AT402822B - Sdk peptide, verfahren zu deren herstellung und sie enthaltende therapeutische zusammensetzungen - Google Patents

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AT402822B AT0053290A AT53290A AT402822B AT 402822 B AT402822 B AT 402822B AT 0053290 A AT0053290 A AT 0053290A AT 53290 A AT53290 A AT 53290A AT 402822 B AT402822 B AT 402822B
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Description

AT 402 822 B
Die Erfindung betrifft SDK-Peptide, ein Verfahren zu ihrer Herstellung und sie enthaltende therapeutisch wirksame Massen.
Die Abkürzungen in dieser Beschreibung folgen den 1983-er Empfehlungen für Nomenklatur und Symbole für Aminosäurepeptide der IUPAC-IUB gemeinsamen Kommission für Biochemische Nomenklatur (Eur. J. Biochem. 138, 9-37 (1984)). Zum leichteren Verständnis sind einige der Abkürzungen unten angegeben:
Asp oder D Asparaginsäure Ser oder S Serin Lys oder K Lysin Pro oder P Prolin Thr oder T Threonin Z Benzyloxycarbonyl Boc t-Butoxycarbonyl OBzl Benzyloxy Ac Acetyl
Andere Abkürzungen sind: DMF Dimethylformamid DCM Dichloromethan NMM N-Methylmorpholin TFA Trifluoressigsäure TLC Dünnschichtchromatographie FAB schneller Atombeschuß
Die Erfindung betrifft Peptide der allgemeinen Formel I: H2N - W - Ser - Asp - Lys - X - OH, I worin X ein Pro- oder Lys-Rest oder eine Valenzbindung ist und W ein Thr- oder Pro-Rest oder eine Valenzbindung ist, mit der Maßgabe, daß, wenn X ein Pro-Rest ist, W auch ein Pro-Rest ist und therapeutisch annehmbare Salze hievon.
Gemäß weiterer Ausführungsformen der Erfindung ist das Peptid Ser-Asp-Lys (i)
Ser-Asp-Lys-Lys (ii)
Pro-Ser-Asp-Lys-Lys (iii)
Thr-Ser-Asp-Lys-Lys (iv)
Pro-Ser-Asp-Lys (v)
Thr-Ser-Asp-Lys (vi)
Pro-Ser-Asp-Lys-Pro (vii)
Diese Tripeptide (i), auf denen die anderen erfindungsgemäßen Peptide basieren, scheinen bis heute nicht isoliert oder präpariert worden zu sein. Es sind jedoch diese Aminosäuresequenzen, beispielsweise im Tetrapeptid, wie es in der W0-A1-88/00594 beschrieben ist, oder in verschiedenen lebenden Proteinen gefunden worden, beispielsweise Ser-Asp-Lys in Lymphocyt T Membranenprotein, wo seine Wirkung ersichtlich wird, wenn ein Teil des Lymphocytmarkierers, wie Lymphocyt CD2, sowohl als a- oder y-Subeinheit des Rezeptors, der die spezifische Sequenz aufweist, eine Position bezüglich gewisser spezifischer Rezeptoren des Lymphocyts einnimmt; diese Aminosäuresequenzen können auch in verschiedenen Proteinen gefunden werden, wie in Proteinen von Viren und auch in gewissen Proteinen des Komplements oder Tumornecrosisfaktors a.
Es war demgemäß von besonderem Interesse, die Wirksamkeit dieser spezifischen Aminosäuresequenzen zu erforschen und es wurde erfindungsgemäß festgestellt, dau sie aktive Rollen auf dem Gebiet der Immunomodulation spielen, wie es durch immunologische Berichte bestätigt wird.
