 2,5 horas e a segunda vez por 2 horas, e filtrado; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,17 a 1,33 (65 °C) para se obter 65 g de Extrato #2 para o uso posterior.

[0104]Preparação de Extrato #3: Radix Rehmanniae Preparata, Ramulus Uncariae cum Uncis, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Concha Margaritifera Usta e Herba Asari foram misturados, reduzidos à essência por 2 vezes com 9 vezes de água, a primeira vez por 3 horas e a segunda vez por 3 horas, filtrados, concentrados até a densidade relativa estar entre 1,06 a 1,08 (80 °C), em que o etanol foi adicionado para fazer um teor final de etanol de 65 a 75%, deixado repousar por 12 a 22 horas, e filtrado; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,310 a 1,330 (77 a 82 °C) para se obter 385 g de Extrato #3 para o uso posterior.

[0105]110 g de dextrina foram dissolvidos com água purificada, em que 3 g de esteviosina foram adicionados para dissolver por agitação satisfatória para se obter a suspensão. 840 g de três extratos bem preparados foram adicionados na suspensão e agitados gradualmente. A densidade de suspensão resultante foi ajustada entre 1,12 a 1,23 (42 a 50 °C), e a suspensão foi filtrada em tempo real com peneira de malha 60 a 100.

[0106]256 g restantes da dextrina foram colocados no granulador. Uma série de parâmetros foi ajustada, por exemplo, frequência de pá da hélice, temperatura do ar de entrada, frequência de alimentação líquida e pressão por pulverização, para fazer os materiais em estado bem fluidizado no leito fluidizado. Os materiais foram granulados por pulverização em uma temperatura de 30 a 60 °C, e secos. A temperatura foi ainda aumentada entre 70 a 90 °C para secar completamente.

[0107]Os grânulos resultantes foram classificados, peneirados e totalmente misturados para produzir os grânulos. O pacote foi um sachê de filme compósito de plástico-alumínio com especificação de 3 g por sachê.

Exemplo 9

[0108]Os seguintes materiais medicinais foram tomados: 253,5 g de Radix Angelicae Sinensis, 253,5 g de Rhizoma Chuanxiong, 202,7 g de Radix Paeoniae alba, 202,7 g de Radix Rehmanniae Preparata, 506,8 g de Ramulus Uncariae cum Uncis, 506,8 g de Caulis Spatholobi, 506,8 g de Spica Prunellae, 506,8 g de Semen Cassiae, 506,8 g de Concha Margaritifera Usta, 253,5 g de Rhizoma Corydalis e 50,5 g de Herba Asari.

[0109]Preparação de Extrato #1: Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Rhizoma Corydalis e Semen Cassiae foram misturados, extraídos usando aquecimento sob refluxo por 2 vezes com 4 vezes de etanol a 70%, a primeira vez por 2 horas e a segunda vez por 1 hora, e filtrados para remover as impurezas; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,250 a 1,310 (70 a 74 °C) para se obter 253 g de Extrato #1 para o uso posterior.

[0110]Preparação de Extrato #2: Radix Paeoniae alba foi adicionado com 4 vezes de etanol a 60%, encharcado, extraído usando aquecimento sob refluxo por 2 vezes, a primeira vez por 2 horas e a segunda vez por 1 hora, e filtrado; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,23 a 1,33 (65 °C) para se obter 42 g de Extrato #2 para o uso posterior.

[0111]Preparação de Extrato #3: Radix Rehmanniae Preparata, Ramulus Uncariae cum Uncis, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Concha Margaritifera Usta e Herba Asari foram misturados, reduzidos à essência por 2 vezes com 5 vezes de água, a primeira vez por 2 horas e a segunda vez por 1 hora, filtrados, concentrados até a densidade relativa estar entre 1,06 a 1,10 (80 °C), em que o etanol foi adicionado para fazer um teor final de etanol de 65 a 75%, deixado repousar por 12 a 24 horas, e filtrado; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,27 a 1,320 (75 a 80 °C) para se obter 305 g de Extrato #3 para o uso posterior.

[0112]300 g de amido solúvel foram dissolvidos com água purificada, em que 3,0 g de esteviosina foram adicionados para dissolver por agitação satisfatória para se obter a suspensão. 600 g de três extratos bem preparados foram adicionados na suspensão e agitados gradualmente. A densidade de suspensão resultante foi ajustada entre 1,12 a 1,23 (42 a 50 °C), e a suspensão foi filtrada em tempo real com peneira de malha 60 a 100.

