CS228546B2 - Způsob výroby pentapeptidů - Google Patents

Description

Vynález se týká způsobu výroby pentapeptidů obecného vzorce I,

A—B—Gly—D—Ε (I) ve kterém

A znamená zbytek obecného vzorce II,

(II) kde

Z¹ představuje atom vodíku, methylovou skupinu nebo amidinoskupinu,

Ri znamená atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku a

R2 znamená atom vodíku nebo

Ri a R2 společně tvoří ethylenový můstek a

R3 znamená hydroxyskupinu nebo alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, navázanou v poloze 3, 4 nebo 5,

B představuje zbytek (Dj-isomoru přírodní «-aminokyseliny,

D znamená zbytek obecného vzorce III,

Z²

I

R₄ CH2

I I —N—CH—CO— (IIP v němž

R₄ znamená atom vodíku nebo alkylovoiú skupinu s 1 až 4 atomy 'uhlíku a

Z² představuje fenylovou skupinu, popřípadě mono- nebo disubstituovanou halogenem, nitroskupinou, alkylovou skupinou s 1 až 4 atomy uhlíku a/nebo alkoxyskupiinou s 1 až 4 atomy uhlíku a

E představuje zbytek obecného vzorce IV,

Rs R6 I I —N—CH—CH2OH (IV) v němž

Rs znamená atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku a

Re představuje atom vodíku, subštituent odpovídající zbytku navázanému na a-uhlík přírodní a-aminokyseliny, zbytek vzorce — (CH2j_m—CH2OH kde m je číslo o hodnotě 1 až 6, nebo zbytek vzorce — (CH2)„—CH2-S (O j p—R7 kde

R7 znamená alkylovou skupinu β 1 až 5 atomy uhlíku a nap nezávisle na sobě představují vždy číslo o hodnotě 0, 1 nebo 2 s tím, že má-li n hodnotu lap hodnotu 0, pak Rz neznamená methylovou skupinu, kde zbytky A a D mají (Lj-konfiguraci, zbytek E má (Dj- nebo (Lj-konfiguraci a zbytek B má (Dj-koinfiguraci s tím omezením, že zmamená-li Z¹ atom vodíku nebo methylovou skupinu, pak R₄ představuje alkylovou skupinu se 3 až 4 atomy uhlíku, jakož i jejich fyziologicky hydrolyzovatelných, fyziologicky přijatelných esterů a solí a komplexů těchto pentapeptidů a esterů.

Při popisování polypeptidů podle vynálezu jako pentapeptidů je třeba mít na zřeteli, že zbytek aminoalkoholu ve významu symbolu E se považuje zia derivát aminokyseliny.

Výrazem „amidinoskiupina“ se míní skupina vzorce

NH

NH—C—

Pokud Z¹ znamená amidimoskupinu, pak R4 představuje atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku. Pokud Z¹ znamená atom vodíku nebo methylovou skppiniu, pak R4 představuje alkylovou skupinu se 3 až 4 atomy uhlíku.

Sloučeniny obecného vzorce I podle vynálezu, v nichž Z¹ znamená atom vodíku nebo methylovou skupinu, náležející do třídy sloučenin popsaných v DOS č. 2 702 711 a v ekvivalentním GB patentu č. 1 578 873. Všechny sloučeniny vyráběné způsobem podle vynálezu jsou nové.

Jak již bylo uvedeno výše, vykazují sloučeniny vyráběné způsobem podle vynálezu výhodné biologické vlastnosti, zejména pak inhibiční účinnost na sekreci luteiinizačníbo hormonu, a lze je ipoužít jako farmaceuticky účinné látky.