Die Erfindung betrifft auch ein Verfahren zur Herstellung eines Peptids, das dadurch gekennzeichnet ist, daß man nacheinander auf herkömliche Weise kondensiert: die Aminosäure Boc Lys(Z)-OH und die Aminosäure X()-OH, um eine Verbindung der allgemeinen Formel (II)
Boc-Lys(Z)-X()-OH zu erhalten, dann die Aminosäure Boc Asp(OBzl)-OH und die obige Verbindung (II), worin die Boc-Gruppe abgespalten wurde, um eine Verbindung der allgemeinen Formel (III)
Boc Asp(OBzl)-Lys(Z)-X()-OH zu erhalten, dann die Aminosäure Boc Ser(Bzl)-OH und die oben genannte Verbindung (III), worin die Boc-Gruppe abgespalten wurde, um eine Verbindung der allgemeinen Formel (IV) 2 ΑΤ 402 822 Β
Die Erfindung betrifft SDK-Peptide, ein Verfahren zu ihrer Herstellung und sie enthaltende therapeutisch wirksame Massen.
Die Abkürzungen in dieser Beschreibung folgen den 1983-er Empfehlungen für Nomenklatur und Symbole für Aminosäurepeptide der IUPAC-IUB gemeinsamen Kommission für Biochemische Nomenklatur (Eur. J. Biochem. 138, 9-37 (1984)). Zum leichteren Verständnis sind einige der Abkürzungen unten angegeben:
Asp oder D Asparaginsäure Ser oder S Serin Lys oder K Lysin Pro oder P Prolin Thr oder T Threonin Z Benzyloxycarbonyl Boc t-Butoxycarbonyl OBzl Benzyloxy Ac Acetyl
Andere Abkürzungen sind: DMF Dimethylformamid DCM Dichloromethan NMM N-Methylmorpholin TFA Trifluoressigsäure TLC Dünnschichtchromatographie FAB schneller Atombeschuß
Die Erfindung betrifft Peptide der allgemeinen Formel I: H2N - W - Ser - Asp - Lys - X - OH, I worin X ein Pro- oder Lys-Rest oder eine Valenzbindung ist und W ein Thr- oder Pro-Rest oder eine Valenzbindung ist, mit der Maßgabe, daß, wenn X ein Pro-Rest ist, W auch ein Pro-Rest ist und therapeutisch annehmbare Salze hievon.
Gemäß weiterer Ausführungsformen der Erfindung ist das Peptid Ser-Asp-Lys (i)
Ser-Asp-Lys-Lys (ii)
Pro-Ser-Asp-Lys-Lys (iii)
Thr-Ser-Asp-Lys-Lys (iv)
Pro-Ser-Asp-Lys (v)
Thr-Ser-Asp-Lys (vi)
Pro-Ser-Asp-Lys-Pro (vii)
Diese Tripeptide (i), auf denen die anderen erfindungsgemäßen Peptide basieren, scheinen bis heute nicht isoliert oder präpariert worden zu sein. Es sind jedoch diese Aminosäuresequenzen, beispielsweise im Tetrapeptid, wie es in der WO-A1-88.00594 beschrieben ist, oder in verschiedenen lebenden Proteinen gefunden worden, beispielsweise Ser-Asp-Lys in Lymphocyt T Membranenprotein, wo seine Wirkung ersichtlich wird, wenn ein Teil des Lymphocytmarkierers, wie Lymphocyt CD2, sowohl als a- oder y Subeinheit des Rezeptors, der die spezifische Sequenz aufweist, eine Position bezüglich gewisser spezifischer Rezeptoren des Lymphocyts einnimmt: diese Aminosäuresequenzen können auch in verschiedenen Proteinen gefunden werden, wie in Proteinen von Viren und auch in gewissen Proteinen des Komplements oder Tumornecrosisfaktors a.
Es war demgemäß von besonderem Interesse, die Wirksamkeit dieser spezifischen Aminosäuresequenzen zu erforschen und es wurde erfindungsgemäß festgestellt, dau sie aktive Rollen auf dem Gebiet der Immunomodulation spielen, wie es durch immunologische Berichte bestätigt wird.
