WO2014157703A1 - 生体染色剤 - Google Patents
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Abstract
Description
多光子レーザ顕微鏡による細胞内に存在するFAD(フラビンアデニンジヌクレオチド)の可視化は、細胞や分子の挙動を低浸襲的に解析することができることから、内視鏡技術への応用が期待されている。多光子レーザ顕微鏡によれば、730nm程度の波長で細胞内フラビンが可視化されるため、細胞を染色することなく自家蛍光画像を取得することができる(Rogart, J. N., et al., "Multiphoton imaging can be used for microscopic examination of intact human gastrointestinal mucosa ex vivo", Clin Gastroenterol Hepatol 2008 January; 6(1): 95-101)。しかしながら、多光子レーザ顕微鏡下で得られる画像は低コントラストである。また、多光子レーザの照射により生体内で紫外線が発生するため、DNA損傷の危険性からヒトへの応用は承認されていない。また、細胞の自家蛍光の強さは、臓器によって大きく異なり、自家蛍光の強い大腸などの消化管上皮細胞は、現在市販されている多光子レーザ顕微鏡を用いて細胞画像を可視化しうるが、自家蛍光が弱い卵巣上皮細胞や膀胱上皮細胞は、現在市販されている多光子レーザ顕微鏡を用いて細胞画像の可視化が困難である(Cruz, J., et al. BIOMEDICAL OPTICUS EXPRESS 1, 5, 1320-1330, 2010年)。
また、多光子レーザ顕微鏡では、高解像度の蛍光画像を取得することができ、早期癌段階の小さい癌細胞の発見が可能である。しかしながら、多光子レーザ顕微鏡で癌細胞や癌組織を発見しても、治療を行うことができず、治療には他の装置の利用や外科的処置が必要であり、早期癌のような小さい状態では、依然として治療時に癌細胞や癌組織の位置の特定に手間取る可能性が残る。
したがって、本発明は、第四の観点において、多光子吸収現象を用いて患者の組織の観察を行うと共に当該組織の一部を選択的に破壊するための多光子レーザ診断治療装置を提供する。
第二の観点において、本発明者らは、癌細胞を優先的又は正常細胞を優先的、あるいは両者を同程度に染色する細胞染色特性を有する染色剤を効率よく評価、選定する方法の提供を課題に鋭意検討した結果、そのような染色剤の評価、選定方法を完成するに至った。そして、当該評価、選定方法を利用し、1200種類もの大量の食用染色剤の中から、上記細胞染色特性を有する染色剤を見出すに至った。
従って、第四の観点において、本発明は、上記目的に鑑み、多光子吸収現象を用いて患者の組織の観察を行うと共に当該組織の一部を選択的に破壊するための多光子レーザ診断治療装置であって、周波数及び出力を調整可能なパルスレーザ光を出射するレーザ光源と、前記レーザ光源からのパルスレーザ光を前記組織における集光位置に照射する光学系と、前記集光位置を変位させる集光位置変位装置と、前記パルスレーザ光の照射により前記組織から発せられた蛍光を検出する光検出器と、前記集光位置変位装置から得た前記集光位置を表すパラメータと前記光検出器によって検出された蛍光の強度とを対応付けて処理することにより前記組織の蛍光画像を生成する蛍光画像生成装置と、制御装置とを備え、ここで前記光学系の周囲は筒状のシールド部材で覆われ、該シールド部材は観察すべき組織の周辺と圧着することで該光学系を封入する空間を形成し、該シールド部材は該空間内の圧力を調節するための通気口を備え、前記制御装置が、前記パルスレーザ光の強度を設定するパルス光強度設定部と、前記蛍光画像上で前記パルスレーザ光の照射範囲を設定する照射範囲設定部と、前記パルスレーザ光の照射時間を設定する照射時間設定部とを含み、前記パルス光強度設定部によって定められた強度の前記パルスレーザ光を前記照射時間設定部によって定められた時間だけ前記照射範囲設定部によって定められた座標範囲に前記集光位置変位部によって走査させながら照射させ、前記パルスレーザ光のエネルギにより前記照射範囲設定部によって定められた照射範囲の前記組織の細胞を選択的に破壊させるようにした多光子レーザ診断治療装置を提供する。
前記シールド部材は前記空間内に液体を供給及び排液するための給液口及び排液口をさらに備えてよく、ここで当該給液口及び排液口は同一のものでも異なるものであってよく、さらに当該給液口及び排液口は前記吸気口及び排気口を兼ねていてもよい。好ましくは、前記液体が組織を染色するための染色剤を含む染色液及び該染色液を洗浄するための洗浄液である。
本発明の生体染色剤は、食品添加物等として認可されている、可食性の天然(動物性又は植物性)又は合成の色素化合物を含む。本明細書で使用する場合、「可食性」とは、対象化合物の用途が本来食用であることを意図するものではなく、食品等に添加できるほどの安全性が担保されており、ヒトなどの管腔臓器を有する動物に適用可能であることを意味する。本発明における可食性の色素化合物は、例えば、タール系色素、特に食用タール系色素、イリドイド系色素、カロテノイド系色素、フラボノイド系色素(例えばカテキン類;アントシアニン類、特にアントシアニジン類;カルコン類;クルクミノイド類)、キノイド系色素、ベタライン系色素を含む蛍光色素化合物群から選択される。本発明における色素化合物は構造により以下のとおり分類することができる。
タール系色素の例として、以下の化合物が挙げられる:
赤色3号(エリスロシン)、赤色104号(フロキシン)、赤色105号、赤色106号(アシッドレッド)、緑色3号(ファストグリーンFCF)、赤色2号、赤色102号、青色2号(インジゴカルミン)、黄色4号(タートラジン)、黄色5号(サンセットイエローFCF)等。
イリドイド系色素の例として、以下の化合物が挙げられる:
ハイメロンP-2(クチナシ青:ゲニポシド)、ハイブルーAT(クチナシ青色素:ゲニポシド)等。
カロテノイド系色素の例として、以下の化合物が挙げられる:
ハイメロンP-2(黄色素:クロシン)、アナトール(アンナットーN2R25、紅の木の実:ビキシン、ノルビキシン)、ハイメロンP-2(クチナシ青:ゲニポシド)、クロシンG150(クチナシ黄色素)、クロシンL(クチナシ黄色素)、βカロテン、アンナットーWA-20(アナトール色素べにの木の種子:ノルビキシン)等。
フラボノイド系色素の例として、アントシアニン類、特にアントシアニジン類、カテキン類、カルコン類、クルクミノイド類等がある。
ハイレッドG150(ブドウ果皮色素、アントシアニン)、ハイレッドRA200(赤大根色素:ペラルゴニジンアシルグリコシド)、ハイレッドV80(紫芋色素:シアニジンアシルグルコシドおよびペオニジンアシルグルコシド)、アピゲニニジン(コウリャン色素)、シアニジン、デルフィニジン(ナス色素)、フィセチニジン(モリシマアカシア色素)、マルビジン(青いスイートピー色素)、ペラルゴニジン、ロビネチニジン(ニセアカシアの木色素)、トリセチニジン(紅茶色素)、ペツニジン(レッドベリー色素)、カプサンチン(トウガラシ色素)等。
スルフレチン、ミリセチン(ブドウ、玉ねぎ色素)、クェルセチン(玉ねぎ、柑橘類色素)等。
キノイド系色素の例として、以下の化合物が挙げられる:
コチニール(コチニールレッドAL、カルミン酸)、ハイレッドS(ラック色素・ラッカイン酸)等。
ベタライン系色素の例として、ハイレッドBL(赤ビート色素:ベタニン、イソベタニン)等がある。
1)多光子レーザにより強く励起され明るい生体細胞画像を提供する色素
