BR112013018953B1 - Composição efervescente na forma sólida para uso em aplicações vaginais para o tratamento de infecções vaginais - Google Patents

Abstract

COMPOSIÇÃO EFERVESCENTE NA FORMA SÓLIDA PARA USO EM APLICAÇÕES VAGINAIS PARA O TRATAMENTO DE INFECÇÕES VAGINAIS. A presente invenção refere-se a uma composição efervescente na forma sólida para uso em aplicações vaginais para o tratamento de infecções vaginais.

Description

[001] A presente invenção se refere a uma composição eferves-cente na forma sólida para uso em aplicações vaginais para o trata- mento de infecções vaginais.

[002] Sabe-se que a composição da microflora intestinal e uroge-nital representa um ponto crítico para a saúde e bem-estar de um indi- víduo. O ecossistema vaginal consiste em células epiteliais que reves- tem a vagina e o útero, células glandulares que secretam no lúmen do órgão e flora bacteriana complexa representada por diferentes espé- cies de micro-organismos.

[003] Estes micro-organismos têm a capacidade de fermentarglicogênio proveniente da decomposição de células parabasais da mucosa vaginal eutrófica, com uma consequente produção de ácido láctico, cujo efeito final é o estabelecimento e manutenção de um am- biente vaginal ácido (com valores de pH de 4-4,5 sob condições fisio- lógicas).

[004] O H+proveniente de ácido láctico contribui para a formaçãode peróxido de hidrogênio. Esta molécula é tóxica para um grande número de espécies bacterianas as quais carecem da enzima cata- lase. Ao nível de secreções vaginais, concentrações de 0,75-5 μg/mL são facilmente alcançadas e são abundantemente suficientes para que o efeito tóxico seja expresso.

[005] A ação combinada de peróxido de hidrogênio, peroxidaseuterina (produzida pelo colo do útero e endométrio) e íons de Cl-e I- também limita o crescimento bacteriano ao ativar diretamente polimor- fonucleados, os quais exercem uma ação bactericida em espaços in- tercelulares epiteliais.

[006] Em mulheres, em virtude de uma variedade de fatores exó-genos e endógenos, tais como o consumo de antibióticos, estados de tensão, modulações hormonais associadas à gravidez e o ciclo mens- trual ou a ingestão de altas concentrações de estrogênio, um desequi- líbrio ocorre frequentemente no ecossistema vaginal. A alteração no equilíbrio do ecossistema vaginal leva a uma prevalência dos assim denomiandos micro-organismos "oportunistas" (por exemplo, Candida albicans e glabrata) e/ou micro-organismos patogênicos (por exemplo, Neisseria gonorrhoeae e Trichomonas vaginalis), os quais podem levar à candidíase, vaginite ou formas de vaginose.

[007] Dados epidemiológicos mostram que infecções vaginaisafetam hoje mais de um bilhão de mulheres em todo o mundo a cada ano, com graves repercussões do ponto de vista socioeconômico.

[008] A terapia geralmente adotada é uma um antibiótico e/oufungicida o qual, usualmente, tem dado bons resultados a curto prazo, mas revela-se incapaz de prevenir infecções recorrentes em virtude de sua crescente resistência contra patógenos. Além disso, nem todos os indivíduos que precisam ser tratados são capazes de empreender e tolerar uma terapia com antibiótico ou fungicida.

[009] O uso de micro-organismos capazes de restaurar a compo-sição correta da microflora vaginal é conhecido.

[0010] No entanto, o modo de distribuição dos micro-organismosao meio vaginal representa um fator muito crítico. Sabe-se, por exem- plo, que cápsulas de gelatina moles, geralmente conhecidas como soft gel, requer suspensão do componente probiótico em uma matriz oleoso a qual, após aplicação do produto, tende a constituir uma bar- reirafísica capaz de reduzir ou inibir quase totalmente a capacidade do referido componente probiótico de colonizar a mucosa vaginal. Além disso, a matriz oleosa poderia exercer um efeito tóxico sobre os micro-organismos, em um grau tal de forma a reduzir consideravel- mente o número e viabilidade dos mesmos.

[0011] Por exemplo, as cápsulas podem levar um tempo relativa-mente longo para dissolver e, em qualquer caso, elas não asseguram uma dispersão adequada do ingrediente ativo por todo o ambiente va- ginal.

[0012] Por exemplo, suspensões hidrofílicas ou hidrogéis reque-rem um modo de aplicação que não é fácil nem muito confortável. De fato, os indivíduos devem permanecer deitados durante pelo menos 20-30 minutos após aplicação das mesmas, de modo a evitar que o produto vaze.

[0013] Finalmente, comprimidos vaginais tradicionais representamum problema de elevada taxa de mortalidade dos micro-organismos durante sua fabricação e, além disso, não são capazes de garantir uma distribuição adequada de micro-organismos ao ambiente vaginal.

[0014] Assim, continua a existir uma necessidade por uma compo-sição capaz de distribuição de bactérias probióticas ao ambiente vagi- nal e que assegure uma dispersão/distribuição completa das mesmas.

[0015] Além disso, continua a existir uma necessidade por umaforma farmacêutica que possa ser facilmente administrada e seja prá- tica de usar.