[0113]250,0 g restantes do amido solúvel foram colocados no granulador. Uma série de parâmetros foi ajustada, por exemplo, frequência de pá da hélice, temperatura do ar de entrada, frequência de alimentação líquida e pressão por pulverização, para fazer os materiais em estado bem fluidizado no leito fluidizado. Os materiais foram granulados por pulverização em uma temperatura de 30 a 60 °C, e secos. A temperatura foi ainda aumentada entre 80 a 90 °C para secar completamente.

[0114]Os grânulos resultantes foram classificados, peneirados e totalmente misturados para produzir os grânulos. O pacote foi um sachê de filme compósito de plástico-alumínio com especificação de 4 g por sachê.

Exemplo 10

[0115]Os seguintes materiais medicinais foram tomados: 338 g de Radix Angelicae Sinensis, 338 g de Rhizoma Chuanxiong, 270,3 g de Radix Paeoniae alba, 270,3 g de Radix Rehmanniae Preparata, 675,7 g de Ramulus Uncariae cum Uncis, 675,7 g de Caulis Spatholobi, 675,7 g de Spica Prunellae, 675,7 g de Semen Cassiae, 675,7 g de Concha Margaritifera Usta, 338 g de Rhizoma Corydalis e 67,3 g de Herba Asari.

[0116]Preparação de Extrato #1: Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Rhizoma Corydalis e Semen Cassiae foram misturados, extraídos usando aquecimento sob refluxo por 2 vezes com 4 vezes de etanol a 70%, a primeira vez por 2 horas e a segunda vez por 1 hora, e filtrados para remover as impurezas; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,280 a 1,320 (75 a 80 °C) para se obter 335 g de Extrato #1 para o uso posterior.

[0117]Preparação de Extrato #2: Radix Paeoniae alba foi adicionado com 4 vezes de etanol a 60%, encharcado, extraído usando aquecimento sob refluxo por 2 vezes, a primeira vez por 2 horas e a segunda vez por 1 hora, e filtrado; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,23 a 1,33 (65 °C) para se obter 55 g de Extrato #2 para o uso posterior.

[0118]Preparação de Extrato #3: Radix Rehmanniae Preparata, Ramulus Uncariae cum Uncis, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Concha Margaritifera Usta e Herba Asari foram misturados, reduzidos à essência por 2 vezes com 5 vezes de água, a primeira vez por 2 horas e a segunda vez por 1 hora, filtrados, concentrados até a densidade relativa estar entre 1,06 a 1,10 (80 °C), em que o etanol foi adicionado para fazer um teor final de etanol de 60 a 65%, deixado repousar por 12 a 24 horas, e filtrado; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,315 a 1,320 (76 a 79 °C) para se obter 420 g de Extrato #3 para o uso posterior.

[0119]80 g de celulose microcristalina foram dissolvidos com água purificada, em que 3,0 g de aspartame foram adicionados para dissolver por agitação satisfatória para se obter a suspensão. 810 g de três extratos bem preparados foram adicionados na suspensão e agitados gradualmente. A densidade de suspensão resultante foi ajustada entre 1,12 a 1,23 (42 a 50 °C), e a suspensão foi filtrada em tempo real com peneira de malha 60 a 100.

[0120]320 g restantes da celulose microcristalina foram colocados no granulador. Uma série de parâmetros foi ajustada, por exemplo, frequência de pá da hélice, temperatura do ar de entrada, frequência de alimentação líquida e pressão por pulverização, para fazer os materiais em estado bem fluidizado no leito fluidizado. Os materiais foram granulados por pulverização em uma temperatura de 30 a 60 °C, e secos. A temperatura foi ainda aumentada entre 70 a 90 °C para secar completamente.

[0121]Os grânulos resultantes foram classificados, peneirados e totalmente misturados para produzir os grânulos. O pacote foi um sachê de filme compósito de plástico-alumínio com especificação de 3 g por sachê.

Exemplo 11

[0122]Os seguintes materiais medicinais foram tomados: 150 g de Radix Angelicae Sinensis, 150 g de Rhizoma Chuanxiong, 225 g de Radix Paeoniae alba, 225 g de Radix Rehmanniae Preparata, 551 g de Ramulus Uncariae cum Uncis, 551 g de Caulis Spatholobi, 551 g de Spica Prunellae, 551 g de Semen Cassiae, 551 g de Concha Margaritifera Usta, 225 g de Rhizoma Corydalis e 19 g de Herba Asari.

[0123]Preparação de Extrato #1: Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Rhizoma Corydalis e Semen Cassiae foram misturados, extraídos usando aquecimento sob refluxo por 2 vezes com 5 vezes de etanol a 70%, a primeira vez por 2,5 horas e a segunda vez por 1 hora, e filtrados para remover as impurezas; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,290 a 1,300 (75 a 77 °C) para se obter 210 g de Extrato #1 para o uso posterior.