クルクミン(ウコン等に由来)、スルフレチン、エピガロカテキンガラート、赤色3号(エリスロシン)、赤色106号、緑色3号、赤色2号、赤色102号、赤色104号(フロキシン)、青色2号、黄色4号、黄色5号、ハイメロン、アナトール、インドシアニングリーン、クチナシ黄色素、クロシン G-150、サフロミン、ハイブルー AT、フルオレッセイン、シアニジン(、デルフィニジン、フィセチニジン、ロビネチニジン、ペラルゴニジン、アピゲニニジン、マルビジン、βカロテン、赤105号、ハイレッドRA200、ハイレッドV80、ハイレッドBL、6-ギンゲオール、ケルセチン、ミリセチン、トリセニジン及びペツニジン。
消化管粘膜の細胞構成は、食物が通る粘膜表面を覆う上皮細胞と上皮細胞がタコツボ状に陥入して粘液を分泌する腺細胞からなる細胞群(第一系列)と、上皮細胞や腺細胞の周囲を埋める毛細血管や結合組織細胞からなる細胞群(第二系列)に分類することができる。粘膜表面から対物レンズを近づけてゆくと、その焦点が粘膜表面に結ばれているときは上皮細胞が主に観察され、焦点が深部に結ばれると、腺細胞と結合組織・毛細血管が観察される。
クルクミン(色素番号1番)、スルフレチン(色素番号2番)、エピガロカテキンガラート(色素番号3番)、赤色3号(エリスロシン)(色素番号4番)、赤色104号(フロキシン)(色素番号9番)、インドシアニングリーン(色素番号15番)、マルビジン(色素番号27番)、βカロテン(色素番号28番)、ハイレッドBL(色素番号32番)、6-ギンゲオール(色素番号33番)、ミリセチン(色素番号35番)、トリセニジン(色素番号36番)及びペツニジン(色素番号37番)。
これらの色素の中でも、クルクミンとスルフレチンは染色性が高く好ましい。
アナトール(色素番号14番)、ケルセチン(色素番号34番)、青色2号(色素番号10番)、クチナシ黄色素(色素番号16番)、クロシン G-150(色素番号17番)、サフロミン(色素番号18番)、ロビネチニジン(色素番号24番)、ハイレッドV80(色素番号31番)及び色素番号34番のケルセチン(色素番号34番)。
これらの色素の中でも、アナトールとケルセチンは染色性が高く好ましい。
赤色106号(色素番号5番)は上皮細胞・腺細胞の細胞膜と結合組織・毛細血管系を強く染色する。また、緑色3号(色素番号6番)は一部の腺細胞と結合組織・毛細血管系を強く染色する。
本発明は、多光子レーザ顕微鏡下での観察下での生体染色剤の細胞染色特性、即ち、癌細胞を特異的に染色するか、又は正常細胞を特異的に染色するか、又は癌細胞と正常細胞のいずれも同定に染色するかを評価する方法を提供する。本発明の評価方法で使用する正常細胞と癌細胞は好ましくは同一の種に由来する哺乳動物細胞であり、例えば癌細胞は正常細胞に癌遺伝子を形質転換させたものであってもよい。哺乳動物細胞の例としては、MDCK細胞、MDBK細胞、COS-細胞、BSC-1細胞、LLC-MK細胞、CV-1細胞、VERO細胞、CRFK細胞、RAF細胞、RK-細胞、TCMK-1細胞、LLC-PK細胞、PK15細胞、LLC- RK細胞、MDOK細胞、BHK-21細胞、CHO細胞、NS-1細胞、MRC-5細胞、WI-38細胞、BHK細胞、293細胞、RK-細胞等が挙げられるが、それに限定されるものではない。また、正常細胞として好ましくは、本発明の評価方法で使用する細胞はイヌ腎臓尿細管上皮細胞由来の細胞株であるMDCK正常細胞であり、癌細胞はがん遺伝子産物RasV12を発現するMDCK-GFP-RasV12細胞(RasV12はRasの12番目のアミノ酸残基グリシンがバリンに置換したものであり、大腸癌では30-40%は認められる変異である)。がん遺伝子産物RasV12を発現する細胞はテトラサイクリンの添加により正常細胞に比べ優先的に増殖させることができるという性質をもつ。
好ましくは、上記レポーター遺伝子は上記癌遺伝子のプロモーターに作用可能式に連結され、上記癌遺伝子の発現と連動して発現される。
多光子レーザ顕微鏡観察下で、正常細胞に比べ癌細胞を特異的に染色する染色剤:
メクロサイクリンスルフォサルチル酸塩
メタサイクリン塩酸塩
メルブロミン
ファストグリーンFCF
赤色3号(エリスロシン)
赤色104号(プロキシン)
ミトキサントロン二塩酸塩
ドキソルビシン塩酸塩
ピルビニウムパモエート
シカゴスカイブルー6B
ローズベンガルナトリウム塩
アシッドレッド
ハイレッドV80(ムラサキイモ色素)
従って、本発明は、多光子レーザ顕微鏡下で観察するための、正常細胞に比べ癌細胞を特異的に染色する染色剤であって、メクロサイクリンスルフォサルチル酸塩、メタサイクリン塩酸塩、メルブロミン、ファストグリーンFCF、赤色3号(エリスロシン)及び赤色104号から成る群から選択される1又は複数の色素化合物を含んで成る細胞染色剤と、正常細胞と癌細胞を同等に染色する染色剤であって、ピルビニウムパモエート、シカゴスカイブルー6B,ローズベンガルナトリウム塩、アシッドレッド及びハイレッドV80(ムラサキイモ色素)から成る群から選択される1又は複数の色素化合物を含んで成る細胞染色剤との混合物を含んでなる、細胞染色剤のカクテルも提供する。
本発明において色素化合物として使用されるクルクミン、スルフレチン、及びエピガロカテキンガレートはフラボノイドの一種である。エリスロシン(赤色3号)及びアシッドレッド(赤色106号)はタール系色素として知られている。いずれの色素化合物も経口投与可能なものである。これらの色素化合物はいずれも多光子レーザにより強く励起され明るい生体細胞画像を提供することができる。また、これらの色素化合物は、消化管等の管腔臓器を構成する特定の細胞構造を優先的に濃く染める性質を有する。
次に、図面を参照して、本発明による多光子レーザ診断治療装置の実施の形態を説明する。
最初に、図1を参照して、本発明による多光子レーザ診断治療装置の全体構成を説明する。多光子レーザ診断治療装置11は、レーザ発振器13と、ビーム径調節器15と、二次元走査器17と、ダイクロイックミラー19と、対物レンズ21と、集光深さ調節器23と、光検出器25と、蛍光画像生成装置27と、モニタ29と、制御装置31とを備える。
図4は上記図1における対物レンズ21を含む光学系の詳細を示すものである。図4において対物レンズ50の周囲は筒状のシールド部材51で覆われ、該シールド部材は観察すべき組織52の周辺と圧着することで該光学系を封入する空間53を形成することを示す。さらに、該シールド部材は該空間内の圧力を調節するための通気口54,55を備える。通気口54,55は例えば真空ポンプなどの吸引手段に接続され、上記空間内を陰圧にすることで、該シールド部材と組織との密着性を高め、その結果、患者の微妙な動きによっても対物レンズと観察組織の相対的位置関係が保たれ、画像のブレなどを防ぐことができる。画像撮影や施術の完了後、通気口54,55を解放することで前記空間内の陰圧状態は常圧に戻り、光学系50を組織から脱離させることができる。通気口54,55は1又は複数個あってよく、複数ある場合、一方を恒久的に吸引手段に接続したままとし、他方の通気口を開閉することで空間内の空気圧の調節が容易となる。
好ましくは、該シールド部材は前記空間内に組織を染色するための染色剤を含む染色液及び該染色液を洗浄するための洗浄液を供給及び排液するための給液口56及び排液口57をさらに備える。当該給液口56及び排液口57は同一のものでも異なるものであってよく、さらに当該給液口56及び排液口57は前記通気口54,55を兼ねていてもよい。好適な態様では、染色液は給液口56を介して前記空間に導入して組織を染色し、その後排液口57を介して該染色液を排液し、必要であれば洗浄液を前述と同一または異なる給液口56を介して前記空間に導入し、前述と同一または異なる排液口57から排液することで組織を洗浄する。
