CS228547B2 - Způsob výroby pentapeptidů - Google Patents

Description

Vynález se týká způsobu výroby pentapeptidů obecného vzorce I,

A—B—Gly—D-E (I), ve kterém

A znamená zbytek obecného vzorce II,

R

kde

Z¹ představuje atom vodíku, methylovou skupinu nebo amidinoskupinu,

Ri znamená atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku a

R2 znamená atom vodíku nebo

Ri a R2 společně tvoří ethylenový můstek a

R3 znamená hydroxyskupinu nebo alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, navázanou v poloze 3, 4 nebo 5,

B představuje zbytek (D)-tsomeiru přírodní a-aminokyseliny,

D znamená zbytek obecného vzorce III,

Z²

I

R4 CH2

I I —N—CH—CO— (III) v němž

R4 znamená atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku a

Z² představuje fenylovou skupinu, popřípadě mono- nebo diSubstituovanou halogenem, nitroskupinou, alkylovou skupinou š 1 až 4 atomy uhlíku ®/inebo alkoxyskupinou s 1 až 4 atomy uhlíku a

E představuje zbytek obecného vzorce IV,

R5 R6

I I —N—CH—CH2OH (IV) v němž

Rs znamená atom vodíku nebo alkylovou skupinů s 1 až 4 atomy uhlíku ,a

Re představuje zbytek vzorce -(CH₂)_n-CH2S(O)_p-R₇ kde

R7 znamená alkylovou skupinu s 1 až § atomy uhlíku, n je číslo o hodnotě 0, 1 nebo 2 a p je číslo o hodnotě 1 nebo 2, kde zbytky A a D mají (L)-konfiguraci, zbytek Emá (Dj- nebo (L)-konfiguraci a zbytek B má (Dj-konfiguraci s tím omezením, že znamená-11 Z¹ atom vodíku nebo methylovou skupinu, pak FU představuje alkylovou skupinu se 3 až 4 atomy uhlíku, jakož i jejich fyziologicky hydrolyzovatelných, fyziologicky přijatelných esterů a solí a komplexů těchto pentapeptidů a· esterů.

Při popisování polypeptidů podle vynálezu jako pentapeptidů je třeba mít na zřeteli, že zbytek aminoalkoholu ve významu symbolu E se považuje za derivát aminokyseliny.

Výrazem „amidinoskupina“ se míní skupina vzorce

NH

I

NH2—c—.

Pokud Z¹ znamená amidinoskupinu, pak Rf představuje atom vodíku nebo alkylovou skupinu iS 1 až 4 atomy uhlíku. Pokud Z¹ znamená atom vodíku nebo methylovou skupinu, pak R4 představuje alkylovou skupinu se 3 až 4 atomy uhlíku.

Sloučeniny obecného vzorce I podle vynálezu, v nichž Z¹ znamená atom vodíku nebo methylovou skupinu, náležejí do třídy sloučenin popsaných v DOS č. 2 702 711 a v ekvivalentním GB patentu číslo 1 578 873. Všechny sloučeniny vyráběné podle vynálezu jsou nové.

Jak již bylo uvedeno výše, vykazují sloučeniny, vyrábněné podle vynálezu, výhodné biologické vlastnosti, zejména pak inhibičmí účinnost na sekreci luteiniziačmího hormonu a lze je použít jako farmaceuticky účinné látky.

Zbytek ve významu symbolu E může mít buď (LJ- nebo (Dj-konfiguraci. V textu tohoto vynálezu i v definici předmětu vynálezu se výrazy, „zbytek (LJ-^amlnoalkoholu“ a „zbytek (DJ-jS-amlnoalkoholiu“. míní takové zbytky, v nichž relativní konfigurace odpovídá konfiguraci zbytků odpovídající (Lj-a-aminokyseliny, respektive (Dj-a-aminokyseliny [přičemž kiarboxylová skupina v tomto zbytku (LJ- nebo (DJ-aminokyseliny je v každém z těchto případů nahrazena seskupením -CH2OH]. Je třeba mít na zřeteli, že tyto zbytky mohou na atomu dusíku v !0-poloze nést alkylový substituent s 1 až 4 atomy uhlíku.