[0016] Em particular, continua a existir uma necessidade por umacomposição que constitua uma alternativa válida à terapia com antibió- ticos e/ou fungicida e, ao mesmo, representa um aprimoramento em relação às formas de administração conhecidas.

[0017] O Requerente constatou, surpreendentemente, que umaformulação probiótica na forma de uma composição sólida preparada adequadamente é capaz de resolver os problemas que persistem na técnica anterior.

[0018] O objeto da presente invenção é uma composição eferves-cente na forma sólida, conforme apresentado na reivindicação inde- pendente anexa.

[0019] Outras modalidades preferidas da presente invenção sãoapresentadas nas reivindicações dependentes anexas.

[0020] A Tabela 1 mostra as cepas bacterianas testadas pelo Re-querente e que constituem o objetivo da presente invenção.

[0021] A Tabela 2 mostra um exemplo de uma composição deacordo com a invenção.

[0022] A Tabela 3 mostra os dados de mortalidade para as bacté-riasprobióticas de acordo com as diferentes pressões exercidas e es- tabilidade dos comprimidos (expressos como a meia-vida da carga bacteriana) após 2 anos de armazenamento a 25 °C.

[0023] A Tabela 4 mostra uma composição que não está em con-formidade com a presente invenção.

[0024] A Tabela 5 mostra uma composição na forma de comprimi-do que não está em conformidade com a presente invenção.

[0025] O requerente conduziu atividade de pesquisa experimentallonga e intensa com o objetivo de identificar a melhor composição qua- litativa e quantitativa para o preparo da composição da presente in- venção, bem como as condições operacionais para o preparo da mesma.

[0026] A composição da presente invenção é uma composiçãoefervescente. A efervescência é em virtude da formação de dióxido de carbono que ocorre quando um sistema de ácido-base compreenden- do um ácido orgânico e um sal do ânion de carbonato e/ou bicarbonato entra em contato com a água/umidade presente no interior da cavida- de vaginal. O sistema de ácido-base é capaz de manter o pH intrava- ginal estável dentro de um intervalo compreendido de 3 a 5,5, de pre- ferência de 4 a 5. Vantajosamente, o pH intravaginal está compreendi- do de 4,2 a 4,5.

[0027] A composição da presente invenção é uma composição efervescente na forma sólida. Em uma modalidade preferida, o ácido orgânico está em uma forma sólida, de preferência um pó ou grânulos, e o sal do ânion de carbonato e/ou bicarbonato está em uma forma sólida, de preferência um pó ou grânulos.

[0028] Em uma modalidade preferida, a composição efervescentena forma sólida está na forma de um comprimido, óvulo, pastilha ou grânulos.

[0029] O ácido orgânico é selecionado do grupo que consiste emou, alternativamente, que compreende ácido cítrico, ácido málico, áci- dotartárico, ácido fumárico, ácido láctico e misturas dos mesmos. Em uma modalidade preferida, o ácido orgânico é ácido cítrico.

[0030] O Requerente constatou que o uso de ácido adípico e/ouácido ascórbico como o ácido orgânico presente no sistema de ácido- base mencionado acima provoca um efeito tóxico sobre os micro- organismos, resultando na mortalidade dos mesmos já no momento de preparo da composição na forma sólida, por exemplo, como um pó ou grânulos. No caso de preparo de um comprimido, a referida mortalida- de ocorre após os componentes serem misturados para obter uma composição na forma sólida, por exemplo, como um pó ou grânulos, mas antes de compressão. Portanto, a composição da presente inven- ção não contém ácido adípico e/ou ácido ascórbico.

[0031] O sal do ânion de carbonato e/ou bicarbonato é seleciona-do do grupo que consiste em ou, alternativamente, que compreende: carbonato de sódio, carbonato de potássio, carbonato de cálcio, car- bonato de magnésio, carbonato de glicina de sódio, bicarbonato de sódio, bicarbonato de potássio, bicarbonato de cálcio, bicarbonato de magnésio, lactato de sódio, lactato de potássio, lactato de carbonato e misturas dos mesmos. De preferência, o referido sal é selecionado do grupo que consiste em ou, alternativamente, que compreende um sal do ânion de bicarbonato. Em uma modalidade preferida, o sal é bicar- bonato de sódio.

[0032] Em uma modalidade preferida, a quantidade do sal doânion de carbonato ou bicarbonato é compreendida de 1 a 15% em peso em relação ao peso total da composição. De preferência, ela é compreendida de 3 a 13% em peso em relação ao peso total da com- posição, ainda mais preferivelmente, está compreendida entre 4 a 12% em peso em relação ao peso total da composição. Vantajosamente, ela está compreendida entre 5 a 10% em peso em relação ao peso total da composição.

[0033] Em uma modalidade preferida, a quantidade de bicarbonatode sódio está compreendida de 1 a 15% em peso em relação ao peso total da composição. De preferência, ela está compreendida de 3 a 13% em peso em relação ao peso total da composição, ainda mais preferivelmente, está compreendida entre 5 a 10% em peso em rela- ção ao peso total da composição. Vantajosamente, ela está compre- endida entre 5 a 10% em peso em relação ao peso total da composi- ção.