図5は光学系の周囲が筒状のシールド部材51で覆われた状態で存在する内視鏡61を示す。図5において63は挿入部であり消化器を円滑に通過させるため柔軟な構造をしている。64は鉗子口、65は鉗子、66は左右上下のアングルノブ操作部を簡略化して示す。67は視度調節などを行なう接眼部、68は接眼レンズ部、69は送気、送水操作部、70吸引操作部、71は検査器本体(図示せず)との接続部、71はライトガイドであり、この近くには、送気口、染色剤挿入口、染色剤吸引口などが検査器本体と接続可能に構成されている。ここで内視鏡の先端部62の光学系50における対物レンズの周囲が筒状のシールド部材51で覆われることで、図4との関係で説明のとおり該シールド部材は観察すべき組織の周辺と圧着して該光学系を封入する空間(図4の53)を形成し、さらに、当該該内視鏡61のシールド部材がやはり図4との関係で説明のとおり、該空間内の圧力を調節することができる内視鏡が備える吸引手段に接続された通気口54,55を備えることで、上記空間内を陰圧にし、該シールド部材と組織との密着性を高め、その結果、患者の微妙な動きによっても対物レンズと観察組織の相対的位置関係が保たれ、内視鏡による検査又は施術中での画像のブレなどを防ぐことができる。画像撮影や施術の完了後、通気口54,55を解放することで前記空間内の陰圧状態は常圧に戻り、光学系50を組織から脱離させることができる。上記の操作は69に送気、送水操作部、70吸引操作部に操作ボタンが集められても良いし、染色作業は準備過程でもあるので、患部撮影、蒸散や削除手術操作とは異なり、検査器本体側に設けられた操作ボタン類で行なってもよい。このような内視鏡を用いることにより、従来の内視鏡手術より精度の良い癌等の病理組織の発見、並びに削除手術が可能となる。
まず、診断時には、制御装置31の診断用パルス強度設定部35に設定されているパルスレーザ光強度でレーザ発振器13からパルスレーザ光を出力し、制御装置31の動作制御部33からの動作指令に従ってビーム径調節器15によって所定のビーム径に調節する。所定のビーム径に調節されたパルスレーザ光は、制御装置31の動作制御部33からの動作指令に基づいて二次元走査器17によって所定範囲を二次元的に走査するように制御されつつ、ダイクロイックミラー19に導かれて対物レンズ21へ向かって反射される。対物レンズ21によって集光されたパルスレーザ光は、集光位置が患者の組織内の所定深さの2次元平面上を走査するようになる。なお、パルスレーザ光の集光位置は、制御装置31の動作制御部33からの指令に従って患者の組織において予め定められた深さに調節される。
患者の診断対象の組織の表面に染色剤を予め塗布しておくことが好ましい。組織の表面に染色剤を塗布することにより、癌病変した組織が正常組織よりも色素に濃く染まって、正常組織と癌病変組織との蛍光の差が大きくなり、癌病変部位を発見しやすくなる。これは、正常組織では、細胞接着が強く細胞間の間隙がほとんどないのに対して、癌病変部では、細胞同士の接着が弱く細胞間に隙間が多く、その間隙に染色剤が貯留されやすいためと考えられる。染色剤としては、人体への安全性の高い食用色素などを使用することが好ましく、特に、正常組織と癌病変組織との蛍光の差を大きくする染色剤として、例えば、エリスロシン、クルクミン、エピガロカテキンガラート、スルフレチン、アシッドレッドなどを用いることが好ましい。
8週齢のC57B6マウス(オス、約20 g)に2% (w/v) デキストラン硫酸ナトリウム (DSS)を含む飲水を7日間与えた。5%抱水クロラール0.2 mlを腹腔内注射して麻酔した後、マウスの腹壁を約1cm縦に切開し、消化管を約1cm腹壁上に持ち上げた。ここで、消化管への血流は腸間膜付着部に流入する血管によって保たれる。消化管を、腸間膜付着部の反体側で筋層と粘膜を含めて約1cm縦に切開した。腸間膜付着部の反対側を切開するのは、血管の切断・損傷を防ぎ、出血を最小限にするためである。消化管の切開部位を上下に開くと内部に、食物の通路である消化管粘膜面が見えた。ここに食物消化物がある場合にはティッシュペーパーでふき取った。
上記色素化合物のうち、特定の化合物がマウス大腸の粘膜表面に塗布された場合に多光子レーザで強く励起され、明るい画像を提供した。特に明るい画像が得られた色素化合物について、蛍光画像リストを図6に示す。色素化合物の投与から観察までの手順は上述の染色性評価の項目に記載したとおりに行った(以下同様)。また、粘膜表面への色素の投与濃度は、色素番号1番のクルクミンの場合のみ5 mg/mlで、その他の色素は、すべて1 mg/mlとした。
上皮細胞・腺細胞系を優先的に染色する様々な色素が確認されたが、代表例として色素番号1番のクルクミンや色素番号2番のスルフレチンの染色パターンを図7に示す。これらの色素は上皮細胞・腺細胞系を濃く、そして結合組織・毛細血管系を淡く染色した。その他、色素番号3番のエピガロカテキンガラート、色素番号4番の赤色3号(エリスロシン)、色素番号9番の赤色104号(フロキシン)、色素番号15番のインドシアニングリーン、色素番号27番のマルビジン、色素番号28番のβカロテン、色素番号32番のハイレッドBL、色素番号33番の6-ギンゲオール、色素番号35番のミリセチン、色素番号36番のトリセニジン、色素番号37番のペツニジンも、上皮細胞・腺細胞系を優先的に染色した(結果は示さず)。
結合組織・毛細血管系を優先的に染色する様々な色素が確認されたが、代表例として色素番号14番のアナトールと色素番号34番のケルセチンの染色パターンを図8に示す。これらの色素は結合組織・毛細血管系を濃く、そして上皮細胞・腺細胞系を淡く染色した。その他、色素番号10番の青色2号、色素番号16番のクチナシ黄色素、色素番号17番のクロシン G-150、色素番号18番のサフロミン、色素番号24番のロビネチニジン、色素番号31番のハイレッドV80、色素番号34番のケルセチンも、結合組織・毛細血管系を優先的に染色した。
上皮細胞・腺細胞系と結合組織・毛細血管系の両方を染色する色素も確認されたが、代表例として色素番号5番の赤色106号や色素番号6番の緑色3号の染色パターンを図9に示す。色素番号5番の赤色106号の場合には、上皮細胞・腺細胞の細胞膜と結合組織・毛細血管系が強く染色された。色素番号6番の緑色3号の場合には、一部の腺細胞と結合組織・毛細血管系が強く染色された。
(材料)
・イヌ腎臓尿細管上皮細胞由来の細胞株であるMDCK正常細胞。
・緑色蛍光タンパク質であるGFPを恒常的に活性化しているがん遺伝子産物RasV12と融合させたGFP-RasV12を発現するMDCK-GFP-RasV12細胞(RasV12はRasの12番目のアミノ酸残基グリシンがバリンに置換したものであり、大腸癌では30-40%は認められる変異である)。
・DMEM(high glucose)with Phenol Red(和光純薬)
・DMEM(high glucose)without Phenol Red(和光純薬)
・Tetracycline System Approved Fetal bovine serum(Clontech)
・Penicilin/Streptomycin(x100) (ナカライテスク)
・GlutaMax(x100)(Invitrogen)
・Trypsin(0.25%)(no phenol red、Invitrogen)+EDTA(3mM)(ナカライテスク)
・Zeocin(100mg/ml、InvivoGen)
・Blasticidin(10mg/ml、InvivoGen)
・Tetracycline(SIGMA)/100% ethanol(100 mg/ml)
・10 cm dish(BD Falcon)
・6 cm dish(BD Falcon)
・96-well dish(lumox(登録商標)multi well 96、SARSTEDT)
・DMSO(ナカライテスク)
・米国FDA(Food and Drug Administration)認可済の化合物Prestwick Chemical Library(1200種)
・日本の厚生労働省認可済の食品添加物(30種)
・多光子レーザ顕微鏡(FV1000MPE、Olympus)