Die Erfindung betrifft auch ein Verfahren zur Herstellung eines Peptids, das dadurch gekennzeichnet ist, daß man nacheinander auf herkömliche Weise kondensiert: die Aminosäure Boc Lys(Z)-OH und die Aminosäure X()-OH, um eine Verbindung der allgemeinen Formel (II)
Boc-Lys(Z)-X()-OH zu erhalten, dann die Aminosäure Boc Asp(OBzl)-OH und die obige Verbindung (II), worin die Boc-Gruppe abgespalten wurde, um eine Verbindung der allgemeinen Formel (III)
Boc Asp(OBzl)-Lys(Z)-X()-OH zu erhalten, dann die Aminosäure Boc Ser(Bzl)-OH und die oben genannte Verbindung (III), worin die Boc-Gruppe abgespalten wurde, um eine Verbindung der allgemeinen Formel (IV) 2
AT 402 822 B
Acetylierung
Acetylierung wird durch Reaktion von Acetylimidazol auf das Trifluoracetat des durch Triäthylamin in DMF neutralisierte Amin durchgeführt.
Herstellung von Boc D(OBzl) K(z) 1
Der Ester des N-Hydroxysuccinimids des Boc D(OBzl) (1 Mol) wird in 2,5 ml DMF gelöst. K(Z) (1.1 eq.) in Suspension wird dieser Lösung zugefügt, auf ein Eisbad gebracht und 1.1 eq Triäthylamin wird unter Umrühren hinzugefügt. Das Rühren wird für 24 h fortgeführt. Die Reaktionsmischung wird unter reduziertem Druck verdampft. Der Rückstand wird mit Äthylacetat und einer Lösung von 0,05 N HCl behandelt. Die organische Phase wird mit Wasser und dann mit einer gesättigten Lösung von Natriumchlorid gewaschen, an Natriumsulfat getrocknet und schließlich unter reduziertem Druck verdampft. Der Rückstand wird auf einer Silica-Gel-Säule chromatographiert und mit einer Mischung von DCM/Methanol (95/5 im Volumen) eluiert. Die homogenen Fraktionen des TCL werden gesammelt. Ausbeute: 0,540 g.
Herstellung von Boc S(Bzl) D(OBzl) K(Z) 2 0,5 mM von 1 wird mit einer Mischung von 1,4 cm3 TFA/DCM (1/1 im Volumen) (20 Äquivalente) behandelt. Nach 60 min bei Raumtemperatur werden die Lösungsmittel unter reduziertem Druck abgedampft. Der Rückstand wird zweimal mit DCM behandelt und unter reduziertem Druck in Gegenwart von KOH getrocknet.
Der Ester des N-Hydrosysuccinimids des Boc S(Bzl) (1.2 eq.) und das zuvor erhaltene Trifluoracetat werden in 1,3 ml DMF gelöst. Ein Äquivalent Triäthylamin wird unter Magnetrühren zugegeben. Das Rühren wird für 24 h fortgesetzt. Die Reaktionsmischung wird wie in 1 behandelt. Der Rückstand wird auf Silica-Gel chromatographiert und das erhaltene Produkt wird mit einer Mischung von Diäthyläther/Methanol (8/2 im Volumen) eluiert. Die homogenen Fraktionen von TLC werden gesammelt (Ausbeute: 0,318 g, 83 %). Beim Verreiben mit Pentan wird ein Feststoff erhalten (0,27 g). Massenspektrometrie (MS) (FAB) MH+, 763 wurde berechnet; 763 und 763.100 wurden gefunden (MH+ - Boc).
Herstellung von Nac S(Bzl) D(OBzl) K(Z) 3
Der Schutz des Derivates 2 wird durch eine Lösung von 3,1 N HCl (20 Äquivalente) in Tetrahydrofuran entfernt. Die Lösung wird bei Raumtemperatur für 6 1.2 h gerührt. Die Reaktionsmischung wird verdampft und unter reduziertem Druck während einer Nacht in Gegenwart von KOH getrocknet.