Zbytek ve významu symbolů E může mít buď (L)-, nebo (Dj-konfiguraci. V textu tohoto vynálezu i v definici předmětu vynálezu se výrazy „zbytek (L)-/3-aminoialkoholu“ a „zbytek (Dj-jS-aminoalfeoholu“ míní takové zbytky, v nichž relativní konfigurace odpovídá konfiguraci zbytků odpovídající (Lj-a-aminokyseliny, resp. (Dj-a-iaminokyseliny [přičemž karboxylová skupina v tomto zbytku (Lj- nebo (Dj-aminokyseliny je v každém z těchto případů nahrazena seskupením -CHaOHJ. Je třeba mít na zřeteli, že tyto zbytky mohou na atomu dusíku v ^-poloze nést alkylový substituent s 1 až 4 atomy uhlíku.

V pentapeptidech obecného vzorce I jsou výhodné následující významy jednotlivých obecných symbolů nebo jejich kombinace:

lj Oba symboly Rt a Rz znamenají atomy vodíku,

2] R3 představuje hydroxyskupimu. Nejvýhodněji pak R3 zaujímá polohu 4 a znamená zejména 4-hydroxyskupinu,

3] B představuje zbytek (D)-isomeru přírodní nearomatické α-aminokyseliny. Nejvýhodněji pak B představuje zbytek -(D)-Ala-,

4] R₄ představuje alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, například skupinu methylovou. Pokud R4 znamená alkylovou skupinu se 3 až 4 atomy uhlíku (a to v případě, představuje-li Z¹ atom vodíku nebo methylovou skupinu, tak v případě, představuje-li Z¹ amidimoskupinu), je touto skupinou s výhodou n-propylová, isopropylová nebo n-butylová skupina, zejména skupina n-propylová,

5] Z² představuje s výhodou fenylovou skupinu, popřípadě mono- nebo substituovanou jedním nebo dvěma zbytky ze skupiny zahrnující fluor, chlor a nitroskupinu, zejména fluorem. Zmamená-li Z² substituovanou fenylovou skupinu, představuje s výhodou inonosubstituovanou fenylovou skupinu. Nejvýhodněji znamená Z² fenylovou nebo m- či p-fluorfenylovou skupinu, zvláště pak fenylovou nebo p-fluorfenylovou skupinu,

6.1} Rs představuje s výhodou atom vodíku,

6.2) Jako substituent navázaný na a-uhlík přírodní «-.aminokyseliny představuje Re s výhodou skupinu vzorce

CH3—S—CH2—CH2—, HO—CH2—,

CH3—CH(OH)— nebo

H2NCO—CHa—CH2—,

6.3] Pokud R6 má jiný význam, než jak je uvedeno v odstavci 6.2 j, představuje s výhodou zbytek vzorce

CH3—SO—CH2—CH2— nebo

CH3—SO2—CH2—CHa—,

6.4} Nejvýhodněji znamená R6 zbytek vzorce

CH3—SO—CH2—CH2— a

6.5) Zbytek E, včetně výhodných zbytků ve významu symbolu E, definovaných výše v odstavcích 6.1) až 6.4), má s výhodou (L )-konfiguraci (jak je definováno výše). Nej228546 výhodněji pak E představuje zbytek -Met(O)-ol, tj. zbytek (L) methionlnol-sulfoxidu,

Hydroxyskupiny v pentapeptldech obecného vzorce I, zejména pak hydroxyskupina teirminálního zbytku /3-am'inoalkoholu ve významu symbolu E, mohou být esterifikotvány za vzniku odpovídajících fyziologicky hydrolyzovatelných, fyziologicky přijatelných esterů, tj. esterů, které hydrolýzou poskytují fyziologicky přijatelnou kyselinu.

Mezi vhodné estery náležejí například estery s mono- a dikarboxylovými kyselinami, zejména estery s karboxylovými kyselinami obsahujícími 2 až 5 atomů uhlíku, jako acetáty, jakož i s aromatickými karboxylovými kyselinami, jako benzoáty.