10 cm dishでMDCK正常細胞を、そして6cm dishでMDCK-GFP-RasV12細胞を培養した。培養液は、MDCK正常細胞はDMEM(Phenol Red入り)+10 %FBS + Penicilin/Streptomycin、
MDCK-GFP-RasV12細胞はDMEM(Phenol Red入り)+10 %FBS + Penicilin/Streptomycin + Zeocin(400 μg/ml) + Blasticidin(5 μg/ml)を用いた。ともに約90 %コンフルエント(密集度)になった時にTrypsin(0.25 %)+EDTA(3 mM)でそれぞれの細胞をdishから剥がし、MDCK正常細胞とMDCK-GFP-RasV12細胞の比率が50~100:1になるように96-well dishに播種した。この時、1 wellあたり1.0~3.0 x 104個の細胞になるようにDMEM + 10 %FBS + Penicilin/Streptomycinの培養液を用いて播種した。1.0 x 104個播種した場合は4日後、3.0 x 104個播種した場合は1日後に2 μg/mlの濃度のTetracyclineを培養液中に加えてGFP-RasV12を発現させてMDCK正常細胞の中に癌化細胞小集団を形成させた(非特許文献4)。18~36時間後に各wellの細胞を200 μlのPBSで3回洗浄し、100 μlの容量のPBSで1 μMに希釈したそれぞれのPrestwick Chemical Libraryの化合物および厚生労働省認可済の食品添加物を各wellに加えて5分間室温にて細胞に取り込ませた。その後200 μlのPBSで3回洗浄し、場合によってはさらに100 μlのDMEM without Phenol Redで1回洗浄してから多光子レーザ顕微鏡で観察を行った。パルスレーザ光子がステップワイズの750、800、850、そして900 nm領域の励起によりGFP-RasV12陽性の癌化細胞小集団に正常細胞に比べて濃くラベルする化合物、あるいはMDCK正常細胞に癌化細胞小集団に比べて濃くラベルする化合物を、赤色可視光領域でChemical Libraryに含まれる1200種類の化合物および厚生労働省認可済の食品添加物の中から探索・同定した。
1200種類のPrestwick Chemical Libraryの中からは、750、800、850、そして900 nmの全ての領域の光子励起により赤色可視光でGFP-RasV12陽性の癌化細胞小集団に正常細胞に比べて濃くラベルされる、すなわち強い蛍光を示す化合物としてメクロサイクリンスルフォサルチル酸塩、メタサイクリン塩酸塩、そしてメルブロミンの3種を同定した(図10,11、12)。図10から図12の蛍光状態を説明する。図10はメクロサイクリンスルフォサルチル酸塩の評価結果であり、上部にその構造式を示す。同図は850nmのレーザを用いて評価したものであり、左端に示す「GFP」の図は、MDCK-GFP-RasV12細胞によって緑色の蛍光が鮮明に観察されたものである。図10「Meclocycline sulfosalicylate」で示す中央の図はメクロサイクリンスルフォサルチル酸塩によって染色され赤い蛍光が鮮明に観測されたものである。ここで赤色の蛍光は、多光子レーザによって幅のある波長で発光されるため、赤色のフィルターで赤い蛍光を中心に抽出したものである。図10中右端の「Merged」で示すものは、上記「GFP」と「Meclocycline sulfosalicylate」を重ね合わせたものである。ここで特許明細書における白黒表示ではこの精度の把握は難しいかもしれないが、「GFP」で示すMDCK-GFP-RasV12細胞とメクロサイクリンスルフォサルチル酸塩の染色による蛍光が、非常に精度良く重なっていることが分かるものである。このことでメクロサイクリンスルフォサルチル酸塩による染色が癌細胞を正確に蛍光で示していることがわかるものである。図11はメタサイクリン塩酸塩、図12はメルブロミンを染色剤として用い同様の評価をしたものであり、両図とも左端「GFP」は緑色、中央の染色剤による図は赤色の蛍光を観測でき、図10同様に右端の「Merge」では図10同様精度良く重なり赤みがかった緑色(黄色に近い発光色)に表示されている。メタサイクリン塩酸塩、そしてメルブロミンよる染色も癌細胞を正確に蛍光で示していることがわかるものである。また、750、800、850、そして900 nmの全ての領域の光子励起によりMDCK正常細胞に癌化細胞小集団に比べて濃くラベルされる化合物としてMitoxantrone dihydrochlorideそしてDoxorubicin hydrochloride、の2種(図13、14)であり、図13から図14の蛍光状態は、図10から図12と異なり、正常細胞だけが染色により蛍光を示すものであり、両図中央の写真は正常細胞が赤い蛍光を示していることから、蛍光を示さない部位が癌細胞であることが分かるものである。癌化細胞小集団と正常細胞の両方がラベルされる化合物としてPyrvinium pamoateそしてChicago sky blue 6Bの2種(図15、16)を同定した。図15から図16の蛍光状態は、左「GFP」が癌細胞を緑色蛍光を発し、中央「Pyrvinium pamoat」、「Chicago sky blue」は、正常細胞、癌細胞共に赤い蛍光を発していることが分かる。厚生労働省認可済の食品添加物からは、750、800、850、そして900 nmの全ての領域の光子励起により赤色可視光でGFP-RasV12陽性の癌化細胞小集団に正常細胞に比べて濃くラベルされる化合物としてFast Green FCF、Erythrosine、そしてPhloxineの3種(図17、18、19)を同定した。図17から図19においては、各中央の図では癌細胞が強い蛍光を発して観察されていることが分かる。また癌化細胞小集団と正常細胞の両方がラベルされる化合物としてRose Bengal sodium salt、Acid red、そしてハイレッドV80(ムラサキイモ色素)の3種(図20、21、22)を同定した。図20から図22の各中央の図では正常細胞、癌細胞ともに赤い蛍光を発していることが分かる。
FDA認可済の化合物1200種類のPrestwick Chemical Libraryの中から同定した化合物は、すべて1 μMの濃度の染色剤で細胞が染まる。また、厚生労働省認可済の食品添加物の中から同定した食品添加物はすべて1 mg/mlの濃度で細胞が染まった。上記したように癌細胞、正常細胞のどちらかが特異的に染色され蛍光を発する物質と、両方が染色される物質を混合して用いることで検出精度を上げる、両組織の境界付近を見極めることが容易になる。このようにして境界付近の正常細胞も削除するなどにより偽陰性の判定を防ぎ、再発防止策に有効に使用できるものである。ここで使用したレポーター遺伝子「GFP」は、癌細胞を濃くラベルものとして利用したが、正常細胞を濃くラベルするレポータ遺伝子を用いても、同様の評価ができる。
8週齢のC57B6マウス(オス、約20 g)に2% (w/v) デキストラン硫酸ナトリウム (DSS)を含む飲水を7日間与えた。5%抱水クロラール0.2 mlを腹腔内注射して麻酔した後、マウスの腹壁を約1cm縦に切開し、消化管を約1cm腹壁上に持ち上げた。ここで、消化管への血流は腸間膜付着部に流入する血管によって保たれる。消化管を、腸間膜付着部の反体側で筋層と粘膜を含めて約1cm縦に切開した。腸間膜付着部の反対側を切開するのは、血管の切断・損傷を防ぎ、出血を最小限にするためである。消化管の切開部位を上下に開くと内部に、食物の通路である消化管粘膜面が見えた。ここに食物消化物がある場合にはティッシュペーパーでふき取った。
続いて、大腸粘膜面に直径2~4ミリのキノコ状隆起(癌)が確認されたマウスの大腸を染色したところ(プロナーゼ処理無し)、クルクミンとスルフレチンはいずれも正常粘膜より癌病変部を顕著により濃く染色した。クルクミンで染色した結果を図23に示す(対物10倍;Zスタック画像)。