Das resultierende Chlorhydrat und 1,1 äquivalente Actylimidazol werden in 1 ml DMF gelöst. Der pH-Wert dieser Lösung wird mit Triäthylamin auf 7,5 gebracht. Die Mischung wird für 22 h gerührt. Die Reaktionsmischung wird dann verdampft und der Rückstand mit Äthylacetat und einer 0,5 N Lösung von HCl behandelt. Die organische Phase wird mit Wasser und einer gesättigten Lösung von Natriumchlorid gewaschen und dann an Natriumsulfat getrocknet. MS FAB MH+, es wurde 705 berechnet und 705 beobachtet.
Herstellung des NAc SDK 4 0,140 g von 3 (0,2 mM) gelöst in 3 ml Methanol und 1 ml Wasser wurden in 22 h in Gegenwart von 10 % Pd/C hydrogenolysiert. Der Katalysator wird auf einem Celite Polster abgefiltert und das Lösungsmittel unter reduziertem Druck verdampft. Ausbeute: 0,079 g. TLC zeigt zwei Ninhydrin-sensitive Flecken.
Das Produkt wird durch HPLC gereinigt, isokratische Methode; Eluent: Wasser: TFA 0,1 %; Flußrate 4 ml/min; t = 8 min.
Aminosäureanalyse: S: 0,9 (1); D: 1.3 (1); K: 1,3 (1) MS: FAB MH+ 391 wurde berechnet und 391 beobachtet.
Herstellung von SDK 5
Das Tripeptid 2 wird anfangs mit einer Mischung von TFA'DCM (1:1 im Volumen) für 1 1/2 h behandelt; die Lösungsmittel werden unter reduziertem Druck verdampft und der Rückstand mit Toluol behandelt; das 4
AT 402 822 B Lösungsmittel wird abgedampft und der Rückstand wird in einer Lösung von 3 ml Methanol und 0,3 ml Wasser für 20 h bei Raumtemperatur und in Gegenwart von 0,030 g Pd/C hydrogenolisiert. Der Katalysator wird auf einem Celite-Polster abgefiltert und das Lösungsmittel wird unter reduziertem Druck abgedampft. Ausbeute: = 0,090 g. MS MH+ 349 wurden beobachtet und 349 berechnet. 5 wird mit HPLC isokratischer Methode gereinigt; Eluent: Wasser, TFA 0,10 %, Flußrate 2 ml/min; t = 6 min.
Aminosäureanalyse: S : 1(1); D : 0,8(1); K : 1,3(1)
Die anderen erfindungsgemäßen Peptide werden mit der gleichen Technik wie SDK präpariert.
Die Bedeutung der vorliegenden Erfindung wird durch die folgenden immunologischen Beobachtungen verdeutlicht.
Rosettenprotokoll I - Präparierung der roten Blutzellen von Schafen
Dreimaliges Waschen der roten Blutzellen (RBC) in RPMI 1640 oder RBS oder Hanks + antibiotischen Mitteln. Zentrifugieren für 7 min bei 3000 U/min.
Suspendieren des Zellsaftes. Zählen. 2.10® RBC/ml in eine Lösung von RPMI bei 20 % vitalem Kälberserum (FCS) (4 ml zuvor an 1 ml RBC-Saft adsorbiert; 30 min auf Eisbad, dann für 7 min bei 3000 U/min zentrifugiert und unter sterilen Bedingungen gewonnen) lösen. II - Herstellen der Jurkat T Zellen
Einbringen von aliquoten Jurkat T Zellen in die Kultur. Lebenserkennung mit Trypanblau.
Anschließende Entnahme des Zellvolumens, das für die praktische Arbeit benötigt wird. Dreimaliges Waschen der Zellen in RPMI 1640 oder PBS oder Hanks + antibiotischen Mitteln. Zentrifugieren für 7 min bei 900 U/min.
Zellsaft in Suspension bringen. Zählen. Einbringen zu 2.10® Jurkat T Zellen/ml eine Lösung von RPMI bei 20 % adsorbiertem FCS. III- Herstellen der Peptide
Inhibitorlösung = SDK (2.10'7 Mol).