[0034] Em uma modalidade preferida, o sistema de ácido-baseconsiste em ácido cítrico e bicarbonato de sódio em uma quantidade, em peso, conforme descrito acima.

[0035] O Requerente constatou que, quando o sal do ânion decarbonato ou bicarbonato, por exemplo, bicarbonato de sódio, é mais do que 15% em peso em relação ao peso total da composição, um efeito tóxico se manifesta contra os micro-organismos em virtude de um efeito osmótico.

[0036] A quantidade do ácido orgânico a ser usado no sistema deácido-base é calculada uma vez que a quantidade do sal do ânion de carbonato ou bicarbonato usado de acordo com as concentrações descritas acima tenha sido determinada. A quantidade de ácido orgâ- nico usada é estequiométrica e é uma função do sal usado e serve unicamente para fins de formação de dióxido de carbono. Na presença do referido sal, o ácido orgânico é capaz de desenvolver efervescência em virtude de formação de dióxido de carbono após hidratação no in- terior da cavidade vaginal.

[0037] O comprimido efervescente, adequadamente formulado, écapaz de distribuir uma grande população de bactérias lácticas para rápida colonização de todo o epitélio e mucosa vaginal. Graças ao sis- tema efervescente estabilizado e pH controlado, as bactérias lácticas são distribuídas à cavidade vaginal em uma boa condição fisiológica, a qual permite que as mesmas cresçam e se multipliquem.

[0038] Vantajosamente, a composição da presente invenção, naforma de um comprimido efervescente, é capaz de garantir uma distri- buição ótima das bactérias sobre a mucosa vaginal. Além disso, a re- feridacomposição é capaz de garantir e manter um ambiente anaeró- bio ou microaerofílico dentro da cavidade vaginal graças à formação de dióxido de carbono.

[0039] O Requerente constatou que uma mistura compreendendoou, alternativamente, que consiste em [celulose microcristalina : arabi- nogalactana], de preferência em uma proporção em peso de 1:1 a 3:1, é capaz de preservar o número e viabilidade das células dos micro- organismos quando desejado para obter um comprimido a partir da composição na forma de pó.

[0040] Em uma modalidade preferida, a composição da presenteinvenção compreende uma mistura contendo [celulose microcristalina : arabinogalactana] em uma proporção em peso de 1:1 a 3:1.

[0041] De preferência, arabinogalactana derivada de plantas éusada. Vantajosamente, arabinogalactana derivado de larix (por exemplo FiberAid® da série de produtos Larex®distribuídos pela Lon- za Inc. EUA) é usada.

[0042] O Requerente constatou igualmente que o uso de amido de milho como a substância de agregação na composição da presente invenção proporciona resultados insatisfatórios quando a composição na forma de pó é usada para preparar comprimidos, uma vez que os comprimidos obtidos após compressão do pó são revestidos.

[0043] Uma mistura que compreende ou, alternativamente, queconsiste em [celulose microcristalina : arabinogalactana] em uma pro- porção em peso de 1:1 a 1:3, pelo contrário, permite que os comprimi- dos sejam obtidos sem ocorrência de revestimento.

[0044] Portanto, os comprimidos obtidos a partir da composição dapresente invenção não contêm amido de milho. Em vez de amido de milho, uma mistura contendo [celulose microcristalina : arabinogalac- tana] é usada em uma proporção em peso de preferência compreendi- da de 1:1 a 3:1.

[0045] A celulose microcristalina pode ser parcial ou completamen-tesubstituída por celulose em forma de pó. Tanto celulose microcrista- lina quanto celulose na forma de pó estão presentes na lista de aditi- vosalimentícios como E460.

[0046] Arabinogalactana é um biopolímero que consiste em mo-nômeros de arabinose e galactose. Há dois tipos de arabinogalacta- nas: aquelas derivadas de plantas e aquelas de origem microbiana.

[0047] A celulose microcristalina (ou celulose na forma de pó) estápresente em uma quantidade compreendida de 2 a 45% em peso em relação ao peso total da composição, de preferência de 5 a 25%.

[0048] A arabinogalactana está presente em uma quantidadecompreendida de 5 e 30% em peso em relação ao peso total da com- posição, de preferência de 10 a 20%.

[0049] De preferência, a composição da presente invenção podecompreender ainda pelo menos um componente adicional selecionado do grupo compreendendo: carbóxi metil celulose de sódio, hidrogen fosfato de cálcio anidro e hidróxi propil metil celulose.

[0050] O referido pelo menos um componente adicional está pre-sente na composição da presente invenção em uma quantidade total que varia de 3 a 70% peso/peso, mais preferivelmente de 6 e 40% pe- so/peso e, ainda mais preferivelmente, de 10 a 25% peso/peso em re- lação ao peso total da composição.

[0051] De acordo com uma modalidade preferida da invenção, acomposição da presente invenção compreende ainda estearato de magnésio em uma quantidade de 0,5% a 7% peso/peso, de preferên- cia de 1% a 3,5% peso/peso em relação ao peso total da composição.

[0052] De acordo com uma modalidade preferida da invenção, acomposição da presente invenção pode ainda compreender dióxido de silício em uma quantidade de 0,5% a 4% peso/peso, de preferência de 1% a 2% peso/peso em relação ao peso total da composição.