更に、クルクミンとスルフレチンはマウス大腸の粘膜表面に塗布された場合に多光子レーザで強く励起され、明るい画像を提供した。結果を図26に示す。色素化合物の投与から観察までの手順は上述の染色性評価の項目で記載したとおりに行った(以下同様)。また、粘膜表面への色素の投与濃度はクルクミンが5 mg/mlで、スルフレチンは1 mg/mlとした。
上記手順により染色された細胞のうち、癌細胞を多光子レーザ照射によりピンポイントで排除した。ここで、排除すべき癌細胞は、検出に用いた画像の座標軸をそのまま利用して照準を合わせた。照射条件はレーザパワーを45%程度、照射時間を2~10秒間とした。結果を図28A及びBに示す。
13 レーザ発振器
17 二次元走査器
19 ダイクロイックミラー
21 対物レンズ
23 集光深さ調節器
25 光検出器
27 蛍光画像生成装置
29 モニタ
31 制御装置
33 動作制御部
35 診断用パルス強度設定部
37 治療用パルス強度設定部
39 照射範囲設定部
41 照射時間設定部
43 レーザ照射ヘッド
45 患者固定台
47 移動装置
49 内視鏡
50 光学系
51 シールド部材
52 組織
53 空間
54 通気口
55 通気口
56 給液口
57 排液口
61 シールド部材付内視鏡
62 先端部
63 挿入部
64 鉗子口
65 鉗子
66 アングルノブ操作部
67 接眼部
68 接眼レンズ
69 送気、送水操作部
70 吸引操作部
71 接続部
72 ライトガイド
Claims (35)
- 多光子レーザ顕微鏡下で観察するための生体染色剤であって、可食性の1又は複数の色素化合物を含んで成る生体染色剤。
- 前記色素化合物がタール系色素、イリドイド系色素、カロテノイド系色素、フラボノイド系色素、キノイド系色素及びベタライン系色素を含む蛍光色素化合物群から選択される、請求項1に記載の生体染色剤。
- 前記タール系色素が赤色3号(エリスロシン)、赤色104号(フロキシン)、赤色105号、赤色106号、緑色3号(ファストグリーンFCF)、赤色2号、赤色102号、青色2号(インジゴカルミン)、黄色4号(タートラジン)又は黄色5号(サンセットイエローFCF)である、請求項2に記載の生体染色剤。
- 前記イリドイド系色素がハイメロンP-2(クチナシ青:ゲニポシド)又はハイブルーAT(クチナシ青色素:ゲニポシド)である、請求項2に記載の生体染色剤。
- 前記カロテノイド系色素が、ハイメロンP-2(黄色素:クロシン)、アナトール(アンナットーN2R25、紅の木の実:ビキシン、ノルビキシン)、ハイメロンP-2(クチナシ青:ゲニポシド)、クロシンG150(クチナシ黄色素)、クロシンL(クチナシ黄色素)、βカロテン又はアンナットーWA-20(アナトール色素べにの木の種子:ノルビキシン)である、請求項2に記載の生体染色剤。
- 前記フラボノイド系色素が、ハイレッドG150(ブドウ果皮色素、アントシアニン)、ハイレッドRA200(赤大根色素:ペラルゴニジンアシルグリコシド)、ハイレッドV80(紫芋色素:シアニジンアシルグルコシドおよびペオニジンアシルグルコシド)、アピゲニニジン(コウリャン色素)、シアニジン、デルフィニジン(ナス色素)、フィセチニジン(モリシマアカシア色素)、マルビジン(青いスイートピー色素)、ペラルゴニジン、ロビネチニジン(ニセアカシアの木色素)、トリセチニジン(紅茶色素)、ペツニジン(レッドベリー色素)、カプサンチン(トウガラシ色素)、エピガロカテキンガレート、緑茶、サフラワーY1500(ベニバナ色素、サフロミンA+B)、クルクミン、スルフレチン、ミリセチン(ブドウ、玉ねぎ色素)又はクェルセチン(玉ねぎ、柑橘類色素)である、請求項2に記載の化合物。
- 前記キノイド系色素がコチニール(コチニールレッドAL、カルミン酸)又はハイレッドS(ラック色素・ラッカイン酸)である、請求項2に記載の生体染色剤。
- 前記ベタライン系色素がハイレッドBL(赤ビート色素:ベタニン、イソベタニン)である、請求項2に記載の生体染色剤。
- 前記蛍光色素化合物がインドシアニングリーン又はジンゲロール(ショウガ辛み成分)である、請求項2に記載の生体染色剤。
- 管腔の上皮細胞・腺細胞系及び/又は結合組織・毛細血管系の細胞を染色するための、請求項1~9のいずれか1項に記載の生体染色剤。
- 前記細胞が癌細胞である、請求項10に記載の生体染色剤。
- 前記色素化合物が700nm以上の多光子レーザで励起される、請求項1~11のいずれか1項に記載の生体染色剤。
- 請求項1~12のいずれか1項に記載の生体染色剤を用いて、被験者より得られた細胞又は培養細胞を観察する方法であって、
1)当該細胞に当該生体染色剤を適用し、
2)多光子レーザ顕微鏡下で当該細胞を観察すること、
を含んで成る、方法。 - 3)前記細胞間の染色性の差異に基づき正常細胞と癌細胞とを識別すること、を更に含んで成る、請求項13に記載の方法。
- 多光子レーザ顕微鏡下での観察により生体染色剤の細胞染色特性を評価する方法であって、
a)癌細胞と正常細胞とを混合し、
b)前記混合物をコンフルエント又は亜コンフルエントな状態になるまで培養し、
c)評価すべき染色剤を前記培養物に適用し、
d)前記染色剤が
i)癌細胞を特異的に染色するか、又は
ii)正常細胞を特異的に染色するか、又は
iii)癌細胞も正常細胞もいずれも染色するか
を判定する、
ことを含んでなる方法。 - 前記工程b)において、前記混合物を癌細胞が優先的に増殖する条件下でコンフルエント又は亜コンフルエントな状態になるまで培養する、請求項15記載の方法。
- 前記癌細胞がRasV12を発現するイヌ腎臓尿細管上皮細胞(MDCK-RasV12)であり、テトラサイクリンの添加により該癌細胞の優先的な増殖が図れる、請求項16に記載の方法。
- 癌細胞が特異的に染色されるか否かを評価するため、
癌細胞をレポーター遺伝子で標識し、レポーター遺伝子の発現と、染色剤による染色とを対比させることを行うことを含む、
請求項15~17のいずれか1項に記載の方法。 - 前記レポーター遺伝子がGFP遺伝子である、請求項18記載の方法。
- 多光子レーザ顕微鏡下で観察するための、正常細胞に比べ癌細胞を特異的に染色する染色剤であって、メクロサイクリンスルフォサルチル酸塩、メタサイクリン塩酸塩、メルブロミン、ファストグリーンFCF、赤色3号(エリスロシン)及び赤色104号から成る群から選択される1又は複数の色素化合物を含んで成る細胞染色剤。
- 多光子レーザ顕微鏡下で観察するための、癌細胞に比べ正常細胞を特異的に染色する染色剤であって、ミトキサントロン二塩酸塩及びドキソルビシン塩酸塩から成る群から選択される1又は複数の色素化合物を含んで成る細胞染色剤。
- 多光子レーザ顕微鏡下で観察するための、正常細胞と癌細胞を同等に染色する染色剤であって、ピルビニウムパモエート、シカゴスカイブルー6B,ローズベンガルナトリウム塩、アシッドレッド及びハイレッドV80(ムラサキイモ色素)から成る群から選択される1又は複数の色素化合物を含んで成る細胞染色剤。
- 多光子レーザ顕微鏡下で観察するための、正常細胞に比べ癌細胞を特異的に染色する染色剤であって、メクロサイクリンスルフォサルチル酸塩、メタサイクリン塩酸塩、メルブロミン、ファストグリーンFCF、赤色3号(エリスロシン)及び赤色104号から成る群から選択される1又は複数の色素化合物を含んで成る細胞染色剤と、正常細胞と癌細胞を同等に染色する染色剤であって、ピルビニウムパモエート、シカゴスカイブルー6B,ローズベンガルナトリウム塩、アシッドレッド及びハイレッドV80(ムラサキイモ色素)から成る群から選択される1又は複数の色素化合物を含んで成る細胞染色剤との混合物を含んでなる、細胞染色剤。
- 前記細胞染色剤が染色剤の総濃度において0.1μM~10μMの濃度で使用される、請求項20~23のいずれか1項記載の細胞染色剤。