[0124]Preparação de Extrato #2: Radix Paeoniae alba foi adicionado com 4 vezes de etanol a 80%, encharcado, extraído usando aquecimento sob refluxo por 2 vezes, a primeira vez por 2 horas e a segunda vez por 2 horas, e filtrado; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,15 a 1,25 (65 °C) para se obter 50 g de Extrato #2 para o uso posterior.

[0125]Preparação de Extrato #3: Radix Rehmanniae Preparata, Ramulus Uncariae cum Uncis, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Concha Margaritifera Usta e Herba Asari foram misturados, reduzidos à essência por 2 vezes com 5 vezes de água, a primeira vez por 2 horas e a segunda vez por 1 hora, filtrados, concentrados até a densidade relativa estar entre 1,06 a 1,10 (80 °C), em que o etanol foi adicionado para fazer um teor final de etanol de 65 a 70%, deixado repousar por 12 a 24 horas, e filtrado; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,310 a 1,315 (79 a 82 °C) para se obter 545 g de Extrato #3 para o uso posterior.

[0126]231 g de lactose foram dissolvidos com água purificada, em que 3,0 g de aspartame foram adicionados para dissolver por agitação satisfatória para se obter a suspensão. 805 g de três extratos bem preparados foram adicionados na suspensão e agitados gradualmente. A densidade de suspensão resultante foi ajustada entre 1,12 a 1,23 (42 a 50 °C), e a suspensão foi filtrada em tempo real com peneira de malha 60 a 100.

[0127]151 g restantes da lactose foram colocados no granulador. Uma série de parâmetros foi ajustada, por exemplo, frequência de pá da hélice, temperatura do ar de entrada, frequência de alimentação líquida e pressão por pulverização, para fazer os materiais em estado bem fluidizado no leito fluidizado. Os materiais foram granulados por pulverização em uma temperatura de 30 a 60 °C, e secos. A temperatura foi ainda aumentada entre 70 a 90 °C para secar completamente.

[0128]Os grânulos resultantes foram classificados, peneirados e totalmente misturados para produzir os grânulos. O pacote foi um sachê de filme compósito de plástico-alumínio com especificação de 4 g por sachê.

Exemplo 12

[0129]Os seguintes materiais medicinais foram tomados: 250 g de Radix Angelicae Sinensis, 250 g de Rhizoma Chuanxiong, 250 g de Radix Paeoniae alba, 250 g de Radix Rehmanniae Preparata, 740 g de Ramulus Uncariae cum Uncis, 740 g de Caulis Spatholobi, 740 g de Spica Prunellae, 740 g de Semen Cassiae, 740 g de Concha Margaritifera Usta, 250 g de Rhizoma Corydalis e 50 g de Herba Asari.

[0130]Preparação de Extrato #1: Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Rhizoma Corydalis e Semen Cassiae foram misturados, extraídos usando aquecimento sob refluxo por 2 vezes com 4 vezes de etanol a 80%, a primeira vez por 2,5 horas e a segunda vez por 1 hora, e filtrados para remover as impurezas; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,280 a 1,300 (75 a 77 °C) para se obter 300 g de Extrato #1 para o uso posterior.

[0131]Preparação de Extrato #2: Radix Paeoniae alba foi adicionado com 6 vezes de etanol a 60%, encharcado, extraído usando aquecimento sob refluxo por 3 vezes, a primeira vez por 2 horas, a segunda vez por 1 hora e a terceira vez por 0,5 hora, e filtrado; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,20 a 1,35 (60 °C) para se obter 60 g de Extrato #2 para o uso posterior.

[0132]Preparação de Extrato #3: Radix Rehmanniae Preparata, Ramulus Uncariae cum Uncis, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Concha Margaritifera Usta e Herba Asari foram misturados, reduzidos à essência por 2 vezes com 8 vezes de água, a primeira vez por 3 horas e a segunda vez por 2 hora, filtrados, concentrados até a densidade relativa estar entre 1,06 a 1,10 (80 °C), em que o etanol foi adicionado para fazer um teor final de etanol de 80 a 85%, deixado repousar por 12 a 24 horas, e filtrado; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,280 a 1,330 (75 a 80 °C) para se obter 425 g de Extrato #3 para o uso posterior.

[0133]80 g de dextrina foram dissolvidos com água purificada, em que 3 g de aspartame foram adicionados para dissolver por agitação satisfatória para se obter a suspensão. 785 g de três extratos bem preparados foram adicionados na suspensão e agitados gradualmente. A densidade de suspensão resultante foi ajustada entre 1,12 a 1,23 (42 a 50 °C), e a suspensão foi filtrada em tempo real com peneira de malha 60 a 100.