[0053] De acordo com uma modalidade preferida da invenção, acomposição da presente invenção pode ainda compreender palmitato de sacarose em uma quantidade de 0,5% a 7% peso/peso, de prefe- rência de 1% a 3,5% peso/peso em relação ao peso total da composi- ção.

[0054] De acordo com uma modalidade preferida da invenção, acomposição da presente invenção pode ainda compreender uma mis- tura de glicerídeos (gorduras saponificáveis) em uma quantidade de 0,5% a 10% peso/peso, de preferência 2% a 7% peso/peso em rela- ção ao peso total da composição.

[0055] De acordo com uma modalidade preferida da invenção, acomposição pode compreender ainda de 0,5% a 10% peso/peso, de preferência de 1% a 5% peso/peso de éster de sacarose, os percentu- ais sendo expressos em relação ao peso total da composição.

[0056] A composição da invenção é para aplicações vaginais parao tratamento de infecções vaginais, tais como vaginite, vaginose, can- didíase, gonorreia, herpes e úlcera venérea.

[0057] Em uma modalidade preferida, a composição está na formade um comprimido. Alternativamente, o comprimido pode ser revestido com um ou mais materiais poliméricos conhecidos na técnica.

[0058] Em relação à população microbiana das formulações deacordo com a presente invenção, é vantajoso usar micro-organismos probióticos, usados individualmente ou em mistura, mesmo um que consiste em diferentes gêneros ou espécies.

[0059] Micro-organismos probióticos são, por definição, micro-organismos, predominantemente bactérias de origem humana, os quais são capazes de induzir a efeitos benéficos se tomados regular- mente em uma quantidade suficiente e durante uma quantidade de tempo adequada.

[0060] A composição da presente invenção compreende pelo me-nos uma cepa de bactérias probióticas tendo a capacidade de reduzir e/ou eliminar a presença de patógenos selecionados do grupo que compreende: Candida albicans, Candida glabrata, Candida parapsilo- sis, Candida krusei, Candida tropicalis, Gardnerella vaginalis , Tricho- monas vaginalis, Neisseria gonorrhoeae, Escherichia coli, Herpex Simplex e Haemophilus ducreyi.

[0061] De preferência, a referida cepa bacteriana pertence a pelomenos uma espécie selecionada do grupo que consiste em: Lactobaci- llus plantarum, Lactobacillus pentosus, Lactobacillus casei, Lactobaci- llus casei ssp. paracasei, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus aci- dophilus, Lactobacillus delbrueckii, Lactobacillus delbrueckii ssp. bul- garicus, Lactobacillus delbrueckii ssp. delbrueckii, Lactobacillus fer- mentum, Lactobacillus gasseri, Lactobacillus reuteri, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium breve, Bifidobacte- rium animalis ssp. lactis, Bifidobacterium adolescentis, Bifidobacterium pseudocatenulatum, Bifidobacterium catenulatum ou Bifidobacterium infantis.

[0062] Dentre as espécies bacterianas mencionadas acima, foimostrado que as cepas bacterianas listadas na Tabela 1 são particu- larmente preferidas.

[0063] Em uma modalidade preferida, as cepas bacterianas sãoselecionadas dentre: Lactobacillus salivarius CRL 1328, Lactobacillus paracasei CRL 1289, Lactobacillus gasseri CRL 1259, Lactobacillus crispatus CRL 1251, Lactobacillus crispatus CRL 1266, Lactobacillus acidphilus CRL 1294, Lactobacillus paracasei LPC 00, Lactobacillus plantarum LP 02 e Lactobacillus fermentum LF 10.

[0064] Em uma modalidade preferida, a composição da presenteinvenção, de preferência na forma de um comprimido, compreende pelo menos duas cepas selecionadas do grupo mencionado acima.

[0065] Em uma modalidade preferida, a composição da presenteinvenção, de preferência na forma de um comprimido, compreende pelo menos três cepas selecionadas do grupo mencionado acima.

[0066] Em uma modalidade preferida, a composição da presenteinvenção, de preferência na forma de um comprimido, compreende pelo menos quatro cepas selecionadas do grupo mencionado acima.

[0067] As cepas selecionadas entre: Lactobacillus salivarius CRL1328, Lactobacillus paracasei CRL 1289, Lactobacillus gasseri CRL 1259, Lactobacillus crispatus CRL 1266 e Lactobacillus fermentum LF 10 demonstraram ser vantajosas.

[0068] Nos comprimidos de acordo com a invenção, os micro-organismos, de preferência, usados na forma de uma cultura liofilizada tendo uma contagem viável geralmente compreendida entre 10 e 200 mil milhões de unidades de formação de colônia (Colony Forming Unit - CFU)/g estão, de preferência, presentes em uma quantidade de 0,5 a 20 % peso/peso, de preferência 1 a 15% peso/peso, ainda mais prefe- rivelmente 3 a 10% peso/peso em relação ao peso total do comprimi- do.