- 粘膜除去剤、等張化剤、pH調節剤、安定化剤、増粘剤、防腐剤、香料及び/又は粘着剤の中かから選択される1または複数をさらに含有する、請求項20~24のいずれか1項記載の細胞染色剤。
- 前記細胞が管腔の上皮細胞・腺細胞系及び/又は結合組織・毛細血管系の細胞である、請求項20~25のいずれか1項記載の細胞染色剤。
- 前記色素化合物が700nm以上の多光子レーザで励起される、請求項20~26のいずれか1項記載の細胞染色剤。
- 請求項20~27のいずれか1項に記載の細胞染色剤を用いて、被験者より得られた細胞又は培養細胞における癌を検出する方法であって、
1)当該細胞に当該癌細胞染色剤を適用し、
2)多光子レーザ顕微鏡下で、染色性の差異に基づき正常細胞と癌細胞とを識別すること、を含んで成る方法。 - 3)前記癌細胞を多光子レーザ照射により排除すること、を更に含んで成る、請求項28に記載の方法。
- 前記培養細胞がiPS細胞、ES細胞又はMUSE細胞から分化された細胞であることを特徴とする請求項28または29のいずれかに記載の方法。
- 多光子レーザ顕微鏡下での観察により生体染色剤の多能性幹細胞由来細胞の染色特性を評価する方法であって、
評価すべき染色剤を多能性幹細胞由来の正常分化細胞と未分化細胞が混在した培養物に適用し、前記染色剤が
i)未分化細胞を特異的に染色するか、又は
ii)正常分化細胞を特異的に染色するか、又は
iii)正常分化細胞、未分化細胞のいずれも染色するか
を判定することを含んでなる方法。 - 前記多能性幹細胞がiPS細胞、ES細胞又はMUSE細胞である、請求項31記載に記載の方法。
- 多能性幹細胞由来の未分化細胞あるいは正常分化細胞が特異的に染色されるか否かを
評価するため、
多能性幹細胞にレポーター遺伝子を導入し、正常に分化した細胞にレポーター遺伝子
が発現するか、または未分化細胞にのみレポーター遺伝子が発現して、染色剤による染色とを対比させることを行うことを含む、請求項31又は32のいずれかに記載の方法。 - 前記レポーター遺伝子がGFP遺伝子である、請求項33記載の方法。
- 当該未分化細胞が癌細胞であることを特徴とする請求項請求項31から33のいずれかに記載の方法。
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Cited By (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2017146184A1 (ja) * | 2016-02-23 | 2017-08-31 | 国立大学法人三重大学 | レーザ内視鏡装置 |
WO2017200066A1 (ja) | 2016-05-18 | 2017-11-23 | 国立大学法人三重大学 | がん検査装置、がん検査方法、および、がん検査用の染色剤 |
JP2018177648A (ja) * | 2017-04-04 | 2018-11-15 | 利章 大原 | 多能性幹細胞の腫瘍化抑制剤及び腫瘍化抑制方法 |
WO2019107370A1 (ja) | 2017-11-28 | 2019-06-06 | 国立大学法人三重大学 | 検出方法 |
WO2020241633A1 (ja) * | 2019-05-27 | 2020-12-03 | 国立大学法人三重大学 | 病変の検出方法 |
Families Citing this family (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105784871B (zh) * | 2016-04-18 | 2018-06-29 | 镇江高海生物药业有限公司 | 一种盐酸美他环素的有关物质及其分析检测方法 |
US10616912B2 (en) * | 2016-04-22 | 2020-04-07 | Qualcomm Incorporated | Uplink payload determination and uplink grant indication for multefire |
CN107167357B (zh) * | 2017-06-22 | 2020-05-15 | 崔舜� | 基于对比染色的深部真菌形态学快速检测方法及试剂 |
CN107941765B (zh) * | 2017-11-16 | 2020-08-21 | 南方医科大学南方医院 | 胃癌切除标本的胃浆膜表面胶原组织评价方法 |
US10933061B2 (en) | 2017-12-21 | 2021-03-02 | Shepherd Therapeutics, Inc. | Pyrvinium pamoate therapies and methods of use |
CN111323396A (zh) * | 2018-12-14 | 2020-06-23 | 中国林业科学研究院资源昆虫研究所 | 一种测定紫胶色酸a含量的方法 |
SE2000055A1 (sv) * | 2020-03-15 | 2021-09-16 | Martin Ivanov Denev | Användande av fotohydrauliskt mekanisk chock, för selektiv sprängning av relativ svagare cellmembranen av cancerceller, vilka har svagare cellmembran än friska celler |
WO2021252280A1 (en) * | 2020-06-08 | 2021-12-16 | The Regents Of The University Of California | White dwarf: cross-polarized white light slide-free imaging |
CN114403064A (zh) * | 2022-03-09 | 2022-04-29 | 中国水产科学研究院黄海水产研究所 | 一种适应于贝类活体的贝壳otc标记方法 |
Citations (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH10186424A (ja) | 1996-12-13 | 1998-07-14 | Imra America Inc | 超短光パルスの伝達装置、発生装置および伝達方法 |
JP2004313184A (ja) * | 2003-03-28 | 2004-11-11 | National Institute Of Agrobiological Sciences | 未分化細胞を選別する方法およびその利用 |
JP2005501568A (ja) * | 2001-09-10 | 2005-01-20 | アンチキャンサー インコーポレーテッド | 腫瘍転移の解像度の向上 |
JP2005211355A (ja) * | 2004-01-29 | 2005-08-11 | Kochi Univ Of Technology | 近赤外発光による経皮的リンパ観察装置 |
JP2007538289A (ja) * | 2004-05-19 | 2007-12-27 | ゲーリー、ブルッカー | 共焦点励起平面を有した広視野多光子顕微鏡のための方法およびシステム |
WO2008093528A1 (ja) * | 2007-02-01 | 2008-08-07 | Kurume University | 癌の生体染色剤 |
JP2008286883A (ja) | 2007-05-15 | 2008-11-27 | Kusunokiya:Kk | 個体内部の組織学的イメージ像を観察・取得する方法 |
JP2010008082A (ja) | 2008-06-24 | 2010-01-14 | Olympus Corp | 多光子励起測定装置 |