Die Peptide wurden überprüft und in RPMI 1640 in passender Konzentration gelöst. IV - Test
Einbringen von 200 ul der Inhibitorlösung + 100 ul Jurkat T Zellen 2.10® M in RMPI + FCS 20 % in ein Röhrchen; 10 min auf einem Eisbad lassen. 100 ul RBC 2.10® M in RPMI + FCS 20 % hinzufügen. Zentrifugieren für 5 min bei 500 U/min. Über Nacht bei 4°C lassenn. V - Zählen der Rosetten
Mikroskopjustierung: Okular: 6 x und Objektiv: 7 x
Zellen durch leichtes Klopfen vorsichtig in die Suspension zurückbringen. Für eine Weile stehen lassen. Zufügen von 30 ul Toluidinblau 1 %-ig (um die Lymphocyten anzufärben) ins Röhrchen. Leicht anklopfen.
Ablesen von 3 Malassex Hemocytometer pro Meßpunkt.
Die Resultate sind in der folgenden Tabelle angegeben. 5
AT 402 822 B % Rosetten (% Inhibition) Peptide SDK PSDKP Kontrolle 10'“ M 10'5 M 10'6 M 10"7 M 10'8 M 10'9 M 10*10 M 10*11 M 10"12 M 10'13 M 10'14 M 10-'5 M 63 £ 4 38 ± 3 ( + 40%)’ 45 ± 4 (-28%) *** 50 £ 2 (-22%) 49 ± 2 (-22%)' 40 £ 2 (-36%) ’ 43 £ 1 (-32%) ’ 43 £ 3 (-32%) ’ 40 £ 1 (-36%) * 44 ± 3 (-30%) ’ 51 £ 7 (-19%) *" 55 £ 2 (-14%) "" 63 £ 4 (NS) 59 £ 4 37 £ 7 (-37%)" 33 £ 3 (-44%) ’ 27 £ 5 (-54%) * 45 £ 6 (-24%) ™ 48 £ 2 (-19%) ™ 48 £ 4 (-19%) ”* 52 £ 5 (NS) () % Inhibition ’ : α < 0,001 " : α < 0,01 *" : α < 0,05
Isolierung humaner peripherer mononuclearer Zellen I - Isolierung von (nPMN)
Blut in PBS auf die Hälfte verdünnen. 35 ml verdünntes Blut auf 15 ml Ficoll-Hypaque.
Zentrifugieren für 30 min bei 1800 U/min bei Raumtemperatur. Wiederaufnahme des Ringes der den mononuclearen Zellen (MNC) entspricht, mit der Pasteur-Pipette.
Zweimaliges Waschen in PBS (zentrifugieren für 10 min bei 1800 U/min)
Auf 2.10® Zellen/ml mittels RPMI 1640 "komplett” Medium + 10 % SVF bringen. II - Reaktive Produkte PHA-M: Eine 5 ml Flasche, die mit 5 ml "komplett” Medium lyophylisiert ist rekonstituieren. Lösung von 100 %. Verdünnen um eine 0,4 %-Lösung zu erhalten.
Peptide: SDK: Röhrchen mit 10® Mol + 4,35 ml "komplettes" Medium. Lösung 2,3 10“* M.
Dann sukzessive verdünnen: 450 jul "Medium" + 50 ul Lösung. III- Protokoll
In einem 96-töpfigen, sterilisierten NUNC-Behälter: 100 ul MNC bei 2.10® Zellen/ml (2.105 Zellen) 50 ul PHA 0,4 %-ig (schließlich 0,1 %-ig) 50 ul Medium 30 ul Peptid (3.10'5 M) Für drei Tage bei 37°C in Luft/CC^Atmosphäre 95/5 inkubieren. Während der letzten 24 h wird ein Punkt aus (3H) Thymidin aufgebracht. 1 uci/Topf. Aufbringen der Töpfe auf Filter und zählen mit einem Zähler.