V pentapeptidech obecného vzorce I jsou výhodné následující významy jednotlivých obecných symbolů nebo jejich kombinace:

lj Oba symboly Ri a R2 znamenají atomy vodíku,

2} R3 představuje hydroxyskupinu. Nejvýhodněji pak R3 zaujímá polohu 4 a znamená zejména 4-hydroxyskupinu,

3) B představuje zbytek (Dj-isomeru přírodní nearomatické a-amiinokyseliny. Nejvýhodněji pak B představuje zbytek -(Dj-Afa-,

4) R4 představuje alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, například skupinu methylovou. Pokud R4 znamená alkylovou skupinu se 3 až 4 atomy uhlíku (a to jak v případě, představuje-li Z¹ atom vodíku nebo methylovou skupinu, tak v případě, představuje-li Z¹ amidinoskupinu J, je touto skupinou s výhodou n-piropylová, isopropylová nebo n-butylová skupina, zejména n-propylová,

5) Z² představuje s výhodou fenylovou skupinu, popřípadě mono- nebo disubstituovanou jedním nebo dvěma zbytky ze skupiny zahrnující fluor, chlor a initroskupinu, zejména fluorem. Znamená-11 Z² substituovanou fenylovou skupinu, představuje s výhodou monosubstituovanou fenylovou skupinu, zejména m- nebo p-substituovanou fenylovou skupinu. Nejvýhodněji znamená Z² fenylovou nebo m- či p-fluorfenylovou skupinu, zvláště pak fenylovou nebo p-fiuorfenylovou skupinu,

6.1 R5 představuje s výhodou atom vodíku,

6.2 R6 představuje s výhodou zbytek vzorce

CH3—SO—CH2—CH2— nebo·

CH₃—SO2—CH2—CH2—,

6.3 Nejvýhodněji znamená R6 zbytek vzorce

CH3—SO—CHz—CH2— a

6.4 Zbytek E, včetně výhodných zbytků ve významu symbolu E, definovaných výše v odstavcích 6.1 J až 6.3), má s výhodou (L)-konfiguraci (jak je definováno výše). Nejvýhodněji pak E představuje zbytek -Met(O)-ol, tj. zbytek (L)-methioninol-sulfoxidu.

Hydroxyskupiny v pentapeptidech obecného vzorce I, zejména pak hydroxyskupina terminálního zbytku ^-aminoalkoholu ve významu symbolu E, mohou být esterífikovány za vzniku odpovídajících fyziologicky hydrolyzovatelných, fyziologicky přijatelných esterů, tj. esterů, které hydrolýzou poskytují fyziologicky přijatelnou kyselinu.

Mezi vhodné estery náležejí například estery s mono- a dikarboxylovými kyselinami, zejména estery s karboxylovými kyselinami obsahujícími 2 až 5 atomů uhlíku, jako acetáty, jakož i aromatickými karboxylovými kyselinami, jako benzoáty.

Pentapeptidy obecného vzorce I a jejich estery mohou být ve formě adičních solí s kyselinami nebo ve formě komplexů. Adiční soli s kyselinami mohou být vytvořeny například s organickými kyselinami, polymerními kyselinami a anorganickými kyselinami. Mezi tyto adiční soli s kyselinami náležejí například hydrochloridy a acetáty. Výrazem „komplexy“ se míní sloučeniny známého typu, připravené z pentapepttdů obecného vzorce I a jejich esterů adicí anorganických sloučenin, například anorganických solí nebo hydroxidů, jako solí vápníku, hořčíku, hliníku, kobaltu a zejména zinku, nebo adicí polymerních organických látek.