WO2011125972A1 (ja) * | 2010-04-06 | 2011-10-13 | 株式会社Cadenz | 観察装置及び観察方法 |
WO2012078853A2 (en) * | 2010-12-08 | 2012-06-14 | Cornell University | Microscope apparatus, method and application |
JP2012223104A (ja) * | 2011-04-15 | 2012-11-15 | Olympus Corp | 誘導多能性幹細胞の識別方法 |
Family Cites Families (23)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6493570B1 (en) * | 1998-11-02 | 2002-12-10 | Photogen, Inc. | Method for improved imaging and photodynamic therapy |
AU2073801A (en) * | 1999-12-09 | 2001-06-18 | Cellomics, Inc. | A system for cell-based screening |
JPWO2003010542A1 (ja) * | 2001-07-25 | 2004-11-18 | 三菱ウェルファーマ株式会社 | 癌診断薬 |
US7756305B2 (en) * | 2002-01-23 | 2010-07-13 | The Regents Of The University Of California | Fast 3D cytometry for information in tissue engineering |
US7157121B2 (en) * | 2002-04-29 | 2007-01-02 | Shaw Industries Group, Inc. | Method of treating carpet for enhanced liquid repellency |
US20040191839A1 (en) | 2003-03-28 | 2004-09-30 | National Institute Of Agrobiological Sciences Japan | Methods for sorting undifferentiated cells and uses thereof |
US7186522B2 (en) * | 2003-03-31 | 2007-03-06 | Cytyc Corporation | Papanicolau staining process |
RU2007137263A (ru) * | 2005-03-09 | 2009-04-20 | Борд Оф Риджентс, Дзе Юниверсити Оф Техас Систем (Us) | Способы и композиция, относящиеся к визуализации экспрессии гена in vivo |
JP2008534617A (ja) * | 2005-04-01 | 2008-08-28 | ザ ボード オブ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティー オブ テキサス システム | キレート剤としてのポリ(ペプチド):製造方法および用途 |
WO2007102146A2 (en) * | 2006-03-06 | 2007-09-13 | Zetiq Technologies Ltd. | Methods and compositions for identifying a cell phenotype |
JP2009535060A (ja) * | 2006-05-03 | 2009-10-01 | ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア | 単一ナノクレセントsersプローブを使用したプロテアーゼおよびプロテアーゼ活性の検出 |
JP2007326789A (ja) | 2006-06-06 | 2007-12-20 | Pentax Corp | 内視鏡用組織蛍光染色剤組成物 |
JP4847795B2 (ja) * | 2006-06-06 | 2011-12-28 | Hoya株式会社 | 内視鏡用組織蛍光染色剤組成物 |
US8784772B2 (en) * | 2007-03-22 | 2014-07-22 | The Johns Hopkins University | Urothelial differentiation of urothelial carcinoma: a bladder cancer stem cell model |
KR101101304B1 (ko) * | 2009-09-07 | 2012-01-02 | 서울대학교산학협력단 | 이광자 트레이서, 이의 제조방법 및 이를 이용한 항암제 스크리닝 방법 |
WO2010036827A1 (en) * | 2008-09-24 | 2010-04-01 | Straus Holdings Inc. | Method for detecting analytes |
NZ717641A (en) | 2008-11-07 | 2017-09-29 | Klox Tech Inc | Combination of an oxidant and a photoactivator for the healing of wounds |
CN101785784A (zh) | 2010-01-15 | 2010-07-28 | 浙江大学 | 用于癌症光热治疗的金纳米杆与两性离子分子的复合物及其制备方法 |
JP5889273B2 (ja) | 2010-04-01 | 2016-03-22 | メディカル・テクロノジー・トランスファー・ホールディング・ベー・フェー | 染色組成物 |
CA2806127C (en) * | 2010-07-23 | 2021-12-21 | Advanced Cell Technology, Inc. | Methods for detection of rare subpopulations of cells and highly purified compositions of cells |
CN101991588B (zh) | 2010-09-08 | 2012-08-08 | 广西壮族自治区水产研究所 | 一种马氏珠母贝育珠的小片与珠核匹配处理液 |
CN103249841B (zh) | 2010-11-22 | 2016-05-04 | 泽蒂克科技有限公司 | 用于异常泌尿系统细胞的差异染色的方法和试剂盒 |
US20140010760A1 (en) * | 2012-04-05 | 2014-01-09 | Brij P. Giri | Hypoxia-Targeted Polymeric Micelles For Cancer Therapy And Imaging |
-
2014
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Patent Citations (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH10186424A (ja) | 1996-12-13 | 1998-07-14 | Imra America Inc | 超短光パルスの伝達装置、発生装置および伝達方法 |
JP2005501568A (ja) * | 2001-09-10 | 2005-01-20 | アンチキャンサー インコーポレーテッド | 腫瘍転移の解像度の向上 |