Die Resultate sind in der folgenden Tabelle angegeben. 6
AT 402 822 B
Stimulierung der T-Lymphocyten-Bildung durch Ser-Asp-Lys (SDK) und Pro-Ser-Asp-Lys-Pro (PSDKP) PBL mit 0,1 % PHA DNA Synthese induziert in MNC stimuliert durch 0,1 % PHA cpm x 103/2.105 Zellen % Stimulierung Kontrolle (RPMI 1640) 35 ± 2 + Autologous RBC 44 ± 5 + 26 % " + SDK3.10-5 M 56 ± 5 + 60 % * Kontrolle (RPM11640) 40 ± 3 + SDK 3.10"10 M 52 ± 5 + 30 % "* Kontrolle (RPMI 1640) 38 ± 3 + PSDKP 3.10‘5M 54 i 4 + 42 % ”* *: α < 0,001 - : o < 0,02 *" : α < 0,01 MNC: Mononucleare Zellen
Humorale Reaktion 6 bis 8 Wochen alte Mäuse des B6D2F1-Stammes werden am Tag 0 mit 0,2 ml einer Suspension von roten Schafblutzellen (108-Zellen) in einer Hanks-Salzlösung sensitiviert.
Die Ser-Asp-Lys und Pro-Ser-Asp-Lys-Pro-Peptide (3 ug/kg) wurden in physiologischem Serum gelöst, injiziert durch IP-Verabreichung in 0,2 ml zur angegebenen Zeit.
Am Tag 4 wurden die Tiere getötet und die Anzahl der B Lymphocyten die IgM Immonglobuline abgeben, wurden durch Hemolyseplattentechnik (Methode Jerne) gezählt. 8 Mäuse pro Gruppe. Vier Bestimmungen pro Tier. Wiederholungstest: 2 Experimente pro Punkt.
Die Resultate sind in der folgenden Tabelle angegeben.
Stimulierung der Humoralreaktion in Mäusen auf rote Blutzellen von Schafen, ein T-abhängiges Antigen von Ser-Asp-Lys und Pro-Ser-Asp-Lys-Pro-Peptiden (Anzahl der P.F.C./106 Zellen) Zeitpunkt der Injektion Injizierte Substanzen Salzlösung Ser-Asp-Lys Pro-Ser-Asp-Lys-Pro -24 h 444 ± 44 644 i 170 (+ 45)' 630 t 142(+ 42)’ Oh 459 t 103 903± 133 (+ 97)' 915 t 140 (+ 99) * + 24 h 407 i 66 459 t 103 (NS) 475 t 82 (NS) + 48 h 407 i 66 673 t 110 (+ 65)’ 589 t 101 (+ 45)' + 72 h 459 t103 1073± 348(+ 134)' 543 t 112 (NS) *: α < 0,001 " : α < 0,01
Peptidkonzentration: 3 ug/kg () % Stimulation
Giftigkeit
Es wurde für keines der erfindungsgemäßen Peptide bei per os-Verabreichung in den höchsten verabreichbaren Dosierungen an Ratten oder Mäuse Giftigkeit festgestellt. Bei IP-Verabreichung wurde bei 1 g/kg für diese Tiere kein Todesfall registriert. 7

Claims (14)

  1. AT 402 822 B Verabreichung - Dosierung Es können nur Ser-As-Lys-Peptide oral verabreicht werden, und ihr Ziel ohne wesentlichen Abbau erreichen; Tabletten und Gelatinkapseln sind mit Dosierungen von 10 mg Ser-Asp-Lys passend. Bei dieser Verabreichung benötigen höhere Peptide geschützte Formen und höhere Einheitsdosierungen (20 ml). Tägliche Dosen können zwischen 10 und 100 mg (SDK) oder 20 bis 200 mg für höhere Peptide tragen. Bei IP-Verabreichung liegen tägliche Dosen zwischen 1 und 10 mg für unmittelbare Wirkung, doch können langsam abgebende Verabreichungsformen (Mikrokapseln, Mikrokugeln od.ähnl.) bis zu 300 mg für Langzeitfreisetzungen enthalten. Patentansprüche 1. Peptide der allgemeinen Formel (I) H2N-W-Ser-Asp-Lys-X-OH, worin X ein Pro- oder Lys-Rest oder eine Valenzbindung ist und W ein Thr- oder Pro-Rest oder eine Valenzbindung ist, mit der Maßgabe, daß, wenn X ein Pro-Rest ist, W auch ein Pro-Rest ist, und therapeutisch annehmbare Salze hievon.