Jednu skupinu sloučenin podle vynálezu tvoří pentapeptidy obecného vzorce I, ve kterém

Z¹ znamená amidinoskupiniu,

B představuje zbytek -(D)-Ala-,

Z² znamená fenylovou skupinu, popřípadě mono- nebo disubstituovanou halogenem, nitroskupimou, alkylovou skujpinou s 1 až 4 atomy uhlíku nebo alkoxyskupinou s 1 až 4 atomy uhlíku a

Ri, R2, Rs, Rí a E mají význam jako. v obecném vzorci I a jejich adiční soli s kyselinami a komplexy.

Druhou skupinu sloučenin podle vynálezu tvoří pentapeptidy obecného vzorce I, ve kterém

Z¹ znamená atom vodíku nebo methylovou skupinu,

Ri a Rž bud představují atomy vodíku, nebo společně tvoří ethylenový můstek,

R3 znamená hydroxylovou skupinu v poloze 4,

B představuje zbytek -(Dj-Ala-,

R< znamená alkylovou skupinu se 3 až 4 atomy uhlíku (zejména skupinu n-propylovou, n-butylovou a isobutylovou),

Z² představuje fenylovou skupinu, popřípadě mono- nebo disubstituovanou jedním nebo dvěma substituentny ze skupiny zahrnující atomy halogenů, nitroskupinu, alkylové skupiny s 1 až 4 atomy uhlíku a alkoxyskupiny s 1 až 4 atomy uhlíku ,a

E znamená zbytek -Met(O)-ol, a jejich adiční soli s kyselinami a komplexy.

Předmětem vynálezu je způsob výroby shora popsaných sloučenin. Tyto sloučeniny je možno připravit tak, že se oxiduje pentapeptid nebo jeho ester, mající sekvenci uvedenou v obecném vzorci I, v němž E představuje zbytek obecného vzorce — (CH2)_n—CH2—S—R7, kde n a R7 mají shora uvedený význam, za vzniku odpovídajícího peintapeptidu či esteru, v němž E znamená zbytek obecného vzorce — (CHž J _n—CH2— S (O Jp—Rv, kde n, p a R7 mají shora uvedený význam, a takto vzniklý pentapeptid nebo jeho ester se Izoluje ve volné formě nebo ve formě a* diční soli s kyselinou nebo komplexu.

Shora popsanou reakci je možno provádět analogicky jako postup uvedený níže v příkladu provedení. Pokud není zvlášť popsána příprava výchozích látek, jsou tyto sloučeniny bud známé, nebo je lze vyrobit a vyčistit o sobě známými metodami.

Pentapeptidy a estery podle vynálezu, jakož i jejich fyziologicky přijatelné adiční soli s kyselinami a komplexy, vykazují cenné farmakologické vlastnosti, jak vyplývá z testů na zvířatech. Tyto sloučeniny (zejména inhibují sekreci luteinisačníbo hormonu a mají depresivní účinnost na centrální nervový systém, o čemž svědčí například následující testy.

1. Inhibiční účinnost na sekreci luteinisačního hormonu; inhibice ovulace u krys

Dospělé samice krys o hmotnosti 200 až 250 g, s pravidelným čtyřdenním estrólmím cyklem, se udržují ve standardních podmínkách [14 hodin světla denně v době od 4,00 do 18,00 h, teplota 24 °C a 55 až 60% relativní vlhkost], přičemž se nijak neomezují v příjmu potravy a vody. Testovaná sloučenina se aplikuje subkutánně ve fázi preestru, přičemž testované dávky se aplikují jednou ve 13,00 h a pak znovu v 16,00 h. Za 20 hodin po první dávce se krysy usmrtí, jejich vejcovody se vyjmou a za použití mikroskopu se zjistí celkový počet vajíček v obou vejcovodech. Vyhodnocování se provádí tak, že se na inhibici ovulace soudí pouze v tom, případě, že nelze zjistit přítomnost žádného vajíčka. Každá dávka se zkouší na pěti krysách.