Pentapeptidy obecného vzorce I a jejích estery mohou být ve formě adičních solí s kyselinami nebo ve formě komplexů. Adiění soli is kyselinami mohou být vytvořeny například is organickými kyselinami, polymerními kyselinami a anorganickými kyselinami. Mezi tyto adiční solí s kyselinami náležejí například hydrochloridy a acetáty. Výrazem „komplexy“ se míní sloučeniny známého typu, připravované z pentapeptidu obecného vzorce I a jejich esterů adicí anorganických sloučenin, například anorganických solí nebo hydroxidů, jako solí vápníku, hořčíku, hliníku, kobaltu a zejména zinku, nebo adicí polymerních organických látek.

Jednu skupinu sloučenin podle vynálezu tvoří pentapeptidy obecného vzorce I, ve kterém

Z¹ znamená amidinoskupinu,

B představuje zbytek -(Dj-Álla-,

Z² znamená fenylovou. skupinu, popřípadě mono- nebo disubstituovanou halogenem, nitroskupinou, alkylovou skupinou s 1 až 4 atomy uhlíku nebo alkoxyskupinou s 1 až 4 atomy uhlíku a

Ri, Rz, R3, Rá a E mají význam jako v obecném vzorci I, a jejich adiční soli s kyselinami a komplexy.

Druhou skupinu sloučenin podle vynálezu tvoří pentapeptidy obecného vzorce I, ve kterém

Z¹ znamená atom vodíku inebo methylovou skupinu,

Ri a R2 buď představují atomy vodíku, nebo společně tvoří ethylenový můstek,

Rs znamená hydroxylovou skupinu v poloze 4,

B představuje zbytek -(D)-Ala-,

R4 znamená alkylovou skupinu se 3 až 4 atomy uhlíku (zejména skupinu n-propylovou, n-butylovou a isobutylovou),

Z² představuje fenylovou skupinu, popřípadě mono- nebo disubstituovanou jedním nebo dvěma subistituenty ze skupiny zahrnující atomy halogenů, nitroskiupinu alkylové skupiny s 1 až 4 atomy uhlíku a alkoxyskupiny s 1 až 4 atomy uhlíku, a

Ξ znamená zbytek -Met(O)-ol, a jejich adičiní soli s kyselinami a komplexy.

Předmětem vynálezu je způsob výroby shora popsaných sloučenin. Tyto sloučeniny je možno připravit tak, že se spojí amidickou vazbou dvě peptidické jednotky, z nichž každá obsahuje alespoň jeden zbytek aminokyseliny nebo amimoalkoholu, přičemž tyto peptidické jednotky jsou takového chiarakterurakteiru, že vznikne pentapeptid nebo jeho ester, mající sekvenci uvedenou v obecném vzorci I, a takto vzniklý pentapeptid nebo jeho ester se izoluje ve volné formě nebo ve formě adiční soli s kyselinou nebo komplexu.

Shora popsanou reakci je možno provádět analogicky jako postup uvedený níže >v příkladu provedení. Pokud není zvlášť popsána příprava výchozích látek, jsou tyto sloučeniny buď známé, nebo je lze vyrobit a vyčistit o sobě známými metodami.

Pentapeptidy a estery podle vynálezu, jakož i jejich fyziologicky přijatelné adiční soli s kyselinami a komplexy vykazují cenné farmakologické vlastnosti, jak vyplývá z testů na zvířatech. Tyto sloučeniny zejména inhibuií sekreci luteinizačního hormonu a mají depresivní účinnost na centrální nervový systém, o čemž svědčí například následující testy.

1. Inhibiční účinnost na sekreci luteinizaoního hormonu; inhibice ovulace u krys

Dospělé samice krys o hmotnosti 200 až 250 g, s pravidelným čtyřdenním estrálním cyklem, se udržují ve standardních podmínkách [ 14 hodin světla denně v době od 04,00 do 18,00, teplota 24 °C a 55 až 60% relativní vlhkost], přičemž ise nijak neomezují v příjmu potravy a vody. Testovaná sloučenina se aplikuje subkutánně ve fázi preestru, přičemž testované dávky se aplikují jedinou ve 13,00 h a pak znovu v 16,00 h. Za 20 hodin po první dávce se krysy usmrtí, jejich vejcovody se vyjmou a za použití mikroskopu se zjistí celkový počet vajíček v obou vejcovodech. Vyhodnocování se provádí tak, že se na inhibici ovulace soudí pouze v tom případě, že nelze zjistit přítomnost žádaného vajíčka. Každá dávka se zkouší na pěti krysách.