  2. 2. Peptid nach Anspruch 1, das Ser-Asp-Lys ist.
  3. 3. Peptid nach Anspruch 1, das Ser-Asp-Lys-Lys ist.
  4. 4. Peptid nach Anspruch 1, das Pro-Ser-Asp-Lys-Lys ist.
  5. 5. Peptid nach Anspruch 1. das Thr-Ser-Asp-Lys-Lys ist.
  6. 6. Peptid nach Anspruch 1, das Pro-Ser-Asp-Lys ist.
  7. 7. Peptid nach Anspruch 1, das Thr-Ser-Asp-Lys ist.
  8. 8. Peptid nach Anspruch 1, das Pro-Ser-Asp-Lys-Pro ist.
  9. 9. Verfahren zur Herstellung eines Peptids nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man nacheinander auf herkömmliche Weise kondensiert, die Aminosäure Boc Lys(Z)-OH und die Aminosäure X()-OH, um eine Verbindung der allgemeinen Formel (II) Boc Lys(Z)-X()-OH zu erhalten, dann die Aminosäure Boc Asp(OBzl)-OH und die obige Verbindung (II), worin die Boc-Gruppe abgespalten wurde, um eine Verbindung der allgemeinen Formel (III) Boc Asp(OBzl)-Lys(Z)-X()-OH zu erhalten, dann die Aminosäure Boc Ser(Bzl)-OH und die oben genannte Verbindung (III), worin die Boc-Gruppe abgespalten wurde, um eine Verbindung der allgemeinen Formel (IV) Boc Ser(Bzl)-Asp(OBzl)-Lys(Z)-X()-OH zu erhalten und schließlich die Aminosäure Boc W()-OH mit der oben genannten Verbindung (IV), worin die Boc-Gruppe abgespalten wurde, um eine Verbindung der allgemeinen Formel (V) Boc W()-Ser(Bzl)-Asp(OBzl)-Lys(Z)-X()-OH zu erhalten, und die oben genannte Verbindung (V) einer Schutzgruppenentfernung unterwirft, um die Verbindung H2N-W-Ser-Asp-Lys-X-OH zu erhalten, mit der Maßgabe, daß: a) die W oder X folgenden Klammern leer sind, wenn W und X für Pro stehen, daß die W folgende Klammer Bzl enthält, wenn W für Thr steht und daß die X folgende Klammer Z enthält, wenn X für Lys steht, und b) der Schritt der Schutzgruppenentfernung weggelassen wird, wenn W und/oder X für eine Valenzbindung steht.
  10. 10. Verfahren nach Anspruch 9, dadurch gekennzeichnet, daß bei Durchführung nach der gemischten Anhydridmethode Isobutylchlorformiat verwendet wird. 8 AT 402 822 B
  11. 11. Verfahren nach Anspruch 9, dadurch gekennzeichnet, daß bei Durchführung nach der Aktivestermethode die Ester von N-Hydroxysuccinimid verwendet werden.
  12. 12. Therapeutisch wirksame Masse mit immunmodulierender Wirksamkeit, dadurch gekennzeichnet, daß sie 1 bis 300 mg eines Peptids nach einem der Ansprüche 1 bis 8 als wirksamen Bestandteil in Verbindung mit geeigneten Trägern für die gewählte Verabreichungsmethode enthält.
  13. 13. Masse nach Anspruch 12, dadurch gekennzeichnet, daß sie zur oralen Verabreichung 10 bis 200 mg wirksamen Bestandteil enthält.
  14. 14. Masse nach Anspruch 12, dadurch gekennzeichnet, daß sie zur IP-Verabreichung 1 bis 300 mg wirksamen Bestandteil enthält. 9
AT0053290A 1989-03-11 1990-03-07 Sdk peptide, verfahren zu deren herstellung und sie enthaltende therapeutische zusammensetzungen AT402822B (de)

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