2. Depresivní účinnost na centrální nervovou soustavu

Tento test se provádí sledováním změn ve spontánním chování myší a krys v souladu s principy popsanými J. H. Nodidem a spol. v „Animal and Clinical Pbarmacological Techniques in Drug Evaluation“, Chicago, 1964 a v „Psychopharmacologia“, 13, 222 až 257 (Berlín, 1968).

Shora popsané pentapeptidy, estery, soli a komplexy se v souladu s tím mohou používat

a) k léčbě pacientů s poruchami, jejíchž etiologie souvisí nebo je modulována sekrecí luteinlsačního hormonu, nebo jejichž etiologie zahrnuje fyziologickou regulaci sekrece luteinlsačního hormonu, například při léčbě hypertrofie prostaty nebo při léčbě

228347 menopausálního syndromu, zejména post-menopausálních návalů horka, například v souladu se studiemi, které popsali Tataryn a spol. [ „Thermo-regulatory mechanisms and thelr Theirapeutic Implications“, 4. mezinárodní symposium o farmakologii termoregulace, Oxford, 1979; publ. Karger, Basilej 1980, str. 202 až 207,] a Cíasper a spol. [„Science, 205, str. 823 až 825 (1979], a bj jako· psychofarmaceutika, například při léčbě psychotických stavů.

Pro obě tato použití a) a b] se doporučovaná dávka pohybuje· v rozmezí od 0,1 •do 10 mg pentapeptidu nebo jeho esteru, přičemž tato celková dávka se podává v několika dílčích dávkách dvakrát až čtyřikrát denně v jednotkové dávkovači formě, nebo •v protrahované formě. Vhodné jednotkové dávkovači formy, například k orálnímu podání, tedy obsahují od 0,025 do 5,0 mg pentapeptidu nebo esteru uvedeného výše, nebo ekvivalentní množství farmaceuticky upotřebitelné soli inebo komplexu, spolu s pevným či kapalným farmaceutickým ředidlem nebo nosičem. Tyto prostředky mohou mít formu například roztoků nebo tablet.

Vynález dále popisuje

1] způsob inhibování sekrece luteinisačního hormonu, zejména způsob léčby hypertrofle prostaty nebo menopausálního syndromu, zejména post-menopausálních návalů horka, jakož i způsob léčby psychotických poruch u pacientů potřebujících takovouto léčbu, který spočívá iv tom, že se zmíněnému pacientovi podá účinné množství pentapeptidu obecného vzorce I nebo jeho fyziologicky ihydrolyzovatelného, fyziologicky přijatelného esteru, nebo fyziologicky přijatelné ediční soli s kyselinou inebo komplexu takovéhoto pentapeptidu nebo esteru, jakož i

2] pentapeptidy, estery, ediční soli s kyselinami a komplexy uvedené výše v odstavci 1). jako farmaceutika, tj. pro použití při léčbě člověka nebo zvířete, zejména pro použití způsobem uvedeným v odstavci 1), a

I

3] farmaceutické prostředky obsahující pentiapeptidy, estery, adiční soli s kyselinami nebo komplexy, uvedené výše v odstavci 1), jako účinné látky.

V popisné části, v příkladové části i v definici předmětu vynálezu se používají následující obvyklé zkratky:

Met-ol = zbytek (L)-methioininolu vzorce OH3SCH2CH2CH (CH2OH ) NH-,

Met(Oj-ol = zbytek (Lj-methioninol-sulfoxidu vzorce

CHs-S [ O j -CH2CH2CH (CH2OH j -NH-,

MeTyr = -N-methyl-Tyr-,

MeTyr (Bu¹) = -N-methyl-O-terc.butyl-Tyr-,

MePhe = -N-methyl-Phe-, (N-propyljPhe = -N-m-piropyl-Phe-, (N-isobutyl)Phe — -N-isobutyl-Phe-, (N-butyl)Phe = -N-n-butyl-Phe-, (N-propyl)Phe(p-Fj = -N-n-propyl-p-fluor-Phe,

Boc = terc.butoxykarbonyl,

Z = benzyloxykarbomyl.