2. Depresivní účinnost na centrální nervovou soustavu

Tento test se provádí sledováním změn ve spontánním chování myší a krys v souladu s principy popsanými J. H. Nodidem a spol. v Animal and Clinical Pharmacological Techiniques in Drug Evaluation, Chicago, 1964 a v „Psychopharmacologia“, 13, 222 až 257 (Berlín, 1968 j.

Shora popsané pentapeptidy, estery, soli a komplexy se v souladu s tím mohou používat

a) k léčbě pacientů s poruchami, jejichž etiologie souvisí nebo je modulována sekiresí luteinizačního hormonu, nebo jejichž etiologie zahrnuje fyziologickou regulaci sekrece luteinizačního hormonu, například při léčbě hypertrofie prostaty nebo při léčbě menopausálního syndromu, zejména post-menopausálních návalů horka, například v souladu se studiemi, které popsali Tataryn a spol. („Thermo-regulatory mechanisme and their Therapeutic Implacatioms“, 4. mezinárodní symposium o farmakologii a termoregulace, Oxford, 1979; publ. Karger, Basilej 1980, str. 202 až 207] a Casper a spol. [„Science“, 205, str. 823 až 825 (1979]]

b] jako psychofarmaceutika, například při léčbě psychotických stavů.

Pro obě tato použití a) a b] se doporučovaná dávka pohybuje v rozmezí od 0,1 do 10 mg peintapeptidu nebo jeho esteru, přičemž tato celková dávka se podává v několika dílčích dávkách dvakrát až čtyřikrát denně v jednotkové dávkovači formě, nebo v protrahované formě. Vhodné jednotkové dávkovači formy, například k orálnímu podání, tedy obsahují od 0,025 do 5,0 mg pentapeptidu nebo esteru uvedeného výše, nebo ekvivalentní množství farmaceuticky upotřebitelné soli nebo komplexu, spolu s pevným či kapalným farmaceutickým ředidlem nebo nosičem. Tyto prostředky mohou mít například formu roztoku nebo tablet.

Vynález dále popisuje

1) způsob inhibování sekrece luteinizačního hormonu, zejména způsob léčby hypertrofie prostaty nebo menopausálního syndromu, zejména post-menopausálních návalů horka, jakož i způsob léčby psychotických poruch u pacientů potřebujících takovouto léčbu, který spočívá v tom, že se zmíněnému pacientovi podá účinné množství pentapeptidu obecného vzorce I nebo jeho fyziologicky hydrolyzovatelného, fyziologicky přijatelného esteru, nebo fyziologicky přijatelné adiční soli s kyselinou nebo komplexu takovéhoto pentapeptidu nebo esteru, jakož i

2} pentapeptidy, estery, adiční soli s kyselinami a komplexy uvedené výše v odstavci lj jako farmaceutika, tj. pro použití při léčbě člověka nebo zvířete, zejména pro použití způsobem uvedeným výše v odstavci

1) a

3) farmaceutické prostředky obsahující pentapeptidy, estery, adiční soli s kyselinami nebo komplexy, uveedné výše v odstavci lj, jako účinné látky.

V popisné části, v příkladové části i v definici předmětu vynálezu se používají následující obvyklé zkratky:

Met-ol = zbytek (L)-methioninolu, vzorce CH3SCH2CH2CH (CH2OH} NH-,

Met(O)-ol = zbytek (Lj-methioninolsulfoxidu vzorce

CH3-S (O) -CH2CH2CH (CHaOH) -NH-,

MeTyr = -N-methyl-Tyr-,

MeTyr (Butj — N-methyl-O-terc.butyl-Tyr-,

MePhe = N-methyl-Phe-, (N-propyl j-Phe = N-n-propyl-Phe, (N-isobutyl JPhe = N-isobutyl-Phe-, (N-butylJPhe = -N-n-butyl-Phe-,

N-propyl jPhe(p-F) = -N-n-propyl-p-fluor-Phe,

Boc = terc.butoxykarbonyl,

Z — benzyloxykarbonyl.