[0134]330 g restantes da dextrina foram colocados no granulador. Uma série de parâmetros foi ajustada, por exemplo, frequência de pá da hélice, temperatura do ar de entrada, frequência de alimentação líquida e pressão por pulverização, para fazer os materiais em estado bem fluidizado no leito fluidizado. Os materiais foram granulados por pulverização em uma temperatura de 30 a 60 °C, e secos. A temperatura foi ainda aumentada entre 70 a 90 °C para secar completamente.

[0135]Os grânulos resultantes foram classificados, peneirados e totalmente misturados para produzir os grânulos. O pacote foi um sachê de filme compósito de plástico-alumínio com especificação de 3 g por sachê.

[0136]Os efeitos benéficos das ditas composições farmacêuticas em tratar dor de cabeça foram demonstrados seguindo 2 pesquisas farmacodinâmicas. Pesquisa Farmacodinâmica 1. Efeito de melhoria da composição farmacêutica (YXQN) em enxaqueca induzida por nitroglicerina em ratos 1. Materiais 1.1 Animais: ratos SD, machos, pesando 180 a 200 g foram fornecidos por Beijing Weitonglihua Experimental Animal Technology Co., Ltd. Os animais foram criados em gaiolas separadas sob luz natural com excelente ventilação e livre acesso à água e alimento. A dieta animal foi alimento em pelotas adquirido a partir de Jinan Dakang Feed Inc. (Certificado No: 364). O ambiente de alimentação para os animais de teste estava em conformidade com a Regulation of Test Animais Tianjin. 1.2 Fármaco: fármaco testado foi preparado pelo método do Exemplo 1 (YXQN-1), e fármaco de comparação pelo método da Patente Chinesa ZL200510073290.3 (YXQN-2). Ambos foram fornecidos por Tasly Pharmaceutical Co., Ltd. Qiyeanshen tablet (Aprovação No: Z45022054), como um fármaco de controle positivo, foi produzido por Guangxi Beihai Pharmaceutical Co., Ltd (LOT: 20130123). Dosagem diária: 20 mg por dia. 1.3 Reagente: kit de ensaio NOS, kit de ensaio de proteína azul brilhante Coomassie e kit de ensaio NO foram adquiridos a partir de Nanjing Jiancheng Science & technology Co., Ltd (LOT:20120726), kit Rat 5-HT foi adquirido a partir de Shanghai Jianglai Bio-tech Co., Ltd (LOT:12-05), kit ELISA foi adquirido a partir de Shanghai Meilian Bio-tech Co., Ltd e kit rat DA ELISA foi adquirido a partir de Shanghai Kaibo Bio-tech Co., Ltd. Solução salina normal e hidrato de cloral a 10%. 1.4 Aparelho: espectrofotômetro ultravioleta UV2100 Shimadzu, emulsificador de dispersão de alto corte F6/10 FLUKO, Hettich ROTANTA 460R centrífuga refrigerada de alta velocidade, detector de corrente sanguínea Doppler de equilíbrio eletrônico e ultra-som. 2. Método 2.1 Agrupamento e administração

[0137]Os animais foram aleatoriamente divididos em 9 grupos de acordo com peso corpóreo, 10 ratos em cada grupo: o grupo modelo; grupo controle positivo; grupo controle sem expressão; grupos de alta, média e baixa dosagem de YXQN-1 (1,562 g, 0,781 g e 0,391 extrato/kg respectivamente); grupos de alta, média e baixa dosagem de YXQN-2 (1,562 g, 0,781 g e 0,391 extrato/kg respectivamente). Preventivamente, os grupos de YXQN-1, YXQN-2 e controle positivo foram administrados por 10 dias consecutivos. O fármaco positivo foi dado em uma dosagem de 20 mg por dia. O volume igual de solução salina normal foi intragastricamente administrado ao grupo modelo e grupo controle sem expressão. 2.2 Estabelecimento de modelo de observação de comportamento

[0138]Com a exceção do grupo controle sem expressão, os ratos remanescentes receberam injeção subcutânea de nitroglicerina (10 ml/kg). Modelos de rato com enxaqueca experimentais foram duplicados. Depois de administrado intragastricamente, aqueles ratos, tendo duas orelhas avermelhadas e frequência aumentada de coçar a cabeça com as patas dianteiras, foram tomados como modelagem bem-sucedida. (1) Orelha avermelhada: observar o momento em que a orelha avermelhada apareceu e desapareceu depois da modelagem; (2) Coçar a cabeça: observar a frequência de coçar a cabeça a cada 30 min depois da modelagem, o momento de coçar a cabeça apareceu com a ação de coçar a cabeça consecutiva por 5 vezes ou mais como o símbolo, e o momento de coçar a cabeça desapareceu com a ação de coçar a cabeça menor do que 5 vezes durante um intervalo, depressão e fadiga como o símbolo. 2.3 Determinação de bio-marcador