V souhlase se standardní nomenklaturou •se u všech zbytků aminokyselin, označovaných zkratkami o třech písmenech, uvažuje L-konfigurace, pokud není uvedeno jinak.

Příklad 1

N^c-amidino-Tyr- (D) -Ala-Gly- (N-propy 1) Phe-Met (O j -ol-hydrochlorld

1,05 g N^a-aimidino-Tyr(D)-Ala-Gly-(N-propyl jPhe-Met-ol-hydrochloridu se rozpustí v 10 ml kyseliny octové a oxiduje se při teplotě 20 °C za použití 0,15 ml 11 M peroxidu vodíku. Po 10 minutách se produkt vysráží ethyletherem. Surový produkt se vyčistí protiproudým rozstřepáváním ve směsi chloroformu, methanolu a vody (65 : 35 : 10 objem/objem). Po překrystalování ze směsi methanolu a ethyletheru se získá sloučenina uvedená v názvu, o optické rotaci [a]_D ²⁰ — = —33,6° (c = 1 v 95% kyselině octové).

Výchozí materiál používaný při shora popsané reakci se připraví následujícím způsobem:

a) H- (N-propy 1) Phe-NH-NH-Z-hydrochlorid

K roztoku 14,0 g H-Pbe-NH-NH-Z-hydro•chlorldu ve 120 ml methanolu se při teplotě 20 °C přidá nejprve 10,0 g natriumkyanborohydridu a po 5 minutách pak 3,2 ml piropionaldehydu. Po reakci trvající 2,5 hodiny se rozpouštědlo odpaří ve vakuu, k odparku se přidá 50 ml vody, směs se silně zalkalizuje (pH cca 12 j přidáním 10 N hydroxidu sodného a produkt se extrahuje methylenchlorideim. Extrakt se důkladně promyje vodou, vysuší se síranem sodným a přidá se k němu nadbytek chlorovodíku v ethyletheru. Krystalizace se pak dokončí přidáním dalšího etheru. Získá se sloučenina uvedená v názvu, o optické rotaci [a]_D ²⁰ = -T 42,5 °C (c — I v dimethylformamidu).

b) Boc-Gly- (N-propyl )Phe-NH-NH-Z

K roztoku 16,8 g Boc-Gly-OH ve 100 ml tetrahydrofuranu se při teplotě —20 °C přidá 11,8 ml pivaloylchloridu, směs se 15 minut míchá při teplotě —15 °C, pak se k ní přidá roztok 12,5 g H-(N-propyl )Phe-NH-NH-Z a 5,5 ml N-ethyl-diisopropylaminu v 50 ml tetrahydrofuranu, reakční směs se míchá 1 hodinu při teplotě —15 °C, pak 1 hodinu při teplotě 0 °C a nakonec 20 hodin při teplotě 10 °C. Po přidání 150 ml 1N hydrouhličitanu draselného se produkt extrahuje ethylacetátem, extrakt se promyje zředěným roztokem hydrogénuhličitanu draselného a hydírogensíranu draselného a vodou, vysuší se síranem sodným a rozpouštědlo se odpaří ve vakuu. Sloučenina uvedená v názvu se vyčistí chromatograficky za použití silikagelu a směsi methylenchloridu a methanolu jako elučního činidla.

c) Boc-Gly-(N-propyl)Phe-NH-NH2

21,1 g Boc-Gly-(N-propyl jPhe-NH-NH-Z ve 100 ml methanolu se hydrogenuje v přítomnosti paládiového katalyzátoru po dobu 1 hodiny za tlaku vodíku 0,2 až 0,3 MPa. Rozpouštědlo se odpaří ve vakuu a amorfní zbytek se vysuší nad kysličníkem fosforečným a hydroxidem draselným ve vakuu, čímž se získá sloučenina uvedená v názvu, o optické rotaci [a]_D ²⁰ = —39,4° (c = 1 v dimethylformamidu j.