V souhlase se standardní nomenklaturou se u všech zbytků íaminokyselin, označovaných zkratkami o třech písmenech, uvažuje L-konfigurace, pokud není uveleino jinak. Příklad 1

N^a-amidino-Tyr-(Dj-Ala-Gly-(N-propyl Phe-Met-ol-hydrochlorid

K roztoku 1,04 g N^K-amidino-Tyr-(D)-Ala-NH-NH2-hydrochloridu ve 20 ml dimethylformamidu se při teplotě —18 °C přidá nejprve 1,3 ml 8 N chlorovodíku v dioxanu a pak 0,35 ml terc.butylnitritu. Po desetiminutovéim stání při teplotě —T8 °C se reakční směs neutralizuje 2,3 ml N-ethyl-diisopropylaminu a smísí se s ochlazeným roztokem

1,5 g H-Gly-( N-propyl jPhe-Met-ol-hydrochloridu a 0,62 ml N-ethyl-diisopropylaminu v 15 ml dimethylformamidu. Po jednohodiinové reakci při teplotě —15 °C a následující tříhodinové reakci při teplotě —10 °C se rozpouštědlo odpaří ve vakuu, zbytek se vyjme vodou a roztok se několikrát promyje methylenchloridem. Vodná fáze se odpaří na objem cca 60 ml, adsorbuje se na polystyrénové adsorpční pryskyřici, pryskyřice se promyje vodou a produkt se z ní vymyje vodným methanolem. Po odpaření eluátu k suchu a vysrážení ze směsi methanolu a ethyletheru se získá sloučenina uvedená v názvu, o optické rotaci [a]_D ²⁰ = —41,0⁰⁴ (c = 1 v dimethylformiamidu, rozkládající se při 90 °C.

Výchozí materiál používaný při shora popsané reakci se připraví následujícím způsobem:

a) H- (N-piropyl JPhe-NH-NH-Z-hydrochlorid

K roztoku 14,0 g H-Phe-NH-NH-Z-hydrorldu ve 120 ml methanolu se při teplotě 20 stupňů Celsia přidá nejprve 10,0 g natriumkyanborohydridu a po 5 minutách pak 3,2 mililitru propionaldehydu. Po reakci trvající

2.5 hodiny se rozpouštědlo odpaří ve vakuu, k odparku se přidá. 50 ml vody, směs se silně zalkalizuje (pH cca 12) přidáním 10N hydroxidu sodného a produkt se extrahuje methylenchloridem. Extrakt se důkladně promyje vodou, vysuší se síranem sodným a přidá se k němu nadbytek chlorovodíku v ethyletheru. Krystalizace se pak dokončí přidáním dalšího etheru. Získá se sloučenina uvedená v názvu, o optické rotaci [:«]d²⁰ = +42,5° (c = 1 v dimethylformamidu.

b) Boc-Gly- (N-propyl) Phe-NH-NH-Z

K roztoku 16,8 g Boc-Gly-OH ve 100 ml tetrahydrofuranu se při teplotě —20 °C přidá 11,8 ml pivaloylchloridu, směs se 15 minut míchá při teplotě —15 °C, pak se k ní přidá roztok 12,5 g H-(N-propl)Phe-NH-NH-Z a 5,5 ml N-ethyl-diisopiropylaminu v 50 mililitrech tetrahydrofuranu, reakční směs se míchá 1 hodinu při teplotě —15 °C, pak 1 hodinu při teplotě 0 °C a nakonec 20 hodin při teplotě 10 °C. Po· přidání 150 ml 1 N hydrogenuhličitanu draselného se produkt extrahuje ethylacetátem, extrakt se promyje zředěným roztokem hydrogenuhličitanu draselného a hydrogemsíranu draselného a vodou, vysuší se síranem sodným a rozpouštědlo se odpaří ve vakuu. Sloučenina uvedená v názvu se vyčistí chromatograficky za použití silikagélu a směsi methylemchloridu a methanolu jako elučního činidla.