[0069] Em uma das modalidades preferidas, de forma a aumentara eficácia probiótica das formulações de acordo com a presente inven- ção, componentes prebióticos específicos são introduzidos na mistura em pó, de modo que uma composição simbiótica seja obtida. O com- ponenteprebiótico é geralmente uma mistura não digerível de nature- zasacarídica, pelo menos parcialmente solúvel em água ou em uma solução aquosa, a qual estimula o crescimento e/ou atividade de uma ou mais cepas bacterianas probióticas, conforme descrito acima. Entre estes prebiótico, preferidos são fibras dietéticas.

[0070] De preferência, a referida fibra prebiótica é selecionada dogrupo que compreende: os fruto-oligossacarídeos (FOS), galacto- oligossacarídeos (GOS), transgalacto-oligossacarídeos (TOS), xilo- oligossacarídeos (XOS), oligossacarídeos de quitosana (COS), α- galactosídeos (tais como rafinose e estaquiose), pectinas, gomas, go- mas parcialmente hidrolisadas, inulina, psyllium, goma arábica, alfar- roba, aveia ou fibras de bambu, fibras de cítricos e, em geral, fibras que contêm um polímero solúvel e uma porção insolúvel em uma pro- porção variável de uns para os outros.

[0071] Vantajosamente, a referida fibra prebiótica é selecionadadentre fruto-oligossacarídeos (FOS), galacto-oligossacarídeos (GOS) e xilo-oligossacarídeos (XOS). Estas fibras não são usadas por levedu- ras do gênero Candida o que, assim, confere uma vantagem competi- tivaàs cepas bacterianas presentes na composição da presente in- venção.

[0072] De preferência, o componente prebiótico está presente nacomposição em uma quantidade de até 70% peso/peso, de preferên- cia compreendida de 5 a 50% peso/peso, ainda mais preferivelmente de 10 a 30% peso/peso em relação ao peso total da composição.

[0073] Em uma modalidade preferida, a composição de acordocom a invenção pode conter componentes ativos adicionais, por exemplo, vitaminas, minerais, extratos vegetais ou outros compostos com um efeito que é sinergístico com ou complementar àquele da po- pulação de micro-organismos presentes nas formulações de acordo com a invenção.

[0074] De preferência, os referidos componentes ativos adicionaisestão presentes na composição em uma quantidade de até 70% pe- so/peso, de preferência compreendida de 0,5 a 40% peso/peso, ainda mais preferivelmente de 1 a 20% peso/peso em relação ao total em peso da composição.

[0075] A combinação de excipientes tecnológicos de compressãoe efervescência de acordo com a presente invenção assegura uma coesão adequada dos pós do comprimido e confere a cinética de libe- ração desejada dos ingredientes ativos após a ingestão do mesmo.

[0076] A mistura dos vários componentes, geralmente na forma depó, pode ser feita adicionando os componentes em qualquer ordem, tendo o cuidado de adicionar a cultura de micro-organismos, de prefe- rência na forma de um liofilizado, como o último ingrediente, para pre- venir a possibilidade que um tempo de mistura excessivo possa provo- car um choque mecânico na parede das células bacterianas, com con- sequente estabilidade ruim e reduzida do produto final.

[0077] Formulações produzidas de acordo com o método da pre-sente invenção são caracterizadas por uma excelente fluidez, um pa- râmetro que favorece o carregamento uniforme das matrizes (isto é, o espaço destinado a acomodar a quantidade específica de pó a ser compactado) nas máquinas de compressão. As referidas máquinas de compressão compreendem, tipicamente, um dispositivo para o carre- gamento das matrizes (geralmente representado por um alimentador para distribuição da mistura em pó) e um disco de metal de raio ade- quado, em cuja espessura as matrizes em si são obtidas; estes estão presentes em número variável dependendo da máquina e a etapa de compressão do pó ocorre aí graças ao movimento simultâneo sinergís- tico de duas partes móveis da máquina, definidas como extrusoras.

[0078] Durante a etapa de compressão, a extrusora inferior define,com a sua posição, o volume da matriz (e, assim, a quantidade de pó carregado de cada vez), enquanto que a extrusora superior, posicio- nada do lado de fora da matriz durante carregamento da mesma com a mistura em pó, é capaz de ser abaixada durante a etapa de com- pressão e entra em contato com o pó presente na matriz, assim, im- pondo,graças à força exercida, uma deformação mecânica mais ou menos acentuada sobre as partículas que constituem o pó. Ao final da etapa de compressão, a extrusora superior sobe, assim, se afastando da matriz e, subsequentemente, a extrusora inferior também sobe, ex- pelindo o comprimido recém-formado da matriz.

[0079] As referidas máquinas de compressão compreendem aindauma série de dispositivos para controlar os principais parâmetros de operação (posição da extrusora inferior no início do ciclo de compres- são, menor posição atingida pelo extrusora superior durante o ciclo de compressão, velocidade de rotação do disco na qual as matrizes estão presentes e assim por diante).

[0080] Há máquinas de compressão alternadas e rotativas, deacordo com os modos de funcionamento geral da máquina e, conse- quentemente, o número de comprimidos que se é capaz de produzir em uma dada unidade de tempo. Comprimidos podem, assim, ser pro- duzidos usando máquinas de compressão conhecidos na técnica e usando extrusoras de formato variável, de preferência extrusoras con- vexas e ovais redondas de raio duplo.