[0139]Todos os animais modelos foram criados e administrados à luz do método supracitado. O sangue e cérebro foram coletados 4 horas depois da modelagem para preparar homogenatos sanguíneos e cerebrais e, congelados e reservados para o uso posterior. O método de colorimetria química foi realizado de acordo com o rótulo do kit para o ensaio de teor de NO e atividade de NOS no soro; assim como teores de 5-HT, 5-HIAA, NA DA no cérebro. 2.4 Gestão estatística

[0140]Todos os dados foram analisados com o software SPSS 20.0, os resultados foram expressados como - ± s e teste t foi usado entre os grupos. 3. Resultados 3.1 Orelhas avermelhadas

[0141]Nenhuma orelha avermelhada foi observada no grupo controle sem expressão. As orelhas avermelhadas apareceram no grupo YXQN-1, YXQN-2 e modelo 3 min depois da modelagem. Em comparação com o grupo modelo, não houve diferença significante no momento em que as orelhas avermelhadas apareceram. Após o tratamento, em comparação com o grupo modelo, o momento em que as orelhas avermelhadas desapareceram nos grupos de média e baixa dosagem de YXQN-1 teve significância estatística (P<0,05, P<0,01), entretanto, nenhuma diferença significativa foi encontrada nos grupos YXQN-2. Em comparação com a grupo de dosagem igual de YXQN-2, os grupos de alta e média dosagem de YXQN-1 tiveram diferença significativa (P<0,05). Os resultados foram mostrados na Tabela 3. Tabela 3 - Efeito de YXQN-1 e YXQN-2 no momento em que as orelhas avermelhadas apareceram e desapareceram em ratos (min,- ± s)

Em comparação com o grupo modelo, * P<0,05, ** P<0,01; em comparação com YXQN-2, # P<0,05. 3.2 Frequência de coçar a cabeça

[0142]No grupo controle sem expressão, a ação de coçar a cabeça ocasionalmente apareceu uma ou duas vezes durante um período de tempo pequeno. A cerca de 3 min depois da modelagem, a ação de coçar a cabeça apareceu em grupos YXQN-1, YXQN-2 e modelo, não tendo nenhuma significância estatística, em comparação com o grupo modelo. Após o tratamento, houve mais momentos de ação de coçar a cabeça durante o período de 0 a 30 min e 30 a 60 min. Em comparação com o grupo modelo, os grupos de alta, média e baixa dosagem de YXQN-1 tiveram significância estatística (P<0,05, P<0,01) em frequência de coçar a cabeça. A diferença significativa ainda não tinha sido encontrada em cada grupo de dosagem de YXQN-2. Em comparação com o grupo de dosagem igual de YXQN-2, os grupos de média e baixa dosagem de YXQN-1 tiveram diferença significativa (P<0,05). Os resultados foram mostrados na Tabela 4. Tabela 4 - Efeito de YXQN-1 e YXQN-2 na frequência de coçar a cabeça em ratos (T ± s) durante cada período de tempo

Em comparação com o grupo modelo, * P<0,05, ** P<0,01; em comparação com YXQN-2, # P<0,05. 3.3 Nível de NO e NOS no soro

[0143]Em comparação com o grupo modelo, o nível de soro de NO e NOS em ratos nos grupos de alta, média e baixa dosagem de YXQN-1 teve significância estatística (P<0,05, P<0,01). A diferença significativa ainda não tinha sido encontrada em cada grupo de dosagem de YXQN-2. Em comparação com o grupo de dosagem igual de YXQN-2, os grupos de média e baixa dosagem de YXQN-1 tiveram diferença significativa (P<0,05). Os resultados foram mostrados na Tabela 5. Tablet 5 - Efeito de YXQN-1 e YXQN-2 no nível de soro de NO e NOS em ratos (T ± s)

Em comparação com o grupo modelo, * P<0,05, ** P<0,01; em comparação com YXQN-2, # P<0,05. 3.4 Teores de 5-HT, 5-HIAA e DA

[0144]Em comparação com o grupo modelo, os teores de 5-HT, 5-HIAA e DA em ratos nos grupos de alta, média e baixa dosagem de YXQN-1 tiveram significância estatística (P<0,05, P<0,01). A diferença significativa ainda não tinha sido encontrada em cada grupo de dosagem de YXQN-2. Em termos de 5-HT e 5- HIAA, em comparação com o grupo de dosagem igual de YXQN-2, os grupos de média e baixa dosagem de YXQN-1 tiveram diferença significativa (P<0,05). Em termos de DA, em comparação com o grupo de dosagem igual de YXQN-2, os grupos de média e alta dosagem de YXQN-1 tiveram diferença significativa (P<0,05). Os resultados foram mostrados na Tabela 6. Tabela 6 - Efeito de YXQN-1 e YXQN-2 nos teores de 5-HT, 5-HIAA e DA em ratos (T ± s)