c) Boc-Gly-,(N-propyl)Phe-NH-NH2

21,1 g Boc-Gly-(N-propyl) Phe-NH-NH-Z ve 100 ml methanolu se hydrogenuje v přítomnosti paládlového katalyzátoru po dobu 1 hodiny za tlaku vodíku 0,2 až 0,3 MPa. Rozpouštědlo se odpaří ve vakuu a amorfní zbytek se vysuší nad kysličníkem fosforečným a hydroxidem draselným ve vakuu, čímž se získá sloučenina uvedená v názvu, o optické rotaci [«]d²⁰ — —39,4° (c = 1 v dimethylform amidu j.

dj Boc-Gly-[N-propyl)Met-ol

K roztoku 7,8 g Boc-Gly-(N-propyl )Phe-NH-NH2 v 50 ml dimethylformamidu se při teplotě —18 °C za míchání přidá nejprve

8.6 ml 8 N chlorovodíku v dioxanu a pak

2,1 ml terc.butylnitritu. Po desetiminutovém stání při teplotě —18 °C se směs neutralizuje přidáním 12,0 ml N-ethyl-diisopropylaminu a smísí se s předem ochlazeným roztokem 5,4 g methionínolu (CH3SCH2CH2CH(NHžJCHžOH] ve 30 ml dimethylformamidu. Po tříhodinové reakci při teplotě —10 °C se reakční směs zředí ethylacetátem, promyje se zředěným roztokem hydrogenuhličitanu draselného a hydrogensíranu draselného a vodou, vysuší se síranem sodným, rozpouštědlo se odpaří ve vakuu a zbytek se vyčistí chromatografií na silikagélu za použití směsi methylenchloridu a methanolu jako elučního činidla, čímž se získá žádaná sloučenina.

e ] H-Gly- (N-propyl) Phe-Met-ol-hydr ochlorld

K roztoku 9,9 g Boc-Gly-(N-propyl )Phe-Met-olu ve 20 ml ethyletheru se při teplotě 0 °C přidá 100 ml 5 N chlorovodíku v ethyletheru. Po další hodině při teplotě 0 °C se rozpouštědlo odpaří ve vakuu a zbytek se překrystaluje ze směsi ethylacetátu, methanolu a ethyletheru, čímž se získá sloučenina uvedená v názivu, o optické rotaci [a]_D ²⁰ = = —72,5° (c = 1 v dimethylformamidu). Produkt se rozkládá při 60 °C.

f) Boc-Tyr-(D)-Ala-NH-NH-Z

K roztoku 14,1 g Boc-Tyr-OH a 5,6 ml N-methylmorfolinu ve 100 ml tetrahydrofuranu se při teplotě —20 C přidá 6,6 ml isobutylchlorformiátu. Po pětiminutové reakci při teplotě —20 °C se přidá roztok 13,7 g H-(D)-Ala-NH-NH-Z-hydrochloridu a 5,0 ml N-methylmorfolimu v 50 ml dimethylformamidu. Směs se nechá 2,5 hodiny reagovat při teplotě —15 °C, pak se k ní přidá 100 ml 1 N hydrogenuhličitaniu draselného, reakční směs se zředí ethylacetátem, promyje se zředěným roztokem hydrogenuhličitanu draselného a hydrogensíranu draselného a vodou, načež se vysuší síranem sodným a rozpouštědlo se odpaří ve vakuu. Po překrystalování zbytku ze směsi ethylacetátu, hexanu a ethyletheru se získá sloučenina uvedená v názvu.