[0081] A força de compressão aplicada durante fabricação é avali-ada por meio de quantificação, com um testador de dureza, da força necessária para quebrar um comprimido. A referida força é medida em Kp (Kiloponds) (1 Kp = 9,807 Newtons (N)). O efeito negativo da com- pressão sobre a população de micro-organismos se manifesta tanto quando as forças aplicadas são elevadas, por exemplo, em comprimi- dos com uma dureza de 10-12 Kp como quando elas são baixas tal como, por exemplo, em comprimidos com uma dureza de 5-6 Kp. A desvantagem de uso de forças elevadas é uma maior redução no nú- mero de microrganismos enquanto que, com baixas forças, uma coe- são reduzida do comprimido é geralmente obtida. Vantajosamente, os comprimidos da presente invenção mostram uma força de compressão compreendida de 5 a 12 Kp, dependendo do tipo de comprimido que se deseja obter.

[0082] Em testes de fabricação sobre comprimidos contendo L.paracasei LPC 00, L. acidphilus LA 02 e L. salivarius CRL 1328 (Tabe- la 2), o Requerente obteve resultados muito positivos, tanto em termos de sobrevivência quanto em termos de subsequente estabilidade.

[0083] Em particular, uma taxa de mortalidade que varia de 4 a15% foi observada quando a força de compressão aplicada foi tal de modo a obter comprimidos com uma dureza compreendida de 5 a 6 Kp e uma mortalidade variando de 10 a 25% quando a força de compres- são aplicada foi tal de modo a obter comprimidos com uma dureza compreendida de 10 a 12 Kp. Outra vantagem do método de acordo com a invenção é que este permite a produção de comprimidos sufici- entemente coesos mesmo em baixas forças de compressão, por exemplo, comprimidos com uma dureza de 5-6 kp.

[0084] Os comprimidos preparados de acordo com a presente in-venção foram testados para avaliar o tempo de desintegração de acordo com a Farmacopeia Europeia, Ed.. X, ref. 2.9.1. A friabilidade dos comprimidos não revestidos foi testada de acordo com a ref. 2.9.7 e a resistência ao esmagamento de acordo com a ref. 2.9.8.

[0085] A Tabela 2 mostra um exemplo de uma composição deacordo com a invenção.

[0086] A Tabela 3 mostra os dados de mortalidade para as bacté-riasprobióticas (composição mostrada na Tabela 2), de acordo com as diferentes pressões exercidas e a estabilidade dos comprimidos (ex- pressa como a meia-vida da carga bacteriana) após 2 anos de arma- zenamento a 25 °C dos mesmos. Os comprimidos obtidos com as for- mulações de acordo com a invenção tinham uma espessura de cerca de 7,7 mm no caso de comprimidos com um alto grau de dureza e cer- ca de 8,4 mm no caso de comprimidos com baixo grau de dureza.

[0087] Na Tabela 3, a estabilidade é expressa como a meia-vidado componente probiótico da formulação, ou seja, o tempo que decor- re antes da contagem de células viáveis inicial seja reduzido para me- tade.

[0088] O seguinte também foi medido: (1) Número de células viáveis a 1 x 109CFU/g de pó espe- rado no tempo zero (2) Número de células viáveis a 1 x 109CFU/g de pó encon- trado no tempo zero (3) Mortalidade % em virtude de compressão (4) Número de células viáveisa 1 x 109CFU/comprimido após 2 anos a 25 °C (5) Meia-vida em dias

[0089] Os dados acima foram obtidos por meio de avaliação do número de bactérias probióticas presentes na composição em pó e na composição após compressão usando o método de contagem de pla- casviáveis, de acordo com métodos conhecidos por aqueles versados na técnica.

[0090] No caso da composição em pó, em uma quantidade com-preendida de 1 e 4 gramas de amostra foi ressuspensa em um volume adequado de um meio líquido estéril, em geral, uma solução salina de cloreto de sódio a 0,85%, à qual peptona bacteriológica é adicionada em uma proporção de 1 g/litro.

[0091] Após dissolução do pó e subsequente homogeneizaçãocom um instrumento acionado a pistão apropriado, o número de célu- las/mL é reduzido por meio de subsequentes diluições seriais de base 10.

[0092] Na prática, 1 mL da diluição mais concentrada é transferidode cada vez, usando uma pipeta estéril, para 9 mL de diluente; esta operação é realizada uma série de vezes que são suficientes para le- var a quantidade de micro-organismos presentes por mL de diluente para um número compreendido de 10 a 300 de modo que, após sua transferência para uma placa de Petri e a adição de um meio de cultu- ra em ágar adequado, eles formem colônias separadas e, assim, con- táveis.

[0093] No caso dos comprimidos, foi observado um protocolo oqual prevê trituração prévia de três a cinco comprimidos e continuação da análise, conforme descrito acima, quanto à composição de pó.

[0094] Os dados experimentais demonstram uma baixa mortalida-de, tanto na forma de comprimidos com um alto grau de dureza (cerca de 16,4% da população inicial) e naqueles com um menor grau de du- reza (cerca de 8,2% da população inicial). Um outro aspecto vantajoso da composição da presente invenção é estabilidade aprimorada, ao longo do tempo, dos micro-organismos probióticos (componente pro- biótico) presentes na mesma comparado com a estabilidade de uma formulação típica da técnica anterior. Essa vantagem se deve ao uso de uma mistura que contém [celulose microcristalina : arabinogalacta- na] em uma proporção em peso compreendida, de preferência, de 1:1 a 3:1. Essa mistura é capaz de limitar consideravelmente os danos mecânicos provocados às células bacterianas probióticas pela etapa de compressão e permite que os comprimidos sejam obtidos sem ocorrência de revestimento.