d) Boc-Gly-(N-propyljPhe-Met-ol

K roztoku 7,8 g Boc-Gly-(N-propyl )Phe-NH-NH2 v 50 ml dimethylformamidu se při teplotě —18 °C za míchání přidá nejprve

8,6 ml 8 N chlorovodíku v dloxanu a pak

2,1 ml teirc.butylnitritu. Po desetiminutovém stání při teplotě —18 °C se směs neutralizuje přidáním 12,0 ml N-ethyl-diisopropylaminu a smísí se s předem ochlazeným roztokem 5,4 g methioninolu [CH3SCH2CH2CH(NHžjCHaOHj ve 30 ml dimethylformamidu. Po tříhodinové reakci při teplotě —10 °C se reakční směs zředí ethylacetátem, promyje se zředěným roztokem hydrogénuhličitanu draselného a hydrogensíranu draselného a vodou, vysuší se síranem sodným, rozpouštědlo se odpaří ve vakuu a zbytek se vyčistí chromatografií ma silikagelu za použití směsi methylenchloridu a methanolu jako elučního činidla, čímž se získá žádaná sloučenina uvedená v názvu.

e j H-Gly- (N-propyl)Phe-Met-ol-hydrochlorid

K roztoku 9,9 g Boc-Gly-(N-propyl)Phe-Met-olu ve 20 ml ethyletheiru se při teplotě 0 °C přidá 100 ml 5 N chlorovodíku v ethyletheru. Po další hodině při teplotě 0 °C se rozpouštědlo odpaří ve vakuu a zbytek se překrystaluje ze směsi ethylacetátu, methanolu a ethyletheru, čímž se získá sloučenina uvedená v názvu, o optické rotaci [a]_D ²⁰ = = —72,5° (c = l v dimethylformamidu). Produkt se rozkládá při 60 °C.

fj Boc-Tyr-(D)-Ala-NH-NH-Z

K roztoku 14,1 g Boc-Tyr-OH a 5,6 ml N-imethy lfor marni du ve 100 ml tetrahydrofuranu se při teplotě —20 °C přidá 6,6 ml Isobutylchlorformiátu. Po pětiminutové reakci při teplotě —20 ^DC se přidá roztok 13,7 gramu H- (D j-Ala-NH-NH-Z-hydrochloridu a 5,0 ml N-methylmorfolinu v 50 ml dimethylformamidu. Směs se nechá 2,5 hodiny reagovat při teplotě —15 °C, pak se k ní přidá 100 ml 1 N hydrogénuhličitanu draselného, reakční směs se zředí ethylacetátem, promyje se zředěným roztokem hydrogenuhličitanu draselného a hydrogensíranu draselného a vodou, načež se vysuší síranem sodným a rozpouštědlo se odpaří ve vakuu. Po překrystalování zbytku ze směsi ethylacetátu, hexanu a ethyletheru se získá sloučenina uvedená v názvu.

g) H-Tyr- (D j-Ala-NH-NH-Z-hydrochlorid

K roztoku 25,0 g Boc-Tyr-(D)-Ala-NH-NH-Z v 50 ml ethylacetátu se při teplotě 0 °C přidá 100 ml 5 N roztoku chlorovodíku v etheru. Po 1,5 hodině se krystalizace dokončí přidáním dalšího ethyletheru. Sloučenina uveedná v názvu se izoluje filtrací. Produkt má optickou rotaci [a]_D ²⁰ = +32,8° (c = = 1 v dimethylformamidu) a rozkládá se při 200 °C.