g) H-Tyr- (D ] -Ala-NH-NH-Z-hydrochlorid

K roztoku 25,0 g Boc-Tyr-(D)-Ala-NH-NH-Z v 50 ml ethylacetátu se při teplotě 0 °C přidá 100 ml 5 N roztoku chlorovodíku v etheru. Po 1,5 hodině se krystalizace dokončí přidáním dalšího ethyletheru. Sloučenina uvedená v názvu se Izoluje filtrací. Produkt má optickou rotaci [a]_D ²⁰ = +32,8° (c = 1 v dimethylformamidu] a rozkládá se při 200 °C.

h) N“-amido-Tyr- (D) -Ala-NH-NH-Z-hydr0chlorid

K roztoku 8,8 g H-Tyr-(D)-Ala-NH-NH-Z-hydírochloridu a 2,8 ml triethylaminiu v 50

228 mililitrech dimethylformamidu se přidá 12,1 gramu l-amidino-3,5-dimettoylpyro;zolnitrátu. Směs se 4 dny míchá při teplotě 50 až 60 °C a pak se k ní přidá, 3,0 ml triethylaminu. Rozpouštědlo se odpaří ve vakuu, zbytek se vyjme vodou a roztok se několikrát extrahuje methylenchloridem. Vodná fáze se zahustí na cca 400 ml, koncentrát se adsorbuje oa polystyrénovou adsorpční pryskyřici a sloučenina uvedená v názvu se z adsorbentu vymyje jako nitrát za použití směsi methanolu a vody jako: elučmího činidla. Eluát se odpaří k suchu, .zbytek se znovu vysuší ve vakuu, rozpustí se v ethylacetátu za přítomnosti malého množství ethanolu a přidáním ethyletheiru a nadbytku 5 N chlorovodíku v ethylacetátu se vysráží sloučenina uvedená v názvu, ve formě hydrochloridu.

Produkt má optickou rotaci [a]_D ²⁰ = = +23,3^P (c = 1 v dimethylformamidu) a rozkládá se při 50 °C.

i) N“-ami'dino-Tyr- (D) -Ala-NH-NHa-hydrochlorid

1,6 g N“-amidlno-Tyr- (D j -Ala-NH-NH-Z-hydrochlorid ve 20 ml methanolu se v přítomnosti paládiového katalyzátoru hydrogenuje za tlaku vodíku 0,2 až 0,3 MPa. Po 30 minutách se katalyzátor odfiltruje, rozpouštědlo ise odpaří ve vakuu a .zbytek se překrystaluje ze směsi methanolu a ethyletheru. Získá se sloučenina uvedená v názvu, o optické rotaci ['a Jo²⁰ — +13,2° (c = 1 vdimethylformamidu], rozkládající se při 80 °C.

Příklad 2

Analogickým postupem jako v přikladu 1 se připraví následující sloučeniny:

2.1 H-MeTyr- (D j -Ala-Gly- (N-isohutyl j Pihe-Metf Gj-ol-trifluoracetát o optické rotaci [a]o²⁰ = —13,7° (c =1 v 95% kyselině octové),

2.2 H-MeTyr- (D) -Ala-Gly- (N-butyl) Phe-Met(Oj-ol-trifluoiracetát o optické rotaci [a]p^2Q — —(c = lv 95% kyselině octové),

2.3 H-MeTyr- (D j - Ala-Gly- (N-propyl )Phe(p-Fj-Met(0)-ol-trifluoracetát o optické rotaci [a]_D ²⁰ = —9,0° (c — 1 v 95% kyselině octové,

2.4 N“-amidino-Tyr- (D) -Ala-Gly-MePhe-MetfOj-ol-acetát o optické rotaci [a]_D ²⁰ — — —50,8° (c = 0,7 v dimethylformamidu),

2.5 N“-amidino-Tyr- (D) -Ala-Gly-MePihe(p-FJ-Met(Oj-ol-hydrochlorid o optické rotaci [«]d²⁰ — —29,3° (c = 1 v 95% kyselině octové).