[0095] O Requerente constatou que a meia-vida do componenteprobiótico na composição de pó e nos comprimidos de dureza variável fabricados com uma formulação de acordo com a invenção são muito similares, demonstrando o fato de que os componentes tecnológicos usados são capazes de minimizar o dano mecânico causado pela eta- pa de compressão.

[0096] Vantajosamente, os comprimidos de acordo com a inven-ção exibem uma alta taxa de sobrevivência dos micro-organismos pro- bióticos mesmo após a etapa de compressão.

[0097] Um outro aspecto vantajoso é a capacidade de liberar dió-xido de carbono à medida que os comprimidos desintegram, resultan- do na criação de um ambiente anaeróbio ou microaerofílico particular- mentefavorável para a colonização vaginal pelos probióticos usados.

[0098] A efervescência é ainda capaz de assegurar uma distribui-ção adequada e homogênea do ingrediente ativo probiótico ao ambi- ente vaginal mediante aumento da eficácia de colonização.

[0099] As composições da presente invenção tornam possível ob-ter comprimidos que contêm micro-organismos probióticos que são eficazes e estáveis ao longo do tempo, mesmo em temperaturas não refrigeradas, porque os componentes que constituem a composição foram escolhidos e selecionados com o objetivo de reduzir a mortali- dade em virtude de mistura e a mortalidade em virtude de compressão sem prejudicar a coesão do pó. Por este motivo, a composição da pre- sente invenção, de preferência na forma de um comprimido, não con- tém nem ácido adípico nem ácido ascórbico, a quantidade do sal do ânion de carbonato ou bicarbonato presente é menos de 15%, em pe- so em relação ao peso total da composição e uma mistura de celulose microcristalina e arabinogalactana é usada em vez de amido de milho.

[00100] O Requerente chegou a esses resultados partindo de uma composição que demonstrou ser inadequada (Tabela 4).

[00101] A composição da Tabela 4 mostra: mortalidade de 80,8% em virtude de mistura, mortalidade de 40,5% em virtude de compres- são e uma mortalidade global (mistura + compressão) de 88,6%.

[00102] A composição da Tabela 4 mostra mortalidade acentuada já ao nível de pó, antes de compressão. O pH de dissolução (em solução salina em uma proporção de 1:10) não é um problema, uma vez que ele é igual a 5,22 para a primeira formulação e 5,53 para a segunda.

[00103] Constatou-se que ácido adípico é tóxico. Mas esta toxicida- de responde para apenas uma determinada parte da mortalidade ob- servada (cerca de 60% da mortalidade total). Constatou-se que o áci- doascórbico é tóxico. Mas esta toxicidade é responsável por uma ou- tra parte da mortalidade. Remoção de ácido ascórbico da composição da Tabela 4 reduz a mortalidade de 73,8 para 26,7%. Ácido adípico por si só é tóxico em qualquer caso (45,8% em um pH de 4,24); sua toxicidade parece aumentar na presença de ácido ascórbico. Ácido ascórbico, assim, parece mostrar uma toxicidade sinergística com aquela do ácido adípico.

[00104] Contudo, é importante notar que a soma da toxicidade em virtude do ácido adípico e ácido ascórbico não leva em conta a morta- lidade observada.

[00105] Por esta razão, o Requerente investigou a presença de ou- tros componentes capazes de ter um efeito tóxico com o objetivo de justificar a toxicidade total observada na composição da Tabela 4.

[00106] Portanto, algum outro componente (além do pH, o qual já foi considerado) deve justificar a toxicidade restante da mesma manei- ra que o ácido adípico e ácido ascórbico.

[00107] Um grau de mortalidade foi determinado como sendo em virtude da pressão osmótica, conferida pelo bicarbonato presente em uma quantidade excessiva. Essa mortalidade revelou ser igual a cerca de 20%. Ácido adípico, ácido ascórbico e os efeitos osmóticos media- dos pelo bicarbonato são responsáveis pela toxicidade observada. Bi- carbonato em si não é tóxico: ele se torna assim apenas em virtude do efeito osmótico.

[00108] Portanto, uma composição (Tabela 5) foi preparada sem adição de ácido adípico, ácido ascórbico e com uma quantidade de ânion de bicarbonato (por exemplo, bicarbonato de sódio) de menos de 15% em peso em relação ao peso total da composição.

[00109] Por exemplo, 84 mg de bicarbonato de sódio constituem um milimol e o CO2 que é liberado ocupa um volume total de 25,4 mL a 37 °C e sob pressão atmosférica. A quantidade de ácido cítrico foi esco- lhida de forma tal a garantir liberação completa do CO2 do bicarbonato de sódio em valores de pH observados após a dissolução do compri- mido.

[00110] A composição da Tabela 5 mostrou problemas quando submetida a uma etapa de compressão de forma a preparar os com- primidos.