h) N^a-amidino-Tyr- (D) -Ala-NH-NH-Z-hydrochlorid

K roztoku 8,8 g H-Tyr-(D j-Ala-NH-NH-Z-hydrochloridu a 2,8 ml triethylaminu v 50 mililitrech dimethylformamidu se přidá 12,1 gramu l-amidino-3,5-dimethylpyrazolinitrátu. Směs se 4 dny míchá při teplotě 50 až 60 °C a pak se k ní přidá 3,0 ml triethylaminu. Rozpouštědlo se odpaří ve vakuu, zbytek se vyjme vodou a roztok se několikrát extrahuje methylenchloridem. Vodná fáze se zahustí na cca 400 ml, koncentrát se adsorbuje na* polystyrénovou adsorpční pryskyřici a sloučenina uvedená v názvu se z adsorbentu vymyje jako nitrát za použití směsi methanolu a vody jako elučního činidla. Eluát se odpaří k suchu, zbytek se znovu vysuší ve vakuu, rozpustí se v ethylacetátu za přítomnosti malého množství ethanolu a přidáním ethyletheru a nadbytku 5 N chlorovodíku v ethylacetátu se vysráží sloučenina uvedená v názvu, ve formě hydrochloridu.

Produkt má optickou rotaci [a]_D ²⁰ — — +23,3° (c — 1 v dimethylformamidu) a rozkládá se při 50 °C.

i j N-ainidino-Tyr- (D j -Ala-NH-NH2-hydrochlorid

1,6 g N^a-amidino-Tyr-(D)-Ala-NH-NH-Z-hydrochlorldu ve 20 tmi methanolu se v přítomnosti paládiového katalyzátoru hydrogenuje za tlaku vodíku 0,2 až 0,3 MPa. Po 30 minutách se katalyzátor odfiltruje, rozpouštědlo se odpaří ve vakuu a zbytek se prekrystaluje ze směsi methanolu a ethyletheru. Získá se sloučenina uvedená v názvu, o optické rotaci [a]_D ²⁰ = +13,2° [c = lvdimethylformamiduj, rozkládající se při 80 stupních Celsia.

j j N^K-amidi,no-Tyr- (D) -Ala-Gly- (N-propyl) Phe-Met-ol-hydrochlorid

K roztoku 1,04 g N^a-amidino-Tyr-(D JAla-NH-NH2-hydroehloridu ve 20 ml dimethylfarmamidu se při teplotě —18 °C přidá nejprve 1,3 ml 8 N chlorovodíku v dioxanu a pak 0,35 ml terc.butylnitritu.

Po desetiminutovém stání při teplotě —18 °C se reakční směs neutralizuje

2,3 ml N-ethyldiisopropylaminu a smísí se s ochlazeným roztokem 1,5 g H-Gly-( N-propyl ]Phe-Met-ol-ihydrochloridu a 0,62 ml N^ethyl-diisopropylaminu v 15 ml dimethylformamidu. Po jednohodinové reakci při teplotě —15 °C a následující tříhodinové reakci při teplotě —10 °C se rozpouštědlo odpaří ve vakuu, zbytek se vyjme vodou a roztok se několikrát promyje methylenchloridem. Vodná fáze se odpaří na objem cca 60 ml, adsorbuje se na polystyrénové absorpční pryskyřici, pryskyřice se promyje vodou a produkt se z ní vymyje vodným methanolem. Po odpaření eluátu k suchu a vysirážení ze směsi methanolu a ethyletheru se získá sloučenina uvedená v názvu, o optické rotaci [a]_D ²⁰ = —41,0° (c = 1 v dimethylformamidu], rozkládající se při 90 °C. Příklad 2

Analogickým postupem jako v příkladu 1 se připraví následující sloučeniny:

2.1 H-MeTyir- (D)-Ala-Gly- (N-propyl )Phe-Met{0)-ol-trifluoracetát o optické rotaci [ee]n²⁰ — —19,3° (c = 1 v 95% kyselině octové),

2.2 H-MeTyr-(Dj-Ala-Gly-(N-isobutyl)Phe-Met{Oj-ol-trifluoracetát o optické rotaci [a]_D ²⁰ = —13,7° (c — 1 v 95% kyselině octové,

2.3 H-MeTyr- (D j - Ala-Gly- (N-buty 1) Phe-Met(O)-ol-trifluoracetát o optické rotaci [«]d²⁰ = —7,9° (c — 1 v 95% kyselině octové,