2.6 H-MeTy,r- { D)-Ala-Gly- (N-propyl )Phe-Met(O)-ol-trifluoiracetát o optické rotaci [a]_D20 ₌ —19,3° (c = 1 V 95% kyselině octové) a

2.7 N^a-amidino-Tyr- (D) - Ala-Gly- (N-propyl )Phe-Met( O )-ol-hydrochlorid o optické rotaci [a]_D ²⁰ — 33,6° (c = 1 v 95% kyselině octové).

Claims (3)

1. Způsob výroby pentapeptidů obecného vzorce I,

A—B—Gly—D—E (lj, ve kterém

A znamená zbytek obecného vzorce II, skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku a Rz znamená atom vodíku nebo

Ri a Rz společně tvoří ethylenový můstek a

R3 znamená hydroxyskupinu nebo alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, navázanou v poloze 3, 4 nebo 5,

B představuje zbytek (D)-isomeru přírodní a-aminokyseliny,

D znamená zbytek obecného vzorce III,

Z²

I

R₄ CH2

I I —N—CH—CO— (III) v němž

Rá znamená atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku a

Z² představuje fenylovou skupinu, popřikde

Z¹ představuje atom vodíku, methylovou skupinu nebo amidinoskupinu,

Ri znamená atom vodíku nebo alkylovou

228548 pádě mono- nebo disubstituovíanou halogenem, nitroskuplnou, alkylovou skupinou s 1 až 4 atomy uhlíku a/nebo alkoxyskupinou s 1 až 4 atomy uhlíku,

E představuje zbytek obecného vzorce IV,

Rs Re

I I •—N—CH—CH2OH (IV) v němž

Rs znamená atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku a

Re představuje atom vodíku, substituent odpovídající zbytku navázanému na a-uhlík přírodní α-aminokyselimy, zbytek vzorce — (CH2)_m-CH?,OH kde m je číslo o hodnotě 1 až 6, nebo zbytek vzorce — (CH₂)_n—CH₂-S(O)_p—Rz kde

R7 znamená alkylovou skupinu s 1 až 5 atomy uhlíku a nap nezávisle na sobě představují vždy číslo o hodnotě 0,1 nebo 2 s tím, že má-li n hodnotu 1 a p hodnotu 0, pak R7 neznamená methylovou skupinu, přičemž zbytky A a D mají (Lj-konfiguraci, zbytek E má (D)- nebo (L)-konfiguraci a zbytek B má (Dj-konfiguraci, s tím omezením, že znamená-li Z¹ atom vodíku nebo methylovou skupinu, pak R4 představuje alkylovou skupinu se 3 až 4 atomy uhlíku, jakož i jejich fyziologicky hydrolyzovatelnýoh, fyziologicky přijatelných esterů a solí a komplexů těchto pentapeptidů a esterů, vyznačující se tím, že se spojí amidickou vazbou dvě peptidické jednotky, z nichž každá obsahuje alespoň jeden zbytek aminokyseliny nebo aminoalkoholu, přičemž tyto peptidické jednotky jsou takového charakteru, že vznikne pentapeptíd nebo jeho ester, mající sekvenci uvedenou v obecném vzorci I, a takto vzniklý pentapeptíd nebo jeho ester se izoluje ve volné formě nebo ve formě adiční soli s kyselinou nebo komplexu.

2. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se použijí odpovídající výchozí látky za vzniku sloučenin obecného vzorce I, v němž

B znamená zbytek D-Ala,

Z¹ představuje amidinoskupinu a

Ri, R2, R3, D a E mají význam jako v bodu 1.

3. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se použijí odpovídající výchozí látky za vzniku sloučenin obecného vzorce I, ve kterém

Z¹ znamená atom vodíku nebo methylovou skupinu,

Ri a Rz buď znamenají vždy atom vodíku, nebo společně tvoří ethylenový můstek,

R3 představuje hydroxyskupinu v poloze 4,

B znamená zbytek D-Ala,

R4 představuje alkylovou skupinu se 3 až 4 atomy uhlíku,

E znamená zbytek Met(O)-ol- a

Z² má význam jako v bodu 1.