4. Conclusão

[0145]A dita composição farmacêutica da presente invenção pode melhorar índices comportamentais induzidos por nitroglicerina e índices bioquímicos em modelos de ratos com enxaqueca. Como mostrado na pesquisa, a dita composição farmacêutica da presente invenção provou-se ter um efeito de melhorar os índices comportamentais induzidos por nitroglicerina em modelos de ratos com enxaqueca, que é melhor do que o fármaco de comparação. Pesquisa Farmacodinâmica 2. Efeito de composição farmacêutica (YXQN) na mudança de fluxo sanguíneo cerebral em modelo de coelhos com enxaqueca 1. Materiais 1.1 Os 36 coelhos comercialmente disponíveis, pesando 2,2 ± 0,5 kg, foram aleatoriamente divididos em 6 grupos, 6 coelhos em cada grupo. Os animais foram criados em laboratório de faculdade de medicina básica de Tianjin Medical University, sob luz natural com excelente ventilação e livre acesso à água e alimento. 1.2 Fármacos: fármaco testado foi preparado pelo método do Exemplo 1 (YXQN-1), e o fármaco de comparação foi preparado pelo método da Patente Chinesa ZL200510073290.3 (YXQN-2). Ambos foram fornecidos por Tasly Pharmaceutical Co., Ltd. 1.3 Aparelho: detector de corrente sanguínea Doppler de ultra-som 2. Método 2.1 Agrupamento e administração

[0146]Os animais foram aleatoriamente divididos em 6 grupos de acordo com peso corpóreo, 6 coelhos em cada grupo: o grupo modelo; grupo controle sem expressão; grupos de alta e baixa dosagem de YXQN-1 (0,782 g e 0,391 g de extrato/kg respectivamente); grupos de alta e baixa dosagem de YXQN-2 (0,782 g e 0,391 g de extrato/kg respectivamente). Os grupos modelo e controle sem expressão foram administrados por perfusão gástrica com volume igual de solução salina normal. O método de modelagem de animal foi o mesmo como a Pesquisa Farmacodinâmica 1 supracitada. Salvo tratamento por fármacos, o grupo modelo foi administrado por injeção na veia da orelha de 5-HT (2 mg/kg) por 3 dias consecutivos, e no 3o dia a injeção de Diazepam (7,5 mg/coelho) foi adicionada. O fluxo sanguíneo cerebral foi avaliado 30 min após a última administração. Os coelhos foram estabelecidos em coelheira. Um detector de 2 MHz foi usado nos temporais para detectar, com um volume de amostragem de 7 mm e uma profundidade de 26 ± 2 mm. 2. Gestão estatística

[0147]Todos os resultados expressaram-se como - ± s e o teste t foi usado entre os grupos. PI=2x (Vs-Vd)/(Vs+Vd) PI: índice de pulso Vs: velocidade de fluxo sanguíneo de pico de contração Vd: velocidade de fluxo sanguíneo do fim da diástole Vm: velocidade de fluxo sanguíneo média 3. Resultados 3.1 Vs, Vd, Vm e PI

[0148]A velocidade de fluxo sanguíneo no grupo controle sem expressão permaneceu inalterada. Depois da modelagem, as velocidades do fluxo sanguíneo nos grupos YXQN-1, YXQN-2 e modelo foram diminuídas, não tendo significância estatística, em comparação com o grupo modelo. Depois do tratamento, em comparação com o grupo modelo, os grupos de alta e baixa dosagem de YXQN-1 tiveram significância estatística (P<0,05, P<0,01). A diferença significativa ainda não tinha sido encontrada em cada grupo de dosagem de YXQN-2. Em comparação com o grupo de dosagem igual de YXQN-2, o grupo de alta dosagem de YXQN-1 teve diferença significativa (P<0,05). Os resultados foram mostrados na Tabela 7. Tablet 7 - Efeito de YXQN-1 e YXQN-2 na mudança do fluxo sanguíneo cerebral em coelhos (- ± s)

4. Conclusão

[0149]A dita composição farmacêutica da presente invenção pode melhorar a mudança de fluxo sanguíneo cerebral em modelo de coelhos com enxaqueca. Como mostrado neste estudo, a dita composição farmacêutica pode melhorar a mudança induzida por nitroglicerina do fluxo sanguíneo cerebral em coelhos com enxaqueca, que foi melhor do que o fármaco de comparação.