2.4 H-MeTyr-{D)-Ala-Gly-(N-propyl]Phe(p-F)-Met{Oj-ol-trifluoracetát o optické rotaci [a]_D ²⁰ — —9,O*¹ (c — 1 v 95% kyselině octové,

2.5 N^a-amidino-Tyr- (D) -Ala-Gly-MePhe-Met(O)-ol-acetát o optické rotaci [a]D²⁰ = = —50,8° (c — 0,7 v dimethylfoirmamídu) a

2.6 N“-amidino-Tyr-(D)-Ala-Gly-MeP.he(p-F)-Met(O j-ol-hydroohlorid o optické rotaci [a]_D ²⁰ — —29,3 (c = 1 v 95!% kyselině octové j.

Claims (2)

předmEt

1. Způsob výroby pentaptidů obecného vzorce I,

A—B—Gly—D—Ε (I) ve kterém

A znamená zbytek obecného vzorce II, kde

Z¹ představuje atom vodíku, methylovou skupinu nebo amidinoskuipinu,

Ri znamená atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku a

Rz znamená atom vodíku nebo

Ri a Rz společně tvoří ethylenový můstek a

R3 znamená hydroxyskupinu nebo alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, navázanou v poloze 3, 4 nebo 5,

B představuje zbytek (D)-isomeru přírodní a-aminokyseliny,

D znamená zbytek obecného vzorce III,

Z²

I

R4 CH2 I I

-N—CH—CO— (III) v iněmž

R4 znamená atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku a

Z² představuje fenylovou skupinu, popřípadě moino- nebo disubstituovanou halogenem, nitroskiupinou, alkylovou skupinou s 1 až 4 atomy uhlíku β/nebo alkoxyskupinou s 1 až 4 atomy uhlíku a

E představuje zbytek obecného vzorce IV,

R5 R6

I I —N—CH—CH₂OH (IV) v němž

Rs znamená atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku a

R6 představuje zbytek vzorce — (CH)_n-CH₂-S(O)_p-R7, kde

Rz znamená alkylovou skupinu s 1 až 5 atomy uhlíku, n je číslo o hodnotě 0, 1 nebo 2 a p je číslo o hodnotě 1 nebo 2, přičemž zbytky A a D mají (LJ-kanfiguraci, zbytek E má (Dj- nebo (Lj-konfiguraci a zbytek B má (DJ-konfiguraci, s tím omezením, že znamená-li Z¹ atom vodíku nebo methylovou skupinu, pak R4 představuje alkylovou skupinu se 3 až 4 atomy uhlíku, jakož i jejich fyziologicky hydrolyzovatelných, fyziologicky přijatelných esterů a solí a komplexů těchto pentapeptidů a esterů, vyznačujících se tím, že se oxiduje pentapeptid nebo jeho ester, mající sekvenci uvedenoiu v obecném vzorci I, v němž E představuje zbytek obecného vzorce

- (CH₂)_n— CH2-S-Ry, kde n a R7 mají shora uvedený význam, za vzniku odpovídajícího pentaptidu či esteru, v němž E znamená zbytek obecného vzorce — (CHz )_n—CH₂—S (O) p—R7, kde η, p a R7 mají shora uvedený význam, a takto vzniklý pentapeptid nebo jeho ester se izoluje ve volné formě nebo ve formě adiční soli s kyselinou nebo komplexu.

2. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se použijí odpovídající výchozí látky za vzniku sloučenin obecného vzorce I, ve kterém

Z¹ znamená atom vodíku inebo methylovou skupinu,

Ri a Rz buď znamenají vždy atom vodíku, nebo společně tvoří ethylenový můstek,

R3 představuje hydroxyskupinu v poloze 4,

B znamená zbytek D-Ala,

Rt představuje alkylovou skupinu se 3 až 4 atomy uhlíku,

E znamená zbytek Met(O)-ol a

Z² má význam jako v bodu 1.