[00111] O pó (Tabela 5) mostrou pobres propriedades coesivas em virtude do uso de amido de milho em uma formulação com um baixo teor de umidade. Todos os comprimidos produzidos pela máquina de compressão foram revestidos mesmo antes de serem passados atra- vés do dispositivo removedor de poeira.

[00112] Após este teste de compressão, o Requerente procedeu à substituição do amido de milho por uma mistura que contém [celulose microcristalina : arabinogalactana] em uma proporção em peso, de preferência, compreendida de 1:1 a 3:1. Tabela 1

Tabela 2

Tabela 3

Tabela 4: composição inadequada

Tabela 5: Composição de 1.300 mg

Claims (7)

1. Comprimido efervescente na forma sólida para uso em aplicações vaginais para tratamento de infecções vaginais, caracteri- zada pelo fato de que compreende: - um sistema de ácido-base, que compreende bicarbonato de sódio e ácido cítrico; o referido bicarbonato estando presente em uma quantidade compreendida de 1 a 15% em peso em relação ao peso total da composição, com a condição de que a dita composição é isenta de ácido adípico ou ácido ascórbico; - uma mistura compreendendo celulose microcristalina e arabinogalactana, sendo que a dita celulose microcristalina e a dita arabinogalactana estão presentes em uma proporção em peso com- preendida de 1:1 a 3:1; - pelo menos uma cepa bacteriana probiótica apresentando a capacidade de reduzir e/ou eliminar a presença de patógenos sele- cionados do grupo que compreende: Candida albicans, Candida gla- brata, Candida parapsilosis, Candida krusei, Candida tropicalis, Gar- dnerella vaginalis, Trichomonas vaginalis, Neisseria gonorrhoeae, Es- cherichia coli, Herpes simplex and Haemophilus ducreyi.

2. Comprimido, de acordo com a reivindicação 1, caracteri- zado pelo fato de que o ácido orgânico é selecionado do grupo que consiste em ácido cítrico, ácido málico, ácido tartárico, ácido fumárico, ácido láctico e misturas dos mesmos, de preferência, o ácido orgânico é ácido cítrico.

3. Comprimido, de acordo a reivindicação 1 ou 2, caracteri- zado pelo fato de que o sal do ânion de carbonato e/ou bicarbonato é selecionado do grupo que consiste em: carbonato de sódio, carbonato de potássio, carbonato de cálcio, carbonato de magnésio, carbonato de glicina de sódio, bicarbonato de sódio, bicarbonato de potássio, bi- carbonato de cálcio, bicarbonato de magnésio, lactato de sódio, lactato de potássio, carbonato de lactato de sódio e misturas dos mesmos, de preferência, ele é um sal do ânion de bicarbonato.

4. Comprimido, de acordo com a reivindicação 3, caracteri- zada pelo fato de que o sal do ânion de carbonato e/ou bicarbonato está presente em uma quantidade compreendida de 3 a 13% em peso, em relação ao peso total do comprimido, de preferência, em uma quantidade compreendida de 4 a 12% em peso, em relação ao peso total do comprimido, ainda mais preferivelmente em uma quantidade compreendida de 5 a 10% em peso, em relação ao peso total do com- primido.

5. Comprimido, de acordo com qualquer uma das reivindi- cações 1 a 4, caracterizada pelo fato de que o sistema de ácido-base consiste em bicarbonato de sódio e ácido cítrico, e sendo que o bicar- bonato de sódio está presente em uma quantidade compreendida de 3 a 13% em peso, em relação ao peso total do comprimido, de preferên- cia, em uma quantidade compreendida de 4 e 12% em peso, em rela- ção ao peso total do comprimido, ainda mais preferivelmente, em uma quantidade compreendida de 5 a 10% em peso, em relação ao peso total do comprimido.

6. Comprimido, de acordo com qualquer uma das reivindi- cações 1 a 5, caracterizado pelo fato de que a referida pelo menos uma cepa bacteriana probiótica pertence a pelo menos uma espécie selecionada do grupo que consiste em: Lactobacillus plantarum, Lac- tobacillus pentosus, Lactobacillus casei, Lactobacillus casei ssp. para- casei, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus acidophilus, Lactobaci- llus delbrueckii, Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus,Lactobacillus delbrueckii ssp. delbrueckii, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus gasseri, Lactobacillus reuteri, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium animalis ssp. lactis, Bifidobacterium adolescentis, Bifidobacterium pseudocatenulatum, Bi- fidobacterium catenulatum or Bifidobacterium infantis; said at least one bacterial strain is preferably selected from among: Lactobacillus saliva- rius CRL 1328, Lactobacillus paracasei CRL 1289, Lactobacillus gas- seri CRL 1259, Lactobacillus crispatus CRL 1251, Lactobacillus crispa- tus CRL 1266, Lactobacillus acidophilus CRL 1294, Lactobacillus pa- racasei LPC 00, Lactobacillus plantarum LP 02 e Lactobacillus fermen- tum LF LF 10.

7. Comprimido, de acordo com qualquer uma das reivindi- cações 1 a 7, caracterizado pelo fato de que é para o tratamento de vaginite, vaginose, candidíase, gonorreia, herpes e úlcera venérea.