JP2004313184A (ja) * | 2003-03-28 | 2004-11-11 | National Institute Of Agrobiological Sciences | 未分化細胞を選別する方法およびその利用 |
JP2005211355A (ja) * | 2004-01-29 | 2005-08-11 | Kochi Univ Of Technology | 近赤外発光による経皮的リンパ観察装置 |
JP2007538289A (ja) * | 2004-05-19 | 2007-12-27 | ゲーリー、ブルッカー | 共焦点励起平面を有した広視野多光子顕微鏡のための方法およびシステム |
WO2008093528A1 (ja) * | 2007-02-01 | 2008-08-07 | Kurume University | 癌の生体染色剤 |
JP2008286883A (ja) | 2007-05-15 | 2008-11-27 | Kusunokiya:Kk | 個体内部の組織学的イメージ像を観察・取得する方法 |
JP2010008082A (ja) | 2008-06-24 | 2010-01-14 | Olympus Corp | 多光子励起測定装置 |
WO2011125972A1 (ja) * | 2010-04-06 | 2011-10-13 | 株式会社Cadenz | 観察装置及び観察方法 |
WO2012078853A2 (en) * | 2010-12-08 | 2012-06-14 | Cornell University | Microscope apparatus, method and application |
JP2012223104A (ja) * | 2011-04-15 | 2012-11-15 | Olympus Corp | 誘導多能性幹細胞の識別方法 |
Non-Patent Citations (9)
Title |
---|
CRUZ, J. ET AL., BIOMEDICAL OPTICUS EXPRESS, vol. 1, no. 5, 2010, pages 1320 - 1330 |
HOGAN, C. ET AL., NAT. CELL BIOL., vol. 11, no. 4, 2009, pages 460 - 467 |
HOGAN,C.: "Characterization of the interface between normal and transformed epithelial cells", NATURE CELL BIOLOGY, vol. 11, no. 4, 1 April 2009 (2009-04-01), pages 460 - 467, XP055288175, DOI: 10.1038/NCB1853 * |
KOJI MATSUMURA: "Development of Methods to Inhibit Tumorigenesis after Transplantation of Differentiated iPS Cells", CYTOMETRY RESEARCH, vol. 21, no. 2, 2011, pages 35 - 41, XP008181415 * |
MANABU ITO: "Introduction of 3D cell culture", THE CELL, vol. 44/11, 20 October 2012 (2012-10-20), pages 515 - 517, XP008181261 * |
MIHOKO KAJITA: "Interaction between normal and transformed epithelial cells", JOURNAL OF JAPANESE BIOCHEMICAL SOCIETY, vol. 81/4, 2009, pages 267 - 276, XP008181218 * |
ROGART, J. N. ET AL., CLIN GASTROENTEROL HEPATOL, vol. 6, no. 1, January 2008 (2008-01-01), pages 95 - 101 |
ROGART, J. N. ET AL.: "Multiphoton imaging can be used for microscopic examination of intact human gastrointestinal mucosa ex vivo", CLIN GASTROENTEROL HEPATOL, vol. 6, no. 1, January 2008 (2008-01-01), pages 95 - 101, XP022403935, DOI: doi:10.1016/j.cgh.2007.10.008 |
See also references of EP2980585A4 |
Cited By (15)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPWO2017146184A1 (ja) * | 2016-02-23 | 2018-12-13 | 国立大学法人三重大学 | レーザ内視鏡装置 |
US11140318B2 (en) | 2016-02-23 | 2021-10-05 | Mie University | Laser endoscope device |
WO2017146184A1 (ja) * | 2016-02-23 | 2017-08-31 | 国立大学法人三重大学 | レーザ内視鏡装置 |
JP2021063815A (ja) * | 2016-05-18 | 2021-04-22 | 国立大学法人三重大学 | がん検査装置、がん検査方法、および、がん検査用の染色剤 |
CN109414151A (zh) * | 2016-05-18 | 2019-03-01 | 国立大学法人三重大学 | 癌症检测装置、癌症检测方法和用于癌症检测的染色剂 |
JPWO2017200066A1 (ja) * | 2016-05-18 | 2019-03-22 | 国立大学法人三重大学 | がん検査装置、がん検査方法、および、がん検査用の染色剤 |
WO2017200066A1 (ja) | 2016-05-18 | 2017-11-23 | 国立大学法人三重大学 | がん検査装置、がん検査方法、および、がん検査用の染色剤 |
JP7060891B2 (ja) | 2016-05-18 | 2022-04-27 | 国立大学法人三重大学 | がん検査装置、がん検査方法、および、がん検査用の染色剤 |
US11555819B2 (en) | 2016-05-18 | 2023-01-17 | Mie University | Cancer test device, cancer test method, and staining agent for use in cancer test |
US11852632B2 (en) | 2016-05-18 | 2023-12-26 | Mie University | Cancer test device, cancer test method, and staining agent for use in cancer test |
JP2018177648A (ja) * | 2017-04-04 | 2018-11-15 | 利章 大原 | 多能性幹細胞の腫瘍化抑制剤及び腫瘍化抑制方法 |
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WO2020241633A1 (ja) * | 2019-05-27 | 2020-12-03 | 国立大学法人三重大学 | 病変の検出方法 |
Also Published As
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