Claims

1. Composição farmacêutica para uso no tratamento de dor de cabeça, CARACTERIZADA pelo fato de que compreende 4 a 9 partes em peso de Radix Angelicae Sinensis, 4 a 9 partes em peso de Rhizoma Chuanxiong, 2 a 8 partes em peso de Radix Paeoniae alba, 2 a 8 partes em peso de Radix Rehmanniae Preparata, 10 a 15 partes em peso de Ramulus Uncariae cum Uncis, 10 a 15 partes em peso de Caulis Spatholobi, 10 a 15 partes em peso de Spica Prunellae, 10 a 15 partes em peso de Semen Cassiae, 10 a 15 partes em peso de Concha Margaritifera Usta, 4 a 9 partes em peso de Rhizoma Corydalis e 0,5 a 2 partes em peso de Herba Asari, em que a dita composição é preparada pelo método a seguir: a) preparação de Extrato #1: Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Rhizoma Corydalis e Semen Cassiae são misturados, extraídos usando aquecimento sob refluxo com etanol, e filtrados para remover as impurezas; e o etanol é recuperado e concentrado para obter o Extrato #1 para uso posterior; b) preparação de Extrato #2: Radix Paeoniae alba é extraído usando aquecimento sob refluxo com etanol, e filtrado; e o etanol é recuperado e concentrado para obter o Extrato #2 para uso posterior; c) preparação de Extrato #3: Radix Rehmanniae Preparata, Ramulus Uncariae cum Uncis, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Concha Margaritifera Usta e Herba Asari são misturados, feita decocção com água, filtrados, concentrados, em que o etanol é adicionado, deixado em repouso, e filtrado; e o etanol é recuperado e concentrado para obter o Extrato #3 para uso posterior; d) preparação de formulações: os três extratos supracitados são adicionados com quantidade apropriada de excipientes, secos, e granulados para obter o produto final; em que os ditos excipientes da etapa d) incluem um ou mais tipos de agente de enchimento e agente flavorizante; preferencialmente, o dito agente de enchimento é selecionado dentre dextrina, amido, amido solúvel, sacarose, lactose e celulose microcristalina; o dito agente flavorizante é selecionado dentre esteviosina, aspartame; mais preferencialmente, o dito agente de enchimento é dextrina e o dito agente flavorizante é esteviosina.

2. Composição, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADA pelo fato de que a dita composição é preparada pelo seguinte método: a) preparação de Extrato #1: Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Rhizoma Corydalis e Semen Cassiae são misturados, extraídos usando aquecimento sob refluxo com 3 a 6 vezes de etanol a 50 a 80% por 2 a 3 vezes, a primeira vez por 0,5 a 2,5 horas, a segunda e/ou terceira vez por 0,5 a 2 horas, e filtrados para remover as impurezas; e o etanol é recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,250 a 1,350 a 70 a 80 °C para obter o Extrato #1 para uso posterior; b) preparação de Extrato #2: Radix Paeoniae alba é adicionado com 3 a 6 vezes de etanol a 50 a 80%, encharcado, extraído usando aquecimento sob refluxo por 2 a 3 vezes, a primeira vez por 0,5 a 2,5 horas, a segunda e/ou terceira vez por 0,5 a 2 horas, e filtrado; e o etanol é recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,10 a 1,35 a 55 a 65 °C para obter o Extrato #2 para uso posterior; c) preparação de Extrato #3: Radix Rehmanniae Preparata, Ramulus Uncariae cum Uncis, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Concha Margaritifera Usta e Herba Asari são combinados, feita decocção com 4 a 10 vezes de água por 2 a 3 vezes, a primeira vez por 0,5 a 3 horas, a segunda e/ou terceira vez por 1 a 3 horas, filtrados, concentrados até a densidade relativa estar entre 1,06 a 1,10 a 75 a 85 °C, no qual o etanol é adicionado para fazer um teor final de etanol de 60 a 85%, deixado repousar por 12 a 24 horas, e filtrado; e o etanol é recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,270 a 1,350 a 75 a 85 °C para obter o Extrato #3 para uso posterior; d) preparação de formulações: os três extratos supracitados são adicionados com quantidade apropriada de excipientes, secos, granulados para obter o produto final.

3. Composição, de acordo com a reivindicação 2, CARACTERIZADA pelo fato de que a dita composição é preparada pelo seguinte método: a) preparação de Extrato #1: Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Rhizoma Corydalis e Semen Cassiae são misturados, extraídos usando aquecimento sob refluxo por 2 vezes com 4 vezes de etanol a 70%, a primeira vez por 2 horas e a segunda vez por 1 hora, e filtrados para remover as impurezas; e o etanol é recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,300 a 1,310 a 74 a 76 °C para obter o Extrato #1 para uso posterior; b) preparação de Extrato #2: Radix Paeoniae alba é adicionado com 4 vezes de etanol a 60%, encharcado, extraído usando aquecimento sob refluxo por 2 vezes, a primeira vez por 2 horas e a segunda vez por 1 hora, e filtrado; e o etanol é recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,23 a 1,33 a 65 °C para obter o Extrato #2 para uso posterior; c) preparação de Extrato #3: Radix Rehmanniae Preparata, Ramulus Uncariae cum Uncis, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Concha Margaritifera Usta e Herba Asari são misturados, feita a decocção por 2 vezes com 5 vezes de água, a primeira vez por 2 horas e a segunda vez por 1 hora, filtrados, concentrados até a densidade relativa estar entre 1,06 a 1,10 a 80 °C, no qual o etanol é adicionado para fazer um teor final de etanol de 65 a 70%, deixado repousar por 12 a 24 horas, e filtrado; e o etanol é recuperado e concentrado até a densidade relativa estar entre 1,320 a 1,325 a 79 a 81 °C para se obter o Extrato #3 para uso posterior; d) preparação de formulações: os três extratos supracitados são adicionados com quantidade apropriada de excipientes, secos, granulados para se obter o produto final.

4. Composição, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADA pelo fato de que a razão em peso dos três Extratos supracitados preparados por Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Radix Paeoniae alba, Radix Rehmanniae Preparata, Ramulus Uncariae cum Uncis, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Semen Cassiae, Concha Margaritifera Usta, Rhizoma Corydalis e Herba Asari para os excipientes é de 40:60 a 65:35, preferencialmente 55:45 a 65:35.

5. Composição, de acordo com a reivindicação 4, CARACTERIZADA pelo fato de que a dita razão dos três Extratos supramencionados para os excipientes é uma razão de extrato seco convertido dos três Extratos supramencionados para os excipientes.

6. Composição, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADA pelo fato de que, na etapa d), a formulação é preparada por um método de granulação por pulverização em leito fluidizado, compreendendo as seguintes etapas: tomar uma parte do agente de enchimento, dissolvê-la com água purificada, adicionar agente flavorizante para dissolver por agitação satisfatória para obter uma suspensão; adicionar três Extratos bem preparados na suspensão supracitada de forma gradual, agitar, ajustar a densidade da suspensão, filtrar em tempo real; colocar o resto do agente de enchimento em um granulador; realizar a granulação por pulverização ajustando os parâmetros de granulação; secar; granular com uma peneira; misturar totalmente e empacotar para obter o produto final.

7. Composição, de acordo com a reivindicação 6, CARACTERIZADA pelo fato de que a quantidade de adição do dito agente flavorizante é responsável por 0 a 1% em peso do agente de enchimento total, e a razão em peso entre a parte do agente de enchimento primeiramente adicionado e o resto do agente de enchimento adicionado posteriormente é de 1:4 a 1,5:1.

8. Método para preparar a composição farmacêutica, como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 7, CARACTERIZADO pelo fato de que o método compreende as seguintes etapas: a) preparação de Extrato #1: Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Rhizoma Corydalis e Semen Cassiae são misturados, extraídos usando aquecimento sob refluxo com etanol, e filtrados para remover as impurezas; e o etanol é recuperado e concentrado para obter o Extrato #1 para uso posterior; b) preparação de Extrato #2: Radix Paeoniae alba é extraído usando aquecimento sob refluxo com etanol, e filtrado; e o etanol é recuperado e concentrado para se obter o Extrato #2 para uso posterior; c) preparação de Extrato #3: Radix Rehmanniae Preparata, Ramulus Uncariae cum Uncis, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Concha Margaritifera Usta e Herba Asari são misturados, feita a decocção com água, filtrados, concentrados, no qual o etanol é adicionado, deixado em repouso, e filtrado; e o etanol é recuperado e concentrado para obter o Extrato #3 para uso posterior; d) preparação de formulações: tomar uma parte do agente de enchimento, dissolvê-la com água purificada, adicionar agente flavorizante para dissolver por agitação satisfatória para obter uma suspensão; adicionar três Extratos bem preparados na suspensão supracitada de forma gradual, agitar, ajustar a densidade da suspensão, filtrar em tempo real; colocar o resto do agente de enchimento em um granulador; realizar a granulação por pulverização ajustando os parâmetros de granulação; secar; granular com uma peneira; misturar totalmente e empacotar para obter o produto final.

9. Uso da composição farmacêutica, como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 7, CARACTERIZADO pelo fato de que é para a preparação de um produto medicinal para tratar dor de cabeça, síndrome traumática de nervo craniano, tontura e vertigem, irritação e irritabilidade, insônia e devaneio.